Universidad Nacional Autnoma de

Mxico.
Facultad de Estudios Superiores

Qumica Farmacutica Biolgica.

LABORATORIO DE MICROBIOLOGA GENERAL I.

Grupo: 2652.

Equipo: 9.

Informe de la prctica:

Multiplicacin Bacteriana (requerimientos

fisicoqumicos).

Fecha de entrega: mircoles 22 de marzo de 2017.

MULTIPLICACION BACTERIANA (REQUERIMIENTOS

FISICIQUIMICOS).
 Objetivos:

Identificar las necesidades fisicoqumicas de los microorganismos

observando cmo influyen estos en la multiplicacin bacteriana.

Diagramas de flujo:

Efecto de la temperatura

Dividir en cuatro partes En ambas placas sembrar

Inicio
ambas placas por estra simple, en su
respectivo cuadrante
cada cepa.

Cepas:
Dos placas de Placa Placa
S. aureus
medio agar sangre. 1.Encubar a 2.Encubar a
S.
Material: 37C por 48 25C por 48
pyogenes
Asa bacteriolgica. horas. horas.
E. coli
P.
aeruginosa

Leer las placas e identificar

si hubo o no crecimiento
bacteriano.

Efecto del pH.

En ambas placas: sembrar

Inicio Dividir en cuatro partes
por estra cerrada, en su
ambas placas.
respectivo cuadrante cada
cepa.

Cepas: 1 placa de medio agar Encubar ambas placas a

K. nutritivo a pH 6. 37C por 48 horas.

pneumoniae 1 placa de medio agar

P. vulgaris nutritivo a pH 9.
S. typhi Materiales:
C. equi Asa bacteriolgica.
Leer las placas e identificar si
hubo o no crecimiento
bacteriano.

Requerimiento de oxigeno

Inicio En ambas placas: sembrar

Dividir las dos placas en
por estra cerrada, en su
seis zonas.
respectivo cuadrante cada
cepa.
 Inicio

Cepas:
S. aureus Placa Placa
1 placa de medio agar

S. pyogenes 1.Encubar a 2.Encubar en
tioglicolato.
una atmosfera aerobiosis a
E. coli 1 placa de medio agar
sin oxigeno en 37C por 48

P. aeruginosa tioglicolato en caja Petri de
una caja de horas.

C. septicum plstico.
anaerobiosis
B. subtilis Materiales:
por 48 horas.

Leer las placas e identificar si

hubo o no crecimiento
bacteriano.

Efecto de la presin osmtica

Inicio En ambas placas: sembrar

Inicio Dividir las dos placas en
por estra cerrada, en su
cuatro zonas.
respectivo cuadrante cada
cepa.

Cepas: 1 placa de medio agar

Encubar ambas placas a
P. vulgaris nutritivo con 7.5% ms de sal.
37C por 48 horas.
S. aureus 1 placa de medio agar
nutritivo normal.
E. coli
Materiales:
S. typhi
Asa bacteriolgica.
Leer las placas e identificar si
hubo o no crecimiento
bacteriano.

Efecto de la humedad

Sembrar S. aureus en el
Inicio Sembrar ambos tubos tubo de agar nutritivo con
de agar nutritivo uno 3% de agar con baja
con S. aureus y otro con humedad.
E. coli.
Cepas:
1 tubo con agar nutritivo con Incubar los 3 tubos a 37C por
S. aureus
3% de agar como baja 48 horas.
E. coli humedad.
2 tubos con agar nutritivo.
Materiales:
Asa bacteriolgica.
 Comparar el desarrollo en
ambos tubos.

Resultados

Cuadro 1. Resultados de multiplicacin bacteriana sometidos a diferentes requerimientos

fisicoqumicos.
Factor fisicoqumico.

Bacterias. Temperatur pH Oxigeno Presin osmtica. Humedad.

a Agar A. tioglicolato Agar Nutritivo Agar
Agar Sangre Nutritivo Aerobio Normal 7.5%de Nutritivo
25C 6 9 Anaerobio sal Normal 3%
37C mas
S. aureus si si ---- ---- si si si si si
poco
S. si si ---- ---- si si ----- ----- ----
pyogenes ----
E. coli si si ---- ---- si si si no si
----
P. si si ---- ---- si si ----- ----- ----
aeruginosa ----
K. ---- ---- si si ----- ----- ----- ----- ----
pneumonia ----
e
P. vulgaris ---- ---- si si ----- ----- no si ----
----
S. typhi ---- ---- si si ----- ----- si no ----
----
C. equi ---- ---- si si ----- ----- ----- ----- ----
----
C. ---- ---- ---- ---- no si ----- ----- ----
septicum ----
B. subtilis ---- ---- ---- ---- si si ----- ----- ----
----
Los datos reportados con lneas punteadas (---) indican que la prueba no se realiz a la bacteria
correspondiente de dicha fila. El termino (si) se asigno como indicativo de multiplicacin bacteriana y el
termino (no) cuando no se presento multiplicacin bacteriana.

Anlisis de resultados

Las bacterias para que se multipliquen a dems de los nutrientes necesitan

factores fisicoqumicos ptimos, tales como: temperatura, pH, tensin de
oxgeno, presin osmtica y humedad. Es por ello que en la presente
practica se realizaron siembras de diferentes cepas, sometidas a variaciones
de los factores fisicoqumicos ya mencionados anteriormente, con la
finalidad de identificar las necesidades fisicoqumicas de los
microorganismos.

Efecto de la temperatura.

La prueba de efecto de la temperatura se realizo solo para S. aureus,

S. pyogenes, E. coli y P. aeruginosa. Dichas cepas fueron sembradas
por igual en dos placas de agar sangre, una placa se incubo a 37C y
la otra se incubo a 25C, todas las cepas incubadas crecieron en
ambas temperaturas, los datos se encuentran descritos en el cuadro
1. Se reporto como "s" con base en la observacin de multiplicacin
bacteriana (crecimiento), y s por el contrario esta no presento dicha
caracterstica se reporto como "no".

Como se describe en el cuadro 1 la cepa de S. pyogenes presento

multiplicacin en ambas temperaturas de incubacin. El resultado se
atribuye a que esta bacteria puede crecer a una velocidad
considerable en un rango de temperatura que se halla entre los 25 y
45C, siendo 37C la temperatura ptima de crecimiento y
multiplicacin. Esto no hace referencia a que la bacteria solo se
multiplique a esa temperatura, si no que a 37C se multiplica mejor y
con mayor velocidad.

En el caso de E. coli y como se indica en el cuadro 1 presento

multiplicacin en ambas temperaturas. Los resultados obtenidos se
deben a que dicha bacteria tiene la capacidad de multiplicarse
preferentemente a 37 C, pero esto no indica que solo a esa
temperatura pueda multiplicarse, si no que es la temperatura optima
para su crecimiento. A si de esta manera se atribuye que creci a
temperatura ambiente porque 25C est dentro de sus rangos de
aceptacin.

Para el caso de P. aeruginosa (con habilidad de crecimiento de 42 C.)

y S. aureus (con temperatura ptima de crecimiento de 35 a 40 C.)
Presentaron multiplicacin bacteriana en ambas temperaturas como
se indica en el cuadro 1. El resultado obtenido pareciera ser que no es
el esperado, mas sin embargo dicho resultado se puede deber a que
estas bacterias soportan temperaturas ms bajas que la ptima y as
de esta manera presentan multiplicacin bacteriana, no con la misma
velocidad ni cantidad de poblacin pero si a una velocidad
considerable.
 Efecto del pH.

Se realizo la prueba de multiplicacin bacteriana en relacin al efecto

del pH con K. pneumoniae, P. vulgaris, S. typhi y C. equi. Se llevo a
cabo en dos placas; en agar nutritivo pH6 y en agar nutritivo pH 9.

La determinacin del efecto de pH, como se indica en el cuadro 1,

cada una de las bacteria K. pneumoniae, P. vulgaris, S. typhi y C. equi
se multiplicaron en ambos pH (tanto pH6 como pH9). El resultado se
debe a que el pH utilizado en cada placa para dicha prctica, se
encuentran dentro del rango establecido para la clasificacin de
bacterias neutrfilas, es decir, se presento crecimiento en ambas
placas con pH diferente pero no porque estas bacterias sean
acidofilas o alcalfilas necesariamente, si no que estn dentro del
rango de pH para que estas se multipliquen, aunque su pH ptimo
sea de 7.

Otro factor a considerar podra ser que el resultado se pudo ver

influido o alterado, por una mala preparacin de los medios en
relacin al buffer utilizado.

Requerimiento de oxgeno.

La prueba de tensin de oxigeno, se realizo con la finalidad de

identificar en S. aureus, S. pyogenes, E. coli, P. aeruginosa, C.
septicum y B. subtilis la capacidad que tienen de tolerar la presencia
o ausencia de oxigeno, segn sea el caso y como es que repercute
respecto a su multiplicacin bacteriana.
Como se indica en cuadro 1 se presento multiplicacin bacteriana en
ambas placas (condicin aerobia y condicin anaerobia) de las
bacterias P.aeruginosa, E. coli, S. pyogenes, S. aureus y B. subtilis.
Dicho resultado se debe a que son bacterias aerobias facultativas, lo
que les permite multiplicarse tanto en presencia de oxigeno como en
tolerar condiciones bajas del mismo, es por ello que se observo
crecimiento de cada una de las bacterias mencionadas en ambas
placas.
Respecto a C. septicum presento crecimiento solo en la placa
sometida a condiciones anaerobias, el resultado es favorable debido a
que C. septicum es una bacteria anaerobia estricta u obligada, dicha
propiedad no permiti que esta se multiplicara en presencia de
oxigeno y por ende solo se multiplico en ausencia del mismo. Es por
ello, que al no someter una placa a condiciones anaerobias, C.
septicum no presento crecimiento en ella.

Efecto de la presin osmtica.

Para llevar a cabo esta prueba se utilizo P. vulgaris, S. aureus, E. coli
y S. typhi se empleo una placa de agar nutritivo y otra placa de este
mismo pero con 7.5% de sal, esto con la finalidad de observar si las
bacterias son capaces de tolerar ambientes con elevada
concentracin de sales o solutos en general sin que este le afecta a
su crecimiento bacteriano. Como se obserba en el cuadro 1, en ambas
placas las bacterias s presentaron multiplicacion bacteriana, dicho
resultado se puede atribuir a que en estas bacterias sus membranas
plasmatcas tienen cierta tolerancia a concentraciones elevada de sal,
aprobechando estas para multiplicarse en el medio agar nutritivo
normal y agar nutritivo con 7.5% de sal.

Efecto de la humedad.

Los microorganismos no tienen la capacidad de retencin de agua, como los

organismos superiores, es por ello que su metabolismo y desarrollo depende
de un medio en el que exista agua. As de esta forma proporcionndoles un
medio con humedad optima estos tendrn una mejor multiplicacin y
crecimiento bacteriano. Con la finalidad de observar cmo es que influye el
factor de humedad en el crecimiento bacteriano, se utilizaron dos cepas: S.
aureus y E. coli. que se sembraron cada una en un tubo con medio
agar nutritivo y por falta de agar bacteriolgico con 3% de agar con
baja humedad solo se sembr S. aureus en un tubo con dicho medio.
Como se indica en el cuadro 1 S. aureus y E. coli crecieron y se
multiplicaron perfectamente en medio agar nutritivo, debido a que
poseen los nutrientes y la humedad optima para su multiplicacin
bacteriana. Mas sin embargo S. aureus en el tubo al 3% menos de
agar, creci en muy poca proporcin, dicho resultado se debe a la
falta de humedad puesto que el agar se encuentra ms concentrado
y por consiguiente el requerimiento que exige S. aureus de humedad
para su optimo crecimiento no lo encontr suficiente para que esta
pudiera multiplicarse mas.

Conclusiones

Los principales requerimientos de los microorganismos para su

multiplicacin bacteriana ptima, se divide en dos principales: los
requerimientos qumicos y los requerimientos fsicos.

Dentro de los requerimientos qumicos el ms importante es la

tensin de oxigeno, debido a que no todas las bacterias necesitan
oxgeno para multiplicarse (aerobias), existen algunas que pueden
multiplicarse en condiciones bajas de oxigeno o simplemente
necesitan una atmosfera libre de el mismo para su optima
multiplicacin (anaerobias).

Los requerimientos fsicos ms importantes son: temperatura,

humedad, pH y presin osmtica. La presencia de condiciones fsicas
ptimas para cada microorganismo, garantizan su buen crecimiento y
multiplicacin bacteriana.

Referencias

Madigan, T. M., Martinko, M. J., Dunlap, V. P. & Clark Brock. Biologa de

los microorganismos. (2009). Espaa: Pearson Educacin, S. A.

Prescott, L. M., Harley, J. P. y Klein. Microbiologa. (1999). Espaa: Mc

Graw-HillInteramericana.

Tortora, J.G., Funke, R.B. y Case. Introduccin a la microbiologa.

(2007). San Francisco: Pearson Education Inc.