clulasclulasclulasclulasclulascl

ulasclulasclulasclulasclulasclula
sclulasclulasclulasclulasclulasc
lulasclulasclulasclulasclulasclul
asclulasclulasclulasclulasclulasc
Preparacin y observacin
lulasclulasclulasclulasclulasclu
con microscopio de clulas
lasclulasclulasclulasclulasclulas
vegetales y animales
clulasclulasclulasclulasclulascl
Clculo de aumentos
ulasclulasclulasclulasclulasclula
sclulasclulasclulasclulasclulasc
lulasclulasclulasclulasclulasclul
asclulasclulasclulasclulasclulasc
lulasclulasclulasclulasclulasclu
Elena Blanco de Tena-Dvila

lasclulasclulasclulasclulasclulas
1D Bachillerato
14 de Diciembre de 2012
Biologa
clulasclulasclulasclulasclulascl
ulasclulasclulasclulasclulasclula
sclulasclulasclulasclulasclulasc
1
 ndice

Contenido
1. Resumen ................................................................................................................ 3
2. Fundamento terico ............................................................................................... 3
3. Materiales ............................................................................................................... 8
3.1. Reactivos ......................................................................................................... 8
3.2. Materiales........................................................................................................ 8
4. Datos y conclusiones .............................................................................................. 9
MUESTRA 1) Epidermis de cebolla ....................................................................... 9
MUESTRA 2) Epidermis de lirio .......................................................................... 10
MUESTRA 3) Parnquima de reserva de patata y sber ....................................... 11
MUESTRA 4) Epitelio bucal ................................................................................. 13
5. Evaluacin ............................................................................................................ 14
5. Propuestas de mejora ........................................................................................... 15
6. Bibliografa y webgrafa ........................................................................................ 17

2
 1. Resumen

El primer objetivo de esta prctica era aprender y practicar las

tcnicas histolgicas bsicas para as preparar muestras de tejido biolgico
observables en el microscopio ptico. Para ello, hemos preparado siete
muestras (epidermis de cebolla, epitelio bucal, parnquima de reserva de patata
y sber, virutas de lpiz, piel de mandarina, epidermis de lirio y parnquima
cloroflico y tejido conductor de lirio) y posteriormente las hemos observado a
travs de un microscopio ptico.

El segundo objetivo de esta prctica era observar, estudiar e

identificar las caractersticas de los tejidos y clulas vegetales o animales
presentes en las muestras preparadas.

El tercer y ltimo objetivo de la prctica era calcular los aumentos de

las fotografas de las muestras estudiadas.

Los resultados de esta prctica nos permiten afirmar que

las tcnicas histolgicas, como la microtoma, la tincin, la

fijacin o el aclaramiento de la muestra, son fundamentales para
la observacin de tejidos biolgicos en el microscopio ptico,
las clulas y tejidos animales o vegetales que forman parte de
todos los seres vivos poseen caractersticas comunes y
diferencias,
es fundamental determinar el nmero de aumentos que posee la
fotografa de una muestra microscpica para as poder conocer
su tamao real.

2. Fundamento terico
Para la preparacin de muestras de tejido biolgico y su posterior
estudio gracias al microscopio deben tenerse en cuenta unas determinadas
tcnicas histolgicas. Las tcnicas histolgicas son una serie de operaciones
gracias a las cuales un tejido biolgico puede llegar a convertirse en un corte

3
extremadamente delgado y coloreado que puede ser observable con un
microscopio ptico.
Las tcnicas histolgicas bsicas que han sido estudiadas y puestas en
prctica en esta experiencia son las siguientes:
Microtoma. La microtoma consiste en la obtencin de cortes
extremadamente finos que puedan ser observados como
muestras en el microscopio ptico. Estos cortes pueden ser
realizados con instrumentos especficos, como el microtomo, o
con otros instrumentos menos precisos, como un bistur
(utilizado en esta prctica). El corte nunca deber sobrepasar los
10 m de espesor con el fin de que la luz que proviene del foco
del microscopio pueda atravesarlo.
Tincin. La tincin consiste en la adicin de unas gotas de
colorante a la muestra que va a ser observada. Los colorantes
reaccionan y tien determinadas zonas del tejido biolgico,
ocasionando que el contraste de la muestra aumente. La
utilizacin de colorantes es fundamental para preparar una
muestra que pueda ser fcilmente observada con un microscopio
ptico.
Aclaramiento. El aclaramiento consiste en un ligero lavado de la
muestra con el fin de eliminar el exceso de colorante. Este
lavado puede llevarse a cabo con agua y un cuentagotas, tal y
como hemos hecho en esta prctica.
Fijacin. La fijacin se debe llevar a cabo para inmovilizar la
muestra y para que los cambios post-morten del tejido o sus
deformaciones no sean observables. Para ello, la muestra se
baar en sustancias fijadoras como el formaldehido, el etanol o
el osmio. Una muestra tambin puede ser fijada siendo colocada
unos segundos sobre una fuente de calor (mtodo utilizado en
esta prctica).

4
 Las clulas que forman los tejidos que hemos observado en esta
prctica poseen formas, estructuras y funciones muy diferentes. El proceso que
posibilita la aparicin de estas clulas tan distintas es la diferenciacin celular.
La diferenciacin celular permite que diferentes clulas, con un origen comn
(clula huevo o zigoto), se especialicen para llevar a cabo un determinada
funcin. Estas clulas especializadas slo poseen activados aquellos genes que
les permiten presentar la forma y la estructura ms adecuada para desempear
su funcin de manera eficaz.

Los tejidos observados en esta prctica poseen caractersticas

comunes y diferencias. As mismo, las clulas que daban lugar a estos tejidos
posean similitudes y tambin variaciones de forma, funcin y estructura.

A continuacin, explicar en profundidad las caractersticas de cada

uno de estos tejidos y clulas y establecer las principales similitudes y
diferencias que existen entre ellos.

En primer lugar, estudiar las caractersticas de la epidermis de

cebolla. La epidermis est formada por clulas eucariotas vegetales muy
cohesionadas debido a las uniones celulares que tienen lugar gracias al
glucoclix. Tienen forma hexagonal y alargada. Estas clulas se encuentran muy
unidas con el fin de formar un tejido difcilmente penetrable y resistente para
poder proteger las diferentes capas de la cebolla. Adems, la forma poligonal
permite un mayor aprovechamiento del espacio y facilita su unin.

Estas clulas vegetales se caracterizan por su pared celular rica en

celulosa, que les aporta rigidez y soporte, as como por la presencia de
cloroplastos capaces de realizar la fotosntesis y sus enormes vacuolas, en las
que almacena pigmentos, enzimas, sustancias de desecho, agua, etc. Las clulas
eucariotas vegetales tambin poseen ncleo definido que contiene ADN,
similar al de las clulas animales, as como membrana plasmtica y citoplasma.
Tambin poseen otros orgnulos, como el Aparato de Golgi, los ribosomas, el

5
retculo endoplasmtico (liso y rugoso) y las mitocondrias. Debemos recordar
que la pared celular y los cloroplastos son orgnulos exclusivos de las clulas
vegetales. Tambin debemos recordar que, a diferencia de las clulas eucariotas
animales, las vegetales no poseen centriolos ni lisosomas.

La epidermis de la cebolla es caracterstica de plantas

monocotiledneas. Las clulas poseen una forma alargada y ms o menos
hexagonal y se distribuyen de manera ms o menos ordenada. Estn cubiertas
por una delgada capa de cutina, ceras y polisacridos, que impiden la prdida
de agua y le pueden otorgar a la planta un cierto brillo.

La epidermis reviste la parte interior y exterior de las mltiples

capas de la cebolla y las protege frente a determinados microorganismos, frente
a la desecacin y frente al dao mecnico. Tambin puede regular el
intercambio de gases y la transpiracin de la planta.

En segundo lugar, estudiar las caractersticas de la epidermis de

lirio, que posee unas caractersticas muy similares a la epidermis de la cebolla.
La epidermis del lirio est formada por clulas eucariotas vegetales y tambin
posee las caractersticas de la epidermis de las plantas monocotiledneas.

Las clulas vegetales de la epidermis del lirio poseen una pared

celular ms gruesa que las de la cebolla, lo que le confiere al tejido una mayor
rigidez y estabilidad. Adems, en este tejido epidrmico podemos observar
fcilmente unos pequeos poros conocidos como estomas. Los estomas son
unos orificios cuya principal funcin es intercambiar gases entre la planta y el
medio. A travs de los estomas entra el CO2, sale el O2 y se regula la emisin
de otros gases, como el vapor de agua. Los estomas estn formados por dos
clulas oclusivas (forma arrionada) cuya funcin es delimitar el tamao de un
espacio central llamado ostiolo.

La estructura de la epidermis del lirio es muy similar a la de la

cebolla. Las clulas tienen una forma poligonal y alargada y se distribuyen de

6
manera ordenada. La epidermis protege al lirio frente a las agresiones externas,
los golpes, la deshidratacin y regula el intercambio de gases mediante los
estomas.

En tercer lugar, estudiar las caractersticas del parnquima de

reserva de la patata y el sber. El sber, tambin conocido como falema, es una
capa que protege el interior vivo de la patata frente a la desecacin, los daos
externos, los golpes, algunos animales, etc. El sber est formado por clulas
vegetales muertas cuyas paredes poseen suberina, un polmero similar a la
cutina, que protege a la planta frente a agresiones trmicas y los golpes.

El parnquima de reserva es un tejido formado por clulas vegetales

cuya funcin es acumular sustancias de reserva en sus vacuolas, plstidos o
paredes celulares. Para poder llevar a cabo esta funcin, estas clulas se han
especializado y poseen unas vacuolas de gran tamao para poder almacenar la
mayor cantidad de sustancia posible. El parnquima de reserva es propio de
tubrculos como las patatas, rizomas, races napiformes como la zanahoria y
algunas frutas.

En cuarto y ltimo lugar, estudiar las caractersticas del tejido

epitelial bucal. Las clulas epiteliales analizadas han sido obtenidas con un
simple raspado de la parte interior del carrillo. La gran mayora de las clulas
obtenidas estn muertas o en proceso de desecacin.

El epitelio bucal est formado por clulas eucariotas animales. Estas

clulas, tal y como he explicado antes, no poseen pared celular ni tampoco
cloroplastos, puesto que son hetertrofas. El hecho de que no posean una
pared vegetal rgida, provoca que las clulas animales tengan una forma ms
irregular y no una forma poligonal. Las clulas animales poseen un ncleo
definido, retculo endoplasmtico (liso y rugoso), centriolos, aparato de Golgi,
ribosomas, vacuolas, mitocondrias y lisosomas. El contenido del citoplasma de

7
la clula queda delimitado por la membrana plasmtica. Puesto que la funcin
de estas clulas no es de reserva, sus vacuolas son muy pequeas.

El epitelio bucal es de tipo plano pluriestratificado. Recubre la cara

interna de la boca, la protege y posee algunas terminaciones nerviosas que
pueden captar estmulos como el dolor.

El tercer objetivo de esta prctica era calcular los aumentos de las

fotografas realizadas. Es fundamental expresar el nmero de aumentos que
posee una fotografa tomada con un microscopio. Si la fotografa no incluye una
escala o bien un nmero de aumentos, nos resultar imposible conocer la
medida real de la muestra fotografiada. Para calcular el nmero de aumentos
de una fotografa, debemos multiplicar el nmero de aumentos que
proporciona el ocular por el nmero de aumentos del objetivo. Por ejemplo,
en una fotografa tomada con un microscopio con un ocular de 10 aumentos y
un objetivo de 40 aumentos, el nmero total de aumentos ser 400.

Puesto que el ocular del microscopio utilizado posea 15 aumentos y

los objetivos posean 4, 10 y 45 aumentos respectivamente, llegamos a la
conclusin de que los aumentos que nos proporcionar el microscopio en cada
caso sern 60, 150 y 675 aumentos totales.

3. Materiales
3.1. Reactivos
Lugol
Azul de metileno
Verde de metilo

3.2. Materiales
10 portas
10 cubres
Microscopio ptico
Bistur

8
 Pinzas
Mandarina
Cebolla
Epitelio bucal
Lpiz
Hoja de lirio
Patata

4. Datos y conclusiones
MUESTRA 1) Epidermis de cebolla

IMAGEN 1: Epidermis de cebolla. Ana Victoria Rojo.

En esta imagen podemos observar la epidermis de la cebolla a 150 aumentos y sus principales partes.

En la Imagen nmero 1, podemos observar la epidermis de cebolla

a 150 aumentos. Podemos distinguir en esta foto las principales partes de una
clula eucariota vegetal. Las zonas que delimitan la clula, teidas de un azul
intenso, son las paredes celulares. Las zonas ms claras son el citoplasma. Los
orgnulos no son apreciables. Los pequeos crculos azules que se encuentran
en el interior de cada clula, son los ncleos. El nuclolo no es apreciable.

9
 Tras analizar esta foto, llegamos a varias conclusiones. La primera
de ellas es que, efectivamente, este tejido epitelial est formado por clulas.

En segundo lugar, observamos que las clulas son vegetales porque

poseen pared celular, citoplasma y ncleo. Adems observamos que son
alargadas, su forma es ms o menos hexagonal, y se encuentran ordenadas y
muy cohesionadas.

En tercer lugar, llegamos a la conclusin de que los orgnulos

celulares y los nuclolos no son apreciables en una fotografa con 150
aumentos. Necesitaremos una fotografa con un mayor nmero de aumentos
para observar la forma de los orgnulos.

MUESTRA 2) Epidermis de lirio

IMAGEN 2: Epidermis de lirio. Elena Blanco de Tena-Dvila.

En esta imagen podemos observar la epidermis del lirio a 675 aumentos y sus principales partes.

En la Imagen 2 observamos la epidermis del lirio a 675 aumentos.

Podemos distinguir las principales partes de una clula vegetal en esta foto. Las
zonas que delimitan la clula, teidas de verde oscuro, son las paredes
celulares. Las zonas ms claras son el citoplasma. Los orgnulos no son

10
apreciables. Los pequeos crculos verdes que se encuentran en el interior de
cada clula, son los ncleos. El nuclolo no es apreciable. En la zona de la
muestra fotografiada los estomas no son apreciables.

Tras analizar la imagen, llegamos a la conclusin de que este tejido

epitelial est formado por clulas.

La segunda, es que las clulas que forman el tejido epitelial del lirio
son clulas vegetales, pues poseen pared celular, ncleo y citoplasma.
Observamos que las clulas son poligonales, hecho que confirma nuestra
teora.

La tercera conclusin es que los orgnulos y el nuclolo de las

clulas tampoco son apreciables en una imagen a 675 aumentos. Necesitaremos
un microscopio con ms aumentos para poder apreciarlos.

MUESTRA 3) Parnquima de reserva de patata y sber

IMAGEN 3: Sber de patata. Elena Blanco de Tena-Dvila.

En esta imagen podemos observar el sber de patata a 150 aumentos y sus principales partes.

En la Imagen 3 podemos observar el sber de la patata a 150

aumentos. Podemos comprobar que est formado por clulas muertas que no

11
poseen citoplasma, sino que est rellenas de aire. Los puntos oscuros son
almidn que acaba de reaccionar con lugol.

Tras analizar la imagen, llegamos a la conclusin de que el sber de

la patata est formado por clulas vegetales, pues poseen pared celular.

En segundo lugar, observamos que las clulas estn muertas porque

no poseen citoplasma ni ncleo, slo estn repletas de aire.

En tercer lugar, llegamos a la conclusin de que el lugol slo est

presente en las clulas vivas. Podemos observar que en las clulas del sber no
hay almidn, sino que se encuentra en el parnquima de reserva.

IMAGEN 4: Parnquima de reserva de patata. Elena Blanco de Tena-Dvila.

En esta imagen podemos observar el parnquima de reserva de patata a 675 aumentos y sus principales partes.

En la Imagen 3 podemos observar el parnquima de reserva de

patata. Observamos dbilmente la pared celular de las clulas. El ncleo y los
orgnulos no aparecen. Las grandes manchas negras son almidn que acaba de
reaccionar con lugol. Son las vacuolas las que contienen ese almidn.

12
 Tras analizar la imagen, llegamos a la conclusin de que la
parnquima de patata est formada por clulas. Sin embargo, puesto que la
muestra no est teida, estas paredes caso no son visibles, al igual que el
ncleo. Nuestra segunda conclusin es, por lo tanto, que es fundamental llevar
a cabo una tincin del tejido biolgico que se quiera observar al microscopio
para poder distinguir claramente sus partes (pared celular, ncleo, citoplasma).

En tercer lugar, llegamos a la conclusin de que, efectivamente, las

clulas vegetales poseen una gran cantidad de vacuolas de gran tamao en las
que pueden almacenar almidn.

MUESTRA 4) Epitelio bucal

IMAGEN 5: Epitelio bucal. Elena Blanco de Tena-Dvila.

En esta imagen podemos observar el epitelio bucal a 150 aumentos y sus principales partes.

En la Imagen 5 podemos observar el epitelio bucal humano a 150

aumentos. Observamos de color rosado el citoplasma de las clulas, la
membrana plasmtica de color marronceo y, de morado, el ncleo. Las
clulas no tienen forma poligonal, sino que son irregulares.

13
 Tras analizar la imagen, llegamos a la conclusin de que el epitelio
bucal est formado por clulas animales, pues estas clulas no son poligonales,
sino irregulares. Esto significa que no poseen pared celular y que, por lo tanto,
son clulas animales.

La segunda conclusin a la que llegamos es que, cuando el tejido

tiene origen animal (humano en este caso), las clulas que lo conforman sern
eucariotas animales. Tal y como hemos comprobado en las anteriores
experiencias, si las clulas provienen de plantas pluricelulares (cebolla, patata,
lirio), sus clulas sern eucariotas vegetales.

5. Evaluacin

Las conclusiones extradas en esta prctica son, en algunos casos,

generalizaciones. En esta prctica de laboratorio hemos trabajado con cinco
tejidos diferentes: la epidermis de la cebolla, la epidermis del lirio, el
parnquima de reserva de patata, el sber de patata y el epitelio bucal humano.
Tras tratar y observar estos tejidos, hemos llegado a la conclusin, por ejemplo,
de que los tejidos que proceden de animales estn formados por clulas
animales y las plantas estn formadas por clulas vegetales. A pesar de que esta
afirmacin puede parecer obvia, si queremos asegurar que es verdadera,
deberamos observar ms tejidos de diferentes clases y orgenes.

En esta prctica, he estudiado y observado cinco tejidos. Sin embargo, el

tiempo del que dispusimos para realizar la prctica fue muy pequeo en
comparacin con el nmero de muestras que debamos observar. El guin de
prctica de debemos seguir cada vez que trabajamos en el laboratorio,
estableca que las muestras que debamos observar eran siete. Las muestras
observadas han sido cinco, dos menos de las previstas.

14
 En esta prctica hemos aprendido algunas tcnicas citolgicas e
histolgicas bsicas (microtoma, tincin, aclaramiento, fijacin). Hemos
aplicado estas tcnicas en todas las muestras observadas y las hemos llevado a
cabo correctamente. La observacin en el microscopio ha sido muy buena.

Las muestras preparadas gracias a las tcnicas histolgicas se observaban

muy bien en el microscopio. Ha sido sencillo identificar las diferentes partes
del tejido, as como el tipo de clulas que lo componan.

El clculo de aumentos ha supuesto un pequeo problema. Debemos

tener en cuenta que las fotos presentadas en este trabajo han sido realizadas con
una cmara digital ajustada al objetivo del microscopio. Por lo tanto, no
debemos tener en cuenta tan slo los aumentos que nos proporciona el
microscopio, sino que tambin deberamos tener en cuenta los que
proporciona la cmara. Sin embargo, olvid apuntar cules eran los aumentos
que la cmara nos proporcionaba y, en esta prctica, he tenido en cuenta slo
los aumentos propios del microscopio.

Por otra parte, he de comentar que el trabajo de laboratorio ya se

desarrolla sin incidencias y con un gran aprovechamiento del tiempo. Tanto yo
como mi compaera de laboratorio hemos aprendido a compenetrarnos y a
trabajar en equipo durante las prcticas de Biologa.

5. Propuestas de mejora

En primer lugar, creo que para poder obtener ms y mejores

conclusiones, debemos analizar un mayor nmero de muestras de diferente
tipo y origen (tejidos procedentes de ms animales, amebas, algas, bacterias).
De este modo, habramos podido estudiar ms profundamente las diferencias y
similitudes de diferentes clulas y tejidos.

En segundo lugar, opino que deberamos haber dedicado algo ms de

tiempo para realizar esta prctica. El tiempo del que dispusimos para crear las

15
siete muestras y observarlas fue muy limitado. Por este motivo, propongo
dedicar por lo menos dos clases a este tipo de prcticas en el futuro.

Mi tercera propuesta de mejora es utilizar material de mayor precisin a

la hora de obtener los cortes finos que sern observados posteriormente con el
microscopio. En esta prctica, utilizamos un bistur y los resultados obtenidos
han sido buenos. Sin embargo, si utilizamos instrumentos como el micrtomo,
la observacin ser ms sencilla y las partes del tejido sern ms fcilmente
identificables.

Por ltimo, he de decir que ser importante no cometer los errores

cometidos en esta prctica en las prximas experiencias en el laboratorio.
Deberemos recordar que la cmara aumenta la imagen de la muestra que nos
da el microscopio. Las soluciones a este problema sern utilizar una cmara
propia de microscopio (en las que se indica los aumentos que proporcionan a
la fotografa) o bien anotar y aadir los aumentos que proporciona la cmara a
los aumentos totales del microscopio.

16
6. Bibliografa y webgrafa
Autor annimo: Clula animal. http://es.wikipedia.org,
http://es.wikipedia.org/wiki/C%C3%A9lula_animal, 19 de Diciembre
de 2012.
Autor annimo: Clula vegetal. http://es.wikipedia.org,
http://es.wikipedia.org/wiki/C%C3%A9lula_vegetal, 20 de Diciembre
de 2012.
Autor annimo: Clulas de la epidermis de la cebolla.
http://www.juntadeandalucia.es,
http://www.juntadeandalucia.es/averroes/~14008068/biologiaygeologia
/practicas%20biolog%EDa/celulas%20de%20la%20epidermis%20de%
20cebolla.htm, 18 de Diciembre de 2012.
Autor annimo: Epitelio. http://es.wikipedia.org,
http://es.wikipedia.org/wiki/Epitelio, 19 de Diciembre de 2012.
Autor annimo: Parnquima reservante. http://es.wikipedia.org,
http://es.wikipedia.org/wiki/Par%C3%A9nquima_reservante, 20 de
Diciembre de 2012.
Autor annimo: Sber. http://es.wikipedia.org,
http://es.wikipedia.org/wiki/S%C3%BAber, 20 de Diciembre de 2012.
Autor annimo: Tcnica histolgica. http://es.wikipedia.org,
http://es.wikipedia.org/wiki/T%C3%A9cnica_histol%C3%B3gica, 15
de Diciembre de 2012.
Autor annimo: Tejido epidrmico. http://es.wikipedia.org,
http://es.wikipedia.org/wiki/Tejido_epid%C3%A9rmico, 20 de
Diciembre de 2012.
MAGARIOS, Gabriel: Tcnica histolgica.
http://www.dermato101.com.ar,
http://www.dermato101.com.ar/tecnica.pdf, 15 de Diciembre de 2012.

17
18