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TECNOLOGA DE BIOREMEDIACIN
Avances recientes
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TECNOLOGA DE BIOREMEDIACIN
Avances recientes
Editado por
MH Fulekar
Departamento de Ciencias de la Vida
Universidad de Mumbai, India
Pgina 5
Un registro de catlogo de CIP para este libro est disponible en la
Biblioteca del Congreso.
ISBN 978-90-481-3677-3 (HB)
ISBN 978-90-481-3678-0 (e-book)
Copublicado por Springer,
PO Box 17, 3300 AA Dordrecht, Pases Bajos
Con Capital Publishing Company, Nueva Delhi, India.
Vendido y distribuido en Amrica del Norte, Central y del Sur por
Springer,
233 Spring Street, Nueva York 10013, Estados Unidos.
En todos los dems pases, excepto la India, vendidos y distribuidos por
Springer,
Haberstrasse 7, D-69126 Heidelberg, Alemania.
En la India, vendida y distribuida por Capital Publishing Company,
7/28, calle Mahaveer, camino Ansari, Daryaganj, Nueva Delhi, 110 002,
India.
Www.springer.com
Fotos de la portada de crdito: Las fotografas tomadas por el editor
durante los estudios de investigacin.
Top - Canal de efluentes emitidos por el cinturn industrial (Chembur,
Mumbai, India).
Bottom - Planta de tratamiento de efluentes industriales (Ratnagiri,
Maharashtra, India).
Impreso en papel sin cido
Todos los derechos reservados
2010 Capital Publishing Company
Ninguna parte de este trabajo puede ser reproducida, almacenada en un
sistema de recuperacin o transmitida
En cualquier forma o por cualquier medio, electrnico, mecnico,
fotocopiado, microfilmado,
Graba o de otra manera, sin el permiso escrito del Editor, con el
Excepcin de cualquier material suministrado especficamente para la
Y ejecutados en un sistema informtico, para uso exclusivo del
comprador del
trabajo.
Impreso en la India.
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Dedico este libro a mi madre
POWARA
Para la inspiracin, motivacin y bendiciones
Pgina 7
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Prefacio
La sociedad global en siglo 21 se enfrenta al reto de mejorar la calidad de
ambiente. Los contaminantes ambientales se han convertido en una
preocupacin mundial
Rpido crecimiento de la industrializacin, urbanizacin, desarrollo
agrcola moderno
Y generacin de energa. Esto dio lugar a la explotacin indiscriminada
de
Recursos humanos para satisfacer los deseos y necesidades humanas,
que han
Perturbar el equilibrio ecolgico en el que la calidad de nuestro medio
ambiente
Depende. Los seres humanos en el sentido verdadero son el producto de
su ambiente.
La relacin hombre-ambiente indica que la contaminacin tiene un
origen social. los
Modernos avances tecnolgicos en procesos qumicos han dado lugar a
Nuevos productos y nuevos contaminantes en niveles mucho ms
abundantes que
Las capacidades de auto-limpieza del medio ambiente. Uno de los
principales problemas
Veces es la amenaza a la vida humana causada por el deterioro
progresivo
del medio ambiente. La contaminacin de las aguas subterrneas,
superficiales,
Y el aire con productos qumicos peligrosos y txicos es uno de los
principales problemas
El mundo industrializado se enfrenta hoy. En cuanto a la solucin a este
problema es
Que existe una necesidad urgente de desarrollar tecnologas que
consuman menos
Menos tiempo y sera respetuoso con el medio ambiente. Por lo tanto,
Los enfoques recibieron gran atencin en los ltimos aos. Uno entre los
Mtodos biolgicos eficaces para tratar la contaminacin ambiental
Es la biorremediacin. La biorremediacin es una alternativa atractiva y
potencial
Para el tratamiento del medio ambiente contaminado. La
Biorremediacin ha sido probada
Eficaz para tratar la contaminacin del suelo y del agua en numerosos
sitios
Mundial, y es aceptada como una tecnologa de remediacin viable por
parte de
Agencia de Proteccin Ambiental de los Estados Unidos, Environment
Canada, y otros
Agencias reguladoras de todo el mundo. Alrededor de las tecnologas
mundiales de biorremediacin
Se clasifican como las "tecnologas innovadoras".
Este libro discute la remediacin basada en la tecnologa de
biorremediacin
Microorganismos modificados genticamente para restaurar los sitios
contaminados y
el entorno. Se estudian las oportunidades para
Procesos en biologa molecular y ecologa. Logros notables de estos
Vii
Pgina 9
Prefacio viii
Los estudios incluyen la limpieza de aguas contaminadas y tierras
contaminadas. los
Identifica las tcnicas de biorremediacin distintas de los mtodos
tradicionales
De tratamiento de residuos tales como incineracin, tcnicas
absorbentes / adsorbentes,
La disrupcin cataltica y la destruccin de contaminantes, etc.
Microorganismos de detalle que atacan enzimticamente los
contaminantes y
Productos inofensivos. Analiza las vas biodegradables y
Manipulaciones de biotransformacin a travs de cepas plasmdicas de
microorganismos,
Empleando tecnologa de ADN recombinante. El libro incluye trabajos
invitados
Por eminentes contribuyentes que proporcionan estrategias rentables de
biorremediacin
Para inmovilizar los contaminantes para la limpieza del medio ambiente.
La tecnologa de biorremediacin resume la Introduccin a la
Biorremediacin;
Tcnicas de biodegradacin para el tratamiento de plaguicidas;
Remediacin de bajo nivel
desperdicios nucleares; Nanotecnologa ambiental para la remediacin
de contaminantes;
Ligninas y polifenoles en biorremediacin; Biosorcin en el medio
ambiente
Remediacin y ingeniera gentica. Tambin describe la aplicacin para
Remediacin de contaminantes ambientales; Microorganismos y genes
en
el entorno; Ecologa del consorcio microbiano para la biodegradacin;
Global
Estado de la contaminacin ambiental; Mejorar las plantas para el
adquisitismo de
rieles; Bioingeniera para biorremediacin; Biorremediacin de
hidrocarburos
en el ambiente; Bioacumulacin y biotransformacin de metales
pesados;
Enfoques genmicos para la biorremediacin y la tecnologa del ADN
recombinante
Para biorremediacin. El libro est dirigido a estudiantes de postgrado
en
Biotecnologa / ciencias de la vida / ciencias ambientales / biosciencias e
investigadores
En universidades, institutos de investigacin e industrias.
Expreso mi gratitud al Honorable Vicecanciller, Prof. Vijay Khole,
Universidad de Mumbai y Pro-Vicecanciller, el Prof. AD Sawant por
proporcionar
Las facilidades necesarias y el estmulo para compilar este volumen.
Me gustara reconocer a los miembros de mi familia con amor y cario
En particular mi esposa Dr. Kalpana, los nios Jaya, Jyoti y Vinay y
Hermanos Sacchidanand, Dilip y Pawan.
El apoyo tcnico y el estmulo constante recibido de mi doctorado
Estudiantes del Laboratorio de Biotecnologa Ambiental de la
Universidad
Mumbai se reconocen con agradecimiento.
Creo firmemente que la finalizacin exitosa de este manuscrito es
Posible gracias a las bendiciones del "Dios Todopoderoso".
MH Fulekar
Profesor, Biotecnologa Ambiental
Departamento Universitario de Ciencias de la Vida
Universidad de Mumbai
Pgina 10
Colaboradores
Alina Petronela Stingu
"Gheorghe Asachi" Tcnico
Universidad de Iasi
Facultad de Ingeniera Qumica
Y Proteccin Ambiental Blvd.
Mangeron, No 71, Iasi - 700 050
Rumania
Anamika Singh
Biotecnologa Ambiental
Laboratorio, Departamento de Vida
Ciencias, Universidad de Mumbai
Mumbai - 400 098, India
Asha A. Juwarkar
Director Adjunto y Jefe
Biotecnologa Ambiental
Divisin Nacional de
Instituto de Investigacin en Ingeniera
Nehru Marg, Nagpur - 440 020
India
Dilip S. Ramteke
Director Adjunto de Medio Ambiente
Divisin de Evaluacin de Impacto
Nacional de Medio Ambiente &
Instituto de Investigacin en Ingeniera
Nagpur - 440 020, India
EA El-Sheikh
Departamento de Proteccin Fitosanitaria
Facultad de Agricultura, Zagazig
Universidad 44511, Egipto
Gayatri Baul
Departamento de Marina
Biotecnologa, Materiales Navales
Laboratorio de Investigacin, Shil-Badlapur
Road, Ambernath - 421 506, India
Irina Volf
"Gheorghe Asachi" Tcnico
Universidad de Iasi, Facultad de
Ingeniera Qumica y
Proteccin Ambiental Blvd.
Mangeron, No 71, Iasi - 700 050
Rumania
MB.A. Ashour
Departamento de Proteccin Fitosanitaria
Facultad de Agricultura, Zagazig
Universidad 44511, Egipto
MH Fulekar
Profesor de
Biotecnologa, Departamento de Vida
Ciencias, Universidad de Mumbai
Santacruz (E), Mumbai - 400 098
India
Ix
Pgina 11
Maria Gavrilescu
"Gheorghe Asachi" Tcnico
Universidad de Iasi, Facultad de
Ingeniera Qumica y
Proteccin del medio ambiente
Departamento de Medio Ambiente
Ingeniera y Gestin
71 Mangeron Blvd., 700 050
Iasi, Rumania
Prachy Dixit
Biotecnologa Vegetal y Secundaria
Productos, Nuclear
Agricultura y Biotecnologa
Divisin, Bhabha Atomic Research
Center, Mumbai - 400 085, India
Pradeep Kumar
Cientfico 'F'
Jefe de Biotecnologa Marina
Departamento de Marina
Biotecnologa, Materiales Navales
Laboratorio de Investigacin, Shil-Badlapur
Carretera, Ambernath 421 506, India
Santosh K. Yadav
Biotecnologa Ambiental
Divisin Nacional de
Instituto de Investigacin en Ingeniera
Nehru Marg, Nagpur - 440 020, India
Soniya Dhanjal
Instituto de Tecnologa Microbiana
(IMTECH), Sector 39A
Chandigarh - 160 036, India
Susan Eapen
Oficial de la Ciencia, SO / H +
Jefe de Seccin de Agricultura Nuclear
Divisin de Biotecnologa, Bhabha
Centro de Investigacin Atmica, Trombay
Mumbai - 400 085, India
Swaranjit Singh Cameotra
Instituto de Tecnologa Microbiana
MTCC y Banco de Genes, Sector 39-A
Chandigarh - 160 036, India
T. Chakrabarti
Director Nacional de Medio Ambiente
Instituto de Investigacin en Ingeniera
(NEERI), Nehru Marg
Nagpur - 440 020, India
TK Ghosh
Biotecnologa Ambiental
Divisin Nacional de
Instituto de Investigacin en Ingeniera
Nagpur - 440 020, India
VV Lakshmi
Profesor y jefe
Departamento de Aplicacin
Microbiologa, Sri Padmavati Mahila
Visva Vidyalayam (Mujer
Universidad), Tirupati - 517 502, India
Valentin I. Popa
"Gheorghe Asachi" Tcnico
Universidad de Iasi, Facultad de
Ingeniera Qumica y
Proteccin del medio ambiente
Bulevar. Mangeron, n 71
Iasi - 700 050, Rumania
x Colaboradores
Pgina 12
Contenido
Prefacio
Vii
Colaboradores
Ix
1. Situacin mundial de la contaminacin ambiental y su remediacin
Estrategias
1
MH Fulekar
2. Biorremediacin de Sitios Contaminados por Xenobiticos: Concepto
Y estudios de casos seleccionados
7
T. Chakrabarti y TK Ghosh
3. Biosorcin en la remediacin ambiental
35
Maria Gavrilescu
4. Ligninas y polifenoles en la biorremediacin
100
Valentn I. Popa, Alina Petronela Stingu e Irina Volf
5. Tecnologa de Biorremediacin para Residuos Peligrosos -
Avances recientes
135
MH Fulekar
6. Tecnologa de biodegradacin para la eliminacin de la toxicidad de
los plaguicidas 167
EA El-Sheikh y MB.A. Ashour
7. Enfoque Genmico de la Biorremediacin
206
VV Lakshmi
8. Tecnologa de ADN Recombinante para la Biorremediacin de
Contaminantes 245
Pradeep Kumar y Gayatri Baul
9. Bioacumulacin y biotransformacin de metales pesados
266
Asha A. Juwarkar y Santosh K. Yadav
10. Recuperacin y Remediacin de Residuos Slidos
Proceso bioqumico
285
DS Ramteke
Xi
Pgina 13
11. Fitorremediacin de residuos nucleares de bajo nivel
315
MH Fulekar y Anamika Singh
12. Mejorar las plantas para la adquisicin de zinc
337
Prachy Dixit y Susan Eapen
13. Nanotecnologa Ambiental: Nanopartculas para
Biorremediacin de Contaminantes Txicos
348
Swaranjit Singh Cameotra y Soniya Dhanjal
ndice
375
Contenido xii
Pgina 14
Estado Mundial de la Contaminacin Ambiental y sus estrategias de
remediacin 1
1
Estado Global de
Contaminacin Ambiental y
Sus Estrategias de Remediacin
MH Fulekar
1.1 Introduccin
La contaminacin ambiental se ha convertido en una de las principales
preocupaciones
Crecimiento de la industrializacin, urbanizacin y desarrollo agrcola
moderno.
La generacin de energa que ha explotado los recursos naturales para
el
Deseos y necesidades, se tradujo en una perturbacin del equilibrio
ecolgico
Calidad del medio ambiente. Innovaciones tecnolgicas y avances
Productos y procesos en las industrias han dado lugar a nuevos
productos y
Contaminantes nuevos en abundante nivel que estn por encima de la
capacidad de
el entorno. Es la revolucin industrial la que dio origen a
contaminacin. La contaminacin es la introduccin de contaminantes
en un ambiente que
Causa inestabilidad, desorden, dao e incomodidad al ecosistema, es
decir, fsica
Sistemas o organismos vivos. La contaminacin se ha convertido en un
tema popular despus de
Segunda Guerra Mundial, cuando las secuelas de la guerra atmica y las
pruebas pusieron de manifiesto los peligros
De contaminantes radiactivos. Luego un evento catastrfico
convencional, el smog
De 1952 en Londres mat al menos a 8000 personas. Este evento
masivo promovido
Algunas de las primeras grandes leyes medioambientales modernas
como la ley de aire limpio
De 1956. La contaminacin comenz a llamar la atencin pblica
principal en los Estados Unidos
Entre mediados de la dcada de 1950 y principios de 1970 cuando el
Congreso pas el ruido
El acto de control de la contaminacin, el acto sobre el aire limpio, la ley
sobre el agua
poltica. Las fuentes de contaminacin ambiental incluyen: plantas
qumicas, carbn
Centrales elctricas, refineras de petrleo (Beychook, 1967), plantas
petroqumicas,
Actividades de eliminacin de desechos, incineradores, granjas de lneas
grandes, fbricas de PVC,
Fbricas de produccin de metales, fbricas de plsticos, muchas
industrias y pulverizacin de
MH Fulekar (ed.),
DOI 10.1007 / 978-90-481-3678-0_1, Capital Publishing Company
2010
La tecnologa de biorremediacin: Avances recientes,
1
Pgina 15
2 MH Fulekar
Pesticidas. Se generan cerca de 400 millones de toneladas mtricas de
desechos peligrosos
Cada ao, de los cuales slo Estados Unidos produce cerca de 250
millones de
toneladas metricas. Los estadounidenses constituyen menos del 5% de
la poblacin mundial,
Pero producen aproximadamente el 25% de las emisiones de CO
2
Y generar aproximadamente el 30%
De los residuos del mundo.
1.2 Eliminacin de desechos
Los residuos incluyen notablemente los residuos slidos urbanos, la
construccin y la demolicin
Residuos industriales, residuos industriales, residuos industriales,
Residuos, residuos radiactivos, residuos electrnicos y residuos
biodegradables. Residuos
Est directamente vinculado al desarrollo humano, tanto tecnolgico
como social.
La composicin de los diferentes residuos ha variado en el tiempo y en
la ubicacin directamente
Relacionados con los materiales de desecho. Los desechos son
materiales que no son productos
Que el generador no tiene ms uso en trminos de transformacin de
produccin o
Consumo, y por lo tanto necesitan ser eliminados. Los desechos pueden
ser generados
Durante la extraccin de materias primas, la transformacin de materias
primas
Intermedios y productos finales, el consumo de productos finales y otros
actividades humanas. La eliminacin de residuos en la tierra causa
contaminantes del suelo
ambiente.
1.3 Contaminacin del agua
La contaminacin del agua es un problema mundial importante debido a
la disposicin de los residuos en el agua del suelo
ambiente. Se ha sugerido que es la principal causa mundial de
Muertes y enfermedades y que explica la muerte de ms de 14.000
personas
diariamente. Se estima que 700 millones de indios no tienen acceso a un
bao adecuado, y
1000 nios indios mueren diariamente debido a enfermedades
diarreicas. Alrededor del 90% de
Las ciudades de China sufren de grado de contaminacin del agua
(Chinadaily.com.cn), y
Casi 500 millones de personas carecen de acceso a agua potable.
Adems de
Los problemas agudos de la contaminacin del agua en los pases en
desarrollo,
Los pases continan luchando con problemas de contaminacin
tambin. En la ms
Reciente sobre la calidad del agua en los Estados Unidos, el 45% de los
Millas del arroyo, el 47% de los acres de lago evaluados, y el 32% de la
baha evaluada y el estuario
Millas cuadradas fueron clasificados como contaminados.
La contaminacin del agua es la contaminacin de cuerpos de agua
como lagos, ros,
Ocanos y aguas subterrneas. Toda la contaminacin del agua afecta a
organismos y plantas que
Viven en estos cuerpos de agua y en casi todos los casos el efecto daa
no
Slo a especies y poblaciones individuales, sino tambin a las especies
biolgicas naturales.
Comunidades. Ocurre cuando los contaminantes son descargados
directa o indirectamente
En cuerpos de agua sin tratamiento adecuado.
Pgina 16
Estado Mundial de la Contaminacin Ambiental y sus estrategias de
remediacin 3
1.4 Enfoques Biotecnolgicos
La actual tecnologa de tratamiento con propiedades fisicoqumicas y
biolgicas
Mtodos no son eficientes y / o eficaces para tratar los contaminantes
como aceptables
nivel. Hoy en da, la biotecnologa est siendo considerada como una
proteccin del medio ambiente. La tecnologa implica el uso de
microorganismos
Para el tratamiento biolgico de los contaminantes del aire, del agua y
del suelo. Biotecnolgico
El tratamiento se lleva a cabo a una temperatura y presin ms bajas
que requieren menos
Energa que la tecnologa convencional de tratamiento fsico-qumico. los
Las industrias que generan desechos peligrosos han encontrado
medidas
La tendencia emergente del tratamiento biotecnolgico. Innovaciones
biotecnolgicas
Para el tratamiento de residuos peligrosos bajo condiciones ambientales
controladas
Se han encontrado medios rentables de reducir el potencial de
contaminacin
Las aguas residuales, lo que conduce a una mayor aceptacin y
Legislacin medioambiental (Fulekar, 2009). La contaminacin
ambiental,
El suelo contaminado o el agua superficial / subterrnea puede
resolverse mediante biorremediacin y /
O fitorremediacin mediante el uso de organismos vivos biolgicos y
plantas verdes.
1.5 Tecnologa de Biorremediacin
La tecnologa de biorremediacin utiliza microorganismos para reducir,
eliminar o
Transformar contaminantes presentes en suelos, sedimentos o agua.
Biorremediacin
Depende de la presencia de microorganismos especficos en las
cantidades correctas y
Combinacin y en las condiciones ambientales apropiadas.
Microorganismos
Que ya viven en ambientes contaminados suelen estar bien adaptados
para sobrevivir
En presencia de los contaminantes existentes ya la temperatura, pH y
Potencial de oxidacin / reduccin del sitio. Estos microbios indgenas
tienden a
Utilizar los nutrientes y aceptores de electrones que estn disponibles,
siempre que el lquido
El agua est presente. El agua tambin acta como un vehculo para
transportar ambos microorganismos
Y sustancias disueltas incluyendo contaminantes y sus productos de
descomposicin.
El proceso de biorremediacin implica biotransformacin y
biodegradacin
Transformando los contaminantes en productos qumicos no peligrosos o
menos peligrosos.
A menudo, los microorganismos metabolizan los productos qumicos
para producir dixido de carbono
O metano, agua y biomasa. La biotransformacin es cualquier alteracin
de la
Molcula o estructura de un compuesto por microorganismos. La
biodegradacin es
La degradacin de la bioactividad orgnica o biotransformacin de
Compuestos inorgnicos en compuestos amigables con el medio
ambiente.
1.6 Fitorremediacin
El trmino fitorremediacin es una combinacin de las palabras fito
planta significado
y remediacin que significa remedio. La fitorremediacin es el uso de
plantas
Capacidad natural de contener, degradar o eliminar sustancias qumicas
txicas y contaminantes
Del suelo o del agua. La fitorremediacin describe varios mecanismos
mediante los cuales
Pgina 17
4 MH Fulekar
Plantas vivas alteran las composiciones qumicas de la matriz del suelo
en las que
creciente. Puede usarse para limpiar metales, pesticidas, disolventes,
explosivos,
Petrleo crudo y otros contaminantes. Las plantas se utilizan a menudo
en combinacin
Con otras tcnicas tradicionales. Las interacciones entre las plantas y
Microorganismos que viven en el suelo tambin pueden contribuir a la
fitorremediacin,
A menudo llamado biorremediacin de rizosfera. La fitorremediacin se
aprovecha de
La capacidad natural de una planta para absorber, acumular o
metabolizar ciertos
Productos qumicos y metales. Cuando las plantas han absorbido y
acumulado
Pueden ser cosechados y desechados. La incineracin es la
Mtodo comn utilizado para eliminar las plantas que han absorbido o
Cantidades de contaminantes. Este proceso produce cenizas, que
pueden ser
Desechos en sitios apropiados de eliminacin de desechos.
1.7 Enfoque de ingeniera gentica-
Biorremediacin / Fitorremediacin
Los cientficos estn estudiando actualmente ciertos microorganismos
genticamente modificados,
Organismos para aumentar su capacidad de metabolizar sustancias
qumicas
Hidrocarburos y plaguicidas. Las posibilidades de utilizar la ingeniera
gentica para
La mejora del proceso de biorremediacin tuvo un impulso temprano a
finales de los aos ochenta.
Las tcnicas de ADN recombinante han sido estudiadas intensivamente
para
Degradacin de desechos peligrosos en condiciones de laboratorio. Los
genticamente
Microorganismos de ingeniera tienen mayor capacidad degradativa y
han sido
Demostrado con xito la degradacin de diversos contaminantes bajo
Definidas. La tecnologa de modificacin gentica ha resultado
En una amplia variedad de aplicaciones actuales y potenciales para uso
en el proceso
De biorremediacin. Bioremediacin explora la diversidad gentica y el
metabolismo
Versatilidad de microorganismos. La arquitectura gentica de estos
organismos
Biodegradacin, biotransformacin, biosorcin y
Bioacumulacin. La impresin azul necesaria de los genes que codifican
para la biodegradacin
Enzimas est presente en el ADN cromosmico y extracromosmico de
tales
Microbios Las tcnicas de ADN recombinante facilitan la evolucin de la
capacidad de un
Organismo para metabolizar un xenobitico mediante la deteccin de
tales genes degradativos y
Transformndolos en un husped adecuado por medio de un vector
adecuado bajo el estrecho
Control de promotores apropiados. Depende de la susceptibilidad a la
alteracin y
Intercambio de informacin gentica. La tecnologa del ADN
recombinante explora
PCR, tcnica de ARN antisentido, mutagnesis dirigida al sitio,
electroporacin
Y tcnicas de bombardeo de partculas. La biotecnologa armada con
La tecnologa de ADN recombinante ahora est ajustando la tecnologa
de biorremediacin
Mejorando los microbios degradantes de contaminantes mediante la
mejora de las
Modificacin gentica de genes reguladores y metablicos especficos
que son cruciales
En el desarrollo de tcnicas eficaces, seguras y econmicas para la
biorremediacin.
Pgina 18
Estado Mundial de la Contaminacin Ambiental y su remediacin
Estrategias 5
Los avances recientes implican el examen de los mecanismos de
extraccin
Transporte de metales en plantas y cuando algunas plantas pueden
absorber y tolerar
Cantidades de metales txicos, mientras que otros no. Se sospecha de
muchos genes diferentes
Para participar en la regulacin de la absorcin de metales en las
plantas. Los genes controlan la
Solubilidad de metales en el suelo que rodea las races, as como el
transporte
Protenas que mueven los metales en las clulas de las races y hasta en
el brote de la planta. Investigadores
Han identificado genes y genes clonados para desarrollar plantas
modificadas genticamente
Para tolerar la contaminacin del metal. En algunos casos, las plantas
estn siendo
Modificado con genes bacterianos. Mejora del conocimiento de los
genes,
Mecanismos y papeles que juegan los microorganismos en la
fitorremediacin
Permite a los cientficos aplicar plantas para descontaminar el medio
ambiente. Plantas
Tienen la capacidad innata de remediar contaminantes peligrosos de
Medio ambiente (biorremediacin), pero la tasa de biorremediacin es
directamente
Proporcional a la tasa de crecimiento de la planta y la cantidad total de
biorremediacin es
Correlacionada con la biomasa total de una planta, haciendo el proceso
muy lento. Esta
Requiere la identificacin de un cultivo de rpido crecimiento (mayor
biomasa
Mayores respuestas de nutrientes) y genotipos que acumulan ms
metal.
El enfoque de ingeniera gentica ha facilitado con xito la modificacin
de la
Funciones de las plantas mediante la modificacin del metabolismo
primario y secundario
Aadiendo nuevos caracteres fenotpicos y genotpicos a las plantas con
el objetivo de
Comprender y mejorar la fitorremediacin.
1.8 Nanotecnologa Ambiental
La nanotecnologa ambiental sera la nueva innovacin para remediar
Y tratar los contaminantes a los niveles aceptables. Cientficos del medio
ambiente
Y los tecnlogos ya estn trabajando con la estructura a nanoescala para
manipular
La cuestin de la escala atmica o molecular que ha eliminado la
eliminacin
Qumica, fsica, biologa e incluso ingeniera. Un reto importante en
Nanotecnologa es disear partculas con pticas pticas y electrnicas
Propiedades controlando su tamao y forma. La nanotecnologa implica
la
Diseo, caracterizacin, produccin y aplicacin de estructuras /
partculas por
Controlando su tamao y forma a nanoescala. El desgaste natural de los
metales,
xidos de hierro y silicato y microorganismos tales como bacterias y
algas
Producen nano celuloides, que incluyen dispersiones de partculas de
tamao nano
En medios con propiedades especiales que pueden ser importantes en el
destino, el transporte,
Transformacin y biodisponibilidad de sustancias nocivas para el medio
ambiente.
Recientemente, el emergente campo de la nanotecnologa tambin ha
Contaminantes del suelo y del agua en el medio ambiente
Compuestos amigables. La nanotecnologa ofrece una gran promesa
para la
Y tecnologas ambientales mejoradas.
Pgina 19
6 MH Fulekar
Referencias
Beychok, Milton R. (1967). Residuos acuosos de plantas de petrleo y
petroqumicos.
1 edicin. John Wiley & Sons. LCCN 67019834.
YO
multicapa
adsorcin
inflexin
punto
No totales
capacidad"
equivalente
Dubinnin-
Radushkevich
2
0
exp
(
)
W
k
W
adsorbido volumen
MI
ee
YO
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-A ~b
YO
YO
Temperatura
independiente
Sin lmite
en el comportamiento
Ley de Henry
LTIMO: Ideal
Adsorbido
Solucin
Teora
0
1
yo
T
yo
Y
Q
Q
=
SMC: Superficie
acomplejamiento
Modelo
qf ( C
mi
)
pgina 52
Biosorcin en la remediacin ambiental 39
145, respectivamente, cuando biosorcin fue probada usando grnulos
de micelio de
Penicillium oxalicum como biosorbente (Zhang et al., 2003).
Deng et al. (2008) utiliz Penicillium chrysogenum como materias
primas
para preparar el adsorbente aminado para el pentaclorofenol (PCP) y
2,4-
cido diclorofenoxiactico (2,4-D) de sorcin de la solucin acuosa. los
capacidad mxima de absorcin indicadas eran 1,23 mmol / g para PCP
y 1,22
mmol / g de 2,4-D.
3.3 Modelado Cintico
La cintica de sorcin describe la tasa de captacin de contaminantes en
el sorbente,
que controla el tiempo de equilibrio. Los parmetros cinticos son tiles
para el
la prediccin de la tasa de absorcin, que proporciona informacin
importante para el diseo
y modelar los procesos (Hameed et al., 2008).
Los diferentes tipos de modelos cinticos incluyendo (pseudo) orden
-primero, (pseudo) -
de segundo orden y de difusin entre partculas se utilizaron para
investigar el mecanismo
de biosorcin y potenciales de control de velocidad etapas tales como el
transporte de masa y
procesos de reaccin qumica (Yurtsever y Sengil, 2009).
La ecuacin de velocidad de primer orden de la Lagergren se da como
(Ho y McKay,
1999c; Arica et al., 2001; Cheung et al, 2001) (Eq 1)..:
(
) ()
1
Iniciar sesin
Iniciar sesin
2,303
mi
T
mi
k
Q
Q
Q
T
-
=
-
(1)
donde q
mi
yq
T
son las cantidades de cadmio adsorbida (II) iones en la biosorbente
en el equilibrio y en el momento t (respectivamente mg / g) y k
1
es el primer orden
constante de velocidad de bioabsorcin (min -1 ). Los parmetros
cinticos se pueden determinar
grficamente (Fig. 3.1).
Tabla 3.2: modelos de isotermas de equilibrio propuestas en forma
lineal
modelos
Ecuacin
Ecuacin lineal
Referencias
Langmuir
Mximo
1
do
mi
mi
do
mi
Q
KC
Q
KC
=
+
do
Q
Q
K
do
Q
mi
mi
do
mi
=
+
1
Mximo
Mximo
Malkoc y
Nuhoglu (2005),
Aksu (2002)
Freundlich
norte
mi
F
mi
Q
KC
=
1
En
En
En
mi
mi
F
Q
do
K
norte
=
+
Arica et
Alabama. (2001),
Koumanova et
Alabama. (2002)
Redlich-
Peterson
1
rp
mi
mi
do
mi
KC
Q
un C
segundo
=
+
()
(
)
En
1
En
En
0
1
mi
rp
mi
R
do
K
Q
do
un
MI
-=b
UN
~
MI
+
b <b <
Para = 1, la ecuacin conversos
a la forma Langmuir
Dursun (2006)
pgina 53
40 Maria Gavrilescu
La ecuacin de pseudo-segundo orden tambin se basa en la capacidad
de sorcin
de la fase slida y se da como (Hamadi et al, 2001;. Arica et al., 2001;
. Levankumar et al, 2009) (Eq 2).:
2
2
2
1
1
T
do
mi
T
T
Q
kq
Q
=
+
(2)
donde k
2
es la constante de velocidad de bioabsorcin de segundo orden (g / mg
min), q
mi
es el
capacidad de biosorcin calculado por el modelo cintico pseudo-
segundo orden
(Mg / g).
Si se considera la siguiente relacin (Ec. 3):
h=k
2
q 2e
(3)
donde h es la velocidad de absorcin inicial en mg / g min, los valores de
k
2
y h son
determinada a partir de la interseccin de segundo orden Eq. (2) a partir
de grfico mostrado en la
Higo. 3,2 (Levankumar et al., 2009).
La ecuacin que define el modelo Elovich se basa en un principio
cintico
suponiendo que los sitios de adsorcin aumentan exponencialmente con
la adsorcin, que
implica una adsorcin multicapa (Yurtsever y Sengil, 2009). La forma
lineal
de la ecuacin Elovich est dada por (Elovich y Larinov, 1962) (Ec. 4):
()
1
1
En
En
tq
T
=
AB +
segundo
segundo
(4)
Higo. 3.1: cintica de pseudo-primer orden de vehculos motorizados de
Ocimum americanum vainas de semillas de L.
para diferentes concentraciones iniciales de pH ptimo 1,5 (Levankumar
et al., 2009).
pgina 54
Biosorcin en la remediacin ambiental 41
donde y , conocido como los coeficientes Elovich, representan la
sorcin inicial
tasa (mg g -1 min -1 ) y se relaciona con el grado de cobertura de la
superficie y la activacin
energa para quimisorcin (gmg -1 ), respectivamente. Los coeficientes
Elovich poda
se calcula a partir de las tramas de q
T
frente a ln t .
El montaje de los anteriores cuatro modelos a los datos experimentales
se examin
por cada parcela lineal de q
T
frente a t 1/2 , ln ( q
mi
-q
T
) Versus t , ( t / q
T
) Versus t , y q
T
frente a ln t , respectivamente.
El modelo de difusin entre partculas puede ser descrito como (Weber y
Morris,
1962; Yurtsever y Sengil, 2009) (ecuacin 5).:
Q
T
=k
int
t 1/2
(5)
donde k
int
es la velocidad de difusin intrapartculas constante y q
T
es la cantidad de
tinte adsorbido (mg g -1 ) en el tiempo ( t ). Los valores de k
int
(mg g -1 h 1/2 ) se puede calcular
partir de la pendiente de los grficos lineales de q
T
frente a t 1/2 . En un sistema lquido-slido, la
absorcin fraccional del soluto sobre la partcula vara segn una funcin
de
difusividad dentro de la partcula y el radio de partcula (Yurtsever y
Sengil,
2009).
Cuando el biosorbente se trata como un material poroso en una solucin
acuosa, la
proceso de difusin puede afectar el proceso de biosorcin (Weber,
1985). Por lo tanto
la ecuacin de difusin entre partculas se introdujo para indicar el
comportamiento de
difusin intrapartculas como el paso limitante en la biosorcin (Sharma
y
Foster, 1994). La ecuacin se da como (Ec. 6):
R=K
S
tb
(6)
Higo. 3.2: cintica de pseudo-segundo orden de potencia Ocimum
americanum vainas de la semilla de L.
para diferentes concentraciones iniciales de pH ptimo 1,5 (Levankumar
et al., 2009).
pgina 55
42 Maria Gavrilescu
Tabla 3.3: modelos cinticos aplicados para la descripcin de la
captacin de contaminantes en sorbentes
(Apostol y Gavrilescu, 2009)
modelo cintico
Ecuacin
caractersticas
El pseudo-primer
orden
ln ( q e - q t ) = ln q e - k 1 t
(7)
q e y q t (mg / g) son el
cantidades de adsorbida adsorbato
en el equilibrio y en cualquier momento,
t (h), respectivamente, y k 1 es la
constante de velocidad de adsorcin
el pseudo
segundo orden
dq / dt = k 2 ( q e - q ) 2
(8)
k 2 (g / mg h) es la constante
de la velocidad de segundo orden
adsorcin. El segundo orden
constantes de velocidad se utilizaron para
calcular la sorcin inicial
tasa dada por: h = k 2 q 2
mi
Elovich
ecuacin
q t = (/ 1 b ) ln ( ab ) + (1 / b ) ln t (9) donde un y b son las constantes
para este modelo obtenido a partir de
la pendiente y la interseccin de la
trama lineal de q t frente a ln t
intrapartculas
modelo de difusin
q t = k Identificacin del t 1/2 + C
(10)
q t (mg L -1 ) es la cantidad
adsorbido en el momento t (min),
y K Identificacin del (mg g -1 min -1 ) es la
tasa constante de intrapartculas
difusin. C es el valor de
la interseccin, lo que da una
idea sobre la capa lmite
espesor, es decir, cuanto mayor es el
interceptar, mayor es la
efecto de la capa lmite
donde R es el adsorbida por ciento metal, t es el tiempo de contacto
(min), b es la
gradiente de parcelas lineales y K
S
es la constante de difusin entre partculas.
La cintica de los datos de adsorcin se analizan con frecuencia usando
cuatro
diferentes modelos cinticos (Hameed et al, 2008;. Apostol y Gavrilescu,
2009;
Mathialagan y Viraraghavan, 2009; Nadavala et al., 2009; Nkedi-Kizza et
al., 2006; Yu et al., 2009) (Tabla 3.3).
Sari y Tuzen (2009) probaron los datos experimentales obtenidos para la
biosorcin
de Pb (II) y Cd (II) de la solucin acuosa por macrofungus ( rubescens
Amanita )
la biomasa, en trminos de cintica de biosorcin utilizando de pseudo-
primer orden y pseudo-
modelos cinticos de segundo orden. que los resultados mostraron los
procesos de biosorcin
tanto de Pb (II) y Cd (II), seguido bien una cintica de segundo orden de
pseudo. Mesa
3.4 presenta los parmetros de sorcin de algunos contaminantes
orgnicos sobre el Natural
absorbentes.
pgina 56
Biosorcin en la remediacin ambiental 43
3.4 Parmetros termodinmicos
La energa libre estndar ( G ), el cambio de entalpa ( H ) y el cambio
de entropa
( S se han estimado ) parmetros termodinmicos para evaluar la
viabilidad
del proceso de adsorcin.
El valor positivo de cambio en entalpa ( H ) indica que la adsorcin
es un proceso endotrmico, mientras que el valor positivo de la variacin
de entropa ( S )
refleja el aumento de aleatoriedad en la interfase slido / solucin.
La energa libre de Gibbs cambio del proceso se relaciona con la K
do
por
Eq. 11:
G = - RT ln K
do
(11)
K
do
se puede expresar como en la relacin (12):
K
do
do
do
un
mi
=
(12)
donde K
do
es el coeficiente de distribucin para la adsorcin, C
un
la cantidad de
adsorbato (mg) adsorbido en el adsorbente por litro de la solucin en el
equilibrio
yC
mi
es la concentracin de equilibrio (mg L -1 ) de solucin.
Con el fin de determinar los parmetros termodinmicos, los
experimentos tienen que
llevarse a cabo a temperatura diferente (303-313 K) para biosorcin. La
libre
cambio de energa ( G ) de la reaccin de sorcin est dado por la Ec.
(11).
Tabla 3.4: parmetro de sorcin para la eliminacin de contaminantes
orgnicos persistentes por sorbentes naturales
Orgnico
contaminante
sorbente
Isoterma
parmetro
Cintico
parmetro
Referencias
corteza de pino pentaclorofenol
Turba
K F = 8,6 1,6
K F = 4,47
q e = 7,65
-
Bras et al.
(2005)
tanjore y
Viraraghavan
(1997)
Aspergilo
Nger
-
k 1 = 168,86
Mathialagan
y
Viraraghavan
(2009)
2,4-diclorofenol Phanerochaete
Chrysosporium
K F = 0,232
k 1 = 0,085
Wu y Yu
(2006)
caas de bamb sulfato de endosulfn
huesos de aceituna
Man
K F = 12,86 1,56
K F = 13,54 1,13
K F = 11,06 1,44
k 1 = 0,29 0,05
k 1 = 0,25 0,06
k 1 = 0,21 0,04
Bakouri et al.
(2009)
K F (mg g -1 (mg L -1 )) es de Freundlich isoterma constante
q (mmol g -1 ) es la capacidad de sorcin monocapa (isoterma de
Langmuir)
q e (mg / g) es la cantidad de adsorbato adsorbida en el equilibrio
K Identificacin del (mg g -1 min -1 ) es la constante de velocidad de transporte
intrapartculas, k 1 es la tasa de adsorcin
constante
pgina 57
44 Maria Gavrilescu
Los parmetros termodinmicos tales como cambios en la energa libre
estndar
cambio de entalpa ( H ) y el cambio de entropa (S ) se determinan
mediante el uso de
(Ec. 13):
1
En c
S
MARIDO
K
R
T
D-D
=
(13)
donde T es la temperatura (K); R es la constante de los gases (8,314 J
mol K), K
do
es el
constante de equilibrio obtenida de isoterma de Langmuir. Los valores
de entalpa
( H ) y el cambio de entropa ( S ) se puede obtener a partir de la
pendiente de la grfica de
( G ) versus T .
parmetros termodinmicos se pueden determinar en experimentos por
lotes. por
ejemplo Yurtsever y Sengil (2009) describen experimentos llevados a
cabo en
diferentes temperaturas en el intervalo de 296 a 366 K para la adsorcin
Pb en quebracho
resina de tanino (QTR) (Fig. 3.3). Los valores de H y S se calculan a
partir
la pendiente y la interseccin de las parcelas de ln K
do
frente a 1 / T .
Los resultados se muestran en la Tabla 3.5. El cambio de energa libre de
Gibbs ( G )
los valores negativos aumentaron con la temperatura, lo que indica la
viabilidad y
espontaneidad del proceso de adsorcin de Pb 2+ iones en QTR. El
positiva H
se indica la naturaleza endotrmica del proceso de adsorcin y el
positivo S
un aumento de la aleatoriedad en el sistema de interfaz / solucin slida
durante el
proceso de adsorcin.
Higo. : 3.3 Influencia de la temperatura sobre el Pb 2+ captacin por
resina de tanino de quebracho
( C 0 = 75 mg L -1 , tamao de partcula = 38-53 m, pH 5, doze
biosorbente:
1 g L -1 (Yurtsever y Sengil, 2009).
pgina 58
Biosorcin en la remediacin ambiental 45
Tabla 3.5: Parmetros termodinmicos para Pb 2+ adsorcin iones en
QTR ( C 0 = 75
mg L -1 , pH 5, 38-53 micras partculas y 350 velocidad de agitacin rpm)
(Yurtsever y Sengil, 2009)
La temperatura, T (K)
296
306
326
346
366
Kc
9.29
13.88
30.40
57.23
118.90
G (kJ mol -1 )
- 5.43
- 6.63
- 9.17
- 11.54
- 14.42
H (kJ mol -1 )
31.84
S (mol kJ -1 )
127,02
Sari y Tuzen (2009) evaluaron los valores de energa libre media para el
biosorcin de Pb (II) y Cd (II) de la solucin acuosa por macrofungus
( Amanita rubescens ) biomasa. Los resultados indicaron que la
biosorcin de
Pb (II) y Cd (II) en A. rubescens biomasa estaba teniendo lugar por
qumica
intercambio inico. Los parmetros termodinmicos calculados, G , H
y
S (Tabla 3.5) mostraron que la biosorcin de Pb (II) y Cd (II) iones en A.
rubescens biomasa era factible, espontnea y exotrmica bajo
examinado
condiciones.
3,5 contaminantes eliminados por Biosorcin
3.5.1 Metales pesados
La contaminacin ambiental por metales txicos se produce a nivel
mundial a travs militar,
industrial (especialmente de combustible y potencia), los procesos
agrcolas y eliminacin de residuos
que genera 5,15 millones de toneladas de As, Cd, Cr, Cu, Hg, Ni, Pb, Se,
V, y Zn en
por ao total de todo el mundo (Brower et al, 1997;.. Zamil et al, 2009).
Muchas industrias, incluyendo placas de metal, la minera, la batera, los
metales preciosos
fabricacin, curtiduras, pigmento, industrias de colorantes y qumicas
liberan pesada
metales en los flujos de residuos que pueden conducir a la
contaminacin de agua dulce y
medio marino (Zhang y Ke, 2004;. Mack et al, 2007).
iones de metales pesados son hoy en da entre los contaminantes ms
importantes
agua superficial y subterrnea (Gavrilescu, 2004; Baysal et al, 2009;.
Brinza et
al., 2009; Hlihor y Gavrilescu, 2009a). Los metales son minerales
esenciales para
todo aerbico y anaerbico ms organismos, pero se ha demostrado
que, en gran
asciende a algunos de ellos, tal como cobre, plomo, cadmio o mercurio,
en serio
afectar la salud humana. El cuerpo humano no puede procesar y
disponer los metales.
Como resultado, se depositan en diversos rganos internos, y pueden
causar efectos adversos
reacciones y graves daos en el cuerpo (Gavrilescu, 2004; OMS, 2007).
Algunos
de los efectos en la salud de los metales pesados se ilustran en la Tabla
3.6.
pgina 59
46 Maria Gavrilescu
Tabla 3.6: Algunos efectos de los metales pesados en la salud humana
Efectos de metales pesados en el cuerpo humano
Referencias
Cr (VI)
, Potencial carcinognico adversa
para modificar la transcripcin del ADN
proceso, dolor de cabeza, nuseas,
dolor epigstrico, hemorragia severa
Diarrea
Kurniawan et al. (2006a);
Quaiser et al. (2007); arief
Et al. (2008); Namasivayam
Et al. (2008); Hlihor y
Gavrilescu (2009a, b)
Cr (III)
Cncer, las reacciones alrgicas de la piel
Vilar et al. (2007); arief et
Alabama. (2008)
Zn (II)
La depresin, letargo, neurolgicos
efectos (convulsiones y ataxia)
Kurniawan et al. (2006);
Hlihor y Gavrilescu
(2009a)
Cu (II)
Insomnio, dao heptico, Wilson
enfermedad
Kurniawan et al. (2006b);
Arief et al. (2008)
Cd (II)
trastorno renal, dao renal,
dao heptico, cncer,
hipertensin
Kurniawan et al. (2006a);
Kurniawan et al. (2006b);
Arief et al. (2008); igwe
y Abia (2007)
Pb (II)
Convulsiones y retraso metal,
encefalopata, la hemoglobina
reducir la produccin
Quaiser et al. (2007); arief
Et al. (2008); Igwe y Abia
(2007)
Ni (II)
Dermatitis, asma crnica,
tos, hemorragia bronquial,
malestar gastrointestinal, nuseas,
debilidad y mareos
Kurniawan et al. (2006a);
Kurniawan et al. (2006b);
Vilar et al. (2007); arief
Et al. (2008); Dahiya et al.
(2008)
La solucin ms apropiada para controlar la biogeoqumica de metales
contaminantes es la tcnica de sorcin, para producir efluentes tratados
alta calidad
de aguas residuales contaminadas segn Devaprasath et al. (2007).
Dirigir
En la actualidad, la contaminacin por plomo es considerado un
problema en todo el mundo ya que este metal
se detecta comnmente en varias aguas residuales industriales
(DAVYDOVA, 2005). Dirigir
es un elemento ms txico para las vidas humanas y animales. La
presencia de incluso bajo
los niveles de plomo en el agua es una preocupacin principalmente
porque tiende a bioacumularse
en la cadena alimentaria (Adriano, 1986;. Prasad et al, 2008). Pb (II)
encabeza la lista
de las amenazas ambientales, ya que, incluso en concentraciones muy
bajas,
se ha demostrado que causa dao cerebral en los nios. muchos
fisicoqumico
Se han propuesto mtodos para su eliminacin de efluentes industriales,
tales como
precipitacin qumica (Solmaz et al., 2007), la adsorcin (Matlock et al.,
2001),
biosorcin (Matheickal y Yu, 1999), el proceso de electrodilisis (Ferreira
et al.,
2005) y as sucesivamente. Un inconveniente importante con
precipitacin produccin de lodos.
El intercambio inico se considera una mejor tcnica alternativa para tal
fin
(Kazemipour et al., 2008).
pgina 60
Biosorcin en la remediacin ambiental 47
Biosorcin de Pb (II) fue adoptado por los investigadores como un
eficiente y
proceso ecolgicamente racional.
Schiewer y Balaria (2009) investigaron la absorcin de Pb (II) por
procesado
cscaras de naranja, un subproducto rico en pectina de la industria de
zumos de frutas. potenciomtrica
titulaciones mostraron una carga superficial significativamente mayor
negativo de protonada
cscaras en comparacin con las cscaras originales, con grupos cidos
alrededor de pH 4, 6 y 10.
El espectro FTIR de las cscaras fueron similares a los de la pectina. El
pico grupo carboxlico
desplazado de 1636 a 1645 cm -1 despus de Pb (II) de unin, lo que
indica la implicacin
de grupos carboxilo en Pb (II) de unin. Equilibrium se logr en 30 min a
2 h, dependiendo del tamao de partcula. El modelo de primer orden
equipado experimental
datos menos que los modelos de segunda o tercer orden. Las constantes
de velocidad obtenidos
eran mucho ms altos para las partculas ms pequeas, mientras que
la capacidad era similar para todos
Tamaos. pH baja, aumento de la fuerza inica, o que compiten co-iones
reduce Pb (II)
unin a dosis bajas de sorbente, pero a dosis altas de sorbente
permanecido eliminacin
por encima de 90%. La absorcin de Pb (II) a 300 ppm fue de 2 mmol / g
(40% de peso seco). Debido
a la alta absorcin, una cintica favorable y una buena estabilidad,
biosorbentes cscara de los ctricos
mantener en alto la promesa para aplicaciones industriales. En general,
este estudio sugiere que
biosorcin de Pb (II) iones de cscaras de naranja puede ser una barata
y eficaz
manera de tratamiento de iones de metal y debe investigarse ms para
su prctica
solicitud.
La eliminacin de venenoso Pb (II) a partir de aguas residuales por
diferente bajo costo
se investig abundantes adsorbentes (cscaras de arroz, mazorcas de
maz y aserrn)
por Abdel-Ghani et al. (2007) en diferentes proporciones de iones
adsorbente / metal, pH,
tiempo de contacto, la concentracin de metal, y la concentracin de
adsorbente. la adsorcin
eficiencias se encontr que eran dependientes del pH, aumentando en el
aumento de la
solucin de pH en el intervalo de 2,5 a 6,5. El tiempo de equilibrio se
alcanz despus de
120 min y el porcentaje mximo de eliminacin se logr a un adsorbente
la carga de peso de 1,5 gm. La capacidad de adsorcin de equilibrio de
adsorbentes
utilizado para el plomo se midieron y se extrapolaron usando Freundlich
lineal, Langmuir
y se encontraron isotermas de Temkin y los datos experimentales para
adaptarse a la Temkin
modelo de isoterma (Abdel-Ghani et al., 2007).
Meunier et al. (2002) examinaron la eficacia con la que algunos
naturales
adsorbentes (cscaras de cacao, corteza de cedro, corteza de pino,
corteza de abeto, y vermiculita
rocas volcnicas) pueden eliminar los metales pesados, especialmente
plomo, desde muy cido
lixiviado producido durante la descontaminacin del suelo mediante un
proceso de lixiviacin qumica
usando cido clorhdrico. cscaras de cacao fueron los biosorbente ms
eficiente con una
mxima capacidad q
Mximo
= 2,60 mg Pb / g (pH inicial = 1,59 y [Pb]
yo
= 45,4 mg / L).
Cedar corteza tambin se puede utilizar para la eliminacin de metales
en soluciones muy cidas pero son
menos eficientes que las cscaras de cacao. Las mediciones cinticas de
eliminacin de plomo por cacao
conchas han revelado que se obtuvo despus de aproximadamente
equilibrio de sorcin
4 h de contacto (Meunier et al., 2002).
Con el objetivo de identificar adsorbentes innovadora, de bajo costo,
Rashed (2006)
evaluado algunas tecnologas de sorcin, mediante la determinacin de
las condiciones adecuadas
para el uso de melocotn y albaricoque piedras, producido a partir de
industrias alimentarias como slido
Pgina 61
48 Maria Gavrilescu
los residuos, como adsorbentes para la eliminacin del plomo de la
solucin acuosa. Qumico
estabilidad de sorbentes, efecto del pH, la dosis adsorbentes, el tiempo
de sorcin y el equilibrio
Se estudi la concentracin. Los resultados revelan que la adsorcin de
iones de plomo en
hueso de melocotn era ms fuerte que en albaricoque piedra hasta
3,36% en adsorcin 3 h
hora. tiempo de equilibrio adecuados para la adsorcin fue de 3-5 h
(adsorcin Pb%
es de 93% para el albaricoque y el 97,64% para melocotn). La gama de
adsorcin eficaz para
pH en el rango fue de 7-8. Aplicacin de Langmuir y Freundlich isoterma
modelos muestran alta de adsorcin mxima y de unin de energas
para el uso de estos
adsorbentes para la eliminacin de iones de plomo a partir de agua
contaminada y de aguas residuales.
Los resultados de este estudio podran ser tiles en la ampliacin y el
diseo rentable
plantas de tratamiento para la eliminacin de iones Pb (II) a partir de
aguas residuales.
Cromo
La contaminacin de cromo est aumentando debido a la generacin de
agua de
la minera, el curtido del cuero, cemento, muriendo, galvanoplastia y la
pintura corrosiva
industrias (Ho et al, 2000;. Sankalia et al., 2004, Acosta et al., 2004,
Ahalya et
al., 2005; Hamadi et al., 2001). Las industrias relacionadas con cromo se
enfrentan a la
problema de la eliminacin segura de gran cantidad de cromo que
contiene las aguas residuales.
existe cromo en dos estados como Cr (III) y Cr (VI). El cromo trivalente es
relativamente menos txicos y menos mvil (Anderson, 1997; Deng et
al., 2009), mientras
cromo hexavalente es txico, carcinognico y mutagnico para
animales, as como
los seres humanos (Costa, 2003). El cromo hexavalente es 500 veces
ms txico que el
la forma trivalente (Kowalski, 1994). Esto se ha convertido en un
problema grave porque
Cr (VI) se ha clasificado como un carcingeno humano Grupo I por
International
Agencia para la Investigacin sobre el Cncer (IARC) y como cancergeno
por inhalacin Grupo A
por la Agencia de los Estados Unidos de Proteccin Ambiental (EPA)
(Levankumar et al., 2009).
La exposicin crnica a Cr (VI) provoca cncer en el tracto digestivo y los
pulmones, y
puede causar dolor epigstrico, nuseas, vmitos, diarrea grave y
hemorragia
(Mohanty et al., 2005). Por lo tanto, la eliminacin de Cr (VI) a partir de
medio ambiente por
biosorcin ha sido un tema de investigacin de gran inters.
Fiol et al. (2003) utilizaron productos de desecho de operaciones
industriales, tales como
corteza de yohimbe, tallos de uva, de corcho y olivos piedras para la
eliminacin de Cr (VI) a partir de
soluciones acuosas. experimentos de equilibrio de lotes a temperatura
ambiente eran
Realizado. la absorcin de metales mostr un perfil dependiente del pH y
la absorcin ptima
a pH inicial entre 2,0 y 3,0. Leve influencia de NaCl en la absorcin de
metales
fue observado. Los datos de sorcin equipados bien con el modelo
Langmuir dentro de la
rango de concentracin estudiado. tallos de uva demostraron ser el
sorbente ms eficiente
seguido de corteza de yohimbe, corcho y olivos piedras (Fiol et al.,
2003).
Babu y Gupta (2008) estudiaron Cr eliminacin a partir de soluciones
acuosas (VI)
utilizando hojas de neem activado por tratamiento trmico, as como
tratamiento cido
cido clorhdrico concentrado (36,5%). estudios de adsorcin por lotes
demuestran
que el adsorbente preparado a partir de hojas de neem tiene una
capacidad significativa para
adsorcin de Cr (VI) a partir de solucin acuosa. Los parmetros
investigados en
este estudio incluyen pH, tiempo de contacto, la concentracin inicial de
Cr (VI) y adsorbente
pgina 62
Biosorcin en la remediacin ambiental 49
dosificacin. La adsorcin de Cr (VI) se encuentra para ser mxima
(99%) a valores bajos
de pH en el intervalo de 1-3. Una pequea cantidad de la hojas de neem
adsorbente (10 g / L)
podra eliminar tanto como 99% de Cr (VI) a partir de una solucin de
concentracin inicial
50 mg / L. El proceso de adsorcin de Cr (VI) se prueba con isoterma de
Langmuir
modelo. Aplicacin de la isoterma de Langmuir al sistema produjo
mximo
capacidad de adsorcin de 62,97 mg / g.
Devaprasath et al. (2007) evaluaron la capacidad de sorcin de Prosopis
spicegera, un rbol fcilmente disponibles hojas para la eliminacin de
Cr (VI) a partir acuosa
medios de comunicacin. estudios de adsorcin se realizaron mediante
experimentos por lotes como una funcin
de parmetros de proceso tales como el tiempo de sorcin, pH y
concentraciones de sorbato
y sorbente. modelo de Freundlich equipado mejor con el equilibrio
experimental.
La adsorcin de Cr (VI) se encontr depende de la concentracin inicial
de metales
de iones, pH, dosis adsorbente y el tiempo de agitacin. La eliminacin
mxima de Cr (VI)
se observ a pH 2 (95%).
Levankumar et al. (2009) investigaron la extraccin de cromo
hexavalente
a partir de soluciones acuosas por O. Americanum vainas de semillas L..
El polvo O.
Americanum vainas de semillas de L. se informaron como un adsorbente
eficaz para la
tratamiento de cromo hexavalente para la primera vez. Fue capaz de
la eliminacin de 100% de cromo a partir de las soluciones acuosas de
concentraciones 100
mg / L, 150 mg / L y 200 mg / L. La adsorcin de cromo mxima prevista
calidad de 83,33 mg / g mostr que adsorbente preparado a partir de la
O. Americanum
L. vainas de semillas han razonable eficiencia de remocin de cromo.
La capacidad de los de bajo rango lignitos turcas para eliminar Cr (VI) a
partir acuosa
Las soluciones se estudi mediante Arslan y Pehlivan (2007). La
utilizacin del marrn
Carbones para el tratamiento de la solucin acuosa que contiene iones
de Cr (VI) est ganando
atencin como un medio simple, eficaz y econmico de tratamiento de
aguas residuales.
El mecanismo de ion Cr (VI) la unin a lignitos puede incluir intercambio
inico,
la adsorcin superficial, quimisorcin, formacin de complejos, y la
adsorcin-complejacin.
La cintica de Cr (VI) biosorcin por lignitos fue rpido, alcanzando 50-
90%
de la capacidad total de biosorcin en 60 min. Los estudios cinticos
indican que
equilibrio en la adsorcin de Cr (VI) en los lignitos se alcanz en 80
min de tiempo de contacto entre los lignitos y la solucin.
Cr (VI) adsorcin sobre lignitos fue descrito slo por el Freundlich
modelo de isoterma. La adsorcin de Cr (VI) aumenta con un aumento
en el
las concentraciones de estos metales en solucin. El costo
sustancialmente menor, de fcil
disponible del carbn de bajo rango indica gran potencial para la
eliminacin de Cr (VI)
iones a partir de sistemas acuosos.
El papel de Bansal et al. (2009) informaron de la posibilidad de utilizar
pre
procesamiento consumidor residuos agrcolas para eliminar Cr (VI) a
partir sinttica
aguas residuales en diferentes condiciones experimentales. Para esto, la
cscara de arroz
(Residuos agrcolas obtenida de los molinos de arroz) se ha utilizado
despus de pre-
tratamientos (de ebullicin y tratamiento con formaldehdo). mxima
eliminacin de metal
se observ a pH 2,0. Las eficiencias de hirvi y se trat formaldehdo
cscara de arroz para la eliminacin de Cr (VI) fueron 71,0% y 76,5%
respectivamente para diluida
Pgina 63
50 Maria Gavrilescu
soluciones en 20 g L -1 dosis adsorbente. Segn los investigadores estos
datos
pueden ser utilizados por las industrias de pequea escala que tienen
bajas concentraciones de Cr (VI) en
aguas residuales usando lotes o reactores de flujo de tanque agitado
donde el material estndar
tales como carbono activado no est disponible.
Cadmio
El cadmio es un elemento no esencial y uno de la traza ms peligrosos
elementos, siendo considerado un metal de prioridad desde el punto de
vista del potencial
peligro para la salud humana (lvarez-Ayuso y Garca-Snchez, 2007).
metal txico
iones tales como Cd (II) con el tiempo pueden llegar a la parte superior
de la cadena alimentaria y, por tanto, se convierten
un factor de riesgo para la salud de las personas (Katircioglu et al.,
2008). El cadmio, que es
un metal ampliamente utilizado y extremadamente txico en
concentraciones relativamente bajas, es
uno de los metales pesados responsables de causar dao renal,
trastorno renal,
presin arterial alta, la fragilidad sea y la destruccin de las clulas
rojas de la sangre (Abia
y Asuquo, 2007).
Tan y Xiao (2008) investigaron el comportamiento de adsorcin de
cadmio en
de trigo molido se deriva en solucin acuosa para entender el fsico-
qumico
proceso en cuestin y para explorar la potencialidad de trigo se deriva
en aguas residuales
tratamiento. Los resultados mostraron que 0,1032 mmol de cadmio se
adsorbe por
gramo de trigo molido tallos. Los resultados del estudio indicaron que el
trigo se deriva
tiene un gran potencial para eliminar los iones de cadmio en solucin
acuosa a travs de una
bajo costo y de manera ecolgica.
Shin et al. (2007) compararon la capacidad de los sorbentes preparado a
partir de enebro
madera y corteza a adsorben cadmio de soluciones de las acuosas a
diferentes valores de pH.
la cintica de la adsorcin, las isotermas de adsorcin, y los
experimentos de adsorcin de borde
se utilizaron para caracterizar el comportamiento de adsorcin. Los
resultados de la cintica y
experimentos de isotermas mostraron que la corteza de enebro tena 3-4
veces mayor adsorcin
capacidad para Cd de madera de enebro. Adems de mayor capacidad,
JB exhibi
una mayor resistencia de adsorcin (45,3 frente a 9,1 L mmol -1 ) y la
absorcin ms rpida
cintica (0,0119 frente a 0,0083 g mol -1 min -1 ) en comparacin con
madera de enebro. por
estos dos adsorbentes, el aumento de la adsorcin Cd con el aumento
de pH de la solucin
en el intervalo de 2-6 sugiere que los grupos carboxilo superficie
(RCOOH) podra ser
involucrado en la interaccin con Cd.
En el estudio de Al-Anber y Matouq (2008), torta de oliva se us como
un adsorbente. Se genera durante la compresin de oliva. orujos
es una abundante y un material adsorbente bajo costo a gran escala en
muchas
pases mediterrneos, especialmente en Jordania. Jordan tiene una
fuerte agrcola
fundacin que deja tras de 80.000 toneladas al ao de residuos orujos,
con
estircol siendo posiblemente el ms problemtico. El objetivo de este
trabajo fue
estudiar la capacidad de utilizar la torta de oliva sin tratar para tratar
aguas residuales contaminadas
por el ion cadmio bajo diferentes condiciones de funcionamiento
(temperatura, dosis y
pH). El adsorbente utilizado en el estudio exhibi tan bueno sorcin en
aproximadamente
pH 6 a temperaturas 28, 35 y 45 C, respectivamente. La eficacia de
eliminacin
se encontr que era 66% a pH 6 y la temperatura de 28 C.
pgina 64
Biosorcin en la remediacin ambiental 51
Las investigaciones tambin han llevado a cabo mediante el uso de
salvado de trigo como sorbente, el cual
demostrado ser mucho econmico, eficaz y ms viable que los
convencionales
sorbentes, segn Nouri et al. (2007).
La capacidad de la torta de aceite de neem (NOC), un material bio-
residuos obtiene como subproducto
producto de fruta neem para eliminar Cu (II) y Cd (II) iones a partir de
solucin acuosa
fue investigado por Rao y Khan (2009). Neem ( Azadirachta indica ) es
un rpido
creciente, planta generalmente de hoja perenne, que alcanza una altura
de 15-20 m y un tronco
la circunferencia de 1.5 a 3.5 m. Neem ha sido ampliamente estudiado
para resolver diversos problemas
relacionados con la agricultura, la salud pblica, control de la poblacin
y del medio ambiente
contaminacin. Neem ha sido reconocido como un purificador de aire
natural y ha sido
sugiri que la plantacin de rboles de neem en el borde de la carretera
es una manera eficaz de
regular la contaminacin relacionada con el trfico. El aumento de la
concentracin inicial de Cu (II)
y Cd (II) iones resultado en un aumento en la capacidad de sorcin, q
mi
(mg g -1 ). los
Se encontraron las capacidades mximas de sorcin en el equilibrio para
ser 1,47, 2,4 y
4,94 mg g -1 a los 15, 25 y 50 mg.l -1 inicial Cd (II) de concentracin,
respectivamente.
Se encontr que el tiempo de equilibrio para ser 10, 50 y 60 min,
respectivamente, para el
Cd (II) concentraciones iniciales de 15, 25 y 50 mg.l -1 que muestra que
el equilibrio
tiempo depende de las concentraciones iniciales Cd (II).
Bulut y Tez (2007) han investigado el comportamiento de adsorcin de
Ni (II),
Cd (II) y Pb (II) a partir de soluciones acuosas mediante cscaras de
avellanas y de almendras,
los cuales son un material muy barato y fcilmente disponible para la
eliminacin de
metales pesados seleccionados a partir de soluciones acuosas. Las
cscaras de avellana (SH)
y almendra (SA) se obtuvieron comercialmente y se utiliza para la
preparacin de
adsorbente. Se lav varias veces con agua destilada para eliminar
superficie
impurezas y despus se seca. Las propiedades estructurales y superficie
qumica de la
conchas se caracterizaron utilizando sorcin de nitrgeno y la titulacin
Boehm. los
capacidad de adsorcin de equilibrio de conchas se obtuvo mediante el
uso de Langmuir lineal
y Freundlich isotermas de adsorcin. Los mejores coeficientes de
correlacin fueron
obtenido para el modelo cintico de pseudo segundo orden. El
intercambio inico es, probablemente,
uno de los principales mecanismos de adsorcin para iones metlicos
divalentes de unin a
las cscaras de avellana y almendra. El orden de la selectividad de los
adsorbentes es
Pb (II)> Cd (II)> Ni (II).
Cobre
El cobre (Cu) es uno de los metales txicos. En particular admisin,
excesiva de cobre
ms de 1,0 mg / L de los resultados de beber en la hemocromatosis y
gastrointestinal
enfermedades catarro porque se acumula en el hgado de animales y
seres humanos.
Dado que el cobre es un metal esencial en una serie de enzimas para
todas las formas de vida,
los problemas surgen cuando es deficiente o en exceso. Sin embargo, el
cancergeno
carcter de cobre es aceptada y las pruebas epidemiolgicas, tales
como el mayor
incidencia de cncer entre los trabajadores del cobre, sugiere un
carcingeno primaria
papel para el cobre. Adems, el cobre es fitotxico para que ha sido
utilizado como
un algicida para controlar la proliferacin de algas. Se puede, por lo
tanto, causa daos a las plantas si,
por ejemplo, est presente en una concentracin demasiado alta en los
lodos de aguas residuales que es
pgina 65
52 Maria Gavrilescu
aplicado a las tierras agrcolas. Una fuente principal de cobre en residuos
industriales
corrientes es baos de limpieza de metales y de las planchas, y
enjuagues, como el latn, el tubo de la caldera,
utensilios de cocina, fertilizantes, y a partir de cobre trabajo de los
metales, que requiere
eliminacin de xido peridica sumergiendo el metal en baos de cido
fuerte (Ho y
McKay, 2004). En los ltimos aos, varios biosorbentes se han utilizado
para la eliminacin
de Cu (II) (Sari et al., 2007a).
Cpsula del algodn fue utilizado como adsorbente por Duygu Ozsoy y
Kumburfor
(2006), con el objetivo de eliminar de los iones Cu (II) de las soluciones
acuosas.
El proceso de adsorcin se llev a cabo en un proceso por lotes y los
efectos de
tiempo de contacto (2-24 h), la concentracin de adsorbente (1-20 g L
-1 ), pH inicial (2,0-6,0),
iones intercambiables
M n+
iones metlicos
SRA
MCH
M +
M +
M +
M +
BE +
M +
BE ++
E++
METRO
NBL
M (BL) n
M +
T
M +
T
M +
M +
Residuos agrcolas
biomasa
Grupos funcionales
COOH, -NH , -CH, 2
Difusin
Transporte
Precipitacin
pgina 131
118 Valentin I. Popa et al.
Para entender cmo los metales se unen a la biomasa, es esencial para
identificar
los grupos funcionales responsables de la unin de metal. La mayor
parte de la funcionalidad
grupos que participan en el proceso de unin se encuentran en las
paredes celulares. el funcional
grupos presentes en molculas de diferentes grados de biomasa, en
general son:
grupos acetamido, carbonilo, fenlicos, polisacridos estructurales,
amido,
amino, sulfhidrilo, grupos carboxilo, alcoholes y steres (Gupta y Ali,
2000).
Estos grupos tienen la afinidad para la complejacin de metales. Algunos
son biosorbentes
no selectiva y unirse a una amplia gama de metales pesados sin ninguna
prioridad especfica,
mientras que otros son especficos para ciertos tipos de metales en
funcin de su
composicin qumica (Sud, 2008).
4.5.6 Materiales residuos agrcolas como biosorbentes para el
La eliminacin de los metales pesados
La eliminacin de iones de metales pesados de las corrientes acuosas de
desechos agrcolas
materiales es una tecnologa innovadora y prometedora. La eficiencia de
la
material de desecho depende de la capacidad, afinidad y especificidad,
incluyendo
Tambin la naturaleza fsico-qumica de la misma. la investigacin
dispersos ya se ha hecho
de la variedad de biosorbentes para la eliminacin de iones de metales
como Cr, Cu, Ni, Pb,
Cd, As, Hg etc. se toman Los adsorbentes ya sea en forma natural, o
modificado
por tratamiento qumico y trmico para aumentar sus capacidades de
sorcin
(Sud et al., 2008).
modificaciones qumicas de biomasa incluyen deslignificacin,
esterificacin de
grupos carboxilo y de fosfato, la metilacin de los grupos amino, y la
hidrlisis
de grupos carboxilato.
La eliminacin de cromo
El cromo es un metal pesado txico de ser liberado en el medio
ambiente por
aplicaciones como de bronceado, conservacin de la madera y
pigmentos, tintes para el plstico,
pinturas y textiles. El cromo se produce en un nmero de estados de
oxidacin, pero
cromo (VI) y cromo (III) son de principal preocupacin ambiental (Yu et
al., 2000).
Un nmero de residuos agrcolas, como cscaras de avellana, cscara de
naranja, maz
mazorcas, cscaras de man, frutas jack y cscaras de semillas de soja
en formas naturales o modificados,
ha sido explorado y fue reportado significativa la eficiencia de
eliminacin (Kurniawan
et al., 2006). Diversas partes de la planta tales como mdula fibra de
coco, cscara de coco
fibra, la corteza de la planta ( Acacia arabica, Eucalyptus ), agujas de
pino, hojas de cactus,
y el polvo de la licencia de neem tambin se han probado para la
eliminacin de cromo que muestra
eficiencia ms de 90-100% a pH ptimo (Dakiky et al, 2002;. Manju y
Anirudhan, 1997; Mohan et al., 2006; Sarin y Pant, 2006; Venkateswarlu
et
al., 2007). Gardea-Torresdey et al. (2000) reportaron que la Avena
monida (entero
biomasa vegetal) mostr 90% de eficiencia de eliminacin de Cr (VI) a
pH ptimo 6,0.
La cscara de arroz en forma natural, as como activado cscara de
carbono arroz se utilizaron para
la eliminacin de cromo (VI) y los resultados tambin se compararon con
comercial
carbn activado y otros adsorbentes (Bishnoi et al., 2004). Aserrn de la
India
Pgina 132
Ligninas y polifenoles en biorremediacin 119
rose wood preparado por tratamiento con formaldehdo y cido sulfrico
mostr
eliminacin eficaz de cromo (VI) (Garg et al., 2004). La utilizacin de la
mostaza
torta de aceite se ha informado con significativa la eficiencia de
eliminacin y los resultados
de carbn activo de residuos de la industria del azcar y granular
activado comercial
carbono para secuestrante de iones de metales pesados a partir de
soluciones acuosas se
comparacin (. Ajmal et al, 2005; Fahim et al., 2006).
La mayora de los estudios mostraron que la biosorcin de cromo, en
agrcola
materiales de desecho es bastante alto y vara de 50 a 100%.
Parcialmente biosorcin
ocurre en intervalo cido particularmente a pH 2. jugadas de especiacin
As cromo
el papel dominante en la decisin de la eficiencia de eliminacin como a
pH 2 cromo es
presente como cromo (III) (Sud et al., 2008). Tabla 4.4 resume los
resultados
reportado en la literatura para la eliminacin de cromo mediante el uso
de residuos agrcolas
materiales.
La eliminacin de plomo
La principal fuente de plomo en el ambiente es de plstico, herramientas
de acabado,
tubos de rayos catdicos, cermica, materiales de soldadura, las piezas
de tapajuntas de plomo y otro menor
producto, el acero y la recuperacin de cable. El plomo puede resultar en
la amplia gama de
efectos biolgicos dependiendo del nivel y la duracin de la exposicin.
En
el plomo ambiente se une fuertemente a partculas tales como aceite,
sedimentos y
lodos de aguas residuales por lo que su eliminacin es de gran
preocupacin (Sud et al., 2008). Diferente
residuos agrcolas se estudiaron para la posibilidad de ser utilizados en
la eliminacin de
dirigir. Resumen de trabajos realizados por diversas investigaciones
utilizando variedad de productos agrcolas
materiales de desecho para la eliminacin de plomo se presentan en la
Tabla 4.5. Literatura
informacin revel que el valor optimizado de biosorcin de plomo se
encuentra alrededor
pH 5-6. Gupta et al. (2004) utilizaron el bagazo de cenizas volantes para
la eliminacin del plomo con el 65%
eficiencia de remocin. Saw polvo de sylvestries Pinus y madera de
caucho han demostrado
una eficacia de eliminacin de 85-90%, pero los resultados indica que la
modificacin no lo hizo
mejorar la eficacia de eliminacin de plomo (Taty-Costodes et al., 2003).
La eliminacin de cadmio
cadmio y sus compuestos en comparacin con otros metales pesados se
relativamente soluble en agua, por lo tanto mvil en el suelo, y tiende a
bioacumularse.
El tiempo de vida largo marcos de ventanas de PVC, plsticos y placas
en acero son la
fuentes bsicas de cadmio en el medio ambiente. El cadmio se acumula
en el
cuerpo humano, especialmente en los riones, lo que conduce a la
disfuncin del rin
(Sud et al., 2008).
Posible uso de salvado de arroz y salvado de trigo fue juzgado por
secuestrante
se inform de cadmio, y significativa la eficiencia de eliminacin
(Montanher et al.,
2005; Farajzadeh y Monji, 2004; Singh et al., 2005). Los estudios fueron
tambin
realizado en el uso de esmalte de arroz, cscara de arroz y gram cscara
negro en su hbitat natural
as como una forma modificada para la eliminacin de cadmio y su
eficiencia relativa
se inform (Kumar y Bandyopadhyay, 2006).
pgina 133
120 Valentin I. Popa et al.
Tabla 4.4: Resumen de los resultados obtenidos por diversos
investigadores que usan bajo coste
materiales de desecho agrcolas para la eliminacin de cromo
Residuos agrcolas
in metlico
resultados
Referencia
biomasa de avena
Cr (III),
Cr (VI)
> 80%
Gardea-Torresdey et al.
(2000)
formaldehido tratada
aserrn india
palo de rosa
Cr (VI)
62-86%
Garg et al. (2004)
Haya aserrn
Cr (VI)
100%
Acar y Malkoc (2004)
tratado qumicamente
bagazo
Cr (VI)
50-60%
Krishanani et al. (2004)
formaldehido tratada
cscara de arroz
Cr (VI)
88.88%
Bishnoi et al. (2004)
Bagazo de cenizas volantes
Cr (VI)
96-98%
Gupta y Ali (2004)
Salvado de trigo
Cr (VI)
> 82%
Faraizadeh y Monji
(2004)
fibras de cscara de coco
Cr (VI)
> 80%
Mohan et al. (2006)
granular comercial
Carbn activado
(C2 y C3) y AC
de los residuos de azcar
industria (C1)
Cr (VI)
93-98%
C1> C2> C3
Fahim et al. (2006)
corteza de eucalipto
Cr (VI)
~ 100%
Sarin y Pant (2006)
polvo de hoja de Neem
Cr (VI)
> 96%
Venkateswarlu et al.
(2007)
madera de caucho vio polvo de Cr (VI)
60-70%
Karthikeyan et al. (2005)
bagazo pretratado
con NaOH y se
CH 3 COOH
Cr (VI),
Ni (II)
90%, 67%
Rao et al. (2002)
mosca bagazo modificado
ceniza
Cr (VI)
67%
Gupta et al. (1999)
Carbn activado
a partir del bagazo
(Carbonizacin y
gasificacin)
Cr (VI)
Significativo
la absorcin de metales
Valix et al. (2006)
Bagazo de caa de azcar,
mazorca de maz maz,
torta de aceite de jatrofa
Cr (III)
Hasta un 97%
Garg et al. (2007)
salvado de arroz crudo
Cr (VI),
Ni (II)
40-50%
Oliveira et al. (2005)
Pgina 134
Las ligninas y polifenoles en biorremediacin 121
Tabla 4.5: Resumen de los trabajos realizados por diversos
investigadores que usan variedad de
materiales de desecho agrcolas para la eliminacin del plomo
Residuos agrcolas
in metlico
resultados
Referencia
Orisa sativa cscara
Pb (II)
98%
Zulkali et al.
(2006)
Agricultural por producto
Humulus lupulus
Pb (II)
75%
Gardea-
Torresdey et
Alabama. (2002)
qumica modificada
residuos residuo manzana
Pb (II)
Hasta un 80%
Lee et al.
(1999)
residuos agro de negro
gramo cscara
Pb (II)
Hasta que 93%
Saeed et al.
(2005b)
corteza febrfuga
Pb (II)
100%
Sud et al.
(2008)
qumicamente modificado
aserrn de goma
madera
Pb (II)
85%
Raji y
Anirudhan
(1998)
De coco carbn basada
Carbn activado
Pb (II)
100%
Sud et al.
(2008)
Nasir et al.
(2007)
Rose biomasa
pretratados con
NaOH
Pb (II), Zn (II)
75%
Montanher et
Alabama. (2005)
El salvado de arroz
Pb (II), Cd (II), Cu (II),
Zn (II)
> 80%
Taty-
Costodes et
Alabama. (2003)
Saw polvo de Pinus
sylvestris
Pb (II), Cd (II)
96%, 98%
Yu et al.
(2001)
Arce aserrn
Pb (II), Cu (II)
80-90%, 60-90% Bailey et al.
(1999)
absorbentes de bajo coste
(Corteza, biomasa muerta,
quitina, algas marinas,
algas, musgo de turba, hoja,
molde, musgo, zeolita,
algodn modificado)
Pb (II), Cd (II),
Cr (VI), Hg (II)
Buenos resultados
hojas de t de residuos
Pb (II), Fe (II), Ni (II),
Zn (II)
92%, 84%, 73%
(Ahluwalia
y Goyal
2005b)
( Cont. )
Page 135
122 Valentin I. Popa et al.
El carbn activado a partir
mdula de coco
Pb (II), Hg (II),
Cd (II), Ni (II), Cu (II)
Hg-100%
Pb-100%
Cu-73%
Ni-92%
Cd-100%
Kadirvelue et
Alabama. (2001)
La paja de arroz, soja
cascos, caa de azcar
bagazo, cacahuete
conchas, pacana y
cscaras de nuez
Pb (II), Cu (II), Cd (II),
Zn (II), Ni (II)
Pb> Cu> Cd>
Zn> Ni
Sud et al.
(2008)
PFP (fieltro pecolo
palma vaina) -peelings
desde el tronco de la palma
rbol
Pb (II), Cd (II), Cu (II),
Zn (II), Ni (II), Cr (VI)
> 70% de Pb> Cd
> Cu> Zn> Ni
> Cr
Iqbal et al.
(2008)
El carbn activado de
cscaras de cacahuete
Pb (II), Cd (II), Cu (II),
Ni (II), Zn (II)
Hasta que 75%
Wilson et al.
(2006)
El uso de otras partes de las plantas tales como cscaras de guisantes,
hojas de higuera, habas,
cscaras de naranja, como adsorbentes han sido reportados cscaras de
frutos de nspero y jack
a mostrar una alta eficiencia de remocin a pH cido (Benaissa, 2006).
Adsorcin
experimentos realizados en cscaras de avellana, cscaras de
cacahuetes, cscaras de nuez y verde
cscaras de coco dieron resultados significativos para la eliminacin de
cadmio (Kurniawan et
al., 2006).
La investigacin tambin ha llevado a cabo mediante el uso de un
tratamiento qumico agrcola
materiales de desecho como tratada base de cscara de arroz, fibras de
enebro tratados, y corncob
modificados con cido ctrico, modificado cscaras de cacahuete,
anhdrido succnico tratados
caa de azcar etc. (Karnitz et al., 2007).
La mayora de los estudios mostraron que los residuos agrcolas, ya sea
en forma natural
o forma modificada es muy eficiente para la eliminacin de iones cadmio
metlicos.
Resumen de los trabajos de investigacin realizados se presenta en la
Tabla 4.6.
Tabla 4.6: Resumen de los trabajos realizados por diversos
investigadores que usan variedad de
materiales de desecho agrcolas para la eliminacin de cadmio
Residuos agrcolas
in metlico
resultados
Referencia
Las cscaras de guisantes, fig
hojas, habas,
cscara de nspero
Cd (II)
70-80%
Benaissa (2006)
Salvado de trigo
Cd (II)
87.15%
Singh et al.
(2005)
Tres tipos de arroz tratada
cscara
Cd (II)
80-97%
Kumar y
Bandyopadhya
esmalte de arroz
Cd (II)
> 90%
(2006)
( Cont. )
pgina 136
Ligninas y polifenoles en biorremediacin 123
activado con vapor
de carbono sulfurado
(SA-SC) a partir de
bagacillo
Cd (II)
98,8%
Singh et al.
(2005)
enebro tratada Base
fibra
Cd (II)
Eliminacin de alta Krishna y
Anirudhar (2003)
Cscara de gramo negro
Cd (II)
99%
Min et al. (2004)
Paja, serrn,
datesnut
Cd (II)
> 70%
Saeed e Iqbal
(2003)
pathenium seca
polvo
Cd (II)
> 99%
Ajmal et al.
(2006)
Bagasee cenizas volantes
Cd (II), Ni (II)
65%, 42%
Srivastava et al.
(2007)
El bagazo
Cd (II), Zn (II)
90-95%
Mohan y
Singh (2002)
El salvado de arroz
Cd (II), Hg (II),
Pb (II), Cr (II), Cu (II),
Ninguna (II)
> 80%
Montanher et al.
(2005)
Salvado de trigo
Cd (II), Hg (II),
Pb (II), Cr (II), Cu (II),
Ni (II)
> 82%, excepto
Ni
Farajzadeh y
Monji 2004
cscara de avellana, naranja
cscara, mazorca de maz,
cscaras de cacahuete, soja
cascos tratados con
frutas NaOH y jack
Cd (II), Cr (II), Cu (II),
Ni (II), Zn (II)
alta de metal
adsorcin
Kurniawan et al.
(2006)
madera de la papaya
Cd (II), Cu (II), Zn (II) 98%, 95%,
67%
Saeed et al.
(2005a)
La paja de arroz, soja
cascos, caa de azcar
bagazo, cacahuete
conchas, pacana y
cscaras de nuez
Cd (II), Pb (II), Cu (II),
Zn (II), Ni (II)
Pb> Cu>
Cd> Zn> Ni
Sud et al. (2008)
Poplarwood aserrn
Cd (II), Cu (II), Zn (II) Cu> Zn> Cd Sciban et al.
(2007)
qumicamente modificado
caa de azcar con
anhdrido succnico
Cd (II), Cu (II), Pb (II)> 80%
Karnitz et al.
(2007)
Polvo de verde
cascara de coco
Cd (II), Cr (II), As (II) 98%
Pino et al. (2006)
Corteza de Abies
sachalinensis y
glehnii pecia
Cd (II), Cu (II),
Zn (II), Ag (II),
Mn (II), Ni (II)
Hasta que 63%
Sud et al. (2008)
(Cont.)
Page 137
124 Valentin I. Popa et al.
La eliminacin de nquel
Nquel y sus compuestos no tienen olor ni sabor caractersticos. Las
fuentes
de nquel para el medio ambiente son niquelado, cermica de colores,
bateras,
hornos utilizados para hacer aleaciones o de las centrales elctricas y los
incineradores de basura.
El efecto de salud ms perjudicial de nquel es las reacciones alrgicas
(Sud et al.,
2008).
Los experimentos en la eliminacin de nquel se llevaron a cabo en la
fstula Cassia biomasa
en su forma natural y los resultados muestran la eficiencia de
eliminacin 99-100% (Hanif et al.,
2007). Aserrn de madera de arce, roble y algarrobo negro se han
reportado como prometedora
biosorbente para la eliminacin de nquel (. Sciban et al, 2006; Shukla et
al., 2005).
desechos agrcolas, como de cacahuete, pacana, nuez, avellana y
cacahuete
conchas en forma natural o modificada tambin se utilizaron para
biosorcin (Kurniawan
et al., 2006). bagazo de caa de azcar en su forma natural mostr que
ms de 80%
eficiencia de eliminacin (Garg et al., 2007). Tabla 4.7 es una
compilacin de investigaciones
realizado en la eliminacin de nquel.
Tabla 4.7: Resumen de los resultados obtenidos por diversos
investigadores usando una variedad de
materiales de desecho agrcolas para la eliminacin de nquel
Residuos agrcolas
in metlico
resultados
Referencia
cscara de avellana
Carbn activado
Ni (II)
Eficaz
normal
Demirbas et al.
(2002)
Casia la fstula biomasa
Ni (II)
100%
Hanif et al.
(2007)
Arce aserrn
Ni (II)
75%
Shukla et al.
(2005)
Bagazo de caa de azcar
Ni (II)
> 80%
Garg et al. (2007)
los residuos de t
Ni (II)
86%
Malkoc y
Nuhoglu (2005)
salvado de arroz desgrasado,
tratado qumicamente
soja y algodn
cscaras de semillas
Ni (II), Zn (II), Cu (II)
57%, 87%
Sud et al. (2008)
hojas de t de residuos
Ni (II), Pb (II), Fe (II),
Zn (II)
92%, 84%,
73%
Ahluwalia
(2005a)
Saw polvo de roble y
negro de langostas dura
madera (modificado y
sin modificar)
Ni (II), Cu (II), Zn (II)
70-90%
Sciban et al.
(2006)
cscara de avellana, naranja
cscara, mazorca de maz,
cscaras de cacahuete, soja
cascos tratados con
frutas NaOH y jack
Ni (II), Cr (II), Cu (II),
Cd (II), Zn (II)
alta de metal
adsorcin
Kurniawan et al.
(2006)
( Cont. )
Page 138
Ligninas y polifenoles en biorremediacin 125
torta de aceite de mostaza
Ni (II), Cu (II), Zn (II),
Cr (II), Mn (II), Cd (II),
Pb (II)
Hasta un 94%
Ajmal et al.
(2005)
fibra de coco qumicamente
modificado con
perxido de hidrgeno
Ni (II), Zn (II), Fe (II)
> 70%
Shukla et al.
(2005)
Tinte de cacahuete cargado
conchas y serrn
Ni (II), Cu (II), Zn (II)
Hasta el 90%
Shukla et al.
(2005)
PFP (fieltro pecolo
vaina de palma peelings
desde el tronco de la palma
rbol)
Ni (II), Pb (II), Cd (II),
Cu (II), Zn (II), Cr (II)
> 70%
Iqbal et al.
(2002)
residuos agro de negro
gramo cscara
Ni (II), Pb (II), Cd (II),
Cu (II), Zn (II)
Pb> Cd> Cu>
Zn> Ni> Cr>
Hasta 93%
Saeed et al.
(2005b)
modificado y
kenaf sin modificar
ncleo, estopa kenaf,
bagazo de caa de azcar,
algodn, fibra de coco,
picea
Ni (II), Cu (II), Zn (II)
Hasta un 88%
Sciban et al.
(2007)
Otros eliminacin de iones metlicos
Otros iones de metales tales como cobre, zinc, arsnico, mercurio y
cobalto presente en
diversos efluentes industriales son motivo de preocupacin ambiental
debido a su toxicidad
incluso en bajas concentraciones. La descarga de estos iones metlicos
en el acutico
sistemas es debido a diversas aplicaciones humanas e industriales (Sud
et al., 2008).
Se estudiaron cscara de arroz y el jacinto de agua junto con otros
adsorbentes de bajo coste
para la eliminacin de arsnico y la eficacia vara entre 71 y 96%
(Mohan
y Pittman, 2007). Copper impregnado y qumicamente modificado
aserrn
tambin fueron juzgados por la eliminacin de arsnico con una eficacia
significativa (Nag et al., 1998).
La utilizacin de aserrn tambin jug papel importante en la eliminacin
de metal de cobre
iones (Ajmal et al., 2005). Pasteles de aceite de mostaza y la corteza
modificada de Pinus radiata
Tambin se han demostrado como biosorbente potencial (Palma et al.,
2003). Todos los resultados
de estas investigaciones se resumen en la Tabla 4.8.
4.5.3 Eliminacin de compuestos fenlicos por Solid Agrcola
residuos
Los fenoles son generalmente considerados como uno de los
contaminantes orgnicos importantes
vertidas al medio ambiente que causan sabor y olor desagradables del
consumo de alcohol
agua. Las principales fuentes de contaminacin de fenol en el medio
acutico son
aguas residuales de pintura, pesticida, la conversin de carbn, resina
polimrica, petrleo
y las industrias petroqumicas.
pgina 139
126 Valentin I. Popa et al.
Tabla 4.8: Resumen de los trabajos llevados a cabo por varios
investigadores utilizando diferentes
materiales de desecho agrcolas para la eliminacin de otros iones
metlicos
Residuos agrcolas
in metlico
resultados
Referencia
tratado qumicamente
aserrn carbonizado
As (III), Cr (VI)
80%, 95%
Nag et al. (1998)
Cobre
impregnado
serrn
As (III)
> 99%
Raji y
Anirudhan (1998)
Cscara de arroz
As (III)
71-96%
Mohan y
Pittman (2007)
cscara de trigo
Cu (II)
99%
Basci et al. (2003)
maz carbonizado
mdula
Cu (II)
90%
Pinus radiata corteza metales mltiples
> 50%
Palma et al. (2003)
Mango aserrn
Cu (II)
60%
Ajmal et al. (2005)
Activado
parthenium
carbn
Hg (II), Cr (VI),
Fe (II)
Significativo
eliminacin
Rajeshwarisivaraj
y Subburam
(2002)
Los carbones activados son los adsorbentes ms utilizados debido a su
excelente
capacidades de adsorcin para los contaminantes orgnicos. Las
capacidades de adsorcin de
carbones activados generalmente estn relacionados con su alta rea
superficial, volumen de poros,
y la porosidad. Su alto coste inicial y la necesidad de un sistema de
regeneracin costosa
hacer que sea menos viable econmicamente como adsorbente.
Tomando estos criterios en
consideracin, la bsqueda de un bajo costo y fcilmente disponibles
adsorbente ha llevado
muchos investigadores a buscar tcnicas ms econmicas y eficientes
para utilizar
origen los residuos agrcolas (Ahmaruzzaman, 2008).
residuos slidos agrcolas primas y materiales de desecho de las
industrias forestales
tales como serrn, cscara de arroz, y la corteza etc. se han utilizado
como adsorbentes.
Serrn, un abundante subproducto de la industria de la madera, con
varios orgnica
compuestos (de lignina, celulosa, hemicelulosas, grupos polifenlicos
que son
til para compuestos fenlicos a travs de diferentes mecanismos de
unin), tiene
demostrado ser un material prometedor para la eliminacin de fenoles
de las aguas residuales.
Nenkova y Redev (2004) mostraron que el aserrn de madera y cortezas
y tcnica
hidrlisis lignina (THL) se puede utilizar como buenos adsorbentes para
la eliminacin de
fenoles disueltos de las aguas. La capacidad de adsorcin de los
adsorbentes investigados
disminuye en el siguiente orden: serrn> madera> ladra> THL. la
adsorcin
de fenol en aserrn, aserrn polimerizado y carbono serrn Tambin se
estudi
por Jadhav y Vanjara (2004).
Corteza, un material rico en polifenoles de la industria de la madera se
ha encontrado
para ser eficaz en la eliminacin de fenoles a partir de soluciones de
agua. Vasquez et al. (2007)
han estudiado la adsorcin de fenoles en Pinus pinaster corteza. La
influencia
de variables tales como la relacin slido / lquido, pH y la concentracin
inicial de fenol
Pgina 140
Las ligninas y polifenoles en biorremediacin 127
en la solucin en la capacidad de adsorcin de la corteza ha sido
analizado. Brs
Et al. (2005) estudiaron la adsorcin de pentaclorofenol en la corteza de
pino. los
la captacin de PCP por la corteza de pino se encontr que era ms
rpido en la fase inicial seguida
por un proceso ms lento. Las especies neutras PCP mostr tener mayor
vinculante
capacidad de corteza de pino que el PCP aninico, que se reflej en una
disminucin
en el coeficiente de distribucin (K
re
) De la isoterma de adsorcin lineal con el
incremento de la solucin de pH de 2 a 7.
La cscara de arroz es otro producto de desecho agrcola que tiene el
potencial de
ser utilizado como un adsorbente, ya que los principales componentes
de la misma son de carbono y slice
(15-22% SiO
2
en forma hidratada amorfa como gel de slice) (Khalid, 2000).
El potencial de adsorcin de cscara de arroz tratada qumicamente y
trmicamente (RHT)
para la eliminacin de 2,4-diclorofenol (DCP) a partir de soluciones
acuosas ha sido
investigado (Akhtar, 2006). adsorcin mxima se logr para RHT. los
se encontr capacidad de adsorcin de RHT a ser significativamente
mayor que qumicamente
tratada cscara de arroz (RHCT) y cscara de arroz sin tratar (RHUT).
Mahvi et al. (2004)
en un estudio comparativo mostr que la ceniza de cascarilla de arroz es
ms eficiente que el arroz
cscara para la eliminacin de fenol.
Otros productos de desecho industrial, tales como mdula, pozos fecha,
paja de trigo, y
virutas de madera, etc. Tambin se han empleado con xito para la
eliminacin de
compuestos fenlicos de las aguas residuales (Ahmaruzzaman, 2008).
4.5.5 El compostaje
La degradacin de la materia orgnica durante el compostaje se puede
ver como una
pelcula de movimiento rpido de los eventos que conducen a la
mineralizacin de la materia orgnica
durante la formacin de humus y el ciclo de humus. Durante el
compostaje, tanto clsica
vas bioqumicas de la descomposicin de molculas orgnicas y el
radical
reacciones mediadas estn operando. Debido al alto contenido de
materia orgnica
del compost, las temperaturas elevadas durante su funcionamiento, y el
alto
relacin C / N en el comienzo de compostaje (que conduce a ciclos de
autolisis con
liberacin de peroxidasas intracelulares), se crea un medio en el que al
menos parte
de las reacciones de radicales inducidos por los hongos de podredumbre
blanca tambin estn operando. Incluso
lignina, cuando se aade artificialmente para el proceso de compostaje,
tambin se degrada
all (Hutterman y Majcherczyk, 1998). En estas condiciones, junto con
la posibilidad de obtener los precursores de humus, un enfoque
alternativo para
biorremediacin es el uso de reacciones mediadas por radicales libres
que son utilizados por
hongos de la pudricin blanca y estn en funcionamiento durante el
compostaje, la biodegradacin de lignina
y en el humus dinmica de los suelos. enzimas y mediadores son
ligninolticos
activas extracelularmente, por lo tanto, los hongos de la pudricin
blanca pueden servir como mejores candidatos para la
biorremediacin de contaminantes altamente apolar. Si las condiciones
no son favorables
para la degradacin espontnea de los contaminantes, se pueden tomar
medidas para
la activacin de la microflora existentes. Si el suelo no se puede quitar,
el
percolacin con el oxgeno y de nutrientes inorgnicos (nitrgeno y
fsforo)
o un aceptor de electrones (nitrato) puede acelerar en gran medida la
tasa de agente txico
Pgina 141
128 Valentin I. Popa et al.
degradacin. Si el suelo se puede tomar desde el sitio, el mtodo ms
simple disponible
para la activacin de la microflora indgena es el proceso de
landfarming. aqu
el suelo se forma en montculos que son entregados a ciertos intervalos.
Durante
este proceso, el suelo se airea y sustratos necesarios se puede aadir.
Debe considerarse, sin embargo, que con este tratamiento compuestos
voltiles
se libera en el aire y cualquier remediacin medida puede ser slo el
resultado
de la transferencia de este compuesto en el aire. Otro enfoque, el uso de
organismos
que crecen en los contaminantes, es el uso de bacterias especialmente
cultivadas. As,
pentaclorofenol (PCP) del suelo contaminadas con fue remediado con un
bacteriana
cepa ( Pseudomonas ) que mineraliza aproximadamente 75% de la PCP
para
CO
2
, Lo que significa una relativamente poca toxicidad residual en el suelo,
medida por
germinacin de las semillas y elongacin de la raz de algunas especies
de plantas y por la toxicidad a
lombrices de tierra. Estas medidas mostraron toxicidad directa del suelo
a bioremediated
ser indistinguible de suelo de referencia limpio. Hubo, sin embargo, un
cambio
basada en la respiracin lignocelulosa. El cambio en la capacidad del
suelo para procesar
lignocelulosa puede reflejar posiblemente un cambio en la composicin
de la comunidad de
los hongos, que son los organismos predominantes implicadas en
lignocelulosa
degradacin. Se observ que la simbiosis planta-microorganismo pueden
ser sensibles
indicadores de perturbacin ecolgica del suelo. Rhizobium la formacin
de ndulos y
vesicular-arbuscular micorrizas (MVA) infeccin por hongos se vieron
afectados en
el suelo remediado a pesar de que varias otras medidas relacionadas
con las plantas de toxicidad
(Germinacin y elongacin de la raz) no se vieron afectados. hongos
Rhizobial y VAM
simbiosis planta / microorganismo son asociaciones de importancia
ecolgica; particularmente
en los ecosistemas de entrada agronmico naturales o bajas donde
representan respectivamente,
los principales medios de entradas de nitrgeno y fsforo a la vegetacin
en terrestre
ecosistemas (Abaecherli y Popa, 2005).
La simbiosis planta-microbios tambin puede ser til como indicadores
para el
efectos ecolgicos y de seguridad ambiental de los productos de
biotecnologa tales
como agentes bioremediating.
cepas bacterianas adecuadas estn aislados por una serie de cultivos de
enriquecimiento,
crecido en una base de alimentos baratos, tales como salvado de trigo, y
se aadi a suelos contaminados.
Todos los procesos bacterianos tienen en comn que los organismos
utilizan los xenobiticos
sustancias como un sustrato para la generacin de la produccin de
energa y la biomasa.
Un consorcio de microorganismos implicados en la formacin del suelo,
comercialmente
disponible podra estar compuesto por:
hongos:
Brown hongos rot - por ejemplo, Trichoderma reesei, Trichoderma
harzianum (hongos
descomponer el material vegetal a la fuente de glucosa-carbono)
Pudricin blanca hongos - por ejemplo, Phanerochaete chrysosporium
(hongos descomponen
muy rpidamente la materia orgnica y son especficos para la lignina)
Hongos micorrizas - suelo pueden ser mejoradas con estos hongos que
impiden
compacidad del suelo, permitir que el agua se filtre en el suelo, cerca de
la absorcin de agua
pgina 142
Ligninas y polifenoles en biorremediacin 129
la superficie del suelo, a estabilizar el suelo e inhiben la erosin.
Micorrizas plantas hongos de ayuda
para adquirir sus nutrientes
bacterias:
Athrobacter globuliformis, baduiis Streptomycetes (estas bacterias viven
en estrecha
cercana con los hongos y que utilizan la descomposicin de los
subproductos y la convierten
en compuestos de carbono y nitrgeno)
Bacterias fijadoras de nitrgeno: Azotobacter vinelandii, Rhizobium sp.
(Ellos
utilizar el nitrgeno gaseoso de la atmsfera y lo convierten en
amoniaco
compuestos. Estas bacterias producen hormonas promotoras del
crecimiento que aumentan
el desarrollo de la raz del cabello, lo que permite que las plantas
acumulan una mayor cantidad de
nutrientes).
Pseudomonas fluorescens que producen antibiticos que atacan y matan
agentes patgenos.
4.6 Conclusiones
Los procesos de biorremediacin se podran desarrollar utilizando las
ligninas y polifenoles
existente en la biomasa o en forma aislada y modificado teniendo en
cuenta su
participacin en la formacin de humus. Las reacciones implicadas en
los sistemas naturales
transformacin de la biomasa podra tener un papel importante en la
transformacin
y el secuestro de contaminantes. Es posible obtener algunos efectos
sinrgicos
por una combinacin entre la biodegradacin de los componentes de la
biomasa con la planta
cultivo.
La comprensin de los mecanismos que participan en la formacin de
humus,
microorganismos y plantas metabolismo puede ofrecer condiciones
ptimas para
biorremediacin de acuerdo con la naturaleza de los contaminantes. Por
lo tanto, el estudio de la
influencia de las estructuras qumicas y fsicas de biomasa junto con
biolgica
transformacin de sus componentes (especialmente ligninas y
polifenoles) bajo
las condiciones del suelo en la biorremediacin requiere de mayor
investigacin.
materiales de desecho agrcolas celulsicos son una fuente abundante
de
biosorcin de metal significativa. Los grupos funcionales estn presentes
en la agricultura
residuos de biomasa debido a sus composiciones o pueden ser
introducidos por medios qumicos
modificacin (acetamido, alcohlico, carbonilo, fenlico, amido, amino,
grupos sulfhidrilo etc.). Estos grupos tienen la capacidad, en cierta
medida a
obligar a los metales pesados por donacin de un par de electrones de
estos grupos para formar
complejos con los iones metlicos en solucin o quelatos.
Biosorcin es un proceso relativamente nuevo que ha demostrado ser
muy prometedor en
la eliminacin de contaminantes de efluentes acuosos. El uso de stos
bajo coste
biosorbentes se promueve ya que son relativamente baratos o de ningn
costo, facilidad
disponible, renovable y muestran una elevada afinidad por los metales
pesados.
La modificacin qumica mejora la capacidad de adsorcin y la
estabilidad de
biosorbentes.
Pgina 143
130 Valentin I. Popa et al.
El proceso de biosorcin requiere ms investigacin en la direccin
de modelado, la regeneracin de biosorbente y recuperacin de iones
metlicos y
inmovilizacin del material de desecho para mejorar la eficiencia y la
recuperacin.
metales pesados txicos tales como Pb (II), Cd (II), Hg (II), Cu (II), Ni (II),
Cr (III),
y Cr (VI), as como algunos elementos de los grupos de lantnidos y
actnidos, pero
tambin compuestos fenlicos se han eliminado con xito de
contaminada
aguas residuales industriales y municipales utilizando diferentes
materiales de desecho agrcolas.
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La tecnologa de biorremediacin de los desechos peligrosos - Avances
Recientes 135
5
La tecnologa de biorremediacin
para los desechos peligrosos
- Avances recientes
MH Fulekar
5.1 Introduccin
Residuos Peligrosos: Una sustancia que no tiene ningn uso econmico
ms all y es
desecharse a tierra, el agua o el aire que podran ser potencialmente
perjudiciales para el hombre
y su entorno, en razn de sus propiedades fsico-qumicas, biolgicas.
Medio Ambiente (Proteccin) 1986 bajo el Residuos Peligrosos (Gestin
y direccin) Regla (1989) describe sobre los residuos peligrosos y el
estado
para garantizar que los residuos peligrosos se manejen de manera que
queden protegidos
la salud humana y el medio ambiente contra los efectos nocivos que
pueden derivarse
de tales desechos.
La sociedad global en el siglo XXI se enfrenta al reto de
la mejora de la calidad del aire, el medio ambiente agua y el suelo y el
mantenimiento de la
Balance ecolgico. India de hoy cuenta con el honor de ser entre las 10
ms
industrializados los pases del mundo. El rpido crecimiento de la
industrializacin,
la urbanizacin, el desarrollo de la agricultura moderna y la generacin
de energa como resultado
en la explotacin de los recursos naturales para el cumplimiento de los
deseos humanos y la necesidad
que han contribuido de perturbar el equilibrio ecolgico del que depende
la calidad de nuestro medio ambiente. Los seres humanos en cierto
sentido son el producto de
su entorno. la relacin del hombre con el medio indica que la
contaminacin tiene
un origen social. El avance tecnolgico moderno en los procesos
qumicos
se ha incrementado el nivel de contaminacin por encima de las
capacidades de auto-limpieza de la
ambiente. Uno de los principales problemas en los ltimos tiempos es la
amenaza a la vida humana
causado por el deterioro progresivo del medio ambiente. Tecnolgico
MH Fulekar (ed.),
DOI 10.1007 / 978-90-481-3678-0_5, 2010 de Capital Publishing
Company
La tecnologa de biorremediacin: Avances recientes ,
135
pgina 149
136 MH Fulekar
revolucin ha trado nuevos cambios en los productos y procesos en
industrias.
Los residuos generados por el desarrollo de productos y procesos son de
preocupacin para los ambientalistas. Las actuales tecnologas de
tratamiento no son
suficiente y / o eficaz para tratar los contaminantes hasta el nivel
aceptable como
por las leyes de proteccin del medio ambiente. El crecimiento
acelerado de la industria
actividades han aumentado los desechos peligrosos. Las principales
fuentes de la peligrosa
contaminantes son generados por las industrias qumicas. obras de
teatro de la industria qumica
un papel vital en el crecimiento econmico y el desarrollo del sector de
la fabricacin de un
pas en desarrollo (Fulekar, 2009).
La rpida industrializacin y urbanizacin en los ltimos decenios
muchos han
dado lugar a la contaminacin de todos los componentes del medio
ambiente es decir, el aire,
el agua, los suelos e incluso nuestra comida. La contaminacin de las
aguas subterrneas, aguas superficiales,
suelo y el aire con productos qumicos peligrosos y txicos es uno de los
principales problemas
el mundo industrializado se enfrenta hoy en da. Por lo que la solucin a
este problema es
respecta, no es urgente necesidad de desarrollar tecnologas que
consuman menos
recursos, menos tiempo y sera favorable al medio ambiente. Por lo
tanto, biolgica
enfoques recibieron gran atencin en los ltimos aos. Uno entre los
enfoques biolgicos eficaces para hacer frente a la contaminacin
ambiental
es la biorremediacin. Como se desprende de la propia palabra
'biorremediacin' (bio +
remediacin) debe implicar dos componentes: la bio es decir, el
componente vivo
y remediacin es decir, el tratamiento del contaminante. La
biorremediacin puede ser
define como cualquier proceso que utiliza microorganismos, hongos,
plantas verdes o su
enzimas para devolver el medio ambiente natural alterado por
contaminantes a su original
condicin. En todo el mundo las tecnologas de biorremediacin se
clasifican como
tecnologas innovadoras. Sin embargo, esto no es un fenmeno nuevo.
Actualmente
biorremediacin ha estado ocurriendo desde que la vida comenz en
este planeta. Es un relativamente
proceso lento, pero con el tiempo la naturaleza ha sanado en s de todas
las perturbaciones.
Como un contaminante se introduce en el medio ambiente, los microbios
de la
alrededores conseguir poco a poco adaptado a este nuevo entorno. Ellos
comenzaron
para elaborar el proceso de degradar el contaminante por la evolucin
de la capacidad
para usarlo como fuente de carbono o la energa. Durante este proceso
natural, la naturaleza
satisface las necesidades nutricionales y fisiolgicas de las bacterias y la
general
proceso es por lo tanto bastante lento. Con la rpida industrializacin y
urbanizacin de
el mundo, hemos introducido los contaminantes a muy alta velocidad y
ahora
necesitamos una solucin de limpieza instantnea que no est dentro
del mbito de lo natural
procesos. La biorremediacin es una alternativa atractiva y potencial
para el tratamiento
del contaminada medio ambiente. La biorremediacin se ha demostrado
eficaz para
el tratamiento de suelos y contaminacin de aguas subterrneas en
numerosos lugares en todo el
mundo, y es aceptada como una tecnologa viable remediacin de los
Estados Unidos
Agencia de Proteccin Ambiental, Environment Canada, y otra
reguladora
agencias en todo el mundo. Biorremediacin tiene numerosas
aplicaciones, incluyendo
limpieza de las aguas subterrneas, suelos, lagunas, lodos, y las
corrientes de desechos proceso.
La biorremediacin es ms rentable que la fsica y qumica convencional
Pgina 150
La tecnologa de biorremediacin de los desechos peligrosos - Avances
Recientes 137
procesos. Las principales ventajas incluyen la capacidad de eliminar los
contaminantes,
para aprovechar los procesos biogeoqumicos naturales, alternativa
rentable, menos
requerimiento de energa en comparacin con otras tecnologas, menos
mano de
supervisin y, a menudo transformndolas en inocuo subproductos tales
como
CO
2
, Nutrientes y biomasa.
Las tcnicas innovadoras para la biorremediacin de residuos peligrosos
han sido
desarrollado. El uso de estudios de investigacin a escala piloto
incorporacin de una nueva fuente
de consorcio microbiano para la biorremediacin de compuestos de
desechos peligrosos,
tanto orgnicos e inorgnicos en los bioreactores diseados y
desarrollados, tienen
ha llevado a cabo.
5.2 La biorremediacin de plaguicidas en el suelo superficial
tratamiento biorreactor
La fabricacin y el uso de plaguicidas ha ido en aumento con el aumento
de plagas
problemas en la agricultura. Los datos muestran la Organizacin Mundial
de la Salud (OMS) que
slo el 2-3% de los pesticidas qumicos aplicados se utilizan eficazmente
para prevenir,
controlar y mitigar las plagas mientras que el resto permanece en el
suelo (EPA,
2005). Como resultado, los residuos de plaguicidas permanece en el
medio ambiente de agua del suelo
causando toxicidad para la biota y entrando as en la cadena alimentaria
(CFTRI,
2003).
Los residuos generados en la industria de los plaguicidas se ha
convertido en un medio ambiente
problema debido a la presente tratamiento de residuos insuficiente e
ineficaz
la tecnologa que implica el tratamiento biolgico fsico-qumicas y. El
reciente
avances en la tecnologa de biorremediacin utilizando consorcio
microbiano han sido
encontrado eficaz para el tratamiento de los pesticidas en el entorno del
agua del suelo (Gita
y Fulekar, 2008). Un biorreactor tratamiento superficial del suelo ha sido
diseado y
desarrollado (Fig. 5.1) por el autor en el que la biorremediacin de
comnmente utilizado
pesticidas a saber, clorpirifos, cipermetrina, fenvalerato y trichlopyr,
butoxi
ster etlico a concentraciones variables viz. 20, 50 y 100 mg / kg han
sido
llevado a cabo utilizando estircol de vaca consorcios microbianos bajo
simulado ambiental
condiciones.
Las condiciones de biorremediacin se han controlado y mantenido
durante
el estudio. La investigacin se ha extendido hasta los compuestos
principales son
convertido en intermedios / compuestos menos perjudiciales y / o medio
ambiente-
compuestos amigables en la aclimatacin a largo plazo. Los resultados
presentados aqu
poner de relieve el potencial de estircol de vaca consorcios microbianos
para la biorremediacin de
El suelo contaminado con pesticidas en biorreactor tratamiento
superficial del suelo.
El estircol de vaca se caracteriz por fsico-qumica y microbiana
parmetros. Los datos indican la presencia de carbono orgnico,
nitrgeno,
fsforo, sulfato, cloruro de calcio, sodio, potasio y magnesio en
cantidades suficientes que proporcionan macro y micro nutrientes para
la proliferacin
de consorcio microbiano. El consorcio microbiano evaluado en estircol
de vaca
incluyen: Pseudomonas pseudoalcaligenes cepa MHF ENV 11,
Owenweeksia
Pgina 151
138 MH Fulekar
hongkongensis cepa MHF ENV 10, Alcaligenes sp. MHF ENV 9,
Proteobacterium MHF ENV 7, Flavobacterium sp. MHF ENV 5,
Pseudomonas
plecoglossicida cepa MHF ENV-1, Pseudomonas putida cepa MHF 7109,
Bacillus acidicola MHF ENV 8, Alcaligenes faecalis subsp. Parafaecalis
MHF
ENV 8, Xanthomonas theicola MHF ENV 10, y Providenciastuarti MHF
ENV 10 (Tabla 5.1).
La presencia de nutrientes, as como los microorganismos en estircol de
vaca y el suelo
se ha encontrado que tienen gran influencia en la biorremediacin de
pesticidas.
Tabla 5.1: composicin microbiana de estircol de vaca y su nmero de
acceso de GenBank
No.
Cepa bacteriana
nmero de acceso de Genbank
1
Alcaligenes sp. MHF ENV 9
GU055763
2
Proteobacterium MHF ENV 7
GU055762
3
Flavobacterium sp. MHF ENV 5
GU055761
4
Pseudomonas pseudoalcaligenes cepa
MHF 11 ENV
GU055765
5
Owenweeksia hongkongensis cepa MHF
ENV 10
GU055764
6
Pseudomonas plecoglossicida MHF cepa
ENV-1
GQ301534
7
Pseudomonas putida cepa MHF 7109
FJ975149
8
Alcaligenes faecalis subsp. parafaecalis
clonar MHF ENV 8
GU183257
9
Bacillus acidicola clon MHF ENV 8
GU183258
10
Providencia stuartii clonar MHF ENV 10
GU183259
11
Xanthomonas theicola clonar MHF
ENV 10
GU183260
Higo. 5.1: biorreactor tratamiento del suelo superficial.
Pgina 152
La tecnologa de biorremediacin de los desechos peligrosos - Avances
Recientes 139
5.2.1 clorpirifos
La concentracin de clorpirifos y sus intermedios durante la
biorremediacin
de 25, 50 y 100 mg / kg clorpirifos suelo enmendado se estim y es
presentado en la Fig. 5.2. Los anlisis realizados en GC-MS mostraron
que
clorpirifos se hidrolizan rpidamente a 3,5,6 tricloro 2-piridinol (TCP) en
25 y 50 mg / kg clorpirifos modificadas suelo mientras que en 100 mg /
kg clorpirifos
suelo enmendado estaba presente hasta el 3er da del experimento. Los
anlisis de residuos
mostraron que los intermedios ms persistentes extrados fueron
piridina bencilo
y TCP. En biorreactor que contiene 25 mg / kg clorpirifos claveteado
suelo, durante
el ocho das de tratamiento, TCP se detect en el suelo durante cuatro
das y bencilo
piridina durante seis das y luego potencialmente metabolizado
adicionalmente en otra ms simple
compuestos. En el caso de 50 mg / kg clorpirifos modificados suelo, el
estudio
mostr que el TCP se detect en el suelo durante un perodo de seis das
y muy baja
concentraciones de piridina bencilo se encontraron en el suelo hasta el
quinto da. En el
caso de 100 clorpirifos mg / L de suelos modificados, los datos indican
que tanto TCP
y piridina bencilo estaban presentes en el suelo hasta el final de la
experimental
estudio (Gita y Fulekar, 2008).
Higo. 5.2: Concentracin de productos intermedios encontrados
durante la biorremediacin de
clorpirifos modificados suelo. (A) del suelo 25 mg / L clorpirifos
modificada, (b) 50 mg / L
clorpirifos modificado del suelo y (c) 100 mg / L clorpirifos suelo
enmendado donde
A = Clorpirifos, B = piridina bencilo y C = TCP.
Los valores se expresan como media SD de experimentos por
triplicado.
pgina 153
140 MH Fulekar
5.2.2 Cipermetrina
La biorremediacin de cipermetrina en las tres concentraciones, es
decir, 25, 50
y 100 mg / kg en el suelo tratadas con suspensin de estircol de vaca
activado se presenta en
Higo. 5.3. El anlisis cuantitativo y cualitativo realizado en CG-EM
mostraron que la cipermetrina se hidroliz a benzaldehdo 3-fenoxi y
alcohol 3-fenoxi-bencil durante el perodo de la biorremediacin en el
suelo superficial
Tratamiento biorreactor.
Higo. 5.3: Concentracin de productos intermedios encontrados
durante la biorremediacin de cipermetrina
suelo enmendado. (A) 25 mg / cipermetrina modificado suelo L, (b) 50
mg / L cipermetrina
suelo modificado y (c) 100 mg suelo cipermetrina modificado / L donde A
= cipermetrina,
B = 3-fenoxi benzaldehido y alcohol benclico C = 3-fenoxi y D = 3-
fenoxi-
cido benzoico. Los valores se expresan como media SD de
experimentos por triplicado.
5.2.3 fenvalerato
La biodegradacin de fenvalerato a una concentracin de 25, 50 y 100
mg / kg
modificado suelo, y sus metabolitos intermedios se presentan en la Fig.
5.4.
Los compuestos tales como 4-cloro-alfa (1-metiletil) actico benceno
y alcohol alfa-ciano-3-fenoxibencil se encontraron siendo el principal
los compuestos intermedios de la degradacin de fenvalerato. Despus
de duracin de una semana, a 100 mg /
concentracin kg, fenvalerato fue todava detectado en el suelo. Sin
embargo, en 50 y
25 mg / kg, se encontr fenvalerato metaboliza completamente en sus
intermedios
por la accin de microorganismos estircol de vaca.
pgina 154
La tecnologa de biorremediacin de los desechos peligrosos - Avances
Recientes 141
Higo. 5.4: Concentracin de productos intermedios encontrados
durante la biorremediacin de
Fenvalerato modificado suelo. (A) 25 mg / L Fenvalerato suelo
enmendado, (b) 50 mg / L
Fenvalerato suelo modificado y (c) 100 mg / L suelo Fenvalerato
modificada donde
A = fenvalerato, B = 4 cloro-alfa (t-metiletil) actico benceno y
alcohol C = alpha-ciano-3-fenoxibencilo.
Los valores se expresan como media SD de experimentos por
triplicado.
5.2.4 Trichlopyr butoxietilo Ester (TBEE)
La concentracin de TBEE y sus intermedios durante el curso de
biorremediacin de suelos contaminados TBEE superficie en 25, 50 y
100 mg / kg
fueron estudiados. Es evidente a partir de los datos de GC-MS que TBEE
se rompi rpidamente
hacia abajo en trichlopyr cido mediante hidrlisis del resto funcional
ster (Fig.
5.5). Los compuestos trichlopyr se encontraron piridinol cido y 3,5,6-
tricloro
siendo los principales metabolitos de la biodegradacin TBEE. En el
biorreactor
que contiene suelo TBEE 25, 50 y 100 mg / kg contaminada
respectivamente, los resultados
sugerir que; TBEE se ha convertido en trichlopyr cido dentro de las 24
horas. En
100 mg / kg de cido TBEE suelo contaminado trichlopyr y 3,5,6
tricloropiridinol
(TCP) se encontraron durante los ocho das del experimento.
La biorremediacin condiciones-pH (6,5-8,0), C: relacin P: N (100: 10:
1),
DO (10-12 mg / L), la humedad (60-80%) y temperatura (25-28 C)
-tienen
sido supervisada y mantenida durante la biorremediacin de cada
plaguicida en
concentraciones variables. Cuanto mayor sea la disponibilidad de
nutrientes y ms grande microbiana
poblacin del estircol de vaca y el suelo se encontr para influir en la
biorremediacin
de pesticidas bajo condiciones ambientales controladas. Estudios de
investigacin
pgina 155
142 MH Fulekar
compila y se demostr mostr que la adaptabilidad de los
microorganismos durante
biorremediacin libera enzimas que metaboliza amplio espectro de
txico
productos qumicos (Fulekar, 2005). La tcnica de tratamiento de suelo
presente superficie utilizada
para la biorremediacin de pesticida usando activado estircol de vaca y
microorganismos del suelo flora
sera una tecnologa de tratamiento eficaz para los pesticidas.
Higo. 5.5: Concentracin de productos intermedios encontrados
durante la biorremediacin de TBEE
suelo enmendado. (A) 25 mg / TBEE modificado suelo L, (b) 50 mg / L
TBEE modificado del suelo y (c)
100 mg / L TBEE modificado suelo donde A = TBEE, cido B = Trichlopyr
y C = TCP.
Los valores se expresan como media SD de experimentos por
triplicado.
5.3 La biorremediacin de pesticida usando Novel
Estircol de vaca microbiana Consorcio
5.3.1 Secuencia reactor biolgico
Secuencia reactor biolgico (SBR) ha sido diseado y fabricado para
estudiar
la biorremediacin de efluentes clorpirifos simulado. El SBR consiste en
una
reactor de activacin, reactor de suelo y el reactor de biomasa
inmovilizada. la activacin
reactor (1 st reactor) consiste en un recipiente de vidrio (8L 6B 7H)
en el que el
simulado efluente 500 mg / L de clorpirifos fue tomada y suspensin de
estircol de vaca como una
se aadi fuente de consorcio microbiano para la biorremediacin. El
primer reactor
estaba conectado a la tierra reactor es decir, 2 nd reactor (9L 7B
13H) en la que
grava, arena y tierra se dispusieron en capas uno encima del otro sobre
la placa perforada
en el fondo. El suelo se sec al aire se moli y pas a travs de un 2 mm
de poro
tamiz tamao, utilizado para el experimento. Gravas inicialmente
lavadas se llena en el
parte inferior por encima de la placa perforada en el reactor de suelo,
que alcanz 5 altura
desde el fondo. Del mismo modo arena, inicialmente se lav varias
veces, se empaquet
Pgina 156
La tecnologa de biorremediacin de los desechos peligrosos - Avances
Recientes 143
por encima de la grava, que tambin alcanza una altura 5 encima de la
capa de grava. Las cuatro
kg de muestra de suelo medido estaba lleno por encima de la capa de
arena-grava que alcanz
una altura 12 encima de la capa de arena. Inicialmente, se introdujo
agua desde la parte superior
del reactor del suelo; tan pronto como la superficie del suelo se hizo un
poco saturado, la
flujo se detuvo. Se dej que la tierra se equilibre durante dos das. La
tierra
reactor (2 nd reactor) fue conectado adems al reactor de biomasa
inmovilizada
es decir, 3 rd reactor (9L 7B 4H); en el que el efluente se gote hacia
abajo desde
capa de suelo de arena-grava en la parte inferior del colector. Una
fotografa de Secuencia
Reactor Biolgica (SBR) se muestra en la Fig. 5.6.
Higo. 5.6: Secuencia reactor biolgico en el reactor de activacin de
laboratorio (A), (B) Soil
reactor, (C) inmovilizada biomasa reactor y (D) de la bomba peristltica.
5.3.2 juego experimental
Se estudi biorremediacin de efluente simulado con 500 mg / l de
clorpirifos
en la Secuencia Reactor Biolgica en tres etapas a saber. reactor de
activacin (primera
reactor), reactor de suelo (segundo reactor) y el reactor de biomasa
inmovilizada (tercera
reactor). En el primer reactor simulado efluente clorpirifos se mezcl con
vaca suspensin de estircol en la proporcin de 1: 4. La suspensin se
deja reaccionar con
efluente clorpirifos por un perodo de 12 horas para la biorremediacin
inicial. los
condicin aerobia se mantuvo mediante el suministro de aire simtrico
0,9-1,2 m 3 / h
y frecuente agitacin mecnica. Despus, la suspensin efluente se
transfiri a
reactor suelo (segundo reactor) utilizando la bomba peristltica. Se
encontr que el efluente
restante en contacto con los medios de comunicacin del suelo durante
un perodo de 12 horas durante el goteo.
El efluente de pesticidas se biodegrada en los medios de comunicacin
del suelo bajo la influencia de la vaca
microflora estircol del suelo como goteando tcnica de filtro. Se recogi
el infiltrado
pgina 157
144 MH Fulekar
en el reactor de biomasa tercer reactor es decir, inmovilizado, donde la
biorremediacin
se llev a cabo adicionalmente utilizando biomasa inmovilizada estircol
de vaca. despus de la terminacin
de un ciclo, el influente se recicl de nuevo usando la bomba peristltica
a la primera
reactor para el tratamiento adicional hasta efluente clorpirifos se
biodegrada en su
compuestos menos txicos o inocuos. El estudio se llev a cabo la
biorremediacin
para un total de 10 ciclos durante un perodo de 21 das en SBR. Las
muestras fueron extradas
del reactor de activacin, reactor de suelo y el reactor de biomasa
inmovilizada despus de cada
12 hrs. Las muestras se almacenaron en viales de vidrio en condiciones
de refrigeracin. la extraccin
de clorpirifos y sus intermedios a partir de muestras de efluentes hecho
por lquido
mtodo de particin. extractos de efluentes se analizaron mediante
cromatografa de gases /
espectroscopa de masas (GC-MS) (Hewlett Packard GC-MS instrumento
Modelo No.
G1800A) para clorpirifos y sus intermedios.
5.3.3 La biorremediacin de clorpirifos en SBR: Investigacin
Recomendaciones
5.3.3.1 Simulacin de efluentes en la BS
Como se dijo anteriormente una secuencia de reactor biolgico (SBR),
diseado y desarrollado
para llevar a cabo la biorremediacin de efluentes clorpirifos simulada,
tiene tres
etapas a saber. interaccin de clorpirifos efluente con estircol de vaca
microbiana suspensin
consorcio en el reactor de activacin (primer reactor); seguido de
efluente
infiltracin a travs del suelo, arena y grava como un filtro de goteo, en
el reactor suelo
(Segundo reactor) y una mayor interaccin con la biomasa estircol de
vaca inmovilizado
reactor (tercera reactor). La interaccin de consorcio microbiano con
clorpirifos
efluente se dej durante un perodo de 12 horas en cada reactor y,
posteriormente, la
reciclaje del efluente se continu durante un perodo de 12 das. Un total
de 10
ciclos de tratamiento se llevaron a cabo durante el perodo de estudio de
biorremediacin
en SBR.
5.3.3.2 Activacin del Reactor
Figura 5.7 muestra que clorpirifos efluente simulado fue degradado
desde 494
mg / L a 98 mg / L durante los ciclos de tratamiento posteriores y fue
an ms degradada
a 10 mg / L en el sexto reciclado de efluentes. Despus de ello, la
concentracin de
clorpirifos se encontr insignificante en reactor de activacin durante un
perodo de 21
das. Los compuestos tales como TCP y 2,4-BIS fenol (1,1-dimetiletil)
fueron encontrados como los intermedios prominentes durante la
biorremediacin de
clorpirifos simulada efluente. (Fig. 5.7). El TCP intermedio fue encontrado
en una
concentracin de 88 mg / L durante el segundo ciclo de tratamiento, que
posteriormente
disminuido a una concentracin de 50 mg / L durante el curso del
experimento sobre
un perodo de 21 das, es decir, dentro de 10 ciclos. Otros intermedios
2,4-bis (1,1-
se detect dimetiletil) fenol a una concentracin de 27 mg / L
inicialmente,
que disminuy gradualmente durante el estudio biorremediacin
durante un perodo de
10 ciclos (Fig. 5.7).
Pgina 158
La tecnologa de biorremediacin de los desechos peligrosos - Avances
Recientes 145
Pgina 159
146 MH Fulekar
Higo. 5.7: La biorremediacin de clorpirifos en secuencia
Reactor biolgico:
(A) reactor de activacin, (b) del suelo infiltrarse, (c) reactor biomasa
inmovilizada y
(D) del suelo. A = Clorpirifos, B = TCP y C = 2, 4-bis (1, 1-dimetiletil)
fenol.
5.3.3.3 suelo Infiltracin
La GC-MS anlisis cuantitativo y cualitativo de infiltrado suelo ilustra
presencia de clorpirifos compuestos padre durante el estudio
biorremediacin. los
concentracin de clorpirifos registr a 235 mg / L en el suelo infiltrarse
shows
la presencia de clorpirifos compuesto original. La concentracin de
clorpirifos
fue grabado en 235 mg / L en el suelo infiltrarse durante el primer ciclo
del estudio,
que disminuy posteriormente hasta una concentracin de 5 mg / L
durante un periodo de
siete ciclos de tratamiento. Durante las ltimas etapas de la
biorremediacin de efluentes,
clorpirifos no se detect en el infiltrado del suelo. En comparacin con la
activacin
reactor, se registraron intermedios tales como TCP a una concentracin
ms alta en
el infiltrado del suelo (Fig. 5.7). Se encontr que la concentracin inicial
de TCP para ser
20 mg / L en el infiltrado del suelo, que con el tiempo se increment a
una concentracin de
102 mg / L en el cuarto ciclo del estudio biorremediacin y luego,
gradualmente
disminuido a una concentracin de 93 mg / L durante un periodo de 10
ciclos de tratamiento.
Los intermedios 2,4-bis se encontr (1,1-dimetiletil) fenol variando
durante
el curso de experimento llevado a lo largo de un perodo de 21 das
hasta la finalizacin
de 10 ciclos, a menos de 21 das.
5.3.3.4 Inmovilizado Biomasa Reactor
En el reactor de biomasa inmovilizada, el suelo se infiltr desde el
segundo reactor fue de
recogido y tratado con biomasa en suspensin estircol de vaca activado
inmovilizado
durante un perodo de 12 horas durante cada ciclo de tratamiento.
Figura 5.7 muestra que la
concentracin de clorpirifos persista durante un perodo de siete ciclos,
despus de lo cual el compuesto era no observada. Sin embargo, ligeras
variaciones en la
concentracin de TCP y 2, 4-BIS se observaron (1,1-dimetiletil) fenol
durante el estudio en el reactor de biomasa inmovilizada.
pgina 160
La tecnologa de biorremediacin de los desechos peligrosos - Avances
Recientes 147
5.3.3.5 Reactor de suelos
Despus del tratamiento durante 12 horas en el reactor de activacin, el
efluente fue rociada
sobre la capa de suelo-arena-grava en reactor suelo como un filtro
percolador. La concentracin
de clorpirifos y sus intermedios en reactor suelo fueron analizados
utilizando GC-
MS y presentado en la Fig. 5.8. La concentracin de clorpirifos se
encontr como
267 mg / kg en el suelo durante el octavo ciclo y despus persistido
hasta el final
del estudio durante un perodo de 10 ciclos de tratamiento dentro de un
perodo de 21 das.
El TCP compuesto fue encontrado como el nico intermedio de clorpirifos
efluente
degradacin en el suelo (Fig. 5.8). La concentracin de TCP se van desde
una
concentracin de 53 mg / kg a 96 mg / kg durante la biorremediacin de
efluentes en
el reactor suelo de SBR. Despus de la finalizacin del experimento
biorremediacin
en SBR, el suelo experimental se mantuvo a un lado en un biorreactor
separado y
se analiz para su posterior biodegradacin de clorpirifos durante un
perodo de cinco
semanas. condiciones de biorremediacin como la humedad, la aireacin
y la accin microbiana
se control y se mantuvo en el suelo experimental. Los datos de GC-MS
representa una considerable cantidad de disminucin de la
concentracin clorpirifos. los
se observ concentracin de clorpirifos ser 326 mg / kg durante la
primera
semanas, que disminuy rpidamente hasta una concentracin de 81
mg / kg en el quinto
semana de clorpirifos efluente de biorremediacin de suelos. El TCP
intermedia tambin
disminuido de una concentracin de 110 mg / kg a una concentracin de
64 mg / kg
durante un perodo de cinco semanas en el suelo experimental.
Higo. 5.8: La biorremediacin de clorpirifos en el terreno experimental:
A = Clorpirifos, B = TCP.
5.3.4 La biorremediacin de clorpirifos en SBR - Datos
Interpretacin
El anlisis GC-MS de la muestra de efluente del reactor de activacin
(primera
reactor) de la SBR muestra una reduccin en la concentracin de
clorpirifos con
aumento del nmero de ciclos de tratamiento. Los datos analticos de
GC-MS ilustran
Pgina 161
148 MH Fulekar
que el clorpirifos ha convertido en productos intermedios tales como TCP
y 2,4-bis
(1,1-dimetiletil) fenol durante el segundo ciclo de la biorremediacin.
Presencia
de TCP y 2,4-bis (1,1-dimetiletil) fenol se observ en todo el
estudiar en reactor de activacin durante un perodo de 10 ciclos. Sin
embargo, el porcentaje
disminuir en TCP en el reactor de activacin, durante el perodo de
estudio, se encontr
para ser 47,5%, mientras que la reduccin porcentual en el fenol 2,4-bis
(1,1-dimetiletil)
fue de 14,8%.
El clorpirifos efluente pasa a travs del reactor del suelo (segundo
reactor)
se recogi en la parte inferior y se analizaron para la biodegradacin de
clorpirifos.
Los resultados muestran que, clorpirifos fue persistente en el suelo
infiltrarse a travs de una
perodo de siete ciclos y luego se biodegrada posteriormente.
Concentracin
de productos intermedios tales como TCP se encontr a una
concentracin mucho mayor en el
suelo infiltrarse en comparacin con la de reactor de activacin. El suelo
era infiltrado
permitido adems a reaccionar con el consorcio estircol de vaca
inmovilizado en inmovilizada
reactor de biomasa. Las concentraciones de clorpirifos y sus
intermedios,
despus del tratamiento de la biomasa inmovilizada, se encontr que
eran ms o menos la misma
como la que se observa en el infiltrado del suelo. biodegradacin
significativa no ha sido
observado durante el tratamiento de biomasa estircol de vaca
inmovilizada, que se atribuye
para aumentar la concentracin de TCP metabolito principal en el
efluente.
Tambin se analizaron las muestras de suelo del reactor de suelo de la
SBR para
clorpirifos biodegradacin por el efecto acumulativo de microbiana
estircol de vaca-suelo
consorcio. muestreo de suelos Composite se hizo y se analiz para
clorpirifos
y sus intermedios mediante GC-MS. Los microorganismos presentes en
el estircol de vaca
y el suelo han actuado como un consorcio para la biorremediacin de
clorpirifos
efluente en el reactor de suelo de la SBR. Los datos de GC-MS muestran
que la
concentracin de clorpirifos estaba aumentando junto con el nmero de
tratamiento
ciclos durante un perodo de estudio de investigacin, que se atribuye a
la adsorcin
capacidad del suelo partculas hacia clorpirifos. Mecanismo de adsorcin
de
clorpirifos en las partculas del suelo depende de la variedad de
variables tales como catin
capacidad de intercambio (CEC) de suelo, la textura del suelo y el
contenido de carbono orgnico de la
suelo (Christophersen et al., 1980). Se encontr que el TCP intermedio
primario
persistir en el suelo durante el curso del experimento. Sin embargo, la
adsorcin
potencial de partculas de suelo hacia TCP era baja y el TCP intermedio
se
comparativamente mvil en el suelo (US EPA, 1992). La concentracin
en porcentaje
Se observ un aumento de TCP en el suelo experimental del reactor de
la suciedad se
73,5% durante un perodo de 10 ciclos.
Desde que se encontraron los clorpirifos adsorbido a las partculas del
suelo a una sustancial
concentracin en el reactor suelo, el suelo experimental se control por
separado en
otro biorreactor para ms clorpirifos biodegradacin usando estircol de
vaca-suelo
consorcio microbiano durante un perodo de cinco semanas, despus de
la finalizacin de SBR
experimentar. La analtica datos muestran la reduccin de GC-MS en los
clorpirifos
de concentracin durante un perodo de cinco semanas. Durante este
perodo, microbiano
condiciones, aireacin, agitacin mecnica y otras condiciones de
biorremediacin
fueron controlados y mantenidos. El porcentaje de reduccin en
clorpirifos era
pgina 162
La tecnologa de biorremediacin de los desechos peligrosos - Avances
Recientes 149
encontrado para ser 75,1%, mientras que el porcentaje disminucin de
41,8% se registr en el
caso de TCP durante un perodo de cinco semanas. Los compuestos
intermedios eventualmente se
convertir en nutrientes, la biomasa e inorgnicos en la aclimatacin
suficiente con
consorcio microbiano.
El estudio de investigacin a escala piloto llevada a cabo para la
biorremediacin de pesticida
efluente usando Secuencia reactor biolgico por Fulekar (2008) ser
efectivamente
aplicable para el tratamiento de pesticida residuos / efluente generado
por pesticida
industrias manufactureras.
5.4 La biorremediacin de residuos Petroqumica-Fenol
La particin por Novel biorreactor
5.4.1 Espectro Petrochemical Industries
Los residuos petroqumica generada a partir de refineras y las industrias
petroqumicas
contiene compuestos orgnicos e inorgnicos complejos. Este residuos
industriales
comprende comnmente fenol, benceno, xileno, tolueno, cresoles,
etileno,
naftaleno, parafina, propileno etc. fenol presente en petroqumica
residuos se toma como un contaminante txico representante para la
biorremediacin.
La biorremediacin se ha convertido en poderosa herramienta para
hacer frente al alto grado de
contaminacin ambiental. Biorremediacin est recibiendo una gran
cantidad de atencin
debido a su enfoque respetuoso del medio ambiente, de bajo costo y su
capacidad para completar
mineralizacin de los contaminantes txicos (Fulekar, 2005).
La biorremediacin de fenol se ha estudiado usando activado estircol
de vaca
consorcio microbiano como una nueva fuente de biomasa en diseado y
desarrollado
biorreactor. En la fase nica se bioremediated Bioreactor (SPB) fenol
usando activado consorcio microbiano estircol de vaca bajo controlada
ambiental
condiciones. En SPB, estircol de vaca consorcio microbiano permanece
bajo contacto directo
con fenol. La dificultad asociada con el contacto directo de
microorganismos
y contaminante es que la concentracin de sustrato inicial debe ser
inferior a
el valor en el que se inhiben los organismos. En este sistema, el
aumento de la
suministro de la concentracin de sustrato inicial prolongar el proceso de
biorremediacin
mediante el aumento de la duracin de la fase de latencia. Para superar
esta dificultad otra
montaje experimental fue el uso de la misma como un biorreactor
Particin en dos fases
Bioreactor (TPPB) en el que se tuvo en los residuos orgnicos tales como
fenol
fase orgnica (2-undecanona) que forma la capa superior y la capa
acuosa
fase en la parte inferior (Fig. 5.9). consorcio estircol de vaca se aadi a
la acuosa
fase sirve como una fuente de biomasa microbiana. Los contaminantes
en el TPPB
distribuir entre la fase orgnica y acuosa y el consorcio microbiano
puede
reaccionar a un nivel sub-inhibidor en fase acuosa y biodegradar el
contaminante
a mayor concentracin (Danghlis, 2005). El consorcio microbiano
estircol de vaca
como se identifica (Sr No. 5.2) contiene un nmero de microorganismos
que se utiliza para
biodegradacin de fenol en TPPB.
pgina 163
150 MH Fulekar
5.4.2 Diseo y Desarrollo de biorreactor
Bioreactor ha sido diseado y desarrollado (vidrio y acero inoxidable;
dimensin: 20 cm 20 cm 25 cm) con una disposicin para el
suministro de aire (20 mg
O
2
/ L) para mantener la condicin aerbica. Se proporcion un agitador
para la agitacin
de biomasa y para asegurar un contacto constante entre el
microorganismo y
contaminante. El biorreactor tiene un puerto de muestreo, tanto a
acuosa y orgnica
fase. En la vaporizacin sistema de biorreactor puede tener lugar de
forma simultnea
con la biorremediacin. Para evitar sistemas de refrigeracin de
vaporizacin, condensador y
se han instalado para condensar el vapor de la fase orgnica en TPPB.
Higo. 5.9: Representacin esquemtica del biorreactor (dos monofsico
de fase y
biorreactor de particin).
5.4.3 Montaje experimental en el SPB y TPPB
La biorremediacin de fenol se llev a cabo en diseado y desarrollado
Individual
Biorreactor de fase (SPB) y de dos fases Particin biorreactor (TPPB)
usando
estircol de vaca consorcio microbiano como se da a continuacin.
Las caractersticas fsico-qumicas de la biomasa estircol de vaca
activado (Tabla
5.2) muestran la presencia de macro- y micro-nutrientes tales como
carbono, nitrgeno,
fsforo, sulfato, calcio, magnesio y sodio. Inicialmente, el potencial
del consorcio microbiano estircol de vaca se evalu para degradar fenol
usando el SPB. En el SPB, el consorcio microbiano estircol de vaca se
mantuvo
en contacto directo con el fenol (en concentracin variable) y degradado
fenol hasta una concentracin de 500 mg / L. En el experimento de la
biorremediacin,
concentraciones iniciales 100, se usaron 250, 500, 1000 mg / L de fenol.
los
resultados indicaron que para 100 mg / L degradacin concentracin de
fenol comenz
inmediatamente, es decir, no se observ fase de retardo, y que la
degradacin del 98,59%
ocurrido en un perodo de 24 h. Del mismo modo, 250 y 500 mg / L
fueron degradados hasta
a 99,4% y 99,6% dentro de las 72 y 96 h, respectivamente. A estas
concentraciones
biodegradacin comenz 2-3 h despus de la instalacin experimental.
La concentracin
Pgina 164
La tecnologa de biorremediacin de los desechos peligrosos - Avances
Recientes 151
de 1,000 mg fue encontrado / L de fenol ser inhibitorio para la
microbiano estircol de vaca
consorcio, ya que no se degrad dentro de las 168 horas de
experimental
perodo.
Tabla 5.2: Caracterizacin fsico-qumica de la suspensin de estircol
de vaca activado
parmetros fsico-qumicos
Cantidad
PH
7,4
Oxgeno disuelto
6,3 mg / L
Temperatura
27,4 C
Carbn orgnico
0,31%
Fsforo
0,13 mg / L
nitrgeno Kjeldahl
14 mg / L
Sulfato
34 mg / L
Calcio
9,8 mg / L
Magnesio
127 mg / L
Potasio
159 mg / L
Sodio
90 mg / L
BOD
9,50 mg / L
BACALAO
184 mg / L
Total CFU / mL
1,4 10 7
El patrn de degradacin de fenol con el tiempo en SPB por el estircol
de vaca
consorcio microbiano se presenta en la Fig. 5.10. El medio ambiente
esencial
parmetros responsables de la biorremediacin fueron monitoreados
durante todo el
experimentar. Los datos muestran un aumento de la temperatura desde
25 a 28 C,
que indica un proceso de biorremediacin. Las disminuciones en el pH
(de 7,2 a 6,5) y
DO (de 12 a 9 mg O
2
/ L) se observaron durante el proceso de biorremediacin.
Durante la biorremediacin, la DQO y DBO se monitorizaron como
indicador
para la biorremediacin y el crecimiento microbiano (Figs. 5.11 y 5.12).
Figura 5.11
demuestra la disminucin en los niveles de COD en un perodo de
biorremediacin,
que indica la degradacin del fenol por microorganismos presentes en el
consorcio estircol de vaca. La disminucin de los valores de DBO (Fig
5.12) indica la
el crecimiento de microorganismos en las diversas concentraciones de
fenol. El presente
estudio biorremediacin de fenol en SPB muestra que el microbiana
estircol de vaca
consorcio es capaz de degradar el contaminante txico por debajo de
1000 mg / L. Por lo tanto, este
sistema es eficaz para la degradacin de concentraciones ms bajas de
contaminantes. A
superar esta limitacin en biodegradar mayor concentracin de
contaminantes,
un TPPB fue diseado y desarrollado en el que se disolvi 5,000 mg / L
de fenol
en la fase orgnica, proporcionando una concentracin inicial de 105 mg
/ L en
la fase acuosa. 2-undecanona fue seleccionado como disolvente
orgnico, ya que tiene
propiedades biocompatibles. La biodegradabilidad de 2-undecanona por
estircol de vaca
Se comprob consorcio.
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152 MH Fulekar
Higo. : 5,10 trama Evolucin temporal de la concentracin de fenol
durante la biorremediacin por de vaca
consorcio de estircol en el SPB.
Higo. 5,11: Demanda qumica de oxgeno (COD) variacin durante la
biorremediacin fenol
por el consorcio estircol de vaca en el SPB.
Higo. 5.12: demanda biolgica de oxgeno (BOD) variaciones durante
fenol
biorremediacin por el consorcio estircol de vaca en el nico biorreactor
particin de fase.
pgina 166
La tecnologa de biorremediacin de los desechos peligrosos - Avances
Recientes 153
Se encontr que el UFC / ml de estircol de vaca consorcio no lo hizo
aumentar comparado con el control positivo en presencia de 2-
undecanona. los
concentracin de fenol se reparti en la fase acuosa era mucho por
debajo de la
concentracin inhibidora de fenol observ usando el SPB. Como se
presenta en
Higos. 5,13 y 5,14, el sistema experimenta una fase de latencia de 48 h
despus de lo cual
biodegradacin comenz. Durante el perodo de 168 h 54,18% del fenol
era
degradado. mediciones CFU (Fig. 5.15) indican que el crecimiento y la
multiplicacin
de microorganismo se inici despus de 48 h. El nmero de
microorganismo aument
hasta el final del experimento. Por lo tanto, esta concentracin de fenol
(5,000 mg / L)
no era inhibidora para los microorganismos en el TPPB.
Higo. : 5,13 trama Evolucin temporal de la concentracin de fenol en
la fase orgnica durante
biorremediacin por el consorcio estircol de vaca en el biorreactor de
particin de dos fases.
Higo. : 5,14 trama Evolucin temporal de la concentracin de fenol en
la fase acuosa durante
biorremediacin por el consorcio estircol de vaca en el biorreactor de
particin de dos fases.
Page 167
154 MH Fulekar
Higo. 5,15: Nmero de unidades formadoras de colonias (CFU / ml x
105) durante la biorremediacin
por el consorcio estircol de vaca en el biorreactor de particin de dos
fases.
Durante biorremediacin de fenol en la TPPB, la temperatura aument
de 26 a 28 C, lo que indica la biorremediacin. El pH se redujo de
7.4 a 6.1 y la DO de 12 a 7 mg O
2
/ L. El potencial de estircol de vaca como una
consorcio microbiano para la biodegradacin de fenol se evalu tanto en
el
SPB y la TPPB.
5.5 La biorremediacin mediante identificado Fenol Degradador
- Pseudomonas putida IFO 14671
Los degradadores de fenol ms activos y potentes de estircol de vaca
microbiana
Se aisl el consorcio, basado en colonia bacteriana que sobrevivieron en
mayor
concentracin de fenol. Se aisl el ADN genmico de estas bacterias, y
16S rDNA se amplific usando cebadores universales. Un producto de
PCR de 1,4 kb
se obtuvo de la 16S rDNA. Este producto fue secuenciado y BLAST
Se realiz un anlisis para identificar la bacteria y sus vecinos ms
cercanos.
Para examinar las relaciones filogenticas, se elabor un rbol
filogentico
(Fig. 5.16). El anlisis BLAST indic que las bacterias fueron ms
similares
a Pseudomonas putida IFO 14671. Por lo tanto, el potencial de
Pseudomonas
putida Tambin se evalu IFO 14671 hacia la biodegradacin de fenol.
UN
estudio biorremediacin de fenol (100, 250, 500 mg / L) por
Pseudomonas putida
IFO 14671 se llev a cabo. La Pseudomonas putida 14671 IFO se
encontr que
biodegradarse fenol a ritmo ms rpido. El aislado de Pseudomonas
putida IFO 14671
cepa comenz biodegradacin de 100 mg / L de fenol inmediatamente y
degradado se
completamente dentro de 7 h. Para 250 mg / L de fenol, se observ una
fase de retardo de 30 min,
y 81,7% fue degradado dentro de 24 h. Del mismo modo, 500 mg / L de
fenol se consumi
completamente dentro de las 48 h por Pseudomonas putida IFO 14671.
A la fase de latencia de 60
minutos se observ en este caso (Fig. 5.17). La DO del cultivo
microbiano
a 600 nm se midi a partir de 30 min hasta 48 h (Fig. 5.18). Los datos
indican
Pgina 168
La tecnologa de biorremediacin de los desechos peligrosos - Avances
Recientes 155
el crecimiento y el desarrollo del microorganismo durante la
biorremediacin
de fenol. La Tabla 5.3 muestra el recuento de viables de Pseudomonas
putida IFO 14671
(En UFC / ml) y se confirma el crecimiento y la proliferacin de los
microorganismos.
El anlisis MS de muestras de biorremediacin mostr la presencia de
catecol
y cis semialdehdo 2-mucnico durante la biorremediacin.
Higo. 5.16: rbol filogentico que muestra la relacin gentica de las
bacterias aisladas
de estircol de vaca consorcio microbiano.
Higo. : 5,17 trama Evolucin temporal de la concentracin de fenol
durante la biorremediacin por
Pseudomonas putida IFO 14671.
Higo. 5,18: Variacin de la densidad ptica del cultivo bacteriano
durante la biorremediacin
de fenol por Pseudomonas putida IFO 14671.
pgina 169
156 MH Fulekar
Tabla 5.3: recuento de viables (UFC / ml) durante la degradacin de
fenol por
Pseudomonas putida IFO 14671
Tiempo (h) 100 mg / L
250 mg / L
500 mg / L
0 1,8 10 5
1 10 5
0,6 10 5
7 1,3 10 7
1,4 10 8
1,8 10 6
24 2,3 10 8
2,3 10 8
5,2 10 8
48 4,1 10 6
7,1 10 8
7,9 10 9
La presente investigacin ha demostrado la ventaja de la TPPB sobre el
SPB,
en el que el microorganismo entra en contacto indirecto con el
contaminante,
para la biodegradacin de las concentraciones ms altas de un
compuesto peligroso. TPPB
diseado y desarrollado para la biorremediacin se ha encontrado eficaz
para
degradacin de compuestos peligrosos en mayor concentracin usando
estircol de vaca como
una nueva fuente de biomasa. Adems la cepa microbiana identificado
Pseudomonas
putida IFO 14671 se ha encontrado para ser un organismo potencial
para mejorar
biorremediacin de compuesto peligrosos generados por las industrias
petroqumicas
(Singh y Fulekar, 2009). El estudio de este microorganismo, en particular
la genmica y la protemica, proporcionaran ms enfoques moleculares
para
biorremediacin. Por tanto, el presente estudio de investigacin sobre la
biorremediacin de
compuestos peligrosos utilizando el consorcio estircol de vaca y
Pseudomonas putida
IFO 14671 como organismo potencial en TPPB ha proporcionado una
investigacin innovadora
en la zona de la biorremediacin.
5.6 Rizosfera Rehabilitacin de clorpirifos en el bombo
cultura Tcnica
5.6.1 Unidad de remediacin ecolgica
En el presente estudio de investigacin, la rizosfera de la planta husped
cultiva en un
micorriza-suelo form una micorrizosfera abarca asociacin simbitica
de hongos micorrcicos, bacterias, actinomicetos en la vecindad
inmediata de la
races de micorrizas (Fig. 5.19). En la planta de biorremediacin asistida,
rizosfera
ayuda en aumento en el carbono orgnico del suelo, bacterias y hongos
micorrcicos, todo
factores que fomentan la degradacin de compuestos peligrosos tales
como orgnico
compuestos y pesticidas en el suelo.
Higo. 5,19: unidad de remediacin ecolgica.
Pgina 170
La tecnologa de biorremediacin de los desechos peligrosos - Avances
Recientes 157
El estudio realizado observ que las plantas liberan exudados en el suelo
que ayuda
para estimular la degradacin de productos qumicos orgnicos
mediante la induccin de sistemas enzimticos
de las poblaciones de bacterias existentes, estimulando el crecimiento
de las nuevas especies que son
capaces de degradar los residuos, y / o el aumento de las
concentraciones de sustrato soluble para
todos los microorganismos. laboratorio de proteccin del medio
ambiente en Athens, Georgia,
examin cinco enzimas vegetales que son sistemas dehalogenase,
nitrorreductasa,
Lacasa, peroxidasa y Nitrilase en sedimentos y suelos en la proximidad
de la
raz (1 mm). dehalogenase enzimas son importantes en las reacciones
de decloracin
de hidrocarburos clorados, se necesita nitrorreductasa en el primer paso
para
degradacin de compuestos nitroaromticos, mientras que la lacasa
sirve para romper anillo aromtico
estructuras en contaminantes orgnicos. Peroxidasa y son importantes
en la nitrilasa
reacciones de oxidacin en suelos rizosfera.
5.6.2 micorrizosfera remediacin de Plaguicidas
En el presente estudio de investigacin, el potencial de la hierba de
centeno para la rizosfera
biorremediacin de clorpirifos en el suelo micorrizas fue investigado en
el
casa verde usando experimentos de cultivo del pote. La olla suelo
cultivado modificado en
concentracin inicial clorpirifos de 10 mg / kg se observ a degradarse
por completo dentro de los siete das de descanso, donde modificado
concentraciones (25-100
mg / kg) disminuy rpidamente bajo la influencia de centeno hierba
micro-rizosfera como
incubacin progres hasta 28 das. La biorremediacin de clorpirifos en
el suelo
se atribuye a los microorganismos asociados con las races en la hierba
de centeno
rizosfera. Por lo tanto los microorganismos supervivientes en el suelo
rizosfrico
claveteado en concentracin ms alta (100 mg / kg) se evalu y utiliz
para el aislamiento
de clorpirifos degradantes micro-organismo. El potencial degradador
identificado por
16S rDNA tcnica de anlisis utilizando BLAST fue Pseudomonas
nitrorreductasa
PS-2. Adems bioaumentacin para la biodegradacin clorpirifos
mejorada
se realiz usando PS-2 como un inculo en la configuracin experimental
similar
a la anterior. Las bacterias y hongos hetertrofos tambin se
enumeraron
del suelo rizosfrico inoculada y no inoculada. en bioaumentacin
experimentos, el porcentaje de disipacin de clorpirifos fue del 100% en
el
inoculado suelo rizosfrico en comparacin con 76,24, 50,36 y 90,80%
en el
no inoculado suelo para concentraciones iniciales de 25, 50 y 100 mg /
kg en el
14 , 21 st y 28 th intervalos diarios, respectivamente.
Biorremediacin de clorpirifos en Rye Grass
micorrizosfera
Rizosfera biorremediacin de clorpirifos estn representados en la Fig.
5.20. Datos
indican que clorpirifos disipa rpidamente en los suelos de la rizosfera
dentro de primera
siete das y continu a degradarse por completo hasta el final del
experimento
durante el perodo de 28 das. El porcentaje de disipacin de los
clorpirifos en
suelo modificado a concentraciones variables (10-100 mg / kg) vari de
58,73 a
100% en el primer perodo de cosecha. Sin embargo, al final del
experimento, el
concentraciones ms bajas (10-50 mg / kg) claveteado en el suelo eran
totalmente degradada
y porcentaje de degradacin a concentraciones ms altas (75 y 100 mg /
kg) era
pgina 171
158 MH Fulekar
encontrado para ser 94,25 y 91,6%, respectivamente. Figura 5.21
demuestra la masa
Los espectros de clorpirifos y su metabolito TCP. Los resultados de la
investigacin por lo tanto,
muestran que el raigrs es un candidato capaz que degrada de manera
eficiente clorpirifos
en su rea de la zona de la raz. Las variedades de gramneas son
reportados a ser el ms adecuado
especies de plantas para rizosfera biorremediacin de contaminantes
orgnicos debido
a su capacidad para albergar gran nmero de bacterias en su altamente
ramificado
sistema raz. En la rizosfera, un aumento en la densidad microbiana, la
diversidad
y la actividad metablica se estima que es eficaz debido a la liberacin
de la raz de la planta
exudados, mucigel y lisados de raz (enzimas, aminocidos,
carbohidratos,
de bajo peso molecular carboxlicos cidos, flavononas y fenlicos) (Kidd
et al.,
2008). Estos RHIZO-depsitos tambin estimulan la supervivencia y la
accin de las bacterias
que posteriormente se traduce en la degradacin eficiente de
contaminantes (Kuiper et al.,
2001). En este estudio de investigacin, las especies de plantas
elegidas, raigrs, demostraron
competente para la biorremediacin rizosfera de clorpirifos en el suelo
que
puede ser acreditado a sus caractersticas ventajosas de tener sistema
radicular fibroso
proporcionando gran superficie especfica para interactuar con
microorganismo (Dzantor
et al., 2000) y la capacidad para descargar la cantidad de exudados en
la rizosfera
(Meharg y Killham, 1990). El estudio realizado por Korade y Fulekar
(2008) tambin ha encontrado que el raigrs efectivamente se puede
utilizar para la remediacin
de antraceno en el suelo.
Higo. 5,20: Disipacin de clorpirifos en el suelo (rizosfera
biorremediacin Expt.).
5.6.3 Aislamiento e identificacin de Clorpirifos degradantes
Microorganismo
El experimento llevado a cabo en el grupo anterior de experimento
demostr la eficacia
de la planta de la hierba de centeno en la biorremediacin de suelos de
clorpirifos.
Pgina 172
La tecnologa de biorremediacin de los desechos peligrosos - Avances
Recientes 159
Higo. 5.21: Los espectros de masas de clorpirifos y su metabolito TCP.
(A) Clorpirifos (RT-12,403 min; identificacin m / z iones 97, 197, 314).
(B) TCP (RT-10,835 min; m / z de iones de identificacin 161).
Tabla 5.4: consorcio microbiano identificados a partir de la rizosfera del
suelo remediado
Las bacterias
hongos
Pseudomonas spp.
Penicillum spp.
Bacillus firmus
Aspergillus niger
Clostridium spp.
Aspergillus fumigatus
Streptomyse spp.
El consorcio microbiano desarrollado en la rizosfera se caracteriza y
se presenta en la Tabla 5.4. Los potenciales microorganismos existentes
en rizosfrico
suelo que tiene la capacidad para sobrevivir y multiplicarse en mayor
concentracin de
Se seleccionaron clorpirifos para bioaumentacin de este compuesto
peligroso.
El degradador clorpirifos capaz de utilizar clorpirifos como la nica
fuente de
luego de carbono en el medio de sal mnimo se identific mediante
anlisis de 16S rDNA.
El ADN genmico de la degradador que se encontr que era una cepa
bacteriana
se aisl y el 16S rDNA se amplific usando cebadores universales. A 734
bp producto PCR obtenido a partir del 16S rDNA entonces se secuenci y
BLAST
(un)
(segundo)
pgina 173
160 MH Fulekar
Se realiz un anlisis para identificar la bacteria y sus vecinos ms
cercanos.
Para examinar las relaciones filogenticas, se elabor un rbol
filogentico
(Fig. 5.22). El anlisis indic que la bacteria era ms similar a P.
nitroreducens PS-2 (no la adhesin. FJ588866.1). Esta bacteria se cultiv
an ms en un inculo para bioaumentacin de clorpirifos.
bioaumentacin
de clorpirifos por la inoculacin de P. nitroreducens PS-2 en la rizosfera
raigrs
Se realiz suelo. perfil Disipacin de clorpirifos en el suelo inoculado en
experimental bioaumentacin establecido se presenta en la Fig. 5.23. A
lo largo del periodo
de incubacin, la degradacin de clorpirifos fue aproximadamente 1,35
veces mayor para 25
mg / kg y vari desde 1,38 hasta 2,02 para 50 mg / kg en el suelo
bioaumentado que la
suelo no bioaumentado. disipacin Clorpirifos fue mayor en suelo
inoculado
durante la experimentacin y vari de 1,31 a 2,64 veces cuando se
compara
a los suelos no inoculadas para 100 mg / kg de pinchos suelo. Las
concentraciones de 25 y
50 mg / kg fueron examinados para disipar completamente por 14 da y
21 st das como
en comparacin con el da 21 y 28 como se observa en no inoculado
rizosfrico
suelo. Clorpirifos fue completamente disipadas a la concentracin de
pas inicial
de 100 mg / kg para el suelo inoculado en contraste con el suelo no
inoculado (6,68
mg / kg) por el final de los experimentos de bioaumentacin. Estos datos
tambin podra ser
analizados estadsticamente mediante la definicin de las ecuaciones de
regresin para el tiempo dependiente
disipacin de clorpirifos en el suelo inoculado y no inoculado para los
tres
(25, 50 y 100 mg / kg) concentraciones de clorpirifos inicialmente
modificarse a la
suelo utilizado en experimentos de bioaumentacin, donde Y es la
variable dependiente
que representa intervalos de tiempo en das, X
1
una variable independiente que representa la
concentracin de clorpirifos en el suelo inoculado y X
2
como independiente
variable que representa la concentracin de clorpirifos en el no
inoculado
suelo. Por lo tanto las ecuaciones de regresin se puede dar la siguiente
que indicar
que este modelo es buen ajuste:
Y = 25,26 + 1,58 X
1
- 2.88 X
2
para 25 mg / kg inicialmente claveteado concentracin clorpirifos;
Y = 26,35 + 0,93 X
1
- 1.61 X
2
para 50 mg / kg inicialmente claveteado concentracin clorpirifos;
Y = 27,04 + 0,01 X
1
- 0,36 X
2
para 100 mg / kg inicialmente claveteado concentracin clorpirifos.
Las diferencias en el porcentaje de la disipacin de clorpirifos que
ocurren en
inocul y el suelo no inoculado en todas las concentraciones se
muestran en la
Tabla 5.5. Estos resultados indicaron que la bioaumentacin mediante la
adicin del aislado
PS-2 en el suelo de la rizosfera de ryegrass mejor significativamente la
degradacin
de clorpirifos ( p <0,05) (Mahajan, 1991) y puede ser utilizado para una
mayor
degradacin de clorpirifos de los suelos contaminados. El presente
estudio tiene
resultados de la investigacin de conformidad con Yu et al. (2003),
donde la degradacin
de butachlor en suelo de la rizosfera de trigo en la concentracin inicial
de 10 mg / kg
fue cinco veces mejoradas por bioaumentacin de degradador butacloro.
Pgina 174
La tecnologa de biorremediacin de los desechos peligrosos - Avances
Recientes 161
Tabla 5.5: disipacin Porcentaje de clorpirifos en el suelo inoculado y
no inoculado a lo largo del perodo de tiempo
clorpirifos
inoculado
No inoculado
(Mg / kg)
rizosfera del suelo
rizosfera del suelo
25
76,24% (14 das)
100% (14 das)
50
90,36% (21 das)
100% (21 das)
100
90,80% (28 das)
100% (28 das)
Higo. 5.22: rbol filogentico que muestra la relacin gentica de las
bacterias aisladas
rizosfera del suelo phytoremediated.
Higo. 5,23: Disipacin de clorpirifos en suelo inoculado (expt
bioaumentacin.).
El nmero total de bacterias hetertrofas y hongos presentes en el
inocul y el suelo no inoculado rizosfera tambin se inocularon durante
los experimentos de bioaumentacin. Los recuentos microbianos en
inoculado y no
Se encontraron suelos rizosfricas inoculados a ser mayor que el mayor
o inocularon
Pgina 175
162 MH Fulekar
pero la tierra no sembrada. Los estudios hacia la degradacin de los
plaguicidas han sido
sugerido para proteger las plantas contra la contaminacin por las
bacterias degradantes
(I. Kuiper et al., 2004). Nuestros resultados indican que la
biorremediacin rizosfera
de clorpirifos por raigrs y bioaumentacin por el aislado de P.
nitroreducens
PS-2 han mejorado biorremediacin de plaguicida en el suelo de
micorrizas. Estas
tcnicas altamente pueden ser recomendados para la remediacin de
suelos contaminados
con un grupo similar de pesticidas.
Rizosfera se considera como una unidad de remediacin ecolgica para
el tratamiento de la
suelos contaminados. Los microorganismos como bacterias, hongos y
actinomicetos
formar una asociacin simbitica lo largo de la zona de la raz de la
planta en la rizosfera.
Las enzimas y plantas microbianas liberan exudados tales como
alcoholes y pequea
concentracin de alto peso molecular compuestos (enzimas y protenas)
en
la rizosfera son beneficiosos en la mejora de la biorremediacin.
5.7 La biorremediacin de tinte y colorante de Efluentes
Utilizando la secuencia basados en la nanotecnologa
Biorreactor de Enfoque
La sntesis de colorante y pigmentos utilizados en la industria textil y
otras industrias
genera los residuos peligrosos. Las industrias de tinte y colorante han
sido
caracterizado entre 29 grupos de industrias peligrosas bajo la Hazardous
Gestin de residuos y normas de gestin de 1989. La Proteccin del
Medio Ambiente
Ley de 1987 ha prescrito conforme a esta norma establecen
disposiciones especficas para los procesos,
las operaciones y el tratamiento de los residuos de tinte y colorante. Los
residuos generados
durante el proceso y el funcionamiento de estos colorantes comnmente
se encuentran para contener
los contaminantes inorgnicos y orgnicos que conducen a la peligro
para los ecosistemas y
biodiversidad causando impacto en el medio ambiente. Los residuos
generados a partir
los productos y procesos utiliza la neutralizacin, floculacin,
coagulacin,
sedimentacin, carbono-absorcin, la desintoxicacin de sustancias
orgnicas por oxidacin y
tratamiento biolgico. In-pesar de la presente tecnologa de tratamiento,
los orgnicos
y metales pesados (hidrocarburos, alcoholes, aminas, cidos orgnicos,
aldehdos,
cetonas y metales pesados) se encuentran comnmente en el entorno
del agua del suelo.
Por lo tanto, los recientes avances en la tecnologa de biorremediacin
usando
los enfoques bio-nanotecnologa son tiles para el tratamiento eficaz de
efluente de colorante para la proteccin del medio ambiente.
En el presente estudio de investigacin, la nanotecnologa basada
biorreactor secuenciado
ha sido diseado y desarrollado por Fulekar (2009) para la
biorremediacin de
residuos peligrosos. (Fig. 5.24) con referencia especial para teir
efluente cosas.
En el primer reactor la fsico-qumica y microbiana caracterizan efluente
ser tomado en el que TiO
2
- semi-conductor a base de nano ser utilizado bajo la
influencia de la radiacin UV para la oxidacin / reduccin y degradacin
qumica
de efluente de colorante. Nanobiosensor tambin se utilizar para
evaluar y / u observar
la velocidad de degradacin qumica del compuesto peligroso presente
en tinte
efluentes cosas. Despus de esto, el efluente materia colorante tratada
se transfiere a la
Pgina 176
La tecnologa de biorremediacin de los desechos peligrosos - Avances
Recientes 163
segundo biorreactor conectado a travs de la bomba peristltica, en el
que micorrizas
suelo modificado con nanopartculas de oro / arena / grava ser
dispuestas una debajo
el otro en placas perforadas en la parte inferior dentro del biorreactor
para goteo
los contaminantes. Las hierbas con races fibrosas se cultivan en la parte
superior de
el suelo para la absorcin de los metales pesados en micorrizosfera. El
oro modificado
nanopartculas en micorrizosfera mejorar la absorcin de metales
pesados
y llevarse bien con el tejido de las plantas durante la fitorremediacin.
Oro
nanopartculas se pueden recuperar despus de la cosecha de las
plantas. Simultaneamente,
rizosfera biorremediacin de contaminantes orgnicos se llevar a cabo
a travs de
el goteo (micorrizas del suelo / arena / grava) en el segundo biorreactor
que
sera medida por los biosensores. Rizosfera es considerada como una
unidad de remediacin ecolgica para el tratamiento de los suelos
contaminados. Microorganismo
como las bacterias, hongos y actinomicetos forman una asociacin
simbitica lo largo de la
zona de las races de la planta en la rizosfera. La planta libera exudados
tales como
cidos orgnicos de cadena corta, fenlicos, azcares, alcoholes y
pequea concentracin
compuesto de alto peso molecular (enzimas y protenas) en la rizosfera.
La planta de enzimas como la lacasa, deshidrogenasa, nitrilasa, y
nitrorreductasa
peroxidasa son beneficiosos para estimular la degradacin de productos
qumicos orgnicos por
la induccin de enzimas sistemas de las poblaciones de bacterias
existentes y tambin estimulando
el crecimiento de las nuevas especies que son capaces de degradar los
contaminantes residuales. los
enzimas microbianas en asociacin con plantas exudados liberados han
hecho
posible proporcionar condiciones favorables para degradar compuestos
peligrosos.
Higo. 5.24: secuencia de biorreactor basado en la nanotecnologa.
pgina 177
164 MH Fulekar
Rizosfera biorremediacin se ha demostrado la tecnologa de
tratamiento eficaz
para la biodegradacin de compuestos orgnicos en respetuoso del
medio ambiente
compuestos.
Adems, el infiltrado recoge en el fondo en el tercer reactor a travs de
biorremediacin de goteo a travs de micorrizas suelo / arena / grava
(segundo precursor)
sern tratados con microbiana micorrizosfera cultivaron y desarrollado
consorcio en biomasa inmovilizada hasta la finalizacin de la
biorremediacin de
los contaminantes orgnicos e inorgnicos residuales. bioacumulacin
de metales pesados,
la precipitacin, la biotransformacin y la absorcin por la planta en
micorrizosfera hara
ser evaluado por bionanosensor y espectrofotmetro de absorcin
atmica.
La degradacin qumica y biorremediacin de contaminantes orgnicos y
contaminantes intermedios formados a travs de vas biodegradables
hara
ser evaluado por los biosensores, as como el uso de GC / HPLC / GC-MS /
RMN
tcnicas.
Este enfoque nano-biotecnologa establecera la nueva innovacin
en biorremediacin para la eliminacin de color, remediacin de metales
pesados y
contaminantes orgnicos en el nivel aceptable de acuerdo con las
normas prescritas
bajo las leyes de proteccin del medio ambiente.
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Tecnologa de biodegradacin para Eliminacin de Pesticidas Toxicidad
167
6
Tecnologa para la biodegradacin
Toxicidad de pesticidas Eliminacin
EA El-Sheikh y MB.A. ashour
6.1 Introduccin
Pesticidas usos son intensivos en todo el mundo para controlar las
plagas de insectos incluso una
compromiso con la rpida adopcin de las tcnicas de manejo de plagas
rallado inte.
Los pesticidas se clasifican como los contaminantes qumicos ms
ampliamente distribuida de
el medio ambiente en el siglo XX. De acuerdo con datos compilados por
el
Estados Unidos Agencia de Proteccin Ambiental (EPA) y el Mundial de la
Salud
Organizacin (OMS), ms de 1000 compuestos se usan como
plaguicidas, que representa
muchas diferentes clases qumicas: carbamatos, tiocarbamatos, fosfatos
orgnicos,
dipiridilos, triazinas, fenoxiacetatos, cumarinas, nitrofenoles, pirazoles,
piretroides, y compuestos orgnicos que contienen cloro, fsforo, estao,
mercurio, arsnico, cobre, etc. Millones de toneladas de plaguicidas se
producen y
utilizado anualmente en estrecha asociacin con la agricultura. Muchos
artculos, reseas y
los libros estn dedicados a los pesticidas (plaguicidas y la qumica de la
biociencia, 1999 y
Los pesticidas revisin de la literatura, 2004).
La contaminacin por plaguicidas a menudo se atribuye al punto
contaminaciones debidas a
control de plagas con productos qumicos, vertidos, actividades de
lavado de tanques, etc. Para mitigar
prdidas directas, la aplicacin de sistemas de biorremediacin en el
corral tiene
ha propuesto. Varias configuraciones de nivel de finca existen sistemas
de biorremediacin, pero
todos ellos se pueden Considrant Ered como un sistema de biofiltro que
contiene un activo biolgico
matriz que retiene los pesticidas y mejora su biodegradacin. Debido a
la
aplicacin generalizada y largo plazo de los pesticidas en la agricultura,
suelos, planta
aguas y embalses en muchas reas estn muy contaminadas. la
toxicidad
de pesticidas que los hace peligrosos cuando se incorporan en la cadena
alimentaria.
MH Fulekar (ed.),
DOI 10.1007 / 978-90-481-3678-0_6, 2010 de Capital Publishing
Company
La tecnologa de biorremediacin: Avances recientes ,
167
Pgina 181
168 EA El-Sheikh y MB.A. ashour
6.2 Plaguicidas Toxicidad de un vistazo
Diclorodifeniltricloroetano (DDT) es un insecticida extremadamente
activo. Esta
compuesto se sintetiz por primera vez en 1874, y desde 1930, cuando
su insecticida
propiedades fueron establecido, se utilizan ampliamente contra el
transmisor de la malaria,
el Anopheles mosquito (Konradsen et al., 2004).
La aplicacin prcticamente ilimitado de DDT en todo el mundo llev a
su
distribucin. La solubilidad ms alta en grasas favoreci su incorporacin
en alimentos
cadenas. Como resultado, en los pasos terminales de las cadenas de
comida la concentracin de
DDT tpicamente se increment casi un milln de veces, por ejemplo, a
partir de agua de lluvia
y terminando en la leche humana (Fellenberg, 1990).
DDT es un veneno de contacto tpico, penetrando rpidamente a travs
de la piel. DDT
induce la apoptosis en las clulas mononucleares humanas in vitro y se
asocia con
aumento de la apoptosis en los nios expuestos (Prez-Maldonado et al.,
2004). Eso
induce dao del ADN en clulas de la sangre (Yanez et al., 2004), y
afecta adversamente
el ciclo de trabajo normal de las membranas de las clulas nerviosas. Ya
que deprime la respuesta de
la Na + -Bomba, restauracin normal del potencial de reposo no se
produce despus de
la excitacin del nervio. Grandes cantidades de DDT inducen parlisis de
extremidades.
La leche materna contiene el insecticida puede daar seriamente la
salud de una
nio o perturban la capacidad reproductiva latente penetrando en las
gnadas.
En condiciones normales, el DDT se descompone lentamente y
parcialmente. Debajo
productos de descomposicin aerbica condiciones son derivados de
dicloroetileno,
que son menos txicos que el DDT; en condiciones aerobias el
dicloroetano
Los derivados son formados, que se transforman fcilmente en los
derivados de los cidos actico
cido (Fellenberg, 1990).
Desde la introduccin de DDT, plagas de insectos se han controlado casi
exclusivamente con los insecticidas qumicos. Debido a su accin rpida,
barata de
producir, relativamente fcil de suministrar, y, insecticidas qumicos
altamente potentes
han sido vistos con optimismo extremo; problemas asociados con estos
compuestos no empezaron a ser evidentes para la mayora de los
cientficos hasta casi
dos dcadas despus de su introduccin.
En respuesta a la amenaza ambiental que estos compuestos presentan,
DDT y
muchos otros insecticidas clorados fueron prohibidos de uso agrcola en
muchos
pases de la dcada de 1970, y las clases alternativas de compuestos
qumicos eran
desarrollado. Estos compuestos, algunos de los cuales todava tienen
pobre insecto mamfero
relaciones de especificidad, incluyen carbamatos, organofosfatos,
piretroides sintticos,
neonicotinoides, reguladores del crecimiento sintticos y disruptores
metablicos.
insecticidas organofosforados (OPPS) se han utilizado ampliamente
en la prctica agrcola desde hace ms de 40 aos. Opps son inhibidores
fuertes
de la acetilcolinesterasa, un cuarto de Zyme esencial para el impulso
nervioso normales
transmisin. Esto afecta a la transmisin de seales a las terminaciones
nerviosas a travs
el receptor de acetilcolina. La disminucin de la actividad enzimtica
conduce a una
acumulacin de sntomas de enfermedades como la sialorrea, edema
pulmonar,
clicos, diarrea, nusea, debilitamiento de la vista, el aumento de la
presin sangunea, muscular
pgina 182
Tecnologa de biodegradacin de la Eliminacin de Pesticidas Toxicidad
169
espasmos y convulsiones, alteraciones del habla, y parlisis de la
respiratorio
tracto. La mayora de los pesticidas organofosforados tienen estructura
general similares, con-
TaiNing tres enlaces fosfoster, y la hidrlisis de uno de los fosfoster
bonos reduce drsticamente la toxicidad de los CIDES Pesti eliminando
la acetilcolinesterasa inactivar los lazos apropiados (Horne et al., 2002).
UN
cuadro clnico similar se observa en el caso de los fosfatos y carbamatos
se administra a un aumento intencionalmente dosis. insecticidas
organoclorados (por ejemplo,
clordano, dieldrin, lindano, DDT) tpicamente penetrar en el organismo
humano
a travs del tracto digestivo o la piel (Guttes et al., 1998]. cuando las
membranas
de las clulas nerviosas son daadas por la accin del pesticida, su
permeabilidad para osmtica
transporte de Na + -flow se mantiene. Por lo tanto, su potencial de
reposo despus de la excitacin
o bien no vuelve a su nivel inicial, o se disminuye. estos compuestos
organoclorados
compuestos cambian severamente la excitabilidad de las clulas
nerviosas. A bajas concentraciones
axones estn daados; concentraciones ms altas tambin causan el
dao de sensorial
neuronas. Clordano y dieldrin son, por otra parte, claramente
cancergenos.
Los llamados plaguicidas piretroides tambin tienen caractersticas
txicas y
son anlogos sintticos de una piretrina insecticida ampliamente
distribuida, natural
compuesto que se encuentra en los crisantemos. Las piretrinas
destinados para uso insecticida
son modificados para aumentar su estabilidad. piretrinas sintticos
tienen efectos txicos
sobre el sistema nervioso (Spencer et al., 2001).
6.3 Los pesticidas Transporte en Ecosistema
Como resultado de las prcticas agrcolas, pesticidas han sido
detectados en muchos
acuferos y aguas superficiales. En suelos estructurados, el flujo de
macroporos a menudo causa
rpida lixiviacin no uniforme a travs de recorridos de flujo
preferenciales, donde una fraccin de la
contaminante se filtra en el agua subterrnea antes de que pueda
degradar o ser adsorbido
por el suelo (por ejemplo, Stagnitti et al., 1994). Con respecto a los
pesticidas, moderadamente
compuestos sorbidos con relativamente cortas vidas medias se ven
particularmente afectados
(Larsson y Jarvis, 2000). Los tiempos de viaje para los plaguicidas
preferentemente lixiviados
por debajo de la zona de la raz son comparables a las de los solutos
conservadoras, con
prdidas de tpicamente menos de 1% de la dosis aplicada, sino que
alcanza hasta 5% de
la masa aplicada (Flury, 1996;. Kladivko et al, 2001; FOCUS, 2001). Estas
aparentemente pequeos nmeros se pueden poner en perspectiva al
considerar a la UE
potable estndar de agua, que establece que las concentraciones de un
solo plaguicida
no podr exceder de 0,1 g L -1 . Para una dosis de 0,2 kg ha -1 y una
recarga anual
de 200 mm, esto implica una prdida mxima permitida lixiviacin de
slo el 0,1% de la
cantidad aplicada (Jarvis, 2007). Por lo tanto, el flujo de macroporos se
debe considerar
en la evaluacin del riesgo de contaminacin del agua subterrnea con
pesticidas (FOCUS,
2000). lixiviacin de pesticidas a travs de la zona vadosa a las aguas
subterrneas es un complejo proceso controlado por una gama de suelo
y las condiciones ambientales. En consecuencia, modelos de destino de
pesticidas representan una variedad de procesos incluyendo el agua del
suelo
pgina 183
170 EA El-Sheikh y MB.A. ashour
flujo, transporte de solutos, el transporte de calor, la sorcin de
plaguicidas, transformacin y la degradacin, la volatilizacin, la
absorcin por el cultivo, y la escorrenta superficial. Un particular
desafo de modelado es predecir el transporte de plaguicidas en niveles
muy bajos de lixiviacin importante para el registro de plaguicidas.
Estos porcentajes bajos de lixiviacin pueden estar asociado con PF,
donde slo una pequea fraccin de los percolados qumicos hacia
abajo a un ritmo rpido, mientras que el grueso restante de los lixiviados
de sustancias ms lentamente que sera de esperar de la teora
cromatogrfica (Boesten, 2000). Por otro lado, se ha argumentado que
para concentraciones muy bajas, acercndose al nivel de cuantificacin,
los criterios de precisin no necesita ser tan riguroso, particularmente
cuando el anlisis tiene en cuenta la incertidumbre de los datos y el
resultado del modelo (Carbone et al., 2002). Una evaluacin del modelo
predictivo la precisin se hace a menudo utilizando el enfoque de factor
de destino, cuando el acuerdo entre las estimaciones del modelo frente
a los valores medidos se considera satisfactoria dentro de dos, cinco, y
las diferencias de 10 veces (Parrish y Smith, 1990). Esta enfoque
permite la naturaleza de los datos medidos para servir como una
entrada para ajustar la lmites que definen la precisin del modelo
(Carbone et al., 2002).
Higo. 6.1: procesos principales que rigen el transporte de plaguicidas y
el destino de la agricultura sistemas de suelos estructurados
(transferidos de Khne et al., 2009). El bastidor central es explicado en
la Fig. 6.2.
pgina 184
Tecnologa de biodegradacin de la Eliminacin de Pesticidas Toxicidad
171
Los principales procesos que rigen el transporte de plaguicidas y el
destino de
sistemas de suelos estructurados agrcolas se ilustran en la Fig. 6.1.
matriz del suelo y
caractersticas de macroporos que invocan diferentes patrones de
transporte estn resaltados
en la Fig. 6.2.
prdida de plaguicidas de sistemas acuosos ha sido bien caracterizado y
implica una combinacin de procedimientos de degradacin y de
transporte. Degradacin
puede incluir tolysis pho, transformaciones qumicas y la formacin de
trans biolgica
(Roberts, 1998;. Stangroom et al, 2000), de que los procesos
microbianos generalmente
dominar (Vink y Van der Zee, 1997). Del mismo modo, el transporte de
plaguicidas puede ser
fsico-qumica o biolgica, pero la libra com matriz se mantiene sin
cambios;
simplemente se transfiere de una matriz a otra. Es importante destacar
que la tasa de
transporte y distribucin de un plaguicida en particular depende en gran
medida de su
propiedades fisicoqumicas (Stangroom et al, 2000;. Crossan, 2002).
Higo. 6.2: Fracturas y microtopografa son disparadores para la
infiltracin preferencial (arriba),
interfaces de estructura / matriz Diversos manchados por trazador de
tinta visualizar diferente preferencial
trayectos de transporte; estas interfaces pueden afectar a la difusin
lateral, de sorcin y la degradacin
(medio). matriz y macroporos caractersticas del suelo y los patrones de
transporte resultantes;
patrones reales tambin dependen de las caractersticas de la
precipitacin y de la superposicin de suelo
horizontes (abajo) (transferidos de Khne et al., 2009).
Pgina 185
172 EA El-Sheikh y MB.A. ashour
6.4 Los pesticidas mecanismos de eficiencia de eliminacin
6.4.1 El uso de una herramienta de diseo para la eliminacin de
plaguicidas
Prcticas se aplicaron a disminuir o eliminar los pesticidas de todo el
medio ambiente
contenidos que van desde el uso de herramientas a los microorganismos
y recientemente mediante el uso de
plantas modificadas. Por ejemplo, Apilot escala, humedal estancada (Fig.
6.3) que consiste
de un estanque abierto y un estanque con vegetacin en serie se
construy en un algodn
granja en el norte de Nueva Gales del Sur, Australia (Rose et al., 2006), y
se evalu
por su potencial para eliminar los pesticidas de la cola-agua de riego.
diez de incubacin
perodos que van de 7 a 13 das cada uno se llevaron a cabo ms de dos
cultivo de algodn
temporadas a MON Itor eliminacin de residuos de cuatro plaguicidas
aplicados al cultivo.
Se observaron reducciones de residuos que van 22-53% y 32-90% en el
primer
y segunda temporadas respectivamente. Promedio de vida media
durante la primera temporada fueron
calculado como 21.3 das para diuron, 25,4 das para fluometuron y 26,4
das
para aldicarb sobre toda el humedal. Durante la segunda temporada de
la supervisin,
plaguicidas vidas medias se redujeron significativamente, con
fluometuron que presenta una
vida media de 13,8 das, aldicarb 6,2 das y 7,5 das endosulfn en el
abierto
estanque. Adems se observaron reducciones significativas en el
estanque y vege tated
tambin despus de un florecimiento de algas en el estanque abierta,
como resultado de lo cual aldicarb
y endosulfn ya no eran cuantificables. Particionamiento en el
sedimento fue
encontrado que un fregadero considerable para el insecticida
endosulfn. Estos resultados
demuestran que los macrfitos y algas pueden reducir la persistencia de
los plaguicidas
en el agua en las explotaciones agrcolas y proporcionar algunos datos
para modelar (Rose et al., 2006).
Higo. 6.3: Diagrama esquemtico del humedal estancada a escala
piloto
(Transferido de Rose et al., 2006).
pgina 186
Tecnologa de biodegradacin de la Eliminacin de Pesticidas Toxicidad
173
Este modelo de pesticidas de eliminacin ha dado una visin preliminar
de
transporte CIDE Pesti y eficacia de eliminacin en tierras hmedas
construidas sobre el algodn
farms. It is recommended that such wetlands are comprised of both
open water
y vege zonas tated, para aumentar el potencial de qumica
complementaria,
fotoltica, microbiano y pes mediada por la planta de pla- avera.
Adicional
Se necesita un trabajo para examinar el potencial de las algas en la
remediacin de los plaguicidas
tailwaters cin Irriga en la granja, y la determinacin de los
parmetros de modelado
para determinar el tamao y el diseo de humedales.
6.4.2 Prcticas de Biodegradacin de Pesticidas
Los productos qumicos en el suelo, el agua y el aire se ve afectada por
diversos qumica / fsica
y los factores ambientales. Estos factores estn relacionados entre s e
influyen en la
destino final de la sustancia qumica, as como los propios procesos de
degradacin.
Los factores ambientales (lluvia, temperatura, irradiacin y humedad
ultravioleta)
afectar a la poblacin microbiana del suelo y las actividades biolgicas
resultantes. Qumico/
factores fsicos del compuesto qumico incluyen la solubilidad, la presin
de vapor
y la estructura. Estos factores regulan la susceptibilidad a las reacciones
de transformacin
catalizada por la comunidad microbiana. La vegetacin tambin puede
afectar el destino, como se
absorcin y translocacin pueden eliminar la substancia qumica de
suelo o el agua. Una vez
dentro de la planta, la sustancia qumica se somete a continuacin a
metabolismo, el secuestro
en la vacuola o incorporacin en un componente de la planta tales como
la lignina. En algunos
casos, la sustancia qumica absorbida pueden ser liberados a travs de
la exudacin del sistema radicular,
por lo que es disponible para los procesos microbianos o qumicos. La
presencia de la
qumico en el suelo o el agua puede ser directa como en la aplicacin de
plaguicidas para plagas
control, o puede ser indirecta, como en el derrame o la contaminacin
inadvertida.
6.4.2.1 Mecanismo de biorremediacin
La biorremediacin es un proceso biolgico por el cual los contaminantes
ambientales
se eliminan o se convierten en sustancias menos txicas (o incluso til).
Natural
biorremediacin es a menudo catalizada en gran medida por la
microbiano o vegetal indgena
poblaciones en el suelo o ecosistemas acuticos. Estos procesos tienen
bioremediative
sin lugar a dudas estado activo durante millones de aos. Los
agricultores han sido reciclaje
Residuos animales y vegetales Vuelta a la tierra a travs de compostaje
durante miles de aos.
Sin embargo, es slo en las ltimas dcadas que los estudios detallados
han comenzado a sondear el
mecanismos moleculares subyacentes del proceso de compostaje, as
como otra
enfoques para la biorremediacin.
6.4.2.1.1 La degradacin microbiana
Cuando se utilizan microorganismos para la remediacin de
xenobiticos, tanto la inoculacin
de microorganismos y la aplicacin de nutrientes son esenciales para su
mantenimiento
en niveles adecuados durante perodos largos (Eapen et al., 2007).
Adems, los microbios
que muestran capacidades de biodegradacin de alta eficiencia en
virtud de laboratorio
condiciones pueden no funcionar igual de bien en los sitios
contaminados reales (Goldstein
et al., 1985; Macek et al., 2008). El potencial de la ingeniera gentica
para
Page 187
174 EA El-Sheikh y MB.A. ashour
acelerar la biorremediacin de xenobiticos se ha reconocido desde la
dcada de 1980, con los intentos iniciales se centraron en
microorganismo (Rugh
et al., 1998; Rosser et al., 2001; Sung et al., 2003; Rugh, 2004; Doty,
2008;
Singleton, 2007). Sin embargo, hay dos problemas principales con la
introduccin
ismos de microorgan transgnicos: las barreras burocrticas bloqueando
su liberacin
en el medio ambiente y la baja tasa de supervivencia de las cepas de
ingeniera que
se han introducido en el suelo contaminado.
Biorremediacin de productos qumicos en el suelo depende de las
actividades de
microbios en el suelo, o en asociacin con el sistema de races.
Qumica / fsica
propiedades del propio producto qumico puede influir en la
disponibilidad de los productos qumicos
al microbio, o la susceptibilidad a procesos de degradacin. Molecular
alteraciones catalizadas por procesos microbianos incluyen oxidacin,
reduccin,
hidrlisis, DE-esterificacin, deshalogenacin, desalquilacin,
conjugacin y
otros. Estos procesos dan lugar generalmente a un producto qumico no
txico en el caso
de un pesticida, o en la disminucin de los niveles de contaminacin de
materiales peligrosos.
La disipacin de los plaguicidas en el suelo implica varios procesos: la
volatilizacin,
fotodescomposicin, la lixiviacin, adsorcin, y la degradacin
microbiana.
La degradacin microbiana se considera que es un factor importante a
disuadir la minera
destino de diazinn y otros CIDES insecti organofosforados en el medio
ambiente.
Muchos autores indicaron que las cepas bacterianas pertenecientes a los
diferentes
grupos taxonmicos tienen un gran potencial degradacin del
organofosforado
insecticidas y otros pesticidas (Comeau et al, 1993;.. Ghassempour et al,
2002; Yasouri, 2006; Srensen et al., 2008). Los estudios sobre la
degradacin microbiana
son tiles en el desarrollo de tegias biorremediacin strat para la
desintoxicacin
de estos insecticidas por ismos microorgan. La biorremediacin, que
implica el uso
de microbios para desintoxicar y degradar tantes Pollu, ha recibido una
mayor atencin
como un enfoque lgico biotechno eficaz para limpiar ambientes
contaminados. En
en general, los enfoques para la biorremediacin son la modificacin del
medio ambiente, tales
como a travs de la aplicacin de nutrientes (bioestimulacin), y
aireacin (biosparging), o
la adicin de un degradador apropiado por ING semilla (bioaumentacin)
(Vidali,
2001; Singh et al., 2006).
estrategias de degradacin exhibidas por microorganismos incluyen co-
metabolismo: la biotransformacin de una molcula de coincidencia a la
normal
funciones metablicas del microbio; catabolismo: la utilizacin de la
molcula
como una fuente nutritiva o energa; y enzimas extracelulares
(fosfatasas
y amidasas): secretan en el suelo, que puede actuar sobre la molcula
como un
sustrato. pueden ocurrir tres tipos bsicos de reacciones: la degradacin,
la conjugacin,
y reordenamientos, y todos los cuales pueden ser microbianamente
mediada. Completar
la degradacin de un producto qumico en el suelo para dixido de
carbono y agua implica muchos
diferentes tipos de reacciones; Sin embargo, normalmente los primeros
uno o dos transformaciones
con frecuencia como resultado la prdida de actividad biolgica.
6.4.2.1.2 El uso de la lombriz de tierra en la biorremediacin de
Pesticidas
Debido a sus acciones biolgicas, qumicas y fsicas, las lombrices de
tierra pueden ser
empleado directamente dentro de las estrategias de biorremediacin
para promover la biodegradacin
de contaminantes orgnicos (Hickman y Reid, 2008). Su aplicacin en
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Tecnologa de biodegradacin de la Eliminacin de Pesticidas Toxicidad
175
la gestin de residuos implica la digestin de una amplia gama de
residuos orgnicos
(Edwards y Bohlen, 1996) en vermicast / compost. Figura 6.4 resume
las acciones positivas de lombrices discutidos en el medio ambiente del
suelo, los cuales
podra tericamente compensar parte de la biorremediacin se discuti
previamente
limitaciones. Adems de los efectos de las lombrices de tierra sobre
bitico microbiana
efectos, varios estudios han puesto de manifiesto los efectos biticos de
lombrices directos
en forma de comportamientos de alimentacin sobre destino de los
contaminantes. Por ejemplo, mientras
Ma et al. (1995) observ que el efecto de los alimentos hojarasca hecha
slo mnimo
diferencia en policclicos extensiones de prdida de hidrocarburos
aromticos (PAH), que hicieron nota
que la bioacumulacin de estos PAHs se mejor en gran medida a travs
de la limitacin de alimento.
Por lo tanto, la posibilidad de que las lombrices de tierra aumentan su
ingesta oral de partculas de suelo
cuando es conducido por el estrs de hambre. Al investigar
hidrocarburos totales de petrleo
(TPH) prdidas en sistemas con-lombriz de tierra que o bien tenan o no
haban recibido
alimentos, Schaefer et al. (2005) observ que TPH residual en los
sistemas con alimentarios
fue mayor; Sin embargo, estos no fueron significativos los valores.
Higo. 6.4: Lombriz efectos fsicos dentro de la biolgicas, qumicas y
ambiente del suelo (transferido de Hickman y Reid, 2008).
Estos resultados sugieren que si las lombrices de tierra fueron aplicadas
a sub ptima
suelos contaminados carentes de materia orgnica, un mayor grado de
biolgica
interaccin podra sobrevenir resultante mayores grados de prdida. En
apoyo de
esto, Haimi et al. (1992) afirmaron que cuanto menor sea el contenido
de materia orgnica, la
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176 EA El-Sheikh y MB.A. ashour
ms alta es la bioacumulacin, lo que obviamente implica una mayor
asociacin de suelos,
un resultado confirmado por Peters et al. (2007) observ que la
captacin significativamente mayor
de p, p-DDE de suelo que el compost por lombrices de tierra ( E. fetida y
L. rubellus ).
Esto significa que las lombrices de tierra slo deben aplicarse a los
suelos contaminados que hacen
no ejercer efectos excesivamente txicos. En relacin con esto, hay
diferencias inherentes
entre los tipos de segmento de lombrices que dictan las respuestas y el
comportamiento de los suelos
tipo, el tipo de contaminante, la disponibilidad de alimentos y una serie
de otros factores ambientales
parmetros (Edwards y Bohlen, 1996; Lavelle, 1998; Curry y Schmidt,
2007). Por lo tanto, sera necesario tener cuidado para seleccionar la
lombriz de tierra correcta
especies para la correcta destinados condiciones. tolerancias lombriz de
tierra y la toxicidad
a los suelos contaminados se han discutido en otro lugar (Sheppard et
al., 1998;
Spurgeon et al., 2004).
Se prev que se acerca para diacin bioreme lombriz de tierra asistida
podra incluir:
1. La aplicacin directa de las lombrices de tierra a los suelos
contaminados (por ejemplo, Schaefer et
al., 2005)
2. Co-aplicacin de las lombrices de tierra a los suelos contaminados con
otra orgnico
medios de comunicacin, como el compost (por ejemplo Ceccanti et al.,
2006)
3. Aplicacin de medios contaminados a las lombrices de tierra como
parte de una alimentacin
rgimen (por ejemplo Getliff et al., 2002)
4. Uso indirecto de las lombrices de tierra podra ocurrir a travs de la
aplicacin de vermidigested
material. Tales sustratos hipotticamente podran ser altos en
promovidos
degradadores y por lo tanto alto en el potencial catablico (por ejemplo,
Alvarez-Bernal et al.,
2006).
Un nmero de estudios han investigado el uso de las lombrices de tierra
dentro de
biorremediacin para mejorar las prdidas de los plaguicidas (Tabla 6.1).
estos contaminantes
tales como insecticidas (Verma et al., 2006) y herbicidas (Farenhorst et
al.,
2001; Binet et al., 2006) apoyan la amplia aplicabilidad del uso de
lombrices de tierra.
Se puede observar de la Tabla 6.1 que una variedad de especies de
lombrices fueron
investigado, as como los efectos de las lombrices de tierra en el
comportamiento, el destino y
prdida de pesticidas.
Los estudios se llevaron a cabo no slo para investigar los efectos sobre
las lombrices de tierra
agroqumicos, sino tambin para comprender los mecanismos que rigen
en la materia
medio ambiente del destino de agroqumicos y la persistencia. Sin
embargo, estos mecanismos
son consistentes con los pertinentes para la aplicacin de las lombrices
de tierra para la biorremediacin
de tales compuestos. Mientras que la investigacin (Eijsackers et al.,
2001) ha identificado
que biorremediacin lombriz de tierra asistida es probable que aumente
hidrocarburo
disponibilidad, y se ha visto volver a movilizar diclorodifeniltricloroetano
(DDT) y hexaclorociclohexano (HCH) unido residuos (Verma y Pillai,
1991), estos hallazgos estaban en conflicto con los de Bolan y Baskaran
(1996)
quien investig el efecto de la lombriz de tierra (Lumbricus rubellus y
alo-
Lobophora calignosa) proyecta sobre la sorcin y el movimiento de 14 C
atrazina,
14 C-2,4-diclorofenoxi cido actico (2,4-D) y 14 C-MetSul Foron metilo. Ellos
Pgina 190
Tecnologa de biodegradacin de la Eliminacin de Pesticidas Toxicidad
177
indicaron que los moldes absorbidos mayores cantidades de herbicidas
que el suelo fuente
debido a los niveles ms altos de carbono orgnico y fracciones de
tamao fino, presente debido
de lombrices acciones de molienda y la alimentacin selectiva.
Claramente ambas teoras son
creble, y tal vez poner de relieve no slo las diferencias en el
comportamiento compuesto,
experimental o especies de lombrices de tierra, sino tambin la amplia
variabilidad entre
los efectos de la mecnica de lombrices de tierra sobre el destino
compuesto, y la subsiguiente
lombriz de tierra arroja sobre el destino compuesto.
Tabla 6.1: Visin general de los pesticidas y los efectos de las especies
de lombrices de tierra en investigadas
la degradacin
Compuesto
Efecto especies de lombrices, o aspecto del uso de Referencia
herbicidas
La atrazina, 2,4-D
y Metsulforon
metilo
L. rubellus y A.
calignosa
yesos aumento
sorcin de compuestos
Bolan y
Baskaran (1996)
La atrazina
L. terrestris y A.
calignosa
sorcin Compuesto
destripar y contenidos
yesos. Las lombrices de tierra
determinada menor
mineralizacin
Binet et al.
(2006)
La atrazina
L. terrestris
actividad mezclado
y distribuido
compuesto, el aumento
persistencia, reducida
mineralizacin,
acelerado unin de
Residuos
Farenhorst et al.
(2000a)
La atrazina
L. terrestris
actividad mezclado
y distribuido
compuesto, el aumento
persistencia, reducida
mineralizacin,
acelerado unin de
Residuos
Farenhorst et al.
(2000b)
atrazina y
Metachlor
L. terrestris
Aumento de la sorcin de
compuesto de la madriguera
forros
Farenhorst et al.
(2001)
La atrazina
L. terrestris
Aumentado
mineralizacin y
biodisponibilidad
Meharg (1996)
La atrazina
A. Giardi
Burrows y moldes
aumentado compuesto
sorcin
Alekseeva et al.
(2006)
( Cont. )
pgina 191
178 EA El-Sheikh y MB.A. ashour
2,4-D,
carbofurano y
metribuzin
Las especies de lombrices no declarada
macroporos aumentaron
pero sorcin
aumento microbiana
mineralizacin
Mallawatantri et
Alabama. (1996)
isoproturn,
dicamba y
La atrazina
A. longa
publicado anteriormente
residuos ligados,
formacin limitada
de residuos ligados,
aumentado
mineralizacin
Gevao et al.
(2001)
La atrazina
L. terrestris y
A. calignosa
Reducido
mineralizacin y
reducido microbiano
nmeros, aumentaron
sorcin del compuesto
Kersante et al.
(2006)
atrazina y
metamitrona
vermicompost
Ningn efecto sobre
degradacin
Koocheki et al.
(2005)
insecticidas
El endosulfn
M. posthuma
Gut microflora
promovido como especfica
degradadores
Verma et al.
(2006)
hexacloro
hexano (HCH)
Pheretima
posthuma
Gut microflora
promovido como especfica
degradadores
Ramteke y
Hans (1992)
HCH y el DDT
P. posthuma
publicado anteriormente
residuos ligados
Verma y Pillai
(1991)
(Adaptado de Hickman y Reid, 2008)
El aumento de sorcin agroqumicos debido a la actividad de lombrices
de tierra y / o presencia
tambin se observ por Farenhorst et al. (2000a, b) cuando lombriz de
tierra ( Lumbricus
terrestris ) la actividad, aunque de localizacin efectiva trans, distribuir y
mezclar
14
C-atrazina, haba resultado en su persistencia a travs de sorcin. Tales
efectos de sorcin
se han observado para 14 C-atrazina y 14 C-metachlor a rica madriguera
orgnica
revestimientos (Farenhorst et al., 2001), para la atrazina a contenido
intestinal de lombrices de tierra y
yesos hmicos y coloidales ricos (Binet et al., 2006) y para la atrazina a
emitir
contenido de carbono orgnico, cuando lombriz de tierra ( Aporrectodea
Giardi ) presencia era
investigado en combinacin con un inculo atrazina degradantes (
Pseudomonas
sp. colar ADP (DSM 11735) (Alekseeva et al., 2006). Sin embargo, en
contraste
a estos hallazgos, Mallawatantri et al. (1996) determinaron que el suelo
orgnico
cantidad de carbono relacionados con los macroporos de lombrices de
tierra (especies desconocidas) era
directamente correlacionada con el nmero de microbios y por lo tanto
se observa mineralizacin de
2,4-D, carbo-furano y metribuzin; contenido de carbono orgnico no slo
parece
determinar la sorcin de los productos agroqumicos, pero tambin
mineralizacin microbiana.
pgina 192
Tecnologa de biodegradacin de la Eliminacin de Pesticidas Toxicidad
179
En relacin con esto, Binet et al. (2006) sugiri adems que las
lombrices de tierra
( L. terrestris y calignosa Aporrectodea actividad promovera atrazina)
mineralizacin alterando el tamao y la diversidad de las comunidades
microbianas. Ellos
a continuacin, informaron que la presencia de lombrices de tierra,
aunque a la densidad de aplicacin de baja (tres
lombrices de tierra por tratamiento 1,8 kg) ms de 86 das, determinan
una mineralizacin menor
medida (11,7%) en comparacin con los tratamientos sin-lombriz de
tierra (15,3%).
Esto est en consonancia con Farenhorst et al. (2000a), que tambin
informaron una disminucin
mineralizacin de atrazina en presencia de lombrices de tierra ( L.
terrestris ), mientras
observando tambin la aceleracin de la formacin de residuos no
extrables en
con-lombriz de tierra tratamientos (Farenhorst et al., 2000a, b). Sin
embargo, estos resultados
estn en conflicto con los de Meharg (1996) quien determin que el 14 C-
atrazina
mineralizacin estaba regulado por la disponibilidad de sustrato en sitios
de intercambio, y
en este caso, lombriz de tierra ( L. terrestris ) la presencia, en una alta
densidad de aplicacin
(Una lombriz de tierra por 40 g) afect la unin de la atrazina a sitios de
intercambio de suelos
durante un perodo de cuatro semanas, con la posterior lizacin minero
de 14 C-atrazina por el suelo
microorganismos ser el doble que el del control. Meharg (1996) lleg a la
conclusin
que esto era debido al aumento de la biodisponibilidad de los sitios de
intercambio atribuidas a
la presencia de gusanos, as reforzando an ms los resultados de
Eijsackers et al.
(2001). Los mecanismos de este se plante la hiptesis de que el
muclago lombriz de tierra
secreciones y cambios en la estructura del suelo y la microflora del
suelo.
En un estudio de contraste, Gevao et al. (2001) aplicaron gusanos de
tierra
( Longa Aporrectodea ) a una velocidad de cinco individuos por 2 kg a
suelos contaminados
con el pesticida no extrable ( 14 C-isoproturon, 14 C-dicamba y 14 C-
atrazina)
residuos durante 28 das para evaluar la degradacin subsiguiente, la
liberacin y la absorcin.
Se determin que debido a la actividad fsica lombriz de tierra, un mayor
grado de
previamente consolidado de residuos de pesticidas en comparacin con
la lombriz de tierra sin
tratamientos fue puesto en libertad. Cuando el estudio se aplic a los
pesticidas recin aadidos,
se observ que la formacin de residuos no extrables de 14 C-
isoproturon,
14 C-dicamba y 14 C-atrazina fueron mayores por factores de 2, 2 y 4,
respectivamente,
en los tratamientos sin-lombrices. De este modo, no slo se limitaron las
lombrices de tierra de la
formacin de la fraccin unida, sino que tambin promueven la
liberacin y en minerales
zacin de residuos ligados. Desde una perspectiva de biorremediacin,
esto claramente
representa un escenario beneficioso global. se atribuyeron Los
mecanismos
a la promocin de microorganismos degradadores de plaguicidas en
intestino de la lombriz que se aade a la
suelo, los cambios en sustrato de carbono ty DISPONIBIL y los cambios
en la estructura del suelo
posteriormente alterando la disponibilidad compuesto.
Adems de este estudio, Kersante et al. (2006) investigaron la de
interacciones
entre las lombrices de tierra ( L. terrestris y A. calignosa ) y
degradadores atrazina
( Pseudomonas sp. ADP) en los microorganismos del suelo sitios
(contenido intestinal del gusano de la tierra, y arroja
forros madriguera). Determinaron que la mineralizacin de atrazina se
redujo en
suelo lombriz de tierra micro-sitios y que las lombrices de tierra
alteraron significativamente el suelo
estructuras microbianas mediante la reduccin del tamao de las
comunidades atrazina degradadores.
Tambin sugirieron que baja mineralizacin de atrazina, o prdida,
podran ser en parte
se explica por las bajas tasas de mineralizacin eficaces en los
bioestructuras debido a
pgina 193
180 EA El-Sheikh y MB.A. ashour
sorcin al alto contenido de carbono orgnico, como se ha sealado
previamente por Farenhorst
Et al. (2001), Alekseeva et al. (2006) y Binet et al. (2006).
La eficacia de la microflora intestinal de lombrices de tierra para
efectuar contaminante del suelo
prdidas o degradacin, ha sido previamente discutido. Por ejemplo,
Verma
Et al. (2006) tom nota del potencial de crecimiento de la lombriz de
tierra (Mataphire posthuma)
los microorganismos del intestino a la Endosulfan pesticida, mientras
que Ramteke y Hans
(1992) Los microorganismos aislados de la tripa de Pheretima posthuma
tratados
con HCH sealando significativa degradacin HCH posterior. Sin
embargo, a diferencia de
Verma et al. (2006), los autores observaron que degradadores (HCH) en
las tripas gradualmente
aumentado a lo largo de un perodo de cinco semanas, en sustitucin de
otros microflora intestinal, lo que indica
el potencial de crecimiento intestinal especializada. Sin embargo, como
dis cussed por un nmero
de los autores (Edwards y Bohlen, 1996; Brown y Doube, 2004; Kersante
et al., 2006; Curry y Schmidt, 2007) sigue siendo cuestionable si (a)
microorganismos son indgenas de tripas de lombrices de tierra, (b)
microflora lombriz intestinal
proviene del suelo circundante y restos de plantas, o (c) si especializada
la alimentacin determina la flora intestinal distintivos.
Una serie de estudios relativos a la aplicacin de las lombrices de tierra,
o los efectos
de lombrices de tierra, sobre los productos agroqumicos de suelo
asociado se han discutido. Mientras que
resultados contradictorios se han observado, especialmente con
respecto al compuesto
sorcin y liberacin, que es el padre AP que hay una serie de
potencialmente positivo
efectos fsicos sobre el destino de agroqumicos.
6.5 La fitorremediacin de Plaguicidas
La fitorremediacin, el uso de plantas para limpiar el suelo contaminado
y agua
recursos, ha recibido mucha atencin en los ltimos aos. Aunque las
plantas
tienen la capacidad inherente para desintoxicar xenobiticos, por lo
general carecen de la
va catablica para la degradacin completa de estos compuestos en
comparacin
a microorganismos (Abhilash et al., 2009). Un mtodo directo para la
mejora de la
eficacia de la fitorremediacin es sobre-expresa en plantas los genes
implicados
en el metabolismo, la captacin o el transporte de contaminantes
especficos. Adems, la
expresin de genes adecuados en el sistema de races mejora de
rhizodegradation
compuestos altamente recalcitrantes como PAHs, PCBs etc. Por lo tanto,
la idea para amplificar
fue desarrollado biodegradacin planta de xenobiticos por
manipulacin gentica,
siguiendo una estrategia similar a la utilizada para desarrollar cultivos
transgnicos. genes
de humano, los microbios, plantas y animales estn siendo utilizados
con xito para
esta empresa. La introduccin de estos genes se puede conseguir
fcilmente para muchos
especies vegetales utilizando Agrobacterium tumefaciens
transformacin de plantas mediada
o mtodos de ADN directos de transferencia de genes (Abhilash et al.,
2009).
cin Phytoremedia para la eliminacin de xenobiticos puede ser una
alternativa /
mtodo suplementario, ya que las plantas son robustos en el
crecimiento, son una renovable
de recursos y puede ser utilizado para remediacin in situ (Cunningham
y Berti,
1993; Cunningham et al, 1995., 1996; Cunningham y Ow, 1996; Suresh y
pgina 194
Tecnologa de biodegradacin de la Eliminacin de Pesticidas Toxicidad
181
Ravishankar, 2004; Parameswaran et al., 2007). Tiene casi seguro
pblico
aceptacin. Adems, las plantas pueden sobrevivir concentraciones ms
altas de peligrosos
residuos que muchos microorganismos utilizados para bioreme diacin.
La fitorremediacin
aumenta la cantidad de carbono orgnico en el suelo, que puede
estimular
la actividad microbiana y aumentar la degradacin rizosfrico de los
contaminantes.
La fitorremediacin tambin produce otros beneficios, incluyendo el
secuestro de carbono, el suelo
de estabilizacin, y la posibilidad de biocombustible o fibra de
produccin. El desarrollo
de las tecnologas de fitorremediacin para la base de plantas de
limpieza de la contaminacin
por lo tanto, los suelos es de inters significativo (Hooker y Skeen, 1999;
Dietz y
Schnoor, 2001; Eapen y D'Souza, 2005).
Aunque la investigacin se ha hecho para demostrar el xito de
fitorremediacin, lo que resulta en su uso en muchos sitios
contaminados (y Aprill en
Sims, 1990; Gunther et al., 1996; Binet et al., 2000; Liste y Alexander,
2000;
Mattina et al., 2000; White, 2000, 2001, 2002, 2003; Fismes et al., 2002;
Li et
al., 2002; Maila y Cloete, 2002; Yoon et al., 2002; Singh y Jain, 2003;
Cantado
et al., 2003; Sunderberg et al., 2003; Trapp et al., 2003; Gao y Zhu,
2004;
Ma et al., 2004; Mattina et al., 2004; Suresh et al., 2005; Parrish et al.,
2006;
Mills et al., 2006; Aslund et al., 2007), el mtodo todava carece de
amplia aplicacin.
Adems, la desintoxicacin de contaminantes orgnicos por las plantas
es a menudo lento, lo que lleva
a la acumulacin de compuestos txicos en plantas que podran ser
liberado ms tarde
en el medio ambiente (Aken, 2008). Tambin existe la preocupacin
sobre el potencial
para la introduccin de contaminantes en la cadena alimentaria. La
cuestin de cmo
disponer de plantas que se acumulan los contaminantes orgnicos es
tambin una preocupacin grave.
Un mtodo directo para mejorar la eficacia de la fitorremediacin es
sobreexpresar en plantas transgnicas los genes implicados en el
metabolismo, absorcin, o
. Transporte de contaminantes especficos (Shiota et al, 1994; Rugh,
2004; Cherian y
Oliveira, 2005; Kramer, 2005; Eapen et al., 2007; Macek et al., 2008;
Aken,
2008; Doty, 2008). Si las plantas son capaces de degradar los
xenobiticos a no txico
metabolitos o completamente mineralizado en dixido de carbono,
nitrato, cloro
etc., no hay temor sobre las estrategias de gestin de residuos
peligrosos para su
disponer de plantas cosechadas. El propsito de esta revisin es
proporcionar reciente
avances en el desarrollo de plantas transgnicas que sobreexpresan
genes catablicos
incluyendo citocromo P450 bacteriana y humana para la degradacin
mejorada
y la mineralizacin de los contaminantes xenobiticos.
6.5.1 Las plantas transgnicas para la biodegradacin mejorada
y
La fitorremediacin de xenobiticos orgnicos
La contaminacin ambiental con xenobiticos orgnicos (pesticidas,
productos farmacuticos,
compuestos de petrleo, PAHs, PCBs etc.) es un problema global, y el
desarrollo de tecnologas de remediacin de la invencin para la
descontaminacin
sitios de afectados son, por tanto, de suma importancia. Fsica, qumica
y mtodos biolgicos todos se pueden usar para la remediacin de
contaminada
sitios (Lee y Huffman, 1989; Felsot y Dzantor, 1995; Johnson et al., 1997;
pgina 195
182 EA El-Sheikh y MB.A. ashour
Hatakeda et al., 1999; Wirtz et al., 2000; Kummling et al., 2001; Perrin-
Ganier
et al., 2001; Matsunaga y Yashuhara, 2003; . Yang et al, 2007); sin
embargo,
fitorremediacin tiempo se ha reconocido como un mtodo rentable para
la
la descontaminacin de los recursos de suelo y agua (Sal et al, 1998;..
Macek et al,
2000; Eapen y D'Souza, 2005). Adems, una variedad de atenuacin de
contaminantes
mecanismos que poseen las plantas hace que su uso en la remediacin
de contaminacin
tierra y el agua ms factible que fsico y remediacin qumica (Glick,
2003; Huang et al, 2004., 2005; Greenberg, 2006; Gerhardt et al., 2009).
Como un
resultado de su naturaleza sedentaria, las plantas han desarrollado
diversas capacidades para hacer frente
con compuestos txicos en su ment Environ. Las plantas actan como
bombeo solar impulsado
sistemas de filtrado y ya que ocupan los contaminantes (principalmente
solubles en agua)
a travs de sus races y de transporte / trasladar a travs de diversos
tejidos vegetales
donde pueden ser metabolizados, secuestradas, o volatilizan (Greenberg
et al.,
2006; Abhilash, 2007; Doty et al., 2007).
Con respecto a sus funciones directas en los procesos de remediacin,
las plantas usan
diferentes tipos de estrategias para hacer frente a los productos
qumicos ambientales:
fitoextractor, fitodegradacin, phytovolatilization, y la gradacin rhizode
(Fig. 6.5) (Schnoor, 1997). Fitoextraccin consiste en la eliminacin y
posterior
almacenamiento de contaminantes por la planta y, a menudo se aplica a
la exclusin
y el almacenamiento de metales que pueden someterse a la especiacin
en las plantas, pero no puede ser
metabolizado. Sin embargo, ciertos productos qumicos orgnicos
tambin se pueden tratar en este
de forma debido a la resistencia inherente a la degradacin. A la inversa,
fitodegradacin
describe procedimientos en los que las plantas metabolizan los
contaminantes que toman
arriba. Los componentes de este mecanismo se utilizan a menudo por
las plantas expuestas a
herbicidas y por lo tanto se han investigado extensivamente. Los
procesos metablicos
involucrado en fitodegradacin tienen fuertes similitudes con los
utilizados por los animales
para la modificacin y la degradacin de las drogas y otras toxinas. Esto
ha dado
elevarse a un modelo conceptual para fitodegradacin conocido como el
hgado verde
modelo (Sanderman, 1994). Un mecanismo de atenuacin adicional,
conocido como
phytovolatilization, implica la liberacin de contaminantes a la atmsfera
despus de su absorcin desde el suelo o el agua. Este mecanismo se ha
observado
tanto para los contaminantes metlicos orgnicos y pesados, incluyendo
tricloroetileno
(TCE), que se ha observado en el gas de escape a partir de hojas de la
planta en el
laboratorio y de campo (Compton et al., 1998), y en la produccin de
voltiles,
mercurio elemental mediante ingeniera gentica Arabidopsis thaliana
crecido en el
presencia de mercurio inico (. Rugh et al, 1996; Bizily et al., 1999). una
indirecta
mecanismo, rhizodegradation, se refiere a la transformacin de
contaminantes por
microbios residentes en la rizosfera de plantas (es decir, la zona de
microbio-rico en ntimo
contacto con el sistema vascular de la raz). Como se mencion
anteriormente, la presencia de
plantas en los sitios contaminados pueden afectar drsticamente las
condiciones redox del suelo y
contenido orgnico (a menudo a travs de la secrecin de cidos
orgnicos a partir de races), as
como la humedad del suelo. Rhizodegradation es el mecanismo
dominante en la eliminacin
de hidrocarburos de petrleo totales de suelo por rboles de races
profundas (Carman et al.,
1998), as como especies anuales (Schwab y Bancos, 1994).
Page 196
Tecnologa de biodegradacin de la Eliminacin de Pesticidas Toxicidad
183
Higo. 6.5: mecanismo tpico de atenuacin posedo por las plantas
contra los xenobiticos. los
xenobiticos se pueden estabilizar o degradados en la rizosfera,
adsorbido o acumulado
en las races y transportados a las partes areas, volatilizado o
degradados dentro de la planta
tejido. desintoxicacin Plant generalmente implica la modificacin de
conversin o enzimtica
(Fase I) seguida de conjugacin (fase II), seguido por el secuestro activo
(fase III).
(GST = glutatin S-transferasas; GT = glucosiltransferasas; Mt =
Malonyltransferases;
OA = cidos orgnicos (Transferido de Abhilash et al., 2009).
6.5.2 Remediacin Ambiental
El concepto de que las plantas pueden degradar xenobiticos surgi en
1940, cuando
plantas se muestran para metabolizar los pesticidas (Sanderman, 1994).
Desde entonces,
el desarrollo de la genmica, protemica y lomics Metabo ha contribuido
mucho para mejorar o manipular el metabolismo de las plantas de
muchos xenobiticos
contaminantes (Raskin, 1996;. Eapen et al, 2007; Aken, 2008). A pesar
de que
fitorremediacin se aplic primero para la eliminacin de los
contaminantes inorgnicos de
suelo, esta tecnologa ha demostrado ser poco a poco a ser eficiente
para el tratamiento de
contaminantes orgnicos incluyendo disolventes clorados, hidrocarburos
poliaromticos
y explosivos (Pilon-Smits, 2005;. Sal et al, 1998). La primera generacin
de
comercialmente disponibles se produjeron plantas transgnicas para
reducir la prdida de
rendimiento de la cosecha causada por dao de los insectos en el mismo
tiempo que la reduccin de la cantidad
de pesticidas requeridos (por ejemplo, plantas que expresan la toxina
Bt). Sin embargo, transgnico
plantas para la fitorremediacin se desarrollaron primero para remediar
metal pesado
sitios contaminados; suelos por ejemplo, Nicotiana tabaccum expresar
una levadura
gen de la metalotionena para mayor tolerancia al cadmio, o Arabidopsis
thaliana
overexpres cantar un gen de la reductasa de iones de mercurio para
mayor tolerancia al mercurio
(Misra y Gedama, 1989;. Rugh et al, 1996).
Pgina 197
184 EA El-Sheikh y MB.A. ashour
El primer intento de desarrollar plantas de ingeniera para la
fitorremediacin de
contaminantes orgnicos dirigidos explosivos y compuestos orgnicos
halogenados
en plantas de tabaco (French et al, 1999;.. Doty et al, 2000). La
eficiencia de
plantas transgnicas a degradan clorado disolventes, explosivos, phe
nolics etc.
han sido ampliamente reconocido en la literatura (McCutcheon y
Schnoor, 2003; Mackova et al., 2006; Meagher, 2000; Eapen et al., 2007;
Doty,
2008; Macek et al., 2008). Estas plantas han sido desarrollados para
contener
transgenes responsables de la metabolizacin de xenobiticos o
transgenes que
resultar en el aumento de la resistencia de los contaminantes.
CYP450 para el metabolismo mejorado de Pesticidas
enzimas citocromos P450 comprenden una superfamilia de protenas
hemo cruciales
para el oxidativo, peroxidativo y bolism meta reductora de un grupo
diverso
de compuestos, incluyendo endobiticos, tales como esteroides, cidos
biliares, cidos grasos,
prostaglandinas y leucotrienos, y xenobiticos, incluyendo la mayor
parte del
frmacos teraputicos y contaminantes ENVI ronmental (Klingenberg,
1958; Nelson
et al., 1996; Kreuz et al., 1996). El primer informe sobre la existencia de
un CYP
enzima o un carbono microsomal pigmento de unin monxido-se
public
en 1958 por Klingenberg et al. Esta enzima dio una nica ptica 450-nm
pico de absorcin, y cuando se reconoci su naturaleza hemoprotein, se
le dio
los P450 nombre del citocromo (Omura y Sato, 1962, 1964; Omura,
1999). En
casi todos los organismos vivos, estas enzimas estn presentes en ms
de una forma,
formando de esta manera una de las mayores familias de enzimas. El
sistema de enzima es
situado en microsomas y se compone de varias isoformas del citocromo
P450 y
un NADPH-citocromo P450 oxidoreductasa no especfica. La notable
diversidad
de las enzimas CYP ha dado lugar a una clasificacin sistemtica de
individuo
formas en familias y subfamilias. Las secuencias de la protena dentro de
un dado
familia de genes es al menos un 40% idntica (por ejemplo, CYP2A6 y
CYP2B6), y el
secuencias dentro de una subfamilia dada son N55% idntica (por
ejemplo, CYP2A6 y
CYP2A7) (Nelson et al., 1996). Sin embargo, el nmero de familias y
enzimas
vara entre los diferentes organismos.
Aunque citocromo P450 (P450 o CYP) monooxigenasas en mayor
Las plantas juegan un papel importante en el metabolismo oxidativo de
endgeno y
compuestos lipfilo exgeno (Inui et al, 2000;.. Eapen et al, 2007; Doty,
2008), la informacin molecular sobre las especies P450 que
metabolizan xenobiticos en
plantas es bastante limitado. Por otra parte, hay una serie de especies
P450
metabolizar antibiticos xeno en los microsomas de hgado humano (Inui
et al., 2000).
Un estudio de 11 P450s humanos en el CYP1, 2, y 3 familias utilizando
un recombinante
levadura sistema expresar mostr que puedan Metabo Lize 27
herbicidas y
cuatro insecticidas (Inui et al., 2001). Adems, otro estudio realizado por
mismo
grupo de investigacin encontr que CYP1A1 humano metaboliza 16
herbicidas, incluyendo
triazinas, ureas y carbamatos, y CYP2B6 metabolizan ms de 10
herbicidas, incluyendo cloroacetanilidas, oxiacetamidas, y 2,6-
dinitroanilinas,
tres insecticidas, y dos productos qumicos industriales (Inui et al.,
2001).
pgina 198
Tecnologa de biodegradacin de la Eliminacin de Pesticidas Toxicidad
185
Durante las dos ltimas dcadas, se llevaron a cabo numerosos
experimentos
en la sobreexpresin de humanos y de mamferos (por ejemplo, rata,
ratn, conejo)
Isoenzimas de CYP450 (CYP1, CYP1, CYP3) en plantas superiores tales
como Nicoti ana
tabaccum , Solanum tuberosum , Oryza sativa o Arabidopsis thaliana .
los
introduccin de estos genes se puede conseguir fcilmente para muchas
especies de plantas
usando Agrobacterium tumefaciens mediada por transformacin de la
planta o directa
la transferencia de genes de ADN (Doty, 2008). Los microsomas que
contienen humano seleccionado
P450s estn disponibles comercialmente que son producidos por medio
de bacterias
( Escherichia coli ) o sistema de expresin de baculovirus (Schmidt et al.,
2006a, b).
La integracin y la expresin de este transgn pueden ser confirmados
por el sur,
El anlisis de transferencia norte y el oeste (Kawahigashi et al., 2007). El
primario
objetivo de estas manipulaciones genticas eran la produccin de
cualquiera de herbicida
planta resistente (por ejemplo, la tolerancia hacia atrazina, simazina) o
plantas capaces de
mejorada metabolizacin de xenobiticos (herbicidas o halogenados
voltiles
hidrocarburos) y su posterior eliminacin del suelo y del suelo
contaminado
agua. Muchas de estas plantas se sobreexpresa con un nico (por
ejemplo, CYP1A1
o CYP2E1) o varios genes P450 (por ejemplo, CYP1A1, CYP2B6, y
CYP2C19).
Parcialmente, las plantas se modificaron adicionalmente con P450
NADPH-citocromo
reductasa, o P450 y reductasa se expresaron como enzima de fusin
(Shiots et al.,
2000; Schmidt et al., 2006a, b). Debido a la amplia especificidad de
sustrato de humano
y mamferos P450s, los transgnicos mostraron una mejora notable de
degradacin metablica hacia xenobiticos individuales o mltiples
(Tabla 10.2).
Los herbicidas son econmicamente importantes porque evitan las
prdidas en
rendimiento de los cultivos debido a la infestacin de malezas (Lockhart
et al, 1990;.. Kawahigashi et al,
2008). Sin embargo, el uso excesivo y el uso repetido de mismo
herbicida pueden conducir a
el desarrollo de malas hierbas resistentes a los herbicidas. De acuerdo
con la Weed Science
Society of America, ms de 310 biotipos de malas hierbas resistentes a
los herbicidas han sido
reportado en los campos agrcolas y jardines de todo el mundo. Como
resultado de estos
tolerancia a herbicidas, se necesita mayor cantidad de herbicidas para
matar estas malas hierbas,
por lo que los residuos contaminen el suelo y cuerpos de agua cercanos
(Kawahigashi
et al, 2006a, b.; 2007). Las plantas utilizadas para la descontaminacin
de estos contaminada
sistema debe ser resistente a herbicidas. Las dos estrategias principales
en
cultivos agrcolas contra la tolerancia a herbicidas son: (i) la
modificacin de sitios diana
y (ii) desarrollar cin de desintoxicacin mejorada (Putwain, 2005). Entre
el
diversos grupos enzimtica, el citocromo P450 y glutatin S-transferasa
juego
papeles importantes en la degradacin mejorada de herbicidas (Ohkawa
et al., 1999).
informacin molecular sobre P450 planta relacionada con el
metabolismo de contaminante orgnico es
limitado; Sin embargo, muchos dependiente de P450 oxidaciones en
microsomas de plantas tienen
ha informado (Kawahigashi et al., 2007), incluyendo la oxidacin de
clorotolurn
en el maz (Fonne-Pfister y Kreuz, 1990) y el trigo (. Mougin et al, 1990);
linuron en el trigo (Frear, 1995) y maz (. Moreland et al, 1993); atrazina
en tulipn ( Tulipa generiana L.); e isoproturn en jcama (Belfrod et al.,
2004). A pesar de numerosos genes del citocromo son reportados en las
plantas, slo algunos
metaboliz herbicida ing genes P450 han sido clonados y caracterizados,
tales
Pgina 199
186 EA El-Sheikh y MB.A. ashour
T
capaz 6.2:
T
plantas ransgenic para mejorar la fitorremediacin de pesticidas
planta objetivo
Gen (s)
Las enzimas
Fuente
T
efectos ransgene
Referencia
O. sativa
CYP1A1, CYP2B6 y CYP2C19
monooxigenasa del citocromo P450
Humano
La fitorremediacin de atrazina y metolacloro
Kaw
ahigashi et al.,
2006a
Solanum tuberosum
,
O.
sativa
CYP1A1, CYP2B6 y CYP2C19
monooxigenasa del citocromo P450
Humano
La resistencia a la sulfonilurea y otros herbicidas
Inui y Ohkaw
un,
2005
N. tabaccum
CYP105A1
monooxigenasa del citocromo P450
seolus Streptomycesgri-
La resistencia a la sulfonilurea
O'keefe et al., 1994.
O. sativa
CYP2C9
monooxigenasa del citocromo P450
Humano
T
olerance a la sulfonilurea
Hirose et al., 2005.
O. sativa
CYP2B22, CYP2C49
monooxigenasa del citocromo P450
Sus scrofa
T
olerance a varios herbicidas
Kaw
ahigashi et al.,
2005
N. tabaccum
,
A.
thaliana
CYP71A10
monooxigenasa del citocromo P450
Glycine max
T
olerance a fenilo herbicida de urea
Siminszky et al., 1999
N. tabaccum
CYP76B1
monooxigenasa del citocromo P450
Helianthus tuberosus
T
olerance al herbicida
Didierjean et al., 2002.
Alfalfa
N. tabaccum
Atza
atrazina clorohidrolasa
Las bacterias
actividad metablica mejorada contra atrazina
W
ang et al., 2005
O. sativa
protox protoporfiringeno
IX oxidasa
Bacillus subtilis
T
olerance a difenil ter herbicida oxyfl ufen
Jung et al., 2008
N. tabaccum
ophc2
Organofosforados hidrolasa (OPH)
udoalcaligenes Pseudomonaspse-
la degradacin mejorada de organofsforo (metil paratin).
W
ang et al., 2008
PAG
opulus trichocarpa
-ECS
-Glutamycysteine
sintetasa
lamo
La sobreexpresin de -ECS result en una mayor tolerancia al
cloroacetanilida herbicidas.
Gllner et al., 2001
N. tabaccum
CYP450E1
monooxigenasa del citocromo P450
Humano
la degradacin mejorada de antraceno y chloropyriphos
Dixit et al., 2008
A. thaliana
LA
CI
Root especfi c lacasa
Algodn
Segrega lacasa a la rizosfera y han mostrado una mayor resistencia a
alleleochemicals fenlicos y la tolerancia mejorada a 2, 4, 6,
-trichlorophenol.
W
Ang et al., 2004
(Adaptado de Abhilash et al., 2009)
pgina 200
Tecnologa de biodegradacin de la Eliminacin de Pesticidas Toxicidad
187
como CYP73A1 y CYP76B1 de alcachofa de Jerusaln ( Helianthus
tuberosus )
(Pierrel et al, 1994;.. Robineau et al, 1998), CYP71A11 de tabaco (
Nicotiana
tabaccum ) (Yamada et al., 2000), y CYP71A10 procedente de la soja
(Glycine max)
(Siminszky et al., 1999). Fischer et al. (2001) informaron de 16 citocromo
P450
especie responsable de la detoxificacin de herbicidas y tolerancia
cruzada (DE
Prado et al., 2005) en Lolium rigidum.
6.5.3 El glutatin S-transferasa (GST) para plaguicidas Enhanced
Degradacin / Conjugacin
Adems de la oxidacin de P450, la conjugacin de glutatin es un
importante
mecanismo para la desintoxicacin de xenobiticos. Glutatin S-
transferasas (GST)
(CE. 2.5.1.18) son una familia de enzimas multifuncionales que
participan en el
desintoxicacin celular y la excrecin de muchos fisiolgica y endgeno
sustancias (Wilce y Parker, 1994), que se encuentran en animales,
plantas y
microorganismos (Santos et al., 2002). Adems, los estudios sobre las
GST son adems
la caracterizacin de su papel en el metabolismo de xenobiticos. Bajo
condiciones normales,
glutatin est presente predominantemente en su forma reducida (GSH),
con solamente
una pequea proporcin presente en su estado completamente oxidado
(GSSG) (Dixon et al.,
1998a, b). GST catalizan la adicin nucleoflica del tiol de la reduccin
glutatin (-glutamil-cisteinil-glicina) a electrofnicos centros en orgnica
compuestos. Los conjugados de glutatin formados son ms hidrfila,
por lo tanto
facilitando su exclusin. Por lo tanto GST transformacin catalizada es
una de
los primeros pasos a lo largo de la ruta del cido mercaptrico en el que
hidrfoba
xenobiticos son detoxificados y eliminados de los organismos (Habig et
al.,
1974). Posteriormente, una bomba de eflujo dependiente de ATP que
media la exportacin
de conjugados de glutatin a partir de clulas (Hayes y Wolf, 1990;
Ishikawa, 1992)
(Fig. 6.6).
De acuerdo con Dixon et al. (1998a), todas las GST de plantas tienen
relacin nativa
masas de alrededor de 50 kDa y se compone de dos firmada de manera
similar (~ 25
kDa) subunidades. Adems, cada sub-unidad contiene una
cinticamente independiente
sitio activo con dominios de unin distintos para glutatin y compaeros
de sustratos
(Marrs, 1996). Las subunidades pueden ser idnticos, dando lugar a
homodmeros,
o distinto pero relacionado, resultando en heterodmeros, con cada sub-
unidad distinta
codificada por un gen diferente (Dixon et al., 1998a). Dado que las
plantas contienen complejo
familias multignicas de GST, las diversas sub-unidades pueden ser
capaces de producir
mltiples isoenzimas GST homo y Hetro-dimrica (Dixon et al., 1998a,
b).
La presencia de un gran nmero de isoenzimas con un diferencial, la
superposicin de
selectividad de sustrato, proporciona el organismo la posibilidad de
desintoxicar una amplia
gama de xenobiticos reactivos, catalizando su conjugacin con GSH, o
por 'atrapar' a travs de la unin no covalente o covalente. La medida
en
que la desintoxicacin y / o activacin se producir depende del nmero
y
cantidad de isoenzimas especficas presentes en un tejido (Vos y
Bladeren, 1990).
Por lo tanto, la sobreexpresin de estos genes en especies de plantas
adecuadas es esencial
para mejorar su potencial catablico.
pgina 201
188 EA El-Sheikh y MB.A. ashour
Higo. 6.6: Representacin esquemtica del papel de las GST en la
desintoxicacin de xenobiticos y
metabolismo endgeno. Es un hecho comprobado que las verdaderas
reacciones de desintoxicacin en fase II
realizado por GST, haciendo que el compuesto bajo consideracin menos
txicos debido
conjugacin (por lo general en una reaccin de sustitucin, pero en
ocasiones como una reaccin de adicin), y
a continuacin, un conjunto de reacciones adicionales que incluyen
escisin, reestructuracin, conjugacin secundaria
etc. La mayora de las GST plantas se supone que es citoslica; Sin
embargo, hay evidencia
para la existencia de isoenzimas apoplsticas y nucleares (Dixon et al.,
1998a, b). los
molculas conjugadas (R-SG) se transportan entonces a las vacuolas
para su posterior procesamiento.
Las actividades alternativas de GST incluyen glutatin peroxidasa,
esterasa, isomerasa
y actividades de unin, que puede desempear funciones adicionales en
el metabolismo endgeno
(Modificado de Dixon et al., 1998a, b).
plantas de lamo se transformaron para sobreexpresar el gen que
codifica bacteriana
-glutamil-cistena sintetasa (-ECS), que es la tasa de limitacin
reglamentaria
enzima en la biosntesis de GSH (Noctor y Foyer, 1998). la transformada
plantas mostraron niveles de GSH y su precursor -ECH (Noctor et
mejoradas
al., 1996). El aumento de la produccin de GSH contribuye a la
antioxidante
proteccin de las clulas de las plantas contra el estrs oxidativo
causado por diversos problemas ambientales
factores (Noctor y Foyer, 1998). Gllner et al. (2001) reportaron que el
aumento
los niveles de glutatin se ha demostrado que aumentar la resistencia a
chloroace-
herbicidas tanilide en plantas de lamo transgnicos que expresan
cistena-glutamil
sintetasa. Karavangeli et al. (2005) desarrollaron plantas de tabaco
transgnicas
sobreexpresa la glutatin S-transferasa I para la fitorremediacin
mejorada
de cloroacetanilida herbicida. La enzima iso GST I a partir de
exposiciones de maz
Pgina 202
Tecnologa de biodegradacin de la Eliminacin de Pesticidas Toxicidad
189
actividad catablica significativo para el alaclor cloroacetanilida
herbicida y
parece ser que participan en su proceso de desintoxicacin. Las plantas
transgnicas mostraron
sustancialmente mayor tolerancia a alaclor en comparacin con plantas
no transgnicas en
trminos de crecimiento y desarrollo (Karavangeli et al., 2005).
Recientemente, Schroder et al. (2008) informaron de la glutatin
dependientes
desintoxicacin (desintoxicacin conjugado) de xenobiticos orgnicos
(acetil saliclico
cido, lamotrigina, paracetamol, 1-cloro-2, 4-dinitrobenceno (CDNB),
fenox-
aprop, y propachlor) en Phragmites australis [(Cav.) Trin. Ex. Steud.]. Un
estudio
de Brenter et al. (2008) mostraron que la expresin de transferasas de
glutatin S en
lamos (Populus trichocarpa) result en un aumento significativo del gen
expresin de GST, alcanzando un mximo a niveles de 25 y 10 veces el
nivel de expresin de
plantas expuestas no despus de 24 h de cada uno de los genes GST,
respectivamente (Brenter
et al., 2008). Brassica juncea sobreexpresan-glutamil-cistena sintetasa
y glutatin sintetasa tambin han demostrado una mayor tolerancia a la
atrazina,
CDNB, metolaclor y fenantreno (Flocco et al., 2004). Recientemente,
Dixit
Et al. (2008) introdujeron P4502E1 humana y GST de hongos
Trcihoderma
virens en N. tabacum . La planta transgnica ha demostrado
degradacin mejorada
de antraceno y chloropyriphos. Por lo tanto, se espera que el transgnico
expresin de ambos P450 y conjugacin de glutatin enzimas humanas
en plantas
proporcionar una mayor desintoxicacin y por lo tanto la mejora de
remediacin de
xenobiticos orgnicos.
6.5.4 Rhizoremediation de xenobiticos orgnicos
Uno de los enfoques ms prometedores para la mejora de la emediation
phytor
La tecnologa es la insercin de genes en los xenobiticos que degradan
la raz
sistema de especies de plantas adecuadas para la secrecin rizosfrico
mejorada y
la posterior degradacin de contaminantes (Glick, 2003; Gerhardt et al.,
2009;
Kawahigashi, 2009). La ventaja de este mtodo es que las plantas no lo
hacen
necesitar tomar los contaminantes con el fin de desintoxicar ellos; en
cambio, el secretada
Las enzimas pueden degradar los contaminantes en la zona rizosfera
(Kawahigashi, 2009).
La rizosfera es el suelo en las inmediaciones de una raz que se ve
afectado
por procesos de raz. Que surge cuando una punta de la raz entra en un
volumen de suelo
y desaparece algn tiempo despus de la raz ha muerto y
descompuesto (Darrah
et al., 2006). Muchos estudios demuestran mejora de forma significativa
cin dissipa
y / o mineralizacin de los contaminantes orgnicos persistentes en la
interfaz raz-suelo
(Anderson et al, 1993;. Anderson y Coats, 1995; Kuiper et al, 2004;.
Chaudhry
et al., 2005; Abhilash y Singh, 2009b). Este efecto rizosfera es
generalmente
atribuido a un aumento en la densidad microbiana, la diversidad y / o la
actividad metablica
debido a la liberacin de exudados de la raz de la planta, mucigel y
lisados de raz (enzimas,
aminocidos, hidratos de carbono, cidos carboxlicos de bajo peso
molecular de masa, flavononas
y compuestos fenlicos) (Curl y Truelove, 1986;. Kidd et al, 2008).
Adems, las plantas pueden
tambin aumentar las propiedades fsicas y qumicas de la tierra
contaminada,
y aumentar el contacto entre los microorganismos de raz asociado y el
suelo
contaminantes (Fig. 6.7).
pgina 203
190 EA El-Sheikh y MB.A. ashour
Higo. 6.7: Representacin esquemtica de la enzimtica y las
actividades microbianas
responsable de la remediacin mejora en la zona rizosfera
(Transferido desde Abhilash et al., 2009).
Las plantas transgnicas que secretan enzimas desintoxicantes pueden
ser tiles para la
rhizoremediation de la amplia gama de productos qumicos hidrfobos.
Wang et al. (2004)
desarrollado plantas transgnicas de Arabidopsis secretan una lacasa
especfico de la raz (LAC1)
a partir de plantas de algodn a la rizosfera y han demostrado una
resistencia mejorada
a aleloqumicos fenlicos y 2, 4, 6-triclorofenol. Del mismo modo, Sonoki
Et al. (2005) transformado plantas de tabaco con una lacasa fngica
extracelular
de Coriouls versicolar para la rhizoremediation de bisfenol A y PCP.
Adems, la sobreexpresin de una dioxigenasa bifenil bacteriana (BPDO)
de LB400 Burkholderia xenovorans dado lugar a la oxigenacin mejorada
de
4-clorobifenilos (Mohammadi et al., 2007). BPDO cataliza una
estereoespecfica
La oxigenacin de bifenilo, la produccin de cis-2,3-dihidro-2,3
dihydroxybiphenyl-
2,3-deshidrogenasa. El 2,3-dihidroxibifenilo es luego escindido por la 2,
3-
dihidroxibifenilo-1,2-dioxigenasa (2, 3 DHBD) y la resultante 2-hidroxi-
6-oxo-6-fenil-hexa-2,4-dienoico (HOPDA) se hidroliza produciendo
benzoico y cidos pentatnicas (Sylvestre et al., 2009). Los genes que
codifican
para la degradacin de PCB en LB400 Burkholderia xenovorans son
BPHA (BphAE
subunidad), BPhe (BphAE subunidad), bphF (BphF) y bphG (BphG)
(Sylvestre
et al., 2009). BPHC gen de Pandoraea pnomenusa B-356 fue exitosa
clonado en plantas de tabaco para la remediacin mejorada de PCB
(Francova et
al., 2003; Novakova et al., 2009). plantas de Arabidopsis transgnicas
que expresan
la dioxigenasa extradiol de escisin aromtico (DBFB) dio lugar a la
mejorada
degradacin de 2, 3-dihidroxibifenilo (2, 3 DHB) (Uchida et al., 2005).
Pgina 204
Tecnologa de biodegradacin de la Eliminacin de Pesticidas Toxicidad
191
Del mismo modo, las plantas de tabaco transgnicas que expresan
deshidrogenasa haloalcano
(DHAA) aceler la ification desintoxicacin de 1-clorobutano en la zona
rizosfrico
(Uchida et al., 2005).
Adems de la presencia de genes catablicos, el xito de la
fitorremediacin
depende de las propiedades morfolgicas y intrnsecas de las especies
de plantas
s mismo. Por lo tanto, la eleccin de las plantas es probable que el
impacto en el xito de la
tecnologa rhizoremediation (Sylvestre et al., 2009). Una especie de
planta con
gran biomasa area es crucial para la fitoextraccin, mientras que el
especies de plantas con extenso sistema de races o la biomasa
subterrnea es importante
para la rhizoremediation. Sin embargo, el crecimiento de las plantas en
Con contaminado
sitios es normalmente obstaculizados por los contaminantes. la
produccin de etileno acelerado
en respuesta al estrs inducida por contaminantes se sabe que inhibe el
crecimiento de las races
y se considera un obstculo importante para la fitorremediacin
(Kawahigashi, 2009).
Estudios previos demostraron que bacteriana 1-aminociclopropano-1-
carboxilato de metilo
(ACC) desaminasa regula los niveles de etileno en plantas por la
metabolizacin de su
ACC precursor en cido -ketobutyric y amonaco (Bernard, 2005; Arshad
et al., 2007). Curiosamente, este ACC desaminasa se ha detectado en
algunas plantas
bacterias promotoras del crecimiento (PGPR), y por lo tanto regula la
biosntesis de
etileno en races de las plantas inoculadas (Glick et al, 1998;. Glick,
2005). transgnico
plantas que expresan genes desaminasa de ACC pueden reducir los
niveles de etileno, lo que resulta
en un sistema radicular ms extenso (Arshad et al., 2007). Se espera
que la
aumento resultante de crecimiento de la raz proporcionada por
desaminasa ACC podra mejorar
el potencial rhizoremedia cin. Adems, la incorporacin de mltiples
genes
relacionada con las diferentes fases de la degradacin de xenobiticos,
junto con
ACC desaminasa, pueden mejorar el potencial de remediacin de plantas
transgnicas
(Kawahigashi, 2009).
6.6 Modelado de Simulacin de pesticida
Degradacin
La eficiencia de un sistema de biorremediacin se estima a partir de la
composicin del efluente
que muestra el resultado de la eliminacin por sorcin, la degradacin y
volatilizacin. los
actividad de degradacin de la tem sys se puede evaluar en ensayos de
degradacin en
muestras de matriz. Estos datos de degradacin se pueden introducir en
los modelos de transporte
para estimar la eficiencia de biorremediacin (Sniegowski et al., 2009). A
modelar la cintica de degradacin de plaguicidas en un biofiltro,
modelos que o bien tomar
el crecimiento microbiolgico en cuenta o modelos que no lo hacen se
puede aplicar. los
primero es de relevancia en caso de que el sistema de biofiltro contiene
poblaciones microbianas
que mineralizar el compuesto con la formacin de la biomasa, CO
2
y otra
minerales inofensivos, que es el resultado preferen cial en el tratamiento
de pesticidas
agua contaminada. Sniegowski et al. (2009) propagaron el uso de
pesticidas
suelos cebados como lum inocu para los sistemas de biorremediacin en
la finca. Pesticidas-priming
suelos originan a partir de campos agrcolas tratados a largo plazo y
contienen de diez
adaptado poblaciones microbianas que poseen vas a la minera aliz el
pesticida.
Pgina 205
192 EA El-Sheikh y MB.A. ashour
Actualmente, se estn examinando el potencial de esta estrategia en
bioaumentacin
microcosmos de biofiltros laboratorio (BM) utilizando linuron (3- (3,4-
diclorofenil) -
1-metoxi-1-metil urea) y un suelo linuron tratados que alberga una
poblacin
que min eralizes linuron y lo utiliza para el crecimiento como modelos.
Sniegowski et al. (2009) comparan los modelos de degradacin pesticida
que
simular la respuesta de biofiltros para el tratamiento del pie de pla-
contaminados
aguas residuales al suministro de pesticida en tiempo irregular en la que
se utiliza el pesticida para
el crecimiento y la mineralizacin. microcosmos de biofiltros que
contienen una mezcla de paja,
turba y el suelo y que albergan micropopulations que utilizan el linuron
herbicida
para el crecimiento, fueron regadas con linurn durante 28 semanas con
una parada en su suministro
entre las semanas 12 y 17. muestras de la matriz se tomaron
regularmente para ensayo
mineralizacin linurn. Una aproximacin de primer orden del modelo
Monod era
utilizado para simular los datos min eralization observados, mientras que
una modelizacin inversa
marco combinando un anlisis de sensibilidad (Morris Anlisis de
sensibilidad) con
un enfoque de modelizacin inversa (mezcla de complejos Evolucin
Metropolis)
adoptado para param eterize el modelo. los tiempos de retardo en la
mineralizacin linurn
disminuido durante las primeras semanas de cin linuron Irriga pero
aument despus de suministro
cesado de linurn. El modelo bien simula la dinmica tiempo de retraso
que eran
en relacin con la dinmica del tamao de la poblacin linurn
degradadora predicho en
el microcosmos. Se predijo que el tamao de la poblacin se redujo a
una tasa
de 0.031 d -1 despus de suministro de pesticida dejado de alcanzar su
tamao inicial de la poblacin
despus de 25 semanas. Ellos encuentran que la degradacin de
modelado de pesticidas en los biofiltros
debe incorporar dinmica de la biomasa en caso de que se utiliza el
pesticida como C-fuente.
De primer orden se acerca sin la incorporacin dinmica de la biomasa
podra dar lugar a
subestimacin del riesgo de lixiviacin de pesticidas.
6.7 Conclusin
A nivel mundial, el uso de plaguicidas ha demostrado para ayudar a
resolver muchos de
problemas que afectan a la produccin de alimentos y la salud humana.
Sin embargo, tal uso tiene
en ocasiones se acompaa con riesgos para personas y el medio
ambiente.
A nivel nacional, regional e internacional, el problema de dao de
pesticidas
deben ser manejados cientficamente dentro de los planes de accin de
colaboracin; tomar como
beneficios tanto como sea posible de uso de estas sustancias txicas sin
riesgo significativo
a los seres humanos. Para promover la iniciacin de los planes en
cuestin, la situacin de
plaguicidas en cada pas deben ser investigadas y aclaradas a fondo.
Los microbios son pesticidas degradantes en el medio ambiente y los
utilizan para su
los procesos metablicos normales como fuente de carbono o de fsforo
o consumir el
pesticidas junto con otra fuente de alimentacin o la energa. Este
bioproceso de microbios
pueden ser utilizados para el desarrollo de la descontaminacin de
pesticidas y restauracin
de la salud del medio ambiente. El uso de los sistemas microbianos de
plaguicidas que degradan
para la eliminacin de compuestos pesticidas de los sitios contaminados
requiere una
comprensin de los requisitos ecolgicos de las cepas que degradan
involucrados en
procesos de degradacin. Hay una necesidad de ms investigacin sobre
la bioqumica
y los aspectos genticos de la degradacin del pesticida por microbios.
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Tecnologa de biodegradacin de la Eliminacin de Pesticidas Toxicidad
193
Las enzimas hidrolticas, responsables de la degradacin de los
plaguicidas para no txico
productos en el medio ambiente, proporcionan decisiones informadas
sobre qu genes a
ingeniero. Se ha sugerido que el aumento de la comprensin de la
actividad enzimtica
proceso implicado en la tolerancia de las plantas y la desintoxicacin de
los plaguicidas proporcionar
nuevas direcciones para la manipulacin de plantas con potencial de
remediacin superior.
Adems, algunas de las plantas modificadas no son adecuados para la
aplicacin en el campo
Debido a su pequeo biomasa y las tasas de crecimiento. Aunque ms
centrado en
las plantas transgnicas se ha hecho, su potencial como
fitorremediacin ingeniera
las plantas no fue examinado extensamente en pruebas de campo. El
impacto ecolgico y
subyacente a la economa de la fitorremediacin con los transgnicos
debe ser cuidadosamente
evaluado y se pesa contra desventajas conocidas de remediacin
convencional
tcnicas o riesgos de tener el metal pesado recalcitrante o especie
metaloide
en nuestro entorno. Investigaciones necesarias para la bioqumica
detallada y
anlisis fisiolgico de todo el proceso de la fitorremediacin-un grupo de
enfoques tecnolgicos innovadores (caracterizacin detallada de todos
los tipos de
oxidasas catalizar la degradacin de contaminantes orgnicos, y de
transferasas
y otras enzimas que participan en el proceso de desintoxicacin etc.)
deben estar
continuado; la creacin de nuevos, modificados genticamente estable,
ambientalmente seguro,
altamente vegetacin efectiva (que crecen bajo diferentes condiciones
climticas) rboles,
gramneas, leguminosas, plantas terrestres o acuticas; la seleccin de
microorganismos
(bacterias, hongos, actinomicetos) con especial atencin a la accin
simbitica y
ampliacin de los procesos de fitorremediacin.
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Page 219
206 VV Lakshmi
7
Genmica enfoque para
biorremediacin
VV Lakshmi
7.1 Introduccin
se estn aadiendo una serie de contaminantes al medio ambiente por
las actividades humanas.
La mayora de estos contaminantes se sintetizan qumicamente
compuestos tambin
denominado como xenobiticos. Algunos de stos persisten en el medio
ambiente durante ms tiempo
periodos debido a la presencia de elementos estructurales o
constituyentes que no lo hacen
ocurrir de forma natural en la naturaleza y por lo tanto son resistentes al
ataque por degradativa
enzimas. Contaminantes como compuestos aromticos nitro,
compuestos aromticos policclicos y bifenilos
se degradan relativamente dentro de un corto perodo de tiempo o
transformado en
productos finales no txicos debido a la degradacin microbiana. Sin
embargo, altamente
compuestos nitrados y halogenados, as como pesticidas y explosivos
son
qumicamente inerte con vidas medias ms prolongadas en condiciones
nativas que los hacen
recalcitrante. Debido a su escasa solubilidad en agua tienden a entrar en
la cadena alimenticia
y estn biomagnificados posteriormente. Adems, muchos de estos
contaminantes son
menudo metaboliza en el las clulas de mamferos que resulta en
productos intermedios que son
agentes potencialmente mutagnicos o cancergenos (Henschler et al,
2001;. Galloway
y prctico, 2003). Esto ha dado lugar a la imposicin de la prohibicin de
uso de varios
de estos compuestos. Aparte de esto, gran cantidad de residuos
radiactivos es tambin
generada como un subproducto de las plantas nucleares de generacin
de energa atmica. Esta
residuos biolgicos peligrosos se dispone en mltiples sitios de vertido
de residuos en todo el mundo.
Actualmente no existe una tecnologa eficiente para almacenar estos
residuos de forma segura. Radio
nucleidos tienen que ser desintoxicado o efectivamente inmovilizado
para evitar fugas
de los sitios contaminados. Los desastres ecolgicos que resultan de
accidental
derrames de los residuos txicos acumulada, no slo afecta ecosistema
terrestre y
vida marina, pero tambin influye en la economa de la zona (Samanta
et al., 2002;
Brim et al., 2003; Regueiro et al., 2007).
MH Fulekar (ed.),
DOI 10.1007 / 978-90-481-3678-0_7, 2010 de Capital Publishing
Company
La tecnologa de biorremediacin: Avances recientes ,
206
pgina 220
Aproximacin a la genmica biorremediacin 207
Los mtodos fsicos y qumicos como la desorcin trmica, lavado de
suelos,
incineracin, llenado de tierra etc. se han empleado en el tratamiento de
varios
sitios contaminados. Sin embargo, estos tratamientos no restauran
efectivamente la flora
o la fauna de la zona (Espaa, 2000). La tasa de biorremediacin es
xenobiticos
significativamente influenciado por factores / condiciones desfavorables
externos, incluyendo
temperatura adversa, la deficiencia de nutrientes, la disponibilidad de
electrones adecuada
aceptoras, toxicidad del compuesto o los compuestos intermedios
producidos resultante debido
para retrasar la conversin en la naturaleza (Dua et al, 2002;.. Carvahlo
et al, 2005). tcnicas
como biotransformacin, bioacumulacin, biosorcin, bioestimulacin y
bioaumentacin se han probado in situ con xito limitado. en
bioaumentacin
biotipo nativo se complementa con cepas o poblacin de biodegradacin
conocida
organismos para acelerar el proceso de limpieza. Sin embargo, la
implementacin de tales
tcnicas no siempre es exitosa en vista de las dificultades para controlar
y ampliar
el proceso a escala de laboratorio en el lugar. Esto depende de una in-
altamente
comprensin en profundidad de las caractersticas fsico-qumicas del
contaminada
medio ambiente, as como la caracterizacin de las comunidades
microbianas en
trminos de sus capacidades biocatalizador, potencial funcional y las
interacciones en
medio ambiente (Atlas y Unterman, 1999; Alexander, 2001).
Para hacer frente a los retos de la limpieza de sitios contaminados varias
emergente
tecnologas se utilizan en la biotecnologa ambiental. biorremediacin de
xenobiticos y radionucleidos ha surgido como un enfoque prometedor
para eliminar
contaminantes txicos del medio ambiente. Es un proceso de mltiples
facetas en la que
tanto factores biticos y abiticos median el proceso de eliminacin.
Bioremediations
tomar ventaja de la versatilidad catablica de los microorganismos para
convertir complejo
residuos (Abed et al., 2002). Un notable gama de capacidades de
desintoxicacin que implica
vas complejas se exhiben por las comunidades microbianas.
radionucleidos
incluyendo uranio, tecnecio y cromo han sido sometidos a enzimtica
desintoxicacin por la cooperacin metablica de los microbios.
microbiana mediada
restauracin de sitios contaminados es un ecolgicamente aceptable,
ambientalmente
enfoque amigable, seguro y eficaz (Abraham et al., 2002, Ala et al.,
2003;
Kumar et al., 2007).
7.2 genmico y Metagenomic Enfoques
Los microorganismos representan dos de los tres dominios de la vida y
tienen gran diversidad.
Tradicionalmente identificacin y caracterizacin de las comunidades
microbianas en
sitios contaminados se limitan a los organismos cultivables. En la era
post-genmica,
anlisis de todo el genoma proporcionado una visin ms profunda de la
diversidad metablica
en los microorganismos. El primer paso en esta difcil tarea de
exploracin fue de
secuenciar los genomas de varias bacterias adaptables identificados
estar involucrado
en biorremediacin que poseen una variedad de genes catablicos. Sin
embargo lo s
cada vez que se dio cuenta de que slo una fraccin de microorganismos
implicados en
biodegradacin son cultivables. Las tcnicas actuales de cultivo
utilizados estn sesgadas
hacia organismos que estn mejor adaptados a las condiciones de
laboratorio. Esta
pgina 221
208 VV Lakshmi
crecimiento preferencial distorsiona la composicin de la comunidad
microbiana real de la
ambiente. De ah que las investigaciones que emplean mtodos
tradicionales de cultivo
solo se han convertido en inaceptable, ya que slo pequea porcin de
las bacterias ambientales
que son cultivables en laboratorio son el blanco (Torsvick, 2002; Daniel,
2005;
Malik et al., 2008).
El mayor auge de la ecologa microbiana se inici en 1995 con la
aplicacin
de herramientas moleculares para el estudio de la biodiversidad y
entender la dinmica de
comunidad microbiana en los detalles ms finos. mtodos
independientes del cultivo (CIM)
surgido crucial en la comprensin de la diversidad gentica, la
estructura de la poblacin
y funciones ecolgicas de la mayora de los hbitats. Los mtodos
moleculares dependen
en la extraccin y caracterizacin de biomolculas tales como cidos
nucleicos, protenas,
cidos grasos y otros compuestos obtenidos directamente desde el
medio ambiente, que
son especficos para los taxones. CIM ha puesto de manifiesto la riqueza
sorprendente de los incultos
mundo microbiano, con recuperacin de la tendencia de explorar el
desconocido microbiana
territorios similar a la observada en el 16 -17 siglo, pero con el empleo
herramientas moleculares. El intento inicial en esta direccin fue
secuenciar clones
de la biblioteca de 5S rRNA cDNA. Sin embargo escenario, ms
convincente de la inmensidad de
la diversidad microbiana surgi de diversos estudios que emplean ARNr
16S, que
fueron de gran xito en la reconstruccin de las filogenias y comparacin
microbiana
distribuciones entre diferentes muestras. Para lograr esta secuencia de
nucletidos
junto con las huellas dactilares fueron ampliamente empleada adems
de la cuantificacin de la
abundancia relativa de cada grupo taxonmico usando hibridacin de
membrana o
hibridacin in situ fluorescente (FISH) (Lane et al, 1985;. Pace et al.,
1985;
Woese, 1987; Handelsman, 2004; Sanz y Kochling, 2007).
representacin genoma de cuatro y siete mil ha estimado
por g de suelo usando herramientas moleculares. Sin embargo, incluso
la utilizacin de la corriente
r-ARN enfoques filogenticos basados tambin a slo 50-200 formas
microbianas / gm
son monitoreados, por lo tanto dejando an una fraccin importante sin
explorar. Este escenario es
explica principalmente por las cuestiones relacionadas con la eficiencia
de extraccin de ADN, imprimacin
sensibilidad especificidad y bajos lmites de deteccin de las tecnologas
disponibles,
Adems de la alta cantidad inicial de carga de biomasa. Estas
limitaciones o destruyen
distorsionar la estructura de la comunidad y la diversidad presente
dentro de los dos micro as como
hbitats macro (Polz y Cavanaugh, 1998; Rappe y Giovannoni, 2003). los
entradas actuales del Banco de genes de los genes rRNA 16S de los
procariotas no cultivados
han numerado de manera significativa a aquellos de microorganismos
cultivados, el antiguo
siendo ms del doble. Esta fraccin uncultured incluye diversos
organismos
que no tienen ninguna afiliacin o solamente estn lejanamente
relacionado con los filos de las cultivadas.
Por lo tanto mayor parte de la microbiota todava sigue siendo un gran
recurso sin explotar para la aplicacin
(Precioso, 2003; Handelsman, 2004, 2005).
Del mismo modo, en el ambiente tambin, los que se caracterizan
organismos conocidos
a jugar un papel en la biodegradacin por la cultura tcnicas-do no
precisa
representar la composicin de la comunidad microbiana en la
naturaleza, ya sea cualitativamente
o cuantitativamente. Esto ha sido claramente representado en la
comparacin de los bancos de genes
capaz de degradar varios xenobiticos. Los organismos no cultivables en
estos
pgina 222
Aproximacin a la genmica biorremediacin 209
casos se predicen para dar cuenta de una fraccin significativa de la
diversidad total, que
no se refleja en los mtodos basados en la cultura. En el pasado, la
integracin de dos dcadas
de las tcnicas ms nuevas de la CIM y la improvisacin de las
existentes han contribuido
significativamente a la deteccin de varios genes catablicos novedosos
de contaminada
sitios especialmente a partir de organismos no cultivables (Widada et al.,
2002, Van
Hamme et al., 2003).
Limitaciones a la biorremediacin en condiciones naturales y baja
especificidad
de los mtodos convencionales han allanado el camino para el desarrollo
de alterna
nuevos mtodos en la forma de organismos modificados genticamente
(OMG) o
'biocatalizadores de diseo'. Estas enzimas modificado Incorporar que
median novela
rutas metablicas, o han aumentado la eficiencia de la actividad
catablica ensanchando
gama sustrato mejorando de este modo la va existente para la
biorremediacin. Con
Los avances tcnicos en varios frentes Ahora se ha vuelto factible
construir
OMG por reshuffling genes estructurales que codifican propiedades
deseadas de diversos
especies (Furukawa, 2003; Boubakri, 2005). Los mdulos de genes
seleccionados son entonces
adaptado y poner bajo el control de un promotor fuerte para construir
novela / mejorado
cepas de biocatalizador que pueden manejar los xenobiticos en el
laboratorio as como en en
condiciones in situ . Adems, la accesibilidad a los de rpido crecimiento
va metablica
bases de datos y una mayor comprensin de las relaciones estructura-
funcin
de los componentes de la enzima est ayudando en la optimizacin
racional de los biocatalizadores
(Pieper y Reineke, 2000;. Krause et al, 2006).
Varios intentos exitosos para el diseo de biocatalizadores potenciales
han sido
hecho en las ltimas dos dcadas incluyendo aquellos para el
tratamiento de sitios contaminados
con bifenilos policlorados (PCB) y los compuestos de cloro-aromtico.
Slo
tener en cuenta algunos ejemplos: Especificidad de sustrato de
dioxigenasa bifenilo
enzima a partir de Pseudomonas sp. fue alterado mediante la
combinacin de homlogos obtenidos
a partir de Pseudomonas sp. LB400 y Pseudomonas, Alcaligenes
especies KF707.
La variante resultante de la enzima activa podra hidroxilar tanto doble
PCBs orto- y doble para-sustituido de manera eficiente. En otro intento,
sitio-
mutagnesis dirigida, intercambio de genes, asistido por el modelado
informtico de 3D
estructuras de protenas, asistidos la adaptacin exitosa de
dehalogenase haloalcano.
La enzima resultante con aminocidos especficos sustituido en el sitio
activo
haba varias veces aumento de la actividad de la enzima mejorando as
la eficiencia de
biorremediacin de contaminantes (Bohac et al, 2002;. Chaloupkov et
al., 2003;
Okuata, 2004; Los casos y Lorenzo, 2005).
Con el uso prospectivo de OMG in situ, debates interesantes han sido
iniciado en la contencin de estas construcciones y los posibles riesgos
ecolgicos
involucrado con fugas. Los problemas asociados con la transferencia
horizontal de genes,
el seguimiento de genes / cepas modificadas y muerte celular horario
del biocatalizador
despus de completar la tarea deseada estaban dirigidas a minimizar
ecolgica
Riesgos. Para lograr esto, 'asesino-anti-asesinas' pares de genes
asociados con bacteriana
estn siendo explotados plsmidos / cromosomas o bacterifagos. Molin
et al.
(1987) propusieron el primer sistema de contencin basado en la
expresin de dos
diferentes genes-la toxina o veneno y una antitoxina o antdoto
respectivo
pgina 223
210 VV Lakshmi
colocado bajo la regulacin de genes reguladores catablicos. La toxina
asesina
era estable durante horas mientras que su homlogo anti-matar era muy
lbil. En
este proceso las clulas que escapan al ambiente contaminado se matan
por el
induccin de un sistema controlado 'suicidio' restringiendo as su
supervivencia
y la propagacin (Molin, 1993). Un refinamiento adicional con la
expresin constitutiva
de cognado gen anti-asesino controlado por seales ambientales fue
diseada
para disminuir la probabilidad de escape de la muerte celular
programada. en reciente
aos, se introdujo un sistema de doble letal en donde los genes letales
como colicinE3,
RNasa y endonucleasa EcoRI que a la vez atacar diferentes celular
objetivos para el control de la muerte celular. Esto asegur drstica
reduccin de las posibilidades de
escapar de las mutaciones como simultneas en varias enzimas era ms
improbable.
As, 'sistemas de contencin bacterianas' fueron diseados para prevenir
su escape hacia
el medio ambiente asegurando de esta manera un sistema a prueba de
fallos 'de los transgnicos Introduccin
en el medio ambiente para la biorremediacin (Zielenkiewicz y
Ceglowski, 2001;
Torres et al., 2003).
7.2.1 Desplazamiento Metagenomic
Describiendo la diversidad filogentica de microorganismos no
cultivados es slo el
primer paso en la comprensin de la biodiversidad. El mayor desafo
consiste en la asignacin
funciones ecolgicas a los organismos no cultivados como microbiota
son cada vez
siendo dado cuenta para jugar papeles clave en los procesos
ambientales naturales. As
era vital para determinar la funcin de genes en los niveles de protena
o de metabolismo
que la mera secuenciacin. El cambio en el nfasis para el anlisis de
todo el genoma de la
Los datos actualmente disponibles genoma en lugar de genes
individuales ha revelado que
aproximadamente el 30-40% de los organismos secuenciados
completamente no tienen funciones conocidas
asignado a nivel bioqumico, muchos de los cuales no estn relacionadas
con los genes conocidos.
Por lo tanto la genmica funcional se ha convertido en una nueva
disciplina que emplea importante
tecnologas innovadoras que utilizan tradicional, as como nuevos
enfoques para
bsquedas de todo el genoma con el apoyo de herramientas de
bioinformtica (Langer et al., 2006;
Valenzuela et al., 2006 ; Falk y Hugenholtz, 2007; Ferrer et al., 2009 ) .
La metagenmica va un paso ms adelante y tiene como objetivo
superar las limitaciones
del organismo individual para el nivel meta por la orientacin
comunidad
perfil. comunidad microbiana de la muestra ambiental se extrae
directamente
mediante la extraccin de los datos de ambas formas microbianos
conocidos y nuevos. El termino
metagenmica fue acuado por Handelsman et al. (1998), mientras
que describe
biofilms cidos de minas. As, mientras que la genmica determina la
completa gentica
complemento de un organismo nicamente, por metagenmica
contraste implica muestreo
las secuencias del genoma de una comunidad de organismos que
habitan en un comn
ambiente. La definicin, en su aplicacin, excluye los estudios que
utilizan la PCR para
amplificar casetes de genes o genes de acceso de slo inters, ya que
no proporcionan
la informacin genmica ms all de los genes siendo amplificada. En
principio, cualquier
medio ambiente es susceptible de anlisis metagenomic a condicin de
que los cidos nucleicos
se puede extraer de material de muestra. La metagenmica se ha
convertido en el centro
del enfoque de atencin en los ltimos cinco aos y se ha aplicado a
varios nichos /
Page 224
Aproximacin a la genmica biorremediacin 211
ambientes, incluyendo los ocanos, suelos, chimeneas termales,
muestras de aguas termales y
boca humana y el tracto gastrointestinal (Sebat et al, 2003;.. Langer et
al, 2006;
Warnecke y col., 2007; Hugenholtz y Tyson, 2008). El enfoque es
tambin
denominado como la genmica, la comunidad ecogenmica, o genmica
ambiental. los
proceso no requiere separacin previa de los organismos a partir de su
hbitat o mantener
microorganismos, ya sea como cultivo puro o mixto en el laboratorio
para la secuenciacin
por lo tanto sin pasar por las principales limitaciones de los enfoques
clsicos en microbiologa.
Estrategias de metagenmica tambin eludir algunas limitaciones
debido a dirigir
clonacin de ADN grande, as como una representacin adecuada de
nmero finito de
clones de pantalla. Los estudios de metagenmica implican
secuenciacin masiva para capturar
comunidades enteras que se han hecho posible con los avances en la
secuenciacin
tecnologa como pirosecuenciacin. De este modo el acceso al potencial
del colectivo
genomas microbianos en un entorno determinado utilizando
simultneamente funcional
anlisis basado en la secuencia empleando mtodos de alto rendimiento
es ahora factible
(Cowan, 2005; Tringe y Rubin, 2005; Dinsdale, 2008).
La metagenmica se ha iniciado a las tres escalas. Pequea escala de un
objetivo
rebanada de comunidad para una funcin selectiva de inters o
mediante el empleo especfica
tcnicas y iniciado principalmente por un solo investigador o de
laboratorio. Medio
proyectos de metagenmica escala emplean a fondo enfoque
multidisciplinario
investigar una comunidad de intereses. El alcance de estos proyectos es
diversa
y se lleva a cabo por el grupo de investigadores colaboradores cada uno
de orientacin
faceta. proyecto a gran escala por el contrario abarca iniciativas globales
en
gran escala para comprender las comunidades microbianas selectivas en
profundidad con detallada
caracterizacin. La metagenmica aplicados a la genmica de la
comunidad de entorno
tenido el mayor impacto en los ltimos aos (Cowan, 2005; Daniel,
2005;
Dinsdale, 2008; Ferrer, 2009). Ductos del diseo del proyecto puede
metagenmica
clasificarse a grandes rasgos en las etapas siguientes.
7.2.2 Consideraciones Pre-secuenciacin
Composicin de la comunidad tiene una gran influencia sobre el modo y
los resultados de
anlisis metagenomic. El conocimiento previo de la poblacin dominante
es til para
el diseo de estrategias posteriores. El tema de la evaluacin de la
cantidad de secuencia
los datos se ha de obtener para una comunidad tambin se vuelve muy
importante, ya que no es
punto final fijo, a diferencia de genomas completos. Dado que las
especies difieren en gen que codifica
densidades de su genoma y no tienen abundancia uniforme en una
comunidad,
es fcil de hacer frente a la cobertura de las poblaciones individuales.
Para obtener
mayor que la cobertura de secuenciacin nica, del tamao de un
metagenmica moderada
biblioteca tendra que ser muchas veces el tamao del metagenoma que
puede
llegar hasta 100 Mbp con una secuenciacin tpica Sanger. En general,
un 6 8
la cobertura de las cepas microbianas es un objetivo comn para
obtener un proyecto de genoma
adecuado para proyecto metagenomic (Dinsdale, 2008;. Kunin et al,
2008; Ferrer,
2009). En ltima instancia, el objetivo del estudio gua la asignacin de
secuencia.
As, aunque una cobertura de 20 o superior puede ser ideal para
determinar SNP
perfil de la frecuencia de la poblacin dominante, para identificar
representaba un exceso de
Pgina 225
212 VV Lakshmi
funciones de genes en una comunidad en su conjunto; sin embargo, una
secuencia mucho menos
los datos seran adecuados. Estudios recientes han demostrado que
incluso extremadamente
baja cobertura de <0,01 poblacin dominante de la estera hipersalina
estratificado
comunidad eran todava suficientes para detectar gradientes genticos
(Goldberg et al.,
2006, Kunin et al., 2008).
7.2.3 Estrategias de muestreo
Extraccin y purificacin de ADN de alta calidad siguen siendo los
cuellos de botella principales
en estudios metagenomic ya que no hay talla nica para todos mtodo
de extraccin
para todas las muestras. Low-biomasa de muestra ambiental produce
insuficiente
DNA para la construccin de la biblioteca o el anlisis de piro-secuencia,
donde microgramo
cantidades de ADN genmico se requieren (Kunin et al., 2008). durante
el muestreo
es esencial para recoger el material muestra adicional y es posible
garanta
datos no de secuencia asociadas con una muestra ambiental o
metadatos.
Tipo de metadatos puede variar considerablemente dependiendo del
tipo de muestra. Algunos de
los ms comunes para los estudios ambientales son datos geogrficos
tales como mundial
sistema de posicionamiento coordenadas, profundidad / altura de
recogida de muestras, datos sobre el pH,
la temperatura, la salinidad del sitio etc. (Venter et al, 2004;. Kunin et
al., 2008;
Urich et al., 2008). Esta informacin complementaria es crucial para el
anlisis como
re-muestreo podra no ser siempre directamente comparables. de
metadatos mejora la
capacidad de interpretar los datos de secuencia significativa,
particularmente para una comparativa
anlisis de la organizacin temporal o espacial. Co-localizacin de
organismos por
la combinacin de FISH con anlisis digital de imgenes puede
proporcionar informacin espacial
en los ecosistemas estructurados. Esto puede proporcionar un apoyo
vital para derivar metablica
las interacciones entre los miembros de la comunidad como se infiere de
los datos de metagenmica
(Lebaron et al., 1997; Sanz y Kochling, 2007). amplificacin de la seal
de tiramida
estn siendo empleados FISH (TSA-FISH utilizando tyramides marcadas
con fluorescencia
para aumentar la sensibilidad mediante la mejora de la seal de
hibridacin. No radiactivos
sondas como trifosfato de uracilo digoxigenina (UTP [DIG]) etiqueta
estn entre las
mtodo de eleccin actualmente (. Schonhuber et al, 1997; Pernthaler et
al., 2004).
7.2.4 Generacin de Datos
Antes de la generacin de los datos de metagenmica, un pre-
Metagenoma Comunidad
Composicin Profiling (PCCP) generalmente se lleva a cabo como una
preseleccin. Esta
SIDA ulterior decisin sobre la asignacin y el procesamiento de la
secuencia basada en
composicin de la comunidad de la muestra ambiental. Esto es seguido
por lo general
por escopeta preparacin biblioteca en la que al menos tres tamaos
medios diferentes de
se utilizan 3, 8, y 40 kpb de ADN clonados en fosmids. proyectos de
metagenmica globales
emprendido por el Instituto Conjunto de Genoma (JGI) han desarrollado
una relacin de 4: 1 entre
los tamaos de los fragmentos ms pequeos y ms grandes para
producir proyectos de los conjuntos de alta calidad
(Warnecke, 2007;. Kunin et al, 2008).
La seleccin de la tecnologa de secuenciacin es fundamental para la
calidad, as como el costo
eficacia del proyecto. Recientemente pirosecuenciacin se ha aadido a
la
Pgina 226
Aproximacin a la genmica biorremediacin 213
universalmente utilizado el enfoque de Sanger. Aunque Sanger (tinte
terminador) secuenciacin
sigue siendo la principal fuente de datos de la secuencia metagenomic,
pirosecuenciacin
estrategias se han aplicado cada vez ms a las comunidades virales y
bacterianas.
Ventajas de pirosecuenciacin sobre enfoque de Sanger es un mucho
menor por la base
costo y sin necesidad de clonacin previa segn el cual la clonacin
sesgo se evitan. los
desventaja importante de pirosecuenciacin es su corta longitudes de
lectura promedio. Esta
vara desde un mximo de 100 bps en la GS20 a 200 bps en la GS FLX
plataformas (Nulton, 2006;. Wommack et al, 2008). Cualquier mejora
adicional
en esta capacidad sera un activo para la metagenmica. Debido a esta
breve lectura
longitudes de secuencia, los enfoques basados principalmente en la
bsqueda de similitud en contra
una base de datos de referencia en lugar de llamar gen o conjunto que
no son factibles
en la mayora de los casos. La combinacin de diferentes tecnologas de
secuenciacin de juntas
se est explorando para la produccin de proyectos de montajes de alta
calidad. Al menos dos
etapas de control de calidad se consideran obligatorios para obtener
datos fiables
(. Edwards et al, 2006a, b; Goldberg, 2006) de la informacin.
7.2.5 Secuencia de procesamiento
Este paso comprende un paso crtico en pre-procesamiento de la
secuencia de lee
antes del montaje, el gen de prediccin, y la anotacin. El cribado
mediante llamadas de base
de datos en bruto procedentes de las mquinas de secuenciacin se
lleva a eliminar la clonacin
secuencias del vector seguidos por la calidad de corte para separar las
bases de baja calidad.
Los errores en estos pasos tienen un enorme impacto en las
consecuencias aguas abajo
en la metagenmica. En contraste con la genmica, metagenmica
proyectos tienden a
retener solamente alta calidad lee y contigs como el proceso tiene baja
tolerancia
por contaminar lee, y no son fcilmente distinguibles por tanto sesgar
anlisis de aguas abajo (Chou y Holmes, 2001;. Kunin et al, 2008). Otro
temas que requieren atencin para minimizar los errores de montaje
incluyen no uniforme leer
regiones repetitivas profundidad, etc. Con vistas a estos aspecto puede
dificultar en gran medida tanto
la calidad y la fiabilidad de la produccin metagenoma. cosechadoras
proceso de montaje
secuencia lee en tramos contiguos de ADN en base a la similitud de
secuencia,
llamados contigs (Raes et al., 2007).
cierre genoma o acabado no es posible para la mayora de
metagenomes
fin, aunque tiene lugar comn en proyectos aislados genoma
microbiano. Sin embargo,
de acabado puede ser considerado como una opcin viable slo para
conjuntos de datos relativos a
poblaciones dominantes dentro de un metagenoma (Hallam et al.,
2006). Completar
o casi completas genomas de cobertura a nivel de proyecto han sido
ensamblado a partir de
poblaciones metagenome presentes en biofilms en drenaje cido de
minas, en activado
lodos y en el entorno marino (Kunin et al., 2008a, b, c). metagenomic
en general se espera que las secuencias de las comunidades
microbianas altamente complejas
para dar lugar a poco o ningn conjunto de lecturas, que excluye el uso
de micro-
la heterogeneidad de los anlisis. densidad todava alto de codificacin
de bacterias y archaeal
genomas y su tamao medio de gen han arrojado aceptable lee que la
captura
la mayor parte de la secuencia codificante. Por lo tanto se encuentran
datos metagenomic para abarcar
la gentica micro-heterogeneidad presente en esa poblacin.
Pgina 227
214 VV Lakshmi
7.2.6 prediccin de genes y anotacin
Los genes y fragmentos de genes a partir de un conjunto de datos dado
metagenomic se asignan a
familias de genes, consiguiendo as una estimacin de su representacin
relativa. A
mejorar la asignacin de funcin a los datos secuenciados, las
tendencias de genes centrada puede
ser adoptado en metagenmica que se describi por primera vez por
Tringe et al. (2005).
El mtodo se centra en la asignacin de funciones a las protenas
codificadas en el secuenciado
genes. Dos enfoques diferentes posibles se adoptan en este tipo de
anlisis
a saber, no selectiva o metagenmica objetivo. En el modo no selectivo
all no est
seleccin previa basado en crecimiento o amplificacin por PCR. Los
datos generados
es el resultado del gen expedicin 'pesca'. El enfoque tiene la ventaja de
pesar
proporcionar informacin muy valiosa de la actividad metablica de
comunidad
no conocido con anterioridad; adolece de la desventaja de una posible
tasa de xito baja
(Raes et al, 2007;.. Kunin et al, 2008a, b). En cambio, en el segundo
enfoque
de la metagenmica dirigidos, la piscina aislado de ADN es
deliberadamente 'sesgado' a
mejorar las tasas de xito. Numerosas estrategias se adoptan como
tratamiento previo de la
comunidad microbiana con contaminante objetivo de aumentar la
actividad metablica
de los genes potenciales, pre-fraccionamiento del ADN sobre la base de
G + C%,
amplificacin de regiones diana por PCR antes del anlisis metagenomic,
la seleccin
de clulas particulares por procedimientos de clasificacin de clulas
usando modos de alto rendimiento para
poblacin enriquecida recogida de organismos etc. Esto es seguido por
funcional
proyecciones de las bibliotecas que adoptan tcnicas como ensayo de
cultivo dual, sustrato
inducida sistema de expresin gnica (SIGEX), y de clulas activadas
fluorescentes de clasificacin
(FACS) que permite la identificacin de los posibles productos activos.
Este enfoque fue
xito en la identificacin de varios genes de hidrocarburos inducida
seguido de
captura de genes relevantes, utilizando la expresin de la protena
fluorescente verde (Yun
y Ryu, 2005; Raes et al., 2007).
Hay dos modos principales de la prediccin de genes: basada en la
evidencia gen
vocacin y enfoque de ab initio. El mtodo basado en la evidencia
depende
utilizando bsquedas de homologa para identificar los ORF y ha sido
adoptado en herramientas
como BLAST Crtica, Orpheus etc. (Badger et al, 1998;. Badger y Olsen,
1999). El otro enfoque prominente de ab initio vocacin de genes se
basa en
caractersticas intrnsecas de la secuencia de ADN para discriminar entre
la codificacin y
regiones no codificantes, lo que permite la identificacin de genes,
incluso en ausencia de cualquier
homlogos en las bases de datos disponibles. formacin conjuntos de
genes se utilizan para mejorar
la calidad de los datos obtenidos y mejorar la prediccin de genes.
Formacin
conjuntos podran derivarse mediante el establecimiento de parmetros
derivados de genes conocidos de la
mismos o relacionados organismos como en el caso del programa de
fgenesB, mientras que varios
otros se basan en la generacin de conjuntos de datos de auto-
entrenado de la secuencia diana por ejemplo,
GLIMMER, MetaGene etc., mientras que se emplea combinacin de estas
herramientas
en mORFind (Delcher et al, 1999;.. Noguchi et al, 2006). La prediccin de
genes
generalmente es seguido por la anotacin funcional utilizando los datos
de meta disponibles
similar a la anotacin genmica. Sin embargo, la naturaleza
fragmentaria y la falta
del barrio de contexto hace que sea ms difcil en la metagenmica. En
Pgina 228
Aproximacin a la genmica biorremediacin 215
genmica, las predicciones de genes y anotaciones finalmente estn
controlados manualmente a
aumentar la fiabilidad como parte del control de calidad, pero estos
manuales son curations
No actualmente factible en metagenomes que se recomienda slo en
general
los niveles de contigs. Por lo tanto metagenmica ha tenido xito en el
estudio de los genes individuales,
las vas, los organismos y las comunidades (Tyson, 2004;. Tringe et al,
2005;
Mavromatisey et al., 2007).
Anlisis de datos 7.2.7
La coleccin de lecturas, contigs, y los genes, como resultado de la
tubera metagenoma,
han de estar asociado con los organismos de los que se derivaron en
trminos
de grupos taxonmicos. Esto es altamente deseable para la
interpretacin significativa de
las especies que contribuyen del ecosistema y este proceso se llama
binning
o clasificacin. Actuales herramientas de agrupacin disponibles rara vez
tienen la resolucin
para discriminar entre cepas de la misma especie, por lo cepa co-
montaje es
no practico. Las etapas del proceso estndar en Post Comunidad de
Secuenciacin
Composicin (PSCC) se re-evaluacin de las estimaciones de
composicin de la comunidad
directamente desde el propio metagenomic datos. Esto es importante
para la interpretacin
datos y evitar el sesgo (Kunin et al., 2008a, b, c). Esto es seguido por
el anlisis de poblaciones dominantes mediante mapeo de marcador
filogentico conservada
genes para evaluar tanto la identidad organismo, as como su
abundancia relativa. Si
ms de una poblacin dominante estn en secuencia, el metablica
probable
interaccin entre las poblaciones se considera (Whitaker y Banfield,
2006;
Raes et al., 2007).
7.2.8 Caja de herramientas de la genmica / Metagenomics
Varias herramientas se aplican para la visualizacin e identificacin de
polimorfismo
en poblacin compuesta. herramientas importantes utilizadas en
genmica y metagenmica
direccin del perfil de las comunidades microbianas de diversas facetas
(Gilbride et al.,
2006; Gabor et al., 2007). tcnicas basadas en cido nucleico como
cadena de la polimerasa
reaccin (PCR) y sus numerosas variantes se aplican para el anlisis de
catablica
genes implicados en la biodegradacin de los contaminantes orgnicos,
as como para
perfil de la comunidad microbiana (Stenuit et al., 2006, 2008).
Limitaciones inherentes
de extraccin y purificacin de cidos nucleicos, tanto en calidad y
cantidad de
muestras ambientales afectan significativamente anlisis mediante
amplificacin por PCR. los
presencia de sustancias inhibidoras que son co-extrajo como cidos
hmicos,
partculas de materia y arcilla orgnicos interfiere significativamente en
el paso de amplificacin.
Multiplex PCR tcnica como una sola reaccin se ha usado para la
deteccin de
mono, o enzima dioxigenasa atacar naftaleno aromtico, tolueno, xileno,
fenol etc. consiguiente ahorro de tiempo y recursos (Wilson et al., 1999;
Baldwin et
al., 2003; Kirk et al., 2004; Gilbride et al., 2006).
PCR en tiempo real (RT-PCR) permite la deteccin y cuantificacin
simultnea
del producto amplificado mientras que la reaccin est an en curso
como fluorescente
se emplean marcadores. Con lmite de cuantificacin normalmente de 1-
2 genoma
pgina 229
216 VV Lakshmi
copias, RT-PCR es de 100 a 10.000 veces ms sensible que la basado en
micromatrices
mtodos (Inglis y Kalischuk, 2004;. Eyers et al, 2004b). Por otra parte, lo
hace
no requiere ningn paso de post-PCR que consumen mucho tiempo para
la cuantificacin de
amplicones, ya que se monitorean en tiempo real y la intensidad de la
fluorescencia es
directamente proporcional a la concentracin del producto. Por lo tanto,
PCR en tiempo real que
permite la cuantificacin en el extremo de cada ciclo es apropiado para
alto rendimiento
requerimientos del modo de metagenmica. An ms su sensibilidad
analtica alto para
la identificacin de genes especficos en mezcla de ADN complejo
tambin hace que sea altamente
adecuado para el anlisis de muestras ambientales (Scow y Hicks, 2005;
Ritalahti
et al., 2006). Sin embargo, los resultados obtenidos no siempre vinculan
la expresin gnica
con una actividad microbiana medible especfica o de la poblacin
debido a la corta
vida media de ARN. Al ser una tcnica de PCR muy sensible, los
contaminantes son
observado a influir significativamente en el resultado que resulta en
seales falsas altas
tambin (Spiegelman et al., 2005). Varios estudios han empleado RT-PCR
en
estudios ambientales para supervisar las actividades de gen para
biodegradar enzimas, una
algunos de los cuales incluyen como oxigenasa aromtico,
deshalogenasa reductora (RDase)
carbazol 1,9 a-dioxigenasa (carAa), sintasa benzylsuccinate (BSSA),
atrazina
catablico (ATZ), reductasa arseniato (arsC) etc. (Widada et al, 2002a;.
Baldwin
et al., 2003; Lerat et al., 2005; Saleh-Lakha et al., 2005). perfil de la
comunidad
en el suelo de la Antrtida hidrocarburo contaminado tambin se
consigui con xito
mediante la observacin de los cambios en tiempo real. Velocidad,
sensibilidad, precisin y ventajas de
posible la automatizacin robtica hace RT-PCR para ocupar una posicin
destacada
entre las herramientas de genmica y metagenmica (Watanabe y
Hamamura, 2003;
Powell et al., 2006).
tcnicas de huella gentica proporcionan patrn especfico o perfil de
una
dado comunidad microbiana. Estos se basan en la separacin de
amplicones
despus de la amplificacin por PCR de marcadores filogenticos tal
como ARNr (16S y
23S rRNA) junto con RecA (protena de reparacin del ADN), EF-Tu, EF-G
HSP70
(Protena de choque trmico), y RpoB (subunidad de ARN polimerasa) o
funcional
genes utilizando cebadores universales o especficos. Los potenciales de
aplicacin y
limitaciones de varias tcnicas de huella son revisados (Fromin et al.,
2002; Nocker et al., 2007) . Entre los diversos perfiles de la comunidad
gentica
mtodos de anlisis de restriccin de ADN ribosmico amplificado
disponible (ARDRA),
y el terminal de restriccin de polimorfismo de longitud de (T-RFLP),
intergnica ribosomal
anlisis espaciador (RISA) junto con electroforesis en gel de gradiente
desnaturalizante
(DGGE) / temperatura electroforesis en gel de gradiente (TGGE) son los
ms populares
herramientas utilizadas para muestras ambientales (Marsh et al, 2000;..
Eyers et al, 2004a;
Forney et al., 2004; Fedi et al., 2005; Bai et al., 2006). A diferencia de gel
tradicional
mtodos de separacin, DGGE / TGGE separan amplificaron fragmentos
de rDNA de la
misma longitud pero tienen diferentes composiciones de pares de bases.
El nmero de bandas
producida durante DGGE o TGGE se observa que es proporcional al
nmero
de las especies dominantes en la muestra. Las principales limitaciones
de DGGE / TGGE
es una especificidad filogentica incompleta proporcionada por el 500 pb
analizado
Pgina 230
Aproximacin a la genmica biorremediacin 217
fragmentos de secuencias de 16S rRNA, sobreestimacin de un mltiplo
comunidad
bandas de las especies individuales debido a la presencia de varias
copias del gen ARNr, o
subestimacin debido a que tienen diferentes bandas de ARNr misma
movilidad. A pesar de
algunas de estas limitaciones, el mtodo permite la supervisin de la
espacial / temporal
cambios en la estructura de la comunidad microbiana prominente en
filogentico moderada
resolucin. Esto es especialmente prominente en las muestras de
diversidad donde microbiana
es en gran parte desconocida (Watanabe et al., 2002, Singh, 2006;
Malik, 2008).
ARDRA es un mtodo simple, rpido y rentable para explorar la
bacterianas estructura de la comunidad o de la pantalla mientras se
analizan los clones contaminada
Sitios. Aunque es una buena medida para detectar cambios
estructurales de microbiana
comunidad a la que no proporciona una imagen eficaz de la diversidad
filogentica
en poblacin compleja (Weidner et al, 1996;.. Bai et al, 2006). T-RFLP es
una
modificacin de ARDRA que utiliza marcados fluorescentes cebadores de
PCR que permiten
cuantificacin de fragmentos terminales de la digestin. La ventaja de
este
enfoque es la simplificacin del patrn de bandas que sigue
manteniendo la fiabilidad. Esta
se pone de relieve en el monitoreo de varias comunidades ambientales
complejos como
cada banda representaba una sola unidad taxonmica operativa o
ribotipos (Tajida
et al., 1999; Konstantinidis et al., 2003; Reardon et al., 2004; Macbeth et
al.,
2004; Fahy et al., 2005). A pesar de la alta resolucin y sensibilidad, T-
RFLP
depender de la amplificacin por PCR altamente, los sesgos relacionados
con PCR
tambin influyen en este anlisis. Esto puede conducir a conclusiones
errneas sobre la
abundancia de una cepa o especie particular en una comunidad
microbiana compleja
(Kirk et al, 2004;.. Osborne et al, 2006). Combinacin de ARDRA con T-
RFLP
y DGGE ha ayudado a una mejor caracterizacin de comunidades
microbianas de
fuentes contaminadas (Watts et al, 2001;.. Haack et al, 2004). Aplicacin
de
varias tcnicas de huella en combinacin con PCR en tiempo real para in
situ
anlisis de las comunidades bacterianas degradantes xenobiticos y
cuantificacin de
sus genes catablicos mostraron una buena correlacin entre la
abundancia microbiana
y la concentracin de contaminante, que corresponde en el sitio (Widada
et al., 2002;
Watanabe y Hamamura, 2003; Scow y Hicks, 2005).
RISA, otra tcnica basada en la PCR de orientacin regin espaciadora
intergnica
entre los operones 16S y 23S de rRNA, se ha encontrado que exhiben
nico
variabilidad en secuencia y longitud. Esto es explotado como
taxonmico
marcador de identificacin para distinguir cepas o los organismos
estrechamente relacionados
(Eriksson et al., 2003;. Spiegelman et al, 2005). A pesar de la rpida y
simple, en
vista de secuencias ms cortas analiza en este mtodo tambin,
comunidad compleja
se generan los niveles de perfil de menor resolucin taxonmica
(Spiegelman et al.,
2005). Un mtodo de toma de huellas dactilares cuantitativa
combinando PCR en tiempo real y T-
RFLP se utiliz para la determinacin simultnea de la abundancia
microbiana y
la diversidad dentro de una comunidad compleja de aguas residuales.
RT-PCR y RFLP pueden ser
integrado con SIP para obtener datos cuantitativos para la identificacin
y la concomitante
cuantificacin de microorganismos activos implicadas en la degradacin
naftaleno
en el microcosmos del suelo (Yu et al., 2005).
pgina 231
218 VV Lakshmi
Algunas de estas herramientas de huellas dactilares como RISA, T-RFLP,
la heterogeneidad de longitud
anlisis por PCR (LH-PCR), el polimorfismo de conformacin
monocatenaria (SSCP)
y DGGE tiene potencial para el diseo de alto rendimiento. En su alto
rendimiento
fragmentos marcados versiones fluorescentes se separan y se
analizaron en automatizado
secuenciadores de ADN. En DGGE versin de alto rendimiento, los
fragmentos de ADN pueden
ser separados dentro de minutos con desnaturalizante Performance
Liquid alta
La cromatografa (D-HPLC), de fase inversa rpido y repetible empleando
cromatografa de pares de iones (Barlaan et al, 2005;.. Spiegelman et al,
2005). los
fragmentos se recogen entonces en el extremo de la columna y se
sometieron a ms
secuenciacin automatizada.
Las etiquetas de genes ambientales plazo se utilizan similar a secuencia
expresada
etiquetas debido a la naturaleza fragmentada de los datos resultantes
de la metagenmica.
anlisis de serie de las etiquetas de secuencias ribosomal / ADN
ribosomal (SARST o ADRS,
respectivamente) y etiquetas de la firma genoma de un solo punto (SP-
GSTs) son dos
prominentes mtodos de marcado que se han desarrollado para el
perfilado de alto rendimiento
comunidades microbianas de complejos en adicin a la toma de huellas
dactilares anteriormente
tcnicas (Neufeld et al., 2004, Ashby et al, 2007;. Kysela et al, 2005;. Yu
et al., 2006; van der Lelie et al., 2006). Estas tcnicas proporcionan la
huella digital
de las comunidades microbianas en forma de concatmeros de
informacin
ricos secuencias de etiqueta amplificados por PCR como V1, V5, V6 y
otra hipervariable
regiones de genes bacterianos 16S rRNA. Estos son clonados y
secuenciados ms
para caracterizar composicin de la comunidad microbiana. De esta
forma, mltiples
etiquetas de secuencias ribosomales (RST) de muchos organismos
diferentes pueden obtenerse
simultneamente desde una nica reaccin de secuenciacin. RST,
como se esperaba, proporcionan
Slo una resolucin filogentica inferior a largos 16S rDNA, pero son
tiles para
explorar la funcin ecolgica de la abundancia / nuevas bacterias bajos
tanto en trminos cualitativos
y trminos cuantitativos (Kayesala et al, 2005;. Yu et al, 2006;.. Ashby et
al,
2007). SP-GST, aunque similar al mtodo SARST en principio, ofrecen
una
probabilidad ms amplio para estudiar la distribucin de genes
funcionales especficos, mientras
examinar composicin de la comunidad microbiana. El estudio
proporciona apoyo a las
los mecanismos experimentales propuestos para las bacterias evolucin
genmica en la naturaleza
por transferencia lateral de fragmentos de genes y de barajado en los
genomas microbianos
(Boubakri et al., 2006). enfoque barajado de ADN Metagenomic tiene
como objetivo evaluar
el potencial de evolucin genmica en metagenomes medioambientales
en trminos de
creacin de nuevos genes bajo presin ambiental reciente como la
contaminacin
con xenobiticos. Adems, estos enfoques son muy prometedores
cuando se combina
con los microarrays-hbitat especfico.
7.2.9 Microarrays de ADN
la tecnologa de microarrays es una poderosa herramienta taxonmica y
funcional que es
ampliamente utilizado en el genoma y el anlisis del transcriptoma
incluyendo microbiana mixta
comunidades. La propiedad de una sola molcula de ADN o ARN diana
de hebra a
hibridar con una molcula de sonda complementaria que se une a un
soporte slido
de la corredera / chip de forma el principio bsico de microarrays (Zhou,
2003; Ehrenreich,
Pgina 232
Aproximacin a la genmica biorremediacin 219
2006). Microchips difieren de acuerdo con la tecnologa de inmovilizacin
utilizan para
unir las sondas, la longitud y la naturaleza de las sondas, as como la
sntesis y la
etiquetado de los objetivos. La eleccin entre las diferentes tecnologas
se basa en
parmetros tales como el coste, densidad de la sonda, la especificidad,
sensibilidad y cuantificacin
tal como fue revisado (Nees y Woodworth, 2001; Zhou, 2003). Las
sondas pueden ser cualquiera
sintetizado directamente in situ usando mscaras fotolitogrficas (por
ejemplo, GeneChip
arrays), reacciones electroqumicas o manchado sobre el soporte slido
despus de ex situ
sntesis. Como colorantes fluorescentes se incorporan enzimtica o
qumicamente en
la muestra la lectura se basa en la deteccin de seales de
fluorescencia. As
microarrays presenta la ventaja de la miniaturizacin mediante la
deteccin de miles de
sondas en una sola diapositiva para el anlisis de la funcin gnica
simultnea en tiempo real.
En comparacin con las tcnicas de hibridacin de cidos nucleicos
tradicional, microarrays
proporcionar una deteccin rpida y altamente sensible incluso hasta
nico desajuste (Eyers
et al ., 2004b). Adems, las muestras ambientales se pueden incubar en
el
presencia de un sustrato marcado radiactivamente antes de la
hibridacin, con el fin de
identificar microorganismos implicados en el metabolismo de un sustrato
especfico como
en conjuntos de istopos (Adamczyk et al, 2003;.. Wagner et al, 2006).
Tres clases principales de formatos de microarrays ambientales han sido
desarrollado para el anlisis de la comunidad microbiana, a saber,
arrays de genes funcionales (FGA), donde las sondas se dirigen a
identificar o medir
genes que codifican enzimas clave implicadas en el proceso metablico
especfico (Wu et
al., 2001; Rhee et al ., 2004),
genoma arrays Comunidad (CGA), que se construyen a partir entera
ADN genmico de mltiples cepas o especies cultivadas (Zhou, 2003;
Wu et
al., 2004, 2006) y
arrays de oligonucletidos filogenticos (POA) contienen sondas
dirigidas
genes taxonmicos (El Fantroussi et al., 2003; Chandler et al ., 2006).
Debido a la capacidad de rendimiento alto de microarrays y la
disponibilidad de
extensas bases de datos de secuencia de ARNr, POA han surgido como
una muy conveniente
medios para la identificacin simultnea de muchos microorganismos de
una muestra.
microarrays enfoque ha sido utilizado con xito para discriminar los
cambios en una
comunidad microbiana del suelo asociado con hexaclorociclohexano
(HCH),
TNT, U (VI) biorremediacin y caracterizacin de la filogentica y
catablico la diversidad de los ambientes contaminados (Brodie et al.,
2006,
Chandler et al., 2006; Garmendiaet et al., 2008). Entre otros resultados,
una fuerte
se observ correlacin entre la concentracin total de xenobiticos y la
sonda
seales correspondientes a Proteobacteria desconocido, y tambin entre
las sondas
la orientacin Sphingomonas sp y la concentracin de HCH. Secuencia
ribosomal
Tag (RST) matrices es otra manera dinmica para monitorear los
cambios en el
composicin filogentico o cambios en los niveles de expresin gnica
catablica durante
procesos de biodegradacin (Neufeld et al., 2006).
la tecnologa de matriz se enfrenta a grandes retos en aplicaciones
medioambientales
en trminos de especificidad, sensibilidad y cuantificacin que varan en
intensidad
con diferentes formatos de matriz. Se proponen varios enfoques para
hacer frente a estos
pgina 233
220 VV Lakshmi
limitaciones (Zhou y Thompson, 2002; Cook y Sayler, 2003; El Fantroussi
et al., 2003; Gentry et al., 2006). Como el diseo de sondas para POA y
FGA
formatos se basa principalmente en secuencias recuperadas a partir de
bases de datos por s solos, estos
microarrays son incapaces de dar acceso a las afiliaciones filogenticos
y desconocidos
actividades funcionales, lo que es un inconveniente principal para
aplicaciones ambientales
(Gentry et al., 2006). Con el fin de evitar esta limitacin, clonar
bibliotecas de
bacteria medioambiental cuya secuencia completa del genoma son
todava desconocidos
fueron vistos en un microarray por lo que es todo el genoma o de lectura
abierto
agrupaciones de cuadros. Adems biblioteca de clones de un
microorganismo especfico impreso en una
microarray podra ser hibridado con ARNm aislado antes y despus de la
exposicin
del microorganismo a un tratamiento de contaminantes. Las diferencias
en la hibridacin
patrones obtenidos se utilizan para identificar los clones que albergan
expresan (o
reprimidos) genes en respuesta al tratamiento. Para lograr integral
foto de comunidades complejas y la deteccin con la cuantificacin de
rara
especie bacteriana sin sesgos de sensibilidad, una nueva generacin de
gran escala
matrices filogenticos universales con todos los genes y las vas
conocidas involucradas en
biodegradacin estn diseados (Desantiz et al., 2007). Estos estn
reemplazando rpidamente
relativamente pequea escala, generacin de microarrays filogenticos
anteriores (Palmer et
al., 2006; Ashby et al., 2007). El uso de curvas de disociacin es una
promesa
para la cuantificacin exacta de las muestras ambientales (Wick et al.,
2006). los
uso de microarrays para el estudio de la dinmica de las comunidades
microbianas in situ
Tambin se ve facilitada por el reciente desarrollo de un Ti integral
denominado
Geochip. Este microarray proporciona vnculos directos entre
biogeoqumicos
procesos y actividades funcionales de las comunidades microbianas de
diferente
ambientes. Geochip 3.0 tiene varios marcadores filogenticos
adicionales tales
como gyrB adems de anlisis funcional (He et al., 2007).
Otro paso importante hacia adelante en arrays de ADN es usar sondas
producidas
directamente a partir de ADN ambiental sin ninguna etapa de cultivos,
es decir, la combinacin de
metagenmica con microarrays. Tal array metagenomic (MGA) era
propuesto por Sebat et al. (2003) por primera vez para caracterizar
microbiana
comunidad de un microcosmos de las aguas subterrneas. El formato de
MGA est todava en sus comienzos
etapas de desarrollo, pero es una gran promesa para el cribado de alto
rendimiento
de entornos naturales; sin necesidad de conocimiento de la secuencia
anterior para
anlisis comunidades microbianas (Gentry et al., 2006). Adems toda la
comunidad
la amplificacin del ARN (WCRA) de acoplamiento con CGA puede
permitir la supervisin
actividades funcionales en las comunidades microbianas de ambientes
contaminados
con diversos disolventes orgnicos, hidrocarburos, etc. uranio (Wu et al.,
2006;
Gao et al., 2007).
istopos estables (SIP) es otra tcnica de eleccin para la vinculacin
identidad filogentico microbiana con funcin ecolgica mediante la
incorporacin
estables sustratos istopo etiquetados como biomarcadores celulares
(Radajewski et al.,
2000). Las principales caractersticas de SIP permiten el acceso directo a
la de cido nucleico de
metablicamente miembros activos en las comunidades microbianas, sin
ninguna previa
conocimiento de su identidad o la presencia en la muestra. Este enfoque
fue
pgina 234
Aproximacin a la genmica biorremediacin 221
empleado para el aislamiento de bacterias de benceno que degradan
anaerbicas de gasolina-
contaminada con arsnico del agua subterrnea reduccin de las
bacterias y las bacterias uncultured
del suelo PAH contaminado (Wackett, 2004a; Manefield et al, 2005;. Yu y
Chuy, 2005; Kasai et al., 2006; Lear et al., 2007). Un enriquecimiento
alternativo
mtodo que utiliza bromodesoxiuridina (BrdU) se aprovecha del hecho
de que la
ADN de los microorganismos que metabolizan BrdU puede ser
inmunoprecipitada.
tcnicas de ADN-SIP se han utilizado para el aislamiento de grandes
fragmentos de ADN a partir de
comunidades microbianas no cultivados para el anlisis metagenomic
(Dumont et al.,
2006). Sin embargo insuficiente incorporacin de sustrato durante la
incubacin durante
investigaciones de ADN / ARN-SIP pueden ser una fuente importante de
sesgo enriquecimiento que
representado en la situacin metabolismo sustrato natural en el medio
ambiente.
Tambin hay un potencial para mejorar la alimentacin cruzada del
sustrato y estos temas
necesitar ser monitorizado el uso de controles apropiados (Neufeld et al.,
2007).
Para superar los sesgos genricos con enfoques dependientes de PCR,
nueva
tcnicas de amplificacin de PCR-independientes como la amplificacin
del genoma entero son
emergiendo como soluciones. Estas tcnicas permiten el acceso a la
informacin genmica
De la abundancia de fuentes microbianas muy bajos que de otro modo
permaneceran
inaccesible. Multiple amplificacin por desplazamiento (MDA) utilizando
phi29
ADN polimerasa y cebadores resistentes exonucleasa azar sin trmica
ciclismo exhibi amplificacin sorprendentemente uniforme a travs de
la genmica
objetivos en comparacin con la PCR de amplificacin del genoma
completo basado (Dean et al.
2002; Abulencia et al., 2006; Binga et al., 2008). El mtodo genera ms
grande
productos homogneos y con menor error promesa de retencin de
frecuencia para una sola clula
la secuenciacin del genoma para estudios metagenomic. hibridacin de
ADN de microbiana
comunidad amplific usando la ADN polimerasa 29 a CGA fue exitosa
en el anlisis de la estructura de la comunidad ambiental (Wu et al.,
2006). T7
basada en polimerasa enfoque de amplificacin lineal usando los
cebadores de fusin ha sido
propuesto para los anlisis basados metatranscriptomics de ARNm (Gao
et al., 2007).
Aunque estrategia de cribado funcin impulsada por haber permitido el
descubrimiento de
varias nuevas enzimas, antibiticos con biotecnolgica y teraputico
aplicaciones desde hace aos, se trata de pantallas de bajo rendimiento
en base a la
deteccin visual que son difciles de ser adoptado para la escala
metagenmica (Gentry
et al., 2006; Kunin y col., 2008). Sin embargo, automatizado de picking
colonia, pipeteado
la robtica, el uso de placas de microtitulacin, y la disponibilidad de
ensayos de actividad sensibles
que apuntan a biomolculas para la deteccin, ayudas para la gestin de
datos informtica asistidas
en la automatizacin de las pantallas metagenome. Esto es
particularmente una ventaja, ya
xitos en la deteccin de metagenome son tpicamente muy baja es
menor que dos de
de 10.000 clones. Se emplean diversas estrategias para enriquecer /
selecta comunidad
genomas con los rasgos deseados a travs de la actividad del promotor
en lugar de fenotpica
antes de la construccin de expresin biblioteca metagenmica se trat
(Lorenz y Eck,
2005).
biosensores fluorescentes intracelulares o biosensores enteros--basados
en clulas son
aplicado ampliamente para la deteccin del medio ambiente y la
notificacin de especfico o clases
de contaminantes (Bhattacharyyaa, 2005; Handelsman, 2005;.
Williamson et al,
Pgina 235
222 VV Lakshmi
2005). Bioreporters tienen dos componentes principales: un
biorreconocimiento microbiana
elemento y un elemento de transduccin, que convierte la respuesta en
una salida
seal (Rogers, 2006). Modificado genticamente microbios, en el que un
promotor
gen por ejemplo lacZ, lux, gfp que codifica para una protena fcilmente
medible como -
galactosidasa, protenas fluorescentes de luciferasa respectivamente se
fusionan con una
circuito regulador natural que regula va de biodegradacin de un
xenobitico
compuesto. La actividad del promotor se detecta visualmente o
compatible con
clasificacin de clulas activadas por fluorescencia permite un cribado
de alto rendimiento de nivel
los clones y posible integracin en un dispositivo basado en chip
(Robertson y Steer,
2004; Harms et al., 2006). Para las aplicaciones de la genmica para
llegar a su nivel ptimo
potencial en estudios medioambientales sera ventajoso si el
automatizado
tecnologa se hace ms barato de despliegue, compacto y de campo
para el anlisis in situ
(Gentry et al., 2006). Con los recientes avances en la micro-fabricacin y
micro-
fludicos tecnologas, se ha hecho posible hacer que el concepto de 'en
laboratorio
en-un-chip'(LOC) en una realidad. El dispositivo es un sistema
miniaturizado montaje
tener todos los componentes de preparacin de la muestra es decir,
concentracin, separacin
y la purificacin junto con etapas de hibridacin / deteccin / anlisis en
una sola
plataforma porttil que ofrece aplicaciones sencillas y verstiles para
llevar a cabo in situ
estudios (Liu y Zhu, 2005).
7.3 Ventajas y Limitacin de metagenmica
Enfoque
La fuerza de la metagenmica radica en su potencial para el
descubrimiento fortuito. As,
se aplica actualmente para explorar la diversidad de biosntesis de
microorganismos
de ambientes variados mediante la identificacin de genes implicados
en el conjunto
rutas biosintticas o biorremediacin de compuestos xenobiticos
importantes.
El descubrimiento de la bomba de protones luz impulsada desde
mediado por bacterioplancton
protena proteorhodopsin, se identific primero en muestras de ADN
ambientales
utilizando el enfoque de metagenmica. Un descubrimiento ms
reciente es con respecto a amonaco
oxidantes entre arqueas se pensaba que las bacterias eran los nicos
responsables de
oxidacin de amonaco aerbico, aunque su nmero podra menudo no
tienen en cuenta
para las tasas observadas de oxidacin de amonaco en muchos
hbitats. Identificacion de
una monooxigenasa gen amoniaco al lado de un archaeal codificacin
gen marcador
pequea subunidad ribosomal RNA usando herramientas bioinformticas
arqueas implicado
como uno de probables principales oxidantes de amonaco en varios
marinas y terrestres
ecosistemas que fue establecido experimentalmente despus (Baldwin,
2003; Daniel,
2005; Schneikeret et al., 2006). ensamblaje Metagenomic de
microorganismos
tiene potencial para responder a varias preguntas fundamentales en
ecologa microbiana
as como para evaluar la diversidad y la funcionalidad de
microorganismos in situ
cuantitativamente, de una manera objetiva. En esta tendencia
bioprospeccin, varios nico
y formas microbianas previamente no reconocidos se identifican en la
contaminada
sitios sin la necesidad del cultivo. Co-localizacin estudios realizados por
la combinacin de FISH
y anlisis de imagen digital ha proporcionado anlisis comparativo de
temporal o
Pgina 236
Aproximacin a la genmica biorremediacin 223
informacin espacial en los ecosistemas estructurados para apoyar las
interacciones metablicas
entre miembros de la comunidad como se infiere a partir de datos
metagenomic (Wagner et
al., 2006; Sanz y Kochling, 2007; Malik, 2008).
A pesar del enorme impacto de la metagenmica en diferentes campos,
hay varios
retos enfrentan a este tipo de anlisis del genoma. Tres notables
limitaciones
de la aproximacin metagenmica bsica incluyen baja resolucin,
incapacidad para clasificar
fragmentos metagenomic cortos y ardua tarea de verificacin funcional
(Cowan
et al., 2005; Hendelsman, 2004, 2005; Kunin, 2008a, b). El principal
desafo
es determinar el tamao mnimo de biblioteca metagenoma. La
construccin
bibliotecas de metagenmica de muestras ambientales, aunque
conceptualmente simple,
son tcnicamente muy difcil. Extraccin y purificacin de ADN de alta
calidad
para diferentes muestras ambientales sigue siendo principal cuello de
botella en la metagenmica.
De hecho no parece haber ninguna todo de una sola talla nica
mtodo de extraccin. Asumiendo
muestra de medio ambiente tiene 100 especies, se estima que habr 0,5
GBP
DNA de nica. Las actuales estimaciones de la diversidad microbiana
sugieren una gama de
entre 3000 y 11.000 genomas por gramo de suelo. Para obtener ms de
un solo
la cobertura de secuencia, biblioteca metagenmica tendra que ser
muchas veces el
tamao del metagenoma. T que la resolucin de las comunidades
microbianas de escopeta
secuenciacin es ms bien baja, con suficiente cobertura de secuencia
nica de dominante
poblaciones a niveles de permitir que la secuencia de montaje. Teniendo
en cuenta ningn otro
sesgos, una poblacin que representa 0,1% de una comunidad slo
representaran
100 pares de kilobases (kpb) de un metagenoma 100 Mbp construidos
para una 4 Mbp
genoma de tamao, lo que resulta en muy poca cobertura de ~ 0,025
cobertura. Un reciente
Estudio sobre la diversidad microbiana en el mar profundo en trminos
de especies de la abundancia
distribucin sugiere fuertemente que miembros de la comunidad raras
que comprende el
mayor parte de la diversidad en muchas muestras ambientales estn
completamente perdido
por niveles actuales de secuenciacin shotgun (Langer et al, 2006;..
Goldberg et al,
2006; Gabor et al., 2006; Johnson & Slatkin, 2008).
En comparacin con los mtodos basados en la PCR WGA actualmente
adoptadas, el recin
amplificacin isotrmica explorada con ADN polimerasa de Phi29 est
dando
altos rendimientos de fragmentos ms largos, con menos de
amplificacin sesgada. Debido a la
excepcional procesividad de la enzima, cantidades prcticamente
significativas de DNA
desde previamente se estn obteniendo los hbitats inaccesibles u
organismos. los
actividad robusta de phi29 DNA polimerasa, incluso en presencia de la
tpica
inhibidores de la enzima sugiere otra aplicacin importante de MDA en
moderado
sustancias de elevado abundancia en muestras de ADN altamente
contaminadas. Ya que slo nanogramos
se requieren cantidades de ADN molde para producir microgramos de
ADN, en este
muestras mtodo puede ser masivamente diluyeron, reduciendo con ello
los contaminantes a
concentraciones sub-umbral (Dean et al, 2002;. Abulencia et al, 2006;.
Binga
et al., 2008).
El alto costo de secuenciacin de escala que supone para metagenomes
de complejo
ambientes todava pueden ser prohibitivos a pesar de varios avances en
novela
tcnicas de secuenciacin como pirosecuenciacin. Para hacer frente a
este reto
comunidad microbiana puede dividirse en subgrupos ms simples que
facilitan contig
Pgina 237
224 VV Lakshmi
identificacin y una mayor cobertura genmica de poblaciones. El divide
y
vencers, aunque difcil de lograr en enfoque de cultivo, puede ser
abordado con mayor facilidad a travs de los estudios de
metagenmica. Los datos resultantes ofrece
orientacin valiosa para la subdivisin de las comunidades microbianas
en enriquecida
poblaciones. El otro reto importante es la identificacin de la fuente de
especies
fragmentos de metagenomic. Los mtodos actuales para clasificar los
fragmentos no lo hacen
realizar bien en las secuencias de menos de 8 kpb. La mayor parte de
los datos de secuencia
obtenido en la mayora de los estudios metagenomic siendo ms
pequeo permanece cuello de botella para
caracterizacin. Y en tercer lugar, similar a todos los datos de secuencia
de ADN, metagenmica
los datos pueden proporcionar informacin sobre el potencial metablico
de slo los genes con
homologa reconocible con caracterizadas protenas (Goldgerg et al.,
2006;
Johnson y Slatkin, 2008; Crdenas y Tiedje, 2008; Shendure, 2008). Falta
de
genomas de referencia se est ensanchando la brecha entre
caracterizado y hipottico
protenas a un ritmo alarmante en los datos metagenomes. La falta de
disponibilidad de ideales
anclas filogenticos que pueden ser utilizados a nivel mundial sigue
siendo una limitacin importante.
Un buen anclaje filogentico necesita ser representados por igual en
todas las especies y
servir como un indicador de la diversidad, tanto en trminos cualitativos
como cuantitativos, as
condiciones. Este requisito ideal no se cumple en los anclajes
filogenticos actualmente
disponible. 16S rRNA anlisis genes, aunque siendo el ms ampliamente
utilizado
marcador filogentico, no cumple con este requisito ideal. El nmero de
rrn
copias del opern varan de 1 a 15 en microorganismo que se
correlaciona principalmente con
la tasa de crecimiento. Esto conduce a una mala representacin de las
bacterias de crecimiento lento en
la PCR generado 16S bibliotecas metagenome rRNA en comparacin con
rapidez
creciente homlogos. Esto puede resultar en ignorar o pasar por alto la
baja abundancia
especies distorsionando as la representacin en situ. La falta de
genomas de referencia
para interespecies heterogeneidad / polimorfismo, conservacin de la
secuencia de alto nivel
entre los genomas filogenticamente no relacionados, confundida por
baja precisin
conjunto de softwares disponibles como resultado falsas o quimricos no
conjuntos
representado en la naturaleza (Kysela et al, 2005;. Langer et al, 2006;.
Johnson y
Slatkin, 2008; Kunin et al., 2008a, b, c).
Adems actualmente con la secuenciacin cada vez ms y ms
accesible,
secuencias del genoma completo de una serie de cepas / especies
individuales de algunos
organismos prominentes / comunidad estn creciendo en nmero y
diversidad. Por lo tanto
una serie de retos estn surgiendo para hacer frente a la comparacin
de estos mltiples
genomas bacterianos. La integracin de la informacin procedente de
mltiples fuentes utilizando
anlisis comparativo del genoma para varias especies de un genoma
bacteriano es
intentado y se describe colectivamente como pan-genoma. Estos se
componen
de un ncleo del genoma, que contiene los genes presentes en todas
las cepas caracterizadas, y
un genoma prescindible que contiene genes presentes en dos o ms
cepas y
genes nicos a las cepas individuales tambin. El repertorio pan-genoma
del genoma
secuencias de un conjunto de especies bacterianas relacionadas por lo
tanto resulta ser muchos rdenes
mayor en magnitud que cualquier solo genoma. El nmero mnimo
estimado
de cepas / especies de organismo dado a caracterizarse, ultra-alto
rendimiento
se requiere de la misma y los modelos actuales diseados para gestionar
colecciones pblicas
pgina 238
Aproximacin a la genmica biorremediacin 225
de genomas en formas novedosas y su aplicabilidad son revisados
(Nocker et al.,
2007; Malik et al., 2008; Tetteli et al., 2008).
proyectos ocenicas globales y otros proyectos de metagenmica han
aadido ms
de 8000 Mbps de datos genmicos de duplicacin esencialmente la
cantidad actual de
datos de secuencias procariotas junto con los metadatos voluminosa en
los ltimos aos
(DeLong, 2005; Overbeek, 2005;. Dubchak et al, 2006;. Seshadri y otros,
2007).
Los metadatos se refiere a la informacin metablica diversidad de la
poblacin microbiana,
temporales de datos espaciales y fsico-qumicos asociados con los sitios
de muestreo. por
la estandarizacin de los metadatos, actualmente no existen normas
establecidas. genmico
consorcio normas est implicado en la evolucin de conjunto mnimo
aceptable de metadatos
para proyectos genmicos / metagenmica, en consulta con las
comunidades de investigacin.
Adems sera importante para correlacionar metadatos provisto de
descifrado
condiciones ecolgicas y ambientales para dilucidar los factores que
favorecen
estructura de una poblacin sobre la otra (Goldberg et al, 2006;.. Hallam
et al,
2006; Nulton, 2006; Stepanauskas y Sieracki, 2007).
Los diversos datos generados por los proyectos metagenome a
diferentes escalas
presentar un tremendo desafo de la minera de datos y gestin de datos
punto de vista tambin. Los datos de montaje est aumentando a un
tremendamente mayor
tasa que los aumentos en la potencia de clculo de laboratorio. Ms que
una simple
almacenamiento de sequence data, el otro tema exigente es 'todo-
versus-all' secuencia
comparaciones requeridas para interpretar metagenomes que empuja el
cmputo
requisitos de forma exponencial. Esto est obligando a adoptar avance
radical en
la computacin cuntica se aproxima al igual que computa para llevar a
cabo las comparaciones de
metagenomic datos. Un esfuerzo pionero para gestionar la informacin
de metadatos ricos
que incluir la ubicacin geogrfica, los procedimientos de muestreo y
otra interesante
informacin adicional con respecto ambiente fue ejemplificado por la
cmara
proyecto, que representa la infraestructura de la Comunidad Cyber por
Advanced Marine
Ecologa Microbiana de Investigacin y Anlisis. Este mega proyecto
iniciado en
Enero de 2006 con desembolso estimado de $ 24,5 millones por siete
aos es financiado
por la Fundacin Gordon y Betty Moore. El enfoque de este metagenoma
iniciativa es servir a las necesidades de la comunidad cientfica por la
ecologa microbiana
la creacin de una rica y distintiva conjunto de datos del repositorio de
datos marinos procariota mundial
la diversidad de las especies y genes (Overbeek, 2005; Dubchak et al.,
2006;
Seshadri et al., 2007; Stepanauskas y Sieracki, 2007).
7.4 integracin de los enfoques micas para la Efectiva
biorremediacin
Como se observa, varios contaminantes xenobiticos son inusualmente
recalcitrantes como
ya sea microbios son capaces de mineralizar completamente ellos o su
hermana
metabolitos se acumulan en el medio ambiente creando riesgos para la
salud. Explorador
o la ingeniera de nuevos vas catablicas y estudiar el control regulador
de
metabolitos primarios y secundarios producida puede proporcionar la
solucin a efectivo
biorremediacin. La secuenciacin de los genomas es slo un paso
preliminar en el
pgina 239
226 VV Lakshmi
desalentadora tarea de la exploracin de las funciones fisiolgicas de
complejo y altamente
organismos adaptables. Varios de estos genes generan una serie de
distinguibles
entidades funcionales a nivel de protena basan en corte y empalme
diferencial. En vista de
importancia de estas modificaciones post-transcripcionales (PTMs) en la
naturaleza, el estudio
del perfil de protena global durante ex situ e in situ biorremediacin es
crucial.
Ms metabolmica dirigidos anlisis holstico de todo el conjunto de
metabolitos
producido por las protenas celulares en respuesta a diversos estmulos
ambientales pueden
proporcionar pistas crticos para va de anlisis. Varios estudios revelan
metabolmica
correlacin precisa entre los verdaderos flujos metablicos analizados
con las protenas y
la abundancia de ARNm ( Casellas et al, 1997;.. Kromer et al, 2004).
Como este enfoque
examina todos los metabolitos presentes en un sistema biolgico hay
poco sesgo
asociado con la eleccin de los metabolitos a estudiar. Sin embargo, los
metabolitos de
un organismo ser parte especfica de sitio de un flujo metabolito in vivo
regular todo
vas metablicas. de ancho flujos Por lo tanto, basado en el metabolismo
(fluxomes) en vez
permite la localizacin de escenarios de regulacin fisiolgica. Hasta el
momento, la protemica
se han considerado necesarias para complementar los datos del enfoque
metabolmica
y tcnicas. Sin embargo, la exploracin de protemica y la
metabolmica est ganando
posiciones centrales entre las tcnicas de post-genmica.
Actualmente no existe una tcnica molecular nica que puede ser
adecuada
para describir toda la diversidad microbiana y los genes catablicos
asociados.
Cada mtodo tiene sus propias limitaciones en materia de sesgo para la
investigacin
de la diversidad. Mientras que la protemica dirigen la expresin global
de las protenas,
metabolmica caracterizar y cuantificar los productos finales a saber, los
metabolitos
que se producen bajo un conjunto dado de condiciones. Por lo tanto
protemico y
metabolmicas enfoques tienen un enorme potencial y son herramientas
poderosas
en la descripcin de las funciones biolgicas y ecolgicas de un entorno.
Estas
enfoques y posibilidades de aplicacin se han revisado exhaustivamente
(Hou et al., 2003;. Stenuit et al, 2005, 2008;. Dinsdale et al, 2008).
Funcional
protemica se define como el uso de la protemica para supervisar y
analizar la
propiedades espaciales y temporales de las redes moleculares y los
flujos involucrados
en las clulas vivas. A la inversa, la protemica funcional es tambin el
uso de la protemica
mtodos para identificar las especies moleculares que participan en
dichas redes a travs de
estimulacin funcional, perturbacin, o el aislamiento de estas redes.
similar
el trmino metaproteome fue utilizado por Rodrguez-Valera en 2004
para caracterizar
toda complemento protena de micro biota ambiental en un punto de
dado
hora. Hasta hace poco, la protemica se haban limitado principalmente
a los aislados microbianos
en la cultura debido a dificultades tcnicas en la preparacin de
extractos de protenas.
Benndorf et al. (2007) desarrollaron un protocolo de extraccin de
protena para una amplia gama
de muestras ambientales, que se puede acoplar a las herramientas de
anlisis de protenas
en lnea vinculado a MS / MS a travs de fuente de ionizacin por
electrospray (LC-ESI-MS / MS)
para la automatizacin.
metagenmica construcciones de sitios contaminados aparecen
requisito previo para
la adaptacin de biorremediacin in situ. genes y enzimas Adems
biomined tienen
pgina 240
Aproximacin a la genmica biorremediacin 227
para ser integrado en la red de regulacin y metablico complejo de la
acoger organismo con el fin de expresarse correctamente. los procesos
de biorremediacin
por tanto, se reconoce cada vez como un marco en una compleja red de
metablica y
interacciones reguladoras que son difciles de abordar con el tradicional
enfoques moleculares. Una combinacin de identificacin de
metabolitos, genoma y
el anlisis del proteoma es vital para elucidar la ruta de degradacin. La
metagenmica
cada vez ms se est viendo como una tecnologa de lnea de base que
representa el
piedra angular de lo que puede lograrse junto con una gama de
complementaria
tecnologas micas. La integracin de las tecnologas emergentes, como
-micas
transcriptmica, la protemica, la metabolmica puede ir muy lejos en el
suministro
respuestas a las preguntas fundamentales de la ecologa microbiana
(Paul et al, 2005;. Malik
et al., 2008; Stenuit et al., 2008; Zhao y Poh, 2008). La aplicacin de
estas ideas
y los mtodos para el anlisis de redes est ofreciendo nuevos
conocimientos sobre la biodegradacin
proceso. Este punto de vista de la 'biologa de sistemas' proporciona una
visin global
para entender la ecologa y la evolucin de microbialecosystems, sobre
la cual
hiptesis y estrategias experimentales arebeing construyen. Un estudio
simultneo
la combinacin de la protemica y la metabolmica funcionales, es
decir, proteometabolomics
puede crear un enfoque de todo el sistema para estudiar
microorganismos especficos del sitio
durante la mineralizacin activa y sera posible desarrollar modelos que
puede predecir actividades microbiano en diversas estrategias de
biorremediacin. Esta
informacin dinmica permitir a uno a seguir rutas de degradacin y la
pista
sus productos intermedios y respuestas durante la mineralizacin. Esta
informacin puede
ser particularmente valiosa para el estudio complejo en la mineralizacin
situ que
evoluciona dinmicamente, con efectos indirectos en poblaciones de
clulas heterogneas
(Carbajosa y otros, 2006;. Cardenaas y Tiedje, 2008).
7.5 Sistemas de enfoques que usan de alto rendimiento
tecnologas
Con los aos las tcnicas cualitativas y cuantitativas han demostrado ser
herramientas muy valiosas para identificar nuevos operones catablicos
y describir ambiental
comunidades microbianas. Sin embargo, su aplicacin es a menudo
mucho tiempo y
por lo tanto, limitado a un pequeo nmero de muestras, con lo que la
amplia
caracterizacin de un ecosistema difcil. Para abordar estas cuestiones,
de alto rendimiento
enfoques se aplican progresivamente en microbiologa ambiental. Ellos
ofrecen
La ventaja de la miniaturizacin, automatizacin y paralelizacin masiva
de tiempo
el consumo de pasos, lo que permite la administracin simultnea de
anlisis en tiempo real. En expansin
infraestructura de secuenciacin para numerosas muestras a un precio
razonable era
posible la adopcin de la nueva tecnologa de 454 o pirosecuenciacin
con un rpido
reduccin de los costes de secuenciacin genmica. Por lo tanto hay un
aumento dramtico en secuenciado
genomas bacterianos y metagenomes degradantes xenobiticos. El
enfoque tiene
surgido como una alternativa en lugar de bajo costo para estudiar el
potencial metablico de
microbios no cultivados (Golyshin et al., 2003; Kube et al, 2005b;.
Deutschbauer
et al., 2006, Schneiker et al., 2006).
Pgina 241
228 VV Lakshmi
Estos datos acumulacin rpida de proceso de degradacin ha hecho
que sea obligatorio
formalizar las bases de datos estructuradas para el anlisis global de la
biodegradacin como una
conjunto y sus redes metablicas. Este enfoque global es altamente
informativo
todos los detalles en cuanto a su estructura, comportamiento complejo
biolgico
interacciones y evolucin de una manera libre de escala con el aumento
intrnseco
robustez. Adems se est acelerando el desarrollo de varios valiosa
herramientas que pueden predecir la capacidad de descomposicin de
compuestos o ayudar en el diseo de fibras artificiales
vas.
redes metablicas son a menudo diseados en o 'pequeo mundo' 'libre
de escala' y
de manera jerrquica. Este es un estado intermedio entre
completamente al azar
redes conectadas y una muy regular. A pesar de algunas controversias,
se
proporciona un marco conceptual til para el anlisis de la diversidad
biolgica mundial
proceso (Barabsi y Bonabeau, 2003; Arita, 2005; Khanin y Wit, 2006).
La naturaleza 'libre de escala' de la red metablica implica una alta
heterogeneidad
en el nmero de conexiones de sus nodos. Los nuevos nodos pueden ser
aadidos a la
sistema mediante la adicin de conexiones a los nodos ya existentes.
naturaleza jerrquica de
redes metablicas permite la agrupacin de las enzimas en mdulos
interconectados
o grupos que trabajan juntos para realizar una funcin discreta. Estos a
su vez estn
conectados entre s por nodos especficos que adquieren una
importancia crtica
en el mantenimiento del flujo en todo el sistema. la seleccin de una
novela reacciones metablicas
por la evolucin es ms probable si el producto se utiliza en varios otros
metablica
reacciones. El anlisis de una serie de topologas de red biodegradacin
tener
revel una estructura en forma de embudo en el que varias vas
convergen a un conjunto de
intermediarios comunes, que constituyen el centro de la red. Esta
propiedad es
especfica a las redes globales de biodegradacin a diferencia de la
modularidad jerrquica
del metabolismo general. Al igual que en otras redes catablicas, ms
grandes y ms
compuestos hidrfobos tienden a acumularse lejos del metabolismo
central.
Adems, las actividades enzimticas no se distribuyen
homogneamente en la red.
La red de biodegradacin crece principalmente del interior al exterior, la
adicin de nuevos
enzimas hacia periferia de la red, lo que permite la expansin de
compuestos que se biodegradan. Se han propuesto varias teoras para
explicar
la evolucin de vas metablicas (Schmidt et al., 2003). Prominente de
stos
son retro-evolucin, modelo de mosaico y la duplicacin de las vas.
Duplicacin
mecanismo se ve favorecida en varias bacterias donde los genes que
codifican para enzimas
mediar misma va a menudo se agrupan en el genoma facilitando de ese
modo
duplicacin simultnea. Los modelos de patchwork y duplicacin se
presumen
jugar un papel importante en la formacin de algunas rutas de
biodegradacin
(Jensen, 1976; Huynen y Snell, 2000; Rison y Thornton, 2002).
Por lo tanto enfoque de sistemas intenta responder a preguntas
interesantes de cmo
vas degradativas se desprenden y los mecanismos de seleccin
probables
que opera a nivel de los ecosistemas. Tambin es til para predecir la
respuesta de
propiedades funcionales a las variaciones internas y externas (Feist et
al., 2007;
Feist y Palsson, 2008; Trigo, 2009). Tpicamente enfoques biologa de
sistemas
considerar el 'sistema completo' para ser una sola clula. Esta
formulacin es claramente
pgina 242
Aproximacin a la genmica biorremediacin 229
insuficiente en algunos casos de la biodegradacin en el que el 'sistema'
es un complejo
medio ambiente, incluyendo mltiples componentes biticos y abiticos.
Sin embargo, global
redes de biodegradacin consideran como metabolismo supra-
organismo, de ese modo
trascender la limitacin en cierta medida como propiedades parecen
similares a un solo
organismo. La riqueza de conocimientos sobre el metabolismo celular ha
acumulado
en varias bases de datos ricos tales como KEGG, MetaCyc Biocatlisis /
Biodegradacin
Base de datos (UM-BBD), Bionemo etc. (Karp et al, 2002;. Ellis, 2002;
Kanehisa
et al., 2006; Ellis et al., 2008).
Los rpidos avances en microfabrications para el procesamiento de ADN
de nanolitros,
amplificacin de ADN submicrolitre PCR y microarrays de protenas y de
microfluidos
tecnologas para la 'secuenciacin de fbrica-on-a-chip' han permitido el
desarrollo
de totalmente integrada, sistemas miniaturizados denominan
'laboratorio-on-a-Chip'
dispositivos (LOC). La tecnologa proporciona automatizado, de alto
rendimiento y
posibles soluciones en el lugar correcto de preparacin de la muestra
(por ejemplo muestra de
coleccin, concentracin, extraccin y purificacin), para la deteccin
final utilizando
seal de reaccin inmunolgica o bioqumico (ptico o electroqumico)
para el ensayo. Todo el sistema se ensambla como un dispositivo porttil
con eficaz
envases para su uso en el lugar. Laboratorio-on-a-chip de los dispositivos
(LOC), tambin conocido como
'Micro sistema de anlisis total (MTAS)' o 'biolgica microelectrnico
mecnico
sistema (BioMEMS)' estn emergiendo plataforma tan importante en
varias disciplinas
(Reyes et al., 2002). LOC para la PCR es otro medio rpidos y sensibles a
desarrollar un instrumento de ciclo trmico analtico en miniatura en un
chip. los
modo integra atrapamiento celular y etapas de lisis junto con
amplificacin por PCR,
la deteccin en tiempo real a travs de mecanismo de transferencia de
energa de resonancia de fluorescencia
la utilizacin de TaqMan y sondas de baliza molecular seguido de anlisis
en una matriz
formato. Otro enfoque reciente consiste en acoplar un chip
microfabricado para PCR
realizar un mtodo de toma de huellas dactilares comunidad de uso
comn en la biorremediacin
incluyendo T-RFLP en el chip de electroforesis capilar (CE). la
amplificacin
y la identificacin de varios marcadores de genes distintos por este
mtodo era altamente
alentadores (Liu y Zhu, 2005; Ottesen, 2006;. Stenuit et al, 2008).
Optimizacin de la preparacin de muestras automatizado junto con
integrado
envases son importante cuello de botella para el desarrollo de pleno
derecho de un universal,
sistema para la deteccin rpida de microorganismos in situ. Los diseos
mejorados son
extensivamente siendo explorado para la creacin de interfaces para
integrar el cultivo
componentes del mdulo. La tendencia actual se centra en el concepto
'todo en uno'
por la miniaturizacin y la integracin de almacenamiento tampn, las
bombas y las vlvulas en un nico
dispositivo. esfuerzos significativos para reducir el volumen y el peso de
todo el sistema
minimizando la prdida de muestra y el consumo de reactivos se prevn.
Promover
concepto 'plug-and-play' se introduce mediante la integracin de chips
de plstico para diferentes
mdulos funcionales de anlisis y un chip de deteccin electroqumica
en una
placa de circuito impreso (PCB), junto con circuitos de control para la
regulacin. Micro-
mezcladores, microvlvulas y microbombas incrustados calentadores
resistivos se utilizan para
lograr soluciones homogneas y el flujo de fluido directo dentro y fuera
de diferentes
cmaras (Liu y Zhu, 2005). A pesar de los desafos en la muestra
automatizada
Pgina 243
230 VV Lakshmi
preparacin, la portabilidad y la integracin de sistemas an no se han
resuelto por completo,
incluso en la etapa actual de la evolucin de los dispositivos de LOC se
exploran rpidamente
en la metagenmica ambientales y la protemica, junto con la
nanofabricacin
y la deteccin de nanopartculas (Liu et al., 2004). El impacto inminente
del LOC en
estos estudios fue significativa simplemente porque la concentracin de
la muestra, reactivo
y el volumen de reaccin y el tiempo de deteccin podran ser
minimizadas por 100-1000
pliegues en comparacin con los mtodos actuales. LOC ofrece varios de
lo esencial
caractersticas exigidas por los sistemas de deteccin ideales como la
velocidad, sensible, especificidad,
la automatizacin junto con caractersticas porttiles. Por lo tanto este
enfoque trae in situ
anlisis un paso ms a 'verdadero' diversidad microbiana existente en la
naturaleza (Liu y
Zhu, 2005; Abgrall et al., 2007).
7.6 Conclusin
Potencialmente ahora biorremediacin puede ser objetivo de eliminar
cualquier compuesto
que los microorganismos pueden capturar o absorber. Combinacin de
alto rendimiento
tecnologas como la genmica, la protemica y la metagenmica,
aplicados en la novela
y de manera imaginativa a lo largo de etiquetado de metadatos ricos
podra nos permitir abordar
aspectos interesantes de la biorremediacin. En conjunto, estos
enfoques tienen un gran
promesa para el estudio de la ecologa microbiana y evolucin . Sinergia
en la actualidad
micas enfoques emergentes acelerar aparicin de herramientas
alternativas para abordar
fronteras difciles del conjunto de rutas de biodegradacin. Esta voluntad
profundizar en la comprensin de la estructura de la comunidad
microbiana y la diversidad y
correlacionarlos con funciones vitales-nicho especfico dentro de un
espacio micro.
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Tecnologa de ADN recombinante para la biorremediacin de
contaminantes 245
8
Tecnologa de ADN recombinante para
Biorremediacin de contaminantes
Pradeep Kumar y Gayatri Baul
8.1 Introduccin
Los contaminantes se generan artificialmente subproductos del mundo
de los humanos modernos y
la mayora de ellos son conocidos por tener poco impacto
ecotoxicolgico a severo en
naturaleza. La creciente conciencia de la contaminacin ambiental y su
directa o
impacto indirecto sobre los ecosistemas garantiza el desarrollo de coste
eficaz, eficiente
y mtodos seguros para el ambiente. El uso excesivo de productos
qumicos en todas las
mbitos de la vida debido a la industrializacin sin disminucin de la
sociedad moderna y en crecimiento
mercado de productos baratos, pero dainos debido a la globalizacin
estn perturbando la
equilibrio homeosttico de la naturaleza y su entorno. Siendo el ms
inteligente
criatura del universo, es el primer deber de los seres humanos para
mantener la naturaleza libre
de contaminantes y proporcionar un ambiente seguro para el medio
ambiente no slo a la sociedad
sino tambin a aquellas criaturas inocentes que no pueden expresar su
malestar.
8.2 Necesidad de Mtodos biolgicos
Un nmero de mtodos disponibles para hacer frente a la
contaminacin; Sin embargo, muchos de ellos
son de valor limitado debido al alto costo y la eficacia mnima. Los
mtodos naturales
son eficaces y seguros, pero son muy lentos y convertirse en ineficaces
debido a la
rpida tasa de generacin de contaminantes por el hombre moderno a
travs de la industrializacin y
generacin de materiales sintticos artificiales no biodegradables,
tambin denominado como
recalcitrante. Los mtodos fsicos son mano de obra intensiva y costosa,
mientras qumica
mtodos se consideran peligrosos. En vista de tal preocupacin
creciente biolgica
mtodos son cada mtodo preferido de eleccin.
Los mtodos biolgicos se denominan muy frecuentemente como la
biorremediacin y
son muy similares a los mtodos naturales en la lucha contra los
contaminantes del medio ambiente.
MH Fulekar (ed.),
DOI 10.1007 / 978-90-481-3678-0_8, 2010 de Capital Publishing
Company
La tecnologa de biorremediacin: Avances recientes ,
245
Pgina 259
246 Pradeep Kumar y Gayatri Baul
De manera ms precisa que son extensin de los mtodos naturales que
se hacen
efectiva por el aumento usando varios efectores como microbios, su
enzimas, biosurfactantes, bioemulsionantes, adsorbentes, plantas y
otros agro
productos. Los mtodos biolgicos ms eficaces se basan en la
biodegradacin de
contaminantes a travs de las enzimas degradadoras tales como
hidrolasas y / o transferasas
etc. Los mtodos que incluyen la biodegradacin se denominan
biorremediacin y
se considera respetuoso del medio ambiente, ya que se degradan los
contaminantes ya sea por completo en
dixido de carbono, agua y biomasa o en otros intermedios inofensivos.
8.3 Los avances de biorremediacin
La biorremediacin es un proceso de biotecnologa ambiental, con la
promesa de
la promocin de un medio ambiente limpio. Se hace uso de las
propiedades metablicas naturales
de microorganismos en la transformacin de contaminantes a sustancias
inocuas en la
ambiente. Los contaminantes que son nuevas para la biosfera tambin
pueden ser llamados
xenobiticos. La introduccin de tales productos qumicos en el medio
ambiente es conocida
para impactar la capacidad de auto-limpieza del ecosistema receptor
que da lugar a la
acumulacin de contaminantes a niveles inmanejables y perjudiciales.
La biorremediacin explora la diversidad de genes y versatilidad
metablica de
microorganismos. La arquitectura gentica de estos organismos les hace
valioso en la biodegradacin, biotransformacin, biosorcin y
bioacumulacin.
La impresin de color azul necesaria de genes que codifican para las
enzimas de biodegradacin est presente
en cromosmico y el ADN extracromosmico de tales microbios.
recombinante
tcnicas de ADN facilitan a evolucionar la capacidad de un organismo
para metabolizar una
xenobiticos mediante la deteccin de dichos genes degradativas y
transformarlas en
un husped apropiado por medio de vector adecuado bajo el control
estricto de la apropiada
promotores. Depende de la susceptibilidad a la alteracin gentica y el
intercambio de
informacin. La tecnologa de ADN recombinante explora PCR, ARN anti-
sentido
tcnica, mutagnesis dirigida al sitio, electroporacin y bombardeo de
partculas
tcnicas en el desarrollo de tcnicas eficaces, seguros y econmicos.
La madre tierra es capaz de manejar la contaminacin por
biorremediacin natural a travs
plantas llamadas fitorremediacin y microbios denominan
biorremediacin microbiana.
Tradicionalmente la desalinizacin de las plantas terrestres utilizando
agrcolas se ha practicado en
muchos paises. tecnologa de biorremediacin aumentada fue propuesto
por primera vez por
Robinson, que explorado ms a fondo durante la dcada de 1960
utilizando los microbios sobre el petrleo
hidrocarburos. La biorremediacin puede llevarse a cabo en el sitio y
denomina como in-situ
o lejos del sitio contaminado denominado como ex-situ. El mtodo ms
tarde implica
eliminacin fsica de contaminantes desde el sitio contaminado al sitio
de tratamiento.
Los mtodos de biorremediacin convencionales son la agricultura tierra,
bioventing,
biocompostadora, biorreactor, bioaumentacin, rizofiltracin y biolgica
estmulo. Como se describen estos mtodos en detalle en otra parte de
este libro,
restringir este captulo slo a la exploracin de la tecnologa del ADN
recombinante
en la biorremediacin de contaminantes.
Pgina 260
Tecnologa de ADN recombinante para la biorremediacin de
contaminantes 247
8.4 Surgimiento de tecnologa del ADN recombinante
La aparicin de la tecnologa de ADN recombinante, en 1972, abri el
camino de
la biotecnologa, por lo que es una tecnologa de vanguardia que
conduce a la aparicin de
nueva industria en el mundo moderno. Los productos entregados de
industria de la biotecnologa
incluir la insulina humana, interfern, hormona de crecimiento humana y
la vacuna contra la hepatitis
(Steinberg y Raso, 1998). Estos productos se hitos de probados
tecnologa de ADN recombinante en el campo de las ciencias mdicas. El
recombinante
la tecnologa del ADN tambin est facilitando el desarrollo de mtodos
prometedores para
combatir la contaminacin. Muchos informes describen los organismos
modificados genticamente (OMG)
como el producto principal de la tecnologa de ADN recombinante y se
est convirtiendo en una
opcin prometedora en la biotecnologa ambiental, as (Glick y
Pasternak,
1988; Cowan, 2000). A medida que la biorremediacin de ser respetuoso
del medio ambiente, se est convirtiendo en una
mtodo de eleccin y en este captulo vamos a discutir la adicin de
valor efectivas
herramientas de la tecnologa de ADN recombinante en el control de la
contaminacin.
La biorremediacin, en su formato natural en muchos casos, se ve
afectada por la lenta
tasa, el impacto de las condiciones fsico-qumicas y compitiendo
estructura de la comunidad
en el sitio. Estas limitaciones pueden abordarse con eficacia en la
biorremediacin moderna
mediante el uso de comunidad definida de microorganismos de
degradacin con ingeniosamente
ingeniera rasgos y mediante la creacin de organismos hbridos o
transgnicos. Adems, el uso de
mediadores biolgicos para mejorar la disponibilidad biolgica del
sustrato elegido como diana
molculas para facilitar la biodegradacin a un ritmo rpido, sin
generacin de
productos nocivos. La tcnica de ADN recombinante tambin est
demostrando ser una
herramienta valiosa en la generacin de tales mediadores ex-situ (en
fermentador o tratamiento
vasos) y tambin puede ser utilizado in situ (en el sitio de la
contaminacin).
Como valor adems de biorremediacin convencional, ADN
recombinante
La tecnologa muestra un gran potencial futuro de la toma de este
enfoque muy
prometedora (Lovley, 2003). Los contaminantes comunes que son causa
de preocupacin y
necesitar ser tratados incluyen hidrocarburos de petrleo de alta
densidad, metales pesados
(plomo, mercurio, cadmio, arsnico etc.), pesticidas, hidrocarburos
clorados,
insecticidas, polmeros (polietileno, polipropileno, policarbonatos,
poliuretano etc.), detergentes y explosivos (TNT, GTN y RDX) etc.
La biorremediacin es ambientalmente seguro se considera un mtodo
de
eleccin para muchos contaminantes como los bifenilos policlorados
(PCB), policclicos
hidrocarburos aromticos (PCAH), muchas otras nocivos productos
qumicos, hidrocarburos,
combustibles de petrleo y metales pesados. La biotecnologa armado
con recombinante
tecnologa de ADN ya est puesta a punto de la tecnologa de
biorremediacin por
la mejora de contaminantes degradar microbios a travs de la mejora de
cepas y
la modificacin gentica de los genes reguladores y metablicas
especficas que son cruciales
en la biodegradacin. La patente hito de Anand Chakrabarty para el
petrleo
biorremediacin la contaminacin por hidrocarburos fue el primer paso
hacia la aplicacin de recombinante
la tecnologa del ADN (Chakrabarty, 1985).
Es apropiado para entender brevemente los fundamentos de esta
tecnologa en
prrafos subsiguientes. Para ms detalles se recomienda acudir a la
clonacin molecular
pgina 261
248 Pradeep Kumar y Gayatri Baul
Manual por Sambrook et al. (1989). Los transgnicos son los ms
prominentes y
herramienta potencial de la tecnologa de ADN recombinante en la
biorremediacin de contaminantes.
Aunque, son los principales resultados, pero su uso en entorno abierto
necesita espacio libre legal en muchos pases. Se utilizan como por
regulatorio
directrices de ese pas.
8.5 Fundamentos de la tecnologa del ADN recombinante
Esta tecnologa permite generar copias de ADN que se pueden combinar
especficamente en una posicin deseada en un ADN genmico o
plasmdico. El resultante
construir se dice que es un hbrido de ADN recombinante y genmica.
Parcialmente tales
un ADN hbrido representa copia de uno o ms genes que se pueden
expresar en
un nuevo organismo husped que se conoce como clon recombinante.
Tales clones son
capaz de expresar las propiedades de los genes extraos que se
adquieren a travs de este
tcnica. Lo mismo se ha demostrado por muchos investigadores en
bacterias,
algas, hongos, nematodos ( elegans Cenorahabditis ) y clulas de
mamferos. los
dijo que la tecnologa es la herramienta ms poderosa de hoy de la
biotecnologa que se est
explorado en varios campos, incluyendo el control de la contaminacin
del medio ambiente, a travs de
biorremediacin. La entrega ms prominente de esta tecnologa es
genticamente
organismo modificado o ingeniera (OMG o GEM). A pesar de que en
varios pases
Los transgnicos no pueden ser liberados, pero se pueden explorar en
recipientes cerrados (fermentador)
para generar diversos productos recombinantes que tienen aplicaciones
en la medicina,
agricultura y medio ambiente.
Generacin de tal hbrido recombinante implica el aislamiento de gen
diana
de mezcla compleja de molculas biolgicas de clula viva. El ADN
aislado
a continuacin, se digiere con enzimas llamadas endonucleasas de
restriccin u obtenidos por
la amplificacin por PCR de la secuencia diana especfica. El primer
mtodo se denomina
digestin de restriccin que se utilizan como tijeras moleculares para
cortar secuencia deseada
en el sitio especfico que es apropiada para la unin al ADN vector en la
clonacin de genes.
El ADN del vector tambin se describe como un plsmido o auto
extracromosmico
replicar molcula de ADN. En palabras sencillas, tecnologa de ADN
recombinante
significa generacin de ADN a partir de dos orgenes diferentes, su
recombinacin
y la transformacin o transfeccin en un husped para generar nuevos o
hbridos
caracteres. Cada clula que recibe este ADN hbrido puede multiplicar
bajo definido
condiciones de la generacin de miles de copias por replicacin. Otros
avances en
esta tecnologa facilita la modificacin del gen antes de la clonacin para
expresar una
protena alterada, para adjuntar un gen indicador, para aadir un
promotor especfico para controlada
expresin, para tener una mayor expresin de protenas, para modificar
las caractersticas de
protena expresada, para alterar el tiempo y el sitio de una expresin de
la protena etc. El
tcnicas que se utilizan para introducir tales propiedades son PCR,
dirigida al sitio
mutagnesis, la fusin de promotor, fusin del gen reportero, secuencia
de seal de integracin
y la digestin con enzimas de restriccin etc.
Las enzimas desempean un papel crucial en esta tecnologa. Estas
enzimas son
aislado originalmente a partir de bacterias (por ejemplo, Eco R1 de
Escherichia coli y Bam H1
Pgina 262
Tecnologa de ADN recombinante para la biorremediacin de
contaminantes 249
de Bacillus amyloliquefaciens ) y son capaces de escindir un cido
nucleico
molcula. La presencia natural de dichas enzimas en estas bacterias les
confiere
resistencia a los virus bacterianos (bacterifagos). Tal bacteria protege
su
propio ADN por metilacin de los motivos de secuencias especficos. En
el ADN recombinante
La tecnologa que se exploran para varias funciones.
Existen varios tipos de enzimas confieren funcin especfica a ellos
como, Tipo I
enzimas de cortar el ADN en ambas cadenas pero en una localizacin no
especfica a diferentes
distancias de la secuencia particular que es reconocido por la enzima
dando
/ cortes imprecisos al azar. Tales fragmentos de ADN no son muy tiles.
Mientras,
Tipo II enzima de corte ambas cadenas de ADN dentro de la secuencia
particular
reconocida por la enzima de restriccin. Tipo II son endonucleasas de
restriccin
las enzimas ms importantes en la tecnologa de DNA recombinante
como los que se utilizan
para cortar una molcula de ADN de ubicacin especfica. Se lee lo
mismo en el 5 3
direccin en ambas hebras (palindrmica Secuencia 5GGATCC3,
3CCTAGG5).
Algunas de las enzimas de restriccin de tipo II estacin generacin
cortar en medio o a travs de ambos
hebra de generacin de extremos romos en DNA digerido ( Hae III),
mientras que otros generan
Extremos cohesivos (cortes escalonados, por ejemplo, BamH 1, Eco
R1, Hind III, etc., Tabla 8.1). MARIDO-
unin es posible con colas complementarias. ADN ligasa es otro
importante
enzima que se utiliza para unir dos fragmentos de ADN covalentemente
entre s mediante la formacin de
enlaces fosfodister de la cadena principal de fosfato-azcar en el ADN.
Antes de
ligadura es apropiado para seleccionar el ADN vector o plsmido con
cuidado.
La eleccin de un vector depende del diseo y objetivo del experimento.
La mayora de los vectores contienen un origen procaritico de
replicacin (Ori / replicn por ejemplo, Col E1
de E. coli ) que permite el mantenimiento en clulas bacterianas.
Algunos vectores contienen una
origen eucariota adicional de replicacin que permite autnomo,
episomal
replicacin en clulas eucariotas. Mltiples sitios de clonacin nicos se
incluyen a menudo
para la flexibilidad y la construccin de la biblioteca ms fcil.
Tabla 8.1: sitio de reconocimiento de unos pocos tipo comn de
endonucleasa de restriccin II
enzimas
Enzima restrictiva
secuencia de reconocimiento
producto de la digestin
generadora de extremo pegajoso
Eco R1
Bam H1
5GAATTC
3CTTAAG
5GGATCC
3CCTAGG
5 ... GAATTC ... 3
3 ... 5 ... CTTAAG
5 ... GGATCC ... 3
3 ... 5 ... CCTAGG
generadora de extremo romo
HaeIII
Alu 1
5 ... CCGG ...
3 ... CCGG ...
5 ... AGCT ...
3 ... TCGA ...
5 ... CCGG 3 ...
3 ... 5 ... CCGG
5 ... AGCT ... 3
3 ... 5 ... TCGA
Pgina 263
250 Pradeep Kumar y Gayatri Baul
Estos vectores tambin contienen genes de resistencia a antibiticos
(ampicilina /
La tetraciclina / Spectinamycin / Chloramphanicol) y / o otros marcadores
seleccionables
que permiten la identificacin y seleccin de las clulas en el medio que
contiene
antibiticos. A medida que la resistencia a los antibiticos es un carcter
ingeniera artificialmente
en el vector que puede ser utilizado para la seleccin de clones.
Algunos vectores contienen promotores inducibles o especficos de tejido
que permiten
expresin controlada de genes introducidos en clulas o transgnico
transfectadas
organismo. vectores modernos contienen elementos multifuncionales
diseados para permitir
una combinacin de clonacin, secuenciacin de ADN, mutagnesis in
vitro, la transcripcin
y la replicacin episomal.
Principales tipos de vectores
Los diversos tipos de ADN de vector utilizados en experimentos de
clonacin molecular
se basan en el plsmido, bacterifago, csmido, artificial bacteriana
modificada
cromosoma (BAC), cromosoma artificial de levadura (YAC), levadura de 2
micras
plsmido, retrovirus y vectores de baculovirus etc. La eleccin del vector
depende
en la naturaleza del ADN diana, el tipo de clula husped para acomodar
ADNr (procaritica
o eucariota) y el objetivo de la clonacin. Un vector de plsmido es un
covalentemente
circular doble molcula cerrado,, ADN de cadena que se produce
naturalmente y
replicar extra-cromosmicamente en las bacterias. La mayora de los
plsmidos vectores contienen una
mnimo de tres elementos principales en la secuencia a saber, origen de
replicacin,
gen marcador seleccionable (Ampicilina / tetraciclina / Spectinamycin) y
un mltiplo
sitio de clonacin para la insercin de ADN extrao. Muchos resistencia a
los medicamentos confieren a
cepas bacterianas. Un laboratorio ms comn generado pBR322
plsmido vector
contiene dos marcadores de seleccin ( Amp y Tet genes de resistencia).
varios nico
sitios de restriccin se encuentran dispersas en plsmido. Algunos se
encuentran dentro de antibitico
genes de resistencia y se utilizan como medio de proyeccin de insertos.
Col E1 ORI es
el replicn en este vector. Otro vector plsmido importante es pUC18,
deriva
de pBR322. Siendo un pequeo vector que puede acomodar fragmentos
de ADN ms grandes
de pBR322 (5-10 kpb). Es un plsmido de alto nmero de copia es decir,
500 por clula,
5-10 veces ms de pBR322. sitio de clonacin mltiple (MCS) est
agrupado en el
mismo lugar.
Interruptible gen que codifica para la enzima beta galactosidasa ( lac Z)
es
comnmente utilizado en muchos vectores como un gen marcador
seleccionable. El MCS en el
medio de la lac secuencia Z se utiliza convencionalmente como
marcador y la insercin.
Gen alterado ( lac Z) siendo no funcional debido a la presencia de gen
extrao,
el fenotipo resultante aparece como una colonia de color blanco
(interrumpido lac Z) en medios
que contiene sustrato cromognico XGAL indicando la clonacin con
xito (intacto
gen lacZ da colonias azules). La presencia del gen de resistencia a los
antibiticos (Beta
lactamasa) permite el crecimiento de ambas colonias transformadas y
no transformadas en
medios que contienen antibitico (ampicilina). Los clones resultantes
pueden estar ms lejos
explorado en los pasos subsiguientes como puede ser requerido para la
aplicacin especfica tal
como la amplificacin PCR, construccin de la biblioteca de ADN,
secuenciacin, sub-clonacin,
mutagnesis y transfeccin.
pgina 264
Tecnologa de ADN recombinante para la biorremediacin de
contaminantes 251
La tecnologa de ADN recombinante ahora est siendo explorado a un
mayor impulso
la velocidad de biodegradacin varias veces por el uso juicioso de OMG y
mediadores
producido a travs de esta tecnologa. Adems, junto con otros biologa
molecular
tcnicas tales como RAPD, DGGE y FISH proporciona herramientas
valiosas para monitorear
biorremediacin mediante la determinacin de la estructura de la
comunidad antes y despus y los factores
que afecta a la supervivencia de las bacterias implicadas en el proceso.
Una breve descripcin de
estas tcnicas es la siguiente.
RAPD: Es sinnimo de Random La amplificacin de ADN polimrfico.
Esta
tcnica se basa en la amplificacin aleatoria de partes de ADN diana
polimrfica
por PCR utilizando cebadores cortos. Los fragmentos de ADN
amplificados al azar son luego
en comparacin en la electroforesis en gel de agarosa. Es til en la
deteccin especfica de la especie
patrones y es factible con relativamente pequea cantidad de ADN de la
muestra.
DGGE: Es sinnimo de electroforesis en gel desnaturalizante en
gradiente. Esta
tcnica es una tcnica de huellas moleculares que separa DNA pequea
fragmentos (200-700 pb) sobre la base de las diferencias en su
comportamiento de fusin y
sustitucin de una sola base. Es til para comparar el comportamiento
de fusin de la
fragmentos de ADN polimrficas y para detectar fragmentos que tienen
mutaciones.
FISH: Esto significa hibridacin fluorescente in situ. Es un molecular
tcnica de sonda utiliza para identificar la presencia o ausencia de
secuencias de ADN especficas
en los cromosomas. Esta tcnica utiliza sondas fluorescentes que se une
a alta
grado de partes de similitud de secuencias en el cromosoma.
8.6 Aplicaciones de la tecnologa del ADN recombinante
en control de contaminantes
Muchos informes describen dcada de 1990 como la dcada de la
biotecnologa ambiental
cuando la tecnologa del ADN recombinante molecular y gan su
importancia
en el control de la contaminacin del medio ambiente. Las herramientas
de la biologa molecular y
tecnologa de ADN recombinante desencaden la diversidad microbiana
y la poblacin
dinmica de ecosistema microbiano en diversas ecolgica, geogrfica y
condiciones ambientales. Aplicacin de biorremediacin ayudado por
recombinante
productos de ADN para limpieza ambiental proporciona un sistema
robusto, rentable y
tecnologa eficiente.
la tecnologa del ADN recombinante es ahora capaz de proporcionar
eficaz
las estrategias de biorremediacin a muchos contaminantes ambientales
utilizando uno o una
combinacin de tcnicas siguientes (Tabla 8.2).
8.6.1 gen reportero de contaminantes biosensores basados en
Monitoreo biorremediacin
El proceso de biorremediacin convencionalmente se supervisa
indirectamente por
medir el potencial de oxidacin-reduccin o redox del sitio contaminado,
junto
con el pH, temperatura, contenido de oxgeno, las concentraciones de
electrones aceptor / donante,
y la concentracin de productos de degradacin (por ejemplo, dixido de
carbono) y bacteriana
Pgina 265
252 Pradeep Kumar y Gayatri Baul
biosensores se utilizan para analizar ambientes de petrleo
contaminado.
biosensores microbianos estn siendo probados y comprobados til en el
monitoreo
contaminantes en un sistema basado en gen indicador (Tabla 8.2) . La
resistencia de metal
genes son conocidos por ser responsable de la resistencia del metal
microbiana. Estas
Los genes se encuentran organizados en operones y se encuentran a
menudo en los plsmidos llevados
por las bacterias resistentes de metal (Ramanathan et al., 1997). La
expresion
de los genes de resistencia est estrechamente regulada y inducida por
la presencia de
metales especficos en el entorno celular (Ramanathan et al., 1997). los
especificidad de esta regulacin estricta ahora est siendo explotada en
este tipo de biosensores.
Los promotores y genes reguladores de estos operones de resistencia
estn siendo
utilizado para construir biosensores especficos de metal (fusiones de
genes de promotor-indicador).
Mediante el uso de sensores bacterianas de metal especfico, adems de
los anlisis qumicos es
posible regular la concentracin de contaminantes en un proceso de
biorremediacin y
tambin para distinguir la concentracin de metal biodisponible del total
de metal
concentracin de las muestras.
Tabla 8.2: sensores microbianos desarrolladas utilizando la tecnologa
del ADN recombinante para
metales pesados txicos
Metal
gen reportero
cepa husped bacteriana
Antimonio
luc
Staphylococcus aureus
Bacillus subtilis
Escherichia coli
Arsnico
luc
Staphylococcus aureus
Bacillus subtilis
Escherichia coli
Pseudomonas fluorescens
Lux
Escherichia coli
Cadmio
luc
Staphylococcus aureus
Bacillus subtilis
Cobalto
Lux
Ralstonia eutropha
Cobre
Lux
Pseudomonas
fluorescens
Dirigir
luc
Staphylococcus aureus
Bacillus subtilis
Mercurio
Lux
Escherichia coli
luc
Escherichia coli
Lux
Pseudomonas putida
Laca
Escherichia coli
GFP
Escherichia coli
luc
Pseudomonas fluorescens
Nquel
Lux
Ralstonia eutropha
Pgina 266
Tecnologa de ADN recombinante para la biorremediacin de
contaminantes 253
8.6.2 El monocultivo recombinante para mltiples
contaminantes
biorremediacin
Los microorganismos recombinantes eficientes como un monocultivo
pueden tener la
capacidad para degradar ms de un contaminante. El uso de ADN
recombinante
la tecnologa evolucione o generar organismos eficientes adapte
especficamente a las
biorremediacin muestra potencial probada. Por ejemplo bacteria
Dienococcus
radiodurans ha sido genticamente modificada para utilizar y degradar
tolueno y
mercurio inico a partir de residuos nucleares altamente radiactivo.
8.7 Los intermedios metablicos y biorremediacin
La modificacin gentica a travs de ofertas de tecnologa de ADN
recombinante
varias ventajas sobre los aislados naturales. La tecnologa facilita el
diseo
y el desarrollo de microorganismos capaces de operar eficientemente a
travs
mltiples vas degradativas para la degradacin parcial o completa de
incluso
compuestos previamente no biodegradables. El desarrollo de
recombinante
microorganismos con la capacidad de degradar xenobiticos puede ser
preferible
sobre consorcios de aislados naturales. Los consorcios de cepas
silvestres o de laboratorio
puede degradar un compuesto xenobitico o de la mezcla a travs de
diferentes metablica
vas. Adems, la biodisponibilidad y el intercambio de productos
intermedios pueden reducir
la velocidad de degradacin y la eficiencia (Erb et al., 1997). Los
compuestos intermedios resistentes
se sabe que son txicos para el proceso de biorremediacin (Timmis et
al., 1994). Muchos
Por lo tanto, los investigadores recomiendan el uso de mltiples
monocultivo actuando sustrato
de OGM.
Para evitar la formacin de metabolitos potencialmente inhibidores, Erb
et al.
(1997) desarrollaron un pseudomonad GM ( Pseudomonas sp B13
SN45RE). Esta
GMO se hizo para degradar ambos compuestos aromticos cloro- y
metilo por la
orto va de escisin. Otra OGM ( Pseudomonas sp B13 FR1 (pFRC20P),
se hizo capaz de utilizar compuestos aromticos cloro- y metilo por una
construido orto va de escisin para degradar una mezcla de 3-
clorobenzoato de
(3CB) y 4-metilbenzoato de metilo (4 MB; 25? M de cada uno) en los
ncleos de sedimentos bajo
la columna de agua a lo largo de un perodo de cuatro semanas (Pipke et
al., 1992). Esta
desarrollo resalta an ms el enorme potencial de los OMG en la
ambiente para superar los problemas inherentes con microorganismos
no modificados genticamente.
Anlisis de los datos de la biodegradacin de 3CB y 4 MB por
Pseudomonas
sp B13 FR1 (pFRC20P) en agua y en microcosmos sedimentos indic que
las vidas medias observadas y tericas se corresponden bien,
demostrando que GM
pseudomonad funcion de manera ptima en estos ambientes. el
fisiolgica
caractersticas de los OMG y su desempeo en medio ambiente acutico
hacer que este microorganismo es un excelente candidato para la
biorremediacin in situ en
en los sitios contaminados con mezclas de compuestos aromticos
clorados y metilados
(Heuer et al., 1995).
Pgina 267
254 Pradeep Kumar y Gayatri Baul
8.8 La biorremediacin ambiental a prueba de estrs
La modificacin gentica tambin puede ser utilizado para desarrollar
microorganismos que son ms
tolerante a las tensiones ambientales que probablemente se encuentren
en una contaminado
ambiente. Aunque los microorganismos indgenas a tales sitios es
probable que
adaptarse a las tensiones en cierta medida, los factores de estrs tales
como pobre en oxgeno,
agua y la disponibilidad de nutrientes, las altas concentraciones de
contaminantes txicos y
pH extremo se puede esperar que tenga alguna restriccin en el nivel de
in situ
biodegradacin. La modificacin gentica tiene el potencial de conferir
mejorada
tolerancia o resistencia a los esfuerzos que puedan, y en consecuencia
mejorar la
rendimiento del microorganismo degradativa (Timmis et al., 1994). los
acoplamiento de los genes catablicos a promotores es sensible a
ambiental
tensiones tales como pH bajo. Estas modificaciones mejoran las
propiedades de degradacin
del microorganismo GM incluso en entornos de estrs. La colocacin del
catablico
genes bajo el control de dichos promotores tambin significa que la
expresin de
esos genes se limita a los entornos estresados particulares.
Los recientes avances en biologa molecular han ampliado nuestra
comprensin
de los procesos metablicos relacionados con la transformacin
microbiana de petrleo
hidrocarburos. Las respuestas fisiolgicas de los microorganismos a la
presencia
de hidrocarburos, incluidas las modificaciones de la superficie celular y
mecanismos de adaptacin para
la captacin y el eflujo de estos sustratos, se han caracterizado. nueva
molecular
tcnicas han mejorado nuestra capacidad para investigar la dinmica de
microbiana
comunidades en ecosistemas contaminados con petrleo. Por las
condiciones que establecen
que maximizar las tasas y el alcance del crecimiento microbiano, el
acceso de hidrocarburos,
y transformacin, altamente acelerado y residuos de petrleo basada en
biorreactor
se han aplicado procesos de degradacin.
El desarrollo de un organismo modificado genticamente adaptada para
el contaminante especfico dirigido siempre
a velocidad rpida de biodegradacin a travs de enzimas especficas y
est hecho o
se pueden hacer robusto para sobrevivir al sitio contaminado para
funcionar eficientemente como
demostrado en condiciones de prueba. Tambin estn diseados de tal
manera que
que mejoran la biodisponibilidad de contaminantes. En muchas
situaciones no disponibilidad
de sustrato para el organismo degradantes perjudica la eficacia de la
proceso de biorremediacin. Muchos sitios contaminados,
particularmente los que son
continuamente contaminado por las actividades industriales, estn
contaminados con un cctel de
ambos compuestos orgnicos e inorgnicos. Un consorcio de los
transgnicos capaces de
degradar sustratos tanto orgnicos como inorgnicos parece prometedor
en tales
situaciones. El xito in situ de OMG en la biorremediacin tambin
depende de
constituyentes qumicos o contaminantes presentes en el sitio
contaminado. A GMO puede
mostrar una excelente eficiencia de biorremediacin en condiciones de
laboratorio, pero
puede no ser necesariamente tan eficiente en las condiciones de campo.
Tales efectos pueden ser
observado debido a la inhibicin de los pasos catablicos de la
biorremediacin o como una
resultado de la toxicidad de los contaminantes locales a GMO aadido
(Timmis et al., 1994).
Por ejemplo, en un sitio contaminado con una mezcla de disolventes
clorados y
radionucleidos, el OMG introducido para degradar disolventes clorados
deben estar
pgina 268
Tecnologa de ADN recombinante para la biorremediacin de
contaminantes 255
resistente a la radiacin. En otras palabras, un OGM eficiente debe ser
diseado para
degradar cualquiera de ambos contaminantes o ser resistente a uno,
mientras que la degradacin de la otra.
cepas resistentes tal radiacin se describen en la literatura. Un
genticamente
modificado Deinococcus radiodurans cepa, que se describe en la
literatura, se encuentra
capaz de degradar 125 n mol por ml de clorobenceno en un sitio que
tiene
radiactividad hasta 60 Gy por hora (Lange et al., 1998).
8.9 Modificaciones de la transcripcin de Metablica
genes
En general se acerca a las aplicaciones de la tecnologa del ADN
recombinante en
biorremediacin tambin incluir modificaciones transcripcionales
metablicos de importancia
genes que codifican para las enzimas de la biodegradacin de
contaminantes o modificacin
formas no txicas almacenable. Se considera para ser una herramienta
de biologa molecular en
qu gen se modifica en la regin codificante o en la secuencia de gen
que es
transcrita en ARNm modificados. Tales modificaciones estn destinadas
a efectivo
sustrato de la enzima de unin o interaccin biolgica eficaz debido al
aumento de
o modificado sitio de unin activo. Tambin se puede realizar para el
control deseado o
regulacin de un gen metablico. Tales modificaciones permiten la
modificacin cepa
para la biorremediacin y la deteccin de contaminantes nivelar puntos
finales.
Tabla 8.3: El reciente desarrollo de la tecnologa del ADN recombinante
en el campo de
biorremediacin de contaminantes
Modificacin gentica
estrategia de biorremediacin
Referencia
GEM suicidas
genes asesino contra asesinas
susceptibles a la apoptosis
Pandey et al., 2004
biosensor de mercurio
Mercurio inducible mer
fusin del promotor con luc
gen (deteccin mnimo
0.1fM)
Marko et al., 1995
organofosforados y
pesticida carbamato
GEM degradantes
Metil paratin hidrolasa
gen que codifica ( MPD ) y
regulador cognado
Liu et al., 2006
los residuos de alquitrn de hulla
deteccin de contaminacin
por FISH
transcritos de ARNm relacionados con
naftaleno dioxigenasa y
amplificacin de la seal de tiramida
Bakersmans y Madsen,
2002
On-line in-situ biosensor clulas enteras y
biosensor electroqumico
Paitan et al., 2003
vectores seguros para el campo
lanzamiento
bacterias de tipo salvaje Pseudo
no teniendo ADN heterlogo
aparte de gen de inters
Davison, 2002
pgina 269
256 Pradeep Kumar y Gayatri Baul
La modificacin gentica permite el desarrollo de organismos
modificados robustos
para atacar especficamente contaminantes a travs de cascada
enzimtica eficiente y
reforzador de la biodisponibilidad mediadores de origen biolgico. An
ms la tecnologa
es capaz de proporcionar la biorremediacin eficiente y vigilancia de los
contaminantes
herramientas (Romantschuk et al., 2000). Varios informes describen
origen natural
microorganismos equipados con las vas requeridas para mineralizar la
ms
xenobiticos recalcitrantes compuestos como el pentaclorofenol (PCP) y
los PCB
(Wilson y Lindow, 1993). tecnologa de ADN recombinante tiene el
potencial
para mejorar las vas catablicas existentes o para extender dichas vas
para incluir
compuestos diana adicionales que de otro modo no ser degradados
(Timmis et
al., 1994; Brasil et al., 1995). Tambin se puede optimizar para superar
el txico
o efecto inhibidor de un contaminante en particular o un metabolito
(Mason et al.,
1997).
El alcance de las vas catablicas se puede ampliar a travs de la
introduccin
de secuencias genticas adicionales, o se informa de la alteracin de
genes existentes
para ofrecer la aplicacin ms simple de las tcnicas de modificacin
gentica a las estrategias de biorremediacin
(Kumar et al, 1996;.. Johri et al, 1999).
8.10 Las mejoras en la transcripcin del gen
secuencias
Los genes implicados en la degradacin de los contaminantes son
generalmente dispuestos en
operones realizadas en rango de gran anfitrin, conjugativo o plsmidos
movilizables. por
transcripcin que se produzca correctamente, se requiere genes a ser
dispuestos en ms
secuencia apropiada en operones para producir la enzima especfica.
Transcripcin
de dichos operones catablicos est controlado por operones
individuales y tambin a una
nivel de clula entera.
operones individuales son controladas por que actan positivamente
protenas reguladoras
que son activados por sustratos o metabolitos (efectores denominados)
presentes en
la va catablica. El control de la transcripcin de esta manera se
garantiza que
el microorganismo slo funcionar la va catablica en presencia
de sustratos especficos, y no ser un desperdicio de carbono y energa
de sntesis
protenas innecesarias en la ausencia de esos sustratos.
La modificacin de los sitios contaminados, con compuestos que actan
como efectores
para determinadas vas catablicas, pueden mejorar la degradacin de
xenobiticos
mediante la activacin de la va catablica respectivo. El P promotor lac
se activa
por la adicin de isopropil - D-tiogalactsido (IPTG), y se informa que
funcionar bien en Escherichia coli en condiciones de laboratorio. El P tac
promotor
Tambin responde a IPTG y se ha reportado que funciona mejor que P
lac en una variedad de
Bacterias Gram-negativo. Sin embargo, IPTG es relativamente caro, y
esto significa
que el desarrollo de organismos modificados genticamente con los
sistemas promotores de la base de este efector
es poco probable que sea comercialmente viable para aplicaciones de
liberacin de campo (Timmis
et al., 1994).
pgina 270
Tecnologa de ADN recombinante para la biorremediacin de
contaminantes 257
El P m promotor de la meta- va de escisin del plsmido TOL
funciones bien en una serie de bacterias Gram-negativas, y se induce
cuando
la protena reguladora XylS se activa por la presencia de benzoato y su
derivados (Keasling y Bang, 1998;. Ramos et al, 1986). A diferencia de
IPTG,
benzoato es relativamente barato y es probable que se produzca in situ
durante la
degradacin de contaminantes aromticos. Debido a su uso como un
alimento existente
conservante y su mala persistencia en el medio ambiente ha sido
benzoato
descrito como un inductor con el medio ambiente (Timmis et al., 1994).
Otros sistemas que presuntamente son aplicables a los sistemas de
liberacin de campo
son el p salicilato inducida por sal -NahR promotor-regulador, el
promotor T7 y
el / P XylR u sistema de expresin que controla la va superior de la TOL
plsmido y es inducida por efectores tales como tolueno, etilbenceno y
xileno
presente en muchos sitios contaminados (Keasling y Bang, 1998; de
Lorenzo
et al., 1993). El promotor de T7 se ha incorporado para su uso en un
nmero
de las bacterias del suelo (Tabor y Richardson, 1985;. Davison et al,
1989). Futuro
Se proponen desarrollos en esta rea para incluir sistemas de expresin
basados
en las respuestas a los metales, tales como CADC (protena reguladora
de cadmio) y ARR,
una protena reguladora para el sistema de resistencia arsnico y otra
ambiental
contaminantes (Keasling y Bang, 1998).
Operones, a un nivel de clulas enteras, son controlados por circuitos
reguladores globales.
Estos estn diseados para asegurar que los operones operan como
parte de la general
necesidades de nutrientes y de energa de la clula microbiana. El
regulador global
circuito responsable de la coordinacin de la transcripcin de operones
catablicos
que se conoce como la represin de catabolitos y acta para reprimir los
operones utilizados para la
catabolismo de ciertos sustratos cuando otros sustratos preferidos estn
disponibles
(Timmis et al., 1994). Por lo tanto, cuando el compuesto de destino no es
una realizacin preferida
sustrato, la degradacin del compuesto objetivo puede ser bloqueado
por catabolito
represin.
La inactivacin del circuito de represin catablica por modificacin
gentica
sin embargo puede conducir a una reduccin de la competitividad del
microorganismo
y para los fines de biorremediacin es por lo tanto indeseable. Una
realizacin preferida
enfoque es para bloquear la represin catablica del opern especfico
utilizado
en la degradacin del compuesto objetivo. Esto se puede lograr a travs
de
la identificacin y eliminacin de los sitios en el promotor del opern
donde
represin se ejerce (Timmis et al., 1994).
La activacin de los operones catablicos se produce cuando el efector
relevante
est presente en una concentracin suficiente tambin conocido como
concentracin efector
lmite. Por ejemplo, los promotores catablicos se activan en una
efectores
concentracin umbral de 5-50? M del plsmido TOL (Mermod et al.,
1998). El Pm promotor del plsmido pWWO TOL en Pseudomonas putida
se activa a una concentracin de 1 ppm de benzoato de (de Lorenzo,
1994). los
Pm, Pu y Psal promotores, que son activados por alquil- y halobenzoates,
alquilo, y halotoluenes, y salicilatos, respectivamente, tienen una amplia
gama de huspedes
y puede funcionar en un nmero de gneros (de Lorenzo, 1994). Sin
embargo, si
pgina 271
258 Pradeep Kumar y Gayatri Baul
El objetivo de la estrategia de biorremediacin es degradar el
contaminante diana a una
concentracin ms baja que el umbral de concentracin efectora,
entonces una alternativa
puede ser necesario ruta catablica. De lo contrario, cuando el
contaminante se reduce a
una concentracin por debajo del umbral de concentracin efectora, la
transcripcin de
el opern catablico no ocurrir, y sin degradacin se llevar a cabo. Si
una
opern catablico alternativa no est disponible, el microorganismo
puede ser
genticamente modificado para colocar los genes catablicos bajo el
control de un diferente
promotor que no est activado por el compuesto objetivo (Timmis et al.,
1994).
promotores alternativos permiten la activacin del opern catablico
para degradar una
contaminante no degradable y pueden separarse efectivamente de las
necesidades de la
microorganismo que le permita utilizar el contaminante como fuente de
carbono. en adicin
tales modificaciones facilitan el uso del contaminante que se degrada
por debajo de la
nivel requerido para soportar el crecimiento microbiano. El mtodo
tambin se puede utilizar para
degradar los contaminantes que proporcionaran poco o ningn beneficio
para el microorganismo en
trminos de carbono o energa. Como se describe para el tricloroetileno
(TCE), donde el
funcin bioremediative del microorganismo se separa del requisito
utilizar el contaminante como fuente de carbono, el microorganismo
est habilitado para utilizar
otras fuentes de carbono para mantener su equilibrio de energa (Timmis
et al., 1994).
La modificacin gentica que implica la insercin de promotores
alternativos
tambin aumenta la variedad de efectores que pueden activar la
biodegradativo
va, y por lo tanto ofrece una mayor flexibilidad al proceso de
biorremediacin.
Tales efectores pueden conferir una mayor transcripcin de los
principales opern catablico
para mejorar la eficiencia del proceso catablico. Sin embargo, para
cerciorarse de que el
carcter insertado se expresa bien en el medio ambiente, es importante
seleccionar
un promotor que se sabe que funciona en el entorno de destino, y luego
encaja
los genes modificados a ese promotor. Esto es probable que sea ms
exitoso que
intentar modificar un promotor que funciona bien en condiciones de
laboratorio
para operar en el campo (de Lorenzo, 1994).
Si promotores adecuados no estn disponibles, entonces los genes
modificados se pueden
insertado en el microorganismo husped utilizando un mini vector
transposn. los
ubicacin de los genes modificados adyacente a la terminal de la mini
transposn
resultar en los genes ser controlado por una secuencia promotora
indgena a
el microorganismo husped. Proyeccin del microorganismo GM es
posteriormente
requerida para identificar la cepa mutante ms adecuado (de Lorenzo,
1994).
8.10.1 El promotor indgena
El uso de una secuencia de promotor indgena del organismo siendo
modificado
para controlar el gen insertado puede conferir un mayor nivel de
expresin de
propia secuencia promotora del gen. Por ejemplo, la insercin de la OPD
gen
de Flavobacterium sp ATCC 27551 y de P diminuta en otra Gram-
bacterias negativas bajo el control de su propia secuencia de promotor
da como resultado la
pobre expresin del gen. Sin embargo, la expresin de la OPD gen, que
es
Pgina 272
Tecnologa de ADN recombinante para la biorremediacin de
contaminantes 259
responsables de degradar el paratin pesticidas y metil paratin, es
mucho
mejor si se coloca bajo el control de propio promotor del organismo
modificado
(De Lorenzo, 1994).
8.10.2 Promotores hambre inducida
En muchas ocasiones los genes catablicos no se expresan debido a la
falta de disponibilidad
de micronutrientes o condiciones de inanicin. La expresin de estos
catablico
genes bajo inanicin en ambientes contaminados pueden mejorarse si la
expresin
de estos genes est unido a promotores hambre inducida tales como
groEL y tra
(Little et al, 1991;. Matin, 1992; Davison, 1999). Bajo tales ambiental
estrs, GroEL puede constituir 3-4 por ciento de la protena celular total.
El hambre vinculados
promotores activan secuencias de genes heterlogos a travs de una
seal universal de
y se encuentran adecuado para entornos en los que la disponibilidad de
nutrientes son demasiado
bajo para apoyar el crecimiento exponencial del microorganismo (de
Lorenzo, 1994).
Los promotores que responden a carbono, nitrgeno, hierro y fosfato de
hambre tienen
ha caracterizado en muchas bacterias Gram-negativas (de Lorenzo,
1994). UN
ventaja adicional de la utilizacin de promotores de hambre inducida es
que evita la
problemas asociados con la introduccin de grandes cantidades de
nutrientes en
sitios contaminados (Matin et al., 1995), promotores de hambre
utilizados de E.
coli para controlar la sntesis de monooxigenasa tolueno en
pseudomonas, con una
resultante reduccin de 60-90 por ciento en la demanda de nutrientes
para la transformacin de un dado
cantidad de TCE en comparacin con los microorganismos de tipo
salvaje.
8.11 Mejora de traduccin
La mejora de la traduccin de una secuencia gentica es
particularmente til en
la optimizacin de la etapa limitante de la velocidad de una reaccin. La
etapa limitante de la velocidad es a menudo
debido a la relativa falta de protena especfica en comparacin con los
otros requeridos
para la va. Para aliviar paso limitante de la reaccin, las mejoras en
traduccin est dirigida a una protena especfica y el gen necesario se
mantiene
bajo el control de un promotor separado. Para asegurar la mayor sntesis
de
requerida de protena en comparacin con otras protenas, la
modificacin de la traduccin
regin de iniciacin (TIR) del gen relevante es recomendado por sitio
dirigida
mutagnesis (Timmis et al., 1994). potenciadores de la traduccin son
secuencias cortas
(40-50 pares de bases) presente en algunos virus de plantas y tambin
puede ser explorado para asegurar
que la traduccin de la secuencia deseada se produce en una gama de
organismos husped como
un medio para eludir los problemas potenciales de la especificidad de
husped encontradas
con la TIR (de Lorenzo, 1994). La insercin de un potenciador de la
traduccin a partir de
virus del mosaico del tabaco activar el gen de la cloranfenicol acetil
transferasa
que se expresa en E. coli, S. typhimurium, Erwinia amylovora, A.
tumefaciens,
A. rhizogenes, Rhizobium meliloti y Xanthomonas campestris (Gallie y
Kado, 1989).
Pgina 273
260 Pradeep Kumar y Gayatri Baul
8.12 La mejora de la estabilidad de protenas y actividad
Estabilidad del ARNm se sabe que influyen en la expresin de la deseada
rasgo. El ARNm del gen 32 del bacterifago T4 es extremadamente
estable debido
a determinantes estructurales en su extremo 5' . La fusin del
promotor / TIR nativo
regin del gen de 32 a varios genes heterlogos se ha demostrado que
el resultado en el
produccin de transcritos ms estables cuando se expresan en
huspedes heterlogos. los
fusin de este transcrito a la xylE gen (que codifica catecol 2, 3
dioxigenasa)
ha sido reportado para dar como resultado la expresin de altos niveles
del reportero
producto en bacterias Gram-negativas tales como A. tumefaciens y X.
maltophila
(Frey et al., 1988). La introduccin de casetes de ADN en el 5' no
traducida
regin de un gen de inters se inform para mejorar la estabilidad del
ARNm por
la introduccin de estructuras de horquilla en el extremo 5 'del ARNm
(Keasling y Bang,
1998). Debido a que el ARNm contiene horquilla tena una vida media de
tres veces mayor
que la de mRNA equivalente sin horquillas, la introduccin de las
horquillas
puede ser explorado efectivamente para aumentar la cantidad de ARNm
y protenas que
est destinada a la produccin (Keasling y Bang, 1998).
Las mejoras en la transcripcin y la traduccin se traducir en un
aumento de la
la produccin de las enzimas y las protenas necesarias para la
biodegradacin de la
orientar contaminante. Sin embargo, una pobre estabilidad y la actividad
de las protenas y baja
especificidad de sustrato todava puede restringir la eficiencia de todo el
biodegradativo
proceso. La estabilidad de una protena puede ser mejorada mediante la
alteracin de la secuencia de
sus aminocidos (Murdock et al., 1993). Por ejemplo, la escisin del
anillo aromtico
catecol-2 enzima, 3-dioxigenasa se inactiva lentamente por su sustratos
oxgeno
y derivados de catecol tales como 4-ethylcatechol. Ramos et al. (1987)
informaron
que mediante la modificacin de la catecol-2, 3-dioxigenasa por dos
aminocidos individuales
caus la enzima sea menos susceptible a la inactivacin por 4-
ethylcatechol
y ms estable en presencia de este sustrato. El desarrollo de hbridos
grupo de genes con actividad enzimas alteradas y sustrato
especificidades tiene
han reportado en la literatura. Estos hbridos codifican para subunidades
de diferente
enzimas para producir una nica enzima con capacidad de
transformacin superior.
Por ejemplo, Furukawa et al. (1994) describieron la degradacin de TCE
por una
genticamente modificada E. coli, que fue diseado para expresar un
gen hbrido
grupo que consiste en genes de la tolueno metablica tod opern y la
bifenilo metablica BPH opern. Esta ingeniera E. coli fue mucho ms
rpido en
degradar TCE que la de un no-modificado salvajes de E. coli clulas que
expresan cualquiera de los dos
los genes originales tolueno dioxigenasa ( todC1C2BA ) o el bifenilo
originales
genes dioxigenasa ( bphA1A2A3A4 ). Este modificadas de E. coli tuvieron
gen hbrido
clster que consista en todC1 que codifica para la subunidad grande de
tolueno
dioxigenasa terminal en P. putida F1, y bphA2, bphA3 y bphA4 en P.
pseudoalcaligenes KF707, que codifica para la subunidad pequea de
terminal de bifenilo
dioxigenasa, la ferredoxina y ferredoxina reductasa, respectivamente.
enzimas hbridos tambin se han desarrollado para producir una sola
enzima
sistema capaz de degradar benceno y tetraclorobenceno. La enzima
Pgina 274
Tecnologa de ADN recombinante para la biorremediacin de
contaminantes 261
Teca clorobenceno dioxigenasa es capaz de deshalogenar parcialmente
1,2,4,5-
tetraclorobenceno pero no tiene actividad contra benceno, mientras que
el TodCBA
dioxigenasa tolueno puede dioxigenados benceno pero no tiene
actividad contra
tetraclorobenzeno. La modificacin gentica de E. coli para expresar un
hbrido
enzima que consiste en la gran subunidad alfa de la dioxigenasa TodCBA
cuya
todC1 especfica subsecuencias subunidad alfa haban sido
reemplazados por equivalente
secuencias de la subunidad alfa de tecA1, resultaron en un OMG con
actividad hacia
benceno y tetraclorobenceno (Beil et al., 1998).
La mutagnesis aleatoria y la deteccin selectiva de rasgos deseados se
descrito en la literatura para las mejoras en la actividad de la protena.
Sin embargo, una
enfoque ms racional basado en la estructura tridimensional de la
protena
y su relacin secuencia de estructura se describe tambin para mejoras
en la actividad de protena por estos investigadores (Timmis et al,
1994;.. Mason et al,
1997; Kellner et al., 1997). La mutagnesis dirigida de la BPHA gen de
Pseudomonas sp LB400 por ejemplo aumenta la especificidad de la
expresada
bifenilo dioxigenasa para incluir congneres no degradadas por la cepa
no GM
(Erickson y Mondello, 1993). Sin embargo, la informacin necesaria para
los ms
existe enfoque racional para relativamente pocas enzimas degradativas
(Mason et al.,
1997), incluyendo P450cam citocromo, deshalogenasa haloalcano,
dihidroxi
bifenilo dioxigenasa y metano monooxigenasa hidroxilasa (Timmis et
al., 1994).
8.13 ampliacin de los objetivos de catablico existente
vas
La extensin del mbito de las vas catablicas existentes para degradar
compuestos nuevos
evita la necesidad de desarrollar completamente nuevas rutas de
degradacin y mayo
por lo tanto, ofrecen la va ms inmediata para la biorremediacin de
anterioridad
no degradables xenobiticos contaminantes. Una de las vas para
mejorar el alcance
de una va catablica es ampliar los tipos de efectores que pueden
regular
esa va particular. Esto puede permitir que la va catablica para operar
en
sitios contaminados que no contienen los efectores utilizados en el no
modificado
camino.
Los estudios con el regulador de XylS del opern catablico del TOL
plsmido encontr que aunque la va fue activado por benzoato, algunos
otros anlogos de benzoato tales como 4-benzoato de etilo inhibe
competitivamente la
activacin del efector mediado de XylS. La mutacin del regulador XylS
result
en todos los anlogos de benzoato de ser capaz de activar el sistema
(Ramos et al., 1986).
La inclusin de nuevos compuestos efectores tambin puede conferir
una mayor eficiencia
de la transcripcin (Timmis et al., 1994).
Extensin de la ruta catablica para incluir ms sustratos podran ser
ya sea lateral o vertical. La extensin lateral necesita la incorporacin de
ms
anlogos de sustratos existentes mientras que la extensin vertical
puede requerir la adicin
de totalmente nuevos sustratos en una va existente. Debido a la
naturaleza modular de
Pgina 275
262 Pradeep Kumar y Gayatri Baul
muchas vas catablicas, la gama de sustrato a menudo se pueden
ampliar mediante la adicin de
un mdulo bioqumicamente compatible para el microorganismo que
permite un nuevo
sustrato que se canaliza en una va existente (Timmis et al., 1994).
Por ejemplo, la adicin de genes deshalogenasa a microorganismos
capaces de
PCBs co-metabolizar pueden extender vas existentes ms all de la
clorobenzoato
intermedio y mejorar la mineralizacin de los PCB por solo
microorganismo
(Hrywna et al., 1999). la expansin lateral de una va puede lograrse a
travs
la utilizacin de rutas isofunctional para la degradacin de
estructuralmente relacionado
compuestos, la utilizacin preferente de enzimas con especificidades de
sustrato relajado
y la mutagnesis dirigida al sitio para alterar la especificidad de las
protenas para su
sustratos (Timmis et al., 1994).
La facilidad con que la mutagnesis de protenas puede ser usado para
alterar existente
Rutas hacia incluyen compuestos previamente no metabolizada depende
de la
nmero de protenas que necesitan para adaptarse antes de catabolismo
de la nueva meta
puede ocurrir compuesto. Cuando slo una nica protena necesita ser
alterado y el
cambios requeridos pueden lograrse mediante la seleccin directa de un
mutante que puede ser
capaces de crecer en el compuesto diana. Sin embargo, cuando
mltiples no permisiva
protenas requieren alteracin, las mutaciones necesarias es probable
que se produzca en demasiado
bajo una frecuencia para producir el microorganismo deseado. En este
caso, las protenas
que no son permisivas para el nuevo compuesto de destino debe ser
identificado y
ya sea modificado de forma secuencial para lograr la especificidad
requerida, o sustituido por
protenas permisivas de otros organismos (Timmis et al., 1994).
El alcance de la biodegradacin de compuestos aromticos se puede
aumentar en
una va catablica por modificacin gentica (Timmis et al., 1994).
Siguiendo
aspectos debe ser abordado con cuidado de alteracin ya sea lateral o
verticalmente
en una va metablica:
reguladores transcripcionales activados-metabolito sustrato /,
mono o di-oxigenasas que median en el ataque inicial sobre el
sustrato,
enzimas de escisin de anillo y
enzimas que transforman los muconolactones sustituidos a
oxoadipato.
La incapacidad de Pseudomonas B13 sp a 4CB o 3,5-diclorobenzoato
(3,5DCB) es informado de que debido a la estrecha especificidad de la
primera enzima
en la va (benzoato de metilo 1,2-dioxigenasa). Esta enzima slo
permiti la
pseudomonad para degradar 3CB (Reineke y Knackmu, 1980). La
insercin de
los genes que codifican la enzima tolueno isofunctional 1, 2-dioxigenasa
activar
la bacteria para degradar 3CB y 4BC. Toluene1, 2-dioxigenasa tiene una
gran
ms amplia especificidad de sustrato de benzoato de 1, 2-dioxigenasa, e
incluye todos
alquil- y clorobenzoatos.
En la gestin ambiental de los contaminantes biorremediacin ha
convertido en una
eleccin obvia debido a su carcter ecolgico. Ofrece rentable, eficiente
y mtodos robustos para el control de los contaminantes ambientales. El
futuro de
biorremediacin armado con tecnologa de ADN recombinante para
entregar a la medida
pgina 276
Tecnologa de ADN recombinante para la biorremediacin de
contaminantes 263
reactivos y enfoques especficos para cada contaminante objetivo
parece prometedor.
enfoques ms lejos, bien definidos con el software de aplicacin
significativa
modelado impulsado de datos de densidad y la cintica de
contaminantes puede extenderse bien definido
las estrategias de biorremediacin para combatir una sola o mltiples
contaminantes en diversos
nichos ambientales.
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266 Asha A. Juwarkar y Santosh K. Yadav
9
bioacumulacin y
Biotransformacin de metales pesados
Asha A. Juwarkarand Santosh K. Yadav
9.1 Introduccin
La estrategia para aumentar y mejorar la eficiencia de remediacin
tcnicas es aumentar el potencial de bioacumulacin y la
biotransformacin
de las plantas y los microbios para la desintoxicacin de metales txicos.
Con un aumento de
prcticas antropolgicos, ms y ms txicos iones metlicos se aaden a
el entorno natural alterando el ecosistema. Metales como Cd, Pb, Cr, As
etc. cuando est presente en altas concentraciones en el potencial de
mostrar suelo efectos txicos
en el crecimiento global y el metabolismo de plantas y microbios (Yadav
et al., 2009;
Juwarkar et al., 2008). Bioacumulacin de tales metales txicos en las
poses plantas
un riesgo para la salud humana y animal. La eliminacin del exceso de
iones metlicos a partir de la
sitio contaminado se produce por qumica, as como medios biolgicos.
Sin embargo, la existencia de muchas clases y tipos de especies
qumicas hacen que el
eliminacin de los metales txicos del medio ambiente muy complicado.
El uso de medios biolgicos para limpiar el medio ambiente natural
incluye
fitorremediacin, as como tcnicas de remediacin microbianas. los
La tecnologa se basa en el uso de origen natural o de ingeniera
gentica
microorganismos para restaurar los sitios contaminados y proteger el
medio ambiente. Otro
los microorganismos, ciertas especies de plantas que se acumulan alta
concentracin
de metales pesados tambin tienen un potencial hacia la restauracin
del medio ambiente.
El xito de la tecnologa de remediacin microbiana depende de la
aplicacin de
tales cepas microbianas que tienen la capacidad de auto reposicin,
continuo
absorcin metablica de metales despus de la adsorcin fsica y el
potencial de
optimizacin a travs del desarrollo de especies resistentes y superficie
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Pgina 280
Bioacumulacin y la biotransformacin de metales pesados 267
modificacin (Joshi y Juwarkar, 2009;. Juwarkar et al, 2007). La tasa de
fitorremediacin es directamente proporcional a la tasa de crecimiento
de la planta y el total
cantidad de fitorremediacin se correlaciona con una biomasa total de la
planta, lo que hace
el proceso muy lento (Kumar et al., 2008). Esto requiere la identificacin
de un rpido crecimiento (biomasa potencial ms grande y mayores
respuestas de nutrientes)
y ms fuertemente genotipos acumulacin de metal. La tcnica hace
uso
de la capacidad intrnseca de las plantas para acumular metales y
transportarlos a
brotes, capacidad para formar fitoquelatinas en las races y secuestran
los iones metlicos.
Que alberga los genes que son considerados como la firma para la
tolerancia y
hiperacumulacin de especies de plantas identificadas en el
hiperacumulador
plantas transgnicas proporcionan una plataforma para desarrollar la
tecnologa con la ayuda
de la ingeniera gentica. Esto dara lugar a los transgnicos que pueden
tener gran
biomasa y crecimiento rpido, una calidad esencial para la eliminacin
de metales del suelo
rpidamente y en grandes cantidades. A pesar de que gran parte de un
potencial, los avances en la
el campo de desarrollo de especies de plantas transgnicas
phytoremediator es bastante lento.
Esto se puede atribuir a la falta de comprensin de las interacciones
complejas
en los mecanismos indgenas de suelo en las plantas que permiten la
translocacin metal,
acumulacin y eliminacin de un sitio.
La tecnologa de la fitorremediacin consiste en varias tcnicas como
fitoextractor, fitominera, phytovolatilization, etc. phytofilteration todos
que emplean plantas para la limpieza de contaminantes del suelo. La
capacidad de una planta
a fitoextraer ciertos metales es el resultado de su dependencia de la
absorcin
de metales tales como arsnico, cromo, zinc, manganeso, nquel, y
cobre para
mantener la funcin natural (Yadav et al, 2009;. Lasat, 2002). Estudios
muestran
que los hiperacumuladoras menudo no excluyen metales no esenciales
en el
proceso de absorcin, lo que resulta en plantas que pueden extraer altos
contenidos de
contaminantes (1-2% de su biomasa) de suelo contaminado. Se cree que
plantas inicialmente desarrollaron la capacidad de hiperacumular
metlico no esencial
compuestos como una forma de autoproteccin de los depredadores
herbvoros, quienes
experimentaran efectos secundarios txicos de la ingestin de la
hiperacumulador de
follaje. Fitoextractor ha atrado la atencin en los ltimos aos por el
bajo costo de
aplicacin y los beneficios ambientales. Este enfoque hace uso de alta
cultivos de biomasa que son inducidos a tomar gran cantidad de metales
cuando su
movilidad en el suelo se ve reforzada por tratamientos qumicos. Varios
agentes quelantes,
tal como cido ctrico, cido etileno-diamina-tetraactico (EDTA),
diethylene-
triamina-pentaactico cido (DTPA), etilen-bis [oxietileno-trinitrilo] tetra
cido actico (EGTA), nitriloacetato (NTA) y otros quelantes sintticos,
tienen
sido estudiados por su capacidad para movilizar metales y aumentar la
acumulacin de
metales en diferentes especies de plantas (Blaylock et al., 1997).
La bioacumulacin y transformacin potencial de las plantas y
microorganismos son los factores clave que controlan la eficacia de
remediacin
tecnologa. El xito de la recuperacin de los metales pesados depende
de
la tasa de acumulacin y la transformacin; por lo tanto los enfoques de
Pgina 281
268 Asha A. Juwarkar y Santosh K. Yadav
aumentar el potencial stos han atrado la atencin de la comunidad
cientfica.
plantas hiperacumuladoras tienen una capacidad para extraer metales
pesados de los suelos
y medios acuosos. Roots exudados juegan un papel importante en la
bioacumulacin
y biotranformation / destoxificacin de metales pesados en la planta, as
como en
microorganismos. Los microorganismos pueden mantenerse a s mismos
en forma metlica txico
medio ambiente y sustancialmente acumular y transformar los metales
txicos a la no
metales txicos a travs de diferentes maneras, como
biotransformacin, biosorcin y
bioacumulacin. Las plantas y los microorganismos producen quelantes
de metales llamados
fitoquelatinas, metalotionenas, cidos orgnicos y aminocidos en
respuesta
a la toxicidad del metal. Estos quelantes son capaces de convertir las
formas txicas altas para
formas menos o no txicos de los metales. Algunos microorganismos
producen orgnica
ligandos tales como siderforo y biotensioactivo, que mejoran la
solubilidad
y la acumulacin de los metales. Identificacin de mutantes, que est
implicado
en la tolerancia y la hiperacumulacin de metal en las plantas, se
requiere para desarrollar
hiperacumuladoras transgnicos ideales. En el presente captulo se ha
centrado
sobre los recientes acontecimientos relacionados con la mejora de las
capacidades de la
tecnologas de biorremediacin de metales pesados a travs de la
biotransformacin y
potencial de bioacumulacin y diferentes mecanismos implicados en la
desintoxicacin
proceso de metales txicos.
9.2 Los enfoques modernos para mejorar la remediacin
Potencial
9.2.1 Metales posible acumulacin de las especies de plantas
Las plantas pueden acumular metales que son esenciales para el
crecimiento y el desarrollo
(Tales como Cu, Mn, Fe, Zn, Mo y, posiblemente, Ni) y tambin algunos
que no tienen
funcin biolgica conocida (Cd, Cr, Pb, Co, Ag, Se y Hg) (Baker y Brooks,
1989; Raskin, 1996). En este contexto, las plantas han sido descritos
como solar-driven
estaciones de bombeo (Cunningham et al., 1995) que en realidad puede
eliminar estas
contaminantes del medio ambiente. Aunque algunos hiperacumuladoras
parecen ser capaces de acumular concentraciones elevadas de varios
pesada
metales simultneamente, todava queda considerable especificidad de
metal
hiperacumulacin. La tolerancia a los metales pesados en las plantas
puede ser definida como la
capacidad de sobrevivir en un suelo que es txico para otras plantas y
se manifiesta por una
interaccin entre un genotipo y su entorno (Juwarkar et al., 2008;
McNair et al., 2000). hiperacumulacin es un fenmeno definido como
captacin y secuestro de excepcional concentracin de metales pesados
en el
partes areas de una planta en condiciones de campo. La definicin se
basa
en estudios comparativos, lo que indica que en la mayora de las plantas
de suelos mineros
acumular bajas concentraciones de iones metlicos en sus brotes,
mientras que unas pocas especies,
endmica de sitios metalferos, se acumulan claramente altas
cantidades (Jambhulkar
y Juwarkar, 2009). Para una planta a ser identificado como un
hiperacumulador, la
especies pueden acumular 0,1% de masa seca [% (dm)] de elementos
tales como Ni,
pgina 282
Bioacumulacin y la biotransformacin de metales pesados 269
Co o Pb; 1% (dm) de Zn y Mn y 0,01% (DM) de Cd. Tales plantas son
resistente a ciertos iones metlicos que sugieren su uso potencial para
la limpieza de
suelo contaminado (Chaney et al., 1997). El uso de hiperacumuladoras
abierto unos
nueva rama de la tecnologa de biorremediacin denominado como
fitorremediacin-an
enfoque respetuoso del medio ambiente y cientfica para eliminar,
extracto o inactivan los iones metlicos
en el suelo usando plantas (Cunningham et al, 1995;. Raskin, 1996;
Chaney, 1997;
Lasat, 2002).
Cerca de 450 plantas hyperacumulator tambin conocidos como
metalofitas tienen
han descrito que pertenece a una amplia gama de taxones, que van
desde hierbas anuales
a perenne, distribuidos geogrficamente en todos los continentes, tanto
en la zona templada
y ambientes tropicales. centros notables de distribucin son de Ni:
Nueva
Caledonia, Cuba, el sureste de Asia, Brasil, el sur de Europa y Asia
Menor; Zn y Pb:
El noroeste de Europa; y Co y Cu: centro-sur de frica. Algunas familias y
gneros son
particularmente bien representado por ejemplo, para Ni: Brassicaceae
(Alyssum y Thlaspi),
Euphorbiaceae (Phyllanthus), leucocroton Asteraceae (Senecio,
Pentacalia);
Zn: Brassicaceae (Thlaspi); Cu y Co: Lamiaceae, Scrophulariaceae (Baker
y Brooks, 1989; Chaney et al., 1997; Clemens, 2001; Broadhurst et al.,
2004; Grato et al., 2005; Prasad, 2005). Curiosamente 75% de la
identificado
hiperacumuladoras acumulan Ni y se denominan como plantas
nickelophilous
(Baker y Brooks, 1989; Prasad, 2005). De la amplia gama de familias de
plantas vasculares las especies de plantas hiperacumuladoras naturales
estn bien representados
por los miembros de Brassicaceae (Reeves y Baker, 2000;. Grato et al,
2005).
hiperacumuladoras naturales pueden crecer en su hbitat natural por s
sola, tienen lento
crecimiento, bajo la biomasa y muy a menudo son selectivos para un
metal individuo
(Clemens et al., 2002).
9.2.2 Papel de las races de las plantas y la interaccin con
exudados
Los microbios en metal Acumulacin
existen metales en varias formas qumicas (o especies). Estas formas a
menudo existen en
un equilibrio complejo rige por muchos factores del suelo y propiedades.
Para cualquier
dado metal pesado, slo una fraccin es biodisponible y por tanto,
potencialmente es la
nica fraccin que puede ser tomada por las plantas (Tabla 9.1). Ms del
metal
se podra convertir a la fraccin biodisponible para su absorcin gradual
y la eliminacin por
la planta, pero el grado en que esto ocurre y la cintica de tales
procesos
no se conoce y son invariablemente suelo especfico. races de las
plantas exudan cidos orgnicos,
por ejemplo mlico y ctrico, y / o fosfatasas cidas bajo deficiencia de P.
Esta excrecin mejorada localizada de cidos orgnicos aumenta la
eficacia
de exudados para la movilizacin de nutrientes tales como P, Zn, Fe y
Mn. los
densidad de poblacin y la composicin de los microorganismos del
suelo en la rizosfera
Tambin se sabe que afectan la movilidad de metal y la disponibilidad de
la planta, a travs de
mejorada exudacin de la raz y la concentracin de cidos orgnicos,
quelantes, y
fosfatasas cidas liberados como metabolitos microbianos.
pgina 283
270 Asha A. Juwarkar y Santosh K. Yadav
interacciones rizosfera se basan en intercambios complejos que
evolucionan
alrededor de las races de las plantas. interacciones basadas en root
entre las plantas y los organismos en el
rizosfera son altamente influenciada por factores edficos; Sin embargo,
el bajo tierra
interacciones biolgicas que son impulsados por exudados de las races
son ms complejos que
los que se producen por encima de la superficie del suelo. La raz
contiene cidos orgnicos que
se unen a metales a partir de formas altamente insolubles en el suelo y
cidos como el cido ctrico
cido y mlico pueden actuar como ligandos esenciales para los
metales. El papel de ctrico
cido en la regulacin de Al desintoxicacin (III) y Ni (II) en las plantas ha
sido claramente
demostrado (Yang et al., 2003). Los exudados de las races son agentes
muy importantes
que forman complejos con metales traza y afectan a su comportamiento
redox. Raz
exudados que contienen cido orgnico pueden formar complejos con
compuestos de metales,
hacindolos disponibles para la planta. Los estudios sobre el papel de los
cidos orgnicos en
Toxicidad Cr en Lycopersicon esculentum demostr que en presencia de
orgnico
cidos como el cido carboxlico y los aminocidos, la absorcin de Cr en
las races se mejora
(Srivastava et al., 1999). cidos orgnicos como cido ctrico, cido
asprtico y oxlico
cido puede convertir inorgnico Cr a ligado orgnicamente Cr, por lo
que es soluble para
perodo de tiempo ms largo y por lo tanto disponible para las plantas.
Ya sea que los cidos orgnicos pueden
jugar un papel significativo en la desintoxicacin Cr todava no se conoce
completamente.
En lo que a la produccin de biomasa de la planta grande en el suelo
contaminado con metal
se refiere, en las ltimas dcadas, una gran variedad de grupo
heterogneo
de bacterias comnmente se conoce como rizobacterias promotoras del
crecimiento vegetal
(PGPR) han sido reportados para mejorar el crecimiento de plantas en
los sitios contaminados a las
garantizar una mayor fitorremediacin (Juwarkar et al, 2008;.. Kumar et
al, 2008).
Estos incluyen especies de Pseudomonas, Azospirillum, Azotobacter,
Klebsiella,
Enterobacter, Alcaligenes, Arthrobacter, Burkholderia, Bacillus y
Serratia .
Se pueden encontrar en la rizosfera, en superficies de la raz y en
asociacin con
races, que pueden mejorar el grado o la calidad del crecimiento de las
plantas directamente y / o
indirectamente.
En la rizosfera, los procesos mediados por las races de la planta segrega
exudados y enzimas. Adems de los compuestos que sintetizan raz y
acumular, una notable diversidad de metabolitos moleculares micro y
macro
Tambin se secreta en la rizosfera como exudados de las races.
exudados de las races juegan un
papel activo y relativamente bien documentado en la regulacin de
simbitica y
interacciones de proteccin con microbios. Sin embargo, el papel de las
secreciones radiculares en
la regulacin de otras interacciones rizosfricas es menos clara. A travs
de la exudacin
de una amplia variedad de compuestos, se sugiere que las races
pueden regular la
comunidad microbiana del suelo en sus inmediaciones, soportar la
herbivora,
fomentar la simbiosis beneficiosas cambian las propiedades qumicas y
fsicas de
el suelo, e inhiben el crecimiento de las especies de plantas de la
competencia. Varios mecnico
funciones han sido atribuidas a raz exudacin incluyendo el
mantenimiento de
el contacto de la raz-suelo, la lubricacin de la punta de la raz, la
proteccin de las races de la desecacin,
estabilizacin de suelos microagregados y de adsorcin y
almacenamiento selectivo
de iones.
Pgina 284
Bioacumulacin y la biotransformacin de metales pesados 271
Tabla 9.1: Biodisponibilidad de metales para absorcin por la planta
Categora
Rieles
fcilmente biodisponible
Cd, Ni, Zn, As, Se, Cu
moderadamente biodisponible
Co, Mn, Fe
apenas biodisponible
Pb, Cr, U
Fuente: . Alkorta et al, 2004
9.3 enfoques moleculares para la desintoxicacin de Toxic
Los metales en plantas
metales pesados como el Cr, Cd, Zn, Fe, Al, Pb y As son altamente
reactivos y txicos
a las clulas vivas. Algunos metales pesados, tales como Cu, Zn y Fe,
son esenciales para
el crecimiento normal de la planta y el desarrollo, ya que forman parte
de muchas enzimas y
protenas. Elevado contenido de ambos metales esenciales y no
esenciales en el suelo
conducir a sntomas de toxicidad y la inhibicin del crecimiento en las
plantas que podran resultar
de la unin de metal para SH-grupo de protenas que resultan en la
inhibicin de la
sus actividades o alteracin de la estructura, el desplazamiento de un
elemento esencial
resultando en efectos de deficiencia. En una serie de estudios genticos
a fondo, el
tolerancia a metales adaptativa ha demostrado ser gobernado por un
pequeo nmero de
principales genes y tal vez la contribucin de algunos genes
modificadores menores (McNair et
al., 2000). Tal vez sea esta tolerancia de metal adaptativo que se
prepara una especie de planta
para hiperacumulacin. Un anlisis gentico de la tolerancia de cobre
con Cu-tolerante
y lneas susceptibles de Mimulus guttatus mostraron que un gen
modificador que es
activa slo en presencia del gen de tolerancia es responsable de la
diferencia
en Cu-tolerancia en esta especie. estudios similares con Zn-
hiperacumulador
Halleri Arabidopsis y el no-acumulador de Arabidopsis Petrea sugiri que
Zn-tolerancia tambin es controlado por un solo gen principal (McNair et
al., 2000).
Los quelantes contribuyen a la desintoxicacin de metales por la
precarga de metal citoslico
concentraciones, mientras que chaperones entregan especficamente
iones metlicos a orgnulos
y el metal que requieren protenas. En las plantas de las principales
clases de quelantes de metales
incluir fitoquelatinas, metalotionenas, cidos orgnicos y aminocidos.
Fitoquelatinas (PC) son pequeos pptidos de unin a metal que se
encuentran en plantas y son
bien documentado en la literatura (Chen et al., 1997). formacin PC
utiliza glutatin,
homoglutatin, hidroximetil-glutatin o -glutamylcysteine. Es
catalizada por phytochelatin sintasa (PCS), una enzima constitutiva que
requiere
activacin post-traslacional por metales y / o metaloides pesados, en
particular
Cd, Ag, Pb, Cu, Hg, Zn, Sn, As y Au tanto in vivo como in vitro (Chen et
al.,
1997).
En experimentos in vitro han demostrado que una serie de planta
sensible de metal
enzimas pueden tolerar una concentracin de 10 a 1000 veces de Cd en
forma de una
complejo PC que el ion radical libre (Kneer y Zenk, 1992). reactivar la PC
de metal envenenado enzimas de plantas, tales como la nitrato
reductasa hasta 1.000 veces mejor
de quelantes tales como glutatin (GSH) o citrato, mostrando de nuevo
los diferentes
pgina 285
272 Asha A. Juwarkar y Santosh K. Yadav
secuestrantes potencial de estos pptidos. Howden et al. (1995)
lograron
aislar una cad 1-mutante de Arabidopsis thaliana sensible a los iones Cd
y
deficiente en su capacidad para formar complejos de Cd-PC. Arabidpsis
tiene solamente una sola
ruta para la sntesis PC. El hallazgo de la mutante Cd-sensibles
(alteraciones de la PC
sntesis) confirm el papel de la PC en Cd desintoxicacin. Los autores
llegaron a la conclusin
que cad1 gen es el gen estructural probable para la sintasa de PC
(Howden et al.,
1995). Como tolerantes Holcus lanatus se muestra L para sintetizar altas
concentraciones
de PCs que las especies As-intolerantes (Hartley-Whitaker et al., 2002).
Aparte de desintoxicacin, PC tambin juegan un papel en la
homeostasis de la pesada
de metal en las plantas. Por un lado, que compleja los iones metlicos
para inactivar y
almacenarlos en la vacuola y por otro, que la transferencia del metal
esencial
a las apoenzimas recin sintetizadas que requieren Cu 2+ o Zn 2+ para
cataltica
actividad o a estructuras de cidos nucleicos tales como Zn-figers. Las
plantas han desarrollado
complejos mecanismos por los que controlan la absorcin y la
acumulacin de
metales pesados (Cobbett y Goldsbrough, 2002). Estos mecanismos
implican
quelacin y secuestrante de iones de metal por una clase particular de
metal de unin
ligandos fitoquelatinas denominados (PC) y metalotionenas (MTs)
(Cobbett
y Goldsbrough, 2002). Las metalotionenas (MTs) son ubicuos bajo
molecular
cistena de masas (Cys) de protenas Ricos que se unen iones metlicos
en grupos tiolato de metal
identificado en embriones maduros de las plantas de trigo como la
protena cys-etiquetados temprano. Ms
de 50 MT se reportan en diferentes plantas clasificadas en cuatro clases
de MT
protenas (Cobbett y Goldsbrough, 2002). MT tienen un posible papel en
Cr
desintoxicacin en plantas y se ha reportado para el sorgo que las
protenas MT-like
se expresan bajo estrs Cr (Shanker et al., 2004). MT son los productos
de
la traduccin del ARNm y se caracteriza como de bajo peso molecular
rica en cistena
de metal-protena de unin. El papel de los PCs en la regulacin de la
toxicidad de metales ha sido
reportado en las plantas. Se sugiri que la produccin de ROS y H
2
O
2
como
resultado de la exposicin de metal podra haber desencadenado
seales para inducir MT mRNA
la transcripcin (Shanker et al., 2004). Por lo tanto, MTS puede tener un
papel muy importante
en la desintoxicacin de metales en plantas, posiblemente por iones
metlicos de unin y haciendo
ellos no txico.
9.4 El potencial de microorganismos a
Biorremediacin de metales
9.4.1 Utilizacin de microorganismos en biorremediacin
El destino de iones metlicos txicos en el medio ambiente del suelo
depende en gran medida de la
interacciones de estos metales con diversas superficies inorgnicas y
orgnicas.
Una superficie orgnica potencialmente importante que puede ser
explotada en el metal
remediacin es la poblacin microbiana del suelo. Las bacterias tienen
una superficie de alta
rea a volumen proporcin y por lo tanto poseen una alta capacidad de
sorcin de metales a partir de
solucin. Hasta la fecha, todas remediacin microbiana usos comerciales
de origen natural
organismos, en general, los identificados en sitios contaminados. Los
organismos que viven en
reas contaminadas desarrollan la capacidad de metabolizar los
contaminantes, incluso si
Pgina 286
Bioacumulacin y la biotransformacin de metales pesados 273
solamente en un pequeo grado, a travs de un proceso llamado
adaptacin. Los microbios evolucionan la
capacidad de hiperacumular metales y no metales, que les da un
selectiva
Advantage dentro de un ambiente contaminado, lo que les permite
sobrevivir y
evolucionar la resistencia adicional.
Los microorganismos pueden interactuar con los metales pesados a
travs de muchos mecanismos alguna
de los cuales puede ser utilizado como la base de las posibles
estrategias de biorremediacin. los
principales tipos de interaccin se resumen en la Figura 9.1. Los
microorganismos del suelo
han demostrado que poseen varios mecanismos capaces de alterar de
metal
biodisponibilidad para la absorcin. Por ejemplo, los microbios se han
documentado
para catalizar reacciones redox que conducen a cambios en la movilidad
de metal en el suelo y
propensin para la absorcin. Adems, las asociaciones de micorrizas
raz se han
demostrado que afectan a la velocidad de absorcin de metal en las
plantas.
Higo. 9.1: interacciones metal-microbios que afectan a la
biorremediacin (Tabak et al., 2005).
9.4.2 Mecanismos de resistencia a metales en microorganismos
Toxicidad de metales no esenciales se produce a travs del
desplazamiento de esencial
metales a partir de sus sitios de unin natural o a travs de
interacciones ligando (Nies,
1999; Bruins et al., 2000). Por ejemplo, Hg 2+ , Cd 2+ y Ag 2+ tienden a
unirse a
grupos SH, y por lo tanto inhiben la actividad de las enzimas sensibles
(Nies, 1999). En
Adems, en niveles altos, ambos metales esenciales y no esenciales
pueden daar clulas
membranas; alterar la especificidad de la enzima; perturbar las
funciones celulares; y daos
la estructura del ADN (Bruins et al., 2000). Sin embargo, para tener
cualquier efecto txico
la mayora de los iones metlicos tienen que entrar en la clula primero.
Para hacer frente a la situacin
pgina 287
274 Asha A. Juwarkar y Santosh K. Yadav
microorganismos han evolucionado dos tipos de sistemas de captacin
de iones metlicos.
Uno de ellos es rpido, no especfica, y conducido por el gradiente a
travs de la quimiosmtica
membrana citoplasmtica de bacterias (Nies, 1999); siendo una
captacin del otro
sistema que tiene una alta especificidad de sustrato. Sin embargo este
sistema es ms lento, a menudo
utiliza la hidrlisis de ATP como fuente de energa y slo se produce por
la clula en
tiempos de necesidad, el hambre o una situacin metablica especial.
tanto, las clulas de combate
los iones de metales pesados, ya sea intracelular o extracelularmente.
Hay muchos
mecanismos de resistencia a metales pesados en los microorganismos
que implican:
eflujo dependiente de energa de metal, la precipitacin de metales en
forma de sales insolubles,
alteracin en la permeabilidad de la membrana al metal, la
inmovilizacin de metal dentro
la pared celular, la produccin de agentes quelantes y transformacin
bioqumica
de iones metlicos. Los microbios resistentes a Cd, Zn, Co, Cr, Co, As y
Ni son aislados
de varios sitios contaminados y depsitos naturales y se encontr que la
genes de resistencia que codifica parecen estar predominantemente
plsmido ubicado y
Probablemente se extendi por transferencia horizontal (Bender et al.,
1990).
9.4.3 bioacumulacin y la biotransformacin de los metales en
microorganismos
Existen al menos tres tipos de procesos microbianos que pueden influir
en la toxicidad
y transporte de metales: biotransformacin, biosorcin y
bioacumulacin,
y la degradacin o sntesis de ligandos orgnicos, tales como siderforo
y
biotensioactivo que afectar a la solubilidad de los contaminantes (Nair
et al.,
2007; Juwarkar et al., 2007). Cada uno ofrece el potencial de
biorremediacin de
contaminantes en el medio ambiente. microorganismos metal reductor
puede reducir
una amplia variedad de metales polivalentes que plantean problemas
ambientales. los
metales pesados sujetas a reduccin enzimtica por microbios incluyen
pero no estn
limitado a cromo (Cr). reduccin enzimtica directa implica el uso de la
formas oxidadas de estos contaminantes como aceptores de electrones.
Las formas oxidadas
de metales son altamente solubles en medios acuosos y son
generalmente muy mvil en
agua subterrnea aerbico, mientras que las especies reducidas son
altamente insoluble y, a menudo
precipitar de la solucin (Nair et al., 2008).
El trmino 'bioacumulacin' se emplea para indicar la concomitancia de
mecanismos de adsorcin y el metabolismo-dependientes, en contraste
con 'biosorcin',
que no implica aporte metablico y puede efectuarse tambin por
biomasa no viable. La relevancia de estas interacciones de metal-
microorganismo en el
ciclos geoqumicas es ampliamente reconocida. La biomasa microbiana
se pueden unir pesada
metales ya sea activa o pasiva o por una combinacin de ambos
procesos
(Nair et al., 2008). Sin embargo, el fenmeno pasivo de biosorcin tiene
varias ventajas sobre el fenmeno activo de bioacumulacin. Un alcalde
desventaja de bioacumulacin es la recuperacin del metal acumulado
por
medios destructivos mientras que en la desorcin de biosorcin se lleva
a cabo por
mtodos fsicos simples sin daar la integridad estructural del
biosorbente.
Adems biosorcin tiene una ventaja sobre la bioacumulacin con un
fcil y
pgina 288
Bioacumulacin y la biotransformacin de metales pesados 275
adquisicin rentable de la biomasa, ya sea como un subproducto de a
gran
proceso de fermentacin a escala o la adquisicin a granel de cuerpos
de agua naturales.
Varias investigaciones han demostrado que las cantidades relativamente
grandes de metal
cationes son algas y bacterias bioacumulado (Strandberg et al., 1981).
Metal
unin por aisladas las paredes celulares bacterianas gram-positivas y
gram-negativas tiene
tambin ha sido evaluado por varios investigadores (Juwarkar, 1988;
Strandberg et
al., 1981). Adems de las interacciones de adsorcin microorganismos
son tambin
capaz de acumular iones metlicos (a pesar de su toxicidad) por el
metabolismo
mecanismos mediados tales como el transporte de metal y de
almacenamiento dentro de la
citoplasma; sistemas de desintoxicacin intracelulares, tales como la
protena de unin de metal
(metalotionenas) o la sntesis de polifosfato (Silver, 1996).
microorganismos
altamente eficaz en el secuestro de metales pesados incluyen bacterias,
hongos, algas,
y actinomicetos.
Las metalotionenas (MTs) son de bajo peso molecular (6-7 kDa), rico en
cistena
protenas que se encuentran en los animales, plantas superiores,
microorganismos eucariotas y algunos
procariotas. Se dividen en tres clases diferentes en funcin de su
contenido de cistena y la estructura. MT ha sido ampliamente
explotados debido a su papel
en la mejora de la tolerancia a los metales, la retencin de metal o de
acumulacin y la
alta capacidad de unin a metal. La nica MT procariota identificado
hasta el momento se encuentra
en unas pocas cepas de cianobacterias del gnero Synechococcus . De
metal vinculante
pptidos y MTs principalmente han sido explotados para aumentar la
tolerancia a metales
o acumulacin de E. coli clulas. Tales pptidos y protenas pueden
unin a metales
ser expresado en ms bacterias con el medio ambiente robustos, tales
como Pseudomonas
para su uso potencial en la biorremediacin (Valls et al., 2000).
Recientemente, Tripathi
Et al. (2007) informaron de las estrategias modernas para la
desintoxicacin de arsnico en
planta y el sistema microbiana (Figura 9.2).
Uno de los ms importantes mecanismos de detoxificacin de metal en
microbios
se biotransformacin en el que el metal se convierte en menos txicos o
fcilmente
formas de reembolso. transformaciones microbianas se han dividido en
dos
amplias categoras: conversiones redox de formas inorgnicas; y
conversiones
desde inorgnico a la forma orgnica y viceversa, tpicamente metilacin
y
desmetilacin. A travs de la oxidacin de ciertos metales como el
hierro, azufre,
manganeso y arsnico, los microbios pueden obtener energa (Santini et
al., 2000). En
Por otro lado, la reduccin de metales tales como arsnico, selenio,
cromo y
uranio se produce a travs dissimilatory reduccin donde los
microorganismos utilizan
metales como un aceptor terminal de electrones para la respiracin
anaerobia (Niggemyer
et al., 2001; Stolz y Oremland, 1999). Ciertos microorganismos pueden
poseer
mecanismos de reduccin que no se acoplan a la respiracin, sino que
se cree
para impartir resistencia a metales; ejemplos incluyen la reduccin
aerbica y anaerbica de
Cr (VI) a Cr (III); de reduccin de Se (VI) a selenio elemental (Lloyd et al.,
2001);
(. Chang et al, 2001) la reduccin de U (VI) a U (IV); y la reduccin de Hg
(II) a
(. Wagner-Dbler et al., 2000; Brim et al, 2000) Hg (0). tales
biotransformaciones
son componentes importantes de los ciclos biogeoqumicos de metales y
tambin pueden ser
explotados de biorremediacin de suelos contaminados por metal.
pgina 289
276 Asha A. Juwarkar y Santosh K. Yadav
Higo. 9.2: Comparacin de los mtodos para la desintoxicacin de
arsnico en planta (panel superior)
y bacterias (panel inferior) (Tripathi et al., 2007).
pgina 290
Bioacumulacin y la biotransformacin de metales pesados 277
9.5 Avance de la tecnologa de la remediacin
9.5.1 Desarrollo de plantas transgnicas para Phytoremediator
La acumulacin de metales
Aunque se conocen varios hiperacumuladoras naturales, las plantas
ideales para el verde
la tecnologa para limpiar el suelo debe poseer rasgos mltiples. Ellos
deben tener
races profundas, un rpido crecimiento, alta biomasa, pueden cosechar
fcilmente, y deben tolerar
y acumular una gran gama de metales pesados en sus partes areas.
El desarrollo de plantas de ingeniera (transgnicos) que albergan el
requiere
rasgos de biorremediacin es tal vez la nica alternativa. El exceso de
expresin y
introduccin de genes hiperacumuladoras en planta no hiperacumulador
podra ser una manera posible para mejorar la absorcin de metales y la
acumulacin, la tolerancia
y proceso de desintoxicacin (Clemens et al., 2002). La sobre-expresin
de una
gen que codifica un producto gnico que limita la velocidad sera de
esperar para llevar una ms rpida
tasa global de la va y para la fitorremediacin ms eficiente. Adems
esto, la represin de un gen endgeno, mediante la insercin de un gen
de inversa
orientacin (tecnologa antisentido), tambin puede dar lugar a la
absorcin de metales mejorada
por las plantas. Varios informes sobre la planta de bioingeniera
tolerantes a la presencia de
niveles txicos de metales como Se, Cd, As, Zn, Cr, Cu, Pb, etc. han
aparecido en
la literatura (Kawashima et al, 2004;.. Lee et al, 2003). En la mayora de
los estudios
la sobre expresin de los genes que codifican para las enzimas de S-
metabolismo,
glutatin, phytochelatin sintasa, ACC desaminasa, Hg 2+ reductasa,
arseniato
reductasa, aldolasa / aldehdo reductasa, las enzimas de la biosntesis de
histidina
y metalotionena (MT) los genes se han llevado a cabo. La ingeniera de
genes transportadores para manipular el transporte de los iones
metlicos dentro de la clula tiene
tambin ha explotado de manera eficaz y una combinacin de algunos
de estos genes en
rpido crecimiento de especies de plantas han dado lugar a unos
resultados prometedores (Lee et al.,
2003).
Un ejemplo bien conocido de hiperacumulador de metal transgnico es
Brassica
juncea , que sobre-expresa sulfurilasa ATP. Se muestra mayor captacin
de Se
y el aumento de la tolerancia Se comparacin con el tipo salvaje cuando
se cultivan en presencia
de selenato, ya sea en condiciones hidropnicas o en el suelo (van
Huysen et al.,
2004). Estas plantas transgnicas tambin pueden tolerar Cd, Zn, Cu, Hg
y As (III,
IV). Transgnico mostaza de la India que sobreexpresan sintasa
cystathione- (CGS)
bajo rodaje concentracin de Se tenido con tasa de volatilizacin Se
reforzada, as
como tolerancia Se que las plantas de tipo salvaje cultivadas ya sea
hidropnico o en
suelo (Van Huysen et al., 2004). En un intento de mejorar el potencial de
eliminacin de metales utilizando plantas, Brewer et al. (1999) crearon
hbridos somticos
entre caerulescens Thlaspi (Zn-hiperacumuladoras) y Brassica napus .
Se observ acumulacin de altos niveles de Zn en los hbridos, que de
otra
son txicos para B. napus . Arabidopsis plantas transformadas con un
coli E. gen ZnT
A que codifica para Pb 2+ , Cd 2+ y Zn 2+ transporte haban mejorado la
resistencia a Pb 2+
y Cd 2+ y la ZntA se encuentran en la membrana plasmtica (Lee et al.,
2003).
plantas de tomate transgnicas que expresan el gen bacteriano 1-
aminocyclopropane-
Pgina 291
278 Asha A. Juwarkar y Santosh K. Yadav
la acumulacin de metales de cido 1-carboxlico (ACC) desaminasa
mostraron una mayor y
los niveles de tolerancia para una gama de metales pesados (Cd, Cu, Ni,
Mg, Pb y Zn) de
las plantas no transformadas (Grichko et al., 2000). Las posibilidades
para la mejora de la
tolerancia a los metales y el potencial de fitorremediacin de las plantas
superiores a travs de la expresin
de TcHMA4 tienen un gran potencial en estudios de remediacin de
metal (Papoyan y
Kochian, 2004). envenenamiento por arsnico es un problema grave.
Dondon et al. (2005)
y Dhankher et al. (2002) examinaron los efectos de la co-expresin de
dos bacteriana
genes para la reductasa arseniato (arsC) y sintetasa -glutamylcysteine (-
ECS)
en Arabidopsis plantas. Aparte de las plantas de los potenciales
phytoremediators modelo
para Como ahora incluir diversos genotipos de rboles transgnicos.
En los ltimos aos, el conocimiento molecular de la entrada de ambos
esenciales y
iones metlicos no esenciales en clulas vegetales ha sido avanzado
mucho. varios planta
transportadores de metal son conocidos y ms an no se han
identificado. los transportadores
identificado hasta el momento incluir ZIP1-4, ZNT1, IRT1, COPT1,
AtVramp1 / 3/4 y
LCT1 en la interfaz plasma membrana citosol; ZAT, tipo ABC, AtMRP,
HMT1 y Cax2 visto en las vacuolas; y RAN1 ve en cuerpos de Golgi (Tabla
9.2). Las manipulaciones de estos transportadores para lograr la
eliminacin de iones metlicos a partir de
la clula tiene un gran potencial.
la captacin de Fe y Zn est mediada por un grupo de transportadores
perteneciente a la
Familia postal es decir ZRT y IRT protenas relacionadas. IRT1 est
aislado de Arabiopsis
y su transcripcin se induce en Arabidopsis races por inanicin de
hierro, que
hace que este transportador un probable candidato para mediar en la
captacin de Fe (II) a partir del suelo.
IRT1 muestra una amplia gama de sustrato y tambin transporte Mn 2+ ,
Zn 2+ y posible
Cd 2+ (Korshunova et al., 1999). ZIP transportadores 1-3 confieren Zn 2+
actividad de absorcin
(Guerinot y Eide, 1999). Caracterizacin de nuevo metal transportadores
Medicago
truncatula con altas similitudes con la familia postal (MtZIP) revel su
funciona como transportadores de metal (Lpez-Milln et al., 2004).
El Zn ZTP1 gen transportador es muy similar a la Arabidopsis gen ZAT.
Probablemente es un alelo de la ZNT1 clonado recientemente y su
estrecha homlogo
ZnT2 gen de caerulescens Thlaspi (Pence et al., 2000). Los tres zinc
Tabla 9.2: transportadores de iones de metal en las plantas (Clemens,
2001)
Localizacin
transportador
Los iones metlicos
citosol
vacuola
Golgi
ZIP1-4
ZNT1
IRT1
COPT1
AtVramp1 / 3/4
LCT1
ZAT1
en MRP
HMT1
Cax2
RAN1
Zn 2+ , Cd 2+
Zn 2+ , Cd 2+
Fe 2+ , Mn 2+ , Zn 2+ , Cd 2+
Cu
Fe 2+ , Cd 2+
Cd 2+ , Ca 2+
Zn 2+
Cd-PC
Cd-PC
Cd 2+
complejo Cu
Pgina 292
Bioacumulacin y la biotransformacin de metales pesados 279
transportador de genes muestran una mayor expresin en T.
caerulescens compararon con
la no hiperacumulador congnere T. arvense , lo que sugiere un papel
importante en
hiperacumulacin de metal pesado. El macrfago resistencia natural
asociado
protenas (Nramp) de la familia de los transportadores se ha
caracterizado recientemente de
arroz y Arabidopsis .
Los rboles son ideales en la remediacin de metales pesados, ya que
pueden soportar
y acumular una mayor concentracin de contaminantes debido a su
gran biomasa
y tamao, puede alcanzar un rea enorme y grandes profundidades por
su extensa y enraizamiento
puede estabilizar un rea. Los investigadores estn ahora tratando de
extender esta tecnologa a
rboles de lamo, que son potenciales remediadores eficaces (Dondon
et al.,
2005).
9.5.2 Los microorganismos modificados genticamente para
Metal
Acumulacin
Puede haber otros usos exclusivos a los OMG en la remediacin de sitios
que sufren
de una combinacin de metal y / o la contaminacin orgnica y de
radionclidos.
Los investigadores estn buscando para identificar los genes que
permiten a los microbios ocupan
metales pesados o contaminantes orgnicos, el uso de estos para
transformar el radioactivity-
especies tolerantes D. radiodurans . Cepa resistente a la radiacin que
podra tratar
la contaminacin por mercurio ha sido diseado (Brim, 2000). Un grupo
en Espaa
ha diseado una bacteria eutropha Ralstonia para contener un gen para
el ratn
metalotionena, una pequea protena que se une metales pesados
(Valls et al., 2000).
Dicha protena se expresa en la membrana externa de las bacterias, lo
que le permite
inmovilizar los metales pesados. La ingeniera de metal de los pptidos
sobre la unin
superficie de las bacterias gram-negativas ambientalmente aceptables
tales como Ralstonia
eutropha y Pseudomonas putida , que ya se emplea en existente
sistemas para la biorremediacin de metales pesados (Diels et al, 1993;.
Macaskie y
Dean, 1990), representa una posible aplicacin de bioacumulacin
mejorada.
Los experimentos de laboratorio mostraron que la ingeniera gentica R.
eutropha podra,
de hecho, hiperacumular cadmio.
Sin embargo, el potencial comercial de los OMG en la remediacin
parece
limitado. Por lo tanto, no hay necesidad de disear microorganismos
para este propsito,
ya que los microbios presentes en la naturaleza son lo suficientemente
eficaces. Adems, el coste
de producir transgnicos es alta, y con la excepcin de la investigacin
acadmica, una
Se necesita permiso de la EPA para el uso en el campo. Por otra parte, el
interruptor en pblico
percepcin, ahora ms escpticos sobre la seguridad de los OMG y
opuesto a su
liberacin en el medio ambiente se ha confundido esfuerzos en esta
rea.
9.6 Perspectivas para el futuro
Los cientficos han sido capaces de ampliar el papel de las plantas en el
entorno
para la destoxificacin de metales utilizando modificaciones genticas.
Con el fin de restaurar
equilibrio ambiental de la tcnica de biorremediacin, evidentemente, s
indica
varios beneficios y es uno de los mtodos ms preferidos para hacer
frente a este
pgina 293
280 Asha A. Juwarkar y Santosh K. Yadav
problema. Sin embargo, la eficacia del mtodo reside en el hecho de que
para poner en prctica
un mtodo de biorremediacin especfica, una estrategia cientfica y
bien formulado
deben adoptarse teniendo en cuenta el tipo de iones metlicos,
geogrfica
ubicacin, la biomasa de la planta hiperacumulador, etc. Estudios
detallados en el campo
de la biorremediacin han mejorado los mtodos y la prctica; sin
embargo, adems
se requieren mejoras para reducir las limitaciones de los protocolos
existentes de modo
que se pueden utilizar con la salida menos negativo. Los diversos
estudios de metal-
homeostasis de iones en humano, levadura y plantas sugieren que
existe un complejo
regulado a la red para el transporte de iones metlicos, quelacin y
secuestro. Promover
identificacin de mutantes para el anlisis bioqumico, molecular y
fisiolgico
y molculas importantes implicados en la tolerancia y metal
hiperacumulacin
en las plantas que se requiere para desarrollar ideales hiper-
acumuladores transgnicas. Aislamiento
de metal-sensores que detectan el estado de metal de la clula y para
dilucidar la
medidas regulatorias posteriores en trminos de regulacin y baja
regulacin de
genes de respuesta a metal, la va de transduccin de seales y la
sensible
factores de transcripcin tambin seran de gran utilidad para el
desarrollo eficaz
phytoremediators.
Sin embargo, para la biorremediacin eficaz, la aplicacin de activo y
creciente
clulas podran ser una mejor opcin debido a su capacidad de auto-
reposicin,
captacin metablica continua de metales despus de la adsorcin fsica
y la
potencial de optimizacin a travs del desarrollo de especies resistentes
y celular
modificacin de la superficie. Adems, en lugar de depender de una sola
especie para metal
remocin, un consorcio de mltiples especies ofrece ms ventajas. tales
especies mltiples
consorcios puede soportar mejor las condiciones ambientales extremas.
Los ricos
contenido exopolmero de las biopelculas tambin puede ser beneficioso
tanto para el atrapamiento
slidos dispersos y biosorcin de metales disueltos. Adems,
proporcionan
microambiente (como pH alcalino, altas concentraciones de CO
2
), Cual podra
ser muy beneficioso para la precipitacin de metal.
plantas hiperacumuladoras metal son relativamente raros, que se
producen a menudo en
zonas alejadas geogrficamente y amenazadas por la devastacin de la
minera
ocupaciones. Por tanto, existe una necesidad urgente de recoger estos
materiales, llevarlos
en el cultivo y establecer un centro de germoplasma para la produccin
a gran escala
de especies hiperacumuladoras para futuras investigaciones, desarrollo
y trabajo de prueba.
La limpieza del medio ambiente contaminado de metal podra ser
factible con
un enfoque combinatorio, es decir, integrar y utilizar diferentes
biorremediacin
mtodos simultneamente y orientar la tecnologa tanto cualitativa as
como estadsticamente. bilogos vegetales, microbilogos, ingenieros
agrnomos y
tendr que integrar sus esfuerzos para la biorremediacin de un sitio
especfico
contaminado con metales pesados especficos.
9.7 Conclusin
En vista de la reciente informacin anterior, se puede concluir que las
plantas
acumulacin y el potencial de transformacin bacteriana de los metales
son la clave para
Pgina 294
Bioacumulacin y la biotransformacin de metales pesados 281
fitorremediacin y la tecnologa de biorremediacin. enfoques
moleculares pueden
ser utilizado para mejorar su aplicabilidad con mayor eficacia. Por lo
tanto, la bioacumulacin y
mecanismos de biotransformacin necesitan ms atencin para su
posterior estudio. Promover
la raz de la raz, la raz-suelo y races-microbios interacciones son la
frontera importante
reas que pueden mejorar las capacidades de tratamiento de fito y
biorremediacin
procesos.
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Recuperacin y remediacin de los residuos slidos mediante Proceso
Bio-qumica 285
10
Recuperacin y remediacin de
Residuos slidos a travs
Proceso de Bio-qumico
DS Ramteke
10.1 Introduccin
La cantidad de residuos peligrosos generados por las industrias de
fabricacin aument
enormemente debido a la industrializacin en todo el mundo. Se genera
este tipo de residuos
en todas las etapas del proceso de produccin, uso y eliminacin de
productos manufacturados
productos. Por lo tanto, la introduccin de muchos nuevos productos
para el hogar y
oficina-ordenadores, medicamentos, textiles, pinturas y tintes, plsticos,
tambin introdujeron
residuos peligrosos, incluidos los productos qumicos txicos, en el
medio ambiente. Estos, tambin,
deben ser manejados con extremo cuidado para evitar humana del
medio ambiente o adversa
impactos sobre la salud.
La India es el segundo pas ms poblado, que tiene aproximadamente el
16% de la
la poblacin mundial y el 25% de la superficie terrestre. La rpida
industrializacin durante la ltima
dcadas ha conducido al agotamiento de los recursos naturales valiosos
y contamina
continuamente. Adems generacin de grandes cantidades de residuos
peligrosos tiene
an ms agravado y crea problemas ambientales en todo el mundo.
la gestin de residuos slidos industriales constituye hoy una de las
principales del medio ambiente,
problema econmico y social en todo el mundo, principalmente debido a
que el volumen de residuos es
creciendo ms rpido que la poblacin mundial. Adems, como ms
estricta ambiental
requisitos se imponen continuamente con respecto a las aguas
subterrneas y superficiales,
el tratamiento de lixiviados de vertedero se convierte en una
preocupacin ambiental importante.
Gestin de residuos peligrosos es un concepto nuevo para la mayora de
los pases asiticos
incluyendo la India. La falta de recursos tcnicos y financieros y la
reglamentacin
control para la gestin de desechos peligrosos en el pasado haba
llevado a la
la eliminacin de desechos peligrosos no cientfica en todo el mundo.
MH Fulekar (ed.),
DOI 10.1007 / 978-90-481-3678-0_10, 2010 de Capital Publishing
Company
La tecnologa de biorremediacin: Avances recientes ,
2 58
Pgina 299
286 DS Ramteke
El mtodo de relleno sanitario para la disposicin final de residuos
slidos
contina siendo ampliamente aceptado y utilizado debido a sus ventajas
econmicas.
Los estudios comparativos de los diversos medios posibles de la
eliminacin de residuos slidos
(Vertederos, incineracin, compostaje etc.) han demostrado que el ms
barato, en
plazo de los costes de explotacin y de capital, es el depsito en
vertederos.
La formacin de lixiviados se produce cuando se disuelven los
componentes solubles
(Lixiviado) de un material slido mediante percolacin de agua. Los
lixiviados pueden contener
grandes cantidades de materia orgnica (biodegradable, pero tambin
refractarios a
biodegradacin), donde de tipo hmico constituyentes consisten en un
grupo importante,
as como amonaco-nitrgeno, metales pesados, clorado orgnico e
inorgnico
sales. Las caractersticas de los lixiviados de vertedero dependen del
tipo de industrial
perder objeto de dumping, el grado de estabilizacin de residuos slidos,
la hidrologa sitio,
contenido de humedad, las variaciones estacionales del tiempo, y la
edad del vertedero y la etapa
de la descomposicin en el vertedero.
Si no se trata adecuadamente, los lixiviados que se filtra desde un
vertedero puede entrar
el agua subterrnea subyacente, lo que plantea riesgos potencialmente
graves para la
entorno y para la salud pblica. Por lo tanto, es necesario tratar
residuos slidos industriales peligrosos.
El suelo es considerado como uno de los recursos naturales ms
importantes de
seres humanos. Sin embargo, los contaminantes orgnicos e inorgnicos
se producen con frecuencia
dentro del ambiente del suelo. metales pesados, hidrocarburos
aromticos policclicos
(HAP) y los pesticidas son los contaminantes ambientales ms comunes.
contaminacin por metales pesados ha recibido una atencin creciente
en los ltimos aos, principalmente
debido a la conciencia pblica sobre los problemas ambientales que los
metales pesados son
txico a niveles ms altos en ambos ecosistema entorno natural y hecha
por el hombre.
Los metales pesados son ubicuos en la naturaleza y por lo tanto los
metales como plomo, mercurio,
de cromo y el cadmio son bien conocidos por ser txicos. La
contaminacin son
aumentado significativamente debido a la minera, fundicin, productos
qumicos de fabricacin, combustible
produccin, fertilizantes, pesticidas y aplicacin de aguas residuales y
residuos municipales
Generacion. Muchos metales y metaloides juegan en las funciones de los
organismos vivos
como microelementos (por ejemplo, Fe, Mn, Mg, Ni, Zn, Cu etc.) que
sirven como componentes de
enzimas, protenas estructurales y pigmentos y el mantenimiento del
equilibrio inico y
potencial osmtico de la clula. Se ha demostrado repetidamente que
los metales pesados
afectar negativamente las funciones biolgicas en el suelo, incluyendo el
tamao de la actividad y
diversidad de la comunidad microbiana del suelo, y la actividad de
enzima implicada
en transformaciones de C, N, P y S.
Debido a la, persistente, bioacumulativos txico, y el efecto sinrgico de
algunos metales en la biota, el ciclismo y el destino en el medio
ambiente son de gran
preocupacin. La amenaza de contaminacin por metales para la salud
pblica y el medio ambiente tiene
alent el inters en el sistema que puede eliminar la contaminacin por
metales desarrollo
del suelo y el agua, o al menos neutralizar sus efectos nocivos. ms
contaminada
ambientes contienen mezclas de contaminantes, los componentes ms
problemticos
generalmente resultando ser metales.
pgina 300
Recuperacin y remediacin de los residuos slidos mediante Proceso
Bio-qumica 287
Millones de toneladas de pesticidas son aplicados anualmente que se
utiliza en la moderna
la agricultura para aumentar la produccin mediante el control de los
efectos nocivos causados
por los organismos diana incluyendo insectos, hongos, bacterias, virus,
as como
hierbas cultivadas en medio de los cultivos econmicos. Sin embargo,
menos del 5% de
estos productos se estima que alcanzar los organismos objetivo. Uno de
los ms
problemas importantes con el uso de pesticidas es su posible
persistencia en
el ambiente del suelo y por lo tanto, su posible incorporacin en la
comida
cadena afecta ecosistema y todos los seres humanos.
hidrocarburos aromticos policclicos (HAP) son un grupo de comn
contaminantes ambientales. HAP se originan a partir de fuentes
antropognicas
como la incineracin de residuos, la gasificacin del carbn, los
derrames accidentales de petrleo, as
como procesos naturales, tales como combustibles fsiles y combustin
de la madera. policclicos
hidrocarburos aromticos policclicos (HAP) son subproductos de la
combustin incompleta
o pirlisis de materiales orgnicos. Ellos son considerados como
contaminantes prioritarios
en el medio ambiente y son motivo de gran preocupacin debido a su
terquedad y
fuertes propiedades mutagnicas / cancergenos. La caracterstica
hidrfoba y
persistencia de los HAP como resultado su acumulacin y el
enriquecimiento de los suelos. HAP
estn muy extendidas y se producen a altas concentraciones de cientos
de mg / kg en los suelos.
La contaminacin de los HAP en el suelo es un problema ambiental en
todo el mundo. Asi que
el presente estudio se centra nuestra atencin hacia la solucin
ecolgica de stos
graves problemas ambientales a travs de la fitorremediacin.
Reclamacin de un vertedero de residuos peligrosos es una necesidad
de la
poca actual, debido a la limitacin de los terrenos necesarios para su
eliminacin, para mantener
la vista esttico travs de la plantacin, para establecer el ecosistema
prstino
y restringir la carga contaminante de entrar en la superficie y las aguas
subterrneas.
Modificacin del suelo con carbn activado (impregnacin) que tiene su
gran superficie
rea, grupos funcionales, porosidad y capacidad de adsorber la mayor
parte de los metales pesados,
compuestos orgnicos tales como compuestos de alto peso molecular
(PAHs y pesticidas) sern
una de las soluciones para reducir los contaminantes orgnicos e
inorgnicos de la
matriz de suelo contaminado. Adems, la carga de carbono a travs de
carbn activado
y el suelo puede ayudar a degradar los materiales adsorbidos,
rejuvenecer la condicin del suelo
y convertirlo en suelo productivo debido a las actividades microbianas
en el suelo in situ
condicin a travs de un acondicionamiento adecuado del suelo
enmendado.
La fitorremediacin es considerado como un innovador, econmico y
solucin compatible con el medio ambiente para la remediacin de sitios
contaminados.
Se utiliza para el tratamiento de muchas clases de contaminantes
incluyendo el petrleo
hidrocarburos, metales pesados y pesticidas.
La modificacin del suelo en el sitio de disposicin de residuos peligrosos
con activa
de carbono para la adsorcin de compuestos orgnicos e inorgnicos de
la matriz del suelo y
conversin en suelo productivo a travs de las actividades microbianas
in situ adems
exploracin de potenciales fitoextractores de especies de plantas de
acumuladores hiper
que crecen en sitios contaminados orgnicos e inorgnicos es la
tendencia reciente
que se adopte para la fitorremediacin. La fitorremediacin se utiliza un
trmino general
para describir varios mecanismos por los que las plantas vivas alteran la
qumica
Pgina 301
288 DS Ramteke
composicin de la matriz del suelo en el que estn creciendo. En
esencia, es la
uso de plantas verdes para la detencin y la limpieza de suelos
contaminados a travs naturales
y el fenmeno de cambio. Las ventajas de esta tcnica son evidentes en
que el costo de la fitorremediacin es mucho menor que los
tradicionales in situ y ex
procedimientos in situ. La fitorremediacin es considerado un innovador,
econmico,
y la solucin compatible con el medio ambiente para la remediacin de
sitios contaminados.
Se utiliza para el tratamiento de muchas clases de contaminantes
incluyendo el petrleo
hidrocarburos, metales pesados y pesticidas.
10.2 Tipos de Residuos Slidos
Los residuos slidos se pueden clasificar en diferentes tipos dependiendo
de su fuente:
(A) Los residuos domsticos generalmente se clasifica como residuos
municipales, (b) Industrial
residuo como residuo peligroso, y (c) los residuos Biomedical o residuos
hospitalarios como
residuos infecciosos.
10.2.1 Residuos Slidos Urbanos
residuos slidos urbanos se compone de los residuos domsticos, de
construccin y demolicin
desechos, residuos de saneamiento, y los residuos de las calles. se
genera esta basura
principalmente de complejos residenciales y comerciales. Con el
aumento de la urbanizacin
y el cambio en los hbitos de vida y de los alimentos, la cantidad de
residuos slidos urbanos
ha aumentado rpidamente y cambiando su composicin. En 1947
ciudades y
ciudades de la India generaron un estimado de seis millones de
toneladas de residuos slidos, en
1997 fue aproximadamente 48 millones de toneladas. Ms del 25% del
slido municipal
residuos no se recoge en absoluto; 70% de las ciudades de la India
carecen de capacidad adecuada
para transportarlo y no hay rellenos sanitarios para la disposicin de los
residuos. los
vertederos existentes no son ni bien equipados ni bien administrados y
no estn alineados
adecuadamente para proteger contra la contaminacin de suelos y
aguas subterrneas.
En los ltimos aos, el mercado de consumo ha crecido rpidamente
conduce
a productos que se envasan en latas, lminas de aluminio, plsticos, y
otros tales
elementos no biodegradables que causan un dao incalculable al medio
ambiente. En
India, algunas reas municipales han prohibido el uso de plsticos y que
parecen
tener xito alcanzado. Por ejemplo, hoy en da uno no ver una sola
pieza de
plstico en toda la regin de Ladakh, donde las autoridades locales
impusieron una
prohibicin de plsticos en 1998. Otros estados deberan seguir el
ejemplo de esta regin
y prohibir el uso de elementos que causan dao al medio ambiente. Un
aspecto positivo
Cabe destacar que en muchas ciudades grandes, las tiendas han
comenzado en los elementos de empaque reutilizable
o bolsas biodegradables. Ciertos artculos biodegradables tambin
pueden ser compostados y
reutilizado. De hecho adecuado manejo de los residuos biodegradables
har considerablemente
disminuir la carga de los residuos slidos que cada ciudad tiene que
abordar.
La basura se pueden clasificar en cuatro grandes categoras.
Los residuos orgnicos : residuos de cocina, verduras, flores, hojas,
frutas.
Pgina 302
Recuperacin y remediacin de los residuos slidos mediante Proceso
Bio-qumica 289
Residuos txicos
: Medicinas viejas, pinturas, productos qumicos, bulbos, las latas de
aerosol,
fertilizantes y plaguicidas envases, pilas, zapato
polaco.
Reciclable
: Papel, vidrio, metales, plsticos.
sucia
: Residuos hospitalarios tales como tela manchada con sangre y otros
fluidos corporales.
10.2.2 Residuos Peligrosos
residuos industriales y hospitalarios se considera peligroso ya que
pueden contener txicos
Sustancias. Ciertos tipos de residuos domsticos tambin son peligrosos.
Peligroso
residuos podran ser altamente txico para los humanos, animales y
plantas; son corrosivos,
altamente inflamables o explosivas; y reaccionar cuando se exponen a
ciertas cosas
por ejemplo, gases. La India genera alrededor de siete millones de
toneladas de desechos peligrosos
cada ao, la mayora de los cuales se concentra en cuatro estados:
Andhra Pradesh, Bihar,
Uttar Pradesh y Tamil Nadu. Los residuos domsticos que se pueden
clasificar como
residuos peligrosos incluyen bateras viejas, betn para zapatos, latas de
pintura, medicamentos viejos,
y frascos de medicamentos.
Los residuos hospitalarios contaminados por los productos qumicos
utilizados en los hospitales se considera
peligroso. Estos productos qumicos incluyen formaldehdo y fenoles, que
se utilizan
como desinfectantes, y el mercurio, que se utiliza en los termmetros o
equipos
que la presin medida de la sangre. La mayora de los hospitales en la
India no tienen adecuada
instalaciones de eliminacin de estos residuos peligrosos. En el sector
industrial, la mayor
generadores de residuos peligrosos son los metales, productos qumicos,
papel, pesticidas, tinte,
refinacin y Artculos de goma industrias.
10.2.3 desechos hospitalarios
Los residuos hospitalarios se genera durante el diagnstico, el
tratamiento o la inmunizacin
de los seres humanos o animales o en las actividades de investigacin
en estos campos o en el
la produccin o el ensayo de productos biolgicos. Puede incluir
desechos como objetos cortantes, sucias
residuos, desechables, los residuos anatmica, culturas, medicinas
desechadas, qumicas
desechos, etc. Estos son en la forma de jeringas desechables, gasas,
vendas,
fluidos corporales, excrementos humanos, etc. Estos residuos es
altamente infeccioso y puede ser una
seria amenaza para la salud humana si no se gestiona de una cientfica
y discrimina
manera. Se ha estimado que ms o menos de los 4 kg de residuos
generados en una
hospital al menos 1 kg podran estar infectados.
Los estudios realizados por diversos organismos muestran que el
cuidado de la salud
establecimientos en la India no han prestado la debida atencin a su
gestin de los residuos.
Despus de la notificacin de la Residuos Bio-mdica (Manejo y Gestin)
Reglas, 1998, estos establecimientos estn racionalizando lentamente el
proceso de
perder la segregacin, recoleccin, tratamiento y disposicin. Muchos de
los ms grandes
hospitales han instalado ya sea las instalaciones de tratamiento o estn
en el proceso de
de hacerlo.
pgina 303
290 DS Ramteke
10.3 Separacin de Residuos Slidos Urbanos
residuos municipales se est generando en volmenes cada vez
mayores en las zonas urbanas
reas. El diagrama esquemtico (Fig. 10.1) describe cmo los residuos
slidos municipales
es segregado y en los que se puede utilizar.
Higo. 10.1: Proceso de la segregacin de los residuos slidos.
10.4 Reciclaje y Reutilizacin
Reciclaje implica la recogida de los materiales utilizados y desechados,
procesamiento
estos materiales y convertirlos en nuevos productos. Reduce la cantidad
de los residuos que se echa en los cubos de basura de la comunidad,
con lo que el
medio ambiente ms limpio y el aire ms fresco para respirar. Los
estudios llevados a cabo por
gubernamentales y no gubernamentales, agencias en el pas han
reconocido la
importancia del reciclaje de residuos. Sin embargo, la metodologa para
reciclaje seguro
de los residuos no se ha normalizado. Los estudios han revelado que un
7-15% de la
residuos se reciclan. Si el reciclado se realiza de manera adecuada, se
va a resolver el
problemas de desechos o basura. A nivel comunitario, un gran nmero
de ONG
(Organizaciones No Gubernamentales) y empresas del sector privado
han tomado
una iniciativa en la segregacin y reciclado de residuos (EXNORA
Internacional en
Chennai recicla una gran parte de los residuos que se recaba). Est
siendo utilizado
para el compostaje, la fabricacin de grnulos para ser utilizado en
gasifica, etc. Plastics se venden a
las fbricas que les reutilizacin.
Los pasos implicados en el proceso antes de reciclar incluyen (a)
Collection
de los residuos de puertas, locales comerciales, etc. (b) Recogida de
residuos de
comunidad vertederos, (c) la coleccin / recogida de residuos de
disposicin final
Sitios.
El diagrama esquemtico (Fig. 10.2) representa el reciclado de desechos.
Pgina 304
Recuperacin y remediacin de los residuos slidos mediante Proceso
Bio-qumica 291
Higo. 10.2: El reciclaje de los desechos.
Fuente: Informe CPCB sobre Gestin de Residuos Slidos Urbanos
reciclaje de residuos tiene algunas ventajas significativas. Eso
conduce a una menor utilizacin de materias primas,
reduce los impactos ambientales derivados del tratamiento y
eliminacin de residuos,
hace que el entorno ms limpio y saludable,
ahorra espacio en los vertederos,
ahorra dinero, y
reduce la cantidad de energa necesaria para la fabricacin de nuevos
productos.
El compostaje
La materia orgnica constituye el 35-40% de los residuos slidos
urbanos generados en
India. Este desperdicio puede ser reciclado por el mtodo de
compostaje, uno de los ms antiguos
formas de eliminacin. Es el proceso natural de descomposicin de los
residuos orgnicos
que los rendimientos de estircol o compost, que es muy rica en
nutrientes. El compostaje
es un proceso biolgico en el que los microorganismos, principalmente
hongos y bacterias,
convertir residuos orgnicos degradables en sustancia humus-similares.
este acabado
producto, que se parece suelo, es alto en carbono y nitrgeno y es un
excelente
medio para el cultivo de plantas. El proceso de compostaje se asegura
de que los residuos
producido en las cocinas no se descuidadamente arrojados y se pudren.
se recicla
los nutrientes y los devuelve al suelo como nutrientes. Aparte de ser
limpio,
barato y seguro, compost puede reducir significativamente la cantidad
de desechables
basura. El abono orgnico se puede utilizar en lugar de fertilizantes
qumicos y
es mejor, especialmente cuando se utiliza para verduras. Aumenta la
capacidad del suelo para
retener el agua y hace que el suelo ms fcil de cultivar. Se ayud a que
el suelo retenga ms
de los nutrientes de las plantas.
10.5 Residuos Slidos Urbanos
residuos slidos municipales (MSW), tambin llamado residuos slidos
urbanos, es un tipo de residuos
que incluye los residuos predominantemente domstica (residuos
domsticos) con a veces
la adicin de los desechos comerciales recogidos por un municipio
dentro de un dado
zona. Son ya sea en forma slida o semislida y generalmente no
incluyen industrial
pgina 305
292 DS Ramteke
Desechos peligrosos. El trmino desechos residuales se refiere a los
residuos izquierda desde casa
fuentes que contienen materiales que no han sido separados hacia fuera
o enviados para
reprocesamiento.
Los elementos funcionales de Residuos Slidos
Generacin de residuos
La generacin de residuos abarca actividades en las que se identifican
materiales
como ya no ser de valor y estn bien desechado o reunidos
para su eliminacin.
manejo de residuos y la separacin, almacenamiento y procesamiento
en la fuente
la manipulacin de residuos y la separacin implica las actividades
asociadas con
gestin de los residuos hasta que se colocan en un recipiente de
almacenamiento para la coleccin.
Manipulacin tambin abarca el movimiento de los contenedores
cargados hasta el punto
de la coleccin. La separacin de los componentes de los residuos es un
paso importante en el
manipulacin y el almacenamiento de los residuos slidos en la fuente.
Coleccin
El elemento funcional de coleccin incluye no slo la recoleccin de
slido
residuos y materiales reciclables, sino tambin el transporte de estos
materiales,
despus de la recoleccin, a la ubicacin donde se vaca el vehculo de
recogida. Esta
ubicacin puede ser una instalacin de procesamiento de materiales,
una estacin de transferencia o un vertedero
sitio de disposicin.
La separacin y el procesamiento y la transformacin de los residuos
slidos
Los tipos de medios y las facilidades que ahora se utilizan para la
recuperacin de los residuos
materiales que han sido separados en la fuente incluyen recoleccin en
la acera,
dejar y recompra de centros. La separacin y transformacin de
desechos que
han sido separados en la fuente y la separacin de los residuos
mezclados
por lo general se producen en una instalacin de recuperacin de
materiales, estaciones de transferencia, de combustin
instalaciones y emplazamientos de descarga.
Transferencia y transporte
Este elemento consta de dos pasos: (i) la transferencia de los desechos
de la ms pequea
vehculo de recogida para el material de transporte ms grande y (ii) la
posterior
transporte de los residuos, por lo general a travs de largas distancias, a
un procesamiento o
sitio de disposicin.
eliminacin
Hoy en da la eliminacin de residuos en vertederos o por esparcimiento
es el ltimo
el destino de todos los desechos slidos, ya sea que se recogen los
desechos residenciales y
transportados directamente a un sitio de relleno, materiales residuales
de materiales
instalaciones de recuperacin (MFR), residuos de la combustin de los
residuos slidos,
compost o otras sustancias de varias instalaciones de procesamiento de
residuos slidos.
Un relleno sanitario moderno no es un vertedero; Se trata de una
estructura construida utilizado
para la eliminacin de desechos slidos en la tierra sin crear molestias o
riesgos
para la salud o la seguridad pblica, tales como la cra de ratas e
insectos y la
la contaminacin de las aguas subterrneas.
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Recuperacin y remediacin de los residuos slidos mediante Proceso
Bio-qumica 293
10.6 Gestin de Residuos Slidos en la India
Ha habido un aumento significativo en los RSU (residuos slidos
urbanos) generacin
en la India en las ltimas dcadas. Esto es en gran parte debido
acelerado de la poblacin
el crecimiento y el desarrollo econmico en el pas. Gestin de residuos
slidos tiene
convertido en un problema ambiental importante en la India. por El
cpita de MSW generada
diario, en la India vara de aproximadamente 100 g en ciudades
pequeas a 500 g en las grandes ciudades.
Aunque, no hay datos a nivel nacional para la generacin de RSU,
recogida y
disposicin, el aumento de la generacin de residuos slidos, a lo largo
de los aos, puede ser estudiado
durante algunos centros urbanos. Por ejemplo, la poblacin de Mumbai
creci de
alrededor de 8,2 millones en 1981 a 12.3 millones en 1991, registrando
un crecimiento del
alrededor del 49%. Por otro lado, los RSU generados en la ciudad
aument de
3200 toneladas por da a 5355 toneladas por da en el mismo periodo de
registro de una
crecimiento de alrededor del 67% (CPCB, 2000). Esto indica claramente
que el crecimiento de
RSU en nuestros centros urbanos ha superado el crecimiento de la
poblacin en los ltimos aos.
Esta tendencia se puede atribuir a nuestra estilos de vida cambiantes,
hbitos alimenticios, y el cambio
del nivel de vida.
residuos slidos municipales en ciudades se recoge por respectivos
municipios
y transportados a los sitios de disposicin designados, que normalmente
son de baja altitud
reas en las afueras de la ciudad. Los ingresos limitados destinados a la
municipios hacen mal equipados para proporcionar altos costos que
implica
la recogida, almacenamiento, tratamiento y disposicin adecuada de los
RSU. Como resultado, una
parte sustancial de los RSU generados permanece desatendido y crece
en montones
al mantenimiento deficiente centros de acopio. La eleccin de un sitio de
disposicin es tambin
ms una cuestin de lo que est disponible de lo que es adecuado. El
medio de cobro
la eficiencia de los RSU en ciudades de la India es de aproximadamente
el 72,5% y alrededor del 70% de las ciudades
la falta de capacidades adecuadas de transporte de residuos (TERI,
1998). Los mtodos insalubres
adoptado para la eliminacin de desechos slidos es, por lo tanto, un
problema de salud grave. los
vertederos en mal estado son propensos a la contaminacin del agua
subterrnea debido
de la produccin de lixiviados. Abrir el vertido de basuras facilita el
cultivo para
vectores de enfermedades tales como moscas, mosquitos, cucarachas,
ratas y otras plagas
(CPCB, 2000).
Los municipios en la India, por tanto, se enfrentan al reto de reforzar
su infraestructura disponible para la gestin eficiente de los RSU y
asegurar
disposicin cientfico de RSU mediante la generacin de ingresos
suficientes, ya sea desde
los generadores o mediante la identificacin de las actividades que
generan recursos a partir de residuos
administracin.
10.7 Escenario Futuro
La generacin de residuos y sus impactos
En la India, se estima que la cantidad de residuos generados por
habitante para aumentar
a un ritmo de 1,0 a 1,33% anual (Shekdar, 1999). La Figura 10.3
representa la
el aumento de las cantidades de residuos slidos municipales 1997-2047
bajo el BAU
Pgina 307
294 DS Ramteke
escenario asumiendo la generacin de residuos per cpita al da en 1995
como 0,456
kg (EPTRI, 1995) y el aumento per cpita en la generacin de residuos
como 1,33%.
El valor calculado de la generacin de residuos per cpita diario en 1997
es 0,468
kg. De la Fig. 10.3 es evidente que la cantidad total de residuos
generados en
2047 sera aproximadamente por encima de 260 millones de toneladas-
ms de cinco
veces el nivel actual. Este enorme aumento de la generacin de residuos
slidos
tendr un impacto significativo en trminos de los terrenos necesarios
para la eliminacin de este
perder, as como en las emisiones de metano.
Higo. 10.3: Las tendencias proyectadas en la generacin de residuos
slidos urbanos (millones
toneladas / ao) de acuerdo con el escenario BAU.
Higo. 10.4: requisito de la tierra acumulativa para la eliminacin de
residuos slidos urbanos (km 2 ).
Requisitos de los terrenos
La carga que el aumento de la generacin de residuos slidos es
impondra
evidente por el hecho de que el requisito acumulativo de la tierra (ao
base
1997), para la eliminacin de los RSU, ascendera a alrededor de 1.400
kilometros 2 de 2047
(Fig. 10.4). Las estimaciones bajo el escenario base se realizan teniendo
en cuenta la
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Recuperacin y remediacin de los residuos slidos mediante Proceso
Bio-qumica 295
eficiencia de recoleccin promedio de los residuos como 72,5%, la
profundidad promedio de vertedero
sitio como 4 m, y la densidad media de residuos como 0,9 tonelada / m 3
(Nacional de Asuntos Urbanos, 1989).
Desvo de tierra para la eliminacin de residuos sera fsicamente
imposible ya
reas con la mayor concentracin de residuos slidos tambin seran las
reas
con grave escasez de terrenos baldos. La implicacin, por lo tanto, es
que si
los mtodos actuales de eliminacin de residuos slidos persisten, los
residuos tendra que
ser llevado a travs de largas distancias, lo que requerira la creacin de
una gran
cantidad de instalaciones e infraestructuras de transporte. Esto
implicara un enorme
financiacin adicional.
10.8 intervenciones tecnolgicas
India se ha quedado atrs en trminos de tecnologas que adoptan para
residuos slidos
administracin. En particular, recogida, tratamiento y eliminacin de
residuos requieren
urgente consideracin.
Recogida de residuos
La opcin preferida sera la de renovar el servicio de recogida existentes
estructura para proporcionar la comunidad con cubos de la basura,
convenientemente colocados para
las personas que depositan los residuos domsticos, y puerta a puerta
de recogida de residuos.
Esto, junto con la separacin de los residuos, en la fuente, en
biodegradable y no
materiales biodegradables no slo reducir el costo del transporte
para su disposicin final, sino tambin proporcionar los residuos
segregados de la orgnica de los residuos
a las actividades de energa.
Tratamiento y eliminacin
una adecuada separacin de los residuos conducira a mejores opciones
y oportunidades
para su disposicin cientfica. Reciclables, por ejemplo, podran ser
inmediatamente
transportados a plantas de reciclaje, la cual, a su vez, tendra que pagar
las corporaciones
para ello, lo que aumenta sus ingresos. Finalmente, el material inerte
que ser
requerido para ser enviados a los vertederos sera de cantidad mucho
menor en comparacin con
los residuos no-segregado, en consecuencia, el aumento de la vida de
nuestra disposicin existente
instalaciones (Singhal y Pandey).
10.9 Gestin de Residuos Slidos en la India: Opciones y
oportunidades
Hasta hace poco, el medio ambiente no era un problema en un pas del
tercer mundo como
India y gestin de residuos slidos definitivamente no era la principal
preocupacin de
ambientalistas y el gobierno, cuando el despertar de la cuestin,
finalmente,
sucedi. Es slo en tiempos muy recientes, cuando el jugador de ciertas
ONG comenzaron a trabajar
y destacando el pattico estado de la prestacin de los servicios de
residuos municipales
en el pas, que los indios que toman las decisiones se dieron cuenta de
la importancia de este
aspecto particular de la gestin ambiental.
Pgina 309
296 DS Ramteke
10.9.1 Antecedentes Informacin sobre la India
Con una superficie de 32,87,263 km, India es el sptimo pas ms
grande del
mundo. Situada totalmente en el hemisferio norte, la parte continental
de la India se extiende
entre las latitudes 8 4 y 37 6 del norte, las longitudes 68 7 y 97 25
este y
mide alrededor de 3,214 kilometros de norte a sur entre las latitudes
extremas
y alrededor de 2.933 kilometros de este a oeste entre las longitudes
extremas. tiene
logrado un progreso socioeconmico multifactico durante los ltimos
50 aos de su
independencia y ahora es la nacin industrializada dcimo en el mundo,
con una
autosuficiencia completa en el campo de la agricultura. La poblacin de
la India, ya que en marzo
1991, se situ en 856 millones (TERI, 1997), por lo que es la segunda
ms grande poblada
los pases del mundo. Suponiendo una tasa de crecimiento anual del
1,3%, la estimacin
cifras de 2021 son 1296800000 (Eduard, 1993). El per cpita actual
cifra del PIB es de Rs. 3197.21 y se prev que aumente a Rs. 11,599.7
para el ao 2021
(Datos no publicados, TERI). La cuanta de los residuos generados en el
pas es
aumentando da a da debido a su aumento de la poblacin y el aumento
PIB, aunque los servicios cvicos no han sido proporcionalmente y la
expansin
por lo tanto, estn bajo una tremenda presin.
10.9.2 Servicios de transporte de residuos
la gestin de residuos slidos urbanos es la responsabilidad de los
gobiernos locales
En India. Transporte de los residuos se lleva a cabo por los municipios
que emplean
vehculos como camiones abiertos, camiones con remolque, camiones
basculantes, camiones volquete y
animales de carros de traccin (principalmente en ciudades pequeas y
zonas rurales). Las tendencias recientes
en las grandes ciudades y pueblos implicar el uso de portacontenedores
y camiones-colocadores,
en el que los contenedores de los vehculos son de los tipos de basura
comunidad. los
volumen de los residuos a ser transportado se expresa generalmente en
trminos de cbico
metros por milln de poblacin. Los clculos realizados sobre la base de
la densidad de los residuos,
residuos generados etc. indican que en promedio 320 m 3 de transporte
Se requiere capacidad para el transporte diario de los residuos
generados por la poblacin
de un milln. Sin embargo, un artculo publicado en 1996 por Bhoyar et
al., En la que
los datos de 44 ciudades de la India ha sido recopilada y analizada,
indica que el 70%
44 de estas ciudades no tienen los 320 m 3 por milln capacidades de
transporte. Esta
porcentaje podra ser an mayor ya que la flota vehicular de la mayora
de las ciudades es
varios aos y es de la carretera durante una gran parte del ao por falta
de las reparaciones.
10.9.3 Waste Collection Services
En ausencia de la modernizacin y la atomizacin de los servicios de
gestin de residuos,
sus diversos componentes, es decir, recogida, transporte y eliminacin,
continan
ser actividades intensivas en trabajo en la India. Alrededor del 80% del
presupuesto total de todos
corporaciones municipales se explica por los salarios de los trabajadores
sanitarios
participado en barrer carretera y actividades relacionadas. Una encuesta
de 159 ciudades realizado
por el Instituto Nacional de Asuntos Urbanos (Nacional de Asuntos
Urbanos, 1989) revel que los residuos
Pgina 310
Recuperacin y remediacin de los residuos slidos mediante Proceso
Bio-qumica 297
eficiencia de recoleccin en estas ciudades vari del 66% al 77% y la
nacional
promedio fue de un pobre 72,5%, en comparacin con los pases
desarrollados, donde la
recogida de residuos es casi completa a excepcin de las zonas ms
rurales. Residuos
eficiencia de recoleccin es una funcin de dos factores principales: la
disponibilidad de mano de obra
y la capacidad de transporte. Menos del 10% de las 157 ciudades
encuestadas en 1989 tuvo
ms de 2800 trabajadores por milln de habitantes que es un punto de
referencia aceptado
de requerimiento de mano de obra ptima, por la mayor parte de las
corporaciones municipales en
India.
10.9.4 Caractersticas de los residuos
La composicin de los residuos depende de una amplia gama de
factores, tales como alimentos
hbitos, tradiciones culturales, estilos de vida, el clima y los ingresos,
etc. Las variaciones debidas
a tales factores se encuentran en diferentes pases, as como a travs de
diferentes
regiones dentro de un pas. Las variaciones inter-regional son, sin
embargo, no como
marcado como aquellos en los distintos pases. Variacin tambin se
produce dentro de una regin
en los ltimos aos como consecuencia de los cambios econmicos y
sociales. India no es una
excepcin a esto, y los datos dados en la Tabla 10.1 muestra claramente
los cambios
en la composicin de la India RSU durante un perodo de tiempo de unos
25 aos. los
ms notable cambio es en el porcentaje de materiales reciclables
(plstico, metales
etc.), que se increment de 9,6% en 1971-1973 (Bhide, 1983) a 17,2%
en 1995
(EPTRI, 1995), debido a los cambios de estilo de vida y el incremento de
consumo
actitud del hombre comn en el pas. Este aumento ha dado lugar a la
fenmeno de la actividad de recoleccin de trapo sobre todo en las
ciudades de metro del pas
en el que las unidades de reciclaje se han multiplicado en las zonas
perifricas que proporcionan
empleo a miles de trabajadores no cualificados. La materia orgnica
tiene ms o
menos siendo el mismo, mientras que la ceniza y tierra fina ha
disminuido correspondiente
al aumento de los materiales reciclables. Un cambio en el consumo de
energa a partir de recursos
carbn y madera a los productos de origen petroqumico podra ser una
explicacin plausible
para la ceniza y fino disminucin porcentual tierra.
Tabla 10.1: Caractersticas fsico-qumicas de MSW indio
Componente
Porcentaje en peso hmedo
1971-1973 una
1995 b
Papel
4.1
5.8
Plstica
0.7
3.9
Rieles
0.5
1.9
Vaso
0,4
2.1
Harapos
3.8
3,5
La ceniza y tierra fina
49,2
40.3
materia compostable total
41,3
42.5
un Bhid y Sundaresan, 1983
b EPTRI, 1995
Pgina 311
298 DS Ramteke
10.9.5 prcticas de eliminacin de residuos
En la mayora de los centros urbanos de la India, de RSU est dispuesto
fuera depositando el
igual en las zonas bajas de las afueras. Compactacin y nivelacin de los
residuos
y un recubrimiento final de la tierra rara vez se observa en las prcticas
de la mayora de estos
sitios de disposicin. Estas bajas sitios de disposicin, al estar
desprovisto de un lixiviado
sistema de recogida, vigilancia de los gases de vertedero y de los
equipos de recoleccin, difcilmente puede
ser llamados rellenos sanitarios y son ms en la naturaleza de
vertederos. Casi
todas las ciudades de la India disponen sus residuos fuera por simple
vertido y slo alrededor
9% practican la manera respetuosa del medio ambiente de la
eliminacin, es decir, el compostaje.
Los residuos interna de la India se pueden clasificar a grandes rasgos en
los residuos orgnicos,
reciclables y ceniza y tierra fina. De estos tres, el componente de
residuos orgnicos
se ha mantenido constante en los ltimos aos en aproximadamente
40%, y es
no se espera que cambie mucho en trminos absolutos en un futuro
prximo. Sin embargo,
la relacin entre los otros dos componentes ha cambiado en los ltimos
aos y es
espera que cambie ms, con el cambio que ocurre en favor de
materiales reciclables.
Por el momento, el pas no tiene una poltica de segregacin de
materiales reciclables y
por lo tanto, stos tambin son objeto de dumping junto con los residuos
orgnicos.
Las corporaciones municipales siendo la autoridad responsable en la
India para
SWM, adems de una amplia gama de funciones relacionadas con la
salud y la
saneamiento, no han sido muy eficaces en cuanto a servicios se refiere
SWM.
Recoleccin, transporte y disposicin -todos los tres componentes del
residuales
carecen en trminos de infraestructura, mantenimiento y Upgradation.
sin embargo, el
eslabn ms dbil de la cadena de gestin de residuos en la situacin de
la India es el
recogida de residuos. segregacin adecuada de los residuos en
diferentes componentes
y su recogida selectiva sin duda puede dar lugar a cambios notables en
todo el sistema. Una de las medidas inmediatas para reformar el vigente
estructura de los servicios de recoleccin implicara la provisin de los
residuos de la comunidad
contenedores a distancias adecuadas para las personas que depositan
los residuos domsticos. Esto como el
primer paso se asegurar de que la gente no tira su basura en las
carreteras y
por lo tanto, no crean tiraderos a cielo abierto. Esto permitir a los
trabajadores sanitarios
para transferir los residuos en el vehculo de transporte de forma rpida
y eficiente con
mnimo riesgo de salud involucrados y tambin ayudar en el
mantenimiento de la esttica
del entorno. La segunda medida debe implicar a la fuente de separacin
de los residuos en componentes biodegradables y no biodegradables.
Esto sera
ser un ejercicio prolongado, ya que implica un cambio de actitud en las
personas y la voluntad
tiene que ser hecho con una planificacin cuidadosa, de manera
escalonada. El pblico general
tendr que ser primero es sensibilizado frente a todo el concepto y
educados acerca
la necesidad y ventajas de hacer la segregacin. La segregacin de los
residuos en el
fuente en s es extremadamente importante ya que los residuos slidos
urbanos, que por lo dems
ambientalmente benigna en conseguir mezclados con residuos
peligrosos como pinturas,
colorantes, bateras, excreta humana se vuelve peligroso.
Los materiales reciclables como papel y plstico, etc. vuelven inservibles
para el reciclado
ya que stos se ensucian por la materia orgnica. Aunque, sera ms
fructfero
clasificar y colocar los diferentes tipos de materiales reciclables en
diferentes recipientes, sin embargo
Pgina 312
Recuperacin y remediacin de los residuos slidos mediante Proceso
Bio-qumica 299
para comenzar con los residuos se puede segregar en dos categoras.
Apropiado
la segregacin conducira a mejores opciones y oportunidades para la
disposicin cientfica
de desperdicio. Los materiales reciclables podran ser seguida
transportado a las unidades de reciclaje
que a su vez tendra que pagar cierta cantidad a las corporaciones, lo
que aade
a sus ingresos. Esto ayudara a la hora de formalizar el conjunto informal
existente de
unidades y esta formalizacin, a su vez podra conducir a reciclar
mltiples ventajas.
Para mencionar algunos: permite Upgradation tecnologa, productos de
mejor calidad y
el ahorro de valiosos recursos de materias primas de pas. Adems, un
dilogo con
la industria del consumidor debe llevarse a cabo para inculcar en ellos la
necesidad
para la evaluacin del ciclo de vida de los productos fabricados y para
reducir el embalaje
contenido de material asociado con cada producto final. La materia
biodegradable
podra ser dispuesto fuera ya sea por compostaje aerbico, digestin
anaerbica o
vertederos sanitarios. Dependiendo de la disponibilidad de tierras y los
recursos financieros
cualquiera de estos mtodos de eliminacin podran ser adoptadas. Sin
embargo, parece que en
este relleno contexto tierra seguira siendo la prctica ms ampliamente
adoptado
en la India en los prximos pocos aos, en cuyo caso tendrn ciertas
mejoras
hay que hacer para asegurarse de que es la tierra de relleno sanitario y
no simplemente el vertido de
residuos. La contribucin al calentamiento global debido a la liberacin
de gases de vertedero en el
atmsfera puede ser amain si los sitios de disposicin estn diseados
y construidos con
las instalaciones de equipos de recoleccin de gas. Esto tendr la doble
ventaja de
mnimas emisiones de efecto invernadero y tambin la generacin de
ingresos si se genera el gas
se utiliza ya sea directamente como un combustible trmica o por
conversin en electricidad.
Sin embargo, esta es una medida a largo plazo y debe ser incorporado
en la fase de
cuando un sitio de disposicin est siendo diseado.
El peligro de contaminacin de las aguas subterrneas por lixiviados
percolacin, el ruido
contaminacin, etc. todo se puede minimizar mediante buenas prcticas
de relleno de tierras. Aerobio
El compostaje es una opcin de captura rpida para la eliminacin de
residuos y un comienzo en el que tiene
Ya se han realizado. La primera planta de compostaje aerbico del pas
se cre
en Bombay en 1992 para manejar 500 toneladas de residuos por da por
una empresa privada.
Sin embargo, slo 300 toneladas / da de capacidad se estn utilizando
en la actualidad debido a cierta
problemas, pero la planta est funcionando con mucho xito y el
compost producido
est siendo vendido a razn de dos rupias / kg. Otra planta de 150
toneladas / da
la capacidad ha estado operando en la ciudad de Vijaywada por
alrededor de un ao. UN
Se espera que la planta similar a entrar en funcionamiento en la ciudad
jardn de Bangalore
a finales de ao. Calcuta, Thane, Chandigarh, Gwalior, Solan y Delhi
tambin estn
remolcar la misma lnea y han firmado acuerdos ya sea o estn en el
proceso de
de esta manera tener las instalaciones de compostaje muy pronto. El
compostaje tiene una
ventaja sobre el depsito en vertederos sanitarios, ya que elimina la
emisin y los lixiviados
problemas y el producto final que es bueno compost de calidad se
pueden vender fuera.
La digestin anaerbica, aunque caro en comparacin con el depsito en
vertederos sanitarios y
compostaje aerbico tambin tiene una buena promesa como una
opcin de eliminacin futuro. Eso
Sin embargo necesita ms investigacin y experimentacin antes de ser
adoptado en una
a gran escala. La incineracin es otra opcin disponible para la
eliminacin de residuos. los
rango bajo valor calorfico de 800-110 kcal / kg de RSU de la India, sin
embargo reglas
Pgina 313
300 DS Ramteke
la opcin de la incineracin para ello. Adems, la tendencia existente en
todo el mundo es
a alejarse de la incineracin y la India tambin pueden optar a salvo de
esta opcin
a excepcin de ciertos tipos de residuos peligrosos como los residuos
hospitalarios.
Las opciones y oportunidades son muchas, que depende de las
corporaciones a
seleccionar y adoptar las ms adecuadas para ellos. Constituyendo un
cuerpo nodal en
el nivel de Ministerio de Asuntos Urbanos con el poder de guas de
encuadre
y las normas de emisin y notificaciones podran recorrido un largo
camino en la asistencia
corporaciones en su trabajo. Este cuerpo nodal tambin podra construir
y mantener
una base de datos central que contiene informacin detallada sobre los
infra
detalles estructurales, financieras y administrativas de todas las
corporaciones municipales
y los consejos en el pas. Otra idea muy buena para una mejora general
en servicios de gestin de residuos podra ser la privatizacin de uno de
los aspectos de
gestin de residuos. Una vez que el sector privado se hace cargo de la
cierta parte de
el trabajo de las corporaciones, las corporaciones probablemente podra
pasar y concentrarse
ms en el resto en trminos de recursos financieros y administrativos.
10.10 La biorremediacin de suelos y Phytoremediation-
Una visin general
En el perodo de 45 aos desde 1930 hasta 1975, la poblacin humana
del planeta ha aumentado
por aproximadamente dos mil millones hasta cuatro mil millones. Un
aumento adicional de la poblacin
de dos mil millones se produjeron en los aos 25 intervalo de 1975 a
2000 y la poblacin es
espera que llegue a ocho mil millones en 2020. El crecimiento
demogrfico y la resultante
desarrollo de las poblaciones urbanas grandes de alta densidad, junto
con el paralelo
la industrializacin global, han colocado grandes presiones sobre el
medio ambiente,
una amenaza potencial para la sostenibilidad del medio ambiente. Esto
ha dado lugar a la
acumulacin de contaminantes qumicos y biolgicos a travs de la
biosfera, pero
sobre todo en suelos y sedimentos.
10.10.1 La biorremediacin
El fundamento histrico de la biotecnologa moderna del medio
ambiente radica en
el compostaje de residuos orgnicos en fertilizantes del suelo y
acondicionadores. En su
ms amplio biorremediacin sentido incluye el tratamiento biolgico de
aguas residuales,
aguas residuales, alimentos y desechos agrcolas, suelos contaminados
y aguas subterrneas.
Mientras que su definicin es objeto de debate, Prince (1998) define la
biorremediacin
como el proceso de juiciosamente que explotan los procesos biolgicos
para reducir al mnimo una
impacto ambiental no deseada; Por lo general, es la eliminacin de
contaminante de
la biosfera. El trmino biorremediacin intrnseca esencialmente
consiste en tomar
ninguna accin sino ms bien la monitorizacin de un proceso natural de
la reduccin de contaminantes
sin intervencin. Por lo tanto, la biorremediacin intrnseca apenas
puede ser denominado como
una tecnologa, pero ha tenido un cierto xito como un mtodo de bajo
costo.
La biorremediacin se puede definir como cualquier proceso que utiliza
microorganismos,
hongos, plantas verdes o sus enzimas para devolver el medio ambiente
natural alterado
pgina 314
Recuperacin y remediacin de los residuos slidos mediante Proceso
Bio-qumica 301
por contaminantes a su condicin original. La biorremediacin se puede
emplear
para atacar a los contaminantes del suelo especficos, tales como la
degradacin de clorado
hidrocarburos por bacterias. Un ejemplo de un enfoque ms general es
la limpieza
de derrames de petrleo por la adicin de nitrato y / o fertilizantes de
sulfato para facilitar la
la descomposicin del petrleo crudo por bacterias indgenas o
exgenos.
10.10.1.1 La biorremediacin Monitoreo
El proceso de biorremediacin se puede controlar indirectamente
midiendo la
Potencial de Oxidacin Reduccin o redox en el suelo y el agua
subterrnea, junto con
pH, temperatura, contenido de oxgeno, las concentraciones de
electrones aceptor / donante, y
concentracin de productos de degradacin (por ejemplo, dixido de
carbono). Tabla 10.2 muestra
el (decreciente) tasa de descomposicin biolgica como funcin del
potencial redox.
Tabla 10.2: tasas de descomposicin biolgica
Proceso
Reaccin
Potencial redox
(E h en mV)
Aerobio
O 2 + 4e - + 4H +
2H 2 O
600 ~ 400
anaerbica
desnitrificacin
2 NO 3
- + 10e - + 12H +
N 2 + 6H 2 O
500 ~ 200
El manganeso (IV)
reduccin
MnO 2 + 2e - + 4H +
Mn 2 + + 2H 2 O
400 ~ 200
Hierro de reduccin (III)
Fe (OH) 3 + e - + 3H +
Fe 2+ + 3H 2 O
300 ~ 100
La reduccin del sulfato
SO 4
2- + 8e - 10 H +
H 2 S + 4H 2 O
0 ~ -150
Fermentacin
2CH 2 O CO 2 + CH 4
-150 -220 ~
Esto, por s mismo y en un solo sitio, da poca informacin sobre el
proceso de
remediacin.
1. Es necesario tomar muestras suficientes puntos en y alrededor del
contaminada
sitio para poder determinar los contornos de igual potencial redox.
contorneado
por lo general se realiza mediante un software especializado, por
ejemplo, utilizando Kriging
interpolacin.
2. Si todas las mediciones del potencial redox que muestran receptores
de electrones
se han utilizado arriba, es en efecto un indicador de la actividad
microbiana total.
Tambin se requiere un anlisis qumico para determinar cuando los
niveles de
contaminantes y sus productos de degradacin se han reducido a menos
de
los lmites reglamentarios.
10.10.1.2 Ventajas de biorremediacin
procesos biocatalticos microbiana y biomineralizacin generalmente
representan
las alternativas de remediacin de bajo coste, por ejemplo, que cuestan
aproximadamente una
dcima parte del coste de la incineracin (Grommen y Verstraete, 2002).
Adicionalmente
Pgina 315
302 DS Ramteke
los procesos de biodegradacin se argumentan para ser flexible y
adaptable a las variables
condiciones ambientales. Muchos productos qumicos sintticos, cuando
se introduce primero
con el medio ambiente parecen haber evolucionado que puede degradar
muchos de estos
productos qumicos (Relebitso et al., 2002). Otro afirm ventaja de
biorremediacin
tiene ms que ver con la percepcin del pblico que con el rendimiento;
biolgico
procesos se perciben como ser ambientalmente benigna, mientras que
la incineracin
y ms procesos de energa y equipo intensivos son percibidas como
ms contaminantes del medio ambiente. Otras ventajas son que a
menudo se ofrecen
los procesos de biorremediacin se pueden implementar en el sitio, de
hecho a veces en
situ (sin excavacin) y que el proceso es aplicable para diluir o
ampliamente
contaminantes difusos (Iwamoto y Nasu, 2001).
La desventaja ms frecuentemente citados para procesos de
biorremediacin de suelos
es que a menudo son muy lentos y puntos finales deseados con
frecuencia pueden no ser
logrado. Los fracasos se producen con mayor frecuencia en los procesos
ms pasivos. Con poco
intervencin, la eliminacin de los contaminantes del suelo por procesos
de atenuacin natural
puede ocurrir y puntos finales aceptables pueden tardar muchos aos en
ser alcanzado. Ah
Puede haber muchas razones de las tasas de biorremediacin lentos y
fracasos principalmente
que las condiciones ambientales presentes son sub-ptimo para la
seleccin y
la promocin del crecimiento de las cepas degradantes. Adems, la
cintica de microbiana
crecimiento y la biodegradacin son tales que a medida que disminuyen
las concentraciones de contaminantes
por lo que tambin lo hacen las tasas de su mayor degradacin.
10.10.2 La fitorremediacin
El mtodo fitorremediacin utiliza varias plantas para extraer, contener,
inmovilizar
o dragar contaminantes de suelos y aguas. Algunas plantas pueden
eliminar
contaminantes de suelo mediante la absorcin directa, seguido de la
transformacin subsiguiente,
el transporte y la acumulacin en una forma no fitotxico. Los diversos
enfoques en
fitorremediacin incluyen fitodegradacin, fitoextraccin,
fitoestabilizacin,
phytovolatilization y rizofiltracin. La fitorremediacin es dejar de ser
activamente
investigados y asociaciones-microbianos de las plantas parecen ser la
clave para mejorar
eliminacin de los contaminantes inorgnicos y orgnicos. tecnologas
de fitorremediacin
son los ms apropiados para grandes reas de baja y suelos
moderadamente contaminados
donde la aplicacin de tecnologas de remediacin convencionales sera
prohibidamente caro.
Un vertedero es un entorno extremadamente variable y heterognea,
como
evidente a partir de la diversidad de composicin de residuos con
respecto a la ubicacin y
hora. Los vertederos tienen residuos que contienen una amplia gama de
molculas orgnicas de
tanto de origen natural y xenobiticos. En muchos pases desarrollados,
municipales
residuos slidos urbanos (RSU) se vierten en rellenos sanitarios
cientficamente diseados.
En muchos pases en desarrollo, que son vertidos de forma incontrolada
sin ningn tipo de precaucin para hacer frente a las emisiones de gases
y la generacin de lixiviados,
que representan una amenaza para el medio ambiente. Natural o
plantado vegetacin en una
vertedero tiene un papel importante en el control de la erosin y la
eliminacin de contaminantes,
Adems de impartir valor esttico. Adems, tambin se puede utilizar en
los lixiviados
Pgina 316
Recuperacin y remediacin de los residuos slidos mediante Proceso
Bio-qumica 303
tratamiento (Maurice, 1998). vegetacin Landfill menudo muestra signos
de dao
comnmente causada por la presencia de gas de vertedero (LFG) en la
zona de la raz. los
objetivo para la reconstruccin de un medio adecuado para la
revegetacin vertedero es
proporcionar una capsula que es profundo y lo ms favorable para el
crecimiento de la raz como sea necesario
para lograr un rendimiento de planta deseada (Vogel, 1987). Aunque las
revisiones de
fitorremediacin de sitios contaminados con una variedad de
contaminantes se
fcilmente disponible (Siciliano y Germida, 1998a; Lasat, 2002;
Schwitzguebel et
al., 2002), la aplicabilidad de esta tecnologa en la recuperacin y
rehabilitacin
de los vertederos de residuos slidos urbanos no se ha tomado en su
debida. El presente
opinin, un vstago de estudios sobre la rehabilitacin de los residuos
slidos urbanos
vertederos, intenta llenar este vaco, apoyndose en los resultados de
investigacin, especialmente
los reportados en las ltimas dos dcadas.
La fitorremediacin, en referencia colectivamente a todas las tecnologas
basadas en plantas,
utiliza las plantas verdes para remediar sitios contaminados (Sadowsky,
1999). Esta
La tecnologa se inspira en la gran cantidad de propiedades fsicas,
qumicas y
interacciones biolgicas que se producen entre las plantas y el medio
ambiente
medios de comunicacin (Fig. 10.5). La fitorremediacin se est
convirtiendo en un medio rentables
de la gestin de residuos, especialmente el exceso de hidrocarburos de
petrleo, policclicos
hidrocarburos aromticos, explosivos, materia orgnica, y nutrientes.
Higo. : 10,5 interacciones planta-medio ambiente.
Fuente: Licht y Isebrands (2005)
Pgina 317
304 DS Ramteke
Las solicitudes estn siendo probados para la limpieza de suelos
contaminados, agua y
de aire (McCutcheon y Schnoor, 2003). Varias caractersticas hacen que
la fitorremediacin
una alternativa atractiva para muchos de los actualmente practicada in
situ y ex
tecnologas in situ. Estos incluyen: bajos costos de capital y de
mantenimiento, no
invasividad, fcil puesta en marcha, la alta aceptacin del pblico y el
paisaje agradable
que emerge como un producto final (Boyajian y Carreira, 1997). En los
ltimos
dcadas, las estrategias de fitorremediacin se han examinado como un
medio para limpiar
una serie de contaminantes orgnicos e inorgnicos, incluyendo metales
pesados (Kumar
et al., 1995; Sal et al., 1995; Chaney et al., 1997), disolventes clorados
(Walton
et al., 1994; Haby y Crowley, 1996), productos agroqumicos (Anderson
et al., 1994;
Hoagland et al., 1997; Kruger et al., 1997), hidrocarburos aromticos
policclicos,
bifenilos policlorados (Brasil et al, 1995;. Donnelly y Fletcher, 1995),
municiones y radionucleidos. Estos contaminantes orgnicos e
inorgnicos solubles,
que se mueven en races de las plantas o rizosfera por el proceso de
flujo de masa de difusin,
parecen ser ms susceptibles al proceso de remediacin. En varios
casos,
plantas y / o sus microbios rizosfera concomitantes se han demostrado
para transformar
algunos compuestos qumicos en algn grado (Walton et al, 1994;..
Crowley et al,
1996; Siciliano y Germida, 1998b).
Las plantas son conocidos para secuestrar, degradar y estimular la
degradacin de
contaminantes orgnicos en el suelo (Anderson et al., 1993). El
secuestro de pesada
metales por las plantas es un mtodo eficaz de reducir la contaminacin
por metales pesados
en el suelo (Cunningham et al., 1995). El secuestro de sustancias txicas
por las plantas es una
rea importante de investigacin fitorremediacin. Las plantas se sabe
que se acumulan
una variedad de sustancias txicas del suelo y si el producto qumico
txico es metablicamente estable
y mvil, que puede ser transferida a travs de apoplasto o simplasto
compartimentos, o
tanto, en la mayor parte de la planta como el compuesto original y se
almacena a altamente
niveles bioconcentraron (McFarlane et al., 1987). Sin embargo, los
mecanismos por
el cual las plantas estimular la desaparicin de compuestos orgnicos
peligrosos de suelo son
no se entiende completamente.
En vista de su potencial demostrado, fitorremediacin ha ido ganando
importancia en la rehabilitacin de los sitios contaminados, incluyendo
vertederos de residuos slidos urbanos.
Existen muchos tipos de procesos de fitorremediacin se han descrito
sobre la base de
el tipo de mecanismo. Estos incluyen: fitoextractor, rizofiltracin,
phytovolatilization, fitodegradacin, la biodegradacin de la rizosfera,
hidrulico
bombeo, phytosorption y phytocapping. Figura 10.6 describe el comn
procesos que intervienen en la fitorremediacin. Procesos y
contaminantes tratado
con por diferentes procesos de fitorremediacin se presentan en la Tabla
10.1. los
la seleccin de la planta y el tipo de la fitorremediacin depende del tipo
de
contaminantes a tratar y la naturaleza del sitio.
10.10.2.1 La vegetacin en los vertederos
Las plantas son conocidos por aumentar la disponibilidad de nutrientes
mediante la secrecin de quelantes catinicos,
cidos orgnicos, o enzimas especficas tales como la fosfatasa en los
sistemas de suelo.
La competencia de estos nutrientes al degradar y no degradantes
especies se
Pgina 318
Recuperacin y remediacin de los residuos slidos mediante Proceso
Bio-qumica 305
influir en la cantidad de contaminante degradado (Steffensen y
Alexander,
1995). Aumento de la disponibilidad de nutrientes provocada por el
crecimiento de plantas puede ser
un mecanismo por el cual las plantas estimular la biodegradacin.
Un anlisis de las especies de plantas que se producen en diferentes
vertederos facilita la
la seleccin de especies de plantas adecuadas para hacer frente a una
variedad de contaminantes juntos.
Es interesante observar que la diversidad de especies se ve influenciada
por la naturaleza
de origen de los residuos, la flora locales y las condiciones que
prevalecen en el vertedero.
Por lo tanto, una sola especie no puede ser identificado como un
indicador universal y la
la seleccin de plantas debe basarse en las condiciones climticas y las
plantas nativas
que ocurre en un vertedero particular.
10.10.2.2 Vertedero vegetacin
Recuperacin de un vertedero debe incluir el objetivo de contener
el material dentro. Esto se debe a los procesos que tienen lugar despus
de la
la compactacin y la cubierta de los residuos de los productos de sitio
producto de totalmente
nuevas caractersticas. Muchos de los productos de estos procesos son
txicos para varios
formas de vida, incluyendo plantas. La influencia de los diferentes tipos
de contaminantes en
vegetacin se representa en la Fig. 10.7. Los materiales txicos en los
residuos incluyen vertedero
gases, lixiviados, metales pesados, los contaminantes orgnicos y otros.
vertedero habitual
condiciones y sus consecuencias sobre la vegetacin se presentan en la
Tabla 10.3.
La vegetacin en un vertedero completado es a menudo pobre y
daado.
Higo. 10.6: Los procesos involucrados en la fitorremediacin.
Fuente:
http://oldweb.northampton.ac.uk/aps/env/landfillleachate/images/
phytorem. gif.
Pgina 319
306 DS Ramteke
Tabla 10.3: Landfill condiciones y sus efectos sobre las plantas
condiciones de vertido
Las consecuencias para las plantas
Un buen drenaje
Riesgo para la sequedad
Alta temperatura
Sequedad y aumento de la demanda de oxgeno
Construccin encima de la superficie
La exposicin al viento, la sequedad
suelo cubierta superior infrtil
Las malas condiciones de crecimiento
Gases
Las malas condiciones de crecimiento
compactar el suelo
La energa adicional requerida para empujar puntas de las races
Fuente: Maurice (1998).
10.10.2.3 Vertedero capsula
Los vertederos se requiere generalmente para tener tapas de arcilla y
sinttico impermeable
membranas para reducir al mnimo la infiltracin de las precipitaciones y
la generacin de lixiviado.
taponado vertedero es la forma ms comn de remediacin porque en
general es
menos costosa que otras tecnologas y gestiona con eficacia el ser
humano y
riesgos ecolgicos asociados con un sitio de remediacin. es
considerable investigacin
est haciendo para desarrollar capas de bajo costo y eficientes. Como se
indica en Platino
International, Inc. (2002), caps vertederos se pueden utilizar para:
1. minimizar la exposicin en la superficie de la instalacin de residuos;
2. evitar la infiltracin vertical de agua en los desechos que crearan
lixiviados contaminados;
Higo. 10.7: Influencia de diferentes tipos de contaminantes en la
vegetacin.
pgina 320
Recuperacin y remediacin de los residuos slidos mediante Proceso
Bio-qumica 307
3. contienen residuos mientras se aplica el tratamiento;
4. emisiones de gases de control a partir de residuos subyacentes; y
5. crear una superficie de tierra que puede soportar la vegetacin y / o
ser utilizado para otro
Los propsitos.
Una tapa vegetativo es un largo plazo, cubierta de auto-sostenible de
plantas que crecen en
y / oa travs de materiales que presenten un riesgo ambiental; una tapa
vegetativo reduce
que riesgo a un nivel aceptable y requiere un mantenimiento mnimo. Un
tpico
sistema de cubierta del vertedero se muestra en la Fig. 10.8.
Higo. 10.8: sistema de cubierta del vertedero.
10.10.3 mycoremediation
Mycoremediation es una forma de biorremediacin, el proceso de usar
hongos
devolver un entorno (por lo general suelo) contaminado por
contaminantes a un menor
estado contaminada. El trmino fue acuado por mycoremediation Paul
Stamets
y se refiere especficamente al uso de micelios fngicos en
biorremediacin.
Una de las funciones primarias de los hongos en el ecosistema es la
descomposicin, que
se lleva a cabo por el micelio. El micelio secreta enzimas extracelulares
y cidos que descomponen la lignina y la celulosa, los dos bloques
principales
de fibra de la planta. Estos son compuestos orgnicos compuestos por
largas cadenas de
carbono e hidrgeno, estructuralmente similar a muchos contaminantes
orgnicos. La clave
a mycoremediation es la determinacin de las especies fngicas
adecuadas para dirigirse a un determinado
contaminante. Ciertas cepas han sido reportados a degradarse con xito
el nervio
gases de VX y sarin.
En un experimento realizado en conjuncin con Thomas, un importante
colaborador en la industria de la biorremediacin, una parcela de suelo
contaminado con
aceite diesel se inocul con micelios de hongos ostra; tradicional
tcnicas de biorremediacin (bacterias) fueron utilizados en las parcelas
de control. despus de cuatro
semanas, ms del 95% de muchos de los PAH (hidrocarburos aromticos
policclicos)
haba sido reducido a componentes no txicos en las parcelas-miceliales
inoculado.
Parece que la comunidad microbiana natural, participa con los hongos
para descomponer los contaminantes, con el tiempo en dixido de
carbono y agua.
Pgina 321
308 DS Ramteke
hongos de madera que degradan son particularmente eficaces en la
descomposicin de aromtico
contaminantes (componentes txicos de petrleo), as como compuestos
clorados
(ciertos plaguicidas persistentes; Battelle, 2000).
Ventajas
Hay una serie de ventajas de coste / eficacia para la biorremediacin,
que puede
ser empleado en reas que son inaccesibles sin excavacin. Por ejemplo,
derrames de hidrocarburos (especficamente, los derrames de gasolina)
o ciertos disolventes clorados
pueden contaminar el agua subterrnea, y la introduccin de la
electrnica apropiada
aceptor o enmienda donador de electrones, segn sea apropiado, puede
reducir significativamente
las concentraciones de contaminantes despus de un tiempo de retraso
que permite la aclimatacin. Esto es
tpicamente mucho menos costoso que la excavacin seguida de la
eliminacin en otros lugares,
incineracin o otras estrategias de tratamiento ex situ, y reduce o
elimina la
la necesidad de bombeo y tratamiento, una prctica comn en los
lugares donde los hidrocarburos
haber contaminado el agua subterrnea limpia.
10.10.4 Saneamiento de Residuos Slidos
remediacin in situ de suelos y medios contaminados con productos
petroqumicos,
pesticidas, explosivos o materiales orgnicos peligrosos pueden ser un
caro y
proceso que consume tiempo. Tambin hay serios problemas legales y
reglamentarios a
tener en cuenta cuando los suelos descontaminantes en-problemas del
sitio que pueden poner en peligro la
viabilidad de un proyecto de construccin o remodelacin.
Waste Management, empresa de servicios de residuos slidos ms
grande de Norteamrica,
ha desarrollado un conjunto de tecnologas innovadoras fuera de las
instalaciones de saneamiento a
ayudan a las empresas hacer frente eficazmente a los suelos
contaminados. estos biorremediacin
servicios incluyen:
TOSS SM (sistema esttico de dos pasos): TOSS SM es una de dos
etapas, en fase slida
tecnologa de biorremediacin que involucra tanto anaerbica y aerbica
etapas de tratamiento. En la primera etapa, el suelo de explosivos
contaminados se combina
con una fuente de carbono, un inculo, vitaminas y agua para lograr
anaerbica
condiciones. La mezcla resultante se conforma en una pila esttica o
colocado
en una construccin de bermas o la caja para facilitar la reduccin
qumica de
nitroaromticos y nitramina explosivos. En la segunda etapa, el
anaerbicamente
tierra tratada se combina con compost de desechos de jardn y
construido en un aireado
biopila. El biopila puede ser aireado por aire forzado transporta a travs
perforada
tuberas enterradas dentro de la pila o girando la pila con un tornero
compost.
Pruebas anteriores de TOSS SM ha demostrado eficiencias de remocin de
TNT
mayor que 99 por ciento.
El BioSITE SM Sistema: El BioSITE SM Sistema de Gestin de Residuos
es
sistema patentado para la biorremediacin a gran escala de los suelos
contaminados
con:
productos petroqumicos incluyendo, pero no limitado a: acetona,
alcoholes, benceno,
etilbenceno, metil etil cetona (MEK), metil isobutil cetona
pgina 322
Recuperacin y remediacin de los residuos slidos mediante Proceso
Bio-qumica 309
(MIBK), hidrocarburos de petrleo, tolueno, de dos y de tres anillos PAHs,
y xileno
otros contaminantes, incluyendo: hidrocarburos alifticos clorados (por
ejemplo,
tricloroetileno), pas tamiz molecular de las torres de embalaje,
qumicas
desechos de fabricacin y pesticidas
compuestos regulados incluyendo constituyentes peligrosos
subyacentes
(UHC) se criban antes de la aceptacin. Los suelos co-contaminado con
metales pueden ser aceptados en funcin de su concentracin.
Bio-in-a-Box SM : Bio-in-a-Box SM se basa en los mismos principios que
tanto
Biosite SM y tirar SM , pero est diseado para operar en el interior en un
tiempo relativamente
a menor escala. En lugar de formarse en montculos de tierra de largo, el
suelo contaminado se humedece, se mezcla con nutrientes y la
costumbre de cosecha propia
microorganismos y, despus se colocaron en recipientes cerrados
llamados fase slida
biorreactorespara incubacin. Estos recipientes pueden o no pueden
estar vinculadas a
de aireacin y de vaco tubos, dependiendo de los contaminantes que se
procesan.
En tan slo unas semanas, el suelo descontaminado estar listo para su
eliminacin en vertederos
o reintroduccin en el medio ambiente.
10.10.5 Composicin para Remediation- Residuos Slidos
Patente de Estados Unidos
Los residuos slidos contaminados con metales catinicos se remedi
con una composicin
que reduce la movilidad de los metales. Un producto reciclado se forma
teniendo
mejores propiedades estructurales para su posible uso como relleno de
ingeniera, tales como carreteras
material de base. Comprendiendo dicha composicin una emulsin de
asfalto o de aceite de resina
pitch en agua y un agente de fijacin qumica.
La invencin se refiere al tratamiento y remediacin de los residuos
slidos
que contiene metales catinicos. Ms particularmente, esta invencin se
refiere a la
formulacin de emulsiones de base orgnica que contienen quelante o
complejante
agentes o agentes para formar compuestos metlicos insolubles. Las
emulsiones son entonces
utilizado para servir dos funciones: 1) inmovilizar el metal catinico
como se determina
mediante la prueba de TCLP de la EPA; y 2) crear un producto reciclado
con la mejora estructural
propiedades en comparacin con los residuos slidos no tratados. Los
residuos slidos remediado
a continuacin, se vuelve a utilizar en el sitio o transferido fuera del sitio
para uso comercial.
10.11 Los rellenos sanitarios y vertederos
Rellenos sanitarios y vertederos utilizados para la eliminacin de los
residuos slidos municipales requieren
la rehabilitacin de vez en cuando, sobre todo en el contexto de la
mejora de dichas instalaciones
en las economas en desarrollo. Las medidas de rehabilitacin y las
estrategias deben asegurar
que en todas las etapas del ejercicio, las preocupaciones ambientales
incluidas las aguas subterrneas
contaminacin resultante de la migracin de lixiviados, la transmigracin
de contaminantes
y la esttica no se pasan por alto. La fitorremediacin ofrece soluciones
viables a
muchos de los problemas ambientales relacionados con la rehabilitacin
de vertederos y tiene varias
aplicaciones como se resume en la Tabla 10.4.
Pgina 323
310 DS Ramteke
T
capaces 10.4:
Aplicacin de la fitorremediacin
No Seor.
Solicitud
Descripcin
contaminantes
T
ipos de plantas
suelos
1.
Phytotransformation
Sorcin, uptak
E y transformacin de
contaminantes
Organics, incluyendo nitroaromticos
y alifticos clorados
T
Rees y hierbas
2.
rizosfera
biodegradacin
biodegradacin microbiana en el
rizosfera estimulado por las plantas
Organics: por ejemplo, PAHs, petrleo
hidrocarburos, TNT
, pesticidas
Pastos, la alfalfa, el hombre
Y otras especies
incluyendo rboles
3.
fitoestabilizacin
Estabilizacin de contaminantes por
vinculante, que agujerea suelos, y / o disminucin de la
lixiviacin
Metales, org
ANICS
V
plantas arious con fibrosa profunda o fi
sistema raz
4.
fitoextractor
Uptak
e de los contaminantes del suelo por las
races o harv
Estable brotes
Metales, Inorg
ANICS, radionucleidos
V
ariedad de natural y seleccionado
hiperacumuladoras por ejemplo,
Thalaspi,
Alyssum, Brassica
W
ater / gramo de agua
5.
filtracin Rhizofi
La sorcin de contaminantes de
soluciones acuosas sobre o dentro de las races
Metales, radionucleidos,
orgnicos hidrfobos
Las plantas acuticas (por ejemplo, lenteja de agua,
Penn
YW
ORT), tambin
Brassica
,
las f ow
Er
6.
control hidrulico
captura de penacho /
phytotrans
Remo
val de grandes volmenes de w
ater
de los acuferos por rboles
Inorg
ANICS, nutrientes, clorados
solv
entos
lamos, sauces
7.
Phyto
vo
latilization
Uptak
E y la volatilizacin del suelo
W
Agua y groundw
ater; conv
ersion de
Se y Hg a especies qumicas voltiles
V
olatile org
compuestos Anic, Se,
Hg
T
Rees para V
AO en planta w
ater,
Brassica,
hierbas, humedales plantas
para Se. Hg en suelos / sedimentos
8.
V
egetativ
e tapas
El uso de plantas para retardar la lixiviacin de
compuestos peligrosos de landfi LLS
Organics, compuestos inorgnicos, w
un guiso
ater,
lixiviados de vertedero
T
Rees como el lamo, plantas (por ejemplo,
alfalfa) y gramneas
9.
Los humedales construidos
El uso de plantas como parte de una construccin
ecosistema para remediar contaminantes
de w acuosa
corrientes aste
Metales, drenaje cido de minas,
industriales y municipales
W
un guiso
ater
Sin flotante, emergente, o
v sumergida
egetation, caas,
aneas, bamb
Fuente:
Schnoor (2002)
pgina 324
Recuperacin y remediacin de los residuos slidos mediante Proceso
Bio-qumica 311
10.12 Descripcin y Aplicaciones
de origen natural biorremediacin y fitorremediacin se han utilizado
durante
siglos. Por ejemplo, la desalacin de tierras agrcolas por fitoextraccin
tiene una larga tradicin. tecnologas de biorremediacin pueden
clasificar en general
como in situ o ex situ. En biorremediacin in situ implica el tratamiento
de la contaminada
material en el sitio mientras ex situ implica la eliminacin de la
contaminada
material a ser tratado en otra parte. Algunos ejemplos de tecnologas de
biorremediacin
se bioventing, el cultivo de la tierra, biorreactor, compost,
bioaumentacin,
rizofiltracin y bioestimulacin.
La biorremediacin puede ocurrir espontneamente (atenuacin natural)
o puede ser estimulado
en medio de la adicin de fertilizantes para aumentar la
biodisponibilidad dentro del medio
(Bioestimulacin). Los avances recientes tambin han demostrado su
eficacia a travs de la
Adems de las cepas de microbios emparejados al medio para mejorar el
residente
la capacidad de poblacin de microbios para descomponer
contaminantes (bioaumentacin).
No todos los contaminantes, sin embargo, se tratan fcilmente por
biorremediacin usando
microorganismos. Por ejemplo, los metales pesados como el cadmio y el
plomo son
no absorbida o capturado por organismos fcilmente. La asimilacin de
metales
Higo. : 10,9 mtodos de remediacin del suelo.
pgina 325
312 DS Ramteke
como el mercurio en la cadena alimentaria puede empeorar las cosas.
La fitorremediacin es
til en estas circunstancias, ya que las plantas naturales o plantas
transgnicas son
capaz de bioacumularse estas toxinas en sus partes areas, que luego
se
cosechado para su eliminacin. Los metales pesados en la biomasa
cosechada pueden estar ms lejos
se concentr mediante incineracin o incluso reciclado para uso
industrial.
La eliminacin de una amplia gama de contaminantes y residuos de la
medio ambiente requiere el aumento de nuestra comprensin de la
importancia relativa
de diferentes vas y redes de regulacin de flujo de carbono, en
particular
entornos y para compuestos particulares y que sin duda acelerar
el desarrollo de tecnologas de biorremediacin y biotransformacin
procesos.
procesos del suelo de biorremediacin se pueden implementar usando
una variedad
de diferentes configuraciones de ingeniera que van desde en subsuelo
situ
(Sin excavar) procesos para la aplicacin de reactor de suspensin del
suelo completamente mezclado
sistemas para tratamiento de suelos excavados. La tecnologa es
interdisciplinario,
que implica la microbiologa, la ingeniera, la geologa, la qumica y
quizs la ecologa
otras disciplinas.
Varios mtodos biolgicos y no biolgicos utilizados en la recuperacin
de suelos son
se muestra en la Fig. 10.9. Si bien hay muchos aspectos de la
biodegradacin relacionada con el suelo
y biorremediacin, este artculo se centrar principalmente en la
recuperacin de producto qumico
contaminantes en el suelo y no abordar las cuestiones de reciclado de
biorresiduos.
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La fitorremediacin de bajo nivel de residuos nucleares 315
11
La fitorremediacin de Bajo Nivel
Desperdicios nucleares
MH Fulekar y Anamika Singh
11.1 Introduccin
Residuos, por definicin, es cualquier material (materiales slidos, tales
como residuos de proceso como
as como lquidos y efluentes gaseosos) que ha sido o va a ser
desechado como siendo
de no uso adicional. Los residuos radiactivos es un producto de desecho
que contiene radiactivo
material. Por lo general, es el producto de un proceso nuclear, como la
fisin nuclear.
Sin embargo, las industrias no estn conectados directamente a la
industria nuclear pueden tambin
producir residuos radiactivos. La mayora de los residuos radiactivos es
de bajo nivel
Residuos, que significa que contiene bajos niveles de radiactividad por
masa o volumen.
La radiacin de este tipo de residuos se protege mediante el uso de ropa
protectora,
pero la contaminacin radiactiva todava peligroso se produce en un
cuerpo humano a travs
ingestin, inhalacin, absorcin, o inyeccin.
La cuestin de los mtodos de eliminacin de los residuos nucleares es
uno de los ms urgentes
los problemas actuales que enfrenta la industria nuclear internacional
cuando se trata de
establecer un plan de produccin de energa a largo plazo; sin embargo,
hay una esperanza de que pudiera
ser resuelto de manera segura. Un informe en el que la perspectiva de la
industria nuclear en este
problema se presenta en un documento del OIEA (El Atmica
Internacional
Agencia de la Energa), publicado en octubre de 2007. En l se resume el
estado actual de
conocimiento cientfico sobre si los residuos podra encontrar su camino
desde un enterramiento profundo
instalacin de nuevo a la tierra y bebiendo agua y poner en peligro la
salud de los seres humanos
y otras formas de vida. En los Estados Unidos, DOE reconoce los avances
en
hacer frente a los problemas de residuos de la industria, y la
recuperacin exitosa de
algunos sitios contaminados; todava cierta incertidumbre y las
complicaciones en el manejo
el problema adecuadamente, de manera rentable, y en el marco de
tiempo proyectado persiste.
En otros pases con menor capacidad o voluntad para mantener la
integridad del medio ambiente
el problema sera an ms problemtica.
MH Fulekar (ed.),
DOI 10.1007 / 978-90-481-3678-0_11, 2010 de Capital Publishing
Company
La tecnologa de biorremediacin: Avances recientes ,
315
pgina 329
316 MH Fulekar y Anamika Singh
Slo en los Estados Unidos, el Departamento de Energa de los Estados
existen
millones de galones de desechos radiactivos, as como miles de
toneladas de
combustible nuclear gastado y materialy tambinenormes cantidades
de suelo contaminado
y el agua.A pesar de grandes cantidades de residuos, el DOE ha
declarado una meta de
la limpieza de todos los sitios contaminados actualmente con xito en
2025. Por ejemplo,
Ohio sitio tena 31 millones de libras de productos de uranio, 2.5 mil
millones de libras de
residuos, 2,75 millones de yardas cbicas de tierra y escombros
contaminados, y un 223
acres parte del subyacente Gran Miami Acufero tenan niveles por
encima de uranio
los estndares de agua potable. Los Estados Unidos tienen al menos 108
sitios designados como reas
que estn contaminados e inutilizables, a veces muchos miles de acres.
DOE desea limpiar o mitigar muchos o todos en el ao 2025; sin
embargo, la tarea puede ser
difcil y se reconoce que algunos nunca puede ser completamente
remediados.
En tan slo una de estas designaciones 108 ms grandes, Oak Ridge
National Laboratory
tenido al menos 167 conocido sitios de liberacin de contaminantes con
tres subdivisiones de
el 37.000 acres (150 km 2 ) sitio. Algunos de los sitios de los Estados
Unidos eran ms pequeas en la naturaleza;
Sin embargo, los problemas de limpieza eran ms fciles de tratar, y el
DOE tiene xito
limpieza completa, o al menos el cierre de varios sitios.
11.2 Caractersticas de los residuos nucleares en la India
Tabla 11.1: Caractersticas de los residuos lquidos y slidos generados
en India
Residuos lquidos
Residuo slido
Fuente
Promedio anual
generacin (m 3 )
Actividad especfica
(Bq / ml)
Promedio anual
generacin (m 3 )
Radiacin
campo (mCi / l)
Investigacin
reactor
16000
1-3
20-25
0,01-1000
reactor de potencia
BWR
26.800
50-100
80
,05-1.000
PHWR
26.800
0,1-1
100
0,01-1000
Combustible-
reprocesamiento
instalaciones
34300
4-20
130
0,01-500
I + D de laboratorio
12.000
1-4
50
0,01 hasta 7000
Fuente: Rao, 2001.
Los residuos radiactivos comprende tpicamente un nmero de
radioistopos que
son configuraciones inestables de elementos que se descomponen,
emiten radiaciones ionizantes
que puede ser perjudicial para la salud humana y para el medio
ambiente.
11.3 Farmacocintica
La exposicin a altos niveles de residuos radiactivos puede causar daos
graves o la muerte.
El tratamiento de un animal adulto con radiacin o alguna otra mutacin
causante
pgina 330
La fitorremediacin de bajo nivel de residuos nucleares 317
efecto, tal como un frmaco anti-cncer citotxico, puede causar cncer
en el animal.
En los seres humanos se ha calculado que una dosis 5 sievert suele ser
mortal, y el
riesgo de por vida de morir de cncer inducido por radiacin de una
dosis nica de 0,1
sieverts es 0,8%, el aumento en la misma cantidad por cada 0,1 sievert
adicional
incremento de la dosificacin. La radiacin ionizante hace que las
deleciones en los cromosomas. Si una
organismo en desarrollo como un nio no nacido se irradia, es posible un
parto
defecto puede ser inducida, pero es poco probable este defecto ser en
un gameto o una
gameto formando celular. La incidencia de mutaciones inducidas por la
radiacin en los seres humanos
estando indeterminada, debido a fallos en los estudios realizados hasta
la fecha.
Dependiendo del modo de desintegracin y la farmacocintica de un
elemento
(Cmo el cuerpo procesa y lo rpido), la amenaza debido a la exposicin
a una
determinada actividad de un radioistopo ser diferente. Por ejemplo
yodo-131 es un corto
vivido beta y gamma emisor, sino porque se concentra en la glndula
tiroides,
es ms capaz de causar lesiones de cesio-137 que, al ser soluble en
agua,
se excreta rpidamente en la orina. De manera similar, el emisor alfa
actnidos y
el radio se consideran muy perjudicial, ya que tienden a tener media
biolgica larga
vive y su radiacin tiene un alto valor de transferencia lineal de energa.
Debido a tales
diferencias, las normas que determinan la lesin biolgica difieren
ampliamente de acuerdo con
el radioistopo, y algunas veces tambin la naturaleza del compuesto
qumico
que contiene el radioistopo.
El objetivo principal de la gestin y eliminacin o destruccin de los
radiactivo
(U otro) de residuos es proteger a las personas y el medio ambiente.
Esto significa aislar,
diluyendo, o destruir (transmutating) los residuos de manera que la tasa
o concentracin
de cualquier radionucleido regres a la biosfera es inofensivo. Para
lograr esto, el
tecnologa preferida hasta la fecha ha sido profunda y entierro seguro
para los ms
desechos peligrosos; transmutacin, almacenamiento recuperable a
largo plazo, y la eliminacin
al espacio tambin se han sugerido.
A pesar de la presente tecnologa de tratamiento y medidas de
proteccin, las
residuos que contienen material radiactivo entra en el medio ambiente
(Fig. 11.1).
11.4 Fuentes de Residuos
Los desechos radiactivos provienen de varias fuentes. La mayora de los
residuos
se origina en el ciclo del combustible nuclear y armas nucleares
reprocesamiento.
Sin embargo, otras fuentes incluyen los desechos mdicos e industriales,
as como
materiales radiactivos naturales (NORM) que se pueden concentr
como resultado de la transformacin o el consumo de carbn, petrleo y
gas, y algunos
minerales.
11.5 Tipos de residuos radiactivos
Aunque no de forma significativa radiactivo, colas de tratamiento de
uranio son residuos. Ellos
son material subproducto de la transformacin aproximada de mineral
de uranio-cojinete. Ellos
pgina 331
318 MH Fulekar y Anamika Singh
se hace referencia a veces como 11 (e) 2 residuos, de la seccin de la
Atmica de EE.UU.
Ley de Energa que las define. relaves de uranio tpicamente contienen
tambin
metales pesados qumicamente peligrosos tales como plomo y arsnico.
montculos de vastas
relaves de uranio se dejan a muchos sitios mineros antiguos,
especialmente en Colorado,
Nuevo Mxico y Utah.
11.5.1 Bajo Nivel de residuos (LLW)
Bsicamente todos los residuos radiactivos que no es de alto nivel de
residuos radiactivos o
residuos de nivel intermedio o residuos transurnicos se clasifica como
de bajo nivel radiactivo
residuos. En cuanto al volumen que puede ser mayor que el de los
residuos radiactivos de alta actividad o
residuos de nivel intermedio radiactivo o residuos transurnicos, pero la
radiactividad
contenida en el bajo nivel de residuos radiactivos es significativamente
menos y hechas
de istopos que tienen mucho ms cortas vidas medias que la mayora
de los istopos en
de alto nivel de residuos o de nivel intermedio residuos radiactivos o
residuos transurnicos.
Grandes cantidades de residuos contaminados con pequeas cantidades
de radionclidos,
tales como equipos contaminados (cajas de guantes, filtros de aire,
materiales de blindaje
y equipos de laboratorio), la ropa de proteccin, trapos de limpieza, etc.,
constituyen
De bajo nivel de residuos radiactivos. Incluso los componentes de
reactores fuera de servicio
pueden venir en esta categora (despus de los procedimientos de
descontaminacin parte). los
nivel de radiactividad y la vida media de los istopos radiactivos en los
residuos de bajo nivel
son relativamente pequeas. El almacenamiento de los residuos por un
perodo de 10 a 50 aos permitir
la mayora de los istopos radiactivos en residuos de bajo nivel a la
caries, en cuyo punto el
residuos puede estar dispuesto fuera como basura normal.
Higo. 11.1: La exposicin del ser humano a material radiactivo.
Pgina 332
La fitorremediacin de bajo nivel de residuos nucleares 319
Puede venir como una sorpresa que varias investigaciones han
demostrado que
la exposicin de los mamferos a niveles bajos de radiacin de hecho
puede ser beneficioso,
incluyendo, aumento de la esperanza de vida, mayor capacidad
reproductiva, mejor las enfermedades
resistencia, aumento de la tasa de crecimiento, una mayor resistencia a
las dosis de radiacin ms altas,
mejor la funcin neurolgica, una mejor cicatrizacin de la herida y la
induccin de tumores ms baja
y el crecimiento (Devaney, 1998). efectos beneficiosos en plantas
incluyen aceleraron
el crecimiento y el desarrollo y el aumento de las cosechas.
11.5.2 residuos de nivel intermedio (ILW)
Contiene cantidades ms altas de radioactividad y en algunos casos
requiere blindaje.
ILW incluye resinas, lodos qumicos y encamisado de combustible reactor
de metal, as
como materiales contaminados de desmantelamiento reactor. Se puede
solidificarse
en hormign o asfalto para su eliminacin. Como regla general, los
residuos de corta duracin (principalmente
materiales de los reactores no combustible) est enterrado en
repositorios poco profundas, mientras que a largo
residuos vivido (de combustible y el combustible reprocesado) se
deposita en el subsuelo
instalaciones. regulaciones de Estados Unidos no definen este tipo de
residuos; se utiliza el trmino
en Europa y en otros lugares.
frascos de residuos de alta actividad son transportados en tren en el
Reino Unido.
Cada matraz se construye de 14 in (360 mm) de acero slido de espesor
y pesa
ms de 50 toneladas.
11.5.3 Alto Nivel de residuos (RAA)
residuos radiactivos de alto nivel se conceptualiza como los residuos que
consiste en la
combustible gastado, los efluentes lquidos procedentes del
reprocesamiento del combustible gastado
y los slidos en la que se convierte el residuo lquido. Se compone, en
general,
material del ncleo de un reactor nuclear o un arma nuclear. Estos
residuos
incluye uranio, plutonio y otros elementos altamente radiactivos creados
durante la fisin, compuesto de fragmentos de fisin y transurnicos.
(Tenga en cuenta que este
definicin no se especifica la radiactividad que debe estar presente para
categorizar
como residuos radioactivos de alto nivel.) Estos dos componentes tienen
diferentes tiempos a
decaer. El radiactivo fragmentos de fisin descomposicin a diferentes
elementos estables va
diferentes cadenas de reacciones nucleares que implican, y las
emisiones a la inocua
los niveles de radiactividad, y esto tomara alrededor de 1000 aos. Por
otra parte,
transurnicos toman cerca de 500.000 aos para llegar a tales niveles.
Salida de calor tiene una duracin
ms de 200 aos. La mayora de los istopos radiactivos en residuos de
alto nivel emiten grandes
cantidades de radiacin y tienen muy larga vida media (algunos de ms
de
100.000 aos), la creacin de largos periodos de tiempo antes de que
los residuos se depositan en seguros
los niveles de radiactividad. Como regla bsica se puede observar que
los volmenes de bajo nivel
residuos radiactivos y los residuos de nivel intermedio superan
ampliamente los de gastado
combustible o de alto nivel de residuos radiactivos. A pesar de esta
realidad en el terreno, el pblico
preocupaciones relacionadas con la eliminacin de los residuos
radiactivos de alta actividad es en todo el mundo y
bastante controvertido.
pgina 333
320 MH Fulekar y Anamika Singh
11.5.4 Transurnidos Residuos (TRUW)
Segn la definicin de regulaciones de Estados Unidos, sin tener en
cuenta para formar u origen, se trata de residuos
contaminado con alfa-radionucleidos emisores transurnicos con vidas
medias
mayor de 20 aos, y las concentraciones mayores de 100 nCi / g (3,7
MBq / kg),
con exclusin de Alto Nivel de residuos. Elementos que tienen un
nmero atmico mayor que
de uranio son llamados transurnicos ( ms all de uranio). Debido a
su larga media
vidas, TRUW est dispuesto con ms cautela que cualquiera de nivel
bajo o intermedio
desechos de actividad. En los EE.UU. surge principalmente de la
produccin de armas, y consiste
de ropa, herramientas, trapos, residuos, desechos y otros artculos
contaminados con
pequeas cantidades de elementos radiactivos (principalmente
plutonio).
Segn la ley estadounidense, los residuos transurnicos se clasifica
adems en contacto-
manejado(CH) y-remoto manejado(RH) sobre la base de la dosis de
radiacin
medida en la superficie del contenedor de residuos. CH TRUW tiene una
dosis superficie
tasa no mayor que 200 mrem por hora (2 mSv / h), mientras que RH
TRUW tiene
una tasa de dosis en la superficie de 200 mrem por hora (2 mSv / h) o
mayor. CH TRUW
no tiene la muy elevada radiactividad de residuos de alta actividad, ni su
fuego alto
generacin, pero RH TRUW pueden ser altamente radiactivo, con tasas
de dosis superficiales
hasta 1000,000 mrem por hora (10.000 mSv / h). Actualmente, Estados
Unidos
se deshace de TRUW generado a partir de las centrales nucleares y las
instalaciones militares
de forma permanente en el aislamiento de desechos Planta Piloto.
11.5.5 de accidentes relacionados con los desechos radiactivos
Un nmero de incidentes se han producido cuando se dispuso material
radiactivo
de forma incorrecta, el blindaje durante el transporte era defectuoso, o
cuando se trataba simplemente
abandonados o incluso robado de un almacn de residuos. En la Unin
Sovitica, los residuos almacenados
en el Lago Karachay fue volado sobre la zona durante una tormenta de
polvo despus de que el lago tena
parcialmente secado. En Maxey plana, una instalacin de residuos
radiactivos de bajo nivel situado en
Kentucky, zanjas de contencin cubierto de suciedad, en lugar de acero
o de cemento,
derrumbado bajo fuertes lluvias en las trincheras y lleno de agua. El
agua
que invadido las trincheras se convirtieron radiactivo y tuvo que ser
dispuesta fuera en la
Maxey instalacin plana en s. En otros casos de accidentes de residuos
radiactivos, lagos
o estanques con desechos radiactivos accidentalmente se desbord en
los ros durante
tormentas excepcionales. En Italia, varios depsitos de residuos
radiactivos permiten el flujo de materiales
en el agua del ro, contaminando as el agua apta para el uso domstico.
En Francia, en
el verano de 2008 numerosos incidentes ocurri; en una, en la planta de
Areva
en Tricastin, se inform de que durante una operacin de drenaje de
lquido que contiene
uranio sin tratar se desbord de un tanque defectuoso y alrededor de 75
kg de la
material radiactivo se filtr en el suelo y, desde all, en dos ros
cerca; en otro caso, ms de 100 personal estaban contaminados con
dosis bajas de
radiacin. (Http://en.wikipedia.org/wiki/Radioactive_waste)
La compactacin de material radiactivo abandonado ha sido la causa de
varios otros casos de exposicin a la radiacin, sobre todo en las
naciones en desarrollo, que
puede tener menos regulacin de sustancias peligrosas (y algunas veces
menos general
Pgina 334
La fitorremediacin de bajo nivel de residuos nucleares 321
educacin sobre la radiactividad y sus peligros) y un mercado para
scavenged
bienes y chatarra. Los carroeros y los que compran el material son
casi siempre conscientes de que el material es radiactivo y se selecciona
por su
esttica o valor de desecho. Irresponsabilidad de parte del material
radiactivo de
propietarios, por lo general un hospital, una universidad o militar, y la
ausencia de regulacin
sobre residuos radiactivos, o la falta de aplicacin de tales reglamentos,
se ha
sido factores importantes en exposiciones a la radiacin.
Eliminacin de residuos 11.6
Gestin de residuos radiactivos implica minimizar los residuos
radiactivos,
el manejo de residuos de embalaje con seguridad, almacenamiento y
eliminacin segura, adems de mantener
los sitios de origen de la radiactividad limpia. Las malas prcticas
conducen a problemas en el futuro.
De ah la eleccin de los lugares donde la radiactividad se va a gestionar
con seguridad es igualmente
importantes, adems de los conocimientos tcnicos y las finanzas, para
dar lugar seguro y
soluciones ecolgicamente racionales. La Agencia Internacional de
Energa Atmica
(OIEA) est promoviendo la aceptacin de algunos principios bsicos
para todos los pases
gestin de residuos radiactivos. stas incluyen:
(I) Proteccin de nivel aceptable de proteccin de la salud humana;
(Ii) Suministro de un nivel aceptable de proteccin del medio ambiente;
(Iii) Aunque se prevean (i) y (ii), el aseguramiento de efectos
insignificantes ms all
fronteras nacionales;
(Iv) el impacto aceptable en las generaciones futuras; y
(V) No se carga indebida a las generaciones futuras.
Hay otros aspectos legales, de control, generacin, gestin de seguridad
y
adems.
Las siguientes opciones se han emitido algn momento u otro. Cada uno
de
las opciones exige estudios serios y evaluaciones tcnicas:
depsitos geolgicos profundos
vertido en el ocano de enterramiento de los Fondos Marinos
Eliminacin de Sub-fondo marino
Mtodo de eliminacin de residuos Subductive
La transformacin de los residuos radiactivos a los residuos estables
no radiactivos
El envo de al Sol
11,7 gestin de desechos radiactivos en la India
eliminacin de residuos est descartando los residuos sin intencin de
recuperarlos. Residuos
medios de gestin de toda la secuencia de operaciones a partir de la
generacin
de los residuos y que termina con la eliminacin.
Al igual que el consumo per cpita de energa elctrica est relacionada
con el nivel de
vivir en un pas, la generacin de electricidad de origen nuclear puede
considerarse
Pgina 335
322 MH Fulekar y Anamika Singh
como una medida mnima de los residuos radiactivos que se genera por
un pas y
por lo tanto, la magnitud relacionada de gestin de residuos radiactivos.
En la escala
de la cuota de generacin de electricidad nuclear, la India ocupa el
cuarto lugar de la parte inferior
en unos 30 pases. A partir del ao 2000, la participacin de la
electricidad nuclear de la India
generacin en la generacin total de electricidad en el pas fue de 2,65%
en comparacin
a 75%, 47%, 42,24%, 34,65%, 31,21%, 28,87%, 19,80%, 14,41% y
12,44%
de Francia, Suecia, la Repblica de Corea, Japn, Alemania, Reino Unido,
EE.UU., Rusia
y Canad, respectivamente. Los reactores en funcionamiento producen
en gigavatios netos
(mil millones (10 9 ) vatios) (E) en los ltimos pases casi 63, 9, 13, 44,
21, 13,
97, 20 y 10, respectivamente; los reactores de la India en el rendimiento
de operacin de 1,9 en esta escala
(Ambos datos son segn OIEA Informe de 2000). Por lo tanto la magnitud
de radiactivo
la gestin de residuos en la India podra ser minsculo en comparacin
con la de otros
pases, sobre todo si se tiene en cuenta el arsenal nuclear ya
en las existencias en los pases con armas nucleares. A medida que ms
reactores de energa vienen
en funcionamiento y como emplazamiento de armas lleva rutas ms
profundas las necesidades de los radiactivo
aumento de la gestin de residuos y, en este contexto, la experiencia de
otros pases
proporcionara lecciones tiles.
gestin de residuos radiactivos ha sido una parte integral de todo el
nucleares
ciclo del combustible en la India. residuos radiactivos de bajo nivel y de
los residuos de nivel intermedio
surgen de las operaciones de los reactores y plantas de reprocesamiento
de combustible. El bajo nivel
lquido residuos radiactivos se retiene como lodos despus del
tratamiento qumico, lo que resulta
en factores de descontaminacin que van desde 10 a 1000. Los residuos
radiactivos slidos es
compactado, rescatados o se incineran dependiendo de la naturaleza de
los residuos. Solar
la evaporacin de los residuos lquidos, la smosis inversa y la
inmovilizacin utilizando cemento
matriz se adoptan en funcin de la forma de residuos. subterrnea de
ingeniera
trincheras en las instalaciones de eliminacin cerca de la superficie se
utilizan para la eliminacin de slidos
residuos; estos sitios de disposicin estn bajo la vigilancia y el control
continuo.
(HEPA) filtros de aire para partculas de alta eficiencia se utilizan para
minimizar aire Borne
radioactividad. Durante las instalaciones de gestin de residuos
radiactivos ltimas cuatro dcadas
se han establecido en Trombay, Tarapore, Rawatbhata, Kalpakkam,
Narora,
Kakrapara, Hyderabad y Jaduguda, junto con el crecimiento de la energa
nuclear
y plantas de reprocesamiento de combustible. enfoque de barreras
mltiples es seguido en la manipulacin
residuos slidos (Rao, 2001).
11,8 fitorremediacin de metales pesados y
Radionclidos: Estudios de casos
Los estudios de investigacin llevados a cabo en la remediacin de
metales pesados y
radionucleidos y descontaminacin de LLNW de la contaminada
ambiente usando la tcnica reciente, la fitorremediacin, se citan.
Los residuos nucleares genera a travs de procesamiento qumico en la
industria nuclear o
programa de armas nucleares han mejorado el nivel de medio ambiente
peligrosos
contaminantes. Los residuos generados por la industria nuclear contiene
en general
radionclidos (U, Pu, Tc, Cs y Sr), metales pesados, tales como Cr, Pb,
Hg, Zn y
pgina 336
La fitorremediacin de bajo nivel de residuos nucleares 323
Cd junto con miradas de orgnicos txicos (por ejemplo, BTEX,
tricloroetileno, TBP,
DBP etc.). Los mtodos convencionales como los tratamientos fsico-
qumicos no son
siendo practicada para descontaminar el bajo nivel de Desechos
Nucleares (LLNW) debido
a la presencia de baja concentracin y grandes volmenes de
contaminantes. los
orgnicos as como productos qumicos inorgnicos presentes en los
residuos nucleares a encontrar su
en forma de agua del suelo provocando la contaminacin del medio
ambiente. Estudios recientes han demostrado
que los contaminantes de residuos nucleares pueden tener tanto efectos
letales y letales en sub
una amplia variedad de organismos vivos cuando se superan las
concentraciones. Algunos
metales pesados estn siendo sometidos a la bioacumulacin y la
biotransformacin
y puede suponer un peligro para la salud humana cuando se transfiere a
travs de la cadena alimentaria.
La fitorremediacin de metales pesados con las plantas cultivadas in
vitro en suelo-frtil
medio acutico es un avance reciente para remediar los metales
pesados de
sitios contaminados.
tecnologa de la fitorremediacin utiliza las plantas verdes para reducir,
eliminar, degradan
o inmovilizar ambientales contaminantes / toxinas de suelo y el agua
con el objetivo
de la restauracin de sitios de la zona a una condicin utilizable para el
propsito previsto (Cunningham
et al., 1995; Flathman y Lanza, 1998; Sal et al., 1998; Weber et al.,
2001;
Wendy et al., 2006). La eficacia de la tecnologa depende
fitorremediacin
en la seleccin de plantas adecuados o especies de plantas. Las plantas
son nicas
organismos equipadas con notables capacidades metablicas y
adsorcin, como
as como los sistemas de transporte que pueden tomar los nutrientes o
contaminantes selectivamente
del suelo y del agua (Fulekar, 2005). La tecnologa para la
fitorremediacin
remediacin de radionucleidos se demuestra en Fig.11.2.
Higo. 11.2: fitorremediacin de radionucleidos.
pgina 337
324 MH Fulekar y Anamika Singh
11.8.1 fitorremediacin de cadmio, plomo y zinc por
Brassica juncea L. Czern y Coss
La remediacin de metales pesados en el medio ambiente acutico
depende de la
concentracin de metales, especies de plantas, el pH y los nutrientes
disponibles para el
crecimiento. El uso potencial de una planta en la remediacin puede
evaluarse mediante la exposicin
al metal txico en presencia de medio nutriente. En el presente trabajo
de investigacin
estudio, medio nutriente adecuado, es decir medio Steinberg se ha
tomado para
el crecimiento adecuado de las plantas y enriquecida con
concentraciones variables de metales
(Cd, Pb y Zn) viz. 5, 10, 20, y 50 mg ml -1 en cada montaje experimental.
los
concentracin de metal (en cada configuracin) desde el medio
ambiente acutico evaluado en
un intervalo de 0 , 1 st , 3 rd 7 , 14 y 21 st se continu da y
crecimiento de las plantas
hasta un perodo de 21 das. Despus de la finalizacin de la
fitorremediacin, B. juncea
plantas se cosecharon y se midieron Cd, Pb y Zn concentracin metales
en las races y brotes de la planta por separado. El presente estudio
pone de manifiesto la
potencial de Brassica juncea (mostaza de la India) para ocupar los
metales pesados tales como
cadmio, plomo y zinc a partir de medio ambiente acutico.
El estudio investig la recuperacin de metales pesados de las acutica
medio ambiente utilizando planta verde B. juncea . Despus de 21 das
de la absorcin, la pesada
metales se agotaron de la solucin de crecimiento que indica una
absorcin exitosa
de cadmio, plomo y zinc por B. juncea (Anamika et al., 2008).
La reduccin en la concentracin de estos metales en el medio se
atribuy
para su absorcin por las plantas. Las figuras 11.3 (a, b y c) demostrar el
agotamiento
de metales a partir de la solucin acutica entre el 1 y el da 21
mostrando
Higo. 11.3A: El agotamiento de cadmio de la solucin durante 21 das
de la absorcin por
Brassica juncea .
pgina 338
La fitorremediacin de bajo nivel de residuos nucleares 325
cadmio (35,2-88,9%), plomo (26 a 80,1%), y zinc (30 a 89,8%),
respectivamente. los
metales se tomaron en cantidades directamente proporcional a su
concentracin en
la solucin proporcionalmente durante todo el perodo de 21 das (Figs
11.3A, 11.3b
Higo. 11.3b: El agotamiento de plomo de la solucin durante 21 das de
la absorcin por
Brassica juncea .
Higo. 11.3c: El agotamiento de zinc de la solucin durante 21 das de la
absorcin por
Brassica juncea .
pgina 339
326 MH Fulekar y Anamika Singh
y 11.3c). La absorcin de zinc por B. juncea se encontr que era ms
alta en comparacin con
cadmio y plomo.
La biomasa de las plantas se determin con respecto a la absorcin de
cadmio, plomo
y zinc por B. juncea . No hubo diferencias significativas en la biomasa de
B. juncea cuando se expone a cadmio, plomo y zinc a diversas
concentraciones
que van desde 0 a 50 mg ml -1 (Tabla 11.2). Esto demuestra que B.
juncea es tolerante
y tiene potencial para crecer en ambientes contaminados y tomar de
manera eficiente
metales pesados arriba.
Tabla 11.2: La biomasa de B. juncea despus de 21 das de exposicin
a los metales pesados
contaminada solucin nutritiva Steinberg *
Metal
Concentracin
Peso seco (g)
(ml g -1 )
races
Los brotes
Discos compactos
Controlar
0,011 0,002
0,080 0,017
5
0,008 0,004
0,076 0,019
10
0,005 0,002
0,055 0,006
20
0,007 0,003
0,063 0,014
50
0,009 0,004
0,079 0,009
Pb
Controlar
0,037 0,007
0,124 0,007
5
0,022 0,003
0,064 0,009
10
0,014 0,004
0,072 0,013
20
0,017 0,002
0,095 0,017
50
0,028 0,005
0,107 0,014
Zn
Controlar
0,020 0,008
0,063 0,012
5
0,016 0,003
0,057 0,007
10
0,014 0,002
0,056 0,003
20
0,013 0,004
0,057 0,008
50
0,015 0,004
0,061 0,009
* Los valores son promedios de tres repeticiones SD
Tabla 11.3 demuestra acumulacin de zinc, cadmio y plomo en
diferentes
concentraciones en la raz y brotes de mostaza de la India ( B. juncea) .
Los resultados muestran
que los metales se acumulan ms en las races que en los brotes. El
nivel de aumento
se observ contenido de metal con el aumento de concentracin de
metal hasta 50 g
ml -1 (ppm). Coeficiente de bioacumulacin tambin ha sido analizado.
En la biomasa vegetal recolectado, los metales mostraron una tendencia
creciente
como su concentracin en la solucin de nutrientes aument (Tabla
11.3). Pesado
metales se tomaron de manera eficiente principalmente por las races
de B. juncea plantas en
todas las concentraciones evaluadas. Hallazgos similares fueron
reportados por Jadia y
Fulekar (2008) para la absorcin de metales pesados (Cd, Cu, Ni, Pb y
Zn) por fibrosa
pgina 340
La fitorremediacin de bajo nivel de residuos nucleares 327
hierba de raz. Una vez que se absorben iones de metales, que pueden
ser acumulados en las races
o ser exportados a los brotes a travs de la corriente de transpiracin
(Ximenez-Embun et
al., 2001). Nuestro estudio mostr una mayor acumulacin de todos los
metales (cadmio,
zinc y plomo) en las races que en los brotes. La acumulacin mxima de
cadmio (a 50 mg ml -1 ) en races y los brotes de B. juncea fueron 18.42
mg gm -1
y 3,35 mg gm -1 , respectivamente, mientras que las ms altas
acumulaciones de Pb (a 50
g ml -1 ) promedi 12,26 mg gm -1 y 2,47 mg gm -1 , respectivamente, en
las races y
dispara. de concentracin de zinc en las races y retoos tejidos
alcanzaron sus valores ms altos
de 26.52 mg gm -1 y 2,58 mg gm -1 respectivamente, a 50 mg ml -1
concentracin.
La acumulacin de metales en B. juncea se encontr que era de 5,4, 4,9
y 5,96 veces
mayor en las races en comparacin con los brotes en caso de cadmio,
plomo y zinc,
respectivamente. Los datos mostraron la acumulacin de metales
pesados por B. juncea en el
orden: Zn> Cd> Pb.
La investigacin ha demostrado que la concentracin de metal en los
tejidos vegetales es una funcin
del contenido de metales pesados en el medio ambiente de crecimiento
(Cui et al., 2004), y
que la absorcin y la acumulacin de diferentes metales pueden variar
de planta a
especies de plantas. Kim et al. (2003) sugirieron que tales discrepancias
surgen debido
a la variacin en el tipo de metales pesados, su concentracin, la forma
de metal presente
y especies de plantas. Diferentes metales son diferente mvil y dentro
de una planta,
cadmio y zinc son ms mviles que el plomo y cobre (Greger, 2004).
Tabla 11.3: acumulacin de metales en las races y brotes de B. juncea
y su
coeficiente de bioacumulacin (en comparacin con el tratamiento de
control) *
Concentracin de metales
La absorcin de metales (g g -1 )
bioacumulacin
(g ml -1 )
races
Los brotes
coeficiente
Discos compactos
Controlar
DAKOTA DEL NORTE
DAKOTA DEL NORTE
DAKOTA DEL NORTE
5
2.230 111,97
344 27.42
514,8 24,35
10
5850 409,26
629 81.87
647,8 18,35
20
13927 345.22
1.449 319,92
767,86 38,89
50
18149 465.55
3349 391,96
435,36 28,68
Pb
Controlar
DAKOTA DEL NORTE
DAKOTA DEL NORTE
DAKOTA DEL NORTE
5
1.258 173,78
242 42.64
300.6 30.83
10
4520 349.50
267 77.10
478,7 41,47
20
7356 170.88
881 48.56
411,85 20,03
50
12264 991.13
2.477 344
294,82 22,87
Zn
Controlar
DAKOTA DEL NORTE
DAKOTA DEL NORTE
DAKOTA DEL NORTE
5
2.250 464,30
471 35.48
544,2 30,83
10
4243 680,26
707 88,73
495 35.92
20
12665 331.52
1004 53,86
683,45 38,77
50
26517 718.71
2582 142.79
582,04 43,98
* Los valores son promedios de tres repeticiones SD ND = No detectado.
pgina 341
328 MH Fulekar y Anamika Singh
El cadmio es uno de los metales pesados ms peligrosos debido a su alta
movilidad
y la pequea concentracin a la que comienzan sus efectos sobre las
plantas para mostrar
(Vzquez et al., 1992). El coeficiente de bioacumulacin (BC) de cadmio
vari
514,8-435,36 como la exposicin aumenta desde el mnimo (5 mg ml -1 )
a
La tasa ms alta (50 mg ml -1 ); BC plomo vari de 300,6 a 294,82 en la
exposicin
de 5 a 50 mg ml -1 , mientras que BC para el zinc oscil 544,2-582,04
entre
5 mg ml -1 y 50 mg ml -1 . El BC de diferentes metales por B. juncea se
encontr
para estar en el orden de Pb <Zn <CD en casi probado todas las
concentraciones.
El factor de transposicin que puede describir el movimiento y la
distribucin
de metales pesados en las plantas tambin se determin con el fin de
evaluar la absorcin de
metales pesados por las races de B. juncea de la solucin de cultivo
hidropnico y su
translocacin desde las races a los brotes. Despus de 21 das de
exposicin, slo el 15,38%
de cadmio (a 50 mg ml -1 ), 16,80% de plomo (a 50 mg ml -1 ) y 17,30%
de
zinc (a los 5 mg ml -1 ) se transloca de la raz a brotes (Fig. 11.4). los
factor de transposicin se encontr en el orden de Pb <Zn <Cd. Se
observ que
plomo acumulado en races de B. juncea en concentraciones ms altas
en comparacin con
cadmio y zinc. Zinc ser un micronutriente se transloca
proporcionalmente
en la raz y el brote; mientras que la captacin de cadmio de la raz a
disparar es similar a la
de zinc. El transporte a travs de la membrana celular de la raz es un
proceso importante que
inicia la absorcin de metal en los tejidos vegetales. Tanhan et al. (2007)
han estudiado
la absorcin y la acumulacin de patrones de Pb, Cd y Zn en Chromolina
odorata
e inform de que la acumulacin de aumento en el orden de Cd <Zn
<Pb, mientras que la BC
aumentado en orden de Cd <Pb <Zn. Se inform patrn de translocacin
similares
en Polygonum thunbergii pero con un patrn de acumulacin diferente
es decir, Cd <
Pb <Zn <Cu (Kim et al., 2003).
Se encontr que el absorcin de cadmio y zinc a ser mayor en rodaje en
comparacin
al plomo. El zinc y el cadmio tienen muchas similitudes fsicas y
qumicas como
ambos pertenecen al Grupo II de la tabla peridica. Por lo general, se
encuentran
juntos en los minerales y competir entre s para diversos ligandos. Por lo
tanto, la
Higo. 11.4: factor de transposicin para disparar parte de B. juncea. El
porcentaje
translocado a la sesin es alta en caso de metal de cadmio.
Pgina 342
La fitorremediacin de bajo nivel de residuos nucleares 329
la interaccin entre el zinc y el cadmio en el sistema biolgico es
probable que sea
similar. El hecho de que el cadmio es un metal txico y zinc es un
elemento esencial
hace que esta asociacin interesante, ya que plantea la posibilidad de
que los efectos txicos
de cadmio puede ser prevenibles o tratables por zinc (Chaudhury y
Chandra,
1987). Nuestros resultados mostraron adems que el plomo se acumula
ms en las races como
en comparacin con los otros dos metales (zinc y cadmio). estudios de
absorcin de plomo
en las plantas han demostrado que las races tienen una capacidad de
absorber significativa
cantidades de plomo, mientras que al mismo tiempo restringe en gran
medida su translocacin a
partes areas (Lane y Martin, 1977).
Races de las plantas actan como un medio para la translocacin de
metales pesados y hay
puede ser un potencial de datos de comparacin mecanismo de
tolerancia de la absorcin de metales
revel que slo una pequea cantidad de plomo se transloca de la raz a
disparar, como
en comparacin con el zinc y el cadmio. Liu et al. (2000) han informado
de que B. juncea
tiene una considerable capacidad para eliminar el plomo de soluciones y
acumularlo en
races. Nandakumar et al. (1995) tambin han informado de la mayor
acumulacin
de plomo en las races de las especies de sorgo, con indicios de que el
plomo se puede encontrar
en la superficie exterior de races de las plantas, como cristalina o
depsitos amorfos, y
podra ser depositado en las paredes celulares o en vesculas. Los
hallazgos de la presente
fitorremediacin estudio han demostrado el uso potencial de B. juncea
para
remediacin de metales pesados de medio ambiente acutico
contaminado. esta planta
se pueden cultivar en campos que estn contaminados con metales
pesados y a partir de entonces
ser eliminado, quemado y enterrado para la eliminacin segura.
11.8.2 Remediation de radiostrontium ( 90 Sr) y radiocesio
( 137 Cs) por Catharanthus roseus (L.) G. Don en Aquatic
Ambiente
El ambiente del suelo-agua podra estar contaminada con desechos de
radionucleidos
a partir de varias fuentes, incluyendo fuentes naturales, a partir de la
precipitacin mundial nuclear
las pruebas de armas, la descarga de las instalaciones nucleares,
eliminacin de residuos nucleares
y accidentes nucleares. Las liberaciones accidentales y rutinarios de
radionucleidos
de la industria nuclear son inevitables y pueden causar local, regional e
incluso
global de la contaminacin ambiental (Fulekar, 2005; 2009).
radionucleidos
en el medio ambiente con el tiempo puede ser transmitida a los seres
humanos a travs
cadenas de comida y puede representar una amenaza ambiental a la
salud de los locales
poblacin (Howard et al, 1991;. Robinson y Stone, 1992). El cuidado
apropiado
y gastos de envo del material que contiene los residuos nucleares,
incluso en trazas es de
la mxima importancia.
Los radionclidos tales como 137 Cs y 90 Sr son los contaminantes
comunes
se encuentran en el ambiente del suelo-agua en el sitio de desechos
relacionados con el bajo nivel
desperdicios nucleares. El radiostrontium ( 90 Sr) y cesio radiactivo ( 137
Cs) tienen largo
impactos radiolgicos y salud a largo plazo debido a su larga vida media
y los productos qumicos
similitudes con dos elementos esenciales necesarios para el crecimiento
vegetal, Ca 2 + y K + ,
respectivamente (Shaw y Bell, 1991). Las diversas tcnicas y mtodos
son
desarrollado para la limpieza del medio ambiente. La tecnologa reciente
implica el uso de
pgina 343
330 MH Fulekar y Anamika Singh
las plantas verdes para la fitorremediacin, un establecimiento
ecolgico, rentable, estticamente
mtodo de eliminacin agradable de radionucleidos de ambiente
contaminado
(Sal et al, 1998;. Negri y Hinchman, 2000; Andrade et al., 2002, Eapen et
Al., 2003).
En la India Bhabha Atomic Research Centre es una autoridad reguladora
que
ha prescrito en el estndar para el tratamiento de los residuos
radiactivos que contiene
radionucleidos. En el proceso de material radiactivo, radionucleidos
como 137 Cs
y 90 Sr son producidos por la fisin nuclear con la mitad de vida de 30
aos y 29
aos, respectivamente. Cs plantea un peligro para la salud tanto de beta
y gamma
radiacin mientras Sr slo emite radiacin beta. 137 Cs y 90 Sr no tienen
ningn papel en planta
la nutricin, sino que pueden ser absorbidos por las plantas. La
capacidad de la planta
acumular radionucleidos en sus partes areas determina su potencial de
fitorremediacin.
En el presente estudio de investigacin Catharanthus roseus plantas han
sido
filtrada y se encontr que tienen un alto potencial en comparacin con
otras plantas para la absorcin
de radionucleidos. Los investigadores an no han buscado el potencial
de C. roseus
para la remediacin de los radionucleidos. Anamika et al. (2009) han
estudiado la absorcin
de 90 Sr y 137 Cs en soluciones lquidas en condiciones in vitro para
evaluar la
potencial de la planta para los radionucleidos de medio ambiente
contaminado. los
tratamiento de exposicin se llev a cabo hasta un perodo de 15 das
para la remediacin
de radionucleidos de medio ambiente acutico contaminado
artificialmente en una
configuracin de laboratorio. La bioacumulacin de estos radionucleidos
en las races y
brotes se ha estudiado el uso de factor de transposicin. los aspectos
ms destacados de investigacin:
planta de Catharanthus roseus crecido en las proximidades de BARC
tiene la eficiencia
para absorber los radionucleidos con especial referencia a radiocesio y
estroncio radiactivo. Resultados de la investigacin son beneficiosos
para otros radionucleidos
podra ser remediado eficazmente de medio ambiente acutico.
El presente estudio investig el potencial de C. roseus para
remediacin de los radionucleidos en medio acutico.
Las plantas de C. roseus se expusieron a tres actividad diferente
concentraciones, a saber. 3,7 10 2 kBqL -1 , 3,7 10 3 kBqL -1 y 3,7
10 4 kBqL -1 de
137 Cs y 90 Sr separado por un periodo de 15 das. C. roseus plantas han demostrado
el potencial para la remediacin de los radionucleidos 137 Cs y 90 Sr.
resultado muestra que
el porcentaje de actividad radionucleidos disminuy con el aumento
inicial
concentracin de 137 Cs y 90 Sr y aument con el aumento perodo de
exposicin
tratamiento (Figs 11.5 y 11.6). C. roseus se encontraron plantas para
eliminar 70, 48
y 45% de 90 Sr y 73, 59 y 51% de 137 Cs desde el 3,7 10 2 kBqL -1 , 3,7
10 3 kBqL -1 y 3,7 10 4 kBqL -1 concentraciones de actividad
respectivamente. los
factor de transferencia para la absorcin de Cs se encontr como 0,70,
0,48 y 0,45 y para Sr 0,73,
0,59 y 0,51 a 3,7 10 2 kBqL -1 , 3,7 10 3 kBqL -1 y 3,7 10 4 kBqL -1 ,
respectivamente despus de 15 das del perodo de tratamiento.
Las figuras 11.7 y 11.8 demuestran la acumulacin de radionucleidos
en las races y brotes de la planta. El presente estudio de investigacin
muestra que la
acumulacin de 137 Cs en races de C. roseus se encontr que era 2,16
kBq g -1 ,
Pgina 344
La fitorremediacin de bajo nivel de residuos nucleares 331
Higo. 11.5: Actividad de 137 Cs en soluciones despus de la incubacin
con C. roseus plantas
para diferentes intervalos de tiempo. Todos los valores son la media de
tres repeticiones SE
Las actividades iniciales de 137 Cs fueron A: 3,7 10 4 kBqL -1 , B: 3,7 10
3 kBqL -1 y
C: 3,7 10 2 kBqL -1 .
Higo. 11.6: Actividad de 90 Sr en soluciones despus de la incubacin
con C. roseus plantas
para diferentes intervalos de tiempo. Todos los valores son la media de
tres rplicas
SE actividades iniciales de 90 Sr fueron A: 3,7 10 4 kBqL -1 , B: 3,7
10 3 kBqL -1
y C: 3,7 10 2 kBqL -1 .
Pgina 345
332 MH Fulekar y Anamika Singh
Higo. 11.7: Distribucin de 90 Sr en races y los brotes de C. roseus .
Todos los valores
son la media de tres repeticiones SE actividades iniciales de 90 Sr
fueron A: 3,7
10 2 kBqL -1 , B: 3,7 10 3 kBqL -1 y C: 3,7 10 4 kBqL -1 .
Higo. 11.8: Distribucin de 137 Cs en las races y los brotes de C. roseus .
Todos los valores
son la media de tres repeticiones SE actividades iniciales de 90 Sr
fueron A: 3,7
10 2 kBqL -1 , B: 3,7 10 3 kBqL -1 y C: 3,7 10 4 kBqL -1 .
pgina 346
La fitorremediacin de bajo nivel de residuos nucleares 333
17,74 kBq g -1 and104.73 kBq g -1 , cuando se expone a 3,7 10 2 kBqL -1
, 3,7 10 3
kBqL -1 y 3,7 x 10 4 kBqL -1 concentraciones de actividad,
respectivamente; mientras que el
acumulacin de 137 Cs en rodaje se encontr 2,61 kBq g -1 a 3,7 10 2
kBqL -1 , 22.15
kBq g -1 a 3,7 10 3 kBqL -1 y 198,93 kBq g -1 a 3,7 10 4 kBqL -1
actividad
nivel. La acumulacin de 137 Cs en los brotes se encuentra 1,9 veces ms
alta que
races en concentracin ms alta actividad (3,7 10 4 kBqL -1 ) y esto ha
demostrado
la eficiencia de C. roseus plantas para remediar el 137 Cs de la aquatic-
flujos de residuos. Del mismo modo, el estudio llevado a cabo para la
fitorremediacin de
90 Sr indica que la exposicin de 90 Sr en 3,7 10 2 kBqL -1 , 3,7 10 3 kBqL -1
y 3,7 10 4 kBqL -1 concentraciones de actividad acumulan 2,23 kBq g
-1 , 13,68