EVALUACIN DE LA VELOCIDAD DE RESPIRACIN MICROBIANA COMO
MEDIO PARA CARACTERIZAR SU ESTADO FISIOLGICO
Edgar Cubedo., Iram Mondaca
imondaca@itson.mx
Modalidad y temtica para participar: Oral (x) Cartel ( ) con la temtica de Tecnologa y Biotecnologa Ambiental.
Palabras clave: Estado fisiolgico, biosensor, respiracin microbiana
Introduccin. Un gran nmero de sensores celulosa. sta membrana se fij a un
microbianos han sido desarrollados desde electodo de oxgeno disuelto tipo Clark los aos 70. Como estos sensores poseen utilizando una membrana de acetato de un alto potencial para detectar un amplio celulosa, despus de lo cual el biosensor se espectro de sustancias se han utilizado en puso en contacto con una solucin de 0.5 g/l gran medida para llevar a cabo la de glucosa en buffer de fosfatos, sometida a cuantificacin de compuestos orgnicos en aireacin y agitacin, para determinar la aguas residuales. Sin embargo, existen otras pendiente inicial de reduccin de oxgeno posibilidades de uso para este tipo de disuelto para cada muestra. biosensores y una de ellas es que se puede Resultados y discusin. El consumo de caracterizar el estado fisiolgico de un oxigeno fu evaluado cada cuatro horas y el microorganismo (1)(2). tiempo en el que la bacteria present una En este trabajo se propone evaluar la mayor velocidad en el consumo de oxigeno velocidad de respiracin de la bacteria fue a las 20 horas despus de que se inici Pseudomonas putida 12633 en diferentes la incubacin, reportndose una absorbancia etapas de crecimiento, con el objeto de de 1.6. caracterizar su estado fisiolgico y as, por Este experimento se realiz en tres medio de sto, determinar el periodo ptimo ocasiones diferentes, siguiendo el mismo de cosecha del microorganismo, con fines de procedimiento, encontrndose que a las 20 conservacin de la cepa o de construccin horas se present en todos los casos la de biosensores microbianos.. mayor velocidad de consumo de oxgeno., Metodologa. Primeramente se realiz una concordando con la etapa de crecimiento curva de calibracin entre el peso seco del exponencial tardo.. microorganismo contra la absorbancia de Conclusin. Es posible estimar el tiempo de suspensiones microbianas, para eliminar el cosecha de un microorganismo a base a la efecto de esta variable al utilizar la misma determinacin de su actividad respiratoria, ya concentracin de biomasa en los diferentes que por medio de este procedimiento experimentos realizados.. . podemos evaluar su actividad fisiolgica y El crecimiento se inici al descongelar la podemos asegurar que el microorganismo se cepa contenida en un vial sembrando en encontrar en el mejor estado fisiolgico agar TSA. Posteriormente se transfiri una para ser almacenado o utilizado para la asada del microorganismo a un matraz de construccin de biosensores microbianos. 100 ml de caldo TSB, incubndose a 27 C Agradecimientos. Se agradece el apoyo del con agitacin a 175 RPM hasta alcanzar una M. C. Luciano Castro y del Dr. Fernando absorbancia de 0.9 . Posteriormente se Lares por proporcionarnos su ayuda con los transfiri con una proporcin del 3% V/V a un materiales y equipos utilizados en esta matraz con 250 ml de TSB y se incub en las investigacin. mismas condiciones Despus de iniciado el Bibliografa. crecimiento se extrajo una pequea cantidad 1. Mulchandani , A., Rogers, K. Enzyme and de biomasa cada cuatro horas hasta la hora Microbial Biosensors. Techniques and 28. En cada caso la biomasa se centrifug y Protocols. Humana Press (1998): 203-207. se le realizaron tres lavados con buffer de 2. Riedel, K., Renneberg, R., Liebs, P., fosfatos para eliminar cualquier residuo de Biochemical Basis of a Kinetically Controlled nutrientes. Se diluy la biomasa a una Microbial Sensor. Bioelectrochemistry and absorbancia de 0.6, para filtrar 1 ml. a travs Bioenergetics. 19 (1988) 137-144. de una membrana estril de nitrato de