Manual Ecotoxicidad

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MANUAL DE EVALUACION Y MANEJO DE SUSTANCIAS TOXICAS EN AGUAS

SUPERFICIALES
Seccin 5 : Orientacin para muestreo, monitoreo y anlisis de datos
MANUAL DE EVALUACION Y MANEJO DE SUSTANCIAS TOXICAS

EN AGUAS SUPERFICIALES
SECCION 5
ORIENTACION PARA MUESTREO, MONITOREO Y ANALISIS DE DATOS
Dr. Robert V. Thomann

Manhattann College
Anexo 5.A.I preparado por la

Dra. Linda Henry
Drexel Institute of technology
Organizacin Panamericana de la Salud - Divisin de Salud y Ambiente

Oficina Regional de la Organizacin Mundial de la Salud
Lima, Per
1994
Indice General
5.1. Introduccin
5.2. Propiedad de las sustancias qumicas
5.3. Escala de espacio y tiempo
5.4. Descargas
5.5. Toxicidad
5.6. Transporte
5.7. Slidos
5.8. Muestreo de Sustancias qumicas - Columna de Agua y Sedimiento
5.9. Muestreo de Sustancias qumicas en el ecosistema Acutico
5.10. Experimentos en laboratorio
5.11. Anlisis y presentacin de datos
Referencias
Anexo 5.I. Recomendaciones concernientes a la seleccin de organismos para
bioensayos acuticos
Anexo 5.II. Problemas Ejemplos - Anlisis de Datos
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Indice de figuras
5.1 Introduccin
El propsito de esta seccin es suministrar guas y orientacin general para el muestreo y
monitoreo de sustancias txicas en aguas superficiales. Se enfatiza en el destino de la sustancia,
aunque tambin se discuten los efectos de las sustancias qumicas en el ecosistema acutico, en
trminos de medicin de toxicidad. Asimismo, se dan algunas sugerencias para el anlisis
estadstico y la presentacin de datos.
Consideraciones generales
Muestreo
Monitoreo
Alcance de la seccin
Consideraciones generales
Existen diversas consideraciones esenciales que gobiernan la extensin y magnitud del esfuerzo de
muestreo y monitoreo(Figura 5.1):
a. La naturaleza del contexto del problema, esto es:

1. El problema abarca solamente un sondeo (una primera evaluacin general) del
posible impacto de una o varias sustancias qumicas? o
2. Es necesario desarrollar una estrategia de control especfica para un ro, lago o
estuario donde existe un problema real o potencial?
b. Los recursos financieros disponibles, y
c. La capacitacin tcnica de los recursos humanos disponible.
Esas tres consideraciones frecuentemente deben ser integradas en un esfuerzo especfico de

monitoreo. Restricciones de tipo presupuestario y de mano de obra pueden determinar, y
frecuentemente lo hacen, la extensin del esfuerzo de muestreo. No obstante, es necesario conocer
los diversos componentes tcnicos involucrados en el muestreo y monitoreo de sustancias txicas,
a fin de poder tomar decisiones con mayor conocimiento, basadas en las limitaciones de naturaleza
presupuestaria y de recursos humanos.
Muestreo
El trmino "muestreo" es usado en el contexto de la determinacin en el campo, de la distribucin

de una o varias sustancias qumicas (y los efectos txicos resultantes) en las diversas fases del
sistema acutico. La distribucin de la sustancia o sustancias qumicas y los efectos resultantes
pueden ser necesarios para respaldar el desarrollo de un programa de manejo de sustancias
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txicas y sus componentes, tales como el desarrollo de estndares de calidad de agua,

construccin y validacin de las bases de un modelo matemtico de prediccin y la asignacin de
niveles permisibles para las descargas al sistema hdrico (vase secciones anteriores de este
manual).
a. la concentracin o toxicidad de sustancias qumicas descargadas y los caudales asociados,

tanto de fuentes puntuales como dispersas;
b. la concentracin de sustancias qumicas en la fase lquida, tanto en partculas como disuelta;
c. la concentracin en el sedimento de fondo, comprendiendo igualmente la sustancia qumica
en las partculas y en el agua intersticial en los sedimentos;
d. la concentracin en los diversos sectores de la biota acutica, incluyendo los niveles ms
bajos de la cadena alimenticia (por ejemplo, plantas acuticas e invertebrados) y tambin los
niveles ms altos (por ejemplo, peces); esas concentraciones deben incluir la infauna y
epifauna bentnicas;
e. los efectos de las concentraciones de sustancias qumicas, tales como son medidas con las
pruebas de toxicidad.
En el contexto de un problema particular, puede no ser necesario muestrear todas esas fases y
compartimientos, de forma que la determinacin de la importancia relativa de las fases, la definicin
de cules sustancias qumicas deben ser muestreadas o si el muestreo debe tener como objetivo el
efecto de una mezcla de sustancias qumicas, se transforma en el problema central para el diseo
del plan de muestreo. Adems, la frecuencia de muestreo en el tiempo y espacio es una
determinacin adicional importante que es necesario realizar.
Para algunas sustancias qumicas y contextos asociados al problema, puede ser necesario
complementar el muestreo de campo con experimentos de laboratorio. Tales experimentos pueden
incluir, por ejemplo, la determinacin de coeficientes de particin entre slidos y agua, tasas de
hidrlisis o biodegradacin.
Esas consideraciones se discuten ms adelante utilizando el esquema general del modelo del
destino de sustancias txicas presentado en las Secciones 3 y 4.
Monitoreo
El trmino "monitoreo" puede ser considerado en tres contextos:
a. Pruebas de vigilancia para determinar la naturaleza y extensin del problema de sustancias

qumicas en el medio ambiente acutico y si estn apareciendo nuevas sustancias qumicas
en aguas superficiales y biota;
b. Pruebas de verificacin del cumplimiento a las exigencias de un permiso de descarga,
asignacin u otro componente de un programa de control de sustancias txicas; y
c. Pruebas de certificacin de calidad para determinar si las tcnicas de laboratorio y anlisis
qumicos estn dentro de los lmites de precisin y sensibilidad requeridos.
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El monitoreo, por lo tanto, puede tener un mbito muy amplio tal como en el monitoreo de
vigilancia, en el cual una investigacin de reconocimiento puede conducirse slo para delinear las
dimensiones de algn problema existente o potencial. Por otro lado, el monitoreo para verificar el
acatamiento de los reglamentos puede ser muy detallado e intensivo, pudiendo ser conducido con
un esfuerzo de autoacatamiento por parte de la propia entidad que descarga con verificaciones
peridicas de la agencia de control.
El nfasis de esta Seccin en trminos de monitoreo de sustancias txicas consiste en la primera

categora de monitoreo de vigilancia.
Alcance de la seccin
Se pretende que esta seccin sea apenas un documento de orientacin general. Se discuten los
principales componentes de un plan de muestreo, as como tambin las formas de las sustancias
qumicas y las consideraciones de naturaleza espacial y temporal. El punto central se basa en el
desarrollo del muestreo y monitoreo como apoyo a programas de manejo de sustancias txicas.
Por tal motivo, el texto no presenta los detalles de los anlisis de sustancias txicas en laboratorios
ni los procedimientos de laboratorio recomendables. Otras referencias que detallan estos aspectos
podrn ser consultadas para este fin (por ejemplo, APHA 1985).
Referencias
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of water and waste water, 16th Edition, Washington, D.C. 874 pp.
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Data Development Standards. EPA-560/11-80-027.
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la contaminacin en organismos marinos del Pacfico Sudeste. Informe del curso.
6. DI TORO, D.M. y HALLDEN, J.A. 1985. A mass balance analysis of cerodaphnia toxicity
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SUPERFICIALES
Anexo 5.A.I. Recomandaciones concernientes a la seleccin de organismos

para bioensayos acuticos
Dra.Linda Henry
Drexel Institute of Technology
1. Introduccin 3. Organismos para bioensayo

2. Proceso de seleccin Referencias
Introduccin
Este informe trata acerca de los grandes grupos de organismos que pueden usarse para
bioensayos acuticos y los criterios para seleccionar las especies ms apropiadas. En algunos
casos, se mencionan las especies que se consideran apropiadas; sin embargo, se debe reconocer
que las especies que son relevantes y apropiadas en Amrica del Norte pueden no serlo, en todos
los casos, en Amrica Central o del Sur. Sin embargo, ha habido considerable investigacin sobre
ciertas especies, lo que podra ayudar en el proceso de seleccin.
La seleccin de organismos para bioensayos debe basarse en:
los objetivos del programa toxicolgico,

la informacin disponible sobre los posibles organismos,
las caractersticas de las especies,
las instalaciones y equipo del laboratorio,
el nivel de capacitacin de los tcnicos.
Los bioensayos acuticos pueden aplicarse a un amplio rango de programas. Sin embargo, es
importante entender claramente todas las facetas del proceso de seleccin a fin de disear
programas que se acercarn efectivamente a los objetivos.
El informe consta de dos secciones principales. La Seccin 2, Proceso de Seleccin, discute el rol
que juegan los objetivos del programa en los procesos de seleccin. Se presenta una serie de
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preguntas y cmo las respuestas afectan a los procesos de seleccin. La Seccin 3, Organismos de
Bioensayo, trata acerca de cada uno de los grupos principales de organismos y su adecuacin a
varios tipos de bioensayos. Se hacen recomendaciones especficas en los casos en que es posible
hacerlo.
2. Proceso de seleccin
Esta seccin discute los objetivos para los estudios toxicolgicos y cmo ellos influyen en el
proceso de seleccin, en particular, ya sea que se seleccionen organismos estndares criados en el
laboratorio o indgenos recolectados en el campo.
Organismos criados en el laboratorio para bioensayos

Organismos recolectados en el campo para bioensayos
Recomendaciones
Organismos criados en el laboratorio para bioensayos
Ventajas
Disponibilidad en forma inmediata de organismos aclimatados, saludables, que han sido

criados bajo las mismas condiciones.
La respuesta de los organismos para bioensayos a la sustancia txica est influenciada por factores
tales como su edad (los animales jvenes son usualmente ms sensibles), dieta (los animales bien
alimentados brindan respuestas ms consistentes), presin (los organismos alterados o presionados
son ms sensibles) y condiciones fsicas como temperatura, luz y el nivel de oxgeno disuelto en el
agua.
Los organismos para bioensayos que se cultivan en el laboratorio representan una fuente predecible
de organismos de prueba de una edad conocida. El uso de condiciones estndares de laboratorio y
de alimentacin asegurar que todos los organismos de prueba respondern a las sustancias
txicas en una forma similar con el paso del tiempo. Esta es una caracterstica importante cuando
se comparan los resultados de diferentes laboratorios.
Desventajas
Muchos organismos con ciclos complejos de vida o informacin insuficiente sobre su cultivo
no pueden ser cultivados en el laboratorio. Por lo tanto, la variedad de organismos est ms
limitada cuando se usan los que han sido criados en el laboratorio.
Los requerimientos de cultivo para organismos acuticos varan sustancialmente, an entre
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especies estrechamente relacionadas. Es necesario conocer el alimento ptimo, la temperatura, el

ciclo de luz y el agua a fin de mantener cultivos continuos en el laboratorio. Esta informacin
requiere de aos de investigacin. Aunque muchas algas, invertebrados y especies de peces se han
usado como organismos para bioensayos, slo existe informacin disponible sobre algunas
especies, que permite un cultivo satisfactorio de laboratorio.
Falta de representatividad a las condiciones y organismos en la comunidad a ser probada.
El aspecto negativo de los organismos estndares criados en el laboratorio es que ellos no son
necesariamente representativos de la comunidad acutica o de las condiciones de salud de los
organismos de cada lugar. Por lo tanto, si el objetivo es estudiar un efluente especfico o la
descarga a un ro o lago, entonces deben considerarse los organismos recolectados en el campo
como una alternativa.
Organismos recolectados en el campo para bioensayos
Hay circunstancias en las que los organismos recolectados en el campo son apropiados. Las
siguientes son algunas preguntas que necesitan hacerse antes de decidir usar los organismos
recolectados directamente de un ro o un lago.
Puede recolectarse el organismo directamente del campo? Esto ocurre en poblaciones

grandes, monoespecficas?
Estn los organismos disponibles durante todo el ao o slo durante ciertas estaciones?
Es el organismo sensible al manejo durante su recoleccin y transporte al laboratorio?
Se adaptar el organismo al agua del laboratorio o se necesita un abastecimiento de agua
fresca diariamente desde el campo?
Ventajas
El ms representativo de la comunidad impactada por el efluente.
Se puede seleccionar una especie importante en una comunidad especfica.
Las pruebas de microcosmos conteniendo muchas especies puede prepararse fcilmente.
Se pueden desarrollar exmenes con varias especies en la misma cmara de prueba. Los
organismos que son compatibles, tales como caracoles, almejas, peces y plantas acuticas pueden
incluirse en la misma cmara de prueba, permitiendo un estudio simultneo de efectos mltiples.
Desventajas
La alta presin y mortalidad frecuentemente estn asociadas con los procedimientos de

recoleccin y transferencia.
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Muchos organismos pueden morir antes o durante la prueba y otros pueden ser
inusualmente sensibles a sustancias txicas como resultado de la presin asociada con los
procedimientos de recoleccin y transferencia. Las muertes en los controles pueden invalidar
la prueba.
La disponibilidad de los organismos puede estar limitada.
Muchas especies no abundan durante todo el ao o tienen varios cambios en su ciclo de

vida.
La edad, salud y condiciones de cultivo de los organismos son desconocidas.
No existe manera de obtener organismos "estandarizados" del campo y frecuentemente

hasta la edad es desconocida.
Recomendaciones
En general, es preferible utilizar organismos criados en el laboratorio en vez de los recolectados en

el campo porque los exmenes estandarizados requieren de un abastecimiento siempre disponible
de organismos en buena salud provenientes de cultivos de condiciones conocidas y constantes. Los
bioensayos hechos en el laboratorio usando organismos recolectados en el campo han sido menos
satisfactorios, con muy pocas excepciones. Los organismos recolectados en el campo son ms
satisfactorios cuando el laboratorio est cerca al lugar de recoleccin y el abastecimiento de agua
desde all est siempre disponible.
3. Organismos para bioensayos

El uso de ms de una especie permitir una determinacin ms cuidadosa de toxicidad porque los
organismos acuticos varan en sus respuestas a las sustancias txicas. Por ejemplo, los peces
pueden ser mucho ms sensibles que los invertebrados a una sustancia qumica, mientras que
puede suceder lo contrario con otra sustancia qumica. Una especie de cada uno de los siguientes
grupos ha sido encontrada adecuada.
algas plantnicas
invertebrados
peces
Esta seccin trata cada uno de los principales grupos de organismos para bioensayos - algas,
invertebrados y peces - y la informacin para ayudar en la seleccin de especies especficas de
prueba dentro de cada grupo. Se presentan las ventajas y desventajas de cada grupo, as como de
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los subgrupos de invertebrados.
La Tabla 5.A.I.1presenta los principales grupos de organismos para bioensayos e indica su

adaptabilidad al cultivo de laboratorio versus la recoleccin de campo y la cantidad de informacin
disponibe en los mtodos de cultivo y prueba.
Criterios generales de seleccin

Seleccin de especies
Recomendaciones
Criterios generales de seleccinEl primer paso es hacerse cada una de las siguientes preguntas.
Existe suficiente informacin sobre la historia de vida del organismo? Sobre las tcnicas de
cultivo? Sobre los procedimientos de bioensayos?
Los organismos acuticos frecuentemente tienen ciclos de vida y requerimientos de cultivo y

de manejo complejos. El desarrollo de esta informacin es una tarea larga que
frecuentemente requiere aos de investigacin. Es muy recomendable que se consideren
slo aquellos organismos de los que se tiene informacin suficiente en cada una de estas
reas. Las especies con informacin limitada sobre cultivo y procedimientos de prueba
deben evitarse.
Es apropiado el ciclo de vida de los organismos a los objetivos y diseo?
El diseo de los bioensayos tiene que ser cuidadosamente considerado en el contexto del
ciclo de vida del organismo. La mayora de protocolos de bioensayos agudos y crnicos
requieren organismos jvenes o recin nacidos. Sin embargo, algunos protocolos, tales
como la prueba de crecimiento de ostras, se aplican a organismos adultos. Asimismo, para
pruebas crnicas que involucran reproduccin, el tiempo requerido para la reproduccin del
organismo es un factor clave.
El bioensayo es para toxicidad en agua o en sedimentos? Para sedimentos, es el objetivo

determinar las sustancias txicas que se filtrarn hacia el agua superficial o las sustancias
txicas que pueden acumularse en los organismos bnticos?
Los sedimentos pueden servir como fuentes de sustancias txicas para el agua superficial o
para los organismos bnticos que viven en los sedimentos. Las sustancias txicas que se
mueven desde los sedimentos hacia el agua superficial pueden ser determinados preparando
lixiviados del sedimento para bioensayos. Tambin pueden ser de preocupacin las
sustancias txicas que estn estrechamente ligadas a los sedimentos y que pueden ser
bioconcentradas en organismos bentnicos, particularmente cuando stos son un
componente importante de una cadena alimenticia que resulta en la exposicin humana.
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Los bioensayos para determinar toxicidad en agua o de sedimentos en contacto con agua se
realizan en mejor forma con organismos plantnicos o de libre natacin. An cuando el
sedimento puede ser el material de prueba, la toxicidad puede ser evaluada exponiendo los
organismos plantnicos a un lixiviado o a un extracto del sedimento usando el agua
superficial.
Si se sospecha la presencia de sustancias txicas firmemente ligadas a los sedimentos,

entonces deben usarse los organismos bentnicos en contacto directo con los sedimentos.
Estas pruebas revelarn cualquier toxicidad de los sedimentos y tambin el potencial de
bioacumulacin de las sustancias txicas y su transferencia a travs de la cadena alimenticia.
Seleccin de especies
Algas
Las algas representan un componente importante de cualquier comunidad acutica porque

son el primer eslabn en la cadena alimenticia. Una sustancia txica no necesita ser
directamente txica a los peces y otros animales acuticos para impactar severamente sobre
la salud de un sistema acutico.
Ventajas y desventajas de las algas como organismos de prueba
Ventajas
Existen sustancias qumicas txicas para las algas tales como los herbicidas que
pueden reducir la productividad del agua receptora, pero que no afectarn a los
peces ni a los invertebrados.
Se detectar la presencia de nutrientes que pueden incrementar la eutroficacin y
resultar en la muerte de los peces y los invertebrados.
La prueba de algas ayudar a determinar cules descargas son los principales

contribuyentes de nutrientes y eutroficacin. Los nutrientes estimularn el crecimiento de
algas en el cuerpo receptor y resultarn en condiciones indeseables y toxicidad para los
peces a travs de los bajos niveles de oxgeno disuelto cuando el exceso de algas muere.
Existe informacin adecuada sobre cultivos y procedimientos de pruebas para muchas

especies estndares.
Los requerimientos de equipo y de espacio no son amplios ni costosos.
Una prueba completa crnica generalmente requiere slo de cuatro das.
Las tcnicas de cultivo y de pruebas son fciles de aprender.
La capacitacin necesaria sobre las tcnicas de cultivo es relativamente mnima y puede ser
aprendida frecuentemente de manuales y otra literatura, aunque es siempre preferible una
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capacitacin "prctica" dada por un tcnico experimentado.
Desventajas
Las sustancias qumicas que slo son txicas para animales no sern detectadas por
algas.
La numeracin de las algas en las soluciones de prueba al final del perodo de prueba
pueden ser largas y requerir tanto como un da completo para su realizacin.
Criterios para la seleccin de especies de algas
Caractersticas
Las especies "ideales" de algas para bioensayos deben tener las siguientes caractersticas:
Ser representativas de un eslabn importante en la cadena alimenticia
Muchas especies de algas verdes y diatomeas son alimento para el zooplancton y,

por lo tanto, son apropiadas para bioensayos. Otras especies, tales como el alga
filamentosa azul- verde, no son una buena fuente de alimento para organismos
superiores en la cadena alimenticia y frecuentemente son indeseables debido a los
problemas de sabor, olor y subproductos que son txicos para los animales.
Disponibilidad en cultivo puro
El aislamiento de un cultivo puro del agua natural requiere de mucho tiempo y

habilidad. Se recomienda una especie proveniente de un laboratorio de abastecimiento
algal.
Las algas crecern en una clula simple o en pequeos grupos de clulas

suspendidos en el agua.
La preparacin de las algas para la prueba requiere de una suspensin uniforme de

las clulas algales. Las formas filamentosas o las colonias grandes de clulas no
pueden prepararse fcilmente en una suspensin uniforme. Asimismo, el conteo
microscpico, una forma comn de determinar el crecimiento algal, no es posible con
formas filamentosas. Adems, las especies que crecen adheridas a superficies no son
tan deseables como las especies que crecen flotando libremente en el agua.
Suficiente informacin sobre requisitos para el crecimiento de nutrientes.
Las especies de algas varan en sus requisitos para cultivos, tales como nutrientes,
temperatura, luz y aeracin. Estos requisitos se establecen a travs de pruebas
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exhaustivas y los de muchas especies ya son conocidos. Se deben evitar las especies
de las que no se tiene tal informacin.
Fcilmente cultivables a temperatura ambiental.
Las especies algales que requieren soluciones complejas de nutrientes o condiciones

especiales de temperatura y luz complicarn innecesariamente el bioensayo.
Asimismo, deben evitarse las especies con perodos de descanso o ciclos complejos
de vida. Preferentemente, las especies de prueba deben mantenerse en una fase
vegetativa de crecimiento por perodos indefinidos de tiempo, cuando se les abastece
de solucin fresca de nutrientes regularmente.
Capaz de crecer en cultivos de agar
Los cultivos puros de algas pueden frecuentemente mantenerse por un ao o ms en

cultivos de agar dentro de un refrigerador oscuro. Las especies que se adaptan a
estas condiciones son deseables como un abastecimiento inmediato de cultivo puro y
pueden mantenerse siempre listas con poco esfuerzo.
Recomendaciones para las especies de prueba
Los ensayos algales se recomiendan adems de otras pruebas para consumo de oxgeno,
tales como DBO si la eutroficacin es un problema en el cuerpo de agua receptor.
Selenastrum capricornutum, es un alga verde unicelular, usada extensamente para

trabajo de bioensayos y de la que existe considerable informacin sobre sus
caractersticas de crecimiento y sus mtodos de cultivo. Tambin es apropiada como
alimento para invertebrados tales como Daphnia y, por lo tanto, puede tener un doble
propsito en el laboratorio. La U.S. EPA (1985) proporciona los mtodos de cultivo
y de prueba.
Cualquier especie que tenga las caractersticas requeridas puede usarse como un
organismo de prueba. Muchas algas verdes y diatomeas han sido usadas
satisfactoriamente, aunque hay una tendencia a preferir las algas verdes. Una especie
regional puede ser ms representativa de las poblaciones naturales que el Selenastrum
capricornutum.
Protozoos
Aunque los protozoos se cultivan fcilmente en el laboratorio, esta especie no hay sido
ampliamente aceptada como un organismo estndar para bioensayos. Probablemente esto es
debido a su pequeo tamao y a las dificultades asociadas con la determinacin de su
respuesta a la sustancia txica, por ejemplo, el nmero de individuos vivos versus el nmero
de muertos.
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Invertebrados
Los invertebrados son un grupo mucho ms diverso que las algas o los peces, con
diferencias dramticas en su forma fsica, sus caractersticas histricas de vida y sus
requisitos de cultivo.
Rotferos
Los rotferos son fcilmente cultivados en el laboratorio pero no han sido

ampliamente utilizados, probablemente debido a su pequeo tamao. Sin
embargo, recientemente se ha desarrollado una prueba que permite la eclosin
de los organismos de prueba de los huevos secos y la evaluacin de toxicidad
rpida. Hasta la fecha esta prueba no ha sido usada extensivamente.
Cladoceros
Los cladoceros, incluyendo dfnidos, estn dentro de los organismos ms

utilizados para bioensayos y son el grupo recomendado en este informe para
representar a los invertebrados.
Ventajas
Corto ciclo reproductivo
Los cladoceros son organismos partenogenticos, es decir, tienen la

habilidad de reproducirse sin machos. Esta habilidad simplifica
significativamente su uso como organismos para bioensayos porque su
perodo de reproduccin es corto y simple.
Representante de un eslabn intermedio importante en la cadena

alimenticia
El zooplancton, especialmente los "predadores" tales como dfnidos que

se alimentan de algas, es un eslabn importante entre los productores
primarios y los peces. Las comunidades acuticas pueden sufrir un dao
significativo por sustancias txicas, tales como sulfato de cobre, que son
ms txicas para el zooplancton que para los peces.
Alta sensibilidad a sustancias txicas en el agua
En general, se ha encontrado que los dfnidos son ms sensibles que los

peces a las sustancias txicas.
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Informacin extensa sobre tcnicas de cultivo
Los dfnidos, tales como Daphnia magna, Ceriodaphnia sp., han sido
usados ampliamente para pruebas de bioensayos y existe considerable
informacin sobre las tcnicas de cultivo y la sensibilidad a las sustancias
txicas. Los requisitos de temperatura, luz y nutrientes estn bien
definidos.
Las tcnicas de cultivo son relativamente simples
Como con las algas, la necesidad de capacitacin en las tcnicas de

cultivo es relativamente mnima, y puede aprenderse frecuentemente de
manuales y otra literatura, aunque la capacitacin "prctica" por un
tcnico experimentado es siempre preferible.
Los requerimientos de cultivo no son prohibitivos
El zooplancton es pequeo y requiere de poca agua comparado con los

peces. Los refrigeradores de temperatura regulada tales como los
usados para anlisis de DBO pueden usarse para su cultivo y prueba.
Pruebas de toxicidad crnica o de ciclo de vida pueden hacerse en 1 a 3

semanas
El ciclo de vida de los invertebrados es relativamente corto y se puede

monitorear su reproduccin dentro de un perodo corto. Aunque el
tiempo para un estudio crnico de invertebrados es mayor que para
algas, es considerablemente menor que para peces.
Se puede usar para pruebas de suelo y sedimento as como para

pruebas de agua
Los dfnidos son de libre natacin y, por lo tanto, son ms apropiados

para examinar agua y no sedimentos. Sin embargo, los dfnidos tambin
han sido usados satisfactoriamente con lixiviados de suelos y
sedimentos. La toxicidad del lixiviado se usa entonces para reflejar la
toxicidad del suelo o del sedimento.
Desventajas
Los dfnidos son los organismos preferidos y tienen pocas desventajas

comparados con otros organismos.
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Recomendaciones para las especies de prueba
Las especies comunes de prueba son Daphnia magna, D. pulex, D. similis y

Ceriodaphnia sp. Existe gran cantidad de informacin disponible sobre cultivo y
pruebas con estos organismos. La U.S. EPA (diciembre 1985 y marzo 1985)
proporciona mtodos de cultivo y de prueba.
Coppodos
Los coppodos no han sido extensamente usados como organismos para

bioensayos, aunque existen procedimientos y mtodos de cultivo para varias
especies. Los coppodos tienen reproduccin sexual (se requieren de machos
y hembras) y nadan muy rpidamente, haciendo difcil su captura. Es probable
que estas caractersticas hayan limitado su uso en bioensayos.
Camarones
Los camarones, particularmente algunas especies de aguas saladas y de

estuarios, tales como Mysidopsis sp., han sido usados extensivamente en
bioensayos agudos. Los organismos pueden ser cultivados en el laboratorio o
recolectados en el campo. Los camarones se reproducen sexualmente y por lo
tanto los mtodos de cultivo son algo ms complicados que para los
cladoceros. Sin embargo, se han cultivado camarones en forma satisfactoria en
el laboratorio.
Tambin existen camarones de agua salada en poblaciones grandes y de

monoespecies en muchas reas costeras, y la recoleccin de campo es un
mtodo satisfactorio para obtener organismos de prueba. Los adultos son
recolectados del campo y mantenidos en tanques. Los recin nacidos y las
hembras que tienen huevos en el momento de la recoleccin son usados en el
bioensayo.
Existen mtodos estndares de cultivo y pruebas agudas de 96 horas para

Mysidopsis sp. Estas directrices tambin pueden ser tiles si se selecciona una
especie diferente de camarn de agua salada. Adems, hay mtodos de cultivo
disponibles para otras especies, pero la M. sp. ha sido la ms utilizada. La U.S.
EPA (marzo 1985) proporciona mtodos de cultivo y de prueba.
Anlidos, insectos, moluscos y crustceos
Estos grupos tambin pueden usarse para pruebas de sedimento ya que las
formas son predominantemente bentnicas. En general, existe menos
informacin sobre cultivos y protocolos de bioensayos para organismos
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bentnicos que para especies plantnicas. Como ya se ha mencionado, las

pruebas para sedimento frecuentemente se realizan con especies plantnicas
preparando lixiviados o extractos de los sedimentos. Sin embargo,
especialmente si la bioconcentracin es una consideracin principal, es
importante usar un organismo que est en contacto directo con los sedimentos.
Los organismos bentnicos son frecuentemente apropiados para la recoleccin

de campo porque muchas especies pueden sobrevivir a los rigores de la
recoleccin y la transferencia al laboratorio mejor que los organismos
plantnicos. Asimismo, los organismos bentnicos son muy adecuados para las
pruebas in situ, particularmente para estudios de bioconcentracin. Una
consideracin importante es la disponibilidad de organismos suficientes en la
etapa apropiada del ciclo de vida.
Anlidos
Los anlidos no han sido muy usados para bioensayos de agua

dulce aunque las pruebas de agua salada con animales
recolectados en el campo son ms comunes. Existen protocolos
para cultivo y pruebas para ambos grupos.
Insectos
Los insectos acuticos son un grupo increblemente diverso de

organismos. La caracterstica ms sobresaliente relacionada a
bioensayo es que, en muchos casos, las larvas o los organismos
jvenes son acuticos, mientras que los adultos son terrestres y
areos. Esta caracterstica complica el proceso de cultivo de
laboratorio, aunque se han desarrollado mtodos exitosos para
especies tales como Chironomus sp.
Muchos insectos acuticos pueden recolectarse de ros o lagos y

transferirse al laboratorio satisfactoriamente. El problema principal
est asociado con los cortos ciclos de vida, lo que significa que la
etapa apropiada puede no estar disponible todo el ao.
Moluscos
Los moluscos incluyen caracoles, almejas y ostras. Los caracoles

no son estrictamente organismos bentnicos pero son apropiados
para bioensayos porque ellos pueden criarse en el laboratorio y
recolectarse del campo. Sin embargo, muy raras veces son
considerados como organismos estndares para bioensayos.
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Las almejas de agua dulce o salada son usadas ampliamente para

pruebas in situ, particularmente para exmenes de
bioconcentracin. Estos organismos pueden fcilmente transferirse
del campo al laboratorio, pueden encontrarse en grupos pluri o
monoespecficos, tienen un largo ciclo de vida adulta y se
alimentan filtrando el material dentro y fuera de los sedimentos.
Estas caractersticas hacen que las almejas sean apropiadas para
bioensayos en un rea especfica. Sin embargo, su limitado xito
en el cultivo de laboratorio significa que los adultos de almejas y
ostras probablemente no son una buena eleccin para un
programa estndar ampliamente aplicado.
Existen protocolos para pruebas con larvas. Las adultas se

recolectan en el campo y en el laboratorio se induce la produccin
de larvas de natacin libre. Estas tcnicas han sido usadas
satisfactoriamente y frecuentemente son seleccionadas para
pruebas con agua salada en las que el nmero de organismos de
natacin libre para bioensayos est ms limitado que en agua
dulce. Sin embargo, las larvas no estn en contacto con los
sedimentos si no son de natacin libre.
Crustceos
Los anfpodos son crustceos bentnicos que han sido usados

satisfactoriamente en bioensayos, principalmente, recolectados del
campo. Si una fuente de anfpodos es identificada, existe
suficiente informacin en la literatura para desarrollar protocolos
para su examen.
Peces
Los peces todava estn considerados por muchos toxiclogos acuticos como los
organismos de prueba ms apropiados porque tienen la importancia ms directa a los seres
humanos. Los peces ofrecen la ventaja adicional de permitir anlisis biolgicos ms
sofisticados tales como estudios histolgicos y patolgicos. Adems, debido a que los peces
son consumidos directamente por los seres humanos, la informacin acerca de la
concentracin de las sustancias txicas en sus tejidos es un componente importante de un
programa toxicolgico.
Existen muchos protocolos de bioensayos para peces en diferentes etapas de su ciclo de

vida, incluyendo pruebas para su primera edad, para huevos y larvas, as como para su
crecimiento a largo plazo y su reproduccin.
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Ventajas y desventajas de peces como organismos de bioensayos
Ventajas
El nivel ms alto de la cadena alimenticia y el predictor ms directo de la salud de una

comunidad acutica
La seleccin de una especie de peces de importancia econmica clave como

organismo para bioensayos permite una extrapolacin directa de toxicidad al impacto.
Mientras que, si el objetivo del bioensayo es proteger los peces, el uso de algas o
invertebrados siempre conllevar un alto grado de incertidumbre.
Puede usarse para estudios toxicolgicos ms sofisticados que los invertebrados o

algas
La toxicologa de los peces es extensa porque los efectos, tales como la qumica de la
sangre, los tejidos corporales y los rganos, puede fcilmente ser estudiada, mientras
que estos tipos de estudios no son posibles en invertebrados.
Desventajas
Requieren un laboratorio de temperatura controlada y un abastecimiento inmediato de

grandes volmenes de agua de prueba
Requieren de un conocimiento muy profundo de las tcnicas de cultivo y de prueba
Sus caractersticas de largo plazo de reproduccin e historia de crecimiento de vida
reprimen este tipo de pruebas
Recomendaciones
Un programa toxicolgico completo debera incluir pruebas con peces. La prueba

actualmente recomendada es una de larvas de peces de 7 das que proporciona datos
crnicos en un corto perodo de tiempo. Los peces jvenes representan un componente
sensible y clave de cualquier sistema acutico. La informacin adecuada sobre cultivos de
laboratorio y la facilidad de inducir la reproduccin en el laboratorio son necesarias para esta
prueba. La U.S. EPA (diciembre 1985, marzo 1985) proporcionan detalles de los mtodos
de prueba y de cultivo. Rand, et al. (1985) proporciona una revisin de las capacidades de
prueba.
Referencias
1. BUIKEMA, A.L.; NEIDERLEHNER, B.B. y CAIRNS, J. Jr. 1982. Biological
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monitoring. Part IV - Toxicity testing. Water Research, Vol. 16, pp. 239-262.
2. RAND, G.M. y PETROCELLI, S.R. 1985. Fundamentals of aquatic toxicology.
McGraw- Hill International Book Company, Ciudad de Mxico y Sao Paulo.
3. *U.S. ENVIRONMENTAL PROTECTION AGENCY. Diciembre de 1985.
Short-term methods for estimating the chronic toxicity of effluents and receiving waters
to freshwater organisms. EPA/600/4-85/014.
4. *U.S. ENVIRONMENTAL PROTECTION AGENCY. Marzo de 1985. Methods
for measuring the acute toxicity of effluents to freshwater and marine organisms.
EPA/600/4- 85/013.
________________
* Disponibles de: National Technical Information Service
U.S. Department of Commerce

5285 Port Royal Road
Springfield, Virginia 22161, U.S.A.
Dra. Linda L. Henry, Ph.D.

BCM Engineers, Inc.
1 Plymouth Meeting
Plymouth Meeting, PA 19462
U.S.A.
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SUPERFICIALES
Anexo 5.A.II: Problema Ejemplo: Anlisis de datos

Preparado por: Ing. Enrique Ortz
Profesional Joven Residente, CEPIS
SEDUE, Mxico
Concentraciones de plomo presentes en las aguas del ro Rmac (Per) durante la campaa de
muestreo realizada del 9-83 al 10-86, siguiendo los pasos presentados en la Seccin 5.11.
PASOS 1, 2, 3 y 4:
DATOS DE PLOMO EN EL RIO RIMAC

Punto 1 (km 73)
No. Pb ln
(m/n+1) 100
(m) (mg/l) (Pb)
1 0,036 -3,32 7,14
2 0,060 -2,81 14,29
3 0,083 -2,49 21,43
4 0,097 -2,33 28,57
5 0,100 -2,30 35,71
6 0,120 -2,12 42,86
7 0,200 -1,61 50,00
8 0,300 -1,20 57,14
9 0,390 -0,94 64,29
10 0,500 -0,69 71,43
11 0,830 -0,19 78,57
12 0,940 -0,06 85,71
13 1,800 0,59 92,86
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PASOS 5 y 7 (ver en hoja grfica)
PASO 7:
Clculo de ln X0,05, ln X0,50, ln X0,84 y ln X0,95 a partir de laFigura 5.A.II.1:
ln X0,05 = -3,58 ln X0,50 = -1,44 ln X0,84 = -0,15 ln X0,95 = 0,71
PASO 8:
Clculo de la mediana (igual al promedio) y de la desviacin estndar de los logaritmos naturales:
Mlnx = lnx = ln X0,50 = -1,44 ....(5.12)
lnx = ln X0,84 - ln X0,50 ........(5.13)
lnx = -0,15 - (-1,44) = 1,29
2lnx = 1,66
PASO 9:
Clculo de los valores estadsticos (mediana, promedio y varianza) de los datos originales no
transformados.
Mx = exp lnx ...........(5.8)
Mx = exp (-1,44) = 0,24
(x) = exp [lnx + (1/2) 2lnx ] ...........(5.9)
(x) = exp [-1,44 + (1,66/2)] = 0,54
2x = [exp (2lnx + 2lnx)] [exp 2 - 1] ......(5.10)
2 x = [exp (2(-1,44) + 1,66)] [exp 1,66 - 1]
2 x = 1,26
x = 1,12
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PASO 10:
Clculo de los percentiles X0,05 y X0,95 de los datos originales no transformados.
X0,05; 0,95= exp [lnx : 1,64 lnx] .........(5.11)
X0,05; 0,95= exp [-1,44 + 1,64 (1,29)]
X0,95 = 1,9652
X0,05 = 0,0286
RESUMEN:
X0,05 = 0,0286
Mx = 0,24
(x) = 0,54
x = 1,12
2x = 1,26
X0,95 = 1,9652
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SUPERFICIALES
5.10 Experimentos en laboratorio

Para un estudio de una sustancia qumica txica en un lugar especfico, el mejor mtodo para
obtener los coeficientes de reaccin y de transferencia para el modelo es a travs de experimentos
directos usando agua y sedimentos del lugar. Estos experimentos de laboratorio incluyen:
a. Particin de los slidos

b. Degradacin
c. Toxicidad
d. Factor de bioconcentracin para peces residentes.
Si no se dispone de datos en la literatura, deben determinarse los siguientes parmetros a travs de

experimentos de laboratorio:
a. Constante de Henry
b. Coeficiente de particin octanol-agua.
En cada uno de estos experimentos se debe tener cuidado al aislar el proceso en estudio. Se debe
seguir la siguiente orientacin:
(1) Particin con slidos:
1. Use un recipiente cerrado para evitar la prdida de la sustancia qumica por volatilizacin.
2. Use tiempos de equilibrio de 2 a 4 horas para minimizar la prdida de sustancia qumica
debido a reacciones.
3. Conduzca experimentos con diferentes concentraciones de slidos para determinar si el
coeficiente de particin vara con dicha concentracin.
(2) Prdidas:
a. Use un recipiente cerrado para impedir la volatilizacin

b. Para determinar la hidrlisis (vase tambin la Seccin 4.5.2.1c):
1. Esterilice el sistema para eliminar la degradacin biolgica.
2. Cubra el recipiente de la experimentacin para eliminar la fotlisis.
c. Para determinar la fotlisis (vase tambin la Seccin 4.5.2.1b):
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1. Esterilice el sistema.
2. Coloque el recipiente de la experimentacin a la luz del sol en el cuerpo de agua
sometido a estudio.
3. La duracin de la prueba debe ser de un mltiplo de das completos para obtener una
tasa diaria integrada.
4. Las pruebas deben llevarse a cabo en das con sol y en das nublados.
5. La tasa de fotlisis es igual a la tasa de prdida total menos la tasa de hidrlisis.
d. Para determinar la biodegradacin (vase tambin la Seccin 4.5.2.1d):
1. Cubrir el recipiente experimental
2. La tasa de biodegradacin es igual a la tasa de prdida total menos la tasa de
hidrlisis.
(3) Bioconcentracin: (vase tambin la Seccin 4.6.1).
a. La exposicin total del animal a la sustancia qumica (agua y alimento) tiene que ser
cuantificada.
b. La duracin de las pruebas debe ser tal que el animal alcance o est cerca de llegar al
equilibrio final.
c. Los cambios de peso durante el experimento deben ser determinados de modo que el factor
de bioconcentracin pueda ser adaptado al crecimiento del animal.
Los procedimientos especficos para cada experimento en laboratorio son presentados en varias
publicaciones. Los ejemplos representativos por experimento son:
a. Particin con slidos - Karickhoff y Brown, 1979

- Karickhoff, et al. 1979
- Horzempa y Di Toro, 1983
- Di Toro, et al. 1986
b. Hidrlisis
c. Fotlisis - Miller, et al. 1980

d. Biodegradacin
e. Bioconcentracin
f. Constante de Henry - Mackay, et al. 1979
g. Coeficiente de Particin- Karickhoff y Brown, 1979 octanol-agua
- Armstrong, et al. 1980
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SUPERFICIALES
5.11 Anlisis y presentacin de datos
Datos del Tipo "por debajo del lmite de deteccin"

Calculo de la media "ajustada"
Calculo de la madia y el desvo estndar "Windsorized"
Los datos de sustancias qumicas en cuerpos de agua naturales tienden a ser muy variables en
espacio y tiempo. En general, se pueden considerar los datos distribuidos de acuerdo a una
distribucin de probabilidad log-normal y como tal, es ventajoso analizar los datos usando aquella
distribucin. La funcin de probabilidad log-normal es dada por:
2
1 1 x
f(x) = --------- exp[ - 1/2 (---- ln [--] )]........(5,7)
x PI2 M
lnx lnx x
donde:
lnx = la desviacin estndar de los logaritmos de x,
M = la mediana = exp ...............(5.8)

x lnx
donde:
lnx = es el promedio del logaritmo de x
El valor promedio de la variable no transformada es entonces:
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1 2
= exp [ + --- ] ......... (5.9)
(x) lnx 2 lnx
La varianza es
2x = exp[2lnx + 2lnx ][exp 2lnx - 1] ..........(5.10)
Los niveles de 5 y 95% son:
x0,05;0,95= exp[2lnx 1,64 lnx] ........(5.11)
Mientras que estos clculos suministran estimados de los parmetros estadsticos relevantes, es til
graficar los datos de la sustancia qumica en hoja de probabilidad log-normal y estimar la mediana
(igual al promedio) y la desviacin estndar de los logaritmos de los datos.
Para graficar los datos en la hoja de probabilidad log-normal, se sugiere lo siguiente:
1. Disponer los datos en orden creciente.

2. Calcular los logaritmos naturales de los datos.
3. Asignar un nmero ndice consecutivo, m, a cada valor (m = 1, 2, .... n, donde n es el
nmero de datos).
4. Para cada uno de los datos, calcular su posicin en el grfico (por ejemplo, el porcentaje de
valores iguales o menores) por medio de la expresin:
m
p = ------- 100 ................ (5.12)
(n+1)
5. Graficar el n de los datos versus [(m/n+1) 100] en una hoja de probabilidad.

6. Ajustar los puntos de la grfica a una lnea recta.
7. Calcular por medio de interpolacin los logaritmos naturales de los siguientes percentiles:
X0,05, X0,50, X0,84, X0,95.
8. Estimar el valor de la mediana (igual al promedio) y de la desviacin estndar de los
logaritmos naturales de los datos a partir de las siguientes ecuaciones y del grfico
(ver
Figura 5.5):
Mlnx = lnx = ln X0,50 ........(5.12)
lnx = ln X0,84 - ln X0,50 .......(5.13)
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9. Calcular los valores estadsticos (mediana, promedio y varianza) de los datos originales no
transformados por medio de las Ecuaciones 5.8, 5.9 y 5.10, respectivamente.
10.Calcular los valores de los percentiles 5% y 95% de los datos originales no transformados
por medio de la Ecuacin 5.11.
La Figura 5.5 ilustra el grfico final. Con fines de presentacin, se sugiere que el promedio, la
mediana y los percentiles de 5 y 95% sean graficados versus la distancia o tiempos considerados.
La Figura 5.6 ilustra esquemticamente el grfico. Es claro que se pueden tambin determinar
otras pruebas estadsticas para representar el comportamiento de la sustancia qumica en estudio.
En el Anexo 5.A.II de esta seccin se incluye un ejemplo ilustrativo del anlisis y presentacin de
los datos.
Datos del tipo "por debajo del lmite de deteccin"

Debido a las bajas concentraciones en que se encuentran algunas sustancias qumicas de inters,
los datos son frecuentemente reportados como "por debajo del lmite de deteccin". Estos datos
pueden ser tratados de la misma manera que en el anlisis precedente, arreglando los "datos por
debajo del lmite" al principio de la serie ascendente de datos. En la medida en que hay una
cantidad suficiente de datos por encima del lmite de deteccin, es todava posible estimar la
mediana y desviacin estndar de los logaritmos de los datos. La Figura 5.7 muestra una grfica
tpica en la cual los "datos por debajo del lmite" han sido incluidos.
Clculo de la media "ajustada" (Gilbert, 1987)

Una alternativa para el cmputo de datos "menores que el lmite de deteccin" o "trazas" es el
clculo de media ajustada a 100p%, donde O p 0,50. Para ello se calcula la media aritmtica de
los n(1 - 2p) datos remanentes luego de la eliminacin de los valores mayores y menores que el
producto np.
Si el nmero de valores reportados como "menor que" o "trazas" es menor que np, luego se
puede calcular la media ajustada. El rango sugerido para p es 0,15 a 0,25. Si los datos son de tipo
log-normal, emplear logaritmos.
Como ejemplo supongamos que tenemos n = 27 datos de una distribucin simtrica con una media
real. Si queremos estimar empleando una media ajustada al 25%, hacemos el producto np igual a
6,75. Luego se descartan los seis valores superiores e inferiores de la serie. La media aritmtica de
los valores de los 15 datos restantes es un estimado de.
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Clculo de la media y de la desviacin estndar "Windsorized"

Otra tcnica para evaluar la media y el desvo estndar de una distribucin simtrica, cuando pocos
datos de la serie son menores que el lmite de deteccin o trazas, es la siguiente (Gilbert, 1987):
1. Reemplazar los valores "menores que" por el primer valor reportado por encima del lmite
de deteccin.
2. Reemplazar una cantidad equivalente de los valores superiores por el primer valor numrico
inferior a stos.
3. Calcular la media de la muestra xw y la desviacin estndar, S, del nuevo conjunto de datos.
4. La nueva desviacin estndar estar dada por:
S (n - 1)
Sw = -----------
v - 1
donde n es el nmero total de datos y v es el nmero de datos no reemplazados. Si la distribucin

de los datos es log-normal, este procedimiento puede ser aplicado a los logaritmos de los datos y
luego se deben emplear las transformaciones para calcular la media y el desvo estndar.
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SUPERFICIALES
5.2 Propiedades de las sustancias qumicas

Como se puntualiz previamente en la secciones 3 y 4 algunas informaciones bsicas sobre las
propiedades de sustancias qumicas en general y de sustancias orgnicas en particular, son
necesarias para iniciar la evaluacin de la naturaleza y extensin del programa de muestreo y
monitoreo. Las propiedades bsicas de las sustancias qumicas orgnicas incluyen:
1. Nombre qumico de la sustancia

2. Nombre comercial
3. Frmula estructural
4. Frmula molecular
5. Masa molecular
6. Punto de fusin
7. Presin de vapor
8. Solubilidad en agua
9. Coeficiente de particin octanol-agua.
Adems de esas propiedades, es conveniente contar con informacin sobre lo siguiente:
1. Constante de Henry
2. Productos de degradacin y conversin
3. Tasa de hidrlisis
4. Tasa de fotlisis
5. Tasa de biodegradacin
6. Coeficiente de particin slidos-agua
7. Factor de bioconcentracin
Algunas fuentes que pueden suministrar en parte esta informacin incluyen:
1. Handbook of Chemical Property Estimation Methods (Lyman et al. 1982)

2. Pesticide Index (Wiswesser, 1976)
3. Treatability Manual (U.S. EPA, 1980)
4. Water Quality Assessment (Mills et al. 1982)
5. Handbook of Environmental Data on Organic Chemicals (Verschueren, 1983)
6. Water-Related Environmental Fate of 129 Priority Pollutants Volumes I and II (Callahan, et
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al. 1979)
En algunos casos, puede ser necesario llevar a cabo experimentos de laboratorio para determinar
ciertas propiedades en condiciones locales especficas, tales como el tipo y concentracin de
slidos, poblacin de microbianas y plantas y animales acuticos. Estas pruebas especficas de
laboratorio sern discutidas ms adelante en la
Seccin 5.10.
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SUPERFICIALES
5.3 Escalas de espacio y tiempo

Prosiguiendo con la determinacin de las propiedades de las sustancias qumicas y con la revisin
del marco analtico de la sustancia qumica bajo estudio, el prximo paso consiste en una
evaluacin de las escalas de espacio y tiempo bajo las cuales se deber conducir el programa de
muestreo. La Seccin 3.2 de este manual contiene este aspecto para una evaluacin preliminar del
problema.
La principal interrogante para este propsito es:
"En qu extensin, en qu lugares y con qu frecuencia debern ser colectadas las muestras"?
Escala de espacio
Escala de Tiempo
Escalas de espacio
Para la determinacin de la escala de espacio apropiada sobre la cual se van a colectar las
muestras, deben tomarse en cuenta las siguientes escalas:
a. Zona de mezcla local - 0,1 a 1-5 Km

b. Escala regional - 1-5 a 10-50 Km
c. Escala de cuenca - 50 Km
Zona de mezcla.La zona de mezcla local es la regin donde se permite que la concentracin de la
sustancia qumica exceda un estndar especfico de calidad de agua. El muestreo debe realizarse
lateralmente a travs del ro o radialmente extendindose hacia afuera de las orillas de un lago, a fin
de describir la extensin de espacio en que se puede efectuar la hiptesis de mezcla completa.
Puede ser necesario realizar un muestreo local tan detallado una o dos veces, a fin de describir la
zona de mezcla.
Escalas regional y de cuenca.Para un ro, la ecuacin bsica de estado permanente que describe
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la distribucin longitudinal de una sustancia qumica ha sido descrita en las secciones 3 y 4. La

ecuacin es:
Tv x
cT = c exp (- --- --- ) = To
c exp (-KT t) ..............(5.1)
H U
Se hace notar que la distribucin depende de la tasa neta de prdida de las sustancias qumicas y
de la hidrologa del ro (profundidad y velocidad). La concentracin mxima (admitiendo mezcla
completa) ocurre en el punto de descarga.
Por lo tanto, la extensin de la escala regional en la cual se conducir el muestreo longitudinal, se

determinar por medio de tres factores principales:
a. Lugares crticos de probable interferencia de la descarga con el uso del agua, tales como
puntos de toma de agua para abastecimiento pblico o impactos locales sobre el ecosistema
acutico;
b. Si hay ms de una fuente descargando sustancias txicas a lo largo del ro, y
c. La velocidad del ro y la tasa neta de prdida de la sustancia qumica.
Si no existen puntos crticos o potenciales aguas abajo de la descarga y si no hay otra fuente
significativa sobre el cuerpo de agua, entonces puede ser necesario solamente un programa de
muestreo cerca de la descarga para describir la zona de mezcla y las concentraciones mximas.
No obstante, si existen puntos de toma de agua para abastecimiento (u otras reas de usos crticos
de agua) aguas abajo de la descarga, sera necesaria una evaluacin de la distancia longitudinal en
la cual debe realizarse el muestreo. Esta evaluacin puede efectuarse basada en lo descrito en las
Secciones 3.2 y 3.4.
Si es necesario el muestreo aguas abajo de la descarga, las estaciones de muestreo debern

situarse aguas arriba y aguas abajo de todas las principales fuentes puntuales, fuentes dispersas y
entrada de afluentes tributarios. Esto se ilustra enFigura
la 5.2, la cual tambin indica que una
estacin deber estar localizada en el punto de toma de agua para abastecimiento, as como en el
lugar de distribucin al consumidor.
Escalas de tiempo
Las consideraciones para determinar cundo y con qu frecuencia muestrear incluyen:
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a. Los efectos agudos de las sustancias txicas descargadas en un corto perodo ( 1-4 das);
tales fluctuaciones pueden impactar el ecosistema acutico o dar como resultado altas
concentraciones al entrar en un sistema de distribucin de agua;
b. Los efectos crnicos de sustancias txicas (esto es, semanas a meses) sobre la salud pblica
o ecosistema acutico; y
c. La posible acumulacin a largo plazo de la sustancia qumica en los sedimentos, con una
subsecuente reaparicin potencial por resuspensin o difusin desde los sedimentos.
En la Seccin 3.2.2 se discuten estos factores.
Por cuestiones de naturaleza prctica, no es usualmente factible muestrear sobre toda la escala de
tiempo debido a limitaciones de costos y de recursos humanos. Si se conoce que los vertidos en el
rea de estudio varan en forma de "pulso" (como por ejemplo escurrimiento de reas agrcolas
luego de una aplicacin espordica de plaguicidas), las investigaciones de campo deben ser
realizadas precisamente antes, y continuar por un perodo de varios das posteriormente.
Como gua general, las investigaciones de campo deben llevarse a cabo a escalas de espacio
intensivas y en forma semanal o bisemanal, varias veces al ao. Las investigaciones estacionales
deben realizarse durante perodos de bajo flujo y durante perodos de erosin potencial de
sedimentos, si hay particin de la sustancia qumica a los slidos suspendidos.
Es preferible este esquema de monitoreo, en el cual se realizan varios muestreos intensivos durante
el ao, a un programa de monitoreo ms disperso a lo largo del ao y con pocas estaciones. Para
cubrir los intervalos entre los muestreos intensivos, se pueden mantener varias estaciones clave de
monitoreo o de control, con muestreos semanales durante el ao. Sin embargo, se debe recordar
que los anlisis de laboratorio para la mayora de las sustancias txicas son complejos y que la
especificacin de una cantidad excesiva de muestras puede resultar una actividad irrealista para
una determinada situacin.
Asimismo, como se observar ms adelante, la colocacin de biomonitores en el campo, tales

como peces o crusteos, permite obtener una muestra integrada por un perodo ms largo (por
ejemplo, semanas) con un esfuerzo considerablemente menor que efectuar una muestra compuesta
a partir de muestras individuales sacadas en el mismo lapso.
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SUPERFICIALES
5.4 Descargas
Luego de haber determinado las escalas de espacio y tiempo adecuadas, debe considerarse el
muestreo de las descargas al sistema hdrico. Los tipos generales de descargas son:
a. Fuentes puntuales - continuas o intermitentes

1. Descargas de residuos domsticos y municipales
2. Descargas de residuos industriales
b. Fuentes dispersas - continuas o intermitentes
1. Escorrentas de reas agrcolas
2. Escorrentas de reas urbanas y suburbanas
3. Aportes atmosfricos
Para los efluentes de fuentes puntuales en estudios de sustancias txicas, sera conveniente efectuar
estimados o mediciones de:
a. Masa de sustancias qumicas usadas o producidas

b. Flujo
c. Conductividad, cloruros
d. Slidos suspendidos totales
e. Concentracin total de sustancia(s) qumica(s) bajo estudio
f. Concentracin disuelta de sustancia(s) qumica(s)
g. Toxicidad total del efluente
Como se explic anteriormente, si la descarga incluye una mezcla de muchas sustancias qumicas,
entonces se deber medir la toxicidad total del efluente. El uso de mediciones de toxicidad se
discute en ms detalle en las Secciones 3.1 y 5.5.
Como informacin adicional bsica, es frecuentemente til incluir en el muestreo de la fuente

puntual los parmetros ms tradicionales como:
a. Temperatura
b. Demanda bioqumica de oxgeno (DBO)
c. Oxgeno disuelto (OD)
d. Serie de nitrgeno (amonio, nitrito, nitrato)
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Estas mediciones pueden ser necesarias si, por ejemplo, los bajos valores de oxgeno pueden estar
agravando un problema de sustancias txicas. Para las fuentes dispersas, en particular las de tipo
intermitente que tienden a estar asociadas con escorrentas agrcolas y urbanas producidas por
precipitaciones, debe realizarse un esfuerzo para medir la descarga durante estos eventos
transitorios. Por lo tanto, para las descargas de fuentes dispersas debern realizarse mediciones de:
a. Tasas de aplicacin o uso de sustancia(s) qumica(s)

b. Precipitacin
c. Escorrentas
d. Conductividad, cloruros
e. Slidos suspendidos totales
f. Forma total y disuelta de la(s) sustancia(s) qumica(s)
g. Toxicidad
Si los aportes atmosfricos se consideran significativos (como por ejemplo, en lagos o en la

proximidad de altas concentraciones atmosfricas en reas agrcolas o industriales), pueden
requerirse mediciones de:
a. Concentracin de partculas en la atmsfera

b. Concentracin de la(s) sustancia(s) qumica(s) en las partculas
c. Concentracin de la(s) sustancia(s) qumica(s) en la fase de vapor
En algunos casos puede ser necesario el uso de reas experimentales de terreno para medir el
aporte de carga txica en condiciones controladas. Midiendo toda la carga txica que entra y que
sale de una cuenca experimental, se puede disponer de bases para extrapolar los resultados a
reas ms extensas de la regin de estudio.
Las reas experimentales pueden ser del orden de 1-10 hectreas o ms. Un lote de tierra en el
cual no se aplican sustancias qumicas es usualmente necesario para el control.
Se instalan equipos para mediciones de lluvia y de escorrenta superficial (por ejemplo, vertederos)
a efectos de medir el coeficiente de escorrenta para las condiciones de suelo existentes en el rea.
Se emplean tasas conocidas de aplicacin o de aporte de sustancias qumicas (por ejemplo,
plaguicidas), y las concentraciones de sustancias txicas (total y disuelta) se miden en el agua de
salida. Estos resultados experimentales pueden suministrar algunas relaciones empricas sencillas
entre tasas de aplicacin o de aporte y las cargas de sustancias qumicas que resultan en el agua
de salida (vase la Seccin 3.3.2).
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SUPERFICIALES
5.5 Toxicidad
El enfoque principal en el anlisis de sustancias qumicas txicas en aguas naturales es la
evaluacin del impacto potencial de dicha sustancia sobre la poblacin humana expuesta y sobre el
ecosistema acutico. Para la descarga de una nica sustancia qumica, las concentraciones
calculadas por el modelo pueden ser comparadas con datos toxicolgicos para evaluar su
impacto. No obstante, cuando varias sustancias qumicas estn presentes en el cuerpo de agua, la
interaccin toxicolgica entre estas sustancias puede invalidar los datos de toxicidad de las
sustancias aisladas. Adems, la elaboracin de un inventario completo de las sustancias qumicas
presentes y sus concentraciones individuales puede resultar difcil o imposible de realizar. Para
estos casos, puede ser til la determinacin de la toxicidad total de las descargas al cuerpo de
agua y tambin la del cuerpo de agua mismo. Esta medicin de toxicidad puede emplearse para
evaluar el significado de cada descarga en el cuerpo de agua. Tambin puede ser utilizada como
variable de calibracin en un modelo de toxicidad.
Mount et al. (1984) ha desarrollado procedimientos experimentales para medir efectos agudos y
crnicos de sustancias qumicas txicas en dos organismos indicadores: Ceriodaphnia y "fathead
minnow". Se define una serie de diluciones de muestras de agua (muestras de descargas o de agua
de ro). Los organismos introducidos en estas diluciones son monitoreados para un efecto
especfico tal como mortalidad o disminucin de la fecundidad. Los resultados de estas pruebas
son empleados para determinar la dilucin de la descarga, o de la muestra del cuerpo de agua, de
la cual se espera un efecto especfico en 50% de los animales expuestos (esto es, EC50 para un
efecto subletal, LC50 para un efecto letal o NOEL para el nivel en que no se observa ningn
efecto). (Vase tambin la Seccin 3.1).
Las diluciones correspondientes a EC50 o LC50 o NOEL pueden convertirse en una medida ms
til llamada Unidad de Toxicidad (TU):
TU = 100/(EC50 o LC50 o NOEL) .................. (5.2)
Las unidades de toxicidad son una medicin de la toxicidad de una muestra en mltiplos de EC50
o LC50 o NOEL. La ventaja de las unidades de toxicidad es que stas pueden ser tratadas de
forma anloga a unidades de concentracin cuando se hacen clculos de dilucin u otro clculo de
balance de masa como en los modelos de calidad de agua (vase la Seccin 3.4).
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Las unidades de toxicidad deben determinarse para todas las descargas a cuerpos de agua que se
sospeche sean txicas y tambin en estaciones de muestreo del mismo. Las estaciones de muestreo
en el cuerpo de agua deben ser colocadas de forma tal que se permita obtener un perfil espacial de
la toxicidad en el cuerpo de agua. De esta forma, se puede efectuar una comparacin cuantitativa
del perfil de toxicidad en el ro con la toxicidad de las descargas, a fin de evaluar la importancia de
cada descarga individual. Para esta comparacin, las unidades de toxicidad en cada descarga
deben convertirse en unidades de masa, multiplicndolas por el caudal correspondiente a la
descarga.
La U.S. EPA (1985) desarroll un procedimiento de seleccin que puede ser utilizado para
comparar descargas en cuerpos de agua en trminos de sus impactos txicos potenciales. Esta
seleccin se basa en la comparacin entre el caudal de las aguas receptoras (un caudal mnimo de
diseo) y el caudal de la descarga, expresada como razn de dilucin para el efluente. Los pasos a
seguir en este procedimiento se resumen a continuacin:
(1) razn de dilucin 10 000 a 1:

baja prioridad para estudios de toxicidad (2) razn de dilucin entre 1000 a 1 y 10 000 a 1:
realizar un cuadro de toxicidad aguda como sigue:
a. colectar de 4 a 6 muestras del efluente en un da;

b. para cada muestra, realizar bioensayos agudos durante 24 horas con efluente de
concentracin 100%, usando daphnia y peces;
c. si se presenta mortalidad mayor o igual al 50% en 3 o ms muestras, se requiere efectuar
pruebas posteriores.
(3) razn de dilucin entre 100 a 1 y 1000 a 1:

realizar un cuadro de toxicidad crnica por 7 das como sigue:
a. colectar 4 a 6 muestras compuestas del efluente de 24 horas por un perodo de 4 a 6 das

consecutivos;
b. para cada muestra realizar bioensayos crnicos con efluente de concentracin 100%,
usando cladoceros y peces;
c. si se observa un efecto del 50% o ms entre los organismos de control y los testigos, se
requiere realizar pruebas posteriores.
(4) tasa de dilucin 100 a 1:

En lugar de realizar los cuadros de sondeo como en los casos anteriores, hacer una caracterizacin
completa de toxicidad.
Los procedimientos para una caracterizacin completa de toxicidad se presentan en el documento

de U.S. EPA (1985). Estos procedimientos incluyen pruebas intensivas de bioensayos con una
variedad de organismos en un esfuerzo por reducir las incertidumbres en la evaluacin de
toxicidad.
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Para informacin adicional sobre tcnicas, metodologas y organismos adecuados para pruebas de
bioensayos, hacemos referencia a los siguientes documentos:
ORTIZ, E., et al. 1988. Manual para bioensayos con cladoceros. Incluye informacin
detallada sobre planificacin y realizacin de bioensayos, as como sobre la biologa de las
especies. Claro y fcil de entender para el no especialista.
GOULDEN y HENRY, L. 1987. Recoge la metodologa detallada sobre el cultivo de
Daphnia sp para las pruebas de toxicidad.
COMISION PERMANENTE DEL PACIFICO SUR (CPPS). 1988. Documento interesante
que resume el Curso Regional organizado por esta Comisin en conjunto con otros
organismos internacionales (PNUMA/LOI/FAO) sobre bioensayos y pruebas de toxicidad
con organismos marinos.
HENRY, L. 1988. Se trata de un breve informe que proporciona informacin til acerca de
los criterios de seleccin y las ventajas y desventajas del uso de los principales grupos de
organismos para pruebas de bioensayos. Se adjunta como Anexo 5.A.I.
TREVORS y LUSTY. 1985. Presenta un programa para computador personal en lenguaje
BASIC para calcular la dosis letal en bioensayos.
Se puede efectuar un anlisis cuantitativo de toxicidad a un cuerpo receptor, aplicando un modelo

de destino a la toxicidad descargada al mismo. Resulta complicado desarrollar un modelo de
toxicidad ya que su comportamiento en un cuerpo de agua depende del tipo de sustancia qumica
descargada y de la interaccin de estas sustancias con otras ya presentes en el mismo. Un anlisis
de toxicidad en el ro Naugatuck en Connecticut fue moderadamente exitoso (Di Toro y Hallden,
1985) y es la nica aplicacin disponible de un modelo de toxicidad en cursos de agua.
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SUPERFICIALES
5.6 Transporte
Flujo de Agua
Velocidad y dispersin
Flujo de agua
El flujo de agua en ros se determina por la hidrologa de la cuenca del ro y las prcticas
operacionales de las estructuras de control tales como presas. La variacin del flujo a lo largo del
ao tiene un efecto significativo en las concentraciones de sustancias txicas en el ro. La relacin
entre concentracin y flujo depender de tres factores:
1. el tipo de descarga (fuente puntual vs. fuente dispersa): Para una fuente puntual la dilucin
de la descarga causa disminucin de la concentracin en la medida que el caudal aumenta
(vase la Seccin 3.4.1). Debido a que una sustancia qumica que se origina en una fuente
dispersa es arrastrada por la escorrenta, las concentraciones tienden a aumentar con el
caudal. Sin embargo, la relacin entre concentracin y caudal es complicada por diversas
razones:
a. el rea en la cual se origina la sustancia qumica puede representar apenas una parte
del rea de drenaje total de la cuenca. Las variaciones en la precipitacin dentro de la
cuenca tenderan a confundir cualquier relacin general con el caudal.
b. la sustancia qumica puede estar presente en la cuenca apenas parte del ao. Las
concentraciones tienden a aumentar despus de un evento hidrolgico solamente
durante aquella parte del ao. Los plaguicidas y herbicidas son sustancias qumicas
que siguen ese comportamiento.
2. grado de adsorcin de la sustancia qumica a los sedimentos: Como se vi en las Secciones
3 y 4, las sustancias qumicas que se adsorben a los slidos tienden a acumularse en los
sedimentos. Cuando el sedimento es erosionado y conducido a la columna de agua, la
sustancia qumica asociada al sedimento es tambin conducida a la columna lquida y la
concentracin aumenta. Como resultado, la relacin tpica entre descarga y concentracin
para una fuente puntual de una sustancia qumica que se adsorbe, es un decaimiento inicial
en la concentracin seguido de un crecimiento en la medida que el caudal se torna
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suficientemente alto para erosionar los sedimentos del fondo. Figura

La 5.3 ilustra esa
relacin para PCBs en el ro Hudson.
3. la presencia en cuerpos de agua de estructuras de control tales como presas: La presencia
de estructuras de control aguas arriba, tales como presas, afecta significativamente el
movimiento de la sustancia qumica en el cuerpo de agua. Las concentraciones aguas abajo
dependen de la descarga a travs de la estructura y tambin de la profundidad en que el
agua es lanzada desde la estructura. Las presas y los reservorios retienen detrs de ellos las
sustancias qumicas, particularmente aquellas asociadas con los slidos suspendidos que se
depositan en el reservorio. Cualquier actividad que d como resultado la resuspensin y
transporte de esos sedimentos, aumentar la concentracin de sustancias qumicas aguas
abajo. Estas actividades pueden incluir caudales muy altos que arrastran los sedimentos de
fondo o que la descarga de agua de la presa est muy cerca del fondo del embalse. En
ausencia de estas actividades, el efecto principal de una presa es disminuir estos efectos y,
por lo tanto, la concentracin de sustancias qumicas aguas abajo.
Dado que el enfoque de una evaluacin de sustancias qumicas en un cuerpo de agua es

determinar y analizar las condiciones que representan alguna condicin crtica, la eleccin de
condiciones de flujo debe reflejar el tipo de fuente, las caractersticas de adsorcin de la sustancia
qumica y la presencia de estructuras de control en el cuerpo de agua. Para la mayora de los
casos, los perodos de flujos bajos representan la condicin crtica.
La determinacin de los flujos durante los perodos de estudio del cuerpo de agua se inicia con los
datos de caudales proporcionados por las estaciones de aforo y estructuras de control. Estos
datos suministran caudales en puntos especficos a lo largo del cuerpo de agua. Para estimar la
variacin de caudal entre estos puntos se pueden emplear dos aproximaciones: 1) estudio directo
en el ro, o, 2) aplicacin de tasas de flujo con respecto al rea.
La medicin directa del caudal en el ro se basa en el aforo directo o en el clculo de dilucin en el

lugar de descarga de una fuente puntual continua de un trazador conservativo. Para esta ltima, la
ecuacin que define el caudal en el ro es:
c
- c
i r2
Q = Q -------------- ..........(5.3)
r1 i c - c
r2 r1
en la cual:
Qr1 = caudal del ro arriba de la fuente puntual i 3(L/T)
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Qi 3 /T)
= caudal de la fuente puntual i (L
ci 3)
= concentracin de trazador conservativo en la fuente puntual i (M/L
cr1 = concentracin de trazador conservativo en el ro arriba de la fuente puntual i (M/L
3)
cr2 = concentracin de trazador conservativo en el ro abajo de la fuente puntual i (M/L

3)
En condiciones ideales, el trazador es un parmetro fcilmente medible cuya concentracin en la

fuente puntual i es diferente a la del ro. De estos trazadores, la conductividad es el que se emplea
ms comnmente. En ausencia de una fuente puntual con un trazador conservativo utilizable, se
puede inyectar un trazador fluorescente en el ro a una tasa constante. La concentracin de
trazador fluorescente medida en la solucin inyectada y en el ro y la tasa de inyeccin del trazador
son utilizadas para determinar el flujo del ro. Rodamina WT es el trazador fluorescente ms
utilizado debido a que se degrada lentamente y no es adsorbido significativamente a los slidos en
el ro. Se hace notar que la concentracin abajo de la fuente puntual i tiene que ser medida luego
de que la fuente puntual se ha mezclado en toda la seccin transversal del ro.
El flujo del ro en puntos entre estaciones de aforo puede tambin ser estimado sin ninguna
medicin directa en el ro. El procedimiento es el siguiente:
1. determine el rea de drenaje de la cuenca en los lugares del ro en que hay estaciones de
aforo y en los lugares entre estaciones donde se quiere conocer el caudal.
2. calcule el caudal por unidad de rea de drenaje (caudal especfico) en las estaciones de
aforo.
3. calcule el rea de drenaje incremental entre la estacin de aforo y el punto de inters.
4. multiplique el rea de drenaje incremental por el caudal especfico de la estacin de aforo y
sume el resultado al caudal de la estacin de aforo. Pese a que este mtodo es menos
costoso que el de las mediciones directas en el ro, resulta tambin menos preciso.
Velocidad y dispersin
En los sistemas fluviales discutidos en las secciones anteriores, se asumi que el ro estaba
completamente mezclado lateral y verticalmente. Por lo tanto, es necesario estimar solamente
velocidad y dispersin en la direccin longitudinal. Una estimacin de ambas puede realizarse a
partir de un estudio con trazador fluorescente en el ro. La orientacin para el estudio con
trazadores fluorescentes puede apreciarse en la publicacin del "United States Geological Survey"
(U.S.GS, 1970) (ver tambin Thomann y Mueller, 1987). En resumen, las etapas de un estudio con
trazadores fluorescentes para determinacin de velocidad y dispersin son las siguientes:
1. Una cantidad de trazador fluorescente es lanzada al agua como una fuente puntual
instantnea a travs del ancho del ro.
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2. Las muestras de agua son colectadas a lo largo del tiempo en diferentes puntos aguas abajo
del lugar de lanzamiento. Esas muestras son analizadas para medir la concentracin del
trazador usando un fluormetro.
En la Figura 5.4 se pueden apreciar los resultados tpicos de estos experimentos.
La velocidad promedio entre las estaciones de muestreo puede ser calculada segn el tiempo de
traslacin del trazador. El tiempo de traslacin es la diferencia entre los instantes correspondientes
a los centros de gravedad de la curva de distribucin temporal del trazador en cada estacin. Por
ejemplo, en laFigura 5.4 el tiempo de traslacin entre las estaciones 1 y 2 es 2,1 horas (esto es,
2,9 - 0,8). La velocidad promedio se obtiene, por lo tanto, dividiendo la distancia de 1000 metros,
entre las estaciones, entre el tiempo de traslacin de 2,1 horas, es decir, 0,13 m/s. Ntese que esta
velocidad promedio puede usarse para determinar la profundidad promedio del ro, H, si se ha
medido el ancho:
Q
H = ------- ...............(5.4)
U . B
donde:
Q = caudal del ro (L3/T)

U = velocidad promedio obtenida de los estudios con trazadores (L/T)
B = ancho promedio del ro (L)
La profundidad promedio es un parmetro importante tanto en el modelaje de contaminantes

convencionales como en el de contaminantes txicos. Esta est incluida en las formulaciones para
reaeracin y demanda de oxgeno de los sedimentos en modelos de contaminantes convencionales
y en la volatilizacin y sedimentacin en modelos de contaminantes txicos.
La dispersin se estima adecuando los datos experimentales de los trazadores a la ecuacin que
describe la distribucin en tiempo y espacio de una funcin delta o lanzamiento instantneo del
trazador en un ro de seccin transversal uniforme y flujo constante:
2
- (x - Ut)
--------- - kt
M 4 Et
C = ------------- e ..........(5.5)
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______
2A \/ PI Et
en la cual:
M = masa de trazador lanzada (M)

A = rea de la seccin transversal del ro (L2)
E = coeficiente de dispersin (L2/T)
t = tiempo (T)
x = distancia desde el lanzamiento del trazador (L)
k = tasa de decaimiento del trazador (1/T)
El valor del coeficiente de dispersin se obtiene ya sea por calibracin directa de la ecuacin (5.5)
a los datos del trazador o por la siguiente linearizacin de la ecuacin (5.6):
-- --
M 1 | (x - 2Ut) |
__ | |
ln(\/t e C) = ln ---------- - ---- | ------------- | .........
____ | |
2A \/PI E 4E | t |
-- --
2
__ kt (x - Ut)
Un grfico de n(\/ t e C) versus -------- suministra una lnea
t
1
con pendiente - --- (vase Thomann y Mueller, 1987, para mayores de
4E y discusiones).
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SUPERFICIALES
5.7 Slidos
Los slidos en la columna lquida de un ro u otro cuerpo de agua estn sujetos a los mismos
procesos de transporte de flujo o dispersin que los constituyentes disueltos. Adems, stos son
transportados verticalmente debido a la sedimentacin. En la interfase entre la columna de agua y
los sedimentos (esto es, la interfase agua-lecho), los slidos provenientes de la columna de agua
pueden abandonar el fondo debido a la resuspensin.
Los slidos, por su tamao, generalmente se clasifican en tres categoras: arcillas, limos y arenas,
correspondiendo a rangos de tamaos de 2 micrones, 2-50 micrones y 50 micrones,
respectivamente. La velocidad de sedimentacin aumenta con el tamao de la partcula. Los
valores tpicos para las tres categoras de tamao son: 1 m/d para arcillas, 10 m/d para limos y 100
m/d para arenas (vase tambin la Seccin 4.5.2.3a). La mayora de los estudios del modelo de
sustancias qumicas txicas no considera las categoras individuales de tamao de los slidos. La
eleccin de una velocidad de sedimentacin cuando se considera un solo tipo de slido se basa en
la distribucin medida de los slidos en el sistema.
Los parmetros que deben ser medidos para los slidos suspendidos en la columna de agua
incluyen:
a. concentracin
b. distribucin de tamao (por tamizado o filtracin secuencial)
c. contenido de carbono orgnico (o contenido de materia orgnica basado en la prdida de
peso por ignicin).
Para los sedimentos del lecho, los parmetros arriba mencionados deben determinarse en funcin
de la profundidad dentro de los sedimentos. Lo ideal sera extraer muestras testigo (con
muestreador tipo "Core") del sedimento de fondo y analizar los estratos a cada uno o dos
centmetros. Adems de los parmetros citados, se deberan analizar los sedimentos de cada
seccin de la muestra testigo para:
a. concentracin de un trazador que pueda ser utilizado para determinar la edad de los
estratos de sedimento. (En el Hemisferio Norte se utiliza normalmente el cesio depositado
como consecuencia de las pruebas nucleares en la atmsfera),
b. porosidad o contenido de agua.
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Estableciendo la edad de los estratos de la muestra testigo se determina la tasa de acumulacin de

sedimentos en el lecho. Esta tasa es la velocidad de sedimentacin que se discute en la Seccin 4.
Los procedimientos empleados para obtener los parmetros antes mencionados son analizados en
varias publicaciones. Las referencias principales incluyen:
a. muestreo de sedimento del lecho - Olsen, 1979

b. anlisis de sedimento del lecho (porosidad, edad) - Olsen, 1979
Bopp, et al. 1982
c. contenido de carbono orgnico en los slidos - Mills y Quinn, 1979
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SUPERFICIALES
5.8 Muestreo de Sustancias Qumicas - Columna de Agua y Sedimento
Columna de agua
a. Concentracin total de la sustancia qumica

b. Concentracin de la sustancia qumica disuelta (usualmente en el nivel de 0,45 m)
c.
concentracin se puede determinar por diferencia aunque ocasionalmente se debe realizar
un anlisis de las cantidades independientes para confirmar la tcnica analtica).
d. Unidades de toxicidad
Se debe enfatizar el extremo cuidado que se debe de tomar en el manejo de las muestras, a fin de
que el equipo de muestreo no est contaminado por usos previos y que el material del mismo no
proporcione una contaminacin. Las botellas de vidrio o acero inoxidable son las ms apropiadas.
Asimismo, es necesario tener cuidado al obtener una muestra de agua a fin de que las espumas
superficiales no se introduzcan en la botella de la muestra, ni que los sedimentos de fondo sean
captados por error.
Se debe tambin considerar el uso de biomonitores en jaula tales como mariscos o peces de agua
dulce o salada. El procedimiento consiste en poner un cierto nmero de esos organismos en jaulas
y suspenderlos en la columna de agua en varias estaciones de muestreo localizadas en el ro. A
partir de los datos del factor de bioconcentracin y de las tasas de excrecin de la sustancia
qumica, se efecta una estimacin del tiempo para alcanzar el equilibrio. Estos valores varan
tpicamente de das a semanas para la mayora de las sustancias qumicas. Los organismos son, por
lo tanto, dejados en el cuerpo de agua durante, por lo menos, ese lapso, siendo luego retirados y
analizados para determinar el contenido de la sustancia qumica.
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Los datos resultantes pueden entonces ser utilizados para estimar la tasa neta de prdida de la
sustancia qumica para un cuerpo de agua especfico (vase la Seccin 4). Adems, si se dispone
factor emprico de bioacumulacin en el campo para usarlo posteriormente con los datos de
biomonitoreo. Por lo menos, pueden llevarse a cabo experimentos de bioconcentracin con los
Sedimento
La determinacin de la sustancia qumica en los sedimentos del lecho abarca el muestreo con
sea posible, se debe medir lo siguiente:
a. Concentracin de las sustancias qumicas en los sedimentos (en base seca) luego del
Concentracin de sustancias qumicas en el agua intersticial existente en los poros del

sedimento.
operacionales que se han empleado para el anlisis de metales pesados en sedimentos.
Si se sospecha que la sustancia qumica ha sido distribuida a profundidad en el sedimento, debido a
estratos del sedimento sacados de la muestra no alterada. El espesor de los estratos puede
estimarse en base a la velocidad neta de deposicin de slidos en el cuerpo de agua particular.
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SUPERFICIALES
5.9. Muestreo de sustancias qumicas en el ecosistema acutico

En algunos casos es deseable, y an necesario, el anlisis de la concentracin de sustancias
qumicas en el tejido de organismos acuticos. Los peces y los mariscos, en particular, pueden
resultar una fuente de alimento contaminado para la poblacin humana. Adems, se pueden
emplear datos de concentracin en especies residentes a fin de estimar concentraciones en la
columna lquida.
Se pueden efectuar muestreos por medios tales como redes o tcnicas para producir un shock en
los peces. Durante las investigaciones intensivas de los compartimentos fsicoqumicos, es deseable
llevar a cabo el muestreo de algunas especies representativas al mismo tiempo.
Los organismos que han sido muestreados comprenden:
a. Peces - niveles trficos altos e intermedios

b. Mariscos - ostras, almejas, mejillones
c. Crustceos - langostas
d. Invertebrados bentnicos
e. Anfibios - sapos
f. Aves acuticas
A los organismos muestreados, adems de identificar su especie, se les debe determinar:
a. Peso
b. Longitud
c. Sexo
d. Contenido de lpidos
e. Concentracin de la sustancia qumica en todo el organismo, en rganos especficos o partes
del organismo (por ejemplo, en la parte comestible del pez).
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SUPERFICIALES
Lista de Figuras
Figura 5.1. Componentes de un programa de muestreo y monitoreo
Figura 5.2. Esquema de ubicacin espacial de estaciones de muestreo
Figura 5.3. Concentracin de PCBs vs. flujo, ro Hudson en Schuglerville, N.Y. (de Hetling et al. 1978, datos de
Turk, U.S.GS.), marzo 30 - setiembre 27, 1977)
Figura 5.4. Perfil temporal tpico de concentracin de trazador en tres estaciones aguas abajo de un lanzamiento
instantneo del trazador
Figura 5.5. Ilustracin del uso de grfico log. probabilstico para estimar mediana, desviacin estndar y percentiles
de 5% y 95%
Figura 5.6. Ilustracin de representacin espacial de datos
Figura 5.7. Esquema de grfico probabilstico de un conjunto de datos con algunos abajo del lmite de deteccin,
estimativas de mediana, percentiles 5% y 95% y desviacin estndar de lnc
Lista de Figuras de los Anexos
Figura 5.A.II.1 - Plomo en el ro Rmac
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SUPERFICIALES
Figura 5.1. Componentes de un programa de muestreo y monitoreo
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SUPERFICIALES
Figura 5.2. Esquema de ubicacin espacial de estaciones de muestreo
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SUPERFICIALES
Figura 5.3. Concentracin de PCBs vs. flujo, ro Hudson en Schuglerville, N.Y.

(de Hetling et al. 1978, datos de Turk, U.S.GS.), marzo 30 - setiembre 27, 1977)
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SUPERFICIALES
Figura 5.4. Perfil temporal tpico de concentracin de trazador en tres

estaciones aguas abajo de un lanzamiento instantneo del trazador Figura 5.5.
Ilustracin del uso de grfico log. probabilstico para estimar mediana,
desviacin estndar y percentiles de 5% y 95%
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SUPERFICIALES
Figura 5.5. Ilustracin del uso de grfico log. probabilstico para estimar
mediana, desviacin estndar y percentiles de 5% y 95%
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SUPERFICIALES
Figura 5.6. Ilustracin de representacin espacial de datos
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SUPERFICIALES
Figura 5.7. Esquema de grfico probabilstico de un conjunto de datos con

algunos abajo del lmite de deteccin, estimativas de mediana, percentiles 5%
y 95% y desviacin estndar de lnc
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SUPERFICIALES
Tabla 5.A.I.1: Adaptabilidad de los organismos como especies para bioensayos
Adaptabilidad del organismo comnmente usado como

Organismos para
Cultivo de un organismo para
bioensayos Recoleccin de campo
laboratorio bioensayo
Muy difcil de reco-
1. Algas Excelente S
lectar, cultivo puro
Muy difcil de reco-
2. Protozoos Excelente Muy limitado
3. Invertebrados
a. Plantnicos
Muy difcil de recolectar,
1. Rotferos Bueno Limitado
cultivo puro
Alta tasa de mortandad
2. Cladceros Excelente despus de la recoleccin S
de campo
3. Coppodos Mediano despus de la recoleccin Limitado
de campo
4. Camarones Bueno Bueno S
b. Bnticos
1. Anlidos Mediano Mediano Limitado
2. Insectos Bajo Mediano S
3. Moluscos Bueno Mediano S
4. Crustceos Bajo Mediano

4. Peces Excelente despus de la recoleccin S
de campo
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SUPERFICIALES
Figura 5.A.II.1 - Plomo en el ro Rmac
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Manual Ecotoxicidad

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MANUAL DE EVALUACION Y MANEJO DE SUSTANCIAS TOXICAS EN AGUAS

Seccin 5 : Orientacin para muestreo, monitoreo y anlisis de datos

MANUAL DE EVALUACION Y MANEJO DE SUSTANCIAS TOXICAS

ORIENTACION PARA MUESTREO, MONITOREO Y ANALISIS DE DATOS

Dr. Robert V. Thomann

Anexo 5.A.I preparado por la

Organizacin Panamericana de la Salud - Divisin de Salud y Ambiente

a. La naturaleza del contexto del problema, esto es:

Esas tres consideraciones frecuentemente deben ser integradas en un esfuerzo especfico de

El trmino "muestreo" es usado en el contexto de la determinacin en el campo, de la distribucin

txicas y sus componentes, tales como el desarrollo de estndares de calidad de agua,

a. la concentracin o toxicidad de sustancias qumicas descargadas y los caudales asociados,

a. Pruebas de vigilancia para determinar la naturaleza y extensin del problema de sustancias

El nfasis de esta Seccin en trminos de monitoreo de sustancias txicas consiste en la primera

strength on heavy metal sorption. Environ. Sci. Tech. 20:55-61.

values. Water, Air and Soil Pollution, 24(4):431-442.

MANUAL DE EVALUACION Y MANEJO DE SUSTANCIAS TOXICAS EN AGUAS

Seccin 5 : Orientacin para muestreo, monitoreo y anlisis de datos

Anexo 5.A.I. Recomandaciones concernientes a la seleccin de organismos

1. Introduccin 3. Organismos para bioensayo

La seleccin de organismos para bioensayos debe basarse en:

los objetivos del programa toxicolgico,

Organismos criados en el laboratorio para bioensayos

Organismos criados en el laboratorio para bioensayos

Disponibilidad en forma inmediata de organismos aclimatados, saludables, que han sido

Los requerimientos de cultivo para organismos acuticos varan sustancialmente, an entre

especies estrechamente relacionadas. Es necesario conocer el alimento ptimo, la temperatura, el

Falta de representatividad a las condiciones y organismos en la comunidad a ser probada.

Organismos recolectados en el campo para bioensayos

Puede recolectarse el organismo directamente del campo? Esto ocurre en poblaciones

El ms representativo de la comunidad impactada por el efluente.

Se puede seleccionar una especie importante en una comunidad especfica.

Las pruebas de microcosmos conteniendo muchas especies puede prepararse fcilmente.

La alta presin y mortalidad frecuentemente estn asociadas con los procedimientos de

La disponibilidad de los organismos puede estar limitada.

Muchas especies no abundan durante todo el ao o tienen varios cambios en su ciclo de

La edad, salud y condiciones de cultivo de los organismos son desconocidas.

No existe manera de obtener organismos "estandarizados" del campo y frecuentemente

En general, es preferible utilizar organismos criados en el laboratorio en vez de los recolectados en

3. Organismos para bioensayos

los subgrupos de invertebrados.

La Tabla 5.A.I.1presenta los principales grupos de organismos para bioensayos e indica su

Criterios generales de seleccin

Los organismos acuticos frecuentemente tienen ciclos de vida y requerimientos de cultivo y

Es apropiado el ciclo de vida de los organismos a los objetivos y diseo?

El bioensayo es para toxicidad en agua o en sedimentos? Para sedimentos, es el objetivo

Si se sospecha la presencia de sustancias txicas firmemente ligadas a los sedimentos,

Las algas representan un componente importante de cualquier comunidad acutica porque

Ventajas y desventajas de las algas como organismos de prueba

La prueba de algas ayudar a determinar cules descargas son los principales

Existe informacin adecuada sobre cultivos y procedimientos de pruebas para muchas

capacitacin "prctica" dada por un tcnico experimentado.

Criterios para la seleccin de especies de algas

Ser representativas de un eslabn importante en la cadena alimenticia

Muchas especies de algas verdes y diatomeas son alimento para el zooplancton y,

Disponibilidad en cultivo puro

El aislamiento de un cultivo puro del agua natural requiere de mucho tiempo y

Las algas crecern en una clula simple o en pequeos grupos de clulas

La preparacin de las algas para la prueba requiere de una suspensin uniforme de

Suficiente informacin sobre requisitos para el crecimiento de nutrientes.

Fcilmente cultivables a temperatura ambiental.

Las especies algales que requieren soluciones complejas de nutrientes o condiciones

Capaz de crecer en cultivos de agar