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5AV1
EQUIPO 2:
Fecha de realizacin:
21/Octubre/2016
Fecha de entrega:
4/Noviembre/2016
INSTITUTO POLITCNICO NACIONAL.
ESCUELA NACIONAL DE CIENCIAS BIOLGICAS.
DEPARTAMENTO FARMACIA.
TOXICOLOGA GENERAL PARA INGENIERA EN SISTEMAS
AMBIENTALES.
RESUMEN
INTRODUCCIN
Para ejercer su efecto txico los POF requieren ser metabolizados,a travs de la
fosforilacin de la enzima acetilcolinesterasa que es una enzima esencial con un
alto grado de especificidad en cuanto al sustrato, y que est presente unida a
estructuras celulares en las regiones de las sinapsis colinrgicas. Como parte del
sistema de la acetilcolina, esta enzima tiene la funcin fisiolgica de desdoblar
rpidamente la acetilcolina neurotrasmisora (AC) en colina y cido actico, y, de
esta manera, inactivarla.
OBJETIVOS
Evaluar la inhibicin de la actividad de la acetilcolinesterasa en el cerebro de
ratones producida por la exposicin aguda a un POF.
INSTITUTO POLITCNICO NACIONAL.
ESCUELA NACIONAL DE CIENCIAS BIOLGICAS.
DEPARTAMENTO FARMACIA.
TOXICOLOGA GENERAL PARA INGENIERA EN SISTEMAS
AMBIENTALES.
HIPOTESIS
A mayor concentracin del pesticida utilizado, la actividad de la enzima
acetilcolinesterasa ser menor. De la misma manera, a menor concentracin de
pesticida, mayor actividad de la enzima, es decir mayor hidrolizacion de
acetilcolina.
METODOLOGA
Reactivos
1) Buffer Tris pH 7
3) Hidroxilamina alcalina 2 M
4) cido clorhdrico 4 N
DESARROLLO DE LA PRCTICA
Centrifugar a 9,000
Separar el cerebro de rpm/15 min para
Despus de la los ratones, colocarlo en obtener la fraccin S9
exposicin aguda a mortero, agregar 2.0 ml (sobrenadante) para la
diferentes dosis del de agua desionizada y evaluacin de la
txico. macerar hasta la actividad de la
disgregacin total, acetilcolinesterasa por
el mtodo de Hestrin.
Mtodo de Henstrin.
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TOXICOLOGA GENERAL PARA INGENIERA EN SISTEMAS
AMBIENTALES.
RESULTADOS
Concentraci Absorbencia
n (mg/kg) (nm)
0 0.122
1 0.244
2 0.56
3 0.602
INSTITUTO POLITCNICO NACIONAL.
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TOXICOLOGA GENERAL PARA INGENIERA EN SISTEMAS
AMBIENTALES.
4 0.776
5 1.095
1.2
0.6
Absorbancia (nm)
0.4
0.2
0
0.5 1 1.5 2 2.5 3 3.5 4 4.5 5 5.5
Concentracin (mg/kg)
y0.1918 x0.08
y = absorbencia (nm)
Despejando x:
y0.08
x
0.1918
Obteniendo as lo siguiente:
(mg/kg)
1 133.33 2.4452 3.347 3.5192 4.3691 2.9509 3.1282
2
2 200 2.8310 2.273 3.1908 2.8362 2.6120 2.7007
2
3 300 2.1689 5.245 3.4932 3.8321 3.3159 3.9520
0
4 450 2.5130 2.7111 2.5391 3.3420 3.0396 5.9019
5 675 2.3826 3.962 4.6350 3.4358 3.5818 4.0875
4
6 1012.5 2.5182 4.348 3.4254 3.6131 3.4775
2
1 1518.75 1.9551 3.086 2.8050 1.9812 2.4504 2.9040
5
2 TESTIGO 2.486 2.0437 2.9979 2.1949 2.2679
9
Esto fue realizado durante treinta minutos, as que para obtener los MOL/min se
realiz la conversin, y se obtuvo lo siguiente:
Concentraci Absorbencia
n (mg/kg) (nm)
0 0.154
2 0.223
4 0.265
6 0.289
8 0.323
10 0.329
0.35
f(x) = 0.01x + 0.2
0.3 R = 0.95
0.25
0.2
Absorbencia (nm)
0.15
0.1
0.05
0
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11
Concentracin (mg/kg)
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y0.0135 x0.2048
y = absorbencia (nm)
Despejando x:
y0.2048
x
0.0135
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Obteniendo as lo siguiente:
DISCUSIN
Aunque cabe destacar que si comparamos con los datos del Testigo, esto no concuerda
muy bien, porque presenta una gran similitud pero incluso con menor magnitud que con
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AMBIENTALES.
los datos de la concentracin ms alta y eso no puede ser posible, lo correcto hubiera
sido que estos presentaran concentraciones muy altas, ya que al no tener presencia de
plaguicidas, la enzima no se inhiba y la hidrolizacion de la acetilcolina seria mas efectiva..
Podemos creer que la manera en la que se efectu el experimento mostro fallos al
manipular las muestras y por lo tanto se obtuvieron datos errneos. De la misma manera
pasa con los datos de la concentracin de plaguicida 200 mg/kg que presento la menor
concentracin de actividad enzimtica, siendo esta baja.
CONCLUSIONES
REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS