Cuestionario

1. Cul es el fundamento de la tincin diferencial de Gram?

Utilizada para distinguir entre clases diferentes de bacterias.

Clasifica las bacterias en dos grupos grandes: grampositivas y gramnegativas. Las
bacterias grampositivas retienen el color del colorante violeta de genciana
aparecen violceas. Las bacterias gramnegativas no retienen el colorante violeta
de genciana y permanecen incoloras hasta que se aplica la safranina como
colorante de contraste y entonces se tornan rosadas.

2. Explica la funcin que desempea el lugol y el alcohol en esta coloracin.

El colorante violeta y el yodo (Lugol) se combinan en el citoplasma de cada

bacteria y lo colorean de violeta oscuro o prpura. Las bacterias que conservan
este color despus de habrseles agregado el alcohol para decolorarlas se
clasifican como grampositivas; las bacterias que pierden el color violeta oscuro
despus de la decoloracin se clasifican como gramnegativas.

3. Escribir el nombre cientfico (gnero y especie), de 5 bacterias Gram

positivas y 5 Gram negativas.

Gram positivas:
Staphylococcus aureus
Streptococcus pyogenes
Streptococcus agalactiae
Streptococcus faecalis
Streptococcus pneumoniae

Gram negativas:
Escherichia coli
Salmonella typhi
Salmonella enteritidis
Haemophilus influenzae
Bordetella pertussis

4. Describir la tcnica de otra tincin diferencial.

Tincin modificada de Ziehl- Neelsen para diagnostico Cryptosporidium de heces,

permitiendo la observacin de ooquistes teidos de parsitos. Esta tcnica es
sencilla de realizar y poco costosa, por lo que ha cobrado importancia debido al
reciente incremento de este protozoario en individuos inmunocomprometidos.
 1- Haga extendidos (frotis) de heces frescas o conservadas en formol, con un
aplicador de madera.

2- Fije los extendidos cubrindolos con metanol durante dos a cinco minutos
fijar al porta. Deje secar al aire libre.

3- Cubra los extendidos con carbol fucsina y teir durante 20-30 minutos. No
requiere calentarse.

4- Enjuague con agua de la llave.

5- Decolore por goteo con cido sulfrico al 5% durante un minuto hasta que
no escurra ms colorante. Lave con agua de la llave.

6- Cubra los portaobjetos con verde de malaquita durante cinco minutos.

Lave con agua de la llave y deje secar al aire libre.

7- Observe al microscopio. Los ooquistes de Cryptosporidium se tien de color

rojo intenso sobre un fondo verde.
Identifique las fases del parsito observadas en ciclo vital. Dibuje el ciclo
completo.

8- La laminilla puede guardarse haciendo montaje con resina sinttica.

5. Explicar: Por qu algunos microorganismos Gram positivos en un cultivo

joven pueden volverse Gram negativos cuando ste envejece?

Con el paso del tiempo las clulas envejece y su pared celular puede
debilitarse, motivo por el cual en la tincin Gram, la pared celular no es
capaz de retener el colorante primario cristal violeta y solo se tie la
clula con el colorante secundario safranina dando como resultado a
clulas Gram negativas en toda la muestra.

Referencias

Tortora, G. Funk, B., Case, C. (2007). Introduccin a la Microbiologa (9 ed.)

Argentina: Mdica Panamericana.

Olivas, E. (2004). Manual de prcticas de microbiologa I, II y parasitologa. Mxico