Professional Documents
Culture Documents
Autor:
-BENITES OTINIANO FTIMA SOLANSH.
Docente:
-Carlos David Vilela Desposorio.
Ciclo:
V ciclo.
Trujillo Per
2017.
PROCEDIMIENTO DE EXTRACCIN DE SANGRE VENOSA
APLICANDO COLORACIN WRIGHT PARA REALIZACIN Y
ANLISIS DEL RECUENTO LEUCOCITARIO APLICADO COMO
MTODO DE AYUDA DIAGNSTICA DE ANEMIA Y
ALTERACIONES LEUCOCTICAS ORIENTADO AL APRENDIZAJE DE
ALUMNOS DE MEDICINA
INTRODUCCIN
Actualmente los exmenes de laboratorio complementarios han recibido
una amplia acogida por el personal mdico, ya que generan resultados que
llevan a un mayor acercamiento al diagnstico posible, adems de que
arrojan datos exactos, sean cualitativos o cuantitativos y poseen mayor
especificidad y sensibilidad si los comparamos con la evaluacin clnica.
Por lo tanto, es imprescindible en nosotros como parte de la formacin de
pregrado en medicina el estudio, comprensin y anlisis de estos mtodos
de laboratorio y sus correctos procedimientos.
Especficamente, en este informe prctico abarcamos los mtodos de la
extraccin de sangre, la coloracin Wright y el recuento leucocitario,
analizando en este ltimo de manera principal el reconocimiento de los
distintos tipos de leucocitos en cuanto a morfologa y las alteraciones en el
mismo.
La extraccin de sangre tanto venosa como arterial, tiene un mismo
objetivo, que es obtener una muestra para su posterior estudio en el
diagnstico de un paciente 1. El procedimiento es sencillo y prcticamente
consiste en seleccin del sitio de puncin, ligadura, desinfeccin del rea de
puncin, puncin y extraccin, soltura de ligadura y retiro de aguja y
etiquetamiento de muestras.
Esta muestra de sangre venosa perifrica obtenida tiene abundantes usos,
entre los cuales resalta uno de los ms principales y bsicos, el hemograma,
el cual es un examen relativamente simple y en algunas situaciones nos
ayuda en la evaluacin diagnstica. Este mide en forma global y en
porcentajes los tres tipos bsicos de clulas que contiene la sangre, las
denominadas tres series celulares sanguneas: Serie eritrocitaria o serie
roja, serie leucocitaria o serie blanca, serie plaquetaria. Tambin entrega
datos sobre hematocrito (Hto), concentracin de la hemoglobina (Hb),
concentracin de hemoglobina corpuscular media (CHCM), volumen
corpuscular medio (VCM) 2 .
Los valores normales en cuanto a : Hemoglobina (g/dl) en varones 13,0
18,0 g/dL y en mujeres 12,0 15,0 g/dL, hematocrito (%) en varones 39
49 y en mujeres <33 43 , nmero de glbulos rojos(10^6/mm3 =
10^12/L) en varones 4.3 -5.9 million/L y en mujeres 3.5 - 5.0 million/L,
VCM en varnes y mujeres 80 99 ft, Concentracin de hemoglobina
corpuscular media en ambos gneros de 33 - 36 g/dL 3.
Como agregado encontramos el recuento de reticulocitos mide la
produccin de eritrocitos, lo que es importante en la evaluacin de una
anemia. Este se afecta por la vida media de los reticulocitos y la intensidad
de la anemia por lo que se usa el ndice reticulocitario que corrige los
valores segn la intensidad de la anemia.
Los leucocitos constituyen una poblacin celular heterognea, sus
caractersticas morfolgicas y funcionales permiten su diferenciacin y es en
base a estas caractersticas que los autoanalizadores de ltima generacin
son capaces de realizar recuentos de algunas poblaciones leucocitarias
semejantes a los obtenidos por la lectura del frotis al microscopio. Al igual
que nosotros podemos reconocerlos y diferenciarlos por observacin en el
microscopio. Y poseen un recuento de 5000 10 000/mm3 4.
Consideramos leucocitosis al nmero de leucocitos mayor al nivel normal
para su edad, en general >15 000xmm3. En cuanto a la leucopenia la
consideramos como una disminucin del conteo total de leucocitos con
niveles < de 4 500xmm3. A su vez, hablamos de una reaccin leucemoide
cuando encontramos niveles de leucocitos > o iguales de 50 000xmm3 con
aparicin de clulas inmaduras con capacidad de mitosis.
Como se mencion anteriormente, los leucocitos son una poblacin
heterognea por lo que cada tipo posee caractersticas y sobre todo valores
de recuentos diferentes que tambin nos simbolizan alteraciones
hematolgicas con nombre propio.
En primer lugar, los neutrfilos poseen valores 1500 7500/mm3. Y se
considera neutrofilia cuando son >7500, y neutropenia que puede ser leve:
1,500-1,000, moderada: 500-1,000, severa: <500 (Agranulocitosis) y
muy Severa: < 100.
Respecto a los linfocitos tienen un valor de Referencia de 1500-4000/mm3
(adultos y debemos considerar que el conteo vara con la edad). Hablamos
de linfocitosis:>4000 (Adultos) y >7,000 (Lactantes) y de linfopenia:
pudiendo ser Leve: 1400-1000, moderada: 500-1000 y severa: <500.
En tercer lugar, encontramos a los monocitos que poseen valor de
referencia de 100 -800/mm3, consideramos monocitosis cuando se presentan
> 800/mm3. Estos estn encargados de la presentacin de Antgenos,
produccin de citoquinas y la fagocitosis
Los eosinfilos por su parte presentan recuentos de 50 500/mm3. Estos
presentan Ncleos Bilobulados con grnulos rojo-naranja en citoplasma y
accin antiparasitaria y participant de la modulacin de la actividad de
hipersensibilidad y alergias.
Por ultimo los basfilos tiene valores de referencia de 25 120/mm 3. Dentro
de sus caractersticas encontramos que tienen un ncleo bilobulado con
grandes grnulos negros, respuesta inflamatoria e hipersensibilidad/alergia.
Por otro lado, la tincin de Wright es una tincin de tipo Romanowsky, que
consiste en azul de metileno y sus productos de oxidacin, as como eosina
Y o eosina B. La accin combinada de estos colorantes produce el efecto
Romanowsky que da una coloracin prpura a los ncleos de los leucocitos
y a los grnulos neutroflicos y da color rosado a los eritrocitos. Los
componentes de este efecto son el azul B y la eosina Y.
Las propiedades de tincin de Romanowsky dependen del enlace de los
colorantes a las estructuras qumicas y de las interacciones del azul B y la
eosina Y. Los agrupamientos de cidos nucleicos, las protenas de los
ncleos celulares y el citoplasma inmaduro reactivo, fijan el azul B,
colorante bsico. La tincin de Wright cuyo colorante est compuesto de
azul de metileno (que tie de color azul las partes cidas de las clulas) y
eosina (que tie las partes alcalinas) disueltos en metanol (que permite la
fijacin de las clulas), adicionando a la preparacin buffer de fosfatos (que
rehidrata a las clulas despus de la exposicin con metanol) 5.
La eosina Y, colorante cido, se fija a los agrupamientos bsicos de las
molculas de hemoglobina y a las protenas bsicas.
Concluyendo, despus de conocer los procedimientos necesarios para hallar
todos estos valores, analizaremos las diversas alteraciones tanto en los
eritrocitos como en los leucocitos.
OBJETIVOS
Extraccin de sangre:
-Marcador indeleble
Utilizado para rotular el tubo de ensayo con el nombre de quien se
est realizando la extraccin.
-Alcohol etlico al 70 %.
Lquido incoloro, libre de sedimento de partculas en suspensin y
de material extrao. Antisptico por lo que es til en la
desinfeccin de la piel.
-Ligadura/brazalete.
Banda elstica utilizada en la extraccin de sangre venosa (regin
cubital del brazo). Funciona deteniendo el flujo sanguneo para
resaltar las venas y facilitar la localizacin de la vena a la cual se
le extraer la sangre.
-Jeringa y aguja.
Instrumento cilndrico, generalmente de plstico, que lleva
en su interior un mbolo que succiona o impele lquidos,
termina en punta en cnula, donde se incluye una aguja
hueca que penetra en la zona del cuerpo, en la que se
quiere introducir o extraer un lquido.
-Gradilla.
Rejilla metlica con compartimentos para mantener
protegidos a tubos de ensayo y las muestras.
Coloracin Wright.
-Lmina portaobjetos.
Lmina de vidrio rectangular de color transparente utilizada
para almacenar muestras y objetos con el fin de observarlas
bajo el microscopio.
-Lpiz.
Idneo y necesario para rotular la lmina con el nombre de
quin fue tomada la muestra sangunea.
-Puente de tincin.
Utilizado para sostener, prevenir de cada y quiebre de la
lmina y ms fcil aplicacin de tinciones.
-Colorante Wright.
Tincin de tipo Romanowsky, que consiste en azul de metileno,
eosina Y o B, estos dan una coloracin prpura a los ncleos de
los leucocitos y a los grnulos neutroflicos y da color rosado a los
eritrocitos.
-Cronmetro.
Es usado para determinar el tiempo exacto en cada reaccin y
obtener resultados ptimos.
-Agua destilada.
Empleada para quitar exceso de colorante luego de haber
surgido efecto y teido la lmina y las estructuras microscpicas.
-Microscopio.
Instrumento cientfico que posibilita la observacin de
estructuras microscpicas no visibles al ojo humano a
simple vista.
Recuento leucocitario:
-Aceite de inmersin.
Aumenta el poder de resolucin de un microscopio, mediante la
immersin en este aceite transparente de alto ndice refractivo
tanto de la lente del objetivo como del espcimen a observar,
aumentando as la apertura numrica de la lente del objetivo. Y
generalmente se usa con un aumento de 100X.
-Microscopio.
Instrumento cientfico que posibilita la observacin de
estructuras microscpicas no visibles al ojo humano a
simple vista.
MTODOS
Extraccin de sangre:
12. Introduccin
de aguja de jeringa en la vena elegida con el bisel hacia arriba, en un
ngulo de 10 si la vena es visible y en un ngulo de 15-30 si la vena
no es muy visible.
13.
Tincin Wright:
5. Retiramiento de 2 portaobjetos.
6. Esperar secamiento del extendido por 1
minuto.
7. Activar cronmetro
para calcular 1
minuto.
8. Rotular con lpiz el nombre de quien se obtuvo la muestra en el
cuerpo del frotis sanguneo.
9. Colocamiento de frotis sanguneo en puente de tincin.
10.Verter mediante una pipeta desechable 3 gotas de colorante Wright.
13.Calcular 5 minutos en el
cronmetro y esperar.
14.Lavar con agua a chorro mnimo el frotis.
15.Dejar secar el frotis sanguneo teido.
16.Posicionamiento de frotis en microscopio y enfocar.
Recuento leucocitario:
leucocitos.
RESULTADOS
Extraccin de sangre
y
tincin Wright.
Observacin N 01.
Frotis
Interpretacin: Despus de la
toma de muestra de sangre venosa,
obtuvimos un frotis el cual luego
coloreamos, y es asi como se ve en
el microscopio con un bajo aumento
y de manera general, solo para
verificar que hicimos una buena
coloracin Wright, y aqu
podemos observar mucho
eritrocitos.
Recuento Leucocitario.
Observacin: Eritrocitos y 1
basfilo
Muestra:
Sangre
venosa
perifrica.
Aumento:
100 x.
Coloracin:
Tincin
Wright.
Interpretacin: Lo podeos definir
por sus abundantes grnulos, no
se nota el citoplasma.
Observacin:Eritrocitos y 1
eosinfilo
Muestra:
Sangre
venosa
perifrica.
Aumento:
100 x.
Coloracin:
Tincin
Wright.
Interpretacin: Vemos 1 eosinfilo, porque apreciamos sus dos lbulos y sus
grnulos rojizos o anaranjados.
Observacin: Eritrocitos y 1
neutrfilo abastonado
Muestra:
Sangre
venosa
perifrica.
Aumento:
100 x.
Coloracin:
Tincin
Wright.
Interpretacin: Observamos claramente la forma del ncleo en bastn y no se nota
presencia de mas lbulos.
Leucocitos # %
Abastonados 13 13%
Segmentados 30 30%
Eosinfilos 8 8%
Basfilos 5 5%
Monocitos 12 12%
Linfocitos 32 32%
Descripcin: Segn el recuento leucocitario podemos ver una neutropenia, por que
los PMN estn por debajo de los valores normales, los abastonados estn por encima
del rango, eosinfilos por encima de 5%, monocitos por encima del 8%, Linfocitos en
el rango normal. POSIBLE MAL RECUENTO LEUCOCITARIO
Leucocitos # %
Abastonados 14 14%
Segmentados 2 2%
Eosinfilos 0 0%
Basfilos 1 1%
Monocitos 0 0%
Linfocitos 70 70%
Leucocitos # %
Abastonados 7 7%
Segmentados 39 39%
Eosinfilos 7 7%
Basfilos 2 2%
Monocitos 3 3%
Linfocitos 42 42%
Leucocitos # %
Abastonados 12 12%
Segmentados 30 30%
Eosinfilos 11 11%
Basfilos 0 0%
Monocitos 14 14%
Linfocitos 33 33%
Leucocitos # %
Abastonados 8 8%
Segmentados 44 44%
Eosinfilos 5 5%
Basfilos 2 2%
Monocitos 6 6%
Linfocitos 35 35%
Leucocitos # %
Abastonados 12 12%
Segmentados 49 49%
Eosinfilos 8 8%
Basfilos 0 0%
Monocitos 6 6%
Linfocitos 25 25%
Leucocitos # %
Abastonados 4 4%
Segmentados 50 50%
Eosinfilos 3 3%
Basfilos 2 2%
Monocitos 13 13%
Linfocitos 28 28%
Descripcion: Abastonados dentro del rango normal, neutropenia, eosinfilo dentro del
rango normal, basfilia, monocitosis, linfopenia.
Tabla N11: Recuento leucocitario Alumno: Peter.
Leucocitos # %
Abastonados 6 6%
Segmentados 64 64%
Eosinfilos 5 5%
Basfilos 0 0%
Monocitos 0 0%
Linfocitos 25 25%