ESTRUCTURA Y FISIOLOGA DE LOS

CROMOSOMAS HUMANOS

Morfologa y estructura qumica.

El cromosoma como estructura
funcional.
Duplicacin y divisin
cromosmica
Tipos de divisiones celulares.
La distribucin independiente y
la recombinacin cromosmica.
MORFOLOGIA CROMOSMICA
COMPOSICIN QUMICA:
DNA Y PROTEINAS CROMOSMICAS

HISTONAS NO - HISTONAS
SMC (Structural maintenance
H1 of chromosomes)
H2A Condensina y Cohesina
H2B DNA topoisomerasas I y II
H3 HP1 (Protena asociada a la
heterocromatina)
H4
HMG proteinas
(High mobility group)
 LOS CROMOSOMAS HUMANOS

23 pares cromosomas 2 m de DNA

La condensacin del cromosoma debe evitar entrampamientos y
quiebras.
DNA y protenas: La fibra de cromatina.
Replicacin y Transcripcin
Niveles de empaquetamiento: El nucleosoma y el cromatosoma
Estructura y fisiologa de las protenas del mantenimiento
estructural: SMC
La cromatina: Eu y heterocromatina
El centrmero y los telomeros.
EN EL NUCLEO INTERFSICO:
Eu y heterocromatina
 CONDENSACION DEL DNA DURANTE EL CICLO
CELULAR
MOLCULA DE DNA

NUCLEOSOMAS EN FILA 11 nm

FIBRA DE 30 nm SOLENOIDE

NUCLEOSOMAS
EMPAQUETADOS 300 nm

700 nm CROMTIDE

1400 nm CROMOSOMA
 1er. NIVEL DE ORGANIZACIN
CROMOSMICA: EL NUCLEOSOMA

DNA
60 bp

146 bp
EL CROMATOSOMA
EL OCTAMERO DE HISTONAS
ENSAMBLAJE DEL
NUCLEOSOMA
EL NUCLEOSOMA
LAS HISTONAS
LA ACETILACION DE LAS LISINAS
2do. NIVEL DE ORGANIZACIN: LA
FIBRA CROMATINICA
NIVELES DE ORGANIZACIN DEL
DNA CROMOSMICO
COMPARTIMIENTOS NUCLEARES
ORGANIZACION ESPACIAL Y EXPRESIN
GNICA
DINAMICA NUCLEAR
 DOMINIOS CROMOSMICOS Y
LA EXPRESIN GNICA
Tipos de cromatina y dominios: eu y
heterocromatina.
La localizacin del gene es importante para su
expresin
Efecto de posicin variegado (EPV).
Reposicin artificial de genes en el genoma.
Mecanismo regulador de la expresin gnica
 INSULATORS

Secuencias especializadas de ADN que previene

efectos de posicin cromosmica. Identificados en
muchos organismos.
Su identificacin se realiza segn dos pruebas:
Enhancer-blocking assay : Bloquea o
Interfiere
Sin efecto
Position-independent expression (PIE) La insercin
aleatoria de transgenes en el genoma produce niveles
variables de expresin gnica por el efecto de posicin
 MODELOS DE
FUNCION DE
INSULATORS

La insercin de un insulator rompe la comunicacin entre el enhancer y

los Factores de Transcripcin ensamblados en el promotor.
El modelo propone que la insercin del insulator rompe transcripcin
porque el insulator se ensambla en un complejo de protenas que
interacta con las uniones vecinas o la matrix nuclear dividiendo el
dominio en dos
INSULATORS gypsy insulator
O enhancer
gene w

a. Enhancer blocking assay

Efecto del insulator
gypsy sobre el gene w
El gene w es necesario
para pigmentacin de
ojos
Gypsy insulator (w)

b. Position independent
expression (PIE)
MARs, LCR Y DOMINIOS CROMATNICOS

Los dominios estructurales estn demarcados por lmites

naturales que definen los alcances de las interacciones
regulatorias posibles.
MAR: Matriz (scaffold) attachment region:
Fragmentos de ADN que permanecen unidos a la matriz
nuclear purificada
Son ricos en secuencias A - T, contienen sitios de consenso para
la DNAtopoisomerasa II (componente mayor matriz nuclear)
Su localizacin indica que muchas estn prximas a los
enhancers, otras estn flanqueando las unidades de transcripcin
y definen los bordes de dominios sensibles a las nucleasas, lo
que sugiere una conexin entre MARs e Insulators.
 MARs, LCR Y DOMINIOS CROMATINICOS
LCR: Locus control region
Contiene una estructura cromatnica tipo cluster especfica de tejido, o
DNAasa I, sitio hipersensible (HS)
Estn ampliamente diseminados en el genoma y podran ser importantes
por la definicin de dominios.
LCR asociados a los genes de las globinas.
5 HS en el flanco upstream de genes globinas, Los HS son eritroide
especficos, y uno es constitutivo, est presente en todos los tejidos.
Los sitios eritroides especficos no son insulators.
El sitio constitutivo puede ser un verdadero insulator.
SWITCH
ESTRUCTURA QUMICA DEL CROMOSOMA
MITOTICO
Ha requerido del desarrollo de algunas tcnicas de estudio
de algunas como:
Aislamiento de cromosomas mitticos a gran escala a
partir de clulas en cultivo (Wray & Stubblefield, 1970).
Anlisis bioqumicos por fraccionamientos, han permitido
demostrar que los cromosomas estn constituidos por:
1/3 de DNA
1/3 de protenas histnicas (PH) y
1/3 de protenas no histnicas (PN-H)
ESTRUCTURA DE LAS PROTEINAS SMC (PN-
H)

5 dominios distintos (Bacterias - humanos)

Walker A y B altamente conservados.
Dominio central (hinge) moderadamente conservado
Dmeros anti paralelos, que posibilita la formacin de
estructura globular.
 ORGANIZACIN DE LAS SU. PROTEICAS SMC
bacterianas condensinas cohesinas

Purificaciones posteriores de SMC2/SMC4 permitieron descubrir un complejo

pentamrico con coeficiente de sedimentacin 13S, en el que un sub complejo
SMC2/SMC4 (8S) est asociado con 3 SU no-SMC:
XCAP-D2, XCAP-H, XCAP-G
FUNCIONES DE LAS PROTEINAS SMC

Rol estructural, son vitales

para:
Condensacin cromosmica
Cohesin de cromtides
hermanas
Segregacin
Tienen motivos proteicos
conservados a ATPasas y
actividades enzimticas.
Cohesina en cromtides hermanas y centrmero (KA
HOLLAND Nat 2002)
HIRANO
DNA TOPOISOMERASA I

Replicacin ADN
Recombinacin
Transcripcin
Reparacin
Dinmica
cromosmica
Relajacin del super
enrollamiento
DNA TOPOISOMERASA II

Replicacin
Segregacin cromosmica
Condensacin
Transcripcin
Rol estructural en scaffold
no confirmado
2 genes:
Topo II : 170 kDa,
Topo II : 180 kDa
 PROTEINA ASOCIADA A LA
HETEROCROMATINA

Cromo dominio amino terminal CHD

Dominio sombreado Carboxilo terminal
Bisagra
 HIGH MOBILITY GROUP (HMG)
NOMBRE MOTIF FUNCION
ENHANCEOSOMA
HMGB1, 2, etc. HMG box
HMGA1, 2, etc. Nucleosoma
binding domi
HMGN1, 2, etc A T hook

a.- HMGA HMGB (flechas rojas) unidas al ADN, llevando los TF (azul) en
contacto unos con otros y reclutando RNA polimerasas (verde)
b.- HMGN: seal localizacin nuclear bipartita (NLS), un dominio de unin
del nucleosoma (NBD) y dominio carboxilo terminal no enrollado
DIVISION CELULAR
DIVISION REDUCCIONAL
RECOMPOSICIN DEL NUMERO
CROMOSMICO
EL CROMOSOMA METAFSICO Y EL
APARATO MITTICO
EL CENTROMERO
- Ensamblan cinetocoro.
- Mantienen cohesin
C.Herm.
- Regulan unin del
cromosoma a fibras huso.
- Dirigen movimientos del
- cromosoma en la divisin
celular.
 S. cerevisae

S. pombe

DNA
CENTROMERICO
Parascaris DE DIFERENTES
univalens ORGANISMOS

Drosophila m.

H. sapiens s.
EL CENTROMERO DE S. Cerevisae

Se une a 1 microtbulo.
125 bp
No DNA repetitivo
CDEI 18 bp,
CDEII 80 bp,
CDEIII 26 bp
ESTRUCTURA Y DOMINIOS FUNCIONALES
DEL CENTROMERO DE MAMIFEROS

satlite DNA: 171 bp

La protena CENP B se une constitutivamente a una sub serie
de satlite DNA, ausente en el cromosoma Y.
Soporte estructural del cinetocoro.
 MAPA FISH DEL CROMOSOMA X

* 1 19 Diferentes BAC o sondas

Pintados sub cromosmicos en rojo, verde o prpura.
ACTIVACION DE NEO CENTROMEROS Y
CAMBIOS DE POSICION
RECOMBINACION
COMPLEJO SINAPTONEMICO
SC
MUCHAS
GRACIAS!
CENTROMERO - CINETOCORO
GEN MBL2
EL CINETOCORO
3 PROTEINAS:
Cbf-III CDE-III
normal, pero no se une
al mutante, y la
segregacin es
perturbada.