UNIVERSIDAD AUTNOMA DEL

ESTADO DE HIDALGO

INSTITUTO DE CIENCIAS DE LA SALUD

REA ACADMICA DE FARMACIA

BIOQUMICA

Electroforesis de protenas

Margarita Hernndez Vera

Q. Fernando Amaro Curiel

Pachuca de Soto, Hidalgo. 20 de septiembre del 2016

Qu es electroforesis de protenas?
La electroforesis de protenas es una prueba de laboratorio basada en
la separacin de protenas aplicando un campo elctrico. Para realizar
esta prueba, los laboratorios pueden usar un medio slido (como el
gel de agarosa) o tubos de slice muy finos, llamados capilares, llenos
de un lquido. Cuando una muestra con una mezcla de protenas
diferentes es aplicada en un gel o dentro de un capilar, las diferentes
protenas de la mezcla se separarn en funcin de su carga elctrica.
En esta tcnica se aplica una corriente elctrica para desplazar las
protenas sobre una capa fina de agar similar a un gel. La distancia
que recorre cada tipo de protena depende de su tamao, su forma, y
su carga elctrica. Las protenas as separadas pueden detectarse
mediante un colorante que se fija y tie las distintas protenas y pone
de manifiesto un patrn de bandas caracterstico. Cada banda indica
la presencia de una protena, mientras que el tamao de la banda
aporta una aproximacin de la cantidad de protena. Este patrn de
bandas se convierte posteriormente en un grfico, que muestra picos
verticales all donde existe mucha cantidad de una determinada
protena, y unos picos ms pequeos o valles donde existe menos.
Con una electroforesis, las protenas sricas quedan separadas en
cinco o seis bandas principales que son: albmina, alpha-1 globulina,
alpha-2 globulina, beta-1 y beta-2 globulinas y gammaglobulina. La
albmina, producida en el hgado, se corresponde con una nica
banda y representa aproximadamente el 60% de las protenas
sricas. Con el trmino globulinas se est aludiendo al resto de
protenas diferentes de la albmina. A excepcin de las
inmunoglobulinas y de algunas protenas del complemento, la mayor
parte de protenas son tambin de sntesis heptica.

Las bandas que se visualizan en la electroforesis de protenas definen

unos patrones caractersticos. Alteraciones de estos patrones se
asocian a toda una serie de condiciones y enfermedades diferentes.
Por ejemplo, en el mieloma mltiple (un tipo de cncer de las clulas
plasmticas sanguneas) el crecimiento y la divisin descontrolados
de las clulas plasmticas malignas conducen a la produccin de
grandes cantidades de un nico tipo de inmunoglobulina monoclonal.
Los anticuerpos (inmunoglobulinas) deben ser distintos entre ellos
para asegurar as el reconocimiento de bacterias, virus y otras
sustancias extraas para el organismo. Cuando existe un cncer de
clulas plasmticas, slo se produce un tipo de anticuerpo por estas
clulas cancerosas, conocido como protena monoclonal. Esta
protena anmala puede visualizarse como una banda caracterstica
en el patrn electrofortico

Al buscar una protena monoclonal, los laboratorios analizarn el

suero y la orina mediante la electroforesis de protenas, que es la
nica prueba que puede confirmar la monoclonalidad
inequvocamente.
Tipos de electroforesis

Electrofresis en gel de poliacrilamida (PAGE)

La poliacrilamida es un soporte empleado frecuentemente en
electroforesis en gel, es qumicamente inerte, de propiedades
uniformes, capaz de ser preparado de forma rpida y reproducible.
Forma, adems, geles transparentes con estabilidad mecnica,
insolubles en agua, relativamente no inicos y que permiten buena
visualizacin de las bandas durante tiempo prolongado. Adems tiene
la ventaja de que variando la concentracin de polmeros, se puede
modificar de manera controlada el tamao del poro.

Inmunoelectrofresis
Es una combinacin de una electroforesis en geles de agarosa
seguida de una inmunodifusin. En la primera parte, se realiza una
aplicacin puntual de la muestra, por lo que al final las distintas
protenas estarn distribuidas a lo largo del gel segn el eje de
migracin.
Electrofresis en geles de gradientes
El uso de geles de poliacrilamida que tienen un gradiente creciente de
concentracin de acrilamida + bisacrilamida, y en consecuencia un
gradiente decreciente en el tamao del poro, pueden tener ventajas
sobre los geles de concentraciones uniformes de acrilamida. En un gel
en gradiente la protena migra hasta alcanzar una zona donde el
tamao de poro impida cualquier avance.
Electroforesis en geles de agarosa
La agarosa es un polisacrido (originalmente obtenido de algas, como
el agar-agar, pero de composicin homognea), cuyas disoluciones
(tpicamente de 0.5 a 2 %) poseen la propiedad de permanecer
liquidas por encima de 50 C y formar un gel, semislido al enfriarse.
Electrofresis capilar
La electroforesis capilar se basa en los mismos principios de las
tcnicas electroforeticas convencionales, pero utiliza condiciones y
tecnologa distinta que nos permiten obtener una serie de ventajas al
respecto.
Con esta tcnica descrita es posible separar cationes, aniones,
protenas, macromolculas y sustancias no cargadas en forma
simultnea.

Electroforesis de Protenas Sricas

El suero contiene una variedad de protenas diferentes que sern
separadas mediante electroforesis en cinco o seis fracciones (segn el
mtodo usado por el laboratorio). Estas fracciones ya mencionadas
Albmina, Alfa 1, Alfa 2, Beta y Gamma. Las inmunoglobulinas
policlonales se encuentran principalmente en la zona Gamma. Las
inmunoglobulinas normales presentes en el suero son diversas y
presentan leves diferencias en su estructura y carga elctrica. Por esa
razn, cuando son sometidas a electroforesis, forman una zona
grande, que es difusa y simtrica, sin ninguna deformacin visible.
Las protenas monoclonales son producidas por un clon de clulas
plasmticas, por lo que todas las molculas son idnticas y tienen la
misma carga elctrica. Esa es la razn por la que en la electroforesis
una protena monoclonal migrar como un pico estrecho (este pico
aparece casi siempre en la zona gamma, pero a veces puede estar
presente en Beta 2 Beta 1, o incluso en la zona Alfa 2, aunque lo
ltimo es poco frecuente). La electroforesis del suero puede usarse
para buscar una protena monoclonal, as como para monitorizar la
cantidad de protena monoclonal.

Electroforesis de Protenas Urinarias

El rin funciona como un filtro, eliminando slo unas pocas
molculas y conservando la mayora de las protenas en la sangre.
Aunque algunas protenas pequeas realmente pasan a travs del
filtro renal, son reabsorbidas posteriormente y recicladas en forma de
aminocidos. Por eso, la orina normalmente slo contiene pequeas
cantidades de protenas. En la orina pueden aparecer diferentes
protenas en distintas enfermedades. Si el rin est daado, varias
protenas sricas pueden pasar a la orina, y los resultados de la
electroforesis de orina puede parecerse a los de una electroforesis de
protenas sricas, siendo visibles las cinco (o seis) fracciones. Cuando
en el suero est presente una protena monoclonal, a menudo el
exceso de cadenas ligeras libres aparecer en la orina como protena
de Bence Jones (en forma de un pico estrecho, normalmente en las
zonas Gamma o Beta). La electroforesis de orina se usa para
investigar la presencia de la protena de Bence Jones y para
monitorizar su concentracin. Tambin sirve para evaluar el dao
renal.

Cmo Puede Ayudar la Electroforesis de Protenas para

Decidir el Tratamiento?
Como se ha mencionado previamente, la capacidad de medir de
forma precisa la cantidad de protena monoclonal con el SPE y/o el
UPE, y de conocer el nivel exacto de la extensin tumoral del mieloma
es una ventaja enorme. La monitorizacin de la enfermedad en
ausencia de un pico en el SPE o el UPE puede ser bastante difcil. La
cantidad de componente-M en el SPE y el UPE refleja la cantidad de
mieloma presente. Sin embargo, es muy importante darse cuenta de
que cada paciente es diferente. En el momento del diagnstico,
algunos pacientes tienen, por ejemplo, un pico muy grande en el
suero pero no tienen un nivel de mieloma tan alto en la mdula sea
o los huesos. Y lo opuesto tambin es cierto: algunos pacientes
pueden tener un pico pequeo, pero muchas clulas del mieloma. Por
eso, en el diagnstico es muy importante correlacionar el tamao del
pico con la cantidad de mieloma en cada paciente. Si el pico es
pequeo, esto puede ser especialmente importante, ya que pequeos
cambios pueden ser ms importantes en trminos de respuesta al
tratamiento as como de potencial progresin o recada.

Ciertos procesos o enfermedades procesos o enfermedades

pueden asociarse a aumentos o disminuciones de varias
protenas sricas
Disminucin Aumento
Desnutricin y malabsorcin
Embarazo
Enfermedad renal
 Albumina Enfermedad heptica Estados de deshidratacin
Situaciones inflamatorias
Sndromes con prdida de
protenas
Deficiencias de alfa1-
antitripsina (enfermedad
Alfa1-globulinas gentica que asocia a Estados inflamatorios
enfisema pulmonar) agudos o crnicos
Enfermedades hepticas
graves
Hipertiroidismo Enfermedades renales
Alfa2-globulinas Enfermedades hepticas (sndrome nefrtico)
graves
Estados de hemolisis
Desnutricin Hipercolesterolemia
Beta-Globulinas Cirrosis Anemias por falta de hierro
Algunos casos de miolema
mltiple o GMSI
Distintos trastornos Policlonales:
genticos de tipo inmune Procesos inflamatorios
Gamma-globulinas Deficiencias inmunes crnicos
secundarias Artritis reumatoide
Lupus eritematoso
Monoclonales:
Miolema mltiple
Gammapatas (GMSI)

Bibliografa
Gel Electrophoresis of Proteins. The practical Approach Series. Third Edition. Edited by
B. D. HAMES
Pacheco Leal. Daniel. Materia : Bioqumica. Editorial : Limusa. Ao : 2010. Edicin : 2a
ED.
Improving Lives, Finding the Cure. Entiendo la electroforesis de protenas. 12650
Riverside Drive, Suite 206 North Hollywood. Disponible en: file:///D:/U-PEP-Span-
2011_e1web.pdf
Cultek. Soluciones de electroforesis. Protocolo y Tcnicas. Disponible en:
file:///D:/Soluciones-Electroforesis-protocolos.pdf
Espinosa Bernardo, Espinosa Mara Alejandra. Electroforesis de protenas. Sede:
Monteria Cordoba. Disponible en: file:///D:/electroforesis_de_proteinas.pdf
CCM. Electroforesis de las protenas sricas. Septiembre 2016. Monografia.
Disponible en: http://salud.ccm.net/faq/6482-electroforesis-de-las-proteinas-sericas