ORGANISMOS TRANSGENICOS

Curso Especializacin: ORGANISMOS TRANSGENICOS

Paso 1 Responder cuestionario de reconocimiento

Por:
Jorge Elas Ruiz Martnez
Cdigo: 5074349
Ana Avila
1065619528
Henrry Giovanni Jaimes
1090375649
Lady Margarita Diaz
1065625836
Jhon Alexander Velasco

Grupo:203022_1

Director: Luz Mery Bernal

UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTAY A DISTANCIA

Febrero-2017
 CUESTIONARIO
1. En la tecnologa del ADN recombinante son utilizadas enzimas bacterianas que tienen la
propiedad de cortar la molcula de ADN en puntos especficos, lo que permite, por ejemplo, que
genes humanos que codifican protenas de inters mdico o comercial sean extrados,
clonados en bacterias o virus, y despus sean transferidos para animales de laboratorio, que
pasan a producir sistemticamente tales protenas.

a) Cul es el nombre genrico que se da a estas enzimas?

R/Son denominadas Enzimas Endonucleasas
b) Que confiere la especificidad a estas enzimas?
R/Su especificad radica en que estas enzimas son de restriccin y reconocen una secuencia
especfica de nucletidos denominada sitio de restriccin de una molcula de DNA de doble
cadena, y cortan el DNA por esa secuencia.
c) En la naturaleza, cul debe ser el papel desempeado por ellas?
R/Estas enzimas en la naturaleza desempean un papel importante en la reparacin del ADN.
Especficamente las endonucleasas AP, catalizan la ruptura del ADN exclusivamente en sitios AP
(sitios apurnicos-apirimidnicos, es decir sitios en los cuales se ha perdido la base nitrogenada, pero
se conserva la columna de azcar-fosfato), y por lo tanto preparan al ADN para la subsecuente
escisin, sntesis
d) Cmo son llamados los organismos que reciben e incorporan genes de otra especie?
R/Son llamados Transgnicos
2. El ciclo trmico bsico de la PCR se inicia a una cierta temperatura, luego sigue para otra y
finalmente va para una tercera, momento que comienza de nuevo y se repite por lo menos 30
veces. Cules son estas temperaturas y que ocurre en ellas?

R/El ciclo trmico bsico de la PCR se da en tres etapas:

a. Desnaturalizacin
En esta etapa se eleva la temperatura hasta alcanzar 94C en un lapso de tiempo de 1minuto
aproximadamente, esto se hace para separar las dos cadenas del ADN.

b. Alineamiento o Hibridacin
Este paso consiste en un descenso de la temperatura entre 35 y 60 C, para permitir que los
cebadores se unan por complementariedad al DNA molde. La duracin de este paso puede oscilar
entre minuto y 2 minutos.

c. Extensin o Elongacin
En este paso se vuelve a aumentar la temperatura hasta los 72C y se deja actuar a la Taq
polimerasa durante 1 2 minutos. la enzima polimerasa incorpora nucletidos complementarios a
partir del extremo 3 libre de la regin en que han hibridado los cebadores,
La temperatura a la que se lleva a cabo esta fase depende de la enzima polimerasa empleada; si
se utiliza Taq polimerasa como en este caso la temperatura de elongacin suele ser de 72C.

3. Explique por qu los cidos nucleicos son desnaturados cuando son sometidos a altas
temperaturas o pH extremos. Una molcula de ADN desnaturada por calor puede ser
nuevamente renaturada? Cmo?

R/Cuando una estructura de ADN o ARN es sometidas a temperaturas o pH extremos, esta acaba por
romper las fuerzas de unin entre las dos hebras que los conforman y se separan es decir se
 desnaturaliza, formando una sola hebra, ya que la energa libre de las interacciones no covalentes que
mantienen la estructura helicoidal del DNA no es muy superior a la energa de los movimientos
trmicos a temperatura ambiente, esto debido a que la estructura de los cidos Nucleicos se mantiene
por medio de enlaces no covalentes, y cada base est unida a su pareja mediante puentes de
hidrogeno.

Una molcula puede ser nuevamente renaturada, formando nuevamente dos hebras, a partir de
molculas de ADN distinto origen y formndose de una partcula de ADN y otra de ARN.

4. Considere el fragmento de ADN:

5-AAGAATTGCGAATTCGACTTAAGGGCCGCGCCGAAGCTTTAAAGGTTATATTTCC-3
Cuantos fragmentos resultaran del corte con las siguientes enzimas de restriccin, indique el nmero
de pares (pb) de base de cada fragmento.

EcoRI: (G AATTC):
HaeIII: (GG CC):
NotI: (GC CCGG):
Con las tres enzimas juntas

Fragmentos Nmero de pares (pb) de base de cada

Enzimas de restriccin
resultantes fragmento
EcoRI: (G AATTC) 2 12 G- AATTC G- AATTC
HaeIII: (GG CC): 1 4 GG- CC
NotI: (GC CCGG): 0 0
Con las tres enzimas juntas 3 16 G- AATTC G- AATTC GG- CC

5. Considere la siguiente secuencia de un fragmento de ADN aislado de una bacteria:

5'CTGATAAGGGATTTAAATTATGTGTCAATCACGAATGCTAATCGCTTAACACTTC 3'

Asumiendo que esta secuencia corresponde a la secuencia de la hebra codificadora, cul sera la
secuencia de aminocidos del polipeptido producido cuando un ARN mensajero (ARNm) transcrito de
este gen sea traducido?

R/ 5'CTGATAAGGGATTTAAATTATGTGTCAATCACGAATGCTAATCGCTTAACACTTC3'

3GACTATTCCCTAAATTTAATACACAGTTAGTGCTTACGATTAGCGAATTGTGAAG5

ARNm

5CUGAUAAGGGAUUUAAAUUAUGUGUCAAUCACGAAUGCUAAUCGCUUAACACUUC3

Polipeptido:
LEU-ILE-ARG-ASP-LEU-ASN-TIR-VAL-SER-ILE-TRE-ASN-ALA-ASN-ARG-LEU-TRE-LEU

6. Considere la secuencia 5- 3 de ADN

1 ACGTAGCTAG TAAAGTCTGT CCTTGATAGA AGCTTCGACT GACTAGTACT

 51 GGACTATCAC CTTGAAGGAC CTGTGGACTT AGTCTGATCG TGACCGTAAG

Este fragmento de ADN fue colocado en una solucin con la endonucleasa de restriccin HindIII que
reconoce la secuencia 5-AAGCTT-3 e hidroliza el ADN entre los dos residuos de cido adenlico. Con
relacin a este enunciado, responda: Cuantos pb presenta el fragmento de ADN y cuantos
fragmentos de ADN resultaran de la digestin con HindIII?

R/El fragmento de ADN presenta 100 pb.

Resultaron dos fragmentos producto de la digestin de la endonucleasa de restriccin HindIII

7. Un cientfico analiz la secuencia de bases nitrogenadas del ADN de una bacteria y verific que
era formada por los codones AGA-CAA-AAA-CCG-AAT. Verific tambin que la secuencia de
aminocidos en el polipeptido correspondiente era serina-valina-fenilalanina-glicina-leucina. Al
analizar el mismo segmento de ADN de otra bacteria de la misma colonia, verific que la
secuencia de bases era AGA-CAA-AAG-CCG-AAT, sin embargo, no verific cualquier alteracin
en la composicin de aminocidos de la cadena polipeptdica.

Cmo usted explica el hecho de bacterias de una misma colonia presenten, para el mismo
segmento de ADN, diferentes secuencias de bases y que esas bacterias presenten la misma
composicin de aminocidos en la cadena polipeptdica correspondiente?

EL CDIGO GENTICO

Fuente: EL CDIGO GENTICO

AGA-CAA-AAA-CCG-AAT

Arginina-Glutamina-Lisina-Prolina-Asparagina
 AGA-CAA-AAG-CCG-AAT

Arginina- Glutamina-Lisina-Prolina- Asparagina

UCU-GUU-UUU-GGU-UUA

Serina-Valina-Fenilalanina-Glicina-Leucina

Dado que en la naturaleza existen 64 codones para 20aminoacidos entonces un aminocido puede
ser codificado por varios codones ,por lo tanto las secuencias de ADN diferentes puden originar una
misma secuencia de protena .Las diferencias entre bacterias de una misma colonial se pude
explicar por error en una replicacin de una batera en una colonia (Pueden ocurrir errores durante
la replicacin que resulten en cambios dentro de la secuencia de nucletidos en los cromosomas. Si
estos cambios ocurren en genes, pueden alterar las funciones de la clula).

8. La profesora del curso Organismos Transgnicos inform a sus estudiantes que un cientfico
espaol afirm haber encontrado protenas en el huevo fsil de un dinosaurio que podran
ayudarlo a reconstituir el ADN de esos animales.

a) Haga un esquema demostrando cmo, a partir de una secuencia de ADN se obtiene una
protena.
ESQUEMA

b) A partir de una protena, es posible recorrer el camino inverso y llegar a la secuencia de ADN
que la gener, justifique.

A partir de una secuencia de una protena, se puede inferir la secuencia RNA mensajero
correspondiente que codifica dicha protena, y a partir de este RNA se infiere por complementariedad
de base nitrogenada, la secuencia del ADN que pudieron codificar la secuencia de la protena
Los intentos hasta el momento por revertir el proceso han sido fallidos, lo cual llevado a lo que Francis
Crick llamo el doman de la biologa molecular, que establece que las va es como lo plantean el
esquema en la figura 1,y las flechas indican la unidirreccionalidad .No es posible que la molcula de
ARN cambie su estructura bajo los efecto de una protena.
.
 1. Imagine que un determinado individuo, reciba un gen de otra especie, este gen es responsable
por la produccin de una protena compuesta por los siguientes aminocidos: cistena - serina -
arginina - alanina - leucina - glutamina - valina - glutamina - treonina - lisina.

Como es de su conocimiento, el cdigo gentico universal y la sntesis de esa protena depende da

accin conjunta del ARN mensajero (ARNm), del ARN de transferencia (ARNt) y del ARN ribosomal
(ARNr). Indique si las siguientes afirmaciones son verdaderas o falsas, sustente cada una de las
respuestas.

a) Esta protena no podra ser producida porque el receptor del gen no posee los ARNr necesarios
para la fase final de traduccin, encontrados solamente en el donador del gen.

b) La molcula de RNA, transcrita por ese gen tendra mnimo una serie de 10 codones con un total de
30 nucletidos, presentando bases pricas de adenina e guanina e bases pirimdicas de citosina y
uracilo.

c) Esa molcula proteica no podra ser producida por el receptor del gen porque los aminocidos
necesarios para la traduccin slo son encontrados en el organismo donante del gen.

e) La molcula proteica podra ser perfectamente montada en el organismo del receptor del gen
desde que fueran tambin transfundidos los anti-codones del ARNt del donante.

10. Un vector ptimo cumple con los siguientes requerimientos:

1. Confiere a la clula husped resistencia a determinados antibiticos, lo que permite

identificar fcilmente aquellas bacterias que lo contienen.
2. Tiene zonas de ADN que no le reportan informacin indispensable, de manera que pueden
cortarse, para permitir la insercin del ADN exgeno.
3. Posee un gran nmero de secuencias de reconocimiento para enzimas de restriccin.
4. Los sitios de restriccin se encuentran en el vector de tal manera que la insercin de ADN
exgeno exprese un marcador fenotpico til para su seleccin.

Indique si las anteriores afirmaciones son verdaderas o falsas, sustente cada una de las
respuestas.

Respuestas
1.Esta afirmacin es verdadera ya que el vector debe contener un marcador de seleccin es decir
genes de resistencia a antibiticos o genes de enzima que la clula husped no tiene, para poder
distinguir las clulas husped que transportan el vector de las que no lo contienen

2. Afirmativo ya que los vectores contienen sitios nicos para el corte con varias enzimas de restriccin
diferentes (entre 10 y 15) que se usan para insertar en esta regin (sitio de clonacin mltiple)

3. Afirmativo el vector debe tener un sitio mltiple de clonacin, que es un segmento con numerosas
secuencias que pueden ser cortadas por enzimas de restriccin.
4. Afirmativa ya que el vector exgeno debe tener algn sitio de corte para enzima de restriccin y un
gen o marcador de tal manera que pueda insertar segmentos de ADN cortados con la misma enzima.

Bibliografa

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