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UNIVERSIDAD NACIONAL

AUTNOMA DE MXICO

FACULTAD DE ESTUDIOS SUPERIORES


ZARAGOZA

LABORATORIO DE BIOQUMICA CELULAR Y DE


LOS TEJIDOS I

Informe:
ELECTROFORESIS DE ADN
9 de Mayo, 2016
OBJETIVOS

Realizar la electroforesis del ADN extrado, purificado y cuantificado.


Analizar las bandas obtenidas en el gel.

INTRODUCCIN

Los cidos nucleicos, no se pueden separar por medio de electroforesis en


geles de poliacrilamida (PAGE). En estos geles, la movilidad electrofortica
vara inversamente con la masa molecular. Los fragmentos de ADN de slo
algunos miles de pares de bases, no pueden penetrar el gel de poliacrilamida.
Este problema se resuelve utilizando agarosa en vez de poliacrilamida. De esta
manera, los plsmidos, que son pequeas partculas de ADN de bacterias o
levaduras, que pueden replicarse autnomamente, pueden por ejemplo,
separarse de ADN cromosomal.1

La electroforesis en geles de agarosa o poliacrilamida es una de las


metodologas ms utilizadas en el laboratorio en todo lo relacionado con el
trabajo con cidos nucleicos. Mediante la electroforesis se puede separar
fragmentos de ADN y ARN en funcin de su tamao, visualizarlos mediante una
sencilla tincin, y de esta forma determinar el contenido de cidos nucleicos de
una muestra, teniendo una estimacin de su concentracin y grado de
entereza.
Sometidos a un campo elctrico, la carga neta negativa del ADN y el ARN har
que estos se muevan en direccin al nodo. La electroforesis de ADN puede
realizarse en geles de agarosa o de poliacrilamida. Ambos tienen
caractersticas diferentes en cuanto a sus propiedades y modo de preparacin,
por lo que se utilizar uno u otro en funcin de la aplicacin y objetivos que
persigamos.
La electroforesis en geles de agarosa es el mtodo estndar para separar y
purificar fragmentos de ADN cuando no requerimos un alto poder de resolucin.
Por su parte, la electroforesis en geles de poliacrilamida, aunque tiene una
mayor limitacin en cuanto al tamao de los fragmentos que podemos separar
(5-600 pb), posee un poder de resolucin mucho mayor, permitiendo la
separacin de molculas que difieren en un slo par de bases. Los geles de
poliacrilamida se corren de forma vertical y tienen la desventaja de ser ms
complicados en su elaboracin y manipulacin.

La aplicacin bsica de las tcnicas de electroforesis de ADN es la separacin


de fragmentos de ADN en una muestra y su visualizacin, para comprobar
aspectos como el tamao de los fragmentos, la concentracin, la entereza y
otros. Los fragmentos que sean de inters pueden purificarse a partir del gel
mediante diferentes tcnicas de extraccin, y utilizarse para diferentes
propsitos (clonacin, secuenciacin, mutagnesis, fusin con otros
fragmentos, utilizacin como sondas, etc.). 2
RESULTADOS

ANLISIS DE RESULTADOS

Foto 2. Se muestra el marcador de peso molecular para gel de agarosa al 1.5 de la


marca nippongenetics.

CONCLUSIONES
REFERENCIAS

1. Vzquez C. Edgar. Bioqumica y biologa molecular en lnea, UNAM.


Consulta: Mayo 8, 2016. Sitio web:
http://laguna.fmedic.unam.mx/~evazquez/0403/electroforesis.html

2. Fierro F. (Abril 28, 2015). Electroforesis de ADN. Mayo 8, 2016, de


Instituto nacional de ecologa y cambio climatico Sitio web:
http://www2.inecc.gob.mx/publicaciones/libros/710/electroforesis.pdf