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Para determinar la actividad amilsica se trabaj con almidn como sustrato de la enzima,
este proporcionado por los laboratorios de la Universidad de La Salle. Se trabaj con la
metodologa denominada como densidad ptica (espectrofotometra) basado en la reaccin
del yodo con el almidn. En la primera parte, se hizo una dilucin de 25 mL de almidn
que se distribuyeron en 5 tubos de ensayo ms un ltimo que es el blanco (Solucin tampn
pH: 5) de la toma de datos. A continuacin, se aadi 1 mL de solucin reveladora (I 2
(0,006%)- KI (0,06%)) con el fin de determinar el almidn remanente en la solucin de
incubacin, y se prosigui a medir absorbancia a una longitud de onda de 640 nm.
Ahora para la determinacin de la cintica enzimtica, con el sobrante de la dilucin se le
agreg el extracto enzimtico (0,02 g) proporcionado por los laboratorios de microbiologa
1. Dmendez17@unisalle.edu.co, 43131017, ingeniera de alimentos, marzo
30 de 2017
2. Ccobaleda23@unisalle.edu.co, 43131023, ingeniera de alimentos,
marzo 30 de 2017
de la Universidad de La Salle, estando el sobrante a una temperatura de 37C +/- 2 que es la
temperatura optima en que trabaja la enzima, se contabilizaron tiempos de 0, 5, 10, 20 y 30
minutos, donde respectivamente se hacan toma de absorbancia con el fin de ver el trabajo
realizado por la enzima -amilasa.
RESULTADOS Y ANLISIS:
- Masa almidn: 0,00025 g
- Masa -amilasa: 0,02 g
El estudio se realiz
Tabla 2.
evaluando el efecto de la
Tubos para la curva
solucin Buffer y agua
de calibracin destilada, por eso se exponen
resultados de ambas
1.600
0.000
0.0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 1.2
[Almidn %]
1.4
0.2
0
0 0 0 0 0 0 0
CONCLUSIONES:
El anlisis de los datos recopilados en esta experiencia arroja como condiciones ptimas la
solucin buffer y una temperatura de 37C +/- 2C. comparando la actividad enzimtica, la
concentracin de sustrato hidrolizado y parmetros cinticos, adems de eso a manera de
recomendacin el cuidado constante en la temperatura de accin de la enzima, ya que este
puede ser un limitante en futuros estudios realizados para cuantificar la actividad
enzimtica de la -amilasa.
REFERENCIAS:
- Daniel C. Harris. (2007). Anlisis qumico cuantitativo. Mxico: Reverte, ISBN.
- Agustn Garrido. (NF). Actividad enzimtica de -amilasa. NE.
1. Dmendez17@unisalle.edu.co, 43131017, ingeniera de alimentos, marzo
30 de 2017
2. Ccobaleda23@unisalle.edu.co, 43131023, ingeniera de alimentos,
marzo 30 de 2017
- Chvez, M. A., Daz, J., Prez, U., Delfn, J. 1990. Temas de enzimologa. La
Habana, Cuba: Ed. Min. Educacin Superior. 567 p.