Professional Documents
Culture Documents
PERPUSTAKAAN CYBER
Perpustakaan Cyber, Jurnal, Artikel Ilmiah, Referensi, Sains, Teknologi, Materi Pelajaran, Cerita Rakyat, Dongeng.
Home Mikroorganisme Pertumbuhan Mikroba, Kinetika, Perhitungan, Populasi, Kultur, Rumus, Fase, Metode, Faktor Caridisini..
11:54 AM
Iklanoleh Google
Bakteri Cultureplate Airmedia
Iklanoleh Google
Agarplate Contohlaporan Sel
Artikel dan Makalah tentang Pertumbuhan Mikroba, Kinetika, Perhitungan, Populasi, Kultur, Rumus, Fase, Metode, Faktor
- Pertumbuhan dapat didefinisikan sebagai pertambahan jumlah atau volume serta ukuran sel. Pada organisme prokariot
seperti bakteri, pertumbuhan merupakan pertambahan volume dan ukuran sel dan juga sebagai pertambahan jumlah sel.
Pada jasad bersel banyak (multiseluler), pembelahan sel tidak menghasilkan pertambahan jumlah individunya, tetapi
hanya merupakan pembentukan jaringan atau bertambah besar jasadnya.
BAB I
PENDAHULUAN
Pertumbuhan mikroba dapat dibedakan antara pertumbuhan masing-masing individu sel dan pertumbuhan kelompok sel
atau pertumbuhan populasi. Pertumbuhan tersebut dapat diukur secara langsung maupun tidak langsung. Pengukuran
langsung akan diperoleh jumlah keseluruhan mikrobia, baik yang hidup maupun yang mati, sedangkan pengukuran tidak
langsung hanya menghitung mikrobia yang hidup. Pengukuran langsung dilakukan secara mikroskopis yaitu dengan
menghitung jumlah bakteri dalam satuan isi yang sangat kecil. Alat yang digunakan adalah Petroff-Hauser Chamber atau
Haemocytometer. Pengukuran tidak langsung dapat dilakukan dengan metode plate count, MPN maupun dengan
pengukuran turbiditas dengan menggunakan spektrofotometer. FOLLOW BY EMAIL
Kinetika pertumbuhan populasi mikroba dapat dilihat berdasarkan sistem biakannya yaitu pada biakan sistem tertutup Emailaddress... Submit
(batch culture) dan biakan sistem terbuka (continous culture). Pada biakan sistem tertutup, pengamatan pertumbuhan
PuriMaulana
populasi mikrobia dalam waktu yang cukup lama memberikan gambaran melalui kurva pertumbuhan, terdapat fase-fase
pertumbuhan. Pertumbuhan sel bakteri biasanya mengikuti suatu pola pertumbuhan tertentu berupa kurva pertumbuhan Addtocircles
sigmoid. Fase pertumbuhan dimulai pada fase log, fase eksponensial, fase stasioner, dan fase kematian. 474havemeincircles Viewall
Sistem biakan terbuka digunakan untuk mempertahankan sel pada fase pertumbuhan eksponensial. Sistem biakan terbuka
mempunyai ciri berupa ukuran populasi dan kecepatan pertumbuhan dapat diatur pada nilai konstan menggunakan Follow 2,318followers
khemostat. Khemostat digunakan dengan mengatur kecepatan aliran medium dan kadar substrat (nutrien pembatas).
Nutrien pembatas dapat menggunakan sumber C (karbon), sumber N atau faktor tumbuh.
ARTIKEL REKOMENDASI
Penulisan yang membahas tentang tema kinetika pertumbuhan mikrobia bertujuan untuk: Dinamika Budaya
Efek Fotolistrik
1. Menjelaskan dan menggambarkan bentuk kinetika pertumbuhan populasi mikroba pada batch culture dan
Energi Potensial Listrik
continuous culture.
2. Menjelaskan cara penghitungan pertumbuhan populasi mikroba. Filum Arthropoda
3. Mengetahui faktor-faktor yang mempengaruhi kinetika pertumbuhan mikroba. Filum Echinodermata
http://perpustakaancyber.blogspot.co.id/2012/11/pertumbuhanmikrobakurvalajulageksponensialstasionerbakteripengaruhkecepatan.html 1/16
2/14/2017 PertumbuhanMikroba,Kinetika,Perhitungan,Populasi,Kultur,Rumus,Fase,Metode,Faktor|PerpustakaanCyber
BAB II Filum Moluska
ISI Filum Platyhelminthes
Fungsi Komposisi dan
2.1. Kinetika Pertumbuhan Mikroba
Invers
Gerak Lurus Berubah
Kinetika pertumbuhan mikroba digunakan untuk menggambarkan sifat-sifat pertumbuhan mikroorganisme. Sifat
Beraturan
pertumbuhan mikrobia dapat digambarkan dalam bentuk kurva pertumbuhan populasi mikroba yang ditumbuhkan dalam
batch culture atau continuous culture. Gerak Melingkar
Beraturan
http://perpustakaancyber.blogspot.co.id/2012/11/pertumbuhanmikrobakurvalajulageksponensialstasionerbakteripengaruhkecepatan.html 2/16
2/14/2017 PertumbuhanMikroba,Kinetika,Perhitungan,Populasi,Kultur,Rumus,Fase,Metode,Faktor|PerpustakaanCyber
sel mikrobia akan membelah 2x lipat sehingga peningkatan jumlah populasi selalu 2n, n adalah jumlah generasi.
Pertambahan jumlah sel dalam populasi disebut sebagai pertumbuhan mikrobia.
Pada fase eksponensial, awalnya sel mikrobia membelah secara pelan kemudian penambahannya semakin meningkat
cepat. Secara matematis memiliki rumus:
Nt=N02n (1)
Berikut contoh pertambahan populasi mikrobia yang dapat di lihat pada Gambar 2.
Gambar 2.Pertumbuhan Eksponensial Populasi Mikrobia, A. contoh penggandaan sel mikrobia yang membelah setiap 20 menit, B. grafik
penggandaan sel mikrobia, garis merah dalam skala Aritmetik dan garis biru dalam skala Logaritmik. (Dikutip dari Prescott, 1999: 115)
Skala logaritmik menunjukkan jumlah sel dan skala aritmetik menunjukkan waktu inkubasi. Titik perpotongan antara skala
logaritmik dengan skala aritmetik menunjukkan adanya pertumbuhan eksponensial dan populasi mengalami penggandaan
dalam interval waktu konstan. Penghitungan waktu generasi dapat digunakan rumus berikut:
Nt=N02n
menggunakan rumus tersebut maka dapat di cari nilai n. Waktu generasi (g) pada pertumbuhan ekponensial diperoleh
dari:
g = t/n (3)
Rerata pertumbuhan dalam batch culture dapat dinyatakan dalam bentuk konstanta kecepatan pertumbuhan rerata (k).
k = n/t
k = log Nt logN0
http://perpustakaancyber.blogspot.co.id/2012/11/pertumbuhanmikrobakurvalajulageksponensialstasionerbakteripengaruhkecepatan.html 3/16
2/14/2017 PertumbuhanMikroba,Kinetika,Perhitungan,Populasi,Kultur,Rumus,Fase,Metode,Faktor|PerpustakaanCyber
-
0.301(t)
0.301 (g)
k = 1/g (4)
g = 1/k (5)
(waktu generasi berbanding terbalik dengan kecepatan pertumbuhan rerata) (Prescott, 1999).
Rata-rata kecepatan pertumbuhan pada fase eksponensial sangat dipengaruhi oleh kondisi lingkungan (seperti nutrisi,
kondisi inkubasi), seperti halnya karakteristik genetik suatu mikrobia. Pada umumnya, prokariot lebih cepat tumbuh
daripada eukariot dan eukariot yang berukuran kecil lebih cepat tumbuh daripada yang ukurannya lebih besar. Hal ini
karena sel yang berukuran kecil memiliki kapasitas penyerapan nutrisi dan pembuangan sisa metabolisme lebih besar
daripada sel yang berukuran besar. Kondisi tersebut mempercepat proses metabolisme yang akan mempengaruhi
kecepatan pertumbuhan mikrobia. Pertumbuhan yang lebih cepat pada prokariot (bakteri) menyebabkan waktu
generasinya lebih pendek dibandingkan eukariot (Brock, 2012).
Biomassa sel mikrobia dapat dihitung melalui konstanta kecepatan pertumbuhan spesifik (), berikut:
dX / dt = X (1)
dt : perubahan waktu
Xt / t = X0
(t) = Xt /X0
= (ln Xt lnX0) / t
(t) = ln Xt lnX0
Kerapatan populasi dalam t dapat diperkirakan dengan sebagai konstanta pertumbuhan. Parameter untuk konstanta
pertumbuhan populasi secara eksponensial adalah waktu generasi (waktu penggandaan). Penggandaan populasi terjadi
saat Xt/Xo = 2, sehingga rumus menjadi :
Xt /X0 = e t
2 = e t
http://perpustakaancyber.blogspot.co.id/2012/11/pertumbuhanmikrobakurvalajulageksponensialstasionerbakteripengaruhkecepatan.html 4/16
2/14/2017 PertumbuhanMikroba,Kinetika,Perhitungan,Populasi,Kultur,Rumus,Fase,Metode,Faktor|PerpustakaanCyber
ln 2 = ln e t
0,693 = t (t=g)
0,693 = g (5)
0,693 = (1/k)
= 0,693 k (6)
dan k, keduanya menggambarkan proses pertumbuhan yang sama dari peningkatan populasi secara eksponensial.
Perbedaannya merupakan konstanta kecepatan pertumbuhan yang digunakan untuk memperkirakan kecepatan
pertumbuhan populasi dari masing-masing aktivitas sel individual dan dapat digunakan untuk mengetahui dinamika
pertumbuhan secara teoritis, sedang k adalah nilai rata-rata populasi pada periode waktu terbatas, yang menggambarkan
asumsi rata-rata pertumbuhan populasi.
c. Fase Stasioner
Mikrobia mengalami pertumbuhan yang terbatas dan konstan selama fase stasioner. Pada fase stasioner, pembelahan sel
yang terjadi sangat lambat. Jumlah pembelahan sel dengan sel yang mati seimbang, sehingga jumlah sel relatif konstan
(pertumbuhan 0). Pertambahan jumlah sel yang sebanding dengan kematian sel disebut dengan fenomena pertumbuhan
kriptik.
Pada fase ini, sel mikroba tetap aktif melakukan metabolisme energi dan proses biosintesis lainnya. Metabolit sekunder
banyak dihasilkan mikrobia pada fase ini. Fase stasioner terjadi karena beberapa alasan yaitu:
4. Fase Kematian
Fase kematian terjadi jika terjadi perubahan lingkungan menjadi tidak menguntungkan, seperti berkurangnya nutrisi
essensial dalam medium dan meningkatnya akumulasi zat toksik dalam medium. Grafik fase kematian seperti grafik fase
eksponensial yaitu logaritmik (kematian sel tiap jam adalah konstan). Sel mikrobia yang mati akan mengalami lisis
(Prescott, 1999).
Dalam kultivasi mikroba menggunakan teknik continuous culture, mikroba ditumbuhkan secara terus menerus pada fase
paling optimum untuk fase pertumbuhan yaitu fase eksponensial dimana sel membelah diri dengan laju yang konstan,
massa menjadi dua kali lipat mengikuti kurva logaritmik. Hal ini dilakukan dengan memberi nutrisi secara terus menerus
sehingga mikroba tidak pernah kekurangan nutrisi. Penambahan nutrisi/media segar ke dalam bioreaktor dilakukan
secara kontinyu, dimana dalam waktu yang sama larutan yang berisi sel dan hasil produk hasil metabolisme dikeluarkan
dari media dengan volume yang sama dengan substrat yang diberikan. Kondisi tersebut menghasilkan keadaan yang stedy
state dimana pembentukan sel-sel baru sama dengan sel-sel yang dikeluarkan dari fermentor. Pada kondisi steady state
konsentrasi nutrisi, konsentrasi sel, laju pertumbuhan dan konsentrasi produk tidak berubah walaupun waktu fermentasi
makin lama. Laju pertumbuhan spesifik dipengaruhi oleh perbandingan antara laju aliran medium dan volume kultur
disebut dengan Laju Dilusi (D) dimana
D = F/V
Keterangan:
F : Laju aliran
V : Volume
http://perpustakaancyber.blogspot.co.id/2012/11/pertumbuhanmikrobakurvalajulageksponensialstasionerbakteripengaruhkecepatan.html 5/16
2/14/2017 PertumbuhanMikroba,Kinetika,Perhitungan,Populasi,Kultur,Rumus,Fase,Metode,Faktor|PerpustakaanCyber
D : Laju dilusi
Dengan menggunakan continuous culture, sel mikroba atau produk metabolitnya dapat dipanen secara kontinyu.
Continuous culture cocok untuk diterapkan pada sistem produksi metabolit sel mikroba yang tidak berpengaruh pada
pertumbuhan selnya itu sendiri. Untuk industri bioteknologi berkapasitas besar, continuous culture menghasilkan efisiensi
produksi yang lebih tinggi dibandingkan dengan batch culture asalkan produk yang dihasilkan tidak berpengaruh negatif
terhadap mikroba penghasilnya.
1. Produktivitas lebih tinggi, disebabkan lebih sedikit waktu persiapan bioreaktor persatuan produk yang dihasilkan,
laju pertumbuhan & konsentrasi sel dapat dikontrol, pemasokan oksigen dan pembuangan panas dapat diatur,
dengan demikian hanya butuh pabrik lebih kecil (pengurangan biaya modal untuk fasilitas baru).
2. Dapat dijalankan pada waktu yang lama.
3. Cocok untuk proses yang kontaminasinya rendah dan produk yang berasosiasi dengan pertumbuhan.
4. Pemantauan dan pengendalian proses lebih sederhana.
5. Tidak ada akumulasi produk yang menghambat.
Kekurangannnya antara lain: aliran umpan yang lama, resiko kontaminasi besar (operasi harus hati-hati & desain
peralatan lebih baik), peralatan untuk operasi dan pengendalian proses harus biasa tetap bekerja baik untuk waktu yang
lama, memerlukan mikroba dengan kestabilan genetik tinggi, karena akan digunakan pada waktu yang lama (Irianto,
2007).
Pemberian nutrient secara kontinyu dan untuk mempertahankan keadaan steady state dalam teknik kultivasi ini dapat
dilakukan dengan dua macam cara, yaitu: khemostat dan turbidostat.
a. Khemostat
Teknik continuous culture dengan menggunakan kemostat dilakukan dengan menambahkan nutrien melalui sebuah tangki
sedemikian rupa sehingga komposisi nutrient di dalam fermentor tempat kultivasi mikrobia selalu dalam keadaan tetap.
Hal ini dapat dicapai dengan mengatur kecepatan aliran medium baru ke dalam fermentor disesuaikan dengan aliran
medium keluar fermentor untuk di panen.
Di dalam sistem ini sel dapat dipertahankan terus menerus pada fase pertumbuhan eksponensial atau fase pertumbuhan
logaritma. Continuous culture mempunyai ciri ukuran populasi dan kecepatan pertumbuhan dapat diatur pada nilai
konstan menggunakan khemostat. Untuk mengatur proses di dalam khemostat, diatur kecepatan aliran medium dan
kadar substrat (nutrien pembatas). Sebagai nutrien pembatas dapat menggunakan sumber C (karbon), sumber N atau
faktor tumbuh. Pada sistem ini , ada aliran keluar untuk mempertahankan volume biakan dalam kemostat sehingga tetap
konstan (Scragg, 1988):
Dengan sistem ini, sel seolah-olah dibuat dalam keadaan setengah kelaparan, dengan nutrien pembatas. Kadar nutrien
yang rendah menyebabkan kecepatan pertumbuhan berbanding lurus dengan kadar nutrien atau substrat tersebut.
Sifat-sifat kemostat dan pertumbuhan steady-state dapat ditunjukkan dengan sejumlah rumus yang berhubungan dengan
jumlah sel dan konsentrasi nutrien pembatas terhadap laju alir suplai medium sebagai faktor yang beroperasi secara
http://perpustakaancyber.blogspot.co.id/2012/11/pertumbuhanmikrobakurvalajulageksponensialstasionerbakteripengaruhkecepatan.html 6/16
2/14/2017 PertumbuhanMikroba,Kinetika,Perhitungan,Populasi,Kultur,Rumus,Fase,Metode,Faktor|PerpustakaanCyber
independen. Hal ini dilakukan dengan menjaga keseimbangan materi dan pembatasan substrat dalam bioreaktor (Scragg,
1988).
Keterangan :
1
F = laju alir suplai medium (1.h );
Dengan kemostat single-stage, suplai medium biasanya bersifat steril (dengan asumsi tanpa penggunaan kembali sel
sebelumnya) dan > , sehingga persamaannya dapat disederhanakan menjadi:
dimana F/V diistalahkan sebagai laju dilusi, D, yang merupakan jumlah volume kultur yang melewati reaktor setiap jam,
sehingga persamaannya dapat ditulis ulang sebagai berikut:
Monod adalah orang pertama yang mengkaji pengaruh konsentrasi substrat tehadap laju pertumbuhan. Beliau
menemukan bahwa ketika medium segar, yang mengandung glukosa sebagai sumber karbon sekaligus sebagai sumber
energi dan dengan semua nutrien yang terkandung di dalamnya, diinokulasikan, siklus pertumbuhan kembali berjalan.
Hubungan antara laju pertumbuhan spesifik () dan konsentrasi substrat (S) dapat digambarkan dengan kurva (Gambar
4) yang mirip demgam yang penggambaran kinetika enzim model Michaelis-Menten. Monod mengajukan suatu aturan
http://perpustakaancyber.blogspot.co.id/2012/11/pertumbuhanmikrobakurvalajulageksponensialstasionerbakteripengaruhkecepatan.html 7/16
2/14/2017 PertumbuhanMikroba,Kinetika,Perhitungan,Populasi,Kultur,Rumus,Fase,Metode,Faktor|PerpustakaanCyber
yang dikenal sebagai rumus Monod, untuk menggambarkan kurva tersebut.
Persamaan monod dapat dibuat persamaan garis lurusnya dengan pembalikan sebagai berikut:
Perpotongan antara 1/ dengan 1/S menghasilkan garis lurus dengan slope Ks/m, menangkap titik absis dari -1/Ks
dan ordinat m (Gambar 5).
3. Hubungan antara kecepatan pertumbuhan dan kecepatan penghasilan produk dengan kecepatan penggunaan substrat
Biomassa (Yx/s)dan hasil produk (Yp/s) merupakan parameter yang penting selama keduanya menunjukkan efesiensi
penggunaan substrat dalam biomassa dan produk. Keduanya ditetapkan sebagai berat biomassa dan berat produk yang
dibentuk per unit dari substrat yang digunakan.
dan
dimana:
Yp : berat produk
http://perpustakaancyber.blogspot.co.id/2012/11/pertumbuhanmikrobakurvalajulageksponensialstasionerbakteripengaruhkecepatan.html 8/16
2/14/2017 PertumbuhanMikroba,Kinetika,Perhitungan,Populasi,Kultur,Rumus,Fase,Metode,Faktor|PerpustakaanCyber
b. Turbidostat
Teknik kultivasi dengan sistem turbidostat dilakukan dengan menambahkan nutrient secara kontinyu sehingga kerapatan
sel selalu dalam keadaan tetap. Dalam teknik turbidostat, aliran medium diatur berdasarkan atas kerapatan optik kultur
mikrobia. Pertumbuhan konsentrasi sel dipertahankan konstan dengan cara memonitor kekeruhan kultur.
Sistem ini didasarkan pada kerapatan bakteri tertentu atau kekeruhan tertentu yang dipertahankan konstan. Ada
perbedaan mendasar antara biak statik klasik dengan biak sinambung dalam kemostat biak static arus dilihat sebagai
sistem tertutup (boleh disamakan dengan organisme sial, tahap stationer dan tahap kematian. Kalau pada biak
sinambung merupakan sistem terbuka yang mengupayakan keseimbangan aliran untuk organisme selalu terdapat kondisi
lingkungan yang sama.
Dalam pertumbuhan sinkron akan terjadi sinkronisasi pembelahan sel. Hal ini dimaksudkan agar proses metabolisme
siklus pembelahan bakteri dapat dipelajari diperlukan suspensi sel yang mengalami pembelahan sel dalam waktu sama
yaitu sinkron. Sinkronisasi populasi sel dapat dicapai dengan berbagai tindakan buatan antara lain dengan merubah suhu
rangsangan cahaya, pembatasan nutrien atau menyaring untuk memperoleh sel-sel yang sama ukurannya. Sinkronisasi
pertumbuhan ini juga dimaksudkan untuk menyediakan stater dengan usia yang sama (Budiyanto, 2005).
Keterangan :
1. Digunakan untuk penelitian fisiologi dan biokimia mikroba, dikarenakan kondisinya mantap, laju pertumbuhan
dapat diatur oleh laju air dan laju pertumbuhan dibatasi oleh konsentrasi substrat pembatas, dapat digunakan untuk
http://perpustakaancyber.blogspot.co.id/2012/11/pertumbuhanmikrobakurvalajulageksponensialstasionerbakteripengaruhkecepatan.html 9/16
2/14/2017 PertumbuhanMikroba,Kinetika,Perhitungan,Populasi,Kultur,Rumus,Fase,Metode,Faktor|PerpustakaanCyber
penelitian pengaruh substrat pembatas terhadap kinerja mikroba.
2. Untuk isolasi dan seleksi mikroba penghasil enzim menggunakan media diperkaya.
3. Untuk produksi biomassa, contoh ICI (Imperial Chemical Industries, kapasitas bioreaktor 3000 m3, substrat
metanol).
4. Untuk produksi bir.
Uraian :
Ada beberapa cara perhitungan secara langsung, antara lain adalah dengan membuat preparat dari suatu bahan (preparat
sederhana diwarnai atau tidak diwarnai) dan penggunaan ruang hitung (counting chamber). Enumerasi mikroba dapat
dilakukan secara langsung yaitu dengan menghitung jumlahnya tanpa ditumbuhkan terlebih dahulu dalam suatu medium,
dalam teknik ini semua sel mikroba baik yang hidup maupun yang mati akan terhitung. Untuk melakukan renumerasi
mikroba dalam suatu bahan seringkali diperlukan pengenceran bertingkat.
Pada metode ini tidak dibedakan sel yang hidup dan sel mati. Penghitungan dilakukan secara langsung pada setiap bidang
pandang mikroskop. Sampel berupa cairan disebar (kira-kira 0,01 mL) pada microscope slide. Setelah dilakukan
pewarnaan kemudian dilakukan penghitungan pada setiap bidang pandang mikroskop.
Penghitungan secara langsung dapat dilakukan secara mikroskopis yaitu dengan menghitung jumlah bakteri dalam satuan
isi yang sangat kecil. Alat yang digunakan adalah Petroff-Hauser Chamber atau Haemocytometer. Jumlah cairan yang
terdapat antara coverglass dan alat ini mempunyai volume tertentu sehingga satuan isi yang terdapat dalam satu bujur
sangkar juga tertentu. Dengan membuat preparat dari Suatu bahan (preparat sederhana diwarnai atau tidak diwarnai) dan
penggunaan ruang hitung (counting chamber).
Ruang hitung terdiri dari 9 kotak besar dengan luas 1 mm. Satu kotak besar di tengah, dibagi menjadi 25 kotak sedang
dengan panjang 0,2 mm. Satu kotak sedang dibagi lagi menjadi 16 kotak kecil. Dengan demikian satu kotak besar tersebut
berisi 400 kotak kecil. Tebal dari ruang hitung ini adalah 0,1 mm. Sel nakteri yang tersuspensi akan memenuhi volume
ruang hitung tersebut sehingga jumlah bakteri per satuan volume dapat diketahui.
http://perpustakaancyber.blogspot.co.id/2012/11/pertumbuhanmikrobakurvalajulageksponensialstasionerbakteripengaruhkecepatan.html 10/16
2/14/2017 PertumbuhanMikroba,Kinetika,Perhitungan,Populasi,Kultur,Rumus,Fase,Metode,Faktor|PerpustakaanCyber
Perhitungan cara tidak langsung hanya untuk mengetahui jumlah mikroorganisme pada suatu bahan yang masih hidup
saja (viable count). Metode perhitungan secara tidak langsung yang didasarkan pada anggapan bahwa setiap sel yang
dapat hidup akan berkembang menjadi satu koloni yang merupakan suatu indeks bagi jumlah organisme yang dapat hidup
yang terdapat pada sampel. Cara ini adalah cara yang paling umum digunakan untuk menentukan jumlah mikroba yang
masih hidup, berdasarkan jumlah koloni yang tumbuh. Teknik ini diawali dengan pengenceran sampel secara seri, dengan
kelipatan 1 : 10. Masing-masing suspensi pengenceran ditanam dengan metode tuang (pour plate) atau sebar (spread
plate). Bakteri akan bereproduksi pada medium agar dan membentuk koloni setelah 18-24 jam inkubasi. Untuk
menghitung jumlah koloni dalam cawan petri dapat digunakan alat colony counter yang biasanya dilengkapi dengan
pencatat elektronik.
Metode sebar (spread plate) merupakan metode penghitungan mikrobia pada medium padat. Dalam metode spread plate
ini, volume kultur yang disebar tidak lebih dari 0,1 ml pada agar plate dan diratakan menggunakan alat yang disebut glass
spreader. Kemudian plate diinkubasi sampai terlihat koloni sehingga jumlah koloni mikrobia dapat dihitung. Walaupun
mikrobia tertanam dalam agar plate, namun hasilnya sama dengan metode pour plate.
Gambar 10.Keuntungan menggunakan metode spread plate daripada metode pour plate adalah kultur tidak pernah terpapar suhu 450oC (suhu
melelehnya agar).
Metode pour plate adalah metode agar cair yang digunakan untuk inokulasi dalam petri dish. Volume kultur yang biasa
digunakan 0,1-1,0 ml. Kultur mikrobia dimasukkan ke dalam petri dish menggunakan pipet steril, kemudian medium agar
yang telah dilelehkan ( 45 oC dituangkan ke dalam petri dish yang telah berisi kultur mikrobia. Selanjutnya dilakukan
pemutaran petri dish agar kultur mikrobia dan medium agar bercampur dengan rata. Koloni mikrobia akan tumbuh dan
http://perpustakaancyber.blogspot.co.id/2012/11/pertumbuhanmikrobakurvalajulageksponensialstasionerbakteripengaruhkecepatan.html 11/16
2/14/2017 PertumbuhanMikroba,Kinetika,Perhitungan,Populasi,Kultur,Rumus,Fase,Metode,Faktor|PerpustakaanCyber
tertanam di dalam medium, baik di permukaan atas maupun di bawah. Sehingga metode pour plate ini cocok untuk
menumbuhkan mikrobia anaerob.
MPN adalah suatu metode enumerasi mikroorganisme yang menggunakan data dari hasil pertumbuhan mikroorganisme
pada medium cair spesifik dalam seri tabung yang ditanam dari sampel padat atau cair yang ditanam berdasarkan jumlah
sampel atau diencerkan menurut tingkat seri tabungnya sehingga dihasilkan kisaran jumlah mikroorganisme yang diuji
dalam nilai MPN/satuan volume atau massa sampel.
Prinsip utama metode ini adalah mengencerkan sampel sampai tingkat tertentu sehingga didapatkan konsentrasi
mikroorganisme yang pas/sesuai dan jika ditanam dalam tabung menghasilkaan frekuensi pertumbuhan tabung positif
kadang-kadang tetapi tidak selalu. Semakin besar jumlah sampel yang dimasukkan (semakin rendah pengenceran yang
dilakukan) maka semakin sering tabung positif yang muncul. Semakin kecil jumlah sampel yang dimasukkan (semakin
tinggi pengenceran yang dilakukan) maka semakin jarang tabung positif yang muncul. Jumlah sampel/pengenceran
yang baik adalah yang menghasilkan tabung positif kadang-kadang tetapi tidak selalu. Semua tabung positif yang
dihasilkan sangat tergantung dengan probabilitas sel yang terambil oleh pipet saat memasukkannya ke dalam media. Oleh
karena itu homogenisasi sangat mempengaruhi metode ini. Frekuensi positif (ya) atau negatif (tidak) ini
menggambarkan konsentrasi mikroorganisme pada sampel sebelum diencerkan.
Pertumbuhan dan aktivitas mikrobia dipengaruhi oleh beberapa faktor lingkungan. Faktor-faktor tersebut dapat menjadi
pembatas bagi kebutuhan hidup mikrobia. Jika mikrobia berada di lingkungan yang sesuai, maka pertumbuhannya juga
optimum. Beberapa golongan mikrobia sangat sensitif terhadap perubahan lingkungan, sedangkan yang lain resisten
terhadap perubahan tersebut. Faktor-faktor yang mempengaruhi aktivitas mikrobia antara lain sebagai berikut:
http://perpustakaancyber.blogspot.co.id/2012/11/pertumbuhanmikrobakurvalajulageksponensialstasionerbakteripengaruhkecepatan.html 12/16
2/14/2017 PertumbuhanMikroba,Kinetika,Perhitungan,Populasi,Kultur,Rumus,Fase,Metode,Faktor|PerpustakaanCyber
a. Suhu
Pertumbuhan mikrobia memerlukan kisaran suhu tertentu. Kisaran suhu pertumbuhan dibagi menjadi suhu minimum,
suhu optimum, dan suhu maksimum. Suhu minimum adalah suhu terendah tetapi mikrobia masih dapat hidup. Suhu
optimum adalah suhu paling baik untuk pertumbuhan mikrobia. Suhu maksimum adalah suhu tertinggi untuk kehidupan
mikrobia.
Berdasarkan kisaran suhu pertumbuhannya, mikrobia dapat dikelompokkan menjadi mikrobia psikrofil (kriofil), mesofil,
dan termofil. Psikrofil adalah kelompok mikrobia yang dapat tumbuh pada suhu 0-30 oCdengan suhu optimum sekitar
15oC Mesofil adalah kelompok mikrobia pada umumnya, mempunyai suhu minimum 15 0C suhu optimum 25-37oCdan
suhu maksimum 45-55 oC Mikrobia yang tahan hidup pada suhu tinggi dikelompokkan dalam mikrobia termofil.
Mikrobia ini mempunyai membran sel yang mengandung lipida jenuh, sehingga titik didihnya tinggi. Selain itu dapat
memproduksi protein termasuk enzim yang tidak terdenaturasi pada suhu tinggi. Di dalam DNA-nya mengandung guanin
dan sitosin dalam jumlah yang relatif besar, sehingga molekul DNA tetap stabil pada suhu tinggi.
Kelompok ini mempunyai suhu minimum 40 oC optimum pada suhu 55-60 oC dan suhu maksimum untuk
pertumbuhannya 75 oC Untuk mikrobia yang tidak tumbuh dibawah suhu 30 oC dan mempunyai suhu pertumbuhan
optimum pada 60 oC dikelompokkan kedalam mikrobia termofil obligat. Untuk mikrobia termofil yang dapat tumbuh
dibawah suhu 30 oC dimasukkan kelompok mikrobia termofil fakultatif. Bakteri yang hidup di dalam tanah dan air,
umumnya bersifat mesofil, tetapi ada juga yang dapat hidup diatas 50 oC (termotoleran). Contoh bakteri termotoleran
adalah Methylococcus capsulatus. Contoh bakteri termofil adalah Bacillus, Clostridium, Sulfolobus, dan bakteri pereduksi
sulfat/sulfur. Bakteri yang hidup di laut (fototrof) dan bakteri besi (Gallionella) termasuk bakteri psikrofil.
Apabila mikroba dihadapkan pada suhu tinggi diatas suhu maksimum, akan memberikan beberapa macam reaksi.
1. Titik kematian thermal, adalah suhu yang dapat memetikan spesies mikrobia dalam waktu 10 menit pada kondisi
tertentu.
2. Waktu kematian thermal, adalah waktu yang diperlukan untuk membunuh suatu spesies mikrobia pada suatu suhu
yang tetap. Faktor-faktor yang mempengaruhi titik kematian thermal ialah waktu, suhu, kelembaban, spora, umur
mikrobia, pH dan komposisi medium.
2. Suhu rendah
Apabila mikrobia dihadapkan pada suhu rendah dapat menyebabkan gangguan metabolisme. Skibat-akibatnya adalah :
1. Cold shock, adalah penurunan suhu yang tiba-tiba menyebabkan kematian bakteri, terutama pada bakteri muda
atau pada fase logaritmik,
2. Pembekuan (freezing), adalah rusaknya sel dengan adanya kristal es di dalam air intraseluler,
3. Lyofilisasi, adalah proses pendinginan dibawah titik beku dalam keadaan vakum secara bertingkat. Proses ini dapat
digunakan untuk mengawetkan mikrobia karena air protoplasma langsung diuapkan tanpa melalui fase cair
(sublimasi).
http://perpustakaancyber.blogspot.co.id/2012/11/pertumbuhanmikrobakurvalajulageksponensialstasionerbakteripengaruhkecepatan.html 13/16
2/14/2017 PertumbuhanMikroba,Kinetika,Perhitungan,Populasi,Kultur,Rumus,Fase,Metode,Faktor|PerpustakaanCyber
Setiap mikrobia memerlukan kandungan air bebas tertentu untuk hidupnya, biasanya diukur dengan parameter aw (water
activity) atau kelembaban relatif. Mikrobia umumnya dapat tumbuh pada aw 0,998-0,6. bakteri umumnya memerlukan
aw 0,90-0,999. Mikrobia yang osmotoleran dapat hidup pada aw terendah (0,6) misalnya khamir Saccharomyces rouxii.
Aspergillus glaucus dan jamur benang lain dapat tumbuh pada aw 0,8. Bakteri umumnya memerlukan aw atau
kelembaban tinggi lebih dari 0,98, tetapi bakteri halofil hanya memerlukan aw 0,75. Mikrobia yang tahan kekeringan
adalah yang dapat membentuk spora, konidia atau dapat membentuk kista.
c. Tekanan Osmosis
Tekanan osmosis sangat erat hubungannya dengan kandungan air. Apabila mikrobia diletakkan pada larutan hipertonis,
maka selnya akan mengalami plasmolisis, yaitu terkelupasnya membran sitoplasma dari dinding sel akibat mengkerutnya
sitoplasma. Apabila diletakkan pada larutan hipotonis, maka sel mikrobia akan mengalami plasmoptisa, yaitu pecahnya sel
karena cairan masuk ke dalam sel, sel membengkak dan akhirnya pecah. Berdasarkan tekanan osmosis yang diperlukan
mikrobia dapat dikelompokkan menjadi:
1. Mikrobia Osmofil : tumbuh pada kadar gula tinggi, contoh beberapa jenis khamir, mampu tumbuh pada larutan gula
dengan konsentrasi lebih dari 65 % wt/wt (aw = 0,94).
2. Mikrobia Halodurik : tahan (tidak mati) tetapi tidak dapat tumbuh pada kadar garam tinggi (30 %).
3. Mikrobia Halofil : dapat tumbuh pada kadar garam yang tinggi, contoh: bakteri yang termasuk Archaebacterium,
misalnya Halobacterium.
d. Buffer
Buffer merupakan campuran garam monobasik dan dibasik, contoh adalah buffer fosfat anorganik dapat mempertahankan
+
pH diatas 7,2. Cara kerja buffer adalah garam dibasik akan mengabsorbsi ion H dan garam monobasik akan bereaksi
dengan ionOH .
Untuk menumbuhkan mikrobia pada media, memerlukan pH yang konstan, terutama pada mikrobia yang dapat
menghasilkan asam oleh karena itu buffer diperlukan untuk mempertahankan pH pada kisaran tertentu yang diperlukan
untuk pertumbuhan mikroba.
e. Ion-ion lain
Logam berat seperti Hg, Ag, Cu, Au, dan Pb pada kadar rendah dapat bersifat meracuni (toksis) karena mempunyai daya
oligodinamik, yaitu daya bunuh logam berat pada kadar rendah. Ion-ion lain seperti ion sulfat, tartrat, klorida, nitrat, dan
benzoat dapat mengurangi pertumbuhan mikrobia tertentu dan sering digunakan dalam pengawetan makanan, senyawa
lain misalnya asam benzoat, asam asetat, dan asam sorbat.
f. Listrik
Bila aliran listrik diberikan pada medium tumbuh mikroba akan menyebabkan:
g. Radiasi
h. Tegangan Muka
1. Tegangan muka mempengaruhi cairan sehingga permukaan cairan tersebut menyerupai membran yang elastis.
2. Perubahan tegangan muka dinding sel akan mempengaruhi pula permukaan protoplasma, akibatnya mempengaruhi
pertumbuhan dan morfologi mikroba.
http://perpustakaancyber.blogspot.co.id/2012/11/pertumbuhanmikrobakurvalajulageksponensialstasionerbakteripengaruhkecepatan.html 14/16
2/14/2017 PertumbuhanMikroba,Kinetika,Perhitungan,Populasi,Kultur,Rumus,Fase,Metode,Faktor|PerpustakaanCyber
3. Zat-zat seperti sabun, deterjen, dan zat-zat pembasah (surfaktan) dapat mengurangi tegangan muka
cairan/larutan.
4. Umumnya mikroba cocok pada tegangan muka yang relatif tinggi
i. Tekanan Hidrostatik
1. Umumnya tekanan 1 400 atm tidak mempengaruhi atau hanya sedikit mempengaruhi metabolisme dan
pertumbuhan mikroba, tekanan hidrostatik yang lebih tinggi akan menghambat atau menghentikan pertumbuhan,
karena dapat menghambat sintesis RNA, DNA, dan protein, serta mengganggu fungsi transport membran sel
maupun mengurangi aktivitas berbagai macam enzim.
2
2. Tekanan diatas 100.000 pound/inchi menyebabkan denaturasi protein, tetapi ada mikrobia yang tahan hidup
pada tekanan tinggi (mikrobia barotoleran), dan yang tumbuh optimal pada tekanan tinggi sampai 16.000
2
pound/inchi (mikroba barofilik), umumnya mikroba laut adalah barofilik atau barotoleran, contoh: bakteri
Spirillum.
j. Getaran
Getaran mekanik dapat merusak dinding sel dan membran sel mikroba, dipakai untuk memperoleh ekstrak sel mikroba
dengan cara menggerus sel-sel dengan menggunakan abrasif atau dengan cara pembekuan kemudian dicairkan berulang
kali atau dengan getaran suara 100-10.000 kali/detik juga dapat digunakan untuk memecah sel mikroba.
Daftar Pustaka :
Adams, M.R. 2000. Food Microbiology. University of Surrey. Guildford. New York
Buckle,K.A., J.A. Davey, M.J. Eyles, A.D. Hocking, K.G. Newton, and E.J. Stuttard. 1989. Foodborne Microorganisms of
Public Health Significance. 4ed.. AIFST (NSW Branch).Australia.
Budiyanto, MAK. 2005. Mikrobiologi Umum. Malang: Universitas Muhammadiyah Malang Press.
Madigan, M. T., Martinko, J. M., Stahl, D. A., and Clark, D. P., 2013, Brock Biology of Microorganisms Thirteenth Edition,
Share ke:
12 5
Artikel Terkait Pertumbuhan Mikroba, Kinetika, Perhitungan, Populasi, Kultur, Rumus, Fase, Metode, Faktor :
Pertumbuhan Mikroba, Kinetika, Perhitungan, Populasi, Kultur, Rumus, Fase, Metode, Faktor
Artikel dan Makalah tentang Pertumbuhan Mikroba, Kinetika, Perhitungan, Populasi, Kultur, Rumus, Fase, Metode, Faktor - Pertumbu
...
http://perpustakaancyber.blogspot.co.id/2012/11/pertumbuhanmikrobakurvalajulageksponensialstasionerbakteripengaruhkecepatan.html 15/16
2/14/2017 PertumbuhanMikroba,Kinetika,Perhitungan,Populasi,Kultur,Rumus,Fase,Metode,Faktor|PerpustakaanCyber
1 komentar:
Siti Aisah
maaf, sekalian sama contoh mengerjakan soal nya seharusnya :D
Reply
Enteryourcomment...
Publish Preview Notifyme
Berkomentarlah secara bijak. Komentar yang tidak sesuai materi akan dianggap sebagai SPAM dan akan dihapus.
Aturan Berkomentar :
1. Gunakan nama anda (jangan anonymous), jika ingin berinteraksi dengan pengelola blog ini.
2. Jangan meninggalkan link yang tidak ada kaitannya dengan materi artikel.
Terima kasih.
Supported by : Barisan dan Deret | Matriks | Statistik | Alat Optik | Mean Median Modus | Gymnospermae | Simpangan Baku |
Integral | Angiospermae | Perubahan Sosial | Porifera | Hukum Newton | Fotosintesis | Usaha dan Energi | Rantai Makanan |
Fluida | Konflik Sosial | Tumbuhan Lumut | Limit Fungsi | Lembaga Sosial Masyarakat | Termodinamika | Filum Cnidaria |
Interaksi Sosial
http://perpustakaancyber.blogspot.co.id/2012/11/pertumbuhanmikrobakurvalajulageksponensialstasionerbakteripengaruhkecepatan.html 16/16