Practica n4

Digestin de los triglicridos de la leche

INTRODUCCIN
Los lpidos se caracterizan por ser insolubles en el agua, lo cual constituye un
problema para la digestin ya que los sustratos no son fcilmente accesibles a
las enzimas digestivas de la fase acuosa. Adems, si los lpidos ingeridos se
hidrolizan en constituyentes ms simples, estos tienden a agregarse en
complejos mayores lo cual dificulta su absorcin. Estos problemas se pueden
superar mediante el aumento del rea lipdica y por solubilizacin de los
productos de hidrolisis con detergentes.
La digestin de las grasas en el organismo ocurre por accin de lipasas, las
cuales requiere de un agente solubilizante, las sales biliares y de una protena
la colipasa que permite la inter-reaccin de la lipasa con los triglicridos que se
encuentran en la parte interna de la micela.
Los triacilgliceroles o triacilglicridos (grasas) (TAG) constituyen como
promedio 90% de los lpidos que se ingieren en la dieta (60 a 150 g/da); el otro
10% corresponde a fosfolpidos, colesterol, steres de colesterol , cidos
grasos libres y pequeas cantidades de vitaminas liposolubles(A, D, E, K).
Adems por la bilis se segrega colesterol (1 a 2 g) y lecitina (7 a 22 g). Las
enzimas digestivas de los diferentes lpidos complejos son protenas
hidrosolubles, y la digestin se lleva a cabo en interfases lpido-agua. La
velocidad de este proceso, depende entonces del rea superficial de la
interfase.

Las sales biliares tienen un importante papel en este proceso de digestin y se

forman a partir de los cidos biliares. Los cidos biliares pueden ser primarios o
secundarios. Los primarios (cido clico y quenodesoxiclico) se sintetizan en
los hepatocitos a partir del colesterol, tienen un proceso de conjugacin con
glicina y taurina y se excretan a la bilis en forma de sales. Estas sales biliares
poseen una accin detergente que permite desintegrar los glbulos de grasa
hasta un tamao minsculo, formando complejos denominados micelas que
ayudan tanto en proceso de digestin como en la absorcin de cidos grasos,
colesterol y otros lpidos.

La mayor parte de las grasas alimentarias las constituyen los triacilgliceroles.

Las enzimas digestivas de los TAGs son lipasas (hidrolasas) que se vierten a la
luz del tubo digestivo) y al hidrolizarlas dan como resultado cidos grasos y
monoacilglicridos.

A diferencia de cmo se planteaba hasta pocas recientes, el proceso digestivo

de los triglicridos dietarios, comienza desde la cavidad bucal y se inicia con la
actividad de la lipasa lingual, (tambin conocida como esterasa pregstrica o
lipasa salival). La lipasa lingual se secreta en baja cantidad en forma
constante . Sin embargo, ante la presencia del alimento en la boca (factor
mecnico) y/o por estimulacin parasimptica (factor neurolgico), la enzima es
secretada en gran cantidad en la cavidad bucal. Esta lipasa acta sobre el bolo
alimentario en su trnsito hacia el estmago y tambin durante la permanencia
del alimento en este rgano. El pH ptimo de la lipasa lingual es de 4,5 pero su
actividad comienza a pH = 2 y an es activa a pH = 7,5. La enzima no es
inactivada por la actividad proteoltica de la pepsina gstrica, por lo cual sigue
actuando en la cavidad gstrica. Adems se ha descrito una lipasa gstrica
secretada por la mucosa de este rgano. Sus caractersticas estructurales y
catalticas son similares a la de la lipasa lingual y por lo general se les
considera a ambas enzimas como una sola unidad estructural e hidroltica. Se
plantea que entre ambas son responsables de 10 a 30% de la digestin de los
triacilgliceroles de origen alimentario. Este proceso contina en el intestino con
la accin de la lipasa de origen pancretico que es segregada hacia la luz
intestinal y se considera la principal enzima en el aspecto cuantitativo de la
digestin.

En los recin nacidos, sin embargo, la secrecin pancretica de lipasas es

todava baja, y en ellos, la digestin de los TAG se puede realizar con
efectividad, gracias a la lipasa lingual, que es ya activa, y a una lipasa presente
en la propia leche materna. Se conoce que la leche materna humana contiene
una lipasa especial, que puede hidrolizar indistintamente las posiciones 1, 2 y
3, identificadas como lipasa lctea. Esta enzima cuando est presente en la
leche es inactiva y solo adquiere actividad despus del contacto con las sales
biliares en el intestino, por lo cual se le conoce tambin como lipasa lctea
estimulada por las sales biliares. La misma permite a los recin nacidos y a los
lactantes hidrolizar totalmente los triglicridos de la leche materna, an en
ausencia de la lipasa lingual-gstrica y de la lipasa pancretica, lo cual reviste
una particular importancia nutricional mientras se alimentan con leche materna.

Los TAG que entran en el intestino se mezclan con la bilis y con posterioridad el
peristaltismo intestinal los emulsiona. Esta emulsin es entonces tratada por las
lipasas segregadas por el pncreas (lipasa pancretica) tanto en los nios
mayores de un ao como en los adultos. Esta enzima presenta una activacin
superficial: su actividad se incrementa al entrar en contacto con la interfase
lpido-agua, a travs de un complejo con la colipasa pancretica (protena de
12 kD) en una relacin 1:1. La colipasa ayuda a la lipasa a unirse a la interfase,
ya que aquella contiene una seccin larga de residuos hidrofbicos que se
asocian cerca del centro activo de la lipasa y en la enzima se produce un
cambio conformacional que contribuye a realizar su catlisis sobre los TAG.

La lipasa pancretica cataliza la hidrlisis de los cidos grasos de los

triacilgliceroles, de las posiciones 1 y 3, generando 2-monoacilglicridos y
cidos grasos libres con diferentes longitudes de sus cadenas
hidrocarbonadas.
FUNDAMENTO
La digestin de los triglicridos da como resultado: beta monoglicridos,
diglicridos, cidos grasos, estos ltimos pueden ser determinados por
titulacin con hidrxido de sodio.

II OBJETIVOS
-Estudiar la accin de la lipasa pancretica sobre los triglicridos de la leche a
travs de la determinacin de los cidos grasos que se liberan.
-Verificar el efecto que tiene la bilis sobre la digestin de los triglicridos.
III PARTE EXPERIMENTAL
PROCEDIMIENTO
1.- Medir en 2 beakers 10 ml. De leche y 1 ml. de extracto de lipasa (solucin
de pancreatina) en cada uno de ellos.
2.- A uno de ellos (A) se le aade 1ml. de agua y al otro (B) 1 ml. De bilis.
Mezclar rpidamente.
3.- Inmediatamente, de cada beaker se toman 2ml. y se colocan en dos
beakers respectivamente y se aade 2 gotas de fenolftalena y se titula con
NaOH 0,01N hasta la aparicin de una coloracin rosada dbil. Anotar los
mililitros gastados y hacer los clculos.
4.- La mezcla que qued despus de retirar los 2 ml. se incuba en bao mara
a 37C por una hora.
5.- Transcurrido el tiempo de incubacin, tomar nuevamente 2ml de cada
beaker de incubacin y titularlos del modo antes descrito.
Anotar los resultados obtenidos en la titulacin de los cidos grasos libres
presentes en la muestra basal y luego de la incubacin, en la siguiente tabla.
 MUESTRA A MUESTRA B
(sin bilis) (con bilis)

BASAL (tiempo cero)

-ml de NAOH 0,01N

-mEq de cidos grasos
-mEq de cidos grasos
por 100 ml de leche.

INCUBADO (una hora)

-ml de NAOH 0,01N

-mEq de cidos grasos
-mEq de cidos grasos
por 100ml de leche.

RESULTADOS:

DISCUSN DE LOS RESULTADOS:

CONCLUSIONES:
 CUESTIONARIO

1.- Cul es la estructura de las sales biliares y donde se forman?

Las sales biliares se producen en el hgado por el Citocromo P450 mediado por
la oxidacin del colesterol. Se conjugan con la taurina o el aminocido glicina, o
con un sulfato o glucurnido, y luego se almacenan en la vescula, que
concentra las sales biliares mediante la eliminacin de agua.
Tras una comida, el contenido de la vescula biliar se secretan en el intestino,
donde las sales biliares sirven para emulsionar las grasas dietticas.

2.- Cul es el rol de las sales biliares en la digestin de los triglicridos?

Los cidos biliares (clico y quenodesoxiclico) se sintetizan en el hgado a
partir del colesterol. Se conjugan con los aminocidos glicina y taurina
formando las sales biliares que emulsionan las grasas y vitaminas liposolubles
(A, E y D), facilitando su absorcin intestinal. Las
sales biliares
son las sales de los cidos biliares, pueden ser sales sdicas o potsicas. Los
cidos modificados tauroclico y glicoclico, tambin tienen sales
3.- Haga un esquema que explique la accin de la lipasa pancretica sobre
los triglicridos de la dieta y Cules son los productos?

4.- Qu es la esteatorrea? En qu casos se presenta?

La esteatorrea es una condicin clnica, en la que se produce una mala
absorcin de las grasas durante la digestin. En el caso de una mala absorcin
de algn nutriente en particular en el sistema digestivo, este se excreta del
cuerpo, provocando una especie de deficiencia de pseudo. Este trastorno
puede ser causado por varias otras condiciones pre-existentes. El tratamiento
para los sntomas de esta condicin depende de la etiologa del trastorno.

Enfermedad del pncreas, tumores de pncreas y pancreatitis, que es la

inflamacin del pncreas, tambin pueden causar esteatorrea. Una pequea
porcin del pncreas es responsable de las enzimas digestivas necesarias en
diferentes procesos corporales. En la aparicin de una fuga, el pncreas
pueden experimentar hinchazn. Esto puede ser muy doloroso y perjudicial
para su funcin general, incluyendo la digestin de las grasas de fuentes de
alimentos. Esto conduce a una mala absorcin y hace que las heces se
vuelvan ms grasas, lo que aumenta el riesgo de contraer la esteatorrea.