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1. Conceptos bsicos.
2. Bacterias, estructura
3. Mecanismo de Accin Patgena
4. Factores Determinante de la Accin Patgena
5. Agentes Antimicrobianos
6. Resistencia Bacteriana a los Antimicrobianos y Antibiograma
7. Virus, Estructura
8. Hongos, Clasificacin
9. Anexos
10. Bibliografa Consultada
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Introduccin a la Microbiologa
CONCEPTOS BSICOS:
BIOLOGA
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MICROBIOLOGIA = Ciencia que se encarga del estudio de los microbios
(Hongos, Bacterias y Virus).
MICROBIO O MICROORGANISMO = Son organismos muy pequeos, de
tamao microscpico, dotados de individualidad, con una organizacin biolgica
elemental. Pueden ser unicelulares multicelulares (los conformados por clulas
indiferenciadas, que al asociarse no forman tej. , pues cada una de ellas constituye
un organismo completo, independiente y dotado de la capacidad de reproduccin).
MICROBIOLOGIA CLNICA = Es una disciplina aplicada de la medicina que
estudia los microorganismos capaces de provocar enfermedades en los seres vivos.
TEORIA MICROBIANA DE LAS INFECCIONES = la misma resulta de la
semejanzas existentes entre los procesos fermentativos y las enfermedades
infecciosas (por ej. Ambos se producen por causa de microorganismos)
POSTULADO DE KOCH = Por el se establecen las condiciones que debe reunir
un microorganismo para ser considerado como agente causal de una determinada
enfermedad infecciosa. Tales condiciones son :
1. Demostrar la presencia del microorganismo en todas las personas enfermas
y su ausencia en las personas sanas.
2. Que el microorganismo pueda ser aislado en un cultivo slido a partir de las
lesiones producidas en el enfermo.
3. Que el microorganismo pueda reproducir la enfermedad, al ser inoculado en
un animal de experimentacin susceptible.
4. Que el microorganismo pueda ser aislado nuevamente a partir de las
lesiones producidas en dicho animal.
5. Que el microorganismo induzca una respuesta inmune especifica en el
husped detectada por serologa (por la aparicin de anticuerpos especficos).
CELULAR ANIMAL
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Introduccin a la Microbiologa
CELULAR VEGETAL
CELULAR PROTISTA
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b. Membrana Citoplasmtica = Esta no presenta esteroles en su
composicin. Asociada a ella hay mesosomas (repliegues internos) y enzimas
generadoras de ATP.
c. Citoplasma = No presenta organelas . Es de aspecto granular, donde se
distinguen granulaciones mayores (sustancias de reserva) y granulaciones
submicroscpicas (ribosomas 70 s). Inmersos en el citoplasma encontramos
ADN extracromosmico (Plsmido) enrollado en forma circular, los cuales
contienen informacin gentica para la sntesis de sustancias no
indispensables.
d. Nucleoide = Contiene el material hereditario y de especificidad (ADN
cromosmico), conformando 1 solo cromosoma dispuesto como 1 filamento en
doble hlice, apelotonado en algn sitio del citoplasma. .En las cadenas hay
ausencia de Histonas. Decimos que no es un ncleo verdadero porque no
posee una membrana que lo separe netamente del citoplasma
e. Divisin = La divisin celular ocurre por divisin o fisin binaria , la cual
puede ser por fisin , conjugacin o por medio de un bacterifago (virus que
infecta a una bacteria , y por lo que el genoma viral se recombina con el
genoma de la bacteria)
f. Motilidad = Por Flagelos
g. Pilis o Fimbrias = Permiten la Adherencia a receptores de las Clulas
huspedes y la transferencia de material gentico entre algunas bacterias
BACTERIAS
Son Microorganismos procariotas, unicelulares, de tamao microscpico (del
orden de los micrones).
CARACTERSTICAS PRINCIPALES :
Estn contenidas en una Pared Celular
Poseen ambos tipos de cidos nucleicos (ADN y ARN)
Se multiplican por fisin binaria (tipo de reproduccin asexual, donde la
replicacin es lineal, comenzando en un extremo de la cadena de ADN y
terminando en el otro, decimos que es semiconservadora ya que c/u de las
cadenas complementarias sirven de molde para la sntesis de otra).
Pueden ser :
a. Aerobias o Anaerobias
b. Mviles o Inmviles
c. Patgenas (causan enfermedades en el organismo al que invaden) o
Saprofitas (es decir, viven libres en la naturaleza, se nutren de materia
inorgnica u orgnica, siendo responsables de la transformacin de la
materia orgnica en mineral y de los ciclos del N y del C en la naturaleza).
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2. MEMBR. CITOPLASMTICA
ELEMENTOS OBLIGADOS 3. CITOPLASMA
(Constantes) 4. RIBOSOMAS
5. NUCLEOIDE
A. GLUCOCALIX
B. FLAGELO
ELEMENTOS C. FIMBRIAS
FACULTATIVOS D. CAPSULA
(Inconstantes) E. ESPORAS
F. PLASMIDOS
1.- PARED CELULAR : Es una estructura gruesa y rgida presente en casi
todas las especies bacterianas dando forma a la bacteria; se halla
separada de la Memb. Citoplasmtica por el Espacio Periplasmtico (este espacio
virtual es ms manifiesto en las bacterias Gram , y, all encontramos protenas y
enzimas como la fosfatasa alcalina y cida, desoxiribonucleasas, ribonucleasas y
penicilinazas). Se pone en evidencia utilizando la Tincin de Gram (la que permite
distinguir bacterias Gram - , bacterias Gram + y bacterias sin pared (gnero
Micoplasma y formas L Bacterianas) o bien utilizando tincin de Ziehl Neelsen
podemos observarla en el caso de los bacilos Acido Alcohol Resistentes (BAAR).
Composicin : Su principal componente es el Pptidoglicano o
Murena (en el caso de las Gram : N- Acetilglucosamina + N Acetilmurmico;
y en el caso de las BAAR : N Acetilglucosamina + N Glicosil murmico)
Propiedades y Funciones:
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Sntesis de la Pared : Los precursores son sintetizados en el citoplasma
bacteriano, luego son transportados a travs de la MP, se forma y elonga un
polmero lineal y finalmente se establecen puentes de unin entre los polmeros
constitutivos. La sntesis de la pared es inhibida por los - Lactmicos.
Esquema de los diferentes tipos de pared celular :
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5.- NUCLEOIDE : (ADN CROMOSMICO) Consiste en un nico cromosoma
(filamento de ADN) que se encuentra apelotonado (en su estructura en doble hlice
no presenta puentes de histonas). En algunos puntos entra en relacin con la MP o
con sus Mesosomas.
Propiedades y Funciones :
A.- GLUCOCLIX =Es una delgada capa externa compuesta por Polisacridos
(Levano o Dextrano) que facilitan la adherencia de la bacteria.
B.- FLAGELO = Se trata de una estructura helicoidal que se comporta como
rgano locomotor de la bacteria, adems presenta el Ag H (especfico de tipo) que
es el responsable de la aglutinacin flagelar..
C.- FIMBRIAS O PILIS = Se trata de estructuras filamentosas carentes de
movilidad, constituidas por una protena llamada Pilina. Por lo general estn
presentes en las bacterias Gram , mientras que en las bacterias Gram + slo se
describen en el Corinebacterium Renale y algunos Streptococos.
Propiedades y Funciones :
1. Propiedad Antignica
2. Brindan Adherencia : ya sea a superficies de ltex , hemates y/o al
glucoclix de las clulas epiteliales.
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1. Propiedad Antifagocitaria : Dificulta o impide la
fagocitosis, lo cual potencia su virulencia ya que favorece la
multiplicacin y facilita la invasin
2. Brinda Proteccin frente a Fagos y ATB : Dificulta la
fijacin de bacterifagos e impide el pasaje de ATB que puedan
afectar a la bacteria.
3. Propiedades Antignicas :
Propiedades y Funciones :
Son resistentes al calor, a la desecacin, a las presiones, a los agentes
qumicos, a los rayos U.V. y radiaciones ionizantes.
Mantienen la virulencia de la forma vegetativa de la que derivan.
Tiene un muy bajo metabolismo, que les permite permanecer viables por
perodos tiempo indefinidos.
Tiene propiedades inmunognicas.
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F.- PLASMIDOS = (ADN EXTRACROMOSOMICO) Se trata de una estructura
esfrica, que codifica independiente del nucleoide y que contiene informacin
gentica para sintetizar sustancias que no son indispensables para la bacteria.
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Tipos y Funciones : Los Plsmidos se clasifican por los caracteres que
expresan y se designan segn esas propiedades
Plsmido "Ent" : Codifica la sntesis de enterotoxinas.
Plsmido "Inv" : Da a las bacterias enteroinvasivas la capacidad de
penetracin a las clulas epiteliales del intestino.
Plsmido "K" : Codifica la Produccin de los Ag de superficie de la
Escherichia Coli.
Plsmido "Hly" : Codifica la produccin de - Hemolisina, responsable de la
lisis de hemates
Factor F (sexual) : Son plsmidos autotransferibles, responsables de la
transferencia de genes por conjugacin que codifican la produccin de pilis
sexuales o F.
Factor Col : codifican la produccin de bacteriocinas (compuestos similares
a los ATB) que resultan letales para otras bacterias .
Factor R (de resistencia) : Es un plsmido, presente en ciertas bacterias
Gram , que codifica los mecanismos de resistencia a uno o ms ATB.
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Respecto a este punto, podemos decir que existen :
A. Bacterias Sin poder de Penetracin :
Estas bacterias No Precisan atravesar el epitelio para
Expresar su Accin Patgena. Estas se adhieren, se
multiplican, colonizan el epitelio donde liberan una
exotoxina soluble que al ser absorbida en la mucosa
puede ejercer o una accin local o general.
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Hialuronidasa (Staphylococo Aureus,
Streptococo Pyogenes, etc.)
b.- Desdoblamiento de :Protenas (por
parte de proteasas)
Mucina (Mucinasas)
Lpidos (lipasas)
Ac. Nuclicos (Nucleassa)
c.- Proceso de Coagulacin Coagulasa
(transforma fibringeno en fibrina)
Ej. :
Staphylococ
o Aureus
Quinasa (Transforma plasmingeno en
plasmina)
Ej. :
Streptococo
Pyogenes,
Staphylococ
o Aureus.
CAPACIDAD LESIONAL = Es aquella capaz de producir alteraciones y/o
lesiones en las clulas y tejidos del husped, responsables del cuadro
patolgico. Estas alteraciones pueden ser producidas por accin directa
(presencia de Antgenos capsulares, somticos o flagelares) o por
mecanismos de accin Indirectos (produccin de Sust. Txicas para las
clulas huspedes), lo cuales producen un proceso inflamatorio y ponen en
marcha mecanismos inmunolgicos responsables del cuadro clnico.
Factores Intervinientes:
1. ACCION TOXICA : Determinada por la
produccin de Exotoxinas y/o Endotoxinas
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formaldehdo)no alteran su antigenicidad, y los toxoides
resultantes proporcionan algunas de las vacunas ms eficaces
(Ej. Toxoide tetnico y toxoide diftrico)
o Endotoxinas = Son sustancia de naturaleza lipopolisacrida,
localizadas en la superficie celular del microorganismo y que
son liberadas por lisis bacteriana. Son producidas
principalmente por las bacterias Gram de los gneros
Escherichia, Salmonella, Shigella y Klebsiella. Los
lipopolisacridos (LPS)estimulan una gran variedad de
respuestas por parte del husped. Desde el punto de vista
clnico, los efectos ms importantes de los LPS son la fiebre y el
colapso vascular o shock. La fiebre, actualmente se atribuye a la
accin de citoquinas sobre el hipotlamo (principalmente la IL-
1 y el factor tumoral o TNF) y puede beneficiar al husped, al
microorganismo o a ambos . En respuesta a los LPS, los
macrfagos son quienes producen estsas2 citoquinas. El shock
por Endotoxinas (shock sptico) se suele asociar con la
diseminacin sistmica del microorganismo y, el ejemplo ms
comn es las septicemia por bacterias Gram - como Escherichia
Coli, Nesisseria meningitidis, etc.
1. MECANISMOS INFLAMATORIOS :
Ya sea por mecanismos de accin directa o indirecta,
las bacterias ponen en marcha el proceso
inflamatorio; permitiendo que lleguen al foco
inflamatorio los Fagocitos. Si el microorganismo
fuere capaz de producir la destruccin de los
Fagocitos, la liberacin de enzimas lisosmicas desde
estos ltimos, ampliarn an ms la reaccin
inflamatoria y llevando a alteraciones patolgicas
como la formacin de granulomas.
2. MECANISMOS INMUNOLGICOS :
Las alteraciones patolgicas tambin pueden deberse
a fenmenos de hipersensibilidad. La simple Rta.
Inmune ya representa la produccin de una serie de
reacciones como vasodilatacin, edema, hiperplasia
ganglionar, infiltracin celular, etc.; estas en
condiciones normales apenas influyen en el cuadro
clnico , pero si se produce un fenmeno de
hipersensibilidad (respuesta inmune exagerada) el
mismo puede ser el responsable de procesos
patolgicos graves o incluso causales de muerte.
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ADHERENCIA = Es el factor ms importante en el momento de la
colonizacin. Se lleva a cabo mediante la utilizacin de adhesinas que
interactan con los receptores superficiales de la clula husped.
ACCION TOXICA = Como vimos sta se debe a la produccin de
Exotoxinas y/o Endotoxinas, por ejemplo :
Neurotoxinas
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Enterotoxinas (citotnica y citotxica)
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OTROS COMPONENTES BACTERIANOS = Como por ejemplo los
antgenos flagelares, capsulares, de pared o somticos; que son capaces de
favorecer la Respuesta Inmune.
FACTORES DE VIRULENCIA :
FERMENTOS = Son enzimas como Mucinasas, Glicosidasas o
Neuraminidasas que descomponen las protenas del moco, facilitando l
penetracin.
FACTORES DE SUPERFICIE = Como la Cpsula y/o los Antgenos de
Pared que inhiben la fagocitosis y la accin de sustancias bactericidas de la
mucosa.
PROTEASAS Ig A =Es una Enzima proteoltica que descompone la Ig A
(subclase 1) desactivando el sistema local de defensa de la mucosa. La sintetizan
microorganismos como Neisseria Meningitidis, Neisseria Gonorrhoeae,
Streptococo Pneumaoniae y Haempophylus Influenzae, etc.
BACTERIOCINAS = Son sustancias que actan como antibiticos frente a
otras bacterias , lo que les permite competir con bacterias integrantes de la flora
normal microbiana del husped.
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BACTERIAS QUE NO SE TIEN CON GRAM
A. MYCOPLASMAS : No tienen Pared
B. MICOBACTERIUM (TUBERCULOSO Y
LEPRAE) : Son BAAR (bacilos cido alcohol resistentes),
se tien con Ziehl Neelsen. No pedir Cultivo
C. ESPIRILOS (TREPONEMA PALIDUM) : es
una espiroqueta, que se tie con Giemsa o impregnacin
Argntica; visibles a la microscopa de campo oscuro o de
contraste de fase. No pedir Cultivo
D. CHLAMIDEAS (PNEUMONIAE Y
TRACHOMATIS) : Son de Parsitos Intracelular
Obligados
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El poder patgeno no solo depende de la especie de microorganismo
sino tambin de las caractersticas del husped:
N de Bacterias + Virulencia (Mecanismos de Accin
Patgena y factores de virulencia)
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VIRULENCIA = Es el mayor o menor grado de Patogenicidad que posee un
microorganismo. Hace referencia a la cepa de determinado microorganismo.
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integre al de la bacteria, de tal forma que los genes parasitados por el fago pueden
determinar que se expresen nuevos caracteres en el fenotipo (Lisogenia por
fagoconversin); as el Corinebacterium Diphtheriae slo ser patgeno ( por lo
tanto toxignico) cuando se halle parasitado por un fago.
AGENTES ANTIMICROBIANOS (ANTIBITICOS O ATB)
.- TIPOS : Pueden ser Bactericidas o Bacteriostticos
1. Bactericidas : ATB con capacidad para destruir microorganismos sensibles
o susceptibles, sin que medie la participacin de las defensas humorales o
celulares del husped.
2. Bacteriostticos : ATBG que inhiben de forma reversible los procesos
metablicos esenciales de cierta bacteria.
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antibiograma se debe decidir en funcin de : la especie aislada, de los ATB
disponibles en la institucin y del foco de la infeccin.
CONCEPTO DE ANTIBIOGRAMA : Conjunto de procedimientos que permiten
determinar la sensibilidad in vitro de un microorganismo ante un determinado
ATB.
Las pruebas de sensibilidad o susceptibilidad antimicrobianas que se utilizan para
determinar la actividad de un ATB frente a una cepa en particular, son
principalmente de 2 tipos :
DILUCIN EN CALDO = Puede realizarse en medios de cultivos lquidos
o slidos. Es un mtodo cuantitativo que sirve para determinar la sensibilidad y
resistencia de las bacterias.
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clasificando a la cepa como Sensible (S) o Resistente y/o Intermedia
(R) para ese ATB.
CIM : (CONCENTRACION INHIBITORIA MINIMA) Es la concentracin
ms baja de un ATB capaz de inhibir el crecimiento de un microorganismo en
condiciones estandarizadas.
Como gua para seleccionar la dosis adecuada a ser administrada, puede utilizarse
la medicin de la concentracin de ATB en el suero del paciente; para lo cual se
toma una muestra de suero del paciente (bajo tratamiento ATB) antes de la
administracin de una nueva dosis endovenosa (en el valle de la curva de
concentracin) y luego se toma otra muestra al terminar la infusin endovenosa
(en el pico de la curva de concentracin). Esto permite determinar el PIS y el PBS
para monitorear y eventualmente corregir la dosificacin del ATB empleado.
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PIS : (PODER INHIBITORIO DEL SUERO) Es la mayor dilucin de un ATB
en el suero del paciente, capaz de inhibir el desarrollo visible de un
microorganismo.
PBS : (PODER BACTERICIDA DEL SUERO) Es la mayor dilucin de un
ATB en el suero del paciente, capaz de matar al inculo en un 99,9 %
VIRUS
Son microorganismos subcelurares, que se comportan como parsitos
intracelulares estrictos
CARACTERSTICAS GENERALES :
Poseen tamao ultramicroscpico (invisibles al M.O., salvo el Poxvirus).
Su estructura elemental est formada por 1 slo tipo de cido nuclico (ARN
o ADN), contenido en la capside, la que a su vez puede o no estar rodeada por
una envoltura lipoprotica o peplos.
Carecen de organelas y no poseen ribosomas (slo algunos virus mayores
contienen algunos fermentos).
En medios inanimados se comportan como partculas inhertes ya que en
ellos son incapaces de crecer y multiplicarse.
En el medio intracelular el cido Nucleico viral utiliza los mecanismos de
biosntesis de la clula husped para replicarse e inducir la sntesis especfica de
sus protenas que al integrarse al genoma replicado originarn nuevos viriones.
No son sensibles a los ATB pero el Interfern inhibe su mecanismo de
replicacin.
ESTRUCTURA y MORFOLOGIA :
ACIDO NUCLEICO : Como ya dijimos posee un solo tipo de Ac. Nucleico
(ARN o ADN) que puede encontrarse en forma monocatenaria, bicatenaria,
lineal o circular. La funcin del cido nucleico es suministrar la informacin
para programar, en la clula husped, la sntesis de sus propios componentes.
CAPSIDE : Es una cubierta proteica que rodea al Ac. Nucleico viral,
protegindolo y facilitndole la penetracin en la clula susceptible.
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4. Simetra Compleja = Como por ej. la del Poxvirus.
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Virus ARN :
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REPLICACIN VIRAL : Los virus carecen de metabolismo y se comportan como
partculas inhertes en medios inanimados, pero dentro de las clulas susceptibles,
el Ac. Nucleico viral emplea los mecanismos de biosntesis clula para replicarse e
inducir la sntesis de protenas especficas que posteriormente se integraran al
genoma replicado para originar nuevos viriones, los cuales se liberaran de la clula
husped para luego infectar otras clulas.
1. ETAPA DE INICIACIN : Comprende los pasos de Adsorcin
(Adherencia), Penetracin y Desnudamiento.
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Traslacin directa a travs de la MP Virus
Desnudos
o Por captacin del virin a travs de fagosomas
o Por fusin del peplos a la MP Virus Envueltos
o Desnudamiento o prdida de la cubierta : El peplos y/o la
capside se desprenden y el Ac. Nucleico viral es liberado hacia el citoplasma
celular
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Monocatenario configurada en sentido ,
inmediatamente despus se forma ADN
Bicatenario que ingresa al ncleo celular
integrndose al genoma del husped. Luego ese
ADN viral (integrado al genoma celular), por
obra de una polimerasa del husped ser
transcrito en ARNm viral
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muchas cadenas positivas, formando la progenie. (Ej.
Poliovirus)
Virus ARN Monocatenario configurado en sentido :
El ARN viral (de configuracin ), primeramente por obra de
una polimerasa viral es trascripto en ARNm viral de sentido
+, ste ser traducido en los ribosomas produciendo una
ARN polimerasa viral, sta polimerasa luego origina, a partir
de la plantilla de ARN de configuracin , un ARN viral de
configuracin +, que ser trascripto repetidamente en
muchas cadenas negativas; es decir, se forma la progenie.
(Ej. Virus de la Rabia)
Virus ARN Bicatenarios : En este tipo de virus la
polimerasa viral acta sobre la cadena de ARN de
configuracin transcribindola en ARNm viral de sentido
+, luego sta cadena acta como plantilla para la sntesis de
nuevas cadenas de sentido a fin de reestablecer la
condicin bicatenaria de la progenie. (Ej. Rotavirus)
Retrovirus (ARN Monocatenarios de sentido +) : En
este tipo de virus el ARN viral, por obra de una transcriptasa
inversa, se transforma en ADN viral el cual se integrar al
genoma del husped en el ncleo celular; all utiliza una ARN
polimerasa del husped para transcribir a partir del ADN
viral la sntesis de ARN viral.
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ANTIVIRALES
CONCEPTO DE DROGAS ANTIVIRALES : Son drogas que interfieren con el
ciclo intracelular de la replicacin, impidiendo la formacin de una progenie viral
infecciosa. Su mecanismo de accin interfiere con los pasos bioqumicos esenciales
de la replicacin viral.
CONCEPTO DE ACCION VIRUCIDA : Son soluciones formoladas, fenoladas,
iodadas, Ac. Oxidantes, Hipocloritos, etc., que actan directamente sobre la
partcula viral infectante, antes de que ingrese al husped susceptible. Son
utilizadas en la desinfeccin de ambientes y equipamiento.
CONCEPTO DE INMUNOMODULADORES : Son drogas que modifican la
respuesta inmune del husped, induciendo la destruccin de las clulas infectadas
y/o evitando que la accin citotxica del virus genere un dao que ponga en peligro
la vida del individuo. Dentro de este grupo de drogas se incluyen los
INTERFERONES
PRINCIPALES ANTIVIRALES :
AMANTADINA Y RIMANTADINA : Son tiles en la profilaxis contra
infecciones por Virus Influenza Tipo A; actuando sobre la etapa de iniciacin de
la replicacin viral. Sus efectos adversos ms importantes son : el insomnio y el
nerviosismo (los que desaparecen al suprimir el tratamiento).
RIBAVIRINA : Acta frente al Virus Sincitial Respiratorio (VSR), Virus
Influenza Tipos A y B, Virus ParaInfluenza, Virus del Sarampin, Virus
de la Hepatitis A y HIV
Efectos Adversos
En Aerosol : No se observa una toxicidad significativa.
Por Va Oral y/o Intravenosa : Provoca Anemia transitoria y Aumento de la
Bilirrubina.
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Trastornos Gastrointestinales (Nuseas, Vmitos y Diarreas)
Trastornos Neurolgicos (Parestesia, Ataxia, etc)
A elevadas dosis : puede causar anemia megaloblstica, Leucopenia y
trombocitopenia.
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SEGN LA FORMA DE CRECIMIENTO Y ESTRUCTURA
1.- LEVADURAS
2.- FILAMENTOSOS
3.- DIMORFICOS
SEGN EL TIPO DE REPRODUCCIN
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del suelo, plantas, alimento, etc.)para absorber
sustancias nutricionales.
FORMAS DE CRECIMIENTO :
1. Por ESPORAS : Las esporas son elementos de
reproduccin y resistencia que se forman por condensacin del
citoplasma y contenido nuclear, de manera que de una clula
madre se origina 4 o ms elementos hijos (cada uno de los
cuales contiene una parte del ncleo primitivo); las esporas
estn envueltas por una cubierta resistente (consistente en 2
membranas , una interna y otra externa) y pueden albergar una
o ms clulas divididas por septos. Poseen un esporo
germinativo de donde surgir una nueva hifa en el momento
del desarrollo.
Tipos :
o Exosporas o Conidios : Esporas asexuales que nacen por
brotacin en el extremo de un filamento de micelio; segn su tamao se
designarn como micro o macroconidios.
o Endosporas o Gonidios : Son esporas que se forman en el interior
del esporangio (vescula que contiene esporas)
o Clamidiosporas : Son esporas asexuales de pared gruesa y en
reposo
o Cigosporas : Son esporas formadas por la conjugacin entre los
filamentos de micelio
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o Brotacin o Gemacin = Consiste en la formacin de una yema en
una determinada zona de la clula madre; a medida que la clula hija
aumente de tamao se ir separando de la clula madre.
o Biparticin (Esporulacin Germinacin) : Mediante este
mecanismo se forman esporas que luego , en un medio adecuado,
germinarn.
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MICOSIS PROFUNDAS : Se pueden tratar con Itraconazol (a criterio mdico)
ESTERILIZACIN (ANEXO 1)
ESTERILIZAR =Procedimiento FsicoQumico que mata toda forma de vida , en
estado vegetativo y/o esporulado (forma de activa y forma de resistencia
respectivamente).
DESINFECTAR = Es eliminar todos los Microorganismos pero no sus formas de
resistencia.
DESINFECTANTE = Sustancia qumica que produce la desinfeccin de material
y que, por sus caractersticas, resulta txica o irritante para los tejidos vivos; por lo
que su uso est limitado a objetos y/o superficies inanimadas.
ANTISPTICO = Es una solucin que puede provocar inhibicin del crecimiento
microbiano y/o la muerte de los microorganismos; y que , por sus caractersticas
qumicas puede ser aplicada sobre tejidos vivos (piel, mucosas, heridas, etc.)
BIOSEGURIDAD (ANEXO 1)
MATERIAL BIOLGICO = Material orgnico o inorgnico que pueda contener
o ser reservorio de agentes patgenos.
EXPOSICIN = Contacto de :
- Piel y mucosas no intactas
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Introduccin a la Microbiologa
- Piel y mucosas intactas pero por tiempo
prolongado con material biolgico
- Lesin percutnea
- rea extensa
ACCIDENTE BIOLGICO = Toda exposicin accidental de un individuo a un
material biolgico. Los procedimientos bsicos ante un accidente biolgico son :
1.- Manejo adecuado del personal expuesto
2.- Reporte del accidente (en ficha epidemiolgica)
3.- Evaluacin clnica del personal expuesto
4.- Tratamiento del personal expuesto
CONCEPTO DE BIOSEGURIDAD = Es una disciplina encargada de
prevenir accidentes biolgicos, para ello se vale de un conjunto de medidas y
controles destinados a disminuir el riesgo de exposicin a agentes infecciosos o
patgenos en clnicas, hospitales, industrias, etc.
Objetivos Primarios:
1.- Proteger la vida del individuo, la comunidad y el medio ambiente.
2.- Evitar el contagio y/o infeccin del operador o terceros en un laboratorio que
maneje material biolgico
Pretende :
a.- Alertar sobre los riesgos potenciales
b.- Brindar conocimientos necesarios sobre las que permitan adoptar las normas de
conducta apropiadas para
medidas preventivas y de accin inmediata manejar material biolgico
frente a un accidente biolgico
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Introduccin a la Microbiologa
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Introduccin a la Microbiologa
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Introduccin a la Microbiologa
Disminuir la Morbimortalidad
Diagnstico Definitivo :
Paciente Infectado
Sintomtico Asintomtico
Examen Clnico Examen Microbiolgico Exmenes Complementarios
Diagnstico Presuntivo Pedido o solicitud de estudio Diagnstico de
Confirmacin
Recoleccin de Muestra
Mtodos Directos Mtodos Indirectos
Microscopa Cultivo, etc Pruebas Serolgicas Pruebas de Hipersensibilidad
Identificacin de germen
1.- La Solicitud de Examen Microbiolgico : El pedido para el examen
microbiolgico debe contener los siguientes datos :
Datos Filiatorios del Paciente
Tipo de Muestra, Fecha de Obtencin y Condiciones de la Toma de Muestra
Datos Clnicos
Estado Inmunitario
Tratamiento Medicamentoso previo a la toma de muestra
Determinacin a Realizar por el laboratorio
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Utilizar medios de transporte apropiados para mantener la viabilidad de los
microorganismos, presentes en la muestra, durante un tiempo prolongado.
Tipos de Tinciones :
A.- Tincin o Coloracin Negativa = Sirve para
visualizar algunas Bacterias y Hongos, por Ej. Cpsula
del Criptococcus Neoformans (presente en el LCR en
una meningitis mictica)
B.-Tincin o Coloracin Simple = (Giemsa) : Nos
permiten la visualizacin de algunas Bacterias, Hongos
y Parsitos
C.- Tincin o Coloracin Diferencial = (Gram,
Ziehl Neelsen, Kin Youn, Auramina
Rodamina, Gueguen, etc). La coloracin ms
utilizada para la deteccin de bacterias sin duda es la de
Gram y en casos de los acilos cido Alcohol Resistentes
o BAAR la basiloscopa (ziehl Neelsen y Kin Ypun) y
Gueguen para los hongos.
1.- Coloracin de Gram (Exmen bacteriolgico): Es
sencilla de realizar, rpida y de gran riqueza
informativa, es por ello
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que an no se pudo reemplazar la utilidad
de esta tincin. Gram permite clasificar las
bacterias en Gram+ y Gram- en funcin de
su estructura de pared; a dems nos
informa su morfologa y disposicin en el
espacio, lo cual nos orienta hacia un
diagnstico.
Fundamento de la Tincin de Gram :
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o CULTIVOS : Son ambientes artificiales que contienen los elementos
nutritivos y las condiciones fsico- qumicas que permiten el desarrollo,
crecimiento, conservacin y estudio de los microorganismos. Existen
diferentes medios de cultivo (tipos) :
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Procedimiento para el cultivo :
1.- Realizar la siembra del microorganismo (contenido
en la muestra) en un medio de cultivo apropiado.
2.- Incubar para generar un crecimiento visible. Es
necesario que el mdico solicitante conozca cuales son
los perodos razonables para realizar las diversas clases
de cultivos y que el laboratorio establezca un sistema
para informar resultados preliminares.
En Bacteriologa Clnica = se requiere de un perodo de
incubacin mnimo de entre 48 72 HS a una
temperatura de entre 35 C y 37 C
En Virologa Clnica = se requiere aproximadamente
entre 30 45 das de incubacin
En Micologa clnica = se requiere aproximadamente de
entre 7 15 das de incubacin; emplendose
universalmente como medio de cultivo el Agar
Saboureaud; al que se le puede adicionar ATB (para
inhibir el desarrollo de bacterias contaminantes) o
Cicloheximida (para inhibir el desarrollo de hongos
contaminantes).
3.- Si se observa el crecimiento de colonias se realiza
una nuevamente una coloracin de Gram (sta se
diferencia de la primera tincin de Gram por que no
visualizaremos ni hemates ni Leucocitos, slo
observaremos lo que se desarroll tras la incubacin del
cultivo).
4.- Realizar el Recuento de Colonias (expresando en
UFC / ml) y observar las caractersticas de la colonia. El
recuento de colonias generalmente es un recurso que se
utiliza mayormente en muestras de orina (2da. Porcin)
en infecciones urinarias; lavado bronquial en
infecciones del TRI y en muestras de catteres.
o IDENTIFICACIN DE GERMEN : Bacterias y hongos pueden ser
identificados, tras su aislamiento en cultivos slidos son identificados por :
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o ANTIBIOGRAMA : Sirve para registrar la susceptibilidad de un
determinado germen a los ATB. Se define como el conjunto de
procedimientos que permiten determinar la sensibilidad in vitro de un
microorganismo frente a un determinado ATB.
o ETODOS DIRECTOS RAPIDOS :
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diversos ndices bioqumicos del LCR no permiten diferenciar
claramente entre una Meningitis Bacteriana y una Viral.
o Contrainmunoelectroforsis (CIE) =
o Inmunoperoxidasa =
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contaminaciones que lleven a resultados de falsos
positivos.
Dot Blot =
o Slot Blot =
o Southern Blot =
o Northern Blot =
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4.- EIA =
5.- Contrainmunoelectroforesis (CIE) =
6.- Inmunodifusin en Gel de Agar (IDGA) =
7.- Inmunomicroscopa Electrnica Empleadas
para virus
8.- Inhibicin de la Hemaglutinacin
o REACCIONES DE HIPERSENSIBILIDAD RETARDADA : Son
reacciones intradrmicas como la (PPD, tricofitina, candidina,
histoplasmina, coccidioidina, paracoccidioidina, Aspergilina, etc.)
donde se efecta una inoculacin intradrmica no letal con antgenos de
cierto microorganismo para tras 24 48 Hs poner en evidencia la
sensibilidad del husped frente a ese microorganismo. Una prueba cutnea
positiva en un individuo sano indica contacto previo con el microorganismo, y
adquiere gran utilidad en los estudios epidemiolgicos.
Enfermedad Infecciosa
Respuesta Inmune del Husped
Por otro lado debemos tener presente que la relacin : Infeccin / Enfermedad ....
tambin se halla condicionada por la evolucin biolgica y la adaptacin al medio
ambiente por parte del husped y los microorganismos; lo cual explica la presencia
de portadores sanos, Infectados y Enfermos.
Para Rich Las enfermedades infecciosas son el resultado de la siguiente relacin :
Inculo + Virulencia + Hipersensibilidad
Enfermedad Infecciosa
Inmunidad Natural + Inmunidad Adquirida
A lo que dice Rich debemos agregar la presencia de Receptores de Superficie
presentes en las clulas, que pueden ser utilizados por diferentes microorganismos;
por Ej. El receptor CR2, presente en los Linfocitos B, permite la infeccin por VEB
y HIV; algo similar ocurre con los Linfocitos T, Macrfagos alveolares y del tracto
digestivo, quienes expresan el receptor ICAM que los vuelve susceptibles a
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infecciones por Rinovirus Micoplasmas y Poliovirus. Por esto decimos que no basta
con estar expuesto al microorganismo para contraer una determinada enfermedad.
La fisiopatogenia de toda enfermedad infecciosa est ligada a 3 factores : el
Medio Ambiente, el Microorganismo y el Husped.
a. Medio Ambiente: es quien condiciona o favorece
la aparicin de determinada enfermedad infecciosa.
b. Microorganismo : se vale de sus factores de
virulencia (Capacidad de : Colonizar, Penetrar,
Multiplicarse, Invadir y Lesionar) para causar , en mayor o
menor medida, la enfermedad.
c. Husped : pone en marcha sus mecanismos de
defensas (inmunidad natural e inmunidad adquirida)
frente al agente y/o sustancia extraa.
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composicin de las secreciones mucosas y cilioestsis de
los epitelios ciliados. En el estmago la secrecin de iones,
por parte de su mucosa, permite que en la luz se forme
cido clorhdrico, que es el responsable de un pH
altamente cido que acta como una barrera muy eficaz
contra el ingreso de microorganismos.
2. Los Movimientos Peristlticos : Dichos movimientos
adquieren gran importancia a nivel del intestino y vas
urinarias en donde impiden la colonizacin de agentes
patgenos ya que tienden a expulsar a los mismos.
3. El Lavado de Los Fluidos Orgnicos : La excrecin
de ciertos fluidos permite la expulsin de
microorganismos, lo que contribuye a evitar su
colonizacin e inclusive impiden que su proliferacin
alcance nmero crticos como para provocar una
infeccin.
4. La Flora Normal : Son microorganismos que residen en
piel y mucosas de personas sanas. La composicin de la
Flora vara de una localizacin a otra y depende de
factores como edad, sexo, tipo de alimentacin, grado de
higiene personal, condiciones de saneamiento ambiental,
condiciones socioeconmicas, clima, etc. La flora
microbiana normal resulta importante porque acta como
barrera defensiva frente a microorganismo total o
potencialmente patgenos; ya sea creando pH cidos en el
medio para destruir a los agentes patgenos (Bacilo de
Doderlein en Vagina) o bien compitiendo por nutrientes o
receptores celulares, produciendo bacteriocinas y tambin
estimulando constantemente al sistema inmulgico para
que reaccione rpidamente frente a posibles grmenes
patgenos, a dems resulta beneficiosa para la digestin
de productos no atacables por los fermentos digestivos y
para la sntesis de algunas vitaminas como la vit. K
(Lactobacillus del intestino).
5. Clulas Fijas : (Ej. Histiocitos, Macrfagos alveolares,
Clulas de Kupffer, Microglias, etc). Estos tipos de clulas
se hallan distribuidas estratgicamente en diversos sitios
del organismo (Piel, Pulmn, Hgado, SNC, etc) donde
actan como filtro para algunos grmenes patgenos.
6. Fagocitos : Constituyen la segunda barrera defensiva que
deben franquear los microorganismos cuando logran
traspasar las barreras anteriores por lo que ya han
ingresado al torrente sanguneo. Estas clulas mediante
procesos oxidantes, leuquinas, monoquinas, linfoquinas y
tambin mediante enzimas, que degradan fosfolpidos de
membranas, destruyen a los grmenes y/o a las clulas
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infectadas (esto no es aplicable a los BAAR ya que ellos
deben ser eliminados por un mecanismo ms complejo
que va asociado a la Inmunidad Especfica y al Sistema de
Complemento).
a. Eosinfilos = Participan en la eliminacin
de inmunocomplejos y algunos parsitos, evitando el
dao de vasos y tejidos. Adems son los responsables
de la magnitud de la Respuesta Inflamatoria.
b. Basfilos = Poseen grnulos de Histamina
y Heparina, lo que les confiere efectos vasoactivos y
anticoagulantes, esto explica su presencia en cuadros
terminales de Shock.
c. Macrfagos = Estos engloban al
microorganismo y activan la inmunidad especfica
d. Linfocitos y Monocitos : estos si bien son
clulas relacionadas con la inmunidad adquirida,
durante la primoinfeccin codifican la informacin e
inician una respuesta inmunolgica celular y
humoral.
7. Opsonizacin : Es el fenmeno de activacin de la
fagocitosis mediante opsoninas (son protenas del suero o
anticuerpos que cuando se combinan con un antgeno lo
vuelve ms fcil de fagocitar). Esta funcin es muy
importante sobre todo en los sinusoides del bazo. En los
pacientes esplenectomizados las alteraciones de la
Opsonizacin determina infecciones por grmenes
capsulados y Gram .
8. Sistema de Complemento : Es un conjunto de
protenas circulantes (C1 a la C9) que se activan
secuencialmente en presencia del complejo antgeno
anticuerpo y otras sustancias, dicha activacin puede
realizarse por la va clsica (desde C1) o por la va
alternativa (a partir de C3). Entre sus funciones
destacamos la hemlisis, la bacterilisis (en presencia de
anticuerpos especficos) y otras reacciones relacionados
con liberacin de mediadores qumicos por parte de
Mastocitos y Basfilos (C3a C5a), Quimiotxis (C5),
Opsonizacin (C3 C4), activacin de la Fagocitosis
(C3b), Transporte de inmunocomplejos (C3b), Citlisis
Inmune (C5), vasodilatacin, coagulacin intravascular,
contraccin de msculo liso, cambios de membrana,
formacin del complejo de taque a membrana o MAC, etc.
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determinada enfermedad; sta puede ser activa o
pasiva.
Su modulacin est relacionada con interleuquinas
(tipo I = activa a los linfocitos T; tipo II = induce el
crecimiento. Maduracin de Linfocitos T; tipo III activan a
los mastocitos y las restantes tipos inducen el crecimiento,
maduracin y diferenciacin de los Linfocitos B) e
interferones (protenas que se producen en las clulas
animales como respuesta a inductores virales como el
genoma viral; su funcin principal es inhibir la replicacin
viral. Tambin ciertas bacterias inducen su produccin).
I. Inmunidad Activa : Se produce tras padecer una
enfermedad infecciosa o tras ser expuesto a un agente
patgeno mediante vacunacin (inoculacin de
microorganismos atenuados o muertos y/o con sus
productos). En este caso, las clulas inmunitarias
reconocen al microorganismo y mantienen una
memoria inmunolgica del mismo, por lo que ante
una nueva exposicin se pone en marcha una
respuesta inmediata contra l mediante la liberacin
de anticuerpos especficos. Por lo tanto, la duracin
de este tipo de inmunidad es muy prolongada
(incluso en algunos casos de por vida).
II. Inmunidad Pasiva : Se produce tras inyectar a un
individuo inmunoglobulinas (anticuerpos)
provenientes de un animal o de otra persona
inmunizada activamente contra determinada
enfermedad. Mediante la inoculacin de estos
anticuerpos se consigue una proteccin inmediata del
sujeto, pero como dichas Ig inoculadas son
destruidas progresivamente, este tipo de inmunidad
es de corta duracin , es decir tienen una utilidad
transitoria frente a determinada enfermedad.
Inmunidad Humoral
Queda determinada por la capacidad de sintetizar anticuerpos y liberarlos hacia el
torrente sanguneo, es decir que los factores activos de la inmunidad humoral son
los anticuerpos presentes en los humores orgnicos. La denominada Clula
Plasmtica (ltimo estadio de diferenciacin de los Linfocitos B) es capaz de
sintetizar anticuerpos o inmunoglobulinas (Ig) con capacidad para combinarse con
antgenos inactivndolos y/o destruyndolos
Si la respuesta especfica frente al agresor es favorable, al cabo de 1 2 semanas, se
producen los distintos tipos de anticuerpos (Ig) los que interactan para eliminar al
patgeno y autolimitar la enfermedad. Pero si el microorganismo estaba registrado
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en la memoria inmunolgica (ligada a la Ig G) la respuesta defensiva es mucho ms
rpida. Los anticuerpos (AC o Ig) frente al germen actan de la siguiente forma : se
fijan a receptores y sitios estratgicos, lo recubren y aglomeran, e interactan con
otros componentes del sistema inmune como las protenas del sistema de
complemento para provocar la lisis del microorganismo.
Podemos decir que las funciones comunes de las Inmunoglobulinas son :
Control de la Respuesta Inflamatoria.
Neutralizacin de toxinas.
Fijacin a sitios estratgicos de microorganismos y partculas extraas
Interactuar con el Sistema de Complemento.
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3. Degranulacin (liberacin del contenido enzimtico de lisosomas dentro de
la vacuola)
4. Lisis del cuerpo, protena y/o agente extrao
BIBLIOGRAFA
1. Microbiologa Mdica, Mims, Playfair, Roitt, Wakelin, Williams
2. Microbiologa Mdica, De Torres
3. Cartillas de la Ctedra de Microbiologa, Facultad de Medicina,
UNT
4. Principios de Enfermedades Infecciosas, Mandell Douglas -
Bennet
5. Clnica Mdica, Farreras - Rozman
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