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Arq Neuropsiquiatr 2005;63(4):1021-1027

ESPECTROSCOPIA DE PRTONS NA DOENA


DE ALZHEIMER E NO COMPROMETIMENTO
COGNITIVO SEM DEMNCIA

Estudo de uma amostra comunitria


Dionsio Azevedo, Cssio M.C. Bottino, Mariana Tatsch, Sergio R. Hototian,
Mario C. Bazzarella, Cludio C. Castro

RESUMO - Objetivo: D e s c rever os achados da espectroscopia de prtons (1H-ERM) na doena de Alzheimer


(DA) e no comprometimento cognitivo sem demncia (CIND) em uma amostra da comunidade. Mtodo:
Foram avaliados seis pacientes com DA, sete com CIND e sete controles normais, originrios da comunidade.
1
H-ERM foi realizada com voxel de 8 cm3 nas regies temporal direita, parietal esquerda e occipital medial
e estudados os metablitos: N-acetilaspartato (NAA), creatina (Cr), colina (Cho) e mio-inositol (mI). Resul -
tados: O NAA foi maior nos indivduos controles do que nos DA e intermedirio no CIND. Anlise de funo
discriminante mostrou que as associaes Cr parietal-Cr occipital e Cr parietal-Cho occipital identificaram
corretamente 92,3% da amostra comparando Controle vs DA. Na comparao Controle vs CIND O mI tem-
poral identificou corretamente 78,6% dos indivduos. Concluso: A espectroscopia pode contribuir para
o diagnstico e seguimento de indivduos com comprometimento cognitivo; avaliaes de pacientes da
comunidade podem revelar achados diferentes quanto distribuio dos metablitos cerebrais.
PALAVRAS-CHAVE: ressonncia magntica, espectroscopia prtons, doena de Alzheimer, comprometimento
cognitivo.

Proton spectroscopy in Alzheimers disease and cognitive impairment not dementia: a community
study
ABSTRACT - Objective: To describe the proton magnetic resonance spectroscopy (1H-ERM) data in Alzheimers
disease (AD) and Cognitive Impairment Not Dementia (CIND) in a community sample. Method: We in-
vestigated subjects with AD (n=6), CIND (n=7) and normal control (n=7). 1H-ERM was perf o rmed with single
voxel (8 cm3) placed in temporal, parietal e occipital regions and studied metabolites were: N-acetylaspartate
(NAA), creatine (Cr), choline (Cho) and myo-inositol (mI). Results: NAA concentration was higher in control
subjects than AD and intermediated in CIND patients. Cho parietal plus occipital and Cr parietal plus Cho
occipital classified correctly 92.3% of subjects Control vs AD. Temporal mI classified 78.6% of subjects bet-
ween Control vs CIND. Conclusion: S p e c t roscopy can be used in the diagnosis and follow-up of individuals
with cognitive impairment; evaluation of community subjects may show diff e rent patterns of brain me-
tabolites distribution.
KEY WORDS: magnetic resonance, proton spectroscopy, Alzheimers disease, cognitive impairment.

Demncia de Alzheimer (DA) doena pre v a- indivduos com variadas denominaes como Age-
lente em pessoas com mais de 60 anos de idade e associated Memory Impairment - AAMI4 e Mild
tende a aumentar com o envelhecimento dos indi- Cognitive Impairment - MCI5. Os critrios de inclu-
vduos1,2. Questiona - se a existncia de um continu- so e excluso para caracterizar essas condies so
um entre idosos normais e aqueles com essa cond i- muito especficos e acabam por se tornar restriti-
o clnica, sobretudo se pessoas com queixas cog- vos. Um conceito mais abrangente e menos re s t r i-
nitivas iro evoluir para um quadro instalado de DA3. tivo denominado comprometimento cognitivo sem
As avaliaes neuropsicolgicas caracterizam esses demncia (CIND em ingls) tem sido utilizado6,7.

P rojeto Te rceira Idade (PROTER), Instituto e Departamento de Psiquiatria do Hospital das Clnicas da Faculdade de Medicina da
Universidade de So Paulo (USP), So Paulo SP, Brasil.
Recebido 21 Maro 2005, recebido na forma final 10 Junho 2005. Aceito 2 Agosto 2005
Dr. Dionsio Azevedo Jr - Rua Coronel Moreira Cesar 66/801 - 24230-061 Niteroi RJ - Brasil. E-mail: dionosioazevedo@uol.com.br
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A confirmao de um quadro demencial exige, (tercil baixo). O clculo do tamanho amostral, utilizando-
alm da caracterizao cognitiva, achados de exa- se como referncia uma prevalncia de demncia esti-
mes complementares. Nesse aspecto, sobressaem mada em 7%, resultou em uma amostra de 1.980 indi-
os estudos de neuroimagem principalmente por vduos idosos. Destes. 1.560 sujeitos foram avaliados em
seus domiclios.
meio da ressonncia magntica8, entre eles, os que
utilizam a espectroscopia por ressonncia magn-
Avaliao neuropsicolgica
tica de prtons (1H-ERM), que um mtodo de es-
O instrumento de rastreio foi idealizado como uma
tudo por imagem que analisa os processos meta- combinao de dois testes cognitivos aplicados nos su-
blicos em sistemas vivos9-11. Na DA, a 1H-ERM mos- jeitos: Mini-exame do Estado Mental [MEEM21] e o Fuld
tra reduo nos nveis de N-acetilaspartato (NAA). Object Memory Evaluation [FOME 22 ]; e dois instru-
A magnitude desse decrscimo varia de 10 a 15% a mentos aplicados nos informantes: Informant Ques-
depender do protocolo utilizado para anlise e t i o n a i re on Cognitive Decline in the Elderly [IQCODE23]
mais acentuada na substncia cinzenta do que na e a Activities of Daily Living - International Scale [ADL-
branca. Entretanto, o nvel de reduo do NAA no IS24]. Os resultados dos testes e escalas foram combinados
tem relao com o nvel de atrofia cerebral nem para obter maior acurcia no diagnstico de demncia
com o grau de demncia. O mio-inositol (mI) mos- em cada amostra populacional. Os operadores lgicos
tra-se aumentado na substncia cinzenta - cerca para obter este escore composto foram combinados da
seguinte maneira: MEEM ou FOME e IQCODE ou ADL-
de 15 a 20%. Para os outros metablitos - colina
IS. Um estudo piloto validou o instrumento de rastreio
(Cho) e creatina (Cr), os resultados m o stram-se in-
incluindo os pontos de corte necessrios para o diag-
constantes entre os diversos estudos12-18.
nstico de DA25. Os pontos de corte do MEEM foram es-
A quantidade de estudos com 1H-ERM para as colhidos segundo o grau de escolaridade dos indivduos
condies clnicas em que h dficit cognitivo sem avaliados, tendo como referncia os resultados publi-
demncia ainda muito pequeno19,20. Parnetti et al. cados por Brucki et al.26. Os questionrios foram aplica-
(1996) descreveram aumento do mI em indivduos dos por entrevistadores previamente treinados e fami-
com AAMI com valores intermedirios entre DA e liarizados com o instrumento. Avaliaes peridicas da
c o n t roles; tambm relataram diminuio do NAA qualidade das informaes foram efetuadas durante
com valores intermedirios entre DA e controles. todo o processo de aquisio dos dados. No total, 250
O objetivo deste estudo foi descrever os acha- pessoas suspeitas de terem DA ou CIND foram enca-
dos da 1H-ERM em pacientes com DA e CIND ori- minhados para o HC FMUSP onde foram realizadas as
ginrios de uma amostra da comunidade. Foram avaliaes clnicas e cognitivas utilizando o CAMDEX
[Cambridge Examination for Mental Disorders of the
realizadas comparaes entre os grupos e cor-
Elderly27] - verso traduzida e adaptada para a lngua
relaes entre os achados da espectroscopia e os
portuguesa28. A avaliao foi realizada por mdicos trei-
testes neuropsicolgicos. nados na aplicao do CAMDEX. Cem indivduos normais
tambm foram selecionados para serem avaliados. O
MTODO diagnstico de DA foi baseado nos critrios do National
O protocolo de pesquisa foi avaliado e aprovado pe- Institute of Neurolgical and Communicative Disord e r s
lo Comit de tica do Hospital das Clnicas da Faculdade and Stroke - Alzheimers Disease and Related Disorders
de Medicina da Universidade de So Paulo (HC-FMUSP). Association - NINCDS-ADRDA29 e do DSM-IV30. Para o
Todos os pacientes ou seus re p resentantes legais assina- diagnstico de CIND utilizaram-se os critrios adotados
ram o Te rmo de Consentimento Livre e Esclarecido con- por Graham et al.31. Por esse critrio, foram considerados
cordando em participar da pesquisa. com CIND todos os indivduos com comprometimento
Os indivduos foram selecionados a partir do Estudo em algum dos subitens do teste cognitivo da entrevista
Epidemiolgico de Prevalncia de Demncia na comu- CAMDEX (CAMCOG), mas que no preencheram os cri-
nidade na cidade de So Paulo em indivduos com mais trios para diagnstico de demncia. Os indivduos ainda
de 60 anos, realizado entre julho de 2002 e julho de 2004. foram classificados de acordo com a gravidade da de-
A amostra foi selecionada com base em dados do mncia utilizando a escala Clinical Dementia Rating -
Instituto Brasileiro de Geografia e Estatstica (IBGE), es- CDR32. Todos os sujeitos realizaram exame fsico e neuro-
tratificando os indivduos por escolaridade e nvel scio- lgico alm de exames complementares (hemograma
econmico. Foram selecionados trs distritos re p re s e n- completo, dosagem de sdio, potssio, uria, creatinina,
tativos dos nveis scio-econmicos: alto, mdio e baixo. glicemia, enzimas hepticas, hormnios tireoidianos,
A populao de idosos para cada distrito foi: 16.999 no vitamina B12, folato e sorologia para sfilis no sangue;
J a rdim Paulista (tercil alto), 14.623 em vila Snia e Rio urina I; radiografia de trax; eletrocardiograma; e tomo-
Pequeno (tercil intermedirio) e 11.710 em Brasilndia grafia computadorizada de crnio).
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Espectroscopia por ressonncia magntica envolvia o hipocampo e evitava-se o corno temporal do


Da amostra de pacientes e controles normais avalia- ventrculo lateral; para a regio parietal esquerda uti-
dos, 20 indivduos foram selecionados para realizao lizava-se uma mesma seqncia de trs imagens colo-
dos exames de neuroimagem. Os exames de ressonncia cando-se o voxel na regio parietal posterior ocupando a
magntica foram realizados no Servio de Ressonncia maior rea cortical possvel evitando o corno posterior do
do INCOR - HC FMUSP. Utilizou-se um aparelho Sigma ventrculo lateral; finalmente, para a regio occipital foi
Horizon LX (General Eletric) de 1,5 Tesla. O protocolo in- escolhida uma rea medial tomando-se o cuidado de no
cluiu cortes axiais pesados em T1 com a tcnica spin- envolver a poro posterior (esplnio) do corpo caloso.
echo e imagens pesadas em T2 com as tcnicas fast
spin-echo (FSE) e FLAIR e obedeceu a seguinte seqncia: Anlise estatstica
a) Inicialmente realizou-se uma seqncia com o lo- Foram feitas, inicialmente, estatsticas descritivas de
calizador em trs planos e que serviu de base para pro- todos os dados, incluindo mdia, desvio padro e in-
gramar as demais sries. A seguir foi realizada a srie tervalo de confiana. Os dados demogrficos contnuos
localizador 128 Yres Brain axial reto para pro g r a m a- (idade e escolaridade) foram analisados quanto sime-
o das espectroscopias. tria da varincia entre os grupos com o Teste de Levene.
b) A primeira seqncia para espectroscopia de pr- Em seguida, comparao entre os grupos foi realizada
tons foi a espectro axial com aplicativo proton brain com a Anlise de Varincia (ANOVA) com correo pelo
examination (PROBE) - point resolved spectroscopy Mtodo de Bonferroni. A varivel gnero foi avaliada
(PRESS) TE de 35 ms, TR de 2000 ms, FOV de 24 mm2 e utilizando o Chi quadrado. Os dados contnuos (testes
voxel nico de 2 x 2 x 2 cm totalizando 8 cm3 de re a cognitivos - MEEM e CAMCOG) e a 1H-ERM dos trs gru-
estudada. A regio de interesse (ROI) para essa seqncia pos de indivduos tambm foram comparados pela ANO-
foi a temporal direita, sobre o hipocampo. Evitou-se apro- VA. A correlao entre os testes cognitivos e os dados
ximar a ROI dos ossos temporais e do corno temporal do demogrficos contnuos (idade e escolaridade) foi ava-
ventrculo lateral. Tanto quanto possvel tambm se tentou liada com o Coeficiente de Correlao de Spearman ( rho).
colocar a ROI sobre a poro anterior do hipocampo. Anlise de Funo Discriminante foi realizada com todos
c) A seguir realizou-se a espectro axial com aplicativo os metablitos medidos pela 1H-ERM em cada uma das
PROBE/SV - stimulated echo acquisition mode (STEAM) trs regies cerebrais para investigar-se, isoladamente
com TE de 30 ms, TR de 2000 ms, FOV de 24 mm2 e voxel ou em combinao, que metablitos poderia(m) aumen-
nico de 8 cm3. Duas regies de interesse foram escolhidas tar a acurcia na classificao dos sujeitos avaliados.
para estudo: a regio parietal posterior esquerda e a
regio occipital medial.
RESULTADOS
O tempo total de exame foi de cerca de 30 minutos.
A Tabela 1 mostra os dados demogrficos dos
As 1H-ERM foram registradas em grfico bem como em
v a l o res absolutos. A nica interferncia do pesquisador trs grupos de indivduos (DA, CIND e Controle). O
(DAJr) foi quanto escolha da posio do voxel nas re- Teste de Levene indicou simetria de varincia da
gies de interesse. Procurou-se seguir sempre os mesmos idade e escolaridade. Na comparao entre os gru-
p a r m e t ros: para a regio temporal direita, escolhia-se pos no houve diferena estatstica quanto ao g-
no localizador as imagens que, numa seqncia de trs, nero. O grupo Controle mostrou ntida pre d o m i-

Tabela 1. Dados demogrficos.

Grupos

Parmetros DA CIND CONTROLE Anlise estatstica

N 6 7 7

Gnero

Feminino (%) 4 (66,7) 3 (42,86) 5 (71,43) 2 = 0,80 *


Masculino (%) 2 (33,3) 4 (57,14) 2 (28,57)

Idade: mdia (DP) 80,50 (4,68) 71,00 (7,94) 67,14 (3,08) p = 0,002 **
p = 0,023 ***

Escolaridade - anos 3,50 (5,36) 3,86 (4,98) 6,00 (3,46) ns


Mdia (DP)
DP, desvio padro; IC, intervalo confiana; ns, no significativo; *Teste do Chi-quadrado: p = 0,37; **ANOVA (Contro l e
versus DA); ***ANOVA (CIND versus DA).
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Tabela 2. Comparao entre testes cognitivos.

Grupos

Testes DA CIND CONTROLE ANOVA

MEEM:mdia(DP) 18,33 (7,09) 25,29 (3,35) 27,29 (4,03) p = 0,014 *


IC 95% 10,89 - 25,77 22,19 - 28,39 23,56 - 31,01

CAMCOG: mdia (DP) 57,17 (17,59) 77,86 (14,47) 88,86 (13,56) p = 0,005 *
IC 95% 38,71 - 75,63 64,47 - 91,24 76,32 - 101,40
*Controle versus DA

Tabela 3. Metablitos cerebrais - 1H-ERM.

Metablito
mdia (DP) DA CIND CONTROLE ANOVA

Temporal
NAA 77,67 (21,12) 81,17 (15,85) 83,29 (14,71) ns
Cr 60,00 (4,24) 55,83 (10,12) 62,86 (9,15) ns
Cho 53,00 (9,47) 52,33 (7,74) 57,00 (13,00) ns
mI 46,50 (4,51) 45,00 (4,02) 52,57 (4,93) p = 0.080 *
p = 0,008 **

Parietal
NAA 54,67 (6,98) 65,13 (12,45) 68,29 (11,69) ns
Cr 42,17 (4,54) 44,67 (6,77) 49,71 (4,46) p = 0,068 *
Cho 27,83 (7,47) 31,17 (7,81) 36,29 (5,74) ns
mI 22,17 (3,76) 25,00 (5,37) 30,29 (5,09) p = 0,024 *

Occipital
NAA 61,83 (7,52) 58,67 (15,51) 67,43 (9,24) ns
Cr 48,67 (6,47) 43,33 (11,52) 49,14 (6,34) ns
Cho 26,33 (2,73) 24,17 (7,00) 24,86 (3,29) ns
mI 25,17 (5,67) 25,67 (6,69) 31,00 (4,24) ns
NAA, n-acetilaspartato; Cr, creatina; Cho, colina; mI, mioinositol; *Controle versus DA **Controle versus CIND; ns, no
significante.

Tabela 4. Subitens do CAMCOG.

ANOVA

Grupos O L M A P C PA Pe

Controle x DA p = 0,029 p = 0,025 p = 0,030 p = 0,035 p = 0,004 ns ns ns

Controle x CIND ns ns ns ns ns ns ns ns

CIND x DA p = 0,041 ns ns ns p = 0,021 ns ns ns


O, orientao; L, linguagem; M, memria; A, ateno; P, praxia; C, clculo; PA, pensamento abstrato; Pe, percepo; ns,
no significativo.

nncia do sexo feminino, entretanto, no houve cor- os outros dois grupos; diferenas estatisticamente
relao desta varivel com os resultados dos testes significantes ocorreram entre os grupos Controle e
cognitivos (rho: p = 0,22 e p = 0,49 para o MEEM e DA, e CIND e DA. Apesar dessa diferena, s houve
o CAMCOG respectivamente) nem com os resultados c o rrelao entre idade e as avaliaes cognitivas
da 1H-ERM (exceo para a Cr e a Cho temporal com para o grupo Controle: rho = 0,867, p = 0,001 para
rho = -0,791, p = 0,034 para ambos metablitos). o MEEM; e rho = 0,898, p = 0,006 para o CAMCOG.
Quanto idade, os pacientes com DA tiveram mdia Nenhuma diferena estatstica foi vista na compa-
significativamente maior quando comparada com rao entre os grupos para escolaridade.
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Tabela 5. Anlise de funo discriminante.

Controle versus DA Controle versus CIND

Cr parietal e occipital Cr parietal e Cho occipital mI temporal

Controle DA Controle DA Controle CIND

Controle 7 (100%) 0 (0%) 6 (85,7%) 1 (14,3%) 6 (85,7%) 1 (14,3%)


DA 1 (16,7%) 5 (83,3%) 0 (0%) 6 (100%) - -
CIND - - - - 2 (28,6%) 5 (71,4%)

A comparao dos escores mdios dos testes lateral. Por essa razo voxels para a 1H-ERM tm
cognitivos (Tabela 2) mostrou diferenas com nvel sido colocados ou na linha mdia ou em ambos la-
de significncia estatstica apenas entre Controle dos dos hemisfrios cerebrais. Nenhuma diferena
versus DA. Como esperado, os indivduos com CIND direita-esquerda tem sido descrita. Considerando,
tiveram escores mdios intermedirios no MEEM entretanto, o estudo de Grn et al.34 com ressonn-
e CAMCOG. cia magntica funcional demonstrando falha de
Os valores mdios dos metablitos para cada ativao do hipocampo direito nos testes de ava-
uma das trs regies estudadas so apresentados liao de memria episdica em pacientes com DA
em valor adimensional (Tabela 3). O NAA e o mI no em fase inicial, optou-se por colocar um voxel nessa
g rupo Controle foram maiores dos que nos outros rea. As regies parietal esquerda e occipital me-
dois grupos em todas as regies. A Cho mostro u dial foram escolhidas seguindo outros estudos com
tendncia a ser maiores no grupo Controle. espectroscopia.
A Tabela 4 mostra a comparao entre os trs O N-acetilaspartato mostrou-se sempre maior
grupos para os subitens do CAMCOG. nos indivduos normais quando comparados com
A anlise de funo discriminante utilizando os portadores de DA. Aqueles com diagnstico de
dados da 1H-ERM foi realizada comparando Con- CIND tiveram valores intermedirios. Esses achados
t role versus DA e Controle versus CIND (Tabela 5). esto de acordo com o que est relatado para a
Na primeira comparao, o NAA e o mI consegui- DA35-37 e para sujeitos com dficits de memria sem
ram identificar os pacientes com DA com pre c i s o demncia19,20 sugerindo comprometimento cogni-
diagnstica de 83,3% e 66,7% respectivamente. tivo em evoluo. O mio-inositol tambm foi maior
A anlise individual dos outros metablitos mos- no grupo de indivduos controles quando compa-
trou resultados semelhantes. Entretanto, quando rados com DA e CIND, achado esse em desacordo
combinados dois ou trs metablitos, o ndice de com a literatura. Engelhardt et al.38 encontraram
a c e rto aumentou. As melhores combinaes foram valores do NAA reduzidos, do mI aumentados e
Cr parietal - Cho occipital e Cr parietal - Cr occipital. da relao mI/NAA aumentados em pacientes com
A primeira atingiu 100% de acerto na identificao DA. A sensibilidade, a especificidade e o valor pre-
de pacientes com DA e a segunda 100% de pre- ditivo positivo para esses dados foram satisfatrios
ciso na identificao dos sujeitos Controles (Tabela para diagnosticar DA. Na comparao entre os gru-
5). Nas duas combinaes, 92,3% da amostra total pos, analisando a 1H-ERM, Controle e DA mos-
foram corretamente identificados. traram diferenas estatsticas significantes para o
mI parietal e uma tendncia para o mI temporal.
DISCUSSO Tambm houve diferena estatstica entre Controle
O estadiamento neuropatolgico da doena de e CIND para o mI temporal. Nenhuma diferena
Alzheimer mostra que o processo de degenerao estatstica foi verificada entre CIND e DA. Na regio
comea nas reas lmbicas da regio medial do lo- occipital, nenhuma diferena entre os trs gru p o s
bo temporal (crtex entorrinal e formao hipo- foi observada.
campal) pro g redindo para reas associativas tm- As alteraes da creatina na DA no esto ainda
poro-parietais e frontais e, no final, envolvendo bem definidas na literatura. Enquanto referida
as reas corticais primrias33. As manifestaes cl- uma temporalidade dos achados na DA com mu-
nicas da demncia dependem de que reas estejam dana dos valores medida que a doena avana17,
envolvidas e o comprometimento sistmico e bi- outros re f e rem uma influncia da idade nas me-
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didas de Cr39. Alm disso, dependendo da re g i o de amostras de centros de pesquisas - casos com
estudada, os valores aferidos para o metablito graus mais avanados de doena. Tanto a Cho
podem mudar40. quanto a Cr serviram para identificar pacientes e
Quanto colina, descrito seu aumento na sujeitos controles e merecem mais estudos para
41
DA . Estudos in vitro indicam que a perda de n e u r - definir seu papel. Um limitador do nosso estudo
nios colinrgicos na DA, part i c u l a rmente no hipo- o pequeno tamanho da amostra que pode ter
campo, prediz um aumento da colina livre solvel influenciado os resultados das mdias tanto da 1H-
ERM quanto dos testes cognitivos. A seleo de
e da glicerofosfocolina37. Em nossa amostra, apenas
amostras maiores de casos da comunidade pode
na regio occipital a Cho foi maior nos sujeitos
auxiliar a estabelecer um perfil re p resentativo das
com DA quando comparados com Controles.
diferenas entre os metablitos de sujeitos com
Entre Controle e CIND houve um grau maior DA ou CIND e a relao destes metablitos com os
de dificuldade para identificar corretamente os in- dficits cognitivos.
divduos dos dois grupos. Apenas o mI temporal
conseguiu separar os indivduos com uma taxa de REFERNCIAS
a c e rto de 78,6% (Tabela 5). Essa dificuldade cor- 1. Paykel ES, Brayne C, Huppert FA, et al. Incidence of dementia in a po-
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foi encontrada para justificar os valores do mI, mas 18. P e t t e g rew JW, Klunk WE, Panchalingam K, McClure RJ, Stanley JA.
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