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Tuxtepec, Oaxaca
Fecha: 10/11/14
Medios de cultivo
D.- Medios selectivos. Son aquellos que favorecen por su diseo el crecimiento
especfico de un microorganismo particular (o grupo de microorganismos). Es de
gran utilidad para el aislamiento de microorganismos a partir de una poblacin
microbiana mixta. Ejemplo: CO2 como fuente de carbono es selectivo para
auttrofos; adicionando cristal violeta se inhibe el crecimiento de los Gram. (+);
utilizando maltosa como nica fuente de carbono slo crecern los que usen
maltosa.
Tambin, este medio de cultivo, puede utilizarse como medio base para preparar
el medio agar chocolate.
Fundamento
Frmula (en gramos por litro) Instruccin
Infusin de msculo de 375.5 Suspender 31 g de polvo por litro de agua
corazn. destilada. Mezclar y dejar reposar 5 minutos.
Peptona. 10.0 Calentar suavemente agitando y hervir 1 o 2
Cloruro de sodio. 5.0 minutos hasta su disolucin. Distribuir y
Agar 15.0 esterilizar a 121 C durante 15.
Fundamento
Cuando se suplementa con sangre de carnero al 5%, es til para realizar las
pruebas de sensibilidad a los antimicrobianos en especies de estreptococos.
E.M.B agar
Este medio es utilizado para el aislamiento selectivo de bacilos Gram negativos de
rpido desarrollo y escasas exigencias nutricionales. Permite el desarrollo de
todas las especies de la familia Enterobacteriaceae.
Fundamento
Este medio combina las frmulas de Holt-Harris y Teague con la de Levine, para
obtener un mejor rendimiento en el aislamiento selectivo de enterobacterias y
otras especies de bacilos Gram negativos.
Mientras que Acinetobacter spp. y otras bacterias oxidativas pueden dar colonias
de color azul lavanda. esto puede ocurrir aunque las cepas no sean capaces de
acidificar a partir de lactosa al 0.5% y ello se debe a la incorporacin de azul de
metileno a sus membranas. En este medio se obtiene adems, un buen desarrollo
de especies de Salmonella y Shigella.
Sal y manitol agar
Medio de cultivo selectivo y diferencial, utilizado para el aislamiento y
diferenciacin de estafilococos. Es recomendado para el aislamiento de
estafilococos patognicos a partir de muestras clnicas, alimentos, productos
cosmticos y otros materiales de importancia sanitaria.
Fundamento
Fundamento
Fundamento
BD Mueller Hinton Chocolate Agar (agar chocolate Mueller Hilton) se utiliza para
el aislamiento y cultivo de bacterias exigentes a partir de muestras clnicas.
Tambin se puede utilizar para las pruebas de sensibilidad de Neisseria
gonorrhoeae.
Fundamento
Fundamento
Fundamento
Esto produce un viraje del color del indicador de pH (rojo neutro), la absorcin en
las colonias, y la precipitacin de las sales biliares.
Pruebas bioqumicas
En el laboratorio disponemos de numerosas tcnicas para la caracterizacin
bioqumica de una especie.
Para realizar las pruebas bioqumicas se dispone de multiples medios, los cuales
se deben aplicar de acuerdo a las exigencias del microorganismo en estudio. De la
amplia variedad de pruebas bioqumicas, nosotros en laboratorio utilizaremos 10,
aplicados a 5 especies de microorganisos.
Pruebas bioqumicas
MIO medio
Medio usado para la identificacin de Enterobacteriaceae en base a su movilidad,
actividad de ornitina decarboxilasa y produccin de indol.
Fundamento
Medio de cultivo semislido, altamente nutritivo debido a la presencia de extracto
de levadura, peptona y triptena. Adems, la triptena aporta grandes cantidades
de triptofano, sustrato de la enzima triptofanasa, para la realizacin de la prueba
del indol. La dextrosa es el hidrato de carbono fermentable, la ornitina es el
sustrato para la deteccin de la enzima ornitina decarboxilasa, el prpura de
bromocresol es el indicador de pH, que en medio alcalino es de color prpura y en
medio cido es amarillo.
La reaccin positiva a la ornitina est dada por un color prpura del medio. Debido
a la fermentacin de la glucosa se reduce el pH produciendo una condicin cida y
originando que el indicador de pH prpura de bromocresol vire al amarillo. La
presencia de acidez, otorga condiciones ptimas para la actividad de la enzima
ornitina decarboxilasa, la cual decarboxila la ornitina presente.
Fundamento
TSI agar
Medio universalmente empleado para la diferenciacin de enterobacterias, en
base a la fermentacin de glucosa, lactosa, sacarosa y a la produccin de cido
sulfhdrico.
Por fermentacin de azcares, se producen cidos, que se detectan por medio del
indicador rojo de fenol,el cual vira al color amarillo en medio cido.
SIM medio
Es un medio semislido destinado a verificar la movilidad, produccin de indol y de
sulfuro de hidrgeno en un mismo tubo. Es til para diferenciar miembros de la
familia Enterobacteriaceae.
Fundamento
Las cepas mviles pueden apreciarse en este medio, por la turbidez que producen
alrededor de la puncin de siembra, mientras que aquellas cepas productoras de
sulfhdrico se distinguen por la formacin de un precipitado negro de sulfuro de
hierro a partir del tiosulfato siempre que el medio se mantenga a un pH mayor a
7.2.
MIN medio
Para identificacin bioqumica de microorganismos en base a la reduccin del
nitrato y formacin de indol.
Fundamento
Sembrar el microrganismo de prueba por picadura sin llegar al fondo del tubo.
Incubar 18 24 h a 35 2C. Para microorganismos anaerobios incubar en las
condiciones adecuadas para su desarrollo.
MR-VP Medio
Medio utilizado para la realizacin del ensayo de Rojo de Metilo y Voges
Proskauer.
Es particularmente til para la clasificacin de enterobacterias.
Fundamento
En el medio de cultivo, la pluripeptona aporta los nutrientes necesarios para el
desarrollo bacteriano y la glucosa es el hidrato de carbono fermentable.
Fundamento
Este medio de cultivo, formulado por Rustigian y Stuart, presenta bajo contenido
de nutrientes y alta capacidad buffer.
Fundamento
En el medio de cultivo, el extracto de levadura aporta los nutrientes necesarios
para el adecuado desarrollo bacteriano.