MECANISMOS CELULARES Y MOLECULARES DE LA

RESPUESTA INMUNE ADQUIRIDA

Yvonne Rosenstein# , Eric Garcia-Garcia e Ingeborg Becker+

#
Departamento de Medicina Biomolecular y Bioprocesos, Instituto de

Biotecnologa, Departamento de Inmunologia , Instituto de Investigaciones
+
Biomedicas y Departamento de Medicina Experimental, Facultad de Medicina,
Universidad Nacional Autnoma de Mxico

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 TABLA DE CONTENIDO

1. Consideraciones generales
2. La respuesta inmune adquirida se rige por complejas interacciones celulares
2.1 Respuesta inmune humoral
2.2 Respuesta inmune celular
2.2.1 Linfocitos CD4+
2.2.2 Linfocitos CD8+
3. Seales intracelulares generadas a traves del receptor para el antgeno
3.1 Los primeros eventos
3.2 La va de PLCg
3.3 La va de Ras y de las MAP cinasas
3.4 Activacin de la va de PI3K
3.5 Distintas vas de sealizacin regulan la expresin de distintos
genes mediante la activacin de factores de trascripcin
3.6 Papel de las molculas adaptadoras en las cascadas de
sealizacin
4. Seales de las molculas co-receptoras
5. Inmunodeficiencias provocadas por defectos en las molculas de
sealizacin

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1. Consideraciones generales.

Las funciones de la respuesta inmune se ejercen a travs de dos grandes

vertientes: la respuesta inmune innata y la respuesta inmune adquirida. Entre
las caractersticas que diferencian a la respuesta inmune adquirida de la innata
se incluyen: especificidad, diversidad y memoria. Al igual que la respuesta
inmune innata, la respuesta adquirida es autolimitada y no es auto-reactiva. La
respuesta inmune adquirida, humoral o celular, puede ser dividida en fase de
reconocimiento, fase de activacin, fase efectora y el retorno a la homeostasis,
con permanencia de una memoria inmunolgica que permite generar muy
rpidamente una intensa respuesta, altamente especfica. Entre las clulas
que participan en la respuesta inmune adquirida se encuentran las clulas
presentadoras de antgenos (CPA), como son clulas dendrticas, macrfagos
y linfocitos B y las clulas responsables del reconocimiento del antgeno: los
linfocitos B y los linfocitos T. Estos ltimos se dividen segn su funcin en T
CD4+ (ayudadores) y T CD8+ (citotxicos). A su vez, dependiendo de las
citocinas que secreten, los linfocitos T CD4+ se subdividen en linfocitos Th-1 y
Th-2.

Al penetrar en el cuerpo, los antgenos son transportados hacia los rganos

linfticos perifricos ms cercanos al puerto de entrada, generalmente los
ganglios drenantes en donde son procesados por clulas presentadoras de
antgeno y expuestos en la superficie de estas mismas, bajo la forma de un
complejo [MHC-Ag], el cual puede ser reconocido por linfocitos T.
Dependiendo de sus caractersticas, el antgeno, tambin puede ser reconocido
directamente por linfocitos B. Los receptores para el antgeno de los linfocitos
B y T son altamente polimrficos y aunque cada receptor es especfico para un
solo determinante antignico, se estima que el conjunto de receptores puede
reconocer entre 107-109 determinantes antignicos distintos. Esto se logra
gracias a la recombinacin somtica de los segmentos gnicos de los
receptores de los linfocitos, que ocurre al azar aun antes de haber estado en
contacto con algn antgeno y que genera clonas de linfocitos cada una de las
cuales expresan receptores con una sola especificidad

Cuando un linfocito encuentra a su antgeno, se activa. Esto significa que

cuando el receptor para el antgeno de ese linfocito interacciona con el
antgeno se genera cierta informacin que se transfiere hacia el interior de la
clula a travs de diversas cascadas de seales bioqumicas. Esta serie de
eventos le permiten a la clula responder adecuadamente a esa seal, y
generar una respuesta, llmese esta produccin de citocinas o interleucinas,
actividad citotxica, proliferacin etc que en conjunto pueden inducir una
respuesta inflamatoria. Normalmente, el proceso inflamatorio lleva a la
recuperacin del evento que inicialmente lo provoc (trauma, infecciones,
intoxicaciones, etc); sin embargo, si el conjunto de eventos que llevan al
desarrollo de la inflamacin no estn coordinados en tiempo e intensidad, se
genera un desequilibrio que puede conducir al establecimiento de un
inflamacin crnica, la cual desembocara en distintas patologas. As mismo, el
entendimiento profundo de los mecanismos celulares y moleculares que
controlan el reconocimiento de diversos tipos de antgenos son esenciales para
el desarrollo exitoso de nuevas vacunas. Actualmente, los nuevos mtodos de

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intervencin teraputica estn diseados para controlar eventos muy precisos
de la activacin de distintas clulas linfoides. Hoy da se busca incidir sobre los
puntos de control de ciertas vas de sealizacin particularmente importantes
para el desarrollo de ciertas respuestas. Un logro particularmente importante
para el campo de la inmunologa es el desarrollo de drogas como el FK506 que
bloquean especficamente a la calcineurina, una fosfatasa intracelular
involucrada en el reclutamiento de factores de trascripcin responsables de la
activacin de genes que contribuyen al rechazo de trasplantes.

En este capitulo revisaremos brevemente los mecanismos celulares que rigen

la respuesta inmune adquirida y los mecanismos moleculares subyacentes a la
maduracin y activacin de linfocitos T y B, as como las principales seales
bioqumicas que participan en estos fenmenos. Como veremos, la diversidad
de vas de sealizacin que se reclutan a travs de los receptores para el
antgeno y de diversas molculas co-receptoras es enorme y la especificidad
de la respuesta es en realidad la integracin de las seales positivas y
negativas generadas a partir de los receptores para el antgeno, y de las
molculas co-receptoras

2. LA RESPUESTA INMUNE ADQUIRIDA SE RIGE POR COMPLEJAS

INTERACCIONES CLULARES

2.1. RESPUESTA INMUNE HUMORAL

La respuesta inmune humoral es mediada por las inmunoglobulinas, cuyas

funciones principales son: neutralizacin, opsonizacin y activacin de
complemento. Los anticuerpos participan principalmente en la defensa contra
microbios extracelulares.

Los linfocitos B son las clulas productoras de anticuerpos. Estas clulas se

producen en la mdula sea donde maduran para luego migrar hacia los
rganos linfoides secundarios o perifricos, donde llevan a cabo las etapas de
reconocimiento antignico y activacin. Los procesos de recombinacin
gentica de los genes de las inmunoglobulinas que se llevan a cabo en la
mdula sea son responsables de la generacin de la diversidad de las
inmunoglobulinas en la regin responsable del reconocimiento del antgeno.
Gracias a estos sofisticados eventos moleculares, se generan anticuerpos con
capacidad de reconocer una amplia diversidad de antgenos utilizando un
nmero reducido de genes.

Los receptores para el antgeno de los linfocitos B son inmunoglobulinas IgM o

IgD unidas a la membrana. Asociadas a cada receptor se encuentran dos
cadenas, denominadas Iga e Igb, que constituyen el mdulo de sealizacin
propiamente dicho del receptor para el antgeno. Aunadas a estas seales, se
combinan aquellas generadas por molculas co-receptoras tales como CR2
(receptor de complemento, CD21), CD19 y CD81 (Fig.1A). El reconocimiento
simultneo de un antgeno (opsonizado por complemento) por el co-receptor
CR2 y por las inmunoglobulinas de superficie de un linfocito B intensifica
mucho la magnitud del estmulo.

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Los antgenos reconocidos por los anticuerpos pueden ser tan diversos como
polisacridos, lpidos, pptidos, cidos nucleicos y pequeas sustancias
qumicas. Los anticuerpos pueden reconocer eptopes lineares o bien
determinantes conformacionales, resultantes del plegamiento de las cadenas
polipeptdicas. El reconocimiento antignico induce la endocitosis del antgeno,
y su procesamiento para ser presentado por el linfocito B mediante molculas
MHC II.

Los receptores de linfocitos B que no han tenido contacto con antgenos

(clulas vrgenes), son del isotipo IgM e IgD. Estas clulas B vrgenes circulan
continuamente por los diversos tejidos linfoides hasta encontrar el antgeno
especfico de su receptor. En el momento en que esto sucede, los linfocitos B
dejan de migrar, y como resultado de una secuencia de eventos moleculares se
transforman en clulas plasmticas productoras de anticuerpos dentro de los
ganglios linfticos o tejidos linfoides asociados a mucosas (amgdalas,
apndice, placas de Peyer etc.). Dependiendo de las caractersticas del
antgeno, los linfocitos B pueden activarse con o sin ayuda de linfocitos T CD4+
(ayudadores). Aquellas macromolculas que contienen antgenos polivalentes,
es decir que constan de mltiples eptopes idnticos como es el caso de
polisacridos y glicolpidos de las cpsulas de algunas bacterias (Haemophilus
influenzae, pneumococo y meningococo), pueden unirse simultneamente a
varios receptores IgM, lo cual lleva al entrecruzamiento de los receptores y a la
activacin del linfocito B (Fig.2). Sin embargo, cuando las caractersticas del
antgeno no inducen el entrecruzamiento de varias molculas de
inmunoglobulinas, sino que solo comprometen a un receptor IgM, el linfocito B
requiere de la ayuda de linfocitos TCD4+ para su activacin. En este caso, los
antgenos protecos unidos a un receptor IgM son endocitados, procesados y
expuestos de nueva cuenta en la superficie celular por las molculas MHC II
del linfocito B. Este proceso permite iniciar lo que se conoce como
cooperacin entre linfocitos T y B, proceso mediante el cual un linfocito T
CD4+ cuyo TCR es especfico para ese antgeno, reconoce al antgeno y
genera una serie de seales intracelulares que ultimadamente van activar al
linfocito B (Fig.2E).

Esta conversacin molecular entre linfocitos T y B depende de la presencia

simultnea de linfocitos B y T con receptores que reconocen determinantes
antignicos de un mismo microorganismo en los mismos rganos linfoides.
Gracias a la migracin constante de ambos grupos de linfocitos por el sistema
linfoide, esto es posible. Actualmente se piensa que un linfocito T especfico
contra un antgeno microbiano determinado es activado previamente, y de
manera independiente, por CPAs que capturaron, procesaron y presentaron
determinantes antignicos del microorganismo a ese linfocito T en los ganglios
linfticos. El determinante antignico del microorganismo reconocido por los
receptores de los linfocitos B puede ser totalmente distinto a los que le
presente la clula B a los linfocitos T, y sin embargo la ayuda proporcionada
por el linfocito T, favorece la produccin de anticuerpos dirigidos contra el
determinante antignico inicial. En otras palabras, los anticuerpos que produce
el linfocito B activado reconocern el mismo determinante antignico que fue
reconocido inicialmente por los anticuerpos que constituyen el receptor para el
antgeno del linfocito B.

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Las seales intracelulares generadas cuando los receptores para el antgeno
reconocen a su antgeno no son suficientes para la activacin adecuada del
linfocito B y se requiere la participacin de molculas co-receptoras tanto de
clulas B como T. Las molculas co-receptoras expresadas por el linfocito B
incluyen B7-1 (CD80) y B7-2 (CD86) cuyo ligando en clulas T es CD28. El
linfocito T CD4+ a su vez expresa la molcula co-estimuladora CD40L cuyo
ligando en la clula B es CD40 (Fig.4) . Esta co-estimulacin, o segunda seal,
es indispensable para la activacin mutua, ya que sin ella los linfocitos entran
en un estado de anergia. Adicionalmente, la IL-2 secretada por el linfocito T
CD4+ induce la activacin y proliferacin del linfocito B, transformndolo en
clula plasmtica productora de anticuerpos (Fig.2E).

Uno de los eventos que ocurren en el linfocito B estimulado, es la activacin del

gen que codifica para la enzima TdT (desoxinucleotidil transferasa terminal),
responsable de generar mayor polimorfismo en la regin variable de los
anticuerpos producidos por los linfocitos B. Mediante la insercin de nuevos
nucletidos en los segmentos gnicos que codifican para la regin variable de
las inmunoglobulinas, las clulas pueden producir anticuerpos con distinta
afinidad para el antgeno. La maduracin de la afinidad permite generar un
polimorfismo adicional al generado durante la recombinacin gentica de los
receptores de linfocitos B, incrementando aun mas (hasta109) el nmero de
posibles diferentes anticuerpos de muy alta afinidad. Aquellos linfocitos B que
expresan receptores de mayor afinidad para el determinante antignico son
seleccionados para seguir su desarrollo hacia clulas plasmticas productoras
de anticuerpos de mayor afinidad que los receptores originales de membrana
de los linfocitos B, mientras que los linfocitos B cuyos receptores tienen menos
afinidad por el antgeno, mueren por apoptosis. En general, los anticuerpos
que se unen al antgeno durante la fase de reconocimiento antignico son de
menor afinidad y de otro isotipo que los que llevan a cabo la fase efectora de la
respuesta humoral.

Mediante los cambios de isotipos de los anticuerpos se generan anticuerpos

con una misma especificidad antignica (determinada por su fraccin Fab),
pero que tienen distintas regiones Fc. El isotipo es determinado por el tipo de
citocinas secretadas por los linfocitos T CD4+: IL-4 favorece la produccin de
IgE, mientras que Il-5 y TGF-b inducen IgA e IFN-g favorece la diferenciacin
hacia las subclases IgG1 e IgG3. Esto es importante, ya que distintos isotipos
de anticuerpos llevan a cabo distintas funciones efectoras, a traves de los
distintos tipos de receptores para Fc expresados por diferentes clulas
linfoides.

Las clulas plasmticas pueden salir de los ganglios linfticos donde sufrieron
su estimulacin, proliferacin y expansin clonal y migar a distintos sitios del
sistema inmune (ganglios o mdula sea) y secretar anticuerpos mientras
persista el reto antignico o bien, transformarse en clulas de memoria, con
capacidad de producir anticuerpos de alta afinidad muy rpidamente, en caso
de la reaparicin del reto antignico. Mientras que la respuesta primaria tarda
de 7 a 10 das para llegar a su mxima expresin, la respuesta inmune
secundaria generada por linfocitos B de memoria, tarda entre 3 y 4 das. Los

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anticuerpos circulan por la sangre y dependiendo de su isotipo, se asocian
preferentemente a distintos tejidos o clulas efectoras, siendo que IgA se
encuentra asociada a mucosas, mientras que IgE se une a receptores FceRI de
alta afinidad en clulas cebadas y basfilos. El entrecruzamiento de los
receptores IgE en estas clulas lleva a la liberacin instantnea de las
substancias vasoactivas de sus grnulos.

2.2 RESPUESTA INMUNE CELULAR

Los linfocitos T se producen en mdula sea y maduran en el timo en donde

son sometidos a dos etapas de seleccin (positiva y negativa) y solo aquellos
que reconocen al MHC propio pero que sin embargo no responden a antgenos
propios, sobreviven. Los linfocitos T reconocen antgenos peptdicos unidos a
molculas MHC y, a diferencia de los linfocitos B, no reconocen antgenos
solubles. Al igual que los linfocitos B, las clulas T vrgenes circulan
constantemente a travs del tejido linfoide hasta encontrarse con el antgeno
especfico presentado por CPAs. La respuesta de los linfocitos T est
directamente influenciada por el tipo de clula que presente originalmente el
antgeno. Las clulas dendrticas se encuentran localizadas estratgicamente
para capturar antgenos y transportarlos a los ganglios linfticos y
presentrselos a los linfocitos T se consideran como las mejores activadoras de
un linfocito T virgen, mas aun si expresan una cantidad abundante de
molculas MHC cargadas de pptidos, as como niveles elevados de molculas
que son ligandos de las molculas co-receptoras (Fig.3).

Una de las primeras consecuencias del reconocimiento del complejo [MHC-

peptido] presentado por las CPAs, es la proliferacin clonal de aquel linfocito T
virgen que reconoci especficamente el complejo [MHC-peptido] y una
diferenciacin de su progenie en clulas efectoras y clulas de memoria. Las
clulas efectoras pasan a la circulacin, y s localizan de nuevo a su antgeno
presentado por CPAs, como por ejemplo macrfagos de tejidos perifricos, se
activan de nueva cuenta para llevar a cabo esta vez sus funciones efectoras.

El modulo de reconocimiento propiamente dicho del receptor para el antgeno

de los linfocitos T (TCR) consta de dos cadenas (a y b). En virtud del alto
grado de polimorfismo que presentan, estas molculas tienen la capacidad de
reconocer una inmensa diversidad de pptidos. Como en el caso de los
linfocitos B, la transduccin de seales est a cargo de un una serie de
protenas invariables asociadas al TCR y cuyo conjunto constituye el complejo
CD3 (constituido por las cadenas g,d y e y la cadena z). As mismo, las seales
del complejo TCR-CD3 son moduladas por las de diversas molculas
accesorias (Fig. 1B). Al interaccionar con sus ligandos presentes en la
superficie de las CPAs, estas molculas modulan las funciones efectoras:
contribuyen a estabilizar la interaccin fsica entre los linfocitos y las CPAs
(adhesin), y participan directamente, positiva o negativamente, en los
fenmenos de activacin y transmisin de seales hacia el interior de la clula
efectora. Entre las molculas accesorias de los linfocitos T mencionaremos
LFA-1, CD2 y CD28 que se unen a sus ligandos complementarios en las CPAs
que son ICAM-1, LFA-3 y B7-1 y B7-2 (estos dos ltimos son ligandos

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deCD28), respectivamente. Otras molculas accesorias presentadas por
linfocitos T son CD4, CD8 (cuyos ligandos son MHC II y MHC I), CD45R, L-
selectina y CD44 (une a linfocitos T al endotelio de tejidos inflamados). Una
vez activados, los linfocitos T expresan CTLA-4, que tiene mayor afinidad por
B7-1 y B7-2 que CD28, y funciona como mecanismo regulador que inhibe la
proliferacin excesiva del linfocito. Las molculas accesorias adicionalmente
regulan la migracin de los linfocitos ((Fig.4)

La afinidad del TCR por los complejos pptido-MHC es mucho menor (Kd: 10-5-
10-7) que la de la mayora de los anticuerpos. Esta baja afinidad posiblemente
es la causa por la cual se requieren las molculas accesorias para estabilizar la
unin de linfocitos T a CPAs. Cuando la interaccin entre el linfocito T y la CPA
es exitosa, las cadenas del TCR se desplazan de manera coordinada con sus
ligandos en las CPAs formando una estructura supramolcular denominada
sinapsis inmunolgica.

La respuesta de los linfocitos T y B vara en funcin del grado de madurez y

diferenciacin de los linfocitos mismos. Mientras que el reconocimiento del
antgeno por parte de timocitos inmaduros conlleva a la muerte (seleccin
negativa), en linfocitos T maduros, este mismo evento induce seales de
proliferacin y diferenciacin. Tambin es importante sealar que el umbral de
activacin de los linfocitos T vara en funcin de su grado de diferenciacin: las
clulas efectoras y de memoria tienen un umbral de activacin menor que los
linfocitos T virgen, y por ello pueden ser activadas por CPAs no profesionales,
esto es, linfocitos B y macrfagos. Dicho en otros trminos, esto significa que
los linfocitos efectores y los de memoria pueden ser estimulados en cualquier
tejido perifrico en el que se encuentre el antgeno especfico de esas clulas,
y no necesariamente en los ganglios linfticos.

A grandes rasgos, dependiendo de si son linfocitos T CD4+ o CD8+, las clulas

secretaran citocinas (CD4+) o tendrn actividad citotxica (CD8+). Sin
embargo, las seales bioqumicas que se generan al reconocer al complejo
[MHC-Ag] a travs del receptor para el antgeno y que conducen a cada una de
estas opciones son esencialmente idnticas.

2.2.1 Linfocitos CD4+

Los linfocitos CD4+ reconocen principalmente pptidos derivados de protenas

extracelulares presentados por CPAs en asociacin con molculas MHC II.
Las CPAs llevan a cabo dos funciones importantes en la activacin de linfocitos
T CD4+: fagocitan, degradan y convierten antgenos proteicos en pptidos y
presentan los complejos MHC-peptido a los linfocitos T CD4+ y por otra parte,al
expresar las molculas co-receptoras B7-1y B7-2 que se unen a su ligando
CD28 en el linfocito TCD4+, as como CD40 que a su vez se une a CD40L en
el linfocito T, proporcionan seales co-estimulatorias que se suman a las
generadas por el receptor para el antgeno, cuando este ultimo reconoce en el
peptido presentado por las molculas MHC a su antgeno especifico. Aunado a
la co-estimulacin, se requiere la produccin de citocinas tanto por las CPAs
como por las clulas T para la activacin de linfocitos T CD4+. Esta

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combinacin de eventos induce la proliferacin, diferenciacin y secrecin de
citocinas del linfocito. La primer citocina producida por linfocitos T al ser
activados es la IL-2, que acta como factor de crecimiento autcrino (para la
misma clula), as como un factor parcrino (para clulas vecinas).

Una vez activados, los linfocitos T CD4+ se convierten en clulas efectoras que
ayudan a otras clulas como macrfagos, a eliminar microbios fagocitados, o a
linfocitos B para producir anticuerpos. La ayuda que prestan los linfocitos T
CD4+ se realiza a travs de las citocinas que producen y por medio de sus
molculas co-receptoras. Las poblaciones de linfocitos T CD4+ mejor definidas
son las Th-1 y Th-2, cuya diferencia radica esencialmente en las citocinas que
secretan. Mientras que las citocinas producidas por CD4+ Th-1 incluyen IFN-g
y TNF-a que activan a los macrfagos en la fase efectora de la respuesta
inmune celular, las citocinas producidas CD4+ Th-2 incluyen IL-4, IL-5, TGF-b,
e IL-13 que participan en la fase efectora de la respuesta inmune humoral
activando a linfocitos B, para transformarlas en clulas plasmticas productoras
de anticuerpos (Fig.5). Recientemente se ha reconocido la existencia de una
subpoblacin de linfocitos T CD4+ con funcin reguladora. Aunque no se
dispone aun de un marcador exclusivo de estas clulas, se sabe que son
CD25+ (cadena a del receptor para IL-2). Estas clulas tienen la capacidad de
inhibir la respuesta de linfocitos CD4+ y CD8+ ya sea por contacto clula-clula
o mediante la produccin de citocinas inhibitorias (IL-10 y TGF-b)

2.2.2 Linfocitos CD8+

Los linfocitos T CD8+ reconocen pptidos derivados de protenas citoslicas

presentados por CPAs o por cualquier clula nucleada en asociacin con las
molculas MHC I. Una de las funciones efectoras de los linfocitos T CD8+ es
inducir la muerte de clulas infectadas o tumorales que, por expresar antgenos
distintos a los propios asociados a las molculas MHC I, son identificadas como
diferentes. La accin citoltica se lleva a cabo mediante la exocitosis de
grnulos de perforina y granzimas. Mientras que la perforina se polimeriza
para formar poros en la membrana de la clula blanco, las granzimas activan
vas apoptticas endgenas de las clulas blanco. Adicionalmente, los
linfocitos T CD8+ (y algunos linfocitos CD4+ Th-1) expresan el ligando de la
molcula Fas (FAS-L), que tambin puede inducir apoptosis en clulas que
expresan Fas, tal como ocurre en linfocitos activados. Este mecanismo de
muerte regula de manera importante la poblacin de linfocitos despus de la
desaparicin del patgeno inductor, restableciendo la homeostasis.

Otra funcin efectora de los linfocitos T CD8+ es la produccin de citocinas que

incluyen IFN-g,TNF-a y TNF-b o LT (linfotoxina). TNF-a y TNF-b pueden actuar
en sinergismo con IFN-g activando macrfagos, especialmente si se unen al
receptor TNF-RII. Sin embargo, s TNF-a y TNF-b se unen al receptor TNFRI,
pueden inducir la muerte de la clula blanco por apoptosis.

En resmen, las clulas CD8+ citotxicas pueden inducir apoptosis por tres
distintos mecanismos: granzimas y perforinas, Fas-L y mediante las citocinas
TNF-a y TNF-b unidas al receptor TNFRI en clulas blanco (Fig.6). Los

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linfocitos T CD4+ Th-1 tambin pueden inducir apoptosis mediante estas dos
ltimas vas.

La mayor parte de las clulas T efectoras expresan varias molculas que

pertenecen a la familia de TNF; de estas mencionaremos TNF-a, TNF-b, Fas
ligando y CD40 ligando (las dos ltimas siempre estn unidas a la membrana).
Mientras que CD40 L funciona como molcula co-estimuladora y activadora y
nicamente se expresa en linfocitos T CD4+, TNF-a, TNF-b y Fas-L tambin se
expresan en linfocitos T CD8+ y participan en su funcin citotxica.

3. SEALES INTRACLULARES GENERADAS A TRAVS DEL

RECEPTOR PARA EL ANTGENO

Las seales bioqumicas que genera el receptor para el antgeno constituyen la

interfase entre el reconocimiento del antgeno y la generacin de una respuesta
efectora. Las seales se transducen en una serie de pasos discretos que
llevan la informacin desde la membrana celular hasta el ncleo en donde se
controla la activacin de la transcripcin de ciertos genes as como la entrada
al ciclo celular. Las seales que se generan se pueden detectar en cuestin de
minutos en el citoplasma y de horas en el ncleo.

Al reconocer el antgeno, los receptores para el antgeno se agregan en la

superficie celular. A pesar de no tener una actividad enzimtica intrnseca,
valindose de su asociacin con un complejo de sealizacion que a su vez
interacciona con diversas cinasas, fosfatasas y molculas adaptadoras, los
receptores para el antgeno (TCR, T Cell Receptor o BCR, B Cell Receptor) se
encargan de transmitir las seales, para finalmente generar una seal
especfica. De una manera general, hay un gran paralelismo en los
mecanismos de transduccin de seal por parte de TCR y del BCR. Las
seales generadas a travs del receptor para el antgeno estimulan varias vas
de sealizacin de manera casi simultanea: la va de las MAP cinasas, la va
de PKC y la va del calcio (Fig.7). A continuacin describimos con mayor
detalle las vas de sealizacin del TCR.

3.1: Los primeros eventos

Muy rpidamente, en cuestin de 5 a 10 minutos, se observa la oligomerizacin

del receptor as como de varias molculas coreceptoras (CD4/CD8, CD28,
CD45) en la superficie del linfocito, en la regin que se encuentra en contacto
con la CPA. Despus de aproximadamente 30 minutos se forma una
estructura ordenada llamada sinapsis inmunolgica en la que se distingue una
regin central en la que se concentran las molculas del TCR mientras que en
la periferia se localiza un anillo constituido por molculas que regulan la
adhesin de los linfocitos con las CPA. Cada conjunto de molculas trae
subyacente su maquinaria de sealizacin. De manera concomitante con la

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formacin de la sinapsis inmunolgica, se registra la activacin de enzimas que
catalizan la fosforilacin de residuos de tirosina de diversas cinasas de tirosina.
Las cadenas invariantes CD3 g,d y e as como los dmeros de la cadena z del
complejo TCR-CD3 y las subunidades Ig-a/b asociadas con el BCR constituyen
el modulo de sealizacin (Fig.6). Cada una de las molculas del modulo de
sealizacin se caracteriza por tener por lo menos una secuencia especfica de
16 aminocidos llamada ITAM (Immunoreceptor Tyrosine Activation Motif) que
consta de dos residuos de tirosina (Y ) separados entre si por 9-11
aminocidos. (YXXXL/I X6-8 YXXXL/I). Las porciones citoplsmicas de la
cadena CD3 y de la cadena z contienen un total de diez ITAMS. Cuando el
TCR de un linfocito T interacciona con el complejo MHC-peptido presentado en
la superficie de una clula presentadora de antgeno, las molculas co-
receptoras CD4 o CD8 se unen simultneamente a las regiones no polimrficas
de las mismas molculas MHC clase II o clase I. Como resultado de ello, Lck,
una tirosin cinasa de la familia Src, que normalmente se encuentra asociado a
la cola citoplsmica de CD4 y CD8, se aproxima a los ITAMs del complejo CD3
y de la cadena z, y fosforila sus residuos de tirosina. Estos residuos de
tirosina fosforilados sirven a su vez de sitio de unin para la cinasa ZAP-70 (z-
associated protein of 70 kDa). La fosforilacin de ZAP-70 por Lck induce su
actividad enzimtica, la cual se traduce por la fosforilacin de la molcula
adaptadora LAT entre otros.

LAT es una molcula adaptadora que consta de varios residuos de tirosina los
cuales una vez fosforilados son el punto de anclaje de diversas molculas: la
molcula adaptadora Grb2, fosfolipasa C-g1 (PLC-g1) y la subunidad p85 de la
fosfatidil inositol 3 cinasa (PI3K). La molcula Grb2 atrae a este creciente
complejo macromolcular a Sos, y a SLP-76. Sos es un intercambiador de
nucletidos de guanina (intercambia molculas de GDP por GTP, necesarias
para activar a las llamadas pequeas GTPasas tales como Ras), y SLP-76 es
una molcula adaptadora que se asocia con Vav (otro factor intercambiador de
nucletidos de guanina, que participa en rearreglos del citoesqueleto) y a Cbl,
una molcula que se ha relacionado con la regulacin negativa de las seales
intracelulares. La formacin de este complejo multimolecular activa por lo
menos cuatro grandes vas de sealizacin: la va de PLC-g1 (fosfolipasa-g1),
las de Ras-MAPK (mitogen-activated protein kinases) y de Ras-PI3K as como
la va de itk (Figs.7 y 8).

3.2: La va de PLC-g

La activacin de PLC-g1 lleva a la hidrlisis de lpidos de la membrana,

produciendo inositol trifosfato (IP3) y diacilglicerol (DAG). IP3 induce flujos de
calcio intraclulares mientras que DAG favorece la traslocacin del citoplasma
a la membrana celular y activacin de diversos miembros de la familia de PKC
(protein cinasa C), que fosforilan residuos de serina de diversas protenas
intraclulares. La amplitud y la frecuencia de los flujos de calcio que se
registran en una clula en respuesta a las seales del receptor para el
antgeno, as como la temporalidad y localizacin celular (citoplasma vs ncleo)
de estas seales ejercen un papel critico en determinar cuales factores de
trascripcin y la eficiencia con la que estos se reclutan. La importancia de los

11
flujos de calcio en la regulacin de algunas de las respuestas de los linfocitos T
se demuestra en el efecto de la ciclosporina y FK506, dos drogas ampliamente
usadas en la clnica por su poder inmunosupresor. En el citoplasma, estas
drogas se unen a la ciclofilina y a FKBP respectivamente, las cuales forman
parte de una amplia familia de molculas llamadas inmunofilinas. Cuando la
ciclosporina y FK506 forman complejos con sus respectivos ligandos, son
capaces de unirse con y de inhibir las funciones de la calcineurina, una
fosfatasa dependiente de calcio y de calmodulina. En condiciones normales, al
desfosforilar al factor de trascripcin NF-AT, la calcineurina descubre un sitio
de localizacin nuclear en NF-AT, provocando su translocacin al ncleo. La
presencia de ciclosporina y FK506 inhibe la actividad de fosfatasa de la
calcineurina, y por la tanto la activacin de los linfocitos. Por otra parte, la
activacin de algunos miembros de la familia de PKC que resulta de la
generacin de DAG, puede participar en la activacin de varias vas de
sealizacin, como por ejemplo la va de las MAPKs, a travs del Raf-1 e
inducir la activacin de otros factores de trascripcin tales como NFkB (Fig.8).

3.3: La va de Ras y de las MAP cinasas

Otro evento de gran importancia que resulta del reconocimiento del antgeno
por parte del receptor para el antgeno es la activacin de Ras. Ras es una
protena que se encuentra normalmente localizada en la cara interna de la
membrana celular y que une molculas de guanosina 5-trifosfato (GTP)cuando
es activada o GDP cuando se encuentra en estado inactivo. Como sucede en
el caso de otras molculas que unen GTP, el estado de activacin de Ras
refleja en realidad el balance entre el conjunto de molculas de Ras que se
encuentran asociadas a GDP y el de las asociadas a GTP. Este delicado
equilibrio est controlado por los factores intercambiadores de nucletidos de
guanina (Guanine Exchange Factors, GEF) que al inducir el intercambio de
GDP por GTP inclinan la balanza hacia la activacin de las protenas G. Ras-
GTP es un activador alostrico de las MAPKs. La familia de las MAPKs esta
constituida por nmerosos miembros, que se activan en cascada. Cada
cascada consta de por lo menos tres enzimas que son sustrato las unas de las
otras. Entre las molculas que son reclutadas en respuesta a la activacin de
Ras, se encuentra Raf-1. Al unirse Raf-1 con Ras-GTP (lo cual favorece su
localizacin membranal), esta cinasa se activa y fosforila residuos de
serina/treonina de sus sustratos. La activacin de Raf-1, mediada a travs de
PKC, conduce a la activacin de la cascada de las MAPKs, entre las cuales
mencionaremos a ERK1/2. A su vez, en el ncleo, ERK fosforila a una
protena llamada Elk, la cual estimula la transcripcin de Fos, uno de los
componentes del factor de transcripcin AP-1 (Fig.7).

De manera paralela a la activacin de Ras, las seales del receptor para el

antgeno reclutan a otras protenas de unin de nucletidos de guanina
(tambin llamadas pequeas GTPasas), tales como la protena Vav. Al
intercambiar el GDP de Rac por GTP, Vav activa a Rac, induciendo un cambio
conformacional de Rac y activa una cascada de MAPKs paralela a la de Ras.
En este caso, el blanco principal es la cinasa JNK (Jun Kinase), que es
activada por seales de stress tales como luz ultravioleta, stress osmtico, y

12
citocinas proinflamatorias como TNF e IL-1. Cuando JNK se encuentra en su
forma activa, es capaz de fosforilar a Jun, el otro componente del factor de
transcripcin AP-1. Por otra parte, Rac-GTP participa activamente en
promover los rearreglos del citoesqueleto que llevan a la formacin de la
sinapsis inmunologica)

En resumen podemos decir que los productos de esta cascada de sealizacin

participan en nmerosos eventos clulares como proliferacin celular y
diferenciacin, como un resultado de cambios en la trascripcin de diversos
genes (por ejemplo, a travs de diversos factores de trascripcin tales como
NFkB, Elk-1, c-fos, c-jun), rearreglos del citoesqueleto, regulacin de la
expresin de receptores de membrana, sntesis de quimiocinas y citocinas,
etc.

3.4: Activacin de la va de PI3K

La activacin de Ras tambin conduce a la activacin de la va de PI3K. Esta

va de sealizacin produce esencialmente PI(3,4,5)P3 a partir de PI(4,5)P2.
Este lpido que normalmente se encuentra en la membrana celular tiene la
capacidad de unirse con los dominios de homologia a plekstrina (PH domains)
de varias protenas, y por ende de atraer a esas protenas a la membrana, en
donde generalmente llevan a cabo sus funciones efectoras. Entre las protenas
de mayor importancia que se han implicado en esta va se encuentran las
cinasas de tirosina de la familia de Itk (Itk, Btk, Tec), quienes adems requieren
de las cinasas de la familia src (Fyn para Itk y Lyn para Btk) para ser activadas.
La ausencia de estas cinasas resulta en graves defectos en el desarrollo de los
linfocitos as como en la activacin de las clulas mediada por el receptor para
el antgeno. Otra cinasa que depende de los productos de PI3K para ser
activada y reclutada a la membrana es AKT (tambin conocida como PKB); el
resultado de esta activacin es un aumento en los niveles nucleares del factor
de trascripcin NF-AT (nuclear factor of activation of T cells) (Fig.8).

3.5 Distintas vas de sealizacin participan en la regulacin de la

expresin de distintos genes mediante la activacin de factores de
trascripcin.

Hasta ahora hemos descrito cuatro grandes cascadas de sealizacin en las

que las enzimas activadas por las seales generadas a travs del receptor para
el antgeno, en conjunto con molculas adaptadoras y de andamiaje generan
una respuesta celular especfica. Para ello, en la mayora de las ocasiones,
estas seales culminan en el reclutamiento de diversos factores de trascripcin
que regulan la expresin gnica de la clula en un momento dado, ante una
situacin dada. Gran parte de la informacin de la que disponemos acerca de
los mecanismos que regulan la expresin de genes en linfocitos T se basa en
el anlisis de los genes de citocinas. Los principales factores de trascripcin
que se activan en respuesta a las seales especficas del receptor para el
antgeno son NF-AT, AP-1 y NFkB.
La presencia del factor de trascripcin NF-AT es necesaria para la expresin de
varios genes de citocinas entre las cuales mencionaremos a IL-2, IL-4, TNF.

13
En linfocitos en reposo, NF-AT se localiza en el citoplasma de la clula, y esta
fosforilado en residuos de serina. Cuando la calmodulina, que es una fosfatasa
dependiente de Ca+-calmodulina, desfosforila a NF-AT, se descubre un sitio de
localizacin nuclear, lo cual permite que NF-AT se dirija al ncleo, en donde se
une con secuencias especficas de la regin promotora de los genes de IL-2 e
IL-4 por ejemplo. Generalmente en la regin reguladora de los genes hay
secuencias concenso especficas para mas de un factor de trascripcin, lo que
sugiere que la induccin de la expresin de un gen es un proceso muy
regulado. Como mencionamos anteriormente, los mecanismos de activacin
de NF-AT se descubrieron mediante el uso de las drogas inmunosupresoras
Cyclosporina y FK506.

AP-1 es un factor de trascripcin que se encuentra en muchos tipos de clulas.

En realidad, este termino engloba una familia de molculas de unin a DNA
que funcionan como dimeros constituidos por protenas que se unen entre si
por una estructura llamada cierre de leucina. Los miembros mejor
caracterizados de esta familia de protenas son Fos y Jun. Mientras que la
localizacin nuclear de NF-AT se lleva a cabo a partir de las reservas
citoplsmicas de esta molcula, la activacin de AP-1 requiere de la sntesis de
novo de Fos y de la activacin de Jun en el ncleo. La transcripcin de Fos
depende de la va de ERK y de PKC, y la activacin de Jun depende de JNK,
de tal modo que la formacin del dimero AP-1 constituye un punto de
convergencia de varias vas de sealizacin activadas a travs del TCR. El
factor de trascripcin AP-1 ejerce su funcin reguladora sobre mltiples genes.

NFkB es otro factor de trascripcin esencial para la produccin de citocinas, en

respuesta a las seales del TCR. Este factor de trascripcin esta constituido
por homo- o heterodimeros de las subunidades p50 y p65. En clulas en
reposo, las molculas NFkB se encuentran en el citoplasma, asociadas a un
inhibidor, conocido como IkB. Cuando las protenas IkB son fosforiladas en
residuos de serina son marcadas con ubiquitina, para luego ser degradadas.
La fosforilacin esta a cargo de una cinasa especfica llamada la cinasa de IkB,
la cual es activada en parte a travs de PKC. Este proceso libera a las
molculas NFkB, que se translocan al ncleo y se unen a secuencias
especficas en las regiones reguladoras de varios genes, entre los cuales los
genes de citocinas y de receptores para citocinas son particularmente
importantes en el marco de las respuestas mediadas a travs de las seales
del TCR.

3.6: Papel de las molculas adaptadoras en las cascadas de

sealizacin.

Hasta ahora hemos descrito a grandes rasgos las vas de sealizacin que
llevan a la activacin de los linfocitos. Hemos hecho hincapi en una serie de
cascadas de sealizacin en donde los actores principales son molculas con
actividad cataltica. Sin embargo, no podramos abordar plenamente este tema
sin hablar de una categora adicional de molculas: las molculas adaptadoras.
Las molculas adaptadoras, no tienen capacidad enzimtica intrnseca. Como
la mayor parte de las molculas que participan en la transduccin de seales,

14
las protenas adaptadoras estn constituidas por dominios modulares que unen
y/o reclutan a otras protenas de sealizacin, de ah que tambin se les
denomine protenas de andamiaje. Entre los modulos de sealizacin
mencionaremos los dominios SH2 (Src Homology domain 2) y PTB (Phospho-
Tyrosine binding domain) que reconocen secuencias cortas de aminocidos
que contienen fosfotirosinas, los dominios SH3 y WW que interactuan
respectivamente con secuencias ricas en prolina y con dominios PH (dominios
de homologia a plekstrina) que se asocian con fosfoinositidos.

Algunas molculas como LAT (Linker for Activation of T cells) y WASP (Wiskot-
Aldrich Syndrome Protein) al reclutar numerosas molculas, muchas de ellas
con actividad enzimtica, promueven la formacin de grandes complejos
moleculares en una regin de la clula en donde se percibieron, a traves de los
receptores para el antgeno, seales de activacin, participan en la regulacin
positiva de las seales. LAT es indispensable para el reclutamiento de la va
de PLCg-1, la generacin de flujos de Ca2+ y la activacin de la MAP cinasa
ERK. WASP participa de manera importante en la regulacin del citoesqueleto
de actina en respuesta a las seales del TCR. En cambio, otras molculas
tales como Cbl-b y c-Cbl participan en la regulacin negativa de las seales.
Las molculas de la familia Cbl son molculas adaptadoras constituidas por
una gran variedad de dominios funcionales a traves de los cuales tambin
reclutan a numerosas molculas sealizadoras, para dirigirlas hacia la va de
degradacin del proteosoma, debido a su funcin de ligasa de ubiquitina. Es
interesante notar que ambos tipos de molculas son reclutados por las mismas
seales.

A traves de sus funciones, estas molculas regulan posita y negativamente los

umbrales de activacin de las clulas linfoides. No es de extraarse entonces
que los defectos en la funcin de estas molculas se traduzca a nivel funcional
por profundas alteraciones en el funcionamiento del sistema inmune. Las
deficiencias en molculas tales como Cbl-b y c-Cbl o la cadena CD3-z se han
relacionado con el desarrollo de enfermedades autoinmunes en modelos
murinos en los que estas molculas se han mutado o en algunos individuos
afectados por enfermedades autoinmunes tales como Lupus Eritematoso
Sistmico o Sjgren primario.

4. SEALES DE LAS MOLCULAS CO-RECEPTORAS

El reconocimiento especifico del antgeno a travs del TCR en ausencia de un

estimulo adicional no lleva a la activacin total de los linfocitos T sino mas bien
a un estado de anergia o inclusive, a la muerte por apoptosis. Las clulas
anrgicas son incapaces de producir IL-2 o de proliferar cuando son
estimuladas nuevamente por el mismo antgeno. El concepto de molcula co-
receptora, co-estimuladora o accesoria se basa en el hecho que estas
molculas, que son molculas no polimorfitas que se expresan en la superficie
de los linfocitos, reconocen a sus ligandos en la superficie de la misma clula
en la que el receptor para el antgeno reconoce a su antgeno.

15
Adems de modular la fuerza de la adhesin entre los linfocitos y sus APCs,
estas molculas generan seales intracelulares que regulan de una manera
positiva o negativa las del receptor para el antgeno, y en funcin del balance
final de las seales intracelulares, determinan la respuesta final del linfocito T o
B (Fig.4). A pesar de que el nmero de molculas caracterizadas como
molculas co-receptoras o accesorias es muy grande y crece cada da, solo se
conocen las funciones precisas de algunas de ellas.

En el caso de los linfocitos T, CD4 y CD8 son co-receptores que participan en

la activacin dependiente del reconocimiento del complejo [MHC-Ag], ya que
cada una de estas molculas se une a la regin no-polimrfica de la misma
molcula MHC que es reconocida por el receptor para el antgeno del linfocito
T, fortaleciendo la interaccin entre el linfocito y CPA, as como proporcionando
seales tempranas del complejo TCR-CD3, acercando a la cinasa Lck, lo cual
permite la fosforilacin en tirosinas de los ITAMS presentes en el complejo CD3
y en la cadena z.

CD28 es una molcula co-estimuladora que, al interaccionar con sus ligandos

B7.1 y B7.2 (CD80 y CD86 respectivamente) en la CPA, proporciona algunas
de las segundas seales necesarias para la activacin completa de un linfocito
T como son la induccin de seales anti-apoptoticas y de factores de
crecimiento, promoviendo la proliferacin y la diferenciacin. Algunas de las
seales intracelulares de CD28 pueden ser las mismas que las del TCR, y
otras, diferentes a las del TCR, pero todas se combinan de manera positiva con
las del TCR. Se considera que al reclutar diversas enzimas y molculas
adaptadoras que participan en las seales del TCR a las balsas de lpidos que
se encuentran en la vecindad inmediata del sitio de interaccin entre linfocitos
T y la CPA, las seales de CD28 contribuyen a aumentar la concentracin
local de estos reactantes y bajan el umbral de respuesta del TCR.
Recientemente se han descrito otra molcula que pertenece a la misma familia
que CD28: ICOS. A diferencia de CD28 que se expresa nicamente en
linfocitos T y de manera constitutiva, la expresin de ICOS es inducible. Al
interactuar con su contra-receptor en la CPA, ICOS genera seales
intracelulares que se suman a las de CD28 y otras molculas co-receptoras
para activar plenamente a los linfocitos T.

As como se han identificado molculas co-receptoras que modulan de manera

positiva las seales del TCR, se han descrito molculas cuyas funciones son
inhibitorias. CTLA-4 es una molcula con estas caractersticas. CTLA-4 se
expresa en linfocitos T activados, y su expresin depende de las seales de
CD28 (se dice entonces que su expresin es inducible); tiene un 30% de
homologa con CD28 e interacciona con los mismo ligandos que CD28 (B7.1 y
B7.2), solo que con mucha mayor afinidad que CD28. Las seales generadas
en respuesta a las interacciones CTLA-4/B7 contrarrestan las de CD28 y como
resultado de ello se observa una menor produccin de IL-2 por las clulas, una
disminucin en los niveles de expresin del receptor para IL-2, y un arresto de
los linfocitos T en la fase G1 del ciclo celular. Otro miembro de la familia de
molculas CD28/CTLA-4 es la molcula PD-1. A diferencia de CTLA-4, PD-1
tiene una expresin mas amplia, ya que su expresin se puede inducir en
clulas B y en clulas mieloides. No se conocen aun todos los detalles

16
moleculares de la va de sealizacin de estas molculas, sin embargo
mencionaremos el hecho que en sus colas citoplsmicas presentan variaciones
de estructuras muy parecidas a los ITAMS, llamadas ITIMS (Immuno Tyrosine
Inhibitory Motifs), y que en vez de tener un papel positivo en la sealizacin,
tienen un papel inhibitorio. El resultado final de estos eventos, y de otros que
no mencionamos, es que el umbral de activacin de los linfocitos T y B
aumenta (Fig.9).

Como en el caso de los linfocitos T, la activacin de los linfocitos B requiere de

la participacin de molculas adicionales que proporcionan la segunda seal.
Una de ellas es CR2, el receptor tipo 2 para el fragmento C3d del
complemento. CR2 consta en realidad de tres cadenas: CR2, CD19, CD81 y
frecuentemente se le llama el coreceptor de linfocitos B ya que CR2 une
antgenos microbianos u otros antgenos a travs de C3d, al mismo tiempo que
la inmunoglobulina de membrana interacciona directamente con el antgeno.
En cuanto esto sucede, la molcula CD19 se acerca a este complejo y es
fosforilada en residuos de tirosina por cinasas de tirosinas asociadas a este
complejo multimolcular.

5. Inmunodeficiencias provocadas por defectos en las

molculas de sealizacin

La integridad del sistema inmune es esencial para la defensa del organismo en

contra de agentes infecciosos y sus productos. Defectos en una o mas de las
partes del sistema inmune son la causa de padecimientos graves. Estas
enfermedades, conocidas en conjunto como inmunodeficiencias, pueden ser
congnitas o adquiridas. Las inmunodeficiencias congnitas se caracterizan
por una mayor susceptibilidad a agentes infecciosos. Esto se manifiesta
generalmente desde temprana edad, aunque en algunas ocasiones los
sntomas pueden aparecer mas tarde. Las anomalas en el desarrollo y funcin
de los linfocitos B se traducen por una produccin de anticuerpos deficiente y
por una mayor susceptibilidad a la infeccin por agentes patgenos. La
maduracin anormal y la activacin defectuosa de los linfocitos T resulta en
una inmunidad celular deficiente as como en una mayor susceptibilidad a las
infecciones por microorganismos intraclulares. Por otra parte, anomalas a
nivel de los linfocitos T ayudadores pueden resultar en el mismo defecto a nivel
de los linfocitos B, aunque la causa real de esta deficiencia se encontrara mas
bien a nivel de la capacidad de las interacciones T-B. En la tabla 1 y 1b
mencionamos algunas inmunodeficiencias primarias que son consecuencia
directa de defectos en molculas involucradas en la transduccin de seales
intraclulares. Estos defectos pueden visualizarse a nivel de la maduracin de
los linfocitos o bien en la respuesta de los linfocitos al estimulo antignico

17
BIBLIOGRAFIA

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Opinion in Immunology 15: 343-348, 2003
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LISTA DE PIES DE FIGURA

1.- Receptores para el antgeno de linfocitos B y linfocitos T

2.- Activacin del Linfocito B
3.- Activacin del Linfocito T
4.- Algunas molculas co-receptoras de linfocitos T y B
5.- Mecanismos activadores de linfocitos T CD4+ Th1 y Th2
6.- Mecanismos citotxicos de linfocitos CD8+
7.- Inicio de las cascadas de sealizacin asociadas a TCR y BCR
8.- Cascadas de sealizacin que se activan a travs del receptor para el
antgeno.
9.- Molculas co-receptoras que regulan negativamente las seales

18
TEXTO DE LEYENDAS.

1. La unin del antgeno a los receptores en linfocitos B (A) e linfocitos T (B)

induce una cascada de sealizacin que lleva a la activacin celular. Esta
cascada se inicia con la fosforilacin de residuos de tirosina presentes en los
ITAMS subunidades Ig a/b asociadas al BCR en linfocitos B (A) y en las
cadenas del complejo TCR-CD3 en linfocitos T (B).

2. La respuesta inmune humoral se inicia cuando el linfocito B endocita al

antgeno reconocido por sus receptores, las inmunoglobulinas IgM o IgD de
membrana (A-D), despus de lo cual el linfocito B degrada el antgeno y lo
presenta al linfocito T CD4+, en asociacin con molculas MHC II. A su vez, a
traves de las seales de su receptor para el antgeno y de las molculas co-
receptoras as como mediante la expresin de citocinas tales como la IL-2, el
linfocito T CD4+ ayuda al linfocito B, para que este se pueda activar, diferenciar
y proliferar (E).

3. La CPA fagocita el antgeno (A), generando el fagosoma, el cual se fusiona

con el lisosoma (B). En el fagolisosoma ocurre la digestin y degradacin del
antgeno (C). La CPA presenta los pptidos en asociacin con molculas
MHCI o MHCII a linfocitos T CD4+ o TCD8+, respectivamente (D). Para la
activacin del linfocito T se requiere que tanto las CPAs como los linfocitos
expresen molculas co-estimuladoras. La secrecin de IL-2 induce la
proliferacin de los linfocitos

4. Molculas co-receptoras de linfocitos T y B

5. Los linfocitos T CD4+ se dividen en dos subpoblaciones: Th1 y Th2,

dependiendo del patrn de citocinas que secretan. El panel A muestra el
mecanismo efector de una clula Th1 que secreta INF-g y TNF-a cuando
reconoce a su antgeno presentado por las molculas MHC II de macrfagos.
Las citocinas a su vez activan al macrfago. El panel B muestra el mecanismo
efector de un linfocito CD4+ Th2 que sintetiza IL-4, IL-5, TGF-b, IL-10 e IL-13
cuando reconoce a su antgeno presentado por las molculas MHC II de los
macrfagos. Las citocinas Th2 activan a los linfocitos B, transformndolos en
clulas plasmticas productoras de anticuerpos y adicionalmente ejercen un
efecto inhibitorio sobre el macrfago.

6. Los linfocitos T CD8+ son clulas citotxicas que reconocen a su antgeno

cuando este es presentado en asociacin con molculas MHC I. Poseen tres
mecanismos distintos para ejercer su citotoxicidad: por medio de granzimas y
perforinas, por Fas-L y Fas y por TNF-a y TNF-b, que se unen al receptor
TNFRI en las clulas blanco.

7. Las seales del TCR y del BCR, junto con las de sus respectivas molculas
accesorias generan seales tempranas a partir de las cuales las tirosin cinasas
de la familia de Src (Lck en el caso de los linfocitos T y Lyn en el caso de los
linfocitos B) fosforilan los residuos de tirosina de los ITAMs, generando sitios de
unin para las tirosin cinasas de la familia ZAP-70/SYK. Estos primeros

19
eventos permiten luego reclutar tres grandes vas de sealizacin, que
ultimadamente regulan el destino de los linfocitos: 1) la va de PLCg, que a
traves de sus productos regula los flujos de Ca2+ intracelular y la activacin de
los distintos miembros de la familia de PKC; 2) la va de los fosfoinostidos
cuyos productos regulan la va de PLCg as como otras enzimas intracelulares
que regulan la activacin de factores de trascripcin tales como NF-AT; 3) la
va de las MAP cinasas que a traves de sus mltiples enzimas participa en
eventos tales como reclutamiento de factores de trascripcin, rearreglos del
citoesqueleto etc

8. Con la interaccin del receptor para el antgeno con su antgeno presentado

por las APCs, y la de las molculas co-receptoras con sus respectivos ligandos
en las APCs se generan complejos agregados multimoleculares que
contribuyen a acercar a los distintos elementos que participan en la
sealizacin. La fosforilacin de las tirosinas de los ITAMs permite activar a
cinasas ZAP-70/SYK, lo que conduce a la fosforilacin de la protena
adaptadora LAT. PLCg se asocia con una de las 9 tirosinas fosforiladas de LAT
a traves de un dominio SH2 e hidroliza el PiP2 de la membrana, generando IP3
que estimula los flujos de Ca2+ intracelular y diacilglicerol (DAG) que activa a
PKC. La regulacin de los niveles de Ca2+ y PKC inciden a su vez sobre varios
factores de trascripcin como NF-AT y NFkB. PI3K se asocia igualmente con
una de las tirosinas fosforiladas de LAT, y genera una serie de seales que se
combinan con las de la va de PLCg, inciden sobre los rearreglos de
citoesqueleto o bien genera seales de sobrevida a traves de la cinasa AKT.
Por otra parte la interaccin del complejo SLP-76/Grb2/Sos con LAT regula los
rearreglos de citoesqueleto as como lleva a activacin de la va de las MAP
cinasas, a la cual tambin se puede llegar a traves de PKC. Como se puede
observar, son mltiples las vas de sealizacin a traves de las cuales se
puede incidir sobre un fenmenos celular. Sin embargo, a pesar de la
redundancia aparente, por lo general, todas estas vas funcionan de manera
coordinada y en conjunto regulan la funcin celular.

9. Algunas molculas co-receptoras tienen en su regin citoplsmica una

secuencia de seis aminocidos (IXYXXL)conocida como ITIM (Immunoreceptor
tyrosine based inhibition motif). Cuando estas molculas interaccionan con sus
contra-receptores, la tyrosina de los ITIMs se fosforila y constituye sitios de
unin para protenas intracelulares que participan en la regulacin negativa de
las seales de activacin, como algunas fosfatasas.

20
Tabla 1

A/ Defectos a nivel de maduracin

Enfermedad Deficiencia funcional Mecanismo

Inmunodeficiencia Reducido nmero de Mutacin en la cadena g de los

severa combinada linfocitos T; linfocitos B receptores para IL-2,-4,-7,-9 Y-
asociada al normales o aumentados; 15; maduracin de linfocitos T
cromosoma X Ig del suero disminuida defectuosa por falta de seales
de IL-7

Inmunodeficiencia Disminucin progresiva La deficiencia de ADA lleva a la

severa combinada por del nmero de linfocitos T acumulacin de metabolitos
deficiencia de adenosin y B; Ig del suero txicos
deaminasa (ADA) disminuida

Inmunodeficiencia Cantidades menores de Maduracin defectuosa de

severa combinada linfocitos T y B; Ig del linfocitos T y B, probablemente
autosmica recesiva suero disminuida debido a mutaciones en los
genes RAG

Agammaglobulinemia Ig del suero disminuida Bloqueo en la maduracin de

asociada al (todos los isotipos), linfocitos B a nivel de clulas pre-
cromosoma X nmero de linfocitos B B, por una mutacin en la tirosin
reducidos cinasa de Bruton ( Btk)

Sndrome de DiGeorge Linfocitos T disminuidos, Hipoplasia del timo debido a un

linfocitos B normales, desarrollo anormal de la 3 y 4
niveles de Igs en el suero bolsa bronquial; maduracin
normales o menores deficiente de linfocitos T

21
 B/ Defectos a nivel de la activacin de linfocitos
Enfermedad Deficiencia funcional
Deficiencia selectiva de Produccin reducida o falta de
isotipos de Igs ciertos isotipos de Igs
(sobretodo IgA e IgG3),
eventual susceptibilidad a
infecciones bacterianas,
Sndrome de hiper-IgM Defectos en interacciones T-B
asociado al cromosoma X (cambio de isotipo) y
activacin de macrfagos;
niveles bajos de IgG e IgA
Inmunodeficiencia comn Reduccin variable de
variable diversos tipos de Igs; niveles
de linfocitos B normales
Deficiencias por defectos Poblacin de linfocitos T
en la expresin del reducida o alteraciones en la
complejo TCR-CD3 o de la relacin CD4+/CD8+;
cinasa ZAP-70 deficiencias en inmunidad
celular
Sndrome linfoproliferativo Proliferacin incontrolada de
asociado al cromosoma X linfocitos B despus de una
infeccin por EBV; linfomas de
linfocitosB,
hipogammaglobulinemias
Expresin deficiente de Carencia de molculas MHC II
molculas MHC clase II, en la superficie celular,
sndrome del linfocito poblacin de linfocitos T CD4+
desnudo ausente; respuestas inmunes
celular y humoral dependiente
de linfocitos T deficiente
Deficiencia de TAP No se expresan molculas
MHC I; nmeros reducidos de
linfocitos. CD8+; infecciones
bacterianas
Causa del defecto
Defectos a nivel de
diferenciacin de linfocitos B,
o en cooperacin T-B;
deleciones o mutaciones de
las regiones constantes de
las Igs
Mutacin en el ligando de
CD40 (CD40L)
Se desconoce la causa de
este padecimiento
Mutaciones o deleciones en
los genes que codifican para
las molculas del complejo
CD3 y ZAP-70
Mutaciones en el gene que
codifica para la protena
adaptadora SAP, la cual
contrarresta las seales de la
molcula SLAM
Mutaciones en los genes que
codifican para los factores de
trascripcin que regulan la
expresin de los genes de
MHC II
Mutaciones en los genes de
TAP imposibilitan el cargado
de molculas MHC I con
pptidos
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