Fosforilacin oxidativa

Proceso por el cual los electrones se

transfieren desde el NADH y FADH2 al O2 a
travs de tres complejos proteicos de la
membrana mitocondrial interna
Estructura de las mitocondrias
Las
membranas
externas y sus
respectivas
caras son
diferentes
 NADH

Esquema del NADH-Q

oxidorreductasa
transporte de
a travs de los tres . Q
Succinato DH-
Q reductasa
complejos
Q-citocromo c
oxidorreductasa

Cit c

Citocromo c
oxidasa

O2
 La teora quimiosmtica
Fue desarrollada por Peter Mitchell (1920-
1992)
Le vali el Nobel de 1978
En los comienzos de la dcada del 60 se
conoca el papel del ATP como moneda de
energa, pero se supona que su sntesis era
por fosforilacin a nivel de sustrato. En
consecuencia, se buscaba un hipottico
intermediario de alta energa capaz de
fosforilar al ADP.
La teora postula que la energa para la
sntesis de ATP proviene de la formacin de un
gradiente qumico por el cual los H+ son
bombeados fuera de la mitocondria.
 MM Ext

Fumarato
Succinato

MM Int
 Componentes del sistema de transporte de

Oxidante o reductor

Complejo Masa SU Gr. Lado de la En la Lado

(kd) prosttico matriz membrana citoslico
NADH-Q 880 FMN NADH Q
oxidoreductasa 34
Fe-S
Succinato-Q 127 4 FAD Succinato Q
reductasa
Fe-S
Q-citochromo c 250 10 Hemo bH Q Citocromo c
oxidoreductasa
Hemo bL
Hemo c1
Fe-S
Citocromo c 200 10 Hemo a Citocromo c
oxidasa
Hemo a3
CuA y CuB
Estructura y estados de reduccin de quinonas
Estructura y estados de reduccin de flavinas
Centros hierro-azufre: Fe no hemnico + S c. lbil

(A) 1 Fe unido a 4 Cistenas

(B) Centro 2Fe-2S con puentes sulfuro de Cis
(C) Centro 4Fe-4S
El grupo hemo: integrante de los citocromos

Hemo c
Citocromo c
Hemo b

Hemo a
El espectro de absorcin de los citocromos permite su
identificacin y da informacin sobre su estado

444

420
Red

Ox 605
BioqUmica - FCByF
La estructura de los citocromos est conservada
en especies diferentes

Atn Rhodospirillum rubrum Paracoccus denitrificans

La secuencia de los
citocromos se usa en
estudios filogenticos
 Determinacin de la secuencia de los
transportadores de electrones

E0
NAD + + H+ + 2 NADH -0.320
NADHDH(FMN) + 2 H+ + 2 -0.300
NADDH(FMNH2)
UQ + 2 H+ + 2 UQH2 0.045
Cit b (Fe3+) + Cit b (Fe2+) 0.077
Cit c1 (Fe3+) + Cit c1 (Fe2+) 0.220
Cit c (Fe3+) + Cit c (Fe2+) 0.254
Cit a (Fe3+) + Cit a (Fe2+) 0.290
Cit a3 (Fe3+) + Cit a3 (Fe2+) 0.550
O2 + 2 H+ + 2 H2O 0.816
 E0
NAD + + H+ + 2 NADH -0.320

O2 + 2 H+ + 2 H2O 0.816

O2 + NADH + H+ H2O + NAD+ 1.14

G0 = -n FE0 = -52.6 kcal/mol

ADP + Pi ATP + H2O G0= 7.3 kcal/mol

Para el bombeo de 1 H+
G = 2.3 RT [pHin pHex] + Z F

En hepatocitos el potencial es aprox. 0.168V,

da un G = 21.5 kJ/mol. Comparado con alred. de 40 a
50 kJ/mol para la sint. de 1 ATP al menos 2 H+, las
estimaciones son que casi 3
 O2
% Cit
red

B yF
C b
-F
ic a
m
qU c1
o
Bi
c
a + a3

Succ

t
 rotenona

NADH UQ Cit b Cit c1 Cit c Cit (a + a3) O2

Antimicina A

NADH UQ Cit b Cit c1 Cit c Cit (a + a3) O2

CN-

NADH UQ Cit b Cit c1 Cit c Cit (a + a3) O2

COMPLEJO I 2 H+

(NADH-Q
oxidoreductasa) Espacio interm.

2x1

2x1
QH2
880 kDa (43 SU)
FMN Q

F
5 FeS

y
CB
-F
Aceptor: Q

ica
m
U
oq
Matriz

Bi
2 H+
NADH + H+
NAD+

FMN + 2 H+ + 2 H- FMNH2 - H+ - FMNH - H+ - FMN .

Q + Q-. + + 2 H+ QH2
4 H+in 4 H+ex
COMPLEJO II (Succinato-Q reductasa)

Espacio interm.
127 kDa FeS FeS
FAD
FeS b560
3 FeS (2/2; QH2
4/4 y 3/4)
FADH2
cit b560 Q
Aceptor: Q b560
FAD F
CBy
-F
mica

qU
Matriz Bi
o

Succinato 2 H+
Fumarato
COMPLEJO III (Q-citochromo c oxidoreductasa)

Espacio interm. 4 H+ Cit c

500 kDa
(dm. 11 SU) Cit c1
3 cit (b562, FeS
Cit b562
b566, c1)
1 FeS QH2 Cicloa Q B yF
- FC Cit b
c
Umi 566
q
Bio
Aceptor: cit c
4 H+ Matriz
4 H+in 4 H+ex
CICLO Q

H+ H+

Espacio interm. Cit c

1
QH2 QH. Q
Cit b562

F Cit b566
C By
QH2 -F 2 1 Q
ica
oq
U m
QH.
Bi
Matriz

H+ H+
COMPLEJO IV
(cit c oxidasa)
2 H+
Cit c
Espacio interm.
2x1
400 kDa (dm. 8- Cit a CuA
13 SU)
2x1

F
cit (a y a3)

y
CB
-F
CuA y CuB CitCit
a3 a3 CuB

ic a
m
Aceptor: O2

U
oq
Bi
4 H+in 4 H+ex
Matriz
O2 + 2 H+
H 2O
 Sntesis de ATP
Fo: transmembrana, 8 SU diferentes (3 en
E. coli), ab2c10-12, canal de H+

F1: 9 SU, 33, es la cataltica

 O O L L

T T T T
L L O O

T O
T T
O
L O L O L L T
G ATP aq

BioqUmica - FCByF
ADP + Pi ATP unido

Coordenada de reaccin
Adenilato translocasa

ADP 3-

ATP 4-

BioqUmica - FCByF

Pi

H+
Lanzadera malato/cetoglutarato

Esp. IM Matriz

NAD+ Mal Mal NAD+

MDH
NADH

BioqUmica - FCByF
NADH

OAA OAA
Glu Glu
AAT AAT
KG KG
Asp Asp
Lanzadera de glicerofosfato

Esp. IM Matriz

DHAP FADH2
NADH F
CBy
-F
ic a
m
NAD+ q U
GliceroP Bi
o FAD

QH2
Desacoplantes

Sustancias que disipan el gradiente de

H+
Aumentan el flujo de
Cesa la produccin de ATP
Pueden ser naturales (valinomicina) o
sintticos (DNF)
 Noradrenalina

Protena G Adenilato ciclasa

Receptor
GTP
-adrenrgico F
C By
-F ATP AMPc
ica
m
Activacin de termogenina oq
U +
Bi Protena Protena
bloqueda por kinasa dep. kinasa dep.
ATP, ADP, GTP, GDP de AMPc de AMPc

ATP ADP
P Lipasa Lipasa
Ac. graso libre sensible a sensible a
hormonas hormonas
Inhibidores del transporte de

Sustancias inhiben algn componente

de la cadena de TEM
Cesa el flujo de
Cesa la produccin de ATP
Actan en diferentes lugares:
Complejo I: Rotenona, amital,
piericidina
Complejo III: antimicina, mixotiazol,
estigmatelina
Complejo IV: cianuro, sulfuro, CO,
azida (N3-)
Inhibidores de la ATP sintasa

Cesa la produccin de ATP

Cesa el flujo de
Ejemplos: oligomicina, diciclo hexil
carbodiimida (DCCD)

Inhibidores de la translocasa
Cesa la produccin de ATP
Cesa el flujo de
Ejemplos: atractilsido