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DILUCIN DE SOLUCIONES

CURSO : ANALISIS INSTRUMENTAL

DOCENTE : ING.JULIO ASTO LIAN.

ALUMONO : ROBLES NINACO, Shirley Thalia

SEMESTRE : VI SEMESTRE

INTRODUCCIN
La espectrofotometra es el mtodo de anlisis ptico ms usado en
las investigaciones biolgicas. El espectrofotmetro es un instrumento
que permite comparar la radiacin absorbida o transmitida por una
solucin que contiene una cantidad desconocida de soluto, y una que
contiene una cantidad conocida de la misma sustancia. Todas las
sustancias pueden absorber energa radiante, aun el vidrio que
parece ser completamente transparente absorbe longitud de ondas
que pertenecen al espectro visible; el agua absorbe fuertemente en la
regin del infrarrojo. La absorcin de las radiaciones ultravioleta,
visibles e infrarrojas depende de la estructura de las molculas, y es
caracterstica para cada sustancia qumica.
Cuando la luz atraviesa una sustancia, parte de la energa es
absorbida; la energa radiante no puede producir ningn efecto sin ser
absorbida. El color de las sustancias se debe a que stas absorben
ciertas longitudes de onda de la luz blanca que incide sobre ellas y
solo dejan pasar a nuestros ojos aquellas longitudes de onda no
absorbida. La espectrofotometra de absorcin en las regiones
ultravioleta y visible del espectro electromagntico es, posiblemente,
la ms utilizada en la prctica del anlisis cuantitativo de todas las
tcnicas espectroscpicas. Asimismo, puede resultar de utilidad como
tcnica auxiliar para la determinacin de estructuras de especies
qumicas. Se basa en la absorcin de radiacin ultravioleta y visible
2 analto, como consecuencia de lo cual se origina un estado
por el
activado que posteriormente elimina su exceso de energa en forma
de calor, en un proceso que esquemticamente puede representarse
as:
X + h > X* > X + calor

MARCO TERICO
Espectrofotometra ultravioleta visible. Ley de Lambert-
Beer.
Los mtodos espectroscpicos de anlisis estn basados en la medida
de la radiacin electromagntica que es absorbida o emitida por una
sustancia. En funcin de ello se clasifican fundamentalmente en:

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Mtodos de absorcin: Se basan en la disminucin de la potencia
de un haz de radiacin electromagntica al interaccionar con una
sustancia.

Mtodos de emisin: Se basan en la radiacin que emite una


sustancia cuando es excitada previamente por medio de otro tipo de
energa (trmica, elctrica).
Mtodos de fluorescencia: Se basan en la radiacin que emite la
sustancia cuando es excitada previamente por un haz de radiacin
electromagntica.

Otras clasificaciones de los mtodos espectroscpicos se establecen


en funcin de la regin del espectro electromagntico que interviene
en la tcnica. As, pueden utilizarse regiones como rayos X,
ultravioleta, visible, infrarrojo, microondas, etc. En la Figura pueden
verse las regiones del espectro electromagntico, en funcin de los
valores de la longitud de onda () de cada radiacin:
En esta figura puede tambin observarse como la luz visible para el
ojo humano constituye nicamente una pequea parte del espectro
electromagntico.

Dado que los primeros mtodos espectroscpicos desarrollados


corresponden a la regin del visible recibieron la denominacin de
mtodos pticos, la cual se utiliza todava con frecuencia. A
continuacin, se ofrece una breve informacin sobre la ley de
Lambert-Beer y la espectrofotometra de absorcin en la regin visible
del espectro.
Si se considera que se dispone de una fuente de radiacin que hace
llegar a la muestra un haz de radiacin, de longitud de onda
previamente seleccionada, cuya potencia es P0, la muestra de
espesor b absorbe una parte de esa radiacin incidente, de forma que
la potencia del haz disminuye despus de atravesar la muestra siendo
su nueva potencia P. El cociente entre la potencia de la radiacin que
sale de la muestra y la de la que incidi sobre ella, se define como
transmitancia:

T=P/P0.

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La transmitancia tambin puede expresarse en tanto por ciento,
multiplicando el cociente anterior por 100. Es ms frecuente utilizar el
concepto de absorbancia, o densidad ptica, que se define como el
logaritmo de la transmitancia cambiado de signo:

A = log (P0/P) = - log T

De acuerdo con estas expresiones, si la muestra no absorbe


radiacin, P y P0 coinciden, por lo tanto A=0, y se transmite toda la
radiacin T=1 (100% de transmitancia). Si, en otro caso, se transmite
solo un 1% de radiacin (T=0.01), P=P0/100, la absorcin de

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radiacin que ha tenido lugar corresponde a A=2. Al incidir radiacin
electromagntica visible sobre la materia puede ser totalmente
absorbida o totalmente reflejada. En el primer caso el objeto
aparecer de color negro y en el segundo de color blanco. Puesto que
nosotros percibimos los objetos por medio de la luz reflejada, si
hacemos incidir un haz de luz blanca (que contiene todas las
longitudes de onda) sobre un objeto, ste absorber ciertas
longitudes de onda y reflejar otras, siendo stas ltimas las
responsables del color. Se dice que este color (observado) es
complementario del que se percibira si la luz absorbida se pudiera
detectar. Dado que en la parte experimental de esta prctica las
medidas van a realizarse con espectrofotometra visible, es
conveniente conocer para qu longitud de onda tiene cada color su
mxima absorcin, lo que se muestra en la tabla siguiente:

Para medir los valores de absorbancia y transmitancia de una


disolucin se utilizan espectrofotmetros UV-Vis, que, como puede
verse en la Figura, se componen de cinco elementos principales:

Una fuente de radiacin que suele ser una lmpara de


filamento de wolframio.

Un monocromador que permite seleccionar una longitud de


onda determinada originando un haz monocromtico.

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Un recipiente para contener la muestra denominado cubeta
fabricado con un material que permite el paso de la radiacin
en la regin del espectro de inters. Suelen ser de vidrio,
plstico o cuarzo. El espesor de la cubeta ms habitual es 1 cm.

Un detector que convierte la energa radiante en una seal


elctrica.

Una pantalla de visualizacin

La absorbancia est relacionada con la concentracin de la sustancia,

c, por la ley de Lambert-Beer, que se resume con la ecuacin: A = e b


c donde c se expresa en mol/L, b es la longitud del camino ptico
(anchura de la clula que contiene la disolucin de la sustancia) y se
expresa en cm, y e es la absortividad molar, propiedad caracterstica
de cada sustancia correspondiente a la cantidad de radiacin que
absorbe a una longitud de onda determinada por unidad de
concentracin, siendo sus unidades L mol-1 cm-1 (la absorbancia no
tiene unidades).

Para poder aplicar la ley de Lambert-Beer es necesario seleccionar


previamente una longitud de onda puesto que tanto A como e varan
con ella. Para ello se obtiene previamente el espectro de absorcin de
la sustancia, que consiste en una representacin de los valores de
absorbancia frente a la longitud de onda expresada en nanometros
(nm). Del espectro de absorcin puede seleccionarse el valor de
longitud de onda para el cual la absorbancia es mxima. La Figura
muestra dos ejemplos de espectro de absorcin.

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Si bien la ley de Lambert-Beer indica que a una representacin
grfica de la absorbancia frente a la concentracin le correspondera
una lnea recta, esto slo tiene lugar para disoluciones diluidas, por
ello, no es conveniente utilizar la expresin matemtica directamente,
sino construir en cada caso la recta de calibrado que confirme que la
ecuacin de Lambert-Beer se cumple en el intervalo de
concentraciones en el que se trabaja. Esta recta se construye
midiendo la absorbancia de una serie de disoluciones de
concentracin perfectamente conocida.
En la prctica que realizaremos a continuacin se determinar la
concentracin de cobre presente en una determinada muestra por
espectrofotometra. Para ello se formar previamente el complejo con
amoniaco,
6 es decir, Cu(NH3)4+2. Por otro lado, se medir la
absorbancia de una serie de disoluciones cuya concentracin de
Cu(NH3)4+2 es perfectamente conocida, representndose el valor de
absorbancia obtenida frente a la concentracin (recta de calibrado).
Por ltimo, a partir del valor de absorbancia medido para la disolucin
problema y utilizando la recta de calibrado se determinar la cantidad
de cobre presente en la muestra problema.
El compuesto formado Cu (NH3)4+2 presenta color azul. Como ya se
ha mencionado anteriormente para que una sustancia sea coloreada
debe absorber luz visible, provocndose como consecuencia trnsitos
electrnicos. En el caso del complejo amoniacal de cobre, la presencia
de los ligandos (NH3) alrededor del ion Cu+2 provoca que los orbitales
3d del Cu+2 se diferencien energticamente, posibilitando la absorcin
de un fotn de energa adecuada que provoca un trnsito electrnico,
como puede verse en la figura.

OBJETIVOS
Adquirir los conocimientos bsicos sobre espectrofotometra de
absorcin visible, incluyendo la Ley de Lambert-Beer y sus
aplicaciones en Qumica.
Para ello se realizar un experimento en el laboratorio que muestre
cmo utilizar un espectrofotmetro para llevar a cabo la
determinacin cuantitativa de un compuesto.

Conocer y aplicar los fundamentos de la espectrofotometra.

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Comprender las relaciones entre el espectro visible de un complejo
de coordinacin y el enlace metal-ligando.

Aplicar y comprender la Ley de Beer-Lambert.

MATERIALES Y REACTIVOS
1 Espectrofotmetro.
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1 Cubeta

Sulfato de Cobre (Cu) al 0,1000 M, Amoniaco (dispensador)

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Piseta, probeta, vaso de presipitacion.

PROCEDIMIENTO
En el manejo del espectrofotmetro han de observarse una serie de
precauciones:

Coger 50 mL de una disolucin patrn 0.1000 M de sulfato de


cobre.
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nsoluc CP. Ve ml Ve= l agua aadida


ion ppm (100- Ve)
1 1.5 0.5 5000 50
3 2.5 0.15 15000 150
5 3.5 0.25 250 250

A partir de la disolucin anterior y de una disolucin de amoniaco


preparar varias disoluciones del complejo Cu(NH3)42+ de
concentracin conocida. En concreto, estas disoluciones se
prepararn mezclando 5.0
mL de amoniaco con 1.0, 2.5, 3.5, 5.0, 6.0, 7.5, y 10.0 mL
respectivamente de la disolucin patrn de sulfato de cobre y
enrasando en un matraz aforado de 50 mL con agua destilada. Las
disoluciones se guardarn en frascos de polipropileno y se
etiquetarn hasta el momento de medir la absorbancia.

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Elegir la longitud de onda a la cual se realizar posteriormente la
medida de la absorbancia. Esa longitud de onda es la correspondiente
al mximo de absorcin, pues es ah donde la sensibilidad es mxima.
Adems, las medidas de absorbancia en esa zona implican un menor
error frente a pequeas variaciones en la longitud de onda que las
realizadas en cualquier otra zona de la banda de absorcin. Para
elegir la longitud de onda de medida se ha obtenido el espectro de
absorbancia de una de las disoluciones preparadas anteriormente.
Medir la absorbancia de cada una de las disoluciones preparadas.

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Representar la recta de calibrado.

Absorvancia
1

0.8

10
0.6

0.4

0.2

0
350 400 450 500 550 600 650 700 750 800 850

-0.2

-0.4

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/nm Absorvanc
ia
400 0.452
420 0.855
460 0.549
480 0.31
500 0.125
520 -0.018
540 -0.147
560 -0.251
580 0.03
600 0.349
620 -0.18
640 -0.127
660 -0.004
680 0.065
700 0.113
720 0.475
740 0.378
760 0.281
11 780 0.21
800 0.131

CONCLUSIONES
Aprendimos el correcto uso del espectrofotmetro.

Conocimos los procedimientos para la mxima absorbancia.


No debemos llenar la celda hasta el borde sino un poco menos,
esto para evitar que se derrame cuando lo colocamos en el equipo.
No debemos tocar la cubeta por el lado transparente sino por el
lado opaco.
No dejar huellas en las paredes de la cubeta espectrofotomtrica.
Enjuagar cuidadosamente la cubeta espectrofotomtrica con la
disolucin que va a ser medida, antes de llenarla definitivamente.
Realizar las medidas empezando por la disolucin ms diluida y
acabando por la ms concentrada.

BIBLIOGRAFIA
http://www.laboratoryinhouse.com.ing

http://www.unt.htm

ROBLES NINACO, Shirley Thalia


http://www.wikipedia com/vhys/.htm

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