UNIVERSIDAD PRIVADA SAN JUAN BAUTISTA

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

ESCUELA PROFESIONAL DE MEDICINA HUMANA

CURSO: BIOQUMICA Y NUTRICION

PRACTICA N 11

MASA PROTEICA VISCERAL Y ESQUELTICA

Para evaluar el estado nutricional de una persona utilizamos el metabolismo

proteico (sntesis y degradacin).
Las protenas en el organismo se distribuyen didcticamente en dos
compartimientos:
a) Compartimiento Proteico Visceral.
b) Compartimiento Proteico Somtico esqueltico.

Las protenas del compartimiento visceral se evalan mediante los niveles de

Transferrina, Pre-albmina, Protenas totales y Albmina en suero, que por su
relativamente corto tiempo de vida (albmina es de 20 das) rinde una estimacin
razonable del compartimiento proteico visceral. En esta prctica utilizaremos la
Protena Total y la Albmina srica.

Las protenas del compartimiento somtico esqueltico la evaluaremos mediante

la relacin entre la excrecin de la Creatinina urinaria en 24 horas y la talla de la
persona, relacin que es un fiel ndice de la masa muscular esqueltica.
As mismo mediante el Peso y la Talla se evaluar la masa corporal total.
 Experimento A: DETERMINACIN DE PROTEINAS TOTALES Y
ALBMINA EN SUERO

FUNDAMENTOS DEL METODO:

Determinacin de Protenas Totales:

Los enlaces peptdicos de las protenas reaccionan con el in cprico, en medio alcalino,
para dar un complejo color violeta con mximo de absorcin a 540 nm, cuya intensidad
es proporcional a la concentracin de protenas totales en la muestra.
Determinacin de Albmina:
La albmina reacciona especficamente (sin separacin previa) con la forma aninica de la
Bromo Cresolsulfon Ftalenas (BCF), en presencia de un exceso de colorante, en medio
tamponado a pH 3,8. El aumento de absorbancia a 625 nm respecto al blanco de
reactivo, es proporcional a la cantidad de albmina presente en la muestra.

REACTIVOS:

Reactivo EDTA/Cu: complejo EDTA/Cu 13 mmol/l en NaOH 875 mmol/l y alquil aril poli
ter (AAP).
Reactivo BCF: solucin de Bromo Cresolsulfon Ftalenas (en polioxietiln lauril ter).
Suero Patrn: solucin de albmina y globulinas en estado nativo con ttulo conocido de
protenas (Biuret Kjeldhal) y albmina (unin BCF).

MATERIAL REQUERIDO:
Espectrofotmetro.
Micro pipetas y pipetas capaces de medir los volmenes indicados.
Tubos de ensayo.
Bao Mara a 37C.
Reloj timer.

PROCEDIMIENTO PARA LA DETERMINACIN DE PROTEINAS TOTALES:

En tres tubos colocar:

Blanco Standard Muestra

Agua destilada 50 uL --- ---
Suero Patrn --- 50 uL ---
Muestra --- --- 50 uL
Reactivo EDTA/Cu 3,5 ml 3,5 ml 3,5 ml

Mezclar los tubos.

Incubar durante 15 minutos en Bao Mara a 37C.
Leer en espectrofotmetro a 540 nm.
PROCEDIMIENTO PARA LA DETERMINACIN DE ALBMINA:
En tres tubos colocar:

Blanco Standard Muestra

Suero Patrn --- 10 uL ---
Muestra --- --- 10 uL
Reactivo BCF 3,5 ml 3,5 ml 3,5 ml

Mezclar los tubos.

Mantenerlos a temperatura ambiente durante 10 minutos.
Leer en espectrofotmetro a 625 nm.

CALCULO DE LOS RESULTADOS:

Protenas totales (g/dl) = M x fc fc = P.T. (g/dl) / S

Albmina (g/dl) = M x fc fc = Alb. (g/dl) / S

Albmina (g/dl)
Relacin A/G = ---------------------------------------
Prot. Tot. (g/dl) - Alb. (g/dl)

VALORES DE REFERENCIA:

PROTENAS TOTALES: 6,1 a 7,9 g/dl.

ALBMINA: 3,5 a 4,8 g/dl.
RELACION A/G: 1,2 a 2,2
 Experimento B: DETERMINACIN DE CREATININA URINARIA

FUNDAMENTOS DEL METODO:

La Creatinina reacciona con el picrato alcalino en medio tamponado, previa
desproteinizacin con cido pcrico, obtenindose un cromgeno que se mide a 510 nm.

REACTIVOS:
Reactivo 1: cido pcrico 41,4 mmol/l.
Reactivo 2: buffer glicina/NaOH 1 mol/l, pH final 12,4.
Standard: solucin de Creatinina 2 mg%

MATERIAL REQUERIDO:
Espectrofotmetro.
Tubos de ensayo.
Micro pipetas y pipetas capaces de medir los volmenes indicados.
Reloj timer.

PROCEDIMIENTO:
Recolectar orina de 24 horas.
Medir la diuresis, tomar una alcuota y efectuar una dilucin 1:50 de la misma.
Luego en tres tubos de ensayo preparar lo siguiente:

Blanco Standard Muestra

Standard --- 0,5 ml ---
Orina diluida (1:50) --- --- 0,5 ml
Agua 1 ml 0,5 ml 0,5 ml
Reactivo 1 2 ml 2 ml 2 ml
Reactivo 2 0,5 ml 0,5 ml 0,5 ml

Mezclar por inversin.

Incubar 20 minutos a temperatura ambiente.
Leer en espectrofotmetro a 510 nm.

CALCULO DE LOS RESULTADOS:

M
Creatinina en orina (mg/24 horas) = ------ x 20 mg/l x 50 x V
S

Siendo:
V = volumen de la diuresis expresado en litros/24 horas.
M = Absorbancia neta del tubo muestra.
S = Absorbancia neta del tubo standard.
VALORES DE REFERENCIA:
900 a 1,500 mg/24 horas.

VALORACIN DEL ESTADO NUTRICIONAL

PROMEDIO DESNUTRICIN
POBLACIONAL
Relacin Cr U 24h / Talla Hombres: 830 Hombres: < 660
(mg 24h/m) Mujeres: 680 Mujeres: < 430
Relacin Peso / Talla Hombres: 37 Hombres: < 30
(Kg/m) Mujeres: 34 Mujeres: < 29
Protenas totales (g/dl) 7 <6
Albmina (g/dl) 4 < 3,5

CUESTIONARIO:

1.- Con los datos obtenidos en los experimentos, realizar la valoracin nutricional de
dicha persona sabiendo que es varn, pesa 60 Kg, su talla es 1,56 m y su volumen
urinario en 24 horas fue de 1000 ml.
2.- Como hubiera sido la valoracin nutricional en el caso que la persona hubiera sido
mujer?
3.- Mencione las caractersticas generales de las protenas y su clasificacin.
4.- Qu son las globulinas y cules son sus clases?
5.- Describa los mtodos de dosaje tanto qumicos como enzimticos para protenas
totales, albmina, globulina y Creatinina.