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SEMESTRE : VI SEMESTRE
INTRODUCCIN
La espectrofotometra es el mtodo de anlisis ptico ms usado en
las investigaciones biolgicas. El espectrofotmetro es un instrumento
que permite comparar la radiacin absorbida o transmitida por una
solucin que contiene una cantidad desconocida de soluto, y una que
contiene una cantidad conocida de la misma sustancia. Todas las
sustancias pueden absorber energa radiante, aun el vidrio que
parece ser completamente transparente absorbe longitud de ondas
que pertenecen al espectro visible; el agua absorbe fuertemente en la
regin del infrarrojo. La absorcin de las radiaciones ultravioleta,
visibles e infrarrojas depende de la estructura de las molculas, y es
caracterstica para cada sustancia qumica.
Cuando la luz atraviesa una sustancia, parte de la energa es
absorbida; la energa radiante no puede producir ningn efecto sin ser
absorbida. El color de las sustancias se debe a que stas absorben
ciertas longitudes de onda de la luz blanca que incide sobre ellas y
solo dejan pasar a nuestros ojos aquellas longitudes de onda no
absorbida. La espectrofotometra de absorcin en las regiones
ultravioleta y visible del espectro electromagntico es, posiblemente,
la ms utilizada en la prctica del anlisis cuantitativo de todas las
tcnicas espectroscpicas. Asimismo, puede resultar de utilidad como
tcnica auxiliar para la determinacin de estructuras de especies
qumicas. Se basa en la absorcin de radiacin ultravioleta y visible
2 analto, como consecuencia de lo cual se origina un estado
por el
activado que posteriormente elimina su exceso de energa en forma
de calor, en un proceso que esquemticamente puede representarse
as:
X + h > X* > X + calor
MARCO TERICO
Espectrofotometra ultravioleta visible. Ley de Lambert-
Beer.
Los mtodos espectroscpicos de anlisis estn basados en la medida
de la radiacin electromagntica que es absorbida o emitida por una
sustancia. En funcin de ello se clasifican fundamentalmente en:
T=P/P0.
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radiacin que ha tenido lugar corresponde a A=2. Al incidir radiacin
electromagntica visible sobre la materia puede ser totalmente
absorbida o totalmente reflejada. En el primer caso el objeto
aparecer de color negro y en el segundo de color blanco. Puesto que
nosotros percibimos los objetos por medio de la luz reflejada, si
hacemos incidir un haz de luz blanca (que contiene todas las
longitudes de onda) sobre un objeto, ste absorber ciertas
longitudes de onda y reflejar otras, siendo stas ltimas las
responsables del color. Se dice que este color (observado) es
complementario del que se percibira si la luz absorbida se pudiera
detectar. Dado que en la parte experimental de esta prctica las
medidas van a realizarse con espectrofotometra visible, es
conveniente conocer para qu longitud de onda tiene cada color su
mxima absorcin, lo que se muestra en la tabla siguiente:
OBJETIVOS
Adquirir los conocimientos bsicos sobre espectrofotometra de
absorcin visible, incluyendo la Ley de Lambert-Beer y sus
aplicaciones en Qumica.
Para ello se realizar un experimento en el laboratorio que muestre
cmo utilizar un espectrofotmetro para llevar a cabo la
determinacin cuantitativa de un compuesto.
MATERIALES Y REACTIVOS
1 Espectrofotmetro.
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1 Cubeta
PROCEDIMIENTO
En el manejo del espectrofotmetro han de observarse una serie de
precauciones:
Absorvancia
1
0.8
10
0.6
0.4
0.2
0
350 400 450 500 550 600 650 700 750 800 850
-0.2
-0.4
CONCLUSIONES
Aprendimos el correcto uso del espectrofotmetro.
BIBLIOGRAFIA
http://www.laboratoryinhouse.com.ing
http://www.unt.htm
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