Professional Documents
Culture Documents
metabolisme; kekuranganvitamin ini dikaitkan dengan anemia megaloblastik dan berbagai gangguan
neurologis. Berbeda dengan banyak prokariota, manusia dan mamalia lainnya tidak dapat mensintesis
B12. Sebaliknya, jalur canggih untuk serapan dan transportasi molekul ini khusus telah berkembang.
Kegagalan di bagian pencernaan dari jalur ini adalah penyebab paling umum dari penyakit defisiensi B12
nondietary-diinduksi. Namun, meskipun kurang sering, cacat dalam pengolahan seluler dan langkah-
langkah hilir lebih lanjut dalam jalur transportasi adalah penyebab juga dikenal defisiensi B12 fungsional.
pendekatan biokimia dan genetik telah mengidentifikasi protein baru di B12 transportasi jalur-sekarang
dikenal untuk melibatkan lebih dari 15 produk-menggambarkan gen jalur yang koheren untuk
perdagangan B12 dari makanan untuk sel-sel tubuh. Beberapa produk gen ini secara khusus
didedikasikan untuk B12 transportasi, sedangkan yang lain merangkul peran tambahan, yang
menjelaskan heterogenitas dalam gambaran klinis banyak kelainan genetik yang menyebabkan
kekurangan vitamin B12. Ulasan ini menjelaskan fitur dasar dan klinis ini jalur tahapan dengan
penekanan pada transportasi gastrointestinal B12 dan pentingnya dalam kedokteran klinis.
Vitamin B12 (B12 [juga dikenal sebagai cobalamin]; singkatanB12 mencakup semua bentuk cobalamins
dan tidak hanya sianokobalamin, yang merupakan vitamin B12) adalah larut dalam air molekul yang
berfungsi sebagai koenzim penting untuk dua enzim di dalam tubuh manusia: metionin sitoplasma
synthase, yang mengkatalisis metilasi homosistein ke metionin; dan methylmalonyl-CoA mutase, yang
mengkatalisis konversi metilmalonil-CoA ke succinylCoA dalam mitokondria (Gambar 1). metionin yang
Reaksi synthase, yang juga melibatkan folat (vitamin B9) adalah penting untuk sejumlah besar reaksi
metil transfer dan juga, oleh karena itu, secara tidak langsung terlibat dalam nukleotida perpaduan.
Reaksi yang methylmalonyl-CoA mutase adalah yang terlibat dalam pencernaan senyawa organik yang
berbeda, termasuk asam amino bercabang dan asam lemak aneh-rantai Di seluruh dunia, defisiensi B12
moderat adalah umum, terutama di negara-negara berkembang di mana individu memiliki asupan
rendah produk hewani (satu-satunya sumber vitamin) 0,1 B12 moderat juga umum di antara populasi
lansia, yang mungkin karena perubahan usia tergantung pada epitel lambung dan ketidakmampuan
untuk secara efektif menyerap B12 makanan-terikat. 2 terang-terangan B12 Kekurangan yang paling
sering terjadi sebagai akibat dari kegagalan untuk serapan vitamin, adalah penyakit parah yang ditandai
anemia megaloblastik dan / atau neurologis gangguan; jika tidak ditangani, gangguan ini dapat
menyebabkan kerusakan ireversibel dan akhirnya death.3 Setelah disebut sebagai kofaktor yang paling
indah alam, 4 B12 berwarna merah adalah tetrapyrrole yang terjadi dalam beberapa bentuk aktif dan
tidak aktif (Gambar 1) 0,5-10 Sebagai kompleks 30-langkah jalur B12 biosintesis terbatas untuk
prokariota tertentu, manusia benar-benar tergantung pada sumber makanan dari vitamin.11 The
tertelan vitamin lolos ke ileum terminal untuk penyerapan dan sekali dalam darah, itu didistribusikan ke
seluruh sel-sel tubuh. Karena sirkulasi enterohepatik efisien, serta reuptake di ginjal, vitamin
dipertahankan dalam tubuh untuk waktu yang lama, dan karena itu tidak cukup asupan makanan harus
berlangsung selama bertahun-tahun pada orang dewasa menyebabkan gejala klinis defisiensi.
Sebaliknya, kekurangan dapat terjadi jauh lebih cepat selama hidup awal dan pada pasien kurang
kapasitas untuk menyerap vitamin. defisiensi B12 bukan disebabkan oleh pasokan makanan tidak
mencukupi umumnya akibat kerusakan autoimun sel parietal lambung (Yang mengarah ke anemia
pernisiosa klasik), tetapi banyak lainnya diakuisisi atau kondisi genetik juga dapat mengakibatkan
kurangnya vitamin, termasuk cacat molekul dalam usus mesin penyerapan (Tabel 1 dan 2). Penyerapan
B12 dan distribusi selanjutnya dalam tubuh dimediasi oleh seperangkat kompleks protein pembawa,
reseptor dan transporter, dan sekarang mungkin untuk menggambarkan jalur koheren B12 dari
makanan ke sel-sel tubuh. Dalam Ulasan ini, kami menggambarkan perdagangan yang mekanisme B12,
bersama-sama dengan gangguan yang dihasilkan dari cacat molekul dalam jalur transportasi ini, dengan
fokus khusus pada penyerapan usus B12. operator B12 dalam cairan ekstraseluler Transportasi dari B12
dalam cairan ekstraseluler tergantung pada tiga protein pembawa homolog: faktor intrinsik,
transcobalamin (juga dikenal sebagai transcobalamin II), dan haptocorrin (juga dikenal sebagai Rprotein
atau transcobalamin SAYA). Protein ini berbagi sama secara keseluruhan perancah struktural dan
masing-masing membawa sebuah molekul B12 tunggal (Gambar 2) .12,13 faktor intrinsik memiliki fungsi
penting dalam pengangkutan B12 ke intrinsik reseptor faktor-B12, cubam, yang diekspresikan pada
enterosit di ileum dan bertanggung jawab untuk penyerapan vitamin dengan cara receptormediated
endositosis. Faktor intrinsik juga penting untuk proses penyerapan yang sebenarnya sebagai cubam
mengakui hanya intrinsik kompleks faktor-B12 dan tidak faktor intrinsic atau orang merdeka B12
alone.14,15 Pada manusia, faktor intrinsik disintesis dan disekresikan oleh sel parietal lambung, dan
hanya sejumlah kecil telah terdeteksi di luar tract.16 pencernaan protein pembawa ini sangat glikosilasi,
yang, serta asam amino spesifik urutan, diduga melindunginya dari pencernaan dengan enzymes.17 usus
Secara struktural, faktor intrinsik memiliki dua domain arsitektur dimana B12 mengikat pada antarmuka
antara dua domains.12 Sebuah modus serupa mengikat B12 pada antarmuka dua domain yang
menegaskan tidak hanyan untuk transcobalamin dan haptocorrin, 13 tetapi juga di B12-dependent
enzim metionin synthase18 dan methylmalonyl-CoA mutase.19 Karena peran penting faktor intrinsik di
B12 penyerapan, kekurangan protein ini (disebabkan oleh autoimun serangan dari sel parietal atau
kesalahan bawaan langka sintesis) menyebabkan avitaminosis B12 parah dan klasik merusak
anaemia.20,21 faktor intrinsik ditemukan oleh Puri sebagai faktor intrinsik kurang pada pasien yang
menderita dari anemia pernisiosa meskipun pasokan yang normal dari faktor ekstrinsik (yaitu B12) .22
Beredar transcobalamin memiliki peran penting dalam mengangkut B12 diserap di ileum untuk sel-sel
tubuh. Pentingnya transcobalamin jelas dalam jumlah kecil anak-anak dengan kesalahan bawaan sintesis
transcobalamin. Anak yang terkena menampilkan beberapa gejala saat lahir, tetapi dalam beberapa
bulan kekurangan parah mengembangkan dan, jika tidak diobati, itu mengarah ke gangguan seumur
hidup karena damage.23-27 neurologis Beberapa yang berbeda jenis mutasi yang mengarah ke
kurangnya transcobalamin memiliki telah diidentifikasi, termasuk penghapusan dan mutasi
mengakibatkan salah RNA editing.23-27 Haptocorrin yang sangat glikosilasi dan dinyatakan dalam
banyak, tapi tidak semua, mammals.28 Pada manusia, haptocorrin adalah hadir dalam banyak cairan
tubuh, termasuk air liur, ASI dan plasma.29 Selain mengawal B12 turun atas bagian dari saluran
pencernaan (lihat di bawah), haptocorrin juga mengikat sejumlah besar vitamin dalam plasma dan ASI.
Haptocorrin berbeda dari faktor intrinsic dan transcobalamin dalam kemampuannya untuk mengikat
tidak hanya B12, tetapi juga bentuk-bentuk tidak aktif dari vitamin, yang disebut analog B12. Selama
bertahun-tahun asal B12 analog tetap belum terpecahkan. Cobanimide dan enam lainnya jenis analog
telah ditemukan dalam tinja, menunjukkan produksi oleh mikroflora kolon, meskipun penyerapan kolon
dari analog tidak shown.30 Studi juga menunjukkan bahwa analog yang hadir dalam darah tali pusat
(Hardlei et al., data tidak dipublikasikan), sehingga mendukung gagasan bahwa analog terbentuk dalam
tubuh. Selain itu, pola analog dalam darah berbeda dari pola diamati pada faeces.30,31 Kesimpulannya,
haptocorrin mengikat analog cobalamin, tetapi peran fisiologis analog ini adalah masalah terus
debate.32,33 Karena hanya B12 transcobalamin-terikat dalam plasma, dan bukan fraksi terikat
haptocorrin, tampaknya tersedia untuk sel-sel tubuh, tingkat transcobalamin B12 terikat (Holo-
transcobalamin) dalam plasma diperkirakan untuk melayani sebagai indikator status B12 keseluruhan
dalam individual.34 Saat ini, pengukuran holotranscobalamin plasma tingkat dianggap sebagai suplemen
yang berharga untuk tes tua untuk mendiagnosis defisiensi B12, seperti karena penilaian dari jumlah
B12 plasma atau pengukuran Asam methylmalonic dan / atau homosistein, yang keduanya terakumulasi
pada pasien yang terkena (Kotak 1) 0,34-38 Penyerapan B12 di usus Selama menelan makanan di
pencernaan bagian atas saluran, B12 ditangkap oleh haptocorrin, dan mekanisme ini diduga untuk
melindungi vitamin dari hidrolisis oleh lingkungan asam di stomach.39 Di duodenum, haptocorrin
terdegradasi oleh enzim disekresikan dari pankreas dan vitamin dirilis kemudian terikat oleh faktor
intrinsik, yang tahan terhadap serangan proteolitik oleh enzymes.17,39 ini Pada ileum terminal, factor
intrinsic B12 diserap oleh endositosis, yang dimediasi oleh kompleks reseptor cubam (Gambar 3)
.14,15,40-44 The cubam kompleks terdiri dari dua berkolaborasi molekul: cubilin (yang merupakan
membran perifer protein yang mengikat intrinsik faktor-B12) dan amnionless (AMN, sebuah
transmembran, protein endocytic). Itu 460 kDa cubilin dan 48 kDa AMN yang coexpressed dalam
membran apikal epitel serap seperti ileum, tubulus proksimal ginjal, dan visceral kuning sac.41,44-48
Cubilin secara kasar dapat dibagi menjadi tiga wilayah: wilayah yang amino-terminal yang trimerizes
protein; delapan faktor pertumbuhan epidermal domain; dan 27 disebut CUB domains.15,42 CUB
domain 5-8 diperlukan untuk intrinsik faktor-B12 mengikat, 49,50 sedangkan modul CUB tersisa
diperkirakan terdiri situs mengikat untuk ligan cubilin tambahan diidentifikasi di jaringan nonintestinal
seperti kidney.51-53 intraseluler The wilayah AMN pelabuhan dua motif endocytic yang menyampaikan
internalisasi kompleks reseptor dan ligands.54 terikat nya Identitas dan pentingnya fisiologis cubam
telah dikonsolidasikan oleh penelitian biokimia menunjukkan ketergantungan saling cubilin dan AMN
untuk pengolahan dan lipat dari kompleks cubam, 43,45,47,55-59 serta oleh penelitian genetik
Imerslund-Grsbeck Sindrom (IGS), yang jarang, kelainan remaja yang mengarah ke B12 deficiency.
60,61 Pasien Penderitaan dari kondisi ini membawa mutasi pada gen yang mengkode cubilin62 AMN.48
atau lebih jauh lagi, sindrom yang sama telah Dijelaskan dalam anjing dengan AMN gen spontan
defect.63 Selain anemia megaloblastik dan / atau gejala neurologis, IGS yang Sering disertai dengan B12-
tahan proteinuria diucapkan, yang dijelaskan dengan fungsi tambahan cubam di reabsorpsi ginjal
protein dari disaring seperti albumin, apolipoprotein AI dan transferrin.51-53 Pasien dengan IGS tapi
yang tidak memiliki proteinuria diketahui, dan dalam beberapa Mungkin ini kasus temuan dijelaskan
oleh mutasi mempengaruhi hanya intrinsik faktor-B12 mengikat. Salah satu contoh dari mutasi tersebut
di CUBN gen yang disebut Finlandia mutasi 1 (FM1), mutasi missense yang ditemukan di sebagian besar
kasus IGS yang dikenal di Finlandia dan dikenal Mengganggu cubilin mengikat intrinsic Faktor-B12.
64 Dalam kasus ini, gambaran klinis menyerupai bahwa dari remaja keturunan yang disebabkan oleh
defisiensi B12 mutasi pada gen yang mengkode factor.21 intrinsik Transportasi dari B12 dalam sel
Setelah Internalisasi cubam-dimediasi intrinsic Faktor-B12, faktor intrinsik terdegradasi di lisosom itu,
yang yang berisi protease yang dapat menyerang pembawa protein (seperti protease usus). The
dibebaskan B12 kemudian melintasi membran lisosom untuk masuk sitoplasma, sebuah proses yang
mungkin melibatkan protein LMBD1 (Gambar 4) 0,65 Bagaimanapun, menggunakan kombinasi analisis
linkage genome-wide dan cDNA transfeksi eksperimen penyelamatan, Rutsch et al.65 telah
menunjukkan bahwa mutasi pada gen LMBD1 encoding adalah bertanggung jawab untuk cblF cacat
langka, kesalahan bawaan B12 metabolisme yang Ditandai dengan lisosom yang rusak pelepasan B12. 66
The konsekuen perangkap vitamin dalam lisosom yang menghalangi penggunaannya sebagai koenzim
untuk metionin sintase dan methylmalonyl-CoA mutase. LMBD1 adalah protein reseptor-seperti 61kDa
lipocalin itu diprediksi pelabuhan sembilan heliks transmembran dan telah ditunjukkan untuk mencari
ke membran lisosomal dengan Cterminus menghadapi cytoplasm.65 Dalam sama
studi, transfeksi fibroblas berbudaya cblF pasien dengan cDNA encoding tipe liar LMBD1 mengakibatkan
Sebuah peningkatan yang substansial dalam sintesis B12, which di gilirannya tercermin dalam aktivitas
enzimatik yang disempurnakan metionin sintase dan methylmalonyl-CoA mutase. Secara keseluruhan,
data Ulasan ini mendukung hipotesis bahwa LMBD1 yang Terlibat dalam ekspor lisosom B12. Persis
bagaimana B12 ditangani dalam sel dari titik lisosom keluar sampai penggunaannya sebagai koenzim
atau ekspor dari sel ini masih belum diketahui. Namun, seperti sebelumnya berpengalaman dengan
aspek-aspek lain dari B12 perdagangan dan / atau metabolisme, efek koperasi studi genetik, biokimia
dan klinis tampaknya merupakan platform untuk mengisi banyak yang hilang potongan. Dengan
demikian, delapan gen yang mendasari kesalahan bawaandalam metabolisme B12 kini telah Ditandai.
Setiap Ulasan ini mewakili gen dari salah satu dari delapan Complementation diketahui kelompok yang
memiliki cacat dalam intraseluler perdagangan B12 dan metabolisme seperti diungkapkan oleh in vitro
analisis komplementasi somatik dari fibroblast pasien sel (Tabel 1) .67 Tergantung pada lokasi dalam
intraseluler B12 jalur, cacat mungkin memblokir produksi atau pemanfaatan methylB12, adenosylB12,
atau kedua, sehingga mengakibatkan homocystinuria, methylmalonic aciduria, atau keduanya (Gambar
1). Meskipun banyak yang masih harus dipelajari tentang protein yang dikodekan oleh delapan ini gen,
prinsip-prinsip keseluruhan transportasi B12 intraseluler dan pengolahan sekarang perlahan-lahan
sedang marak (Ulasan di rinci elsewhere67,68). Singkatnya, pengetahuan saat ini menunjukkan bahwa
B12 keluar dari lisosom terikat oleh cobalamin sitosol C protein, yang terlibat dalam decyanation dari
[Cyanocobalamin dan dealkilasi dari alkylcobalamins.69-72 B12 yang diproses kemudian mungkin
diteruskan ke cobalamin D protein sitosol, 73-75 yang telah disarankan untuk menentukan perdagangan
B12 untuk apo-metionin synthase dalam sitosol dan apomethylmalonyl-CoA mutase dalam mitokondria.
Fraksi B12 masuk mitokondria dimodifikasi oleh cobalamin B protein untuk menghasilkan kofaktor aktif
5'-deoxyadenosylcobalamin, yang kemudian digunakan oleh methylmalonylCoA mutase (Mut). Dalam
proses ini, cobalamin A protein mungkin memiliki peran penting dalam memastikan bahwakofaktor
tetap di aktif, negara adenosylated nya. Itu B12 yang tersisa di sitosol dipandu ke kedua dua enzim B12-
dependent, metionin sintase (Cobalamin G protein). Di sini, cobalamin protein E diduga mengkatalisis
generasi Methylcobalamin, bentuk kofaktor aktif digunakan oleh synthase.67 metionin Keluar dari B12
dari sel Sebagai alternatif untuk sisa di dalam sel untuk digunakan sebagai koenzim, atau mungkin untuk
penyimpanan, B12 dapat keluar sel untuk masuk ke aliran darah (atau cairan ekstraseluler). Peran ini
sangat penting dalam usus di mana epitel yang sel memberikan B12 untuk plasma. Multidrug resistance
protein 1 (MRP1) telah diidentifikasi sebagai salah satu pintu gerbang molekuler untuk ekspor B12 di ini
cells.76 MRP1 (juga dikenal sebagai ABCC1) adalah ~ 190 kDa dalam ukuran dan milik ATP-binding kaset
(ABC) transporter keluarga yang pasangan ATP hidrolisis untuk pengangkutan zat terhadap konsentrasi
gradient.77 MRP1 adalah protein multifungsi dan pada awalnya ditandai sebagai transporter mampu
mengekspor berbagai agen antikanker, sehingga memberikan kontribusi resistensi di beberapa kanker
forms.78 protein adalah dinyatakan dalam membran basolateral sel terpolarisasi di Selain hadir di
sebagian besar cells.77,79,80 nonpolarized Sebelumnya, B12 diasumsikan untuk meninggalkan sel-sel di
kompleks dengan transcobalamin.81-83 Namun, serangkaian eksperimen ekspor seluler benar-benar
menunjukkan bahwa B12 keluar dari sel kultur terjadi dengan transportasi transmembran vitamin dalam
bentuk bebas (nonprotein-terikat) melalui MRP1.76 Memang, transportasi vitamin dalam bentuk bebas
juga implisit oleh fakta bahwa tes Schilling untuk mendiagnosis kekurangan penyerapan B12
menggunakan pengukuran B12 radioaktif bebas dalam urin (setelah radioaktif B12 memiliki telah
diberikan secara oral dan semua B12 beredar mengikat protein telah jenuh dengan suntikan berlabel
B12) 0,84 mendukung fungsi fisiologis MRP1 di yang penghabisan basolateral epitel B12, Mrp1-KO tikus
memiliki konsentrasi berkurang dari B12 dalam plasma, seperti serta di hati dan ginjal. Sebaliknya,
vitamin terakumulasi di ileum dan kolon dari mice.76 ini Namun, kurangnya Mrp1 hanya mengarah ke
penghambatan parsial B12 penghabisan untuk plasma, dan tidak ada kelainan morfologi atau metabolik
diamati di mice.76 ini Demikian juga, mutasi MRP1 belum diidentifikasi dalam genom B12deficient
pasien dengan defects.85 metabolik belum diketahui Pengamatan ini menunjukkan adanya satu atau
beberapa jalur ekspor B12 alternatif yang mungkin mengimbangi hilangnya Mrp1 pada tikus knockout.
berlebihan seperti mekanisme untuk ekspor mungkin dilakukan oleh lainnya anggota keluarga MRP
sebagai protein ini diketahui memiliki overlap.86 substrat yang luas Namun, B12 seluler assay76 ekspor
gagal membuktikan B12 transportasi oleh terdekat homolog MRP1, ABCC3, ABCC5 dan ABCC6, yang
disajikan dalam basolateral epitel (M. R. Rasmussen dan S. K. Moestrup, data tidak dipublikasikan).
ambilan B12 dari plasma Setelah MRP1-dimediasi keluar ke dalam aliran darah, B12 adalah diangkut
oleh transcobalamin.87 B12 terikat oleh transcobalamin
adalah mudah diambil oleh sel-sel hati dan
Kegiatan namun gagal untuk menghubungkan kegiatan ini untuk protein dengan
dengan cara yang persis sama seperti yang dijelaskan untuk enterosit
B12 (yang memiliki peran penting, tidak langsung dalam sintesis DNA).
mengungkapkan MRP1.77,79,80
kesimpulan
yang dapat hasil dari cacat pada gen yang terlibat dalam
seperti yang dijelaskan dalam Ulasan ini, banyak yang masih menjadi
pada tahap yang sangat awal kehidupan. Pencarian terus untuk B12 mengangkut protein mungkin,
bagaimanapun, menjadi rumit
semata-mata pada gejala dan hasil dari laboratorium saat ini digunakan
34.110 mewakili
112 bentuk meniru administrasi ini penyerapan fisiologis normal B12 dan menghindari kedua
ketidaknyamanan