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Instituto Tecnolgico de Celaya

Departamento de Ingeniera Bioqumica

PRCTICA NO. 11

MORFOLOGA DE HONGOS

Introduccin.

La mayora de los que deben relacionarse con la rama micolgica, a menudo se


sienten confundidos y desalentados en sus tentativas para estudiar los hongos
debido a la gran variacin en el aspecto macroscpico de las colonias, a la
multiplicidad de las estructuras microscpicas y a la nomenclatura poco conocida.

Sin embargo, estas dificultades son ms psicolgicas que reales y cuando se


llegan a dominar unos cuantos conceptos bsicos basados en las morfologas
macroscpica y microscpica, la identificacin de los hongos resulta ms fcil y
rpida que en otras bacterias ordinarias.

Los hongos emiten una o ms prolongaciones tubulares llamadas tubos


germinales o tambin llamadas hifas, que se alargan por el crecimiento de su
extremo distal. La hifa puede dividirse por formacin de paredes transversales a
intervalos regulares.

Las hifas divididas por tabiques se denominan hifas tabicadas, sin embargo
algunos hongos no desarrollan tabicaciones en las hifas y se denominan no
tabicadas o cenocticas. Finalmente, el conjunto de hifas desarrollan lo que se
conoce como micelio, la diferenciacin de los hongos se basa principalmente en
su aspecto colonial y morfologa microscpica.

l.- La morfologa colonial se basa en los siguientes parmetros:


- Aspecto
- Consistencia.
- Pigmentacin de la colonia.
- Difusin de pigmento al medio.
- Luz reflejada.
- Luz transmitida.
- Bordes.

ll.- Morfologa microscpica ( referente al micelio )


- Tabicado o septado.
- Cenoctico.
- Hialino.
- Pigmentado ( mucilaginoso, carotinoide )
- Macrosifonado
- Microsifonado.

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Objetivo.
El alumno ser capaz de diferenciar las colonias de los hongos y los diversos tipos
de estructuras bsicas, como por ejemplo, el micelio por medio de tcnicas de
observacin en fresco o directa y algunas preparaciones facilitadas por el profesor,
valorando estos parmetros como fundamentales en la identificacin de los
hongos.

Tcnicas a emplear.

A).- Tcnica de resiembra en tubo.

1.- Con el asa micolgica en ngulo de 90 tomar un pequeo fragmento de las


colonias con morfologa diferente y depositarlo en un tubo con medio inclinado
PDA o SDA.
2.- Incubar a 28 C
3.- Observar cada 40 horas el desarrollo de las colonias.

B).- Tcnica de observacin microscpica en fresco.

1.- Sobre un porta objetos depositar una gota de colorante azul de algodn
lactofenol.
2.- Con el asa micolgica tomar un pequeo fragmento de la colonia y colocarlo
sobre el porta objetos.
3.- Agregar una gota de alcohol al 70% (esto es necesario solo en el caso de
hongos con esporulacin abundante).
4.- Rasgar el fragmento de la colonia con ayuda da agujas de diseccin o bien con
la misma asa micolgica.
5.- Colocar sobre la preparacin un cubre objeto evitando formar burbujas de aire.
6.- Observar al microscopio a seco dbil y seco fuerte, nunca usar aceite de
inmersin.

Material a emplear.

1.- Colonias de hongos proporcionadas por el profesor.


2.- Tubos con medio PDA o SDA.
3.- Colorante azul de algodn.
4.- Preparaciones fijas proporcionadas por el profesor.
5.- Porta y cubre objetos.

Desarrollo de la prctica.
1.- Escoger diferentes tipos de colonias y resembrarlas en tubos con medio PDA o
SDA.
2.-Observar comparativamente las caractersticas macroscpicas de las colonias
desarrolladas.

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3.- Hacer preparaciones en fresco con azul de algodn lactofenol de las colonias
aisladas resultando de la prctica anterior.
4.- Observar comparativamente el micelio de las muestras aisladas con las
preparaciones fijas proporcionadas por el profesor.

Dibujos:
a.- Hifa.
b.- Micelio.
c.- Micelio macrosifonado septado.
d.- Micelio macrosifonado cenoctico.
e.- Micelio septado fugilaginoso.
f.- Micelio microsifonado.

C) Estudio Morfolgico de los Hongos Filamentosos

Entre los criterios ms empleados para la identificacin de los hongos


filamentosos est el estudio de las caractersticas macro y microscpicas de las
colonias. La morfologa microscpica de los cultivos es la que proporciona por
ejemplo: el grosor de los filamentos, el tipo y la distribucin de los septos, la forma,
el tamao y la disposicin de las esporas y de las estructuras formadoras de
stas.

Uno de los mtodos aplicados para la observacin microscpica de los cultivos es


la observacin en fresco, con una solucin adecuada. Tambin es muy til la
realizacin de cultivos en portaobjetos.

Procedimiento

a) Materiales necesarios: portaobjetos, cubreobjetos, placas de Petri de vidrio,


soportes de vidrio en U, pinzas, asa de micologa, cultivos de hongos conocidos,
medios de cultivo Sabouraud diluido 1/10, agua destilada estril, microscopio.
Todo el material a utilizar debe ser estril.

b) Tcnica:

Disponer de portaobjetos nuevos, limpios, colocados sobre el soporte en U,


dentro de una placa de Petri (previamente esterilizados).

Al lado del mechero, abrir las placas que contienen los portaobjetos, con
una pipeta estril, colocar 3 ml de agar Sabouraud fundido (a 45 C), cubrir
la placa y dejar solidificar el medio de cultivo a temperatura ambiente.

El conjunto est dispuesto para la inoculacin del hongo.

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Tomar con un asa de micologa un pequeo fragmento de la colonia de la


cepa en estudio. Nota: es de gran importancia que el inculo depositado
sea muy escaso.

Colocar 5 a 10 ml de agua destilada estril en la placa con el fin de


mantener un ambiente hmedo.

Anotar la fecha del cultivo y la especie inoculada.

Colocar las placas en la estufa de cultivo a 25 - 27C. Observarla


diariamente, Detener el crecimiento cuando parezca suficiente.

Saque la lmina de la caja de petri, que sirvi de cmara hmeda. Limpie la


superficie por debajo de la lmina y coloque sta sobre la platina del
microscopio.

Observe microscpicamente en el centro y bordes del disco o la pelcula de


agar, donde se encuentra el microcultivo.

Compare diversos montajes.

Aprecie hongos unicelulares y pluricelulares, diferencie micelio de sustrato


del micelio areo.

Cuestionario
A) Consulte sobre hongos zoospricos indicando algunos ejemplos y su
importancia ecolgica.
B) Dentro de los deuteromicetes (fungy imperfecti) describa un hongo con
conidiogenesis fialdica y otro con blstica.
C) Existen algunos hongos que presentan dimorfismo. Qu significa y que
factores ambientales influyen en esta propiedad?
D) En deuteromicetes (con solo reproduccin asexual conocida) ocurre en
cierto grado intercambio gentico. Consulte un mecanismo que permita este
intercambio.

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