27/4/2017 Elantibiograma

Losantibiticos
Unantibiticohasidodefinidocomounasustanciaqumicaproducidaporunmicroorganismocapazdeinhibireldesarrollodeotros
microorganismos. Los antibiticos modificados por manipulaciones qumicas aun se consideran como tales. Un agente
antimicrobianoesactivocontralosmicroorganismosypuedeserproducidoenformanaturalpormicroorganismososintticamente
en el laboratorio. El trmino agente quimioterpico ha sido empleado para referirse a agentes antimicrobianos sintticos o no y
tambin se refiere a agentes que actan contra clulas humanas como inmunomoduladores y drogas antitumorales. Los trminos
agente antiviral y agente antimictico son trminos ms especificos, incluidos dentro de la categora ms general de agentes
antimicrobianos.

Elaislamientodeunagenteinfecciosoapartirdeunpacientenoesconfrecuenciasuficienteparaestablecerlaterapiaadecuada.
Muchasbacteriasyalgunoshongospresentanresistenciaalosagentesantimicrobianosyalgunosvirushandesarrolladoresistencia
alosagentesantiviralesmsactuales.Lospatronesderesistenciacambianenformaconstanteynoimportalorpidamentequese
introduzcan los nuevos agentes teraputicos porque los microbios parecen siempre dispuestos a superarlos. Incluso entre los
neumococos,quepordcadashanpermanecidoinvariablementesusceptiblesanivelesdepenicilinaGmenoresde0.04U/ml,han
aparecidocepasquehandesarrolladoresistenciaaestadroga.

Ya que no se puede predecir la susceptibilidad de las bacterias, hongos y virus a los agentes antimicrobianos, con frecuencia es
necesario estudiar la sensibilidad individual de cada patgeno a estas drogas, pudindose elegir entonces el agente apropiado (el
ms activo contra el patgeno, el menos txico para el husped, con las caractersticas farmacolgicas apropiadas y el ms
econmico),queproporcionamayoresposibilidadesdeunaevolucinfavorable.

Por supuesto, el resultado teraputico final depende de muchas otras variables. La enfermedad subyacente y condicin clnica del
husped, las propiedades farmacolgicas del agente antimicrobiano, la administracin de otros agentes teraputicos adicionales y
otros factores ejercern una fuerte influencia sobre el desenlace final. Los microbilogos slo pueden recomendar agentes
teraputicos sobre la base de sus actividades in vitro. El clnico debe tomar la decisin final, teniendo en cuenta su conocimiento
sobretodoslosfactorespertinentes.

Unconceptoimportantesobreelqueesnecesarioinsistiresquenosepuedenrealizarpruebasdesensibilidadinvitroconcultivos
mixtos,sloloscultivospurosproporcionarnresultadosvlidossobrelaeficaciadeunantibitico.

Enlaprcticadiaria,unabuenapartedelostratamientosefectuadostantoanivelhospitalariocomoambulatorio,seestablecencon
arreglo a unos criterios derivados del estudio in vitro del comportamiento de las distintas especies bacterianas frente a un
determinado grupo de antibiticos (tratamiento emprico). Ello se debe a que en muchas ocasiones, no puede disponerse de la
bacteria aislada del proceso infeccioso y la eleccin teraputica, en esos casos, responde a criterios de empirismo derivados
precisamente del conocimiento del comportamiento de distintos tipos de antibiticos frente a las bacterias presuntamente
responsablesdelainfeccin.

Por otra parte, cada vez se hace ms necesario contar con un diseo de un programa de vigilancia de la resistencia a los
antimicrobianos,anivelgeneral,basadoprecisamenteenelconocimientoquetantoanivelhospitalariocomoambulatoriosetiene
delcomportamientodelosdistintosaislamientosdebacteriasfrentealosantimicrobianosparapoderdisearlasactuacionesque
tiendanasuperarlaresistenciadelasmismasalosantibiticos.

Se hace necesario tambin contar no solamente con criterios de tipo cuantitativo o cualitativo (sensible, intermedio, resistente),
sino que adems los resultados han de interpretarse adecuadamente para evitar llegar a conclusiones errneas que pueden
derivarse de atender exclusivamente al dato que el sistema de realizacin del antibiograma nos ofrece ya que existen muchas
formas de interrelacin bacteriaantibitico que deben conocerse para llegar a ese objetivo final que es la eleccin de la terapia
msadecuada.

En lneas generales y en funcin sobre su forma de actuar sobre los microorganismos, hablamos de dos grandes grupos de
antibiticos

Antibiticos primariamente bactericidas: Ejercen una accin letal e irreversible sobre el microbio (Fosfomicina
Vancomicina.BLactmicosPolimixina.AminoglucsidosRifampicina.AcidoNalidxicoQuinoleinas.Nitrofurantoinas)

Antibiticosprimariamentebacteriostticos:Inhibenelcrecimientoperonomatanalmicroorganismo,
permitiendoquelaspropiasdefensasdelhuspedpuedeneliminaralasbacterias(TetraciclinaCloranfenicol.
SulfonamidasTrimetroprim.LincomicinaClindamicina.Macrlidos)

Elantibiograma
Porqurealizarunantibiograma?

Elprimerobjetivodelantibiogramaeseldemedirlasensibilidaddeunacepabacterianaquesesospechaeslaresponsabledeuna
infeccinaunoovariosantibiticos.Enefecto,lasensibilidadinvitroesunodelosrequisitospreviosparalaeficaciainvivodeun
tratamientoantibitico.Elantibiogramasirve,enprimerlugar,paraorientarlasdecisionesteraputicasindividuales.

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El segundo objetivo del antibiograma es el de seguir la evolucin de las resistencias bacterianas. Gracias a este seguimiento
epidemiolgico, a escala de un servicio, un centro de atencin mdica, una regin o un pas, es como puede adaptarse la
antibioterapiaemprica,revisarseregularmentelosespectrosclnicosdelosantibiticosyadoptarseciertasdecisionessanitarias,
comoelestablecimientodeprogramasdeprevencinenloshospitales.

Haypuesundobleinters:Teraputicoyepidemiolgico.

Cundorealizarunantibiograma?

Siempre que una toma bacteriolgica de finalidad dagnstica haya permitido el aislamiento de una bacteria considerada
responsabledelainfeccin.

Establecer esta responsabilidad exige una colaboracin entre el bacterilogo y el clnico. En efecto, en ciertas circunstancias, el
microbilogonopodrdeterminarconcertezaqueelaislamientodeunabacteriaexigeunantibiograma,sinlosdatosclnicosque
leaportaelmdico.Porejemplo,unabacterianopatgenapuedeserresponsabledelainfeccindeunenfermoinmunodeprimido
oenunlugardeterminadodelorganismo.Lapresenciadesignosclnicospuedesertambindeterminanteparalarealizacindeun
antibiograma(porejemplo:lainfeccinurinariaconunnmeroreducidodegrmenes).

Sensibilidadbacterianaalosantibiticos

La determinacin de la Concentracin Inhibidora Mnima (CIM) es la base de la medida de la sensiblidad de una bacteria a un
determinadoantibitico.LaCIMsedefinecomolamenorconcentracindeunagamadedilucionesdeantibiticoqueprovocauna
inhibicindecualquiercrecimientobacterianovisible.Eselvalorfundamentaldereferenciaquepermiteestablecerunaescalade
actividaddelantibiticofrenteadiferentesespeciesbacterianas.

Hay diferentes tcnicas de laboratorio que permiten medir o calcular de rutina, y de manera semicuantitativa, las CIM (mtodos
manualesymtodosautomatizadososemiautomatizados).Estosdiferentesmtodosderutinapermitencategorizarunaciertacepa
bacteriana en funcin de su sensibilidad frente al antibitico probado. Esta cepa se denomina Sensible (S), Intermedia (I) o
Resistente(R)alantibitco.

Paraundeterminadoantibitico,unacepabacterianaes,segnlaNCCLS:

Sensible,siexisteunabuenaprobabilidaddexitoteraputicoenelcasodeuntratamientoaladosshabitual.

Resistente, si la probabilidad de xito teraputico es nula o muy reducida. No es de esperar ningn efecto
teraputicoseacualfuereeltipodetratamiento.

Intermedia, cuando el xito teraputico es imprevisible. Se puede conseguir efecto teraputico en ciertas
condiciones(fuertesconcentracioneslocalesoaumentodelaposologa).

Ciertas molculas son representativas de un grupo de antibiticos. Los resultados (S, I, R) obtenidos con estas molculas pueden
serampliadosalosantibiticosdelgrupo,queenesecasonoesnecesarioensayar(Ejemplo:Equivalenciaentrelacefalotinaque
se ensaya y las restantes cefalosporinas de 1 generacin que no es necesario probar, ya que el resultado puede deducirse del
obtenidoenlacefalotina).
Estehechopermiteensayarunnmeroreducidodeantibiticos,sinlimitarporellolasposibilidadesteraputicas.

InterpretacindeunAntibiograma

Certosmecanismosderesistenciaseexpresandbilmenteinvitro,cuandoseinscribenenelDNAbacteriano.Suexpresinenel
organsmo, en donde las condicones en cuanto a medios son diferentes, expondra al riesgo de fracaso teraputico. Para evitar
esto,elantibiogramadebeserinterpretadodemaneraglobalafindedescubrir,atravsdelacomparacindelasrespuestaspara
cadaantibitico,unmecanismoderesistenciainclusodbilmenteexpresado.As,graciasalainterpretacin,unacepaqueaparece
como falsamente sensible ser categorizada como I o R (Ejemplo: Una cepa de Klebsiella pneumoniae productora de BLSE puede
aparecer sensible in vitro a las cefalospornas de 3" generacin. El resultado de Sensible debe ser corregido a Intermedio o
Resistente,yaquelautilizacindeestosantibiticoscorreraelriesgodeprovocarunfracasoteraputico).

Resistenciabacteriana
Cada antibitico se caracteriza por un espectro natural de actividad antibacteriana. Este espectro comprende las especies
bacterianasque,ensuestadonatural,sufrenunainhibicindesucrecimientoporconcentracionesdesuantibiticosusceptiblesde
seralcanzadasinvivo.Aestasespeciesbacterianasselesdicenaturalmentesensiblesadichoantibitico.Lasespeciesbacterianas
quenoseencuentranincluidasdentrodedichoespectrosedenominannaturalmenteresistentes.

El antibitico no crea resistencia, pero selecciona las bacterias resistentes eliminando las sensibles. Es lo que se conoce con el
nombre de presin de seleccin. El aumento de la frecuencia de las cepas resistentes va unido cas siempre al uso intensivo del
antibiticoencuestin.

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Laresistencia natural es un carcter constante de todas las cepas de una misma especie bacteriana. El conocimiento de las
resistencias naturales permite prever la inactivdad de la molcula frente a bacterias identificadas (despus del crecimiento) o
sospechosas (en caso de antiboterapia emprica). En ocasiones, constituye una ayuda para la identificacin, puesto que certas
especiessecaracterizanporsusresistenciasnaturales.Ejemplos:ResistencianaturaldelProteusmirabilisalastetraciclinasyala
colistina.ResistencianaturaldelaKlebsiellapneumoniaealaspenicilinas(ampicilina,amoxicilina).

Laresistenciaadquridaesunacaractersticapropiadeciertascepas,dentrodeunaespeciebacteriananaturalmentesensible,
cuyopatrimoniogenticohasidomodificadopormutacinoadquisicindegenes.Contrariamentealasresistenciasnaturales,las
resistencias adquiridas son evolutivas, y su frecuencia depende a menudo de la utilizacin de los antibiticos. En el caso de
numerosasespeciesbacterianas,yteniendoencuentalaevolucindelasresistenciasadquiridas,elespectronaturaldeactividad
noesyasuficenteparaguiarlaeleccindeuntratamientoantibitico.Enesecaso,sehaceindispensableelantibiograma.

Unaresistencia cruzada es cuando se debe a un mismo mecanismo de resistencia. En general, afecta a varios antibiticos
dentro de una misma familia (Ejemplo: La resistencia a la oxacilina en los estafilococos se cruza con todas los lactmicos). En
ciertos casos, puede afectar a antibiticos de familias diferentes (Ejemplo: La resistencia por impermeabilidad a las ciclinas se
cruzaconlaresistenciaalcoloranfenicolyaltrimetoprima).

Unresistencia asociadaescuandoafectaavariosantibiticosdefamiliasdferentes.Engeneral,sedebeala.asociacinde
varios mecanismos de resistencia (Ejemplo: La resistencia de los estafiolococos a la oxacilina va frecuentemente asociada a las
quinolonas,aminoglicsidos,macrolidosyciclinas).

Conelfindetenerencuentalaevolucindelasresistenciasadquiridasy,porconsiguiente,proporcionaralosmdicosdatostiles
cuandodebenprocederalaeleccinempricadeunaantibioterapia,lanocindeespectroclnicocompletaladeespectronatural.
Definido para cada antibitico, este espectro clnico se incluye en el Resumen de las Caractersticas del Producto (RCP). Este
espectro integra no solamente datos bacteriolgicos (espectro natural, frecuenca de las resistencias adquiridas), sino tambin
datos farmacocinticos y clnicos (las especies descritras en el espectro son aquellas para las que se ha demostrado la actividad
clnicadelproducto).Elespectroclnicoserevisaregularmenteparatenerencuentalaevolucindelasresistenciasadquiridas.

Evolucin,engeneral,dealgunas Evolucin,enhospital,dealgunas
resistenciasbacterianas resistenciasbacterianas

Mecanismosdelaresistenciaadquirida

Elmecanismogenticodeadquisicindeunaresistenciapuedeser:

La mutacin de un gen implicado en el modo de accin de un antibitico: Este mecanismo afecta preferentemente a ciertos
antibiticos:quinolonas,rifampicina,cidofusdico,fosfomicina,antituberculososyavecescefalosporinas(Ejemplo:Laresistencia
alasquinolonaspormodificacindelADNgrasaenlasenterobacterias).

Laadquisicindegenesderesistenciatransferidosapartirdeunacepapertenecienteaunaespecieidnticaodiferente:Ciertos
Antibiticos estn particularmente afectados por este mecanismo: lactmicos, aminoglicsidos, tetraciclinas cloranfenicol,
sulfamidas(Ejemplo:ResistenciaalaampicilinaE.coliydelProteusmirabilis).

Elmecanismobioqumicodelaresistenciapuedeser:

unaproduccinporlabacteriadeenzimasqueinactivanelantibitico.Ejemplo:Penicilinasadelosestafilococos,lactamasade
amplioespectro(BLAE)delasenterobacterias.

una modificacin del blanco del antibitico. Ejemplo: Modificacin de las Protenas de Enlace con la Penicilina (PBP) de los
estafilicocosresistentesalaoxacilina(llamadosestafilococos"MetiR").Neumococosresistentesalapenicilina.

una impermeabilidad de la pared bacteriana por modificacin o por disminucion cuantitativa de las porinas. Ejemplo:
Pseudomonasaeruginosaresistentealaimipenem.

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un mecanismo de efusin: expulsin de la molcula por un transporte activo. Ejemplo: Estafilococos resistentes a las
tetraciclinas.

Pruebasdesensibilidadbacterianainvitro
En la poca posterior al descubrimiento de las sulfonamidas y de la penicilina rara vez se probaba la sensibilidad de los
microorganismosalasdrogas.Lospacienteserantratadosenformaempricaylosmicroorganismosgeneralmenteeransensibles.
Slotraselsurgimientodelascepasresistentes,pocodespusdelaintroduccindeestosagentes,losmicrobilogoscomenzaron
aprobarlasensibilidaddeunmicroorganismoinfectantefrentealosagentesantimicrobianos.

En un primer momento, el mtodo estndar utilizado para las pruebas in vitro fue el de dilucin en caldo, que proporcionaba un
resultadocuantitativodelaconcentracindeagenteantimicrobianonecesariaparainhibireldesarrollodeunorganismodado.

Mtodobasededilucinencaldo

Enlosmtodosdedilucinencaldo,basedecasitodoslosmtodosutilizadosen
la actualidad, se colocan concentraciones decrecientes del agente antimicrobiano,
generalmente diluciones 1:2, en tubos con un caldo de cultivo que sostendr el
desarrollo del microorganismo. El caldo ms comnmente usado para estas
pruebaseseldeMuellerHintonsuplementadoconloscationesmagnesioycalcio.

Los agentes antimicrobianos se preparan en "soluciones madre" concentradas y

luegosediluyenencaldohastaobtenerlasconcentracionesapropiadas.

Un tubo de caldo se mantiene sin inocular como control negativo de crecimiento.

Luegodelaincubacinadecuada(usualmentedeundaparaelotro)seobservala
turbidez de los tubos que indicar desarrollo bacteriano. El microorganismo
crecereneltubocontrolyentodoslosotrosquenocontengansuficienteagente
antimicrobianocomoparainhibirsudesarrollo.Laconcentracindeantibiticoque
presente ausencia de crecimiento, detectada por falta de turbidez (igualando al
controlnegativo),sedesignacomolaConcentracinMnimaInhibitoria(CMI)(ver
esquemaampliado).

Para medir la capacidad de un antimicrobiano para matar a un microorganismo (CMB) se debe realizar la prueba de actividad
bactericida,queempleaelmismosistemadedilucinencaldoqueparamedirlasensibilidad.

Almismotiempoquelasuspensininicialdelmicroorganismoesinoculadaenlostubosdecaldo,setomaunaalcuotadeltubode
control de crecimiento, inmediatamente despus de ser sembrado, y se inocula tambin en una placa de agar para determinar el
nmerorealdeunidadesformadorasdecolonias(UFC)delinculo.Estenmeroseobtienealcontarlascoloniaspresentesluego
delaincubacindelaplacadeagarhastaeldasiguienteypormultiplicacinporelfactordedilucin.Porejemplo,usandounasa
calibradade0,01mlparasembrarlaplacaycontandounas250colonias,en1mldeltubooriginalhabr250/0,01.

UnavezdeterminadalaCMI,sesiembraunacantidadconocidadeinculodecadaunodelostubosdecaldoquenopresentaban
turbidez en placas de agar (la pequea cantidad del agente antimicrobiano que es llevada junto con el inculo se elimina por
dilucinenelagar),yelnmerodecoloniasquecreceenestossubcultivos,despusdeincubardurantelanoche,secomparacon
elnmerodeUFC/mldelcultivooriginal.Dadoqueinclusolasdrogasbactericidasnosiempreesterilizantotalmenteunapoblacin
bacteriana, la mnima concentracin del agente antibacteriano que permite sobrevivir a menos de 0,1 % del inculo original se
denominaconcentracinbactericidamnima(CBM)oconcentracinletalmnima(CLM).

LasCMIylasCMBdeunagenteantimicrobianopuedenserdeterminadas,conestemtodooconalgunavariante,paracualquier
bacteriaquecrezcaenunmedioliquido.

Perosegnsepudodisponerdemayornmerodeagentesantimicrobianosparaeltratamientodeunagranvariedaddebacterias,
se hicieron aparentes las limitaciones del macromtodo de dilucin en caldo y se desarrollaron variantes de esta tcnica que
permitieran,porejemplo,probarsimultneamenteungerrnenaisladodeunpacientefrenteamsdeunagenteantimicrobiano.

Actualmentesonvarioslosmtodosqueseutilizanparallevaracabolosestudiosdesensibilidadalosantibiticosytodosellosse
realizanenloslaboratoriosdemicrobiologabajocondicionesentandarizadaspororganismosinternacionales.Entretodos,tresson
losque,porsusencillezyfiabilidad,sehanimpuestocomosistemticaderutinariaenlamayoradeloslaboratorios:

Pruebasdesensibilidadbacterianainvitro
Mtododedifusinenagar

Una vez demostradas las grandes ventajas de las tcnicas de dilucin en caldo, el paso siguiente, pensando sobre todo en poder
realizar fcilmente pruebas de sensibilidad de un microorganismo frente a mltiples antibiticos a la vez, consisti en buscar la

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maneradeaplicarlaideadirectamentealasplacasdeagar.

Las primeras pruebas se realizaron inoculando la superficie de una placa de agar con el microorganismo en estudio, colocando
pequeascubetas(demetalovidrio)sobreelagaryagregandolassolucionesdelosdiferentesantimicrobianosdentrodedichas
cubetas. Los agentes antimicrobianos difundan en el medio en forma radial alrededor de la cubeta e inhiban el desarrollo del
microorganismo en la zona donde su concentracin era suficientemente alta. Las reas de inhibicin grandes indicaban una
actividadantimicrobianamsefectiva.

Estemtodofuemodifcadoen1947porBondiycol.incorporandoelagenteantimicrobianoadiscosdepapeldefiltro.Fueunpaso
adelante gigantesco ya que el uso de los discos de papel permita preparar un gran nmero de pruebas idnticas y almacenarlas
parausofuturo.

En1966,despusdelosestudiosrealizadosporBauer,Kirby,SherrisyTurk,ensayandodiferentescepasbacterianas,elempleode
los discos de papel de filtro para las pruebas de sensibilidad fue estandarizado y correlacionado definitivamente con las CMI
correspondientes.

Durantemuchosaos,yapesardeserunatcnicapuramentecualitativa,elmtododedifusinpordisco(omtodoKirbyBauer),
enfuncinsobretododesucomodidad,economayfiabilidad,hasido,yaunes,unodelosmsutilizadosenloslaboratoriosde
todoelmundo.

El microorganismo a investigar se inocula en una o varias placas de agar y sobre su superficie se disponen los discos
correspondientes a varios antibiticos. Se incuban las placas durante 1624 horas a 35C y al cabo de este tiempo se estudia el
crecimiento en ellas. Se valora el dimetro de la zona de inhibicin que se forma alrededor de cada disco y se compara con las
referencias oportunas publicadas por el NCCLS. Con esta referencia podemos informar si el microorganismo es Sensible,
IntermediooResistente(S,I,R)acadaunodelosantibiticosensayadosenlasplacas.

Antibiogramarealizadoporelmtododedifusinenagar

Enestafotografasemuestraunejemplodeantibiogramarealizadoporelmtododedifusinenagarpormediodediscos.

En la imagen de la izquierda se muestra una vista general de una placa con crecimiento bacteriano y con seis discos de
antibiticos.Lazonadecolorclaroqueocupalamayorpartedelaplacaeselcrecimientobacterianoenlaszonasnoinhibidas.Los
crculosnegrosquerodeanacincodelosseisdiscosmarcanlaszonasenquelosrespectivosantibiticoshaninhibido,conmayor
omenoreficacia,elcrecimientodelmicroorganismoaestudio.Elsextodisco(AM10)notieneasualrededorhalodeinhibicinlo
queindicalaresistenciadelmicroorganismoaeseantibitico.

Lafotodeladerecha,unplanomscercanodelamitadsuperiordelaplaca,permiteobservarconmsdetallelosealadoenel
prrafo anterior. Puede verse adems, con gran claridad, la especial disminucin de la intensidad de crecimiento del
microorganismo en la zona interior del halo de inhibicin del disco de CTX30, debido probablemente a la aparicin de mutantes
resistentesdedichomicroorganismocapacesdesoportarenmayormedidaqueelrestoelefectoinhibitoriodelantibitico.

Pruebasdesensibilidadbacterianainvitro
MtododeEtest

Esunodelosmtodosmsrecientesquesehanpresentadoenelmercadoyresultadeunacuriosacombinacindecaractersticas
delosmtodosanteriores.SetratadeunatcnicacuantitativaenplacaquepermiteobtenerunalecturadirectadeCMIeng/ml,

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yaqueseempleantirasplsticasimpregnadasenconcentracionescrecientesdeantibiticoindicadasenunaescalagraduadasobre
lapropiatira.

Una de sus grandes ventajas, dadas sus caractersticas, es que resulta un mtodo ideal para estudiar cualquier tipo de
microorganismo, aerobio o anaerobio, incluyendo aquellos llamados "fastidiosos" o los que tengan requerimientos especiales para
crecer.

Elmicroorganismoainvestigarseinoculaenunaplacaysobreellasedepositalatiradelantibitico(oantibiticos)aensayar.Tras
laincubacinde1624horasa35Cseobservanlasplacasysevaloralazonadeinhibicin,deformaelptica,alrededordecada
tira.LaCMIseleedirectamenteobservandoelpuntomsbajodelaelipsequepresentecrecimiento.

AntibiogramarealizadoporelmtododeEtest

EnestafotografasemuestraunejemplodeantibiogramarealizadoporelmtododeEtest.

EnlafotografadelaizquierdasemuestraunavistageneraldeunaplacaconcrecimientobacterianoycondostirasdeEtest.La
zona de color ms claro que ocupa la mayor parte de la placa es el crecimiento bacteriano en las zonas no inhibidas. Las elipses
msoscurasquerodeanlapartesuperiordelastirasEtestmarcanlaszonasenquelosrespectivosantibiticoshaninhibido,con
mayoromenoreficacia,elcrecimientodelmicroorganismoaestudio.

Lafotodeladerecha,unplanomscercanodelamitadinferiordelaplaca,permiteobservarconmsdetallelosealadoenel
prrafoanterior.SeapreciaperfectamentecomoelpicodelazonamsestrechadelaelipseenlatiradeMZcoincide,enlaescala
graduada, con la franja entre las marcas de 1.5 y 2, lo que nos indicara que la CMI de este antibitico (MZ) para este
microorganismoserade2g/ml.

fotografa:DaniVal

Pruebasdesensibilidadbacterianainvitro
Mtodosautomatizados

Lamayoradeestosnovedososmtodosutilizansistemasdemicrodilucinenmediolquidosobremicroplacasconpocillosen"U"e
interpretan el crecimiento bacteriano en los diferentes pocillos por medio de un autoanalizador (mediciones por turbidez o
fluorescencia) o, en el caso de los sistemas ms sencillos, por simple lectura ptica del tcnico a travs de un visor invertido de
espejo.

Sumanipulacinsueleserfcilyrpida,generalmenteautomatizadaosemiautomatizada,loquelosconvierteenmtodosideales
paragrandesvolmenesdetrabajo.Unadesusgrandeslimitacionesesquesloofrecengarantaparainvestigarmicroorganismos
decrecimientorpidoyquenotenganrequerimientosespeciales.

Antibiogramarealizadopormtodoautomtico

Enestafotografasemuestraunejemplodeantibiogramarealizadoporunmtodoautomatizado.

Enlaimagendelaizquierdasemuestraunavistageneraldeunamicroplacaparaautoanalizadorqueincluyefasedeidentificacin
y fase de antibiograma (panel microScan). Las tres filas superiores de la microplaca son la zona de "identificacin" del
microorganismo,lascincofilasinferioressonelapartado"antibiograma".

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La foto de la derecha, un plano ms cercano de la mitad inferior izquierda de la microplaca, permite observar con ms detalle
algunas filas de pocillos con diluciones seriadas de algunos antibiticos. La dosificacin de cada antibitico aumenta, en cada fila,
de izquierda a derecha (obsrvese los rtulos bajo cada pocillo: 816 ... 12816 ... 2832). Los pocillos que en la imagen
muestran un color verde intenso tienen crecimiento bacteriano, o sea, el antibitico en cuestin no impide el desarrollo del
microorganismoaestudio.Lospocillostransparentesmarcaranlospuntosdeinhibicindecadaantibitico.

fotografa:DaniVal

Bibliografa:
http://www.danival.org/microclin/antibiot/_madre_antibiot.html

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