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INSTRUMENTOS

ASA DE INOCULACIN
Posee un mango de KOLLE revestido de ebonita (caucho), que
sirve como aislante del calor. Termina en asa (bolita) y sirve para
tomar la muestra que se usar en el medio de cultivo.

AGUJA DE INOCULACION
el alambre es recto, Se lo utiliza especialmente para sembrar en
las profundidades de los cultivos

PIPETA GRADUADA
Instrumento graduado que sirve para aspirar cantidades especficas de lquidos y
transferirlo de un recipiente a otro. Tiene un filtro arriba que hace que el lquido
pipeteado no contamine la boca, y que la boca no contamine el lquido pipeteado.

CAJA PETRI
Es un recipiente redondo de vidrio o plstico donde se almacenan los
medios de cultivo solidos sobre los cuales se van a efectuar siembras
bacterianas. Mide 9 mm.
TUBOS DE ENSAYO
Instrumento no graduado que almacenan los medios de cultivo semislidos o lquidos al
igual que agua destilada.
TUBOS DE DURHAM
Tubos de gas de fermentacin, es ms pequeo que el de ensayo. Sirven para comprobar
si el cultivo es fermentador o no de gas.
LAMINAS PORTA- OBJETO
Estas lminas de vidrio son de borde romo y sirven para depositar en ellas el material u
observarse al microscopio.
LAMINILLAS CUBRE-OBJETO.
Cubre la muestra para ser observadas en fresco, lo que permite una distribucin
uniforme del material y a la vez impide que se contamine el lente del microscopio.
VASO DE PRECIPITACION
Es un instrumento graduado de vidrio, metal o de un plstico en especial que
sirve para preparar los medios de cultivo. Protege al elemento del calor.
MATRAZ
De base plana, es cnico. Tiene un tbulo redondeado hacia arriba. Sirve para el
transporte de la muestra esterilizadas.
FIOLA
Base plana no cnica. Al igual que el matraz tiene un tbulo redondeado hacia
arriba pero ms alargado. Sirve para el transporte de muestras
esterilizadas.
KITAZATO
Base plana cnica con una protuberancia en su tbulo en la parte
superior. Sirve como bomba al vaco.
BALON
No posee una base plana. Tiene un tbulo en la parte superior y un cuerpo
esfrico. Sirve para el transporte de una sustancia.
PROBETA
De vidrio, graduado, volumtrico y de base pentagonal. Sirve para medir una cantidad
exacta de agua destilada necesaria para la preparacin de los medios de cultivo.
FRASCO GOTEROS
Sirve para el almacenamiento de colorantes que sern usados en los
medios de tincin. En la tapa tiene un canal por donde sale el colorante.
MECHEROS DE GAS
Utilizado para la esterilizacin y fijar el material de elementos que se
vayan a usar. Tiene una llama ms firme y potente.
MECHEROS DE ALCOHOL
Al igual que el de gas es usado para esterilizar y fijar la tincin elementos a
usar, pero este no posee una llama tan firme.
VASOS DE COPLIN
De vidrio con base redonda. Sirve para almacenar sustancias como el Xilol el cual es
utilizado para limpiar las placas que contienen aceite de inmersin.
ACEITE DE INMERSION
Sirve para observar las bacterias en lente de 100x. Esta echo de cedro.
HORNOS E INCUBADORAS
Las incubadoras Sirven para obtener una temperatura de 37c,
temperatura adecuada para toda vida bacteriana crezca.
Los hornos brindan una temperatura de 100 a 140c (esteriliza) por lo
cual se los llama Hornos Pasteur.
AUTOCLAVE
Esterilizacin de instrumentos que han sido contaminados. Se lo realiza a
temperatura de 121c por 15 minutos.
PERLAS DE VIDRIO
Son redondas y sirven para la desfibrinacin de la sangre.

MEDIOS DE CULTIVO
Un medio de cultivo es un conjunto de sustancias que brindan a la bacteria condiciones
necesarias que facilitan su desarrollo y formacin de colonias
Colonias. - conjunto de bacterias que forman manchas o puntos visibles en un medio de
cultivo y la cual constituye la descendencia de una sola bacteria, tienen caractersticas
que van de acuerdo a:
Consistencia: viscosa, friables, grasosas, glucoides
Trasparencia: translucidos, opacos, transparentes
Pigmentos 1. Amarillo dorado (Estafilococos aureus)
2. Amarillo verdoso (Micrococos luteus)
3. Rojo (Serratia marcescens)
4. Blanco (Estafilococcus Epidermidis)
5. verde azulado (bacillus licianico)

CONDICIONES QUE DEBE REUNIR UN MEDIO DE CULTIVO.


1. Tener un contenido nutritivo adecuado para que la bacteria se desarrolle.
2. PH alcalino ente 7 y 7,8.
3. Recolectado en recipientes adecuados y estriles.
PRINCIPALES OBJETIVOS DE UN MEDIO DE CULTIVO.
1. Obtener cultivos puros, para estudiar las bacterias y mantenerlas vivas
indefinidamente.
2. Observar el aspecto de las colonias a simple vista o con pequeo aumento, con fines
diagnsticos.
3. Obtener cantidades apreciables de bacterias para fines industriales: como la
elaboracin de vacunas y antgenos para reacciones de aglutinacin.
4. Facilitar el hallazgo de las bacterias en un producto patolgico.
5. Estudiar la fisiologa de las bacterias.
6. Estudiar la toxignesis y las cualidades de las toxinas.

CLASIFICACION DE LOS MEDIOS DE CULTIVO


Sencillo
a) Medios naturales. - Son aquellos que no han sido creados artificialmente por el
hombre
Ej. liquido asctico, papa, leche, etc.
b) Medios artificiales. - Son aquellos elaborados por el hombre
Ej. agar sangre, agar chocolate, agar nutritivo inclinado
c) Consistencia: consistencia los medios de cultivos pueden clasificarse en:
-Solidos: agar al 1,5% ej. Agar citrato
-Semislidos: agar al 1% ej. Agar motilidad
-Lquidos: no tiene agar ej. agua de peptona
- Agar: alga (gracilaria liquenoides)
- El agar tiene un gel transparente similar a la gelatina(pone duro el cultivo)
- La incubacin de las bacterias es a 35c y el de la gelatina es 25c, por eso no se la usa
porque se hace liquida.

Otros
a) Medios Bsicos: Formados por extractos de carne, peptona, sal y agua.
- Brinda vitaminas a las bacterias, sal y pequeas cantidades de
oligoelementos.
Ej. Agar nutritivo profundo.

b) Medios Enriquecidos: medios de cultivos bsicos + minerales y aminocidos.


Ej. Agar sangre, agar chocolate.

c) Selectivos: cultivos bsicos o enriquecidos + sustancias inhibitorias o


colorantes.
Ej. Agar McConckey (favorece Gram - e inhibe Gram +)

d) Diferencial: cultivos bsicos o enriquecidos + un indicador de Ph (azul de


bromotinol).
Ej. Agar citrato, Agar urea.
e) Enriquecimiento: Medios de cultivo enriquecidos + sustancias inhibidoras.
Ej. Caldo tetrationato
EN TUBOS DE ENSAYO
Lquidos
Caldo de tetrationato:
-color blanco
- Crecimiento de bacterias intestinales inhibiendo el crecimiento de aquellas
que no son habitantes en el intestino.
-crecimiento de la salmonella tfica
Caldo nutritivo:
-color amarillo
- Para bacterias que no son exigentes de requerimiento nutritivo.
Agua de peptona:
-color salmn (medio rosadito)
- Sirve para demostrar si la bacteria es capaz de producir indol.
Semislido
Agar motilidad:
- Sirve para ver si la bacteria tiene o no movimiento.
Solidos

PRIMER MEDIO: Medio de Lowenstein Jensen


- Es de color blanco verdoso(menta).
- Crecimiento de bacilo de Koch
SEGUNDO MEDIO: Agar pie(pai) o huevo
- color blanco (Leche condensada)
- crecimiento de bacilo diftrico
TERCER MEDIO: Agar citrato
-color verde(moco)
- Para bacterias cuya fuente de energa es el carbono
CUARTO MEDIO: Agar urea
- color meln, durazno, naranja
- Para bacterias que usan el nitrgeno como fuente de energa
QUINTO MEDIO: Agar nutritivo inclinado
-Para bacterias no exigentes de su requerimiento nutritivo
-Las bacterias se siembran en la superficie del medio de cultivo
SEXTO MEDIO: Agar nutritivo profundo(recto)
- Para bacterias no exigentes de su requerimiento nutritivo
-Las bacterias se siembran en la profundidad del medio de cultivo
SEPTIMO MEDIO: Agar TSI
- Color rojo(sangre)
- se lo utiliza en los coprocultivos(heces)

En caja de Petri (solo solidos)

Agar sangre
- Se lo utiliza para saber si la bacteria produce o no hemolisis
-color rojo(pasin)
Agar chocolate
- Crecimiento de gonococo y meningococo
-color caf(chocolate)
Agar SS (salmonella-shigella)
-color naranja (ms o menos)
- Para cultivo de Salmonella y Shigella
Agar McConckey
-color cereza
- favorece Crecimiento de Gram
-inhibe el crecimiento de Gram +
Agar Mller Hinton
-color agua de coco
- Para las pruebas de antibiograma.
-Susceptibilidad o resistencia de las bacterias ante antibiticos.
Agar Bismuto sulfito
-color blanco opaco
- Se usa para el crecimiento de Salmonella typhi.

TINCIONES COMPUESTAS

Tincin compuesta de Preston Morrel para


bacterias Gram positivas y Gram negativas.

1. oxalato de amonio de cristal violeta por 30


segundos.
2. yodo lugol por 30 segundos.
3. decolorar con Iodo acetona por 30 segundos.
4. Lavar con agua.
5. carbol fucsina diluida por 30segundos.
6. Lavar con agua.
7. Secar con papel filtro y observar con lente de
100x.
Resultados:
Gram positivos: Morado
Gram negativos: Rosado

Tincin compuesta de Ziehl Neelsen para bacterias BAAR y NO BAAR.


1. carbol fucsina fuerte y calentar hasta la emisin de vapores por 5 minutos.
2. Decolorar con alcohol-acido al 3% hasta eliminar el
exceso de carbol fucsina.
3. Lavar con agua.
4. azul de metileno durante 1 minuto.
5. Lavar con agua, secar con papel filtro y observar en
lente de 100x.
Resultados:
1. BAAR: Rojo (B. tuberculoso)
2. NO BAAR: Azul (estafilococos)

PLACAS

BACILOS SUPTILIS
- Es Gram + - Se tie de morado por el mtodo de Preston Morrell

MICROCOCCUS LUTEUS
- Gram + - Diplococo en parejas o ttradas - Se puede ver un haz de luz de 1 a 2 micras
- Es viscoso negativo - Se lo puede relacionar como contaminante de cultivo y produce
endocarditis - Se tie de morado por Preston Morrell
ENTEROCOCO
- Es un coco Gram + - Mide de 0,5 a 1 micra de dimetro -
Se lo encuentra en forma de diplococo - Se tie de morado
por Preston Morrell - Ejemplo: Shigella