EVALUACIN DE LA SENSIBILIDAD MICROBIANA DE

Staphylococcus aureus EN GLUTARALDEHIDO COMO

DESINFECTANTE A PRUEBA.
Los mtodos de susceptibilidad antimicrobiana o antibiogramas son mtodos in
vitro que determinan la susceptibilidad de los microorganismos a una variedad
de agentes antimicrobianos, bajo condiciones de laboratorio especfica y
estandarizada.

Debido a que los microorganismos tienen susceptibilidad variable a los agentes

antimicrobianos, es necesario tener una herramienta que permita determinar la
susceptibilidad del microorganismo causante de la infeccin.

El Glutaraldehido, se utiliza, solo o en combinacin con otros productos, para la

limpieza, desinfeccin y esterilizacin de material clnico delicado y de
superficies.

COMO SE HACE?

PREPARACIN DE LOS TUBOS:

1. Enumerar 10 tubos de ensayo estriles.

2. Distribuir 5 mL de caldo peptona tamponada estril al 1% o Caldo BHI,
a cada uno de los tubos.
3. Al primer tubo se le debe adicionar 5 ml del compuesto a analizar
(glutaraldehido) en la concentracin deseada, ejemplo: 50%, del tubo
anterior se toman 5 mL y se llevan al tubo 2 lo cual reduce la
concentracin a la mitad, es decir, 25%, esto se hace con los dems
tubos hasta el tubo 10, donde del ltimo se toman 5 mL y se descartan.
NOTA: El ltimo tubo no recibe solucin de antibitico y sirve de control
de crecimiento.

PREPARACIN DEL INOCULO:

1. A partir del cultivo microbiano (Staphylococcus aureus), mantenido en

Agar nutritivo al 37C y no mayor a 24 horas de incubacin, se
transfieren varias asadas a un tubo de 10 mL de agua estril, el cual
se comparar por turbidez con un patrn llamado Macfarland
(PREGUNTAR SI SE LO DAN YA PREPARADO-Este tubo es una mezcla de
H2SO4 y cido brico, que equivale 1,5 x10 8 clulas/ml 0,5, YO LES
EXPLICO EN CASO DE QUE NO SE LOS PREPAREN COMO PREPARARLO).,
lo que se busca es que el tubo el tubo de 10 mL de agua estril por
turbidez sea igual al del MacFarland.
2. Del tubo con 10 mL de agua estril, adicionar 0,1 mL a los 10 tubos
que fueron preparados., estos se llevan a incubacin a 37C/24 horas.
 3. Del tubo con 10 mL de agua estril, preparar tres diluciones
consecutivas y de la ltima de ellas sembrar en profundidad en agar
nutritivo en incubar a 37C/24 horas, contar la poblacin.
4. Leer tubos despus de la incubacin de la siguiente manera:

CIM: corresponde a la mnima concentracin de antibitico o

compuesto, en donde no se observa desarrollo (turbidez).

PARA LA LECTURA DE LA CONCENTRACIN MINIMA BACTERICIDA-CMB:

De los tubos que no presentaron turbidez re toman 1 mL de cada tubo y

se siembran en agar nutritivo por separado, incubacin a 37C/24 horas.

Su objetivo es determinar la menor concentracin de un antimicrobiano

que es capaz de matar el 99,9% de cepa bacteriana.

Para esto el CMB corresponde a la primera caja en donde no se present

crecimiento.
La prctica es muy sencilla, el tiempo relativamente no es ms de 3 das y el
objetivo principal es determinar la concentracin inhibitoria y bactericida de un
compuesto qumico, con respecto al crecimiento microbiano.