Aglutinarea in tuburi

analiza seric cantitativ, realizat tot prin tehnica aglutinrii n tuburi. Utilizm serii separate
de tuburi, cte o serie pentru fiecare Ag cunoscut folosit, serul de cercetat fiind diluat
corespunztor protocolului de lucru. Atunci cnd presupunem o febr tifoid sau paratifoid
utilizm spre ex. 6 serii de tuburi, cu Ag cunoscute i inactivate, pentru a evidenia Ac anti-O
(TO S. typhi, AO S. paratyphi A, BO S. paratyphi B), i anti-H (d S. typhi, a S.
paratyphi A, b S. paratyphi B). Dup realizarea diluiilor, incubm tuburile pentru Ac anti-O
timp de 18-20 ore la 52 C urmat de 10 minute la temperatura camerei iar tuburile pentru Ac anti-
H timp de 2 ore la 52 C urmat de 10 minute la temperatura camerei i citim reacia. Un titru de
1/250 n cazul Ac anti-O i respectiv 1/2500 n cazul Ac anti-H ar putea fi sugestiv. Creterea de
4 ori a titrului, la 2 determinri succesive (interval de 7-10 zile) poate confirma suspiciunea de
diagnostic. La persoanele vaccinate n antecedente diagnosticul serologic nu poate fi utilizat
(rezultatele nu sunt interpretabile) i este strict necesar izolarea n culturi a S. typhi.
Att n cazul bolnavilor, dar mai ales n cazul convalescenilor i purttorilor a fost recomandat
reacia de aglutinare n tuburi pentru identificarea prezenei i titrului Ac anti-Vi. Se consider c
un titru de peste 1/40 poate fi considerat sugestiv.

Pentru febra enterica

Pentru diagnosticul serologic al febrelor enterice vom folosi seruri recoltate n dinamic, la 7-10
zile distan, Ag cunoscute (Ag O i Ag H), 4 iruri de eprubete (dou iruri pentru anti-O,
dou iruri pentru anti-H (pentru c vom lucra n cele dou probe, n dinamic, pentru fiecare tip
de Ac). Pentru fiecare ir de tuburi dilum binar serul de cercetat. n final, pentru fiecare ir
avem: un tub martor (tampon pentru diluie + Ag, fr ser) i tuburi cu serul diluat, de ex. 1/40,
1/80, 1/160 etc (un ir de tuburi pentru serul recoltat de la pacient astzi i altul la 10 zile,
pentru titrarea Ac anti-O i nc dou iruri pentru titrarea Ac anti-H). Incubm cele 2 iruri de
tuburi cu Ag O timp de 20 ore la 52C iar cele 2 iruri de tuburi cu Ag H le incubm 2 ore la
52C plus 10 minute la temperatura camerei. Evaluarea o facem pentru fiecare tub n parte,
ncepnd de la diluiile mari, prin examinare i uoar agitare, pentru a surprinde aglutinatele.
Ultimul tub care prezint aglutinare vizibil stabilete titrul reaciei (pentru fiecare ir de tuburi,
n parte). Un titru care crete de 4 ori n dinamic stabilete diagnosticul n mod cert.
n cazul unor pacieni care se afl n convalescen sau n cazul persoanelor care ar putea fi
purttori ncercm s stabilim titrul Ac anti-Vi.