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Chapitre 01 :
Introduction la
biologie cellulaire
Gnralits
Classification et importance relative du monde vivant
Cellule et thorie cellulaire
Types cellulaires (Procaryote, Eucaryote, Acaryote)
Mthodes d'tude de la cellule
Universit Dr Yahia Fars de Mda 1er Anne SNV / 2015-2016
UEF 01. Matire : Biologie Cellulaire
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I. Gnralits :
La biologie (bios = vie ; logos = tude) ; est ltude des tres vivants. Elle
recouvre une partie des sciences naturelles. Ce terme (en franais) t cre par le
naturaliste Jean-Baptiste de Lamarck en 1802 ; Tout ce qui est gnralement commun
aux vgtaux et aux animaux comme toutes les facults qui sont propres chacun de ces tres sans
exception, doit constituer l'unique et vaste objet d'une science particulire qui n'est pas encore fonde, qui
n'a mme pas de nom, et laquelle je donnerai le nom de biologie.
Lobjet de la biologie est le vivant. Bien que la diffrence entre un tre vivant et
un objet minral est fait de faon simple et intuitive. Lanalyse chimique montre que
lon y trouve les mmes atomes et que Les systmes biologiques sont constitus de
molcules organiques inertes obissant aux lois physiques et chimiques. En rsultat,
de nombreuses difficults surgissent lorsquon se questionne : Quest ce qui
permet de dire quune chose est vivante ?
Grouper les diffrents lments en fonction des similitudes est une tendance
humaine. Par exemple, on peut organiser la musique par artiste, et regrouper les
divers artistes dans des catgories plus larges, tels que le rock, le jazz et classique. De
la mme manire, on peut tudier les d'cureuils et papillons en reconnaissons que
de nombreuses espces diffrentes appartiennent un groupe. Nous pouvons aussi
trier les groupes dans des catgories plus larges, comme les rongeurs (qui
comprennent les cureuils) et d'insectes (qui comprennent les papillons). La
Taxonomie (branche de la biologie) est une science qui nomme, classe et regroupe
les espces.
La biologie cellulaire une science qui tudie les cellules, du point du vue
structural et fonctionnel.. Cest Ltude des lois qui rgissent les phnomnes
communs aux divers units lmentaires (cellules) dorganisation de la matire
ltat vivant
Les mitochondries et les plastes (ces derniers chez les Vgtaux et certains
Protistes, seulement), sont des organite bien dlimits. Leur fonction est lie au
mtabolisme nergtique et aux conversions dune forme dnergie en une autre au
sein de la cellule (respiration, photosynthse).
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B. Caractristiques Gnrales Des Procaryotes
De faon gnrale, les seules membranes rencontres dans ces cellules sont
celles qui les limitent, lintrieur de la cellule ne prsente donc pas dorganites ; en
particulier, le patrimoine gntique nest pas enferm dans un systme
membranaire clos et il nexiste pas de noyau vrai. Ceci entrane une continuit
entre les lieux o se droulent les diffrentes tapes de lexpression de linformation
gntique ; lorganisation molculaire du matriel gntique est, probablement en
rapport avec ce fait, trs diffrente chez les Procaryotes et les Eucaryotes.
Un acaryote est une cellule sans noyau. De faon plus large, le terme dsigne
galement les organismes dpourvus de noyaux, d'organites et de mtabolisme. Ils
possdent cependant une information gntique, sous forme d'ADN ou ARN. Le type
le plus commun d'acaryotes est le globule rouge. Les virus sont gnralement aussi
considrs comme tant des acaryotes.
Les virus occupent une place particulire entre les vivants et non vivants. D'une
part, ils sont faits des mmes molcules que les cellules vivantes. D'autre part, ils
sont incapables d'existence indpendante, tant compltement dpendant d'une
cellule hte pour se reproduire. Les virus sont des particules sub-microscopiques
constitues de matriel gntique enferm l'intrieur d'une couche de protine
appele la capside. Certains virus ont une couche de membrane supplmentaire
appel l'enveloppe. Les virus sont mtaboliquement inertes jusqu' ce qu'ils entrent
dans une cellule hte, aprs quoi le matriel gntique viral sapproprie la
machinerie de la cellule hte pour produire une protine virale et le matriel
gntique viral.
Cependant, plus grand est que mieux quand plus de dtails sont rvls. La
finesse de dtails qui peut rvler un microscope est son pouvoir de rsolution. Ceci
est dfini comme le plus petit la distance que deux objets peuvent approcher un de
l'autre mais encore tre reconnue comme tant distinctes. La rsolution est
principalement fonction de la longueur d'onde de la source d'clairage ; La plus
petite longueur d'onde, plus l'objet qui provoquera la diffraction, et meilleur est le
pouvoir de rsolution. Le microscope optique utilise la lumire visible de longueur
d'onde d'environ 500 nanomtres (1000 nm = 1 m), est capable de distinguer des
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objets aussi petits que la moiti de ce: 250 nm. Le microscope lectronique est
ncessaire pour rvler lultra-structure des organites et d'autres structures
cytoplasmiques. La longueur d'onde d'un faisceau d'lectrons est d'environ 100 000
fois infrieure celle de la lumire. En thorie, le microscope lectronique peut
distinguer structures environ 1000 fois plus petites, qui est, environ 0,2 nm.
A. Le microscope optique
B. Le microscope lectronique
2. Fractionnement cellulaire
a) Prlvement :
Dans le milieu mdical, les prlvements sont effectus en clinique, l'hpital ou
dans des cabinets privs ou mdecin spcialiste.
On distingue quatre catgories majeures de prlvement :
o Les frottis : grattage (du col de l'utrus...),
o Les biopsies : fragments de tissu ou dorgane,
o Les organes en intgralit,
o Les liquides d'panchement divers (pleural, ascitique, pricardique)
b) Fixation :
Cest laction de tuer les cellules, en vitant tout phnomne agonique, de
manire conserver les structures dans un tat morphologique aussi proche que
possible de ltat vivant. Une bonne fixation doit viter tout artefact : apparition
dune structure nouvelle (par coagulation), disparition dune structure normalement
prsente (par solubilisation), dformation ou dplacement des constituants
cellulaires (par cristallisation)
c) Dshydratation :
Pour dshydrater les tissus, on les plonge dans des alcools de degrs
croissants, 70, 80, 90, 100, pendant le temps ncessaire l'quilibre des
concentrations. La pice anatomique doit tre entirement dshydrate avant
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l'inclusion dans la paraffine. La paraffine n'est pas non plus soluble dans l'alcool
utilis pour la dshydratation. On procde donc une double substitution.
On remplace l'eau par de l'alcool (Dshydratation)
On remplace l'alcool par le tolune (Substitution)
d) Inclusion :
La coupe ne peut tre pratique que dans une substance assez dure ; cest
pourquoi on imprgne les tissus dune substance denrobage, en gnral la paraffine
; lalcool ntant pas parfaitement miscible avec la paraffine, on plonge le tissu
dshydrat dans un solvant organique intermdiaire miscible lalcool et la
paraffine, le xylne, puis dans la paraffine maintenue liquide l'tuve entre 50 et
60C. On refroidit alors et on obtient un bloc de paraffine durcie contenant le tissu
examiner. Cette imprgnation suppose une dshydratation et une substitution de
leau par lalcool, solvant de la paraffine. En effet l'inclusion ne se fera de faon
satisfaisante que si la pice couper ne contient ni eau ni solvant intermdiaire
(alcool).
e) Coupe (microtomisation) :
Le bloc de paraffine est dcoup en tranches minces laide des microtomes
qui sont des appareils permettant de dbiter les blocs de paraffine en coupes de
quelques microns quelques dizaines de microns. Les forces de frictions entre
couteau et bloc chauffent la paraffine et la mettent en surfusion, ce qui permet de
coller les coupes les unes la suite de l'autre : ruban de coupes sries. On les
recueille sur des lames de verre (porte objets) autrefois enduites d'une solution
d'ovalbumine qui les colle sur la lame en schant. .
f) R hydratation :
Les coupes colles sur lame de verre sont dparaffines l'aide d'un solvant
organique et ramenes l'eau par des bains d'alcools de concentrations
dcroissantes. Cela permet de les colorer, car la majorit des colorants sont solubles
dans l'eau ou dans l'alcool.
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g) Coloration :
Les objets biologiques coups et examins par transparence ne sont pas ou
peu colors: ils offrent trs peu de contraste, donc de visibilit, et aucun dtail ne
peut tre peru. Il faut renforcer le contraste de couleur des diffrents organites ou
mieux les colorer. Cette lame de verre est alors plonge dans un colorant. On dispose
nombreux colorants naturels, qui se fixent sur telle ou telle structure de la cellule, par
exemple, le vert de mthyle colore en vert la chromatine
On utilise deux catgories de colorants : Les plus courants sont :
l'hmatoxyline, qui colore les noyaux cellulaires en bleu violac
Losine, qui colore les cytoplasmes en rose
Les bleus (Bleu de mthylne, de toluidine)
- EXAMENS CYTOLOGIQUES