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SEMESTRE 2017- I
I CICLO
PROFESOR COORDINADOR:
PRCTICA N1
I. OBJETIVOS
II. MATERIALES
III. PROCEDIMIENTO
Hacer una descripcin de las diferentes etapas que comprende el mtodo cientfico.
Leer el artculo seleccionado rpidamente para tener una idea general del mismo.
Proceder a leer el artculo cuidadosamente y analizarlo con el propsito de establecer lo
siguiente:
IV. RESULTADOS
Entregar el reporte del artculo evaluado considerando todos los pasos del mtodo cientfico.
Rev Med Hered. 2015; 26:230-237.Frecuencia anticuerpos anti Toxoplasma gondii en gestantes de Cucuta.
Colombia.
Rev Med Hered. 2014; 25:208-214: .Eficacia del proceso de limpieza y desinfeccin de losendoscopiosde
un hospital de nivel III
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PRCTICA N 2
I. OBJETIVO
II.MATERIALES
III.PROCEDIMIENTO
Los Glcidos o Hidratos de carbono por accin deshidratante del cido sulfrico originan compuestos
derivados del furfural, los que en presencia del alfa-naftol presente en el reactivo de Molisch, formarn
un anillo de color prpura.
Preparacin:
1. En tubos rotulados de 13x100 mm colocar 1 mL de cada solucin del glcido 1%: Glucosa,
Fructosa, Sacarosa, Maltosa y Almidn.
2.Aadira cada tubo 2 gotas del Reactivo de Molischy agitar suavemente.
3.Agregar lentamente por la pared del tubo, sin agitar, 1 mL de cido sulfrico (H2SO4)
concentrado.
4. Observar la formacin de un anillocolor prpura en la zona de interfase si la reaccin es
3
positiva.
5. Determinar si la reaccin de Molisch es positiva o negativa para cada uno de los glcidos.
Un azcar reductor es aquel que en su forma cclica tiene el grupo OH del carbono anomricolibre y
por tanto puede convertirse en su forma lineal abiertaque contiene (potencialmente)el grupo aldehdo
con capacidad reductora. El azcar reductoral ser sometido a la accin del calor en el medio alcalino del
reactivo de Benedict, se isomeriza formando cuerpos fuertemente reductores para el ion cprico (Cu+2)
del reactivo que es reducido a ion cuproso (Cu+1) el que reaccionar con los iones OH- del medio
precipitando como xido cuproso (Cu2O) que es de color rojo ladrillo.
Preparacin
1. En tubos rotulados de 16x150 mmcolocar 2mL de cada solucin de glcido 1%: Glucosa,
Fructosa,Sacarosa, Maltosa y Almidn.
2. Aadir a cada tubo 1 mL de Reactivo de Benedict.
3. Someter los tubos a ebullicin en agua hirviendo en un beaker por 5 min. Retirarlos con ayuda
de una pinza.
4. Observar la formacin del xido cuproso que es color anaranjado hasta rojo ladrillo si la
reaccin es positiva.
5. Determinar si la reaccin de Benedict es positiva o negativa para cada uno de los glcidos.
El ion triyoduro(I3--) del Lugol es adsorbido por el almidn a nivel de las hlices de la amilosa formando
compuestos complejos de color azul negruzco (yoduro de almidn).
Preparacin
IV.CUESTIONARIO P#2
1.Diga cules son las principales fuentes de carbohidratos en nuestra dieta y cul es el
requerimientodiario.
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V.INFORME
Cartula
Introduccin
Marco terico: 2pp: Carbohidratos y fundamentos de las 3 reacciones
Resultados: Esquemas y tablas simples de la reaccin (+) o (-) para
cada glcido evaluado en cada una de las 3 pruebas.
Conclusiones: Interpretacin de los resultados explicando por qu el glcido da una reaccin (+)
o (-)
Cuestionario
Referencias bibliogrficas (estilo Vancouver)
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UNIVERSIDAD PRIVADA SAN JUAN BAUTISTA
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
ESCUELA PROFESIONAL DE MEDICINA HUMANA
CURSO DE BIOLOGAMOLECULAR
PRCTICA N 3
I. OBJETIVO
Reconocer compuestos orgnicos como los lpidos y las protenasque son constituyentes
importantes entodos los seres vivos
II. MATERIALES
Aceite comestible
Albmina al 2%
Leche
Alcohol
Cloroformo
ter etlico
Solucin alcohlica de Sudn III
Tinta roja
Hidrxido de sodio NaOH20%
Hidrxido de sodio NaOH 40%
Sulfato de cobre CuSO41%
cido ntrico HNO3concentrado
Tubos de 16x150 mm
Tubos de 13x100 mm
Beakers de 50mL
Mechero
Pipetas Pasteur de plstico de 2,5mL
Guantes
Pinza de madera
Gradilla para tubos
III. PROCEDIMIENTO
Los lpidos son insolubles en agua y solubles en solventes orgnicos como el ter y cloroformo.
Preparacin:
6
tubo N 1: agua destilada 1 mL
tubo N 2: alcohol 1 mL
tubo N 3: cloroformo 1 mL
tubo N 4: ter etlico1 mL
El Sudn III es un tinte diazo altamente soluble en lpidos tindolosen la gamadel rojo cereza
alanaranjado.
Preparacin:
3.1.3Saponificacin
Preparacin
3.2.1Reaccin de Biuret
Los compuestos que contienen dos o ms enlaces peptdicos forman uncomplejo con las sales
de cobre en un medio fuertemente alcalino, dando un color prpura o violeta, debido a la
formacin de un complejo de coordinacin entre los iones del Cu+2 y los pares de electrones no
compartidos del nitrgeno que forma parte de los enlaces peptdicos.
Preparacin
3.2.2Reaccin Xantoproteica
Se emplea para determinar la presencia de protenas solubles en una solucin, empleando cido
ntrico(HNO3) concentrado. Las protenas solubles que presentan aminocidos aromticos
(fenilalanina, tirosina y triptfano), dan derivados nitrogenados que se colorean de amarillo.
Preparacin
V. INFORME
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FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
ESCUELA PROFESIONAL DE MEDICINA HUMANA
CURSO DE BIOLOGA MOLECULAR
PRCTICA N4
I. OBJETIVOS
II. MATERIALES
III. PROCEDIMIENTO
1. En un mortero colocar la muestra (3fresas sin hojas y/o untrozo de pltano de 3 cm) e
incorporar 2 mL de NaCl 0,9% triturando por 1 min.
2. Aadir 10mL de la solucin de lisis y seguir triturando (~5 min) hasta obtener una masa
homognea y semilquida.
3. Agregar2mL de acetato de sodio a la preparacin, mezclar, para luego dejar reposar por 5
min.
4. Filtrar la preparacin en untubo de 16x150mm con la ayuda de un embudo cubierto con
gasa.
5. Trasvasar 5-8mL del filtrado a un beaker pequeo e incorporar por las paredes 2 volmenes de
etanol frioe introducir rpidamente una bagueta delgada y girar sobre su mismo eje a fin
de recuperar el ADN bajo la forma de fibras.
6. Colocar la baguetacon el ADN extrado en un tubo 16x150mmconteniendo 1 mL de solucin
salina citratada para resuspenderlo y reservarlo para su uso en el siguiente experimento.
7. Obtener ms fibra de ADN para reconocer su carcter cido. Para ello dejar caer en las
hebrasun colorante bsico como el azul de metileno.
Las pentosas se deshidratan en una solucin cida dando furfural que al reaccionar con el orcinol
del reactivo de Bialy en presencia de FeCl3, dan un producto de condensacin de color verde-
azulado.
Preparacin
V. INFORME:
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PRCTICA N5
I. OBJETIVOS
II. MATERIALES
Microscopios
Lminas portaobjetos
Lminas cubreobjetos
Lminas preparadasde artrpodo (Pulexirritanspulga oPediculushumanus piojo)
Suero fisiolgico
Pipeta Pasteur
Plumn indeleble
Papel lente
Hebra de algodn
Letra e en papel
.
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VI. PROCEDIMIENTO.
1. Preparar lminas hmedas (una gota de suero fisiolgico ms la muestra) con una hebra de
algodn y una letra een posicin de lectura.
2. Observar dichas muestras con los objetivos 4x, 10x y 40x.
3. Verificar con la lmina de la letra e, que los movimientos en estos sistemas son invertidos.
4. Observar la lmina preparada de artrpodo con los objetivos de 4x y 10x.
5. Calcular el aumento total de acuerdo al objetivo utilizado multiplicando el aumento del ocular
porel aumento del objetivo: Ejm: para un ocular de 10x y un objetivo de 40x elaumento total
es de 400x (es decir, 400 veces).
VIII. INFORME
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CURSO DE BIOLOGAMOLECULAR
PRCTICA N 6
Existen dos tipos de clulas, las procariotas y las eucariotas, que difieren principalmente en la
organizacin de su material gentico. Las procariotas no poseen envoltura nuclear, su ADN circular
ocupa dentro de la clula un lugar llamado nucleoidey se halla en contacto directo con el protoplasma.
I. OBJETIVOS
II.MATERIALES
Palitos mondadientes
Solucin salina fisiolgica (NaCl 0,9%)
Solucin de Mercurio cromo
Solucin de Violeta de genciana
Colorante Azul de metileno
Yogurt natural
Lminas portaobjetos
Lamillas cubreobjetos
Varilla de coloracin
Lminas con tincin de Gram de Escherichia coli (bacilos) y Streptococcus (cocos)
Lminas con tincin de Ziehl-Neelsen de Mycobacterium tuberculosis
Aceite de inmersin
Alcohol isoproplico
Papel lente
Microscopios
Guantes
Recipiente para descarte
III. PROCEDIMIENTO
Para observar cada lmina preparada con la tincin Gram o la tincin Ziehl-Neelsen agregar
una gota de aceite de inmersin y usar el objetivo de 100x.
IV. INFORME
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CURSO DE BIOLOGAMOLECULAR
PRCTICA N 7
Existen dos tipos de clulas, las procariotas y las eucariotas, que difieren principalmente en la
organizacin de su material gentico. En las clulas eucariotas el ADN se asocia a protenas formando
unas estructuras complejas denominadas cromosomas, los cuales se encuentran dentro de un ncleo
verdadero rodeado por una complicada envoltura nuclear, a travs de la cual tienen lugar los procesos
de intercambio ncleo-citoplasmticos.
I. OBJETIVOS
II.MATERIALES
III.PROCEDIMIENTO
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CLULA ANIMAL
1.Separar una de las catfilas de la cebolla con una pinza y extenderla sobre una
lmina portaobjetos.
2.Con el bistur cortar cuadritos de 0,5 cm de catfila.
3.Disponer de 2 lminas y colocar en cada lmina un cuadradito de catfila.
4. Agregar a una de las lmina 1 gota de suero fisiolgico y a la otra agregar 1gota del
coloranteLugol.
5.Cubrir las preparaciones con lminas cubreobjetos.
6.Observar las preparacionescon objetivos de 10x y 40x.
7. Reconocer la membrana celular, pared celular y el ncleo de esta clula vegetal.
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CLULA VEGETAL
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Saccharomyces Aspergillus Penicillium
IV.CUESTIONARIO P#7
1. Cules son las diferencias entre una clula animal y una clula vegetal?
2. Cules son los componentes y cmo estn estructuradas las paredes celulares de las bacterias,
hongos y vegetales?
3. Qu es el Lugol, cul es su frmula y cules son sus aplicaciones?
V.INFORME
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CURSO DE BIOLOGAMOLECULAR
PRCTICA N 8
I.OBJETIVOS
II.MATERIALES
III. PROCEDIMIENTO
IV.RESULTADOS:
VI. CUESTIONARIO
V.INFORME
Cartula- Introduccin- Marco terico- Resultados: tabla y observaciones (esquemas) con su descripcin
e interpretacin- Conclusiones- Cuestionario- Referencias bibliogrficas (estilo Vancouver).
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CURSO DE BIOLOGAMOLECULAR
PRCTICA N 9
I. OBJETIVOS:
Las clulas tienen vesculas membranosas que contienen enzimas hidrolticas que
permiten la digestin intracelular y que corresponden a los lisosomas los cuales pueden
ser identificados en protozoarios con una tincin vital.
Con el uso de suero fisiolgico observar plstidos en las clulas eucariotas vegetales, los
que contienen pigmentos o pueden sintetizar y acumular diversas sustancias. As tenemos
los Leucoplastos que son plstidos incoloros como los Amiloplastos que acumulan
almidn, los Proteinoplastos que acumulan protenas, los leoplastos que acumulan
grasas y aceites esenciales. Los Cromoplastos son plstidos coloreados pues en su
estructura contienen pigmentos como el caroteno que es un pigmento de color naranja, el
licopenode color rojo y la xantfila de color amarillo. Los Cloroplastosson plstidos que
presentan el pigmento de color verdeclorofila cuya funcin principal es realizar la
fotosntesis.
II. MATERIALES:
III. PROCEDIMIENTO:
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3.1 Observacin de mitocondrias en epitelio bucal
1. En una lmina colocar dos gotas de cultivo de protozoarios y una gota del colorante
rojo neutro, mezclar dejar reposar 2 min.
2.Cubrir con una laminilla y observar la preparacin con objetivos de10x y 40x.
3.Reconocerlos lisosomas, teidos de rojo, en el interior de los Paramecium.
1. Seleccionar una hoja joven de Elodea y colocarla sobre una gota de agua en una lmina
portaobjetos.
2. Cubrir la muestra con una laminilla.
3. Observar al microscopio con objetivos de 10x y 40x.
4. Reconocer los cloroplastosde color verde en el citosol de la clula.
Las vacuolas pueden ocupar entre el 30-90% de la clula vegetal y en algunos casos contienen
pigmentos solubles en agua.
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IV. PROTOCOLO:
EPITELIO BUCAL
PROTOZOARIO
HOJA DE ELODEA
PAPA
AJ AMARILLO
ZANAHORIA
BETARRAGA
V. CUESTIONARIO P#9
VI.INFORME
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CURSO DE BIOLOGAMOLECULAR
PRCTICA N 10
ACCIN ENZIMTICA
Las Enzimas son en su mayora protenas con actividad de catalizador biolgico que tienen
como funcin acelerar la velocidad de las cientos de reacciones qumicas que se producen en la
clula. El mecanismo de accin se realiza de la siguiente manera:
E + S ES E + P
I. OBJETIVOS
II. MATERIALES
Gradilla
Bistur
Mortero con piln
Hgado de pollo
Solucin salina de NaCl 0,9%
Tubos de prueba de 16 x150 mm/13x100mm
Agua oxigenada = Perxido de hidrgeno = H2O2
Dixido de manganeso (MnO2)
Hisopos
Fsforos
Pipetas Pasteur
Pipetasde 1mL
Azul de metileno
Aceite
Succinato de sodio 0,1 M
Buffer Fosfato pH 7.4
Mechero de alcohol
Placas Petri
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III. PROCEDIMIENTO
Preparacin
5. Al tubo1 incorporar 0,5mL de aceite por las paredes y dejar en la gradilla- NO MOVER.
6.Al tubo 2 agregar 1mL de homogenizado de hgado e inmediatamente incorporar 0,5mL
de aceite por las paredes- NO MOVER.
V.INFORME
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CURSO DE BIOLOGA MOLECULAR
PRCTICA N 11
I. OBJETIVOS
II. MATERIALES
III. PROCEDIMIENTO
3.2ColoracinWright o Giemsa
1. Cubrir el frotis con colorante Wright o Giemsa por 1 min.
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2. Sin eliminar el colorante agregar agua destilada y dejar actuar por 10 min.
3. Eliminar luego el colorante y lavar suavemente con agua de cao.
4. Dejar secar la lmina coloreada.
5. Observar la preparacin con el objetivo de 100xy aceitede inmersin
IV.PROTOCOLO
Reconocer y esquematizar los siguientes elementos formes que sern observados con ayuda del
microscopio:
1. LEUCOCITOS GRANULARES:
a) Neutrfilo segmentado: presenta un ncleo con varios lbulos (2-5) unidos por bandas de
cromatina.
2. LEUCOCITOS AGRANULARES:
3. PLAQUETAS:
Son los elementos formes ms pequeos de las clulas de la sangre, de forma redonda.
Son esenciales en la coagulacin sangunea.
De forma generalmente redonda, sin ncleo, de color rosa intenso, contiene hemoglobina,
que es la protena que se encarga del transporte de oxgeno y anhdrido carbnico.
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Neutrfilos
Eosinfilo
Basfilo
Monocito
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Linfocitos
V.INFORME
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CURSO DE BIOLOGAMOLECULAR
PRCTICA N 12
I. OBJETIVO:
II. MATERIALES:
III. PROCEDIMIENTO:
1. Cultivar los bulbos de cebolla en vasos pequeos conteniendo agua corriente, la que deber
cambiarse cada 24 h, mantenidos en oscuridad, a 25C y sometidos a aireacin constante.
2. Despus de 48 a 72 h, arrancar con ayuda de una pinza 2 a 3 races del bulbo, cortar 2 cm
de la parte apical y colocarla sobre una placa Petri que contenga Orcena.
3. Calentar la placa en la llama de un mechero de alcohol hasta aproximadamente los 60C y
observar la emisin de vapores blancos evitando la ebullicin del colorante.
4. Dejar enfriar y repetir esta operacin cuatro veces.
5. Enfriar y dejar reposar durante 15 min.
6. Colocar la raicilla en la lmina portaobjeto, cortar 2 mm de la punta, aadir una gota de
Orcena fra, cubrir la preparacin con laminilla.
7. Con la punta de un lpiz golpear suavemente la preparacin describiendo crculos
concntricos para permitir la extensin del tejido meristemtico.
8. Eliminar el exceso de colorante usando una tira de papel filtro.
9. Observar la preparacin con objetivo de 100x y aceite de inmersin.
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IV. PROTOCOLO
Reconocer y esquematizar las diferentes fases del ciclo celular que se observan:
Profase: Fase en la cual los cromosomas se observan con sus dos cromtides hermanas.
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V. CUESTIONARIO P#12:
VI.INFORME
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CURSO DE BIOLOGAMOLECULAR
PRCTICA N 13
I. OBJETIVO:
II. MATERIALES:
Guantes
Placas excavadas de porcelana
Lancetas hematolgicas estriles
Algodn
Alcohol yodado
Sueros comerciales Anti-A, Anti-B y Anti-D o Rh
Mondadientes
Recipiente de descarte
III. GENERALIDADES:
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GRUPOS SANGUNEOS
(AGLUTINGENOS) (AGLUTININAS)
A A Anti-B
B B Anti-A
AB AB Ninguno
(Receptor universal)
IV. PROCEDIMIENTO
1. Limpiar la yema del dedo anular con algodn embebido en alcohol yodado.
2. Realizar la puncin utilizando una lanceta de hematologa estril.
3. En una lmina #1 colocar 2 gotas de sangre y en la lmina #2colocar 1 gota de sangre.
4. Agregar a la lmina#1 una gota de suero Anti-A y una gota de suero Anti-B sobre la
respectivagota de sangre y mezclar usando palitos mondadientes separados.
5. Agregar a la lmina #2 una gota de suero Anti-D (Anti-Rh)y mezclar con la gota de sangre
usando otro palito mondadientes.
6. Observar la aglutinacin e identificar a qu grupo sanguneo y factor Rh pertenece.
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MTODO DE RECONOCIMIENTO PRCTICO
GRUPO AGRUPO B
Anti-AAnti-B Anti-AAnti-B
GRUPO ABGRUPO O
Anti-AAnti-B Anti-AAnti-B
FACTOR Rh (+)FACTORRh(-)
Anti-D Anti-D
V.CUESTIONARIO P#13:
VI.INFORME;
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CURSO DE BIOLOGAMOLECULAR
PRCTICA N14
EL CDIGO GENTICO
I. OBJETIVOS:
II.MATERIALES:
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III.PROCEDIMIENTO
Ejemplo:
Pro
Reconocer:
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SECUENCIA I
Segmento A:
ADN 5 a t g c g c t c a c g t g a C a c a a t g
ADN3
Mensajero
Aminocido
Segmento B
ADN 5 c c c g g t a c g t g t g c A c a a a t g
ADN3
Mensajero
Aminocido
Segmento C
ADN 5 g g t a t a c t a t c a t c T t a g a t a
ADN3
Mensajero
Aminocido
Analice y responda:
1.Nmero de codones:
2.Nmero de aminocidos empleados:
3.Secuencia usada por la ARN polimerasa:
4. Sitios de glicosilacin:
SECUENCIA II
Segmento A:
ADN 5
ADN3 T a c g g c a t g g g g c a C c c a t t T
Mensajero
Aminocido
Segmento B
ADN 5
ADN3 g c c c c g t a g a t a c a T c a t g t t
Mensajero
Aminocido
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Segmento C
ADN 5
ADN3 c g a c t t g g a a a a a t C c c g g a T
Mensajero
Aminocido
Analice y responda:
1. Nmero de codones:
2. Nmero de aminocidos empleados:
3.Secuencia usada por la ARN polimerasa:
4.Sitios de glicosilacin:
SECUENCIA III
1. Nmero de aminocidos:
2.Nmero de codones:
3. Por qu el primer aminocido no es la metionina?
4.Cmo podramos averiguar a qu protena pertenece esta secuencia?
IV.CUESTIONARIO P#14
V.INFORME
* * * * *
40