ESTRUCTURA Y FUNCIN DE AMINOCIDOS Y PROTENAS
3.1. AMINOCIDOS COMO
CONSTITUYENTES DE LAS
PROTENAS
Las clulas vivas producen gran variedad de
macromolculas como son las protenas,
cidos nucleicos y polisacridos, entre
otros. Estas macromolculas son biopolme-
ros constituidos por unidades monomricas
o estructurales. Para los cidos nucleicos,
las unidades estructurales son los nucleti-
dos; para los polisacridos son los monosa-
cridos.
En virtud de que las protenas desempean
una amplia variedad de funciones esenciales
en los organismos, las cuales describiremos
ms adelante, es evidente que para conocer
tanto el funcionamiento normal como pa-
tolgico de un organismo se requiere un
conocimiento claro de la estructura y pro-
piedades de las protenas.
Aunque muchas protenas contienen otras
sustancias, adems de los aminocidos, la
estructura y muchas de sus propiedades bio-
lgicas estn determinadas por las clases de
aminocidos presentes y el orden en el que
estn dispuestos en la cadena polipeptdica.
Es asombroso que en una clula existan
millares de protenas con estructura y fun-
cin diferentes, pero resulta an ms sor-
prendente que todas ellas estn integradas
por slo 20 aminocidos comunes. Los ami-
nocidos comunes son aqullos para los que
existe un codn especfico en el cdigo ge-
ntico del DNA (ver el captulo cidos nu-
cleicos). Los aminocidos derivados son
generados despus de su incorporacin a la
molcula protenica.
Adems de ser las unidades estructurales
de las protenas, los aminocidos tienen
otras funciones importantes como la trans-
misin de impulsos en el sistema nervioso,
como material energtico, y otros.
3.1.1. Estructura general
Desde el descubrimiento del primer amino-
cido, asparagina, en 1806, habran de pasar
ms de 130 aos para que le llegara el turno
a la treonina, con la que se cerr la lista de
los 20 aminocidos.
Un aminocido es un compuesto que con-
tiene dos grupos funcionales: un grupo amino
y uno carboxo. Ambos grupos estn unidos
al mismo tomo de carbono, designado car-
bono a. Al carbono a de cada aminocido
tambin est unido un tomo de hidrgeno y

del esprrago, alanina de alantoides) o de al-
guna propiedad caracterstica (glicina por su
sabor dulce). De la denominacin trivial ha
surgido una abreviatura de tres letras que, da-
das las tcnicas modernas de secuenciacin,
han obligado la anotacin de los aminoci-
dos por una sola letra mayscula (tabla 3.1.).
Los aminocidos presentes en las prote-
nas pueden clasificarse en dos grandes gru-
pos dependiendo de la polaridad relativa de
sus grupos R (tabla 3.2).
Tabla 3.2.
Clasificacin de los L-a-aminocidos presentes
en las protenas con base a las polaridades relati-
vas de sus grupos R. Un grupo no polar es aquel
que tiene poca o ninguna diferencia de car-
ga de una regin a otra, en tanto que un grupo
polar tiene una diferencia de carga relativamen-
te grande en diferentes regiones.

3.1.4.1. Aminocidos con grupo R no polar

Los aminocidos ms hidrofbicos (no pola-

res) son la fenilalanina, leucina, isoleucina,
valina, alanina, metionina y triptofano.
 La mayora de las cadenas laterales de los ca, lejos del agua de solvatacin de la super-
aminocidos ms hidrofbicos estn orien- ficie.
tadas hacia el interior de la molcula protei-
 En la prolina el grupo R es nico ya que in-
corpora el grupo amino en la cadena lateral. Re-
almente la prolina es un iminocido que tiene
consecuencias estructurales importantes para
las protenas como veremos ms adelante.
La glicina, el ms pequeo de los amino-
cidos, puede encajar en regiones de la es-
tructura tridimensional de las protenas
inaccesibles para otros aminocidos.
3.1.4.2. Aminocidos con grupo R polar
sin carga
A este grupo pertenecen aminocidos cuya
cadena lateral tiene naturaleza polar (hidro-
fi'lic) como son la serina, treonina, cistena,
asparagina, glutamina y tirosina.
3.1.43. Aminocidos con grupo R polar
con carga negativa
En esta categora se encuentran los cidos
asprtico y glutmico.
3.1.4.4. Aminocidos con grupo R polar
con carga positiva
Los aminocidos que pertenecen a este gru-
po son la lisina, arginina e histidina.
Las cadenas laterales de los aminocidos
polares sin carga se encuentran en propor-
ciones significativas tanto en el interior co-
mo en la interfase de la protena con el
disolvente. Por el contrario, los aminocidos
polares glutamina y asparagina y los que tie-
nen grupos cargados a pH 7.0 como Usina, 3.1.5.1. Ejemplos de importancia
arginina, histidina, glutamato y aspartato se
hallan predominantemente en la superficie La omitira funciona como intermediario en
de las protenas globulares donde la carga se el metabolismo de la treonina, aspartato y
encuentra estabilizada por el disolvente metionina; junto con la citrulina, es un inter-
acuoso. La colocacin poco usual de una ca- mediario en la biosntesis de la urea.
dena lateral cargada en el interior de una
protena globular se correlaciona con un pa-
pel estructural o funcional esencial.
Los grupos R con carga de los aminoci-
dos bsicos y acdicos, tienen un papel clave
en la estabilizacin de la conformacin pro-
tenica a travs de enlaces salinos. Adems,
funcionan en sistemas enzimticos que re-
quieren de transmisin de cargas. Ya se ha
mencionado el lugar importante de la histi-
dina en la catlisis enzimtica en virtud de la
carga de su grupo imidazol que le permite
funcionar, a pH 7.0, como base o como ci-
do cataltico.

3.1.5. Aminocidos no protenicos

Existen aminocidos que no forman parte de
las protenas pero que realizan importantes
funciones en el metabolismo intermediario,
o bien, como hormonas, neurotransmisores
y otras.
La DOPA (dihidroxifenilalanina) es un
aminocido neurotransmisor, precursor de
la melanina y se encuentra en la va meta-
blica biosinttica de las aminas neuro-
transmisoras: d o p a m i n a , a d r e n a l i n a y
noradrenalina.
 molcula de agua y formando un tipo de en-
lace amida conocido como enlace peptdico
(fig-3.8)

3.2.2. Formacin
El enlace peptdico posee una serie de inte-
resantes caractersticas estructurales. Dada

la resonancia del grupo carbonilo (-C-), el

II
o

El cido gama-aminobutrico (GABA) es enlace peptdico tiene naturaleza de doble

un neurotransmisor derivado del glutamato. enlace parcial.
H2N-CH2-CH2-CH2-COOH
GABA
3.2. ENLACE PEPTDICO
La reaccin ms importante de los amino-
cidos es el enlace peptdico. Este enlace de-
termina la fuerza de unin primaria de una
protena; su estructuracin corresponde a 3.2.3. Estructura del etano
una polimerizacin de aminocidos, es de-
cir, una protena es un polipptido complejo. Si recordamos la estructura del etano (un
enlace C-C) y del etileno (doble enlace
C=C) veremos que en el primer caso, los
3.2.1. Definicin tomos de carbono del etano giran libremen-
te teniendo como eje el enlace sencillo; en
El grupo a -carboxilo de un aminocido (RO cambio, el doble enlace del etileno repre-
puede unirse covalentemente al grupo a ami- senta una estructura rgida que impide la li-
no de otro aminocido (R2) eliminando una bre rotacin.
3.2.4 Estructura coplanar
El enlace peptdico con la caracterstica de
ser un doble enlace parcial, determina una
estructura rgida entre carbono y nitrgeno y
por lo tanto es un enlace coplanar. En un po-
lipptido, los carbonos a de aminocidos
cercanos estn en situacin trans respecto al
enlace peptdico.
3.2.5. Rotacin del enlace
As como en el enlace peptdico no puede
haber rotacin, s puede haberla en torno a
los enlaces C-N y C-C determinando ngu-
los de conformacin (y y <fr) que, en las
protenas naturales, presentan poca variabi-
lidad en sus valores. Esto trae como conse-
cuencia que, en un pptido, los enlaces
peptdicos presentan una alternancia que de-
termina una secuencia en zig-zag (fig. 3.10).
33. PPTIDOS
3.3.1. Definicin
Cuando los grupos amino y carboxilo de los
aminocidos se combinan para formar un
polipptido. Los aminocidos constituyen-
tes se denominan residuos de aminocidos.
Un pptido consta de dos o ms residuos de
aminocidos unidos por enlaces peptdicos.
En la figura 3.10 se muestra un tripptido en
el que hay que hacer notar que es aquel for-
mado con tres residuos, no con tres enlaces
peptdicos.
3.3.2. Clasificacin
Por convencin, las estructuras peptdicas se
describen a partir del residuo amino termi-
nal (grupo-NH2 libre), que se coloca a la iz-
quierda, y termina con el residuo carboxilo
terminal (grupo -COOH libre) que se coloca
a la derecha. La repeticin de este proceso
secuencial genera un polipptido con una
secuencia de aminocidos especfica ( R r
R2-R3-R4... Rp).
Aunque existen discrepancias en la litera-
tura, el trmino oligopptido se reserva para
molculas con 2 a 20 residuos, polipptido
de 20 a 50 residuos y protena a las que su-
peran esta cifra.
3.3.3. Representacin de estructuras
Las estructuras polipeptdicas pueden repre-
sentarse colocando el aminocido inicial (el
del extremo amino terminal) y a partir de s-
te colocar en zig-zag los residuos en el orden
secuencial correspondiente (fig. 3.11).
Como los poliptidos pueden contener un
nmero de residuos muy elevado, es poco
prctico usar las frmulas estructurales con-
vencionales. En cambio, puede utilizarse la
abreviatura de tres letras (o incluso de una
sola) para designar el pptido. En nuestro
ejemplo (fig. 3.11) se podra escribir: Ala -
Ser - Gli - Tre, o bien, A-S-G-T-.
3.3.4. Pptidos de importancia biolgica
En todos los seres vivos se han aislado pp-
tidos de inters biolgico. Uno de los ms
sencillos es el tripptido glutatin (y-gluta-
mil-cisteinil-glicina), en el cual el glutamo
inicial est unido a la cistena por medio del
carboxilo gama (y) en lugar del alfa ( a ), co-
mo ocurre con la gran mayora de los pptidos.
Este tripptido lleva a cabo funciones oxido-
rreductoras por su grupo sulfhdrilo (-SH),
se requiere para la actividad de varias enzimas
y participa en el transporte de aminocidos.
Un grupo importante es el de los pptidos
cerebrales con actividad de neurotransmiso-
res, como la sustancia P (decapptido) o los
analgsicos opiceos como las endorfinas y
encefalinas. Tir-Gli-Gli-Fen-Met Encefali-
na (Metionina) Arg-Pro-Lis-Pro-Gln-Fen-
Fen-Gli-Leu-Met Sustancia P.
La oxitocina y vasopresina son polipti-
dos cclicos. Los antibiticos polipeptdicos
a menudo contienen D y L-aminocidos y
otros no presentes en protenas, por ejemplo,
la tirocidina y gramicidina S, que contienen
D-fenilalanina y ornitina. Estos poliptidos
no son sintetizados en los ribosomas.
 Otros polipptidos importantes son las
hormonas colecistocinina y gastrina, la insu-
lina y glucagn, la hormona liberadora de ti-
rotropina y otras.
3.4. PROTENAS
3.4.1. Definicin
Las protenas constituyen sin duda uno de
los grupos de molculas de gran trascenden-
cia en los seres vivos. Todas las protenas
son polipptidos de peso molecular elevado.
Arbitrariamente, como se ha sealado antes,
se ha establecido como lnea divisoria entre
poliptidos y protenas un peso molecular de
8,000 y 10,000. Una protena simple es aqu-
lla que contiene slo aminocidos; una prote-
na compleja contiene, adems, otras molculas
diferentes como el hemo (de la hemoglobi-
na), vitaminas, lpidos, carbohidratos o ele-
mentos minerales (metaloenzimas).
3.4.2. Importancia biomdica
Las protenas desempean una amplia varie-
dad de funciones que pueden agruparse en
dos clases: dinmicas y estructurales. De las
funciones dinmicas, la ms importante es la
funcin cataltica. De hecho, la mayor parte
de las reacciones qumicas celulares son
catalizadas por enzimas, casi todas ellas de
naturaleza proteica. En realidad, estas mol-
culas son tan importantes que merecen un
captulo especial dentro de la bioqumica.
Otra funcin dinmica de las protenas es
el transporte, ejemplos de este grupo son la
hemoglobina y mioglobina. Otras protenas
actan como hormonas. Las protenas tam-
bin pueden funcionar con un papel protector
como las inmunoglobulinas y el interfern.
Algunas participan en los mecanismos con-
trctiles como la miosina y actina. Otras tie-
nen una funcin de reconocimiento, como es
el caso de los receptores hormonales situa-
dos en la membrana celular o en el citosol.
Dentro de las protenas estructurales se
encuentran el colgeno, la elastina y la que-
ratina.
As pues, las protenas son quiz las macro-
molculas ms verstiles, que se responsabili-
zan en gran parte de las funciones metablicas
y de la morfologa de los seres vivos. No en
vano el trmino protena deriva del griego
proteos que significa "primero", "primoridaT.
3.4.3. Clasificacin
En la actualidad no existe un sistema de cla-
sificacin de las protenas universalmente
aceptado. Durante mucho tiempo se dividie-
ron en simples y conjugadas. Sin embargo,
en todas las protenas, aun las ms simples,
casi siempre estn asociadas otras molculas
llamadas grupo prosttico. En esto se basa
la clasificacin propuesta en la tabla 3.3.
3.4.3.1. Basada en su solubilidad
Un sistema de clasificacin basado en la so-
lubilidad todava est en uso, en particular
en bioqumica clnica (tabla 3.4.).
Sin embargo en esta clasificacin, no se
puede hacer una distincin entre albminas
y globulinas nicamente en base a sus solu-
bilidades en agua o en soluciones salinas.
As, se subdividieron en seudoglobulinas
(solubles al agua) y euglobulinas (insolubles
en agua exenta de sales).
3.4.3.2. Basada en la forma
Otra clasificacin se basa en la forma (rela-
cin entre longitud y amplitud) y en sta se
consideran Xas protenas globulares, de for-
ma esfrica, solubles en agua, dentro de las
cuales se encuentran la insulina, albmina y
 Albminas Solubles en agua y en soluciones salinas. Sin aminocidos distintivos
Globulinas Escasamente solubles en agua pero solubles en soluciones salinas.
Sin aminocidos distintivos
Protaminas Solubles en etanol a 70-80% pero insolubles en agua y en alcohol etilco
absoluto. Ricas en arginina
Histonas Solubles en soluciones salinas
Escleroprotenas Insolubles en agua o en soluciones salinas. Ricas en glicina, alanina y prolina

globulinas plasmticas y numerosas enzimas. 3.4.4. Importancia biolgica de las

Las protenas fibrosas, son de forma alarga-
da, baja solubilidad en agua, resistentes a la
traccin, dentro de las cuales tenemos la
queratina, miosina, colgeno y fibrina.
3.43.3. Basada en sus funciones
Las protenas se pueden clasificar de acuer-
do a sus funciones en protenas estructura-
les, catalticas ( e n z i m a s ) , reguladoras,
protectoras (inmunoglobulinas), de trans-
porte, etc. (tabla 3.5).
protenas, Genes y protenas. Diversidad
Hemos mencionado el papel tan relevante y
verstil de las protenas con sus mltiples
funciones. La diversidad de formas y fun-
ciones proteicas que existen en una sola c-
lula, formadas a partir de 20 aminocidos,
nos indica que tal variabilidad depende de la
combinacin casi infinita de aminocidos en
cada una de las protenas existentes en un
ser vivo. Qu determina tal variabilidad?
En los siguientes subcaptulos hablare-
mos de los niveles de organizacin de la es-
una cadena lateral, designada R que es dife-
rente para cada uno de los 20 aminocidos
comunes excepto para la glicina (fig. 3.1).
3.1.2. Propiedades generales
3.1.2.1. Asimetra. Estereoisomera
Con excepcin de la glicina, para la cual
R-H, los cuatro grupos unidos al carbono a
de los aminocidos son diferentes. Esta
orientacin tetradrica con cuatro grupos di-
ferentes alrededor del carbono a confiere
actividad ptica (capacidad de rotar el plano
de luz polarizada) a los aminocidos. En la
configuracin absoluta, utilizando la pro-
yeccin de Fisher, el COOH est dirigido
hacia arriba y atrs del plano de la pgina, el
grupo R de la cadena lateral se dirige hacia
abajo y atrs del mismo plano, el grupo H y el
grupo -NH2 en el carbono a estn dirigidos
hacia el lector, si por convencin el grupo ex-
amino est proyectado hacia la izquierda, el
aminocido tiene la configuracin absoluta. Su
enantimero ptico, con el grupo a-amino
hacia la derecha tiene la configuracin abso-
luta denominada D, como en el D-gliceralde-
hdo (fig. 3.2). En las protenas de mamfero
slo se encuentran L-a-aminocidos.
La dificultad surgida de intentar denominar
familias de ismeros pticos con dos o ms
centros asimtricos ha dado lugar al estable-
cimiento de un mtodo ms general de desig
nacin estereoqumica, el sistema RS, donde
los grupos unidos a un orden basado en el n-
mero atmico: SH>OH>NH2>CDOH>CH3>H.
En todos los casos el grupo H se encuentra
debajo del plano. Si los otros tres grupos se
ordenan de mayor a menor prioridad en el
sentido de las manecillas del reloj, el centro
asimtrico es R (RECTUS en latn) y S (si-
nisterenel opuesto) (ver fig. 3.3.).
Dado que los aminocidos de las prote-
nas son asimtricos, las protenas tambin
tienen propiedades asimtricas.
3.1.22. Formas inicas de los aminocidos
Los grupos amino y carboxilo de un ami-
nocido pueden ionizarse. El pK del grupo
amino es 9.8 y el del grupo carboxilo es 2.1.
Por tanto, dentro de los lmites fisiolgicos del
pH, ambos grupos estn cargados (fig. 3.4),
constituyendo un ion dipolar o switterion
(en alemn, ion hbrido).
Cabe aclarar que la estructura sin carga de
un aminocido indicada en la fig. 3.1 no
puede existir a ningn pH, pero es posible
usarlo por conveniencia, al describir la qu-
mica de los aminocidos.
Los aminocidos tienen carcter anftero,
por comportarse como cidos o bases debi-
do a sus grupos ionizables. En los aminoci-
dos neutros, que existen como ion dipolar,
es decir, aquella forma en la que la carga po-
sitiva es igual a la carga negativa (carga neta
tructura proteica. El primer nivel, o estructu-
ra primaria, se refiere al orden de los ami-
nocidos en la cadena polipeptdica. Es
decir, cada protena posee un ordenamiento o
secuencia de aminocidos bien definido pe-
r o . . . qu determina ese ordenamiento?
Aqu debemos detenernos y, quiz adelan-
tando un poco, hablar de ese factor particular
en cada clula u organismo que determina
ese ordenamiento y, por ende, la gran diver-
sidad de estructuras y funciones proteicas.
Ese elemento dictador de la secuencia po-
lipeptdica es la unidad transmisora de los
caracteres hereditarios, el gene o gen; bio-
qumicamente, el DNA. La informacin ge-
ntica contenida en cada clula o individuo
se expresa a travs de una protena, muy fre-
cuentemente de una enzima. En este sentido,
las protenas vienen a ser las ejecutoras de
las ordenes dictadas por los genes. Sobre es-
to se tratar ms ampliamente en el captulo
de cidos nucleicos.
3.4.5. Niveles estructurales de una
protena*
3.4.5.1. E s t r u c t u r a primaria
La estructura primaria, ya familiar desd la
descripcin de los pptidos, se refiere al or-
den de los aminocidos en la cadena poli-
peptdica. La fuerza estabilizadora de esta
estructura es el enlace covalente (peptdico).
En esta estructura se incluye, adems de la
secuencia de aminocidos, la localizacin
de los puentes disulfuro (cistina).
La determinacin de la estructura prima-
ria de una protena es actualmente una tcnica
accesible a la mayor parte de los laborato-
rios de bioqumica. Esto ha sido posible gra-
cias a los esfuerzos de Sanger, quien en 1953
fue el primero en estudiar y determinar la
estructura primaria de una protena, la insu-
lina. Ahora se conoce la secuencia completa
de ms de 2,000 protenas, gracias a los mto-
dos automticos en el anlisis de aminoci-
dos introducidos por Moore y Stein en 1964.
El analizador automtico de aminocidos
(secuenciador) est cediendo lugar actual-
mente a sistemas basados en mtodos cro-
matogrficos de alta eficacia, que utilizan la
tcnica de degradacin de Edman, y los m-
todos secuenciales del gen que codifica a la
protena en estudio.
La importancia de la estructura primaria
es tal que una variacin en un solo amino-
cido de una cadena polipeptdica puede de-
terminar una falta letal en la protena
completa. El ejemplo clsico es el de la he-
moglobina S (HbS) que tiene la sexta posi-
cin de la cadena P ocupada por valina en
lugar de glutmico como la hemoglobina
normal (HbA). Los individuos que tienen
este defecto padecen anemia de clulas fal-
ciformes, con una elevada hemolisis y obs-
truccin de capilares por los eritrocitos
anormales.
3.4.5.2. Estructura secundaria
Si una protena estuviera constituida por s-
lo una disposicin polipeptdica lineal, su
nica conformacin posible, fuera la fibrosa.
Sin embargo, en virtud de la estructura co-
planar del enlace peptdico y los ngulos de
rotacin y vy que regularmente toman va-
lores de 132 y 123 respectivamente, surge
una estructura particularmente estable que
es la a-hlice. En este tipo de estructura se-
cundaria, la cadena polipeptdica se pliega
adoptando una forma helicoidal con giro a la
derecha que contiene 3.6 residuos de ami-
nocidos por vuelta. Esta estructura fue pro-
puesta inicialmente por Pauling y Corey. La
mxima estabilidad de la hlice est deter-
minada por puentes de hidrgeno que se es-
tablecen entre el grupo carbonilo (C-0) de
un enlace peptdico y el amino (N-H) pre-
sente cuatro residuos ms adelante en la ca-
dena (fig. 3.12).
 Figura 3.12. Representacin de un polipptido en conformacin de a-hlice
En la conformacin de a-hlice las cadenas
laterales R se proyectan en forma perpendi-
cular al eje de la hlice y hacia el exterior de
la estructura en espiral generada por la cade-
na peptdica. Si estos grupos R estn prxi-
mos y tienen carga del mismo signo o estn
ramificados (valina, isoleucina), sus interac-
ciones desestabilizan la estructura helicoi-
dal. Otro factor que rompe la conformacin
a-helicoidal es la presencia de prolina, ya
que el anillo pirrolidina de su cadena lateral
interacciona estricamente con la cadena la-
teral del aminocido precedente y, adems,
porque no puede ocurrir rotacin del enlace
N-C. La presencia de prolina entre dos cade-
nas en a-hlice produce una acodadura de
la direccin general de la molcula, lo cual
es de gran importancia en la configuracin
general de una protena. Otro aminocido
que tiende a desestabilizar la a-hlice es la
glicina, por tener un grupo R muy pequeo.
Pauling y Corey tambin propusieron otra
estructura secundaria que es la estructura P
(P porque fue una segunda estructura, sien-
do la a-hlice la primera). La conformacin p
est formada por dos o ms cadenas polipep-
tdicas que pueden ser paralelas (en el mismo
sentido) o antiparalelas (en direcciones opues-
tas) y se estabilizan tambin por puentes de
hidrgeno (fig. 3.13). En tanto que la hlice
es una cadena polipeptdica enrollada, la tira
plegada p est extendida y se dispone a la
manera de un acorden con los grupos R pro-
yectados por encima y por debajo de los planos
generados por las cadenas polipeptdicas. La
estabilidad es mayor en la conformacin an-
tiparalela, la ms frecuente en las protenas
naturales, incluso ms que la a-hlice.
En general, estas estructuras laminares se
dan en las protenas fibrosas como la quera-
tina del pelo y la piel, la fibroma de la seda;
la sustancia amiloide que se deposita en
condiciones patolgicas, es un depsito de
protena en forma de tira plegada.
Es comn que en numerosas protenas
ocurran simultneamente ambas estructuras,
la a-hlice y la hoja plegada p, como se
ilustra en la fig. 3.14.
Finalmente, dentro de la estructura secun-
daria, pueden existir algunas regiones de las
protenas que no son a-hlice ni tira plega-
da, sino que son conformaciones enrolladas
al azar. En trminos de su funcin biolgi- permiten agruparlas en familias y subfami-
ca, las regiones de enrollamiento aleatorio
son de igual importancia que las de a-hlice
o tira plegada.
3.4.5.3. Estructura terciaria
Existen razones sobradas para pensar que
gran parte de las protenas tienden a adoptar
forma esfrica, globular. Esto slo puede
ocurrir si suponemos que, adems del plega-
miento secundario, existe un superplega-
miento de la protena que da lugar a una
estructura compacta. Es la que se conoce co-
mo estructura terciaria de las protenas. Se
trata de un arreglo tridimensional que forma
diversos repliegues especficos.
Los tipos de enlaces que estabilizan la es-
tructura terciaria son: a) atraccin electros-
ttica de tipo salino entre un grupo carboxi-
lato (-COO - ) y un grupo amino (-NH3+) de
residuos glutamato o aspartato con Usina o
arginina; b) puentes de hidrgeno, entre gru-
pos carboxilato, oxhidrilo (-OH) o los pro-
pios grupos carbonilo (-C=0) de las
uniones peptdicas; c) interaccin de cade-
nas polares, como los grupos aromticos de
la fenilalanina o los no aromticos de alani-
na e isoleucina, etc; d) fuerzas de Van der
Waals, cuando los residuos son idnticos
como dos metilos de la alanina, hidroximeti-
los de la serina, etc; e) puentes disulfuro,
que se establecen entre los grupos sulfhidri-
lo (-SH) de la cistena para dar el enlace co-
valente disulfuro (-S-S-) entre cadenas
vecinas (fig. 3.15).
El resultado de las distintas uniones des-
critas es una estructura terciaria de gran es-
tabilidad. El estudio de la estructura terciaria
ha sido posible gracias a la cristalografa de
rayos X desarrollada por la escuela de Bragg
en Cambridge y a la labor pionera de Ken-
drew sobre la mioglobina y de Perutz sobre
la hemoglobina.
Las estructuras terciarias de las protenas
lias; por ejemplo, protenas fibrosas de for-
ma alargada y protenas globulares de forma
esferoidal.
3.4.5.4. Estructura cuaternaria
Cuando una protena se compone de ms de
una cadena polipeptdica, se dice que posee
estructura cuaternaria. Las protenas que po-
seen este grado de organizacin estructurai se
denominan oligomricas y las cadenas polipep-
tdicas individuales que la integran se denomi-
nan monmeros, protmeros o subunidades.
Cuando una protena oligomrica contiene dos
o cuatro monmeros o subunidades se deno-
mina dmero o tetrmero, respectivamente. El
mejor ejemplo estudiado es la hemoglobina
que es una protena tetramrica (fig. 3.16).
Figura 3.13. Conformacin p de una protena con disposicin paralela (a) antiparalela (b).
Figura 3.14. Representacin esquemtica del plegamiento de la cadena principal de la ribonucleasa bovina.
La regin de a-hlice est encerrada en un valo y la regin p est sombreada. Otras porciones constituyen
un enrollamiento al azar.

Figura 3.15. Tipo de uniones que estabilizan el plegamiento de las protenas. 1. interaccin electrosttica; 2
puentes de hidrgeno, entre treonina y serina; 3 interaccin dipolo-dipolo entre dos serinas; 4 unin de disul-
furo, convalente, entre dos cisternas, y 5. interaccin hidrofbica entre leucina e isoleucina.
Figura 3.16. Estructura cuaternaria de ias protenas. Esquema de la disposicin de cuatro subunidades de una
molcula de hemoglobina, formada por dos cadenas a en la parte inferior de la figura y dos cadenas p en la
parte superior.
 Los enlaces que mantienen la estructura
cuaternaria son del mismo tipo que los que
mantienen la estructura terciaria, excepto
enlaces covalentes. Por ejemplo, la ot-qui-
motripsina contiene tres cadenas polipept-
dicas unidas por enlaces disulfuro y no se
considera estructura cuaternaria. La mioglo-
bina est compuesta por una sola cadena
polipeptdica y no posee estructura cuater-
naria. Sin embargo, la hemoglobina contie-
ne 4 subunidades unidas no covalentemente
y, por tanto, tiene estructura cuaternaria. La
enzima aspartato transcarbamilasa tiene una
estructura cuaternaria formada por 12 subu-
nidades. Otros ejemplos incluyen la sintetasa
de cidos grasos, la piruvato deshidrogena-
sa, a las cuales se les conoce como complejos
multier>zimticos o estructuras supramole-
culares.
La estructura cuaternaria est ntimamen-
te ligada a las propiedades reguladoras de
las protenas, particularmente en los siste-
mas llamados alostricos. En estos siste-
mas, la respuesta puede estar afectada por la
presencia de efectores (inhibidores o activa-
dores) que modulan la accin primaria de la
protena (ver captulo de Enzimas).
Las estructuras secundaria y terciaria de
una protena estn determinadas por la es-
tructura primaria. Por lo tanto, no es necesario
postular un control gentico independiente
para los niveles de estructuracin superiores
al nivel primario, puesto que la estructura
primaria determina la secundaria, terciaria y
(cuando est presente) la cuaternaria.
3.5. RELACIN ENTRE
ESTRUCTURA Y FUNCIN
La actividad biolgica de una protena de-
pende del ordenamiento tridimensional
apropiado de sus grupos funcionales. De es-
te modo, las protenas slo funcionan cuan-
do estn plegadas en su estructura original o
conformacin nativa. Debido a que las con-
formaciones nativas de la mayor parte de las
protenas estn estabilizadas slo por enla-
ces no covalentes, el plegamiento puede ser
alterado por condiciones como alta tempera-
tura, pH extremo o presencia de solventes
orgnicos que debilitan las interacciones no
covalentes.
3.5. L Desnaturalizacin
La alteracin de una protena que modifique
su conformacin nativa se denomina desna-
turalizacin; este cambio provoca la consi-
guiente alteracin o desaparicin de sus
funciones. En una protena se produce la
desnaturalizacin al perder su estructura se-
cundaria, terciaria y cuaternaria, conservn-
dose la primaria (covalente). En el estado
desnaturalizado los niveles de estructura-
cin superior de la conformacin nativa se
encuentran al azar, es decir la protena alta-
mente ordenada queda reducida a un poli-
mero estadstico formado por una cadena de
aminocidos (fig. 3.17). La existencia de en-
laces disulfuro en una protena aumenta su
resistencia a la desnaturalizacin.
3.5.1.1. Agentes desnaturalizantes
Todos aquellos agentes capaces de romper o
alterar los enlaces que mantienen las estruc-
turas de orden superior de una protena pue-
den desnaturalizarla.
Un agente desnaturalizante muy comn es
el calor, esto tiene aplicacin cotidiana en el
laboratorio de bioqumica. Otros agentes f-
sicos (radiaciones, tensoactividad, altas
presiones) o qumicos (cidos, lcalis, urea,
detergentes) capaces de alterar las interac-
ciones dbiles pueden llegar a desnaturalizar
las protenas. En protenas cuya estructura
tridimensional est determinada por enlaces
disulfuro, pueden ser desnaturalizadas por
agentes reductores como el mercaptoetanol
o el ditiotreitol. En ocasiones esta alteracin
es reversible cuando se elimina el agente
agresivo. En otros casos la desnaturaliza-
cin es irreversible.
Una consecuencia de la desnaturalizacin
es la prdida drstica de solubilidad. Otras
alteraciones incluyen disminucin de la vis-
cosidad, velocidad de difusin y facilidad
con que cristalizan.
Siendo la conformacin de la molcula
protenica la base principal de su funcin, al
desnaturalizarse la protena, se altera su acti-
vidad fisiolgica. Por ejemplo, las globuli-
nas plasmticas desnaturalizadas pierden
sus funciones de anticuerpos.
3.5.2. Complementarte dad y capacidad
de reconocimiento
Existen protenas capaces de reconocer de-
terminado tipo de molculas que sern objeto
de su actividad. Ese sitio de reconocimiento
se debe a la presencia en la protena de una
estructura complementaria a la de la mol-
cula (llmese sustrato, hormona, antgeno,
efector, grupo prosttico), que permite a la
protena (sea enzima, anticuerpo, receptor
membranal) reconocer a la molcula en
cuestin y asociarse con ella en forma espe-
cfica. Para explicar el fenmeno de la espe-
cificidad, Emil Fisher propuso en 1894 una
analoga similar a la que existe entre llave y
cerradura.
En las protenas donde ms se ha ejempli-
ficado el fenmeno de la especificidad de
reconocimiento molecular es entre las enzi-
mas y su sustrato; de ellas nos ocuparemos
ms adelante. Otro ejemplo es el de la globi-
na que se une especficamente a su grupo
prosttico, el grupo hemo, debido a que la
protena tiene un hueco molecular con la
forma precisa para el hemo y dado que las
cadenas laterales de los aminocidos en con-
tacto con el anillo son no polares.
Clsico ejemplo de reconocimiento es la
unin de sustancias llamadas antgenos con
su anticuerpo especfico. El anticuerpo es
una molcula protenica especial pertene-
ciente al grupo de las inmunoglobulinas.
Los receptores membranales de reconoci-
miento de las hormonas, que representan el
primer sitio de accin hormonal, son tam-
bin protenas de reconocimiento.
Como regla general, un sitio fijador (de
reconocimiento) en una protena se ajusta al
compuesto que se va a unir en forma, tama-
o y polaridad.
3.5.3. Alosterismo
En algunas enzimas y en la hemoglobina se
encuentra, adems del sitio activo (para el
sustrato), otro sitio de reconocimiento para
molculas llamadas efectores alostricos; la
ocupacin de este otro sitio determina una
inhibicin o una activacin de la reaccin,
mecanismo conocido como alostrico. Un
mecanismo alostrico es un proceso comn
en molculas proteicas en el que la asocia-
cin del sustrato est influenciada por la fi-
jacin de otras molculas que no son
sustratos directos de la protena. En un pro-
ceso alostrico debe haber en la protena
centros separados de fijacin para el sustrato
(por ejemplo, O2 en el caso de la hemoglobi-
na) y el efector (inhibidor o activador) que
ejerce el control alostrico.
3.6. MTODOS DE SEPARACIN Y
ANLISIS
3.6.1. Cromatografa
Las experiencias en cromatografa se re-
montan a 1850, cuando Runge describi un
mtodo para el anlisis de mezclas de colo-
rantes, aplicando gotas de colorantes en pa-
pel y notando la separacin en diferentes
colores. Sin embargo, el crdito del descu-
brimiento de'la cromatografa se le d al bo-
tnico Tswett, quien en 1906 efectu la
separacin de mezclas de pigmentos vegeta-
les en un tubo conteniendo material adsor-
b e n t e s l i d o f i n a m e n t e d i v i d i d o . La
separacin cromatogrfica se basa en el coe-
ficiente de particin lquido-lquido de los
compuestos.
La cromatografa en papel, como todas
las tcnicas simples, ha revolucionado la se-
paracin y deteccin de productos de reac-
cin y la determinacin e identificacin de
compuestos. Desarrollada en 1944 por Mar-
tin en Inglaterra, consiste en colocar en tiras
de papel como soporte de una fase estacio-
naria acuosa mientras una fase mvil org-
nica se desplaza en la tira, gotas de la
sustancia a separar cerca del punto donde
partir el desplazamiento de la fase orgnica
(fig. 3.18).
La relacin de la distancia recorrida por el
compuesto entre la distancia que recorre el
frente del solvente desde el sitio de aplica-
cin se conoce como valor Rf (relacin de
frentes) del compuesto. Bajo condiciones
estrictamente controladas el Rf es una cons-
tante importante para propsitos de identifi-
cacin.
El mtodo descrito es cromatografa uni-
dimensional. La cromatografa bidimensio-
nal es una variante de considerable poder de
separacin, ya que se emplean dos diferen-
tes solventes aplicados secuencialmente pa-
ra desplazar un solo compuesto (fig. 3.19).
La gota del compuesto (generalmente un
aminocido o un pptido) se "revela" como
una mancha en el papel. El material usado
como revelador es usualmente la ninhidrina
mencionada antes.
La cromatografa en capa fina utiliza el
mismo principio de la cromatografa en pa-
pel (cromatografa de adsorcin); el soporte
utilizado es slica gel o celulosa colocadas
en una hoja de vidrio o plstico en forma de
capas muy finas. En este proceso, la separa-
cin cromatogrfica es muy rpida (fig.
3.20).
Las dos primeras tcnicas descritas se uti-
lizan generalmente para separar e identificar
aminocidos o pptidos pequeos. A conti-
nuacin se describirn tcnicas para la sepa-
racin e identificacin de protenas.
Tambin utilizando una separacin en co-
lumna, pero aprovechando las cargas resi-
duales de las protenas como carcter
diferencial, se describe la cromatografa de
 Figura 3.18 Cromatografa en papel.
intercambio inico. Las resinas de intercam-
bio inico para preparar la columna croma-
togrfica, se preparan a partir de materiales
insolubles (agarosa, poliacrilamina, celulosa,
etc.) que contienen ligandos cargados negati-
vamente (R-CH3-COO--SO5) o ligandos
cargados positivamente (dietilamino) uni-
dos a la resina insoluole.
Las resinas cargadas negativamente fijan
cationes conocindose como resinas de in-
tercambio catinico. Igualmente, las resinas
cargadas positivamente fijan aniones y se
denominan resinas de intercambio aninico.
El grado de retencin o retardo de una pro-
tena (o aminocido) por una resina depen-
der del nmero de cargas (positivas o
negativas) de la protena al pH del experi-
mento (revisar pl de una protena). Aquellas
molculas proteicas con la misma carga que
la resina se eliminarn primero, seguidas por
protenas de carga opuesta, que por atrac-
cin de cargas, se retendrn ms tiempo en
la columna. Cuando es difcil eliminar una
molcula fuertemente atrada por la resina,
se utilizan cambios de pH o fuerza inica
para debilitar la interaccin.
Los derivados de celulosa como carboxi-
metil celulosa (CMC) y dietilaminoetil celu-
cero), no se desplazan ni hacia el ctodo ni
hacia el nodo en un campo elctrico. El
punto isoelctrico (pl) de un aminocido se
define como el pH en el cual no tiene carga
elctrica neta; en el caso de los aminocidos
con slo un grupo amino y uno carboxilo co-
rresponde a la siguiente ecuacin:
pl = | ( P K 1+ pK2)
Si consideramos la curva de titulacin de
un aminocido sencillo como la glicina, su
equilibrio de ionizacin corresponde a:
A pH de 1 la forma inica predominante
tiene una carga de +1 (forma catinica) y se
desplazar hacia el ctodo en un campo
elctrico. La adicin de base hasta alcanzar
la forma de zwitterin, corresponde al punto
isoelctrico (pl=5.97).
La adicin de base a la forma dipolar de la
glicina, completa la titulacin del grupo -
NH 3, el pH de la solucin es superior a 11.5
y la especie predominante tiene una carga
formal de -1 (forma aninica).
Como puede verse en la fg. 3.5, la glicina
y otros aminocidos con cadena lateral no
ionizable y valores de pKi prximos a 2.5 y
de pK2 prximos a 9.5, pueden actuar como
amortiguadores en dos zonas de pH, donde
ninguna les permite actuar como amortigua-
dores al pH fisiolgico del plasma.
Precisamente, el pH de 7.4 es un valor
cercano al pl de dichos aminocidos, y ste
es el punto de menor solubilidad de amino-
cidos y protenas.
Un caso ms complejo lo constituyen los
aminocidos con un grupo ionizable en su
cadena lateral. Tal es el caso del cido glut-
mico y del asprtico que poseen un grupo
losa (DEAE) se han utilizado con xito en la identificar se pasa a travs de una columna
purificacin de protenas. empaquetada con pequeas esferas de resina
En la cromatografa lquida de alta reso- insoluble. Como en esta tcnica la resina es-
lucin, la mezcla de protenas a separar e t tan densamente empaquetada se requiere
de bombeo a elevada presin para forzar el cla de protenas se separa en funcin del ta-
paso de la protena. En esta tcnica la co- mao saliendo primero las protenas ms
lumna es metlica y no de vidrio como la grandes y a continuacin las ms pequeas,
cromatografa a presin normal. Las esferas las cuales se retardan por tener que viajar por
de resina pueden cubrirse con grupos carga- el retculo del gel (fig. 3.21).
dos, como en la cromatografa de intercam-
bio inico, o con residuos hidrofbicos con
lo que las molculas no polares se retrasarn
al paso por la resina. Las esferas pueden ser
porosas y actuar con el mismo principio de
la cromatografa de exclusin molecular, se-
parando molculas grandes de las pequeas.
La cromatografa de afinidad se basa en
la alta afinidad que tienen las protenas por
sus sustratos, grupos prostticos, receptores
de membrana, inhibidores no covalentes es-
pecficos y anticuerpos especficos. Estos
compuestos de alta afinidad se pueden unir
en forma covalente a una resina insoluble y
utilizarse para purificar una protena me-
diante cromatografa en columna.

3.6.2. Filtracin en gel Figura 3.21 Filtracin en gel o cromatografa de

La separacin de protenas de diferente ta-
mao hacindolas pasar a travs de una co-
lumna empaquetada con un gel poroso en
forma de pequeas esferas insoluoles se de-
nomina filtracin en gel o cromatografa de
exclusin molecular. El polisacrido dextra-
na es tratado qumicamente para que se for-
men enlaces cruzados que den un retculo o
malla por la cual pueden pasar molculas
pequeas. Esta sustancia queda como pe-
queas esferas hidroflicas, pero insolubles,
que al colocarlas en agua se hinchan para
formar un gel insoluble. El nombre comer-
cial de este gel es sephadex.
Las protenas pequeas pueden penetrar
por los poros del gel, por lo que tendrn que
desplazarse por espacios sinuosos y viajar
ms a travs de la columna, que las prote-
nas grandes, las cuales, al no poder penetrar
por el retculo del gel, son excluidas por mo-
tivos estticos. En consecuencia, una mez-
exclusin molecular en columna
El bioqumico tiene para elegir varios ti-
pos de sephadex para preparar columnas.
As, el sephadex G-25 excluye compuestos
de peso molecular de 3,500-4,500, sephadex
G-50 para PM de 8-10,000 y sephadex G-75
para 40-50,000 de PM. Los geles de sepha-
dex G-100 y G-200 se utilizan para separar
protenas de alto peso molecular.
3.6.3. Electroforesis
El movimiento de una partcula cargada en
un campo elctrico externo, hacia el electro-
do de carga opuesta se denomina electrofo-
resis. La electroforesis de protenas se ha
llevado a cabo de acuerdo al principio desa-
rrollado por el sueco Tiselius en 1937. Se-
gn esta tcnica, se hace pasar durante un
cierto tiempo, una corriente elctrica a tra-
vs de un tubo en U (un electrodo en cada
extremo) lleno con una protena disuelta en
un amortiguador con la misma fuerza ini-
ca, pH y conductividad. Durante la electro-
foresis, las diferentes protenas migran hacia
el electrodo de carga opuesta. El grado de
migracin depende de las cargas de la pro-
tenas, del P.M. y de la forma. El sitio donde
se concentra la protena en el tubo puede ser
determinado por un proceso ptico. La luz
refractada nos da un patrn de picos, cada
pico representa la separacin entre la mol-
cula proteica y el amortiguador (fig. 3.22).
El aparato de Tiselius se utiliz para de-
terminar el punto isoelctrico y la movilidad
electrofortica de las protenas. Una modifi-
cacin altamente simplificada de la tcnica
electrofortica de Tiselius es la llamada
elctroforesis de zona. En sta, la separa-
cin electrofortica se realiza sobre un so-
porte inerte como papel, almidn, agar,
acetato de celulosa y, el ms reciente gel de
poliacrilamida. La medida de la concentra-
cin de cada protena separada se hace por
revelado y lectura en un densitmetro.
Variantes ms desarrolladas de la elctro-
foresis simple son la inmunoelectroforesis y
el isoelectroenfoque. La primera combina la
separacin electrofortica con la especifici-
dad de las reacciones inmunolgicas. Es es-
pecialmente til para separar protenas y
otras sustancias antignicas con carga,
particularmente las protenas plasmticas
(fig. 3.23). El isoelectroenfoque ofrece una
resolucin sumamente elevada. En esta tc-
nica se utilizan mezclas de anfolitos formados
por cidos poliamino-policarboxlicos con un
intervalo de pl definido para establecer un
gradiente de pH a travs del campo elctrico
aplicado. Una protena cargada se desplaza-
r a travs del gradiente de pH en el campo
elctrico hasta que alcance una regin de pH
en el gradiente igual al valor de su pl. En es-
te punto la protena se mantiene estacionaria
en el campo elctrico y puede visualizarse o
eliminarse de la columna (fig. 3.24).
3.7. PROTENAS DE IMPORTANCIA
MDICA
En esta seccin, se estudiarn algunas pro-
tenas con importantes funciones biomdi-
cas. Se han escogido las protenas de
transporte, hemoglobina y mioglobina, pro-
tenas protectoras como las inmunoglobuli-
nas, las protenas plasmticas, protenas
estructurales como el colgeno y protenas
contrctiles como la tropomiosina, como
ejemplo de protenas cuya estructura y fun-
cin es esencial estudiar para una correcta
comprensin de sus procesos bioqumicos
normales y de su mal funcionamiento en las
enfermedades.
3.7.1. Hemoglobina y mioglobina-
Las hemoglobinas son protenas globulares,
presentes en los glbulos rojos, que fijan
oxgeno en los pulmones y lo transportan
por la sangre hacia los tejidos; al volver a los
pulmones desde los capilares, actan como
transporte de CO2 y de iones hidrgeno.
La hemoglobina (Hb) est formada por la
protena globina (una histona) y el grupo
prosttico hemo. La protena globina desde
el punto de vista de su estructura cuaternaria
es un tetrmero, es decir, la constituyen 4
subunidades, cada una de ellas formada por
cadenas polipeptdicas con dos estructuras
primarias diferentes y cada subunidad con
su grupo hemo. En la forma ms comn de
hemoglobina humana adulta, HbA, las dos
subunidades de una clase se denominan ca-
denas a y los otros dos monmeros de la
misma clase se designan como cadenas p.
As, la frmula tetramrica de la HbA es
0 ^ 2 - La hemoglobina fetal (HbF) es 0,272
la hemoglobina de las clulas falciformes
(HbS) es ct22 y la hemoglobina menor del
adulto (HbA2) es a252- Se conoce la secuen-
cia completa de aminocidos de las cadenas
a(141 aminocidos) y de las cadenas p , y y 6
(146) aminocidos). El PM de la hemoglobi-
na, incluyendo el grupo hemo, es de aproxi-
madamente 67,000. La hemoglobina fue la
primera protena analizada por difraccin de
rayos X, identificada como una molcula ca-
si esfrica con un dimetro de 5.5 nm (fig.
3.25). Su concentracin en la sangre huma-
na es de 16 g por 100 mi.
La mioglobina (Mb) es una protena que
almacena 02 en el tejido muscular rojo. A
diferencia de la hemoglobina, la mioglobina
est compuesta por una sola cadena polipep-
tdica (monmero) y un solo centro de fija-
cin de 02 (hemo). La cadena polipeptdica
consta de 153 aminocidos y tiene un PM de
17,000. El polipptido P de la Hb es muy se-
mejante a la mioglobina. Su distribucin es-
pecial es el de una superficie polar y el
interior no polar, patrn caracterstico de las
protenas globulares.
El grupo prosttico hemo es una molcula
de porfirina, un tetrapirrol cclico, que con-
tiene un tomo de hierro en su centro. El tipo
de porfirina de la hemoglobina y la mioglo-
bina corresponde a la protoporfirina IX con
dos propionilos, dos vinilos y cuatro metilos
como cadenas laterales unidos a los grupos
pirrlicos (fig. 3.26). El tomo de hierro,
tanto en la hemoglobina como en la mioglo-
bina, se encuentra en estado ferroso (Fe2*).
El quinto enlace de coordinacin del to-
mo ferroso de los hemos es con el nitrgeno
imidazlico de una histidina {histidina pro-
ximal de la apoprotena). En las cadenas po-
lipeptdicas con 02 ligado, esta molcula
Figura 3.25 Estructura cuaternaria de la hemoglobina.

forma un sexto enlace coordinado con el

Fe 2+ y el segundo imidazol de una histidina
distal de la globina. El hemo se sita dentro
de un espacio hidrofbico en cada una de las
subunidades de globina. De esta manera, las
4 subunidades se disponen en un arreglo es-
pacial tetradrico preciso, con las cadenas
en contacto con las P; los grupos hemo se lo-
calizan en la periferia.

Cintica de oxigenacin de hemoglobina

y mioglobina

La hemoglobina se combina con el oxgeno

y se transforma en oxihemoglobina (Hb0 2 );
en realidad fija ocho tomos de oxgeno por
tetrmero (dos por cada subunidad). Esta
combinacin se lleva a cabo sin alterar la va-
lencia del hierro que sigue como ferroso, es
decir, no es una oxidacin sino una oxigena-
cin. Cuando la hemoglobina se oxida qu-
micamente, el hierro pasa de ferroso a
frrico (Fe 2+ Fe 3+ ) y se denomina me-
tahemoglobina (MHb); en estas condiciones
no transporta oxgeno. Normalmente se forma
menos del 1 % de MHb, pero puede produ-
cirse un exceso si se ingieren sulfonamidas,
nitritos, fenacetina u otros oxidantes.
La curva de saturacin de oxgeno con he-
moglobina es sigmoidea. Esto se debe a que
una vez fijado el primer tomo de 0 2 facilita
la unin del siguiente. As, la hemoglobina
muestra una cintica cooperativa de fija-
cin. En cambio, la mioglobina muestra una
curva de saturacin de oxgeno de tipo hi-
perblica (fig. 3.27), lo que indica que la
mioglobina tiene mayor afinidad por el 0 2
que la hemoglobina y es una molcula ina-
decuada como transportadora de 0 2 pero efi-
caz para almacenarlo. Bajo condiciones de
escasez de oxgeno (como en el ejercicio in-
tenso), la p 0 2 del tejido muscular puede dis-
minuir hasta 5 mm Hg. A esta presin, la
mioglobina cede con facilidad su oxgeno
para apoyar la sntesis oxidativa de ATP en
las mitocondrias musculares.
La cooperatividad positiva de la hemo-
globina depende de la integridad de la es-
tructura cuaternaria; si el tetrmero se
disgrega en monmeros, la cooperatividad
desaparece y la curva de saturacin de ox-
geno adquiere forma hiperblica. Los datos
de cristalografa con rayos X indican que la
hemoglobina tiene dos estructuras cuaterna-
rias. Las dos formas son de conformacin
desoxi, llamada "tensa" o estado conforma-
cional T; al fijarse el oxgeno a las subunida-
des, la conformacin pasa del estado T al R
("relajado"). La constante de afinidad del 0 2
es mayor en el estado R que en el estado T
(fig. 3.28). T y R se emplean tambin para
describir las estructuras cuaternarias de las
enzimas alostricas, donde el estado T tiene
afinidad menor por el sustrato. En la unidad
II, sobre equilibrio cido base, ya habamos
sealado la influencia del oxgeno sobre el
pKa de la hemoglobina:
H H b + 4 0 2 Hb(0 2 ) 4 +H + ; es decir, la
forma T es ms acida. Por tanto, cuando la Hb
oxigenada se encuentra a pH bajo (cido) y
C 0 2 alto, tiende a liberar su oxgeno y repre-
senta un aumento de oxigenacin en tejidos
metablicamente activos. La reduccin de la
afinidad oxgeno-hemoglobina en un pH ba-
jo se denomina efecto Bohr (fig. 3.29).
El efecto Bohr puede encajar en la defini-
cin de un mecanismo alostrico, segn el
cual, en la protena existe un sitio de fijacin
para el sustrato y otro para el efector alost-
rico (positivo o negativo). La fijacin del
efector en el sitio alostrico influye sobre la
conformacin del sitio del sustrato (sitio ac-
tivo). En la hemoglobina el sitio activo es
ocupado por el oxgeno y el sitio alostrico
es ocupado por el hidrogenin. Al ocupar su
sitio el ion H, desplaza a la Hb a la forma T,
de afinidad ms baja por el oxgeno.
El efecto Bohr, por lo tanto, tiene conse-
cuencias fisiolgicas importantes. Las clulas
con metabolismo rpido y con requerimien-
tos elevados de 0 2 , producen cido carbnico
y cido lctico que incrementan la concen-
tracin de H+ en la clula. Dado que el H+ el ascenso a grandes alturas o en la enferme-
fuerza alostricamente hacia la conforma- dad pulmonar crnica, el eritrocito aumenta
cin T de la hemoglobina, disminuye la afi- la produccin de 2,3-DPG el cual se une a la
nidad C>2-Hb y se disocia una mayor forma T de Hb, la estabiliza, y reduce su afi-
cantidad de O2 hacia los tejidos. En los pul- nidad por el oxgeno. Por lo tanto, un au-
mones, la concentracin de H+ disminuye, mento en el contenido de 2,3-DPG de los
el pH sube, los protones son liberados de la eritrocitos hace que la hemoglobina ceda
hemoglobina favoreciendo la forma R y la una porcin mayor de su oxgeno a los teji-
captacin de oxgeno. La mioglobina no dos.
presenta efecto Bohr.
En resumen, un incremento de hidroge-
niones provoca liberacin de oxgeno, en
tanto que un incremento en el oxgeno causa
la liberacin de hidrogeniones.
La hemoglobina fetal (HbF) tiene mayor
afinidad por el oxgeno que la adulta (Hb A)
lo que le permite extraer O2 de la HbA de la
sangre placentaria. Despus del parto, la
HbF es inadecuada, ya que su elevada afini-
dad por el oxgeno la hara ceder menos O2 a
los tejidos.
En los tejidos perifricos, una disminu-
cin de O2 hace que se acumule el 2, 3-di-
fosfoglicerato (2,3-DPG), el cual es un
efector alostrico de la hemoglobina cuando
sta se encuentra en la forma T. Cuando la
liberacin de oxgeno est alterada como en
 La hemoglobina se combina con el mon-
xido de carbono (CO) para formar carboxi-
hemoglobina. En virtud de la mayor
afinidad de la hemoglobina por el CO (210
veces), a tensiones iguales de O2 y CO, la fi-
jacin del CO a la Hb excede con mucho a la
del oxgeno. La carboxihemoglobina (Hb-
C0) tiene un color rojo brillante caractersti-
co. Para desplazar el CO de la Hb-CO en las
personas intoxicadas con este gas se requie-
re el uso de la oxigenoterapia hiperbrica
(O2 puro a 3 o ms atmsferas de presin)
para forzar la expulsin del monxido de
carbono.
Adems de transportar el oxgeno de los
pulmones a los tejidos, la hemoglobina faci-
lita el transporte de CO2 de los tejidos a los
pulmones. Aproximadamente el 15% del
CO2 es transportado como carbodioxihemo-
globina o carbaminohemoglobina (Hb-
CO2). La interaccin del CO2 con la
hemoglobina afecta tambin la transicin
del estado T al R. El CO2 forma radicales
carbamilados reversiblemente con los extre-
mos amino de las cadenas polipeptdicas de
hemoglobina cuando sta cede su O2.
Hb-NH2+C02 -* Hb-NH-COO-+H+
Cuando estn carbamilados, los extremos
tienen carga negativa y pueden formar enla-
ces inicos que estabilizan la estructura cua-
ternaria. Los H+ son captados por la Hb que
acta como amortiguadora.
En los pulmones el proceso descrito se in-
vierte y conforme el oxgeno se une a la he-
moglobina, los H+ se liberan y se unen al
HCO3 para formar H2CO3. Por tanto, la fija-
cin del O2 obliga a la expulsin del CO2 de
acuerdo al efecto de Bohr que ya revisamos.
Hemoglobinas humanas mulantes
Las mutaciones en los genes que codifican
las cadenas a y P pueden afectar la funcin
transportadora de la hemoglobina; cuando
esto ocurre, el trastorno se conoce como una
hemoglobinopata. Muchas de las imitantes
pueden ser asignadas a una de las cuatro cla-
ses siguientes:
Hemoglobina M. Hemos mencionado que
en la hemoglobina normal, el grupo hemo
funciona con Fe2+ pero pequeas cantidades
se oxidan a frrico (Fe3+)y se transforma en
metahemoglobina. En las variantes de he-
moglobina M, los residuos His proximal y
distal son reemplazados por Tir la cual esta-
biliza el Fe en forma oxidada, frrica. En
consecuencia se presenta metahemoglobine-
mia, la afinidad por el oxgeno est dismi-
nuida y puede faltar el efecto Bohr.
Hemoglobinas mutantes con afinidad ma-
yor de lo normal por el oxgeno. En estas
mutantes se favorece la forma R, por tanto,
no ceder suficiente oxgeno a los tejidos.
La hipoxia producida conduce a policitemia.
Las protenas mutantes no muestran coope-
ratividad en la fijacin del oxgeno ni efecto
Bohr.
Hemoglobina S (hemoglobina falcifor-
me). La sustitucin de un solo aminocido
de la cadena P (Glu por Val) produce una
hemoglobina que, al cambiar un aminocido
polar (Glu) por uno no polar (Val) se genera
en la superficie de la cadena p una zona ad-
herente. Esta zona, que se presenta en la
HbS desoxigenada, tiene una zona comple-
mentaria en la forma oxigenada de la HbA.
La unin de zonas complementarias y adhe-
rentes hace que la HbS desoxigenada se po-
limerice y forme precipitados fibrosos
largos que distorsionan mecnica y fsica-
mente al eritrocito, causando liss. Los eri-
trocitos deformados se denominan clulas
falciformes (forma de hoz) y su lisis al pasar
por las sinuosidades esplnicas produce
anemia. As, esta enfermedad hereditaria se
conoce tambin como anemia de clulas fal-
ciformes. Los individuos homocgotos (ge-
notipo S/S) presentan anemia pero los
heterocigotos (genotipo A/S) tienen el rasgo
 En el caso de la histidina, las formas inicas
posibles son las observadas en la fig. 3.7.
Obsrvese que la histidina con un pK R = 6.0,
muy prximo al pH fisiolgico, es el nico
aminocido que puede actuar como amorti-
guador en los lquidos corporales. Precisa-
mente, la hemoglobina contiene una elevada
proporcin de histidina y posee as un alto po-
der amortiguador en los eritrocitos. Por otro
lado, este comportamiento excepcional de la
histidina le confiere un papel nico en las pro-
tenas enzimticas como activador fisiolgico.
Por ejemplo, una enzima puede requerir un
imidazol de una histidina que es esencial en su
forma bsica para que exista actividad catalti-
ca. A pH 6.0, la mitad de las enzimas estarn
en forma bsica (imidazol) activa y la mitad
en forma acida (imidazolio) inactiva.
A pH 7.0 , el pH es una unidad (10 veces)
por encima del pK del imidazolio y el co-
ciente imidazol/imidazolio es 10:1; debido a
esta proporcin la enzima mostrar el 91%
de su actividad potencial mxima.
aunque en general no estn anmicos. El gene vienen clulas sanguneas denominadas lin-
para la HbS manifiesta elevada incidencia focitos T (que maduran en el timo), que ac-
en poblaciones expuestas endmicamente al tan directamente o bien a travs de
paludismo; esto proporciona cierta protec- sustancias por ellas liberadas llamadas linfo-
cin contra el parsito, que se desarrolla cinas. En la respuesta humoral intervienen
dentro del eritrocito, debido a que las clulas los linfocitos B (de bursa o bolsa de Fabricio
infectadas requieren ms oxgeno que las no de las aves), y su accin se ejerce a travs de
infectadas y al adquirir la forma semilunar los anticuerpos (inmunoglobulinas) que c-
(de hoz) son eliminadas de la circulacin. lulas derivadas de estos linfocitos B segre-
Hemoglobinas inestables. En estas mu- gan.
tantes, la sustitucin de un aminocido den- Las molculas de anticuerpos (Ab) son
tro del espacio para el hemo reduce la protenas que pertenecen a las inmunoglo-
afinidad de la subunidad con el grupo pros- bulinas. Cuando se introduce al organismo
ttico. Las hemoglobinas mutantes son ines- una sustancia extraa como una protena, un
tables y destruidas porque el hemo que polisacrido o un cido nucleico, las clulas
normalmente estabiliza la conformacin plasmticas, derivadas de un linfocito B,
protenica no puede unirse a la apoprotena. producen anticuerpos. La molcula de anti-
cuerpo se asocia de forma no covalente con
la sustancia extraa y la elimina del organis-
Talasemias mo. Las sustancias que inducen la produc-
cin de anticuerpos en un organismo se
Normalmente, las cadenas a y p se produ- denominan antgenos (Ag).
cen en una proporcin de 1:1. En estas en- Para que una sustancia acte como antge-
fermedades, la sntesis de las cadenas a-o no en un organismo debe poseer una estruc-
las p de la hemoglobina est disminuida. En tura qumica distinta de los constituyentes
consecuencia, se presenta aumento de pro- propios de ese organismo. Por ejemplo, la
duccin de la cadena complementaria que albmina de cualquier mamfero, excepto la
precipita intracelularmente y da lugar a la humana, es antignica para el hombre cuando
destruccin prematura del eritrocito; esto se la introduce parenteralmente. Un antge-
conduce a formas severas de anemia. no puede contener mltiples determinantes
antige'nicos, que son pequeas regiones de
la molcula de antgeno que inducen espec-
3.7.2. Estructura y funcin de los ficamente la produccin de un anticuerpo.
anticuerpos En las protenas, por ejemplo, un determi-
nante antignico puede comprender slo
La inmunologa estudia todos los fenme- seis o siete aminocidos en total de la prote-
nos bioqumicos y fisiolgicos de defensa na. Un antgeno puede poseer decenas o mi-
gracias a los cuales el organismos distingue les de estos grupos determinantes, de tal
lo propio (nuestros tejidos y clulas) de lo manera que inducirn mltiples tipos de an-
no propio (bacterias, virus, hongos, parsi- ticuerpos, cada uno de ellos capaz de reco-
tos, clulas tumorales, trasplantes, etc.) y es n o c e r y u n i r s e a c a d a u n o de los
capaz de destruir a las sustancias extraas. determinantes (fig. 3.30).
Todas las acciones de respuesta a material En general, un determinante antignico
extrao se denominan respuesta inmune. solo o una molcula pequea, no determinan
Esta respuesta puede ser de tipo celular y de la formacin de anticuerpos pero, al unirse
tipo humoral. En la respuesta celular inter- covalentemente a molculas grandes, facili-
 Cada anticuerpo se une al determinante
antignico frente al que se ha formado.

ANTICUERPOS (Igs)

Figura 3.30 Esquema de un antigeno, que puede ser una protena y donde se muestran distintos e hipotticos
determinantes antignicos y cmo a ellos se pueden unir diferentes anticuerpos de manera especifica.

tan la gnesis de anticuerpos dirigidos espe- su portador, el hapteno conserva su capaci-

cficamente contra la molcula pequea. A
estas molculas pequeas se les conoce co-
mo haptenos. Es el caso, por ejemplo, de
pptidos sintticos o el 2, 4-dinitrofenol,
DNP-glicina, etc. Al tiempo que un hapteno
requiere la unin a una molcula grande pa-
ra producir anticuerpos, una vez separado de
dad de unirse al anticuerpo.
Al estimularse los linfocitos B con un an-
tgeno se induce una serie de cambios que
los hace transformarse en clulas plasmti-
cas. Estas poseen la funcin de sintetizar y
secretar inmunoglobulinas a las cuales en un
principio, se les denomin anticuerpos; le-
go, al descubrirse la electroforesis, y ver que
constituyen una clona (clulas provenientes
emigraban en la fraccin gamma, se les dio de una misma estirpe) y por tanto, los anti-
el nombre de gammaglobulinas. Sin embar- cuerpos producidos son idnticos, homog-
go, al conocerse con precisin su estructura neos. En realidad, las protenas de
y funcin en 1965, se le denomin inmuno- Bence-Jones son las cadenas ligeras de las
globulinas (Ig). inmunoglobulinas que, por su bajo PM, apa-
recen fcilmente en la orina. La protena de
Bence-Jones es homognea para cada indi-
Estructura de nmunoglobulinas viduo con mieloma, aunque es diferente
cuando se comparan entre s las protenas de
La heterogeneidad de las inmunoglobulinas diferentes enfermos de mieloma.
fue durante aos un serio obstculo para es- Cada inmunoglobulina est formada por
tudiarlas qumicamente. Al aislar anticuer- una "unidad bsica" tetramrica construida
pos contra un solo antgeno, se obtena una por cuatro cadenas polipeptdicas unidas por
pequea cantidad de una mezcla de globuli- puentes disulfuro (fig. 3.31). Dos de estas
nas. El conocimiento cada vez ms avanzado cadenas son de bajo peso molecular y se les
de ios mielomas y la cantidad anormalmente denomina cadenas ligeras, L (del ingls
alta de una protena presente en la orina de light); las de mayor PM se denominan cade-
estos pacientes, la protena de Bence-Jones, nas pesadas, H (del ingls heavy). En la in-
contribuyeron a vencer el obstculo. munoglobulina ms comn, la IgG, su
El mieloma mltiple es un tipo de cncer cadena pesada tiene aproximadamente 440
en que se presenta la multiplicacin descon- aminocidos (PM 50,000) y sus cadenas li-
trolada de multitud de clulas provenientes geras contienen la mitad de aminocidos
de una sola clula productora de anticuerpos. (PM 25,000). En la estructura tridimensio-
Todas las clulas del tumor son idnticas, nal de los anticuerpos, cada cadena H est
asociada con una cadena L (fig. 3.32). La
conformacin que adopta la molcula com-
pleta es de una T o una Y.
La porcin central de las cadenas H es una
zona (de unos 15 aminocidos) de gran fle-
xibilidad, llamada bisagra o gozne, por donde
se deforma la molcula cuando se produce
la unin antgeno-anticuerpo (Ag-Ab).
Las cadenas L constan de dos regiones de
estructura primaria bien definidas y diferen-
ciadas: una regin de gran variabilidad en
nmero y secuencia de aminocidos, deno-
minada regin variable (V); dentro de la re-
gin variable hay zonas hipervariables, con
grupos de aminocidos siempre distintos,
determinados por cada antgeno particular.
Estos son los sitios de combinacin donde
se realiza la unin de la inmunoglobulina
con su antgeno; en cierto modo compara-
bles al sitio activo de una enzima.
Otra parte de las inmunoglobulinas mues-
tra una composicin fija en nmero y orden
de aminocidos que se denomina regin
constante (C). Las regiones constantes de
las cadenas H son las que determinan la cla-
se a la que pertenece el anticuerpo (ver ms
adelante), es la que produce la fijacin de las
protenas del complemento y proporciona la
regin necesaria para que los anticuerpos
crucen la membrana placentaria. La parte
constante de las cadenas ligeras puede ser de
dos tipos, de ah que existan dos tipos de ca-
denas ligeras: kappa (K) y lambda (X). En las
cadenas pesadas, la parte constante determi-
na cinco tipos: alfa (a), gamma (y), delta
(5), mu (ji), y psilon (e), a los que se refie-
ren las cinco clases diferentes de inmuno-
globulinas. Cada clase de inmunoglobulinas
slo contienen un tipo de cadenas pesadas
pero pueden contener uno u otro tipo de ca-
dena ligera.
Clases de inmunoglobulinas
Las inmunoglobulinas pueden ser de las cla-
ses siguientes: IgG, IgM, IgA, IgD e IgE, se-
gn posean las cadenas pesadas gamma,
mu, alfa, delta y psilon, respectivamente,
(tabla 3.6).
IgG. Esta clase de Ig se encuentra en el
plasma a elevadas concentraciones y es la
que se forma en mayor cantidad durante la
respuesta secundaria a antgenos extraos.
Los anticuerpos IgG pueden promover la fa-
gocitosis y tambin activar el complemento;
 Tienen la propiedad de atravesar activamen-
te las membranas biolgicas. El alto nivel de
IgG en el feto se debe a que esta Ig atraviesa
la placenta. Este hecho, en determinadas cir-
cunstancias, puede tener consecuencias ne-
fastas para el feto, cuando la madre Rh (-)
produce anticuerpos anti Rh ( + ) contra el fe-
to en la llamada enfermedad hemoltica del
recin nacido. Se han reconocido 4 subcla-
ses de IgG.
IgM. Se encuentran principalmente en el
plasma, y son los primeros anticuerpos que
acten contra un antgeno extrao (respuesta
primaria). La IgM tanto en sangre como en
otros lquidos se encuentra como tetrmero
o pentmero, (unidos estos por puentes di-
sulfuro) de una estructura cova lente bsica
[(LH)2]5; de ah que esta Ig sea la de mayor
PM (900,000). Debido a esa estructura pen-
tamrica que determina 10 sitios de unin
con el antgeno, la IgM es un anticuerpo
muy efectivo. Los anticuerpos como los pre-
sentes en la artritis reumatoide (anti IgG)
son de esta clase. Al igual que las IgG, las
IgM pueden promover la fagocitosis de mi-
croorganismos por los macrfagos y leuco-
citos polimorfonucleares y son potentes
activadores del complemento. Se han identi-
ficado 2 subclases de IgM.
IgA. Las Ig de esta clase se encuentran
principalmente en las secreciones extravas-
culares (secreciones mucosas, bronquial,
nasal, intestinal, urinaria, lgrimas, leche y
calostro). Como tales, estas inmunoglobuli-
nas son la defensa inicial contra los antge-
nos virales y bacterianos invasores, con
anterioridad a su entrada en el plasma. Se
presentan habitualmente como un dmero de
la estructura bsica (LH2)2- Actan en forma
sinrgica con otras secreciones (lisozima y
complemento) para destruir a ciertos mi-
croorganismos.
Tanto a los dmeros de IgA como a los
pentmeros de IgM se pueden unir dos pp-
tidos adicionales que son la pieza de secre-
cin y la cadena J. La pieza de secrecin es
una glicoprotena que se sintetiza en clulas
epiteliales de mucosas y glndulas excri-
nas; es la que permite a IgA e IgM salir a las
secreciones biolgicas.
IgD. Est presente en la superficie de los
linfocitos del recin nacido. Parece partici-
par en la diferenciacin de linfocitos B a c-
lulas plasmticas.
IgE. Aunque presente en plasma en con-
centraciones bajsimas es la inmunoglobuli-
na que determina las reacciones alrgicas y
anafilcticas, como son asma bronquial, ri-
nitis alrgica, urticaria, ciertos casos de der-
matitis, incluso el ms grave de todos, el
choque anafilctico. La IgE posee la capaci-
dad de unirse por su extremo Fe (ver adelan-
te) a los mastocitos o clulas cebadas.
Cuando los mismos antgenos que indujeron
su formacin vuelven a entrar, se unen por
el extremo Fab, se producen cambios alost-
ricos y se liberan grandes cantidades de his-
tamina, serotonina, leucotrienos y otras
sustancias vasoactivas que producen vasodi-
latacin perifrica o broncoconstriccin; es-
to puede acarrear la muerte del individuo
por hipotensin e insuficiencia respiratoria.
Fijacin de antgeno por molcula de
anticuerpo
Las regiones variables de las cadenas L y H
constituyen un centro de fijacin de anti-
cuerpo. Dado que cada unidad bsica de an-
ticuerpo contiene dos pares de cadenas
(LH)2, existen dos centros de fijacin de an-
tgeno por molcula de anticuerpo. Esta ca-
racterstica ha podido ser estudiada tratando
las Ig con papana, enzima que divide la
molcula en tres fragmentos (fig. 3.33), dos
de los cuales son iguales entre s y compren-
den la porcin NH 2 - terminal de la cadena H
y toda la cadena L. Estos fragmentos se de-
signan fragmentos Fab (antigen binding) y
pueden fijar antgenos con una afinidad si-
milar a la del anticuerpo completo. El otro

Figura 3.33 Hidrlisis de la IgG en los fragmentos
Fab y uno Fe por la enzima proteoltica papaina.
fragmento conocido como Fe (cristaliza-
ble), es la mitad COOH- terminal de las ca-
denas H y no puede fijar antgeno, por lo que
se deduce que hay dos centros de fijacin de
Ag por molcula de Ab) situados en los extre-
mos amino-terminales de las cadenas H y L
que comprende las secuencias variables de
aminocidos. La valencia 2 que tiene cada
molcula de Ab permite que cada Ab fije
dos Ag diferentes. Esta propiedad favorece
la aglutinacin y precipitacin clsicas de la
reaccin antgeno-anticuerpo (Fig. 3.34). La
fuerza de asociacin entre Ag y Ab se debe a
fuerzas no covalentes.
Es evidente que existen sobradas razones
para hablar ms extensamente de los fen-
menos inmunolgicos en medicina; basta
mencionar la inmunidad a las infecciones,
las reacciones de hipersensibilidad y alergia,
la autoinmunidad, los trasplantes y el cn-
cer. Sin embargo, escapa a los objetivos de
este texto de bioqumica cubrir estos tras-
cendentales aspectos que pueden consult-
arse en obras dedicadas a esas disciplinas.
3.7.3. Protenas plasmticas
El plasma es el medio lquido de suspensin
de los elementos slidos de la sangre (eritro-
citos, leucocitos, plaquetas, etc.). Si se toma
una muestra de sangre, se deja coagular y se
separa el cogulo, el lquido remanente es el
suero; ste no contiene elementos figurados
(clulas) ni fibringeno, protena involucra-
da en la formacin del cogulo. Por el con-
trario, si se impide la coagulacin de la
sangre y se separan las clulas, el lquido re-
sultante es el plasma, que contiene lo mismo
que el suero y adems fibringeno. En resu-
men, la sangre sin elementos celulares es el
plasma y el plasma sin fibringeno es el sue-
ro.
Aunque en el plasma se encuentran ms
de 200 protenas, muchas no son estricta-
mente "plasmticas" ya que se encuentran
ah slo transitoriamente o experimentando
parte de su catabolismo. El trmino prote-
nas plasmticas se restringe a unas 50 mol-
culas que realmente llevan a cabo funciones
 Figura 3.34 Unin de anticuerpo a antgenos en reacciones de precipitacin (a) y en reacciones
de aglutinacin (b).
especficas en el plasma: de transporte, nu-
tritiva, reguladora del equilibrio hdrico y
cido base, inmunitaria, etc.
La facilidad con la que pueden obtenerse
muestras de sangre ha permitido que el estu-
dio de sus constituyentes sea uno de los pila-
res ms importantes del desarrollo de la
bioqumica en general y, en particular, de la
bioqumica clnica.
Las protenas plasmticas son una mezcla
muy heterognea que comprende no solo
protenas simples, sino tambin conjugadas,
como las glucoprotenas y lipoprotenas.
Las primeras tcnicas de separacin, elec-
troforesis e inmunoelectroforesis, permiti
separarlas en diferentes componentes: alb-
mina^lobulinas^y fibringeno (ver subcap-
tulos 3.6.3). A medida que las tcnicas de
fraccionamiento se hicieron ms resolutivas,
se identificaron subgrupos de globulinas (a,
p y y) que con las primeras tcnicas migra-
ban juntas. Hasta hoy se han aislado puras
unas 70 protenas plasmticas; seguramente
quedan muchas por descubrir y caracterizar.
En la tabla 3.7 se muestran las principales
protenas plasmticas, ordenadas de acuerdo
a su movilidad electrofortica. Como se po-
dr observar, la mayora contiene un resto
glucdico.
F'realbmina. Esta es una de las protenas
que une y transporta hormonas tiroideas,
aunque tambin fija algunos frmacos como
aspirina y barbitricos.
Albmina. Es una de las pocas protenas
del plasma que carecen de carbohidratos. Es
la ms abundante (55%) y tiene un PM muy
bajo (69,000); por lo tanto, la albmina es
responsable del 80% de la presin osmtica
coloidal total deljlasma. Est compuesta
por 610 aminocidos en una sola cadena po-
lipeptdica con 50% de a-hlice y 15% de
estructura p. Se sintetiza exclusivamente en
el hgado a razn de 20g al da y tiene una
vida media de 10 das.
 Adems de contribuir a la presin osmti-
ca coloidal, la albmina acta como molcu-
la transportadora de bilirrubina, cidos
grasos, oligoelementos y algunos frmacos:
cafena, salicilatos, fenilbutazona, antibiti-
cos, digitlicos, barbitricos, etc. Tambin
se fija a la albmina el triptfano, hecho im-
portante porque un incremento de su con-
centracin libre repercute sobre el
funcionamiento cerebral (por aumento de
serotonina cerebral).
Su funcin nutritiva consiste en proveer
de aminocidos utilizables para la sntesis
de protenas del organismo. En casos de
desnutricin grave, disminuye la sntesis de
protenas y se presenta hipoalbuminemia.
Esta hipoalbuminemia repercute, sobre to-
do, en la funcin coloidosmtica; en las en-
fermedades renales y hepticas que tambin
se acompaan de hipoalbuminemia, se pre-
senta edema tisular (ver unidad 2, subcap-
tulo 2.2.2.1). Adems, la albmina a pH 7.4
posee 17 cargas negativas que, por el efecto
Gibbs-Donnan, aumentan la concentracin
plasmtica de cationes y ocasiona indirecta-
mente un aumento de presin osmtica.
ok\-glucoprotena acida. Contiene un alto
contenido en carbohidratos, sobre todo ci-
do silico, responsable ste del bajo punto
isoelctrico (3.5) de la protena, el ms bajo
de todas las plasmticas. Se sintetiza en el
hgado y por su abundancia en plaquetas se
le ha relacionado con la coagulacin.
ai-antitripsina. Forma parte de otras pro-
tenas antiprotesicas; sta posee el 90% de
la capacidad antiprotesica total del plasma.
Su actividad antiproteasa es polivalente
(tripsina, quimotripsina, colagenasa, elasta-
sa, etc.) pero sobre todo sobre la elastasa de
origen neutrfo. Segn la teora elastasa-
antielastasa del enfisema (destruccin de al-
veolos pulmonares y ensanchamiento de
bronquiolos), los neutrfilos pulmonares li-
beran elastasa de sus lisosomas; en ausencia
 de al-antitripsina, las clulas pulmonares
son sensibles a la proteasa que destruye la
elastina de las fibras y disminuye la elastici-
dad pulmonar, ocasionando insuficiencia
respiratoria crnica. Contribuye a la enfer-
medad el humo de tabaco que inhibe a la an-
titripsina. Sera interesante prevenir a
fumadores potenciales con fenotipos predis-
ponentes al efisema.
a\-Fetoglobulina. Llamada tambin a l -
fetoprotena, posee gran afinidad por los es-
trgenos. Su concentracin aumenta en
tumores digestivos, carcinoma heptico y
tumor embrionario del testculo. En lquido
amnitico se ha encontrado elevada en em-
barazos que conllevan fetos anenceflicos.
a\-Antiquimotripsina. Es otra de las anti-
proteasas plasmticas. Se ha sugerido un pa-
pel protector de las mucosas, dada su
concentracin en la secrecin bronquial.
Transcortina- Se denomina tambin glo-
bulina fijadora de corticosteroides.
Globulina fijadora de tirosina. Incorpora
las dos terceras partes de las hormonas tiroi-
deas circulantes.
Inter-al-inhibidor de la tripsina. Da
cuenta del 3% de la capacidad antiproteasa
plasmtica.
Protena ligadora de retinol. Su papel es
transportar la vitamina A.
al-Macroglobulina. Es la protena plas-
mtica de mayor peso molecular, se une
prcticamente a todas las endopeptidasas.
^-Globulina ligadora de esteroides. Se une
especficamente a los esteroides testostero-
na, androstanolona y estradiol.
Haptoglobina. Constituye el 25% de las
protenas plasmticas. Su funcin es unirse
irreversiblemente a la hemoglobina con lo que
se excede el umbral renal de excrecin; se lo-
gra as un ahorro de hierro y se protege al rion
del efecto nocivo de la hemoglobina libre.
Hemopexina. Su papel consiste en la fija-
cin del grupo hemo con lo cual se impide
su excrecin urinaria y contribuye al ahorro
de hierro, que es reutilizado por el hgado.
$2-Microglobulina. Es sintetizada por las
clulas linfoides. Es una protena de mem-
brana de linfocitos, plaquetas, clulas PMN
y de cultivos de carcinoma mamario, pul-
mn embrionario, etc. Aumenta en enferme-
dades malignas y en pacientes con riones
trasplantados.
Otras protenas de la fraccin a-globul-
nica son la ceruloplasmina, que transporta
cobre y parte de las lipoprotenas. En la
fraccin fi-globulnica se encuentran tam-
bin la P1 -glucoprotena especfica del em-
barazo, la protena C reactiva (que aumenta
en procesos infecciosos y denominada as
porque precipita al polisacrido C del neu-
mococo), parte de las lipoprotenas, la
transferrina, que transporta hierro, y las
protenas relacionadas con la coagulacin.
Fraccin y-globulnica. Est integrada
por las inmuno globulinas que se trataron en
el subcaptulo 3.7.2.
Lipoprotenas plasmticas. Dentro de las
protenas plasmticas se encuentra este gru-
po complejo de protenas y lpidos unidos
por fuerzas no covalentes, que por su impor-
tancia en el transporte de lpidos es ms
conveniente tratar en el captulo correspon-
diente al metabolismo de estas sustancias.
Factores de la coagulacin
Se define como hemostasia el cese de la he-
morragia que sigue a la interrupcin traumti-
ca de la integridad vascular. La coagulacin
sangunea es uno de los tres mecanismos que
contribuyen al proceso fisiolgico de la he-
mostasia. El primero de estos mecanismos es
la constriccin del vaso daado con objeto de
frenar la salida de sangre de la herida; la se-
gunda fase consiste en la formacin de un trom-
bo o cogulo blanco de plaquetas en el lugar
del dao; la tercera fase es la formacin de un
cogulo sanguneo insoluble o trombo rojo.
En la primera fase participan sustancias
vasconstrictoras locales cuya accin es le-
 Las protenas son molculas formadas por
aminocidos por un enlace particular (enlace
peptdico) que bloquea los grupos ct-amino
y a-carboxilo, excepto en el aminocido ini-
cial y el terminal. De esta manera, en las
protenas la existencia de grupos ionizables
depender de las cadenas R laterales de los
aminocidos, y el valor del pl caracterstico
de una protena depender de las concentra-
ciones relativas de los diferentes grupos ci-
dos y bsicos. En virtud de que el pH
isoelctrico de una protena es difcil de cal-
cular a partir de los valores de pK de sus
aminocidos constituyentes, los valores de
pl de las protenas se miden experimenta 1-
mente determinando el pH en el que la pro-
tena no se mueve en un campo elctrico.
Al igual que con los aminocidos, a un pH
superior al pl, la protena tendr una carga
neta negativa. A un pH inferior al pl la pro-
tena tendr una carga neta positiva. La im-
portancia del clculo del pl de una protena
se tratar ms adelante en este captulo.
3.7.3. Reacciones qumicas de los
aminocidos
Los aminocidos pueden presentar reaccio-
nes qumicas a tres niveles: en el grupo a -
amino, en el a-carboxilo y en los grupos
activos de la cadena lateral R. No obstante
que no es objetivo primordial de este texto
revisar exhaustivamente el alto nmero de
reacciones posibles, se considerarn aque-
llas reacciones importantes de identificacin
de aminocidos.
3.13.1. Reacciones del grupo a -carboxilo
El grupo carboxilo a puede esterificarse con
alcoholes o formar amidas en presencia de
amoniaco.
El grupo carboxilo de un aminocido pue-
de reaccionar con el grupo amino de otro pa-
ra formar, por medio de un enlace peptdico,
un dipptido.
go amplificada por serotonina, adrenalina, y
una potente sustancia vasoconstrictora deri-
vada de prostaglandinas, el tromboxano A2
que, en conjunto con el ADP liberado del te-
jido colgeno, contribuyen a la agregacin
plaquetaria para formar el tapn laxo de
plaquetas que constituye la segunda fase.
Esta fase de la hemostasia se mide mediante
el tiempo de sangrado.
La coagulacin sangunea o tercera fase,
que culmina con la formacin del trombo
rojo de eritrocitos y fibrina, se puede llevar a
cabo a travs de dos vas {extrnseca e in-
trnseca) que convergen en una ruta final
comn que, al activar el factor X, la pro-
trombina se transforma en trombina, la cual
cataliza la transformacin de fibringeno
(soluble) en el cogulo de fibrina (insolu-
ble).
La va extrnseca es la que sigue a una le-
sin en respuesta al dao tisular, debido a la
presencia de sustancias que no estn presen-
tes normalmente en la sangre. La va intrn-
seca se inicia a travs del contacto de la
sangre con una superficie distinta de los va-
sos sanguneos, por ejemplo, una pared vas-
cular anormal o un rea de circulacin san-
gunea restringida. A causa de una herida se
desencadenan ambos mecanismos, pues la
sangre entra en contacto con una superficie
ajena a los vasos y, adems, con otras sus-
tancias de los tejidos que interaccionan con
ella. Las dos vas convergen en el camino
comn y finalmente se forma el cogulo.
El elevado nmero de factores plasmti-
cos de la coagulacin ha obligado a estable-
cer por parte de un Comit Internacional,
una nomenclatura para los mismos. En sta,
cada factor se designa por un nmero roma-
no de acuerdo al orden cronolgico de su
descubrimiento pero que no tiene relacin
con el orden en el cual acta (tabla 3.8).
Va extrnseca. Esta va es sumamente r-
pida en respuesta al dao tisular. Se inicia
con la liberacin de un factor tisular, la
tromboplastina, que forma un complejo ac-
tivo, en presencia de Ca 2+ , con el factor Vlla
(activado) plasmtico. La tromboplastina ti-
sular es una lipoprotena que se encuentra
ampliamente distribuida en las membranas
de los tejidos, especialmente cerebro, pul-
mones y capas del endotelio vascular.
Va intrnseca. Esta es una va lenta, por-
que en ella intervienen un nmero mayor de
factores que, al operar en un mecanismo de
cascada, generan el factor Xa (activado). Se
inicia con la fase de contacto en la cual se
activa parcialmente el factor XII, enzima
que cataliza la transformacin de prekali-
krena (factor Fletcher) en kalikrena, enzi-
ma autocataltica, que ataca al factor XII y lo
activa totalmente (Xlla). El sustrato princi-
pal del factor Xlla es el factor XI el cual es
activado (Xla). La accin del factor Xla
constituye la ltima etapa del sistema intrn-
seco; su sustrato es el factor IX el cual se ac-
tiva en dos etapas con participacin de Ca 2+ .
La activacin del factor X constituye la
etapa clave y va comn de la coagulacin al
estar regulada por las vas extrnseca e in-
trnseca. La activacin del factor X, catali-
zada por el factor IXa, es acelerada 500
veces por la presencia del factor VIII o fac-
tor antihemoflico; este ltimo factor es acti-
vado previamente por trombina (fg. 3.35).
La formacin de la red de fibrina se inicia
con el paso de protrombina a trombina, cata-
lizado por el complejo Xa-Ca 2+ -Va-FL. La
velocidad de activacin de la protrombina
por el factor Xa aumenta 50 a 100 veces en
presencia de fosfolpidos (FL) y Ca 2+ . El co-
factor Va acelera el proceso unas 350 veces.
El valor global del complejo activador de
protrombina es de 20,000 veces.
El paso de fibringeno a fibrina se produce
por la accin proteoltica de la trombina sobre
el fibringeno, que se encuentra a una alta
concentracin en el plasma. El fibringeno
pasa, as, a la forma de monmero de fibrina;
estos monmeros se asocian y forman una
fibra polimerizada conocida como cogulo
blando cuyo paso a la estructura insoluble lla-
mada cogulo duro o red de fibrina requiere la
presencia del factor XHIa como catalizador.
En situacin normal, los procesos de for-
macin del cogulo estn bloqueados por
sustancias inhibidoras de la coagulacin
que aseguran la ausencia de trombos intra-
vasculares. Estas sustancias son principal-
mente la heparina, las antiproteasas descritas
anteriormente y, fundamentalmente, la anti-
trombina III; el efecto de la antitrombina es
potenciado varios cientos de veces por hepa-
rina. La heparina se localiza en los granulos
metacromticos de las clulas cebadas que
se localizan en la pared vascular, por lo que
su distribucin es muy amplia.
El proceso de disolucin del cogulo a los
pocos das de su formacin, llamado^fer/nd-
lisis, se inicia con la activacin del plasmi-
ngeno plasmtico a plasmina, que es una
serinproteasa capaz de digerir tanto al fibri-
ngeno como a la fibrina. El activador del
plasmingeno es una serinproteasa tisular
catalticamente inactiva hasta que se expone
a la fibrina; cuando la plasmina digiere a la
fibrina, el activador ya no manifiesta acti-
vidad y la fibrinlisis cesa. Existe inters
teraputico en este activador tisular del plas-
mingeno, para reducir el dao de una trombo-
sis coronaria aguda. As mismo, la urocinasa
serinproteasa sintetizada en el rion y la es-
treptocinasa del estreptococo p-hemoltico,
estimulan la activacin del plasmingeno.
Las propiedades anticoagulantes de la es-
treptocinasa se utilizan a nivel teraputico.
Otros factores anticoagulantes de uso te-
raputico incluyen a los cumarnicos, que
inhiben la carboxilacin, dependiente de vi-
tamina K, de los residuos de glutamato a
carboxiglutamato (Gla) en las regiones
NH2-terminales de los factores II, VII, IX y
X. El dicumarol, antagonista de la vitamina
K, se usa como anticoagulante en pacientes
predispuestos a formar cogulos intravascu-
lares.
3.7.4. Glicoprotenas y proteoglicanos
Las glicoprotenas y proteoglicanos son mo-
lculas constituidas por protenas a las cua-
les se han agregado cadenas de oligosacri-
dos unidos por covalencia. Casi todas las
protenas plasmticas, excepto la albmina,
son glucoprotenas. Muchas protenas de
membrana, los grupos sanguneos y algunas
hormonas, son glucoprotenas. Muchos in-
vestigadores del cncer piensan que el fen-
meno de la metstasis se debe, por lo menos
en parte, a alteraciones de las glucoprotenas
de la superficie de las clulas cancerosas.
Las glicoprotenas forman la mayor parte
del mucus secretado por las clulas epitelia-
les que permite la lubricacin de los conduc-
tos del cuerpo. Las glucoprotenas son
protenas con pesos moleculares que van de
15,000 a ms de un milln, a las cuales se
unen una o varias cadenas de oligosacridos
(menos de 15 azcares) que contribuyen con
60%. Los proteoglicanos son de mayor ta-
mao en comparacin con la glucoprote-
nas, su PM es de varios millones, tienen
90-95% de carbohidratos, con mltiples ca-
denas de glicosaminoglicanos. La heparina
es un proteoglicano en la que ms de la mi-
tad de las serinas se encuentran enlazadas
con cadenas de polisacridos. Adems de
anticoagulante, la heparina se une a la lipo-
proteinlipasa de la pared capilar y causa su
liberacin.
En el aspecto estructural, es importante la
unin entre la glicoprotena colgena y los
proteoglicanos con sulfato y carboxilato
(ver ms adelante).
Por defectos hereditarios en la enzima
lisosomal encargada de hidrolizar los glico-
saminoglicanos presentes en los proteoglica-
nos, se produce un grupo de enfermedades,
clasificadas dentro de los errores innatos del
metabolismo, llamadas mucopolisacarido-
sis; (ver unidad de carbohidratos).
Es de particular inters el estudio de estos
compuestos en medicina, en particular de la
microbiologa, en virtud de que la pared
bacteriana est construida por peptidoglica-
nos, entre otras molculas. Las bacterias gram
positivas tienen una pared que contiene pep-
tidoglicanos y cido teicoico, cuya sntesis
es bloqueada por penicilina. La especifici-
dad de las reacciones inmunolgicas a las
bacterias depende de los peptidoglicanos
de su pared.
3.7.5 Colgeno y protenas contrctiles.
El colgeno, principal protena del tejido
conectivo es la protena ms comn en el
mundo animal y ms abundante del cuerpo
humano. Es una protena insoluble en agua,
rgida y muy resistente a la tensin; es la que
proporciona fuerza estructural y forma a
todos los tejidos y rganos del cuerpo. Pre-
domina en el tejido conjuntivo o conectivo
donde forma parte de los tendones, cartla-
gos, cristalino, piel, etc. (tabla 3.9). La gela-
tina, protena de uso comn, se obtiene
como alimento desnaturalizando el colge-
no por el calor.
Se denomina sustancia fundamental o ba-
sal a la estructura de carcter gelatinoso
compuesta de fibrillas de colgeno incrusta-
das en un matriz de polisacridos aminados
y glicoprotenas.
En la estructura del colgeno predomina
la glicina (35%), prolina (10.12%), alanina
(11 %) y los aminocidos derivados hidroxi-
prolina (10%) y 5-hidroxilisina (10%). No
posee triptfano ni cisterna. La unidad mole-
cular bsica del colgeno en las fibrillas
contiene tres cadenas polipeptdicas, con una
glicina cada tercer aminocido, que se de-
nomina tropocolgeno, o segn la termino-
loga ms reciente, simplemente colgeno.
Existen por lo menos 5 tipos distintos de
colgeno en los tejidos por lo que se consi-
dera una familia de molculas que compar-
ten numerosas propiedades. La propiedad
ms definida es la triple hlice, estructura
enrollada de tres subunidades polipeptdicas
unidas entre s por puentes de hidrgeno. La
prolina determina su arreglo helicoidal y el
pequeo tamao de la glicina asegura la nti-
ma unin de las tres cadenas que permite
una estructura de superhlice (fig. 3.36).
Sntesis de colgeno. El colgeno maduro
es una protena extracelular pero su sntesis
es de inicio intracelular bajo la forma de una
molcula precursora llamada preprocolge-
no. Este precursor pierde una secuencia gua
de 100 aminocidos (pptido seal) y se
transforma en procolgeno; en est forma
las hidroxilasas de prolina y lisina las trans-
forma en hidroxiprolina e hidroxilisina res-
pectivamente. Estas enzimas requieren
oxgeno molecular, a-cetoglutarato, hierro
ferroso y, sobre todo, cido ascrbico; du-
rante la adolescencia hay una gran demanda
de vitamina C para este tipo de reacciones.
En ausencia de cido ascrbico, se forma un
colgeno con dificultad para formar fibras,
ocasionando fragilidad de los tejidos y la
aparicin de lesiones de la piel, huesos,
dientes y vasos sanguneos, todas ellas ca-
ractersticas del escorbuto. Posteriormente,
el procolgeno es glicosilado, con glucosa o
galactosa, en las hidroxilisinas. En una etapa
posterior, se forman puentes disulfuro entre
cadenas de procolgeno y se integra una tri-
ple hlice que sale de la clula. Despus de
la formacin de triple hlice, no puede ocu-
rrir una hidroxilacin ulterior de los resi-
duos de prolina y lisina.
Despus de este proceso intracelular, el
procolgeno glicosilado alcanza el exterior;
las enzimas extracelulares amino y carboxi-
proteasas remueven los propptidos amino y
carboxilo terminal, donde se encuentran las
cisternas, responsables de los puentes disul-
furo (-S-S-), y se forman unidades de tropo-
colgeno que se ensambla espontneamente
en fibrillas de colgeno inmaduro. Sin em-
bargo, estas fibrillas no tienen la fuerza ten-
sora del colgeno maduro hasta que se
forman enlaces covalentes en forma cruza-
da; en este entrecruzamiento participan con-
densaciones aldlicas con el e-amino de la
lisina que se desamina oxidativamente a un
6-aldehdo (al-lisina) y forma bases de
Schiff con otros e-NH 2 de lisinas o hidroxi-
lisinas.
El resultado es la fibra de colgeno madu-
ra. En el latirismo, enfermedad que se debe
a la ingestin del frijol Lathyrus, no pueden
formarse con facilidad los enlaces covalen-
tes y el colgeno se vuelve muy frgil.
En el cartlago, los proteoglicanos y el co-
lgeno son biolgica y mecnicamente in-
terdependientes. El cartlago es una matriz
extracelular en la cual el colgeno contribu-
ye a su fuerza tensora y los proteoglicanos
son los causantes de su notable elasticidad.
Enfermedades del colgeno
Las enfermedades del colgeno pueden re-
sultar de defectos adquiridos o hereditarios;
entre los primeros podemos ubicar al escor-
buto y el latirismo. Las enfermedades here-
ditarias por defectos en la sntesis o el
ensamble sirven muy bien para ilustrar las
consecuencias de diferentes tipos de muta-
ciones. La consideracin de los pasos de
biosntesis del colgeno (fig. 3.37) es nece-
saria para entender estas enfermedades.
Osteognesis imperfecta. Es el nombre
que se da a un grupo de 4 enfermedades ca-
racterizadas por mltiples fracturas (fragilidad
sea) que dan como resultado deformidades
seas; se debe a sntesis defectuosa de una
de las cadenas del colgeno tipo I. En esta
enfermedad se impide la formacin normal
de la triple hlice con la consiguiente degra-
dacin de todas las cadenas, fenmeno deno-
minado con propiedad "suicidio proteico".
Sndrome de Ehlers - Danlos. Con este
nombre se designa a un grupo de al menos
10 enfermedades que comparten entre todas
ellas sntomas de debilidad estructural en el
tejido conectivo. Por ejemplo, el sndrome
de Ehlers-Danlos tipo IV, est causado por
defectos en el colgeno tipo III; los sntomas
son graves por el embarazo o el parto y ten-
dencia a sufrir contusiones. El sndrome de
Ehlers-Danlos tipo V, llamada tambin cutis
laxa, se manifiesta por piel suelta, que apa-
rece excesivamente arrugada y cuelga en
pliegues. En el sndrome de Ehlers-Danlos
tipo VI hay una deficiencia de lisil-hidroxi-
lasa; las caractersticas clnicas incluyen
marcada hiperextensibilidad de la piel y las
articulaciones, difcil curacin de las heridas
y deformaciones msculo-esquelticas. En
el tipo VII del sndrome la piel se magulla
fcilmente y es hiperextensible.. pero la prin-
cipal manifestacin es la dislocacin de las
articulaciones como la cadera y rodillas.
Sndrome de Marfn: Es una enfermedad
que se caracteriza por sntomas relacionados
con esqueleto, ojo y corazn, que suelen ter-
minar con accidentes vasculares, en especial
con ruptura de la aorta. Se ha identificado el
colgeno tipo I como el posible factor donde
reside la base de esta enfermedad.
Sndrome de Menkes. Se caracteriza por-
que el cabello toma aspecto rizado. Hay de-
ficiencia de lisinoxidasa y los enlaces
cruzados son defectuosos; esta asociado a
un metabolismo anormal del cobre.
Protenas contrctiles
El movimiento es una caracterstica esencial
de todas las formas vivas, desde el movi-
miento de cilios y flagelos hasta el ms fino
de la mano humana. Las molculas respon-
sables de esta importante propiedad son las
protenas contrctiles. El mecanismo con-
trctil del msculo esqueltico de los verte-
brados es el mejor conocido.
 el)

Dimetro de 1 5 A

Prolina

Figura 3.37 Estructura de! colgeno desde la secuencia primaria hasta la fibrilla.
 Para que se realicen los movimientos de
una clula (pseudpodos) o de un organismo
(contraccin muscular) se requiere de un
mecanismo disparador del proceso (el Ca 2+ ),
una fuente de energa (el ATP) y un sistema
transductor (el msculo). El msculo es el
principal transductor bioqumico que con-
vierte la energa (qumica) potencial en
energa (mecnica) cintica. Este sistema me-
canoqumico es la maquinaria ms eficiente y
verstil de conversin energtica jams co- un aspecto estriado. Este se debe a la alter-
nocida.
Un transductor qumico-mecnico debe
satisfacer varios requerimientos: 1) suminis-
tro constante de energa; 2) debe haber un
sistema regulador de la actividad mecnica;
3) debe existir un operador, funcin cubierta
por el sistema nervioso y 4) que la mquina
pueda regresar a su estado original. Estos re-
querimientos son satisfechos, en el hombre,
por tres tipos de msculos: esqueltico, car-
diaco y liso. El msculo esqueltico y car-
diaco aparecen estriados en el microscopio;
el msculo liso no es estriado. El msculo
esqueltico se encuentra bajo control ner-
vioso voluntario, el msculo cardiaco y liso
es de control involuntario.
El tejido muscular es el ms abundante del
cuerpo humano. Ms del 40% de la masa muscu-
lar de un individuo adulto es msculo esquel-
tico. Durante una actividad muscular intensa,
los msculos pueden consumir 85% o ms
del ATP total producido en el metabolismo.
Todos los msculos estriados del cuerpo
estn formados por gran nmero de fibras.
Cada fibra muscular contiene millares de
miofibrillas, ordenadas en paralelo, las cua-
les poseen a su vez unos 2,500 filamentos
que se encuentran inmersos en un citoplas-
ma soluble (sarcoplasma), rodeados por una
membrana celular (sarcolema). La clula
muscular posee un abundante retculo endo-
plsmico (sarcoplsmico) poco rugoso, lo
cual habla de una sntesis proteica muscular
poco activa; su contenido en mitocondrias
es muy variable, los msculos aerbicos de
actividad continua son muy abundantes en
mitocondrias, mioglobina y citocromos, son
los llamados msculos rojos; en cambio, los
msculos blancos son poco abundantes en
mitocondrias y mioglobina y su metabo-
lismo es anaerbico.
Las miofibrillas son la maquinaria contrc-
til del msculo y su unidad es la sarcmera.
Cuando se examinan cortes de una miofibrilla
al microscopio ptico o electrnico presentan
nancia de bandas oscuras y claras; la banda
oscura, banda A, es anisotrpica, birrefrin-
gente a la luz polarizada, lo cual sugiere un
ordenamiento geomtrico regular de las mo-
lculas; la banda I es isotrpica, no es refrin-
gente, lo que indica un ordenamiento ms al
azar. Dentro de la banda A se distingue una
zona de poca densidad a los electrones o zo-
na H con una lnea central muy densa, linea
M. Dentro de la banda I se define una lnea
muy densa a los electrones o lnea Z; dos l-
neas Z delimitan una sarcmera (fig. 3.38).
Detrs de la estructura microscpica de la
miofibrilla subyace una estructura molecu-
lar de sus componentes. Cada sarcmera est
formada por filamentos gruesos, confinados
a la zona H de la banda A y que constan de
la protena miosina; los filamentos delgados
se localizan en la banda I pero se extienden
hasta la banda A y consisten en las protenas
acuna, tropomiosina y troponina. La lnea Z
es un material amorfo de a-actinina al cual
se unen los filamentos delgados y la lnea M
es un ensanchamiento de los filamentos
gruesos formada por protena M. Al corte
transversal, cada filamento grueso est ro-
deado por seis filamentos delgados y cada
filamento delgado est rodeado por tres fila-
mentos gruesos (fig. 3.39).
Protenas musculares
La actina, descubierta por Straub, es una
protena globular que representa el 25% en
peso de la protena muicular. La forma glo-
bular monomrica es la actina-G, la cual se
prolimeriza, en presencia de Mg 2 + para for-
mar un filamento de doble hlice, insoluble,
llamado actina-F. Ninguna de las dos for-
mas (G o F) muestra actividad cataltica.
La tropomiosina, descubierta por Bailey,
es una molcula en forma de varilla o bastn
que se encuentra asociada con filamentos de
actina. Constituye el 2.5% de las protenas
musculares. La otra protena ligada a la acti-
na es la troponina. Mientras que la tropo-
miosina existe en todos los msculos, la
troponina es exclusiva del msculo estriado.
La troponina consta de tres subunidades di-
ferentes: la troponina-C, protena fijadora de
calcio; la troponina-I, inhibe la interaccin
actina-miosina y tambin la actividad
ATPasa; la troponina-T, interviene en el en-
samble de las subunidades C e I al complejo
actina-tropomiosina (fig. 3.40).
El componente fundamental del filamento
grueso es la miosina descubierta por Kuhne,
es la protena ms abundante del msculo
esqueltico (55% de la protena muscular).
La miosina est compuesta por dos cadenas
pesadas entrelazadas helicoidalmente con
una cabeza globular en cada extremo, lo cual
le da un aspecto caracterstico (fig. 3.41).
Adems, cada cabeza globular est asociada
a dos cadenas ligeras. La porcin globular
de la miosina tiene actividad ATPasa y se
combina con la actina.
Cuando la miosina es digerida con tripsi-
na, se forman 2 fragmentos denominados
meromiosinas. La meromiosina pesada po-
see la porcin globular y parte de la porcin
fibrosa; conserva la actividad ATPasa y se
une a la actina-F. La meromiosina ligera
contiene la porcin fibrosa y no muestra ac-
tividad ATPasa ni se une a la actina-F. La
actividad ATPasa se incrementa 100 a 200
veces por la adicin de actina-F.
Actomiosina. Hace ya ms de 30 aos que
Szent-Gyrgyi mezcl en un tubo de ensayo
actina con miosina y observ la formacin
de un complejo actomiosina que aument la
viscosidad de la solucin. La fibra de acto-
miosina preparada por Engelhardt, posee un
comportamiento ptico de doble refraccin
anlogo a la fibra muscular intacta; esto jus-
tific el considerar que una fibra de acto-
miosina preparada es, en efecto, un modelo
molecular de la fibrilla muscular.
Bases moleculares de la contraccin
muscular
La contraccin muscular se inicia con la lle-
gada del impulso nervioso y con ello la ace-
tilcolina que despolariza la membrana
muscular y se alcanza el potencial crtico o
de accin que se propaga por el sarcolema.
Esta despolarizacin provoca aumento de
permeabilidad al Ca 2+ . En ausencia de cal-
cio la interaccin actinamiosina est inhibi-
da por la troponina-I y el msculo est en
reposo, relajado. Al entrar el Ca 2 + al sarco-
plasma, se une a la troponina-C y se produce
un cambio conformacional que afecta a las
otras subunidades de troponina y a la tropo-
miosina que se desplaza de su lugar y permi-
te interaccionar a las cabezas globulares de
la miosina con las molculas de actina.
En conjunto, se produce un deslizamiento de
filamentos de actina sobre los de miosina y con
ello un acortamiento, no de filamentos, sino de
la zona H (fig. 3.42). Al acortarse la zona H,
se acorta la sarcmera, la miofibrilla y el
msculo completo. La energa que aporta fuer-
za para la contraccin muscular es la hidr-
lisis del ATP (ver captulo Bioenergtica). La
caracterstica de este ciclo bioqumico de con-
traccin es que la actina posee poca afinidad
por el complejo miosina-ATP (fibra-relajada);
al hidrolizarse el ATP, se produce la contrac-
cin por la elevada afinidad de la actina por el
complejo miosina-ADP (fibra contrada). En
trminos simples, la energa producida por
hidrlisis de ATP se usa para que se produz-
ca la unin-desunin de actina y miosina.
 La relajacin de msculo tiene lugar con
el cese del impulso nervioso y el retorno del
sarcolema a su estado polarizado original lo
cual se logra por bombeo de Na+ hacia afue-
ra y de K+ hacia dentro de la clula por me-
dio de una Na+-K+-ATPasa. En esta fase de
relajacin interviene tambin el ATP para
bombear Ca2+, contra un gradiente de con-
centracin, hacia afuera de la clula por una
C 1+-M | + -ATPasa.
 El grupo carboxilo puede ser qumica- te detectar cantidades del orden de 1 micro-
mente descarboxilado para dar la correspon- gramo 3 * 10~9 moles de un aminocido.
diente amina. La fluorescamina reacciona con los ami-
nocidos a temperatura ambiente dando un
producto fluorescente, cuya concentracin
5.13.2. Reacciones del grupo a -amino puede medirse con un espectrofluormetro.
Este es un reactivo an ms sensible (10 a
El grupo amino de los aminocidos reaccio- 100 veces mayor que la ninhidrina), ya que
na con la ninhidrina en caliente para dar un permite detectar cantidades de nanogramos
compuesto prpura intenso (excepto la de un aminocido o 10-10 a 10"11 moles.
prolina que da un derivado amarillo) que La reaccin con dinitrofluoro benceno
absorbe al mximo la luz con longitud de (reactivo de Sanger) fue muy utilizada hace
onda de 570 nm (el amarillo de la prolina a aos para identificar aminocidos N-termi-
440 nm). nales, hoy, casi en desuso. Los a -aminoci-
El color obtenido con la ninhidrina es la dos en presencia del reactivo dan lugar a los
base de una prueba colorimtrica que permi- dinitrofenil derivados.
3.13.3. Reacciones de la cadena lateral
Un buen nmero de reacciones qumicas
pueden ser utilizadas para cuantificar cade-
nas laterales especficas en una solucin de
aminocidos libres o protenas desnaturali-
zada.
El reactivo de Ellman (cido ditiobis-ni-
trobenzoico) reacciona con el tiol de la ca-
dena lateral de la cisterna a pH 8.0 dando un
producto, el cido tionitrobenzoico, que ab-
sorbe intensamente a 412 nm.
La reaccin de Sakaguchi se utiliza para
cuantificar espectrofotomtricamente el
grupo guanidino de la arginina. El reactivo
de Ehlrich es un ensayo colorimtrico para
el grupo indol del triptfano. El reactivo de
Pauly da un color rojo con el imidazol de la
histidina y el fenol de la tirosina.
3.1.4. Clasificacin
Entre las diferentes clasificaciones estructura-
les de los aminocidos, quiz la ms extendida
es la que los agrupa segn las propiedades
fisicoqumicas de su cadena lateral, en parti-
cular, en cuanto a su polaridad. Los amino-
cidos se denominan en forma sistemtica o
trivial. La ms extendida es la denomina-
cin trivial o comn, fruto del material don-
de se aislaron por primera vez (asparagina