Ao de la Promocin de la

Industria Responsable y del

Compromiso Climtico

UNIVERSIDAD NACIONAL
DE SAN MARTIN
FACULTAD DE INGENIERIA
AGROINDUSTRIAL

Escuela profesional de Ingeniera Agroindustrial

Asignatura: Qumica de los productos naturales no

alimentarios

Trabajo : Practica 03 Marcha fotoqumica

preliminar en la determinacin de los
constituyentes qumicos de una planta
por pruebas de coloracin

Docente : Ing. Ms. Alejandro cruz Rengifo

Estudiante: Stalyn Ruiz Cortez.

Tania M. Caldern Silvero

Hugo Bernard Castaeda Rojas

Frank Pizango Pilco

Cdigo : 76474937

Ciclo : VI
Fecha : 06/10/2015

Morales San Martin

Introduccin

La exploracin de plantas medicinales enmarcada dentro de la

investigacin etnobotnica como una va segura, rpida y
adecuada para encontrar nuevos medicamentos, ha adquirido
gran importancia en el mundo moderno, para enfrentar los
grandes problemas de la salud, especialmente cuando el
hombre se encuentra sorprendido e indefenso, con nuevas o
reconocidas enfermedades infecciosas y gran cantidad de
patgenos resistentes a principios activos efectivamente
utilizados como los antibiticos.

La investigacin en plantas medicinales se presenta como un

desafo para aquellos que trabajan en ella, buscando en la
naturaleza nuevas fuentes de principios activos a ser utilizados
en teraputica. A pesar de los siglos transcurridos, aun hoy,
parte de la poblacin, particularmente los pases en desarrollo,
no tienen a su alcance la posibilidad de adquirir medicamentos y
cuidan su salud primaria recurriendo al uso de plantas,
informacin transmitida debido a su tradicin cultural, y cuya
eficacia se encuentra avalada por el uso popular.

Las plantas medicinales son especies que han sido empleadas

abundantemente alrededor del mundo en la medicina tradicional
para el tratamiento de algunas enfermedades, particularmente
el ltex producido por diferentes especies, se han usado para el
tratamiento de heridas y ulceraciones infectadas, enfermedades
fngicas de la piel, herpes en los labios, como purgante.

Los aceites esenciales y los extractos vegetales son mezclas

complejas de metabolitos secundarios, aislados de las plantas
por diversos mtodos como la destilacin por arrastre de vapor,
por expresin de los frutos o por medio de soxtlet. Los
principales componentes qumicos de estas mezclas son: mono
y sesquiterpenos incluyendo carbohidratos, alcoholes, ter,
aldehdos y cetonas, los cuales son responsables de las
fragancias y de las propiedades biolgicas de las plantas
aromticas y medicinales. Los aceites esenciales y extractos
vegetales cubren un amplio espectro de efectos farmacolgicos
mostrando diversas propiedades como antiinflamatorios,
antioxidantes, y anticancergenos. Otras actividades biolgicas
se reportan como biocidas en contra de una amplia gama de
microorganismos como bacterias, hongos, virus, protozoarios
insectos y plantas

La cola de caballo es una de las plantas medicinales muy buena

para la curacin de enfermedades por sus ricas propiedades
curativas que tiene, es por eso que en esta prctica observaremos
algunos de sus componentes qumicos (metabolitos secundarios)
como las saponinas, fenoles, flavonoides y alcaloides; a travs del
mtodo pruebas por coloracin utilizado para la deteccin
fotoqumica preliminar de dichos constituyentes qumicos.

Objetivos:

Determinacin de la presencia de la muestra a utilizar en

solventes como el alcohol, para encontrar indicios de
metabolitos como los alcaloides, flavonoides, fenoles,
saponinas en la Cola de Caballo

Comparar la presencia de los constituyentes qumicos

presentes tanto en la muestra fresca como en la muestra
seca de cola de caballo.

Revisin Bibliogrfica:

La cola de caballo, Equisetum arvense L, es un arbusto

perenne perteneciente a la familia Equisetaceae. Ha sido uno
de los remedios naturales que utilizaban culturas antiguas
debido a sus propiedades medicinales.
Cola De Caballo

Nombre Cientifico: Esquisetum Arvense /

Bogotense.
Clasificacion Botanica:
-Familia: Esquisitacae.
 -Gnero: Esquisetum.
Descripcin: Botnica: Herbcea Que Mide Hasta 2
M De Altura, Con Tallos Cilndricos Huecos Y Suaves,
Con Anillos Espaciados En El Tronco De Donde Salen
Las Hojas. Sus Frutos Tienen Forma De Conos. Se
Encuentra En Climas Semiclido, Semiseco, Seco Y
Templado. Crece Desde Zonas Inundables Hasta En
Orillas De Arroyos, Y Est Asociada A La Selva
Tropical Subcaducifolia, Perennifolia; Bosques
Mesfilo De Montaa, De Encino Y Pino. Es Una Planta
Con Dos Pies, Uno Masculino Y Otro Femenino. Las
Esporas Del Pie Femenino Originan El Equiseto Adulto
Al Fecundarse Con Las Del Masculino. Existe Ms De
Una Veintena De Equisetos, El Mayor De Los Cuales
Se Encuentra En Los Bosques Hmedos De
Sudamrica. Vive En Lugares Hmedos Y Sombros,
Junto A Los Arroyos, Generalmente En Compaa De
Helechos Aunque Nunca En Suelos Calcreos.

Otros nombres comunes: Cola De Rata, Equiseto,

(Equisetum Arvense), Cua De Cavall, Limpiaplata,
Cien Nudillos, Candalilo, Hierba Del Platero, Mocco-
Mocco. Los Equisetos Se Encaraman A Las Matas
Vecinas Hasta Que Les Vence Su Propio Peso Y
Cuelgan Los Penachos De Ramitas Simulando Una
Cola De Caballo. De Ah Su Nombre Y Otros Como
Rabo De Mula O Rabo De Lagarto.

Componentes activos: Contiene Muchos Minerales

(Slice, Calcio, Magnesio, Cromo, Hierro, Manganeso,
Potasio); Acidos (Saliclico, Mlico, Esqus tico),
Saponinas, Nicotina, Glucosidos, Heteroxidos
Flavnicos, Taninos Y Fitosteroles. La "Cola De
Caballo" Es Una Planta Muy Rica En Sales Minerales:
Adems De Silicio, Contiene Abundante Potasio. Otros
De Sus Principios Activos Saludables Son Los
Sapnidos, Flavonoides Y Alcaloides, Entre Ellos, La
Nicotina, Muchos De Los Cuales Poseen Comprobados
Efectos Protectores Y Curativos.
Partes tiles: altura de los tallos frtiles: hasta 20
cm. altura de los tallos estriles: hasta 80 cm. hojas:
salen en unos nudillos presentes en los tallos
Metabolitos Secundarios: son subproductos de rutas
metablicas normales que ocurren en ciertas especies como la
cola de caballo, siendo particulares dentro de un grupo
taxonmico. El metabolismo secundario es una caracterstica
fundamental de la especializacin, es decir que el compuesto
resultante, puede no ser importante para la clula pero s para el
organismo como un todo. Los metabolitos secundarios pueden ser
bioactivos, pero no jugar un papel esencial en los procesos
fisiolgicos del organismo. Con pocas excepciones, los metabolitos
secundarios pueden clasificados dentro de cinco grupos, de
acuerdo con su base biosinttica: fenilpropanos, acetogeninas,
terpenoides, esteroides y alcaloides.
Reconocimientos de Metabolitos: El reconocimiento de
metabolitos secundarios se realiza por medio de pruebas
fitoqumicas preliminares, las cuales son una prueba qumica de
caracterizacin consistente en una reaccin qumica que produce
alteracin rpida en la estructura molecular de un compuesto, por
ejemplo, la modificacin de un grupo funcional, la apertura de un
sistema anular, la formacin de un aducto o un complejo, lo cual
da por resultado una manifestacin sensible como el cambio de un
color, la formacin de un precipitado o el desprendimiento de un
gas, dndonos indicios de la presencia o ausencia de un
metabolito secundario en particular.
Alcaloides: son sustancias bsicas que contienen nitrgeno en
un anillo heterocclico, son derivados de aminocidos,
presentan distribucin taxonmica limitada y se encuentran
en plantas superiores como sales de un cido orgnico. La
base del alcaloide es soluble en solventes orgnicos y pueden
formar sales solubles en solventes polares cuando se
encuentra en cidos minerales diluidos. Se identifican por:

El Reactivo de Mayer (tetraiodo mercuriato de potasio) da

lugar a la formacin de un precipitado amarillento amorfo o
cristalino. El precipitado (una sal compleja) puede disolverse
posteriormente en algn solvente menos polar para su
identificacin
El Reactivo de Wagner: (yodo yoduro de potasio) da
precipitado color marrn al agregar a la muestra de reactivo
preparado

Flavonoides: son compuestos polifenlicos con quince tomos

de carbono, cuya estructura consta de 2 anillos de benceno
unidos por una cadena lineal de tres carbonos. El esqueleto de
los flavonoides se representa por el sistema C6 C3 C6. Son
 pigmentos naturales presentes en los vegetales y que
protegen al organismo de los daos producidos por sustancias
o elementos oxidantes. Se determina por:

PRUEBA DE SHINODA: Los flavonoides con el ncleo

benzopirona (ej. flavonas, flavonoles, flavanonas, etc.)
producen coloraciones rojizas cuando a sus disoluciones
acuosas o alcohlicas se les adiciona magnesio seguido de
HCl concentrado. Aunque no se conoce el mecanismo de
esta prueba, es muy utilizada para reconocer esta clase de
compuestos.

2HCl (conc,) + Mg(s) MgCl2 + H2

Saponinas: son un grupo de glicsidos solubles en agua, que

tienen la propiedad de hemolizar la sangre y disminuir la
tensin superficial del agua, formando espuma abundante.
Las saponinas por hidrlisis se desdoblan en carbohidratos y
una aglicona llamada sapogenina, la puede tener el sistema
anular esteroidal o el de un triterpeno pentacclico. Se
determina por:
Prueba de espuma.
- Altura de menos de 5 mm = no se detectan saponinas
- Altura de 5 9 mm = contenido bajo
- Altura de 10 14 mm = contenido moderado
- Altura mayor de 15 mm = contenido alto

Fenoles: son alcoholes aromticos, compuestos de

molculas que tienen un grupo -OH unido a un tomo de
carbono de un anillo bencnico. La estructura que se
encuentra en todos los fenoles es el fenol.
son: Desinfectantes, preparacin de resinas y polmeros,
preparacin del cido pcrico, usado en la preparacin
de explosivos, sntesis de la aspirina y de
otros medicamentos. Se determina por:

CLORURO FERRICO: Da coloracin azul; verde negro en

presencia de compuestos fenlicos, taninos. Al agregar una
gota de del reactivo preparado.
Materiales y mtodos:

Muestra:
Muestra fresco o seco

Materiales:

Solvente que puede ser EtOH, MetOH. CH2Cl2,

Hexano, etc.
Balanza
Tabla de picar, papel filtro
Vasos, entre otros

Mtodos:

1. Convertir la muestra a partculas pequeas utilizando una

tabla de picar si es fresco o por presin manual si es seco,
en seguida pesar aproximadamente 3 gramos de ella y
colocar en vaso de 50 ml y agregar 30 ml de solvente
(alcohol).
2. Macerar por 10 minutos con agitacin utilizando una
baqueta, dejar en reposo y luego filtrar
3. Tomar el extracto en solucin y dividir en partes iguales
en 6 tubos de prueba
4. Dos tubos de prueba sern asignados para la
determinacin de ALCALOIDES. un (1) tubo de prueba
para la determinacin de SAPONINAS, un (1) tubo de
prueba para la prueba de FENOLES, un (1) tubo de prueba
para la determinacin de FLAVONOIDES.
5. Para la determinacin de Alcaloides se utilizara los
reactivos Wagner y Mayer, haciendo la prueba por
separado en cada tubo de prueba las que tendrn
previamente 1 gotas de HCl 1%
6. Para la determinacin de Saponinas se agregara agua
(obteniendo doble de volumen) y sacudir por 30 segundos
si hay espuma y mantiene este tiempo hay presencia de
saponinas (las espumas pueden varias de lo ms mnimo
o a lo ms abundante).
 7. Para la determinacin de Flavonoides se empleara la
PRUEBA DE SHINODA que consiste en obtener la variacin
de coloracin del extracto por efecto de la siguiente
reaccin:

2 HCl (conc.) + Mg(s)* MgCl2 + H2

Donde HCl concentrado reaccionara con una o 2 con
limadura de Mg. Que se colocara en el extracto para dar
el producto.
8. Para la determinacin de FENOLES, bastara agregar 1, 2
3 gotas de FeCl3 acuoso, el extracto del jugo de prueba
para observar la presencia de este metabolito, cuando
ms gotas se tornara ms oscura.

Anotar los resultados de cada determinacin observando

los colores que ocasionan los metabolitos sealados

Resultados:
Para nuestra fresca de Cola de Caballo
Reactivo De Wagner: Dio un precipitado color
verde opaco amarronado y cuando se movi para
uniformizarlo se volvi ms intenso.
Reactivo De Mayer: Dio un color verde no muy
amarronado, es decir menor que con el reactivo
Wagner.
Para la determinacin de saponinas tambin
agregamos 5 ml de la muestra en tubos de
ensayo. Agregando tambin agua hasta que sea
el doble de la muestra, agitamos, y observamos
como la muestra reacciono produciendo espuma
asi se prueba que hay presencia de Saponinas.
En la determinacin de flavonoides agregamos a
la muestra a un tubo de ensayo, con 2 gotas HCl
concentrado y dos Limadura de Magnesio y
vemos como este reacciona produciendo
bastantes burbujas y de esa manera observamos
que la muestra tiene presencia de Flavonoides.
Para la determinacin de fenoles agregamos a la
muestra de 5 ml que se encontraba en el tubo
agregamos 2 gotas de FeCl3 acuoso y vimos
 como el color de la muestra vira a un verde
opaco

Para nuestra seca de Cola de Caballo

Antes de la determinacin de metabolitos, la muestra
utilizada Cola de Caballo, lo colocamos en la estufa y
lo dejamos por 24 horas a 50 C para poder evaporar
toda su humedad
Para la determinacin de alcaloides separamos
en 2 tubos de ensayo 5 ml de la muestra
preparada y aadida HCl 1% a continuacin
agregamos 1 gota los reactivos de Wagner y
Mayer respectivamente, observamos como el
color en las dos muestra cambio a un verde
oscuro
Reactivo De Wagner: Dio un precipitado
color bien verde amarronado y cuando se
movi para uniformizarlo se volvi ms
intenso.
Reactivo De Mayer: Dio un color verde
amarronado, parecido al del reactivo
Wagner.
En la determinacin de flavonoides agregamos a
la muestra a un tubo de ensayo, con 2 gotas HCl
concentrado y dos Limadura de Magnesio y
vemos como este reacciona produciendo poca
reaccin de burbujas en el tubo (nula la
reaccin) indicando poco ndice de flavonoides.
Para la determinacin de fenoles agregamos a la
muestra de 5 ml que se encontraba en el tubo
agregamos 3 gotas de FeCl3 acuoso,
observando como el color de la muestra vira a
un verde negruzco

Discusin:
 Al observar los alcaloides tanto la muestra fresca como la
seca en la seca, se vio que para ambos el color con el
reactivo de Wagner fue casi el mismo verde amarronado
intenso solo que en la muestra fresca fue un poquito opaco.
Y para el reactivo de Mayer para ambos fue idntico.
Y segn Cesar Navarro en su libro de Determinacin de la
presencia de algunos compuestos qumicos por mtodos
fitoqumicos colorimtricos el color que se da con dichos
reactivos es marrn, lo cual indica que en la cola de caballo
si hay presencia de alcaloides pero se puede decir que en
pocas cantidades porque tambin era verdoso.

Para la determinacin de saponinas en la muestra fresca se

observ que hubo gran cantidad de espuma, mientras que
en la muestra seca hubo una pequea cantidad. Entonces
se puede decir que en la muestra fresca hay ms cantidad
de saponinas que en la seca.
Y segn Cesar Navarro en su libro de Determinacin de la
presencia de algunos compuestos qumicos por mtodos
fitoqumicos colorimtricos, muestra que: - Altura de 5 9
mm = contenido bajo
Altura de 10 14 mm = contenido moderado
Altura mayor de 15 mm = contenido alto

En cuanto a los flavonoides en la muestra fresca se vio ms

presencia de gas que en la muestra seca, indicando que en
la fresca se encuentran ms flavonoides que en la seca,
esto puede ser porque en la seca se pudieron perder por el
calor al que fue sometida la muestra.

Y en la presencia de fenoles, en la muestra fresca cambio

bien de color y en la seca fue mnimo el cambio de color, y
segn la revisin bibliogrfica que se hizo el color debera
ser un verde medio negro que fue lo que se vio en la fresca
pudiendo decir que ah hay ms fenoles que en la seca.

Conclusin y recomendaciones:
Conclusiones:

Al finalizar las dos prcticas aprendimos todo el

procedimiento del mtodo de pruebas de coloracin para la
determinacin de constituyentes qumicos de la muestra de
cola de caballo tanto fresca como seca.

Tambin se puede decir que en la muestra fresca hay ms

presencia de los constituyentes qumicos estudiados como
los alcaloides, saponinas, fenoles y flavonoides que en la
muestra seca en donde hay en menor cantidad. Realizada
los diferentes procesos de determinacin para Alcaloides.
Saponinas, Flavonoides y Fenoles obtuvimos la presencia
de estos en nuestra muestra de Cola de Caballo, pero ms
fue la presencia en muestra fresca que en seca.

Recomendaciones:

se recomienda seguir bien los pasos del mtodo por pruebas

de coloracin para una buena determinacin de los
constituyentes qumicos a observar.

Tambin debemos utilizar la planta de cola de caballo, ya que

es muy buena para muchas enfermedades como las
diurticas, inflamatorias.

Bibliografa:

valos-Garca, A. y Prez-Urria, C.E. 2009.

Metabolismo secundario de plantas. Reduca
(Biologa). Serie Fisiologa Vegetal. 2(3): 119-
145.
Medinas D.V.; Osorio Y.M. Estudio de estabilidad
fsica y qumica cualitativa de las hojas (droga
cruda) de la Petiveria alliacea L. [Tesis de
Diploma]. Santiago de Cuba; 2007. p.28-49.
Palomino, O. (2001). Mtodos analticos para la
identificacin de Plantas Medicinales. Apuntes
del Curso de la Asociacin Espaola de
Farmacuticos de la Industria (AEFI).
Anexos:
1. Material fresco
1.1 la cola de caballo en estado fresco
1.2
1.3 la muestra de cola de caballo cortado y
puesto en el vaso con el solvente (alcohol)

1.4 la muestra agregada los reactivos de Wagner y

Mayer

1.5 los diferentes tubos para determinar

metabolitos
 2.

2.

2.

2.

2.

2. Material seco
2.1 Cola de caballo seca dejada en estufa a 50 C
por 24 horas

2.2 La muestra agregada en el vaso con el

solvente para ser agitado
con la baqueta por 10
minutos

2.3 la muestra en diferentes tubos para la identificacin de distintos tipos de metabolitos