Garca Gonzlez Juan Jess

PRCTICA No. 7 CROMATOGRAFA EN COLUMNA

OBJETIVOS

Comprender la tcnica de cromatografa en columna, sus caractersticas y los

factores que en ella intervienen.
Emplear la tcnica de cromatografa en columna para la separacin de un compuesto
orgnico.
A travs de cromatografa en capa fina controlar la cromatografa en columna.

INTRODUCCIN
La cromatografa en columna es el mtodo ms utilizado para la separacin de compuestos
orgnico a escala preparativa. La fase estacionaria se deposita en el interior de una columna
de vidrio que termina con una placa porosa que impide su paso y en un estrechamiento con
una llave. La mezcla se deposita sobre la parte superior de la fase estacionaria mientras que
la fase mvil atraviesa el sistema. Los compuestos van saliendo por separado de la columna
y se recogen en fracciones, los ms polares quedan ms retenidos y para que salgan
generalmente hace falta aumentar la polaridad del disolvente. El tiempo necesario para e
luir un compuesto de la columna se llama tiempo de retencin. El adsorbente ms utilizado
para cromatografa de columna es gel de Slice, la elucin de la cromatografa puede
realizarse por gravedad o mediante presin, la diferencia en ambos casos est en el tamao
de las partculas de gel de slice. Debido a que la disminucin del tamao de las partculas de
adsorbente conduce a una separacin ms eficaz, la cromatografa a media presin
proporciona mejores resultados, adems de ser ms rpida.
RESULTADOS Y ANLISIS DE RESULTADOS
Imagen 1

Se llev a cabo la cromatografa en columna, usando como sustancia problema media

pastilla de cafiaspirina, donde los componentes principales son cafena y cido
acetilsaliclico, se prepar el gel silica y se prepar el equipo para la cromatografa en
columna, se fue vertiendo volmenes de acetato de etilo que contenan cafena y cido
acetilsaliclico disueltos una vez terminada la cromatografa. Se procedi a aplicar la
cromatografa en capa fina para revelar si se llev a cabo con xito la obtencin de los
componentes principales de la pastilla. Como se puede observar en la imagen 1, los
primeros dos frascos no presentaron cambios en el rf, en los frascos 3 y 4 se not que s hay
un desplazamiento que se alinea con el de la cafena, mientras que los frascos 5, 6, 7 y 8
presentaron una alineacin con la mancha del cido acetilsaliclico.
El clculo de la pureza de la cafena y el cido acetilsaliclico no se pudo llevar a cabo debido
a que no se complet el proceso de determinacin de punto de fusin, por falta de tiempo
durante la prctica.
CONCLUSIONES
La cromatografa en columna sirve para la separacin de componentes en una mezcla.
La cromatografa en capa fina nos sirve para controlar e identificar los componentes de
una mezcla.

Ambos tipos de cromatografa se complementan.

CUESTIONARIO

1.- Indique algunas de las aplicaciones de la cromatografa de adsorcin.

Capa fina: para la identificacin de sustancias, por ejemplo, la separacin de aminocidos.

Columna: separacin de colorantes, protenas, separa mayores cantidades de producto principal.

2.- Diga cul es la diferencia entre una cromatografa en capa fina y la de columna.
La cromatografa en capa fina es un procedimiento para identificar y para determinar
cuantitativamente componentes individuales, mientras que la cromatografa en columna se
aplica para llevar a cabo purificaciones, en la cual se pueden separar grandes cantidades de
una mezcla de compuesto.

3.- Qu debe hacerse para encontrar el eluyente adecuado para un compuesto que se
purifica en cromatografa en columna?
Esta eleccin depende del componente que se va a separar y del material en que la separacin se
llevar a cabo.

En la eleccin influyen varios factores:

* No utilizar compuestos muy voltiles

*Pureza
* Evitar que contengan trazas de metales (catalizadores).

La eleccin del eluyente se realiza de forma emprica. Hay que estudiar la polaridad del componente
y probar con eluyentes cada vez menos polares.

4.- Por qu es necesario realizar una cromatografa en capa fina a los eluatos obtenidos
de la columna cromatogrfica?
La cromatografa en capa fina es un control de la cromatografa en columna, nos sirve para saber en
qu fracciones de los viales se encuentra el principio activo de nuestra muestra, en este caso, de la
cafiaspirina.

5.- Escriba una lista de eluyentes utilizados en cromatografa en columna en orden de

polaridad creciente.
Los eluyentes usados en cromatografa en columna deben tener polaridad baja a media, los ms
utilizados son:

Hexano
Tolueno
ter
Diclometano
Acetato de etilo
Acetonitrilo
Isopropanol
 Etanol
Metanol

FUENTES
Primo, Yfera Eduardo, Qumica orgnica bsica y aplicada: De la molcula a la industria,
Volumen II, Editorial Revert, Espaa, 1995.