Oral and Maxillofacial Pathology Journal Vol.4 No.

1, 2017 : 1 - 5

Research Report

Potensi Ekstrak Daun Kacapiring (Gardenia Jasminoides) Dalam Meningkatkan

Jumlah Sel Fibroblas Dan Kolagen Tipe I Pada Proses Penyembuhan Luka
Pencabutan Gigi Tikus Wistar

(The Role of Gardenia jasminoides Leaf Extract Increasing Fibroblast and Type-I Collagen on
Wound Healing After Wistar Rats Tooth Extraction)
1
Frida Chusna Achirularofa, 2Retno Pudji Rahayu, 2Istiati
1
Mahasiswa S1 Pendidikan Dokter Gigi Fakultas Kedokteran Gigi Universitas Airlangga
2
Staf Pengajar Departemen Patologi Oral dan Maksilofasial Fakultas Kedokteran Gigi Universitas Airlangga
Surabaya-Indonesia

ABSTRACT
Background: The process of wound healing after tooth extraction becomes a major concern for dentistry
clinicians, it is because of the discomfort and pain suffered by patients. Gardenia jasminoides believed to act as anti-
inflamation on wound healing process. Objective: To prove that the extract of Gardenia jasminoides 3% can increase
the number of fibroblast and type-I collagen on wound healing after tooth extraction. Method: Wistar rats were divided
into 2 control groups and 2 treatment groups. Gardenia jasminoides 3% extract gel was applied to the sockets former
of wistar rats tooth extraction. On the third and fifth day after application, the former of revocation socket, HPA slides
was made using Haematoxilin eosin (HE) staining and Immunohistochemie (IHC). The number of fibroblasts and the
cells that express type I collagen was calculated using 400x magnification of microscope. Data were analyzed using
Independent t-test and Pearson correlation test. Result: The number of fibroblasts and type-I collagen expression was
increased in the third and fifth day of treatment group. Independent t-test obtained significant value of p <0.05. In
Independent t-test, found the increased correlation number of fibroblasts and the expression of type I collagen with
significant value of p <0.05. Conclusion: Gardenia jasminoides leaves Extract can increase the number of fibroblasts
and the expression of type-I collagen, and there was the correlation of increased number of fibroblasts and type-I
collagen expression. Thus, the extract can accelerate the wound healing process of tooth extraction.

Key words: Gardenia jasminoides, fibroblast, type-I collagen, wound healing

ABSTRAK
Latar Belakang: Proses penyembuhan luka pasca pencabutan gigi menjadi perhatian yang utama bagi klinisi
kedokteran gigi, hal ini karena ketidaknyamanan dan rasa sakit yang diderita pasien. Kandungan aktif dari daun
Kacapiring (Gardenia jasminoides) dapat bertindak sebagai anti-inflamasi dalam penyembuhan luka. Tujuan: Untuk
membuktikan bahwa ekstrak Gardenia jasminoides 3% dapat meningkatkan jumlah sel fibroblas dan kolagen tipe I
pada proses penyembuhan pasca pencabutan gigi. Metode: Tikus wistar dibagi dalam 2 kelompok kontrol dan 2
kelompok perlakuan. Gel ekstrak Gardenia jasminoides 3% diaplikasikan pada soket bekas pencabutan gigi. Pada hari
ketiga dan kelima mandibular tikus didekalsifikasi dan dibuat sediaan HPA menggunakan pengecatan Haematoxilin
Eosin (HE) dan Imunohistokimia (IHC). Jumlah sel fibroblas dan jumlah sel yang mengekspresikan kolagen tipe I
dihitung dibawah mikroskop cahaya dengan pembesaran 400x. Data penelitian dianalisis menggunakan uji Independent
t-test dan uji korelasi pearson. Hasil: Jumlah sel fibroblas dan ekpresi kolagen tipe I meningkat pada kelompok
perlakuan hari ketiga dan kelima. Uji Independent t-test diperoleh nilai signifikan p<0,05. Uji korelasi pearson
didapatkan ada hubungan peningkatan jumlah sel fibroblas dan ekspresi kolagen tipe I dengan nilai signifikan p<0,05.
Kesimpulan: Ekstrak daun Gardenia jasminoides 3% dapat meningkatkan jumlah sel fibroblas dan ekspresi kolagen
tipe I, serta ada hubungan peningkatan jumlah sel fibroblas dan ekspresi kolagen tipe I. Sehingga ekstrak daun
Gardenia jasminoides 3% dapat mempercepat proses penyembuhan luka pencabutan gigi.

Kata Kunci: Gardenia jasminoides, Fibroblas, Kolagen tipe I, penyembuhan luka

Korespondensi (correspondence) : Frida Chusna Achirularofa, Bagian Patologi Oral dan Maksilofasial, Fakultas
Kedokteran Gigi Universitas Airlangga. Jl. Prof. Dr. Moestopo No. 47 Surabaya, Indonesia. E-mail:
frida.chusna@gmail.com

1
 Oral and Maxillofacial Pathology Journal Vol.4 No.1, 2017 : 1 - 5
PENDAHULUAN
Salah satu tindakan perawatan dibidang
kedokteran gigi adalah pencabutan ggi.
Terdapat 11 juta pasien per hari mengalami
ketidaknyamanan seperti rasa nyeri,
pembengkakan, dan memar setelah tindakan
pencabutan gigi.1 Sehingga diperlukan obat
untuk mempercepat proses penyembuhan luka
setelan pencabutan gigi.
Gardenia Jasminoides yang merupakan
salah satu tanaman herbal di Indonesia,
bersifat sebagai imunomodulator melalui
peningkatkan ekspresi CD8 dan sel NK (CD
16) pada konsentrasi 3%, serta dapat
menginduksi apoptosis pada sel kanker
melalui pemeriksaan ekspresi caspase 3, p53
dan Vascular Endothelial Growth Factor
(VEGF).2 Komponen aktif daun kaca piring
adalah Geniposides dan Chlorogenic acid,
memiliki sifat anti oksidan, anti bakteri, anti
biotik, anti inflamasi, anti piritik dan anti
viral.3,4
Fibroblas dan kolagen merupakan elemen
yang penting dalam proses penyembuhan luka.
Kolagen berperan dalam proses pembentukan
protein struktural yang penting pada
pembentukan jaringan. Fibroblas muncul
pertama kali pada 2-3 hari pasca terjadinya
luka dan mencapai puncak pada 7-14 hari
pasca luka.5 Fibroblas akan memproduksi
kolagen yang dibentuk sejak hari ke-3 dan
akan tampak nyata jumlahnya di hari ke-7
setelah luka, dan mulai stabil dan terorganisir
sekitar hari ke-14. Pada awalnya terdapat
kolagen tipe III yang lebih dominan dalam
proses penyembuhan luka, namun kemudian
pembentukan kolagen tipe III akan diganti
oleh kolagen tipe I, karena strukturnya yang
lebih kuat.6
Penelitian ini ingin mengungkap potensi
ekstrak daun kacapiring (Gardenia
jasminoides) dalam meningkatkan jumlah sel
fibroblas dan ekspresi kolagen tipe I beserta
hubungannya dalam penyembuhan luka paska
pencabutan gigi.
METODE PENELITIAN
Ekstrak daun Gardenia jasminoides adalah
komponen yang diperoleh dari ekstrak air
daun Gardenia jasminoides dengan
konsentrasi 3% dengan cara mencampurkan
air mendidih dengan daun yang sudah
dikeringkan, kemudian di freeze drying. Basis
gel yang digunakan adalah PEG 400 dan PEG
4000. Basis gel ini merupakan kombinasi
antara polietilenglikol 4000 dan
polietilenglikol 400 dengan perbandingan 1:4.
Penelitian yang digunakan adalah
penelitian eksperimental laboratoris. Pada
penelitian ini digunakan 28 ekor tikus Wistar
yang dibagi menjadi 4 kelompok perlakuan
(K1, P1, K2, dan P2), masing-masing
berjumlah 7 ekor. Kelompok K1 dan K2
adalah kelompok tikus yang setelah
pencabutan diberikan basis gel PEG pada luka
bekas pencabutan. Kelompok P1 dan P2
adalah kelompok tikus yang setelah
pencabutan diberikan gel ekstrak air daun
Gardenia jasminoides 3%.
Pada hari ke-3 dilakukan pembuatan
preparat HPA dan IHC pada kelompok K1 dan
P1. Selanjutnya pada pada hari ke-5 dilakukan
pembuatan preparat HPA dan IHC pada
kelompok K2 dan P2. Preparat HPA dengan
pengecatan HE untuk melihat sel fibroblas,
sedangkan preparat IHC untuk melihat jumlah
sel fibroblas yang mengekspresikan kolagen
tipe I. Selanjutnya sel yang terlihat dihitung
menggunakan 5 lapang pandang dibawah
mikroskop cahaya pembesaran 400x. Data
yang diperoleh kemudian dianalisa
menggunakan Uji Statistik Independent t-test
untuk mengetahui perbedaan kelompok
perlakuan dengan kelompok kontrol, dan Uji
Statistik Pearson untuk mengetahui hubungan
peningkatan jumlah sel fibroblas dan ekspresi
kolagen tipe I.
HASIL
Dari hasil penelitian dapat dilihat rata-rata
jumlah sel fibroblas pada kelompok perlakuan
hari ketiga (P1) lebih tinggi dibanding
kelompok kontrol pada hari ketiga (K1). Dan
jumlah sel fibroblas pada kelompok perlakuan
hari kelima (P2) lebih tinggi dibanding
kelompok kontrol pada hari kelima (K2).
Begitupula pada sel yang mengekspresikan
kolagen tipe I (Gambar 1).
Pada gambar 2 dapat dilihat jumlah sel
fibroblas yang semakin meningkat pada
kelompok kontrol pada hari ketiga (K1),
perlakuan hari ketiga (P1) dan perlakuan hari
kelima (P2).
2
 Oral and Maxillofacial Pathology Journal Vol.4 No.1, 2017 : 1 - 5
Gambar 1. Rata-rata Jumlah Sel Fibroblas dan
Ekspresi Kolagen Tipe I pada
Kelompok Kontrol dan Kelompok
Perlakuan pada hari ketiga dan hari
kelima.
a
a
b (c)
c
c antibody monoclonal anti collagen
Gambar 2. Menunjukkan perbedaan jumlah sel-
sel fibroblas antara kelompok kontrol
hari ketiga (a), perlakuan hari ketiga
(b), dan perlakuan hari kelima (c)
(pewarnaan HE, pembesaran 400x)
Pada gambar 3 dapat dilihat jumlah sel
fibroblas yang mengekspresikan kolagen tipe I
semakin meningkat pada kelompok kontrol
pada hari ketiga (K1), perlakuan hari ketiga
(P1) dan perlakuan hari kelima (P2).
b
Gambar 3. Menunjukkan perbedaan ekspresi
kolagen tipe I antara kelompok
kontrol hari ketiga (a), perlakuan
hari ketiga (b), dan perlakuan hari
kelima (c) (Pengecatan IHC dengan
type I, pembesaran 400x)
Hasil Uji Independent t-test pada data
jumlah sel fibroblas menunjukkan ada
perbedaan signifikan antara kelompok K1 dan
P1, serta antara kelompok K2 dan P2.
Sedangkan pada pada data jumlah sel fibroblas
yang mengekspresikan kolagen tipe I
menunjukkan ada perbedaan signifikan antara
kelompok K1 dan P1, serta antara kelompok
K2 dan P2. Hal ini dikarenakan nilai Sig.(2-
tailed) pada masing-masing kelompok yang
dibandingkan adalah 0,000 (p=0,000), dimana
p=0,000 < p=0,05 (tabel 1), maka
perbedaannya bersifat signifikan.
Berdasarkan uji korelasi pearson,
didapatkan hasil hubungan antara jumlah sel
fibroblas dengan ekpresi kolagen tipe I sebesar
0,908 (r = 0,908), dengan p=0,000. Sehingga
3
 Oral and Maxillofacial Pathology Journal Vol.4 No.1, 2017 : 1 - 5

ada korelasi yang sgnifikan, kuat, dan searah ekspresi kolagen tipe I. Kandungan Gardenia
antara jumlah sel fibroblas dengan ekspresi jasminoides dapat mempengaruhi Toll Like
kolagen tipe I. Receptor 2 (TLR2) pada makrofag. Apabila
ekstrak air Gardenia jasminoides diaplikasikan
Tabel 1. Uji Independent t-test pada Data Jumlah secara topikal pada daerah luka, maka
Sel Fibroblas dan Ekspresi Kolagen kandungan Gardenia jasminoides akan diikat
Tipe I. reseptor dipermukaan makrofag yang
Data Kelompok yang Hari Sig. mengakibatkan terjadinya hantaran sinyal intra
dibandingkan ke- (2-
seluler. Sinyal tersebut dimulai dengan
tailed)
menghambat aktivitas Inhibitor of kB (IkB)
Jumlah sel K1 dengan P1 3 0,000
fibroblas K2 dengan P2 5 0,000 yang terikat pada Nuclear Factor Kappa B
(NF-kB), sehingga menyebabkan terjadinya
fosforilasi, serta menurunnya degradasi IkB,
Ekspresi K1 dengan P1 3 0,000
kolagen K2 dengan P2 5 0,000 dan terjadi penurunan translokasi NF-kB
tipe I kedalam inti. Hal ini akan memicu penurunan
proses transkripsi sitokin pro-inflamasi, namun
juga mengaktifasi gen yang memproduksi
sitokin anti-inflamasi yaitu IL-10, Fibroblast
Growth Factor (FGF) dan Transforming
PEMBAHASAN
Growth Factor Beta (TGF-).8 Interleukin-10
dapat menghambat sitokin pro-inflamasi.
Pada penelitian ini menggunakan ekstrak
Selanjutnya TGF-, PDGF dan FGF akan
air daun Gardenia jasminoides konsentrasi
merangsang migrasi dan proliferasi sel
3%. Pemilihan konsentrasi 3% pada ekstrak
fibroblas. FGF yang dipicu oleh keadaan
air daun Gardenia jasminoides didasarkan
hipoksia akan menstimulasi ekspresi VEGF
penelitian pendahuluan bahwa Gardenia
(Vascular Endothelial Growth Factor). VEGF
Jasminoides bersifat sebagai imunomodulator
bekerja dengan menstimulasi proliferasi
melalui peningkatkan ekspresi CD8 dan sel
fibroblas. Sehingga terjadi peningkatan jumlah
NK (CD 16) dengan konsentrasi optimum
sel fibroblas.9
3%.2 Berdasarkan referensi yang ada, ekstrak
Melalui analisis data dengan uji normalitas,
air daun Gardenia jasminoides juga
uji homogenitas, independent t-test, ditemukan
mempunyai sifat sebagai antioksidan dan anti
hasil bahwa pemberian ekstrak air daun
inflamasi. Komponen aktif daun kaca piring
Gardenia jasminoides 3% dapat meningkatkan
adalah geniposides dan chlorogenic acid,
jumlah sel fibroblas. Hal ini ditunjukkan dari
memiliki sifat anti oksidan, anti bakteri, anti
perbedaan yang signifikan antara kelompok
biotik, anti inflamasi, anti piritik dan antiviral. 4
kontrol dengan kelompok perlakuan pada hari
Proses penyembuhan luka dapat dilihat
ketiga, begitu pula pada hari kelima. Hasil
melalui beberapa indikator, diantaranya adalah
pada hari kelima lebih tinggi daripada hari
peningkatan jumlah sel fibroblas dan kolagen
ketiga, hal ini sesuai dengan teori bahwa pada
tipe I. Fibroblas merupakan elemen utama
hari kelima peningkatan proliferasi sel
dalam proses pembentukan protein struktural
fibroblas lebih meningkat dibanding hari
yang berperan dalam pembentukan jaringan.
ketiga.
Fibroblas akan memproduksi kolagen.
Selanjutnya Transforming Growth Factor
Kolagen merupakan protein yang terbanyak
Beta 1 (TGF-1) akan mempengaruhi
pada matriks ekstraseluler, dan berfungsi
proliferasi sel fibroblas yang bersifat autokrin
untuk mengisi matriks ekstraselular. Pada
serta mempengaruhi sintesis kolagen, sehingga
awalnya terdapat kolagen tipe III yang lebih
sintesis kolagen dapat meningkat. Kolagen
dominan dalam proses penyembuhan luka,
akan memberikan kekuatan dan integritas pada
namun kemudian akan diganti oleh kolagen
semua luka yang menyebabkan luka
tipe I.7
menyembuh dengan baik. TGF-1 adalah
Pada penelitian ini digunakan ekstrak air
salah satu sitokin yang berperan dalam proses
daun Gardenia jasminoides dengan
pembentukan jaringan granulasi, diekspresikan
konsentrasi 3% diharapkan dapat
selama terjadi fibroplasia aktif selama proses
mempercepat penyembuhan luka dengan
penyembuhan luka, dan mengaktivasi berbagai
meningkatkan jumlah sel fibroblas dan
jenis sel selama fase inflamasi. TGF-1 dapat

4
 Oral and Maxillofacial Pathology Journal Vol.4 No.1, 2017 : 1 - 5
mempengaruhi proses sintesis kolagen yang
dihasilkan oleh fibroblas melalui mekanisme
pengaktifan gen COL11 dan COL12. 2.
Setelah proses trasnlasi, terjadi peningkatan
pro-1 dan pro-2 popypeptides chains,
kemudian memasuki reticulum endoplasma
yang didalamnya terdapat residu proline dan
lysine yang terhidroxilasi membentuk
hidroxypproline dan hydroxylysine. Hal
tersebut menyebabkan pro- chains bergabung
dengan rantai lain dengan ikatan hidrogen dan
membentuk struktur triple helix procollagen, 3.
sehingga sintesis kolagen meningkat. Setelah
itu procollagen disekresi ke ekstraseluler,
sehingga deposisi kolagen tipe I juga
10
meningkat.
Melalui analisis data dengan uji normalitas,
uji homogenitas, independent t-test, ditemukan 4.
hasil bahwa pemberian ekstrak air daun
Gardenia jasminoides konsentrasi 3% dapat
meningkatkan ekspresi kolagen tipe I. Hal ini
ditunjukkan dari perbedaan yang signifikan
antara kelompok kontrol dengan kelompok
perlakuan pada hari ketiga, begitu pula pada
hari kelima. Hasil pada hari kelima lebih
tinggi daripada hari ketiga. Hal ini sesuai 5.
dengan teori bahwa pada hari kelima
peningkatan ekspresi kolagen tipe I lebih
meningkat dibanding hari ketiga.
Uraian proses tersebut menunjukkan bahwa
ekstrak ekstrak daun Gardenia jasminoides
3% dapat mempercepat proses penyembuhan 6.
luka setelah pencabutan gigi. Hal ini sesuai
dengan data hasil penelitian yang
menunjukkan terjadinya peningkatan jumlah 7.
sel fibroblas dan sel fibroblas yang
mengekspreskan kolagen tipe I pada
kelompok yang diberikan ekstrak bila
dibandingkan dengan kelompok kontrol
positif.
Kesimpulan dari penelitian ini adalah
ekstrak daun Gardenia jasminoides 3% dapat 8.
meningkatkan jumlah sel fibroblas dan
ekspresi kolagen tipe I, serta ada hubungan
peningkatan fibroblas dengan kolagen tipe I.
Dengan demikian, ekstrak daun Gardenia 9.
jasminoides 3% memiliki potensi dalam
mempercepat proses penyembuhan luka
setelah pencabutan gigi.
10.
DAFTAR PUSTAKA
1. Friedman JW. 2007. The Pprophylactic
Extraction of Third Molars: A Public
Health Hazard. Am J Public Heatlh. vol.
97, Issue. 9, pp.1154-1559.
Retno PR, Djoko AP, dan Aulanniam.
2009. Peningkatan Ekspresi Sel
Immunesurveillance oleh Senyawa
Bioaktif Ekstrak Gardenia jasminoides:
Suatu Inovasi dalam Penatalaksanaan
Terapi Luka Akibat Trauma Pencabutan
Gigi. Laporan Penelitian Hibah Bersaing,
Fakultas Kedokteran Gigi Universitas
Airlangga. hal. 4-10; 17-19; 26.
Fan Y, Zhongfu Ge and Aoxue Luo, 2011.
In vitro antioxidant activity of
polysaccharide from Gardenia
jasminoides Ellis. Journal of Medicinal
Plants Research. vol. 5, Issue. 14, pp.
2963-2968.
Prashant SC, Naresh KS, Vijay KS,
Prabhu D, Krishan AS and Sarang B.
2011. Amelioration of inflammatory
responses by Chlorogenic acid via
suppression of pro-inflammatory
mediators. Journal of Applied
Pharmaceutical Science. vol. 01, Issue.
04. pp. 67-75.
Robbins RS, Kumar V. 2007.Basic
Patology. Disadur Staf Pengajar
Laboratorium Patologi Klinik Fakultas
Kedokteran Universitas Airlangga. Buku
Ajar Patologi.Edisi 7. Jakarta: EGC. hal
46-47; 195.
Granick MS and Gamellli RL. 2007.
Surgical wound healing and management.
New York: Informa. pp.11-18.
Triyono B, 2005. Perbedaan Tampilan
Kolagen di sekitar Luka Insisi pada Tikus
Wistar yang diberi Infiltrasi Penghilang
Nyeri Levobupivakain dan yang tidak
diberi Levobupivakain, Tesis, Program
Megister Biomedis dan PPDS I, UNDIP,
Semarang. hal. 14-23.
Kumar V, Abbas AK, Fausto N. 2005.
Robbins and Cotran Pathologic Basis of
Disease. 7th ed. Philadelphia: Elsevier
Saunders. pp. 113-114.
Broughton II G, Janis JE, and Attiger CE.
2006. Wound Healing: an Overview,
Plastic Reconstruction Surgery. Vo.117,
Issue.7, pp.132.
Verrecchia F, and Mauviel A. 2007.
Transforming Growth Factor- and
Fibrosis. World J Gastroenterol, vol. 13,
issue. 22, pp. 3056-3062
5
Oral and Maxillofacial Pathology Journal Vol.4 No.1, 2017 : 1 - 5