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Quinta edicin
Michael L
Qumica clnica
P R IN C IP IO S , P R O C ED IM IEN T O S Y C O R R ELA C IO N ES
Q U IN T A ED IC I N
Qumica clnica
PRINCIPIOS, PROCEDIMIENTOS Y CORRELACIONES
QUINTA EDICIN
Edward P. Fody, MD
Chief
Departament of Pathology
Erlanger Medical Center
Chattanooga, Tennessee
Traduccin:
IQ Francisco Snchez Fragoso
QFB Carina Amador Vzquez
linlM
MXICO BOGOT BUENOS AIRES CARACAS GUATEMALA
LISBOA MADRID NUEVA YORK SAN JUAN SANTIAGO SAO PAULO
AUCKLAND LONDRES MILN MONTREAL NUEVA DELHI
SAN FRANCISCO SIDNEY SINGAPUR ST. LOUIS TORONTO
A Sheila, Chris, y Carson por su
apoyo y paciencia
MLBA
A mi esposa, Anita, p o r su am or
y apoyo
LES
Prlogo
Parece que fue hace poco que escrib el prlogo de la cuarta facilita el proceso educacional al identificar los objetivos
edicin de este libro. No obstante, desde entonces encuen del aprendizaje, enfocndose en conceptos e ideas clave,
tro que han sido introducidas muchas pruebas de diagns y aplicando la teora a travs de casos prcticos. Cubre
tico nuevas y que, bajo las recientes normas ADA/HSS, las los aspectos bsicos del anlisis de laboratorio, as como
pruebas ms antiguas, incluso la de la glucosa, tienen que muchas reas especiales de las pruebas de laboratorio cl
cumplir funciones ms demandantes. Nuestro laboratorio nico. Y, an es posible llevar este libro a clase, al laborato
ha cambiado la mayor parte de sus sistemas analticos, ins rio, la oficina o a casa para estudiar.
talado un nuevo sistema de informacin y ha sido reorga Por haber trabajado de forma personal con algunos de
nizado para satisfacer las necesidades siempre crecientes los editores y colaboradores, s que tienen gran nivel, tanto
de un sistema de atencin de la salud que depende en gran en el laboratorio como en el saln de clases. Sus intereses
medida de pruebas de laboratorio. Mucho ha cambiado y bases proveen un balance excelente entre lo acadmico
desde la cuarta edicin, y es mrito de los editores y cola y lo prctico, lo que asegura que tanto estudiantes como
boradores de este libro que estn comprometidos a man profesionales tengan ante s una base bien desarrollada de
tener el contenido educacional actual con los cambios que conocim iento que ha sido refinada de manera cuidadosa
ocurren en la medicina de laboratorio. por la experiencia. Proveen el cribado y seleccin necesa
Muchas pruebas, mtodos y sistemas de medicin rios para separar el trigo de la paja, y proveer el sustento
nuevos continan siendo introducidos en el mercado de real para nuestros estudiantes y nosotros mismos.
atencin de la salud que cada vez es ms competitivo. Para la multitud de estudiantes a quienes va dirigido
Las pruebas de laboratorio parecen fciles de realizar; sin este libro, permtanme transmitirles algunas recomenda
embargo, los procesos de anlisis suelen requerir tecno ciones de mi amigo y mentor Olaf el vikingo. Al parecer su
loga compleja que es ms difcil entender. Nuevas prue joven hijo se estaba embarcando en un viaje al mundo real
bas estn evolucionando como resultado de hallazgos de de trabajo. El hijo de Olaf le pregunta, Cmo llego a la
investigacin recientes, junto con nuevos procesos de cim a? la recomendacin de Olaf fue, Tienes que empe
medicin que, otra vez, dependen de tecnologa compleja. zar desde abajo y comenzar a subir! Despus de reflexio
El nico constante es, al parecer, el conocimiento creciente nar esto por un momento, su hijo pregunt, Cmo llego
requerido para entender la ciencia del laboratorio clnico al fondo? Olaf contest, Tienes que conocer a alguien!
actual. Al igual que los estudiantes de la ciencia del laboratorio
Este cambio rpido y evolucin de las pruebas de labo clnico, se debe estudiar y prestar atencin a las recom en
ratorio hace cada vez ms difcil captar el conocimiento daciones de este libro; sin embargo, se debe buscar tam
que define el estado actual de la prctica para los cient bin a los mentores. Los autores de este libro, as como sus
ficos del laboratorio clnico. La tarea del profesional de instructores de curso y sus profesores en el laboratorio,
laboratorio se vuelve ms imponente y tambin ms crti son claves para iniciar su carrera. Bsquelos y benefciese
ca con cada ao que pasa. Por fortuna, los editores y cola de su aprendizaje y experiencia! Estos profesionales cono
boradores de este texto han estado dispuestos a enfrentar cen lo ltimo, y poseen el conocim iento actual del rea y,
esta tarea en apariencia imposible para apoyar y desarro sobre todo, estn dedicados a ayudarlo.
llar la profesin. Deseo agradecerles y felicitarlos!
La quinta edicin de Qumica clnica: principios, proce Ja m e O. Westgard, PhD
dimientos y correlaciones contina su misin de atender Professor, Pathology and L aboratory M edicine
las necesidades de la educacin formal de nuestros estu University o f Wisconsin
diantes en la ciencia del laboratorio clnico, as como las Madison, Wisconsin
necesidades continuas de los profesionales del rea. sta
vii
Prefacio
La qumica clnica contina siendo una de las reas de y analticas en la prctica diaria de la qumica clnica, se ha
la medicina de laboratorio que avanza con ms rapidez. hecho un esfuerzo para mantener un equilibrio apropiado
Desde la publicacin de la primera edicin de este libro entre principios analticos, tcnicas y las correlaciones de
en / 1985, han tenido lugar muchos cambios. Nuevas tec resultados con los estados morbosos.
nologas y tcnicas analticas han sido introducidas, con En esta quinta edicin, los editores han hecho varios
un impacto impresionante en la prctica de la qumica cambios importantes en respuesta a peticiones de lecto
clnica. Adems, el sistema de atencin de la salud est res, alumnos, profesores y profesionales. Los contenidos
cambiando. Hay mayor nfasis en m ejorar la calidad de de captulo, objetivos, trminos clave y resmenes han
la atencin del paciente, los resultados de cada uno de los sido actualizados y ampliados. Cada captulo ahora inclu
pacientes, la responsabilidad financiera y la administra ye estudios de caso comunes, actualizados, y preguntas o
cin de calidad total. La prueba en el lugar de la atencin ejercicios de prctica. Se ha ampliado el glosario de trmi
(PLDA) est tambin a la vanguardia de la prctica de la nos. Para proveer un estudio actualizado y completo de
atencin de la salud, y ha puesto de manifiesto retos y la qumica clnica, todos los captulos han sido actualiza
oportunidades para los laboratoristas clnicos. Ahora, ms dos y revisados por profesionales que practican la qumi
que nunca, los laboratoristas necesitan interesarse en las ca clnica y la medicina de laboratorio todos los das. Los
correlaciones de enfermedad, interpretaciones, resolucin procedimientos bsicos de los procedimientos analticos
de problemas, aseguramiento de la calidad y efectividad de analizados en los captulos reflejan las tcnicas ms recien
costos; necesitan saber no slo el cm o de las pruebas sino tes o ejecutadas comnmente en el laboratorio de qumica
tambin el qu, p o r qu y cundo. Los editores de Qumica clnica. Los procedimientos detallados han sido omitidos
clnica: principios y procedim ientos han designado la quinta debido a la diversidad de equipo y conjuntos comercia
edicin como un recurso incluso ms valioso para estu les empleados en los laboratorios clnicos actuales. Los
diantes y profesionales. manuales de instrumento e instrucciones de los conjun
Al igual que las cuatro ediciones anteriores, la quinta edi tos son las referencias ms confiables para instrucciones
cin de Qumica clnica: principios, procedim ientos y corre detalladas o procedimientos analticos actuales. Todo el
laciones es completa, actualizada y fcil de entender para material de los captulos ha sido actualizado, mejorado y
estudiantes de todos los niveles. Tambin pretende ser un reorganizado para mejor continuidad y legibilidad.
recurso organizado de manera prctica para profesores y
profesionales. Los editores han intentado mantener la legi M ichael L. Bishop
bilidad del libro y mejorar su contenido. Debido a que los Edward P. Fody
laboratoristas clnicos usan sus habilidades interpretativas Larry E. S ch oeff
ix
Colaboradores
Dev Abraham, MD Elizabeth L. Frank, PhD
Assistant Professor in Medicine Assistant Professor Clinical
University of Utah School of Medicine Department of Pathology
Salt Lake City, Utah University of Utah Health Sciences Center
Salt Lake City, Utah
John J, Ancy MA, RRT
Director of Respiratory Services Vicki S. Freeman, PhD, MT(ASCP)SC
St. Elizabeth's Hospital Chair and Associate Professor
Belleville, Illinois Department of Clinical Laboratory Science
School of Allied Health Science
Michael J. Bennett, PhD, FRCPath, FACB, DABCC The University of Texas Medical Branch at Galveston
Professor of Pathology and Pediatrics Galveston, Texas
Mary Quincy Parsons and Kelsey Louise Wright Profes
sor of Mitochondrial Disease Research Lynn R. Ingram, MS
University of Texas Southwestern Medical Center Program Director
Dallas, Texas Clinical Laboratory Sciences
University of Tennessee, Memphis
Larry H. Bernstein, MD Memphis, Tennessee
Chief, Clinical Pathology
New York Methodist Hospital Weill Cornell Robert E. Jones, MD, FACP, FACE
Brooklyn, New York Adjunct Associate Professor of Medicine and Pediatrics
University of Utah School of Medicine
Larry A, Broussard, PhD, DABCC, FACB Diabetes Scientific Manager
Professor Aventis Pharmaceuticals
Clinical Laboratory Sciences Salt Lake City, Utah
LSU Health Sciences Center
New Orleans, Louisiana Lauren E. Knecht, BA
Salt Lake City, Utah
Ellen Carreiro-Lewandowski, MS, CLS
Professor Thomas P. Knecht, MD, PhD
Department of Medical Laboratory Science Associate Professor of Medicine
University of Massachusetts Dartmouth Divisin of Endocrinology
North Dartmouth, Massachusetts University of Utah School of Medicine
Salt Lake City, Utah
George S. Cembrowski, MD, PhD
Associate Professor Daniel H, Knodel, MD, FACP, JD
Department of Laboratory Medicine and Pathology Associate Professor of Medicine Clinical
University of Alberta Divisin of Endocrinology and Metabolism
Director, Medical Biochemistry University of Utah School of Medicine
Regional Laboratory Services Salt Lake City, Utah
Capital Health Authority
Edmonton, Alberta, Caada Robn Gaynor Krefetz, MEd, MT(ASCP), CLS(NCA)
CLT Program Director
Sharon S. Ehrmeyer, PhD, MT(ASCP) Community College of Philadelphia
Professor, Pathology and Laboratory Medicine Philadelphia, Pennsylvania
Director, MT/CLS
University of W isconsin
Madison, W isconsin
xi
xii COLABORADORES
xv
Contenido
Anlisis estadstico de los datos del intervalo INSTRUMENTACIN PARA PROTEM ICA / 115
de referencia / 58 Electroforesis bidimensional / 116
EFICACIA DEL DIAGNSTICO / 61 Espectrometra de masas MADI-TOF y SELDI-TOF / 116
Teora del valor predictivo / 61 O SM O M ETRA/ 117
MTODO DE SELECCIN Y EVALUACIN / 64 Osmmetro de punto de congelamiento / 118
Mtodo de seleccin / 64 TCNICAS ANALTICAS PARA PRUEBAS EN EL
Mtodo de evaluacin / 64 LUGAR DE LA ATENCIN (PLDA) / 119
Medicin de la imprecisin / 64 RESUMEN / 120
Medicin de la inexactitud / 65 PREGUNTAS DE REPASO / 121
Experimento de comparacin de mtodos / 66 REFERENCIAS / 122
ASEGURAMIENTO Y CONTROL DE LA
CALIDAD / 69
5 Principios de autom atizacin qum ica
Control de calidad / 70
clnica I 124
Operacin general de un sistema de control
de calidad estadstico / 71
William L. Roberts
Respuesta de las reglas de control al error / 72 HISTORIA DE LOS ANALIZADORES
Uso de datos del paciente para control de calidad / 79 AUTOMATIZADOS / 125
Control de calidad externo / 80 FUERZAS IMPULSORAS HACIA MS
Prueba en el lugar de la atencin: la dificultad AUTOMATIZACIN / 125
ms reciente / 81 ENFOQUES BSICOS HACIA LA
Hacia la atencin de calidad del paciente / 83 AUTOMATIZACIN / 126
PROBLEMAS DE PRCTICA / 84 PASOS DEL ANLISIS AUTOMATIZADO / 127
PREGUNTAS DE REPASO / 86 Preparacin e identificacin de la muestra / 127
REFERENCIAS / 87 Medicin de la muestra y entrega / 129
Sistemas de reactivos y entrega / 132
Tcnicas analticas e instrum entacin / 90 Fase de reaccin qumica / 133
Alan H. B. Wu Fase de medicin /136
Procesamiento de la seal y manejo de datos /138
ESPECTROFOTOMETRA Y FOTOMETRA / 91 SELECCIN DE ANALIZADORES
Ley de Beer / 91 AUTOMATIZADOS / 139
Instrumentos espectrofotomtricos / 93 AUTOMATIZACIN TOTAL DEL LABORATORIO / 140
Elementos de un espectrofotmetro / 93 Fase preanaltica (procesamiento de la muestra) / 140
Aseguramiento de la calidad del espectrofotmetro / 96 Fase analtica (anlisis qumicos) / 141
Espectrofotmetro de absorcin atmica / 97 Fase posanaltica (manejo de datos) / 142
Fotometra de flama / 98 TENDENCIAS FUTURAS EN LA
Fluorometra / 98 AUTOMATIZACIN / 142
Quimioluminiscenca /100 RESUMEN / 142
Turbidez y nefelometra /100 PREGUNTAS DE REPASO / 143
Aplicaciones lser / 101 REFERENCIAS / 144
E LEC TR O Q U M IC A / 101
Celdas galvnicas y electrolticas /101
6 Inrnunoensayos y tcnicas con sonda de
Semiceidas /101
Electrodos selectivos de iones (ESI) / 102 cido nucleico / 145
Electrodos de pH / 102 Susan Orton
Electrodos detectores de gas /104 INMUNOENSAYOS / 146
Electrodos de enzimas / 104 Consideraciones generales / 146
Cloridmetros coulomtricos y voltametra de Inrnunoensayos no marcados / 147
separacin andica / 105 Inrnunoensayos marcados /151
ELECTROFORESIS / 105 SONDAS DE CIDO NUCLEICO / 160
Procedimiento /105 Qumica del cido nucleico / 161
Materiales de soporte / 106 Tcnicas de hibridacin / 161
Tratamiento y aplicacin de la muestra / 106 Aplicaciones de la sonda de cido nucleico / 164
Deteccin y cuantificacin /106 RESUMEN / 164
Electroendosmosis /107 PREGUNTAS DE REPASO / 165
Enfoque isoelctrico / 107 REFERENCIAS / 166
Electroforesis capilar / 107
CROMATOGRAFA / 108
7 Pruebas en el lugar de la atencin / 168
Modos de separacin / 108
Elizabeth E. Porter
Procedimientos cromatogrficos /109
Cromatografa lquida de alta presin (CLAP) /110 ADMINISTRACIN Y ESTRUCTURA / 169
Cromatografa de gases /111 Licencia y regulacin CU A / 169
CONTENIDO xix
C O N T E N I D O D E L C A P I T U L O
O B J E T I V O S
Al terminar este captulo, el laboratorista clnico Elaborar una lista de los tipos de termmetros
podr: utilizados en el laboratorio clnico, y describir cada
Convertir resultados de un formato de unidad a uno de ellos.
otro usando el SI. Clasificar el tipo de pipeta cuando se tiene una
Describir las especificaciones para cada tipo de pipeta real o su descripcin.
agua de laboratorio. Describir dos formas de calibrar una pipeta.
Identificar los diversos grados qumicos emplea Definir un desecante y explicar cmo se utiliza en
dos en la preparacin de reactivos e indicar su uso el laboratorio clnico.
correcto. Llevar a cabo de manera correcta los clculos
Definir estndar primario, SRM, estndar secundario. matemticos de laboratorio proporcionados en
Describir los siguientes trminos que se rela este captulo.
cionan con soluciones y, cuando sea apropiado, Identificar y describir los tipos de muestras utiliza
proporcionar las unidades respectivas: por ciento, das en la qumica clnica.
molaridad, normalidad, molalidad, saturacin, Describir los pasos generales para procesar mues
propiedades coligativas, potencial redox, conducti tras de sangre.
vidad y densidad relativa. Identificar las variables preanalticas, de preco-
Definir una disolucin amortiguadora y dar la fr leccin, coleccin y poscoleccin que afectan de
mula para calcular pH y pK. manera adversa los resultados de laboratorio.
Usar la ecuacin de Henderson-Hasselbalch para Elaborar una lista con el orden de disposicin ade
determinar la variable faltante cuando se da el pK cuado para los tubos de coleccin.
y el pH, o el pK y la concentracin del cido dbil y Identificar el aditivo o conservador, si est presen
su base conjugada. te, cuando se da un color de tapn de recoleccin.
2
CAPTULO 1 PRINCIPIOS BSICOS Y PRCTICA 3
T R M I N O S C L A V E ___________________________________________
El objetivo principal de un laboratorio de qumica clnica como lo indica su nombre, es una derivada o una funcin
es la ejecucin correcta de procedimientos analticos que matemtica de una de las unidades bsicas. Un ejemplo de
producen informacin exacta y precisa, lo que contribu una unidad SI es metro por segundo (m/s) que se utiliza
ye al diagnstico y tratamiento del paciente. El logro de para expresar velocidad. Sin embargo, algunas unidades
resultados confiables requiere que el laboratorista clnico que no son del SI se utilizan tanto que su uso se ha vuelto
use de manera correcta los materiales y el equipo, y com aceptable con las unidades SI bsicas o derivadas (cuadro
prenda los conceptos fundamentales crticos para cual 1-1). Entre stas se incluyen ciertas unidades antiguas,
quier procedimiento analtico. Los temas de este captulo como hora, minuto, da, gramo, litro y ngulos planos
son unidades de medicin, materiales bsicos de labora expresados como grados. Estas unidades, aunque se utili
torio, matemticas de laboratorio a nivel de introduccin, zan y reconocen, no se clasifican tcnicamente como uni
adems de una explicacin breve de la recoleccin y el dades SI bsicas ni derivadas.
procesamiento de muestras. Otra convencin SI es el uso de prefijos estndar utili
zados ju n to con una unidad simple (cuadro 1-2). Los pre
fijos se pueden aadir para indicar fracciones decimales o
UNIDADES DE M EDIDA1
mltiplos de una determinada unidad. Por ejemplo, 0.001
Cualquier resultado de laboratorio cuantitativo impor L se podra expresar por medio del prefijo mili, lo que
tante incluye dos componentes. El primero representa equivaldra a un mililitro y se escribe como 1 mi. Note que
el valor real, y el segundo es una etiqueta que identifica el trmino SI para masa es kilog ram o; es la nica unidad
las unidades de la expresin. El nmero describe el valor bsica que contiene un prefijo como parte de su conven
num rico, mientras que la unidad define la cantidad fsica cin de nombre. Por lo general, los prefijos estndar para
o dimensin (p. ej., masa, longitud, tiempo o volumen). masa emplean el trmino gram o en vez de kilogramo.
Aunque las distintas divisiones cientficas han utiliza Los resultados de laboratorio suelen expresarse en tr
do de manera tradicional varios sistemas de unidades, se minos de concentracin de sustancia (p. ej., moles) o la
prefiere el Sistem a Internacional de Unidades (SI), adop masa de una sustancia (mg/dl, g/dl, meq/L y UI). Estas
tado a nivel internacional en 1960, en las publicaciones unidades familiares y tradicionales pueden causar confu
cientficas y los laboratorios clnicos, y suele ser el nico sin durante la interpretacin. Se recomienda presentar
sistema utilizado en muchos pases. Este sistema se dise el informe de analitos usando moles de soluto por volu
para dar a la comunidad cientfica global un mtodo uni men de disolucin (concentracin de sustancia) y que
forme al describir cantidades fsicas. La unidades del SI el litro se use como volumen de referencia.2 Los cuadros
(denominadas unidades SI) se basan en el sistema mtrico. en que se presentan valores de referencia de laboratorio
En el SI existen varias clasificaciones de unidades, una de proporcionan valores tradicionales, adems de valores SI
las cuales es la unidad bsica. Hay varias unidades bsicas recomendados. En el apndice D, Conversin de unidades
(cuadro 1-1), donde longitud (m etro), masa (kilogramo) y tradicionales a unidades SI p ara analitos qum icos clnicos
cantidad de sustancia (mol) son las que se encuentran con comunes, se presentan ambas unidades jun to con el fac
ms frecuencia. A otro conjunto de unidades reconocidas tor de conversin de unidades tradicionales a unidades SI
se le denomina unidades derivadas. Una unidad derivada, para analitos comunes.
4 PARTE I PRINCIPIOS BSICOS Y PRCTICA DE LA QUMICA CLNICA
y que la preparacin de estas sustancias no es uniforme. para ciertas propiedades qumicas y fsicas, se puede usar
Con frecuencia se emplea el anlisis de temperatura de en lugar de un estndar primario ACS en el trabajo clnico
fusin para determinar el intervalo de pureza aceptable. No y se emplea con frecuencia para comprobar la calibracin
se recomienda que los laboratorios clnicos usen estas sus o evaluaciones de exactitud y sesgo. Muchos fabricantes
tancias para preparacin de reactivos a menos que se inclu utilizan un NIST SRM al producir materiales estndar y
ya ms purificacin o un blanco de reactivo. Los reactivos de calibracin y, de este modo, son considerados locali-
grado tcnico o comercial se emplean sobre todo en manu zables segn el N IST, y pueden satisfacer ciertos requisi
factura, y nunca se deben usar en el laboratorio clnico. tos de acreditacin. Hay materiales de referencia estndar
Los reactivos orgnicos tambin tienen varios grados para un nmero limitado de analitos, incluso hormonas,
de pureza que difieren de los que se emplean para clasifi frmacos seleccionados y gases sanguneos. Estn disponi
car reactivos inorgnicos. Estos grados incluyen un grado bles los SRM 909a y 909b para suero humano, con el SRM
prctico con algunas impurezas; qumicamente puro, con 909a certificado para calcio, cloruro, colesterol, creatinina,
enfoques al nivel de pureza de sustancias qumicas grado glucosa, litio, magnesio, potasio, sodio, urea, cido rico,
reactivo; reactivos orgnicos grado espectroscpico (pura y los oligoelementos cadmio, cromo, cobre, hierro, plomo
desde el punto de vista espectral) y cromatogrfico (pure y vanadio; y el SRM 909b aade los triglicridos.10
za mnima de 99% determinada mediante cromatografa Un estndar secundario es una sustancia de menor pure
de gases), con niveles de pureza logrados mediante sus za, cuya concentracin se determina por comparacin con
procedimientos respectivos, y grado reactivo (ACS), que un estndar primario. El estndar secundario no slo depen
cuenta con certificacin de que contiene impurezas por de de su composicin, que no se puede determinar de modo
debajo de ciertos niveles establecidos por la ACS. Como directo, sino tambin del mtodo de referencia analtico.
en cualquier mtodo analtico, la pureza deseada del reac Una vez ms, debido a que por lo general no se dispone de
tivo orgnico se indica mediante la aplicacin particular. estndares primarios fisiolgicos, los qumicos clnicos no
Aparte de los aspectos de pureza de las sustancias qu tienen por definicin estndares secundarios verdaderos.
micas, leyes como la Occupational Safety and Health Act Los fabricantes de estndares secundarios incluirn el SRM
(OSHA)4 requieren que los fabricantes indiquen con cla o el estndar primario utilizado para comparacin. Esta
ridad el nmero de lote, ms cualquier riesgo fsico o bio informacin llega a ser necesaria durante procesos de acre
lgico para la salud y precauciones necesarias para el uso ditacin de laboratorio.
seguro y almacenamiento de cualquier sustancia qumica.
Se requiere que un fabricante proporcione hojas de datos Especificaciones para el ag u a11
tcnicos de cada sustancia y un documento llamado hoja
de datos de seguridad del material (m aterial safety data El agua es el reactivo utilizado con ms frecuencia en el
sheet, MSDS). En el captulo 2, Seguridad y regulaciones en laboratorio. Debido a que el agua de la llave es inadecuada
el laboratorio, se presenta una explicacin ms detallada para aplicaciones de laboratorio, en casi todos los procedi
de este tema. mientos, incluida la preparacin de reactivos y estndares,
se emplea agua que ha sido purificada en forma sustancial.
El agua que se purifica slo por destilacin da como resul
M ateriales de referencia5 9
tado agua d estilada; el agua que se purifica por intercambio
A diferencia de otras reas, la qumica clnica se relaciona inico produce agua desionizada. La osmosis inversa, en
con el anlisis de subproductos bioqumicos encontrados que se bombea agua por una membrana semipermeable,
en el suero, lo que hace casi imposible la purificacin y la produce agua de osm osis inversa. El agua se purifica tam
determinacin d su exacta composicin. Por esta razn, bin mediante ultrafiltracin, luz ultravioleta, esteriliza
los estndares definidos de manera tradicional no se apli cin o tratamiento con ozono. Los requisitos de laboratorio
can estrictamente en la qumica clnica. suelen indicar agua grado reactivo que, segn el National
Recuerde que un estndar prim ario es una sustancia Com m ittee fo r Clinical Laboratory Standards (NCCLS), per
altamente purificada que se puede medir de modo direc tenece a uno de tres tipos (I, II o III). Se recomienda deno
to para producir una sustancia de pureza y concentracin minar al agua grado reactivo, seguida del tipo relacionado
conocida exacta. Las tolerancias de pureza ACS para estn (I, II o III), en vez del mtodo de preparacin.12
dares primarios son 100 0.02% . Debido a que casi no La filtracin previa elimina partculas de materia de
hay constituyentes biolgicos disponibles dentro de estas suministros de agua municipales antes que cualquier tra
limitaciones, se emplean los m ateriales de referencia estn tamiento adicional. Los cartuchos de filtracin estn for
dar (standard reference m aterials, SRM) certificados por el mados por vidrio, algodn, carbn activado (que elimina
NIST, en lugar de los estndares primarios ACS. materiales orgnicos y cloro) y filtros de submicras (^ 0 .2
El NIST desarroll material de referencia certificado mm ), que eliminan cualquier sustancia ms grande que
(CRM/SRM) para uso en laboratorios qumico clnicos. Se los poros del filtro, incluidas bacterias. El uso de estos fil
les asigna un valor despus del anlisis cuidadoso, con lo tros depende de la calidad del agua municipal y los otros
ltimo en mtodos y equipo. As, se certifica la composi mtodos de purificacin empleados. Por ejemplo, el agua
cin qumica de estas sustancias; sin embargo, es posible dura (que contiene calcio, hierro y otros elementos clisuel-
que no posean el equivalente de pureza de un estndar pri tos) podra requerir prefiltracin con un filtro de vidrio o
mario. Debido a que cada sustancia ha sido caracterizada algodn en vez de carbn activado o filtros de submicras,
6 PARTE I PRINCIPIOS BSICOS Y PRCTICA DE LA QUMICA CLNICA
que se taponan con facilidad y cuya operacin resulta cos reactivos. El agua tipo II es aceptable para casi todos los
tosa. Los filtros de submicras llegan a resultar mejores des requisitos analticos, incluidos preparacin de reactivos,
pus de la destilacin, desionizacin o del tratamiento por controles de calidad y estndares. El agua tipo I se emplea
osmosis inversa. para probar mtodos que requieren interferencia mnima,
El agua destilada se purifica para eliminar casi todos los como anlisis de metales traza, hierro y enzimas. El uso
materiales orgnicos. Se usa una tcnica de destilacin muy con cromatografa lquida de alta resolucin podra reque
parecida a la que se encuentra en experimentos de destila rir una etapa de filtracin final con un filtro menor de 0.2
cin de laboratorios de qumica orgnica en que el agua se mm. Debido a que el agua tipo I se debe usar de inmedia
hierve y evapora. El vapor sube y entra al serpentn de un to, no se recomienda el almacenamiento por los cambios
condensador, un tubo de vidrio que contiene un serpentn de resistividad. El agua tipo II se debe almacenar de mane
de vidrio. El agua fra que rodea a este serpentn condensa ra tal que se reduzca cualquier contaminacin qumica o
dor disminuye la temperatura del vapor de agua. El vapor bacteriana y durante perodos cortos.
de agua vuelve al estado lquido, que se recolecta despus. Los procedimientos de prueba para determinar la
Muchas impurezas no suben en el vapor de agua, y permane calidad del agua grado reactivo incluyen mediciones de
cen en el aparato de ebullicin. El agua recolectada despus resistencia; pH, cuentas de colonias (para evaluar la conta
de la condensacin tiene menos contaminacin. Debido a m inacin bacteriana) en medios selectivos y no selectivos
que los laboratorios usan miles de litros de agua todos los para la deteccin de coliformes, cloro, amoniaco, nitrato
das, se usan alambiques en lugar de pequeos aparatos de o nitrito, hierro, dureza, fosfato, sodio, slice, dixido de
condensacin; sin embargo, los principios son bsicamente carbono, demanda qumica de oxgeno (DQO) y detec
los mismos. El agua puede ser destilada ms de una vez, y en cin de metales. Algunas agencias de acreditacin13 reco
cada ciclo de destilacin se eliminan ms impurezas. miendan que los laboratorios documenten el desarrollo de
En el agua desionizada se han eliminado algunos o todos cultivos, pH y resistencia especfica al agua utilizada en la
los iones, aunque podra estar presente material orgnico, preparacin del reactivo. La resistencia se mide porque el
as que no es pura ni estril. Por lo general, el agua desio agua pura, desprovista de iones, es un mal conductor de
nizada se purifica a partir de agua tratada previamente, la electricidad. La relacin entre pureza del agua y resis
como el agua prefiltrada o destilada. El agua desioniza tencia es lineal. Por lo general, si se incrementa la pure
da se produce por medio de una resina de intercambio de za, tambin se incrementa la resistencia. Esta medicin es
aniones o cationes, seguida del reemplazo de las partcu insuficiente para determinar la pureza verdadera del agua
las eliminadas con iones hidrxido o hidrgeno. Los iones porque es posible que est presente un contaminante ini
que se prev eliminar del agua determinarn el tipo de co que tenga poco efecto en la resistencia. En el cuadro
resina de intercambio inico que se usar. Una columna es 1-3 se presenta una lista de las especificaciones del agua
insuficiente para todos los iones presentes en el agua. La grado reactivo de cada tipo para parmetros seleccionados
combinacin de varias resinas producir diferentes grados de acuerdo con las normas del NCCLS.
de agua desionizada. Un sistema de doble cama emplea Tome nota de que el agua grado reactivo que satisfa
una resina amnica seguida de una catinica. Las dife ce las especificaciones de otras organizaciones, como la
rentes resinas pueden estar en columnas separadas o en A m erican Society f o r Testing M aterials (ASTM ), tal vez no
la misma. Este proceso es excelente para eliminar slidos sea equivalente a las especificaciones que establece para
ionizados y gases disueltos. cada tipo el NCCLS, y se debe tener cuidado de satisfacer
La osmosis inversa es un proceso que usa presin para los requisitos de procedimiento del ensayo respecto a las
forzar el agua por una membrana semipermeable, y pro exigencias de tipo de agua. En el caso de ciertos proce
duce agua que refleja un producto filtrado del agua origi dimientos, tal vez se requiera agua tipo especialidad que
nal. No elimina gases disueltos. La osmosis inversa podra excede las especificaciones del agua tipo I.
utilizarse como pretratamiento para el agua.
La ultrafiltracin y la nanofiltracin, al igual que la des Propiedades de la solucin
tilacin, son excelentes para eliminar materia particulada,
microorganismos y cualquier pirgeno o endotoxinas. La En la qumica clnica se miden sustancias encontradas en
oxidacin ultravioleta (elimina algunos materiales orgni lquidos biolgicos (p. ej., suero, orina y lquido espinal).
cos traza) o los procesos de esterilizacin (utilizan longi
tudes de ondas especficas), junto con el tratamiento por
ozono, destruyen bacterias que dejan productos residua CUADRO 1-3. AGUA PARA REACTIVO
les. Estas tcnicas se emplean despus que se utilizaron
TIPO i TIPO II TIPO lli
otros procesos de purificacin.
La produccin de agua grado tipo I depende en gran Recuento mximo de <10 1000 NE
medida de la condicin del agua alimentada. Por lo gene colonias (UFCm i)
ral, el agua se obtiene al filtrarla inicialmente para eliminar Silicato (mg/L SiO,) 0.05 0.1 1 .0
materia particulada, seguida de osmosis inversa, desio
Resistividad (m egaohm cm ) 10 (en lnea) 1.0 0.1
nizacin y un filtro de 0.2 mm o procesos de filtracin
ms restrictivos. El agua tipo III es aceptable para lavar pH NE NE 5.0-8.0
material de vidrio pero no para anlisis o preparacin de NE = no especificado.
CAPTULO 1 PRINCIPIOS BSICOS Y PRCTICA 7
Una sustancia que se disuelve en un lquido se llama solu el informe de valores de electrlitos, como sodio [Na+],
to; en ciencia del laboratorio, a estos solutos biolgicos potasio [K+] y cloruro [CU] expresados como miliequiva-
se les conoce tambin como analitos. El lquido en el que lentes por litro (meq/L); sin embargo, esta convencin se
se disuelve el soluto, en este caso un lquido biolgico, ha reemplazado por las unidades familiares de milimoles
es el disolvente. Juntos representan una disolucin. Cual por litro (mmol/L).
quier disolucin qumica o biolgica se describe mediante La saturacin de la disolucin da poca inform acin
sus propiedades bsicas, como concentracin, saturacin, especfica acerca de la concentracin de solutos en una
propiedades coligativas, potencial redox, conductividad, disolucin. La temperatura, as como la presencia de
densidad, pH y resistencia inica. otros iones, puede afectar la constante de solubilidad
para un soluto en una determinada disolucin y, por
C o n cen tra cin tanto, afectar la saturacin. Los trm inos de rutina en
La concentracin de analito en disolucin se puede expre el laboratorio clnico que describen el grado de satura
sar de muchas maneras. En general, la concentracin se cin son diluido, concentrado, satu rado y su persaturado.
expresa como disolucin en por ciento, molaridad, mola- En una d isolucin dilu ida hay relativamente poco solu
lidad y normalidad, y estas expresiones se analizan aqu to. En contraste, una disolucin con cen trad a tiene gran
porque tienen un uso extendido, aunque no son del SI. cantidad de soluto en disolucin. Una disolucin en la
Observe que la expresin SI para la cantidad de una sus que hay un exceso de partculas de soluto no disueltas
tancia es el mol. es una disolucin satu rada. Como indica su nom bre, una
Las disoluciones en p o r ciento son iguales a parte por disolucin su persatu rada tiene una concentracin mayor
cien o la cantidad de soluto por 100 unidades totales de de partculas de soluto no disueltas que una saturada de
disolucin. Tres expresiones de soluciones en por ciento la misma sustancia. Como resultado de la mayor con
son peso por peso (p/p), volumen por volumen (v/v) y, la centracin, una disolucin supersaturada es inestable
ms comn, peso por volumen (p/v). En el caso de solu desde el punto de vista term odinm ico. La adicin de
ciones v/v, se recomienda usar mililitros por litro (ml/L) un cristal de soluto o la agitacin m ecnica perturba
en lugar de por ciento o % (v/v). la solucin supersaturada, y el material excedente de la
La m o larid ad se expresa como el nmero de m oles disolucin se cristaliza. Un ejem plo es cuando se mide
por 1 L de disolucin. Un mol de sustancia es igual a la osmolalidad srica mediante la depresin del punto
su peso m olecular en gramos (pm g). La representacin de congelacin.
SI para la concentracin m olar tradicional es moles de
soluto por volumen de disolucin, con el volum en de P ropiedades coligativas
disolucin expresado en litros. La expresin SI para la El comportamiento de las partculas en disolucin demues
concentracin se debe representar como moles por litro tra cuatro propiedades reproducibles con base nicamente
(mol/L), m ilim oles por litro (mmol/L), m icrom oles por en el nmero relativo de cada clase de molcula presente.
litro (pmol/L) y nanom oles por litro (nmol/L). El SI A las propiedades de presin osmtica, presin de vapor,
adopt el trm ino familiar m o larid ad como expresin de punto de congelacin y punto de ebullicin, se les deno
concentracin. mina propiedades coligativas. La presin de vapor es la pre
La m olalidad representa la cantidad de soluto por 1 kg sin a la que el disolvente lquido est en equilibrio con el
de disolvente. En ocasiones, se le confunde con la molari vapor de agua. El punto de congelacin es la temperatura a
dad; sin embargo, se distingue fcilmente de sta porque la que las presiones de vapor de las fases slida y lquida
la molalidad se expresa siempre en trminos de peso por son las mismas. El punto d e ebullicin es la temperatura
peso o moles por kilogramo y describe moles por 1 0 0 0 g a la que la presin de vapor del disolvente alcanza una
(1 kg) de disolvente. La expresin preferida para molali atmsfera.
dad es moles por kilogramo (mol/kg). La presin osm tica es la que permite al disolvente fluir
La n orm alidad es la menos probable de las cuatro expre por una membrana semipermeable para establecer el equi
siones de concentracin encontradas en los laboratorios librio entre compartimientos de distinta osmolalidad. La
clnicos, pero se usa con frecuencia en titulaciones qu presin osmtica de una disolucin diluida es proporcio
micas y clasificacin de reactivos qumicos. Se define nal a la concentracin de las molculas en disolucin. La
como el nmero de pesos equivalentes gramo por 1 L de expresin para la concentracin es el osmol. Un osmol
disolucin. Un p eso equivalente es igual al peso molecu de sustancia es igual a la molaridad multiplicada por el
lar en gramos de una sustancia dividido entre su valencia. nmero de partculas en disociacin. Cuando un soluto
La valencia es el nmero de unidades que se combinan o se disuelve en un disolvente, estas propiedades coliga
reemplazan 1 mol de iones hidrgeno para cidos, iones tivas cambian de manera predecible para cada osmol de
hidrxido para bases, y el nmero de electrones intercam sustancia presente; el punto de congelacin se reduce en
biados para reacciones de oxidorreduccin. Es el nmero -1 .8 6 C , el punto de ebullicin se eleva en 0.52C , la pre
de tomos o elementos que se combinan para un deter sin de vapor se reduce en 0.3 mmHg o torr, y la presin
minado compuesto; por tanto, el peso equivalente es el osmtica se incrementa en un factor de 1.7 X 104 mmHg
peso de combinacin en gramos de un material. La nor o torr. En el entorno clnico, el punto de congelacin y la
malidad siempre es igual o mayor que la molaridad de ese depresin de la presin de vapor se miden como una fun
compuesto. La normalidad se usaba antes para presentar cin de la osmolalidad.
8 PARTE I PRINCIPIOS BSICOS Y PRCTICA DE LA QUMICA CLNICA
[HA]
Conductividad - log [H+] = - log K a x - l o g (Ec. 1-5)
[A+]
La conductividad es una medida del paso de la electricidad
por una solucin. La calidad de la conductividad de una Por convencin, la p significa log negativo de; por
solucin depende principalmente del nmero de cargas tanto, -lo g [H+] se puede escribir como pH, y K como
respectivas de los iones presentes. Resistividad, el recpro pK La ecuacin ahora se convierte en
co de la conductividad, es una medida de la resistencia de [HA]
una sustancia al paso de la corriente elctrica. La aplica PH = pK a - log (Ec. 1-6)
cin principal de la resistividad en el laboratorio clnico [A+
es para evaluar la pureza del agua. La resistividad o resis La eliminacin del signo de menos antes del log de la
tencia se expresa como ohms, y la conductividad como cantidad [HA]/[A+] produce una ecuacin conocida como
ohms-1 o mho. de H enderson-H asselbalch, que matemticamente describe
las caractersticas de disociacin de cidos y bases dbiles
p H y disoluciones am ortiguadoras y el efecto en el pH:
Las disoluciones am ortiguadoras son cidos o bases dbi
pH = pK - l o g (Ec. 1-7)
les y sus sales relacionadas que, como resultado de sus F F a &[HA]
caractersticas de disociacin, reducen los cambios en
la concentracin de ion hidrgeno. La concentracin de Cuando la relacin entre [A+] y [HA] es 1, el pH es
iones hidrgeno se expresa como pH. Una p minscula igual al pK y la disolucin amortiguadora tiene un capaci
antes de ciertas letras o abreviaturas significa operacional- dad mxima de amortiguamiento. La constante de disocia
mente el logaritmo negativo de o el log inverso de esa cin Ka y, por tanto, el pKa siguen siendo iguales para una
sustancia. De acuerdo con esta convencin, el trmino pH determinada sustancia. Cualquier cambio de pH se debe
representa el log negativo o inverso de la concentracin slo a la relacin entre la concentracin de base/sal [A+] y
de iones hidrgeno. En trminos matemticos, el pH se la concentracin de cido dbil [HA].
expresa como La fuerza inica es otro aspecto importante de las diso
luciones amortiguadoras, en particular en las tcnicas de
pH = log(l/[H+]) separacin. La fu erz a inica es la concentracin o activi
pH = -lo g [EL] (Ec. 1-1) dad de iones en una disolucin o una disolucin amorti
guadora. Se define14 como sigue:
donde [EL] es igual a la concentracin de iones hidr
u = I = l/ 2 I C iZ i2, o,
geno en moles por litro.
La escala de pEI vara de 0 a 14, y es una forma conve Z [(C i)x (Z i)\ 2 \
(Ec. 1-8)
niente de expresar la concentracin de iones hidrgeno.
Una capacidad de las disoluciones amortiguadoras para
reducir cambios de pH se relaciona con las caractersticas donde Ci es la concentracin del ion, Zi es la carga del ion
de disociacin del cido o base dbil en presencia de su y 2 es la suma de la cantidad (Ci) X (Z i)2 para cada ion
sal respectiva. A diferencia de un cido o base fuerte, que presente. En mezclas de sustancias, se debe considerar el
se disocia casi por completo, la constante de disociacin grado de disociacin. El incremento de la fuerza inica
para una disolucin de cido o base dbil tiende a ser muy hace que crezca la nube inica que rodea a un compuesto
pequea, lo que significa que ocurre poca disociacin. y disminuya la tasa de migracin de partculas. El incre
La ionizacin del cido actico (CH3COOH), un cido mento de la solubilidad de algunas sales, jun to con cam
dbil, se puede ilustrar como sigue: bios de corriente, tambin puede promover eficazmente la
disociacin del compuesto en iones, lo que afecta tambin
[HA] [A"] + [H+] la separacin electrofortica.
[CH3COOH] [CH3C O O l + [H+ (Ec. 1-2)
M ATERIALES DEL LABORATORIO CLNICO
donde HA = cido dbil, A " = base conjugada y H+ =
Muchos materiales distintos se requieren en el laboratorio
iones hidrgeno.
mdico actual; sin embargo, varios artculos son comunes
Tome en cuenta que la constante de disociacin, Ka, de
en la mayor parte de las instalaciones, como termmetros,
un cido dbil se calcula con la siguiente ecuacin:
pipetas, matraces, vasos de precipitado, buretas, deseca
[A~] [H+ dores y material de filtracin. A continuacin se explica
Ka = (Ec. 1-3)
[HA] de manera breve la composicin y el uso general de estos
suministros.
CAPTULO 1 PRINCIPIOS BSICOS Y PRCTICA 9
Term m etros y tem p eratu ra15-16 muchos dispositivos. Las ventajas de un termistor sobre
La prctica predominante para medicin de temperatu los termmetros de lquido en vidrio ms tradicionales
ra emplea la escala Celsius (C); sin embargo, tambin se son el tamao y el tiempo de respuesta de milisegundos.
emplean las escalas Fahrenheit (F) y Kelvin (K). La designa Una desventaja puede ser el costo inicial, aunque el uso de
cin SI para la temperatura es la escala Kelvin. En el apndi una sonda termistora anexa a un medidor de volts y ohms
ce C, Conversiones bsicas del laboratorio clnico se presentan (VOM) puede resultar econmico. Igual que los term
las distintas frmulas de conversin entre cada escala. metros de lquido en vidrio, el termistor se puede calibrar
Todas las reacciones analticas ocurren a una temperatura contra un termmetro SRM o la celda de temperatura de
ptima. Algunos procedimientos de laboratorio, como las fusin de galio.18-19 Cuando el termistor se calibra contra
determinaciones de enzimas, requieren control preciso de la la celda de galio, ste se puede usar como una referencia
temperatura, mientras que otros funcionan bien en un inter para cualquier tipo de termmetro.
valo amplio de temperaturas. Las reacciones que dependen
de la temperatura emplean algn tipo de celda de enfriamien M aterial de vidrio y de plstico
to o calentamiento, bloque de calentamiento o enfriamiento, Hasta hace poco, los materiales de laboratorio (como pipe
o bao de agua o hielo para proporcionar el entorno correcto tas, matraces, vasos de precipitado y buretas) eran de algn
de temperatura. Las temperaturas del refrigerador de labora tipo de vidrio y se les denominaba, de manera correcta, m ate
torio suelen ser crticas y requieren verificacin peridica. riales de vidrio. A medida que se ha depurado el plstico y se
Los termmetros son una parte integral de un instrumento puso a disposicin de los fabricantes, ste se utiliza cada vez
o requieren que se les coloque en el dispositivo para man ms para elaborar utensilios de laboratorio. Antes de analizar
tenimiento de la temperatura. Los tres tipos principales de los materiales generales de laboratorio, se presenta un breve
termmetros descritos incluyen el de lquido en vidrio, el resumen de los tipos y usos del vidrio y el plstico vistos
termmetro electrnico o termistor y el termmetro digital; comnmente hoy da en los laboratorios. (Vanse apndice
sin embargo, tambin se emplean otros tipos de dispositi L, Caractersticas de tipos de vidrio; apndice M, Caracters
vos indicadores de temperatura. Sin importar el uso que se ticas de tipos de plstico, y apndice N, Resistencia qumica
les d, todos los dispositivos indicadores de temperatura se de tipos de plstico.) Sin importar el diseo, casi todos los
deben calibrar para constatar la precisin. suministros de laboratorio deben satisfacer ciertas toleran
Los termmetros de lquido en vidrio, en que se utiliza cias de exactitud. Los que satisfacen las especificaciones del
un lquido coloreado (rojo u otro material de color), estn NIST20-21 se clasifican como clase A. Los recipientes que con
reemplazando a los dispositivos ms tradicionales de mer tienen o transfieren lquido estn diseados para contener
curio en vidrio. En esencia el diseo es el mismo, con un (TC) o para entregar (TD) un volumen especfico. Como
bulbo en un extremo y un tallo graduado. Normalmente indica el nombre, la diferencia principal es que los disposi
se emplean para medir temperaturas entre -2 0 C y 400C. tivos TC no entregan el mismo volumen cuando el lquido
Los termmetros de inmersin parcial se usan para medir se transfiere a un recipiente, mientras que la designacin TD
temperaturas en unidades como bloques de calentamien significa que el dispositivo entregar esa cantidad.
to y baos de agua, y se deben sumergir a la altura apro El material de vidrio empleado en el laboratorio clni
piada, como indica la lnea continua grabada en el tallo co suele caer en una de las categoras siguientes: Kimax/
del termmetro. Los termmetros de inmersin total se Pyrex (borosilicato), Corex (alum inosilicato), con alto
emplean para aplicaciones de refrigeracin, y los de super contenido de silicio, Vycor (resistente al cido y las bases),
ficie llegan a necesitarse para comprobar temperaturas en actnico bajo (color mbar) o cristal con plomo (cal soda
superficies planas, como en una incubadora y un horno da) empleado para material desechable.22 Siempre que
de calentamiento. La inspeccin visual del termmetro de sea posible, el material de vidrio qumico clnico de uso
lquido en vidrio debe revelar una lnea continua de lqui rutinario debe ser de vidrio trmico de borosilicato o alu
do, libre de separacin o burbujas de gas. El intervalo de m inosilicato, y satisfacer las tolerancias clase A recomen
precisin para un termmetro que se emplea en laborato dadas por el NIST. El material de vidrio que no satisface las
rios clnicos se determina mediante la aplicacin especfi especificaciones tipo A podra tener el doble del intervalo
ca pero, en general, debe ser igual a 50% del intervalo de de tolerancia, a pesar de parecer idntico a una pieza de
temperatura deseado que requiere el procedimiento. material de vidrio tipo A. El fabricante es la m ejor fuente
Los termmetros de lquido en vidrio se deben calibrar de informacin acerca de los usos especficos, limitaciones
contra un termmetro certificado por el NIST, o que cum y especificaciones de exactitud para el material de vidrio.
pla con sus especificaciones, para aplicaciones de laborato El material de plstico est comenzando a reemplazar
rio crticas.17 El NIST tiene un termmetro SRM con varios al vidrio en el laboratorio. La alta resistencia nica a la
puntos de calibracin (0o, 25, 30 y 37C) para uso con corrosin y a la rotura, adems de su flexibilidad, han
termmetros de lquido en vidrio. El galio, otro material de hecho ms atractivo al material de plstico. Relativamen
referencia estndar, tiene un punto de fusin conocido, y te econm ico, permite que casi todos los artculos sean
tambin se puede usar para verificacin de termmetros. totalmente desechables despus de cada uso. Los princi
A medida que avanza la automatizacin y se miniatu- pales tipos de resinas que se emplean con frecuencia en el
riza, se ha incrementado la necesidad de contar con un laboratorio de qumica clnica son poliestireno, polietile-
termmetro electrnico exacto de fcil lectura (term istor), no, propileno, Tygon, Teflon, policarbonato y cloruro de
y en la actualidad se incorpora de manera rutinaria en polivinilo. De nuevo, cada fabricante es la m ejor fuente de
10 PARTE I PRINCIPIOS BSICOS Y PRCTICA DE LA QUMICA CLNICA
Serolgica/Mohr
Correcta Spectroline
Caulfield
FIGURA 1-4. Tipos de bulbos de pipeta.
Volumtrica/Ostwald-Folin
drenado. Este tipo de pipeta suele tener el mayor grado de plazam ien to de aire depende de un pistn para extraer la
exactitud y precisin, y se debe usar al diluir estndares, muestra mediante succin en una punta desechable que
calibradores o material de control de calidad. Las pipetas debe ser cambiada despus de cada uso; el pistn no entra
Pasteur no tienen marcas de calibracin y se emplean para en contacto con el lquido. Una pipeta de desplazam iento
transferir disoluciones o lquidos biolgicos sin considera positivo opera moviendo el pistn en la punta de la pipeta
cin de un volumen especfico. Estas pipetas no se deben o barril, de manera muy parecida a una jeringa hipodrmi-
emplear en tcnicas analticas cuantitativas. ca; no requiere una punta diferente para cada uso; debido a
La pipeta autom tica es la que se emplea de manera habi los remanentes, se podra requerir enjuague y secado entre
tual en el laboratorio qumico clnico actual. Las pipetas muestras. Los dosificadores y los diluidores/dispensadores
automticas y semiautomticas tienen muchas ventajas; son pipetas automticas que obtienen el lquido de un
entre otras, seguridad, estabilidad, facilidad de uso, mayor recipiente comn y lo distribuyen de manera repetida. Las
precisin, ahorro de tiempo y menor necesidad de limpie pipetas dosificadoras pueden ser de tipo tapa de botella,
za como resultado de que las porciones contaminadas de motorizadas, porttiles o estar unidas a un diluidor, que
la pipeta (como las puntas) suelen ser desechables. En la combina las funciones de muestreo y transferencia. En la
figura 1-6 se ilustran muchas pipetas automticas comu figura 1-7 se dan ejemplos de tipos diferentes de dispositi
nes. A una pipeta relacionada con un solo volumen se le vos de pipeteo automtico. Estas pipetas se deben usar de
denomina volumen fij o a los modelos capaces de selec acuerdo con las instrucciones de cada fabricante. Muchas
cionar volmenes diferentes se les denomina v ariables, pipetas automatizadas emplean un lavado entre muestras
sin embargo, slo se puede usar un volumen a la vez. El para eliminar problemas de residuos. Sin embargo, para
intervalo disponible de volmenes es de 1 ql a 1000 mi. El reducir la contaminacin por residuos con las pipetas
intervalo de volumen ms amplio visto en una sola pipeta manuales o semiautomticas, el secado cuidadoso de la
es de 0 a 1 mi. A una pipeta con una capacidad de pipeteo punta podra eliminar cualquier lquido adherido a la par
de menos de 1 mi se le considera una m icropipeta; una que te externa de la punta antes de transferir cualquier lquido.
transfiere ms de 1 mi, es una m acropipeta autom tica. Se debe tener cuidado para asegurar que no se sec el orifi
El trmino autom tica, como se emplea aqu, significa cio de la pipeta, porque se extraera muestra. Otra precau
que el mecanismo que extrae y transfiere el lquido es una cin al usar de forma manual las pipetas semiautomticas
parte integral de la pipeta. ste podra ser un dispositivo es quitar el tapn de manera lenta y continua.
automatizado que opera por s mismo, uno semiautom- Las puntas de pipeta desechables, de un solo uso, estn
tico o uno por completo manual. Hay tres tipos generales diseadas para usarse con pipetas de desplazamiento de
de pipetas automticas: de desplazamiento de aire, de des aire. El laboratorista debe asegurar que la punta de la pipe
plazamiento positivo y dosificadoras. Una pipeta de des ta est bien puesta en el extremo de la pipeta y que no
FIGURA 1-6. (A) Plpeteador de desplazamiento de aire, ultramicrodlgltal, volumen fijo, con eyector de punta.
(B) Pipeteador de desplazamiento de aire, volumen fijo. (C) Pipeteador de desplazamiento positivo, electrnico,
digital. (D) Pipeteador de jeringa.
14 PARTE I PRINCIPIOS BSICOS Y PRCTICA DE LA QUMICA CLNICA
tiene deformidad alguna. En particular, es probable que volumen de la pipeta. En otra tcnica fotomtrica utili
varen las puntas de plstico utilizadas en pipetas con zada para evaluar la exactitud de la pipeta se comparan
desplazamiento de aire. En una determinada pipeta se las absorbancias de diluciones de dicromato de potasio,
pueden usar diferentes marcas, pero no necesariamente u otro lquido coloreado con los espectros de absorbancia
funcionan de una manera idntica. Podra haber rebabas apropiados, por medio de material de vidrio volumtrico
que no siempre se detectan a simple vista. Un mtodo en clase A contra las diluciones equivalentes hechas con el
que se usa una disolucin 0.1% de rojo de fenol en agua dispositivo de pipeteo.
destilada sirve para comparar la capacidad de reproduc Estas tcnicas de calibracin consumen tiempo y, por
cin de distintas marcas de puntas para pipeta.23 Al usar tanto, son imprcticas para comprobaciones diarias. Se
este mtodo, la pipeta y el operador deben ser los mismos, recomienda realizar una comprobacin de las pipetas al
de modo que la variacin sea slo un resultado de los cam principio y despus tres a cuatro veces por ao, o segn dic
bios en las puntas de pipeta. Las puntas para pipetas de te la agencia que acredita al laboratorio. Muchas compaas
desplazamiento positivo estn hechas con columnas rectas ofrecen servicios de calibracin; la elegida debe satisfacer
de vidrio o plstico. Estas puntas deben ajustar bien para tambin los requisitos de acreditacin. Una comprobacin
evitar residuos, y se puedan usar de forma repetida sin ser diaria, rpida, para muchos dispositivos de pipeteo autom
cambiadas despus de cada uso. Como se mencion, estos tico de mayor volumen, utiliza matraces volumtricos. Por
dispositivos deben enjuagarse y secarse entre muestras ejemplo, un dispensador de botella que suele entregar 2.5
para reducir los residuos. mi de reactivo se podra comprobar mediante la transferen
Las pipetas clase A, al igual que todo el material de vidrio cia de cuatro alcuotas del reactivo en un matraz volum
clase A, no necesitan ser recalibradas en el laboratorio. Los trico de 10 mi clase A. El fondo del menisco debe coincidir
dispositivos de pipeteo automtico, adems de los mate con la lnea de calibracin del matraz volumtrico.
riales que no son clase A, requieren calibracin. Un mto
do gravimtrico (pg. 15) puede llevar a cabo esta tarea al B uretas
entregar y pesar una disolucin de densidad relativa conoci Una bureta tiene el aspecto de una pipeta graduada, larga,
da, como el agua. Se deben usar una balanza analtica recin con una llave en un extremo. El volumen total usual de
calibrada y por lo menos masas clase 2. Slo se debe usar una bureta vara de 25 a 100 mi de solucin, y se emplea
una pipeta si est dentro de 1.0% del valor esperado. para entregar un volumen particular de lquido durante
Aunque la validacin gravimtrica es el mtodo ms una titulacin (fig. 1-8).
deseable, la calibracin de la pipeta se puede llevar a cabo
tambin por medio de mtodos fotomtricos, en parti Je rin g a s
cular para dispositivos de pipeteo automticos. Cuando En ocasiones, las jeringas se utilizan para transferir vol
se usa un espectrofo tme tro, se obtiene el coeficiente de menes pequeos (menores de 500 pl) en el anlisis de
extincin molar de un compuesto, como el dicromato gases sanguneos o en tcnicas de separacin como cro
de potasio. Despus de tomar con la pipeta una alcuo matografa o electroforesis. Las jeringas son de vidrio y
ta del diluyente, el cambio de concentracin reflejar el tienen barriles finos. El mbolo est hecho por lo general
CAPTULO 1 PRINCIPIOS BSICOS Y PRCTICA 15
FIGURA 1-9. (A) Desecador de vidrio. (B) Desecador de vidrio con anillo de sellado seco (no se necesita grasa
para sellar la tapa).
CAPTULO 1 PRINCIPIOS BSICOS Y PRCTICA 17
Centrifugacin
La centrifugacin es un proceso en que la fuerza centrfuga
se usa para separar materia slida de una suspensin liqui
da. La centrifugadora lleva a cabo esta accin. sta consta
de una cabeza o rotor, portadores o campos (fig. 1-11) que
van unidos a una flecha vertical de un motor, y estn ence
rrados en una cubierta metlica. La centrifugadora tiene
siempre una tapa y un interruptor de encendido y apaga
do; sin embargo, muchos modelos incluyen un freno o un
tacmetro que indica la velocidad, y algunas centrifugado
ras estn refrigeradas. La fuerza centrfuga depende de tres
variables: masa, velocidad y radio. La velocidad se expresa cia se agitar y vibrar o har ms ruido del esperado. La
en revoluciones por m inuto (rp m ), y la fuerza ce n tr tapa de la centrifugadora debe permanecer cerrada hasta
fuga generada se expresa en trminos de la fuerza centrfuga que la mquina se haya detenido por completo, para evitar
relativa (FCR) o gravedades (g). La velocidad de la centri cualquier contaminacin con aerosol. Se recomienda revi
fugadora se relaciona con la FCR medante la siguiente sar de forma peridica el reloj automtico, las escobillas
ecuacin: (si existen) y la velocidad. Las escobillas, que son barras
de grafito fijas a un resorte, crean un contacto elctrico
F C R = 1.118 X 105 X r X (rpm )2 (Ec. 1-11) en el motor. Se debe consultar el manual de servicio del
fabricante para conocer detalles sobre el cambio de las
donde 1.118 X 10 3 es una constante, determinada a par escobillas y los requisitos de lubricacin. La velocidad de
tir de la velocidad angular, y r es el radio en centmetros, una centrifugadora se comprueba de manera fcil con un
medido desde el centro del eje de la centrifugadora hasta tacmetro o con luz estroboscpica. El orificio localizado
el fondo de la proteccin del tubo de ensayo. El valor de en el borde de muchas centrifugadoras est diseado para
FCR tambin se puede obtener de un nomograma similar verificar la velocidad con estos dispositivos pero tambin
al que se localiza en el apndice H, N om ogram a de fu erz a podra representar un biorriesgo de aerosol.
relativa centrfuga. La clasificacin de centrfugas se basa
en varios criterios, incluso el modelo de banco o piso,
refrigeracin, cabeza de rotor (fija, hematcrito, cubeta Filtracin
giratoria o angulada; fig. 1-11), o velocidad mxima (es La filtracin se usa en lugar de la centrifugacin para sepa
decir, ultracentrifugadora). Las centrifugadoras suelen racin de slidos o lquidos. Sin embargo, en el labora
usarse para separar suero de un cogulo de sangre cuando torio actual la filtracin con papel slo se usa de forma
se est procesando la sangre; para separar el sobrenadan ocasional y, por tanto, aqu slo se describen los aspectos
te de un precipitado durante una reaccin analtica; para bsicos. El material del filtro est hecho de papel, celu
separar dos lquidos inmiscibles, como el suero cargado de losa y sus derivados, fibras de polister, vidrio y diversos
lpidos; o para expulsar aire. materiales resinosos como columna. Por lo general, el
El cuidado de la centrifugadora incluye limpiar diario papel filtro se dobla de manera que permita ajustarse a un
derrames o restos, como sangre o vidrio, y asegurar que embudo. En el mtodo A, el papel filtro redondo se dobla
est balanceada de manera apropiada (fig. 1-12) y libre como un abanico (fig. 1-13A); en el mtodo B, se dobla en
de cualquier vibracin excesiva. Es de suma importancia cuartos (fig. 1-13B).
equilibrar la carga de la centrifugadora. Muchas de stas El papel filtro difiere en tamao de poro y se debe selec
que son nuevas disminuirn de forma automtica su velo cionar de acuerdo con las necesidades de separacin y la
cidad si la carga no est bien distribuida; pero con frecuen tasa de flujo relacionada para determinados lquidos. El
papel filtro no se debe usar al emplear cidos o bases fuer
tes. Cuando se coloca en el embudo, la solucin se drena
de manera lenta por el papel dentro del embudo y hacia un
recipiente receptor. Al lquido que pasa por el papel filtro
se le llama filtrado.
Dilisis
La dilisis es otro mtodo para separar macromolculas
de un disolvente o sustancia ms pequeas. Se volvi
popular cuando se utiliz junto con el sistema Technicon
Autoanalyzer en la dcada de 1970. En esencia, se colo Cuando se usa una tabla de logaritmos, el paso inicial
ca una disolucin en una bolsa o est contenida en un es determinar N, a partir de los dos primeros dgitos del
lado de una membrana semipermeable. Las molculas ms nmero. En este ejemplo, N es 14. Localice el nmero 14
grandes son retenidas dentro del saco o en un lado de la bajo la columna N en las tablas de logaritmos (cuadro 1-7).
membrana, mientras que las ms pequeas y disolventes El siguiente dgito en este ejemplo, 1.424, es 2. Contine a
se difunden. Este proceso es muy lento. El uso de colum lo largo del rengln y lea los nmeros debajo de 142, que,
nas que contienen un gel ha reemplazado la separacin en este caso, son 1523. La ltima parte de la mantisa se
manual por dilisis en la mayor parte de los procedimien obtiene de la seccin de partes proporcionales del cuadro
tos analticos. de logaritmos y se agrega a 1523. En este caso (1 .4 2 4 ),
el dgito restante es 4. El valor debajo de 4 en el cuadro
M ATEM TICAS Y CLCULOS es 12. La mantisa se convierte en 1523 + 12 = 1535. El
logaritmo de 1.425 X 103 es igual a 3 .1535. El carcter es
DE LABORATORIO
3, y la mantisa 1535. Debido a que slo hay cuatro cifras
Cifras significativas significativas en el nmero original, en el logaritmo slo se
deben escribir cuatro cifras significativas. El log entonces
Las cifras significativas son el nmero mnimo de dgitos es 3.154. Para nmeros menores que 1, el carcter tiene
necesarios para expresar un valor particular en notacin por lo comn una barra en la parte_superior. El nmero
cientfica sin prdida de exactitud. El nmero 814.2 tiene 2.12 X 10~2 tiene un log de 2.3263 o 2.33 para satisfacer el
cuatro cifras significativas porque en notacin cientfica se nmero de cifras significativas.
escribe como 8.142 X 102. El nmero 0.000641 tiene tres Para determinar el nmero original de un valor loga
cifras significativas, y la expresin en notacin cientfica rtmico, el proceso se hace a la inversa. Este proceso se
para este valor es 6.41 X 10-4. Los ceros slo represen denomina antilogaritm o. Con el ejemplo previo, determi
tan lugares decimales y no son necesarios para expresar el ne el antilogaritmo de 2.33. La caracterstica 2, que tiene
nmero en notacin cientfica. una barra encima, indica 1(L2. La mantisa, 0 .3 263, o 0.33,
puede dar el nmero de dos maneras. Se puede localizar
Logaritm os la mantisa en una tabla de logaritmos y determinar N. Un
segundo mtodo es usar una tabla de antilogaritmos. En
El logaritm o (log) base 10 de un nmero positivo N mayor
el cuadro 1-8 se ilustran ambos mtodos. El redondeo de
que cero es igual al exponente al que se debe elevar la
los nmeros no afecta al antilogaritmo. Casi todas las cal
base 10 para producir N. Por tanto, se puede decir que N
culadoras tienen funciones de logaritmo y antilogaritmo.
es igual a 10x, y el log de N es igual a x. El nmero N es el
Consulte las instrucciones del fabricante para familiarizar
antilogaritmo (antilog) de x.
se con el uso propio de estas funciones.
El logaritmo de un nmero, que se escribe en formato
decim al, incluye dos partes: el carcter o caracterstica y
la mantisa. El carcter es el nmero que se encuentra a la L ogaritm os negativos o inversos
izquierda del punto decimal en el log y se deriva del expo La caracterstica de un log puede ser positiva o negativa,
nente, y la mantisa es la parte del logaritmo a la derecha del pero la mantisa es siempre positiva. En ciertas circunstan
punto decimal y se deriva del nmero. Aunque se pueden cias, el laboratorista debe tratar con logaritmos inversos
tomar varios enfoques para determinar el log, un mtodo o negativos. Tal es el caso del pH o el pKa. Como se men
consiste en escribir el nmero en notacin cientfica. El cion antes, el pH de una solucin se define como menos
nmero 1424 expresado en notacin cientfica es 1.424 X el logaritmo de la concentracin de iones hidrgeno. La
103, con lo cual el carcter es 3. El carcter se puede deter siguiente frmula es conveniente para determinar el loga
minar tambin al sumar el nmero de cifras significativas ritmo negativo al trabajar con pH o pK :
y luego restar 1 de la suma. La mantisa se obtiene de una
tabla de logaritmos o con una calculadora que tenga una pH/pKa = x - log N (Ec. 1-12)
funcin log para el resto del nmero. En el caso de 1.424,
una calculadora dara una mantisa de 0.1535, y una tabla donde x = exponente negativo base diez expresado sin el
de log revelara lo que se muestra en el cuadro 1-7. Ciertas signo menos y N = porcin decimal de la expresin en
calculadoras con funcin log no requieren la conversin a notacin cientfica.
notacin cientfica.
B. Tabla de antilog
Partes proporcionales
N 0 1 2 3 4 5 m 7 8 9 12456789
|.32| 2089 2094 2099 2104 2109 2113 2118 2123 2128 2133 011223344
I.33 2138 2143
Por ejemplo, si la concentracin de iones hidrgeno de de muchas calculadoras cientficas disponibles, sin olvidar
una disolucin es 5.4 X 10'6, entonces x = 6 y N = 5.4. que los pasos especficos varan entre fabricantes.
Al sustituir esta informacin en la ecuacin 1-12, sta se
convierte en: Concentracin
Al comienzo de este captulo se encuentra una descripcin
pH = 6 - log 5.4 (Ec. 1-13)
detallada de cada trmino de concentracin (p. e j., mola
El logaritmo de N (5.4) es igual a 0.7324, o 0.73. El pH ridad, normalidad). El siguiente anlisis se centra en las
se convierte en expresiones matemticas necesarias para preparar reacti
vos de una concentracin definida.
pH = 6 - 0 . 7 3 = 5.27 (Ec. 1-14)
D isolucin en p o r ciento
La misma frmula se aplica para obtener la concentra Una disolucin en por ciento se determina de la misma
cin de iones hidrgeno de una solucin cuando slo se tie manera, sin importar si se usan unidades peso/peso, volu
ne el pH. Con un pH de 5.27, la ecuacin se convierte en men/volumen o peso/volumen. Por ciento significa par
5.27 = x - l o g N (Ec. 1-15) tes por 100, que se representa como porcentaje (%) y es
independiente del peso molecular de una sustancia.
En este caso, el trmino x siempre es el nmero entero
Ejemplo 1-1: peso/peso (p/p)
ms grande siguiente. En este ejemplo, es 6. Al sustituir x,
la ecuacin se vuelve Para preparar 100 g de una disolucin acuosa a 5% de cido clor
hdrico (con HC1 12 M), multiplique la cantidad total por el por
5 .27 = 6 - l o g N (Ec. 1-16)
ciento expresado en forma decimal. El clculo es
Multiplique las variables por - 1 :
5% = = 0.050 (Ec. 1-20)
100
(1)(5 .2 7 ) = ( -1 ) (6 ) - ( - l)( lo g N ) .
- 5 .2 7 = - 6 + log N (Ec. 1-17) Por tanto,
De esta ltima ecuacin se despeja la cantidad desco 0.050 X 100 = (5 g de HC1) (Ec. 1-21)
nocida sumando un 6 a ambos lados del signo igual, y la Otra forma de llegar a la respuesta es plantear una relacin
ecuacin se convierte en: de tal manera que
6 - 5 . 2 7 = log N (Ec. 1-18) 5 _ x
0.73 = log N 100 ~ 100
Debido a que 500 mi es igual a 0.5 L, la ecuacin final se B. Cul es la molaridad de esta solucin stock? Las uni
escribe al sustituir 0.5 L por 500 mi, lo que elimina la necesidad dades finales deseadas son moles por litro (mol/L). La
de incluir el factor de correccin 1000 ml/L en la ecuacin. molaridad de una disolucin es
0.44,g-HCI ^ l(moDHCl lOOCUnL
B. Cul es la normalidad de una disolucin 0.5 M de
H2S 0 4? Continuando con el mtodo anterior, la ecua jttP 3.5g-HCl
3.5,gHCl
cin final es = 12.05 mol/L o 12 M (Ec. 1-38)
0.5m crH 2SO4 x 98^H 2S 0 4 1 |)H2S 0 4
jnerl-H2S04 49,gH2S 0 4 C o n version es
Para convertir una unidad en otra, se aplica el mismo m to
= 1 Eq/L = 1 N (Ec. 1-32)
do de eliminar trminos semejantes. En algunos casos, un
Al cambiar molaridad por normalidad o viceversa, se puede laboratorio de qumica puede presentar el informe de un
aplicar la siguiente frmula de conversin: determinado analito con dos unidades de concentracin
distintas (como calcio). La unidad SI recomendada para el
M X V =N (Ec. 1-33) calcio es milimoles por litro. Las unidades ms tradiciona
donde V es la valencia del compuesto. Al usar esta frmula, el les y mejor conocidas son miligramos por decilitro (mg/
ejemplo 1-7.3 se convierte en di). De nuevo, es importante entender la relacin entre las
unidades dadas y las necesarias en la respuesta final.
0.5 M X 2 = 1 N (Ec. 1-34)
Ejemplo 1-10
Ejemplo 1-8
Convierta 8.2 mg/dl de calcio en milimoles por litro (mmol/L).
Cul es la molaridad de una solucin 2.5 N de HC1? Este pro El pmg del calcio es 40 g. As, si hay 40 g por mol, entonces se
blema se resuelve de dos maneras. Una consiste en usar el mto deduce que hay 40 mg por mmol. Las unidades deseadas son
do por pasos en que las unidades existentes se intercambian por mmol/L. La ecuacin se transforma en
las unidades necesarias. La ecuacin es
8.2jag"x LdJ"' ^ IOOOj b L^ l<nmqD_ 2.05 mmol
2.5 E( HC1 36M C 1(^)H C1
^eSC lOOjnh' 40jng"
X lJ3q" X 36M Ci (Ec. 1-39)
= 2.5 mol/L HC1 (Ec. 1-35)
Una vez ms, es posible emplear el mtodo sistemtico por pasos
El segundo mtodo es usar la frmula de conversin de nor
para eliminar unidades similares en este problema de conver
malidad a molaridad. La ecuacin ahora se convierte en
sin.
M X V = 2.5 N Un problema de conversin, o con ms precisin, un proble
V= 1 ma de dilucin encontrado con frecuencia se presenta cuando se
. . 2.5 N r (Ec. 1-36) requiere una concentracin menor o un volumen diferente que
M = -------- = 2.5 N
1 la sustancia stock disponible, pero los trminos de concentracin
Cuando la valencia de una sustancia es 1, la molaridad es son los mismos. Se emplea la frmula siguiente:
igual a la normalidad. Como se mencion antes, la normalidad
es igual o mayor que la molaridad. V4 X C1 = V2 X C2 (Ec. 1-40)
CAPITULO 1 PRINCIPIOS BSICOS Y PRCTICA 23
Esta frmula slo es til si las unidades de concentracin y volu Por ejemplo, una dilucin 1:2 o V, de suero tiene una relacin de
men entre las sustancias son las mismas y si se conocen tres de una parte de suero a una parte de diluyente. Sin embargo, diluir
las cuatro variables. una muestra 1:2 representara una parte de muestra a dos partes
de diluyente y un factor de dilucin de 1:3 o V3. En los proce
Ejemplo 1-11
dimientos, es importante entender por completo el significado
Qu volumen se requiere para preparar 500 mi de una solucin de estas expresiones. Las diluciones de muestra se deben hacer
0.1 M de una disolucin amortiguadora de tris a partir de una con agua tipo I o II, disolucin salina o diluyente especfico del
disolucin de disolucin amortiguadora de tris 2 M? mtodo con material de vidrio clase A. La muestra y el diluyente
se deben mezclar por completo antes de usar la mezcla. No se
V , X 2 M = 0 . 1 MX 500 mi
recomienda que las diluciones de muestra se hagan en tazas o
(V jld M) = (0.1)(500) = (Vt)(2) = 50 = Vx = 50/2 = 25 contenedores de muestra de volumen pequeo. Se puede usar
cualquier volumen total siempre que la fraccin se reduzca para
(Ec. 1-41) dar el factor de dilucin.
Se requieren 25 mi de la solucin 2 M para preparar 500 mi de una Ejemplo 1-13
disolucin 0.1 M. Este problema difiere de las otras conversiones en
que es en realidad una dilucin de una disolucin stock. A continua Si en el ejemplo anterior se requirieran 150 mi de la disolucin
cin se presenta una explicacin ms detallada de las diluciones. de sodio 100 meq/L, se debe mantener la relacin de dilucin de
stock a volumen total. Establezca una relacin entre el volumen
Diluciones total deseado y el factor de dilucin para determinar la cantidad
de stock necesaria. La ecuacin se convierte en
Una dilucin representa la relacin entre el material con
centrado o stock y el volumen final total de una disolucin, 1 _ x
y es el volumen o peso del concentrado ms el volumen 30 ~ 150
del diluyente, mientras las unidades de concentracin se x=5 (Ec. 1-43)
mantienen sin cambio. Esta relacin entre la disolucin
Tome nota de que 5/130 se reduce al factor de dilucin de V30. Para
concentrada o stock y el volumen total de la disolucin es
preparar esta disolucin, se aaden 5 mi del stock a 145 mi del
igual al fa c to r de dilucin. Debido a que una dilucin se hace
diluyente apropiado, as que la relacin de volumen de stock a
al aadir una sustancia ms concentrada a un diluyente, la
volumen de diluyente es igual a 5/143. Recuerde que el factor de
dilucin es siempre menos concentrada que la sustancia
dilucin incluye el volumen total de stock ms diluyente.
original. La relacin del factor de dilucin a la concentra
cin es inversa; as, el factor de dilucin crece a medida que
disminuye la concentracin. Para determ inar el factor D iluciones sim ples
de dilucin requerido, tome simplemente la cantidad nece Al hacer una dilucin simple, el laboratorista debe deci
saria y divida entre la concentracin del stock, de modo que dir el volumen total deseado y la cantidad de stock que se
quede en una forma de fraccin reducida. usar.
Cul es el factor de dilucin para preparar una disolucin de Una dilucin 1:10 (710) de suero se logra al usar cualquiera de
sodio de 100 meq/L a partir de la disolucin stock de 3000 meq/ml? los siguientes mtodos. Una relacin de 1:9, una parte de suero y
El factor de dilucin es nueve partes de diluyente (disolucin salina):
2 X 8.6 = 17.2 mg/dl (Ec. 1-44) Otro tipo de dilucin en serie combina varios factores de dilucin
que no son mltiplos entre s. En el ejemplo anterior, las dilucio
Nota: al determinar la concentracin del stock original o sin
nes 1:2, 1:4 y 1:8 se relacionan mediante un factor de 2. Consi
diluir a partir de la dilucin, divida entre el denominador del dere la situacin cuando se requieren factores de dilucin 1:10,
factor de dilucin.
1:20, 1:100 y 1:200. Existen varias formas de resolver este tipo de
problema de dilucin. Un mtodo es tratar las diluciones 1:10 y
D iluciones en serie 1:20 como un problema de dilucin en serie, las diluciones 1:20 y
Una dilucin en serie se define como varias diluciones pro 1:100 como una segunda dilucin en serie y las diluciones 1:100
gresivas que van de soluciones ms concentradas a menos y 1:200 como la ltima dilucin en serie. Otro mtodo consiste en
concentradas. Son extremadamente tiles cuando el volu considerar el factor de dilucin del concentrado que se requiere
men de concentrado o diluyente es escaso y se necesita para producir la dilucin final. En este ejemplo, la dilucin inicial
reducirlo al mnimo o se requieren varias diluciones, como es 1:10, con diluciones posteriores de 1:20, 1:100 y 1:200. La pri
en la determinacin de un ttulo. Si el volumen de suero mera dilucin se podra llevar a cabo aadiendo 1 mi de stock a 9
de un paciente disponible para el laboratorio es pequeo mi de diluyente. El volumen total de disolucin es 10 mi. As, se
(como en las muestras peditricas), se necesitar la dilu satisface el factor de dilucin inicial. Al hacer las diluciones res
cin en serie para asegurar que se dispone de una can tantes, se aaden 2 mi de diluyente a cada tubo de ensayo.
tidad suficiente de muestra. Al principio, la dilucin en Dilucin inicial/anterior X (x) = dilucin necesaria
serie se hace igual que una dilucin simple. Las diluciones Se despeja (x).
posteriores se harn de cada dilucin precedente. Cuando Al usar los anteriores factores de dilucin y despejar (x), la
se realiza una dilucin en serie, deben satisfacerse cier ecuacin de transforma en
tos criterios. stos varan con cada situacin, pero por lo 1:10 X (x) = 1:20,
general incluyen consideraciones como el volumen total
donde (x) = 2 (o 1 parte de stock a 1 parte de diluyente)
deseado, la cantidad de diluyente o concentrado disponi
ble, el factor de dilucin, la concentracin final necesaria 1:20 X (x) = 1:100,
y los materiales de apoyo requeridos. donde (x) = 5 (o 1 parte de stock a 4 partes de diluyente)
1:100 X (x) = 1:200,
Ejemplo 1-17 donde (x) = 2 (o 1 parte de stock a 1 parte de diluyente)
Una muestra de suero se diluir 1:2, 1:4 y, por ltimo, 1:8. Se (Ec. 1-47)
decidi de manera arbitraria que el volumen total de cada dilu
En la prctica, la dilucin 1:10 debe ser diluida por un factor
cin sea 1 mi. Tome en cuenta que el mnimo comn denomina
de 2 para obtener una dilucin posterior 1:20. Debido a que el
dor para estos factores de dilucin es 2. Una vez que se hace la
segundo tubo ya contiene 2 mi de diluyente, se deben agregar 2
primera dilucin (V2), una dilucin 1:2 (mnimo comn denomi
mi de la dilucin 1:10 (1 parte de stock a 1 parte de diluyente).
nador entre 2 y 4), producir
Para preparar de sta la dilucin 1:100, se requiere un factor de
V2 x v 2 = % dilucin 1:5 de la mezcla 1:20 (1 parte de stock a 4 partes de dilu
yente). Como este tubo ya contiene 2 mi, el volumen de diluyen-
(factor de dilucin inicial) (factor de dilucin siguiente)
= (factor de dilucin final) (Ec. 1-45)
1 mi
Al hacer una dilucin 1:2 de la primera, se satisface el segun a
do factor de dilucin de 1:4. Hacer una 1:2 de la dilucin 1:4 de mezcla, de mezcla
producir la siguiente dilucin (1:8). Para satisfacer el factor dilucin #2 #3
necesario para diluciones posteriores, es til resolver la siguiente primaria 14 1:8
ecuacin para (x):
Stock/concentracin precedente X (x) 1 mi de 1 mi
U mi de suero "I dilucin "1 1:4 de
= factor de dilucin final necesario (Ec. 1-46) J primaria J mezcla
1 mi de - 1 mi de -1 mi de
Para hacer estas diluciones, se etiquetan tres tubos de ensayo 1:2,
diluyente diluyente diluyente
1:4 y 1:8, respectivamente. Se aade 1 mi de diluyente a cada
tubo de ensayo. Para hacer la dilucin primaria de 1:2, se aade FIGURA 1-14. Dilucin en serle.
CAPTULO 1 PRINCIPIOS BSICOS Y PRCTICA 25
te se divide entre sus partes, que es 4; por tanto, se deben agregar lmites de linealidad suelen representar el intervalo decla
500 pl, o 0.500 mi, de stock. La dilucin 1:200 se prepara de la rable de un ensayo. Este trmino no se debe confundir con
misma manera con un factor de dilucin 1:2 (1 parte de stock a 1 los intervalos de referencia relacionados con la importan
parte de diluyeme) y agregando 2 mi de la dilucin 1:100 a los 2 cia clnica de una prueba. En los ensayos en que se mide la
mi del diluyeme que ya est en el tubo. absorbancia, por lo general se obtienen resultados de con
centracin mediante la grfica de la ley de Beer, conocida
A gua de hidratacin como una grfica o curva estndar. Esta grfica se constru
ye al graficar la absorbancia en funcin de la concentra
Algunos compuestos estn disponibles en forma hidrata cin de estndares conocidos (fig. 1-15). Debido a que en
da. Para obtener el peso correcto de estas sustancias, se la mayor parte de los ensayos fotomtricos la absorbancia
deben incluir las molculas de agua adheridas. inicial se fija en cero (0) con un reactivo blanco, los pun
Ejemplo 1-19 tos iniciales son 0,0. Es necesario identificar de manera
apropiada las grficas y especificar las unidades de concen
Cunto CuS04 5H20 se debe pesar para preparar 1 L de 0.5 M tracin. Al eje horizontal se le conoce como x, mientras
CuS04? Al calcular el pmg de esta sustancia, se debe considerar que el vertical es el y. Resulta irrelevante saber cul eje se
el peso de agua de modo que el pmg sea 250 g de agua en vez del asigna a cada variable (absorbancia o concentracin), pero
pmg del CuS04 solamente (160 g). Por tanto, es importante que los valores asignados estn distribuidos
250(g)CuSO4 5H20 O.5jn0L , de manera uniforme a lo largo del eje. Por convencin, en
el laboratorio clnico la concentracin se grfica normal
u x U ^ =I25s/L <Et' , 48,
mente en el eje x. En una grfica normal, slo se grafican el
Se cancelan los trminos similares para obtener el resultado de
estndar y las absorbancias relacionadas.
125 g/L. Un protocolo de reactivo suele designar el uso de una
Una vez establecida la grfica normal, slo se permite
forma anhidra de una sustancia qumica; sin embargo, con fre
ejecutar un estndar, o calibrador, siempre que el sistema
cuencia slo se dispone de una forma hidratada.
sea el mismo. El clculo de un punto o calibracin se refiere
Ejemplo 1-20 al clculo de la comparacin de la concentracin conocida
del estndar o calibrador y su absorbancia correspondien
Un procedimiento requiere 0.9 g de CuS04. Todo lo que se tiene
te con la absorbancia del valor desconocido, de acuerdo
es CuSO+ 5H20 . Qu peso de CuS04 5H20 se requerir?
con la siguiente relacin:
Calcule el porcentaje de CuS04 presente en CuSO+ 5H20 .
El porcentaje es
Concentracin del estndar (Cs)
160
= 0.64, o 64% (Ec. 1-49) Absorbancia del estndar (As)
250
Por tanto, 1 g de CuS04 5H20 contiene 0.64 g de CuS04; as que Concentracin de la muestra desconocida (Cu)
la ecuacin se transforma en: (Ec. 1-52)
Absorbancia de la muestra desconocida (Au)
0.9 g CuS04 necesarios
Al despejar la concentracin de muestra desconocida,
0.64 CuS04 en CuS04 5H20
la ecuacin se transforma en:
= 1.41 g de CuS04- 5H20 requeridos (Ec. 1-50) (A J(C J
C = (Ec. 1-53)
Cmo elaborar una grfica de la ley de B eer
La ley de Beer-Lam bert ( ley de B eer) establece la relacin Ejemplo 1-21
entre la concentracin y la absorbancia en muchas deter El ensayo de la protena biuret es muy estable y sigue la ley de
minaciones fotomtricas. Se expresa como Beer. En vez de construir una nueva grfica normal, se lleva a
A = be (Ec. 1-51) cabo el ensayo de un estndar (6 g/dl). La absorbancia del estn-
dar fue 0.400, y la absorbancia de la muestra desconocida fue ra que sea la unidad, el clculo de la actividad por medio
0.350. Determine el valor de la muestra desconocida en g/dl. de la ley de Beer requiere la inclusin de la dilucin y, en
funcin de la unidad para el informe, la posible conver
Cu = (0.350X 6^ 1) a
(Ec. 1-54) sin al trmino apropiado (p. ej., umol a mol, mi a L, min
(0.400)
a s y factores de temperatura). Entonces, la ley de Beer
Este mtodo de clculo es aceptable, siempre que todo en el para la UI se transforma en:
sistema, incluidos el instrumento y los reactivos, permanezcan
(AA)10~6(TV)
sin cambio. Si cambia cualquier cosa en el sistema, se debe cons C= (Ec. 1-57)
truir una nueva grfica estndar. La comprobacin de linealidad, (eX bX S V )
la calibracin, o ambas, se requiere si un sistema cambia o se donde TV = volumen total de la muestra ms reactivos en
vuelve inestable. Las agencias reguladoras suelen prescribir la mi y SV = volumen de muestra en mi. El factor 1CL6 con
condicin de verificacin.
vierte los moles en nmoles para la UI. Si se empleara otra
Clculos d e enzim as unidad de actividad, como el katal, se requerira la conver
Otra aplicacin de la ley de Beer es el clculo de resultados sin en litros y segundos, pero se excluye la conversin a
de ensayos con enzimas. Cuando se calculan resultados de y desde micromoles.
enzimas, la tasa de cam bio de absorban cia se monitorea de Ejemplo 1-22
forma continua durante la reaccin, para dar la diferencia
de absorbancia, conocida como absorban cia delta, o AA. En La AA por minuto para una reaccin enzimtica es 0.250. El pro
vez de usar una grfica estndar en un clculo de un punto, ducto medido tiene una capacidad de absorbancia molar de 12.2 X
se emplea la capacidad de absorbancia molar del producto. 103 a 425 nm a 30C. La incubacin y la temperatura de reaccin
Si se tiene la constante de capacidad de absorbancia y la se mantienen tambin a 30C. El ensayo requiere 1 mi de reactivo
absorbancia, en este caso AA, la ley de Beer se usa para cal y 0.050 mi de muestra. D los resultados de actividad enzimtica
en unidades internacionales. Al aplicar la ley de Beer y la informa
cular la concentracin de la enzima de manera directa, sin
cin de conversin necesaria, la ecuacin se convierte en:
la necesidad inicial de una grfica normal, como sigue:
que cese el flujo de sangre y se produzca la dilatacin de La centrifugacin de la muestra acelera el proceso de
las venas, lo que facilita su deteccin. El calibre de la aguja separacin del plasma y las clulas. Las muestras se deben
est inversamente relacionado con el tamao de la aguja; centrifugar durante unos 10 min a una FCR de 1 0 0 0 a
cuanto mayor sea el nmero, ms pequeo ser el orificio 2 0 0 0 g, pero se debe evitar la destruccin mecnica de
de la aguja y menor la longitud. Un equipo de infusin IV a glbulos rojos, que podra liberar hemoglobina (proceso
veces denominado mariposa por el aspecto del montaje, se denominado hem olisis).
usa siempre que las venas son frgiles, pequeas o difciles Las muestras de sangre arterial miden los gases san
de alcanzar o hallar. La mariposa est unida a una pieza guneos (presiones parciales de oxgeno y dixido de
de tubera, que luego se une a un cubo o tubo. Se deben carbono) y el pH. Se emplean jeringas en lugar de tubos
evitar los sitios adyacentes a la terapia IV; sin embargo, si al vaco como resultado de la presin en un vaso sangu
ya se han empleado ambos brazos en la terapia y sta no neo arterial. Las arterias radial, branquial y femoral son
se puede descontinuar por corto tiempo, se debe buscar los principales sitios arteriales. Las punciones arteriales
un sitio ab ajo del sitio IV La muestra inicial extrada (5 son las ms difciles de llevar a cabo, debido a la presin
mi) se debe desechar porque tiene ms probabilidades de arterial inherente, la dificultad para detener la hemorragia
estar contaminada con liquido IV y slo se deben usar las posterior y la formacin indeseable de un hematoma, que
muestras posteriores para propsitos analticos. impide el suministro de sangre a los tejidos circundantes.
Adems de la venipuncin, las muestras de sangre se Para ms informacin acerca de la puncin arterial, vase
pueden colectar por medio de una tcnica de puncin Procedures f o r the Handlng and Processing o f B lood Speci-
cutnea relacionada por lo general con el rea externa del mens (NCCLS, 1 9 9 9 ).29
fondo del pie (puncin del taln), la parte carnosa de la El metabolismo continuo podra ocurrir si el suero o el
mitad de la ltima falange del tercer o cuarto dedo (anu plasma permanece en contacto con las clulas por cierto
lar) (puncin digital), o posiblemente la porcin carnosa perodo. Los tubos al vaco podran incorporar material
del lbulo de la oreja. Se emplea una lanceta ahusada para plstico parecido al gel que sirve como una barrera entre las
perforar la piel y un tubo capilar (es decir, un tubo de clulas y el plasma o el suero, y sellar estos compartimien
vidrio estrecho y corto) para recolectar la muestra. tos durante la centrifugacin. Algunos geles interfieren
Se dispone de informacin adicional relacionada con con ciertos analitos, de manera notable los oligometales, y
la flebotoma y la puncin cutnea;28'29 adems, muchos frmacos como los antidepresivos tricclicos.
programas de capacitacin acreditados en flebotoma y Tambin es posible incorporar cualquier conservador
ciencia del laboratorio incluyen guas y procedimientos requerido para examen analtico en los tubos de recolec
formales para la recoleccin adecuada de muestras de san cin. Por lo general, ya sea el tubo de recoleccin (es decir,
gre. Por desgracia, es probable que otro personal del hos los tubos capilares) o el tapn se codifica con un color
pital que pudiera recolectar muestras (como enfermeras para facilitar la identificacin de la presencia de un anti
o mdicos) no tenga el beneficio de tal capacitacin. Esta coagulante o conservador (cuadro 1-9). Como no todas las
falta de entrenamiento podra dar como resultado la reco pruebas tienen los mismos requisitos, el laboratorista debe
leccin inadecuada y un incremento en los errores. constatar los requisitos de recoleccin especficos para
El examen analtico de sangre conlleva el uso de san cada prueba antes de la recoleccin de la muestra. Para evi
gre total, suero o plasma. La sangre total, como lo indica tar contaminacin, se comienza con los tubos de cultivo de
su nombre, utiliza tanto la porcin lquida de la sangre sangre (tapones amarillos o negros); seguidos de los tubos
llamada plasm a como los componentes celulares (eritro sin anticoagulantes o conservadores (tapn rojo); luego,
citos, leucocitos y plaquetas). Esto requiere recolectar la los tubos para estudio de coagulacin que contienen citra-
sangre en un recipiente que contiene un anticoagulante. to de sodio (tapn azul cielo); despus, los que contienen
Es necesario mezclar por completo la sangre despus de conservadores heparnicos (verdes); y, por ltimo, los que
la venipuncin para asegurar que el anticoagulante inhi contienen cido etilendiam inotetraactico (EDTA) (lavan
ba de manera adecuada los factores de coagulacin de la da) y fluoruro u oxalato de sodio (color gris).
sangre. A medida que se asienta sta, las clulas caen hacia La identificacin adecuada del paciente es el primer
el fondo y dejan un sobrenadante amarillo claro en la par paso en la recoleccin de muestras. No se puede dejar
te superior, denominado plasm a. Si un tubo no contiene de recalcar la importancia de usar el tubo de recoleccin
un anticoagulante, los factores de coagulacin de la san apropiado, evitar la aplicacin prolongada del torniquete,
gre estn activos para formar un cogulo. El fibringeno practicar la extraccin en el orden apropiado y rotular de
encapsula el cogulo. Al lquido restante se le llama suero modo adecuado los tubos. La aplicacin prolongada del
y no plasma. Casi todos los anlisis en el laboratorio qu torniquete causa estasis del flujo de sangre y un incremen
mico clnico se llevan a cabo en el suero. La diferencia to en la hemoconcentracin y que cualquier cosa se una
principal entre el plasma y el suero es que este ltimo no a las protenas o clulas. Pedir a los pacientes que abran y
contiene fibringeno (es decir, hay menos protena en el cierren su puo durante la flebotoma no sirve de nada, y
suero que en el plasma) y se libera algo de potasio de las puede causar un aumento en la concentracin de potasio
plaquetas (el potasio srico resulta ligeramente mayor en y, por tanto, se debe evitar. Se debe tomar en cuenta la
el suero que en el plasma). Es importante permitir que se contaminacin intravenosa si ocurre un gran aumento en
coagulen por completo las muestras de suero (cerca de 20 las sustancias que estn siendo infundidas, como glucosa,
m in) antes de ser centrifugadas. potasio, sodio y cloruro, con una disminucin de otros
28 PARTE I PRINCIPIOS BSICOS Y PRCTICA DE LA QUMICA CLNICA
analitos como urea y creatinina. Adems, se debe emplear merular, que compara la produccin de creatinina en la
el antisptico apropiado. Por ejemplo, las torundas de orina con la del suero en un intervalo y un volumen de
alcohol isoproplico se usan para limpiar y desinfectar orina especificados (por lo general con correccin de rea
el sitio de recoleccin; sin embargo, no es el antisptico superficial). La frmula general es:
apropiado para desinfectar el sitio cuando se extraen con
UV/P (Ec. 1-59)
centraciones de alcohol sanguneo.
La sangre no es la nica muestra analizada en el labo donde U representa el valor de creatinina de orina en mg/dl;
ratorio de qumica clnica. La orina es el siguiente lquido y el volumen de orina por unidad de tiempo expresado en
ms comn para determinacin. Casi todos los anlisis ml/min, y P el valor de creatinina en plasma o suero en mg/
cuantitativos de orina requieren una muestra programada di. Con esta frmula, el valor de aclaramiento de creatinina
(por lo comn 24 h); tal vez sea difcil obtener una mues se expresa en ml/min. (Vase captulo 24, Funcin renal.)
tra completa (toda la orina se debe recolectar en el tiempo Otros lquidos corporales analizados en el laboratorio
especificado) porque muchas muestras programadas son de qumica clnica son el lquido cefalorraqu deo (LCR),
colectadas por el paciente en una situacin ambulatoria. los lquidos para paracentesis (pleural, pericrdico y peri-
El anlisis de creatinina se emplea para evaluar la integri toneal) y los amniticos. En estas muestras, se deben
dad de la orina de 24 h porque la produccin de creatinina observar el color y las caractersticas del lquido antes
est relativamente libre de interferencia y es estable, con de la centrifugacin. En ese momento, un laboratorista
poco cambio en la produccin entre individuos. Un adul debe comprobar tambin que la muestra est designada
to excreta en promedio 1 a 2 g de creatinina por 24 h. El slo para anlisis qumico clnico, porque varios departa
volumen de orina difiere ampliamente entre individuos; mentos (es decir, hematologa o microbiologa) podran
sin embargo, un recipiente de 4 L es adecuado (la produc compartir una sola muestra de lquido y la centrifugacin
cin promedio es de alrededor de 2 L). Se debe observar podra invalidar ciertas pruebas en esas reas.
que este anlisis difiere de la prueba de aclaramiento de El lquido cefalorraqudeo es un ultrafiltrado del plas
creatinina empleado para evaluar la tasa de filtracin glo- ma y suele reflejar los valores vistos en el plasma. Para el
CAPTULO 1 PRINCIPIOS BSICOS Y PRCTICA 29
anlisis de glucosa y protena (protenas totales y espe temperatura). Es posible congelar las muestras a -2 0 C y
cficas), se recomienda que una muestra de sangre sea almacenarlas durante periodos ms largos sin efectos per
analizada al mismo tiempo que esos analitos en el LCR. judiciales en los resultados. Se deben evitar los ciclos repe
Esto ayudar a determinar la utilidad clnica de los valores tidos de congelamiento y descongelamiento, como los que
obtenidos en la muestra de LCR. Esto tambin es cierto ocurren en los denominados congeladores sin escarcha.
para los ensayos con deshidrogenasa de lactato y protena
requeridos en lquidos de paracentesis. Todas las muestras Variables de la m uestra
de lquido se deben manejar de inmediato sin retraso entre
adquisicin de la muestra, transporte y anlisis. Las variables de la muestra incluyen consideraciones fisio
El lquido amnitico se emplea para evaluar madurez lgicas, preparacin adecuada del paciente y problemas en
pulmonar del feto (relacin L/S), enfermedades congni- la recoleccin, transporte, procesamiento y almacenaje.
tas, enfermedades hemolticas, defectos genticos y edad Aunque los laboratoristas deben incluir mecanismos para
gestacional. Los laboratoristas deben comprobar el mane reducir el efecto de estas variables en el ensayo y docu
jo especfico de este lquido con el responsable del proce mentar cada incidente preanaltico, por lo general resulta
dimiento de prueba. frustrante tratar de controlar las variables que dependen
sobre todo de individuos fuera del laboratorio. La mejor
manera de proceder consiste en evaluar de manera crti
Procesam iento de la prueba
ca o predecir las reas o los vnculos dbiles, identificar
Cuando las muestras llegan al laboratorio, deben procesar los posibles problemas e instaurar un plan de accin que
se. En el laboratorio qumico clnico, esto significa hacer contenga polticas, procedimientos o controles en el viaje
corresponder de manera correcta el tubo de recoleccin de de la muestra hasta llegar al laboratorista que lleva a cabo
sangre con la demanda apropiada de analito y las etiquetas la prueba. La buena comunicacin con todo el personal
de identificacin del paciente. Se trata de un rea en parti ayuda a asegurar que siempre que existan los planes se
cular sensible al error preanaltico. Las etiquetas de cdi satisfagan las necesidades del laboratorio y, en ltima ins
go de barras en tubos de muestra primarios son un medio tancia, del paciente y el mdico. Casi todas las agencias
popular para detectar errores y reducir al mnimo los que de acreditacin requieren que los laboratorios consideren
resulten crticos en este punto del procesamiento. En algu todos los aspectos de variacin preanaltica como parte
nas instalaciones, las muestras se numeran o introducen de sus planes de aseguramiento de la calidad, incluidas la
en listas de trabajo o en un segundo sistema de identifica resolucin de problemas y la documentacin.
cin que resulta til durante la fase analtica. El laborato- La variacin fisiolgica se refiere a cambios que ocurren
rista debe constatar tambin si la muestra es aceptable para dentro del cuerpo, como cambios cclicos (variacin diurna
procesamiento posterior. Los criterios empleados depen o circadiana) o los que resultan de ejercicio, dieta, estrs,
den de la prueba en cuestin, pero suelen incluir conside sexo, edad, condiciones mdicas (fiebre, asma, obesidad),
raciones de volumen (es decir, existe volumen suficiente frmacos o postura (cuadro 1-10). Casi todas las muestras
para los requisitos del examen?); el uso de anticoagulan se toman de pacientes en ayunas (por lo general durante un
tes o conservadores apropiados; que el tiempo se indique perodo nocturno de 8 h). Sin embargo, como nocturno y
con claridad y sea apropiado para el examen programado, ayuno son trminos relativos, se deben determinar el tiem
y que la muestra est intacta y se haya transportado de po y lo que se consumi durante ese perodo antes de obte
manera adecuada (p. ej., que se haya enfriado o est en ner la muestra para las pruebas que resultan afectadas por
hielo, y que se encuentre dentro de un perodo razonable, la dieta o el ayuno. La preparacin del paciente para mues
protegida de la luz, tapada de modo apropiado). A menos tras programadas o que requieren dietas especficas u otras
que se est llevando a cabo un anlisis de sangre completo, instrucciones deben estar bien escritas y ser explicadas de
la muestra se centrifuga como se describi antes, y el suero manera verbal a los pacientes. Los pacientes ancianos sue
o plasma deben separarse de las clulas. len malinterpretar o se preocupan demasiado por las ins
Una vez procesada, el laboratorista debe observar la pre trucciones que reciben del personal mdico. Un nmero
sencia de cualquier caracterstica srica o plasmtica, como telefnico de informacin del laboratorio incluido en estas
hemolisis e ictericia (mayor concentracin de pigmento de indicaciones impresas puede servir como una referencia
bilirrubina) o la presencia de turbidez relacionada por lo excelente para la preparacin adecuada del paciente.
general con lipemia (incremento de lpidos). Las mues Los frmacos pueden afectar a varios analitos.30 Es
tras se deben analizar en un lapso de 4 h; para reducir al importante confirmar los medicamentos, si existe alguno,
mnimo los efectos de evaporacin, las muestras se deben que est tomando el paciente y que pudieran interferir con
tapar de manera apropiada y mantener alejadas de reas de la prueba. Por desgracia, muchos laboratoristas no tienen
flujo rpido de aire, luz y calor. Si el ensayo se va a reali el tiempo o el acceso a esta informacin, y el inters en este
zar despus de ese tiempo, las muestras se almacenan de tipo de interferencia slo surge cuando el mdico cuestiona
modo adecuado. En esencia, esto significa refrigeracin a un resultado. Algunas influencias encontradas con frecuen
4C durante 8 h. Muchos analitos son estables a esta tem cia son el hbito de fumar, que causa un incremento en la
peratura, con la excepcin de la fosfatasa alcalina (se incre glucosa como resultado de la accin de la nicotina; hormo
menta) y la deshidrogenasa de lactato (disminuye como na de crecimiento; cortisol; colesterol; triglicridos y urea.
resultado de las fracciones cuatro y cinco inestables con la Cantidades altas o consumo crnico de alcohol causan
30 PARTE I PRINCIPIOS BSICOS Y PRCTICA DE LA QUMICA CLNICA
C U A D R O 1-10. FA C T O R E S Q U E A F E C T A N A C O N S T IT U Y E N T E S S R IC O S C O M U N E S
APLICACIN POSTURA
PROLON GADA SUPINA A VARIACIN
CO N STITUYEN TE DE TO RNIQUETE H EM OLISIS ERECTA DIURNA EDTA COM IDAS OTRAS
Amoniaco t t f Tabaquismo;
f con el ejercicio
TP/albmina t T (Alb i*) t Lipemia
Bilirrubina 1 Luz
Hierro t t / t Menstruacin
Glucosa / t Cafena, fumar
Fosfato t i
Electrlitos
Calcio t 1 t (ionizado) Los cambios marcados en la
albmina y el pH deben
tomarse en cuenta en la
evaluacin
Na 1 (grave)
K 1 t t f con la abertura o cierre de la
mano antes de la recoleccin
Cloruro 1
Magnesio t 1 Lipemia*
Enzimas
ALT t t t con el ejercicio intenso
AST t t f con el ejercicio intenso
Amilasa i Suero y slo plasma
heparinizado
CK t (moderada)* Luz y sensible al pH, mantenga
cubierto para reducir la prdida
de C 0 2 en la oscuridad
LD t Fracciones lbiles con el fro
ALP t T 1
ACP T t Lipemia; pH estabilizado a 5.4
para almacenamiento adecuado
Lpidos
Colesterol A*
t t
Triglicrido **
t
Hormonas
Prolactina / t (protena) Estrs, ambulacin,
ejercicio = f
Insulina t
ACTH / Se adhiere al vidrio;
use poliestireno
Catecolaminas t / t Estrs; f con la intoxicacin,
tabaco
Cortisol / Cafena
Gastrina t
GH / t t con el ejercicio
PTH / La afectan las concentraciones
de Ca; vida media corta
CAPTULO 1 PRINCIPIOS BSICOS Y PRCTICA 31
CUADRO 1-10. FACTORES QUE AFECTAN A CO N STITU YEN TES SR IC O S CO M UN ES ( CO NTIN UACI N }
APLICACIN POSTURA
PROLON G ADA D E SUPINA A VARIACIN
CO N STITUYEN TE TO RN IQU ETE HEM OLISIS ERECTA DIURNA EDTA CO M IDAS O TRAS
hipoglucemia, mayor cantidad de triglicridos e incremen debe documentar el recibo de la muestra, su condicin al
to en la enzima y-glutamiltransferasa y otras pruebas de momento de recibirla, y la fecha y hora en que se recibi.
funcin heptica. Las inyecciones intramusculares incre En algunos casos, un testigo verifica el proceso completo
mentan la enzima creatina cinasa y la fraccin musculoes- y firma tambin a medida que la muestra sigue su curso.
queltica de lactato deshidrogenasa. Los opiceos, como Cualquier prueba analtica se podra usar como parte del
morfina o meperidina, causan incrementos en las enzimas testimonio legal; por tanto, el laboratorista debe dar a cada
hepticas y pancreticas, y los anticonceptivos orales pue muestra, incluida la que carece de documentacin, la mis
den afectar muchos resultados analticos. Muchos frma ma atencin que recibe una muestra forense.
cos afectan las pruebas de funcin heptica. Los diurticos
causan disminucin de potasio e hiponatremia. Los medi RESUMEN
camentos tipo tiazida causan hiperglucemia y azoemia pre-
rrenal secundaria a la reduccin del volumen sanguneo. El objetivo principal de cualquier laboratorio de qumica
Las variaciones posteriores a la recoleccin se relacionan clnica es realizar de manera correcta los procedimientos
con los factores descritos en procesamiento de la muestra. analticos que producen informacin exacta y precisa para
Los errores administrativos son los que se encuentran con ayudar en el diagnstico del paciente. Para lograr resulta
ms frecuencia, seguidos de la separacin inadecuada de dos exactos y confiables que reflejan el estado fisiolgico
clulas del suero, almacenaje inadecuado y recoleccin. del paciente, el laboratorista clnico debe estar familiariza
do con el uso de suministros y equipo, con la nocin fun
damental de los conceptos crticos para el ensayo qumico
Cadena de custodia
clnico. En este capitulo se proporciona la informacin
Cuando las pruebas de laboratorio tienen relacin proba necesaria para la prctica importante de la qumica clni
ble con un crimen o accidente, adquiere una naturaleza ca, incluidos unidades de medicin, temperatura, reactivos
forense. En estos casos, se requiere la identificacin docu (sustancias qumicas, estndares, disoluciones, especifica
mentada de la muestra en cada fase del proceso. Cada insta ciones para el agua), materiales de laboratorio (de vidrio y
lacin tiene sus propias formas y protocolos; sin embargo, plstico, pipetas, buretas, balanzas y desecantes), tcnicas
el paciente y, por lo general, un testigo, deben identifi de separacin, recoleccin de muestras, transporte y pro
car la muestra. sta debe tener un sello inviolable. Cual cesamiento, adems de matemticas y clculos de labora
quier individuo que haya tenido contacto con la muestra torio.
P R E G U N T A S DE R E P A S O
1. Determine cada uno de los siguientes constituyentes 2. Determine los valores de concentracin de cada una
de una disolucin que contiene 100 g de NaCl elabo de las siguientes designaciones para una disolucin
rada con 500 mi de agua destilada. que contiene 10 mg de CaCl2 y 100 mi de agua desti
a) Molaridad. lada.
b) Normalidad. a) mg/dl.
c) Por ciento (p/v). b ) Molaridad.
d) Factor de dilucin. c) Normalidad.
32 PARTE I PRINCIPIOS BSICOS Y PRCTICA DE LA QUMICA CLNICA
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Chem 1977;23:733.
Segundad y regulaciones
en el laboratorio
Tolmie E. Wachter
C O N T E N I D O D E L C A P T U L O
O B J E T I V O S
Al terminar este captulo, el laboratorista clnico Identificar las clases de fuegos y el tipo de extinto
podr: res que se emplea con cada uno.
Describir la sensibilizacin en cuanto a la seguri Describir los pasos empleados como medidas de
dad para el personal del laboratorio clnico. precaucin al trabajar con equipo elctrico, mate
Enumerar las responsabilidades del patrn y el riales criognicos y gases comprimidos, y al evitar
empleado en cuanto a proveer un lugar de trabajo riesgos mecnicos relacionados con el equipo de
seguro. laboratorio.
Identificar los riesgos relacionados con el mane Seleccionar ios medios correctos para la eliminacin
jo de sustancias qumicas, muestras biolgicas y de desechos generados en el laboratorio clnico.
materiales radiolgicos. Describir los pasos requeridos en la documenta
Elegir el equipo de proteccin personal apropiado cin de un accidente en el lugar de trabajo.
al trabajar en el laboratorio clnico.
34
CAPTULO 2 SEGURIDAD Y REGULACIONES EN EL LABORATORIO 35
T R M I N O S C L A V E ___________________________________________
El Congreso de Estados Unidos decret en 1970 la ley pbli Responsabilidad sobre la seguridad
ca 91-596, mejor conocida como Ley de Seguridad y Salud
El patrn y el empleado comparten responsabilidad en
Ocupacional (OSHA). El objetivo de esta regulacin federal
cuanto a la seguridad. El patrn tiene la ltima responsabi
fue proporcionar a todos los empleados (incluso el perso
lidad en relacin con la seguridad y delega autoridad a los
nal del laboratorio clnico) un ambiente de trabajo segu
supervisores para operaciones seguras. La administracin
ro. Bajo esta legislacin, la Administracin de Seguridad y
en el laboratorio debe empezar con una poltica de seguri
Salud Ocupacional est autorizada a conducir inspecciones
dad escrita. Los supervisores de laboratorio, que reflejarn
en las instalaciones para determinar si un patrn cumple
las actitudes de la administracin hacia la seguridad, son
con los estndares obligatorios. La seguridad ya no es slo
miembros esenciales del programa de seguridad.
una obligacin moral, sino tambin una ley federal.
R esponsabilidades del p a tr n
O tras reglas y normas
Establecer mtodos de trabajo de laboratorio y polticas
Hay otras reglas federales relacionadas con la seguridad en de seguridad.
el laboratorio, como la Ley de Agua Limpia, la Ley de Recu Proporcionar supervisin y gua a los empleados.
peracin y Conservacin de Recursos y la Ley de Control Ofrecer informacin segura, capacitacin, equipo de pro
de Sustancias Txicas. Adems, se precisa que los laborato teccin personal y supervisin mdica a los empleados.
rios clnicos cumplan con las leyes aplicables locales y esta Proporcionar y mantener el equipo y las instalacio
tales, como cdigos contra incendios y de construccin. nes del laboratorio que sean adecuadas para las tareas
Los estndares de la OSHA que regulan la seguridad en el requeridas.
36 PARTE I PRINCIPIOS BSICOS Y PRCTICA DE LA QUMICA CLNICA
El empleado tambin tiene una responsabilidad con su extintores de fuego, y probar de forma peridica e inspec
propia seguridad y la de sus compaeros. La conducta del cionar el equipo para operacin adecuada. Se recomien
empleado en el laboratorio es un factor vital para la conse da que las regaderas de seguridad descarguen 115 a 190
cucin de un lugar de trabajo sin accidentes o lesiones. L/min de agua a 20 a 50 psi. Otros artculos que deben
estar disponibles para el personal son mantas ignfugas,
R esponsabilidades del em pleado juegos de accesorios contra derrames y material de prime
Conocer y cumplir con los mtodos de seguridad esta ros auxilios.
blecidos para el trabajo en el laboratorio.
Tener una actitud positiva hacia los supervisores, los
compaeros, las instalaciones y la capacitacin en rela
Cam panas
cin con la seguridad. C am panas d e extra cci n
Notificar de inmediato a su supervisor las condiciones Las campanas de extraccin son necesarias para expulsar
o prcticas inseguras y asegurar que se corrijan. humos nocivos y peligrosos de reactivos qumicos. stas
Participar en la conduccin de prcticas de trabajo se deben revisar en busca de obstrucciones. Un trozo de
seguras y el uso de equipo de proteccin personal. papel suave colocado en la abertura de la campana indi
car la direccin del flujo de aire. Cuando la campana
Sealizacin y etiquetado est en operacin el marco mvil no debe estar abierto
por completo. Las sustancias qumicas almacenadas en las
Las seales para identificar peligros son crticas, no slo
campanas no deben bloquear el flujo de aire. De mane
para alertar al personal de laboratorio acerca de riesgos
ra peridica, se debe evaluar la ventilacin midiendo la
potenciales, sino para riesgos especficos que surgen debi
velocidad frontal con un medidor de velocidad calibrado.
do a emergencias como fuego o explosin. La N ational
La velocidad en el frente de la campana (con el marco
Fir Protection Association (NFPA) desarroll un sistema
mvil en posicin de operacin normal) debe ser de 30
estndar de identificacin de riesgos (smbolo diferencia
a 3 7 m/min. La prueba con humo se recomienda tambin
do con colores, con forma de diamante), que han adoptado
para localizar espacios muertos o turbulentos en el lugar
muchos laboratorios clnicos. De un vistazo, el personal de
de trabajo. El moni toreo adicional debe ser de acuerdo con
emergencia puede evaluar los riesgos para la salud (cua
el plan de higiene qumico de la instalacin.
drante azul), con sustancias inflamables (cuadrante rojo),
de reactividad y estabilidad (cuadrante amarillo), y otra
informacin especial (cuadrante blanco). Adems, cada C am panas d e bioseguridad
cuadrante muestra la gravedad, que va de cero para poca Las campanas de bioseguridad eliminan partculas que
a 4 para mucha, de los riesgos dentro del rea provista de podran ser dainas para el empleado que trabaja con
avisos. (En la figura 2-1 se observa el smbolo de cdigo muestras biolgicas infecciosas. Los centros para el con
de riesgo NFPA.) trol de enfermedades (CDC) y prevencin y los institutos
Los fabricantes de sustancias qumicas para laboratorio nacionales de salud han descrito cuatro niveles de biose
tambin proporcionan informacin de precaucin a los guridad, que constan de combinaciones de prcticas y tc
usuarios por medio de etiquetas. La informacin indicada nicas de laboratorio, equipo de seguridad e instalaciones
en stas incluye comentarios acerca del riesgo, medidas de laboratorio. El nivel de bioseguridad de un laboratorio
de precaucin, clase de riesgo especfico, instrucciones de se basa en las operaciones efectuadas, las rutas de trans
primeros auxilios para contacto interno o externo, cdigo m isin de agentes infecciosos y la funcin o actividad del
d almacenamiento, cdigo de seguridad, y ropa y equi laboratorio. En consecuencia, las campanas de bioseguri
po de proteccin personal necesarios. Esta informacin dad se disean para ofrecer varios niveles de proteccin,
es adicional a las especificaciones sobre el anlisis de lote dependiendo del nivel de seguridad del laboratorio espe
real de los constituyentes qumicos y notas de otros pro cfico (cuadro 2-1).
ductos (fig. 2-1). Los reactivos y soluciones preparados
internamente deben etiquetarse de manera estndar con Equipo de alm acenam iento qumico
identidad qumica, concentracin, advertencia de riesgo,
manejo especial, condiciones de almacenaje, fecha de ela Existe equipo de seguridad para el almacenamiento y
boracin, fecha de expiracin (si es aplicable) e iniciales manejo de sustancias qumicas y gases comprimidos. Los
del preparador. soportes de seguridad se deben usar siempre para trans
portar botellas de 500 mi de cidos, lcalis u otros disol
ventes, y las latas de seguridad aprobadas se deben usar
EQUIPO DE SEGURIDAD
para almacenar, transferir o eliminar sustancias inflama
Se ha desarrollado equipo de seguridad especficamente bles en volmenes mayores que 1 L. Los gabinetes de segu
para uso en el laboratorio clnico. La ley exige al patrn ridad se requieren para almacenar lquidos inflamables, y
haber designado equipo de seguridad disponible, pero slo se deben usar refrigeradores a prueba de explosin
tambin es responsabilidad del empleado cumplir con las diseados en especial para los materiales inflamables.
reglas de seguridad y usar el equipo. En cada banco slo debe haber la cantidad de sustancia
Se requiere que todos los laboratorios cuenten con qumica necesaria para el da. Los soportes o abrazaderas
regaderas de seguridad, estaciones de lavado de ojos y para cilindros de gas se deben usar todo el tiempo, y los
CAPTULO 2 SEGURIDAD Y REGULACIONES EN EL LABORATORIO 37
Made in USA
CAUSE BLIHDNESS IF SWALLGWEi) CANNGT BE MADE
NON-POISONOUS HARMFUL IF INHALED CAUSES
RRITATION NON-PHGTOCHEMICALLY REACTIVE
Keep away from heat, sparks and fame. Keep container tightly closed and upright to
prevent leakage. Avoid breathing vapor or spray mist. Avoid contad with eyes, skin and
Flash Polnt: 11C (52F Closed Cup) clothing. Use only with adequate ventilation. Wash thoroughty after handling. In case of
fire, use water spray, alcohol foam, dry Chemical o rC 0 2. In case of spiliage, absorb and
Mximum Limits and Specifications L o tN o . KEAM flush with large voluntes of water immediately.
Methyl Alcohol: 99.8% Minimum by volume FIR ST A ID : Incase o f skin contact, flush with plenty of water; ior eyes,
flush with
Residue after Evaporation: 0.001% Mximum plenty of water for 15 minutes and get medical attention. If sw ailow ed, f conscious,
induce vomiting by giving two glasses of water and sticking finger down throat. Have
Water: 0.10% Mximum patient lie down and keep warm. Cover eyes to exelude light. Never give anyfhing by
CAS - (67-56-1); mouth to an unconscious person. ff inhaled, remove to fresh air. if necessary, give
oxygen or appiy artificial respirafion.
N O T E : It is unlawful to use this fluid in any food or drink or in any drug or cosmetic for
internal or external use. Not for intemal or exfemal use on man o r animal.
FIGURA 2-1. Etiqueta muestra de producto qumico: (1) expresin de peligro, (2) clase de riesgo, (3) precauciones de seguridad,
(4) cdigo de riesgo de la National Fire Protection Agency (NFPA), (5) tipo de extintor de incendios, (6) instrucciones de seguridad,
(7) peso frmula y (8) nmero de lote.
El color del diamante en la etiqueta NFPA indica peligro:
Rojo = inflamable. Almacene enun reasegregada para productosinflamables.
Azul = riesgo para lasalud.Txico si seInhala, ingiereo absorbe por la piel.Guarde en un rea segura.
Amarillo = Sustancias reactivas y reactivos oxidantes. Pueden reaccionar de forma violenta con el aire, agua u otras sustancias.
Almacene lejos de materiales Inflamables o combustibles.
Blanco = corrosivo. Puede daar la piel, ojos o membranas mucosas. Almacene lejos de reactivos con cdigo rojo, azul y amarillo.
Gris = presenta no ms que riesgo moderado en cualquiera de las categoras. Para almacenamiento qumico general.
Excepcin = reactivo incompatible con otros reactivos de la misma barra de color. Almacene por separado. Cdigo de riesgo (4):
siguiendo el uso NFPA, cada diamante muestra un segmento rojo (inflamabilidad), un segmento azul (salud; es decir, toxicidad)
y amarillo (reactividad). En cada segmento con cdigo de color est Impreso un nmero negro que muestra el grado de riesgo.
El cuarto segmento, segn estipula la NFPA, se deja en blanco. Se reserva para advertencias especiales, como radiactividad.
Las clasificaciones numricas muestran el grado de riesgo: 4 = extremo, 3 = grave, 2 = moderado, 1 = leve, y 0 = ninguno de
acuerdo con los datos presentes.
tanques grandes se deben transportar por medio de carre cen m ejor proteccin contra formulaciones de reactivos
tillas de mano. especficos. Los guantes de nitrilo, por ejemplo, ofrecen
un mbito ms amplio de compatibilidad con disolventes
orgnicos que el ltex. Las batas de laboratorio, de prefe
Equipo de proteccin personal rencia con mangas y puo, deben abarcar todo el brazo,
Las partes del cuerpo sujetas con ms frecuencia a lesiones tener botones y estar hechas de material resistente a lqui
en el laboratorio clnico son los ojos, la piel y las vas respira dos. Es necesario el uso de zapatos adecuados; los zapatos
torias y digestivas. Por tanto, el uso de equipo de proteccin construidos de material poroso, zapatos abiertos o sanda
personal es muy importante. Lentes de seguridad, goggles, lias son considerados peligrosos.
visores o blindajes de trabajo protegen los ojos y la cara de Los respiradores se requieren para varios procedimien
salpicaduras e impacto. Los lentes de contacto no ofrecen tos en el laboratorio clnico. Ya sea que se empleen para
proteccin a los ojos; se recomienda no usarlos en el labora riesgos biolgicos o qumicos, se debe usar el tipo correc
torio de qumica clnica. Si cualquier solucin cae en el ojo to para el riesgo especifico. Los respiradores con filtros de
de manera accidental, se requiere irrigacin exhaustiva. partculas de alta eficiencia (high-ejficiency particulate air,
Los guantes y mangas ahuladas protegen brazos y HEPA) se emplean cuando los controles de ingeniera no
manos cuando se emplean sustancias custicas. Los guan son factibles, por ejemplo, al trabajar de manera directa
tes se requieren para uso de rutina en el laboratorio; sin con pacientes con tuberculosis (TB) o llevar a cabo proce
embargo, los guantes de polivinilo u otros que no sean de dimientos en los que las muestras de pacientes con casos
ltex son una alternativa aceptable para personas alrgi confirmados de, o en los que se sospecha, TB se convierten
cas a este material. Ciertos materiales para guantes ofre en aerosol. La capacitacin, mantenimiento y el protocolo
38 PARTE I PRINCIPIOS BSICOS Y PRCTICA DE LA QUMICA CLNICA
Fuente: Centers for Disease Control and Prevention and the National Institutes of Health. Biosafety in Microbiological and Blomedical Laboratories,
3rd ed. Washington, D.C.: U.S. Government Printing Office, Table 3, Comparison of Biological Safety Cabinets, 1993.
*Se pueden aadir paneles con guantes e incrementarn la velocidad frontal a 46 m/min; es posible aadir los guantes con una liberacin de presin
de aire de entrada que permitir trabajar con productos qumicos o radionclidos.
escrito para uso de respiradores se requieren de acuerdo y desinfectar de inmediato el rea o equipo. La limpieza
con el estndar de proteccin respiratorio. recomendada incluye lo siguiente:
Cada patrn debe proveer (sin ningn cobro) batas
Usar equipo de proteccin apropiado.
de laboratorio, guantes u otro equipo de proteccin a los
Emplear dispositivos mecnicos para recoger vidrio
empleados que pudieran estar expuestos a peligros biolgi
roto u otros objetos ahusados.
cos o qumicos. Es responsabilidad del patrn limpiar y man
Absorber el derrame con toallas de papel, apsitos de
tener todo el equipo de proteccin personal. Antes de salir
gasa o pauelos de papel.
del laboratorio, se debe eliminar y desechar de manera ade
Limpiar el sitio de derrame usando un detergente acuo
cuada todo el equipo de proteccin personal contaminado.
so comn.
Desinfectar el sitio de derrame con una solucin apro
SEGURIDAD BIOLGICA bada o blanqueador al 10%, con un tiempo de contacto
apropiado.
Consideraciones generales
Enjuagar el sitio de derrame con agua.
Las muestras de sangre y otros lquidos corporales se deben Desechar los materiales en recipientes apropiados para
recolectar, transportar, manejar y procesar con precaucio materiales biopeligrosos.
nes estrictas. Guantes, batas y proteccin para la cara se
deben usar si hay probabilidades de que ocurran salpica Plan de control de exposicin a patgenos
duras. El lavado consistente y completo de las manos es
llevados por la sangre
un componente esencial de control de infeccin.
La centrifugacin de muestras biolgicas produce En diciembre de 1991, la OSHA emiti la regla final para
aerosoles finamente dispersados que son una fuente de la exposicin ocupacional a patgenos transmitidos p o r la
infeccin de alto riesgo. Lo ideal es que las muestras per sangre. Para reducir la exposicin de los empleados, cada
manezcan tapadas durante la centrifugacin. Como una patrn debe tener un plan de control de exposicin escri
precaucin adicional, se recomienda el uso de una centri to. El plan debe estar disponible para todos los empleados
fugadora con proteccin interna. cuyas obligaciones anticipadas razonables pudieran dar
como resultado exposicin ocupacional a sangre u otros
Derram es materiales en potencia infecciosos. El plan de control
de exposicin se debe analizar con todos los empleados
Cualquier derrame de sangre, lquido corporal u otro y estar a su alcance mientras trabajan. El empleado debe
material potencialmente infeccioso debe ser limpiado, recibir la capacitacin adecuada en relacin con las tcni
CAPITULO 2 SEGURIDAD Y REGULACIONES EN EL LABORATORIO 39
HDSM deben estar fcilmente accesibles a los empleados do de manera paulatina el uso de mercurio y compuestos
durante todos los turnos. que lo contienen. Los laboratorios deben tener una pol
tica y un mtodo para eliminacin legal del mercurio. Los
Estndar de laboratorio controles de ingeniera del laboratorio, y de procedimien
to, y equipo de proteccin personal deben ser adecuados
La Exposicin ocupacional a sustancias qumicas peligrosas
para proteger a los empleados de estas sustancias.
en laboratorios, conocida tambin como estndar de labora
torio, fue promulgada en mayo de 1990 para proveer a los
laboratorios normas especficas para el manejo de sustan A lm acenam iento y m anejo de
cias peligrosas. Este estndar de la OSHA requiere que cada sustancias qum icas
laboratorio que emplea materiales peligrosos tenga un plan
Para evitar accidentes al manejar sustancias qumicas, es
de higiene qum ica escrito. Este plan provee procedimientos
importante mostrar respeto a stas y tener un conocimiento
y prcticas de trabajo para regular y reducir la exposicin
completo de sus propiedades. Esto es importante en particular
del personal de laboratorio a sustancias qumicas peligro
al transportar, transferir o usar sustancias que, cuando entran
sas. Las sustancias qumicas peligrosas son aquellas que
en contacto con otras, podran ocasionar la formacin de sus
poseen un riesgo fsico o sanitario por exposicin aguda o
tancias que son txicas, inflamables o explosivas. Por ejem
crnica. Los procedimientos que describen cmo proteger
plo, el cido actico es incompatible con otros cidos como el
a los empleados contra teratgenos (sustancias que afectan
crmico y el ntrico; el tetracloruro de carbono es incompati
el desarrollo celular en el feto o el embrin), carcingenos
ble con el sodio; y los lquidos inflamables son incompatibles
y otras sustancias qumicas txicas se deben describir en el
con el perxido de hidrgeno y el cido ntrico.
plan. En necesario capacitar a los empleados en cuanto al
Los acuerdos para el almacenamiento de sustancias qu
uso de sustancias qumicas peligrosas para abarcar la iden
micas dependen de las cantidades necesarias y su natura
tificacin de signos y sntomas de exposicin, localizacin
leza o tipo. El almacenamiento adecuado es esencial para
de HDSM, un plan de higiene qumica y cmo protegerse
evitar y controlar incendios y accidentes de laboratorio.
ellos mismos contra sustancias qumicas peligrosas. Debe
Desde un punto de vista ideal, el cuarto de almacenaje
ser designado un funcionario de higiene qumica para cual
debe estar organizado de modo que cada clase de sustancia
quier laboratorio que emplee sustancias qumicas peligrosas.
est aislada en un rea que no sea utilizada para el trabajo
El protocolo debe ser revisado anualmente y ser actualizado
de rutina. Se debe mantener un inventario actualizado que
cuando se modifican las regulaciones o cambia el inventario
indique la ubicacin de sustancias, cantidades mnimas y
qumico. Recuerde que lavarse bien las manos es un com
mximas requeridas, vida de anaquel, etctera. Ciertas sus
ponente esencial de la higiene qumica preventiva.
tancias se deterioran con el tiempo y se vuelven peligrosas
(p. ej., el ter forma perxidos explosivos). El almacenaje
Efectos txicos de sustancias peligrosas
no se debe basar slo en el orden alfabtico porque exis
Las sustancias txicas tienen la capacidad de causar efectos te la posibilidad de almacenar juntas sustancias qumicas
nocivos (locales o sistmicos) mediante la accin o interfe incompatibles que podran reaccionar. stas se deben sepa
rencia qumica directas con el funcionamiento de los siste rar para almacenaje como se ilustra en el cuadro 2-2.
mas del organismo. Puede causar efectos agudos o crnicos
relacionados con la duracin de la exposicin (es decir, corto Sustancias qum icas inflam ables y com bustibles
plazo o contacto simple contra largo plazo o prolongado, con Los lquidos inflamables y combustibles, que se emplean
tacto repetido). Casi cualquier sustancia, incluso la ms ino en numerosos procedimientos de rutina, estn entre los
cua, puede daar pulmones, piel, ojos o membranas mucosas
del trabajador despus de la exposicin a largo o corto plazo,
y puede ser txica en exceso. Adems, algunas sustancias qu CUADRO 2-2. REQ UISITO S D E A LM A C EN A JE
micas son txicas a concentraciones muy bajas. La exposicin
SUSTANCIA A LM A C EN A D O S POR SEPARADO
a agentes txicos puede ser por contacto directo (absorcin),
inhalacin, ingestin, o inoculacin o inyeccin. Lquidos inflamables Slidos inflamables
En el laboratorio de qumica clnica, el personal debe cidos minerales cidos orgnicos
estar consciente en particular de los vapores txicos de
Custicos Oxidantes
disolventes qumicos, como acetona, cloroformo, metanol
o tetracloruro de carbono, que no dan seales explcitas de cido perclrico Sustancias reactivas
irritacin sensorial como el bromo, amoniaco y formalde- con agua
hdo. El muestreo de aire o el moni toreo de rutina podran Sustancias reactivas con aire Otras
ser necesarios para cuantificar concentraciones peligrosas.
Sustancias reactivas con calor
El mercurio es otra fuente de vapores venenosos que suele
que requieren refrigeracin
pasar desapercibida. Es altamente voltil y txico, y la piel
y las vas respiratorias lo absorben de manera rpida. Las Sustancias inestables
cajas de accesorios para derrames de mercurio deben estar (explosivos sensibles a
disponibles en reas donde se emplean termmetros de cambios bruscos)
mercurio. La mayor parte de los laboratorios estn retiran Consulte el apndice F, Ejemplos de qumicos incompatibles.
CAPTULO 2 SEGURIDAD Y REGULACIONES EN EL LABORATORIO 41
Productos qum icos reactivos FIGURA 2-2. Equipo para limpieza de derrames.
Los productos qumicos reactivos son sustancias que, en
ciertas condiciones, pueden explotar o encender de forma
espontnea, o emiten calor o gases inflamables o explosi SEGURIDAD EN RELACIN CON LA RADIACIN
vos. Algunos cidos o bases fuertes reaccionan con el agua
para generar calor (reacciones exotrmicas). El hidrgeno Proteccin am biental
se libera si se mezclan metales alcalinos (sodio o potasio)
Una poltica de radiacin debe incluir proteccin ambiental
con agua o cidos, y tambin podra ocurrir combustin
y para el personal. Todas las reas en las que se emplean y
espontnea. La mezcla de agentes oxidantes, como los
almacenan m ateriales radiactivos deben estar provistas con
perxidos, y agentes reductores, como el hidrgeno, gene
signos de precaucin, y el trnsito en estas reas debe estar
ran calor y pueden ser explosivos.
restringido slo a personal esencial. Es necesario remar
car el monitoreo regular y sistemtico; y la descontamina
Sustancias qum icas ca rcingenas
cin de equipo de laboratorio, material de vidrio y reas
Los carcingenos son sustancias que han sido determina
de trabajo se debe programar como parte de los procedi
das como agentes causantes de cncer. La OSHA ha publi
mientos de rutina. Se deben mantener registros en cuanto
cado listas de carcingenos confirmados y bajo sospecha,
a la cantidad de material radiactivo disponible, as como
y las normas detalladas para su manejo. La bencidina es
la cantidad que se elimina. Se requiere una licencia de la
un ejemplo comn de un carcingeno conocido. Si es
N uclear Regulatory Commission (NRC) si la cantidad total
posible, se debe usar una sustancia qumica sustitua o un
de material radiactivo excede cierto nivel. El funcionario
procedimiento distinto para evitar la exposicin a agen
de seguridad del laboratorio debe consultar con la auto
tes carcingenos. Para requisitos de seguridad normativos
ridad de seguridad institucional acerca de estos requisitos.
(OSHA) e institucionales, el laboratorio debe mantener un
inventario preciso de carcingenos.
Proteccin del personal
D e rra m e s d e sustancias qum icas Es esencial que slo el personal capacitado de forma ade
La atencin estricta a una buena tcnica de laboratorio cuada trabaje con radioistopos, y que los usuarios sean
puede ayudar a evitar derrames de productos qumicos. monitoreados para asegurar que no sea excedida la dosis
Sin embargo, es necesario establecer procedimientos de mxima permisible de radiacin. Los monitores de radia
emergencia para manejar cualquier accidente. Si ocurre cin deben ser evaluados de manera peridica para detec
un derrame, el primer paso debe ser ayudar al personal tar el grado de exposicin para el empleado de laboratorio.
o evacuarlo, luego puede empezar el confinamiento y Los registros se deben mantener el tiempo que dure el
la limpieza. Hay varios equipos comerciales disponibles empleo ms treinta aos.
para derrames, con los cuales se neutraliza o absorbe las
soluciones qumicas derramadas (fig. 2-2). Sin embargo,
Radiacin no ionizante
ningn equipo nico es adecuado para todos los tipos de
derrames. Los procedimientos de emergencia para derra Las formas no ionizantes de radiacin tambin son de inte
mes deben incluir tambin un sistema de informacin. rs en el laboratorio clnico. El equipo suele emitir diversas
42 PARTE I PRINCIPIOS BSICOS Y PRCTICA DE LA QUMICA CLNICA
longitudes de onda de radiacin electromagntica que deben El tringulo del fuego ha sido modificado a una pirmi
evitarse mediante blindaje o el uso de equipo de proteccin de tridimensional conocida como tetraedro del fu eg o (fig.
personal (cuadro 2-3). Estas energas tienen efectos biolgi 2-3). Esta modificacin no elimina los procedimientos
cos diversos que dependen de la longitud de onda, intensi establecidos al tratar con un incendio, pero proporciona
dad de la energa y duracin de exposicin. Los laboratoristas medios adicionales mediante los cuales se podran evitar o
deben estar conscientes de los riesgos que presenta el equipo extinguir los incendios. Un incendio se extinguir si se eli
a fin de protegerse a ellos mismos y al personal auxiliar. mina cualquiera de los tres elementos bsicos (calor, aire
o combustible).
SEGURIDAD CONTRA INCENDIOS
Clasificacin de incendios
Q um ica del fuego
Los incendios han sido divididos en cuatro clases con base
El fuego es en s una reaccin qumica que conlleva la oxi en la naturaleza del material combustible y los requisitos
dacin rpida de un material combustible o carburante, con para su extincin:
la consiguiente liberacin de calor y luz. En el laboratorio
Clase A: materiales slidos combustibles ordinarios, como
de qumica clnica, todos los elementos esenciales para que
papel, madera, plstico y tela.
comience el fuego estn presentes, combustible, calor o
Clase B: lquidos y gases inflamables y productos del
fuente de ignicin y oxgeno (aire). Sin embargo, la inves
petrleo combustibles.
tigacin reciente hace pensar que un cuarto factor est pre
Clase C: equipo elctrico energizado.
sente. Este factor ha sido clasificado como una reaccin en
Clase D: metales combustibles o reactivos, como el mag
cadena en la que la combustin contina e incluso se acele
nesio, sodio y potasio.
ra. Es causada por la rotura y recombinacin de molculas
del material combustible con el oxgeno de la atmsfera.
Tipos y aplicaciones de extintores de fuego
As como los incendios han sido divididos en clases, los
extintores se dividen en clases que corresponden al tipo de
incendio por extinguir. Asegrese de elegir el tipo correc
to, usar el tipo equivocado de extintor podra ser peligro
so. Por ejemplo, no emplee agua en lquidos incendiados
o equipo elctrico.
Los extintores de agua a presin, as como la espuma
y los tipos de sustancias qumicas secas multipropsito, se
emplean para incendios clase A. Los extintores de produc
tos qumicos en polvo multipropsito y de dixido de car
bono se emplean para incendios clases B y C. Los extintores
de hidrocarburos halogenados se recomiendan en particular
para uso con equipo de cmputo. Los incendios clase D pre
sentan problemas especiales, y la extincin se deja a bombe
FIGURA 2-3. Tetraedro del fuego. ros capacitados que emplean productos qumicos especiales
CAPITULO 2 SEGURIDAD Y REGULACIONES EN EL LABORATORIO 43
Incendios de clase A
Emplee estos tipos
de e x tin to re s *--
Combustibles
ordinarios:
madera, papel,
ropa, etc. QUITE EL
Agua presurizada Producto qumico en polvo SEGURO
Incendios de clase B A pu n te la
Use estos tipos de
extintores ------------- BOQUILLA
Lquido
inflamable
Grasa
Gasolina
Pinturas A p r ie t e e l
Aceites, etc. GATILLO
Productos qumicos secos Dixido de carbono
Incendios de clase C A SE
Utilice estos tipos RPIDA
de extintores ------------ * -
Equipo MENTE
elctrico LA
Motores
\ M interruptores BOQUILLA
Producto qumico
Dixido de carbono Haln en polvo
a Incendios de clase D
/ \ Use este tipo de Cubra el material
w agente -
Metales
inflamables
Metal X
quemado con agente
extintor (amontone con
una pala, espolvoree)
FIGURA 2-4. Uso adecuado de extintores de incendios. (Adaptado del Departamento de seguridad clnica y de
laboratorio. Centro de ciencias de la salud de la Universidad de Texas en Houston.)
en polvo (fig. 2-4). El personal debe conocer la ubicacin y Use slo equipo aterrizado adecuadamente (enchufe
tipo de extintor porttil cerca de su rea de trabajo, y cmo con tres patas).
usar un extintor antes de que ocurra un incendio. En caso Compruebe que no se encuentren cables elctricos rados.
de un incendio, evace primero a todo el personal, pacien Informe de inmediato de cualquier mal funcionamiento
tes y visitantes que estn en peligro inmediato, y luego acti o equipo que produzca un zumbido a fin de repararlo.
ve la alarma de incendio, d aviso e intente extinguirlo, si No trabaje con equipo elctrico energizado.
es posible. El personal debe trabajar como un equipo para Nunca opere equipo elctrico con las manos mojadas.
llevar a cabo los procedimientos de emergencia. Los simula Conozca la ubicacin exacta del panel de control elc
cros de incendio se deben realizar de manera regular y con trico para la electricidad de su rea de trabajo.
la documentacin apropiada. Emplee slo cables de extensin aprobados, y no sobre
cargue los circuitos. (Algunas regulaciones locales pro
hben el uso de algn cable de extensin.)
CONTROL DE OTROS RIESGOS
Pida que se comprueben las conexiones a tierra y que se d
Riesgos elctricos otro mantenimiento preventivo peridico en el equipo.
Emplee el regulador apropiado para el tipo de gas en horadadores de corcho, agujas, hojas de bistur y otras
uso. herramientas. Debe estar vigente un programa de inspec
No intente controlar o desconectar el flujo de gas con el cin de material de vidrio para detectar signos de desgas
regulador de alivio de presin. te o fatiga que pudieran contribuir a rotura o lesin. Los
Mantenga las tapas de proteccin removibles en su objetos afilados infecciosos se deben eliminar en recipien
lugar hasta que el cilindro est en uso. tes aprobados por la OSHA a fin de reducir el riesgo de
Asegrese de que los tanques de acetileno estn entu lesin e infeccin.
bados de manera apropiada (el gas es incompatible con
tubera de cobre). Riesgos ergonm icos
No fuerce una vlvula de cilindro congelada o pegada.
Use una carretilla para transportar tanques grandes. Aunque la mecanizacin y automatizacin incrementadas
Compruebe siempre los tanques al recibirlos y despus han hecho obsoletas muchas tareas manuales tediosas y
de manera peridica en busca de fugas. repetitivas, los procesos de laboratorio a menudo requie
Asegrese de que el cilindro est etiquetado de manera ren el manejo repetido de instrumentos, recipientes y
apropiada para identificar el contenido. equipo. Estas acciones fsicas pueden, con el tiempo, con
Los tanques vacos se deben marcar con la leyenda tribuir a trastornos de distensin repetitivos como tenosi-
vaco. novitis, bursitis y quistes subcondriales. Los principales
factores contributivos relacionados con trastornos de dis
Riesgos con m ateriales criognicos tensin repetitivos son posicin o postura, fuerza aplicada
y frecuencia de repeticin. Recuerde considerar el diseo
El nitrgeno lquido es probable que sea uno de los flui de herramientas manuales (como pipetas ergonmicas),
dos criognicos que se emplean con ms frecuencia (gases observancia de la tcnica ergonmica correcta y coloca
licuados) en el laboratorio. Sin embargo, hay varios ries cin del equipo al conducir cualquier tarea repetitiva. Los
gos relacionados con el uso de cualquier m aterial criog sntomas crnicos de dolor, entumecimiento u hormigueo
nico: fuego o explosin, asfixia, acumulacin de presin, en las extremidades podran indicar el inicio de trastornos
deterioro de materiales y dao tisular similar al de las que de distensin repetitivos. Otros riesgos incluyen lesin
maduras por calor. musculoesqueltica aguda. Recuerde levantar objetos
Para trabajo criognico slo se deben usar recipientes pesados de manera adecuada, mantener la carga cerca del
construidos con materiales diseados para soportar tempe cuerpo y usar los msculos de las piernas en vez de la
raturas ultrabajas. Adems de usar proteccin para los ojos espalda. Incremente poco a poco la fuerza al empujar o
y la cara, se recomienda tambin para las manos a fin de jalar, y evite dar golpes con las extremidades.
protegerse del riesgo de tocar superficies superenfriadas. Los
guantes, de material impermeable, deben quedar flojos de ELIMINACIN DE M ATERIALES PELIGROSOS
modo que se puedan quitar con rapidez si se derrama lquido
sobre ellos o en su interior. Para reducir la ebullicin o espu- El manejo y eliminacin seguros de productos qumicos
macin violentas y las salpicaduras, las muestras a congelar y otros materiales requiere un conocimiento completo
se deben insertar siempre en el refrigerante de manera muy de sus propiedades y riesgos. Quienes generan desechos
lenta. Los lquidos criognicos se deben almacenar en reci peligrosos tienen una responsabilidad moral y legal, segn
pientes bien aislados, pero sin cierre hermtico, que reducen se define en las regulaciones locales, estatales y federales,
la prdida de lquido debido a la evaporacin por ebullicin, para proteger tanto al individuo como al ambiente al eli
y que evitan el taponamiento y la acumulacin de presin. minarlos. Hay cuatro tcnicas bsicas de eliminacin de
desechos: descargar al sistema de drenaje, incineracin,
Riesgos m ecnicos enterrar en el rea de desechos y reciclar.
y segregar en clases compatibles. Si resulta prctico, los afilados. Los mtodos aprobados para tratamiento y dispo
disolventes como el xileno y la acetona se podran filtrar o sicin de residuos clnicos son incineracin, esterilizacin
volver a destilar para reutilizarlos. Si no es factible el reci con vapor, entierro, desactivacin trmica, desinfeccin
clado, el personal capacitado debe llevar a cabo los planes qumica o encapsulacin en una matriz slida.
de eliminacin. El material inflamable tambin se puede Quienes producen residuos clnicos deben poner en
quemar en incineradores diseados con posquemadores y prctica los siguientes procedimientos:
depuradores para eliminar productos txicos de combus
Los patrones de trabajadores de atencin de la salud
tin.
deben establecer y poner en prctica un programa de
Tambin, antes de la eliminacin, las sustancias que
desechos infecciosos.
son explosivas, como los carcingenos y perxidos, se
Los desechos biomdicos se deben colocar en una bolsa
deben transformar en formas menos peligrosas siempre
marcada con el smbolo de biorriesgo, y colocarlos des
que sea posible. Los desechos qumicos slidos que son
pus en un recipiente a prueba de fugas que sea resis
inadecuados para la incineracin se deben enterrar en un
tente a punciones y est equipado con una tapa slida
rea de desechos. Esta prctica, sin embargo, ha creado
bien ajustada. Todos los recipientes deben ser marcados
un problema ambiental, y en la actualidad hay escasez de
con claridad con la palabra biorriesgo o su smbolo.
sitos seguros.
Los instrumentos ahusados, como agujas, hojas y
objetos de vidrio, deben ser colocados en recipientes
D esechos radiactivos especiales resistentes a la puncin antes de colocarlos
La manera de usar y eliminar istopos est estrictamente dentro de la bolsa y el recipiente.
regulada por la N uclear Regulatory Commission (NRC), y Las agujas no deben ser transportadas, volverse a tapar,
depende del tipo de desecho (soluble o no soluble), su doblar o romper a mano.
nivel de radiactividad, y la radiotoxicidad y vida media Los residuos biomdicos deben ser eliminados por
de los istopos en cuestin. El funcionario de seguri medio de uno de los procedimientos recomendados.
dad de radiacin debe ser consultado siempre acerca de El material potencialmente biopeligroso, como la san
las polticas relacionadas con la eliminacin de desechos gre o productos sanguneos y desechos de laboratorio
radiactivos. Muchos laboratorios clnicos transfieren los contaminados, no se pueden desechar de modo directo.
materiales radiactivos a un receptor autorizado para que Los desechos combustibles contaminados se pueden
se encargue de eliminarlos. incinerar. Los residuos no combustibles contaminados,
como el material de vidrio, se deben meter a autoclave
D esechos biopeligrosos antes de eliminarlos. Se debe prestar atencin especial
a la eliminacin de jeringas, agujas y vidrio roto que
El 2 de noviembre de 1988, el presidente Reagan con tambin pudieran infligir cortes o punciones accidenta
virti en decreto la M edical W aste Tracking Act de 1988. les. Se deben usar recipientes apropiados para desechar
Su propsito era a) encargar a la Agencia de proteccin estos objetos ahusados.
ambiental la responsabilidad de establecer un programa
para seguir la pista de los residuos clnicos desde la gene DOCUM ENTACIN E INVESTIGACIN
racin hasta la elim inacin, b) definir el residuo clnico,
DE ACCIDENTES
c) establecer tcnicas aceptables para el tratamiento y
disposicin y d) establecer un departamento con ju risd ic Cualquier accidente que conlleve lesiones personales,
cin para hacer cumplir las nuevas leyes. Varios estados incluso menores, se debe reportar de inmediato a un super
han puesto en prctica las directrices federales e incor visor. Bajo las normas de la OSHA, se pide a los patrones
porado requisitos adicionales. Algunas de las entidades que mantengan registros de lesiones y enfermedades ocu-
que abarcan las reglas son cualquier instalacin relacio pacionales el tiempo que dure el empleo ms treinta aos.
nada con la atencin de la salud, incluso, pero no nada Los requisitos para mantener los registros incluyen un
ms, centros quirrgicos ambulatorios; bancos y centros primer informe de lesin, un informe de investigacin del
de extraccin de sangre; clnicas, entre otras las mdi accidente y un resumen anual que se registra en el histo
cas, dentales y veterinarias; laboratorios de investigacin rial de lesiones de la OSHA (forma 300).
clnicos, de diagnstico, patolgicos o biom dicos; hos El primer informe de lesin se emplea para notificar a
pitales; instalaciones de atencin de largo plazo; centros la compaa aseguradora y al departamento de recursos
de emergencia menores; clnicas de salud ocupacional y humanos o de relaciones del empleado que ocurri una
laboratorios clnicos; y consultorios de mdicos y den lesin en el lugar de trabajo. Por lo general, el empleado
tistas. y el supervisor completan el informe, que contiene infor
Los residuos clnicos se definen como un desecho especial macin sobre el patrn y la persona lesionada, as como la
de las instalaciones de atencin de la salud y adems como hora y el lugar, causa y naturaleza de la lesin. Se firma y
desecho slido que, si se maneja o trata de manera inapro se pone fecha al informe; luego, se enva al gerente de ries
piada, podra transmitir enfermedades infecciosas (para gos de la institucin o al representante de la aseguradora.
ms informacin, consulte el sitio Web de JCAHO: www. El informe de investigacin debe incluir informacin
jcaho.org). Incluyen desechos animales, sangre residual y acerca de la persona lesionada; una descripcin de lo que
productos sanguneos, desechos microbiolgicos y objetos sucedi; la causa del accidente (ambiental o personal);
46 PARTE I PRINCIPIOS BSICOS Y PRCTICA DE LA QUMICA CLNICA
factores contributivos; testigos; la naturaleza de la lesin, tection o f L aboratory W orkers from Instrument B iohazards
y acciones que se emprendern para evitar una recurren and Infectious D isease Transmitted by Blood, Body Fluids
cia. La persona que realiza la investigacin debe firmar y and Tissue, norma aprobada M29-A2 (NCCLS).
fechar este informe.
Cada ao se debe completar y enviar un registro y RESUM EN
resumen de las lesiones y enfermedades ocupacionales al
Departamento del Trabajo de Estados Unidos, Oficina de Las reglas de seguridad fundamentales del laboratorio
Estadsticas Laborales (registro de lesin OSHA No. 300). clnico son desarrollar la previsin y percepcin de acci
La forma estandarizada demanda informacin similar al dentes, usar el sentido comn y desarrollar y practicar lo
primer informe de lesin y al informe de investigacin del siguiente:
accidente. Se debe informar acerca de toda muerte ocu- 1. Buen com portam iento y hbitos personales.
pacional, enfermedad ocupacional no fatal, exposicin Usar la indumentaria y ropa de proteccin adecuadas.
biolgica o qumica y lesin ocupacional no fatal que Sujetarse el pelo largo.
conlleve la prdida de conciencia, restriccin de trabajo No comer, beber o fumar en el rea de trabajo.
o movimiento, transferencia a otro trabajo o tratamiento Nunca pipetear con la boca.
mdico (otro que no sea primeros auxilios). Lavarse las manos con frecuencia.
Debido a que es importante determinar por qu y cmo 2. Buen mantenimiento.
ocurri un accidente, se debe llevar a cabo una investi Mantener las reas de trabajo libres de sustancias qu
gacin al respecto. La mayor parte de los accidentes se micas, material de vidrio sucio, etctera.
pueden atribuir a dos causas fundamentales: ambientales Almacenar de manera adecuada los productos qumicos.
(condiciones inseguras) o personales (actos inseguros). Etiquetar los reactivos y las disoluciones.
Los factores ambientales incluyen salvaguardas inade Colocar seales de advertencia.
cuadas, uso de equipo inapropiado o defectuoso, riesgos 3. Buena tcnica de laboratorio.
relacionados con la ubicacin o mal mantenimiento. Los No operar equipo nuevo o desconocido hasta haber
factores personales incluyen indumentaria de laboratorio recibido la instruccin y autorizacin.
inadecuada, falta de habilidades o conocimiento, condi Leer todas las etiquetas e instrucciones con deteni
ciones especficas fsica o mentales, y actitud. La m oti miento.
vacin positiva del empleado es importante en todos los Usar el equipo de seguridad personal provisto.
aspectos de la promocin de la seguridad y prevencin de Para el manejo seguro, uso y eliminacin de productos
accidentes. qumicos, aprenda sus propiedades y riesgos.
Tiene una importancia particular que la autoridad apro Aprenda los procedimientos de emergencia y familiar
piada sea notificada de inmediato si algn individuo sufre cese con la ubicacin de salidas de incendios, extinto
una puncin de aguja en la recoleccin de sangre o una res de fuego, mantas, etctera.
cortadura durante el procesamiento o manejo posterior de Sea cuidadoso al transferir productos qumicos de un
la muestra. Para un resumen de las recomendaciones para recipiente a otro, y aada siempre el cido al agua de
proteccin de trabajadores de laboratorio, refirase a Pro- manera lenta.
P R E G U N T A S DE R E P A S O
1. Cul de las siguientes normas requiere que las HDSM 3. El equipo de proteccin personal (EPP) adecuado
sean accesibles a los empleados que tienen contacto en el laboratorio de qumica para pruebas de rutina
con un compuesto peligroso? incluye:
a) Norma de Patgenos Llevados en la Sangre. a) Respiradores con filtro HEPA.
b) Norma de Comunicacin de Riesgos. b) Guantes con mangas ahuladas.
c) Regulaciones de CCE. c) Lentes de seguridad para individuos que no usan
d) Norma de Equipo de Proteccin Personal. lentes de contacto.
d) Bata de laboratorio impermeable, proteccin para
2. Los productos qumicos se deben almacenar:
los ojos y la cara y guantes desechables apropiados.
a) En orden alfabtico para facilidad de acceso.
b) Dentro de un gabinete con ventilacin apro 4. Un incendio causado por un lquido inflamable se
piada. debe extinguir mediante qu tipo de extintor?
c) Segn sus propiedades qum icas y clasifica a) Halgeno.
cin. b ) Clase B.
d) Dentro de una campana de extraccin, si se libe c) Agua a presin.
ran vapores txicos al abrirlos. d) Clase C.
CAPTULO 2 SEGURIDAD Y REGULACIONES EN EL LABORATORIO 47
5. De lo que se menciona a continuacin, cul es el medio c) Posicin o postura, fuerza aplicada y frecuencia
apropiado de eliminacin para el tipo de desecho? de la repeticin.
a) Verter el xileno al sistema de drenaje. d) Fatiga, torpeza y falta de coordinacin.
b) Desecho microbiolgico mediante esterilizacin
7. De lo siguiente, cules son ejemplos de radiacin no
con vapor.
ionizante?
c) Mercurio mediante entierro.
a) Rayos gamma y X.
d) Desechos radiactivos mediante incineracin.
b) Luz ultravioleta y microondas.
6. Cules son los principales factores que contribuyen c) Radiacin alfa y beta.
a lesiones repetitivas por distensin? d) Radiacin de neutrones.
a ) Falta de atencin de parte del laboratorista.
b) Temperatura y vibracin.
C O N T E N I D O D E L C A P T U L O
O B J E T I V O S
Al terminar este captulo, el laboratorista clnico Describir las fases preanaltica y posanaltica del
podr: aseguramiento de la calidad.
Definir los siguientes trminos: aseguramiento de Determinar si hay una tendencia a un cambio,
la calidad, control de calidad, control, estndar, dados los datos de laboratorio.
exactitud, precisin, estadstica descriptiva, esta Analizar la funcin de los trabajadores del labora
dstica inferencial, intervalo de referencia, error torio clnico en las pruebas en el lugar de atencin.
aleatorio, error sistemtico, dispersin, comproba Describir las caractersticas importantes y requisi
cin delta e intervalos de confianza. tos de quienes realizan el examen en el lugar de
Calcular lo siguiente: sensibilidad, especificidad, atencin.
eficiencia y desviacin estndar. Explicar los procesos relacionados con la seleccin
Evaluar datos de laboratorio por medio del siste y evaluacin del mtodo.
ma multirreglas para control de calidad. Explicar los programas de examen de capacidad en
Graficar los datos y determinar errores constantes el laboratorio clnico.
o proporcionales significativos, dados los datos de
laboratorio.
48
CAPTULO 3 CONTROL DE CALIDAD Y ESTADSTICA 49
T R M I N O S C L A V E ___________________________________________
no paramtricas. Las desviaciones pequeas respecto de las res en uno de los extremos de la distribucin. (Un ejemplo
distribuciones gaussianas no afectan de manera grave los de una distribucin sesgada se muestra en la fig. 3-9.)
resultados de las pruebas estadsticas paramtricas. El tipo Otro tipo de grfica es el histogram a d e frecuen cias acu
ms comn de desviacin respecto de la distribucin gaus- muladas. En esta grfica, el nmero de observaciones que
siana en las observaciones de laboratorio clnico es el sesgo, son menores o iguales a una cierta observacin se grafi-
o la presencia de nmeros de observaciones cada vez mayo can contra el valor de esa observacin. En la figura 3-3
30 _
20
10 10
0 i.
84 86 90
n
94 98
i m lll.l
i i i i i i i i i i I . , 8 M.
102 106 110 114 118 122 126 130 134 138
i
85 90 100 110 120 130 140 150
A Concentracin de ATT (p) B Concentracin de ATT (p)
FIGURA 3-2. Histogramas de frecuencia de concentraciones de antitrombina III de un estudio de intervalo de referencia. Los datos en A han
sido agrupados en intervalos de dos unidades. Los datos en B han sido agrupados por cinco unidades (x = 111.6; s = 9.5 unidades).
CAPITULO 3 CONTROL DE CALIDAD Y ESTADISTICA 51
nZx - (2 x ,r
Por lo general, se emplean otras tres medidas de ubica S= J " ' ' ' T (Ec. 3-3)
cin: mediana, moda y percentil. La m ediana es el valor de \ n (n - l)
la observacin que divide las observaciones en dos grupos, Esta ecuacin se emplea con frecuencia en los progra
cada uno con nmeros iguales de observaciones. Los valo mas de computadora para reducir al mnimo el tiempo de
res de un grupo son ms pequeos que la mediana, y los clculo. Otra forma de expresar s es en trminos del coefi
del otro son ms grandes. Si las observaciones se disponen ciente de variacin (CV), que se obtiene al dividir s entre
en orden creciente y hay un nmero impar de observacio la media y multiplicar por 100 para expresarlo como un
nes, la mediana es la observacin media. Si hay un nmero porcentaje:
par de observaciones, la mediana es el promedio de las dos
observaciones intermedias. lOOs
La m oda es la observacin ms frecuente. Para los datos C V (% ) = (Ec. 3-4)
de ATT, la media es 111.6, la mediana 112 y la moda 110
52 PARTE I PRINCIPIOS BSICOS Y PRCTICA DE LA QUMICA CLNICA
EI x, x I
DAM = (Ec. 3-5)
Glucosa
La desviacin estndar de la m edia, llamada tambin
FIGURA 3-4. Histograma de frecuencia gaussiana idealizado de
error estndar de la m edia (EEM ), se calcula de la siguiente
valores de control de glucosa con una media de 120 y desviacin
estndar de 5 mg/dl. Los porcentajes indican el rea bajo la curva
ecuacin, en la que n representa el nmero de observacio
acotada por los lmites 1, 2 y 3. nes promediadas para calcular la media:
y = 1.0116X - 0 .0 0 7 1
R2 = 0.9948
FIGURA 3-5A. Presentacin grfica de ISTAT contra Hitachi del laboratorio central de un experimento de comparacin
de mtodos. El potasio medido mediante el analizador Hitachi 917 (muestra de plasma) se compara con el potasio medido
por el analizador ISTAT (sangre completa). Las muestras de sangre completa se obtuvieron del departamento de urgencias,
fueron transportadas al laboratorio de qumica donde las muestras de sangre completa se mezclaron con pares de alcuo
tas extradas, una para la prueba con ISTAT y la otra separada en plasma para anlisis con el analizador Hitachi.
CAPTULO 3 CONTROL DE CALIDAD Y ESTADSTICA 53
que la media de una muestra grande est ms cerca de la manera previa. Adems, es posible observar con facilidad
media de una muestra pequea. las diferencias dependientes de la concentracin.
En la figura 3-5A, la concordancia entre los dos mto
Estadsticas descriptivas d e gru p o s dos se puede estimar a partir de la recta que m ejor se ajus
ta a los puntos. Mientras que la estimacin visual se puede
d e observaciones en p a res
usar para dibujar la recta, el uso de una tcnica estadstica,
Quiz el paso ms informativo en la evaluacin de un nue
anlisis de regresin lineal, dar como resultado una elec
vo mtodo analtico es el experimento de comparacin de
cin imparcial de recta, y proporcionar al trabajador de
mtodos, en el que las muestras de pacientes se miden
laboratorio medidas de ubicacin y dispersin para la rec
con el mtodo nuevo y el viejo, o comparativo.1 Los datos
ta. La recta que pasa por los datos tendr la ecuacin de
obtenidos de esta comparacin constan de dos mediciones
para cada muestra de paciente. La graficacin es la forma y = mx + y 0 (Ec. 3-7)
ms simple de ver y resumir los datos de comparacin del
mtodo por pares. Por convencin, los valores obtenidos La pendiente de la recta ser m; el valor de la ordenada
con el mtodo viejo (comparativo) se grafican en el eje x al origen y (el valor de y en x = 0) ser yQ. Si hay con
y los valores obtenidos con el mtodo nuevo (prueba) se cordancia perfecta entre los dos mtodos, cada valor del
grafican en el eje y. En la figura 3-5A se muestra una gr mtodo de prueba ser idntico al valor del mtodo com
fica de las determinaciones de potasio llevadas a cabo con parativo. La ecuacin de esta relacin perfecta sera y = x,
dos instrumentos diferentes: a) el Hitachi 917, en el que con m igual a 1 y y0 igual a 0. En la figura 3-6A se muestra
se analizan muestras de plasma de pacientes graficadas en esta concordancia perfecta; y en la figura 3-6B la situacin
el eje x; y b) un analizador que se emplea en el lugar de en la que los valores del mtodo de prueba son de manera
la atencin, el ISTAT, con el que se analizan muestras de congruente ms altos que los del mtodo comparativo. La
sangre completa graficadas en el eje y. Hay una relacin m ejor recta por los datos an tiene una pendiente de 1
lineal entre los dos mtodos en el intervalo total de valo pero una ordenada al origen de 5.0. En la figura 3-6C se
res de potasio. Hay otro mtodo para ver estos pares de observa la situacin en la que los valores del mtodo de
datos. En la figura 3-5B se muestra una grfica en la cual prueba son mayores que los valores del mtodo compara
las diferencias entre los valores del mtodo comparativo y tivo para concentraciones distintas de cero; la pendiente
el de prueba se grafican contra el valor del mtodo compa es mayor que 1 (1 .1 ), pero la ordenada al origen y es 0.
rativo. Esta grfica se conoce tambin como diagrama de Para concentraciones crecientes, hay diferencias mayores
Altman-Bland.3 Este mtodo permite la comparacin sim entre los valores de prueba y comparativo. En la figura
ple de las diferencias con lmites mximos establecidos de 3-6D, la ordenada al origen y es an 0 y la pendiente es
2.000
1.500
1.000
o
E
0.500
o
ro
I
0 0.000
"0 *
*
< -0.500
I
CO
0
-o
* -1.000
-1.500
-2.000
2 4 6
FIGURA 3-5B. Grfica de diferencias Altman-Bland que muestra las diferencias entre el potasio
de ISTAT y Hitachi 917 contra el potasio de Hitachi 917.
54 PARTE I PRINCIPIOS BSICOS Y PRCTICA DE LA QUMICA CLNICA
160 160
CO
0
120 - t 120 -
y 0 '
y "O
80 _ -g 80 * i
N 35 o N = 35
Pendiente = 1.0 '0 Pendiente =1.0
40 Yo=0.0 40 - . ' Yc=5
Sy/X= 0.0 Sy/, = 0.0
l i l i I 1 1 1
40 80 120 160 40 80 120 160
A Mtodo comparativo B Mtodo comparativo
160
to 160
a>
120 I 120 -
0)
-o y'
80 80
N = 35 o N = 35
Pendiente = 1.1 o Pendiente=0.9
40 Yo=0.0 40 Yo=0.0
Sy/X=0.0 Sy;x=0.0
l i l i I I I 1
40 80 120 160 40 80 120 160
Mtodo comparativo D Mtodo comparativo
* 160
co 160
_Q 03
0 jQ
0
1 120
0
1 120
"O 0
T3
opc
8 80 -
oo
O
o N = 35 ' N = 35
-o Pendiente=1.0 '0 Pendiente =1.0
2 Yo=0.0 Yo=0.0
40 2 40
Sy/X=2 S y/X= 5.0
I I I I ...1... .......I
....X ........... i . .....
40 80 120 160 40 80 120 160
Mtodo comparativo Mtodo comparativo
FIGURA 3-6. Experimentos de comparacin de mtodos con datos simulados. En (A) no se observa error; en
(B) se observa error constante; en (C) y (D) se observa error proporcional; en (E) y (F) se observa error aleatorio.
menor que 1 (0 .9 ), se observa que los valores del mtodo la recta. Para los puntos (x p y (), (x 2, y,),..., (x , (xn,
de prueba son menores que los del mtodo comparativo y j , la ecuacin de la pendiente de la recta de regresin es
para los valores distintos de cero.
I Xxi - x ) ( y i - y )
El anlisis de regresin lineal suele proporcionar esti- m = -----
maciones no sesgadas de la pendiente y la ordenada al ori- Z(x - 3c)2
gen y. En la regresin lineal, la recta del m ejor ajuste es n^x ,, __ ^ ^
la que reduce al mnimo la suma de los cuadrados de las = -------by-------
distancias verticales de los puntos observados a partir de riLx~ ( l x )
CAPTULO 3 CONTROL DE CALIDAD Y ESTADSTICA 55
La ordenada al origen, y, se calcula de m y las inedias de mtodos: aleatorio y sistemtico. El error aleatorio se
de x. y y:. presenta en todas las mediciones; puede ser positivo o
negativo; y se debe al instrumento, operador, reactivo y
variaciones ambientales. La medicin de dispersin sy/x
provee una estimacin del error aleatorio. El error sistem
= y - mx (Ec. 3-9) tico es un error que influye en las observaciones de manera
consistente en una direccin. A diferencia del error alea
En la regresin lineal se supone que no hay error de torio, el sistemtico no debe estar presente en un mtodo.
medicin en el mtodo comparativo, y que la dispersin Las medidas de ubicacin, la pendiente y la ordenada al
de los puntos en torno a la recta de regresin se debe a origen, proporcionan medidas del error sistemtico.
errores aleatorios en el mtodo de prueba. La dispersin Debido a que s /x es una estimacin de la desviacin
de los puntos respecto a la recta de regresin se denomina estndar respecto a la recta de regresin, los lmites esta
desviacin estndar de la recta de regresin y se abrevia sy/x. dsticos se pueden calcular para cualquier punto sobre la
Otro nombre para esta dispersin es el error estndar de recta. Los lmites de 95% para cualquier valor de y en la
la estimacin. Se calcula por medio de la siguiente ecua recta de regresin son y 1.96sy/x. Si mx + y0 se sustituye
cin: por y (ec. 3 -7 ), entonces los lmites de 95% son mx + y g
1.96sy /x,.
Hay dos tipos de error sistemtico: constante y pro
porcional. El error sistem tico constante existe cuando hay
una diferencia constante entre los valores del mtodo de
Las grficas de comparacin de mtodos de la figura prueba y el mtodo comparativo sin importar la concen
3-6E y F muestran la influencia de la mayor dispersin de tracin. En la figura 3-6B, hay una diferencia de 5 entre los
puntos cerca de la recta de regresin. En la figura 3-6E y F, valores del mtodo de prueba y los del comparativo. Esta
el valor de 2 o 5, respectivamente, se sum de forma alter diferencia constante, reflejada en la ordenada al origen,
nativa a, o se rest de, los valores de y en la figura 3-6A. La se llama error sistem tico constante. El error proporcional
pendiente y la ordenada al origen no cambiaron. Slo sy/x existe cuando las diferencias entre los valores del mtodo
se increment a 2 o 5, respectivamente. de prueba y el comparativo son proporcionales a la con
El coeficiente de correlacin r es una medida de la fuerza centracin del analito. En la figura 3-6C y D, la diferencia
de la relacin entre las variables y y x. El coeficiente de entre el mtodo de prueba y el comparativo es proporcio
correlacin puede tener valores de - 1 a +1, donde el signo nal a la concentracin medida. Esta diferencia, indicada
indica la direccin de la relacin entre las dos variables. por una pendiente diferente de la unidad, se debe al error
Una r positiva indica que ambas variables aumentan o dis sistemtico proporcional.
minuyen, mientras que una r negativa indica que cuando
se incrementa una variable, la otra disminuye. Un valor de
Estadsticas inferenciales
r igual a cero no indica relacin. Un valor de 1.0 indica una
relacin perfecta. La ecuacin usual para el clculo de r es Las pruebas estadsticas inferenciales descritas en este
captulo se emplean para comparar las medias o desviacio
I nZxiy i - Y XiZyi nes estndar de dos grupos de datos. La pru eba t, descrita
i I n lx f - ( I x t )2 ] x [ (nXy, )2 - ( l y )2 ] (Ec 3' 11) por Gosset en 1908, se emplea para determinar si hay una
diferencia importante estadstica entre las medias de dos
Aunque muchos laboratoristas igualan valores positi grupos de datos. La prueba F se emplea para determinar
vos altos de r (0.95 o ms alto) con concordancia excelen si hay una diferencia importante desde el punto de vista
te entre los mtodos de prueba y comparativo, la mayor estadstico entre las desviaciones estndar de dos grupos
parte de las comparaciones de qumica clnica deben tener de datos. Ambas pruebas tienen utilidad limitada en estu
coeficientes de correlacin mayores que 0.98. El valor dios de evaluacin de mtodos.
absoluto del coeficiente de correlacin se puede incre Para ambas pruebas, se calcula una estadstica y luego se
mentar de manera significativa al ampliar el intervalo compara con los valores crticos encontrados en las tablas
de muestras comparadas. No obstante, el coeficiente de F y t de libros de estadstica. Los valores crticos definen el
correlacin tiene un uso. Cuando r es menor que 0.99, el nivel de significacin o la probabilidad de que las diferen
uso de la frmula de regresin da como resultado una esti cias se deban al azar. Por convencin, se dice que la prue
macin de la pendiente que es demasiado pequea y una ba t o F es estadsticam ente im portante si la probabilidad de
ordenada al origen y que es demasiado grande. Waakers y la diferencia que ocurre debido al azar es menor que 5%. Si
asociados han recomendado que si r es menor que 0.99, la probabilidad de la diferencia que ocurre debido al azar
se deben usar otras estadsticas de regresin para obtener es mayor que 5%, entonces se dice que la diferencia no es
estimaciones ms reales de la regresin, pendiente y orde im portante estadsticam ente. Mientras menor sea la proba
nada al origen y .2'4 bilidad, ms importante es la diferencia desde el punto de
El error toma en cuenta la diferencia entre los resul vista estadstico. Por ejemplo, una diferencia que ocurre
tados del mtodo comparativo y el de prueba. Dos clases 1% del tiempo debido al azar tiene mayor significado que
de error se miden en los experimentos de comparacin una que ocurre 5% debido al azar.
56 PARTE I PRINCIPIOS BSICOS Y PRCTICA DE LA QUIMICA CLNICA
CUADRO 3-2. VALORES DE t CRTICOS valor de , el mdico debe usar la tabla de valores crticos
de un extremo.
NIVEL DE SIGNIFICACIN DE DOS EXTREMOS DE UN EXTREMO
En qumica clnica, la prueba t se aplica algunas veces
5% (0.05) 1.96 1.64 a datos de comparacin de mtodos obtenidos midiendo
1% (0.01) 2.58 2.33 muestras de pacientes mediante los mtodos de prueba y
comparativo. Los valores medidos se promedian para cada
mtodo, y se aplican a los promedios de pruebas de diferen
cia estadsticamente significativa. Si x. y y. son los valores
obtenidos mediante mtodos comparativos y de prueba,
Para aplicar la prueba , se calcula y compara la estads
respectivamente, el valor de para un grupo de observacio
tica con una tabla de valores de crticos para niveles de
nes en pares (x^yq), (x2,y 2),..., (x.,yq),..., (xn,y n) es
significacin y grados de libertad seleccionados. Los valo
res de se deben obtener de la tabla de si se promedia
un nmero pequeo de observaciones (30 o menos). Si
n
se promedian ms de 30 observaciones, los valores crti
cos son casi independientes del nmero de observaciones sd /V^
y dependen principalmente del nivel de significado. Los : sesgo / ( s , / V ) (Ec. 3-13)
valores crticos listados en el cuadro 3-2 se podran usar si
se promedian ms de 30 observaciones. El numerador de la expresin es la diferencia entre la
Si la estadstica calculada pasa del valor crtico, enton media del mtodos de prueba (Xy/n) y la media del m to
ces se dice que existe una diferencia significativa. Mientras do comparativo (Xx7n). Esta diferencia entre las medias se
ms grande sea la diferencia, mayor ser la estadstica y llama sesgo. El smbolo sd representa la desviacin estn
menor la probabilidad de que la diferencia se deba al azar. dar de las diferencias:
Los valores crticos de un extremo se emplean para probar
si una media de un grupo de nmeros es significativamen ^ _ /Xlyq - x sesgo]
te mayor o menor que la otra media. Los valores crticos (Ec. 3-14)
n 1
de dos extremos se emplean para probar si las medias son
diferentes.
La ecuacin 3-13 muestra que el valor de es el sesgo,
En su aplicacin ms simple, la prueba se emplea para o diferencia de las medias, dividido entre el error estndar
determinar si la media de un grupo de datos ( 3c ) es dife de la media. Westgar y otros, y Westgard y Hunt han mos
rente de la media verdadera (abreviada como M ). La ecua trado que la interpretacin de la prueba sin considerar sd
cin para el clculo de la estadstica es
y n podra ser engaosa.5,6 Un sesgo estadsticamente sig
nificativo podra existir entre los mtodos, pero su tamao
| x-M |
= podra ser significativo desde el punto de vista clnico. Se
s /\ f recomienda al usuario comprobar que el sesgo tiene signi
ficacin clnica y estadstica.6 A veces, el sesgo y sd pueden
Grados de libertad = n - 1 (Ec. 3-12)
ser grandes clnicamente, pero el valor de t resultante pue
de ser pequeo. Al interpretar los resultados de la prueba
El valor es el valor absoluto de la diferencia de la
, todos los trminos, sesgo, sd y el valor de se deben
media verdadera y la media de los datos dividida entre el
evaluar de manera crtica.
EEM. Por ejemplo, si la media de un grupo de mediciones
La segunda prueba estadstica inferencial, la prueba F,
de control de calidad de glucosa fue evaluada estadsti
ha sido empleada para comparar los tamaos de las des
camente y mostr ser diferente del valor medio usual, se
viaciones estndar de los dos mtodos. Para calcular la
emplearan los valores crticos de dos extrem os. Si la
estadstica F, el cuadrado de la desviacin estndar ms
calculada fuera menor que 1.96, entonces la diferencia
grande (sL) se divide entre el cuadrado de la desviacin
entre las medias no sera considerada significativa al nivel
estndar ms pequea (ss).
5%. Un valor de entre 1.96 y 2.58 indica una diferencia
estadsticamente significativa; tal diferencia ocurrira debi
do al azar, con una probabilidad entre 1 y 5%. Una dife F= (Ec. 3-15)
rencia con un valor mayor que 2.58 es ms significativa (s,) 2
y tiene menos de 1% de probabilidad de ocurrir debido al
azar. La mayor parte de los programas de hojas de clculo Al igual que la prueba , la estadstica F se compara
proveen la prueba y el nivel de significacin. entonces con los valores de F crticos en tablas estadsticas
Los valores crticos de un extremo se emplearan para que se tabulan mediante grados de libertad y nivel de sig
determinar si la media de un grupo de datos es signifi nificacin. Debido a que la prueba F provee informacin
cativamente mayor o menor que la media verdadera. Por acerca de la significacin estadstica pero no la significa
ejemplo, es posible que un mdico de laboratorio tenga cin clnica, Westgard y Hunt recomiendan que el valor de
varios valores de colesterol de un paciente y desee deter F no se debe usar como un indicador de aceptabilidad de
minar si estos valores son significativamente mayores que una prueba.6 Ms bien, la aceptabilidad debe depender del
el lmite superior de aceptabilidad. Despus de calcular el tamao de un error aleatorio.
CAPTULO 3 CONTROL DE CALIDAD Y ESTADSTICA 57
con la edad y el sexo (como el sodio). Un analito, como la entonces para excluir al donador o para explicar un valor
creatina cinasa, en el que hay diferencias sustanciales entre anormal; por ejemplo, una concentracin elevada de CK en
varones y mujeres, requerira muestrear al menos 120 varo un atleta en entrenamiento. Si se desea un alcance normal o
nes y 120 mujeres. Si se desearan los intervalos de referencia un intervalo de referencia relacionado con la salud, se debe
para varones y mujeres desde el nacimiento hasta 70 aos excluir a embarazadas y a personas con enfermedad cr
de edad, y si cada categora de edad se iguala a un intervalo nica o aguda. Se debe instruir a los donadores acerca de la
de 10 aos, entonces el nmero mnimo de individuos por preparacin antes de la recoleccin de la muestra. Por lo
probar sera 100 individuos X 2 sexos X 7 clasificaciones general se requieren las muestras en ayuno, en cuyo caso
de edad, o 1400 individuos. El examen sistemtico de tal el donador debe recibir instrucciones de no comer despus
cantidad de individuos es casi siempre prohibitivo. Wins- de las 10 p.m. y beber lquidos descafeinados no calricos
ten11 ha sugerido que se empleen cuatro categoras de edad: antes de la extraccin de sangre. Se deben tomar muestras
recin nacidos, prepberes, poblaciones de adultos (posp- a todos los donadores de un modo similar, y el flebotomista
beres y premenopusicas) y adultos de mayor edad (varones debe tener cuidado de no aplicar el torniquete por ms de
mayores de 60 aos y mujeres posmenopusicas). Aunque un minuto. Es necesario notar que muchos analitos (p. ej.,
estas divisiones no son ptimas, reducen el nmero de cate hierro, ACTH [hormona adrenocorticotrpica] y cortisol)
goras probadas. La dependencia de fosfatasa alcalina con la muestran variaciones diurnas significativas. Es necesario
edad (fig. 3-7) indica que, a menos que haya ms estratifica controlar el tiempo de muestreo para estas sustancias.
cin de fosfatasa alcalina por edad, el intervalo de referencia Las muestras obtenidas se deben etiquetar y manejar
prepuberal puede ser limitado en utilidad. de la misma manera que las regulares. Los instrumentos
Los estudios de intervalo de referencia en nios sanos empleados para analizarlas deben estar funcionando bien.
son limitados debido al dolor psicolgico y fsico de la fle De manera ideal, se deben tomar muestras y analizar no
botoma. Muchos de esos estudios se realizan en pacientes ms de 5 a 10 individuos diarios. Con este anlisis de ms
peditricos para quienes las muestras de suero y plasma ya largo plazo, el alcance normal reflejar el estado a largo pla
estn disponibles. Desafortunadamente, las enfermedades zo de control analtico. El anlisis sobre un perodo corto
y tratamientos de estos nios pueden dar como resultado puede introducir cam bios en el alcance de referencia debi
cambios sistemticos en sus datos de laboratorio. El uso do a diferencias transitorias de instrumento o reactivo.
de estos datos de laboratorio puede resultar en intervalos
de referencia errneos. Debido a que pocos centros pue A n lisis estadstico de los datos del
den emprender estudios sistemticos de intervalos de refe
intervalo de referencia
rencia en recin nacidos y nios sanos, se recomienda que
los valores de referencia publicados sean usados y com D efinicin riguro sa del intervalo d e referen cia
parados de manera crtica con los valores de referencia de El anlisis de la gran cantidad de datos derivados de estu
adultos del laboratorio clnico. Soldin y cois.12 y M eites13 dios de intervalos de referencia sola ser muy laborioso.
han compilado valores de referencia para pacientes pedi En la actualidad esta tarea se simplifica por el uso de hojas
tricos en monografas completas. de clculo o programas estadsticos de microcomputado-
ras de fcil acceso. Los datos de prueba se introducen pri
Recoleccin de datos para estudios de mero a la computadora junto con los demogrficos de los
intervalo de referencia donadores, como cdigo identificador, sexo y edad. Lue
go, se grafican los histogramas de frecuencia para todas
Si se quiere que la utilidad de los datos de intervalo de las pruebas. Los resultados para individuos con datos de
referencia sea mxima, la poblacin de referencia debe laboratorio atpicos deben ser enviados a sus mdicos. Si
estar compuesta de individuos con buena salud. Los se conoce la razn de los resultados atpicos (p. ej., la alta
empleados del hospital son los individuos saludables ms concentracin de CK en el atleta), se deben eliminar stos
al alcance para estudios de intervalo de referencia pero, del anlisis posterior.
desafortunadamente, hay un sesgo de muestreo, ya que la Hasta casi 1990, la prctica normal era elaborar las gr
poblacin est compuesta sobre todo de mujeres jvenes y ficas de los datos del intervalo de referencia como histogra
de mediana edad. Con frecuencia se debe dedicar un gran mas de frecuencia acumulada en papel de probabilidad, y
esfuerzo para reclutar suficientes adultos varones. Una vez luego derivar intervalos de referencia a partir de la grfica de
que se identifica la poblacin de referencia, se debe redac probabilidad. En la figura 3-2 se muestran histogramas de
tar y presentar una forma de consentimiento al comit de frecuencia de ATT. En la figura 3-3 se muestra el histograma
experimentacin con humanos o a la junta de revisin ins de frecuencia acumulada de ATT por medio de una escala
titucional del hospital a fin de que se pueda reclutar a los lineal para el eje y. En la figura 3-8 se muestra un histogra
voluntarios para donacin de sangre u otras muestras. ma de frecuencia acumulada para ATT graficado en papel
De manera ideal, los posibles donadores deben ser entre de probabilidad. Las grficas de probabilidad de frecuencia
vistados para reunir los siguientes datos: edad, sexo, estado acumulada hacen lineales las distribuciones gaussianas y
de salud, nivel de actividad, estatura y peso, consumo de permiten trazar la mejor recta por los puntos. La mayor par
alcohol, uso de frmacos (incluso anticonceptivos orales), te de los datos de intervalo de referencia han sido emplea
antecedentes en relacin con el hbito de fumar y etapa del dos para determinarlo, y se reduce el efecto de los valores
ciclo menstrual. Estos datos de entrevista se pueden usar atpicos. Los lmites externos de 2.5 y 97.5% de la poblacin
CAPTULO 3 CONTROL DE CALIDAD Y ESTADSTICA 59
99 99
98
98
95
95
90
90
-80
03 80
7 0 o
o 60 70
ro 50 I 60
o
CD
40 I 50
>30 ro 40
o
: 20 g 30
10
| 20
5 10
2 5
1
2
10 20 30 40 50
Validacin del intervalo d e referen cia La especificidad de una prueba se define como la pro
Muchos laboratorios carecen de recursos adecuados para porcin de individuos sin la enfermedad con resultados de
llevar a cabo estudios de intervalos de referencia rigurosos prueba negativos para la enfermedad. La especificidad (%)
desde el punto de vista estadstico. Incluso sin los pasos de se define como sigue:
introduccin y anlisis de datos, el reclutamiento y el mues-
treo de un mnimo de 120 individuos es demandante. La 100 x el nmero de individuos
mayor parte de los fabricantes de analizadores de labora sin la enfermedad con una
torio clnico proporcionan intervalos de referencia para los prueba negativa
Especificidad (%) = (Ec. 3-17)
analitos medidos con sus reactivos. Un laboratorio no nece nmero total de individuos
sita elaborar su propio intervalo de referencia para un nuevo
examinados sin la enfermedad
analizador y reactivos. Ms bien, necesita hacer un estudio de
validacin mucho ms pequeo descrito en el mismo docu
De manera ideal, la sensibilidad y la especificidad deben
mento de la NCCLS C28-A.14 Slo se requieren muestras de
ser cada una de 100%. La sensibilidad y especificidad de
20 individuos de referencia para anlisis en un instrumento
una prueba dependen de la distribucin de los resultados
de prueba, si el laboratorista determina que el instrumen
de la prueba para individuos enfermos y no enfermos, y
to de prueba y la poblacin de individuos son similares a
tambin de los valores de prueba que definen los niveles
los descritos en las instrucciones del fabricante. Los lmites
anormales. En la figura 3-13 se muestran los histogramas
de referencia de 95% que describe el fabricante podran ser
de frecuencia de antgeno especifico de prstata (PSA)
considerados vlidos si no ms de 2 a 20 individuos exa
de dos poblaciones de pacientes. Estas dos poblaciones
minados quedan fuera de los lmites descritos originales. Si
son subconjuntos de un grupo de 4 9 6 2 varones volunta
tres o ms resultados de prueba estn fuera de estos lmites,
rios, con edades de 50 aos o ms en quienes se evalu la
es necesario obtener otras 20 muestras de referencia; si no
presencia de cncer de prstata mediante examen rectal
ms de dos de estos nuevos resultados estn fuera de los
digital de la prstata y una medicin de PSA.16 De estos
lmites del fabricante, entonces se pueden usar los lmites
voluntarios, 770 tuvieron hallazgos anormales. El histo
del fabricante. Si fracasa el segundo intento en la validacin,
grama de frecuencia superior representa el subconjunto de
el laboratorista debe examinar de nuevo el procedimiento
578 pacientes con valores de PSA anormales o exmenes
analtico e identificar las diferencias entre la poblacin del
rectales digitales anormales a quienes se les practic una
laboratorio y la que us el fabricante para la informacin del
biopsia para determinar cncer de prstata y se encontr
instructivo. En caso de no identificar diferencias, podra ser
que no tenan la enfermedad. El histograma de frecuen
necesario que el laboratorio lleve a cabo el estudio completo
cia inferior representa el subconjunto de 192 pacientes
de intervalos de referencia con 120 individuos.
con valores de PSA anormales o exmenes rectales digi
tales anormales a quienes se les practic una biopsia y se
EFICACIA DEL DIAGNSTICO encontr que tenan cncer de prstata. Se puede ver que,
El material de esta seccin permite al lector analizar los aunque los pacientes con carcinoma de prstata tienden a
datos de prueba del paciente, y calcular la sensibilidad tener valores ms altos de PSA, hay gran cantidad de tras
diagnstica y especificidad y el valor predictivo de una lape entre las dos poblaciones.
prueba. El lector tambin podr comparar las eficacias La sensibilidad y la especificidad se pueden calcular
diagnsticas de varias pruebas de laboratorio y determinar para cualquier valor de PSA. Si los valores altos de PSA se
usan para indicar la presencia de enfermedad (es decir, si
la prueba ms til.
los valores que pasan de 35 ng/ml se emplean para indicar
cncer de prstata), entonces la especificidad de la prueba
Teora del valor predictivo ser 100% (todos los pacientes con cncer de prstata se
Mientras que los radilogos de principios de la dcada clasifican como negativos con la prueba). Sin embargo, la
de 1950 empleaban los trminos sensibilidad diagnstica, sensibilidad es baja (2.6% ); slo 5 de 192 pacientes con
especificidad y valor predictivo, no fue sino hasta la dcada carcinoma tienen valores de PSA mayores que 35 ng/ml.
de 1970 que los laboratoristas se familiarizaron con sus La sensibilidad se puede incrementar al disminuir el valor
significados. La sensibilidad diagnstica no debe confun de prueba. Por tanto, si los valores de PSA mayores que
dirse con la analtica. Para una prueba que se emplea para 4 .0 ng/ml (el lmite de referencia superior aceptado) se
diagnosticar determinada enfermedad, la sensibilidad diag emplean para diagnosticar carcinoma, la sensibilidad se
nstica es la proporcin de individuos con esa enferme incrementa a 79%. No obstante, la especificidad disminu
dad que dan positivo con la prueba. La sensibilidad suele ye a 46% . Hay pocas pruebas de laboratorio con sensibili
expresarse como porcentaje: dades y especificidades cercanas a 100%. La sensibilidad y
especificidad de la fraccin MB de la creatina cinasa para
100 X el nmero de individuos el diagnstico de infarto de miocardio son casi de 95%
i v i , /n/, enfermos con una prueba positiva cada una. La troponina, aunque con casi la misma sensi
Sensibilidad (%) = ------------------------------------------------
nmero total de individuos bilidad para diagnosticar infarto de miocardio, tiene una
especificidad mejorada, alrededor de 98%. Las pruebas de
enfermos examinados
embarazo con gonadotropina corinica humana (hCG) en
(Ec. 3-16) suero y orina empleadas en el laboratorio clnico tienen
62 PARTE I PRINCIPIOS BSICOS Y PRCTICA DE LA QUMICA CLNICA
160
140
Hipertrofia prosttica benigna
N =578
.2 100
20 30 40 50 60
Antgeno prosttico especfico
160
140
Carcinoma prosttico FIGURA 3-13. Histogramas de frecuen
120 N = 192 cias de resultados de PSA (ensayo Hybritech
Tndem) de pacientes evaluados para
g 100 posible cncer de prstata. (A) En la grfica
C
O superior se muestra el PSA de pacientes a
3 80 los que se les realiz una blopsla sin cncer
0)
de prstata; (B) la grfica Inferior muestra
u- 60
el PSA de pacientes con cncer de prstata
40 detectado mediante blopsia. (Adaptada de
Catalona WJ, Richie JP, deKernlon JB y col.
20 Comparacin de la concentracin de ant
geno prosttico especfico en la deteccin
0 oportuna de cncer de prstata: curvas
10 20 30 40 50 60 caractersticas de operacin del receptor. J
B Antgeno prosttico especfico (ng/ml) Urol 1994; 152:2031.)
sensibilidades que se aproximan a 100%. Muchas pruebas PV es la fraccin de pruebas negativas que son negativos
tienen sensibilidades y especificidades que son cercanas a verdaderos: PV'a (%) = 100 TN/(TN + FN). La eficiencia de
50%. Galen y Gambino han expresado que si la suma de la un prueba es la fraccin de los resultados de prueba que
sensibilidad y especificidad de una prueba es casi 100%, la son positivos verdaderos o negativos verdaderos: eficiencia
prueba no es m ejor que lanzar una moneda al aire.17 (%) = 100(TP + TN)/(TP + TN + FP + FN). Los clculos de
La sensibilidad y la especificidad se pueden calcular a sensibilidad, especificidad y valores predictivos para PSA
partir de relaciones simples. Los pacientes con enferme que pasan de 4.0 ng/ml se muestran en el cuadro 3-3. Si un
dad que son clasificados de manera correcta mediante una paciente tiene un resultado de prueba negativo, tiene una
prueba como portadores de la enfermedad se llaman posi probabilidad de 87% de no tener cncer. La probabilidad
tivos verdaderos (TP). Los pacientes sin la enfermedad que de que un paciente tenga cncer si tiene una prueba posi
son clasificados mediante la prueba como no portadores tiva es bastante baja, alrededor de 33%.
de la enfermedad se llaman negativos verdaderos (TN). Los El valor predictivo de una prueba se puede expresar
pacientes con la enfermedad que son clasificados median como una funcin de la sensibilidad, especificidad y pre-
te la prueba como libres de la enfermedad se llaman nega valencia de enfermedad, o la proporcin de individuos en
tivos fa lso s (FN ). Los pacientes sin la enfermedad que son la poblacin que tienen la enfermedad:
clasificados de manera incorrecta como portadores de la
enfermedad se llaman positivos fa lso s (FP). La sensibilidad prevalencia x sensibilidad
PV = 1------------------------------------- (Ec. 3-18)
se puede calcular a partir de la frmula 100 TP/(TP + FN). (prevalencia) (sensibilidad) +
La especificidad se puede calcular de 100 TN/(TN + FP). (1 - prevalencia) (1 - especificidad)
Otras tres relaciones son importantes en la evaluacin
de pruebas de diagnstico: valor predictivo de una prue El PV+ para PSA para varias prevalencias y un lmite de
ba positiva (PV+), valor predictivo de una prueba negativa 4 .0 ng/ml (sensibilidad =, especificidad =) se muestran en
(PV~) y la eficiencia. PV+ es la fraccin de pruebas positivas el cuadro 3-4. Se puede observar que, incluso en la situa
que son positivos verdaderos: PV+ (%) = 100 TP/(TP + FP). cin en que la enfermedad tiene una prevalencia alta (0.2,
CAPTULO 3 CONTROL DE CALIDAD Y ESTADSTICA 63
CUADRO 3-3. C LCU LO D E M U ESTRA DE SEN SIB ILID A D , ESP EC IFIC ID A D , P V , PV Y EFIC IEN C IA
C A LC U LA D A PARA V A LO R ES DE PSA DE > 4 .0 NG/ML
NMERO DE PACIENTES CON PSA NMERO DE PACIENTES CON
POSITIVO (>4.0 ng/ml) PSA NEGATIVO (4.0 ng/ml)
o una quinta parte de la poblacin), la probabilidad de que (tasa positiva verdadera alta) y una especificidad alta (tasa
una prueba indique en verdad carcinoma es 27%. positiva falsa baja) y formar una curva COR con pun
Debido a que la seleccin de un nivel lmite para definir tos cerca de la esquina superior izquierda de la grfica. La
ha sido con mucha frecuencia arbitrario, es preferible cal curva A corresponde a tal prueba. La prueba representada
cular y graficar la sensibilidad y la especificidad para todos mediante la curva B, en la cual la tasa positiva falsa es igual
los valores de una prueba. Esto permite la comparacin a la tasa positiva verdadera, no transmite informacin de
de sensibilidades de dos o ms pruebas a especificidades diagnstico til. Cada vez ms evaluaciones clnicas de
definidas o la comparacin de especificidades para cier pruebas diagnsticas se presentan en la forma de curvas
tas sensibilidades. Las curvas caractersticas de operacin COR. La NCCLS ha publicado normas para pruebas de
del receptor (CO R), que son grficas de sensibilidad (tasa laboratorio de evaluacin clnica, incluso una gua com
positiva verdadera) contra 1 - especificidad (tasa positiva pleta para curvas COR.19
falsa), han sido usadas para comparar diferentes pruebas En la figura 3-15 se muestra la curva COR de los datos
de laboratorio.18 En la figura 3-14 se ilustran dos curvas de PSA de la figura 3-13. Tambin las concentraciones de
de COR distintas. La curva A es una curva COR para una PSA a las que se calcul la sensibilidad y especificidad.
prueba en la cual hay una separacin amplia entre los valo Se puede ver que ningn valor de PSA ofrece tanto sensi
res de prueba de pacientes con la enfermedad y sin sta. La bilidad alta como especificidad alta. En la actualidad los
curva B ilustra la curva COR obtenida de una prueba para urlogos recomiendan una variante ms especfica de la
la cual hay poca separacin entre pacientes enfermos y no. prueba de PSA: el porcentaje de PSA libre.20
La parte inferior izquierda de la curva, donde la tasa posi
tiva falsa est cerca de 0 (100% de especificidad) y la tasa
positiva verdadera est cerca de 0 (0% de sensibilidad),
corresponde a valores de prueba extremos en la poblacin
enferma. La parte superior derecha de la curva, en la cual
tanto la tasa positiva verdadera como la positiva falsa son
altas, corresponde a valores de prueba representativos en
la poblacin no enferma. Para valores de prueba interme
dios, una buena prueba debe tener una sensibilidad alta
0.001 0.1%
0.01 1.5%
0.10 14.0%
Tasa positiva falsa (especificidad 1)
0.2 26.8%
0.5 59.4% FIGURA 3-14. Curvas COR. La curva A corresponde a una prueba
con separacin entre los pacientes enfermos y no enfermos. La curva
Sensibilidad = 79%; especificidad = 46%. B corresponde a una prueba que no proporciona ms informacin.
64 PARTE I PRINCIPIOS BSICOS Y PRCTICA DE LA QUMICA CLNICA
M todo de evaluacin
Cuando se lleva un mtodo o instrum ento al interior de
la organizacin, el laboratorista debe volverse hbil en
su uso. Con antelacin a la evaluacin completa, se debe
practicar una evaluacin inicial, breve. Esta evaluacin
prelim inar debe incluir el anlisis de una serie de estn
dares para comprobar el alcance lineal y el anlisis de
duplicado (por lo menos 8 instrum entos) de dos con
troles para obtener estim aciones de im precisin de corto
Tasa positiva falsa plazo. Si algunos resultados no alcanzan las especifica
ciones publicadas en la hoja de inform acin de producto
FIGURA 3-15. Curva COR para PSA (ensayo Hybritech Tndem) para del mtodo (prospecto), se debe consultar a quin ela
el diagnstico de cncer de prstata. (Adaptada de Catalona WJ, bor el mtodo. Sin mejora en ste, carecen de sentido
Richie JP, deKernion JB y col. Comparacin de la concentracin de evaluaciones ms amplias.22 En la figura 3 -1 6 se muestra
antgeno prosttico especfico contra densidad de antgeno prosttico una forma simple de introduccin de datos que se puede
especfico en la deteccin temprana de cncer de prstata: curvas
usar para simplificar la recoleccin de datos de evalua
caractersticas de operacin del receptor. J Urol 1994; 152:2031.)
cin del mtodo.
Cuando se renen datos de evaluacin de mtodo,
la imprecisin e inexactitud de un mtodo se estiman y
M TO D O DE SELECCIN Y EVALUACIN comparan con el error mximo permisible, el cual por lo
comn se basa en criterios mdicos. Si la imprecisin o
M todo de seleccin
inexactitud excede este error mximo permisible, se con
Antes de que se introduzca al laboratorio una nueva prue sidera que el mtodo es inaceptable, y se debe modificar y
ba o metodologa, se debe reunir y considerar de mane evaluar de nuevo o rechazar. La imprecisin, la dispersin
ra cuidadosa la informacin administrativa y tcnica. La de mediciones repetidas respecto de la media, se debe a la
informacin se debe recopilar de muchas fuentes distin presencia de error analtico aleatorio. La imprecisin se
tas, incluso del fabricante y los representantes de ventas, estima a partir de estudios en los que las alcuotas de una
colegas, presentaciones cientficas y publicaciones. La muestra con una concentracin constante de analito se
informacin administrativa debe incluir costo del instru examinan de manera repetida. La inexactitud, la diferen
mento, rendimiento, volumen de muestra, requisitos de cia entre un valor medido y su valor verdadero, se debe a
personal, costo por prueba, tipos de muestras, tamao la presencia de error analtico sistemtico, que puede ser
del instrumento y requisitos de energa y ambientales. La constante o proporcional. La inexactitud se puede estimar
informacin tcnica debe incluir sensibilidad analtica, a partir de tres estudios: recuperacin, interferencia y un
especificidad analtica, lmite de deteccin, alcance lineal, estudio de mtodos de comparacin.
sustancias interferentes y estimaciones de imprecisin e
inexactitud.
Medicin de la imprecisin
La sensibilidad analtica o lm ite de deteccin se refiere
a la concentracin ms pequea que se puede medir con El primer paso en la evaluacin del mtodo es el estudio de
exactitud. Un grupo profesional ha definido el lm ite de precisin. Este estudio estima el error aleatorio relacionado
deteccin como igual a tres veces la desviacin estndar con el mtodo de prueba y seala algunos problemas que
del blanco, o bien como el lugar localizado tres desviacio afectan la reproducibilidad. Se recomienda que este estu
nes estndar arriba del blanco medido.21 La especificidad se dio se realice en un perodo de 10 a 20 das, incorporando
refiere a la capacidad del mtodo para medir slo el analito una o dos ejecuciones analticas por da.23 24 Una ejecucin
de inters. El alcan ce lineal (denominado a veces alcan ce an altica se define como un grupo de muestras de pacien
analtico o dinm ico) es el intervalo de concentracin en el tes y materiales de control que son analizados, evaluados
que la concentracin medida es igual a la concentracin y descritos juntos. La imprecisin se debe medir a ms de
real sin modificacin del mtodo. Mientras ms amplio sea una concentracin, con materiales de control que abarcan
el alcance lineal, menos frecuentes sern las diluciones de el intervalo de concentraciones con sentido clnico. Por
CAPITULO 3 CONTROL DE CALIDAD Y ESTADSTICA 65
FIGURA 3-16. Formulario de introduccin de datos para el experimento de evaluacin de mtodos. (Cortesa de Kristen Lambrecht.)
ejemplo, la glucosa se debe estudiar en los hipoglucmicos imprecisin dentro de la ejecucin, entre ejecuciones y
(-5 0 mg/dl) e hiperglucmicos (-1 5 0 mg/dl). total.25
Una vez que se renen los datos de precisin, se calcula
la media, la desviacin estndar y el coeficiente de varia
M edicin de la inexactitud
cin. El error aleatorio, o imprecisin, relacionado con el
procedimiento de prueba se indica mediante la desviacin Cuando se estima y considera adecuada la imprecisin de
estndar y el coeficiente de variacin. La imprecisin den corto plazo del mtodo, pueden empezar los experimentos
tro de la ejecucin se indica mediante la desviacin estn de exactitud.24 La exactitud se puede estimar de tres mane
dar de los controles analizados dentro de una ejecucin. ras: recuperacin, interferencia y estudios de comparacin
La imprecisin total se puede obtener de la desviacin de muestras de pacientes. El fabricante debe llevar a cabo
estndar de datos de control con uno o dos puntos de y documentar los estudios de recuperacin e interferencia.
datos acumulados por dia. Se puede usar una tcnica es Debido a que estos dos tipos de estudios pueden ser prohi
tadstica, anlisis de varianza, para analizar todos los datos bitivos en trminos de esfuerzo y materiales, por lo general
de precisin disponibles para proveer estimaciones de la se realizan en laboratorios clnicos ms grandes. Los expe
66 PARTE I PRINCIPIOS BSICOS Y PRCTICA DE LA QUIMICA CLNICA
rimentos de recuperacin mostrarn si un mtodo mide mtodo. Young17 y Siest y Galteau28 han publicado listados
todo o slo parte del analito. En un experimento de recu extensos de los efectos de frmacos en pruebas de laborato
peracin, se prepara una muestra de prueba aadiendo una rio. Las interferencias comunes (como hemoglobina, lpi-
alcuota pequea de analito concentrado en diluyente a la dos, bilirrubina, anticoagulantes y conservadores) tambin
muestra del paciente. Otra muestra del paciente se dilu deben ser probados por el fabricante. Glick y Ryder2930
ye aadiendo el mismo volumen de diluyente solamente. han presentado interferogramas para varios instrumen
Ambas muestras diluidas se analizan entonces mediante tos de qumica, estas grficas relacionan la concentracin
el mtodo de prueba. La cantidad recuperada es la dife medida del analito contra la concentracin interferente.
rencia entre los dos valores medidos. Se debe tener cui Ellos han demostrado que decenas de miles de dlares de
dado de asegurar que las muestras originales del paciente correccin del trabajo se pueden ahorrar mediante la adqui
se diluyan no ms de 10%; de esta manera, la matriz de sicin de instrumentos que reducen al mnimo la interfe
disolucin de las muestras es afectada en forma mnima. rencia de hemoglobina, triglicrido y bilirrubina.31
El mtodo comparativo se puede usar tambin para medir
las muestras diluidas24 y, por tanto, asegurar la preparacin Experim ento de com paracin de m todos
apropiada de la muestra. En el cuadro 3-5 se da un ejemplo
de un clculo de recuperacin para la muestra; los resulta En un estudio de comparacin de mtodos, las muestras del
dos se expresan como porcentaje recuperado. paciente se analizan mediante el mtodo que est siendo
El experimento de interferencia se usa para medir erro evaluado (mtodo de prueba) y uno comparativo. La cali
res sistemticos debidos a sustancias distintas del analito. dad del mtodo comparativo afectar la interpretacin de
Un material interferente puede causar varios errores siste los resultados experimentales. El mejor mtodo comparati
mticos en varias formas. El interferente puede reaccionar vo es el mtodo de referencia; un mtodo con inexactitud
con el reactivo analtico o puede modificar la reaccin entre insignificante en comparacin con su imprecisin. Los
el analito y los reactivos analticos. La hemolisis y la turbi- mtodos de referencia pueden ser laboriosos y tardados
dez pueden oscurecer la absorbancia del analito medido. (como el mtodo de referencia para colesterol). Debido a
En el experimento de interferencia,26 el interferente poten que la mayor parte de los laboratorios carecen del personal
cial se agrega a la muestra del paciente. En el cuadro 3-6 se y equipo para llevarlos a cabo, los resultados del mtodo de
muestra un clculo de interferencia. La concentracin del prueba se comparan por lo general con los del mtodo
material en potencia interferente debe estar en el intervalo de uso rutinario. El mtodo rutinario tendr ciertas inexac
de mxima concentracin. Si se observa un efecto, su concen titudes, tanto conocidas como desconocidas, dependiendo
tracin se debe disminuir para descubrir la concentracin de cun bien las haya estudiado el laboratorio o qu tan
a la que los resultados de prueba se invalidan primero. Los bien est documentado el mtodo en las publicaciones. Si el
materiales por probar se deben seleccionar de revisiones mtodo de prueba va a reemplazar al comparativo, se deben
de publicaciones y referencias recientes especficas del caracterizar bien las diferencias entre los dos mtodos.
^ ^ ml de estndar
ml de estndar + ml de suero
concentracin recuperada
Recuperacin = K X 100%
concentracin aadida
CAPTULO 3 CONTROL DE CALIDAD Y ESTADSTICA 67
^ ^ , , , , mi de estndar
Concentracin agregada = concentracin del estndar x
mi de estndar + mi de suero
Westgard y col.24 y la NCCLS32 recomendaron que con no proporcionan informacin acerca de la magnitud del
ambos mtodos se ejecuten entre 40 y 100 muestras, pero error existente en relacin con los lmites de error clnica
se deber abarcar el alcance clnico y representar muchas mente permisibles.6
condiciones patolgicas diferentes. Se recomiendan anli A pesar de las advertencias regulares acerca del mal
sis por duplicado de cada muestra con cada mtodo. Las uso del coeficiente de correlacin r, los laboratoristas lo
muestras duplicadas se analizarn en ejecuciones distintas siguen usando como un indicador de la aceptabilidad del
y en orden de anlisis distinto en las dos ejecuciones. El mtodo de prueba. El valor de r se puede incrementar si
anlisis mediante ambos mtodos se debe efectuar el mis aumenta el alcance de las muestras de pacientes. La apli
mo da, de preferencia dentro de 4 horas. cacin principal del coeficiente de correlacin en estudios
Si no se analizan los duplicados, la validez de los resul de evaluacin de mtodos debe ser para determinar el tipo
tados experimentales se debe comprobar al comparar de anlisis de regresin que se usar. Si el coeficiente de
los resultados de los mtodos de prueba y comparativo correlacin es 0.9 9 o mayor, el alcance de muestras de
despus del anlisis, identificando las muestras con dife pacientes es adecuado para el anlisis de regresin lineal
rencias grandes y, si es necesario, repitiendo el anlisis. Si estndar descrito en la seccin de estadsticas. Si r es
se comparan 40 muestras, dos a cinco se deben analizar menor que 0.99, entonces se debe usar otro anlisis de
diario durante un mnimo de 8 das. Si se comparan 100 regresin.1'3435 El anlisis de regresin lineal es por mucho
muestras, el estudio de comparacin se debe llevar a cabo ms til que la prueba t o la prueba F para evaluar datos
durante el estudio de replicacin de 20 das. de comparacin de mtodos.6 El error sistemtico cons
Una grfica de los datos del mtodo de prueba (grafica- tante se puede estimar a partir de la ordenada al origen
dos en el eje y ) contra los datos del mtodo comparativo y, el error sistemtico proporcional de la pendiente, y el
(graficados en el eje x) ayuda a ver los datos de compa error aleatorio del error sistemtico de la estimacin (sy/x) .
racin de mtodos (fig. 3-5). Los datos se deben graficar Si hay una relacin no lineal entre los valores de prueba
diario y adems en necesario inspeccionar la linealidad y y comparativo, entonces la relacin lineal slo se puede
los valores atpicos. De esta manera, las muestras origina usar en el alcance lineal. Debido a que los puntos atpicos
les pueden estar disponibles para volver a analizarlas. La son ajustados en gran medida en una regresin lineal, es
confirmacin visual de la linealidad suele ser adecuada; importante asegurar que estos puntos atpicos sean genui-
sin embargo, tal vez en algunos casos sea necesario eva nos y no resultado de error de laboratorio.
luar la linealidad de manera ms cuantitativa.33 Muchos Cuando se calculan todas las estimaciones de impre
analistas han empleado la prueba F, la prueba t por pares cisin e inexactitud, se comparan con lmites predefini
y el coeficiente de correlacin para la interpretacin de los dos o error analtico mdicamente permisible.16 Si el error
datos experimentales. La prueba F se usa para comparar la aleatorio y el error sistemtico son ms pequeos que el
magnitud de la imprecisin del mtodo comparativo. La error permisible, el desempeo se considera aceptable. Si
prueba t por pares se emplea para comparar la magnitud el error es ms grande que el error permisible, se deben
del sesgo (la diferencia entre las medias de la prueba y la reducir los errores o rechazar el mtodo.
del mtodo comparativo) con la del error aleatorio. Tanto El error analtico permisible representa el error total e
la prueba F como la prueba t indican slo si existe una incluye componentes del error aleatorio y del sistemtico.
diferencia estadstica significativa entre las dos desviacio Se han empleado muchos mtodos para estimar el error
nes estndar o medias, de manera respectiva. Las pruebas mdicamente permisible, incluso usar mltiplos del inter-
68 PARTE I PRINCIPIOS BSICOS Y PRCTICA DE LA QUIMICA CLNICA
El almacenamiento de la muestra puede originar erro dos de referencia u otros muy especficos. La respuesta
res en los resultados descritos. Para cada analito se deben analtica comparativa del calibrador y las muestras provee
establecer normas sobre los requisitos para muestras. la base para calcular valores para muestras de pacientes. El
stas podran verse afectadas por la evaporacin (p. ej., mismo material no debe servir como calibrador y control.
electrlitos), exposicin a la luz (bilirrubina), refrigera El error de laboratorio se puede reducir al mnimo si se
cin (lactato deshidrogenasa [LD]) y congelamiento. Los presta atencin a los procedimientos y tcnicas de labo
errores de copiado podran ocurrir en cualquier etapa del ratorio adecuados. El sistema de control de calidad para
procesamiento de las muestras. Aunque el uso de com metodologas de prueba individuales se puede enfocar en
putadoras ha simplificado las tareas administrativas, una el control de variables especficas de prueba. Los factores
muestra podra ser confundida por otra. Es obvio que tales posanalticos consisten en el registro e informe de datos
errores se deben reducir al mnimo. del paciente al mdico dentro del intervalo de tiempo
El laboratorista puede al menos controlar los factores apropiado. Con la automatizacin e informes de pacientes
analticos, que en primer lugar dependen de la instrumen generados por computadora, la incidencia de errores en la
tacin y los reactivos. Un programa de mantenimiento fase posanaltica ha disminuido en gran medida.
preventivo diario y mensual es esencial para cada pieza de
equipo. Las comprobaciones de funcionamiento del ins
Control de calidad
trumento efectuadas de modo rutinario deben ser detalla
das en el manual de procedimiento y se debe documentar El propsito del sistema de control de calidad es m onito
su desempeo. La NCCLS ha elaborado estndares para rear procesos analticos, detectar errores analticos duran
monitorear variables como la calidad del agua,59 la calibra te el anlisis y evitar informar valores incorrectos del
cin de balanzas analticas, la calibracin de material de paciente. Los mtodos analticos se monitorean de forma
vidrio volumtrico y pipetas, la estabilidad de la energa normal al medir materiales de control estables y compa
elctrica,60 y la temperatura de instrumentos controlados rar despus los valores medidos con su valor esperado.
termostticamente.61 Se debe anotar la fecha de cundo se El presupuesto de laboratorio debe reflejar la importan
reciben los reactivos y cajas de accesorios, y tambin cun cia del control de calidad. El compromiso momentneo
do fueron abiertos. Los lotes nuevos de reactivos deben ser es importante a fin de asegurar un sistema adecuado para
probados junto con los lotes de reactivos viejos antes de el monitoreo y mejoramiento del desempeo del labo
ser usados para el anlisis. ratorio. El sistema estadstico usado para interpretar las
Si los reactivos se van a usar como estndares o cali concentraciones medidas de controles se llama sistem a de
bradores, es necesario emplear productos qumicos de la control de calidad estadstica. A principios del siglo pasado
ms alta pureza, grado reactivo o grado A m erican C hem ical Shewhart63 estableci los principios de control de calidad
Society (ACS). Diferentes tipos de estndares estn dispo estadsticos. En 1950, Levey y jen n in g s64 emplearon estos
nibles. Un estndar prim ario es una sustancia no higros mismos principios bsicos cuando introdujeron el control
cpica de alta pureza que puede ser secada, de preferencia de calidad estadstico al laboratorio clnico. Desde 1950,
a 104 a 110C sin un cambio de composicin. As, los los sistemas de control de calidad estadstico en el labora
estndares primarios se pueden secar y despus pesar para torio han experimentado muchas modificaciones.
preparar soluciones de concentraciones seleccionadas. El error analtico puede ser separado en componentes
Cuando se compran, los estndares primarios son sumi de error aleatorio y error sistemtico (fig. 3-27). El error
nistrados con un registro de anlisis para elementos con aleatorio afecta la precisin y es la base para variar diferen
taminantes, que no deben exceder 5% en peso. Algunos cias entre mediciones repetidas. Los incrementos de error
estndares han sido certificados como puros por varios aleatorio pueden ser causados por variaciones en la tcnica.
cuerpos oficiales como el N ational Institute f o r Standar El error sistem tico surge de factores que contribuyen a una
dization and Technology (NIST) y el C ollege o f A m erican diferencia constante, ya sea positiva o negativa. El error
Pathologists (CAP). sistemtico puede ser causado por varios factores, incluso
Un estndar prim ario es la sustancia de ms alta pure estndares o reactivos mal preparados, instrumentacin
za disponible en la actualidad que puede ser pesada con defectuosa y procesos escritos de manera deficiente.
exactitud de manera analtica. Un estndar secundario es Los materiales de control d e calidad se deben compor
aqul cuya concentracin suele determinarse mediante tar como muestras reales, estar disponibles en cantidad
anlisis por medio de un mtodo de referencia aceptable suficiente para durar por lo menos un ao, ser estables
que se calibra con un estndar primario. Su concentracin durante ese perodo, estar disponibles en volmenes de
no se puede determinar de manera directa a partir del peso viales convenientes y tener una variacin mnima en con
del soluto y el volumen de la solucin. Los calibradores centracin y composicin de un vial a otro.65 El material
se emplean en los procesos de calibracin para establecer de control debe parecerse mucho a la muestra que est
concentraciones de muestras de pacientes. Los materiales simulando tanto en el aspecto fsico como qumico. El
de calibracin deben satisfacer los requisitos de identidad, material de control se dehe probar de la misma manera
etiquetado y desempeo de la norma NCCLS Tentative que las muestras de pacientes. Los materiales de control
G uideline f o r Calibration M aterials in Clinical Chemistry deben abarcar el alcance clnicamente importante de las
(C 2 2 ).62 Siempre que sea posible, los calibradores deben concentraciones de analitos. Los niveles de control deben
tener sus concentraciones asignadas por el uso de mto estar en los niveles de decisin apropiados; por ejemplo,
CAPTULO 3 CONTROL DE CALIDAD Y ESTADSTICA 71
atpicos en los nuevos datos de control, estas estimacio 3 -1 0 se emplearon de manera frecuente reglas de control y
nes iniciales podran no ser del todo confiables y se deben sus abreviaturas. Las abreviaturas tienen la forma A , don
revisar a medida que se tienen ms datos. Al cambiar a de A es un smbolo para una estadstica o es el nmero de
un nuevo lote de material similar, muchos laboratoristas observaciones de control por ejecucin analtica y L es el
utilizan la media recin obtenida como el objetivo pero lmite de control.70 por ejemplo, una violacin de regla l 2s
retienen la desviacin estndar previa empleada. Confor indica la situacin en la cual una observacin de control
me se obtienen ms datos, todos se deben promediar para est fuera de los lmites x 2s. Una ejecucin an altica se
derivar las mejores estimaciones de la media y la desvia define como un conjunto de muestras de control, y del
cin estndar.68 paciente, probadas, evaluadas y descritas juntas.
Los valores de control pueden ser comparados de forma De manera ideal, si un mtodo est bajo control, nin
numrica o visual con lmites estadsticos en una grfica guna de las reglas de control debe ser violada y no debe
de control. Esta grfica es simplemente una extensin de haber rechazo de la ejecucin analtica. Desafortunada
la curva de distribucin gaussiana (fig. 3-18), con el tiem mente, algunas ejecuciones analticas sern rechazadas
po expresada en el eje x. El eje y por lo general se grada como fuera de control aun cuando no haya error analtico
para proveer concentraciones hechas de x - 3s a x + 3s. adicional. Por ejemplo, cuando se usa la regla de control
Las lneas horizontales que corresponden a mltiplos de s l 2s con un solo control que se analiza por ejecucin ana
se trazan alrededor del eje x. Las lneas 2s corresponden a ltica, entonces 5% de las ejecuciones estarn fuera de los
los lmites de 95.5% para el control. Si el proceso analtico lmites 2s cuando slo la variacin analtica est presen
est bajo control, casi 95% de los puntos estarn dentro te. Cuando ms de un control es analizado por ejecucin
de estos lmites y alrededor de 5% de los puntos estarn analtica y no se presenta un error adicional, existe una
fuera de estos lmites. Los lmites 3s corresponden a casi probabilidad alta de que por lo menos un control estar
los lmites de 99.7% . Si el proceso est bajo control, no fuera de los lmites 2s. Cuando se usan dos controles, hay
ms de 0.3% de los puntos estarn fuera de los lmites casi una probabilidad de 10% de que por lo menos un con
3s. Se considera que un mtodo analtico est bajo con trol quede fuera de los lmites 2s; cuando se usan cuatro
trol cuando hay distribucin simtrica de valores de control controles, hay una probabilidad de 17%. Por esta razn,
respecto de la media y hay pocos valores de control fuera muchos analistas no investigan el mtodo analtico si un
de los lmites de control 2s. Algunos laboratorios definen solo control excede los lmites 2s cuando se usan dos o
que un mtodo analtico est fuera de control si un valor ms controles. Ellos slo reanalizan los controles o toda la
de control cae fuera de sus lmites 2s. Otros laboratorios ejecucin analtica.
han empleado los lmites 2s como lmites de advertencia Desafortunadamente, este mtodo intuitivo para el
y los 3s como lmites de error. Para estos laboratorios, un control de calidad logra un nivel desconocido de calidad.
valor de control entre 2s y 3s alertara al tecnlogo de un Lo que se necesita es un sistema que seale de manera
posible problema. Un punto fuera de los lmites 3s reque confiable la presencia de error analtico significativo pero
rira accin correctiva. que responda a errores pequeos. Definir tal sistema de
Se han empleado criterios diferentes para juzgar si los control requiere comprender la respuesta de las reglas de
resultados de control indican situaciones fuera de con control al error analtico.
trol. Westgard y Grothhave estudiaron las capacidades de
deteccin de errores de la mayor parte de estos criterios.69 Respuesta de las reglas de control al error
Ellos emplearon el trmino regla de control para indicar
el criterio para juzgar si el proceso analtico est fuera de Westgard y asociados69 han estudiado la respuesta de la
control. Para simplificar la comparacin de los distintos reglas de control, ya sea por separado o en grupos, a la pre
valores de control, Westgard y asociados emplearon abre sencia de error sistemtico o aleatorio. Los diferentes pro
viaciones para las diferentes reglas de control. En el cuadro cedimientos de control (grupos de reglas de control) tienen
FIGURA 3-18. Grfica de control que muestra la relacin de lmites de control con la distribucin gaussiana. Se grafi-
can los valores de control diarios, y muestran ejemplos de un desplazamiento, un cambio abrupto en el proceso analtico
y una tendencia, un cambio gradual en el proceso analtico.
CAPTULO 3 CONTROL DE CALIDAD Y ESTADSTICA 73
R4S Rechace una ejecucin si el alcance o diferencia entre Detecta errores aleatorios; emplela
la observacin de control mxima y mnima de entre dentro de la ejecucin
las 4 a 6 observaciones de control excede 4s
respuestas distintas, dependiendo de las reglas de control la probabilidad en el eje y es la Ped. En la figura 3-19A, Ped
y el nmero de observaciones de control (n) empleadas. para la regla de control 1 y un error sistemtico de 2s es
Westgard y Groth71 simularon el anlisis de materiales de 0.5 si se analiza un control. Las grficas de funcin expo
control mediante instrumentos con distintos niveles de nencial se pueden usar para determinar la efectividad de
error. Se realizaron un gran nmero de simulaciones en varios procedimientos de control en la deteccin de errores
cada nivel de error, con la proporcin de situaciones fuera analticos. Se requieren dos conjuntos de funciones expo
de control tabuladas y gradeadas despus contra el tamao nenciales, uno para el error sistemtico (desplazamiento
del error. Las grficas resultantes, que ilustran la probabi de la media) y uno para el error aleatorio (incremento en
lidad de rechazo contra el tamao del error analtico, se la imprecisin). En la figura 3-19B se muestra una fami
llaman funciones exponenciales. De manera ideal, una regla lia de funciones exponenciales para la deteccin de error
de control debe tener una probabilidad de 0% de detectar aleatorio mediante la regla de control l 2s. Debido a que los
errores pequeos y una probabilidad de 100% de detec procesos analticos siempre contienen error aleatorio, el
tar error significativo. En la figura 3-19A se muestra una eje x se origina en ls. En la figura 3-19B, Ped para la regla
grfica de una familia de funciones exponenciales para la de control 1 y una duplicacin del error aleatorio es 0.3
deteccin de error sistemtico mediante la regla de control si se analiza un control. El m ejor procedimiento de control
l 2s. La probabilidad de rechazo se grfica contra el tamao es el que tiene la menor Pfr y la mayor Ped para detectar
del error sistemtico. El tamao del error sistemtico vara errores analticos de un tamao que puede comprometer
de 0 a 5s, donde s es la desviacin estndar. Las diferen la calidad de los resultados analticos. En la figura 3-19 se
tes lneas corresponden a distintos nmeros de controles muestra la funcin exponencial para procedimiento ideal.
analizados. Cuando se emplea un control y no hay error, la Aunque la regla de control 1, da como resultado una alta
probabilidad de rechazo en ausencia de error es casi de 5%. deteccin de errores sistemticos de tamao moderado, su
La probabilidad de rechazo cuando no est presente nin Pfr es tan alta que resulta inaceptable. La figura 3-20A y B
gn error se llama probabilidad de rechazo falso (P ). La muestra las funciones exponenciales para la regla de con
probabilidad de deteccin de error (P d) es la probabilidad trol 1 para error sistemtico y aleatorio, respectivamente.
de rechazar una ejecucin analtica como fuera de control La regla de control 13 da menor respuesta a incrementos
cuando existe un error. La Ped se puede determinar para moderados en el error sistemtico pero tiene una Pfr baja.
cualquier tamao de error al rechazar el tamao del error Westgard y asociados han sugerido una aplicacin
en un eje y erigir una lnea vertical que interseca la curva manual de una combinacin de reglas de control con
de funcin exponencial para la n deseada. De esta intersec por lo menos dos observaciones de control por ejecucin
cin, se traza una lnea horizontal hasta el eje y. El valor de analtica.68 Adems de usar la regla 1 como una regla de
74 PARTE I PRINCIPIOS BSICOS Y PRCTICA DE LA QUIMICA CLNICA
O
Q.
Regla de control 13s Regla de control 13s FIGURA 3-20. Curvas de funcin exponencial
para la regla de control 13s para el error sistemti
co (A) y error aleatorio (B). (Proporcionada por P.
Douville.)
O
0.
advertencia y la regla 1 para rechazo, este sistema tam contrario, se aplican las otras reglas en este orden: 22s, 4 ls,
bin incluy las reglas 22s, R4s, 4 y 10-. Las reglas de con- 10- y R4_. La regla 2 2s se invoca siempre que dos observa
teo (las reglas 22s, 4 ]s y 10-) son efectivas en la deteccin de ciones de control consecutivas del mismo lado de la media
error sistemtico. Como las reglas 4 1Sy 10 detectan cam bios excedan los lmites de control x + 2s o x - 2s. Esta regla
pequeos que suelen carecer de im portancia clnica, exhibi responde en la mayor parte de los casos a errores sistem
dos p or la m ayor p arte de los analizadores, no se recom ienda ticos. La regla 22s se aplica al inicio a las observaciones de
su uso. Las reglas R y 1 son efectivas en la deteccin de control dentro de la ejecucin analtica ms reciente (en
error aleatorio. La regla 13 tambin puede detectar error los materiales y dentro de la ejecucin). La regla se puede
sistemtico. Los ejemplos de violaciones de las reglas ante aplicar entonces a las dos ltimas observaciones en el mis
riores se muestran en la figura 3-21. mo material de control pero de ejecuciones consecutivas
Para aplicar de forma manual el procedimiento de con (dentro de los materiales y en las ejecuciones) o se puede
trol multirreglas clsico de Westgard, se evalan los nuevos aplicar a las dos ltimas observaciones consecutivas de los
resultados de control para asegurar que estn dentro de sus diferentes materiales de control (en los materiales y en las
lmites 2 s . Si es as, no se requiere ms inspeccin. De lo ejecuciones).
FIGURA 3-21. Ejemplos de violaciones de las seis reglas que comprenden el procedimiento de control multirreglas de Westgard.
76 PARTE I PRINCIPIOS BSICOS Y PRCTICA DE LA QUMICA CLNICA
La regla 4 ls se viola cuando cuatro observaciones de temtico. Cuando se emplea con sistemas imprecisos, este
control consecutivas del mismo lado de la media exceden procedimiento de mltiples reglas ofrece al laboratorio
los lmites de control x + ls o x - ls. Tiene una mayor res una m ejor deteccin de errores y menor rechazo falso de
puesta a errores sistemticos. Estas reglas se aplican den ejecuciones analticas. Se adapta con facilidad a procedi
tro los materiales y las ejecuciones, y en los materiales y mientos de control existentes y se ha vuelto muy popular
las ejecuciones. La regla 10- es sensible a error sistemtico desde su descripcin inicial en 1981.
y se viola cuando 10 observaciones de control consecuti La aplicacin del procedimiento multirreglas conlleva
vas caen en un lado de la media. Esta regla se aplica den lo siguiente:
tro de los materiales y en las ejecuciones, as como en los
1. El clculo de las medias y las desviaciones estndar de
materiales y en las ejecuciones.
las diferentes concentraciones de materiales de control.
La regla R4s se viola cuando el alcance o diferencia entre
2. La construccin de grficas de control, con lneas que
las observaciones de control superior e inferior dentro de
indican los lmites de desviacin estndar 0, 1 , 2 y 3.
la ejecucin pasa de 4 . Esta regla es ms sensible a error
3. Anlisis de diferentes niveles de material de control en
aleatorio o mayor imprecisin. La regla se invoca cuando
cada ejecucin analtica, con la graficacin de los datos
una observacin de control material excede un lmite +2s
de control en la grfica apropiada.
y la otra observacin excede un lmite -2 s . Las dos obser
4. Aceptar la ejecucin analtica si cada observacin cae
vaciones estn fuera de los lmites 2s pero en direcciones
dentro de los lmites 2s.
opuestas, lo que da como resultado un alcance que excede
5. Comprobar si se violan las reglas 1 , 2ls, R4s y 10- cuan
4s. La regla del alcance est diseada para uso dentro de
do uno de los materiales de control est fuera de sus
una sola ejecucin con un mximo de cuatro a seis obser
lmites 2s. Si no se viola ninguna de las reglas, se acepta
vaciones de control, no en las ejecuciones.
la ejecucin. Si ha ocurrido la violacin de una regla,
La combinacin de las reglas de control l v l 3s, 2 ,
se rechaza la ejecucin, y se determina el tipo de error
4 j , 10- y R+s empleadas junto con una grfica de control
ms probable (aleatorio contra sistem tico). Una vez
se conocen como procedim iento multirreglas de Shewhart.
que se identifica y corrige la condicin de error, se ana
Las funciones exponenciales para este procedimiento de
lizan de nuevo las muestras de control y del paciente.
varias reglas se muestran en la figura 3-22. Este procedi
miento multirreglas produce mayor deteccin de errores En la figura 3-23 se muestra el diagrama de control de
sobre el uso de la regla l 3s solamente. La inclusin de las dos niveles que simplifica la aplicacin de un procedimien
reglas 1 y R4s mejora la deteccin del error aleatorio, y las to multirreglas. Esta aplicacin a un sistema de control de
reglas 22s, 4 ls y 10- incrementan la deteccin de error sis dos niveles se ilustra en la figura 3-24. La interpretacin
Multirreglas (12s, 13s, 22s, 4ls, 10-, R4s) Multirreglas (12s, 13s, 22s, 4ls, 10-, R J
1.0,
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FIGURA 3-23. Grfica de control de dos niveles para la ejecucin de procedimientos multirreglas.
NJ
NJ
78 PARTE I PRINCIPIOS BSICOS Y PRCTICA DE LA QUMICA CLNICA
172
m ,
. #
158
#
*
164
x= 160 * #
*
156
152
148 I 2 3 4 5 6 7 8 9 10 IM 2 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 282930
t t t t t t t t
106
104 # #
#
102
*
x = 100
# #
#
98
*
96
94 FIGURA 3-24. Datos de control para lustrar el uso del
I 2 3 4* 5 6 7 8 9 10 II 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30
procedimiento multirreglas. Las flechas corresponden
} t t t
al da en los que hay violaciones de por lo menos una
Material de concentracin baja regla.
de los datos de control se resume en el cuadro 3-11. Cabe principio recomend la regla de seleccin l 2s para reducir
hacer notar que la regla R4s no se aplica en las ejecuciones. el nmero de observaciones de control que el tecnlogo
El lector sagaz notar que el procedimiento mutirreglas mdico tena que evaluar con las otras reglas de control.
detectar las violaciones de la reglas 10- o 4 ls slo si hay As, la regla de seleccin 1 redujo la labor del tecnlogo.
una violacin de la regla 1 . A veces, las reglas 10- y 4 ls En la actualidad, el anlisis de un solo producto de con
pueden ser violadas sin la activacin de la regla de adver trol en un analizador grande multianalito producir 20 a
tencia l 2s. Tales sucesos sern poco frecuentes e indica 30 diferentes resultados de control, uno para cada anali
ran errores sistemticos pequeos que en algn momento to. Incluso en ausencia de error analtico incrementado,
detectara el procedimiento multirreglas. hay una probabilidad mayor de 50% de que por lo menos
Las aplicaciones automatizadas del procedimiento muti uno de los analitos quede fuera de los lmites +2s. Como
rreglas no deben usar la regla de seleccin 1 Westgard al los instrumentos actuales son ms precisos que aqullos
que se empleaban cuando se describi primero el proce aplicacin de las prcticas de control de calidad optimiza
dimiento de control multirreglas, la violacin de la regla das, especficas del analito, redujeron la frecuencia de las
l 2s debe ser ignorada, a menos que se relacione con una ejecuciones rechazadas falsamente, los gastos de control
violacin de regla 2ls o L . Con frecuencia la deteccin del de calidad, e incrementaron la eficiencia de su analizador
valor atpico l 2s se deduce al analizar de nuevo el analito qumico de alto volumen.76 Su programa de control de
fuera de control, un procedimiento dilatorio con ningn calidad actual, especfico del analito, comprende la regla
valor agregado. Se recomienda no usar la regla 1 siempre 13 5s para el sodio, potasio, glucosa y nitrgeno ureico san
que los datos de control de calidad sean interpretados por guneo; la regla l 25s para albmina, cloruro y dixido de
un programa de computadora. carbono, y la regla l 23s para pruebas de calcio, que se eje
Las funciones exponenciales de la figura 3-22 muestran cutan por duplicado y se promedian.
que cuando se emplea el procedimiento multirreglas con Distintos mtodos se pueden usar para deducir estas
cuatro observaciones, detectar errores de tamao mode reglas de control (fig. 3-25). Un programa de computado
rado (p. ej., un cambio 2s o una duplicacin del error alea ra disponible a nivel comercial77 permite al laboratorista
torio) con una probabilidad de casi 50%. Los errores ms especificar un analito, su imprecisin y el error permisible
pequeos no se pueden detectar de manera confiable. Los mdicamente (de ordinario los lmites de prueba de com
procedimientos de control ms sensibles se requieren para petencia segn lo especificado por CLIA 88). El programa
ensayos en los que un desplazamiento 2s o una duplicacin propone entonces procedimientos de control de calidad
de la desviacin estndar causar clasificaciones errneas ptimos para ese analito. En la actualidad, la mayor parte
del estado clnico. Por ejemplo, la desviacin estndar de de los laboratorios emplean el mismo subconjunto de pro
muchos anlisis de calcio es 0.15 mg/dl para un calcio de cedimiento de control multirreglas para todos sus analitos:
alcance normal. Un desplazamiento positivo de 0.30 mg/ la regla 1 para la deteccin de error aleatorio y la regla 22s
di fcilmente puede colocar a muchos pacientes normo- para la deteccin de error sistemtico. Esta combinacin de
calcmicos en la categora hipercalcmica. La sensibilidad dos reglas es quiz el procedimiento de control ms comn
del procedimiento multirreglas se puede incrementar para empleado en los laboratorios clnicos de Estados Unidos.
detectar errores sistemticos ms pequeos al aumentar
el nmero de observaciones consideradas. Se pueden usar Uso de datos del paciente para control de calidad
otros procedimientos de control. El procedimiento de
control de media y alcance72 tiene una capacidad bastante Varios algoritmos han sido propuestos para manejar datos
mayor para la deteccin de error si cada material de con del paciente a fin de determinar si han ocurrido errores de
trol se analiza por duplicado en cada ejecucin analtica. proceso o preanalticos. Esta seccin se centra en dos proce
Prcticamente, este procedimiento requiere la aplicacin dimientos de control distintos que usan datos del paciente:
de computadoras porque con cada ejecucin analtica se el promedio de datos del paciente y comprobaciones delta.
necesitan la media y el alcance. Otros procedimientos de control de calidad que emplean
La tcnica de suma acum ulada (cusum) ha sido descrita datos del paciente incluyen la revisin de resultados lejanos
para uso rutinario en el laboratorio;73 tambin requiere la individuales para identificar errores de copiado ntegros (lla
aplicacin de computadoras. El procedimiento cusum es mados a veces com probaciones lmite) y el anlisis de rutina
sensible a error sistemtico y se puede usar con la regla 1 . de muestras duplicadas, como se hace con frecuencia en
Cusum es sensible a cambios persistentes pequeos que estudios de endocrinologa. Algunos laboratorios usan an
ocurren por lo general en el moderno analizador de fre lisis por duplicado de otro tipo: comparaciones paciente-
cuencias de calibracin baja. Hay otros procedimientos de muestra. Estas comparaciones requieren el anlisis regular
control que emplean promedios y desviaciones estndar ali de muestras divididas en instrumentos que miden el mismo
sados de forma exponencial.71,74 Estos procedimientos han analito. Las diferencias entre instrumentos que exceden los
sido puestos en prctica en sistemas de control de calidad lmites predeterminados se investigan y corrigen.
de informacin de laboratorio disponibles comercialmente. Hoffman y Waid, en 1965, describieron el uso de pro
Muchos de los analizadores actuales logran exactitud y medios de datos del paciente.78 En su mtodo promedio
precisin muy alta. La magnitud de la desviacin estndar de normales, se seal una condicin de error cuando el
analtica puede ser pequea cuando se compara con la del promedio de datos consecutivos del paciente, con distri
error permisible desde el punto de vista mdico (p. ej., bucin central, estaba ms all de los lmites de control
la desviacin estndar de la glucosa en ciertos analizado establecidos para el promedio de los datos del paciente.
res se aproxima a 1-2 mg/dl, que es mucho ms pequea La hiptesis que sustenta el promedio de normales es que
que el error mdicamente permisible de 10 mg/dl). Slo la poblacin de pacientes es estable. Cualquier cambio
se requiere detectar errores muy grandes cuando estos sera, por consiguiente, secundario a un error analtico
analizadores miden analitos como la glucosa. La sensibi sistemtico. Cembrowski, Chandler y Westgard estudia
lidad del procedimiento de control se debe reducir en vez ron el uso del promedio de pacientes con simulaciones de
de incrementar. Una forma de hacer esto es mediante la computadora y encontraron que sus capacidades de detec
incorporacin de pocas observaciones; por ejemplo, usar cin de errores dependan de varios factores.79 Los ms
la regla de control l 3s o incluso expandir los lmites de importantes fueron el nmero de resultados del paciente
control (p. ej., usar los lmites de control 3 .5 s [es decir, promediados y la relacin entre la desviacin estndar de
la regla de control l 35s]).75 Koch y col mostraron que la la poblacin de pacientes (s ) y la desviacin estndar del
80 PARTE I PRINCIPIOS BSICOS Y PRCTICA DE LA QUMICA CLNICA
Cuadrcula de
seleccin de E s t a b il id a d d e p r o c e s o ( f r e c u e n c ia d e e r r o r e s , f )
CC multirreglas
de Westgard > 10% 2% - 10% <2%
<2.0s 1 3S / 2 2 S / R 4 S / 4i s
N= 6 N =4 Ns 2
13 S /2 2 S / R4 S / 4 1 S / 8 X 13 S/2 2 S/ R 4 S /4 1 S 1 3 S / 2 2 S / R 4 S / (4 1 S W )
N =4 N =2 N =2
FIGURA 3-25. Cuadrcula de seleccin de CC para el algoritmo multirreglas de Westgard. (Reproducida con autorizacin de J.O. Westgard.)
mtodo analtico (s ). Otros factores importantes incluye positivos a causa de desviaciones grandes en los valores de
ron los lmites para evaluar la media (lmites de control), laboratorio secundarias a enfermedad o terapia.
los lmites para determinar qu datos del paciente se pro
mediaban (lmites de truncamiento) y la magnitud de la Control de calidad externo
poblacin que yace fuera de los lmites de truncamiento.
Cembrowski y col recomendaron que las ejecuciones de Los programas de prueba de competencia proveen de forma
computadora de la tcnica se emplearan para comple peridica muestras de concentraciones desconocidas de ana
mentar el control de calidad de la muestra de referencia litos a laboratorios participantes. La participacin en estos
y la aplicacin de computadora recomendada. Douville, programas es por orden del gobierno de EUA bajo CLIA
Cembrowski y Strauss evaluaron los promedios de datos 88. El CAP y la American Association o f Bioanalysts son los
endocrinos del paciente y demostraron capacidades altas dos proveedores ms grandes de programas de prueba de
de deteccin de errores para la prueba del tiroides.80 competencia en Estados Unidos. Proporcionan muestras
Cembrowski y col investigaron el uso del intervalo para las principales reas de qumica cualitativa y cuantita
amnico para control de calidad y encontraron que la prc tiva, incluso qumica general, qumica de protenas, anlisis
tica de reanalizar especies simples con intervalos amnicos de orina, toxicologa y endocrinologa. Las muestras para
anormalmente altos o bajos daban como resultado la repe anlisis cuantitativo contienen mltiples analitos y suelen
ticin innecesaria de analizar muestras de pacientes.81 Con proporcionarse como materiales liofilizados. Una vez que
frecuencia, estas muestras simples tenan intervalos am el laboratorio recibe sus muestras, debe analizar y devolver
nicos anormales. Un procedimiento de control mejorado sus resultados dentro de un tiempo especfico a un centro
consiste en promediar ocho intervalos amnicos de pacien de computadoras para recopilacin y comparacin con los
te consecutivos y comparar el promedio con los lmites de resultados de otros laboratorios participantes. El centro
control para el promedio de intervalos amnicos.82 de computadoras establece valores objetivo y alcances de
En otro mtodo de control de calidad se emplean datos resultados aceptables con base en el promedio de valores de
del paciente, la comprobacin delta, en el que el resultado participantes o valores de laboratorios de referencia.
ms reciente de un paciente se compara con el valor previo. Para el programa de competencia del CAP, se calcu
La diferencia entre datos de laboratorio consecutivos (del lan las medias y desviaciones estndar de los resultados
tas) se calcula y se compara con los lmites establecidos de de laboratorios semejantes (instrumentos y metodologas
manera anticipada.83,84 Se investiga una diferencia que exce similares). Entonces se descartan los valores ms all de
de estos lmites; esta diferencia es el resultado de mezclar tres desviaciones estndar de la media, y se calculan de
la muestra o de cambios reales en los resultados de prueba nuevo la media y la desviacin estndar. Un resultado par
del paciente. La diferencia se calcula por lo comn de dos ticipante se clasifica como aceptable si la diferencia entre
maneras: como una diferencia numrica (valor actual menos el resultado y la respuesta objetivo (normalmente la media
el ltimo valor) y como una diferencia porcentual (diferencia semejante) es menor que el error permisible. CLIA 88 ha
numrica por 100 dividida entre el valor actual). Wheeler y definido errores permisibles para un gran nmero de de
Sheiner evaluaron el desempeo de varios mtodos de com analitos regulados;41 algunos se muestran en el cuadro 3-7.
probacin delta y clasificaron a cada comprobacin inves Estos errores permisibles se denominan a veces lmites
tigada como un positivo verdadero o falso.83 Encontraron fijos y se expresan en unidades de medicin del analito
que el porcentaje de positivos verdaderos iba de 5 a 29%, (com o 0 .5 mmol/L de la media para el potasio) o como
y concluyeron que los mtodos de comprobacin delta porcentajes (como 1 0 % para colesterol total).
podan detectar errores que de otro modo se omitan, pero Para un nmero mucho ms pequeo de analitos (como
a costa de investigar muchos falsos positivos. En su pobla la hormona estimuladora de la tiroides), CLIA 88 tiene
cin de hospital de atencin terciaria, hubo muchos falsos lmites definidos de forma estadstica para la aceptabili
CAPTULO 3 CONTROL DE CALIDAD Y ESTADSTICA 81
dad. Para estos analitos, el resultado participante es acep control de calidad internos, se deben revisar. Las mezclas
table si cae dentro de 3 ndices de desviacin estndar de muestras de competencia o de muestras de competen
(IDE) de la media del grupo. La comparacin con los lm i cia y clnicas se deben descartar. Siempre que sea posible,
tes estadsticos requiere el clculo de la desviacin de los las alcuotas de muestras de estudio se deben congelar y
resultados de estudio respecto de la media, que se expresa guardar. Si los resultados del estudio difieren de forma
en nmeros de IDE arriba o abajo de la media. El IDE es importante de instrumentos semejantes, estas alcuotas se
la diferencia numrica entre los resultados de un laborato deben volver a analizar. Los resultados que an se desvan
rio y la media, dividida entre la desviacin estndar. Una significativamente despus de repetir el anlisis indican
desviacin fuera de 3 IDE suele considerarse inaceptable un sesgo de largo plazo. Si las desviaciones son variables
porque tales desviaciones ocurrirn slo 0.3% de las veces en magnitud y direccin, puede haber un problema con la
como resultado de la probabilidad. imprecisin (error aleatorio). En el caso de que el anlisis
En comparacin con los lmites estadsticos, las violacio repetido produzca resultados satisfactorios, el error quiz
nes de los criterios de lmites fijos con frecuencia demostra represente un error aleatorio o sesgo transitorio encon
rn la necesidad de reemplazar instrumentacin anticuada trado durante el periodo de prueba. En la figura 3 -2 7 se
o poco confiable. Ehrmeyer y Laessig han empleado simu muestra una forma de estudio que el tecnlogo qumico
lacin con computadora con el fin de evaluar la capacidad puede usar para revisar estudios de competencia.
de diferentes esquemas de prueba de competencia para La prueba de competencia externa se emplea tambin
detectar laboratorios cuyo desempeo es deficiente. El para determinar estimaciones del estado presente del de
desempeo de todos estos esquemas es imperfecto, y algu sempeo entre laboratorios. El CAP publica de manera
nos buenos laboratorios son juzgados deficientes, y ciertos regular resmenes de sus comparaciones entre laborato
malos laboratorios escapan a la deteccin.86,87 rios en los Archives o j Pathology and Laboratory Medicine.
Cembrowski y col y Cembrowski, Hackney y Carey han
propuesto un sistema multirreglas para evaluar el resulta Prueba en el lugar de la atencin:
do de la prueba de competencia ordenada por HCFA.88'90 la dificultad m s reciente
El sistema se ilustra en la figura 3-26. Cuando se detec
La prueba en el lugar de la atencin (PLDA) se define como
tan desviaciones importantes en un conjunto de de cinco
la prueba analtica llevada a cabo fuera de los confines del
resultados de estudio (una o ms observaciones que exce
laboratorio central, por lo comn por personal ajeno al
den 3 IDE, el alcance de las observaciones que exceden
laboratorio (p. ej., enfermeras, terapeutas respiratorios).
4 IDE o la media de los 5 resultados que exceden 1 .5
Los sinnimos de la PLDA son prueba cerca del pacien
ID E), los registros de laboratorio, incluso los resultados de
te, prueba descentralizada, exploracin al lado de cama y
examen de sitio alterno. La PLDA ms comn conlleva el
uso de medidores porttiles de glucosa sangunea completa
para el manejo de pacientes con diabetes.19 Muchos analitos
distintos se pueden medir en la actualidad con exactitud y
rapidez cerca del paciente, ya sea que el paciente est en
un hospital, una ambulancia o incluso en un avin. Parte
del xito de la PLDA surge de la incapacidad del laborato
rio clnico centralizado para responder a las demandas del
especialista clnico en relacin con tiempos de respuesta
ms rpidos (TR ).92,93 La rpida disponibilidad de resulta
dos de prueba puede incrementar la salida de pacientes de
reas consideradas cuello de botella, como los departamen
tos de urgencia, y podra incluso disminuir la estancia del
paciente y reducir el costo total de la atencin.94
Un programa exitoso de PLDA requiere planeacin
cuidadosa, ejecucin y evaluacin continua del equipo,
educacin y control de calidad. El primer paso para poner
en prctica un programa de PLDA es formar un comit
directivo de PLDA. El comit debe incluir al director de
medicina del laboratorio (presidente); al coordinador de
la PLDA (por lo regular un tecnlogo de laboratorio), y al
mdico, enfermera y representantes de atencin respirato
ria. Si es posible, los sistemas de informacin y personal de
finanzas tambin deben asistir. La asistencia a la reunin
depender de los puntos de la agenda. Esta colaboracin
establece la etapa para comunicacin y resolucin de pro
FIGURA 3-26. Resultados de PC de seleccin. Diagrama de flujo blemas de PLDA. Antes de que el comit directivo pueda
para investigar grupos de cinco resultados de competencia para error recomendar cualquier dispositivo de PLDA, debe evaluar
sistemtico y aleatorio significativo. los sistemas disponibles y elegir despus el que m ejor se
REVISIN DE RESULTADOS DE COMPETENCIA
Revis:
Firma Fecha Firma Fecha
Central: Dr. C.P
Tox.: Dr. D.L
HDIP: Dr. F.B
Muestra inv.:
CUADRO 3-12. REQ UISITO S D E C A LID A D D E tivamente simple de operar y controlar. Es casi imposible
A N A LIZ A D O R ES EM P LEA D O S EN E L LU G A R DE ajustar programas extensos de capacitacin para PLDA en
ATENCIN _____________________________________ programas ya ajetreados de especialistas clnicos. Tambin
se deben considerar las capacidades de manejo de datos.
Velocidad (las pruebas se deben completar dentro de La conexin de analizadores de PLDA con el sistema de
minutos de introduccin de la muestra) informacin del laboratorio puede proveer acceso a los
La exactitud y la precisin se aproximan a la del analiza datos del paciente a toda la institucin.
dor del laboratorio central El costo total de la PLDA depende del volumen de
muestras y del personal que lleva a cabo la prueba (enfer
Equipo pequeo y porttil
mera contra tcnico).95 Al calcular el costo por prueba en
Capacidad para analizar una "muestra no preparada" el lugar de atencin o el laboratorio central, es importante
(como sangre completa) incluir costos de mano de obra, de instrumentacin, sumi
Tamao de muestra pequeo nistros, capacitacin y de depreciacin e indirectos (es
Men de prueba flexible
decir, costos de informe o gastos generales de hospital).
En la mayor parte de los casos, la prueba del laboratorio
Alcance dinmico amplio para reducir al mnimo las central ser la menos cara en una base de costo por prue
repeticiones, diluciones y pruebas confirmatorias ba que la prueba de sitio alterno. Aunque podra parecer
Facilidad de uso para el personal que no es del menos caro llevar a cabo el anlisis en el laboratorio cen
laboratorio tral, se debe considerar el impacto de los TR en la eficien
Capacidad de bloqueo cia de pacientes atendidos y el tiempo de estancia. El uso
selectivo de la PLDA en reas de atencin crticas puede
Para evitar que personas no autorizadas producir ahorros de costos de largo plazo para el centro de
realicen la prueba
atencin de la salud.
Cuando no se introduce la identificacin del paciente
Cuando no se introduce el control de calidad Hacia la atencin de calidad del paciente
El costo por prueba se aproxima al que proporciona el Gran parte de este captulo se ha centrado en la entrega
laboratorio principal de resultados de prueba de laboratorio exactos. La exacti
tud en anlisis de laboratorio es slo una caracterstica de
Desembolso bajo de capital para equipo calidad que se requiere del laboratorio de qumica clni
Lectura cuantitativa (ninguna subjetividad de parte del ca.49 Otras caractersticas de calidad igual de importantes
observador) incluyen formas efectivas de peticin de prueba; instruc
Calibracin automtica ciones claras para la preparacin del paciente y manejo de
la muestra; tiempos de respuesta apropiados para el pro
Interpretacin de control de calidad autom atizada
cesamiento de la muestra, anlisis e informe de resultados;
Interfase hom ognea con el sistema de informacin del alcances de referencia apropiados, e informes de resultados
laboratorio u hospital (comunicacin por sistema ina comprensibles. La mayor parte de los laboratorios clnicos
lmbrico; infrarrojo o radiofrecuencia) proveen anlisis de laboratorio exacto. Apenas se com ien
Poco m antenimiento za a apreciar que la mayor parte de fallas de laboratorio
ocurren en el dominio preanaltico o posanaltico.
Requisitos mnimos de solucin de problemas
Por ejemplo, Ross y Boone revisaron 363 incidentes
Confiabilidad alta con tiem po muerto mnimo que ocurrieron en un gran hospital de atencin terciaria
Capacidad de respaldo en 1987.96 En los 3 3 6 registros mdicos investigados, se
encontr que los errores pre y posanalticos daban cuenta
Capacidades de lectura de cdigo de barras
de 46 y 47% de los incidentes totales, respectivamente.
Uso de ningn reactivo o reactivos listos para usarse Los errores preanalticos incluyeron rdenes de labora
Produccin de desechos mnima torio extraviadas o mal interpretadas, preparacin inade
cuada e identificacin incorrecta del paciente, recipiente
Desechables mnimos y reciclables
de muestra equivocado y muestra mal etiquetada o mal
Fuente: Cembrowski GS, Kiechle FL. Point-of-care testing: Critical analy- manejada. Los errores posanalticos incluyeron resultados
sis and practical application. Adv Pathol Lab Med 1994;7:3-26. retrasados, no disponibles o incompletos. El personal aje
no al laboratorio fue responsable de 29% de los errores.
ajuste a las necesidades del rea solicitante. Los requisi La mayor parte de estos errores fueron interdeparta
tos de calidad de los analizadores de PLDA se resumen mentales; la prevencin de esta clase de errores requiere
en el cuadro 3-12. Se deben considerar muchos criterios un enfoque de grupo coordinado, interdepartamental. La
antes de poder aprobar un programa de PLDA, incluso la representacin comprometida de los participantes impor
necesidad percibida para PLDA; potencial para mejoras en tantes es un prerrequisito para el xito, ya sea el mdico,
el resultado del paciente; asi como frecuencia de pruebas, la enfermera, el administrativo de la sala del hospital, el
confiabilidad del mtodo y requisitos de capacitacin y flebotomista o el analista. Estos individuos pueden for
personal. Es importante elegir un analizador que sea rela mar un equipo de calidad o equipo de m ejoram iento que se
84 PARTE I PRINCIPIOS BSICOS Y PRCTICA DE LA QUMICA CLNICA
reunira de manera regular para definir el problema y, con de la calidad97,98 y debe soportar su crecimiento en la ins
el tiempo, hacer recomendaciones para su solucin. El titucin. Esta clase de mtodos han sido transferidos con
grupo debe usar varias tcnicas estadsticas y de grupo. xito a negocios estadounidenses e incluso al ambiente
Para que estos procesos de grupo tengan xito, debe haber clnico y del hospital.99 100 Es slo a travs de tales esfuer
un compromiso total de la administracin. La administra zos de mejoramiento de la calidad que se puede mejorar
cin se debe capacitar en este proceso de mejoramiento de manera importante la atencin total del paciente.
P R O B L E M A S DE P R C T I C A
Problem a 3-1: clculo de la sensibilidad Problem a 3-3: com unicacin interdep artam ental
y especificidad Se tiene un problema con la unidad mdica de cuidado
Los obstetras emplean concentraciones de fetoprotena intensivo (UM CI) y las muestras de gas sanguneo arterial
alfa (AFP) para ayudar a diagnosticar defectos del tubo que enviaron al laboratorio. En las ltimas tres semanas,
neural (DTN) al inicio del embarazo. Para los siguientes no se ha querido llevar a cabo un anlisis de gases san
datos, calcule la sensibilidad, especificidad y eficiencia de guneos en seis muestras diferentes de la UMCI debido a
la AFP para detectar DTN, as como el valor predictivo de pequeos cogulos encontrados en las muestras. El per
una AFP positiva. sonal de la UMCI est furioso con la poltica de recha
zo, pero se cree que los anlisis seran incorrectos si se
NMERO DE INTERPRETACIN DE EMBARAZOS emplean estas muestras.
DE HALLAZGOS DE AFP
RESULTADO DEL
1. Describa dnde radica el problema.
EMBARAZO POSITIVO (DTN) NEGATIVO (NINGN DTN) TOTAL 2. Qu se puede hacer para remediar este problema?
DTN 5 3 8 3. Por qu el presente sistema de control de calidad no
Ningn DTN 4 843 847 detecta esta clase de error?
Total 9 846 855 Los siguientes problemas representan los pasos en un
estudio de evaluacin del mtodo. Se emplea un conjun
to de datos abreviado para motivar al alumno a hacer los
Problem a 3-2: decisin adm inistrativa clculos a mano. Lleve a cabo los clculos para los siguien
en control d e calidad tes datos experimentales, que se obtuvieron de un estudio
Usted est a cargo del laboratorio clnico cuando un tec de glucosa. Este mtodo de prueba es un procedimiento
nlogo se presenta con la hoja de trabajo. Ha ocurrido una
violacin de la regla 22s en las ejecuciones y dentro de los
materiales en el material de alta concentracin. Usted pide
ALTO ENERO
ver los datos del paciente y los datos de control previos,
que son los siguientes: 2 2 6 ___________________________________________________ x + 3,
222 ___________________________________________________
HOJA DE TRABAJO PARA LA GLUCOSA, ENERO 8
VALORES DE CONTROL DE GLUCOSA DE ENERO
2 1 8 ___________________________________________________
7 127 131
118, 120, 121, 119, 125, 118, 122, 116, 124, 123, 117,
8 110 114
117, 121, 120, 120, 1 1 9 ,1 2 1 , 123, 120 y 122 mg/dl
9 320 3 16
La solucin de control B se analiz diario y dio los 10 146 141
siguientes resultados:
295, 308, 296, 298, 304, 294, 308, 310, 296, 300, 295, 1. Grafique estos resultados. De la inspeccin de la grfi
30 3 , 305, 300, 308, 297, 297, 305, 292 y 300 mg/dl ca, determine su error constante o proporcional signifi
cativo.
Problema 3-5: recuperacin 2. Calcule las estadsticas de regresin lineal como sigue:
Para los datos de recuperacin siguientes, calcule la recu a) Prepare una tabla con los siguientes encabezados de
peracin porcentual para cada uno de los experimentos columna: x v y v x2i, y 2i, xy., Y.
y el promedio de los experimentos de recuperacin. Los
experimentos se efectuaron aadiendo dos niveles de b) Introduzca los datos x. y y en la tabla (recuerde que
estndar a cada una de cinco muestras del paciente (A a la x es el mtodo comparativo y y el mtodo de prueba)
E) con los siguientes resultados: y calcule 2 x , 2y., 2x 2i, 2 y 2i y Yxy.. Introduzca estos
datos en la tabla.
0.9 mi DE SUERO 0.9 mi DE SUERO+0.1 m 0.9 mi SERUM + 0.1 mi
MUESTRA + 0.1 mi DE AGUA DE EST. DE500 mg/dl DE EST. DE 1000 mg/dl c) De las sumas en (b), calcule x y y . Emplee las ecua
A 59 110 156 ciones 3-8 y 3-9 para calcular la pendiente m y la
B 63 112 160 ordenada al origen (y ), respectivamente.
C 76 126 175 d) Con la ecuacin de regresin Y = mx + y calcule y.
D 90 138 186 para cada x , introduzca los valores de Y. en la columna
E 225 270 320 Y., y luego calcule: (y. - Y.), (y. - Y.)2 y 2(y. - Y.)2
4. Cul es el error total (ET = EA + ES) del mtodo? Problema 3-10: etiquetado de muestras
Nota: las estadsticas de regresin lineal se deben usar Se recibe una muestra de orina en el laboratorio con una
para estimaciones de error slo dentro del intervalo de solicitud de anlisis de orina completo. Se etiqueta el reci
concentracin estudiado; se deben haber reunido datos piente y se da inicio al anlisis. Al terminar el anlisis se
hasta 300 mg/dl en el experimento de mtodos de com enva un informe de los resultados a la sala del hospital.
paracin. Varios minutos despus, se recibe una llamada telefni
5. a) Cul es la estadstica que cuantifica al error aleato ca de la sala con la noticia de que el anlisis de orina no
rio entre mtodos? b) Qu valor calcul para esta corresponde al paciente. Lo que sucedi es que el reci
estadstica? piente fue marcado de manera incorrecta antes de ser lle
6. Juzgue la aceptabilidad del desempeo del mtodo de vado al laboratorio.
prueba. Para llegar al juicio, aplique los siguientes cri 1. Cul es el problema en este caso y dnde ocurri?
terios: 2. El sistema de control de calidad (CC) del laboratorio
a) Para que el mtodo sea aceptado, todos los errores podra detectar o evitar este tipo de problema?
deben ser menores que el error permisible (Ea) para
u n a X C dada. Problema 3-11: programa para examen de PLDA
b ) Los siguientes son los errores Ea para la glucosa: Su laboratorio est a cargo de supervisar el programa de
X cl = 120 mg/dl Eal = 10 mg/dl CC para los glucmetros (PLDA) en uso en su hospital.
X c2 = 300 mg/dl Ea2 = 25 mg/dl Usted observa que el personal de la sala del hospital no
est siguiendo el procedimiento adecuado para ejecutar
Problema 3-9: prueba en el lugar de atencin el CC. Por ejemplo, en este caso, el CC del glucmetro
1. Se comisiona a una persona como laboratorista clnico se ejecut tres veces seguidas en un esfuerzo por tener
para un equipo de trabajo en el lugar de atencin (LDA). los resultados bajo control. Las dos primeras ejecuciones
Qu otra persona podra servir en este equipo? fueron l 3s. La ltima ejecucin volvi a menos de 3 DE.
2. Qu debe existir antes de poner en prctica un pro Explique el procedimiento correcto de seguimiento para
tocolo de prueba en el lugar de atencin para asegurar tratar con los resultados fuera de control.
resultados exactos y precisos del paciente?
3. Una vez que se decide proveer a los mdicos y pacien Problema 3-12: interpretacin de la regla de CC
tes con la prueba en el LDA, cules son caractersticas Explique la regla R4s, incluso qu tipo de error detecta.
o requisitos importantes de los analizadores LDA?
P R E G U N T A S DE R E P A S O
5. Con la siguiente curva COR, cul es la mejor prue 9. Cules reglas se pueden usar para evaluar conjuntos
ba? de cinco resultados de prueba de competencia?
a) Prueba A. a ) Media > 1 .0 IDE.
b) Prueba B. b) 1 resultado > 2 IDE.
c) Prueba C. c) 5/5 resultados > 1 . 0 IDE y media > 1 .5 IDE.
d) Prueba D. d) 1 resultado > 3 IDE.
6. Los estudios de interferencia suelen u sar como un 10. La razn principal para poner en prctica la PLDA es
interferente. a) El costo de prueba reducido.
a) Eritrocitos bemolizados. b) Resultados mejorados de atencin del paciente.
b ) Intralpido. c) Dism inuir la carga de trabajo del laboratorio
c) Muestras muy ictricas. central.
d) Todo lo anterior. d) Emplear a no laboratoristas como analistas.
7. Cul regla de Westgard detecta el error aleatorio? 11. Verdadero o falso (si la respuesta es falsa, explique por
a) l 3s. qu)
V a) Una tendencia ocurre cuanto los resultados de
o 22s. CC caen en un lado de la media o el otro en un
d) 100.
perodo de 6 a 7 das consecutivos.
8. Cul(es) de las siguientes reglas es probable que b) La sensibilidad diagnstica se refiere a la proba
detecten errores sistemticos pequeos y difcilmente bilidad de que slo las personas que no tienen la
se debe(n) usar? enfermedad den un resultado de prueba negativo
a) R4s. para la enfermedad.
b) 10 . c) El error aleatorio se relaciona con la precisin del
c) 22s>
^4 mtodo y el error sistemtico con la exactitud
ls -
d) 1 del mtodo.
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C A P T U L O
Tcnicas analticas
e instrumentacin
Alan H. B. Wu 4
C O N T E N I D O D E L C A P T U L O
O B J E T I V O S
90
CAPTULO 4 TCNICAS ANALTICAS E INSTRUMENTACIN 91
T R M I N O S C L A V E ___________________________________________
Las tcnicas analticas y la instrumentacin representan Los instrumentos que se estudian en esta seccin miden
las bases de todas las mediciones hechas en un laboratorio la absorcin o la emisin de la energa radiante para deter
moderno de qumica clnica. La mayor parte de las tc minar la concentracin de tomos o molculas. Estos dos
nicas se ubican en una de las cuatro disciplinas bsicas fenmenos, la absorcin y la emisin, guardan una rela
del campo de la qumica analtica: espectrometra (como cin muy estrecha. Para que un rayo de radiacin electro
espectrofotometra, absorcin atmica y espectrofotome magntica sea absorbido debe tener la misma frecuencia
tra de masa), luminiscencia (entre las que estn fluores que una rotacional o vibratoria del tomo o molcula con
cencia, quimioluminiscencia y nefelometra); mtodos tra la que choca. Los niveles de energa que son absorbidos
electroanallticos (como electroforesis, potenciometra y se desplazan en etapas discretas, y cualquier tipo particu
amperometra) y cromatografa (de gases, de lquidos y de lar de molcula o tomo absorber slo ciertas energas y
capa fina). Debido a los adelantos en ptica, electrnica y no otras. Cuando la energa es absorbida, los electrones
en la fabricacin de computadoras, los instrumentos ya se de valencia se desplazan hacia un orbital de mayor nivel.
producen en miniatura. Esta miniaturizacin ha permiti Despus de la absorcin de energa, los electrones excita
do la produccin de dispositivos para efectuar pruebas en dos regresan a su estado basal mediante la emisin de una
el lugar de atencin, los cuales proporcionan resultados cantidad discreta de energa en la forma de una longitud
tan seguros como los instrumentos que se encuentran en de onda caracterstica de energa radiante.
un gran laboratorio. La absorcin o la emisin de energa por parte de los
tomos dan como resultado un espectro de lneas. Debido
ESPECTROFO TO M ETRA Y FOTOM ETRA a la complejidad relativa de las molculas, stas absorben
o emiten una cantidad de energa comprendida en una
Los instrumentos para medir la radiacin electromagn gran regin. La luz que emiten los slidos incandescentes
tica comparten varios conceptos y partes en comn. Los (tungsteno o deuterio) es un continuo. Los tres tipos de
componentes comunes de los instrumentos se tratan con espectros se muestran en la figura 4 -2 .1-3
mayor profundidad en una seccin posterior. Los instru
mentos fotomtricos miden la alta intensidad sin conside
Ley de Beer
rar la longitud de onda. En la actualidad, la mayor parte
de instrumentos contienen filtros (fotmetros), prismas, Beer y col describieron la relacin que hay entre la luz que
o rejillas (espectrmetros) para seleccionar (aislar) pocos absorbe una disolucin y la concentracin de esa misma
valores de la longitud de onda incidente. De la energa disolucin. La ley de Beer establece que la concentracin
radiante que pasa a travs de un objeto, una parte se refle de una sustancia es directamente proporcional a la cantidad
jar, se absorber y se transmitir.
La radiacin electromagntica se describe como foto
nes de energa que viajan en ondas. La relacin entre lon
gitud de onda y energa E se expresa mediante la frmula
de Planck:
E = hv (Ec. 4-1)
Luz incidente
70 49 34 24 17 % transmitido
1 2 3 4
0 1 2 3 4 5 Concentracin
Capas o concentracin Concentracin
FIGURA 4-4. (A) Porcentaje de la luz incidente original transmitida por capas guales de la disolucin que absorbe luz;
(B) porcentaje de transmitancia en fundn de la concentracin en papel para grficas lineales; (C) % T en fundn de la
concentracin en papel semilogartmico; (D) A en funcin de la concentracin en papel para grficas lineales.
A/D Pantalla
94 PARTE I PRINCIPIOS BSICOS Y PRCTICA DE LA QUIMICA CLNICA
A/D Pantalla
Divisores
del haz
Cubeta de la
disolucin de
referencia
CAPTULO 4 TCNICAS ANALTICAS E INSTRUMENTACIN 97
probable de un problema y el mantenimiento requerido para gotas finas llegan hasta la flama. El quemador es una ranura
eliminarlo se explican en el manual del instrumento. larga y angosta que permite una longitud de la trayectoria
mayor para absorber la radiacin incidente. La luz que pro
Espectrofotm etro de absorcin atm ica viene de la lmpara de ctodo hueco atraviesa la muestra de
tomos en estado basal que estn en la flama. La cantidad
El espectrofotmetro de absorcin atm ica se emplea para de luz absorbida es proporcional a la concentracin. Cuan
medir la concentracin mediante la deteccin de radiacin do un tomo en estado basal absorbe energa luminosa,
electromagntica que absorben los tomos y no las mol se produce un tomo excitado. ste regresa entonces a su
culas. Las partes bsicas se ilustran en la figura 4-11. La estado basal, emitiendo luz de la misma energa que absor
fuente de luz comn, conocida como lm para de ctodo bi. Por consiguiente, la muestra de la flama contiene una
hueco, consta de una cmara al vaco, hermtica al gas, en poblacin dinmica de tomos en estado basal y tomos
la que se encuentra un nodo, un ctodo cilindrico y un excitados, que absorben y emiten energa radiante. La ener
gas inerte, que puede ser helio o argn. Cuando el voltaje ga emitida proveniente de la flama se difundir en todas
se aplica, el gas del filtro se ioniza. Los iones atrados al direcciones, y ser una emisin permanente. Puesto que el
ctodo chocan contra el metal, desprenden a los tomos y objetivo del instrumento es medir la cantidad de luz absor
hacen que se exciten. Cuando retornan a su estado basal, bida, el detector de la luz debe tener la aptitud de diferen
se emite energa luminosa que es caracterstica del metal ciar entre el haz luminoso emitido por la lmpara de ctodo
en el ctodo. En general, se requiere una lmpara separada hueco y el emitido por los tomos excitados que se encuen
para cada metal (p. ej., una lmpara de ctodo hueco de tran en la flama. Para lograrlo, el haz luminoso del ctodo
cobre se usa para medir Cu). hueco se modula insertando un interruptor giratorio mec
Las lmparas de descarga luminosa sin electrodo son nico entre la luz y la flama, o bien, pulsando el suministro
una nueva fuente de luz para los espectrofotmetros de elctrico de la lmpara. Como el haz luminoso absorbido
absorcin atmica. Se llena un bulbo con argn y el ele entra a la muestra en pulsos, la luz se transmite tambin en
mento que se desea examinar. Un generador de radiofre pulsos. Habr menos luz en los pulsos transmitidos porque
cuencia alrededor del bulbo suministra la energa para parte ser absorbida. Por tanto, hay dos seales luminosas
excitar al elemento, lo cual causa la emisin caracterstica provenientes de la flama una seal alternante de la lm
del espectro del elemento. para de ctodo hueco y una directa de la emisin de la fla
La muestra analizada debe contener el metal reduci ma. El circuito de medicin se sintoniza con la frecuencia
do en el estado atmico vaporizado. Por lo regular, esto modulada. La interferencia proveniente de la emisin de la
se logra utilizando el calor de una flama para romper los flama constante se elimina electrnicamente al aceptar slo
enlaces qumicos y producir tomos libres y no excitados. la seal en forma de pulsos del ctodo hueco.
La flama es la celda de la muestra en este instrumento, y ya El monocromador se utiliza para aislar la lnea de emi
no se usa una cubeta. Hay varios diseos, pero el quemador sin deseada de las otras lneas de emisin de la lmpara.
ms comn es el quem ador de prem ezcla de larga trayectoria Adems, funciona como proteccin del fotodetector con
ptica. La muestra, en disolucin, se introduce como una tra la luz excesiva que emana de las emisiones de la flama.
aspersin dentro de una cmara, donde se mezcla con aire Un tubo FM es el detector de luz usual.
y combustible. La mezcla pasa por placas desviadoras, en La absorcin atmica sin flama requiere una modi
donde las gotas grandes caen y son desalojadas. Slo las ficacin de instrumentos en la que se incluye un horno
Muestra
Interruptor \ (tomos) / Tubo FM
&
Fuente
luminosa Monocromador Lectura
Cabeza del
Combustible I quemador
Oxidante "
Placas
iI desviadoras
v rDren
Aspiracin
de aire
Muestra
elctrico para romper los enlaces qumicos (atomizacin Fotom etra de flam a
electrotrmica). La muestra, lquida o slida, est conte
nida en un pequesimo cilindro de grafito. Se pasa una El fotmetro de emisin de flama, el cual mide la luz que
corriente elctrica por las paredes del cilindro, se evapora emiten los tomos excitados, se us de manera amplia
el disolvente, se convierte la muestra en cenizas y, para para determinar la concentracin de Na+, K+ o Li+. Con
terminar, se calienta la unidad hasta la incandescencia el surgimiento de los electrodos selectivos de iones para
para atomizar la muestra. Este instrumento, al igual que el estos analitos, este tipo de fotmetros ha dejado de usarse
espectrofotmetro, se utiliza para determinar la cantidad en forma rutinaria en los laboratorios de qumica clni
de luz absorbida. Una vez ms, la ley de Beer se aplica para ca. Por tanto, esta tcnica ya no se trata en esta edicin.
El lector debe consultar las ediciones anteriores de esta
calcular la concentracin. Uno de los problemas principa
les es que la correccin elemental es en gran medida ms obra.
necesaria y crtica para las tcnicas electrotrmicas que
para los mtodos de absorcin atmica basados en la fla Fluorom etra
ma. En la actualidad, el enfoque ms comn requiere una
Como se vio con el espectrofotmetro, la luz que entra a la
lmpara de deuterio como fuente secundaria, y se mide la
solucin puede pasar o ser absorbida en parte o por com
diferencia entre las dos seales de absorbancia. Ha habido
pleto, lo cual depende de la concentracin y la longitud de
un gran adelanto en las tcnicas de correccin elemental
onda que entra a esa solucin particular. Siempre que ocu
basada en el efecto Zeeman .1 La presencia de un campo
rre absorcin, hay una transferencia de energa al medio.
magntico intenso ocasionar que la longitud de onda de
Cada tipo molecular posee una serie de niveles de energa
la radiacin emitida se desplace ligeramente; este despla
electrnica, y puede pasar de un nivel de energa bajo a
zamiento en la longitud de onda es el efecto Zeeman.
uno mayor slo absorbiendo una unidad integral (cuan
La espectrofotometra de absorcin atmica es sensible
to) de luz que es igual en energa a la diferencia entre los
y precisa. Se usa en forma rutinaria para medir la concen
dos estados de energa. Hay niveles de energa adicionales
tracin de los oigometales que no se excitan con facilidad.
que se deben a la rotacin o vibracin de partes molecula
Por lo general es ms sensible que la emisin de flama
res. El estado excitado dura cerca de 10 '3 segundos antes
porque la mayor parte de tomos producidos en la flama
de que el electrn pierda energa y vuelva al estado basal.
de propano o de aire y acetileno permanecen en el estado
La energa se pierde por colisin, prdida de calor, trans
basal disponibles para la absorcin luminosa. Es exacta,
ferencia a otras molculas y emisin de energa radiante.
precisa y especfica. Una desventaja es que la flama es inca
Debido a que las molculas son excitadas por absorcin de
paz de disociar las muestras en tomos libres. Por ejemplo,
energa radiante y pierden energa por mltiples interac
el fosfato podra interferir en el anlisis del calcio porque
ciones, la energa radiante emitida es menor que la absor
se formara fosfato de calcio. Esto se podra superar aa
bida. La diferencia entre las longitudes de onda mximas,
diendo cationes que compitieran contra el calcio por el
excitacin y fluorescencia emitida se llama desplazam iento
fosfato. Como rutina, se aaden lantano o estroncio a las
de Stokes. Tanto la energa de excitacin (absorcin) como
muestras para formar complejos estables con el fosfato.
la de fluorescencia (emisin) son caractersticas para un
Otro problema posible es la ionizacin de los tomos des
determinado tipo molecular; por ejemplo, en la figura 4-
pus de la disociacin por la flama, la cual se puede dis
12 se muestran los espectros de absorcin y fluorescencia
minuir reduciendo la temperatura de la flama. Otra fuente
de quinina en cido sulfrico al 0.1 N. La lnea disconti
de error puede ser la interferencia de la matriz a causa de
nua del lado izquierdo muestra la energa de excitacin de
la intensificacin de la absorcin de la luz por los tomos
longitud de onda corta mxima absorbida, mientras que la
que se encuentran en los disolventes orgnicos o la forma
cin de gotitas slidas cuando el disolvente se evapora en
la flama. Esta interferencia se podra superar sometiendo
la muestra a un tratamiento de extraccin previo .5
Hace poco tiempo se empez a usar el plasma acopla
do por induccin (PAI) para aumentar la sensibilidad con
respecto a la emisin atmica. Se ha dado a conocer que el
soplete, un plasma de argn mantenido por la interaccin
de un campo de radiofrecuencia y un gas de argn ioniza
do, proporciona temperaturas de entre 5 500K y 8000K .
La opinin es que la atomizacin completa de los elemen
tos se presenta en estas temperaturas. Se recomienda el uso
del plasma acoplado por induccin como una fuente para
determinaciones en las que se emplean elementos refracta
rios como el uranio, circonio y boro. El plasma acoplado por Longitud de onda (nm)
induccin y deteccin con espectrmetro de masas es la tc FIGURA 4-12. Espectros de absorcin y fluorescencia de quinina en
nica ms sensible y especfica para todos los elementos de la 0.1 N de cido sulfrico. (De Coiner D. Basic Concepts in Laboratory
tabla peridica. La espectrofotometra de absorcin atmica Instrumentation. Bethesda, MD: ASMT Education and Research Fund,
se usa con menor frecuencia a causa de esta nueva tcnica. 1975-1979.)
CAPTULO 4 TCNICAS ANALTICAS E INSTRUMENTACIN 99
continua del lado derecho es el espectro fluorescente de Los fluormetros de monocromador emplean rejillas,
longitud de onda ms grande (energa menor). prismas o filtros para el aislamiento de la radiacin inci
dente. Los detectores de luz son casi siempre tubos FM
In stru m en ta ci n b s ic a como resultado de su mayor sensibilidad a bajas intensi
Los fluormetros de filtro miden las concentraciones de dades de luz. Los instrumentos de doble haz se usan para
soluciones que contienen molculas fluorescentes. Un ins compensar la inestabilidad debida a la fluctuacin de ener
trumento bsico se muestra en la figura 4-13. La fuente ga elctrica.
emite luz de alta energa de longitud de onda corta. Un Las mediciones de concentracin de fluorescencia
atenuador mecnico controla la intensidad de luz. El filtro se relacionan con la absortividad molar del compuesto,
primario, colocado entre la fuente de radiacin y la mues la intensidad de la radiacin incidente, la eficiencia del
tra, selecciona la longitud de onda que la solucin por cuanto de la energa emitida por cuanto absorbido y la
medir absorbe mejor. La muestra fluorescente en la cubeta longitud de la trayectoria de luz. En disoluciones diluidas
emite energa radiante en todas direcciones. El detector con los parmetros del instrumento mantenidos cons
(colocado en ngulos rectos con respecto a la celda de tantes, la fluorescencia es directamente proporcional a
muestra) y un filtro secundario que pasa las longitudes de la concentracin. En general, se obtendr una respuesta
onda ms largas de luz fluorescente evita que la luz inci lineal hasta que la concentracin de la especie fluorescen
dente choque con el fotodetector. La salida elctrica del te sea tan alta que la muestra com ience a absorber canti
fotodetector es proporcional a la intensidad de la energa dades importantes de luz de excitacin. Una curva que
fluorescente. En los espectrofluormetros, los filtros son demuestra la no linealidad cuando se incrementa la con
reemplazados por prismas o monocromadores de rejilla. centracin se ilustra en la figura 4 -14. La solucin debe
Las lmparas de descarga de gas (mercurio y arco de absorber menos de 5% de la radiacin excitante para que
xenn) son las fuentes de energa radiante de excitacin ocurra una respuesta lineal .6 Como con todas las medi
empleadas con ms frecuencia. Las lmparas de tungs ciones cuantitativas, se debe preparar una curva estndar
teno incandescentes se usan menos porque liberan poca para demostrar que la concentracin empleada cae en un
energa en la regin ultravioleta. Las lmparas de vapor intervalo lineal.
de mercurio se emplean por lo general en fluormetros En la polarizacin de fluorescencia, la energa radiante
de filtro. El mercurio emite un espectro de lnea caracte se polariza en un solo plano. Cuando la muestra (fluo-
rstico. Las lneas de resonancia de 365 a 366 nm son de rforo) se excita, emite luz polarizada a lo largo del mis
uso comn. La energa a longitudes de onda distintas a las mo plano como luz incidente si el fluorforo est unido a
lneas de resonancia se provee al cubrir la superficie inter una gran molcula. En contraste, una molcula pequea
na de la lmpara con un material que absorbe la radia emite luz despolarizada porque girar fuera del plano de
cin del mercurio de 254 nm y emite una banda amplia polarizacin durante su tiempo de vida de excitacin. Esta
de longitudes de onda ms largas. La mayor parte de los tcnica se emplea mucho para la deteccin de frmacos
espectrofluormetros usan una lmpara de xenn de alta teraputicos y drogas. En el procedimiento, se permite que
presin. El xenn tiene un buen continuo, que es necesa el analito de muestra compita con uno marcado con fluor
rio para determinar el espectro de excitacin. foro por un anticuerpo limitado para el analito. Mientras
Filtro
primario
Fuente brsifet V t /
Portamuestras
Atenuador
Filtro
secundario
FIGURA 4-13. Fluormetro de filtro bsico. (De Coiner D. Basic FIGURA 4-14. Dependencia de la fluorescencia en la concentra-
Concepts in Laboratory Instrumentatlon. Bethesda, MD: ASMT Educa- cin de fluorforo. (De Guilbault GG. Practical Fluorescence, Theory,
tion and Research Fund, 1975-1979.) Methods and Technlques. Nueva York: Marcel Dekker, 1973.)
100 PARTE I PRINCIPIOS BSICOS Y PRCTICA DE LA QUMICA CLNICA
Cubeta
f >
Detector, nefelmetro
con dispersin de
Fuente luz directa
de luz
Detector, turbidimetra
espectrofotomtrica
Detector,
nefelmetro con
dispersin de luz a 90
A plicaciones lser
En una celda galvnica, cuando se conectan los elec
La amplificacin de luz mediante emisin de radiacin trodos, hay flujo espontneo de electrones del electrodo
estimulada (LASER) se basa en la interaccin de energa con la menor afinidad electrnica (oxidacin; p. ej., pla
radiante y tomos o molculas excitados de modo adecua ta). Estos electrones pasar por el medidor externo al cto
do. La interaccin da lugar a emisin de radiacin esti do (reduccin), donde se liberan iones OH'. Esta reaccin
mulada. La longitud de onda, direccin de propagacin, contina hasta que uno de los componentes qumicos se
fase y plano de polarizacin de la luz emitida son iguales agota; punto en el cual, la celda est muerta y no puede
que para la radiacin incidente. La luz lser es polariza producir energa elctrica hacia el medidor externo.
da y coherente, y tiene amplitud espectral reducida y rea Se puede forzar la corriente a que fluya por la celda
de seccin transversal pequea con divergencia baja. La muerta slo aplicando una fuerza electromotriz externa
emisin radiante puede ser muy poderosa y continua o E. sta se llama celda electroltica. En resumen, una celda
pulsante. galvnica se puede construir a partir de una electroltica.
La luz lser puede servir como la fuente de energa inci Cuando se inactiva la E externa, los productos acumula
dente en un espectrmetro o nefelmetro. Algunos rayos dos en los electrodos producirn de manera espontnea
lser producen anchos de banda de pocos kilohertz tanto corriente en la direccin opuesta de la celda electroltica.
en la regin visible como infrarroja, lo que hace a estas
aplicaciones cerca de tres a seis veces ms sensibles que los Sem iceldas
espectrmetros comunes .9
La espectrometra lser se puede usar tambin para la Es imposible medir la actividad electroqumica de una
determinacin de estructura e identificacin de muestras, semicelda; es necesario acoplar dos reacciones y comparar
as como para diagnstico. La cuantificacin de muestras una con la otra. Para evaluar las reacciones de semicelda,
depende del espectrofotmetro empleado. Un ejemplo de se asignan de manera arbitraria 0.00 V a una reaccin de
aplicacin clnica del lser es el contador Coulter, que se electrodo especfica. Toda reaccin acoplada con esta reac
usa para anlisis diferencial de leucocitos .10 cin cero arbitraria es positiva o negativa, lo cual depende
de la afinidad relativa hacia los electrones. El electrodo
definido como 0 .00 V es de hidrgeno estndar: gas de H2
ELECTROQUM ICA
a 1 atmsfera (atm ). El gas hidrgeno en contacto con H+
Muchos tipos de anlisis electrnicos se emplean en el en la disolucin forma un potencial. El electrodo de hidr
laboratorio clnico, incluso potenciometra, amperome- geno acoplado con una semicelda de cinc es catdico, con
tra, coulometra y polarografa. Las dos celdas electroqu la reaccin 2H+ + 2e~ - * H p porque H2 tiene una mayor afi
micas bsicas requeridas en estos anlisis son las celdas nidad que el Zn hacia los electrones. El Cu, sin embargo,
galvnicas y electrolticas. tiene una afinidad mayor que H, hacia los electrones y, por
tanto, la reaccin amnica H 2 - 2H+ + 2e~ ocurre cuando
Celdas galvnicas y electrolticas se acopla con la semicelda de electrodo de cobre.
El potencial que se genera mediante el electrodo de gas
Una celda electroltica se puede preparar como se muestra hidrgeno se usa para evaluar el potencial de electrodo
en la figura 4-17. Consta de dos semiceldas y un puente de metales en disolucin de 1 mol/L. En el cuadro 4-1 se
salino, que puede ser una pieza de papel filtro saturado muestran los potenciales de reduccin para ciertos meta
con electrlitos. En lugar de dos como se muestra, los les .11 Un electrodo de hidrgeno se emplea para determi
electrodos se pueden sumergir en un solo vaso de preci nar la exactitud de electrodos de referencia e indicadores,
pitados grande que contiene una solucin salina. En cada la estabilidad de disoluciones estndar y los potenciales de
configuracin, la solucin sirve como puente salino. uniones lquidas.
102 PARTE I PRINCIPIOS BSICOS Y PRCTICA DE LA QUMICA CLNICA
Calibracin
Los pasos necesarios para estandarizar un medidor de pH Transistor de
son bastante directos. Primero, equilibre el sistema con los efecto de campo Macroelectrodo
electrodos en una disolucin amortiguadora con un pH de FIGURA 4-20. Otros ejemplos de electrodos selectivos de Iones.
104 PARTE I PRINCIPIOS BSICOS Y PRCTICA DE LA QUIMICA CLNICA
que se emplea para la deteccin de urea, y glucosa de oxi- trofortica. La tasa de movilidad 12 de la molcula (p.) est
dasa, que se usa para la deteccin de glucosa. Un electro dada por
do de urea debe tener un ESI que sea selectivo para NH4+
O
o NH3, mientras que la oxidasa de glucosa se emplea en JU= x r x n (Ec. 4-10)
combinacin con un electrodo de pH. M k
donde Q = carga neta de la partcula
Cloridm etros coulom tricos y voltam etra k = constante
de separacin andica r = radio inico de la partcula
n = viscosidad de la disolucin amortiguadora
Los ESI de cloruro han reemplazado en gran medida las
titulaciones coulomtricas para la determinacin de clo De la ecuacin, la tasa de migracin es directamente
ruro en lquidos corporales. La voltametra de separacin proporcional a la carga neta de la partcula e inversamente
andica se us de manera extensa para anlisis de plomo y proporcional a su tamao y la viscosidad de la disolucin
se mide mejor mediante espectroscopia de absorcin at amortiguadora.
mica electrotrmica (horno de grafito) o, de preferencia,
ICP-MS. Procedim iento
La muestra se moja en un soporte hidratado durante
ELECTROFORESIS
alrededor de 5 min. El soporte se coloca en la cmara de
La electroforesis es la migracin de solutos cargados o par electroforesis, que se llena antes con disolucin amorti
tculas en un campo elctrico. La iontoforesis se refiere a guadora. Es necesario agregar suficiente de esta disolucin
la migracin de iones pequeos, mientras que la electrofo a la cmara para mantener contacto con el soporte. La elec
resis de zon a es la migracin de macromolculas cargadas troforesis se lleva a cabo al aplicar un voltaje o corriente
en un medio de soporte poroso como papel, acetato de constantes durante un tiempo especfico. Luego, se retira
celulosa o pelcula de agarosa. Un electroforetograma es el el soporte y se coloca en un fijador o se seca rpido para
resultado de electroforesis de zona y consiste en las zonas evitar la difusin de la muestra. Esto va seguido de la tin
separadas de una macromolcula. En un laboratorio clni cin de las zonas con el tinte apropiado. La cantidad de
co, las macromolculas de inters son protenas en suero, tinte que capta la muestra es proporcional a la concentra
orina, lquido cefalorraqudeo y otros lquidos corporales cin de la muestra. Despus que se lava el exceso de tin
biolgicos y eritrocitos y tejido. te, puede ser necesario colocar el medio de soporte en un
La electroforesis consta de cinco componentes: la fuer agente clarificador. De lo contrario, se seca por completo.
za motriz (potencia elctrica), el medio de soporte, la
disolucin amortiguadora, la muestra y el sistema detec Suministro de energa
tor. Un aparato electrofortico representativo se ilustra en Los suministros de energa que operan a corriente o voltaje
la figura 4-22. constantes estn disponibles en el comercio. En la electro
Las partculas cargadas migran hacia el electrodo car foresis, el calor se produce cuando la corriente fluye por
gado opuesto. La velocidad de migracin se controla un medio que tiene resistencia, lo que da como resultado
mediante la carga neta, el tamao y la forma de la part un incremento de la agitacin trmica del soluto disuelto
cula; la fuerza del campo elctrico; las propiedades fsicas (iones) y origina una disminucin de la resistencia y un
y qumicas del medio de soporte; y la temperatura elec- incremento de la corriente. El incremento origina aumen
tos de calor y evaporacin del agua de la disolucin amor
tiguadora. Esto hace que se incremente la concentracin
inica de la disolucin amortiguadora y origina ms incre
mentos posteriores en la corriente. La tasa de migracin se
Fuente de energa puede mantener constante si se emplea un suministro de
energa con corriente constante. Esto resulta cierto por
que, a medida que avanza la electroforesis, una disminu
cin en la resistencia como resultado del calor producido
disminuye tambin el voltaje.
Disoluciones amortiguadoras
Dos propiedades de la disolucin amortiguadora que afec
tan la carga de anfolitos son el pH y la resistencia inica.
Los iones llevan la corriente elctrica aplicada y permi
ten que la disolucin amortiguadora mantenga un pH
constante durante la electroforesis. Un anfolito es una
molcula, como una protena, cuya carga neta puede ser
positiva o negativa. Si la disolucin amortiguadora es ms
cida que el punto isoelctrico (pl) del anfolito, se une con
FIGURA 4-22. Aparato de electroforesis, componentes bsicos. iones H+, adquiere carga positiva y migra hacia el ctodo.
106 PARTE I PRINCIPIOS BSICOS Y PRCTICA DE LA QUMICA CLNICA
Electroforesis capilar
En la electroforesis capilar (EC ), la separacin se efecta
en capilares de slice fundida de dimetro estrecho (di
metro interno, 2 575 pm). Por lo comn, los capilares slo
se llenan con disolucin amortiguadora, aunque tambin
de energa se pueden usar medios de gel. En la figura 4 -2 4 se mues
tra de forma esquemtica la instrumentacin de la EC. Al
FIGURA 4-24. Esquema de electroforesis capilar en instrumenta
inicio, el capilar se llena con disolucin amortiguadora y
cin. La muestra se asla en el capilar reemplazando el depsito de
luego se carga la muestra; al aplicar un campo elctrico
disolucin amortiguadora andica con el depsito de la muestra. (De
se lleva a cabo la separacin. La deteccin se puede hacer
Heiger DN. High-Performance Capillary Electrophoresis. Waldbronn,
Alemania: Hewlett-Packard, 1992.) cerca del otro extremo del capilar en forma directa por la
pared capilar .13
Un concepto fundamental de la EC es el flu jo electroos-
m tico (FEO ). El FEO es el flujo integral de lquido hacia
Electroendosm osis el ctodo al aplicar un campo elctrico y se superpone a
El movimiento de los iones de la disolucin amortigua la migracin electrofortica. El FEO controla la cantidad
dora y el disolvente en relacin con el soporte fijo se lla de solutos temporales que permanecen en el capilar. Los
ma endosm osis o electroendosm osis. Los medios de soporte cationes migran ms rpido porque el FEO y la atraccin
como el papel, acetato de celulosa y el gel de agar, toman electrofortica se dirigen hacia el ctodo; todas las molcu
una carga negativa de la absorcin de iones hidrxido. las neutras son llevadas por el FEO pero no son separadas
Cuando se aplica corriente al sistema de electroforesis, entre s; y los aniones se mueven ms lento porque, aunque
los iones hidrxido permanecen fijos mientras los posi son llevados hacia el ctodo por el FEO , son atrados hacia
tivos libres se mueven hacia el ctodo. Los iones estn el nodo y repelidos por el ctodo (fig. 4-25). Debido a que
muy hidratados, lo que da como resultado el movimiento se emplea mucho para monitorear analitos separados, la
catdico neto del disolvente. Las molculas que son casi deteccin UV-visible se lleva a cabo de manera directa en
neutras son llevadas hacia el ctodo con el disolvente. Los el capilar; sin embargo, la sensibilidad es deficiente debido
medios de soporte como el gel de agarosa y el de acrilamida las dimensiones pequeas del capilar, que da como resul
son en esencia neutros, lo que elimina la electroendosmo tado una longitud de trayectoria corta. La fluorescencia, la
sis. La posicin de las protenas en cualquier separacin fluorescencia inducida por lser y la deteccin quimiolu-
de electroforesis depende no slo de la naturaleza de la miniscente se pueden emplear para mayor sensibilidad.
protena, sino tambin de las otras variables tcnicas. La EC ha sido usada para la separacin, cuantificacin
y determinacin de pesos moleculares de protenas y pp-
tidos; para el anlisis de los productos de la reaccin en
Enfoque isoelctrico
cadena de la polimerasa (RCP); y para el anlisis de iones
El enfoque isoelctrico es una modificacin de la electro inorgnicos, cidos orgnicos, productos farmacuticos,
foresis. Se usa un aparato similar al que se muestra en la ismeros pticos y drogas en el suero y la orina .14
FIGURA 4-25. Migracin diferencial de soluto superpuesta en el flujo electroosmtico en electroforesis de zona
capilar. (De Heiger DN. High-Performance Capillary Electrophoresis. Waldbronn, Francia: Hewlett-Packard, 1992.)
108 PARTE I PRINCIPIOS BSICOS Y PRCTICA DE LA QUMICA CLNICA
CROM ATO GRAFA disolvente mvil es menos polar que el disolvente esta
cionario, y de fa s e invertida cuando el disolvente mvil es
La crom atografa se refiere al grupo de tcnicas empleadas ms polar.
para separar mezclas complejas con base en diferentes La cromatografa de particin es aplicable a cualquier
interacciones fsicas entre cada uno de los compuestos y la sustancia que pueda ser distribuida entre dos fases lqui
fase estacionaria del sistema. Los componentes bsicos en das. Debido a que los compuestos inicos son por lo
cualquier tcnica cromatogrfica son la fase mvil (gas o comn solubles slo en agua, la cromatografa de parti
lquido), que lleva la mezcla compleja (muestra); la fase cin funciona mejor con compuestos no inicos.
estacionaria (slido o lquido), por la cual fluye la fase mvil;
la columna que retiene la fase estacionaria; y los compo
Exclusin estrica
nentes separados (eluato).
La exclusin estrica, una variante de la cromatografa
lquido-slido, se emplea para separar molculas de soluto
M odos de separacin con base en el tamao y la forma. La columna cromato-
grfica se empaca con material poroso, como se muestra
Adsorcin
en la figura 4-26. Una muestra que contiene molculas de
La cromatografa de adsorcin, conocida tambin como
tamao distinto se desplaza por la columna disuelta en
crom atografa lquido-slido, se basa en la competencia
el disolvente mvil. Las molculas pequeas entran a los
entre la muestra y la fase mvil para sitios adsortivos en la
poros del empaque y son retenidas por un momento. Las
fase estacionaria slida. Hay un equilibrio de molculas de
molculas grandes son excluidas de los poros pequeos
soluto que son adsorbidas en la superficie slida, y desor-
y, por tanto, se mueven con rapidez entre las partculas.
bidas y disueltas en la fase mvil. Las molculas que son
Las molculas de tamao intermedio estn restringidas en
ms solubles en la fase mvil, se mueven ms rpido; las
parte a entrar a los poros y, por consiguiente, se mueven
menos solubles se mueven ms lento. As, una mezcla se
separa por lo comn en clases de acuerdo con los grupos por la columna a una velocidad intermedia entre las velo
cidades de las molculas grandes y pequeas.
funcionales polares. La fase estacionaria puede ser polar
Los primeros mtodos empleaban perlas hidroflicas
cida (como el gel de slice), polar bsica (como la al
de dextrano entrecruzado, poliacrilamida o agarosa, que
mina) o no polar (como el carbn vegetal). La fase mvil
formaban un gel al meterlas en agua. Este mtodo se deno
puede ser un disolvente simple o una mezcla de dos o ms
minaba filtracin en gel. Un proceso de separacin similar
disolventes, lo cual depende de los analitos por desorber.
con perlas de gel hidrfobo de poliestireno con una fase
La cromatografa lquido-slido no se emplea mucho en
mvil no acuosa se llamaba crom atografa de p ern ea ra n en
los laboratorios clnicos debido a problemas tcnicos con
gel. El empaque poroso actual emplea materiales inorgni
la preparacin de una fase estacionaria que tiene distribu
cos rgidos como el slice o el vidrio. El trmino exclusin
cin homognea de sitios de absorcin.
estrica incluye todas estas variaciones. El tamao de poro
lo controla el fabricante, y los materiales de empaque se
Particin pueden comprar con distintos tamaos de poro, lo cual
La cromatografa de particin se conoce tambin como depende de las molculas por separar.
crom atografa lquido-lquido. La separacin del soluto se
basa en la solubilidad relativa en un disolvente orgnico
(no polar) y uno acuoso (polar). En su forma ms sim
ple, la particin (extraccin) se efecta en un embudo de
separacin. Las molculas que contienen grupos polares
y no polares en una disolucin acuosa se agregan a un
disolvente orgnico inmiscible. Despus de una agita
cin vigorosa, se permite que se separen las dos fases. Las
molculas polares permanecen en el disolvente acuoso; las
molculas no polares se extraen en el disolvente orgnico.
Esto da como resultado la particin de las molculas de
soluto en dos fases separadas.
La relacin de la concentracin del soluto en los dos
lquidos se conoce como coeficiente de particin:
(CCFAR ).16 La absorbancia de cada punto eluido se mide Un empaque de columna uniforme, fino, da como resultado
con un densitmetro, y la concentracin se calcula por ensanchamiento de banda mucho menor, pero requiere pre
comparacin con un estndar de referencia sometido a cro sin para forzar la fase mvil a pasar. El empaque tambin
matografa en condiciones idnticas. puede ser pelicular (un ncleo inerte con una capa porosa),
de partculas pequeas e inertes o de partculas macroporo-
Crom atografa lquida de alta presin (CLAP) sas. El material ms comn empleado para el empaqueta
miento de columnas es el gel de slice. Es muy estable y se
La cromatografa lquida moderna emplea presin para puede usar de diferentes formas. Se puede usar como empa
separaciones rpidas, temperatura controlada, detectores que slido en cromatografa lquido-slido o cubierto con
en lnea y tcnicas de elucin de gradiente .1718 En la figura un disolvente, que sirve como la fase estacionaria (lquido-
4 -2 9 se ilustran los componentes bsicos. lquido). Como resultado de la corta duracin de las partcu
las recubiertas, las molculas del lquido de la fase mvil se
Bombas enlazan ahora con la superficie de las partculas de slice.
Una bomba fuerza a la fase mvil a pasar por la columna La CLAP de fase invertida en la actualidad es muy popu
a una velocidad mucho mayor que la lograda mediante lar; la fase estacionaria son molculas no polares (p. ej., el
columnas de gravedad. Existen bombas neumticas, de hidrocarburo C-18 octadecilo) unidas a partculas de gel de
jeringa, reciprocantes o amplificadoras hidrulicas. La slice. Para este tipo de empaque de columna, la fase mvil
bomba de ms uso en la actualidad es la bomba recipro empleada por lo comn es acetonitrilo, metano, agua o
cante mecnica, que se emplea como una bomba pluri- cualquier combinacin de disolventes. Una columna de
cabezales con dos o ms pistones reciprocantes. Durante fase invertida se puede usar para separar muestras inicas,
el bombeo, los pistones operan fuera de fase (180 para no inicas e inonizables. Se usa una disolucin amortigua
dos cabezales, 120 para tres cabezales) para proveer flujo dora para producir las caractersticas inicas deseadas y pH
constante. Las bombas neumticas se emplean para pro para la separacin del analito. Los empaques de columna
psitos preoperativos; las bombas de amplificador hidru varan en tamao (3 a 20 mm). Las partculas ms peque
lico ya no son de uso comn. as se usan sobre todo para separaciones analticas y las
ms grandes para separaciones preparativas.
Colum nas
La fase estacionaria se empaca en largas columnas de acero Inyectores de m uestra
inoxidable. La CLAP se ejecuta por lo comn a tempera Una jeringa pequea se puede usar para introducir la
turas ambiente, aunque las columnas se pueden colocar en muestra en la trayectoria de la fase mvil que la lleva hacia
un horno y calentar para incrementar la tasa de particin. la columna (fig. 4 -2 9 ). Sin embargo, el m ejor mtodo y
Jeringa pequea
para inyectar la
Eluyente
FIGURA 4-29. Componentes bsicos de CLAP. (De Bender GT. Chemical Instrumentation: A Laboratory Manual Based on
Clinical Chemistry. Filadelfla: WB Saunders, 1972.)
CAPITULO 4 TCNICAS ANALTICAS E INSTRUMENTACIN 111
ms empleado es el inyector de bucle. La muestra se intro influencia de un campo elctrico alto (1 0 6 V/m), en una
duce en un bucle de volumen fijo. Cuando se conmuta niebla fina de pequeas gotas con carga positiva, de la cual
el bucle, la muestra se coloca en la trayectoria de la fase el disolvente se evapora rpido. Los iones de soluto que
mvil en movimiento y se descarga en la columna. permanecen se transfieren despus a un espectrmetro de
Los inyectores de bucle tienen reproducibilidad alta y masas para ser analizados.
se usan a presiones altas. Muchos instrumentos de CLAP
tienen inyectores de bucle que pueden ser programados Registradores
para inyeccin automtica de muestras. Cuando el tamao El registrador se emplea para registrar la seal del detector
de muestra es menor que el volumen del bucle, la jeringa en funcin del tiempo que la fase mvil tarda en pasar por
que contiene la muestra se llena con la fase mvil hasta el el instrumento, empezando desde el momento de inyec
volumen del bucle antes de llenar el bucle. Esto evita la cin de la muestra. La grfica se llama crom atogram a (fig.
posibilidad de meter aire a la columna porque esta prcti 4-3 0 ). El tiempo de retencin se emplea para identificar
ca podra reducir la duracin del empaque de la columna. compuestos cuando se compara con tiempos de retencin
estndar obtenidos en condiciones idnticas. El rea de
Detectores pico es proporcional a la concentracin de los compuestos
Los detectores de CLAP modernos monitorean el eluido a que producen los picos.
medida que sale de la columna y, de manera ideal, produ Cuando la fuerza de elucin de la fase mvil es cons
cen una seal electrnica proporcional a la concentracin tante en la separacin, se llama elucin isocrtica. Para
de cada componente separado. Los espectrofotmetros muestras que contienen compuestos de composiciones
que detectan absorbancias de luz visible o ultravioleta son relativas que difieren mucho, la eleccin del disolvente es
los que se emplean con ms frecuencia. El CFD y otros un compromiso. Los compuestos eluidos primero pueden
detectores de exploracin rpida se usan tambin para tener tiempos de retencin cercanos a cero, lo que pro
comparaciones espectrales e identificacin y pureza de duce una separacin mala (resolucin), como se muestra
compuestos. Estos detectores han sido empleados para en la figura 4-30A. Los compuestos bsicos suelen tener
anlisis de frmacos en la orina. Obtener una exploracin tiempos de retencin bajos porque las columnas C -18 no
ultravioleta de un compuesto a medida que se eluye en la toleran pases mviles con pH alto. La adicin de reactivos
columna puede proveer informacin importante en cuan formadores de pares de cationes (p. ej., cido sulfnico de
to a su identidad. Las sustancias desconocidas se pueden octano) puede dar como resultado una m ejor retencin de
comparar contra espectros almacenados en una bibliote compuestos con carga negativa en la columna.
ca de una manera similar a la espectrometra de masas. A Los compuestos de elucin tarda pueden tener tiempos
diferencia de la cromatografa de gases/espectrometra de de retencin largos, y producen bandas amplias que dan
masas, que requiere volatilizacin de compuestos especfi como resultado una sensibilidad menor. En algunos casos,
cos, la cromatografa lquida/conjunto de fotodiodos (C U ciertos componentes de una muestra pueden tener una
CFD) permite la inyeccin directa de muestras de orina gran afinidad con la fase estacionaria que no experimenta
acuosas. elucin en absoluto. La elucin de gradiente es una tcni
Debido a que muchas sustancias biolgicas fluorescen ca de CLAP que se puede usar para superar este problema.
de forma intensa, los detectores de fluorescencia tambin La composicin de la fase mvil se modifica para proveer
se pueden usar, lo que conlleva los mismos principios des un incremento continuo en la fuerza del disolvente de la
critos en la seccin de mediciones espectrofotomtricas. fase mvil que entra a la columna (fig. 4-30B ). La misma
Otro detector de CLAP comn es el detector amperom- elucin de gradiente se puede efectuar con un cambio ms
trico o electroqumico, que mide la corriente producida rpido en la concentracin de la fase mvil (fig. 4-30C ).
cuando el analito de inters se oxida o se reduce a cierto
potencial fijo establecido entre un par de electrodos. Crom atografa de gases
Un espectrmetro de masas (EM ) se puede usar tam
bin como detector, no slo para la identificacin y cuan- La crom atografa de gases se emplea para separar mezclas
tificacin de compuestos sino tambin para informacin de compuestos que son voltiles o se pueden hacer vol
estructural y determinacin de peso molecular .19 La mues tiles .21 La cromatografa de gases puede ser cromatogra
tra en un EM se volatiliza primero y luego se ioniza para fa gas-slido (CG S), con una fase estacionaria slida, o
formar iones moleculares cargados y fragmentos que se cromatografa gas-lquido (CG L), con una fase estacio
separan de acuerdo con su relacin de masa a carga (m /z); naria de lquido no voltil. La CGL se usa por lo comn
la muestra se mide entonces mediante un detector, que da en laboratorios clnicos. En la figura 4-31 se ilustran los
la intensidad de la corriente de iones para cada especie. componentes bsicos de un sistema cromatogrfico de
La identificacin de la molcula se basa en la formacin gases. La configuracin es similar a la CLAP, excepto que
de fragmentos caractersticos. El acoplamiento de un cro la fase mvil es un gas, y las muestras se dividen entre una
matgrafo de lquidos con un espectrmetro de masas es fase mvil gaseosa y una fase estacionaria lquida. El gas
difcil debido a la gran cantidad de disolvente en el elui portador puede ser nitrgeno, helio o argn. La seleccin
do. La tcnica de electrodispersin (ED) permite transferir del gas portador se determina por el detector empleado en
los iones de la disolucin a la fase de gas.20 La muestra se el instrumento. El instrumento puede ser operado a una
pasa por una punta capilar metlica y se convierte, bajo la temperatura constante o ser programado para funcionar a
112 PARTE I PRINCIPIOS BSICOS Y PRCTICA DE LA QUMICA CLNICA
t (min)
t (min) t (min)
FIGURA 4-30. Cromatogramas: (A) la fase mvil de separacin de Intercambio inico socrtico contiene 0.055 M de NaN03. (B)
Gradiente de fase mvil-elucin de gradiente de 0.01 a 0.1 M de NaN03 a 2%/minuto. (C) Elucin de gradiente, 5%/mlnuto. (De
Horvth C. High Performance Liquid Chromatography, Advances and Perspectives. Nueva York: Academic Press, 1980.)
diferentes temperaturas si la muestra tiene componentes nenies para que se evaporen al inyectarlos. La muestra de
con volatilidades distintas. vapor pasa rpido por la columna en parte como un gas y en
La muestra, que es inyectada por un septo, se debe inyec parte disuelta en la fase lquida. Los compuestos voltiles
tar como un gas, o la temperatura del puerto de inyeccin que estn presentes, sobre todo en la fase gas, tendrn un
debe estar arriba del punto de ebullicin de los compo- coeficiente de particin bajo y se movern con rapidez por
la columna. Los compuestos con puntos de ebullicin ms
altos se movern con lentitud por la columna. El efluente
Regulador de gas Jeringa pasa por un detector que produce una seal elctrica pro
Septo y calentador porcional a la concentracin de los componentes voltiles.
(puerto de inyeccin) Como en la CLAP, el cromatograma se usa para identificar
los compuestos por el tiempo de retencin y para determi
nar su concentracin por el rea bajo el pico.
Colum nas
Las columnas de CGL estn hechas de vidrio o acero inoxi
Cilindro de dable y existen en diversas configuraciones de espiral y
fase mvil tamaos. Las columnas empacadas se llenan con partcu
(gas portador) Horno del las inertes como tierras diatomceas o polmero poroso o
detector
cuentas de vidrio cubiertas con una fase lquida no voltil
Detector de (estacionaria). Estas columnas son por lo comn de 1/8 a
concentracin
Vi de pulgada de ancho y 3 a 12 pies de largo. Las colum
FIGURA 4-31. Componentes bsicos de CGL. (De Bender GT. Che nas tubulares abiertas, cubiertas, de pared capilar, tienen
mical Instrumentation: A Laboratory Manual Based on Clinical Che dimetros internos en el intervalo de 0.25 a 0 .50 mm y son
mistry. Filadelfia: WB Saunders, 1972.) de hasta 60 m de largo. La capa lquida va sobre las pare
CAPTULO 4 TCNICAS ANALTICAS E INSTRUMENTACIN 113
des de la columna. Un soporte slido recubierto con una poco. El gas portador y los compuestos separados forman
fase estacionaria lquida puede a su vez estar impregnado el flujo de columna de la muestra en el otro filamento. Los
en las paredes de la columna. componentes de la muestra tienen por lo comn una con
La fase estacionaria lquida debe ser no voltil a las ductividad trmica menor, lo que incrementa la tempera
temperaturas empleadas, trmicamente estable y no reac tura y la resistencia del filamento de muestra. El cambio de
cionar con los solutos por separar. La fase estacionaria se resistencia produce un circuito de puente desequilibrado.
denomina no selectiva cuando la separacin se basa ante El cambio elctrico se amplifica y alimenta al registrador;
todo en la volatilidad relativa de los compuestos. Las fases es proporcional a la concentracin del analito.
lquidas selectivas se emplean para separar compuestos Los detectores de ionizacin de flama se usan mucho
con base en la polaridad relativa (como en la cromatogra en el laboratorio clnico. No son ms sensibles que los
fa lquido-lquido). detectores de CT. El efluente de la columna se alimenta
hacia una pequea flama de hidrgeno que arde en exceso
Detectores de aire u oxgeno atmosfrico. El chorro de flama y un
Aunque hay muchos tipos de detectores, slo se analizan electrodo colector alrededor de la flama tienen potencia
la conductividad trmica (CT) y los detectores de ioniza les opuestos. Cuando se quema la muestra, se forman los
cin de flama porque son los ms estables (fig. 4-32). Los iones y se mueven hacia el colector cargado. As, se forma
detectores de conductividad trmica contienen alambres una corriente proporcional a la concentracin de los iones
(filamentos) que cambian la resistencia elctrica con el y se alimenta al registrador.
cambio de temperatura. Los filamentos forman los bra
zos opuestos de un puente de W heatstone y se calientan Espectrom etra de masas
elctricamente para elevar su temperatura. El helio, que La identificacin definitiva de las muestras que salen de
tiene una conductividad trmica alta, es por lo comn el las columnas cromatogrficas de gas es posible cuando se
gas portador. El gas portador de la columna de referencia utiliza un espectrmetro de masas como detector.20 En la
fluye de manera estable en un filamento, enfrindolo un figura 4-33A y B se muestra un diagrama de bloques de
tetrapolo y espectrmetros de masas con trampa de iones.
Lado Lado de
Las sustancias separadas de un cromatgrafo de gases
sensor referencia entran a la fuente donde las muestras son bombardeadas
con electrones para formar iones moleculares cargados y
fragmentos. Las molculas se descomponen en fragmen
Gas portador
tos caractersticos de acuerdo con su estructura molecu
lar (fig. 4-34). Estas partculas son concentradas para que
entren al sector de filtracin de masas donde son clasifica
das segn su relacin masa a carga (m /z) y son contadas
Salida mediante un multiplicador de electrones. Tanto el tetra
polo como los detectores de trampa de iones contienen
varillas o placas que se cargan con voltajes variables de CA
y CD para formar campos elctricos. En el tetrapolo, los
iones forman selectivamente rbitas sinusoidales estables
y atraviesan el sector de filtracin donde llegan al detector
y son medidos. En la trampa de iones, stos tambin for
man rbitas estables, pero son desestabilizados de forma
selectiva a fin de que lleguen al detector. Los patrones de
fragmentacin caractersticos que producen estos iones
se emplean para identificacin. Las bibliotecas por compu
tadora y algoritmos de comparacin estn disponibles
dentro del instrumento para comparar resultados espec
trales de masas de una sustancia conocida obtenida de una
muestra con la biblioteca de referencia. Los sistemas CG/
EM se emplean de manera extensa para medir drogas en
confirmaciones toxicolgicas de orina. En la figura 4-35
se ilustra el espectro de masa de A9 9-carboxitetrahidro-
cannabinol, un metabolito de la marihuana. Las drogas y
metabolitos deben ser extrados de los lquidos corporales
y, por lo comn, reaccionan con reactivos de derivacin
para formar compuestos que son ms voltiles para proce
FIGURA 4-32. (A) Esquema de un detector de conductividad tr sos de cromatografa de gases.
mica. (B) Esquema de un detector de ionizacin de flama. (De Tetz Los espectrmetros de masa en tndem (CG/EM/EM),
NW, ed. Fundamentis of Clinical Chemistry. Filadefia: WB Saunders, obtenidos al aadir un segundo espectrmetro a un sis
1987.) tema CG/EM, se pueden usar para mayor selectividad y
114 PARTE I PRINCIPIOS BSICOS Y PRCTICA DE LA QUIMICA CLINICA
Introduccin
de la muestra
182 i
303 i I
menores lmites de deteccin. El primer espectrmetro de deteccin de enfermedades que la genmica porque estos
masa permite que slo los iones de una relacin especfica productos determinan lo que est ocurriendo actualm en
m iz pasen al segundo espectrmetro, donde se lleva a cabo te dentro de una clula, en vez de los genes, que indican
una fragmentacin y anlisis adicional (fig. 4-36). lo que una clula p odra ser capaz de efectuar. Adems,
muchos cambios (postraslacionales) pueden ocurrirle a la
INSTRUMENTACIN PARA PROTEM ICA protena, ya que se ve afectada por otras protenas y enzi
mas, que no se pueden predecir con facilidad mediante el
La siguiente generacin de biomarcadores para enferme conocimiento a nivel genmico.
dades humanas ser descubierta por medio de tcnicas Con frecuencia se emplea un mtodo asistemtico, bas
encontradas dentro de los campos de investigacin de la tante general, en el descubrimiento de nuevos marcado
genmica y la protemica. La genmica emplea secuencias res bioqumicos. Las protenas de muestras (p. ej., suero,
conocidas del genoma humano completo para determinar orina, extracto de tejido) de individuos normales se com
el papel de la gentica en ciertas enfermedades humanas. paran con las obtenidas de pacientes con la enfermedad
La protemica es la investigacin de los productos prote- que se est estudiando. Las tcnicas, como la electroforesis
nicos codificados por estos genes. La expresin de prote bidimensional, se pueden emplear para separar protenas
nas es igual a y, en muchos casos, ms importante para la en puntos o bandas individuales. Las protenas que slo
Tndem en espacio
(l
Ionizacin Anlisis de masa Disociacin Anlisis de masa Deteccin
Tndem en tiempo
Ionizacin
Anlisis de masa
Disociacin
Anlisis de masa
Deteccin
116 PARTE I PRINCIPIOS BSICOS Y PRCTICA DE LA QUMICA CLNICA
aparecen en las muestras normales o mrbidas se estudian mioluminiscencia de polipptidos marcados de manera
an ms. Existen programas de computadora que compa apropiada. Estas ltimas tcnicas son ms sensibles a los
ran geles en forma digital para determinar puntos o reas tintes colorimtricos.
que son diferentes. Cuando se han encontrado las prote
nas candidato, los puntos pueden ser aislados y someti Espectrom etra de m asas MADI-TOF
dos a anlisis de espectrometra de masas avanzado para
y SELDI-TOF
identificar la protena y algunas modificaciones postrasla-
cionales que pueden haber ocurrido. Con este mtodo, el La espectrometra de masa de tiempo de vuelo con ioniza
investigador no tiene preconcepciones o sesgos en cuanto cin y desorcin lser asistida por matriz (m atrix-asssted
a qu direcciones o protenas particulares buscar. lser desorption ionization time-of-flight, MALDI-TOF) se
emplea para el anlisis de biomolculas, como pptidos
Electroforesis bidim ensional y protenas. Las muestras de protenas, como las aisladas
de un electroforetograma, se mezclan con un disolvente
Este ensayo de electroforesis combina dos dimensiones de matricial apropiado y se depositan como puntos en una
electroforesis distintas para separar protenas de matrices placa de acero inoxidable. Se seca el disolvente y la placa
complejas como suero o tejido. En la primera dimensin, se introduce en el sistema de vaco del analizador MAL-
las protenas se resuelven de acuerdo con sus puntos iso DI-TOE Como se muestra en la figura 4-38, un impulso
elctricos (pl), usando gradientes de pH inmovilizados. lser radia la muestra causando desorcin e ionizacin de
Los gradientes comerciales estn disponibles en diver la matriz y la muestra. Debido a que el alcance espectral
sos rangos de pH. En la segunda dimensin, las prote de masa monitoreado es alto ( > 5 0 0 daltons), la ioniza
nas se separan de acuerdo con su tamao relativo (peso cin de la matriz de bajo peso molecular se puede distin
molecular), usando electroforesis en gel de dodecil sulfato guir fcilmente de los pptidos y protenas de alto peso
de sodio-poliacrilamida (SDS-PAGE). Un esquema de este molecular y no interfiere con la prueba de la protena. Los
procedimiento se muestra en la figura 4-37. Los geles se pue iones de la muestra se centran hacia el espectro de masas.
den correr en condiciones desnaturalizantes o no desna El tiempo requerido para que una masa llegue al detector
turalizantes (p. ej., para el mantenimiento de la actividad es una funcin lineal de la masa; as, los iones grandes
enzimtica) y ver mediante diversas tcnicas, incluso el requieren ms tiempo que los pequeos. El peso molecular
uso de tintes colorimtricos (como el azul de Coomassie de las protenas adquirido mediante el espectro de masas
o tincin de plata), radiogrficas, fluoromtricas o de qui- se emplea para determinar la identidad de la muestra, y es
til en la determinacin de modificaciones postraslacio-
nales que pudieron haber ocurrido. Para protenas muy
Ia
1 2
Espetrometra de
Lser masas de tiempo de vuelo
i \ - A
Analito
V
O O Ma,riz
\w o +
grandes, las muestras se pueden preparar con tripsina, que OSM O M ETRA
rompe los enlaces peptidicos entre la lisina y la arginina,
para producir fragmentos de menor peso molecular que Un osmmetro se emplea para medir la concentracin
entonces se pueden medir. El lmite de deteccin de esta de partculas de soluto en una disolucin. La definicin
prueba es casi 10 '15 a 10 '18 moles. Una modificacin de la matemtica es
espectrometra de masas MALDI-TOF es la espectrometra de Osmolalidad = cp X n X C (Ec. 4-13)
masas de tiempo de vuelo con ionizacin y desorcin lser
mejorada por superficie (surface-enhanced lser desorption donde cp = coeficiente osmtico
ionization time-of-flight, SELDI-TOF), en la cual las prote n = nmero de partculas disociables (iones) por
nas son captadas de manera directa en un biochip croma- molcula en la disolucin
togrfico sin que se requiera la preparacin de la muestra. C = concentracin en moles por kilogramo de disol
En la figura 4-39 se ilustra el proceso SELDI-TOE vente
Muestra
Lavado
MAE
Seleccionar el sistema:
Hidrfobo
Aninico
Lser
Catinico
De enlace con metal
Anticuerpo
Desorcin/ionizacin Eliminar las protenas no
enlazadas, sales u otros
contaminantes
Lector
SELDI
(PBSIi)
r i
-a
to
g
Espectros '
originales
Escala de
grises (gel)
A Baja Masa/carga Alta Estacin de trabajo
FIGURA 4-39. Esquema general del proceso SELDI-TOF. (Diagrama cortesa de Ciphergen Biosystems, Fremont, CA.)
118 PARTE I PRINCIPIOS BSICOS Y PRCTICA DE LA QUMICA CLNICA
El coeficiente osmtico es un factor derivado de for Osm m etro de punto de congelam iento
ma experimental para corregir el hecho de que algunas de En la figura 4-40 se ilustran los componentes bsicos de
las molculas, incluso un compuesto altamente disociado, un osmmetro de punto de congelamiento. La muestra en
existen como molculas y no como iones. un pequeo tubo se introduce en una cmara con refrige
Las cuatro propiedades fsicas de una disolucin que rante fro que circula desde una unidad de enfriamiento. Se
cambian con variaciones en el nmero de partculas sumerge un termistor en la muestra. Para medir la tempe
disueltas en el disolvente son presin osmtica, presin ratura, se emplea un alambre con el que se agita de manera
de vapor, punto de ebullicin y punto de congelam ien suave la muestra hasta que se enfra varios grados debajo
to. Los osmmetros miden la osmolalidad de manera de su punto de congelamiento. Es posible enfriar agua a
indirecta al medir una de estas propiedades coligativas, una temperatura tan baja como -4 0 C y an tener agua
que cambian en proporcin con la presin osmtica. Los lquida, siempre que no estn presentes cristales o mate
osmmetros de uso clnico miden la depresin del punto ria particulada. sta se denomina disolucin superenfriada.
de congelamiento o la depresin de la presin de vapor; La agitacin vigorosa cuando se superenfra la muestra da
los resultados se expresan en miliosmoles por kilogramo como resultado congelamiento rpido. El congelamiento
(mosm/kg). tambin se puede iniciar al sembrar cristales en una diso-
CAPITULO 4 TCNICAS ANALTICAS E INSTRUMENTACIN 119
Barrera de Producto de
membrana biodeteccin
* *
* *
* *
Analitos
objetivo
Agente de Transductor
biodeteccin
!________________________________________ II________________ II_________________________________________________I
BIODETECCIN TRANSDUCCIN ELECTRNICA
FIGURA 4-42. Esquema de un biosensor. (De Rosen A. Biosensors: where do we go from here? MLO Med Lab Obs
1995;27(3):24.)
recientes con el desarrollo de la fabricacin de microcir- los ESI ahora se usan de manera rutinaria para estos dos
cuitos de silicio porque es posible miniaturizar los bio- ltimos metales.
sensores y distribuirlos a bajo costo. En una sola oblea de La electroforesis es todava una tcnica importante en
silicio se puede producir un sistema de biosensores para los laboratorios clnicos, aunque el desarrollo de nuevos
producir un multipanel de resultados, como un perfil de ensayos ha puesto en duda su funcin. Por ejemplo, la
electrlito. Los dispositivos comerciales de PLDA emplean electroforesis de lipoprotenas ha sido desplazada en gran
biosensores electroqumicos (como los electrodos selecti medida por la medicin directa de colesterol de lipopro
vos de m icroiones) y pticos para la medicin de glucosa, tenas de alta densidad (HDL) y el clculo de colesterol
electrlitos y gases sanguneos arteriales. Con la inmovi de lipoprotenas de baja densidad (LDL). El desarrollo de
lizacin de anticuerpos y secuencias de DNA especficas, un ensayo especfico para colesterol LDL disminuir ms
las sondas biosensoras pronto estarn disponibles para la la funcin de la electroforesis. Con el desarrollo de inmu
deteccin de hormonas, frmacos y drogas, y bacterias noensayos especficos para la forma MB de la isoenzima
difciles de cultivar y virus como C hlam ydia, de tuberculo cinasa de creatina (CK-MB) y ensayos de inhibicin para
sis o de inmunodeficiencia humana .22 la forma 1 de la deshidrogenasa de lactato (LD 1), la elec
troforesis ya no es tan comn como antes; sin embargo,
RESUM EN en fechas recientes se puso en circulacin un ensayo de
electroforesis automatizado para isoformas CK-MB. La
Las tcnicas y principios generales empleados en un labo electroforesis desempear un papel importante en el rea
ratorio de qumica clnica son idnticos a los utilizados de patologa molecular para la identificacin de produc
en otros laboratorios de prueba analtica. Los laboratorios tos gnicos y mutaciones. La electroforesis bidimensio-
clnicos tienen necesidades especiales que requieren que nal permite la separacin de mezclas complejas, y es una
los analizadores tengan alto rendimiento y tiempos de res herramienta importante para el descubrimiento de nuevos
puesta para la muestra. La generacin actual de analizado biomarcadores para enfermedad (protem ica). La iden
res qumicos opera bajo el modo de acceso aleatorio; es tificacin de protenas especficas se puede llevar a cabo
decir, cualquier combinacin de pruebas se puede llevar a mediante instrumentos de espectrometra de masas con
cabo en una muestra desde un men de analitos. Para los desorcin asistida por lser. La electroforesis capilar es
analitos de qumica general, como glucosa o fsforo, la una tecnologa incipiente que promete tener muchas apli
espectrofotometra es la tcnica que ms se emplea. Para caciones clnicas. Con el desarrollo de inmunoensayos, el
electrlitos como sodio o potasio, los electrodos especfi papel de la cromatografa lquida ha pasado del monitoreo
cos de iones son muy usados y han reemplazado en gran de frmacos teraputicos a la toxicologa. La CLAP con
medida a los fotmetros de flama. La espectrofotometra detectores UV de exploracin rpida se emplea para iden
de absorcin atmica se emplea todava para metales tificaciones completas de frmacos. Los sistemas CG/EM
como cinc y cobre, y es el mtodo de referencia para cal son el sostn principal para confirmacin.
cio y magnesio. Sin embargo, los ensayos colorimtricos y
CAPTULO 4 TCNICAS ANALTICAS E INSTRUMENTACIN 121
P R E G U N T A S DE R E P A S O
13. Cul de las siguientes es la ley de Beer? 17. Qu es lo ms exacto en relacin con los electrodos
a) % T = I/I0 X 100 selectivos de iones?
b) E = tv a) El electrodo de pH usa una membrana de estado
c) e = ApH X 0.59V slido.
d )A = e X b X c b) El electrodo de calcio no requiere un electrodo de
e) Osmolalidad = <}> X n X C referencia.
c) Las membranas especficas de gas son necesarias
14. De lo siguiente, qu clasifica de manera correcta la
para electrodos de oxgeno y dixido de carbo
radiacin electromagntica de baja energa a alta ener
no.
ga?
d) El electrodo de sodio usa un portador selectivo de
a) Csmica, gamma, rayos X, U y visible, infrarroja,
iones (valinomicina).
microondas.
e) El ESI para la urea emplea ureasa inmovilizada.
b ) UV, visible, infrarroja, microondas, rayos X, cs
mica, gamma. 18. De lo siguiente, qu es FALSO en relacin con la
c) U y visible, infrarroja, csmica, gamma, microon espectrometra de masas?
das, rayos X. a) Los iones se forman por el bombardeo de electro
d) Microondas, infrarroja, visible, UV, rayos X, gam nes.
ma, csmica. b) El cuadripolo y los sectores de trampas de iones
e) Visible, U y infrarroja, csmica, gamma, micro- separan iones de acuerdo con su relacin masa a
ondas, rayos X. carga.
c) Cada compuesto qumico tiene un espectro de
15. Cul es el propsito del interruptor giratorio en un
masa nico.
espectrofotmetro de absorcin atmica?
d) La espectrometra de masas detecta cromatografa
a) Corregir la cantidad de luz emitida por la flama.
de gas y lquido.
b ) Corregir la intensidad fluctuante de la fuente de
e) Los espectrmetros de masas se pueden usar para
luz.
secuenciar DNA.
c) Corregir la sensibilidad fluctuante del detector.
d) Corregir las diferencias en la tasa de aspiracin de 19. De los siguientes enunciados, cul no es un objetivo
la muestra. de la investigacin protemica?
e) Corregir la presencia de luz parsita. a) Identificar protenas novedosas como posibles
nuevos marcadores para enfermedad.
16. De lo que se menciona a continuacin, qu describe
b) Identificar modificaciones postraslacionales de
m ejor el proceso de fluorescencia?
protenas.
a) Los tomos emiten un fotn cuando se excitan
c) Comprender el mecanismo de las enfermedades.
los electrones.
d) Identificar mutaciones gnicas especficas.
b) Las molculas emiten un fotn cuando se excitan
e) Determinar cules genes estn expresados y cu
los electrones.
les estn inactivos.
c) Las molculas emiten un fotn a la misma energa
cuando los electrones excitados vuelven al estado 20. Cul de los siguientes procedimientos no se emplea
basal. en la actualidad o de manera rutinaria para los dispo
d) Las molculas emiten un fotn a mayor energa sitivos de prueba en el lugar de la atencin?
cuando los electrones excitados vuelven al estado a) Inmunocromatografa.
basal. b) Biosensores.
e) Las molculas emiten un fotn a menor energa c) Deteccin colorimtrica.
cuando los electrones excitados vuelven al estado d) Deteccin electroqumica.
basal. e) Reaccin en cadena de la polimerasa.
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Principios de
automatizacin
qumica clnica
William L. Roberts
C O N T E N I D O DE L C A P T U L O
O B J E T I V O S
T R M I N O S C L A V E
124
CAPTULO 5 PRINCIPIOS DE AUTOMATIZACIN QUMICA CLNICA 125
En el laboratorio moderno de qumica clnica se emplea un plsticos de prueba, identificacin positiva del paciente
alto grado de automatizacin. Muchas etapas en el proce y calibracin infrecuente estaban entre las caractersticas
so analtico que antes se llevaban a cabo de forma manual nicas del ACA. Otros hitos importantes fueron la intro
ahora se pueden realizar automticamente, lo que permi duccin de la tecnologa de anlisis de capa fina en 1976
te al operador centrarse en tareas que no son posibles de y la introduccin del analizador Kodak Ektachem (ahora,
automatizar con facilidad e incrementar tanto la eficiencia Vitros) en 1978 (en la actualidad, Ortho-Clinical Diagnos-
como la capacidad. El proceso analtico se puede dividir tics). Este instrumento fue el primero en usar volmenes
en tres fases principales: preanaltica, analtica y posana- de micromuestra y reactivos en placas para anlisis qu
ltica, que corresponden al procesamiento de la muestra, mico por va seca, y en incorporar de manera extensa la
el anlisis qumico y el manejo de datos, respectivamente. tecnologa de computadoras en su diseo y uso.
M ejoramientos sustanciales han ocurrido en las tres reas Desde 1980 han sido desarrollados varios analizadores,
durante la dcada pasada. Siete vendedores principales de sobre todo discretos, que incorporan caractersticas como
diagnstico venden analizadores automatizados y reacti electrodos selectivos de iones (ESI), fibra ptica, anlisis
vos. Estos vendedores perfeccionan de manera continua policromtico, software y hardware de computadora cada
sus productos para hacerlos ms funcionales y amigables vez ms avanzado para el manejo de datos y mens de
con el usuario. La fase analtica es la ms automatizada, prueba ms grandes. Los analizadores populares y ms
y en la actualidad ms investigacin y esfuerzos de desa exitosos que emplean estas y otras tecnologas desde 1980
rrollo se enfocan en incrementar la automatizacin de los son los analizadores Astra (ahora, Synchron) (Beckman
procesos pre y posanalticos. Coulter) que empleaban de manera extensa ESI; Paramax
(Dade) utiliza suministro de tabletas de reactivo y mues
HISTORIA DE LOS ANALIZADORES treo de tubo primario; el analizador Hitachi (Boehrin-
ger Mannheim; ahora, Roche Diagnostics) con discos de
AUTOM ATIZADOS
reaccin reutilizables y configuraciones fijas de diodos
Despus que Technicon introdujo en 1957 el primer anali para mapeo espectral, y el Chem 1 de Technicon (ahora,
zador automatizado, los instrumentos de este tipo prolife- Bayer), que empleaba segmentos de aceite encapsulados
raron de muchos fabricantes .1Este primer AutoAnalyzer de muestra y reactivos en un solo tubo de flujo continuo.
(AA) fue un analizador de lotes secuencial, de canal nico Los sistemas automatizados de uso comn en la actualidad
y flujo continuo capaz de proveer un solo resultado de en los laboratorios de qumica clnica son los analizado
prueba en casi 40 muestras por hora. La siguiente gene res Aeroset y ARCH1TECT (Abbott Laboratories), Advia
racin de instrumentos Technicon que se desarroll fue la (Bayer), Synchron (Beckman Coulter), Dimensin (Dade
serie de analizadores mltiples simultneos (Simultaneous Behring), AU (Olympus), Vitros (Ortho-Clinical Diagnos
M ltiple A nalyzer, SMA). SMA -6 y SMA-12 fueron anali tics) y varias lneas de analizadores Roche.
zadores con canales mltiples (para pruebas diferentes), Los fabricantes de estos sistemas de instrumentos han
que trabajaban de manera sincrnica para producir 6 a 12 adoptado las caractersticas y tecnologas ms exitosas
resultados de prueba por hora. No fue sino hasta media de otros instrumentos, donde es posible, para hacer cada
dos de la dcada de 1960 que estos analizadores de flujo generacin de su producto ms competitiva en el mercado.
continuo tuvieron alguna competencia importante en el Las diferencias entre los instrumentos de los fabricantes,
mercado. principios de operacin y tecnologas son menos distintas
En 1970, se introdujo el primer analizador centrfugo ahora que en los primeros aos de la automatizacin del
comercial como una tecnologa subproducto de la inves laboratorio.
tigacin del espacio exterior de la NASA. El Dr. Norman
Anderson desarroll un prototipo en 1967 en el Oak Ridge FUERZAS IM PULSORAS HACIA MS
National Laboratory como una alternativa para la tecnolo
AUTOM ATIZACIN
ga de flujo continuo, la cual tena problemas de acarreo
importantes y un costoso derroche de reactivo. l quera Desde 1995, el ritmo de cambios con los analizadores
llevar a cabo anlisis en paralelo y tambin aprovechar los qumicos de rutina actuales y la introduccin de nuevos
avances de la tecnologa de las computadoras. La segunda han disminuido de forma considerable, en comparacin
generacin de estos instrumentos (1975) fue ms exitosa, con la primera mitad de la dcada de 1990. En efecto, los
como resultado de la miniaturizacin de las computadoras analizadores son ms rpidos y fciles de usar como resul
y avances en la industria de los polmeros para la fabrica tado de los refinamientos continuos de transformacin
cin de cubetas pticas de plstico de gran calidad. y electrnicos. Los mtodos son ms precisos, sensibles
El siguiente desarrollo importante que revolucion la y especficos, aunque algunos de los mismos principios
instrumentacin de qumica clnica ocurri en 1970 con se encuentran en los instrumentos de hoy como en los
la introduccin del Automatic Clinical Analyzer (ACA) modelos anteriores. Los fabricantes han trabajado de
(DuPont [ahora, Dade Behring]). ste fue el primer ana manera exitosa hacia la automatizacin con capacidades
lizador discreto de flujo continuo, as como tambin el de independencia e intervencin mnima del operador.2
primer instrumento en tener capacidades de acceso a lea Los fabricantes tambin han respondido al deseo de los
torio, mediante el cual se podan analizar muestras STAT mdicos de llevar la prueba de laboratorio al paciente. La
fuera de la secuencia del lote segn se requiriera. Paquetes introduccin de analizadores de banco fciles de operar,
126 PARTE PRINCIPIOS BSICOS Y PRCTICA DE LA QUMICA CLNICA
porttiles y pequeos, en laboratorios de consultorios vos diagnsticos en pacientes que parecen saludables .5 La
(LC ), as como en unidades de atencin quirrgica y cr expectativa de resultados de calidad con mayor exactitud
tica que demandan resultados de laboratorio inmediatos, y precisin nunca est presente con los estndares nor
ha dado como resultado un dominio enormemente exi mativos que establecen las Enmiendas de Mejoramiento
toso de analizadores que se emplean en el lugar donde se del Laboratorio Clnico (CLIA), la Comisin Conjunta
presta la atencin .3 Otra rea especializada con un arsenal sobre Acreditacin de Organizaciones de Atencin de la
de analizadores de rpido desarrollo es la inmunoqumica. Salud (JCAHO), el Colegio de Patlogos Estadounidenses
Las tcnicas inmunolgicas para examinar frmacos, pro (CAP) y otros. La intensa competencia entre los fabrican
tenas especificas, marcadores de tumores y hormonas han tes de instrumentos ha impulsado la automatizacin hacia
evolucionado a un nivel de automatizacin incrementado. analizadores ms complejos con tecnologas creativas y
Los instrumentos que usan tcnicas como el inmunoensa- caractersticas nicas. Adems, los costos disparados han
yo de polarizacin por fluorescencia (FPIA), nefelometra estimulado la reforma de atencin de la salud y, de manera
e inmunoensayo competitivo y no competitivo con detec ms especfica, la atencin gestionada y los ambientes de
cin quimioluminiscente se han vuelto populares. capitacin dentro de los cuales los laboratorios estn for
El hito ms reciente en el desarrollo de analizadores de zados a operar.
qumica ha sido la combinacin qumica e inmunoensa
yo en un solo analizador m odular. El analizador Dimen EN FOQUES BSICOS HACIA LA
sin RxL con un mdulo de inmunoensayo heterogneo
AUTOM ATIZACIN
se introdujo en 1997. Este diseo permite la consolida
cin adicional de la estacin de trabajo con mejoras con Hay muchas ventajas en relacin con la automatizacin de
siguientes en la eficiencia operacional y ms reducciones los procedimientos. Un propsito es incrementar el nme
en el tiempo de respuesta. Los analizadores modulares que ro de pruebas que lleva a cabo un laboratorio en un deter
combinan las capacidades de qumica e inmunoensayo minado perodo. La mano de obra es un artculo caro en
ahora se pueden obtener de varios vendedores (fig. 5-1). los laboratorios clnicos. A travs de la mecanizacin, se
Otras fuerzas estn impulsando tambin el mercado reduce el componente de mano de obra dedicado a cual
hacia ms automatizacin enfocada. El mayor volumen quier prueba simple, y esto baja de modo efectivo el costo
de anlisis y el tiempo de respuesta ms rpido han dado por prueba. Un segundo propsito es minimizar la varia
como resultado una menor cantidad de laboratorios tron cin en los resultados de un laboratorio a otro. Al repro
cales ms centralizados que llevan a cabo anlisis ms ducir los componentes de un procedimiento de la forma
completos .4 El uso de grupos de expertos de laboratorio o ms idntica posible, se reduce el coeficiente de variacin
perfiles ha disminuido, con las pruebas individuales diri y se incrementa la reproducibilidad. As que la exactitud
gidas de manera ms diagnstica segn dictan los cambios no depende de la habilidad o carga de trabajo de un ope
de poltica recientes de Medicare y Medicaid. Es del cono rador particular en un da especfico. Esto permite compa
cimiento de los investigadores, durante muchos aos, que rar mejor los resultados da a da y de una semana a otra.
los paneles de qumica slo conducen en ocasiones a nue- No obstante, la automatizacin no corrige las deficien
cias inherentes a la metodologa. Una tercera ventaja se
obtiene debido a que la automatizacin elimina los errores
m potenciales de los anlisis manuales como etapas de pipe
*
teo volumtrico, clculo y transcripcin de resultados. Se
acumula una cuarta ventaja debido a que los instrumentos
A pueden usar cantidades muy pequeas de muestras y reac
tivos. Esto permite extraer menos sangre de cada paciente.
Adems, el uso de pequeas cantidades de reactivo dismi
nuye el costo de productos de consumo.
Hay tres enfoques bsicos con los instrumentos: flujo
continuo, anlisis centrfugo y anlisis discreto. Los tres
pueden usar anlisis por lotes (es decir, gran nmero de
muestras en una ejecucin), pero slo los analizadores
discretos ofrecen acceso aleatorio o capacidades STAT.
En flu jo continuo, los lquidos (reactivos, diluyentes y
muestras) se bombean por un sistema de tubera continua.
Las muestras se introducen de manera secuencial, y cada
una fluye por la misma red. Una serie de burbujas de aire
a intervalos regulares sirven como medios de separacin
FIGURA 5-1. Analizadores modulares de qumica e inmunoensa y limpieza. El flujo continuo, por tanto, resuelve la consi
yo. (A) Dade Behring Dimensin RxL (fotografa cortesa de Dade
deracin importante de uniformidad en pruebas de rendi
Behring); (B) Roche MODULAR ANALYTICS (fotografa cortesa de
miento porque cada muestra sigue la misma trayectoria de
Roche Diagnostics); (C) Abbot ARCHITEC c8200 (fotografa cortesa
de Abbott Diagnostics); y (D) Beckman Coulter Synchron LXi 725 reaccin. El flujo continuo tambin ayuda al laboratorio
(fotografa cortesa de Beckman Coulter). que necesita ejecutar muchas muestras que requieren el
CAPTULO 5 PRINCIPIOS DE AUTOMATIZACIN QUMICA CLNICA 127
Vendido primero en EUA 1998 1999 2001 1997 2002 1995 2001 1998
Rendimiento (pruebas/h, de 1600 600-1200 360-540 288-500 800 600-700 472-708 600-1200
pende de la mezcla de prueba)
Ensayos a bordo al mismo 59 49 41/71 48/95 51 75 72 47
tiempo
Canales abiertos 100 62 41/71 10 95 Sistema Canales de 5
cerrado instalacin
disponibles
Canales de electrodo selectivo 3 3 5 4 3 3 4 3
de iones
Volumen de muestra 2 |xL 2 |xL 3 |xL 2 |xL 1 |xL 6 p,L 2 (cL 2 jcL
mnimo aspirado
Volumen muerto de taza de 50 pcL 50 |xL 40 |xL 20 |xL No disponible 30 |j,L 50 pcL 50 |xL
muestra peditrica
Perforacin de la tapa de No No Yes No No No No No
tubo primario
Volumen de reaccin 160 |aL 80 |xL 210 |xL 350 |aL 150 |xL No aplicable 200 |xL 180 |jlL
final mnimo
Deteccin corta de muestra S S S S S S S S
Deteccin de cogulo No S S S S S S No
Mediciones de ndice S S S No S No No S
Dilucin automtica de S S S S S No S S
muestra del paciente y
repeticin de la prueba
Inventario automtico de S S S S S S S S
prueba a bordo
Solucin de problemas remota No S S S S No S S
mediante mdem
Inform acin obtenida de A ller RD. Chem istry analyzers branching out. CAP Today 2002; ju lio: 84-106(34) y directam ente de los vendedores.
CAPTULO 5 PRINCIPIOS DE AUTOMATIZACIN QUMICA CLNICA 129
FIGURA 5-3. Rejilla de 5 lugares Roche/HItachl. FIGURA 5-4. Rotor de analizador centrfugo.
130 PARTE I PRINCIPIOS BSICOS Y PRCTICA DE LA QUIMICA CLNICA
Rueda de cubetas
Estacin de
sellado en U
Manmetro de presin
Al recipiente
de desecho
de cubetas
Interruptor
de presin
Compresor de cubetas
FIGURA 5-7. Sistema de produccin del analizador para cubetas selladas. (Fotografa cortesa de Dade Behring.;
sistema nico de distribucin de muestra. Una probscide adecuado de muestra. La aguja sale de la taza y se mueve
hace presin en punta en la bandeja de muestra, la levanta a la derecha a una posicin sobre el paquete de prueba. La
y se mueve sobre la muestra a fin de aspirar el volumen muestra y el diluyente se inyectan en el paquete de prueba
requerido para las pruebas programadas para esa muestra. por una abertura especial de llenado de paquete. Despus
La punta se mueve despus sobre el bloque de medicin que se llena el paquete, se enjuagan la aguja, la tubera y
de placa. Cuando una placa est en posicin para recibir la bomba. El paquete de prueba se mueve sobre el sistema
una alcuota, la probscide se baja de modo que una gota de transporte. El instrumento transfiere tambin el nm e
de 10 pl transferida toque la placa, donde es absorbida ro de especificacin de la muestra del paciente sobre el
desde la punta no mojante. Un mbolo propulsado por un paquete al sistema de presentacin de resultados.
motor paso a paso controla la aspiracin y la formacin de El analizador Paramax emplea motores de avance gra
gotas. La precisin de descarga se especifica en 5% . dual controlados por computadora para mover las jeringas
En varios sistemas discretos, la sonda est unida por de muestreo y lavado. Cada 5 s, la sonda de muestreo entra
medio de una tubera no mojante a jeringas de precisin. a un recipiente de muestra, extrae el volumen requerido,
Las jeringas extraen una cantidad especfica de muestra se mueve a la cubeta y transfiere la alcuota con un volu
hacia la sonda y la tubera. Luego, la sonda se posicio- men de agua para lavar la sonda. El volumen de lavado
na sobre una cubeta, en la que se descarga la muestra. El se ajusta para producir el volumen de reaccin final. Si se
analizador Hitachi 736 utiliza dos sondas para aspirar de excede el alcance de linealidad del procedimiento, el siste
forma simultnea un volumen doble de muestra en cada ma recupera el tubo de muestra original, repite la prueba
sonda sumergida en un recipiente de muestra y, por tanto, con un cuarto del volumen de muestra original y calcula
entregarla en cuatro canales de prueba individuales, todo un nuevo resultado tomando en cuenta la dilucin.
en un paso operacional (fig. 5-9). Las sondas cargadas La economa del tamao de muestra es una consideracin
pasan por un fino bao de niebla antes de la entrega para importante en el desarrollo de procedimientos automatiza
lavar cualquier residuo de muestra adherido a la superficie dos, pero las metodologas tienen limitaciones para mante
externa de las sondas. Despus de la entrega, las sondas se ner niveles de sensibilidad y especificidad apropiados. Los
mueven a una estacin de enjuague para limpiar las super factores que gobiernan la medicin de muestra y reactivo
ficies interna y externa de las sondas. son interdependientes. En general, si se reduce el tamao
La estacin de llenado ACA Star (Dade) coloca las can de muestra, entonces se deben reducir el tamao de la cube
tidades apropiadas de muestra y diluyente en cada paquete ta de reaccin y el volumen de reaccin final, o incrementar
de prueba analtica. Una taza de muestra llena en la ban la concentracin de reactivo para asegurar suficiente forma
deja de carga va seguida de los paquetes de prueba para cin de color para lecturas fotomtricas exactas.
las pruebas requeridas en la muestra. Cuando se activa el
sistema, una lanzadera empuja a la izquierda la primera Sistemas de reactivos y entrega
taza de muestra a la posicin de muestreo. Mientras la
muestra se mueve a la izquierda, un impulsor de paquete Los reactivos se pueden clasificar como sistemas lquidos
accionado por resorte empuja el primer paquete de prue o secos para uso con analizadores automatizados. Los
ba sobre el riel de la estacin de llenado debajo de una reactivos lquidos se pueden comprar en recipientes de
placa decodificadora. El decodificador detecta el cdigo volumen a granel o en paquetes de dosis unitarias como
binario en la parte superior del paquete de prueba. Este una conveniencia para la prueba STAT en algunos anali
cdigo, cuando se traduce, proporciona instrucciones al zadores. Los reactivos secos se empacan en varias formas.
instrumento, incluso el volumen de muestra, tipo de dilu Pueden ser envasados como polvo liofilizado, que requiere
yente y caractersticas de manejo especiales. Por la bom reconstitucin con agua o una disolucin amortiguadora.
ba se hace pasar el diluyente que se usar para el mtodo A menos que el fabricante provea el diluyente, la calidad
particular con la finalidad de purgar las lneas y la aguja del agua disponible en el laboratorio es importante. Otros
antes de la admisin de diluyente. La aguja se coloca sobre reactivos secos pueden estar en forma de tableta, como los
la taza de muestra, se introduce y se aspira el volumen que se emplean en los analizadores ACA Star y Paramax.
Bao
Recipiente Canal Canal Canal Canal Bao de enjuague
de muestra 1 2 3 4
CAPTULO 5 PRINCIPIOS DE AUTOMATIZACIN QUMICA CLNICA 133
El analizador ACA Star tritura y disuelve las tabletas de analito de inters (fig. 5-10). El nmero de capas vara en
reactivo en la bolsa de prueba plstica a bordo del instru funcin del ensayo por realizar. El color que se forma en
mento. El analizador Paramax emplea una bocina ultra la capa del indicador vara con la concentracin del anali
snica para romper y disolver la tableta en una cubeta de to en la muestra. Las reacciones fsicas o qumicas pueden
plstico llena de agua. Un tercer y nico tipo de reactivo ocurrir en una capa, donde el producto de estas reaccio
seco es la p la ca de qum ica seca multicapas para el analiza nes avanza a otra capa en la que pueden ocurrir reacciones
dor Vitros. Estas placas tienen capas microscpicamente posteriores. Cada capa puede ofrecer un ambiente nico y
delgadas de reactivos secos montadas en un soporte pls la posibilidad de llevar a cabo una reaccin comparable a
tico. Estas placas son casi del tamao de una estampilla la ofrecida en un ensayo qumico o podra promover una
postal y no muy gruesas. actividad distinta por completo que no ocurre en la fase
El manejo del reactivo vara segn las capacidades del lquida. La capacidad para crear mltiples sitios de reac
instrumento y metodologas. Muchos procedimientos de cin permite la posibilidad de manejar y detectar compues
prueba usan reactivos de trabajo sensibles de corta dura tos en formas no posibles en procedimientos qumicos en
cin; as, los analizadores contemporneos emplean diver disolucin. Los materiales interferentes pueden quedar
sas tcnicas para conservarlos. Una tcnica es mantener rezagados o alterados en las capas superiores.
refrigerados los reactivos hasta el momento de usarlos y Los reactivos para los analizadores ACA estn conte
luego preincubarlos rpido a la temperatura de reaccin o nidos en paquetes de prueba especiales, que son sobres
almacenarlos en un compartimiento refrigerado en el ana de plstico divididos. Un paquete separado se usa para
lizador que alimenta directamente al rea de distribucin. cada prueba llevada a cabo en una muestra (fig. 5-11). Los
Otro medio de conservacin es proveer los reactivos en compartimentos a lo largo de la parte superior del sobre
forma de tableta seca y reconstituirlos cuando se va a eje contienen reactivos lquidos o en tableta. El nombre de
cutar la prueba. Una tercera es elaborar el reactivo en dos clave y el cdigo binario que ilustra la prueba estn impre
componentes estables que se combinarn en el momento sos en una barra de plstico en la parte superior de cada
de la reaccin. Si se emplea este mtodo, el primer com paquete de prueba. Todos los paquetes de prueba requie
ponente tambin podra ser empleado como un diluyente ren almacenaje refrigerado.
para la muestra. Los distintos fabricantes suelen usar com
binaciones de estas tcnicas de manejos de reactivos. Fase de reaccin qumica
Los reactivos tambin deben ser transferidos y medi
dos con exactitud. Muchos instrumentos emplean reacti Esta fase consiste en mezclado, separacin, incubacin
vos a granel para disminuir la preparacin y el cambio de y tiempo de reaccin. En la mayor parte de los analiza
reactivos. Los instrumentos que no usan reactivos a granel dores discretos, los reactivos qumicos se mantienen en
emplean un empaquetado de reactivos nico. En los anali
zadores de flujo continuo, los reactivos y diluyentes se sumi
nistran desde contenedores a granel en los que la tubera
est suspendida. El dimetro interno, o calibre, de la tubera
gobierna la cantidad de lquido que ser distribuido. Una
bomba de dosificacin, junto con un mltiple, introduce,
proporciona y bombea de manera continua y precisa lqui
dos y burbujas de aire por el sistema de flujo continuo.
Para entregar los reactivos, muchos analizadores dis
cretos emplean tcnicas similares a las usadas para medir
y entregar las muestras. Las jeringas, movidas mediante
un motor de avance gradual, pipetean los reactivos en
recipientes de reaccin. Las bombas propulsadas por pis
tn, conectadas mediante tubera, tambin pueden distri
buir reactivos. Otra tcnica para transferir reactivos a los
recipientes de reaccin emplea frascos de reactivos pre-
surizados conectados mediante tubera a vlvulas de dis
tribucin. La computadora controla la apertura y cierre
de las vlvulas. El volumen de llenado de reactivo en el
recipiente de reaccin se determina mediante la cantidad
precisa de tiempo que la vlvula permanece abierta.
Los analizadores Vitros emplean placas para contener su
sistema completo de qumica de reactivos. Las capas mlti
ples en la placa van sobre un soporte de polister claro. La
misma cubierta va entre soportes de plstico. Hay tres o ms
capas: a) una capa de dispersin, que acepta la muestra; b)
una o ms capas centrales, que pueden alterar la alcuota FIGURA 5-10. Placa Vitros con varias capas que contienen todo el
y c) una capa de indicador, donde se puede cuantificar el sistema qumico de reactivos. (Cortesa de Ortho-Clinical Diagnostics.)
134 PARTE I PRINCIPIOS BSICOS Y PRCTICA DE LA QUMICA CLNICA
M ezclado
Un componente vital de cada procedimiento es el mezcla
do adecuado de los reactivos y la muestra. Los fabrican
tes de instrumentos contemplan grandes distancias para
asegurar el mezclado completo. Las mezclas no uniformes
pueden producir ruido en el anlisis de flujo continuo y
precisin deficiente en el anlisis discreto.
El mezclado se lleva a cabo en analizadores de flujo
continuo (como el Chem 1) mediante el uso de tubera en
espiral. Cuando la corriente de reactivo y muestra pasan
por las espiras, el lquido gira y cae en cada espira. La tasa
diferencial de lquidos que caen entre s produce el mez
FIGURA 5-11. ACA. Un paquete de prueba con cdigo binario en
clado en la espiral.
una barra en la parte superior. (Fotografa cortesa de Dade Behring.)
El R A I000 emplea una accin rpida de inicio-paro de
la bandeja de reaccin. Esto causa una accin de bailo
recipientes mviles individuales que son desechables o teo contra las paredes de las cubetas, que mezcla los com
reutilizables. Estos recipientes de reaccin tambin fun ponentes. Los analizadores centrfugos pueden usar una
cionan como cubetas para anlisis ptico. Si las cubetas secuencia de rotacin inicio-paro o burbujear aire por la
son reutilizables, entonces se preparan las estaciones de muestra y el reactivo para mezclarlos mientras estas diso
lavado inmediatamente despus de las estaciones de lec luciones se mueven del disco de transferencia al rotor.
tura para limpiar y secar estos recipientes (fig. 5-12). Esta Este proceso de transferencia y mezclado ocurre en slo
configuracin permite al analizador operar de manera con unos segundos. El mezclado se debe a la fuerza centrfuga,
tinua sin reemplazar las cubetas. Ejemplos de este mtodo y sta empuja la muestra desde su compartimiento, sobre
son los analizadores Advia (Bayer Health), Aeroset (Abbott una particin en un compartimiento lleno de reactivo y,
Laboratories), Hitachi (Roche Diagnostics), AU (Olym por ltimo, hacia el espacio de la cubeta en el permetro
pus) y Synchron (Beckman Coulter). Como alternativa, del rotor.
los reactivos se pueden colocar en una cmara de reaccin En la tecnologa de placa Vitros, la capa de dispersin
estacionaria (como Astra), en la cual un proceso de flujo provee una estructura que permite una diseminacin rpi
directo de la mezcla de reaccin ocurre antes y despus de da y uniforme de la muestra sobre la capa o capas de reac
la lectura ptica. En los sistemas de flujo continuo, se usan tivo para la formacin uniforme de color.
Los analizadores ACA tienen componentes diseados
en especial para el mezclado: los mezcladores-rompedo
res. Las platinas presionan de manera selectiva y colapsan
los compartimientos de reactivo a lo largo de la parte supe
rior del paquete de prueba, y de esta manera se liberan los
reactivos en el interior del paquete. Mientras tanto, una
platina inferior presiona contra la porcin del fondo de
la envoltura del paquete de prueba para forzar los fluidos
hacia los compartimientos de reactivo rotos. Luego, con Muchos analizadores discretos no cuentan con una
un movimiento de golpeteo ligero el mezclador-rompedor metodologa automatizada mediante la cual puedan sepa
mezcla por completo los reactivos con los fluidos. rar sustancias interferentes de la mezcla de reaccin. Por
El analizador Paramax emplea ondas sonoras ultrasni tanto, se han elegido mtodos que tienen pocas interferen
cas durante 45 s para disolver las tabletas de reactivo en el cias o que tienen interferencias conocidas que se pueden
agua desionizada en cada cubeta. El ultrasonido se emplea compensar mediante el instrumento (p. ej., usar frmulas
tambin para mezclar la muestra con los reactivos prepa de correccin).
rados antes y para mezclar, si es necesario, el contenido de El uso de cromatografa de columna automatizada en algu
las cubetas despus de una segunda adicin de reactivo. nos mtodos proporciona al ACA la capacidad de remover
Los analizadores Hitachi utilizan paletas de agitacin de la muestra sustancias que podran afectar de manera
que se sumergen en el recipiente de reaccin durante unos adversa la reaccin. Se pueden usar tres tipos de colum
segundos para agitar la muestra y los reactivos, despus de nas: filtracin en gel, intercambio de iones y eliminacin
lo cual vuelven al depsito de lavado (fig. 5-14). Otros de protena. La columna se localiza en la parte superior del
instrumentos, como Astra, usan barras de agitacin mag paquete de prueba, debajo del encabezado del paquete
nticas que yacen en el fondo del recipiente de reaccin de plstico. Si el paquete contiene una columna croma-
que, cuando se activan, producen un movimiento de remo togrfica, la muestra y la cantidad prescrita de diluyente
lino para mezclar. Otros emplean una distribucin forzada se inyectan en el sitio de llenado de la columna opuesto
para llevar a cabo el mezclado. al sitio usual de llenado de muestra y diluyente. La mues
tra se mueve por la columna mediante la presin del dilu
S ep ara cin yente y hacia el paquete de prueba para anlisis.
En las reacciones qumicas, los constituyentes indeseables
que interfieren con el anlisis pueden requerir ser separa Incubacin
dos de la muestra antes de que otros reactivos sean introdu Un bao de calentamiento en los sistemas discretos o de
cidos al sistema. Las protenas causan mayor interferencia flujo continuo mantiene la temperatura requerida de la
en muchos anlisis. Un mtodo sin separar la protena es mezcla de reaccin y provee el retraso necesario para com
usar una relacin reactivo a muestra muy alta (la muestra pletar el desarrollo de color. Los componentes principales
est muy diluida), de modo que el espectrofotmetro no del bao de calentamiento son el medio de transferencia
detecta alguna turbidez a causa de la protena precipitada. de calor (es decir, agua o aire), el elemento de calenta
Otro mtodo es acortar el tiempo de reaccin para elimi miento y el termorregulador. Un termmetro se ubica en
nar los interferentes que reaccionan ms lento. el compartimiento de calentamiento del analizador y es
En los sistemas de flujo continuo antiguos, un dializa- monitoreado mediante la computadora del sistema. En
dor era el mdulo de separacin o filtracin. ste llevaba muchos sistemas analizadores discretos, las multicubetas
a cabo el equivalente de los procedimientos manuales de se incuban en un bao de agua mantenido por lo general a
precipitacin, centrifugacin y filtracin, por medio de una una temperatura constante de 37C.
membrana de celofn de poro fino. En la tecnologa de placa La tecnologa de placa incuba placas colorimtricas a
Vitros, la capa de dispersin de la placa capta clulas, crista 37C. Hay una estacin de acondicionamiento previo para
les y otra materia particulada pequea, pero tambin retiene llevar la temperatura de cada placa cerca de 37C antes de
molculas grandes, como protena. En esencia, lo que pasa que entre al incubador. El incubador mueve las placas a
por la capa de dispersin es un filtrado libre de protena. intervalos de 12 s, de tal manera que cada placa est en la
salida del incubador cuatro veces durante el tiempo de incu
bacin de 5 min. Esta caracterstica se emplea para mto
dos de velocidad de dos puntos y permite que la primera
lectura puntual sea tomada en parte a travs del tiempo
de incubacin. Las placas potenciomtricas se mantienen a
25C. Las placas se mantienen a esta temperatura durante
3 min para asegurar estabilidad antes de la lectura.
Tiem po d e reaccin
Antes que el espectrofotmetro realice la lectura ptica,
el tiempo de reaccin puede depender de la velocidad de
transporte por el sistema para la estacin de lectura, las
adiciones de reactivo programadas con cmaras de reac
cin mviles o estacionarias, o una com binacin de ambos
procesos. Es necesario mantener un ambiente conducen
te para la terminacin de la reaccin el tiempo suficiente
antes de realizar el anlisis espectrofotomtrico del pro
ducto. El tiempo es una limitacin definitiva. Para mante
FIGURA 5-14. Paletas de agitacin en el analizador Hitachi 736. ner la ventaja de anlisis mltiples rpidos, el instrumento
(Fotografa cortesa de Boheringer Mannheim.) debe producir resultados lo ms pronto posible.
136 PARTE I PRINCIPIOS BSICOS Y PRCTICA DE LA QUMICA CLNICA
El Advia Centaur (Bayer), un sistema de inmunoensa- fotomultiplicador; sin embargo, a diferencia de los conta
yo de acceso aleatorio, automatizado por completo (fig. dores gamma, los luminmetros no requieren un cristal
5 -1 9 ), emplea tecnologa de quimioluminiscencia para para convertir los rayos gamma a fotones de luz. Los foto
anlisis de reaccin. En los ensayos de quimioluminiscen nes de luz de la muestra se detectan de manera directa, son
cia, la cuantificacin de un analito se basa en la emisin de convertidos a impulsos elctricos y, luego, se cuentan.
luz que resulta de una reaccin qumica .9 Los principios
de los ensayos de quimioluminiscencia son similares a los Procesam iento de ia seal y m anejo de datos
de radioinmunoensayo (RIA), excepto que se emplea un
ster de acridinio como el trazador, y las partculas para- Debido a que la mayor parte de los instrumentos auto
magnticas como la fase slida. La muestra, el trazador y matizados imprimen los resultados en forma de reporte,
el reactivo de partculas paramagnticas se agregan e incu la calibracin exacta es esencial para obtener informacin
ban en cubetas de plstico desechables, lo que depende del exacta. Hay muchas variables que pueden entrar en el uso
protocolo de ensayo. Despus de la incubacin, la sepa de estndares de calibracin. Las matrices de los estn
racin magntica y el lavado de las partculas se llevan a dares y sustancias desconocidas pueden ser diferentes.
cabo de manera automtica. Las cubetas son transportadas Dependiendo de la metodologa, esto podra representar
hacia una cmara de luminmetro sellada a la luz, donde problemas o no. Si se emplean estndares secundarios
se aaden los reactivos para iniciar la reaccin quimiolu- para calibrar un instrumento, se deben conocer los mto
miniscente. En la inyeccin de los reactivos en la cubeta dos empleados para obtener los valores de los constitu
de muestra, el luminmetro del sistema detecta la seal yentes del estndar. Los estndares que contienen ms de
quimioluminiscente. Los luminmetros son similares a un analito por vial pueden causar problemas de interferen
los contadores gamma en que utilizan un detector de tubo cia. Debido a que no hay estndares primarios disponibles
para las enzimas, se pueden usar estndares secundarios
o factores de calibracin con base en los coeficientes de
extincin molares de los productos de las reacciones.
Muchas veces, un laboratorio tendr ms de un ins
trumento capaz de medir el constituyente. A menos que
haya alcances normales diferentes publicados para cada
mtodo, los instrumentos se deben calibrar de modo que
los resultados sean comparables. La ventaja de calibrar un
instrumento automatizado es la estabilidad a largo plazo
de la curva estndar, que se requiere monitorear slo con
controles todos los das. Algunos analizadores emplean
estndares de baja y alta concentracin en el comienzo
de cada ejecucin, y luego usan las absorbancias de las
reacciones de los estndares para producir de forma elec
trnica una curva estndar para cada ejecucin. Otros ins
FIGURA 5-19. Sistema de quimioluminiscencia automatizado Advia trumentos se calibran por s mismos despus de analizar
Centaur. (Foto cortesa de Bayer Diagnostics.) las disoluciones estndar.
CAPTULO 5 PRINCIPIOS DE AUTOMATIZACIN QUMICA CLNICA 139
En los analizadores de flujo continuo originales se lisis qumicos o elctricos de la muestra, la computadora
empleaban seis estndares analizados al principio de cada del instrumento pasa al modo de adquisicin de datos y
ejecucin para producir una curva de calibracin para un clculo. Quiz se requiera promediar la seal proceso, lo
lote particular. Ahora, los analizadores de flujo continuo que implicara cientos de impulsos de datos por segundo,
emplean un calibrador de nivel nico para calibrar cada como con el analizador centrfugo, y frmulas de supre
ejecucin con el uso de agua para establecer la lnea base. sin y correccin para interferentes que son programadas
El analizador centrfugo emplea estndares pipeteados en la computadora para el clculo de resultados.
en cubetas designadas en cada ejecucin para anlisis de Los instrumentos automatizados avanzados tienen
punto final. Despus que se ha obtenido la absorbancia del algn mtodo para reportar los resultados impresos con un
ta de cada muestra, la computadora calcula los resultados vnculo para identificacin de la muestra. En los sistemas
mediante la determinacin de una constante para cada estn complejos, la informacin demogrfica de la muestra se
dar. Las constantes se obtienen al dividir la concentracin introduce en la computadora del instrumento junto con las
del estndar (preintroducida en la computadora) entre la pruebas requeridas. Despus, se imprime la identificacin
absorbancia delta y promediar las constantes para cada uno de la muestra con los resultados de prueba. El Paramax
de los estndares para obtener un factor. La concentracin imprime etiquetas de cdigo de barras para la identifica
de cada control e incgnita se determina multiplicando la cin de la muestra despus que el operador introduce la
absorbancia delta de la incgnita por el factor. Si la concen informacin del paciente y las pruebas requeridas en la ter
tracin de una incgnita excede el alcance de los estndares, minal de la computadora. Cuando se aplica la etiqueta a la
el resultado se imprime con una bandera. La actividad de la muestra, est se puede cargar en el analizador. Los micro-
enzima se obtiene mediante un ajuste de regresin lineal de procesadores controlan las pruebas, reactivos y el tiem
la absorbancia delta en funcin del tiempo. La pendiente po, mientras se comprueba el cdigo de barras para cada
de la recta producida se multiplica por el factor de enzima muestra. ste es el vnculo entre los resultados reportados
(preintroducido) para calcular la actividad. y la identificacin de la muestra. Incluso el ms simple de
La tecnologa de placa necesita clculos ms avanzados los sistemas numera de forma secuencial los resultados
para producir resultados. Los materiales de calibracin de prueba para proveer una conexin con las muestras.
requieren una matriz de protenas debido a la necesidad de Debido a que en la actualidad la mayor parte de los ins
que los calibradores se comporten como suero al reaccio trumentos tiene integrado o adjunto un monitor de video,
nar con las distintas capas de las placas. Los lquidos cali los programas de software avanzados que vienen con el
bradores se basan en suero de bovino, y la concentracin instrumento se pueden mostrar para determinar el estado
de cada analito se determina mediante mtodos de refe de los diferentes aspectos de los procesos de anlisis. El
rencia. Las pruebas de punto final precisan tres lquidos monitoreo computadorizado est disponible para parme
calibradores, las pruebas que requieren blanco necesitan tros como la linealidad de la reaccin y el instrumento,
cuatro lquidos calibradores y los mtodos enzimticos tres datos de control de calidad con varias opciones para pre
calibradores. Las pruebas colorimtricas emplean ajuste sentacin estadstica e interpretacin, deteccin corta de
de ranura para producir la estandarizacin. En el anlisis muestra con banderas en la impresin, resultados anor
de enzimas, un algoritmo de ajuste de curvas estima el males del paciente indicados con banderas, deteccin de
cambio en la densidad de reflexin por unidad de tiempo. cogulos, temperatura del recipiente de reaccin o cmara
Esto se convierte en absorbancia o cambio de densidad de de prueba e inventarios de reactivo. La impresora tambin
transmisin por unidad de tiempo. Luego, una ecuacin puede mostrar los resultados del paciente, as como varias
cuadrtica convierte el cambio en la densidad de transmi advertencias mencionadas antes. La mayor parte de los
sin a actividad de volumen (U/L) para cada ensayo. fabricantes de instrumentos ofrecen software de computa
El ACA Star retiene las calibraciones para cada lote de dora para programas y algoritmos de mantenimiento preven
un mtodo particular hasta que el laboratorista programa tivo para solucin de problemas de diagnstico. Algunos
el instrumento para recalibracin. La calibracin del ins fabricantes instalan mdems de telfono en el analizador
trumento se inicia o comprueba mediante el anlisis de para tener un enlace de comunicacin directa entre el ins
un mnimo de tres niveles de estndares primarios o, en el trumento y el centro de servicio para solucin de proble
caso de enzimas, muestras de referencia. Los valores obte mas instantnea y diagnstico de problemas.
nidos se comparan con las concentraciones conocidas por
medio de la regresin lineal, con el eje x que representa los SELECCIN DE ANALIZADORES
valores esperados y el eje y la media de los valores obteni
AUTOM ATIZADOS
dos. La pendiente (factor de escala) y la ordenada al origen
(compensacin) son los parmetros ajustables en el ACA. Cada enfoque del fabricante para la automatizacin es ni
En los primeros modelos de este instrumento, el opera co. Los instrumentos que son evaluados se deben calificar
dor determinaba e introduca los parmetros de manera de acuerdo con las necesidades identificadas antes. Un labo
manual a la computadora del instrumento; sin embargo, ratorio podra requerir el analizador STAT, mientras que
en los modelos posteriores ms automatizados, el instru otro tal vez necesite un analizador por lotes para volmenes
mento lleva a cabo la calibracin en forma automtica de alta concentracin. Al considerar el costo hay que con
a solicitud del operador. Despus que se lleva a cabo la siderar el precio del instrumento y, lo ms importante, el
calibracin y estn en progreso o se completan los an costo total de consumibles. El alto costo de capital de un
140 PARTE I PRINCIPIOS BSICOS Y PRCTICA DE LA QUMICA CLNICA
instrumento puede ser pequeo en realidad cuando se divi que necesitan. La siguiente generacin de automatizacin
de entre un gran nmero de muestras que sern procesadas. reproducir la prctica japonesa de laboratorios de caja
Tambin es importante calcular el costo total por prueba negra, en los que la muestra entra en un extremo y por
para cada instrumento que se considera. Adems, un anli el otro sale el resultado impreso .12 Se ha dedicado mucho
sis de punto de equilibrio para estudiar la relacin de costos esfuerzo durante la dcada pasada en el desarrollo de
fijos, costos variables y ganancias puede ser til al analizar alimentacin frontal automatizada de la muestra en la
la justificacin financiera y el impacto econmico en un caja analtica, y el manejo automatizado y computadori-
laboratorio. Por supuesto, el modo de adquisicin, es decir, zado de los datos que salen de la caja. Ha habido muchos
compra, arrendamiento, etctera, se debe tener en cuenta en avances en las tres fases del proceso de prueba de labo
el anlisis. El costo variable de consumibles se incrementa a ratorio; es decir, preanaltica (procesamiento de la mues
medida que se llevan a cabo ms pruebas o se analizan ms tra), analtica (anlisis qumico) y posanaltica (m anejo de
muestras. La capacidad para usar reactivos producidos por datos) a medida que se fusionan en el sistema integrado de
ms de un proveedor (sistemas de reactivo abiertos contra autom atizacin total del laboratorio (ATL). Los vendedores
cerrados) puede dar a un laboratorio la posibilidad de per de equipo de automatizacin estn desarrollando compo
sonalizar la prueba y, tal vez, ahorrar dinero. El componente nentes de arquitectura abierta que proveen ms flexibili
de trabajo se debe evaluar tambin. Los instrumentos ms dad en la ejecucin de la automatizacin .13
antiguos pueden tener asignadas las unidades de registro de
carga de trabajo del CAP; esto provee una base excelente
para comparacin, por medio de estudios de movimiento Fase preanaltica (procesamiento de la muestra)
en el tiempo. Desafortunadamente, los instrumentos ms
El protocolo de manejo de la muestra disponible en la actua
recientes en el mercado quiz no hayan sido regulados para
lidad en los principales analizadores de qumica es usar el
trabajo y, por tanto, este juicio podra ser ms subjetivo de
tubo de recoleccin de muestra original (muestreo de tubo
lo deseado. Con el gran nmero de instrumentos disponi
primario) de cualquier tamao (despus de la separacin
bles en el mercado, el objetivo es encontrar el instrumento
del plasma o el suero) como la taza de muestra en el anali
correcto para cada situacin .10
zador y lectores de cdigo de barras, tambin en el analiza
Otra consideracin importante en relacin con la selec
dor, para identificar la muestra. Un proceso automatizado
cin de un instrumento son sus capacidades analticas.
est reemplazando poco a poco el manejo manual y la pre
Cules son las caractersticas de desempeo del instru
sentacin de la muestra al analizador. Incrementar la efi
mento para exactitud, precisin, linealidad, especificidad
ciencia mientras se reducen los costos ha sido un impulso
y sensibilidad (que pueden ser dependientes del mtodo),
importante para que los laboratorios comiencen a integrar
estabilidad de la calibracin y estabilidad de los reactivos
algn aspecto de la automatizacin total del laboratorio en
(vida de anaquel y de abordo o reconstituidos)? La mejor
sus operaciones. Desde un punto de vista conceptual, la
forma de comprobar estas caractersticas de desempeo de
ATL se refiere a dispositivos automatizados y robots inte
un analizador antes de tomar una decisin acerca del ins
grados con los analizadores existentes para llevar a cabo
trumento es tenerlo en operacin. De manera ideal, si un
todas las fases del anlisis de laboratorio. A la fecha se ha
fabricante pone a prueba un instrumento en el laboratorio
prestado ms atencin al desarrollo de los sistemas fronta
del posible comprador, entonces se puede evaluar su desem
les que pueden identificar y marcar las muestras, centrifu
peo analtico para la satisfaccin del cliente con estudios
garlas y preparar alcuotas, y clasificar y entregar muestras
para comprobar la exactitud, precisin y linealidad. Al mis
al analizador o para almacenaje .14 Los sistemas de extre
mo tiempo, el personal del laboratorio puede observar las
mo posterior pueden incluir la eliminacin de muestras
caractersticas de diseo como mens de prueba, capacidad
del analizador y transporte para almacenaje, recuperacin
real de independencia, facilidad de uso, y el espacio que el
desde el almacenaje para repetir el anlisis, tomar nuevas
instrumento y sus consumibles ocupan en el laboratorio.
alcuotas o eliminacin, as como el manejo completo de
La instrumentacin de qumica clnica provee velocidad
los datos del analizador y la interaccin con el sistema de
y precisin para los ensayos que de otro modo se lleva
informacin del laboratorio (SIL).
ran a cabo de forma manual. Las metodologas elegidas y
El Dr. Sasaki y colaboradores instalaron el primer labo
la adhesin a los requisitos del ensayo proveen exactitud.
ratorio clnico por completo automatizado en el mundo en
Nadie puede asumir que el resultado producido es el valor
la escuela mdica de Koshi en Japn 15; desde entonces, el
correcto. Los mtodos automatizados se deben evaluar por
concepto se ha vuelto de manera gradual y constante una
completo antes de ser aceptados como rutina. Es importan
realidad en Estados Unidos. La Universidad de Nebraska
te entender cmo funciona en realidad cada instrumento.
y la de Virginia han sido pioneras para el desarrollo del
sistema ATL. En 1992, se desarroll en la Universidad
AUTOMATIZACIN TOTAL DEL LABORATORIO11
de Nebraska un prototipo de plataforma de automatiza
Las presiones de la reforma de atencin de la salud y la cin del laboratorio, donde los componentes clave son
atencin administrada han causado inters creciente en un sistema de transporte, muestras con cdigo de barras
m ejorar la productividad de las fases preanaltica y posa- y un paquete de software de computadora para controlar
naltica del anlisis de laboratorio. En cuanto al proce el movimiento de la muestra y el seguimiento, y la coor
so analtico en s, los analizadores de rutina en qumica dinacin de robots con los instrumentos como celdas de
clnica tienen en la actualidad casi toda la mecanizacin trabajo .16 Algunos de los primeros laboratorios automa
CAPITULO 5 PRINCIPIOS DE AUTOMATIZACIN QUMICA CLNICA 141
tizados en Estados Unidos han informado sus experien ratorio, ellos estn construyendo laboratorios ncleo que
cias con la automatizacin frontal con una gran cantidad contienen todos sus analizadores automatizados como la
de informacin para los interesados en la tecnologa .1718 primera etapa necesaria para enlazar con ms facilidad los
El primer hospital de laboratorio en instalar un sistema distintos instrumentos en un sistema ATL .25
automatizado fue el hospital de la Universidad de Virginia
en Charlottesville en 1995. Su Centro de Investigacin de Fase analtica (anlisis qum icos)
Automatizacin Mdica cooper con Johnson & Johnson
y Coulter Corporation para usar un Vitros 950 conectado Ha habido cambios y mejoras que ahora son comunes para
a un carril U Coulter/IDS para muestreo directo de un muchos analizadores de qumica en general. Entre otros
transportador de muestra sin usar robtica intermedia .19 estn el micromuestreo siempre ms pequeo y la entrega
El primer sistema llave en mano disponible a nivel comer de reactivo con mltiples adiciones posibles desde reactivos
cial fue el Clinical Laboratory Automation System (CLAS) restituidos al azar; mens de prueba totales y expandidos
(Boehringer-Mannheim Diagnostics; ahora, Roche Diag a bordo, en particular frmacos y hormonas; tiempos de
nostics). ste acopla la lnea de analizadores Hitachi con reaccin acelerados con caractersticas qumicas para rendi
un sistema de banda transportadora para proveer un siste miento ms rpido y menor tiempo de permanencia; mayor
ma completamente operacional con las interfaces .20 ptica de resolucin con monocromadores de rejilla y con
La robtica y la automatizacin frontal estn cambian juntos de diodos para anlisis policromtico; electrodos de
do la fisonoma del laboratorio clnico .21 Gran parte del flujo directo mejorados; software interactivo mejorado de
beneficio derivable de la ATL se puede comprender slo fcil manejo para control de calidad, mantenimiento y diag
mediante la automatizacin frontal. La planificacin, eje nstico; mdems integrados para solucin de problemas en
cucin y evaluacin del desempeo de un sistema de trans lnea; sistemas de manejo de datos con interfaz para el SIL;
porte y clasificacin automatizado en un laboratorio de frecuencias reducidas de calibracin y controles; modos
referencia grande han sido descritas en detalle .2223 Varios automatizados para calibracin, dilucin, repeticin de la
fabricantes de instrumentos trabajan en la actualidad en ejecucin y mantenimiento; as como mejoras de diseo
dispositivos frontales de interfaz, o ya los comercializan, ergonmicas y fsicas para facilidad del operador, funcio
jun to con software para sus propios analizadores de qumi nalidad y reduccin de mantenimiento. De acuerdo con los
ca. Johnson & Johnson introdujo el sistema Vitros 9 5 0 AT datos de estudio recientes del CAP, los ocho analizadores de
(Automation Technology) en 1995 con un diseo de arqui qumica ms populares son Aeroset (Abbott Diagnostics);
tectura abierta para permitir a los laboratorios seleccionar Advia (Bayer Health); sistemas AU (Olympus); Dimensin
de muchos sistemas de automatizacin frontales en vez de (Dade Behring); sistemas Hitachi (Roche Diagnostics); siste
estar encerrados en una interfaz de propietario. Ahora est mas Integra (Roche Diagnostics); sistemas Synchron (Beck
disponible una interfaz Lab-Track en el Dimensin RxL de man Instruments), y Vitros (Ortho-Clinical Diagnostics ).26
Dade Behring Chemistry Systems que es compatible con Las caractersticas y especificaciones de estos ocho sistemas
los principales vendedores de automatizacin y permite se resumen en el cuadro 5-1. Una ventaja principal de los
el muestreo directo desde un sistema de pistas. Tambin, analizadores de qumica modulares es la escalabilidad. Con
en la actualidad existe tecnologa para que los separadores forme aumenta la carga de trabajo, se pueden agregar ms
microcentrfugos sean integrados en los analizadores de mdulos para incrementar el rendimiento. Un esquema del
qumica clnica .24 Otros cuantos sistemas estn ahora en el sistema MODULAR ANALYTICS (Roche) se muestra en la
mercado, incluso el sistema Advia LabCell, que emplea un figura 5-20. Este sistema puede acomodar desde uno has
enfoque modular para la automatizacin. El Power Pro- ta cuatro mdulos D, P o E. Esto provee flexibilidad para
cessor Core System (Beckman Coulter) lleva a cabo clasi adaptar a cargas de trabajo cambiantes. Es posible combinar
ficacin, centrifugacin y eliminacin de tapas. El enGen las pruebas de inmunoensayo y qumica, sin considerar la
Series Automation System (Ortho-Clinical Diagnostics) necesidad de dividir las muestras. Las pruebas repetidas se
provee clasificacin, centrifugacin, eliminacin de tapas pueden llevar a cabo de forma automtica con la disolucin
y funciones de almacenamiento de la muestra e interfaz de amortiguadora de reejecucin, que soporta todas las mues
forma directa con un analizador Vitros 950 AT. Estn dis tras hasta completar todo el anlisis.
ponibles tres sistemas de automatizacin de Olympus que
pueden efectuar clasificacin, centrifugacin, eliminacin Lnea de reejecucin
de tapas, toma de alcuotas y capacidades de interfaz direc
ta con el instrumento. El Gnesis F E 500 (Tecan) es un
ejemplo de un sistema frontal independiente que clasifica,
centrifuga, retira tapas y toma alcuotas. Algunos laborato
rios han adoptado un enfoque modular de extremo en fase
con dispositivos para slo ciertas funciones automatiza
das. Ciba-Corning Clinical Laboratories instal sistemas
autmatas en varios laboratorios regionales .19 Lo primor Disolucin amorti- Disolucin amortigua- Disolucin amorti
guadora de entrada dora de reejecucin guadora de salida
dial es que la robtica y la automatizacin frontal estn
aqu para permanecer. Conforme ms y ms laboratorios FIGURA 5-20. Esquema del sistema Roche MODULAR ANALYTICS.
clnicos cambian hacia la automatizacin total del labo (Foto cortesa de Roche Diagnostics.)
142 PARTE PRINCIPIOS BSICOS Y PRCTICA DE LA QUMICA CLNICA
soras detrs del desarrollo y mejoramiento de los analiza factores: necesidades del laboratorio, consumibles, capa
dores estn el volumen incrementado de prueba, tiempo cidades analticas, espacio y facilidad de uso. La automati
de respuesta ms rpido y costos disparados. Los analiza zacin qumica clnica continuar evolucionando. La ATL
dores automatizados pueden usar uno de los tres mtodos provee en la actualidad la integracin de las tres fases del
bsicos para anlisis de muestras: flujo continuo, anlisis anlisis de laboratorio, y enlaza el procesamiento de mues
centrfugo y anlisis discreto, pero la mayor parte en la tra frontal y el manejo de datos de extremo posterior con
actualidad usan anlisis discreto. Los fabricantes han dise la fase analtica. Las tendencias futuras incluirn sin duda
ado sus instrumentos para imitar los pasos en un procedi ms capacidad de computadora, ms probabilidad, uso
miento manual para incluir la preparacin e identificacin incrementado de robtica, mapeo espectral, m ejoramien
de muestras, medicin de la muestra y entrega, sistemas de to continuo en el software de computadora, y el desarro
reactivos y prueba, fase de reaccin qumica, fase de medi llo de sistemas computarizados con inteligencia artificial.
cin y procesamiento de seales y manejo de datos. Cada Nuevas tecnologas, como las reacciones en cadena de la
enfoque del fabricante para la automatizacin es nico. polimerasa y el anlisis in vivo no invasivo, tendrn tam
Al seleccionar un analizador automatizado para el labo bin un gran impacto.
ratorio de qumica clnica es necesario considerar varios
P R E G U N T A S DE R E P A S O
1. De lo siguiente, cul no es una fuerza impulsora para 6. El tiempo de perm anencia se refiere a:
ms automatizacin? a) Nmero de pruebas que un instrumento puede
) Prueba de alta concentracin. manejar en un tiempo especificado.
b) Tiempo de respuesta rpido. b) La capacidad del instrumento para efectuar una car
c) Esperanza de resultados ms exactos de alta cali ga de trabajo definida en un tiempo especificado.
dad. c) El tiempo entre la iniciacin de una prueba y la
d) Mayor uso de paneles de qumica. terminacin del anlisis.
d) Ninguna de las anteriores.
2. Cul de los siguientes enfoques para la automatiza
cin del analizador puede usar paletas de mezclado 7. En qu ao se introdujo el primer analizador centr
para agitar? fugo comercial?
a ) Anlisis para centrifugar. a) 1957.
b) Flujo continuo. b) 1967.
c) Anlisis discreto. c) 1970.
d) Anlisis de placa qumica seca. d) 1976.
3. Cul de los siguientes tipos de analizadores ofrecen 8. Las siguientes son ventajas para la automatizacin
capacidad de acceso aleatorio? EXCEPTO:
a) Analizadores de flujo continuo. a) El nmero cada vez mayor de pruebas efectuadas.
b) Analizadores centrfugos. b) El componente de trabajo minimizado.
c) Analizadores discretos. c) La correccin de deficiencias inherentes en las
d) Ninguno de los anteriores. metodologas.
d) El uso de cantidades pequeas de muestras y
4. Las siguientes son consideraciones primarias en la
reactivos en comparacin con los procedimientos
seleccin de un analizador de qumica automatizado
manuales.
EXCEPTO:
a) El costo de consumibles. 9. Cules de los pasos siguientes en la automatizacin
b) El costo total del instrumento. es por lo general un proceso manual en la mayor parte
c) El componente de trabajo. de los laboratorios?
d) Cmo se agregan o mezclan los reactivos. a) Preparacin de la muestra.
b ) Medicin de la muestra y entrega.
5. Un ejemplo de un analizador de inmunoensayo auto
c) Entrega de reactivo.
matizado sera:
d) Fase de reaccin qumica.
a) Advia Centaur.
b) Paramax. 10. Cul de los siguientes analizadores de qumica emplean
c) Synchron. placas para contener todo el sistema de reactivos?
d) Vitros. a) Analizadores Vitros.
b) Analizadores ACA.
c) Analizadores Paramax.
d) Ninguno de los anteriores.
144 PARTE I PRINCIPIOS BSICOS Y PRCTICA DE LA QUMICA CLNICA
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Inrnunoensayos y
tcnicas con sonda de
cido nucleico
Susan O rto n
C O N T E N I D O D E L C A P I T U L O
INMUNOENSAYOS RESUMEN
Consideraciones generales PREGUNTAS DE REPASO
Inrnunoensayos no marcados REFERENCIAS
Inrnunoensayos marcados
SONDAS DE CIDO NUCLEICO
Qumica del cido nucleico
Tcnicas de hibridacin
Aplicaciones de la sonda de cido nucleico
O B J E T I V O S
145
146 PARTE I PRINCIPIOS BSICOS Y PRCTICA DE LA QUMICA CLNICA
___________________________________________ T R M I N O S C L A V E
En este captulo se introducen dos mtodos analticos puede ser un antgeno o un anticuerpo. El enlace se
genricos empleados en el laboratorio clnico: uno conlle relaciona con la concentracin de cada reactivo, la espe
va el enlace de anticuerpo a antgeno y el otro depende del cificidad del anticuerpo para el antigeno, la afinidad y
enlace a una secuencia de cido nucleico con su secuen avidez para ambas y las condiciones ambientales. Aun
cia complementaria de cido nucleico blanco. Comunes que este captulo se enfoca en inmunoensayos que usan
a ambos mtodos son la naturaleza complementaria de una molcula de anticuerpo como el reactivo de enlace,
los reactivos, que determina la especificidad, y el sistema otros ensayos, como los de receptor y los de protena de
detector, que determina el alcance de la reaccin de enlace enlace, competitivos, emplean protenas receptoras o de
y se relaciona con la sensibilidad analtica. En inmunoensa transporte como reactivo de enlace, respectivamente.
yos, un antgeno se une a un anticuerpo. Las interacciones Los mismos principios se aplican a estos ensayos. Una
antgeno-anticuerpo podran tener que ver con reactivos molcula de anticuerpo es una inmunoglobulina con un
no marcados en tcnicas menos sensibles desde el punto de dominio funcional conocido como F (a b ); esta rea de
vista analtico o con un reactivo marcado en tcnicas ms la protena de inmunoglobulina se une con un sitio en
sensibles. El diseo, marcador y sistema de deteccin se el antgeno. ste es relativamente grande y com plejo y,
combinan para crear muchos ensayos distintos, que permi por lo comn, tiene sitios mltiples que se pueden unir a
ten la medicin de una amplia variedad de molculas. anticuerpos con diferentes especificidades; cada sitio en
En el enlace de cido nucleico, por lo comn, una sonda el antgeno se conoce como un determinante antignico o
se unir con una secuencia de cido nucleico complemen epitopo. Existe cierta confusin en la terminologa usada:
taria. El cido nucleico blanco puede ser amplificado o no algunos inmunlogos se refieren a un inmungeno como
antes de la deteccin o cuantificacin, o ambas cosas. As, la molcula que induce la respuesta biolgica y sntesis de
los mtodos basados en cido nucleico estn diseados anticuerpo, y algunos usan antgeno para referirse a lo que
para detectar cambios en la concentracin de DNA o RNA se une con el anticuerpo. Sin embargo, todos concuerdan
y no en detectar un producto gnico sintetizado, como una que el sitio antignico al que se puede unir F(ab) es el
protelna detectada en inmunoensayos. De nuevo, muchos epitopo.
diseos de ensayo usan sondas. Para dar una explicacin El grado de enlace es una consideracin importante en
ms clara, los inmunoensayos sern considerados por un inmunoensayo. El enlace de un anticuerpo con un ant
separado de los ensayos con sonda de cido nucleico. En geno se relaciona de modo directo con la afinidad y avidez
este captulo se revisan los conceptos del enlace, se des del anticuerpo para el epitopo, as como la concentracin
cribe la naturaleza de los reactivos empleados y se analiza del anticuerpo y el epitopo. En condiciones estndar, la
el diseo de ensayo bsico de tcnicas seleccionadas utili afinidad de un anticuerpo se mide usando un hapteno (Hp)
zadas en el laboratorio clnico; como tal, pretende ser un porque ste es un antgeno de peso molecular bajo que se
repaso y no una revisin exhaustiva. considera tiene slo un epitopo. La afinidad hacia el hap
teno se relaciona con la probabilidad para enlazar o con
INM UNOENSAYOS el grado de naturaleza complementaria de cada uno. La
reaccin reversible se resume en la ecuacin 6 - 1:
Consideraciones generales
Hapteno + anticuerpo complejo hapteno-anticuerpo
En un inmunoensayo, una molcula de anticuerpo reco
noce y se une con un antgeno. La molcula de inters (Ec. 6-1)
CAPTULO 6 INMUNOENSAYOS Y TCNICAS CON SONDA DE CIDO NUCLEICO 147
El enlace entre un hapteno y el anticuerpo obedece la de reaccin cruzada y el homlogo, ms fuerte es el enlace
ley de accin de masas y se expresa matemticamente en con el anticuerpo .1 La produccin de anticuerpo de reac
la ecuacin 6- 2 : tivo se logra mediante tcnicas policlonales o monoclona-
les. En la produccin de anticuerpo policlonal, el antgeno
K _ K _ Hp - Ab] estimulante se inyecta en un animal sensible al antgeno;
(Ec. 6-2)
fl k2 [Hp] [Ab] el animal detecta este antgeno extrao y prepara una res
puesta inmune para eliminar el antgeno. Si parte de esta
Ka es la constante de afinidad o equilibrio y representa respuesta inmune incluye produccin intensa de anticuer
el recproco de la concentracin de hapteno libre cuando po, entonces se colecta la sangre y se recoge el anticuerpo,
estn ocupados 50% de los sitios de enlace. Mientras mayor caracterizado y purificado para producir el reactivo anti
sea la afinidad del hapteno hacia el anticuerpo, menor es srico comercial. Este reactivo de anticuerpo policlonal
la concentracin del hapteno necesaria para saturar 50% es una mezcla de especificidades de anticuerpo. Algunos
de los sitios de enlace del anticuerpo. Por ejemplo, si la anticuerpos reaccionan con los epitopos estimulantes y
constante de afinidad de un anticuerpo m onoclonal es algunos son endgenos para el husped. Mltiples anti
3 X 10n L/mol, significa que una concentracin de hap cuerpos dirigidos contra los epitopos mltiples en el ant
teno de 3 X 10n mol/L es necesaria para ocupar la mitad geno estn presentes, y pueden formar un enlace cruzado
de los sitios de enlace. Por lo comn, la constante de afi con el antgeno multivalente. Los anticuerpos policlonales
nidad de anticuerpos que se emplea en procedimientos de se emplean por lo comn como anticuerpos de captura
inmunoensayo vara de 10 9 a 10 11 L/mol, mientras que la en inmunoensayos de emparedado o indirectos.
constante de afinidad para protenas de transporte vara En contraste, una lnea de clulas inmortales produce
de 10 7 a 10 8 L/mol, y la afinidad para los receptores va de anticuerpos m onoclonales; cada lnea produce un anticuer
10 8 a 10 11 L/mol. po especfico. Este mtodo se desarroll como una exten
Como con todas las reacciones qumicas (moleculares), sin del trabajo de hibridoma que publicaron Kohler y
las consideraciones iniciales de los reactivos y productos Milstein en 1975.2 El proceso comienza con la seleccin
afectan el grado de enlace complejo. En inmunoensayos, de clulas con las caractersticas que permitirn la sntesis
la reaccin es directa (hacia la derecha) (ecuacin 6- 1) de un anticuerpo homogneo. Primero, un husped (por
cuando la concentracin de los reactivos (Ag y Ab) excede lo comn, un ratn) se inmuniza con un antgeno (aqul
la concentracin del producto (complejo Ag-Ab) y cuando para el que se desea un anticuerpo); despus, se recogen
hay una constante de afinidad favorable. del bazo los linfocitos sensibilizados. Segundo, una lnea
Las fuerzas que agrupan a un determinante antignico y de clulas inmortales (por lo regular una lnea de clulas
un anticuerpo son enlaces reversibles, no covalentes, que de mieloma de ratn no secretoria que es deficiente en fos-
resultan de los efectos acumulados de fuerzas hidrfobas, forribosiltransferasa de guanina hipoxantina) se requiere
hidroflicas, de puente de hidrgeno y de van der Waals. para asegurar que sea viable la propagacin continua in
El factor ms importante que afecta la resistencia acumu vitro. Estas clulas se mezclan en presencia de un agente
lada de enlace es la bondad (o cercana) de ajuste entre el de fusin, como el glicol de polietileno, que promueve la
anticuerpo o el antgeno. La resistencia de la mayor parte fusin de dos clulas para formar un hibridoma. En un
de estas fuerzas interactivas se relaciona de manera inver medio de crecimiento selectivo, slo sobrevivirn las clu
sa con la distancia entre los sitios interactivos. Mientras las hbridas. Las clulas B tienen un lapso de vida natural
ms se aproximen el anticuerpo y el oxgeno, mayores son limitado in vitro y no pueden sobrevivir, y las clulas de
las fuerzas de atraccin. mieloma no fusionadas no sobreviven debido a su defi
Despus que se forma el complejo antgeno-anticuerpo, ciencia de enzimas. Si las clulas fusionadas viables sinte
la probabilidad de separacin (que se relaciona de manera tizan anticuerpo, entonces se evalan la especificidad y el
inversa con la tensin de enlace) se conoce como avidez. isotipo de cualquier anticuerpo. El reactivo de anticuerpo
sta representa un fenmeno de valor aadido en el que la monoclonal se produce en el comercio mediante el cre
resistencia de enlace de todos los pares anticuerpo-epito- cimiento de hibridoma en cultivo de tejido o en anima
po excede la suma del enlace nico anticuerpo-epitopo. les compatibles. Una caracterstica importante acerca del
En general, mientras ms fuertes sean la afinidad y la avi reactivo de anticuerpo monoclonal es que el anticuerpo es
dez, mayor es la posibilidad de reactividad cruzada. homogneo (un solo anticuerpo, no una mezcla de anti
La especificidad de un anticuerpo se describe en la cuerpos). Por tanto, reconoce slo un epitopo o un antige
mayor parte de los casos mediante el antigeno que indujo no multivalente, y no puede formar un enlace cruzado con
la produccin de anticuerpo, el antgeno homlogo. De un antgeno multivalente.
manera ideal, este anticuerpo reaccionara slo con ese
antgeno. Sin embargo, un anticuerpo puede reaccionar Inm unoensayos no m arcados
con un antgeno que en estructura es similar con el ant
geno homlogo; esto se conoce como reactividad cru za Precipitacin in m u n e en g el
da. Considerando que un determinante antignico puede En uno de los inmunoensayos no marcados ms simples
tener cinco o seis aminocidos o un azcar inmunodomi- introducidos en el laboratorio clnico, el anticuerpo no mar
nante, no es sorprendente que sea comn ia similitud del cado se impregn en la parte superior del antgeno no
antgeno. Mientras mayor sea la similitud entre el antgeno marcado (ambos en la fase de lquido); durante el perodo
148 PARTE I PRINCIPIOS BSICOS Y PRCTICA DE LA QUMICA CLNICA
FIGURA 6-2. Esquema que demuestra el patrn de identidad. El
pozo del centro contiene el antgeno, extracto de timo de conejo.
El pozo 1 se llena con un suero que contiene anticuerpo Sm. Los
pozos de prueba estn en los pozos 2 y 3; el patrn de identidad, la
Incremento de la concentracin de antgeno lnea continua entre los tres pozos, confirma la presencia de anticuer
po Sm en los sueros de prueba. El pozo 4 se llena con un suero que
FIGURA 6-1. Curva de precipitina que muestra la cantidad de preci contiene anticuerpo U1-RNP. Los sueros de prueba en los pozos 5 y 6
pitado en funcin de la concentracin de antgeno. La concentracin tambin contienen anticuerpo U1-RNP confirmado por el patrn de
de anticuerpo es constante. identidad entre el suero conocido y los sueros de prueba.
CAPTULO 6 INMUNOENSAYOS Y TCNICAS CON SONDA DE CIDO NUCLEICO 149
identidad parcial y sin identidad son ambiguos. Esta tcnica tiempo fijo. Si se utiliza papel de grficas semilogartmico,
se emple para detectar anticuerpos relacionados con enfer la concentracin del antgeno se grfica contra el dimetro
medades, como Sm y RNP detectados en lupus eritematoso del anillo de precipitina; la lnea se dibuja punto a punto.
sistmico, SSA y SSB en el sndrome de Sjgren y Scl-70 en Para los que llevan a cabo RID, se favorece el mtodo de
la esclerosis sistmica progresiva. punto final debido a su estabilidad e indiferencia a varia
La tcnica de difusin simple, inmunodifusin radial ciones de temperatura; sin embargo, el tiempo de respuesta
(RID), es un mtodo de precipitacin inmune empleado es ms grande comparado con el mtodo cintico.
para cuantificar protena (el antgeno). En este mtodo, La contrainmunoelectroforesis es un mtodo de precipita
el antisuero monoespecifico se agrega a la agarosa lqui cin inmune que emplea un campo elctrico para hacer que
da; luego, la agarosa se vaca en una placa y se enfra. Los el antgeno y el anticuerpo migren uno hacia el otro. Se cor
pozos se cortan en la agarosa solidificada. Los estndares tan dos lneas de pozos paralelas en la agarosa; el anticuerpo
mltiples, una o ms muestras de control de calidad, y se coloca en una lnea y el antgeno en la otra. El anticuer
muestras del paciente se aaden a los pozos. El antlge- po migrar hacia el ctodo y el antgeno hacia el nodo; una
no se difunde desde el pozo en todas direcciones, se une lnea de precipitina se forma donde se encuentran. La prue
al anticuerpo soluble en la agarosa y forma un complejo ba cualitativa es til para detectar ciertos antgenos bacte
visto como un anillo de precipitina concntrico (fig. 6-3). rianos en el lquido cefalorraqudeo y otros lquidos cuando
El dimetro del anillo se relaciona con la concentracin se necesita una respuesta de laboratorio rpida.
del antgeno que se difunde desde el pozo. Se construye La inmunoelectroforesis (IEF) y la electroforesis de inmu-
una curva estndar para determinar la concentracin en nofijacin (EIF) son dos mtodos empleados en el labo
las muestras de control de calidad y del paciente. El alcan ratorio clnico para caracterizar protenas monoclonales
ce analtico utilizable est entre los estndares mnimo y en suero y orina. En 1964, Grabar y Burtin publicaron
mximo. Si el anillo es mayor que el estndar superior, se mtodos para examinar protenas sricas por medio de
debe diluir la muestra y volverla a analizar. Si el anillo es electroforesis acoplada con reacciones inmunoqumicas
menor que el estndar mnimo, la muestra se debe ejecutar en agarosa.6 Las protenas de suero se separan electrofo-
en una placa de concentracin baja. Existen dos variantes: rticamente y despus el anticuerpo de reactivo se coloca
el mtodo de punto final (Mancini)4 y el mtodo cintico en un canal que corre paralelo a las protenas separadas.
(Fahey-McKelvey ).5 El mtodo de punto final requiere que El reactivo de anticuerpo y las protenas sricas separadas
el antgeno se difunda desde el pozo, y la concentracin del se difunden; cuando el anticuerpo de reactivo reconoce
antgeno se relaciona con el cuadrado del dimetro del anillo la protena srica y la reaccin es en la zona de equiva
de precipitina; la curva estndar se grfica en papel de gr lencia, se ve un arco de precipitina (fig. 6-4). La placa de
fica lineal y es la recta del mejor ajuste. Para asegurar que agarosa se tie (por lo comn, con una tincin de pro-
se ha difundido todo el antgeno, el tiempo de incubacin
es 48 a 72 horas, lo que depende del peso molecular del
antgeno; por ejemplo, la cuantificacin de IgG requiere 48
horas, IgM requiere 72 horas. En cambio, el mtodo cinti
co requiere que los anillos sean medidos en un tiempo fijo
de 18 horas; una muestra con una concentracin mayor
se difundir a una mayor rapidez y ser ms grande un
tena como el negro de Amido 10), se destie y seca para podra requerir ajuste para asegurar que la reaccin est
incrementar la legibilidad de los arcos de precipitina, en en la zona de equivalencia.
particular los arcos dbiles. El tamao, forma, densidad y El ltimo mtodo de precipitacin inmune en gel que
ubicacin de los arcos ayuda en la interpretacin de la pro se analiza es la tcnica de cohete (tcnica de Laurell o elec-
tena. Toda la interpretacin se hace comparando los arcos troinmunoensayo ).8,9 En esta tcnica cuantitativa, el anti
de la muestra del paciente con los de control de calidad, cuerpo de reactivo se mezcla con agarosa; el antgeno se
un suero humano normal. Debido a que la IEF se emplea coloca en el pozo y se somete a electroforesis. Conforme
para evaluar una protena monoclonal, se debe determi el antgeno se mueve por la agarosa, reacciona con el anti
nar la clase de cadena pesada y el tipo de cadena ligera. cuerpo de reactivo y forma un cohete, con precipitacin
Para evaluar las protenas monoclonales ms comunes, a lo largo de los bordes. La altura del cohete es proporcio
se usan los siguientes antisueros: suero completo antihu nal a la concentracin de antgeno presente; la concentra
mano (que contiene una mezcla de anticuerpos contra las cin se determina con base en una curva de calibracin. El
protenas sricas principales), IgG antihumana (especfica alcance estrecho de linealidad podra requerir dilucin o
de cadena y), IgM antihumana (especfica de cadena u), concentracin de la muestra desconocida.
IgA antihumana (especfica de cadena a ) , /. antihumana
(especfica de cadena K) y k antihumana (especfica de D eteccin d e com plejos d e antgeno-anticuerpo en
cadena k ) . El tiempo de respuesta de prueba y la sutileza
fa s e lquida
en la interpretacin han disuadido de usar la IEF como la
Una estrategia diferente para cuantificar los complejos
tcnica primaria para evaluar anticuerpos monoclonales.
antgeno-anticuerpo es usar un instrumento para detectar
La E IF 7 ha reemplazado a la IEF en muchos laborato
los complejos antgeno-anticuerpo solubles cuando inte-
rios. Se coloca una muestra de suero, orina o lquido cefa
ractan con luz. Cuando el antgeno y el anticuerpo se
lorraqudeo en los seis carriles de un gel de agarosa y se combinan, se forman complejos que actan como part
somete a electroforesis para separar las protenas. El aceta
culas en suspensin y, por tanto, pueden dispersar luz. El
to de celulosa (o algn otro material poroso) se satura con
tamao de las partculas determina el tipo de dispersin
reactivo de anticuerpo y se aplica despus a un carril de
que dominar cuando la disolucin interacta con luz casi
la protena separada. Si el reactivo de anticuerpo reconoce
m onocrom tica .10 Cuando la partcula, como albmina
la protena, se forma un complejo insoluble. Despus de
o IgG, es relativamente pequea en comparacin con la
teir y secar la pelcula de agarosa, la interpretacin se
longitud de onda de la luz incidente, la partcula disper
basa en la migracin y apariencia de las bandas. Como se
sar luz de forma simtrica, hacia delante y hacia atrs.
muestra en la figura 6-5, la protena m onoclonal aparece
Un mnimo de luz dispersada es detectable a 90 de la luz
r como una banda discreta (con un antisuero monoes- incidente. Las molculas ms grandes de complejos ant
pecfico de cadena pesada y ligera que est en la misma
geno-anticuerpo tienen dimetros que aproximan la lon
posicin). Las protenas policlonales lo hacen como una
gitud de onda de la luz incidente y dispersan luz con una
banda difusa. La concentracin de la muestra del paciente
intensidad mayor en la direccin directa. La longitud de
onda de la luz se selecciona con base en su capacidad para
ser dispersada en direccin directa y la capacidad de los
complejos antgeno-anticuerpo para absorber la longitud
de onda de la luz.
La turbidim etra mide la luz transmitida y la n efelom e
tra la luz dispersada. Los turbidmetros (espectrofot
metros o colorm etros) estn diseados para medir la luz
que pasa por una disolucin, de modo que el fotodetector
est colocado a un ngulo de 180 desde la luz incidente.
Si la absorbancia de luz es insignificante, la turbidez se
puede expresar como la absorbancia, que est relacionada
de forma directa con la concentracin de partculas sus
pendidas y la longitud de la trayectoria. Los nefelmetros
miden la luz a un ngulo distinto a 180 a partir de la luz
incidente; la mayor parte miden luz directa dispersada a
menos de 90 porque la sensibilidad se increm enta (va
se el captulo 4, T cnicas an alticas e instrum entacin).
La concentracin relativa del reactivo de anticuerpo y el
antgeno es muy importante para asegurar que el tamao
del complejo generado sea m ejor detectado por el nefel
FIGURA 6-5. Electroforesis de nmunofljacin. A. Inmunoglobulina metro o turbidmetro, y que la reaccin inmune no est
monoclonal IgG k . B. Inmunoglobina monoclonal IgA k con cadenas en poszona o prozona. Por tanto, podra ser importante
ligeras de k libre. C. Inmunoglobulinas biclonales IgG X e IgM k . D. probar ms de una concentracin de muestra del pacien
Banda de cadena pesada de IgA difusa sin una cadena ligera corres te, monitorear la presencia de anticuerpo en exceso o
pondiente. aadir ms antisuero y vigilar la tasa mxima. El exceso
CAPTULO 6 INMUNOENSAYOS Y TCNICAS CON SONDA DE CIDO NUCLEICO 151
de anticuerpo indicara que hay poco antgeno y que se de enlace es un receptor (p. ej., receptor de estrgeno o
subestim la reaccin. progesterona), el ensayo es un anlisis de receptor. Si el
Para turbidimetra y nefelometra, todos los reactivos y reactivo de enlace es una protena de transporte (como
sueros deben estar libres de partculas que podran disper globulina ligadora de tiroxina o transcortina), el ensayo
sar luz. El pretratamiento de suero con polietilenglicol, un se puede llamar prueba competitiva de enlace a protena.
polmero hidroflico, no inico, mejora la interaccin ant- En la actualidad los inmunoensayos se emplean casi de
geno-anticuerpo. Debido a que el polmero es ms hidro modo exclusivo, con dos excepciones notables: ensayos
flico que el antgeno o el anticuerpo, el agua es atrada de receptor de estrgeno y progesterona, y la relacin de
desde el antgeno y el anticuerpo al polietilenglicol. Esto enlace de hormona tiroidea, que emplea globulina ligado
da como resultado una tasa ms rpida y mayor cantidad ra de tiroxina.
de formacin de complejo antlgeno-anticuerpo. Los inmunoensayos se pueden describir con base en
Ambos mtodos se pueden efectuar en un modo de su marcador; cul reactivo est marcado, la concentracin
punto final o cintico. En el modo de punto final, se toma relativa y la fuente del anticuerpo, el mtodo empleado
una medicin al comienzo de la reaccin (la seal de fon para separar reactivos libres de los marcados por enlace,
do) y otra en un tiempo fijo en la reaccin (seal de mese la seal que se mide y el mtodo utilizado para asignar
ta o punto final); la concentracin se determina por medio la concentracin de analito en la muestra. Por tanto, el
de una curva de calibracin. En el modo cintico, la tasa diseo de inmunoensayo tiene muchas variables por con
de formacin de complejo se moni torea sin interrupcin siderar, que conducen a diversos ensayos.
y se determina la tasa mxima. sta se relaciona de mane
ra directa con la concentracin del antgeno, aunque esto M arcadores
no necesariamente es lineal. As, se requiere una curva de La forma ms simple de identificar un ensayo es mediante
calibracin para determinar la concentracin de muestras el marcador utilizado. En el cuadro 6-2 se listan los marca
desconocidas. dores de uso comn y los mtodos empleados para detec
tarlos.
Inm unoensayos m arcados Marcadores radiactivos. Los tomos con ncleos ines
tables que emiten radiacin en forma espontnea son
C o n sideracio nes g en era les radiactivos y se conocen como radionclidos. La emisin
Por lo general, en todos los inmunoensayos marcados, se conoce como decaimiento radiactivo y es independiente
un reactivo (antgeno o anticuerpo) se marca al unir una de los parmetros qumicos o fsicos, como temperatura,
partcula o molcula que se detecta mejor a menores con presin o concentracin. De las tres formas de radiacin,
centraciones de los complejos antgeno-anticuerpo. Por slo se emplean beta y gamma en el laboratorio clnico. En
tanto, el marcador mejora la sensibilidad analtica. Todos la emisin beta, el ncleo puede emitir electrones con car
los ensayos tienen un reactivo de enlace, que puede unir ga negativa o partculas con carga positiva llamados posi
se al antgeno o ligando. Si el reactivo de enlace es un trones. Los electrones emitidos se conocen tambin como
anticuerpo, el anlisis es un inmunoensayo. Si el agente partculas beta. El tritio (3H) es el radionclido empleado
RIA, radioinmunoensayo; EIA, inmunoensayo enzimtico; CLA, ensayo quimioluminiscente; FIA, inmunoensayo fluorescente.
152 PARTE I PRINCIPIOS BSICOS Y PRCTICA DE LA QUMICA CLNICA
por lo comn en ensayos de inmunologa celular para Ab - HRP + perxido *Ab = HRP + 0 2
diagnstico e investigacin.
La emisin gamma es radiacin electromagntica con
0 2 + OPD reducida > OPD oxidada + 11,0 (Ec. 6-3)
longitudes de onda muy cortas que se originan de ncleos M arcadores fluorescentes. Los marcadores fluores
inestables. Cuando un radionclido libera energa y se centes (fluorocromos o fluorforos) son compuestos que
vuelve ms estable, se desintegra o decae, liberando ener absorben energa radiante de una longitud de onda y emi
ga. Un espectro especfico de niveles de energa se rela ten energa radiante de una longitud de onda ms grande
ciona con cada radionclido. La unidad estandarizada en menos de 10 '4 segundos. Por lo comn, la luz emitida
de radiactividad es el becquerel (Bq), que es igual a una se detecta a un ngulo de 90 desde la trayectoria de luz
desintegracin por segundo. La unidad tradicional es el de excitacin con un fluormetro o un espectrofotme
curie (C i), que es igual a 3.7 X 10 10 Bq; 1 qCi = 37 kBq. tro modificado. La diferencia entre la longitud de onda de
La vida media del radionclido es el tiempo necesario para excitacin y la de emisin (cambio de Stokes) vara entre
que 50% del radionclido decaiga y se vuelva ms estable. 20 y 80 nm para la mayor parte de los fluorocromos. Algu
Mientras ms larga sea la vida media, decae con mayor nos inmunoensayos de fluorescencia simplemente sustitu
lentitud y, por tanto, se incrementa el tiempo en que se yen un marcador fluorescente (como la fluorescena) por
puede medir. Para sustancias radiactivas empleadas en un marcador enzimtico y cuantifican la fluorescencia .13
pruebas diagnsticas, es preferible que la emisin tenga Otro mtodo, el inmunoensayo de fluorescencia de reso
un nivel de energa apropiado, y que la vida media sea lucin en el tiempo, utiliza un marcador fluorescente muy
relativamente larga; 125I satisface estos requisitos y es el eficaz, como un quelato de europio ,14 que fluoresce casi
radionclido de emisin gamma que ms se utiliza en el 1000 veces ms lento que la fluorescencia de fondo natu
laboratorio clnico. ral y tiene un cambio de Stokes amplio. El retraso permite
Los radionclidos de emisin gamma son detectados que el marcador fluorescente sea detectado con interferen
por medio de un detector de centelleo de cristal (conoci cia mnima desde la fluorescencia de fondo. El cambio de
do tambin como contador gamma). La energa liberada Stokes largo facilita la medicin de radiacin de emisin al
durante el decaimiento excita una fluorita, como el yodu tiempo que se excluye la radiacin de excitacin. El ensa
ro de sodio activado con talio. La fluorita excitada libera yo resultante es muy sensible y de resolucin en el tiempo,
un fotn de luz visible, que es amplificada y detectada por con fluorescencia de fondo minimizada.
un tubo fotomultiplicador; la energa de luz amplificada M arcadores lu m iniscen tes. Los marcadores luminis
se traduce entonces en energa elctrica. El decaimiento centes emiten un fotn de luz como resultado de una
detectable del radionclido se expresa como cuentas por reaccin elctrica, bioqumica o qumica .1516 Algunos
minuto (CPM). compuestos orgnicos se excitan cuando se oxidan y emi
En los inmunoensayos, un reactivo se radiomarca. En ten luz cuando vuelven al estado basal. Los oxidantes
ensayos competitivos, el antgeno se marca y se le deno incluyen perxido de hidrgeno, hipoclorito u oxgeno. A
mina trazador. El radiomarcador debe permitir al trazador veces se requiere un catalizador, como peroxidasa, fosfata
ser funcional por completo y competir por igual con el sa alcalina o iones metlicos.
antgeno no marcado por los sitios de enlace. Cuando el El luminol, el primer marcador quimioluminiscente
anticuerpo detector se radiomarca, el sitio de combina empleado en inmunoensayos, es una diacilhidracida ccli
cin con antgeno debe permanecer activo biolgicamente ca que emite energa luminosa en condiciones alcalinas
y libre. en presencia de perxido o peroxidasa. Debido a que la
M arcadores enzim ticos. Las enzimas se emplean por lo peroxidasa puede servir como catalizador, en los ensayos
comn para marcar el antgeno/hapteno o anticuerpo .1112 se puede usar esta enzima como marcador; el sustrato qui-
La peroxidasa de rbano (HRP), fosfatasa alcalina (ALP) mioluminognico, luminol, producir luz que es directa
y deshidrogenasa de glucosa-6-fosfato se emplean en la mente proporcional a la cantidad de peroxidasa presente
mayor parte de los casos. Las enzimas son catalizadores (ecuacin 6-4):
biolgicos que incrementan la tasa de conversin de sus
Luminol + 2H 20 2 + OH" Peroxidasa
trato a producto y no se consumen en la reaccin. Como
tal, una enzima puede catalizar muchas molculas de sus 3-aminoftalato + luz (425 nm) (Ec. 6-4)
trato y, por consiguiente, amplificar la cantidad de produc
to generado. La actividad de la enzima se puede monitorear Un marcador quimioluminiscente popular, steres de
de manera directa al medir el producto formado o el efec acridinio, es una molcula orgnica de anillo triple enlaza
to del producto en una reaccin acoplada. Dependiendo da mediante un enlace de ster con una cadena orgnica. En
del sustrato empleado, el producto puede ser fotomtrico, presencia de perxido de hidrgeno y en condiciones alca
fluoromtrico o quimioluminiscente. Por ejemplo, una linas, el enlace de ster se rompe y permanece una molcu
reaccin fotomtrica representativa con anticuerpo marca la inestable (N-metilacridn). La luz es emitida cuando la
do con HRP (Ab-HRP) y el sustrato (un perxido) generan molcula inestable vuelve a su estado basal ms estable.
el producto (oxgeno). El oxgeno puede oxidar entonces ster de acridinio + 211,0, + OH- *
un cromgeno reducido (ortofenilendiamina reducida
[OPD]) para producir un compuesto coloreado (OPD oxi N-metilacridn + C 0 2 + H ,0 + luz (4 3 0 nm)
dada) que se mide por medio de un fotmetro. (Ec. 6-5)
CAPTULO 6 INMUNOENSAYOS Y TCNICAS CON SONDA DE CIDO NUCLEICO 153
La fosfatasa alcalina conjugada por lo comn con un los reactivos de anticuerpo. Despus de la incubacin y la
anticuerpo ha sido empleada en los analizadores de inmu separacin de antgeno libre marcado (no enlazado), se
noensayo automatizados para producir algunos de los mide el antgeno enlazado marcado.
ensayos quimioluminiscentes ms sensibles. La ALP cata Como opcin, el ensayo competitivo se puede llevar a
liza los sustratos fosfato de arilo 1, 2-dioxetano adamantilo cabo en etapas sucesivas. Primero, el antgeno marcado
(AMPPD) para liberar luz a 4 77 nm. El lmite de deteccin se incuba con el anticuerpo de reactivo y luego se agrega
se aproxima a 1 zmol, o aproximadamente 602 molculas el antgeno marcado. Despus de un tiempo de incuba
de enzima .17,18 cin largo y un paso de separacin, se mide el antgeno
enlazado marcado. Este mtodo incrementa la sensibilidad
D iseo del ensayo analtica del ensayo.
Inrnunoensayos competitivos. El primer ensayo fue un Considere el ejemplo del cuadro 6-3. Un nmero rela
inmunoensayo competitivo en el que el antgeno radiomar- tivamente pequeo, pero constante, de sitios de combi
cado (Ag*; llamado tambin trazador) compite con ant nacin de Ab estn disponibles para combinarse con una
geno no marcado (Ag) por un nmero limitado de sitios cantidad constante, relativamente grande, de Ag* (traza
de enlace (Ab) (fig. 6- 6 ). La proporcin de Ag y Ag* que dor) y calibradores con concentraciones de antgeno cono
se une con el Ab se relaciona con la concentracin de Ag cidas. Debido a que la cantidad de trazador y anticuerpo
y Ag* y requiere anticuerpo limitado en la reaccin. En el son constantes, la nica variable en el sistema de prueba
ensayo competitivo, la concentracin de Ag* es constante es la cantidad de antgeno no marcado. Cuando se incre
y limitada. A medida que aumenta la concentracin de Ag, menta la concentracin de antgeno no marcado, aumenta
ms se enlaza con el anticuerpo, lo que da como resultado la concentracin (o porcentaje) de trazador libre.
menos enlace de Ag*. Estos ensayos de reactivo limitado Si se emplean varios calibradores, se establece una cur
eran muy sensibles porque las concentraciones bajas de va de respuesta. Cuando se incrementa la concentracin
antgeno no marcado produjeron una seal mensurable de Ag no marcado, disminuye la concentracin de trazador
grande a partir del antgeno enlazado marcado. Si el ensa que se une con el Ab. En el ejemplo presentado en el cuadro
yo competitivo est diseado para alcanzar el equilibrio, 6-3, si la cantidad de antgeno no marcado es cero, el tra
los tiempos de incubacin suelen ser largos. zador mximo se combinar con el anticuerpo. Cuando no
La reaccin de antgeno-anticuerpo se puede realizar en est presente el antgeno no marcado, es posible el mximo
una etapa cuando el antgeno marcado (Ag*), el antgeno enlace mediante el trazador; esto se conoce como E_, 0
E m a.x ,
no marcado (Ag) y el anticuerpo de reactivo (Ab) se incu enlace mximo o el estndar cero. Cuando la cantidad de
ban de forma simultnea jun tos para producir antgeno antgeno no marcado es la misma que el trazador, cada uno
enlazado marcado (Ag*Ab), antgeno no marcado enlaza se unir con igual cantidad de anticuerpo. A medida que
do (AgAb) y marcador libre (Ag*) como se muestra en la la concentracin de antgeno se incrementa en un ensayo
figura 6-6 y la ecuacin 6- 6 : competitivo, la cantidad de trazador que se acompleja con
el reactivo de enlace disminuye. Si el trazador es de bajo
Ag* (reactivo fijo) + Ag + Ab (reactivo limitado) * peso molecular, con frecuencia se mide el trazador libre.
Ag*Ab + AgAb + Ag* (Ec. 6-6) Si el trazador es de alto peso molecular, se mide el traza
dor enlazado. Los datos se pueden graficar en una de tres
Un ensayo simultneo competitivo, genrico, heterog maneras: enlazado/libre contra la dosis aritmtica de ant
neo, comienza al pipetear la muestra de prueba (control geno no marcado; porcentaje enlazado contra el log de la
de calidad, calibrador o muestra del paciente) en tubos de
dosis del antgeno no marcado; y logit enlazado/EQcontra
ensayo. A continuacin, se aaden el antgeno marcado y el log de la dosis del antgeno no marcado (fig. 6-7).
La fraccin enlazada se puede expresar en varios for
matos. Enlazado/libre (E/L) son las CPM de la fraccin
enlazada comparada con las CPM de la fraccin libre. El
porcentaje enlazado (% E) es la CPM de la fraccin enlaza
da comparada con la CPM del enlace mximo del trazador
(EQ) multiplicadas por 100. La transformacin logit E/Efl
es el log natural de (E/E0)/(l - E/E0).
Al usar papel para grficas logit-log en el que E/E0 se gr
fica en el eje de las ordenadas y el log de la dosis del antgeno
no marcado se grfica en el eje de las abscisas, se produce
una recta con una pendiente negativa. La mayor parte de las
veces, las microcomputadoras calculan la mejor recta por
medio de la regresin lineal; los valores del paciente se pue
den calcular mediante la computadora con esta relacin.
Es importante recordar que el m ejor tipo de tcnica de
FIGURA 6-6. Inmunoensayo marcado competitivo. Durante la incu
bacin simultnea, el antgeno marcado( ^ ) y el antgeno no mar ajuste de curva se determina mediante experimento, y no
cado ( Q ) compiten por los sitios de enlace de anticuerpo (= ^ ). hay certeza de que la grfica logit-log de los datos gene
Con frecuencia se mide el marcador enlazado en el precipitado. re siempre una recta. Para determinar el m ejor mtodo,
154 PARTE I PRINCIPIOS BSICOS Y PRCTICA DE LA QUIMICA CLNICA
0 100 1
1 0 = 50
200 100
50 80 - = 40 J O -=.67
200 120
60 _ gg
100 - 6 _= .4 9
200 ~~ 134
200 = 25 JO --.33
200 150
400 = 17 34 = .20
200 166
% JK
+! < f ~ o
O 0 %
II \
P o
\ ____/ x / V ___
A B c
FIGURA 6-10. Ensayo de emparedado no competitivo de dos sitios
para detectar anticuerpo. El antgeno inmovilizado ( 0 ) capta al
anticuerpo (= ^ ). Entonces, se aade el anticuerpo marcado (=4(),
se enlaza con el anticuerpo captado y se detecta.
Concentracin del analito
FIGURA 6-8. Curva de dosis respuesta en un Inmunoensayo no se puede modificar para determinar la clase de inmuno-
competitivo. globulina del anticuerpo especfico presente en el suero.
Por ejemplo, si el anticuerpo detector fuera marcado y no
En el ensayo de emparedado para detectar antgeno especfico (p. ej., IgM antihumana de conejo [especfica de
(conocido tambin como ensayo de captacin de ant cadena p]), detectara y cuantificara slo la IgM humana
geno), el anticuerpo no marcado, inmovilizado, capta el captada por el antgeno inmovilizado.
antgeno. Despus del lavado para eliminar molculas que
no reaccionaron, se aade el anticuerpo detector marca T cnicas d e separacin
do. Despus de otro lavado para eliminar el anticuerpo Los inmunoensayos requieren que el reactivo marcado
detector marcado libre, la seal del anticuerpo marcado libre se distinga del marcado enlazado. En ensayos hetero
enlazado es proporcional al antgeno captado. Este forma gneos, la separacin fsica es necesaria y se logra mediante
to depende de la capacidad del reactivo de anticuerpo para absorcin, precipitacin o interaccin con una fase slida
reaccionar con un solo epitopo en el antgeno. La especi como se lista en el cuadro 6-4. Mientras m ejor sea la sepa
ficidad y cantidad de anticuerpos monoclonales ha permi racin del reactivo enlazado del libre, ms confiable ser
tido la expansin rpida de diversos ensayos. En la figura el ensayo. Esto contrasta con los ensayos hom ogneos en
6-9 se muestra un esquema. los que la actividad o expresin del marcador depende de
El ensayo de emparedado es otro estudio no competiti si el reactivo marcado est libre o enlazado. No se requiere
vo empleado para detectar anticuerpo, en el cual el antge ninguna etapa de separacin en ensayos homogneos.
no inmovilizado capta anticuerpo especfico. Despus de Adsorcin. Las tcnicas de adsorcin emplean partculas
lavar, el anticuerpo detector marcado se aade y se enlaza para captar antgenos pequeos, marcados o no marcados.
con el anticuerpo captado. La cantidad de anticuerpo mar Por lo comn se usa una mezcla de carbn vegetal y dextra-
cado enlazado es directamente proporcional a la cantidad no entrecruzado. El carbn vegetal es poroso y se combina
de anticuerpo especfico presente (fig. 6-10). Este estudio fcil con molculas pequeas para eliminarlas de la disolu
cin; el dextrano evita que protena no especfica se enlace
con el carbn vegetal. El tamao del dextrano afecta el de
la molcula que puede ser absorbida; mientras menor sea el
peso molecular del dextrano empleado, ms pequeo es
el peso molecular del antgeno libre que puede ser absorbi
do. Otros adsorbentes son slice, resina de intercambio inico
o Sephadex. Despus de la absorcin y la centrifugacin, el
antgeno libre marcado se encuentra en el precipitado.
Precipitacin. La precipitacin no inmune ocurre
cuando el ambiente se modifica afectando la solubilidad
de la protena. Los compuestos como el sulfato de amonio,
sulfato de sodio, polietilenglicol y etanol precipitan pro
tena de manera no especfica; precipitarn tanto anticuer
po libre como complejos antgeno-anticuerpo. El sulfato
FIGURA 6-9. Ensayo de emparedado no competitivo de dos sitios de amonio y el sulfato de sodio separan las globulinas
para detectar antgeno. El anticuerpo inmovilizado ( = 0 capta al libres y los complejos antgeno-anticuerpo. El etanol des
antgeno (=f^)- Entonces, se aade el anticuerpo marcado ( 0 ), se naturaliza protena y complejos antgeno-anticuerpo, y
enlaza con el antgeno captado y se detecta. causa precipitacin. El polietilenglicol precipita molculas
156 PARTE I PRINCIPIOS BSICOS Y PRCTICA DE LA QUIMICA CNICA
de protena ms grandes con o sin el antgeno unido. vilizado o anticuerpo. Los inmunoensayos con separacin
Idealmente, despus de la centrifugacin, todo el antgeno de fase slida son ms fciles de efectuar y automatizar, y su
enlazado marcado estar en el precipitado, y dejar al ant ejecucin requiere menos manipulacin y tiempo que otros
geno libre marcado en el sobrenadante. inmunoensayos. Sin embargo, es necesaria una cantidad
Los complejos solubles antgeno-anticuerpo pueden relativamente grande de anticuerpo de reactivo o antgeno
ser precipitados mediante un segundo anticuerpo que para cubrir la superficie de la fase slida y es difcil lograr la
reconoce al anticuerpo primario en el complejo soluble. El cobertura uniforme de la fase slida. Cuesta ms producir
resultado es un complejo ms grande que se vuelve insolu- ensayos de fase slida y requieren mayor habilidad tcnica
ble y precipita. La centrifugacin se utiliza de nuevo para a fin de minimizar la variabilidad intraensayo e interensayo.
ayudar a la separacin. Este mtodo de separacin inmune El lavado insuficiente es una fuente de error comn.
se conoce tambin como mtodo de anticuerpo doble o
segundo anticuerpo. Por ejemplo, en un ensayo de hor E jem plos d e inm unoensayos m arcados
mona de crecimiento, el anticuerpo primario o especfico El inmunoensayo de inhibicin turbidimtrico mejora
de antgeno producido en un conejo reconoce a la horm o do por partculas (PETINIA) es un inmunoensayo com
na de crecimiento. El segundo anticuerpo, producido en petitivo homogneo en el que los haptenos de bajo peso
una oveja o cabra, reconocera al anticuerpo de conejo. molecular enlazados a partculas compiten con analito no
Los complejos antgeno-anticuerpo marcados, complejos marcado por un anticuerpo especfico. El grado de aglu
antgeno-anticuerpo no marcados y anticuerpos primarios tinacin de partculas es inversamente proporcional a la
libres precipitan con el segundo anticuerpo. Este mtodo concentracin de analito no marcado y se evala midiendo
de separacin es ms especfico que la precipitacin no el cambio en la luz transmitida en un analizador clnico
inmune porque slo precipita el anticuerpo primario. Una automtico (ACA) (DuPont; ahora, Dade ).19
separacin similar ocurre cuando la protena estafilocci- Los anlisis de inmunoabsorcin ligados a enzimas
ca A (SPA) sustituye al segundo anticuerpo. La SPA se une (ELISA), un grupo popular de inmunoensayos heterog
con IgG humana y causa precipitacin. neos, tienen un marcador enzimtico y usan una fase sli
Fase slida. El uso de una fa s e slida para inmovilizar da como la tcnica de separacin. Cuatro formatos estn
anticuerpo de reactivo o antgeno provee un mtodo para disponibles: un ensayo competitivo con antgeno marca
separar reactivo marcado enlazado del libre despus de lavar. do, un ensayo competitivo con anticuerpo marcado, un
El soporte de fase slida es una superficie inerte a la que ensayo no competitivo para detectar antgeno y un ensayo
se une el antgeno del reactivo o anticuerpo. El soporte de no competitivo para detectar anticuerpo.
fase slida puede ser, pero no est limitado a, superficies de Uno de los primeros ensayos homogneos fue la tc
poliestireno, membranas y cuentas magnticas. El antgeno nica de inmunoensayo de m ultiplicacin de enzimas
inmovilizado o anticuerpo puede ser absorbido o enlazado (EM IT), un ensayo enzimtico que produce en la actua
de forma covalente con el soporte de fase slida; el enlace lidad Syva Corporation .20 Como se muestra en la figura
covalente evita la liberacin espontnea del antgeno inmo 6- 11, los reactivos en la mayor parte de los sistemas de
CAPTULO 6 INMUNOENSAYOS Y TCNICAS CON SONDA DE CIDO NUCLEICO 157
especficos. Como se ilustra en la figura 6-12, mltiples muestra del paciente o de control. El anticuerpo reconoce
antgenos de proteina (como los relacionados con el virus al antgeno y se enlaza con l para formar un complejo
de la inmunodeficiencia humana [HIV]) se aslan, des insoluble. Despus del lavado, un reactivo de anticuerpo
naturalizan y separan mediante dodecil sulfato de sodio- marcado detecta el complejo. Dependiendo del marcador,
electro fo resis en gel de poliacrilamida (SDS-PAGE). El se podra obtener un producto fotomtrico, fluorescente
SDS desnaturaliza la protena y aade una carga negativa o quimioluminiscente que aparece como una banda. Las
global proporcional al peso molecular de la protena. La bandas de la muestra del paciente se comparan con las
PAGE de protenas tratadas con SDS permite la separacin del control que contienen anticuerpo que reaccionar con
de protena con base en el peso molecular. Las prote antgenos conocidos. Los marcadores de peso molecular
nas separadas se transfieren entonces a un nuevo medio se separan tambin y se tien para proveer una gua para
(como membrana de nylon, nitrocelulosa o de difluoruro la interpretacin del peso molecular.
de polivinilideno). Las protenas separadas se fijarn en
el nuevo medio y se pueden teir para asegurar la sepa Inm unocitoqum ica e inm unohistoqum ica
racin. Cada carril en la membrana se incuba con una Cuando los reactivos de anticuerpo se emplean para detec
tar antgenos en clulas o tejidos, los mtodos se conocen
como inmunocitoqumica e inmunohistoqum ica, respecti
vamente. Cuando el antgeno es una parte integral de la
1 2 3 4 clula o el tejido, ste es un anlisis directo. Una segun
da estrategia, el anlisis indirecto, emplea clulas o teji
do como sustrato; este complejo se detecta entonces por
medio de un reactivo de anticuerpo marcado.
Los marcadores fluorescentes son los ms comunes en
inmunocitoqum ica o inmunohistoqumica. Cuando se
emplean para identificar microscpicamente bacterias o
Extracto de protena de cepa constituyentes en tejido (como complejos inmunes depo
B +
Electroforesis SDS-PAG sitados in vivo), el mtodo se llama inmunofluorescencia
directa (IFD ) o ensayo de fluorescencia directa (EFD ). Se
1 2
o 3 4
requiere un microscopio de fluorescencia configurado de
modo especial. Se seleccionan longitudes de onda de luz
mediante un filtro monocromador para excitar el marca
dor fluorescente; ste emite luz de una segunda longitud
Protenas cm cm cm cm de onda que se selecciona para ver por un segundo filtro
separadas c m tm im cm monocromador. Ejemplos de EFD son la deteccin de Tre-
transferidas
pon em a pallidum en lquido de lesin o deteccin de com
<=l plejos inmunes en la glomerulonefritis relacionada con el
sndrome de Goodpasture y nefritis del lupus.
D + Cuando se emplea un marcador fluorescente en el an
Revestimiento con muestra de suero lisis indirecto, ste es inmunofluorescencia indirecta (IFI)
o un ensayo de inmunofluorescencia indirecto (EIF). El
1 2
o 3 4 1 2 3 4
sustrato se coloca en una placa de microscopio, se cubre
con una capa de suero y se permite que reaccione con el
i I 1f-- 11-- 1 antgeno, y el anticuerpo enlazado se detecta mediante el
i__j cttt __] czzn
reactivo de globulina antihumana marcada. La placa se ve
[=
1 H R P con un microscopio de fluorescencia. El EIF ms comn
t i
A >=> i i i i
llevado a cabo en el laboratorio clnico detecta anticuer
pos para antgenos nucleares (AAN). Tanto el ttulo como
el patrn de fluorescencia proveen informacin til para
E cm diagnosticar enfermedad tisular conectiva. Otros autoanti-
+ F + cuerpos y anticuerpos para enfermedad infecciosa se pue
Revestimiento con Ig-HRP antihumana Anticuerpo visualizado del paciente den detectar mediante el EIE
na aguda y leucemia linfoblstica aguda es difcil, desde el estn en la fase G 0 y G t del ciclo celular, y el contenido de
punto de vista morfolgico, y requiere ms informacin DNA nuclear son dos conjuntos de 23 cromosomas, cono
para identificar las molculas expresadas fenotpicamente. cido como diploide. Cuando una clula se prepara para la
En las leucemias linfoides y linfomas, la identificacin de replicacin, se sintetiza DNA (fase S) y el contenido de
clulas tumoraies, como linfocitos T o B, puede ser un pre- DNA es aneuploide. Siguen la mitosis (fase M) y la divi
dictor importante de resultado clnico. Otra aplicacin es sin celular. El estado de ploida reflejado en el ndice de
determinar la relacin CD4/CD8 (la relacin del nmero DNA (DNA index, DI) compara la cantidad de DNA medi
de linfocitos T colaboradores a linfocitos T citotxicos) do en las clulas tumoraies con el de las clulas normales
y, ms reciente, el nmero absoluto de clulas positivas (ecuacin 6-7):
CD4. ste es el mtodo estndar para diagnosticar infec
cin, e iniciar y monitorear el tratamiento aunque la cuan-
^ nmero de canales mximo del pico aneuploide G 0!G l
tificacin de carga viral sea considerada por muchos como
un m ejor marcador. nmero de canales mximo del pico diploide G 0/GT
La inmunofenotipia comienza con una suspensin de
clulas vivas. Las clulas pueden provenir de sangre peri (Ec. 6-7)
frica, mdula sea o tejido slido. Los leucocitos o clulas Si se midieran las clulas diploides normales, enton
mononucleares se pueden aislar por medio de separacin ces el DI es uno. Si el DI no es uno, entonces las clulas
de gradiente de densidad (centrifugacin por Licoll-Hypa- son aneuploides. Si el DI es menor que uno, las clulas son
que) o mediante lisis de eritrocitos. El tejido, como ganglio hipodiploides; a la inversa, un DI mayor que uno es hiper-
linftico o mdula sea, requiere eliminacin de mecnica ploide. El porcentaje de clulas en la fase S se determina
de clulas del tejido para colectar una suspensin de clu tambin y por lo regular es menor que 5%.
las. Con base en los antecedentes del paciente y el tipo de Es posible emplear clulas nuevas fijadas en alcohol o
muestra, se emplea un panel de anticuerpos monoclona clulas rehidratadas removidas de un bloque de parafina.
les (MAb) marcados con fluorocromo. Los fluorocromos Las clulas se tratan con un detergente para permitir que
de uso comn en inmunofenotipia son isotiocianato de la tincin entre al ncleo. Las tinciones, como el yoduro
fluorescena, ficoeritrina, clorofila de peridinina, CY-5, de piridinio o el de etidinio, intercalan el DNA, y la fluo
aloficocianina e isotiocianato de tetrametil rodamina. Una rescencia se mide con el citmetro de flujo. El contenido
alcuota de la suspensin celular se incuba con uno o ms de DNA se relaciona con la intensidad de fluorescencia
MAb, lo cual depende del diseo del citmetro de flujo. (nmero de canales). Medir el DI y el porcentaje de clu
Si la clula expresa el antgeno, entonces el MAb marca las de la fase S son indicadores de pronstico en cncer de
do se enlaza y se puede detectar el marcador fluorescente. mama, ovario, vejiga y colorrectal.
La citom etra de flu jo se basa en clulas transportadas bajo
presin fludica pasando una por una por un haz lser. La
dispersin de luz directa, la dispersin de luz lateral y la
SONDAS DE CIDO NUCLEICO
emitida de marcadores fluorescentes se detectan mediante El examen molecular es un rea en rpida expansin en
tubos fotomultiplicadores. La dispersin de luz directa se el laboratorio clnico. Los laboratorios de investigacin
relaciona con el tamao de la clula, y la dispersin late han empleado estas tcnicas durante muchos aos; sin
ral con la granularidad de la clula. Cuando se emplean embargo, es reciente el desarrollo de los estudios apro
estos dos parmetros juntos en un diagrama de dispersin bados por la FDA para la deteccin y cuantificacin de
(histograma de dos parmetros), la poblacin de clulas DNA y RNA en muestras qumicas. Asuntos de calidad
deseada se puede seleccionar por medios electrnicos. En importantes que se atendern en cualquier estudio clnico
esta poblacin de clulas se evala tambin la emisin del basado en DNA son la calidad y preparacin de la muestra,
MAb marcado. Para un solo parmetro, la frecuencia de las sensibilidad de los reactivos a contaminantes inactivado-
clulas contra la intensidad de fluorescencia (el nmero res, sesgo de la amplificacin y variabilidad, seleccin de
de canal) se registra y presenta como un histograma de un controles apropiados, desempeo de la enzima de restric
solo parmetro. Por otro lado, si se evalan dos parme cin, y reproducibilidad y contaminacin cruzada de reac
tros en la misma celda, se genera un diagrama de disper ciones de amplificacin .31 Los cidos nucleicos almacenan
sin que muestra la expresin de dos antgenos en forma toda la informacin gentica y dirigen la sntesis de pro
simultnea. Con un panel de MAb, se puede identificar tenas especficas. Al evaluar cidos nucleicos, se podra
la clula y determinar el nmero relativo o absoluto de la intentar comprender mejor los cambios celulares antes
clula. de poder detectar productos protenicos especficos. Las
enfermedades con base gentica, presencia de organismos
A nlisis d e D N A m ediante citom etra d e flu jo infecciosos, diferencias entre individuos para propsitos
En la citometra de flujo, otro uso del citmetro de flujo es forenses y de trasplantes y la regulacin del crecimiento
medir el contenido de cido desoxirribonucleico (DNA) celular alterado son reas que han sido investigadas con
nuclear y la capacidad proliferativa de las clulas malig hibridacin de cido nucleico. El avance ms reciente es
nas. Esto ayuda a distinguir entre enfermedad benigna y el uso de sistemas moleculares (hasta 105 a 106 sondas por
maligna, para vigilar el avance de la enfermedad y predecir sistema) para anlisis de alta velocidad de ligandos mlti
la respuesta al tratamiento. Las clulas normales en reposo ples y el anlisis de expresin gnica.
CAPTULO 6 INMUNOENSAYOS Y TCNICAS CON SONDA DE CIDO NUCLEICO 161
Qumica del cido nucleico que una se acerque a la otra. Las dos hebras complemen
tarias se pueden volver a unir o anillar si las condiciones
El DNA almacena informacin gentica humana y dicta cambian y favorecen esto. La renaturalizacin seguir las
la secuencia de aminocidos de pptidos y protenas. El reglas de la formacin de pares de bases de modo que se
DNA est compuesto de dos hebras de nucletidos; cada recupere la molcula original de DNA.
una es un polmero de molculas de desoxirribosa unidas El cido ribonucleico (RNA) tambin est presente en
mediante enlaces fuertes de 3 ' 5 ' fosfodister que unen al las clulas humanas y es similar al DNA desde el punto de
grupo 3 ' hidroxilo de un azcar con el grupo 5 ' fosfato vista qumico. El RNA difiere del DNA en tres formas: a)
de un segundo azcar. Una base de purina o pirimidina la ribosa sustituye a la desoxirribosa como el azcar; b) el
est unida tambin a cada azcar. Las dos hebras estn uracilo reemplaza a la timina como una purina base, y c)
dispuestas en una hlice doble con las bases apuntando el RNA es de una sola hebra. El DNA y el RNA trabajan
hacia el centro. Las hebras son antiparalelas, de modo que juntos para sintetizar protenas. El dsDNA genmico es
el extremo 3 ' 5' de una hebra se enlaza con una hebra dividido por enzimas en sus dos hebras, una de las cuales
en la direccin 5' 3 '. Debido a que los steres de fosfato sirve como la plantilla para la sntesis de RNA mensajero
son cidos fuertes y se disocian a pH neutro, la hebra tie complementario (mRNA). Cuando el mRNA se libera de
ne una carga negativa que es proporcional a su longitud. la plantilla de DNA, la hebra de DNA se vuelve a anillar. El
Las bases de purina (adenina [A] y timina [T] y las bases mRNA especifica el aminocido que se aadir a la cadena
de pirimidina (citosina [C] y guanina [G ]) mantienen la de pptido mediante RNA de transferencia, que transporta
doble hlice al formar puentes de hidrgeno entre pares de el aminocido al ribosoma, donde se prolonga la cadena
bases como se muestra en la figura 6-13. La adenina forma peptdica.
pareja con la timina con dos puentes de hidrgeno, y la Esta descripcin de sntesis de protenas remarca que
citosina se junta con la guanina con tres puentes de hidr desde el punto de vista fisiolgico el DNA se desnatura
geno. Las hebras son complementarias debido a la manera liza de forma rutinaria, se une con el RNA y se vuelve a
fija mediante la cual se enlazan los pares de bases. anillar para restablecer el DNA original, siguiendo siem
Bajo condiciones fisiolgicas, la estructura helicoidal pre las reglas de pares de bases. Estos procesos forman la
del DNA de doble hebra (dsDNA) es estable debido a los base de los estudios de hibridacin de cido nucleico en
numerosos puentes de hidrgeno, aunque dbiles, entre los que las hebras complementarias de cido nucleico de
los pares, y la interaccin hidrfoba entre las bases en el fuentes no relacionadas se unen para formar un hbrido
centro de la hlice. Sin embargo, los enlaces dbiles se pue o dplex. El examen molecular en el laboratorio clnico
den romper in vitro al cambiar las condiciones ambienta consiste en dos reas principales: a ) el uso de sondas de
les; las hebras se desnaturalizan y separan entre s. Una vez DNA para detectar de manera directa o caracterizar un
desnaturalizadas, la carga negativa de cada hebra impide blanco especfico, y b) el uso de tecnologas de amplificacin
de cido nucleico para detectar o caracterizar un DNA o
5' 3' RNA blanco especfico. Entre los procedimientos en los
que se emplean sondas estn los estudios de fase slida
(hibridacin de captacin, Southern blot y Northern blot),
estudios con base en disolucin (estudios de proteccin,
anlisis de captacin de hbrido) y estudios de hibrida
cin in situ. Los procedimientos de amplificacin incluyen
amplificacin de cido nucleico (reaccin en cadena de la
polimerasa, amplificacin de secuencia con base en cido
nucleico, amplificacin mediada por transcripcin, ampli
ficacin por desplazamiento de hebra), amplificacin de
sonda (reaccin en cadena de la ligasa) y amplificacin
de seal (ensayo de DNA de cadena ramificada).
Tcnicas de hibridacin
Una sonda de cido nucleico es una hebra corta de DNA
o RNA de una secuencia conocida que est bien carac
terizada y es complementaria para la secuencia base en
el blanco de prueba. Las sondas pueden ser fragmentos
de cidos nucleicos genmicos, DNA clonado (o RNA) o
DNA sinttico. Los cidos nucleicos genmicos se aslan
de organismos purificados. Algunas sondas son clonadas
molecularmente en el husped bacteriano. Primero, la
secuencia de DNA que se emplear como sonda debe ser
aislada por medio de endonucleasas de restriccin bacte
rianas para el DNA en una secuencia base especfica. La
FIGURA 6-13. Representacin de una molcula de DNA. secuencia base deseada (la sonda) se inserta en un vector
162 PARTE I PRINCIPIOS BSICOS Y PRCTICA DE LA QUMICA CLNICA
plasmldico, dsDNA circular. El vector con el inserto se de nylon con carga. La transferencia ocurre por la accin
incorpora en una clula husped, como E scherichia coli, capilar de una disolucin salina, y el DNA se transfiere a la
donde se duplica el vector. La secuencia base deseada membrana, o bien, se usa corriente elctrica para transfe
duplicada se asla y purifica. Para fragmentos de DNA cor rir el DNA. Cuando el DNA est en la membrana, se aade
tos, se puede sintetizar una sonda de oligonucletido por una sonda que se une con la secuencia base complemen
medio de un proceso automatizado; si se conoce la secuen taria y aparece como una banda. En un mtodo similar, la
cia de aminocido de la protena, es posible determinar la N orthern blot, el RNA experimenta extraccin, digestin,
secuencia base a partir de la secuencia de aminocido. electroforesis, transferencia y, por ltimo, sondeo.
En una reaccin de hibridacin, la sonda debe ser detec La reaccin en cadena de la p olim erasa (PCR) que desa
tada. La sonda se puede marcar de forma directa con una rrollo KB Mullis de Cetus Company 32-33 es una tcnica de
radionclido (como 32P), enzima o biotina. 32P se detecta hibridacin amplificada que sintetiza de forma enzimti
mediante autorradiografa cuando el marcador radiactivo ca millones de copias del DNA blanco para incrementar
expone la pelcula de rayos X siempre que la sonda est la sensibilidad analtica. La mezcla de reaccin de prueba
localizada. Si la sonda se marca de forma directa con una incluye la muestra de DNA (clulas disueltas o tejido dige
enzima, se debe aadir un sustrato apropiado para generar rido enzimticamente con RNAasa y proteinasa y extra
un producto colorimtrico, fluorescente o quimioluminis do despus), cebadores de oligonucletido, polimerasa
cente. Las sondas marcadas con biotina se pueden unir a de DNA termoestable (p. ej., polimerasa Taq, de Thermus
avidina, que es acomplejada a una enzima (com o ALP o aquaticus) y trifosfatos de nucletido (ATP, GTP, CTP y
HRP); entonces se puede detectar la actividad enzimti- TTP) en una disolucin amortiguadora. El proceso, mos
ca. Por otro lado, la sonda biotinilada se puede detectar trado en la figura 6-14, comienza con el calentamiento de
mediante un reactivo de anticuerpo de avidina marcado.
Las tcnicas con sonda que se analizan se listan en el
A DNA blanco >" i "n r ^ m T i i i i T"H~t~3
cuadro 6-5. Un mtodo clsico para el anlisis de DNA,
atribuido a EM Southern ,31 es la Southern blot. En este o
mtodo, el DNA se extrae de una muestra con un reactivo B Desnaturali
fenlico y luego se digiere de forma enzimtica por medio zacin
de endonucleasas de restriccin para producir fragmentos o
de DNA. Estos fragmentos se separan despus mediante
electroforesis en gel de agarosa. Los fragmentos de DNA se C Adicin de
desnaturalizan y transfieren a un medio de soporte slido; reactivos
la mayor parte de las veces, nitrocelulosa o una membrana
O
D Extensin lili ri i iT T
CUADRO 6-5. TCNICAS CON SONDA__________ _ '1
No amplificada
Z 2 L Z 1 ....TI.f 1 5'
Southern blot
O
Northern blot
Hibridacin in situ E Desnaturali 3'
zacin
Polimorfismo de la longitud del fragm ento de
restriccin (PLFR)
Amplificacin del blanco
Reaccin en cadena de la polimerasa (PCR)
o
Reaccin en cadena de la transcriptasa polimerasa F Ciclo repetido
inversa (RT-PCR) 20 - 30X
r/_ w
Replicacin de secuencia autosostenida (3SR)
Amplificacin de sonda
Replicasa Q-beta O
Reaccin en cadena de la ligasa (LCR) G Producto
Amplificacin de seal 3'a
Mltiples marcadores por sonda FIGURA 6-14. Reaccin en cadena de la polimerasa. (A) La secuen
cia de DNA blanco se indica mediante la lnea en negrita; (B) el DNA
Mltiples sondas por blanco
de doble hebra se desnaturaliza (separa) por calentamiento; (C) se
Sistema de sonda de estratificado doble aaden los reactivos, y el cebador se une con la secuencia de DNA
blanco; (D) la polimerasa extiende los cebadores, y (E-G) se repiten el
Ensayo de DNA ramificado (bDNA)
calentamiento, anillado del cebador y la extensin.
CAPITULO 6 INMUNOENSAYOS Y TCNICAS CON SONDA DE CIDO NUCLEICO 163
DNA blanco para desnaturalizarlo, separando las hebras. tante, no hay procesamiento de la muestra de posamplifi-
Dos cebadores de oligonucletido (sondas) que reconocen cacin, as que se reduce la probabilidad de contaminar
los bordes del DNA blanco se aaden y anillan al DNA otras muestras con productos amplificados.
blanco. La polimerasa de DNA termoestable y los trifos La PCR est limitada por el gasto, la necesidad de con
fatos de dinucletido extienden el cebador. El proceso de tar con termocicladores, posible contaminacin con aero
desnaturalizacin por calor, enfriar para permitir que los sol de una muestra a otra, anillado no especfico y grado
cebadores anillen y calentar de nuevo para extender los de tirantez. La rigidez se relaciona con la estabilidad del
cebadores, se repite muchas veces (15 a 30 veces o ms). enlace entre el DNA o RNA blanco y la sonda, y se basa
La PCR es una reaccin de amplificacin exponencial en en el grado de correspondencia y la longitud de la son
la que despus de n ciclos hay (1 + x )nveces la cantidad de da. La estabilidad del dplex es afectada enrgicamente
blanco que estuvo presente al inicio, donde x es la eficien por la temperatura, pH y fuerza inica de la disolucin
cia media de la reaccin para cada ciclo. En teora, unos de hibridacin. En condiciones de baja rigidez (tempera
20 ciclos produciran casi 1 milln de veces la cantidad tura baja o fuerza inica incrementada), ocurre un enlace
de DNA blanco presente en un principio. Sin embargo, imperfecto.
en realidad, nunca se alcanzan los mximos tericos, y se Se han desarrollado otras tcnicas para vencer algunos
requieren ms ciclos para alcanzar tales niveles de ampli de estos defectos, para estandarizar mtodos de uso en
ficacin. laboratorios clnicos o proveer nuevos mtodos patenta
Las secuencias de DNA blanco amplificadas, conoci dos. Se ha descrito la amplificacin del blanco, la sonda
das como am plicones, se pueden analizar mediante elec y la seal. El mtodo clsico de amplificacin del blanco,
troforesis en gel, Southern blot o con sondas marcadas de PCR, incrementa el nmero de cidos nucleicos blanco de
modo directo. Cuando el blanco es RNA o mRNA micro modo que se puedan usar sistemas simples de deteccin
biano, el RNA debe ser convertido de forma enzimtica a de seal. Otro mtodo de amplificacin del blanco es la
DNA mediante la transcriptasa inversa; el producto, DNA replicacin de secuencia autosostenida (3SR), que detecta
complementario (cDNA), se puede analizar entonces por RNA blanco y se relaciona con ciclos isotrmicos conti
PCR. Este mtodo se denomina reaccin en cadena d e la nuos de transcripcin inversa .40,41 Un cebador (polimera-
transcriptasa p olim erasa inversa (RT-PCR). Al principio, la sa T7RNA) se une con el RNA y la transcriptasa inversa
PCR era un ensayo cualitativo, pero se han desarrollado extiende el cebador anillado. La ribonucleasa H se degrada
estudios que permiten la cuantificacin de amplicones. La a RNA y permite que se una el segundo cebador, seguida
RT-PCR cuantitativa se usa para medir cargas virales en de la sntesis de las secuencias de cDNA y RNA. El cDNA
pacientes infectados con HIV y hepatitis C. Estos nme sirve como plantilla para la produccin de mltiples copias
ros permiten a los mdicos determinar el estado mrbi de RNA antisentido, que se convierte a cDNA. As, el ciclo
do y evaluar la eficacia de los tratamientos antivirales. La se perpetua por s mismo.
reciente innovacin de la PCR es el desarrollo de la RT- La reaccin en cadena de la lgasa (LCR) es una tcni
PCR de tiempo real, que permite la medicin directa de ca de amplificacin de sonda en la que se emplean dos
acumulacin de amplicn durante la fase exponencial de pares de sondas marcadas que son complementarias para
la reaccin. Dos hallazgos importantes condujeron al des dos secuencias de DNA blanco cortas muy prximas .42
cubrimiento de la PCR de tiempo real. Primero, encontrar Despus de la hibridacin, la ligasa de DNA interpreta la
que la polimerasa Taq posee actividad de 5'-> 3'-exonu- rotura entre los extremos como una mella y une los pares
cleasa34,35; segundo, la construccin de sondas de oligo de sondas.
nucletido con marcador dual que emiten una seal de El sistema de replicasa Q-beta utiliza replicasa Q-beta
fluorescencia slo en la divisin, con base en el principio para sintetizar copias adicionales de la secuencia MDV-1
de la transferencia de energa de resonancia p o r fluorescencia del RNA Q-beta de doble hebra .43 Despus que se calienta
(FRET).36 La FRET conlleva la transferencia no radiacti el DNA o RNA blanco para desnaturalizarlo, se aade una
va de energa de una molcula donadora a una molcula sonda con la secuencia especfica de blanco y la secuencia
aceptora. Los sistemas basados en sonda, como las sondas de MDV-1 y se hibrida. Se elimina la sonda no ligada, se
Taq-Man ,37 guas moleculares 38 y cebadores Scorpion ,39 aaden la replicasa Q-beta y las bases de ribonucletido en
dependen de la proximidad de los fluorforos donadores exceso, y la amplificacin sigue.
y las molculas aceptoras de no fluorforo (supresores) en Los mtodos de amplificacin de seal estn disea
la sonda no hibridada, de modo que se genera poca seal dos para incrementarla al aumentar la concentracin del
o ninguna cuando el acptor extingue la fluorescencia del marcador. Una sonda puede tener mltiples marcadores
donador. En la hibridacin para el blanco, el fluorforo unidos, o bien podran estar marcadas varias sondas cor
y el supresor se separan por cambios conformacionales tas complementarias para cada uno de los blancos. Se ha
(guas moleculares y cebadores Scorpion) o divisin enzi desarrollado un sistema de sonda con doble estratificacin
mtica del fluorforo desde el supresor como resultado de en el cual parte de la sonda primaria se une al DNA blanco
la actividad de nucleasa 5 ' a 3 ' de la polimerasa de Taq. y otra parte se extiende lejos del DNA blanco. Se aaden
La deteccin en tiempo real ocurre cuando la emisin de sondas secundarias marcadas que hibridan la porcin de
fluorescencia de la sonda reportera (impulsada por la acu la sonda primaria, que no est ligada al DNA blanco. Un
mulacin de amplicones) se monitorea ciclo a ciclo. Los poderoso sistema de amplificacin de seal emplea sondas
resultados estn disponibles de inmediato y, lo ms impor mltiples. Las sondas primarias mltiples se emplean para
164 PARTE I PRINCIPIOS BSICOS Y PRCTICA DE LA QUMICA CLNICA
enlazar al DNA blanco. Un brazo de una sonda secundaria reado la translocacin cromosmica relacionada con la
puede reconocer un extremo de la sonda primaria; una mayor parte de los linfomas foliculares no hodgkinianos y
sonda terciaria marcada con enzima reconoce los otros ciertos linfomas difusos de grandes clulas. El cromosoma
brazos de la sonda secundaria. El ensayo de DNA ramifi Filadelfia en la leucemia mielgena crnica se relaciona
cado (bDNA) es un ejemplo del ltimo mtodo .44 con la translocacin que da como resultado la deteccin
La hibridacin in situ se lleva a cabo en clulas, tejido del gen de fusin bcr/abl.48
o cromosomas que se fijan en una placa de microscopio .45 El diagnstico prenatal de enfermedades genticas
Despus que el DNA se desnaturaliza por calentamien como la anemia drepanoctica, fibrosis qustica ,49 corea
to, se aade una sonda marcada e hibridar la secuencia de Huntington ,30 distrofia muscular tipo Duchenne ,51 y la
blanco despus de que se enfra la placa. Por lo comn enfermedad de Willebrand ha sido posible con el uso de
se emplean productos colorimtricos o fluorescentes. Una la tecnologa de sondas. Adems, se puede determinar el
ventaja de este mtodo es el contexto morfolgico en el estado portador en la distrofia muscular tipo Duchenne y
que se considera la localizacin del DNA blanco. la enfermedad de Willebrand.
El polim orfism o de longitud del fragm en to de restriccin La PCR ha sido utilizada para detectar polimorfismo
(PLFR) es una tcnica que evala diferencias en las secuen del complejo principal de histocompatibilidad clases I y
cias de DNA genmico .46 Esta tcnica puede ayudar a esta II .53 La exactitud incrementada de diferencias de deteccin
blecer la identidad o no identidad en el examen forense o en los genes, en vez del producto gnico, se ha empleado
de paternidad, o para identificar un gen relacionado con para mejorar la compatibilidad de trasplante.
una enfermedad. El DNA genmico se extrae de una mues Los sistemas moleculares son conjuntos ordenados de
tra (como leucocitos sanguneos perifricos) y se purifica molculas de sonda de DNA nicas unidas a un sopor
y cuantifica. Se aade una endonucleasa de restriccin, te slido .34 Los sistemas consisten en cientos y cientos de
que rompe las secuencias de DNA en un sitio especfico. sondas de DNA en lugares determinados con precisin en
Si hay una mutacin o cambio en el fragmento de DNA, el sustrato fijo. Los sistemas moleculares se desarrollaron
esto podra causar que la longitud del fragmento de a partir del trabajo de Southern en la dcada de 1970 que
DNA difiera de la usual. La transferencia Southern se pue demostr que las sondas de DNA marcadas se podan usar
de usar para identificar las longitudes diferentes de los para interrogar a las molculas de DNA unidas a un soporte
fragmentos de DNA. Se podra usar una sonda especfica slido .31 Los microsistemas se emplean para dos aplicacio
marcada para identificar una aberracin especfica. La PCR nes principales, a) determinacin de secuencias de DNA
se puede usar para amplificar la secuencia de DNA blanco y deteccin de mutacin y b) determinacin de expresin
antes del anlisis de PLFR. gnica. En la actualidad, Affymetrix, Inc. ha desarrollado
GeneChips, microsistemas patentados de alta densidad
Aplicaciones de la sonda de cido nucleico que contienen 1 0 0 0 0 a 4 0 0 0 0 0 sondas de DNA cortas,
diferentes, en una oblea de vidrio de 1.2 por 1.2 cm. Los
Las sondas de cido nucleico se emplean para detectar GeneChips estn disponibles para genotipia de HIV-1 ,55
microorganismos infecciosos; detectar configuraciones anlisis de mutacin de gen supresor tumoral p53 humano,
de genes, translocaciones cromosmicas o rotura cro- y anlisis de mutacin de gen p450 citocromo humano, con
mosmica; detectar cambios en los oncogenes y factores otros GeneChips actualmente en desarrollo.
supresores de tumores; ayudar en el diagnstico prenatal
de una enfermedad heredada o estado portador; identifi
RESUM EN
car marcadores polimrficos empleados para establecer la
identidad o no identidad, y para ayudar en la seleccin de En este captulo se introdujeron las bases de los inm u
donadores. Las sondas de cido nucleico son tiles para noensayos y las tcnicas de sonda de cido nucleico. En
identificar microorganismos en una muestra de paciente todos los inmunoensayos se emplean anticuerpos para
o confirmar un microorganismo aislado en cultivo. En detectar analitos blanco. Los inmunoensayos no marca
la actualidad se dispone de sondas para confirmar espe dos en gel incluyen mtodos para caracterizar protenas
cies de M ycobacterium , de Legionella, Salm onella, cepas monoclonales e identificar anticuerpos especficos para
de E scherichia coli diarregenas, S higella y especies de componentes nucleares. Los inmunoensayos no marca
Cam pylobacter. Tambin hay sondas para identificar hon dos en la fase soluble se tipifican mediante nefelometra
gos como B lastom yces derm atitidis, C occidioides immitis, y turbidimetra. Los inmunoensayos marcados han incre
Cryptococcus neoform ans e H istoplasm a capsulatum. La mentado la sensibilidad analtica. La diversidad de diseos
identificacin directa de microorganismos en muestras de de ensayo, la especificidad mejorada y confiable de anti
pacientes incluye C hlam ydia trachom atis, N eisseria gono- cuerpos monoclonales y la automatizacin han hecho a
rrhea, citomegalovirus, virus de Epstein-Barr y virus de los inmunoensayos cada vez ms populares en el laborato
herpes simple. Adems, el examen de carga viral para HIV rio clnico. Los inmunoensayos se describen en trminos
y el virus de la hepatitis C se detectan por medio de tec del marcador utilizado, el mtodo para detectar el marca
nologa de sonda. dor, el requisito para realizar la separacin (homognea o
Los estudios de reconfiguracin gnica mediante trans heterognea), el enlace competitivo o no competitivo, y la
ferencia Southern son tiles para distinguir entre linaje de medicin cualitativa o cuantitativa. Las tcnicas especiali
linfocitos T y B .47 Asimismo, se ha detectado y monito- zadas en las que se emplean anticuerpos incluyen inmuno-
CAPTULO 6 INMUNOENSAYOS Y TCNICAS CON SONDA DE CIDO NUCLEICO 165
P R E G U N T A S DE R E P A S O
1. La resistencia del enlace entre un antgeno y un anti c) La molcula detectora es anti-TT radio-
cuerpo se relaciona con: marcado.
a) Concentracin de antgeno y anticuerpo. d) Cuando se incrementa la concentracin
b) Fuente de produccin de anticuerpo porque los de analito en la muestra de prueba, dis
anticuerpos monoclonales enlazan mejor. minuye la concentracin de la molcula
c) Bondad del ajuste entre el epitopo y el F(ab). marcada enlazada.
d) Especificidad del anticuerpo.
7. Cul inmunoensayo no homogneo depende de inhi
2. En la produccin de anticuerpo monoclonal, la espe bir la actividad del marcador enzimtico cuando se
cificidad del anticuerpo se determina mediante: enlaza a reactivo de anticuerpo para eliminar reactivo
a) La lnea celular de mieloma. de separacin marcado libre del reactivo marcado enla
b) Los linfocitos B sensibilizados. zado?
c) Los linfocitos T sensibilizados. a) EMIT.
d) El medio de crecimiento selectivo. b) CEDIA.
c) MEIA.
3. Cul mtodo de precipitacin inmune no marcado se
d) ELISA.
usa para cuantificar protena srica?
a) Difusin doble. 8. Numere los pasos en una Western blot en el orden de
b ) Inmunodifusin radial. ejecucin. El paso 1 es el primer paso en el ensayo.
c) Contrainmunoelectroforesis. _______ a) Se aslan y desnaturalizan los antgenos
d) Electroforesis de inmunofijacin. de protena.
b ) El suero de prueba se incuba con las pro
4. En la electroforesis de inmunofijacin, las bandas dis
_
tenas.
cretas aparecen en el mismo lugar electrofortico; una
_______ c) Las protenas se transfieren a una mem
que reacciona con reactivo de IgA antihumana (espe
brana de nitrocelulosa.
cfica de cadena a ) y la otra que reacciona con reacti
d) Las protenas se separan mediante SDS-
vo de 7. antihumana. Esto se describe mejor como:
PAGE.
a) Una protena m onoclonal IgA X.
e) Se evala el reactivo de antisuero marca
b) Una protena pobclonal IgA /..
do que reaccion.
c) Protenas biclonales de IgA.
d) Reactividad cruzada. 9. En la citme tra de flujo, el portador lateral reacciona
con:
5. En la nefelometra, la formacin del complejo antge-
a) El contenido de DNA de la clula.
no-anticuerpo se incrementa en presencia de:
b) La granularidad de la clula.
a) Disolucin salina de fuerza inica alta.
c) El tamao de la clula.
b) Disolucin salina normal.
d) El nmero de clulas en G 0 y Gr
c) Polietilenglicol.
d) Complemento. 10. Los reactivos que se requieren para una reaccin de
PCR son:
6. En un RIA heterogneo, competitivo, clsico, para
a ) Polimerasa de DNA termoestable.
medir T4, cules enunciados son ciertos y cules son
b ) Desoxirribonucletidos individuales.
falsos?
c) Cebadores de oligonucletido.
a) El ensayo requiere un paso de separa
d) Polimerasa Taq.
cin.
e) Todo lo anterior.
_______ b) El trazador es T 4 con un radiomarcador.
166 PARTE I PRINCIPIOS BSICOS Y PRCTICA DE LA QUMICA CLNICA
11. La tcnica de cido nucleico en la que el RNA se con 12-14. Compare el mtodo con la descripcin apropia
vierte a cDNA, que despus se amplifica, se conoce da.
como: 12. Southern blot
a) PCR. 13. Northern blot
b) RT-PCR. 14. Western blot
c) PLFR. a) El DNA de doble hebra es el blanco.
d) Hibridacin in situ. b ) El RNA mensajero es el blanco.
c) Las protenas son el blanco.
38. Tyagi S, and Kramer E Molecular Beacons: probes that fluoresce 49. Gasparini P, Novelli G, Savoia A, et al. First-trimester prenatal diag
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CAPTULO
Pruebas en el lugar
de la atencin
Elizabeth E. Porter 7
C O N T E N I D O DE L C A P T U L O
O B J E T I V O S
Al completar este captulo, el laboratorista clnico Enunciar los principios bsicos en que se sustentan
podr: estas aplicaciones comunes de PLDA.
Definir la prueba en el lugar de la atencin Glucosa en el LDA
(PLDA). Determinacin de componentes qumicos y
Explicar qu estructura bsica se requiere para gases sanguneos en el LDA
manejar un programa de PLDA Coagulacin en el LDA
Explicar los aspectos generales de poner en Hematologa en el LDA
prctica una prueba en el lugar de la atencin. Conectividad en el LDA
T R M I N O S C L A V E
168
CAPTULO 7 PRUEBAS EN EL LUGAR DE LA ATENCIN 169
El C ollege o f American Pathologists (CAP) ha definido a la La supervisin y aplicacin de CLIA 88 ocurre va la Food
pru eba en el lugar de la atencin (PLDA) como las activi and Drug Administration (FDA) y centros para servicios de
dades analticas de examen del paciente proporcionadas Medicare y Medicaid (CMS), antes HCFA. CLIA 88 incluye
dentro de la institucin, pero llevadas a cabo fuera de las regulaciones de control de calidad y estndares de personal
instalaciones fsicas de los laboratorios clnicos .1 y divide las pruebas en categoras de complejidad bsicas.
El personal de enfermera, perfusin o terapia respirato Las pruebas exentas constan de ensayos simples. La lista
ria o mdicos residentes o tratantes pueden llevar a cabo la de pruebas exentas original slo contena metodologas para
PLDA. Estos miembros del personal de atencin de la salud nueve analitos; ahora, se incluyen muchos otros analitos. En
por lo comn no son capacitados de manera especfica en el cuadro 7-1 se listan las pruebas exentas en la actualidad.
ciencia del laboratorio clnico. Los especialistas del labora Las pruebas moderadamente complejas incluyen casi 75%
torio clnico y de laboratorio profesional estn calificados de alrededor de 12 0 0 0 mtodos de prueba. Estas pruebas
de manera nica para apoyar, asistir y proveer supervisin se realizan segn las instrucciones del fabricante sin nin
para tal prueba. De ese modo, se mejoran la calidad de guna modificacin, los reactivos se obtienen con facilidad
los resultados de la PLDA y la de la atencin del paciente. y se requieren pocos pasos de toma de decisin por parte
Los laboratorios actuales, laboratoristas e instituciones de del operador. El 25% restante son mtodos de prueba muy
atencin de la salud pueden llevar a cabo esto si: complejos. Las pruebas muy complejas pueden modificarse
en relacin con las instrucciones del fabricante o se pueden
1. Construyen una administracin y estructura para apo
desarrollar dentro de cada laboratorio, o requerir habilidad y
yar y facilitar la calidad de la PLDA.
toma de decisiones significativas por parte del operador.
2. Mantienen la base de conocimiento y habilidad para
La licencia CLIA se debe ajustar a la prueba que se lleva
poner en prctica de manera apropiada la PLDA.
a cabo (es decir, complejidad apropiada). La institucin
3. Transforman la PLDA preexistente en cumplimiento
tambin debe hacer varias elecciones respecto a la con
normativo y produccin de resultados de alta calidad
cesin de licencias CLIA. La institucin puede optar por
para el paciente.
efectuar la PLDA bajo la licencia del laboratorio clnico.
Por otro lado, se puede obtener una licencia CLIA inde
ADM INISTRACIN Y ESTRUCTURA pendiente para la PLDA.
Los componentes esenciales para establecer un programa La institucin debe decidir qu agencias de inspeccin
de PLDA se incluyen en el recuadro 7-1. y certificacin aplicar a su programa de PLDA. Algunas
agencias tienen reputacin, lo que significa que la acredita
cin que otorgan estas agencias es aceptable bajo CLIA 88 .
Licencia y regulacin CLIA stas son la Join t Commission on Accreditation o f H ealthcare
Hay un concepto errneo de que la PLDA puede estar Organizations (JCAHO), el College o f American Pathologists
exenta a veces del organismo de regulacin que se aplica al (CAP) y la Commission o f Office Laboratory Accreditation
examen llevado a cabo en el laboratorio clnico. Todas las (COLA). Todas las instituciones, y en particular las no
pruebas, sin importar la ubicacin, caen dentro del mbito acreditadas por una agencia reputada, estn sujetas a los
de las Enmiendas de 1988 de M ejoram iento del L aborato CMS o inspeccin estatal de pruebas (cuadro 7-2).
rio Clnico (CLIA 88). CLIA 88 es un organismo de regu
lacin federal de Estados Unidos. Histricamente, CLIA R equisitos p a ra p ru e b a d e m icroscopa realiza da
88 se puso en prctica, en parte, como una respuesta al p o r el p ro v eed o r (MRP)
escndalo percibido de la prueba de Papanicolaou (pap) La MRP es una subcategora de prueba de complejidad
de la dcada de 1980. Ciertos laboratorios clnicos y labo moderada. Estas pruebas requieren un microscopio. Por
ratorios de consultorios tuvieron operaciones de pruebas lo regular no existen materiales de control de calidad para
problemticas, como falta de documentacin y resultados estas pruebas. En general, las muestras son lbiles y no
de prueba de mala calidad que originaron ausencia de con sobreviven al transporte al laboratorio clnico. El sitio
fianza clnica. debe tener certificacin MRP (al menos). Se puede supo
ner que para mdicos u odontlogos la competencia est
dentro del alcance de su especialidad. El personal de nivel
R E C U A D R O 7-1 E L E M E N T O S D E L medio (es decir, personal que no es mdico u odontlo
go) debe tener como mnimo un certificado de secundaria,
jun to con su capacitacin y orientacin especficas para
Licencias CLIA apropiadas ejecutar la prueba.
Agencia de inspeccin o certificacin elegida
Personal de apoyo Personal de apoyo
Estandarizacin
Una estructura que define autoridad, responsabili Las siguientes posiciones son tiles para establecer y man
dad y rendicin de cuentas tener un programa PLDA de calidad.
Comunicacin y relaciones interdisciplinarias Director. Por lo general, la posicin la ocupa un
(redes) investigador con doctorado, maestra, o un doctor en
osteopata o patlogo. Las responsabilidades incluyen
170 PARTE I PRINCIPIOS BSICOS Y PRCTICA DE LA QUMICA CLNICA
decisiones sobre qu poltica seguir, administrativas, Coordinador del LDA (CLDA). El coordinador del
financieras y tcnicas. El director provee vinculacin lugar de la atencin es responsable de ejecutar y coordi
con la administracin de alto nivel para la institucin nar las pruebas del paciente en el lugar de la atencin,
de atencin de la salud. Un buen director ser experto y facilitar el cumplimiento de procedimientos y polti
en resolucin de problemas, relacionados con cuestio cas y requisitos administrativos. El CLDA lleva a cabo
nes tcnicas e interacciones de personal. la revisin en el lugar donde se aplican las pruebas al
CAPTULO 7 PRUEBAS EN EL LUGAR DE LA ATENCIN 171
CUADRO 7-2. CEN TERS FOR M E P IC A ID S E R V IC E S (CM S) O IN SPECCI N ESTATAL DE LA PRU EBA
EXENTA MODERADA ALTA
paciente, control de calidad y registros de mantenimien enlace de comunicacin entre el CLDA y el personal que
to, e informa los problemas e incumplimientos norma ejecuta las pruebas. Asimismo, facilitan las actividades
tivos al personal administrativo apropiado. El CLDA de capacitacin y aptitud cuando se emplea un proceso
facilita y garantiza documentacin de capacitacin de de capacitar al instructor. (En el proceso de capacitar
aptitud y supervisa la terminacin de programas de al instructor, el coordinador del LDA puede capacitar al
pruebas de capacidad. El CLDA coordina la resolucin contacto o instructor designado, quien despus capacita
de problemas para PLDA y provee asistencia de recursos a otro personal del LDA en el departamento.) Esto es til
tcnicos in situ al personal que brinda la atencin para en particular para cuestiones relacionadas con turnos en
resolucin de problemas relacionados con el control de horas en las que no se est de servicio y fines de semana.
calidad y desempeo del instrumento. El CLDA facilita
la comunicacin entre el personal a cargo de las pruebas Estandarizacin
en el lugar de la atencin y el personal del laboratorio
La estandarizacin es el uso congruente del mismo instru
clnico. El CLDA facilita el control de inventario ade
mento, reactivo o mtodo de prueba para cualquier analito
cuado del lugar de la atencin. El CLDA debe exhibir
en el sistema de atencin de la salud designado. La estan
excelentes habilidades de servicios al cliente, como apti
darizacin produce los siguientes beneficios:
tudes de comunicacin superiores y buenas habilidades
analticas y de resolucin de problemas. Tambin son La comparacin de los resultados en ubicaciones pro
importantes las aptitudes de administracin del tiempo, duce atencin mejorada del paciente. Esto reduce la
planificacin y organizacionales. Cualquier individuo confusin del mdico clnico acerca de la interpreta
que busque la posicin del CLDA debe poseer moti cin de resultados de prueba distintos para el mismo
vacin propia y no requerir supervisin continua de la analito, sin importar dnde se realiz la prueba.
administracin para asegurar desempeo en el trabajo. Ahorra costos. Casi todos los vendedores negocian los
El CLDA debe exhibir aptitudes tcnicas de alto nivel y precios con base en volmenes de prueba. Cuando la
tener excelentes habilidades interpersonales. estandarizacin est presente, los volmenes de prue
Contactos o instructores designados en departamentos ba sern mayores para el vendedor elegido que si se
distintos al laboratorio. Para cada unidad, piso, clnica, emplearan varios vendedores. Se pueden lograr ahorros
que ejecuta la PLDA, es importante tener como contacto de costo importantes.
una persona o instructor designado. Esta persona facilita Ahorra tiempo y trabajo. Con la estandarizacin, hay
en gran medida la eficacia del programa de PLDA y es un slo un mtodo de prueba, en vez de mltiples, para los
172 PARTE I PRINCIPIOS BSICOS Y PRCTICA DE LA QUMICA CLNICA
que se deben mantener procedimientos, listas de com informacin necesaria. Evale la peticin con la estruc
probacin de capacitacin y recertificacin, registros en tura de programa descrita antes. Podra haber diversas
papel y equivalencias. justificaciones clnicas para ejecutar la PLDA. Antes de
Conformidad administrativa de las instalaciones. Los establecer cualquier prueba, es importante considerar si
distintos mtodos presentes en una sola institucin est disponible alguna prueba en el laboratorio clnico
hacen difcil mantener los factores antes mencionados central. Algunas preguntas a considerar son:
y tambin casi imposible la conformidad administrativa
Cul es el tiempo de respuesta promedio y el costo
congruente en relacin con la comparacin del resulta
promedio para pruebas que realiza el laboratorio clni
do de prueba.
co contra las PLDA?
Si la PLDA puede reducir el tiempo de respuesta, el
Estructura de supervisin tiempo de respuesta ms corto dar como resultado
Es importante establecer una estructura para las PLDA un menor tiempo de estancia o mayor satisfaccin del
que defina la autoridad, responsabilidad y rendicin de cliente?
cuentas. Los propsitos de tal estructura son: El tiempo de respuesta ms corto producir eficiencia
operacional mejorada para el departamento?
Facilitar el desempeo exacto y a tiempo de las pruebas del Qu otra opcin, adems del desempeo de la PLDA,
paciente cuando se llevan a cabo fuera del laboratorio. existe para alcanzar los objetivos deseados?
Facilitar el cumplimiento con las agencias reguladoras
(como JCAHO, CAP, CLIA 88 ). Las instituciones deben considerar tambin otras
Facilitar un proceso de estandarizacin en las mltiples opciones, como transportar muestras al laboratorio cen
instalaciones y sitios que llevan a cabo la PLDA, que d tral mediante sistemas de tubos neumticos, usar rieles
como resultado calidad mejorada de prueba, eficiencia para transportar muestras, o restructurar el flujo de tra
y contencin de costos. bajo. Es importante determinar si la PDLA puede lograr
Coordinar y facilitar la comunicacin entre el labora una relacin costo a beneficio favorable. Por ejemplo, si
torio, enfermera y vendedores de instrumentos, sumi el volumen de prueba esperado es pequeo, podra no ser
nistros, reactivos o materiales de control de calidad efectivo en cuanto a costos capacitar personal, mantener y
utilizados en el lugar de la atencin. documentar la competencia, comprar reactivos de control
Facilitar la educacin del personal de PDLA mediante de calidad, as como supervisar la prueba.
la provisin de materiales para capacitacin o recertifi
cacin, o ambas cosas. Seleccin preliminar de dispositivos o m todos
Los componentes de tal estructura incluyen por lo Flaga una seleccin preliminar del mtodo e instrumenta
regular mtodos o comits de direccin, o ambos. Este cin para efectuar la prueba solicitada. Revisar las distin
tipo de comits puede supervisar el cumplimiento, la uti tas opciones que hay en el mercado y limitar la seleccin
lizacin, la seleccin de mtodos o instrumentos, estanda a varios mtodos o instrumentos. Los criterios para selec
rizacin, cuestiones de procedimiento y decisiones acerca cin podran incluir la facilidad de uso, costo, men de
de la expansin o limitacin de las pruebas. Estos comits prueba, comparacin con la instrumentacin de laborato
funcionan m ejor cuando son multidisciplinarios o son de rio clnico, compra de contratos de grupo y caractersticas
varios hospitales donde es aplicable (es decir, sistemas de de software. El manejo de datos y la conectividad (vase
hospitales). Su estructura y funcin se deben documentar Conectividad del LDA en este captulo) son criterios impor
mediante pliza escrita. tantes a considerar, con un nfasis en la capacidad para
interconectar los datos producidos mediante el dispositivo
COMUNICACIN LDA.
Reactivos, sum inistros y equipo. Enumere todos los con detalles suficientes que el instructor no pertenecien
reactivos requeridos, suministros y equipo. Incluya te al laboratorio recordar para explicar con claridad las
requisitos de almacenaje y estabilidad, incluso requi cuestiones de capacitacin. La lista de comprobacin de
sitos de fechado y marcado, y cualquier advertencia de capacitacin debe documentar toda la capacitacin del
seguridad aplicable. operador. Es ms eficaz usar un sistema de dos copias: una
M antenimiento. Provea las instrucciones para mante para el archivo de educacin continua del empleado y otra
ner el instrumento, incluida la frecuencia requerida. para la oficina de PLDA.
Potencia. Describa la fuente de energa para el instru En la lista de comprobacin se deben incluir los siguien
mento (CA contra batera, o ambas). Si se emplean tes asuntos:
bateras, identifquelas. Si son aplicables bateras recar Procedimiento de lectura.
gables, explique cmo recargarlas. Mantenimiento.
Calibracin y comprobacin de la calibracin. Identifi Reactivos.
que los materiales requeridos y la frecuencia requerida. Control de calidad.
C ontrol de calidad (CC). Identifique los materiales Requisitos de muestra.
de CC, frecuencia, el proceso para llevar a cabo el CC, Observacin directa (efectuar una prueba simulada
cmo determinar el xito o fracaso del CC y el proce del paciente).
dimiento para solucionar la falla del CC. (Asegrese de Informe de resultados: software o documentacin en
incluir CC del lquido e instrucciones de CC electrni papel, o ambos, alcances de referencia y crtico.
cas cuando sea apropiado.) Seguridad.
Procedimiento para examen del paciente. Escriba las Informacin del operador (nombre, nmero de
instrucciones detalladas por pasos. No omita los pasos identificacin del operador, piso).
simples con base en la suposicin. Firma del instructor.
Alcances de referencia y teraputico, lm ites tcnicos, Puede complementar con cuestionario.
valores crticos. Se deben incluir estos valores (de pre
ferencia en formato de cuadro). Lista d e com probacin d e recertificacin
Inform e de resultados. Describa en detalle cmo la CLIA y otras agencias de certificacin tambin requieren
institucin a la que pertenece registrar y dar a cono documentacin de aptitud de continuidad para personal
cer los resultados del paciente. que lleva a cabo pruebas o recertificacin. La lista de com
Transferencia de datos, docum entacin electrnica, probacin de recertificacin puede ser ms corta que la
configuraciones. Es til documentar estos asuntos lista de comprobacin de capacitacin. Se debe adaptar o
(especficos para su institucin) en el procedimiento. modificar segn los problemas observados cuando se reali
Esto servir como una herramienta de referencia til y za la prueba. Espere hasta que la prueba se est realizando
tambin facilitar la estandarizacin, en particular en durante un tiempo para poder observar estos problemas.
sistemas multihospitales.
Lim itaciones, notas. Incluya sustancias interferentes y C r e a r fo rm a s o registros en papel
limitaciones de prueba. Es posible listar precauciones A menos que el instrumento o prueba tenga documentacin
especiales. Se debe incluir informacin relacionada con o conectividad electrnica completa, las formas de papel
posibles fuentes de error, situaciones clnicas que afec sern necesarias para cumplimiento y monitoreo. Podran
tan los resultados y aplicaciones clnicas. ser necesarias algunas, o todas las formas siguientes:
Examen de aptitud. Documente los requisitos de exa Registro de control de calidad.
men de aptitud y el proceso. Registro de pruebas del paciente.
Recepcin de reactivos y lote de control: identifique el Registro de problemas o accin correctiva.
proceso a seguir para la recepcin de reactivos y controles. Forma de mejoramiento de la calidad.
M ejoram iento de la calidad (M C). Describa el proceso
La mayor parte de estas formas, si no es que todas, pue
de MC de su institucin para la prueba o mtodo.
den ser eliminadas con una buena conectividad.
Solucin de problemas: explique cmo dar solucin a re
sultados inesperados, errores y problemas de instrumentos.
EXAM EN DE APTITUD
Mtodo alternativo. Exprese el proceso a seguir si el
instrumento o prueba no estn disponibles. Para PLDA, El examen de aptitud es una parte de la buena prctica
esto tiene que ver por lo comn con tomar prestado o de laboratorio que comprueba la capacidad para produ
reemplazar el instrumento o enviar la muestra al labo cir resultados confiables de prueba del paciente. Muchas
ratorio clnico para anlisis. agencias reguladoras y de certificacin tambin la requie
Referencias. Incluya la informacin escrita del produc ren. Para satisfacer estos objetivos, los pasos siguientes
to que proporciona el fabricante, referencias de libros facilitan la organizacin y documentacin:
utilizados, publicaciones de estndares y cualquier Asegrese de tener una estructura.
referencia aplicable de artculos cientficos.
Ordene la prueba apropiada.
L is t a d e c o m p r o b a c i n d e c a p a c it a c i n Documente el recibo de envos de PA.
Empiece con su plantilla de lista de comprobacin. La Programe la distribucin.
lista de comprobacin de capacitacin debe ser clara y Distribuya al departamento de PLDA.
CAPITULO 7 PRUEBAS EN EL LUGAR DE LA ATENCIN 175
D a conocer los resultados al proveedor de PA. que ver, por lo general, con documentacin en registros
Mantenga la documentacin. en papel, aunque estn en desarrollo algunos sistemas
electrnicos para registrar pruebas manuales. El registro
C om unicacin manual en grficas de pacientes introduce la posibilidad de
Antes de poner en prctica una nueva prueba o mtodo, es errores de transcripcin. Los resultados se deben registrar
importante notificar a todas las partes afectadas y usuarios de modo que se cumpla con las regulaciones aplicables,
de la ejecucin, como mdicos, departamentos de enfer como fecha y hora de la prueba, persona que la realiz,
mera, administradores y laboratoristas clnicos. La noti unidades de medicin y mbitos de referencia. Todo esto
ficacin debe incluir una descripcin corta de la prueba o requiere capacitacin y cooperacin de los que llevan a
mtodo y los usos esperados. cabo las pruebas. En la actualidad, mucho del anlisis ins
trumentado tiene la capacidad de transferencia electrnica
M antenim iento
a un administrador de datos y, posiblemente, una interfaz
Ciertos procesos administrativos deben ser monitoreados
para el sistema de informacin del laboratorio (SIL). Una
para asegurar el cumplimiento normativo y buenas prcti
explicacin detallada se da en la seccin de Conectividad
cas de laboratorio, incluso:
en el LDA de este captulo.
Aadir nmeros de serie a su lista de instrumentos.
Contribuir a su programa para comparaciones y com APLICACIONES EN EL LUGAR DE LA ATENCIN
probaciones de calibracin.
Agregar suministros y reactivos requeridos a su lista de Determ inacin de glucosa en el LDA
informacin de pedido. La determinacin de glucosa en el LDA es la prueba de
Aadir la prueba a su registro de cuenta de volumen de volumen ms alto en la mayor parte de las instituciones de
prueba. atencin de la salud. Se emplea con frecuenci para moni-
Agregar la prueba al programa de examen de aptitud. torear el nivel de glucosa en pacientes con diabetes, pero
se puede usar para otros propsitos. La mayor parte de los
M ejoram iento del desem peo medidores de glucosa institucionales actuales utilizados en
Al igual que con todas las pruebas de laboratorio, debe existir el LDA incluyen la capacidad para documentar la prueba de
un proceso de mejoramiento del desempeo (MD) para asegu forma electrnica. Tambin hay disponibles muchos medi
rar la calidad. Entre las cuestiones que se deben monitorear dores de glucosa de uso domstico; la glucosa es la prueba
est el control de calidad (CC). Se realiz el CC? Estuvo LDA que se emplea con ms frecuencia en el hogar.
dentro del alcance aceptable? Es necesario hacer un monito Una pequea gota de sangre, la mayor parte de las veces
reo regular de la media y la desviacin estndar. Los asuntos obtenida por puncin capilar, se aplica a una tira de prue
de CC son importantes porque el CC evala el instrumento, ba. Ocurre una reaccin entre la sangre y los reactivos en
reactivos, operador (persona que lleva a cabo la prueba) y el la tira de prueba. El medidor mide la reaccin y la con
proceso de prueba. El mismo personal que analiza las mues vierte en un resultado cuantitativo. La reaccin real vara
tras del paciente debe ejecutar el CC. Se debe notar que el entre fabricantes.
CC para la PLDA tiene la misma importancia que la prueba
de laboratorio clnico. La teora bsica de CC establece que Constituyentes qum icos y gases sanguneos
cuando una prueba est funcionando de manera apropiada y determ inados en el LDA
con el tiempo se ejecutan muestras de concentracin conoci
Varios fabricantes ofrecen instrumentacin diseada para
da, hay una distribucin gaussiana de valores.2No es funcin
medir constituyentes qumicos (la mayor parte de las veces
de este captulo describir con detalle el proceso de CC (para
electrlitos) o gases sanguneos, o ambos, en el LDA. Casi
ms informacin consulte el captulo 3, control de calidad y
todos operan sobre el principio de medir cambios potencio-
estadstica).
Se debe observar tambin el desempeo de monitores mtricos, amperomtricos o conductimtricos va sensores
(electrodos). Esto ha sido realizado mediante sensores no
no relacionados con el CC. Se debe vigilar la aptitud de
las personas que ejecutan la PLDA (es decir, operadores desechables y desechables. Los instrumentos con senso
res desechables pueden ser configurados para anlisis de
vlidos). Es necesario documentar el uso de identificacin
correcta del paciente al ejecutar la PLDA. Mantenga un varias muestras antes de desecharlos del paquete de reac
registro para asegurar que el mantenimiento del equipo se tivo multimuestra, que incluye los sensores as como los
reactivos requeridos. Por otro lado, algunos instrumentos
lleva a cabo de manera apropiada.
LDA emplean un cartucho desechable de una sola muestra
El proceso de mejoramiento del desempeo debe
incluir comunicacin con la unidad o el administrador del que contiene todos los componentes del sistema (reactivos,
LDA, un proceso de accin correctiva y seguimiento claro. sensores y recipiente de desechos). En estos dispositivos, el
Este proceso posibilitar la confianza del operador en los instrumento recibe la transmisin de los sensores como una
resultados de prueba producidos y la confianza del mdico seal elctrica y la convierte en un resultado.
en los resultados de prueba del paciente.
Coagulacin en el LDA
In fo rm e d e resultados La prueba de coagulacin en el LDA es el tiempo de coa
Los resultados de prueba del paciente y de control de cali gulacin activado (TCA). El TCA, que Elattersley describi
dad deben ser documentados. La prueba manual tiene primero en 1996,3 se emplea para monitorear la terapia de
176 PARTE I PRINCIPIOS BSICOS Y PRCTICA DE LA QUfMICA CLNICA
heparina. Aunque la terapia de heparina es esencial para datos de la conectividad. El siguiente paso en el proceso
mantener la hemostasis durante muchos procedimientos de conectividad es la transmisin de los resultados de la
mdicos, los pacientes pueden variar mucho en su respues prueba desde el administrador de datos al sistema de infor
ta a la heparina. La sobredosis de heparina puede dar como macin del laboratorio (SIL). sta es la porcin de interfaz
resultado hemorragia, y una dosis baja de heparina origina de la conectividad. Existen estndares para la conecti
la formacin de un cogulo de sangre. Esto se puede evitar vidad de la PLDA, conocidos cono estndares POCT1-A
si se monitorea la terapia de heparina con un TCA. (point-of-care testing 1-A). Los estndares POCT 1-A se apli
La coagulacin in vivo ocurre como resultado de una can a instrumentacin (dispositivos), as como a estaciones
interaccin compleja de componentes vasculares, celula de trabajo de manejo de datos e interfaces .6,7
res y no celulares (cascada de coagulacin). El TCA pro Muchos sistemas de conectividad son especficos del
vee una m edicin no especifica in vitro de los componentes vendedor o del instrumento. Sin embargo, los sistemas
celulares y no celulares del proceso de coagulacin. ms complejos recientes manejan los resultados de varios
Los primeros tiempos de coagulacin en el LDA se lle vendedores va un sistema integrado simple. Esta clase de
varon a cabo mediante la extraccin de sangre completa sistema permite al coordinador del lugar de la atencin
nueva, luego se mezclaba por perodos de forma manual, o supervisar la prueba, el CC, los instrumentos y operadores
se inverta el tubo y se observaba la formacin del cogulo. para varios tipos de equipos de una sola estacin de traba
En fechas recientes, la gran variabilidad de este proceso se jo . Algunas ventajas del sistema son:
ha reducido mediante: a) la adicin de un activador (celita,
La documentacin electrnica de los resultados del
slice, caoln o partculas de vidrio), b) mantenimiento de
paciente reduce los errores en la transcripcin y asegu
una temperatura estable (37C) durante el proceso de coa
ra que los resultados de prueba del paciente se docu
gulacin y medicin y c) un sistema de agitacin mecnica o
menten de manera correcta en el registro mdico.
deteccin de cogulo. Los instrumentos de coagulacin en el
La documentacin electrnica permite un sistema prc
LDA ms recientes con tcnicas de micromuestreo reducen
tico para la facturacin por PLDA.
la variabilidad al automatizar ms el proceso, y se requiere
Las configuraciones de instrumentos estandarizadas se
menos tcnica del operador para realizar la prueba. Los ins
pueden mantener en el sistema.
trumentos de coagulacin ms nuevos utilizados en el LDA
Se mejora el cumplimiento normativo.
efectan pruebas adicionales, como PT-INR y aPTT.
Se elimina el registro en papel o se reduce en gran medida.
Monitorear casi todas las pruebas de modo eficaz en
H em atologa en el LDA relacin con el tiempo da como resultado calidad m ejo
En el momento actual, slo ha estado disponible la PLDA rada.
de hematologa mnima. En aos anteriores, el hematcrito Todos los resultados de prueba se pueden ejecutar por
centrifugado era la prueba de hematologa ms comn reali una sola interfaz.
zada en el lugar de la atencin. En fechas recientes, muchas Los operadores para muchos dispositivos distintos de
instituciones estn eliminando el hematcrito centrifugado muchos lugares diferentes, junto con su documenta
debido a las cuestiones de seguridad y porque la variabili cin apropiada, se pueden manejar de una manera inte
dad en la tcnica del operador puede producir variacin grada.
insignificante en los resultados de prueba. Muchas insti
tuciones emplean en la actualidad un sistema que consiste RESUM EN
en cubetas desechables y un analizador. La cavidad de la
Las pruebas en el lugar de la atencin son las actividades
cubeta contiene reactivos depositados en sus paredes inter
analticas de examen del paciente provistas dentro de la
nas que hemolizan a los glbulos rojos cuando se extrae
la muestra de sangre en la cavidad por accin capilar. La institucin, pero llevadas a cabo fuera de las instalaciones
hemoglobina liberada se convierte en hemoglobina de azi- fsicas de los laboratorios clnicos. El servicio de calidad
para el paciente, as como el cumplimiento normativo, se
da. La cubeta se coloca en el analizador, donde se mide la
absorbancia y se calcula el nivel de hemoglobina .4 facilita por la existencia de un programa estructurado de
PLDA dentro de la institucin. Los laboratoristas pueden
proporcionar ayuda y apoyo al personal que realiza las
Conectividad en el LDA
pruebas. Cuando se pone en prctica la PLDA, se deben
La conectividad ha sido el avance reciente ms significa contemplar varias etapas preparatorias. El resultado final
tivo en la PLDA. Por tradicin, los resultados de la PLDA de la atencin cuidadosa con estos detalles ser un progra
han sido escritos de forma manual en el registro mdico del ma de PLDA de calidad que, a su vez, produce resultados
paciente o, en ocasiones, registrados va una impresin de calidad en el examen del paciente.
de instrumento que ha sido colocada en el registro mdico. La PLDA es un rea en rpido crecimiento de la medi
La conectividad es la capacidad para documentar la prueba cina de laboratorio. Como se describi en este captulo, la
de forma electrnica. En general, el instrum ento tiene PLDA proporciona diversas oportunidades para los labo
la capacidad de almacenar cierta cantidad de datos. ste es el ratoristas y otros profesionales de la salud para trabajar
segmento de dispositivo de la conectividad. Mltiples instru de manera coordinada y proveer resultados confiables,
mentos suben los datos va la red de computadoras hasta una congruentes, de alta calidad siempre que se lleve a cabo
estacin de trabajo central. sta es la porcin de m anejo de la prueba.
CAPTULO 7 PRUEBAS EN EL LUGAR DE LA ATENCIN 177
P R E G U N T A S DE R E P A S O
178
CAPTULO
Aminocidos y
protenas
Barbara J. Lindsey 8 ...
C O N T E N I D O D E L C A P T U L O
O B J E T I V O S
Al terminar este captulo, el laboratorista clnico Explicar por lo menos cinco causas generales de
podr: concentraciones anormales de protena srica.
Describir las estructuras y propiedades generales Listar los intervalos de referencia para protena
de aminocidos y protenas, incluso protenas con total y albmina y analizar algunos factores no
jugadas y simples. patolgicos que afectan las concentraciones.
Describir la sntesis de protenas y el catabolismo. Describir y comparar metodologas empleadas en
Explicar las caractersticas generales de las ami el anlisis de protena total, albmina y fracciona
noacidopatas, incluso el defecto metablico en miento de protena. Incluir las caractersticas estruc
cada una y el procedimiento empleado para la turales o propiedades qumicas que son pertinentes
deteccin. a cada medicin y el uso clnico de cada una.
Explicar de manera breve la funcin e importancia Reconocer y nombrar las fracciones, e interpretar
clnica de las siguientes protenas: cualquier anormalidad en el patrn, y relacionar
prealbmina estos patrones con etapas de enfermedad comn
albmina dada una exploracin densitomtrica de una elec
oq-antitripsina troforesis de protena srica con el mtodo de
cq-fetoprotena rutina (cinco zonas).
haptoglobina Diferenciar los tipos de proteinuria con base en la
ceruloplasmina causa y tipo de protena encontrada en la orina, y
transferrina describir el principio de los mtodos usados para
fibringeno determinacin cualitativa y cuantitativa e identifi
protena C reactiva cacin de protenas en la orina.
inmunoglobulina Describir las enfermedades relacionadas con alte
troponina raciones en protenas de lquido cefalorraqudeo.
179
180 PARTE II CORRELACIONES CLNICAS Y PROCEDIMIENTOS ANALTICOS
___________________________ T R M I N O S C L A V E
En 1839, el qumico alemn G.J. Mulder estaba investi nocidos esenciales desde el punto de vista nutricional
gando las propiedades de una sustancia encontrada en la deben ser aportados en la dieta en la forma de protenas.
leche y claras de huevo que se coagulaba con el calor. El En circunstancias normales, las enzimas proteollticas,
cientfico sueco J.J. Berzelius sugiri a Mulder que estas como pepsina y tripsina, digieren por completo protenas
sustancias se llamaran protenas (de la palabra griega de la dieta en sus aminocidos constituyentes. Entonces
proteis, que significa primer rango de importancia) por los aminocidos se absorben rpido desde el intestino
que sospechaba que podran ser las ms importantes de hacia la sangre portal y despus se vuelven parte del grupo
todas las sustancias biolgicas. Mulder pens que todas corporal de aminocidos. Otros contribuyentes al grupo
las sustancias protenicas eran lo mismo porque contenan de aminocidos son los recin sintetizados y los que se
carbono, nitrgeno y azufre. Se encontr que esto no era liberan por la descomposicin normal de protenas cor
cierto cuando C. Dumas descubri que el contenido de porales.
nitrgeno variaba un poco en protena obtenida de fuentes El grupo de aminocidos se utiliza sobre todo para la
distintas .1 sntesis de protenas corporales, como protenas plasm
En la actualidad se sabe que las protenas son macro ticas, intracelulares y estructurales. Los aminocidos se
molculas compuestas de polmeros de aminocidos con emplean tambin para la sntesis de compuestos no pro-
enlace covalente, y que participan en todo proceso celular. tenicos que contienen nitrgeno, como purinas, pirimi-
En este captulo se analizan las propiedades generales de dinas, porfirinas, creatina, histamina, tiroxina, adrenalina
los aminocidos y protenas, las anormalidades relaciona y la coenzima NAD. Adems, la protena provee 12 a 20%
das con cada uno y mtodos de anlisis. del requisito de energa corporal diaria total. El grupo
amino se elimina de los aminocidos por desaminacin o
AM INO CIDO S transaminacin. El cetocido resultante puede entrar en
una va metablica comn con carbohidratos y grasas. Los
Estructura bsica aminocidos que generan precursores de la glucosa, por
ejemplo, piruvato o un intermediario del ciclo del cido
Los am inocidos a son biomolculas pequeas que con
ntrico, se conocen como glucognicos. Ejemplos son ala-
tienen por lo menos un grupo amino (-NH2) y un grupo
nina, que se puede desaminar a piruvato; arginina, que
carboxilo (-COOH) enlazados al carbono a . Difieren entre
se convierte a cetoglutarato, y aspartato, que se convier
s por la composicin qumica de sus grupos R (cadenas
te a oxaloacetato. Los aminocidos que son degradados a
laterales). La estructura general de un aminocido a se
acetil-CoA o acetoacetil-CoA, como la leucina o la lisina,
ilustra en la figura 8-1. Veinte aminocidos diferentes se
se denominan cetognicos porque originan cuerpos cet-
emplean como bloques de construccin para la prote
nicos. Algunos aminocidos pueden ser cetognicos o
na. Los grupos R encontrados en estos aminocidos a se
glucognicos porque algunos de sus tomos de carbono
muestran en el cuadro 8- 1.
surgen en precursores cetnicos y otros aparecen en posi
bles precursores de glucosa. En la figura 8-2 se muestran
M etabolism o los puntos de entrada de los tomos de carbono de ami
nocidos en las vas metablicas de carbohidratos y grasas.
Cerca de la mitad de los 20 aminocidos que requiere el
El ion amonio que se produce durante la desaminacin de
humano no se pueden sintetizar a una tasa suficientemen
te rpida para mantener el desarrollo. Estos nueve ami- los aminocidos se convierte en urea en el ciclo de la urea
en el hgado.
A m inoacidopatas
R
Las am inoacidopatas son trastornos hereditarios raros del
I metabolismo de los aminocidos. Las anormalidades exis
Ho N C COOH
ten en la actividad de una enzima especfica en la va meta
I blica o en el sistema de transporte de la membrana para
H aminocidos. Han sido identificadas ms de 100 enferme
FIGURA 8-1. Estructura general de un aminocido a. dades que resultan de errores innatos del metabolismo.
CAPITULO 8 AMINOCIDOS Y PROTEINAS 181
Glicina (Gli) H O
Alanina (Ala) ch3
Glutamina (Gln) c h 2 c h 2 c n h 2
~ H3 OH
Valina (Val)* CHCH3 Serina (Ser) - ch2
ch 3 OH
|
Leucina (Leu)* CH2CH CH3 Treonina (Tr)* CH CH3
H3
Tirosina (Tir) c h 2^ ^ > oh
Isoleucina (lie)* CH CH CH3
Cisterna (Cis) C H SH
Lisina (Lis)* c h 2 c h 2 c h 2 c h 2 n h 2
Metionina (Met)* c h 2 c h 2 s c h 3
NH,
/T "N H I!
CH2 ( I Arginina (Arg) c h 2 c h 2 c h 2 n c n h 2
Triptfano (Trp)* H
NH
Histidina (His)*
NH
Fenilalanina (Fen)*
- " .- O Aspartato (Asp)
Glutamato (Glu)
C H COOH
C H C H COOH
Tirosina
Fenilalanlna
Aspartato
FIGURA 8-2. Conversin de las estructuras de carbono de aminocidos en piruvato, acetil-CoA o derivados del ciclo del ATA
para ms catabolismo.
182 PARTE II CORRELACIONES CLNICAS Y PROCEDIMIENTOS ANALTICOS
electrodispersin. El primer espectrmetro de masas sepa fenilpirvico (APHFP), que se oxida a cido homogens-
ra y determina las masas de las distintas molculas en la tico (AHG). El AHG se metaboliza ms en una serie de
muestra y las transmite a la cmara de colisin. Aqu la reacciones a fumarato y acetoacetato, como se muestra en
colisin de las molculas con un gas inerte bajo presin la figura 8-3. El defecto en las anormalidades de tirosina
causa fragmentacin. Los fragmentos pasan a un segun heredadas es ya sea una deficiencia de aminotransferasa
do espectrmetro de masas que los separa de acuerdo a de tirosina, que da como resultado tirosinem ia I; una defi
masa y carga. La exploracin de computadora de los dos ciencia de oxidasa de cido 4-hidroxifenilpirvico, que da
espectrmetros de masas relaciona los iones de fragmento lugar a tirosinem ia tipo 771; o, lo que es ms comn, una
con sus iones moleculares originales intactos, y permite deficiencia de hidrolasa de fumarilacetoacetato, FAA, que
la identificacin y cuantificacin simultneas de amino produce tirosinemia I. La hidrolasa de FAA divide al cido
cidos asi como de otras molculas como las acilcarnitinas fumarilacetoactico en cidos fumrico y acetoactico. La
(que identifican trastornos de cidos orgnicos y grasos).5 ausencia de estas enzimas origina concentraciones anor
Por tanto, se pueden identificar tanto el incremento de malmente altas de tirosina y, en algunos casos, incremen
fenilalanina como la disminucin en las concentraciones tos en APHFP y metionina. Las concentraciones altas de
de tirosina vistas en la PKU y se puede calcular la relacin tirosina causan dao heptico, lo que podra ser fatal en
de fenilalanina a tirosina. Usar la relacin entre metaboli- la infancia, o tiempo despus cirrosis y cncer de hgado. La
tos en vez de una concentracin individual ha incrementa incidencia de tirosinemia I es de alrededor de 1 en 100000
do la especificidad de la medicin y disminuido la tasa de nacimientos. Los criterios de diagnstico incluyen una
falsos positivos para PKU a menos de 0.01% . Adems, la concentracin alta de tirosina al usar MS/MS acoplada con
sensibilidad del mtodo detecta concentraciones menores
de fenilalanina, lo que permite diagnosticar PKU en el pri
mer da de vida. Puesto que MS/MS tiene la capacidad para
detectar ms de 25 trastornos genticos distintos con una Va alterna
sola muestra, este mtodo podra reemplazar los diversos Fenilalanina cido fenilpirvico
procedimientos que se emplean en la actualidad en pro y metabolitos
gramas de deteccin con recin nacidos. Bloqueado en
El anlisis de orina para cido fenilpirvico, aunque no Hidroxilasa la fenilcetonuria
es considerado un procedimiento de deteccin inicial, se de fenilalanina
Tirosina
puede emplear para diagnstico en casos cuestionables y
monitoreo de terapia diettica. La prueba, que se podra Bloqueado en Aminotransferasa
llevar a cabo mediante tubo o prueba de tira reactiva (Phe-
nistix, Miles Diagnostics, Elkhart, IN), conlleva la reac
la tirosinema II
T de tirosina
una prueba confirmatoria para una concentracin alta del esta enzima cataliza la descarboxilacin oxidativa de los
metabolito anormal succinilacetona .5 cetocidos a de cadena ramificada a C 0 2 y sus tiosteres
Acil-CoA correspondientes (fig. 8 -4). El resultado de este
A lcaptonuria defecto enzimtico es una acumulacin de los aminoci
Este trastorno es de inters histrico considerable en cuan dos de cadena ramificada y sus cetocidos correspondien
to a que fue uno de los errores innatos del metabolismo tes en la sangre, orina y lquido cefalorraqudeo (LCR).
originales descritos. A comienzos del siglo xx, Archibald Por lo general, los infantes con esta anormalidad here
Garrod, un pediatra, reconoci que el sndrome, que dada parecen normales al nacer, pero a los 4 a 7 das, pre
haba sido llamado alcaptonuria, mostraba un patrn de sentan letargo, vmito y signos de insuficiencia para crecer.
herencia familiar. l propuso que la alcaptonuria y ciertos Siguen los sntomas del sistema nervioso central (SNC),
trastornos se deban a defectos genticos, cada uno de los que incluyen rigidez muscular, estupor e irregularidades
cuales dio como resultado falta de actividad de una enzi respiratorias. Si no se trata, la enfermedad causa retraso
ma metablica particular.8 Cuarenta y cinco aos despus, mental grave, convulsiones, acidosis e hipoglucemia. En
se confirm que el defecto bioqumico en la alcaptonuria la forma clsica de la enfermedad, la muerte ocurre por lo
es una falta de oxidasa de homgentisato en la trayectoria regular durante el primer ao; sin embargo, se tiene cono
catablica de la tirosina (fig. 8-3). Este trastorno ocurre en cimiento de formas intermedias. En estas variantes menos
casi 1 de 2 5 0 0 0 0 nacimientos. Una manifestacin clni graves, la actividad de la descarboxilasa es casi 25% de lo
ca predominante de la alcaptonuria es el oscurecimiento normal. Aunque esto an origina una elevacin persisten
de la orina al exponerla a la atmsfera. Este fenmeno se te de los aminocidos de cadena ramificada, con frecuen
debe a la acumulacin de AHG en la orina, que se oxida cia las concentraciones se pueden controlar al limitar la
para producir un polmero oscuro. Los pacientes alcapto- ingestin de protenas de la dieta.
nricos no tienen problemas inmediatos; sin embargo, la Aunque la incidencia de la EOOJA es baja, se presen
concentracin alta de AHG se acumula poco a poco en el ta en 1 de 2 1 6 0 0 0 nacimientos, el diagnstico oportuno
tejido conectivo, lo cual causa pigmentacin generalizada es importante para comenzar el tratamiento diettico. Por
de estos tejidos (ocronosis) y una degeneracin parecida tanto, la prueba para EOOJA se incluye en muchas de las
a la artritis. detecciones metablicas requeridas por la ley en ciertos
estados. Suele emplearse una prueba de Guthrie modifica
E n ferm ed a d d e la orina con olor a ja r a b e d e a rce da para esta deteccin neonatal. El inhibidor metablico
Como indica el nombre, la caracterstica ms notable de para B. subtilis, incluido en los medios de crecimiento, es
esta enfermedad hereditaria es el olor a jarabe de arce o 4-azaleucina. En una prueba positiva para EOOJA, una
azcar quemada caracterstico de la orina, aliento y piel. concentracin elevada de leucina de un disco de papel fil
La enfer-medad de la orina con olor a ja r a b e de arce (EOO- tro impregnado con la sangre del infante superar al inhi
JA ) resulta de actividad nula, o reducida en gran medida bidor y ocurre crecimiento bacteriano. Por otro lado, un
( < 2%), de la enzima descarboxilasa de cetocido a de ensayo microfluoromtrico para aminocidos de cadena
cadena ramificada, que bloquea el metabolismo normal de ramificada, con deshidrogenasa de leucina (EC 1.4.1.9),
los aminocidos leucina, isoleucina y valina. En particular, se puede usar para la deteccin de masa. En este proce-
1
Acido a-cetoisocaproico
1
Acido a-ceto fS-metilvalrico
1
Acido a-cetoisovalrlco
t
Isovaleril-CoA
Descarboxilacin IM l Bloqueado en EOOJA
a-Metilbutiril-CoA
f
Isobutiril-CoA
Bloqueado Deshidrogenasa
en acidemia de isovaleril-CoA
isovalrica
p-metlcrotonil-CoA
1
AcetlI-CoA Acetil-CoA + Succinll-CoA
Y
Succinil-CoA
A cidem ia isovalrica
La acidemia isovalrica resulta de una deficiencia de la
enzima deshidrogenasa isovaleril-CoA en la va degrada-
tiva de la leucina (fig. 8-4). La elevacin resultante del
Bloqueado en
homocistinuria
f
Cistationina
(3-Sintasa
de cistationina
Aunque hay evidencia de disfuncin endotelial en pacientes efecto de aminocidos absorbidos que se originan de pro
con concentraciones altas de homocistena, hay desacuerdo tenas de la dieta. La muestra se colecta en heparina, y el
en cuanto a si la hiperhomocistinemia es un factor causa plasma se elimina de las clulas con prontitud, teniendo
tivo en el desarrollo de enfermedad aterosclertica o una cuidado de no aspirar la capa de plaquetas o leucocitos.
consecuencia del proceso de la enfermedad .8,9 Una expli Si este paso no se efecta con precaucin, el plasma se
cacin ms detallada de los factores de riesgo cardaco se contamina con plaquetas o aminocidos de leucocitos,
encuentra en el captulo 23, Funcin cardaca. en los que los contenidos de cido asprtico y glutmi-
co, por ejem plo, son casi 100 veces ms altos que en el
A cid u ria argininosuccnica y citrulinem ia plasma. Por la misma razn se debe evitar la hemolisis.
Estos trastornos por aminocidos resultan de deficiencias La desproteinizacin se debe llevar a cabo de inmediato
enzimticas hereditarias en el ciclo de la urea. La aciduria o se debe alm acenar la muestra a una temperatura de -20
arginosuccnica resulta de una deficiencia de liasa de cido a -4 0 C .
arginosuccnico (AAS), y una disminucin en la actividad Los anlisis de aminocidos en la orina se pueden efec
de la sintetasa de AAS causa citrulinemia. Hay tambin tuar en una muestra aleatoria para propsitos de detec
varios trastornos relacionados causados por deficiencias cin; sin embargo, para cuantificacin, se requiere orina
en las otras enzimas requeridas para sntesis de urea. Los de 24 h conservada con timol y disolventes orgnicos.
sntomas incluyen vmito y altas concentraciones de amo Tambin se puede analizar lquido amnitico.
niaco, y el retraso metal se relaciona con algunas de las Para deteccin preliminar, el mtodo de eleccin es la
condiciones. De manera general, estos trastornos no se cromatografa de capa fina. La aplicacin de separaciones
incluyeron en los programas de deteccin en recin naci de una o dos dimensiones depende del propsito del an
dos; sin embargo, la tecnologa MS/MS ha permitido la lisis. Si se est investigando una categora particular de
medicin de los metabolitos. La citrulina es el marcador de aminocidos, como los de cadena ramificada, o incluso un
diagnstico para citrulinemia y aciduria arginosuccnica. solo aminocido, suelen ser suficientes las separaciones
En la citrulinemia el aumento de la concentracin de citru- unidimensionales. Las condiciones de separacin se pue
lina es bastante alto; en la aciduria argininosuccnica, el den seleccionar de tal manera que ofrezcan buena resolu
incremento de citrulina es ms leve, y en infantes de mayor cin del aminocido en cuestin.
edad se observan incrementos de ornitina y arginina .5 Los mapas bidimensionales son esenciales para detec
cin ms general. En la cromatografa bidimensional, se
permite que los aminocidos migren a lo largo de un fren
Cistinuria
te de disolvente, y luego se hacen girar 90 al cromatogra-
Esta aminoacidopata hereditaria se debe a un defecto en el
ma y ocurre una segunda migracin de disolvente. Se han
sistema de transporte de aminocidos y no a una deficien
empleado diversos disolventes, incluso mezclas de buta-
cia enzimtica metablica. Normalmente, los aminocidos
nol-cido actico-agua y etanol-amoniaco-agua. El croma-
se filtran sin dificultad por el glomrulo y luego son reab
tograma se ve al teir con ninhidrina, que da a la mayor
sorbidos de forma activa en los tbulos renales proximales.
parte de los aminocidos un color azul.
En la cistinuria, la excrecin urinaria de cistena aumenta
Cuando ha sido indicada la posibilidad de un trastorno
20 a 30 veces como resultado de un defecto gentico en el
por aminocido en los pasos preliminares, los aminoci
mecanismo resortivo renal. El mecanismo de transporte no
dos se pueden separar y cuantificar mediante cromato
es especfico para la cistina. La excrecin de los otros ami
grafa de intercambio catinico por medio de una elucin
nocidos, lisina, arginina y ornitina, se eleva de modo sig
con disolucin amortiguadora en gradiente, un sistema
nificativo tambin como resultado de resorcin deficiente.
de fase invertida de CLAP equipado con deteccin de
De los cuatro, la cistina es el aminocido que causa
fluorescencia ,11 o electroforesis capilar. Otra tcnica que
complicaciones de la enfermedad. Debido a que la cistina
provee un mtodo muy especfico y sensible para la medi
es relativamente insoluble, cuando alcanza estas concen
cin de aminocidos es la espectrometra de masas en
traciones altas en la orina, tiende a precipitar en los tbulos
tndem.
de los riones y forma clculos urinarios. La formacin de
clculos de cistina se reduce si se ingieren muchos lqui
dos y se alcaliniza la orina, lo que hace a la cistina relativa PROTENAS
mente ms soluble. Si esto no tiene xito, se puede iniciar
el tratamiento con dosis regulares de penicilamina .10 Caractersticas generales
La cistinuria se puede diagnosticar si se hace un anli
Las protenas son una clase esencial de compuestos que
sis de cistena de la orina con cianuro-nitroprusiato, que
comprenden 50 a 70% del peso en seco de la clula. Las
produce un color rojo prpura al reaccionar con grupos
protenas se encuentran en todas las clulas del cuerpo, as
sulfhidrilo. Se deben descartar los resultados falsos positi
como en los lquidos, secreciones y excreciones.
vos debido a la homocistina.
Tam ao m olecular
A n lisis de am inocidos
Las protenas biolgicamente activas son macromolculas
Las muestras para anlisis de aminocidos se deben que varan en peso molecular de casi 6 000 para insulina a
extraer despus de por lo menos 6 a 8 h de ayuno para el varios millones para algunas protenas estructurales.
CAPTULO 8 AMINOCIDOS Y PROTENAS 187
ES T U D IO D E C A S O 8-1
Un nio de 13 meses de edad fue admitido a un peque en la admisin al centro mdico aparecen en el cuadro 8-
o hospital rural.1 Su estado de salud ha sido nor 1.1 del estudio de caso.
mal hasta hace 10 dias, tiempo en el que desarroll 1. Campbell P. Case studies. J Med Tech 1985;2:9.
una infeccin de tracto respiratorio superior. El nio
experiment problemas crecientes con su balance y se Preguntas
volvi letrgico. Estos sntomas llevaron a la madre a
buscar atencin mdica en el hospital donde los resul 1. Cul resultado de laboratorio puede ser til para des
tados pertinentes de laboratorio en la admisin mostra cartar el diagnstico de sndrome de Reye?
ron una concentracin de glucosa srica de 23 mg/dl y 2. Qu correlaciones se pueden hacer con el pH de la
cetonas moderadas en la orina y el suero. Se inici un sangre, PCO, de glucosa srica y hallazgos de cetona
tratamiento con una disolucin intravenosa de dextro- en suero y orina?
sa al 5% para corregir la concentracin baja de glucosa.
Debido a que el cuadro clnico se asemeja al sndrome 3. Qu otras pruebas de laboratorio se deben llevar a
de Reye, el nio fue transferido a un centro mdico para cabo para comprobar un defecto en el metabolismo de
un diagnstico definitivo. Los resultados de laboratorio protenas?
PH 7.17
PC02 23 mm Hg
Q-
o
90 mm Hg
fNJ
! R=
n h 2
r
c- -COOH + NH2
i'
C COOH
-H ,0
NH5 v
! II
Ks __ H
- L
i
i
j _ l _ ___ COOH
H H H I H I H
Enlace
peptdico
La conformacin (forma) de una protena se determi hacia atrs sobre s misma para formar la estructura tridi
na por la interaccin entre un polipptido y su ambiente mensional. Las convoluciones especficas que experimen
acuoso en el que el polipptido obtiene una estructura tri ta un polipptido se determinan por interaccin de los
dimensional estable. Hay cuatro aspectos de la estructura grupos R en la molcula. Las reacciones de los grupos R
de una protena que se relacionan con su conformacin. incluyen enlaces de disulfuro, atracciones electrostticas,
El nmero y clases de aminocidos, as como su secuen puentes de hidrgeno, interacciones hidrfobas y fuerzas
cia en la cadena polipeptdica, constituyen la estructura de van der Waals. A la estructura terciaria se deben muchas
primaria de una protena. El enlace peptdico covalente de las propiedades fsicas y qumicas de la protena.
es el nico tipo de unin que interviene a este nivel. La Adems de estos primeros tres niveles que pueden
estructura primaria es crucial para la funcin y caracte existir en las molculas que comprenden una sola cadena
rsticas moleculares de la protena. Cualquier cambio en peptdica, algunas protenas muestran un cuarto nivel de
la composicin del aminocido puede modificar de forma organizacin llamado estructura cuaternaria. sta es la con
significativa a la protena. Por ejemplo, cuando el cido figuracin de dos o ms cadenas polipeptdicas para for
glutmico sustituye al aminocido valina en la cadena (3 de mar una molcula de protena funcional. La albmina, que
la hemoglobina A, se forma hemoglobina S, que da como est compuesta de una sola cadena polipeptdica, no ten
resultado anemia drepanoctica. dra estructura cuaternaria. Sin embargo, la hemoglobina
La estructura secundaria es el enrollamiento de la cade comprende cuatro cadenas de globina, la deshidrogenasa
na polipeptdica. El patrn usual que se forma por las pro de lactato consta de cinco cadenas peptdicas y la cinasa de
tenas globulares (en su mayor parte protenas sricas) es creatina tiene dos cadenas unidas. Las cadenas polipept-
una hlice que requiere 3.6 aminocidos para formar una dicas estn unidas por atracciones no covalentes como los
vuelta en la espiral. Se puede ver tambin una lmina ple puentes de hidrgeno o las interacciones electrostticas.
gada (3 o un patrn irregular pero estable. La estructura Cuando se perturba la estructura secundaria, tercia
secundaria se mantiene mediante puentes de hidrgeno ria o cuaternaria de una protena, sta puede perder sus
entre los grupos NH y CO de los enlaces peptdicos, ya sea caractersticas funcionales y moleculares. Esta prdida de
dentro de la misma cadena o entre cadenas diferentes en su carcter original se llama desnaturalizacin. El calor,
la misma molcula. En la figura 8-7 se muestra el esquema hidrlisis mediante cido fuerte o lcali, accin enzimti-
de una estructura secndaria. ca, exposicin a urea u otras sustancias, o exposicin a luz
El siguiente nivel de estructura, la estructura terciaria, ultravioleta, causan desnaturalizacin.
se refiere a la forma en la cual la cadena torcida se dobla
C ontenido d e nitrgeno
Las protenas comprenden los elementos carbono, oxge
no, hidrgeno, nitrgeno y azufre. El contenido de nitr
geno es el que separa a las protenas de los carbohidratos
y lpidos puros, que no contienen tomos de nitrgeno.
Vara un poco el contenido de nitrgeno de protenas sri
cas; el promedio es de alrededor de 16%. Esta caractersti
ca se us en un mtodo de medicin de protena total.
C a rg a y punto isoelctrico
Debido a su composicin de aminocidos, las protenas
pueden llevar cargas positivas o negativas (es decir, son
R o an fotricas). Los grupos reactivos cidos o bsicos que no
intervienen en el enlace peptdico pueden existir en dife
-C CH C N CH - - rentes formas cargadas, lo cual depende del pH del medio
II I circundante. El cido asprtico y la lisina son ejemplos de
O H
aminocidos que tienen grupos carboxilo o amino libres,
FIGURA 8-7. Estructura secundaria de protenas. respectivamente (cuadro 8-1). En la figura 8-8 se mus-
CAPfTULO 8 AMINOCIDOS Y PROTENAS 189
Solubilidad
H Las protenas en disolucin acuosa se hinchan y encie
NH rran agua. Natelson y Natelson 1 han aconsejado que, por
1
CH,
esta razn, es necesario al reconstituir suero liofilizado
1 mezclar con suavidad el vial reconstituido durante por lo
CH, menos 30 min para completar el proceso de hinchamien-
1 to. Las disoluciones de protena son emulsiones coloidales
CH, o m icelas porque estn cargadas o porque cada molcula
1
CH,
de protena tiene una envolvente de agua alrededor.
H 1 *0 La solubilidad de las protenas es promovida por un
H HN - C - C - 0* carcter dielctrico alto del disolvente y alta concentra
NHN+ cin del agua libre. Asi, las concentraciones bajas de sal
1 / H
-O -
H 1 * X
cin resultante de las globulinas se llama salificacin. Al
1
1
1
V 1
X
X
o
0
0
tran estos dos aminocidos y las cargas que tendran en In m u no gen icida d
disoluciones que son alcalinas o cidas. Debido a su masa molecular, contenido de tirosina y espe
A un pH de 2.98, el cido L-asprtico no tiene carga cificidad por especies, las protenas pueden ser antgenos
neta (igual o ninguna ionizacin de los grupos amino y eficaces. Cuando se inyectan en otra especie (como cone
carboxilo); mientras que a un pH alcalino (pH, 9.4 7 ), el jo , cabra o pollo), las protenas sricas humanas provocan
cido asprtico tiene una carga negativa neta. La L-lisina la formacin de anticuerpos especficos para cada una de
no tiene carga neta a un pH de 9.47 pero, en un ambiente las protenas presentes en el suero. Cuando se hizo posible
190 PARTE II CORRELACIONES CLNICAS Y PROCEDIMIENTOS ANALTICOS
obtener estos anticuerpos para cada una de las protenas El siguiente paso en la sntesis de protenas es obtener
sricas, se introdujeron en el laboratorio clnico mtodos el aminocido para los ribosomas. Primero, el aminoci
con reacciones antgeno-anticuerpo que son muy espec do se activa en una reaccin que requiere energa y una
ficos. Algunos de los mtodos comunes se describen en enzima especfica para cada aminocido. El complejo de
el captulo 6 , Inmunoensayos y tcnicas con sonda de cido aminocido activado se une entonces a otra clase de RNA,
nucleico. RNA de transferencia, con la liberacin posterior de la
enzima activadora y monofostato de adenosina (AMP). El
Sntesis tRNA es una cadena corta de RNA que aparece libre en el
citoplasma. Cada aminocido tiene un tRNA que contiene
La mayor parte de las protenas plasmticas se sintetizan tres bases que corresponden a las tres bases en el mRNA.
en el hgado y son secretadas por el hepatocito hacia la cir El tRNA lleva su aminocido particular al ribosoma y se
culacin. Las inmunoglobulinas son excepciones que son une al mRNA de acuerdo con el codn correspondiente.
sintetizadas en clulas plasmticas. De esta manera, los aminocidos se alinean en secuencia.
Los aminocidos de una cadena polipeptdica son colo Como cada nuevo tRNA aporta el siguiente aminocido,
cados en una secuencia determinada por una secuencia el aminocido precedente se transfiere al grupo amino del
correspondiente de bases (guanina, citosina, adenina y nuevo aminocido, y las enzimas localizadas en los riboso
timina) en el DNA que constituye el gen apropiado. El mas forman un enlace peptdico. El tRNA se libera hacia el
DNA de doble hebra se desdobla en el ncleo, y una hebra citoplasma, donde puede tomar otro aminocido, y el ciclo
se usa como plantilla para la formacin de una hebra com se repite. Cuando se llega al codn terminal, se separa la
plementaria de RNA mensajero (mRNA). El mRNA, que cadena peptdica y se disocian el ribosoma y el mRNA.
ahora lleva el cdigo gentico del DNA, se mueve al cito En la figura 8-9 se ilustra la sntesis de protenas. Por lo
plasma, donde se une a los ribosomas. Una secuencia de general, las protenas intracelulares son sintetizadas en
tres bases (codn) en el mRNA se requiere para especificar ribosomas libres, mientras que las protenas que produce
el aminocido que se transcribir. El cdigo en el mRNA el hgado para secrecin se elaboran en ribosomas unidos
tambin contiene codones de inicio y terminacin para la al retculo endoplsmico rugoso. La sntesis de protenas
cadena peptdica. ocurre a la misma tasa de casi 2 a 6 enlaces peptdicos por
T rifosfatos
de nuclesido
RNA mensajero
Ncleo
Citoplasma
RNA de transferencia
X que lleva aminocido
i if t ATP
Aminocidos <5
Ribosoma
RNA de
transferencia
Pptido completo
192 PARTE II CORRELACIONES CLINICAS Y PROCEDIMIENTOS ANALTICOS
segundo. La sntesis se controla en dos pasos: seleccin de La albmina es un ejemplo de una pro tena globular. Las
genes para transcripcin a mRNA y seleccin de mRNA protenas fibrosas son ms alargadas y simtricas y tienen
para traduccin a protenas. Ciertas hormonas tienen que mayor viscosidad. El colgeno y la troponina son ejemplos
ver en el control de la sntesis de protenas. La tiroxina, de protenas fibrosas.
hormona del crecimiento, insulina y testosterona promue
ven la sntesis, mientras que el glucagon y el cortisol tie Protenas conjugadas
nen un efecto catablico. Las protenas conjugadas comprenden una protena (apo-
Las protenas que se extraen despus de la sntesis al protena) y una mitad no pro tena (grupo prostico). El
parecer tienen una secuencia corta de aminocidos, una grupo prosttico puede ser un lpido, carbohidrato, porfiri-
pieza secretoria que atrae la protena al aparato de Golgi nas, metales, etctera. Estos grupos imparten ciertas carac
para secrecin posterior por exocitosis. La pieza secretoria tersticas a las protenas. La mayor parte de los nombres
se elimina durante el proceso de secrecin. As, las prote asignados a estas protenas conjugadas son descriptivos por
nas secretadas existen por lo regular como protenas pre s mismos. Las metaloprotenas tiene un ion metlico unido
cursoras dentro de las clulas de las cuales surgen. a la protena, ya sea de manera directa, como en la ferriti-
na (que contiene hierro) y la ceruloplasmina (que contiene
Catabolism o y balance de nitrgeno cobre), o como metales complejos (metal ms otro grupo
prottico), como la hemoglobina y las flavoprotenas. El
La mayor parte de las protenas del cuerpo se sintetizan metal (hierro) en la hemoglobina se une primero a la proto-
de manera repetida y constante, y luego se degradan. Se porfirina, que luego se une a las cadenas de globina; en la
ha demostrado que en un amplio intervalo de tasas de sn flavoprotena, el metal se une primero a FMN o FAD.
tesis, el catabolismo y la sntesis de protenas son iguales. Cuando los lpidos como el colesterol y el triglicrido
Normalmente, este recambio totaliza casi 125 a 220 g de estn enlazados con protenas, las molculas se llaman
protena todos los das. Sin embargo, la tasa de recambio de lipoprotenas. Cuando los carbohidratos estn unidos a
pro tena vara mucho para cada una. Por ejemplo, las pro las protenas, se pueden usar varios trminos para descri
tenas plasmticas y la mayor parte de las protenas intrace- bir los resultados. Por lo general, las molculas con 10 a
lulares se degradan con rapidez, con vidas medias de horas 40% de carbohidrato se llaman glucoproteinas.1 Ejemplos
o das; algunas de las protenas estructurales, como el col de glucoproteinas son la haptoglobina y la oq-antitripsina.
geno, son estables desde el punto de vista metablico y tie Cuando el porcentaje de carbohidrato enlazado a la pro
nen vidas medias de aos. La desintegracin de protena tena es mayor, se acostumbra llamar a las protenas muco-
ocurre en el tubo digestivo, riones y, en particular, en el protenas o proteoglucanos cuando estn presentes tambin
hgado. Durante el catabolismo, las protenas se hidrolizan heparn-sulfato, queratn-sulfato o condroitinsulfato. Un
a sus constituyentes aminocidos. Los aminocidos son ejemplo de una mucoprotena es la mucina, un compuesto
desaminados, lo que produce amoniaco y cetoacidosis. Los que lubrica recubrimientos de rganos. Las nucleoprote-
hepatocitos convierten el amoniaco en urea que se excre nas son las protenas que se combinan con cidos nuclei
ta en la orina. Los cetocidos son oxidados por medio del cos (DNA o RNA) (p. ej., cromatina).
ciclo del cido ctrico y son convertidos a glucosa o grasa.
De ordinario, existe un balance entre el anabolismo Funcin general de las protenas
(sntesis) y el catabolismo de protenas. En trminos nutri-
cionales, esto se llama balance de nitrgeno. Cuando el cata La amplia variedad de molculas que constituyen las pro
bolismo de protenas excede al anabolismo, el nitrgeno tenas pueden funcionar de forma general o, como mol
excretado excede al ingerido. ste es un balance de nitrge culas individuales, pueden tener alguna funcin nica.
no negativo, y ocurre en condiciones en las que hay des Las protenas plasmticas y las tisulares comparten el
truccin tisular excesiva, como quemaduras, enfermedades mismo grupo de aminocidos, por tanto, las alteraciones
consuntivas, fiebres altas continuas o inanicin. Lo contra en un grupo finalmente afectan al otro. Esto es porque
rio, balance de nitrgeno positivo, se observa cuando el las protenas plasmticas son importantes en la nutricin
anabolismo es mayor que el catabolismo. Durante el creci tisular; tambin pueden ser hidrolizadas a aminocidos,
miento, embarazo y procesos de reparacin se encuentra un que se emplean para la produccin de energa por medio
balance positivo. del ciclo del cido ctrico.
Otra funcin general de las protenas plasmticas es la
Clasificacin distribucin de agua entre los compartimientos del cuer
po. La ley de Starling atribuye una fuerza osmtica de
Las protenas por lo general se clasifican en dos grupos prin coloide a las protenas plasmticas, que, debido a su tama
cipales con base en la composicin: simples y conjugadas. o, no pueden cruzar las membranas capilares. Esta fuerza
osmtica origina la absorcin de agua del tejido al extre
P rotenas sim ples mo venoso de los capilares. Cuando la concentracin de
Las protenas sim ples contienen cadenas peptdicas que en protenas plasmticas se reduce de manera significativa, la
la hidrlisis producen slo aminocidos. La forma de las disminucin concom itante en la presin osmtica (onc-
protenas simples puede ser globular o fibrosa. Las prote tica) coloidal del plasma da como resultado niveles incre
nas globulares son relativamente simtricas, con cadenas mentados de lquido intersticial y edema. Esto se ve con
polipeptdicas en espiral y plegadas en forma compacta. frecuencia en la enfermedad renal cuando la proteinuria
CAPTULO 8 AMINOCIDOS Y PROTENAS 193
origina una disminucin de la concentracin de protena C U A D R O 8-3. FUN CIO N ES D E LA S PRO TEN AS
plasmtica y ocurre hinchazn de la cara, manos y pies.
Nutricin del tejido
La naturaleza anfotrica de las protenas provee el meca
nismo para su participacin como disoluciones amortigua M antenim iento de la distribucin de agua entre clulas
doras dentro del plasma y tejido intersticial. Los grupos R y tejido, compartimientos intersticiales y el sistema
ionizables pueden enlazar o liberar iones hidrgeno en vascular del cuerpo
exceso segn sea necesario. Participacin como disoluciones amortiguadoras para
Muchas protenas plasmticas funcionan como trans m antener el pH
portadores especficos de sustancias metablicas. Como
ejemplos estn la globulina de enlace a tiroxina, que lleva Transporte de sustancias metablicas
tiroxina; haptoglobina, que enlaza hemoglobina libre, y Parte del sistema de defensas (anticuerpos)
albmina, que transporta cidos grasos libres, bilirrubina Hormonas y receptores
no conjugada, calcio, sulfamidas y muchos otros compues
tos endgenos y exgenos. Adems de transportar molcu Estructura del tejido conectivo
las al lugar donde se pueden usar, las protenas, a travs del Biocataiizadores (enzimas)
proceso de enlace, sirven para mantener la sustancia enla
Participacin en la hemostasis y coagulacin de
zada en un estado soluble, proveer un sitio de almacenaje
la sangre
para la sustancia en exceso (transcobalamina II) y evitar la
prdida de compuestos de masa molecular pequea por el
rin (es decir, transferrina para conservar hierro).
prealbmina se pueden ver en el cuadro 8-2. Rara vez se
Varias protenas son glucoprotenas. Una funcin prin
observa como una banda distinta en los patrones electrofo-
cipal de las glucoprotenas es distinguir cules clulas son
rticos rutinarios del acetato de celulosa del suero, aunque
originales y cules son extraas para el cuerpo. stas son
puede ser exhibida mediante electroforesis de alta resolu
evidentes en particular como antgenos de histocompatibiii-
cin (EAR) o inmunoelectroforesis. Es rica en triptfano y
dad y grupos sanguneos eritrocticos. Los antgenos pueden
contiene 0.5% de carbohidrato. La prealbmina combina
estimular la sntesis de anticuerpos, que tambin son prote
da con tiroxina y triyodotironina sirve como mecanismo
nas. Los anticuerpos y componentes del sistema de comple
de transporte para las hormonas tiroideas. La prealbmina
mento ayudan a proteger al cuerpo contra infeccin.
tambin se une con la protena de enlace a retinol para
Muchas protenas celulares actan como receptores
formar un complejo que transporta retinol (vitamina A).
para hormonas. El receptor se une con su hormona espe
La prealbmina disminuye en dao heptico, respuesta
cfica y permite que el mensaje hormonal sea transmitido
inflamatoria de fase aguda y necrosis tisular. Una concen
a la clula. Adems, ciertas hormonas (como la del creci
tracin baja de prealbmina tambin es un marcador sen
miento y la adrenocorticotrpica [ACTH]) son por s mis
sible de estado nutricional protenico deficiente. Cuando
mas protenas.
la ingestin de caloras y protenas en la dieta es deficiente,
Las protenas tambin desempean una funcin estructu
la sntesis heptica de protenas se reduce y se increm en
ral. El colgeno es la protena ms abundante en los mamfe
ta el catabolismo. Esto da como resultado una disminu
ros, y constituye un cuarto del peso corporal total. El colgeno
cin en la concentracin de protenas que se originan en
es el principal elemento fibroso de la piel, huesos, tendones,
el hgado, incluso prealbmina, albmina y globulinas (3
cartlago, vasos sanguneos y dientes. La elastina y los proteo-
como transferrina y complemento C3. La prealbmina,
glucanos son otras dos protenas de tejido conectivo.
debido a su corta vida de alrededor de dos das, disminuir
Otra propiedad biolgica importante de algunas pro
con ms rapidez que las otras protenas. La prealbmina
tenas (enzimas) es su capacidad para catalizar reacciones
se incrementa en pacientes que reciben esteroides, en el
bioqumicas. Otras protenas (factores de coagulacin)
alcoholismo y en la insuficiencia renal crnica.
ayudan en el mantenimiento de la hemostasis. La diversi
dad de funciones atribuidas a varias protenas se resume
A lbm in a
en el cuadro 8-3.
La albm ina es la protena presente en concentracin ms
alta en el suero (cuadro 8-2). Se sintetiza en el hgado. El
Protenas plasm ticas
primer mtodo para su determinacin requera precipitar
Aunque las protenas en los compartimientos de lqui las globulinas con sulfato de sodio, dejando la albmi
do desempean una funcin fisiolgica importante, las na en la disolucin. Despus, la albmina se determin
protenas plasmticas son las que se analizan con ms mediante el mtodo de Kjeldahl y, ms tarde, con forma
frecuencia. Se ha identificado a ms de 500 protenas plas cin de color de biuret. El mtodo ms comn en la actua
mticas. Las propiedades de algunas protenas plasmticas lidad conlleva el enlace de colorante y el cambio de color
seleccionadas se analizan en la siguiente seccin. cuando un colorante se une mediante albmina. Cuando
se necesita ms informacin acerca de las protenas, se
P rea lb m in a (transtirretina) obtiene un patrn electrofortico, y la albmina se calcula
La prealbmina recibe ese nombre porque migra delan como un porcentaje de la protena total (por lo regular,
te de la albmina en la electroforesis usual de protenas alrededor de 60% ). En el nacimiento, el valor de referencia
sricas o plasmticas. Las caractersticas moleculares de la para la albmina srica promedia 39 g/L. La concentracin
194 PARTE II CORRELACIONES CLNICAS Y PROCEDIMIENTOS ANALTICOS
cae a 28 .4 g/L a casi 9 meses, y luego comienza a aumentar Prdida en la orina en la enfermedad renal. La albmina
de manera lenta hasta que se alcanzan los valores de la es secretada normalmente en cantidades muy peque
edad adulta de 35 a 55 g/L.12 La concentracin de albmi as. Esta excrecin se incrementa cuando el glomrulo
na srica despus de 60 aos promedia 38.3 g/L.13 ya no funciona para restringir el paso de protenas des
La albmina tiene dos funciones bien conocidas. Una de la sangre.
es la contribucin que hace a la presin osmtica de coloi
Las anormalidades en la albmina srica son exhibidas
de del lquido intravascular. Como resultado de su alta
tambin por la ausencia de albmina (analbum inem ia) o la
concentracin, se le debe casi 80% de esta presin, que
presencia de albmina que tiene caractersticas molecula
m antiene el lquido apropiado en el tejido. La otra funcin
res inusuales esta anormalidad se llama bisalbum inem ia
principal es su propensin a unirse con varias sustancias
y se demuestra por la presencia de dos bandas de albmi
en la sangre. Por ejemplo, la albmina se une con la bili
na en vez de la banda nica vista mediante electroforesis.
rrubina, cido saliclico, cidos grasos, iones de calcio y
La analbuminemia es una anormalidad de origen gentico
magnesio, cortisol, y algunos frmacos. Esta caracterstica
que resulta de un rasgo recesivo autosmico. Estas condi
es exhibida tambin con varios colorantes, lo que provee
ciones son raras.
un mtodo para la cuantificacin de albmina.
El incremento de las concentraciones de albmina
A continuacin se mencionan algunas circunstancias
srica se observa en la deshidratacin. Este incremento es
que podran causar concentraciones bajas de albmina
relativo, porque la albmina est contenida en un volu
srica:
men reducido de suero. Administrar lquidos para tratar la
Una fuente inadecuada de aminocidos, lo cual se deshidratacin disminuir las concentraciones de albmi
observa en la desnutricin y las enfermedades consun na srica de nuevo al nivel normal.
tivas musculares.
Hepatopata, que da como resultado incapacidad de los G lobulinas
hepatocitos para sintetizar albmina. El incremento en El grupo globulina de protenas consta de las fracciones oq,
las globulinas que ocurre en la cirrosis temprana, sin a 2, 3 y y. Cada fraccin consta de una cantidad diferente
embargo, equilibrar la prdida de albmina para dar de protenas con funciones distintas. En las subsecciones
una concentracin de protena total dentro de lmites siguientes se describen ejemplos seleccionados de las glo
aceptables. La disminucin de albmina srica es insig bulinas.
nificante en hepatitis viral. A ntitripsina cq. La an ti tripsina cq es un reactante
Prdida gastrointestinal cuando el lquido intersticial de fase aguda. Su funcin principal es neutralizar enzi
se filtra en la inflamacin y enfermedad de la mucosa mas parecidas a la tripsina (es decir, elastasa) que pue
intestinal. den causar dao hidroltico a la protena estructural.
ES T U D IO D E C A S O 8-2
La antitripsina oq es un componente principal (casi 90% ) de deteccin para condiciones fetales en las que hay un
de la fraccin de protenas sricas que migran en la elec mayor paso de protenas fetales hacia el lquido amnitico.
troforesis inmediatamente despus de la albmina. Las Las condiciones relacionadas con una concentracin alta
caractersticas moleculares se ilustran en el cuadro 8 - 2 . de AFP incluyen espina bfida y defectos del tubo neu-
Una deficiencia de antitripsina cq se relaciona con ral, atresia del tubo gastrointestinal y sufrimiento fetal en
enfermedad pulmonar enfisematosa, degenerativa, grave. general. Su uso para determinar defectos del tubo neural
La enfermedad pulmonar se atribuye a la actividad proteo- antes de trmino es una razn importante para su examen.
ltica descontrolada de proteasas de leucocitos en el pul La fetoprotena cq se incrementa tambin en ataxia-telan-
mn durante perodos de inflamacin. La cirrosis heptica giectasia, tirosinosis y enfermedad hemoltica del recin
juvenil es tambin una enfermedad correlativa en la defi nacido. Es interesante que la AFP del suero materno se
ciencia de antitripsina cq. La protena se sintetiza pero no incremente tambin en presencia de gemelos. Las concen
se libera del hepatocito. traciones bajas de AFP materna indican un mayor riesgo
Varios fenotipos de deficiencia de antitripsina oq han de sndrome de Down y trisoma 18.
sido identificados. El fenotipo ms comn es MM (alelo El tiempo normal para deteccin est entre 15 y 20 sema
PiM) y se relaciona con actividad de antitripsina normal. nas de edad gestacional. La AFP materna se incrementa poco
Otros alelos son Pis, Piz, PiF y P r (nulo). El individuo a poco durante este perodo; por tanto, la interpretacin
con fenotipo homocigoto ZZ est en grave riesgo de cn requiere la fecha exacta del embarazo. Las concentraciones
cer heptico y enfermedad pulmonar por deficiencia de de AFP se ven afectadas tambin por el peso de la madre,
antitripsina cq mientras que los que tienen el fenotipo SZ lo cual refleja el volumen sanguneo (relacin inversa), la
muestran slo 35% de actividad normal de antitripsina oq. raza ( 10% mayor en afroestadounidenses) y la diabetes
Por lo general, los individuos con el fenotipo MZ o MS (valor reducido); por tanto, los resultados de prueba deben
no se ven afectados, pero deben ser asesorados respecto ser ajustados para estas variables. Se ha encontrado que
a tener descendencia que pudiera ser ZZ o Z ' y estn en expresar los valores de AFP en mltiplos de la media (MM)
peligro. El alelo Piz se presenta en 1 de 1 5 0 0 caucsicos. origina una buena correlacin con el riesgo del infante. El
Factores distintos a la antitripsina oq tambin tienen que MM se calcula al dividir el valor AFP del paciente entre el
ver en la enfermedad porque algunas personas con feno valor de referencia promedio para esa edad gestacional. En
tipos anormales y bajas concentraciones de protenas no la mayor parte de los programas de deteccin se emplea un
desarrollan enfermedad explcita. Las concentraciones MM de 2.0 como lmite superior y MM de 0.5 como lmite
incrementadas de antitripsina oq se observen en reaccio inferior para la AFP del suero materno.
nes inflamatorias, embarazo y uso de anticonceptivos. Las concentraciones sricas de AFP se pueden usar tam
El descubrimiento de concentraciones anormales de bin como marcador tumoral. Concentraciones altas de AFP
antitripsina a , se hace en la mayor parte de los casos por se encuentran en muchos casos de carcinoma hepatocelular
la falta de una banda de globulina cq en electroforesis de (alrededor de 80% ) y ciertos tumores gonadales en adultos
protenas. Este hallazgo va seguido de uno de los mto (vase el captulo 30, Marcadores tumor ales en circulacin).
dos cuantitativos. Un mtodo utilizado con amplitud es Glucoprotena cida cq (orosomucoide). La glucopro-
la inmunodifusin radial. Tambin estn disponibles los tena cida <q comprende cinco unidades de carbohidra
ensayos inmunonefelomtricos mediante instrumentacin to unidas a una cadena polipeptdica. Debido a su bajo pl
automatizada. La determinacin de fenotipo se puede lle (2 .7 ), tiene carga negativa incluso en disoluciones cidas,
var a cabo por inmunofijacin. hecho que origin su nombre. En el cuadro 8-2 se ven otras
Fetoprotena cq. La fetoprotena cq (AFP) se sintetiza al caractersticas moleculares. Las secuencias de haptoglobi-
inicio en el saco vitelino fetal y luego en las clulas paren- na, inmunoglobulinas y glucoprotena cida oq muestran
quimatosas del hgado. En 1956, se descubri por primera homologa considerable, lo cual da lugar a especular que
vez que en suero fetal tiene una movilidad electrofortica estas protenas comparten un precursor en el pasado evo
entre la de la albmina y la de la globulina cq. Tiene su lutivo. La glucoprotena cida oq participa en la formacin
mximo en el feto a las casi 13 semanas de gestacin (3 mg/ de ciertas membranas y fibras en relacin con colgeno, y
mi) y retrocede a las 34 semanas de sta .14 En el nacimien puede inactivar hormonas bsicas como la progesterona.
to, aminora con rapidez a concentraciones de adulto, que Los mtodos analticos ms comunes para la determi
normalmente son muy bajas (cuadro 8-2). Los mtodos de nacin de orosomucoide son la inmunodifusin y la nefe
uso comn para determinaciones de AFP son el radioin- lometra. La inmunofijacin se ha empleado para estudiar
munoensayo e inmunoensayo marcado con enzima. variantes hereditarias.
La funcin fisiolgica de la AFP no est bien estable La concentracin incrementada de esta protena es la
cida. Se ha propuesto que la protena protege al feto de causa principal de una mayor concentracin de glucopro
un ataque inmunoltico por su madre, modula el creci tena en el suero durante la inflamacin. Tambin se incre
miento celular, transporta compuestos como esteroides, menta en cncer, neumona, artritis reumatoide y otras
y se requiere para el desarrollo funcional del sistema condiciones relacionadas con la proliferacin de clulas.
reproductor femenino .13 La AFP es detectable en la sangre Antiquimotripsina cq. La antiquimotripsina cq (oq-
materna hasta el mes 7 u 8 de embarazo porque se trans ACT) es una proteinasa de serina con catepsina G, elastasa
mite a travs de la placenta. Por tanto, la medicin de la pancretica, quimasa de mastocitos y quimotripsina como
concentracin de AFP en el suero materno es una prueba enzimas blanco .16 La oq-ACT lleva cuatro cadenas laterales
196 PARTE II CORRELACIONES CLNICAS Y PROCEDIMIENTOS ANALTICOS
de oligosacridos. Migra entre las zonas cq y oq en la elec empleadas para evaluar enfermedades reumticas. Se obser
troforesis de alta resolucin con protenas sricas. En la va aumento de la concentracin en condiciones como
inflamacin se observan concentraciones altas, y parece quemaduras y sndrome nefrtico cuando se han perdido
ser que el complejo formado entre la oq-ACT plasmtica y grandes cantidades de lquido y protenas de bajo peso
sus enzimas blanco desempea un papel importante en la molecular. La determinacin de una concentracin reducida
sealizacin de la sntesis de protenas de la fase aguda en de haptoglobina libre (o capacidad de enlace de haptoglo
respuesta a lesin. La deficiencia hereditaria de cq-ACT se bina) se ha empleado para evaluar el grado de hemolisis
relaciona con asma y hepatopata. intravascular que ha ocurrido en reacciones de transfusin
Inhibidor de inter-a-tripsina. El inhibidor de inter-a-trip- o enfermedad hemoltica del recin nacido. La rotura mec
sina (ITI) comprende por lo menos tres subunidades poli- nica de los glbulos rojos durante el traumatismo atltico
peptdicas distintas: dos cadenas pesadas designadas Hx y H2 podra dar como resultado una disminucin temporal de las
y una cadena ligera designada L o bikunn. A la cadena ligera concentraciones de haptoglobina.
se debe la inhibicin de las proteasas tripsina, plasmina y qui- Se tiene conocimiento de que el fenotipo de haptoglobina
motripsina.17 En la electroforesis srica de alta resolucin, el es un factor de riesgo independiente para enfermedad car
ITI migra en la zona entre las fracciones oq y oq. El aumento diovascular (ECV) en individuos con diabetes mellitus tipo
en la concentracin se ve en trastornos inflamatorios. 2. El fenotipo 2-2 de haptoglobina se relaciona con un riesgo
Globulina Ge (componente especfico de grupo; pro cinco veces mayor en comparacin con el fenotipo 1-1. El
tena de enlace a vitamina D). La globulina Ge es otra fenotipo 2-1 de haptoglobina representa un riesgo interme
protena que migra en la interzona oq y a r Esta prote dio en el desarrollo de ECV en pacientes con diabetes.18
na exhibe una alta afinidad de enlace hacia compuestos Ceruloplasmina. La ceruloplasmina es una glucopro
de vitamina D y actina, el constituyente principal de los tena cq, con contenido de cobre, que tiene actividades
filamentos delgados del msculo. Debido al polimorfis enzimticas (es decir, oxidasa de cobre, histaminasa y oxi
mo gentico, existen varios fenotipos de globulina Ge. El dasa ferrosa). Se sintetiza en el hgado, donde seis a ocho
aumento de las concentraciones de globulina Ge se obser tomos de cobre, la mitad como iones cuprosos (Cu+) y la
van en el tercer trimestre de embarazo y en pacientes que otra mitad como iones cpricos (Cu2+) estn unidos a una
toman anticonceptivos orales de estrgeno. La hepatopa apoceruloplasmina. Noventa por ciento o ms del cobre
ta grave y los sndromes con prdida de protenas se rela srico total se encuentra en la ceruloplasmina. Las carac
cionan con concentraciones bajas. tersticas moleculares se muestran en el cuadro 8 - 2 .
Haptoglobina. La haptoglobina, una glucoprotena a 2, El primer mtodo analtico de determinacin de ceru
se sintetiza en los hepatocitos y, en menor grado, en clu loplasmina se bas en su actividad de oxidasa de cobre. En
las del sistema reticuloendotelial. La haptoglobina com la mayor parte de los ensayos actuales se emplean mto
prende dos clases de cadenas polipeptdicas: dos cadenas dos inmunoqumicos, como la inmunodifusin radial y la
a y una p. Hay tres cadenas a posibles y slo una forma nefelometra.
p. En la electroforesis en gel de almidn, la haptoglobina Las concentraciones bajas de ceruloplasmina en el
exhibe tres tipos de patrones, lo que ilustra el polimorfis nacimiento aumentan de forma gradual hasta las concen
mo en las cadenas a. La haptoglobina homocigtica 1-1 da traciones de adulto y continan aumentando de manera
1 banda. Las cadenas peptdicas forman polmeros entre lenta con la edad. Las mujeres adultas tienen concentra
s y con las cadenas de haptoglobina 1 para proveer los ciones ms altas que los varones, y el embarazo, procesos
otros dos patrones electroforticos, que han sido designa inflamatorios, tumores, estrgeno oral y los anticoncepti
dos como fenotipos Hp 2-1 y Hp 2-2. En el cuadro 8-2 se vos causan una concentracin srica incrementada.
ilustran otras caractersticas. Ciertas enfermedades o trastornos se relacionan con
La haptoglobina se incrementa desde una concentra concentraciones sricas bajas. En la enfermedad de W il-
cin media de 0.02 g/L en el nacimiento hasta concentra son (degeneracin hepatolenticular), una enfermedad
ciones de adulto dentro del primer ao de vida. Conforme hereditaria recesiva autosmica, las concentraciones sue
se llega a la vejez, las concentraciones de haptoglobina len ser bajas (0.1 g/L). Disminuye el cobre total srico,
aumentan, con un incremento marcado visto en los varo pero se eleva la fraccin reactiva directa y se incrementa la
nes. La inmunodifusin radial y los mtodos inmunone- excrecin urinaria de cobre. El cobre se deposita en la piel,
felomtricos han sido empleados para la determinacin hgado y cerebro, y produce cirrosis heptica y dao neu-
cuantitativa de haptoglobina. rolgico. El cobre tambin se deposita en la crnea, pro
La funcin de la haptoglobina es enlazar hemoglobi duciendo los anillos de Kayser-Fleischer caractersticos.
na libre mediante su cadena a . La hemoglobina anormal, La concentracin baja de ceruloplasmina se observa tam
como la de Bart y la hemoglobina H, no tiene cadenas a bin en la desnutricin; malabsorcin; hepatopata grave;
y no se puede enlazar. Las clulas reticuloendoteliales eli sndrome nefrtico, y sndrome de Menkes (enfermedad
minan de la circulacin al complejo haptoglobina-hemo- del pelo ensortijado), en el que la absorcin reducida de
globina pocos minutos despus de su formacin. As, la cobre origina una disminucin de ceruloplasmina.
haptoglobina evita la prdida de hemoglobina y su consti Macroglobulina cq. La macrogobulina oq, una pro te
tuyente hierro en la orina. na dimrica, grande (cuadro 8- 2), es sintetizada por los
La concentracin de haptoglobina srica se incremen hepatocitos. Debido a que su movimiento est restringido
ta en condiciones inflamatorias. Es una de las protenas como resultado de su tamao, se encuentra sobre todo en
CAPTULO 8 AMINOCIDOS Y PROTENAS 197
los espacios intravasculares. Sin embargo, concentraciones ferrina, una protena de fase aguda negativa, disminuye
mucho ms bajas de macroglobulina cq se pueden encon tambin en la inflamacin. Una deficiencia de transferrina
trar en otros lquidos corporales, como el LCR. En el enla plasmtica podra dar como resultado la acumulacin de
ce con proteasas inhibidoras, es eliminada por los tejidos hierro en la apoferritina o en histiocitos, o bien, podra pre
reticuloendoteliales. Los mtodos analticos que han sido cipitar en el tejido como hemosiderina. Se ha demostrado
empleados para el ensayo satisfactorio de esta protena son que pacientes con deficiencias hereditarias de transferrina
inmunodifusin radial e inmunonefelometra. tienen anemia hipocrmica importante. Un incremento de
Esta protena alcanza una concentracin srica mxima hierro enlazado a transferrina se encuentra en un trastorno
a la edad de 2 a 4 aos y luego disminuye hasta cerca de un hereditario del metabolismo del hierro, hemocromatosis, en
tercio de esa concentracin cuando el individuo tiene alre el que el hierro en exceso se deposita en el tejido, en parti
dedor de 45 aos de edad. Despus, se observa un incre cular en el hgado y el pncreas. Este trastorno se relaciona
mento moderado. Este cambio con la edad es ms notable con la piel bronceada, cirrosis, diabetes mellitus y concen
en varones que en mujeres .19 Hay una diferencia distinta traciones bajas de transferrina plasmtica.
en los valores de referencia para varones y mujeres, m uje Hemopexina. Las clulas parenquimatosas del hgado
res adultas que tienen valores ms altos que los varones. sintetizan hemopexina, que en la electroforesis migra en
La macroglobulina a 2 inhibe proteasas como tripsina, la regin de la globulina (3. En el cuadro 8-2 se muestran
pepsina y plasmina. Tambin contribuye con ms de un otras caractersticas. La hemopexina se puede determinar
cuarto de la inhibicin de trombina que por lo regular est mediante inmunodifusin radial. La funcin de la hemo
presente en la sangre. Poco se conoce de su correlacin pexina es eliminar el hem circulante. Cuando el hem libre
con enfermedad o trastornos, excepto en el caso de enfer (ferroprotoporfirina IX) se forma durante la rotura de
medad renal. hemoglobina, mioglobina o catalasa, se une con hemo
En la nefrosis, las concentraciones de macroglobulina pexina en una relacin 1:1. El complejo hem-hemopexina
srica a 2 podran incrementarse tanto como 10 veces por es llevado al hgado, donde se destruye el complejo. La
que su gran tamao ayuda en su retencin. La protena hemopexina tambin remueve ferrihem y porfirinas.
se incrementa tambin en la diabetes y la hepatopata. El La concentracin de hemopexina es muy baja en el
empleo de medicamentos anticonceptivos y el embarazo nacimiento pero alcanza valores de adulto dentro del pri
incrementan las concentraciones sricas en 20%. mer ao de vida. Las embarazadas tienen concentraciones
Transferrina (siderofilina). La transferrina, una gluco- mayores de hemopexina plasmtica. Las concentraciones
protena, se sintetiza sobre todo en el hgado. Dos mol incrementadas se encuentran tambin en diabetes mellitus,
culas de ion frrico pueden enlazar a cada molcula de distrofia muscular tipo Duchenne y algunas malignidades,
transferrina. Normalmente, cerca de 33% de los sitios en particular melanomas. En los trastornos hemolticos,
de enlace de hierro en la transferrina estn ocupados. La las concentraciones sricas de hemopexina disminuyen.
transferrina es el componente principal de la fraccin de La administracin de difenilhidantona tambin causa
globulina |3 y aparece como una banda distinta en la elec concentraciones reducidas.
troforesis de alta resolucin con protenas sricas. La varia Lipoprotenas. Las lipoprotenas son complejos de pro
cin gentica de la transferrina se ha demostrado mediante tenas y lpidos cuya funcin es transportar colesterol, tri-
electroforesis en gel de poliacrilamida. En el cuadro 8-2 se glicridos y fosfolpidos en la sangre. Las lipoprotenas se
dan otras caractersticas de la transferrina. subclasifican de acuerdo con la apoprotena y el contenido
Los mtodos analticos empleados para la cuantifica- especfico de lpido. En la electroforesis de alta resolucin
cin de transferrina son imunodifusin e inmunonefelo con protenas sricas, las lipoprotenas de alta densidad
metra. Se considera que ambos dan resultados precisos (HDL) migran entre la zona de la albmina y la globulina
y exactos. c q ; las lipoprotenas de muy baja densidad (VLDL) migran
Las funciones principales de la transferrina son el trans al comienzo de la fraccin de globulina (3 (pre-(3), y las
porte de hierro y la prevencin de prdida de ste por el lipoprotenas de baja densidad (LDL) aparecen como una
rin. Su unin con el hierro evita que ste se deposite en banda separada en la regin de la globulina |3. Para una
el tejido durante incrementos temporales de hierro absor explicacin ms detallada de la estructura y mtodos de
bido o libre. La transferrina transporta hierro a sus sitios anlisis, refirase el captulo 12, Lpidos y lipoprotenas.
de almacenaje, donde se incorpora a la apoferritina, otra M icroglobulina 3r La microglobulina (32 (B2M ) es el
protena, para formar ferritina. La transferritina tambin componente de cadena ligera del complejo principal de
lleva hierro a las clulas, como la mdula sea, que sinteti histocompatibilidad (CPH). Esta protena se encuentra en
za hemoglobina y otros compuestos que contienen hierro. la superficie de la mayor parte de las clulas nucleadas
La forma ms comn de anemia es la que se presenta por y est presente en concentraciones altas en los linfocitos.
deficiencia de hierro, una anemia hipocrmica, microctica. Debido a su tamao pequeo (PM, 1 1 8 0 0 ), la B2M se fil
En este tipo de anemia, la concentracin de transferrina en tra por el glomrulo renal pero la mayor parte se absorbe y
el suero es normal o incrementada. Una concentracin redu cataboliza en los tbulos proximales. Las concentraciones
cida de transferrina suele reflejar una disminucin global en sricas altas son el resultado del aclaramiento deficiente
la sntesis de protena, como se observa en la hepatopata o en el rin o la sobreproduccin de la protena que ocurre
la desnutricin, o bien se podra observar en trastornos con en diversas enfermedades inflamatorias, como artritis reu-
prdida de protena como el sndrome nefrtico. La trans matoide y lupus sistmico eritematoso. En pacientes con
198 PARTE II CORRELACIONES CLNICAS Y PROCEDIMIENTOS ANALTICOS
virus de inmunodeficiencia humana, una concentracin proceso inflamatorio. Las concentraciones de fibringeno
alta de B2M en ausencia de insuficiencia renal indica una tambin aumentan con el embarazo y el uso de pldoras
tasa grande de recambio de linfocitos, lo que hace pensar para el control de la natalidad. Por lo general, los valores
que el virus elimina a los linfocitos. La B2M puede ser vis reducidos reflejan coagulacin excesiva, durante la cual se
ta a veces en la EAR pero, debido a su concentracin baja, consume el fibringeno.
suele medirse mediante inmunoensayo. Protena C reactiva. La protena C reactiva (PCR) se
Complemento. Complemento es un trmino colectivo sintetiza en el hgado y aparece en la sangre de pacientes
para varias protenas que participan en la reaccin inmune con diversas enfermedades inflamatorias. Otras caracters
y sirve como un enlace para la respuesta inflamatoria. Las ticas se encuentran en el cuadro 8-2. La PCR recibi este
caractersticas moleculares de componentes complemento nombre porque precipita con la sustancia C, un polisac-
seleccionados se listan en el cuadro 8-2. Estas protenas cir rido de neumococos. Sin embargo, se encontr que la PCR
culan en la sangre como precursores no funcionales. En la aparece en forma abrupta siempre que hay necrosis tisular,
va clsica, la activacin de estas protenas comienza cuan ya sea que el dao se origine de una infeccin neumoc-
do el primer factor complemento, C lq , se une con el com cica o alguna otra fuente. Esto condujo al descubrimiento
plejo antgeno-anticuerpo. El enlace ocurre en la parte Fe, o de que la PCR reconoce y se une con grupos moleculares
constante, de la molcula de IgG o IgM. Cada protena com hallados en una amplia variedad de bacterias y hongos. La
plemento (C2-C9) es activada despus en forma secuencial PCR hallada en las bacterias promueve el enlace de com
y se puede unir con la membrana de la clula a la que est plemento, lo que facilita su captacin mediante fagocitos.
enlazado el complejo antgeno-anticuerpo. El resultado Este proceso de recubrimiento de protena para increm en
final es la lisis de la clula. Adems, el complemento es tar la fagocitosis se conoce como opsonizacin.
capaz de acudir a otros sistemas efectores humorales y celu La PCR se mide por lo general mediante mtodos inmu-
lares en el proceso de inflamacin. Existe una va alterna (la nolgicos, incluso nefelometra e inmunoensayo enzimti-
va de la properdina) para la activacin del complemento en co (E1A). Los mtodos tradicionales tienen una sensibilidad
la cual los primeros componentes son desviados y el proce de alrededor de 3 a 5 mg/L. Los mtodos de PCR con base
so comienza con C3. Diferentes sustancias activan esta va en anticuerpo monoclonal desarrollados en fechas recien
(no requiere la presencia de un anticuerpo), sin embargo, el tes pueden detectar concentraciones de CRP menores a 1.0
ataque ltico en las membranas es el mismo (secuencia C5- mg/L y se denominan PCR de alta sensibilidad (PCRas).
C9). Los mtodos analticos han incluido una medicin del La PCR es una de las primeras protenas de fase agu
ttulo del complemento al usar su actividad en un sistema da que aumenta en respuesta a enfermedad inflamatoria.
hemoltico y mediante mtodos inmunoqumicos como la Aumenta de forma significativa en la fiebre reumtica,
imunodifusin radial y la nefelometra. infecciones bacterianas, infartos de miocardio, artritis
El complemento aumenta en estados inflamatorios y reumatoide, carcinomatosis, gota e infecciones virales. La
disminuye en la desnutricin, lupus eritematoso y coa- PCR ha sido reconocida tambin como un factor de riesgo
gulopatas intravasculares diseminadas. Tambin se han independiente en la enfermedad cardiovascular con base
descrito las deficiencias hereditarias de protenas comple en los hallazgos de que la aterotrombosis, adems de ser
mento. En la mayor parte de los casos, las deficiencias se una enfermedad de acumulacin de lpidos, representa
relacionan con infecciones recurrentes. tambin un proceso inflamatorio crnico. Con el ensayo
Fibringeno. El fibringeno es una de las protenas PCRas, concentraciones de < 1 , 1 a 3 y > 3 mg/L corres
ms grandes en el plasma sanguneo. Se sintetiza en el ponden a grupos de bajo, moderado y alto riesgo para
hgado y se clasifica como una glucoprotena porque tiene futuros sucesos cardiovasculares.20 Las concentraciones
un contenido de carbohidratos considerable. En el cuadro altas de PCR estimulan la produccin de factor tisular que
8-2 se dan otras caractersticas moleculares. En la electro- inicia la coagulacin, activa el complemento y se une con
fresis plasmtica, se ve al fibringeno como una banda LDL en la placa aterosclertica; la evidencia apunta a una
distinta entre las globulinas |3 y y. La funcin del fibri relacin causal entre las concentraciones de PCR y enfer
ngeno es formar un cogulo de fibrina cuando se activa medad cardiovascular .21 Adems, las intervenciones como
mediante trombina; por tanto, el fibringeno casi se eli prdida de peso, dieta, ejercicio y dejar de fumar y admi
mina por completo en el proceso de coagulacin y no se nistracin de agentes farmacolgicos (como las estatinas)
observa en el suero. originan concentraciones reducidas de PCR y menor ries
De ordinario el fibringeno ha sido determinado como go vascular.20,21 Una explicacin ms detallada de los fac
pro tena coagulable. La concentracin de fibringeno es tores de riesgo cardacos se halla en el captulo 23, Funcin
proporcional al tiempo requerido para formar un cogulo cardaca.
despus de la adicin de trombina a plasma citratado. Los Inmunoglobulinas (Igs). Hay cinco grupos principales
productos de divisin de fibrina (productos de degrada de inmunoglobulinas en el suero: IgA, IgG, IgM, IgD e
cin de fibringeno y fibrina) se determinan por medio de IgE. Se sintetizan en las clulas plasmticas. Una respuesta
mtodos de inmunoensayo como inmunodifusin, nefelo inmune a partculas extraas y microorganismos estimula
metra y radioinmuno ensayo. su sntesis. En cierto sentido el neonato no sintetiza las
El fibringeno es uno de los reactantes de fa s e aguda, inmunoglobulinas. La IgG cruza la placenta; la madre sin
un trmino que se refiere a las protenas con un incre tetiza la IgG presente en el suero del recin nacido. La IgM
mento significativo en el plasma durante la fase aguda del no cruza la placenta sino ms bien es la nica inmuno-
CAPTULO 8 AMINOCIDOS Y PROTENAS 199
globulina que sintetiza el neonato. La concentracin de globulina monoclonal se tipifica mediante el mtodo de
IgM al inicio es 0.21 g/L, pero se incrementa con rapidez inm unofijacin para determinarla como IgG, IgA o IgM,
a concentraciones de adulto ms o menos a los seis meses e identificar las cadenas ligeras k o L L o s incrementos de
de edad. La IgA es casi nula al nacer (0.003 g/L), se incre IgD o IgE, o enfermedad de cadena pesada se deben consi
menta de forma gradual hasta alcanzar los valores de adul derar si no hay reaccin con los antisueros de electrofore
to en la pubertad, y contina incrementndose despus. sis de inmunofijacin caracterstica.
Las concentraciones de IgD e IgE son indetectables en el La IgG se incrementa en la hepatopata, infecciones y
nacimiento con los mtodos usuales, pero se incremen enfermedad del colgeno. Una disminucin de hemoglo
ta poco a poco hasta la adultez. Por lo regular la IgA es bina se relaciona con mayor susceptibilidad a infecciones
mayor en los varones que en las mujeres; las concentracio y gammapata monoclonal de uno de los otros idiotipos.
nes de IgM e IgG son un poco ms altas en las mujeres. Las La IgA es la inmunoglobulina idioptica presente en la
concentraciones de IgE varan con la condicin alrgica mucosa respiratoria y gastrointestinal. La IgA en lquidos
del individuo. que no sean el suero tiene un pptido secretorio adicional
Las inmunoglobulinas comprenden dos cadenas poli- conocido como p iez a J . Esta pieza permite a la IgA apare
peptdicas largas (cadenas pesadas o H) y dos polipptidos cer en secreciones. Los incrementos policlonales en la IgA
cortos (cadenas ligeras o L), unidas por enlaces de disul srica (sin la pieza J ) se hallan en hepatopata, infecciones
furo. Un individuo es capaz de producir 1 milln de mol y enfermedades autoinmunes. Las concentraciones sricas
culas de inmunoglobulina distintas. Las diferencias entre bajas se hallan en la sntesis reducida de protenas, ataxia-
estas molculas se hallan en una regin de la molcula lla telangiectasia y trastornos de inmunodeficiencia heredi
mada regin variable. Esta regin se localiza en el extremo tarios.
de la molcula que contiene a las cadenas ligera y pesada, La IgM es el primer anticuerpo que aparece en respuesta
y es el sitio en el que la inmunoglobulina (anticuerpo) a la estimulacin antignica. La IgM es tambin el tipo de
se combina con el antgeno. De esta manera, hay muchos anticuerpo que acta como anticuerpo anti A o anti B para
anticuerpos diferentes que son relativamente especficos los antgenos de eritrocitos, factores reumatoides y anti
para antgenos correspondientes. cuerpos heterfilos. Las concentraciones altas de IgM se
Las diferencias en las cadenas pesadas (H) se llaman hallan en toxoplasmosis, citomegalovirus, rubola, herpes,
idiotipos y se designan IgG, IgA, IgM, IgD e IgE. Las cade sfilis y varias enfermedades bacterianas y fngicas. En la
nas pesadas se llaman y, a , p, 8 y e, respectivamente. Las macroglobulinemia de Waldenstrm se observa un incre
cadenas ligeras (L) para todas las clases de inmunoglobu mento monoclonal. Este incremento se ve como un pico en
lina son de dos clases, K y X. Cada m olcula de inm uno- la vecindad de la zona (3 tarda de un patrn electrofortico
globulina o anticuerpo tiene dos cadenas H idnticas y dos de protena. Las disminuciones se observan en condiciones
cadenas L idnticas. Por ejemplo, IgG tiene dos cadenas X de prdida de protenas y trastornos de inmunodeficiencia.
tipo H y dos cadenas L idnticas (ya sea k o X). La IgD es la inmunoglobulina con la cuarta concen
Cuando se inyecta una sustancia extraa (antgeno) tracin ms alta en el suero normal. Su concentracin se
en un animal (como conejo o cabra), se sintetiza un anti incrementa en infecciones, hepatopata y trastornos del
cuerpo que reaccionar con ese antgeno. Esta reaccin es tejido conectivo. El mielanoma mltiple de IgD tambin
relativamente especfica; es decir, los anticuerpos reaccio ha sido descrito con un pico monoclonal en la zona (3 tar
narn de modo especfico y selectivo con el antgeno que da del patrn electrofortico.
se emple para originarlos. Las protenas y los polisac- La IgE es la inmunoglobulina idioptica relacionada
ridos son antgenos fuertes. Los anticuerpos se pueden con reacciones alrgicas y anafilcticas. Los incrementos
crear en conejos y otros animales para las inmunoglobu policlonales se observan en alergias, incluso asma y fiebre
linas humanas as como las otras protenas sricas. Estos del heno. Los incrementos monoclonales se observan en el
anticuerpos de inmunoglobulina antihumana de conejo mieloma de IgE, una enfermedad rara.
se emplean para detectar y evaluar de manera cuantita
tiva IgG, IgA, IgM, IgD e IgE. Las inmunoglobulinas han Protenas diversas
sido determinadas con inmunodifusin radial y radioin-
munoensayo. Tambin se han utilizado tcnicas de inmu M ioglobina
noensayo fluorescente y ensayos inmunonefelomtricos. La mioglobina es una protena hem que se halla en mscu
El mtodo inmunonefelomtrico automatizado est dispo lo esqueltico y cardaco estriado. Representa casi 2% de la
nible para IgG, IgA e IgM. protena total del msculo. Una porcin menor de la mio
Una molcula de inmunoglobulina derivada de la pro globina hallada en las clulas est enlazada estructural
liferacin de una clula plasmtica (clon) se llama inmu mente, pero la mayor parte est disuelta en el citoplasma.
noglobulina m onoclonal o paraprotena. Un incremento Comprende una cadena polipeptidica que contiene 153
marcado de tal Ig monoclonal se encuentra en el suero aminocidos, acoplada con un grupo hem. En tamao, la
de pacientes que tienen malignidad de clulas plasmticas mioglobina, con un peso molecular de 17 800 daltons, es
(mieloma). Los incrementos monoclonales se observan un poco ms grande que un cuarto de una molcula de
en patrones electroforticos como picos. Aunque estas hemoglobina. Se puede unir de forma reversible con el
inmunoglobulinas suelen estar en las fracciones (3 o X, en oxgeno en una manera similar a la molcula de hemoglo
ocasiones, una podra aparecer en el rea a r La inmuno- bina, pero la mioglobina requiere una tensin de oxgeno
200 PARTE II CORRELACIONES CLNICAS Y PROCEDIMIENTOS ANALTICOS
Muerte
ES T U D IO D E C A S O 8-3
Una m ujer de 76 aos de edad fue admitida al hospital CUADRO 8-3.1. DE ESTUDIO DE CASO.
con gangrena de su pie derecho. Estaba desorientada y RESULTADOS DE LABORATO RIO
tena dihcultad para hallar las palabras correctas para
expresarse. En la evaluacin, se supo que viva sola Da 1
y que tena que preparar sus alimentos. Una hija que CK total 187 U/L (40-325)
viva en el rea dijo que su madre se alimentaba mal, Masa de CK-MB 6 iJtg/L (<8)
aun cuando se le motivara. Un ECG, realizado en la
admisin, mostr posible ritmo ectpico con contrac Troponina I 16.3 |xg/L (0-2)
ciones supraventriculares prematuras ocasionales. El Prealbmina 15 mg/dL (17-42)
cardilogo sospecha de un posible infarto de miocar
Albmina 2.7 g/dL (3.7-4.9)
dio inferior de edad indeterminada. Los resultados de
laboratorio se muestran en el cuadro 8-3.1. de estudio Repeticin (5 h despus)
de caso. CK total 180 U/L
Masa de CK-MB 5.4 xg/L
Preguntas
Troponina I 17.5 (jig/L
1. En este paciente, cul es el valor clnico de las
Da 2
mediciones de troponina I?
CK total 177 U/L
2. Cul es una explicacin posible para la concentra
Masa de CK-MB 4.5 (xg/L
cin alta de mioglobina?
Troponina l 13.7 xg/L
3. Qu condicin est indicada por el valor bajo de
prealbmina? Mioglobina <500 xg/L (<76)
CUADRO 8-5. CO N CEN TRA CIO N ES D E PRO TEN A S EN ESTA D O S M O RBO SO S S E LEC C IO N A D O S
PROTENA TOTAL ALBMINA GLOBULINA ENFERMEDAD
N, | 4 Dao heptico
Cirrosis puente p-y
Hepatitis p globulinas y
Ictericia obstructiva f globulinas a 2, p
Quemaduras, traumatismo
Infecciones
Aguda f globulinas a , , a 2
Crnica f globulinas a , , a 2, y
i 4 N Malabsorcin
Dieta inadecuada
Sndrome nefrtico | globulinas a 2, P; 4 globulinas y
4 N 4 Sndromes de inmunodeficiencia
t t T Deshidratacin
f N t Mieloma mltiple
Gamm apatas monoclonales y policlonales
total, como los individuos con lesiones neurolgicas que determina el nitrgeno; se supone un promedio de 16% de
son mantenidos con lquidos intravenosos por un perodo nitrgeno en masa en la protena para calcular la concen
prolongado. tracin de protena.
El mtodo de anlisis de nitrgeno total emplea qui Las protenas sricas se precipitan con un cido org
mioluminiscencia. La muestra, en presencia de oxgeno, nico como el cido tricloroactico o cido tngstico. El
se calienta hasta una temperatura alta (1 1 0 0 20C ). nitrgeno no protenico se elimina con el sobrenadante.
Cualquier nitrgeno enlazado qumicamente se oxida a El grnulo de protena se digiere en H2S 0 4 con calor (340
xido ntrico. Este ltimo se mezcla entonces con ozono a 360C ) y un catalizador, como el sulfato cprico, para
( 0 3) para formar una molcula de dixido de nitrgeno acelerar la reaccin. El sulfato de potasio se introduce
excitada (NO,*). Cuando esta molcula decae al estado tambin para increm entar el punto de ebullicin a fin de
basal, emite un fotn de luz. La cantidad de luz emitida es mejorar la eficacia de la digestin. El H 2S 0 4 oxida al C, H
proporcional a la concentracin de nitrgeno en la mues y S en la protena a C 0 2, CO, H20 y S 0 2. El nitrgeno en la
tra. Esta seal de quimioluminiscencia se compara con la pro tena se convierte en bisulfito de amonio (NH,HSO+),
de un estndar para cuanticacin. que se mide al aadir lcali y destilar el amoniaco en una
disolucin estndar de cido brico. El borato de amo
nio (NH 4H ,B 0 3) que se forma se titula con una disolucin
Protenas totales estndar de HC1 para determinar la cantidad de nitrgeno
La muestra que ms se usa para determinar la protena en la disolucin de protena original.
total es suero y no plasma. No es necesario recolectarla cuan Este mtodo no se emplea en el laboratorio clnico
do el paciente est en ayuno, aunque en algunos de los porque es tardado y muy tedioso para uso rutinario. El
mtodos ocurren interferencias con la presencia de lipemia. contenido de nitrgeno de cada protena puede diferir
La hemolisis elevar falsamente el resultado de protena del 16% supuesto en el clculo de Kjeldhal descrito. El
total debido a la liberacin de protenas de eritrocitos en el contenido de nitrgeno real de protenas sricas vara de
suero. Las muestras de suero claras, bien cerradas, son esta 15.1 a 16.8%. As, si se emplea un estndar de protena
bles durante una semana o ms a temperatura ambiente, (calibrado con el Kjeldahl) que difiere en composicin
por un mes a 2 a 4C, y durante por lo menos dos meses de la muestra de suero por analizar, se introduce un error
a -20C .31 porque el contenido de nitrgeno no ser el mismo. Tam
El intervalo de referencia para la protena total srica es bin es necesario suponer que no se pierden protenas de
6.5 a 8.3 g/dl (65 a 83 g/L) para adultos ambulatorios. En concentracin significativa en la muestra desconocida en
posicin de recostado, la concentracin de pro tena total el paso de precipitacin. A pesar de estas suposiciones, el
srica es 6.0 a 7.8 g/dl (60 a 78 g/L). Este intervalo normal mtodo de Kjeldahl, an es considerado por algunos como
inferior es un resultado de cambios en la distribucin de el mtodo de referencia para protenas.
agua en los compartimientos extracelulares. La concentra Refractom etra. La refractometra es til cuando se
cin de protena total es baja al nacer, y las concentracio requiere un mtodo rpido que requiere un pequeo volu
nes de adulto se alcanzan a la edad de 3 aos. Hay una men de suero. La velocidad de la luz cambia cuando pasa
disminucin ligera con la edad. Las concentraciones de el lmite entre las dos capas transparentes (es decir, aire y
protena total ms bajas se observan en el embarazo. Los agua), lo cual causa que la luz se curve (refracte). Cuando
mtodos para la determinacin de protena total se descri se aade un soluto al agua, el ndice de refraccin a 20C
ben a continuacin y se resumen en el cuadro 8 - 6 . de 1.330 para agua pura se incrementa en una cantidad
Kjeldhal. El mtodo clsico para la cuanticacin de proporcional a la concentracin de soluto en la disolu
protena total es el mtodo de Kjeldahl. Debido a que es cin. Esta proporcionalidad se cumple bastante bien en
preciso y exacto, se emplea como un estndar mediante un incremento de concentracin de 2 a 3 (es decir, de 520
el cual se comparan otros mtodos. En este mtodo, se g/dl). Debido a que la mayor parte de los slidos disueltos
en el suero son protenas, el ndice de refraccin refleja compuesto que tiene dos o ms de los siguientes grupos:
la concentracin de protena. Sin embargo, en la adicin NHCEI2 y NHCS. El mtodo se nombr porque una sus
a protena, el suero contiene varios slidos no proteni- tancia llamada biuret (NbflCONHCONH) reacciona con
cos, como electrlitos, urea y glucosa, que contribuyen al iones cpricos de la misma manera. Debe haber un m ni
ndice de refraccin del suero. Por tanto, la escala inte mo de dos de los grupos reactivos; por tanto, los amino
grada en el refractmetro se debe calibrar con un suero cidos y los dipptidos no reaccionarn.
de una concentracin de protena conocida que tambin Enlace de colorante. Los mtodos de enlace de colo
tiene presentes los constituyentes no protenicos. Se hace rante se basan en la capacidad de la mayor parte de las
una suposicin de que las muestras de prueba contienen protenas del suero para unirse con colorantes, aunque
estos otros solutos en casi la misma concentracin que en podra variar la afinidad con la que se enlazan. Los colo
el suero de calibracin. El error se introduce cuando estas rantes azul de bromofenol, Ponceau S, negro de amido
sustancias se incrementan o cuando el suero es pigmenta 10B, verde de lisamina y azul brillante de Coomassie se
do (por la bilirrubina), lipmico o hemolizado. El ndice han empleado para teir bandas de protena despus de la
de refraccin tambin es dependiente de la temperatura, electroforesis. Adems, se ha descrito un mtodo de enlace
y algunos refractmetros tienen integrada una correccin de colorante para la determinacin de protena total con
de temperatura. el azul brillante de Coomassie 250. El enlace de azul bri
Por lo general, la protena total se mide con un refrac llante de Coomassie 250 a protena ocasiona un cambio
tmetro porttil. Se coloca una gota de suero mediante en la absorbancia mxima del colorante de 465 a 595 nm.
accin capilar entre un cubreobjetos y el prisma. El refrac El incremento de absorbancia a 595 nm se emplea para
tmetro se sostiene a fin de que la luz se refracte por la determinar la concentracin de protena. Aunque el m to
capa de suero. Los rayos refractados ocasionan que parte do es simple y rpido, las respuestas de enlace de coloran
del campo de visin se ilumine, y se produce un punto en te desiguales de cada una de las protenas ha motivado una
el que hay una lnea definida entre la luz y la oscuridad. recomendacin para tener precaucin cuando se aplica
Se lee el nmero de gramos por litro en esta lnea en la esta prueba a la mezcla compleja de protena encontrada
escala interna. La temperatura se corrige en el medidor TS en el suero.
(American Optical Corp, Scientific Instruments Divisin; A bsorcin u ltravioleta. Las protenas sricas tambin
Buffalo, NY) mediante un sistema de cristal lquido. han sido estimadas m ediante espetrofotom etra ultravio
La medicin de protena total por refractometra es leta. Las protenas absorben luz a 2 8 0 y a 2 1 0 nm. La
fcil y rpida. La exactitud es aceptable ,32 con un acuerdo absortividad (absorbancia de una disolucin de 1% en
reportado de 3 % con el mtodo de biuret, pero est suje una trayectoria de luz de 1 cm ) a 2 8 0 nm se relaciona
ta a interferencias falsas positivas. con la absorbancia de la tirosina, triptfano y am inoci
Biuret. El procedimiento de biuret es el mtodo ms dos de fenilalanina en la protena. La albmina humana
utilizado y el que recomienda el grupo de expertos de la tiene slo un residuo de triptfano en la m olcula y una
International Federation o j Clinical Chemistry para la deter absortividad de 5 .31 comparada con el fibringeno, que
m inacin de protena total. En esta reaccin, los iones tiene 55 residuos de triptfano y una absortividad de
cpricos (Cu2+) forman complejos con los grupos que 15.1.
intervienen en el enlace peptdico. En un medio alcalino La absorbancia de las protenas a 210 nm es un resulta
y en presencia de por lo menos dos enlaces peptdicos, do de la absorbancia del enlace peptdico a esa longitud de
se forma un quelato de color violeta. El reactivo tambin onda. La longitud de onda a la cual ocurre la absorbancia
contiene tartrato de potasio sdico para acomplejar los mxima depende en menor grado de la conform acin de
iones cpricos a fin de evitar su precipitacin en la diso la protena. Estos mtodos han sido empleados rara vez en
lucin alcalina, e ioduro de potasio, que acta como un laboratorios clnicos para monitorear eluatos de separa
antioxidante. La absorbancia del quelato coloreado for ciones de protena de columnas. Para usar estos mtodos,
mado se mide a 540 nm. Cuando reaccionan los pptidos las suposiciones deben ser que la composicin de la mues
pequeos, el color del quelato producido tiene tono dife tra de suero desconocido est cerca de la correspondiente
rente al que se observa con los pptidos ms grandes. El a la disolucin de calibracin.
color vara de rosa a violeta rojizo. Sin embargo, no hay
diferencia discernible en la reaccin dada por las prote Fraccion am ien to, identificacin y cuantificacin
nas vistas de forma normal en el plasma. Por tanto, en un
d e proten a s especficas
amplio intervalo de concentraciones el color que se forma
En el ensayo de protenas sricas totales, se puede obte
es proporcional al nmero de enlaces peptdicos presentes
ner inform acin diagnstica til para determinar la
y refleja la concentracin de protena total. Sin embargo,
fraccin de albmina y las globulinas. Una inversin o
en presencia de protenas anormalmente pequeas, como
cam bio significativo en la relacin de albm ina y la glo
las vistas en el mieloma mltiple, la concentracin de la
bulina total se not primero en enfermedades del rin
protena se subestimara debido al tono de color ms lige
y el hgado. Para determinar la relacin de albmina a
ro producido. Si se debe analizar suero lipmico, existe
globulina (A/G), es com n determ inar protena total y
una manera de superar este problema .33
albmina. Las globulinas se calculan al restar la albm i
Adems del grupo NHCO que se presenta en el enlace
na de la protena total (protena total/albmina = glo
peptdico, los iones cpricos reaccionarn con cualquier
bulinas).
206 PARTE II CORRELACIONES CLNICAS Y PROCEDIMIENTOS ANALTICOS
Cuando se encuentra una anormalidad en la prote colorante. Se han hecho uso de diversos colorantes, como
na total o albmina, se realiza por lo regular un anlisis anaranjado de metilo, 2-4-hidroxiazobenceno-cido ben
electrofortico. Las protenas sricas se separan en cinco o zoico (HAAB), verde de bromocresol (VBC) y prpura de
ms fracciones por medio de los mtodos electroforticos bromocresol (PBC). El anaranjado de metilo no es espe
usuales. Si se observa una anormalidad en el patrn elec cfico para albmina; las lipoprotenas (3 y algunas globu
trofortico, se hace un anlisis de cada una de las prote linas oq y oq se unen tambin a este colorante. El HAAB,
nas dentro del rea de la anormalidad. aunque ms especfico para albmina, tiene una sensibi
Los mtodos para medir fracciones de protena se descri lidad baja. Adems, varios compuestos como salicilatos,
ben en seguida. En el cuadro 8-7 se listan los tipos de anlisis penicilina, bilirrubina conjugada y sulfonamidas, interfie
usados en la cuantificacin de concentraciones de albmina. ren con el enlace de la albmina al colorante. El VBC no es
Fraccionam iento de sales. El fraccionamiento de pro afectado por sustancias interferentes como la bilirrubina
tenas ha sido realizado mediante varios procedimientos y los salicilatos; sin embargo, la hemoglobina se enlaza al
con precipitacin. Las globulinas se pueden separar de colorante. Por cada 100 mg/dl de hemoglobina, la alb
la albmina mediante salificacin con sales de sodio. Las mina se incrementa en 0.1 g/dl.34 Segn los informes, la
sales, al disminuir el agua disponible para hidratacin de medicin de la albmina mediante VBC sobrestima los
grupos hidrfilos, causarn precipitacin de las globuli valores bajos de albmina. Esto se observ en particular
nas. Se han empleado diversas concentraciones (26 a 28% en los pacientes cuando la concentracin baja de albmina
p/v) de distintas sales (p. ej., Na2S 0 4, Na2So3). La alb iba acompaada de una fraccin elevada de globulina a ,
mina que permanece en disolucin en el sobrenadante se como ocurre en el sndrome nefrtico o en la enfermedad
puede medir mediante alguno de los mtodos rutinarios renal terminal.35 Se encontr que las globulinas a , como la
de protena total. La salificacin no se usa para separar la ceruloplasmina y la glucoprotena de cido a , reaccionan
fraccin de albmina en la mayor parte de los laboratorios con VBC y producen un color cuya intensidad es casi un
actuales porque estn disponibles mtodos directos que tercio de la reaccin vista con la albmina. Esta reaccin
reaccionan de manera especfica con la albmina en una de globulinas a contribuy de forma significativa con la
mezcla de protenas. absorbancia de la prueba slo despus que los tiempos de
Enlace de colorante. Los mtodos ms comunes para incubacin excedieron 5 min. Por tanto, la especificidad
la determ inacin de albmina son los procedim ientos de la reaccin para albmina se puede m ejorar si se toman
de enlace de colorante. El pld de la disolucin se ajusta de lecturas de absorbancia dentro de un intervalo corto estan
modo que la albmina tenga carga positiva. Entonces, por darizado despus del mezclado .36 Los tiempos empleados
fuerzas electrostticas, la albmina es atrada y se une con han variado de 0.5 a 30 s despus del mezclado.
un colorante aninico. Cuando se une con la albmina, El prpura de bromocresol (PBC) es un colorante
el colorante tiene un mximo de absorcin diferente al del opcional que se puede usar para las determinaciones de
colorante libre. La cantidad de albmina se puede cuan- albmina. Por enlazarse de manera especfica con la alb
tificar al medir la absorbancia del complejo de albmina- mina, el PBC no est sujeto a la mayor parte de las interfe-
CAPITULO 8 AMINOCIDOS Y PROTENAS 207
rendas, y es preciso y exhibe correlacin excelente con los los cationes (carga neta positiva) migran hacia el ctodo
mtodos de referencia de inmunodifusin. Sin embargo, (terminal negativa), donde los aniones (carga neta negati
el anlisis de la albmina mediante el mtodo de PBC, no va) migran al nodo (terminal positiva). La velocidad de
es sin desventajas. En pacientes con insuficiencia renal, el la migracin depende en gran medida del grado de ioni
mtodo de PBC subestima la albmina srica .37 El suero zacin de la protena al pEl de la disolucin amortiguado
de estos pacientes al parecer contiene ya sea una sustancia ra. Esto se puede estimar de la distancia entre el pl de la
unida fuertemente a albmina o una albmina modificada protena y el pH de la disolucin amortiguadora. Mientras
en su estructura que afecta el enlace del PBC. De manera ms difieran el pH de la disolucin amortiguadora y el pl,
similar, la unin del PBC con la albmina se deteriora en mayor es la magnitud de la carga neta de esa protena y se
presencia de bilirrubina enlazada de forma covalente. En mover ms rpido en el campo elctrico. Adems de la
estas situaciones el enlace del VBC no resulta afectado. densidad de carga, la velocidad del movimiento tambin
En la actualidad, tanto el mtodo del VBC como el del depende de la intensidad del campo elctrico, tamao y
PBC se emplean para cuantificar albmina. forma de la molcula; la temperatura, y las caractersticas
D eterm inacin de globulinas totales. Otro modo de de la disolucin amortiguadora (es decir, pH, composicin
fraccionar protenas es la medicin de globulinas totales. cualitativa y fuerza inica). La movilidad electrofortica
La albmina se puede calcular entonces por sustraccin especfica p de una protena se puede calcular por:
de la globulina de protena total. La concentracin de glo
bulina total en suero se determina mediante un mtodo
colorimtrico directo con cido glioxlico. El cido gliox-
lico, en presencia de Cu2+ y en un medio cido (cido ac donde
tico y H2S 0 4), se condensa con el triptfano hallado en las s = distancia recorrida en cm
globulinas para producir un color prpura. La albmina t = tiempo de migracin en segundos
tiene casi 0.2% de triptfano, comparada con 2 a 3% para F = intensidad del campo en V cm -1
las globulinas sricas. Cuando se calibra con un suero de
concentraciones conocidas de albmina y globulina, se Tiselius desarroll la electroforesis usando un medio
pueden determinar las globulinas totales. La medicin de acuoso. sta se conoce como lm ite mvil o electroforesis
las globulinas con base en su contenido de triptfano nun libre. Despus, en el laboratorio clnico, se emple papel.
ca se ha vuelto comn debido a la facilidad y simplicidad El trmino dado al uso de un medio slido es electroforesis
de los mtodos de enlace a colorante para albmina. de zona. El papel ha sido reemplazado en gran medida por
Electroforesis. La electroforesis separa las protenas acetato de celulosa o gel de agarosa como medio de sopor
con base en sus densidades de carga elctrica. Las caracte te empleado en la actualidad.
rsticas de carga de la protena se analizaron antes en este
captulo. La protena, cuando se coloca en una corriente Electrlisis d e p rotena srica
elctrica, se mover de acuerdo con su densidad de car En el mtodo estndar para electroforesis de protena sri
ga, que se determina mediante el pH de una disolucin ca (EPS), las muestras sricas se aplican cerca del extre
amortiguadora circundante. A un pH mayor que el pl, la mo del ctodo de una tira con medio de soporte que se
protena tiene carga negativa, y viceversa. La direccin de satura con disolucin amortiguadora alcalina (pH, 8 . 6).
movimiento depende de si la carga es positiva o negativa; La tira de soporte se conecta a dos electrodos y se pasa
ES T U D IO D E C A S O 8-4
Una m ujer de 3 2 aos de edad desarroll fatiga pro lipoprotena p. La protena srica total fue 4.7 g/dl. La
gresiva y, despus, edema en sus tobillos y en otras paciente se convirti en candidato para trasplante renal.
regiones dependientes de su cuerpo cuando se acosta (C aso 8-4 cortesa del Dr. R. McPherson, presidente, Pato
ba por perodos prolongados. Aunque produca vol loga clnica, M edical College o f Virginia Hospitals, Virgi
menes de orina casi normales, el anlisis de orina con nia Com m onw ealth University H ealth System.)
tira reactiva revel protena 4 plus. Su albmina srica
estuvo abajo del intervalo de referencia y su colesterol Preguntas
srico fue significativamente alto. La prdida de pro
tena de orina estuvo en el intervalo de 10 a 15 g/24 1. Qu estado morboso es la explicacin ms probable
h. La biopsia renal mostr participacin glomerular para los sntomas del paciente y los resultados de
extensa. laboratorio?
La electroforesis de protena srica mostr cantida 2. En esta condicin, por qu son altas las fracciones
des reducidas de albmina (2.27 g/dL), globulinas alfa, de globulina a , y (3?
y globulinas y. La fraccin a 2 fue significativamente
elevada (34.4% del total) como tambin la banda de 3. Por qu es edematoso el paciente?
208 PARTE II CORRELACIONES CLNICAS Y PROCEDIMIENTOS ANALTICOS
una corriente por la tira para separar las protenas. Todas esta absorbancia se registra en dispositivo de grfica de
las protenas sricas principales llevan una carga negativa tira para obtener un patrn de las fracciones (fig. 8-13).
neta a pH 8.6 y migrarn hacia el nodo. Si se emplean Muchos densitmetros de exploracin calculan el rea
mtodos estndar, las protenas sricas se disponen por s bajo la curva de absorbancia y el porcentaje de colorante
mismas en cinco bandas: la albmina es la que viaja ms total que aparece en cada fraccin. La concentracin se
rpido hacia el nodo seguida de globulinas cq y oq, glo calcula entonces como un porcentaje de la protena total
bulinas (3 y globulinas y, en ese orden. La amplitud de la que se determin mediante uno de los mtodos de prote
banda de protenas en una fraccin depende de la canti na, como el procedimiento de biuret.
dad de protenas con caractersticas moleculares un poco El clculo se puede hacer tambin cortando las bandas
distintas que estn presentes en esa fraccin. La protena pequeas de la membrana y eluyendo el colorante de cada
homognea da una banda reducida. banda en 0.1 M de NaOH. Las absorbancias se agregan
Despus de la separacin, las fracciones de protena se para obtener la absorbancia total, y luego se calcula el por
fijan al sumergir la tira de soporte en una disolucin ci- centaje de la absorbancia total hallada en cada fraccin.
da (como el cido actico) para desnaturalizar las prote Se debe ejecutar un control srico de referencia con
nas e inmovilizarlas en su medio de soporte. Despus se cada ejecucin electrofortica (fig. 8-13A), y los resulta
tien las protenas. Se han empleado diversos colorantes, dos se deben monitorear para mantener lmites de con
incluso Ponceau S, negro de Amido o azul de Coomassie. fianza de 95% para las fracciones. Los valores de referencia
La protena aparece como bandas en el medio de soporte. para cada fraccin son como sigue: albmina, 53 a 65%
Los patrones electroforticos representativos del acetato de la protena total (3.5 a 5.0 g/dl); globulina oq, 2.5 a
de celulosa se muestran en la figura 8 - 12B, mientras que 5% (0.1 a 0.3 g/dl); globulina cq, 7 a 13% (0 .6 a 1.0 g/dl);
la figura 8-12A muestra los patrones obtenidos con gel de globulina (3, 8 a 14% (0.7 a 1.1 g/dl), y globulina y, 12 a
agarosa como medio de soporte. 22% ( 0.8 a 1.6 g/dl).
Se realiza la inspeccin visual de la membrana, o la tira El uso accidental de plasma dar como resultado una
transparente clarificada se coloca en un densitmetro de banda reducida en la regin de globulina (32 debido a la
exploracin. Las mediciones de reflectancia se pueden presencia de fibringeno. La presencia de hemoglobina
hacer tambin en membranas no clarificadas; sin embargo, libre causar una seal en el patrn en la zona tarda cq
la densitometra de exploracin es ms comn. El patrn o en la zona temprana P, y la presencia de com plejos de
de la membrana se hace pasar por una rendija por la que hemoglobina-haptoglobina causar una seal pequea en
se transmite luz a un fototubo para registrar la absorbancia la zona a ,.
del colorante que se enlaza a cada fraccin. Por lo general, Con frecuencia la informacin obtenida por cuanti-
ficacin de cada fraccin es casi igual a la obtenida por
inspeccin visual. La gran ventaja de la electroforesis en
comparacin con la cuantificacin de protenas especfi
cas es la visin global que ofrece. El patrn electrofor
tico puede dar informacin acerca de los incrementos y
decrementos relativos dentro de la poblacin de protenas,
I as como informacin acerca de la homogeneidad de una
fraccin.
Es probable que el hallazgo ms significativo de un
patrn electrofortico sea la enfermedad de inmunoglobu-
I k 2
<
lina monoclonal. La exploracin densitomtrica mostrar
un mximo definido si el incremento en las inmunoglobu-
te linas es un resultado de un incremento m onoclonal (fig. 8 -
I
* I 13B). Un pico en la regin y, P, o, algunas veces, oq seala
" u la necesidad de examinar las inmunoglobulinas y observar
Ul I signos clnicos en la mielomatosis. De igual manera, una
I * Q) deficiencia en la inmunoglobulina predominante, IgG, se
ve como una tincin muy tenue en el rea y. Otro hallazgo
ii significativo es una disminucin en la antitripsina cq (fig.
8-13C ).
Il t En el sndrome nefrtico, el paciente pierde albmina
srica y protenas de bajo peso molecular en la orina. Tam
bin se pierde cierta cantidad de IgG. Al mismo tiempo,
ocurre un incremento en la macroglobulina cq, lipopro
tena p, componentes complemento y haptoglobina. Estos
FIGURA 8-12. Patrones electroforticos de protena srica en aga dos sucesos originan una disminucin drstica en la canti
rosa y acetato de celulosa. (A) Gel de agarosa, note la globulina y
dad relativa de albmina, y un incremento importante en
monoclonal: (B) acetato de celulosa. (Cortesa del Department of
Laboratory Medicine, The University of Texas M.D. Anderson Hospital,
las cantidades relativas de las fracciones de globulina oq y
Drs. Liu, Fritsche and Trujillo, Ms. McCIure, supervisor.) p (fig. 8-13D ).
CAPTULO 8 AMINOCIDOS Y PROTEINAS 209
Patrn de referencia
62% I
r
I
Cirrosis
Se observa un patrn inflamatorio que indica una condi les pequeas y diferenciar bandas inusuales o incrementos
cin inflamatoria cuando hay una disminucin en la alb sobresalientes de bandas normales que pueden disfrazar
mina y un incremento en las globulinas oq (glucoprotena se de gammapata monoclonal. Por ejemplo, en pacien
cida cq, antitripsina oq), globulinas oq (ceruloplasmina y tes con sndrome nefrtico, una banda incrementada de
haptoglobina) y la banda de globulina |3 (protena C reac macroglobuina oq en la regin oq se podra confundir con
tiva; fig. 8-13E ). Este tipo de patrn, conocido tambin una protena monoclonal migratoria tal como una gam
como patrn reactante d e ja se aguda, se ve en traumatismos, mapata de protena monoclonal IgA .38
quemaduras, infarto, malignidad y hepatopata. Los reac-
tantes de fase aguda se llaman as porque se incrementan E lectroforesis capilar
en el suero das despus del traumatismo o la exposicin La electroforesis capilar (EC) es una coleccin de tcni
a agentes inflamatorios. El fibringeno, la haptoglobina, cas en las que la separacin de molculas tiene lugar en
ceruloplasmina y amiloide A srico se incrementan varias capilares de slice combinada de dimetro pequeo. Los
veces, mientras que la PCR y la macrofetoprotena oq se capilares suelen ser de 30 a 50 cm de largo, con un dime
incrementan varios cientos de veces. La interleucina 1, un tro interno entre 25 y 100 qm. En la electroforesis de zona
factor protenico de leucocitos, es reconocida como un capilar, los capilares se llenan con una disolucin conduc
mediador importante de la sntesis de protenas de fase tora, por lo regular una disolucin amortiguadora acuo
aguda por hepatocitos. Estos reactantes de fase aguda al sa. Un extremo del capilar se conecta a tierra (extremo de
parecer desempean alguna funcin en los mecanismos deteccin) y el otro, el extremo de inyeccin de muestra,
inmunorreguladores. Las infecciones crnicas tambin se conecta con un suministro de energa de alto voltaje.
producen una disminucin en la albmina, pero el incre Cuando se aplica un voltaje positivo, las molculas de la
mento de globulina se encuentra en la fraccin y as como
en las fracciones cq, oq y p.
El patrn electrofortico de protenas sricas en la
Patrn de EAR normal
hepatopata muestra la disminucin en la concentracin
de albmina srica y el incremento en la globulina y. El
patrn en la cirrosis del hgado es bastante caracterstico,
con las anormalidades ya mencionadas; sin embargo, ade
ms, hay algunas globulinas y de movimiento rpido que
evitan la resolucin de las bandas de globulina |3 y y. Esto
se conoce como el puente |3-y de la cirrosis (fig. 8-13F).
En la hepatitis infecciosa, la fraccin de la globulina y
aumenta con el dao hepatocelular creciente. En la icteri
cia obstructiva, hay un incremento en las globulinas cq y |3. Zonas Protenas sricas
Algo que tambin se observa en la ictericia obstructiva es halladas en las zonas
una mayor concentracin de lipoprotenas, que es un indi 1. ZONA DE PREALBMINA -Prealbmina
cador de su origen biliar. ste es el caso en particular cuan 2. ZONA DE ALBMINA -Albmina
do hay poca o ninguna disminucin de la albmina srica. 3. INTERZONA DE ALBMINA-aj -Lipoprotena-a
(fetoprotena-a)
4. ZONA on -Antitripslna-ai,
Electroforesis p rotenica d e alta resolucin glucoprotena cida a r
La EPS estndar separa la protena en cinco zonas distin 5. INTERZONA a r a2 -Gc-globuilna, inhibidor
tas, que comprenden muchas protenas individuales. Al de inter-a-tripsina
antiquimotripsina-cq
modificar los parmetros electroforticos, estas fracciones
6. ZONA a2 -Macroglobulina-a2,
se pueden resolver en hasta 12 zonas. Esta modificacin,
haptoglobina
conocida como electroforesis de alta resolucin (EAR), se 7. INTERZONA o2-Pi -Globulina insoluble
lleva a cabo mediante un alto voltaje acoplado con un sis en fro (hemoglobina)
tema de enfriamiento en el aparato electrofortico y una 8. ZONA Pi -T ransferrina
disolucin amortiguadora ms concentrada. El medio de 9. INTERZONA pr p2 -Lipoprotena-|3
soporte que ms se emplea es gel de agarosa. Para obtener 10. ZONA p, -C3
los patrones de EAR, las muestras se aplican en gel de aga 11. ZONA -y! -IgA (fibringeno), IgM
(nmunoglobinas
rosa, se someten a electroforesis en una cmara enfriada
monoclonales,
mediante un bloque de gel, se tien y se inspeccionan de cadenas ligeras)
forma visual. Cada zona se compara con la misma zona en 12. ZONA 72 -IgC (protena C reactiva)
un patrn de referencia por intensidad de color, aparien (nmunoglobinas
cia, tasas de migracin y apariencia de bandas anormales o monoclonales,
regiones de densidad. Un patrn de EAR srico normal se cadenas ligeras)
muestra en la figura 8-14. Adems, los patrones se pueden Las protenas listadas entre parntesis se hallan normalmente en concentracin
demasiado baja para ser visibles en un patrn normal.
examinar con un densitmetro para obtener estimaciones
semicuantitativas de la protena hallada en cada zona. La FIGURA 8-14. Patrn electrofortico de alta resolucin del suero.
EAR es en particular til para detectar bandas monoclona (Cortesa de Helena Laboratories, Beaumont, TX.)
CAPTULO 8 AMINOCIDOS Y PROTENAS 211
ES T U D IO D E C A S O 8-5
disolucin amortiguadora con carga positiva fluyen hacia ms la lleva de nuevo de regreso a su punto de ninguna
el extremo de deteccin, que est conectado a tierra, y por carga, o su pl.
tanto es negativo en relacin con el extremo de inyeccin. Las aplicaciones clnicas del EIE han incluido la tipifica
El flujo neto de la disolucin amortiguadora se llama flu cin molecular de deficiencias de antitripsina a , determi
jo electroosmtico (FEO ). Cuando se inyecta la muestra, nacin de variantes genticas de enzimas y hemoglobinas,
las molculas tendrn una tendencia a moverse hacia el deteccin de paraprotenas en suero y bandas oligoclona-
extremo detector (negativo) del capilar debido al FEO ; sin les en LCR y determinaciones de isoenzimas.
embargo, las molculas con carga negativa en la muestra
tendrn tambin una tendencia a migrar de nuevo hacia el M todos inm unoquim icos
extremo inyector (positivo). Esto se conoce como movili Las protenas especficas se pueden identificar mediante
dad electrofortica. El FEO es por lo general ms fuerte que inmunoensayos inmunoquimicos en los que se mide la reac
la movilidad electrofortica y todos los iones (carga posi cin de la protena (antgeno) y su anticuerpo. Los mtodos
tiva, neutros, y carga negativa) migrarn hacia el extremo con varias modificaciones de este principio son R1D, inmu-
detector pero con diferentes movilidades netas con base en noelectroforesis (IEF), electroforesis por inmunofijacin,
el tamao y las diferencias de carga. Las molculas separa electroinmunodifusin, inmunoturbidimetra e inmunone-
das se detectan por su absorbancia cuando pasan por una felometra. Estas tcnicas se explican en el captulo 6 , Inmu
ventana pequea cerca del extremo de deteccin del capi noensayos y tcnicas con sonda de cido nucleico.
lar. El uso de capilares de dimetro pequeo permite que
el calor se disipe de manera efectiva, lo que significa que
Protenas en otros lquidos corporales
se pueden emplear voltajes de operacin mayores y, por
tanto, los tiempos de anlisis son ms rpidos. Adems, el Las clases de lquidos corporales que se estudian por su
tamao de muestra requerido es pequeo (nanolitros). contenido de protenas han aumentado. Esto es en parte
un resultado de la mayor sensibilidad de los mtodos de
E n fo q u e isoelctrico prueba disponibles en la actualidad. Esta seccin incluye
El enfoque isoelctrico (E1E) es la electroforesis de zona una descripcin de los dos fluidos cuyo contenido de pro
que separa las protenas con base en el pl. El EIE emplea tenas se estudia con ms frecuencia: orina y LCR.
potencia constante y poliacrilamida o gel de agarosa, que
contiene un gradiente de pH. El gradiente de pH se esta Protena u rin aria
blece mediante la incorporacin de polianiones y poli- La mayor parte de las protenas halladas en la orina provie
cationes pequeos (anfolitos) en el gel. Los pl variantes nen de la sangre; sin embargo, las protenas urinarias tam
de los poliiones provocan que, en presencia de un campo bin se originan del rin y el tracto urinario, y de fuentes
elctrico, busquen su lugar en el gradiente y permanezcan extraas con la vagina y la prstata. Las protenas en la
all. El gradiente de pH puede variar de 3.5 a 10. sangre aparecen en la orina porque pasan por el glomrulo
Cuando una protena se somete a electroforesis en el renal y no las reabsorben los tbulos renales. Las pruebas
gel, migrar a un lugar en el gel donde el pH corresponde cualitativas para proteinuria se llevan a cabo por lo regular
a su pl. La protena recibe el enfoque all porque, si debe con una tira de prueba de reactivo. Estos mtodos se basan
difundirse en alguna direccin, deja su pl y gana una carga en el cambio en la respuesta de un colorante indicador en
neta. Cuando esto ocurre, la corriente isoelctrica una vez presencia de protena, conocido como error de protena de
212 PARTE II CORRELACIONES CLNICAS Y PROCEDIMIENTOS ANALTICOS
indicadores. En un pH cido, el indicador que es amarillo mtodo es casi 10 veces ms sensible que el mtodo de
en presencia de protena, avanza por varios tonos de verde biuret. Lowry y asociados incrementaron las sensibilidad
y por ltimo a azul a medida que se incrementa la concen de la reaccin de Folin-Ciocalteau al incorporar una reac
tracin de protena. Una concentracin de protena de 6 cin de biuret como paso inicial. Despus de la unin del
mg/dl o mayor produce un cambio de color. Cu2+ con los enlaces peptdicos, se aade el reactivo de
La mayor parte de los ensayos cuantitativos se llevan a Folin-Ciocalteau. Cuando se oxida el complejo de Cu2"
cabo en muestras de 12 o 24 h. El tiempo de 24 h toma en protena, se reduce el reactivo, y se forman los cromge-
cuenta los cambios rtmicos circadianos en la excrecin nos azul de tungsteno y azul de molibdeno. Esto incre
a ciertas horas del da. El paciente debe evacuar, vaciar menta la sensibilidad a 100 veces ms que la del mtodo
por completo la vejiga y desechar esta orina. La orina se de biuret solo. Otra modificacin emplea un complejo de
colecta desde ese momento durante las 24 h siguientes. Al rojo de pirogalol-molibdato que reacciona para producir
final del perodo de 24 h, la vejiga se vaca por completo y un complejo azul prpura. Este procedimiento se automa
esa orina se incluye en la muestra. Se mide con precisin tiza sin dificultad.
el volumen de la muestra programada y se registra. Los Los mtodos de enlace de colorante tambin se han
resultados se expresan por lo general en trminos del peso empleado para determinar el contenido de protena total
de protena por 24 h calculando la cantidad de protena de fluidos corporales. Los mtodos estn disponibles con
presente en el volumen total de orina colectada durante colorantes como azul de Coomassie y Ponceau S. En el
este tiempo. cuadro 8-8 se resumen los distintos mtodos para la medi
Se han propuesto varios mtodos para la determinacin cin de protena total urinaria .39
de protena total en la orina y otros lquidos corporales, Los valores de referencia o intervalos para protenas uri
entre otros la medicin de la turbidez cuando las protenas narias son muy dependientes del mtodo, y varan de 100
urinarias se mezclan con un cido orgnico aninico como a 250 mg/24 horas. Debido a la facilidad de uso, velocidad
el cido sulfosaliclico, ATC o cloruro de bencetonio. Estos y sensibilidad, las tcnicas empleadas con ms frecuencia
mtodos son sensibles, pero el reactivo no reacciona igual en la actualidad son los procedimientos turbidimtricos.
con cada fraccin de protena. Esto es cierto en particular Im portancia fisiolgica de la proteinuria. La proteinu
para el cido sulfosaliclico, que produce cuatro veces ms ria en la enfermedad renal se puede clasificar como resul
turbidez con la albmina que con la globulina a. tante de disfuncin glomerular o tubular. La proteinuria
Un mtodo que se considera que da resultados ms exactos glomerular es una consecuencia de prdida de integridad
consiste en la precipitacin de protenas de orina, disolucin de la membrana glomerular, que normalmente evita que
del precipitado de protena y formacin de color con reactivo las protenas pasen a la orina debido a su gran peso m ole
de biuret. Otro procedimiento qumico para protena urinaria cular. En la proteinuria glomerular selectiva temprana, las
emplea el reactivo de Folin-Ciocalteau, que es una disolucin protenas a las que se debe el incremento suelen ser alb
de cido fosfotungstomolbdico, llamado con frecuencia reac mina (> 8 0 % ) y transferrina. Cuando la lesin glomerular
tivo de fenol porque oxida compuestos fenlicos. El reactivo se hace ms grave, la membrana se vuelve no selectiva, y
cambia de color de amarillo a azul durante la reaccin con las protenas de todos los tamaos, incluso las inmunoglo-
tirosina, triptfano y residuos de histidina en la protena. Este bulinas, pasan a la orina. El dao a la membrana glomeru-
Mtodos turbidimtricos Las protenas precipitan como finas partculas, Rpido, fcil de usar; sensibilidad
(cido sulfosaliclico, la turbidez se mide espectrofotomtricamente desigual para protenas individuales
cido tricloroactico o
cloruro de bencetonio)
Biuret Las protenas se concentran por precipitacin, Exacto
se disuelven de nuevo en lcali, luego
reaccionan con Cu2+; el Cu2+ forma un
complejo coloreado con los enlaces peptdicos
Folin-Lowry Reaccin de biuret inicial; oxidacin de tirosina, Muy sensible
triptfano y residuos de histidina por reactivo
fenlico de Folin (mezcla de cidos
fosfotngstico y fosfomolbdico): medicin
del color azul resultante
Enlace a colorante (azul Enlace de protena a colorante, causa Linealidad limitada; sensibilidad
de Coomassie, Ponceau S cambio en el mximo de absorcin desigual para protenas individuales
CAPTULO 8 AMINOCIDOS Y PROTENAS 213
ES T U D IO D E C A S O 8-6
6 1500 Preguntas
8 1300 1. Cul es la causa ms probable de concentracin
10 1200 elevada de protenas?
12 1100 2. Qu otros resultados soportan esta conclusin?
14 900 3. Por qu es elevada la concentracin de US?
lar ocurre en enfermedades como diabetes, amiloidosis y excede la capacidad absortiva de un tbulo con funcio
trastornos de disglobulinemia y colgeno. La presencia de namiento normal. En la proteinuria tubular, las molculas
agentes txicos en la sangre, como mercurio y herona, de protena pequeas que pasan normalmente por el glo-
pueden dar como resultado tambin prdida de integridad mrulo y son reabsorbidas, como microglobulina f>2 (PM,
molecular. Un indicador inicial de disfuncin glomerular 1 1 8 0 0 ), protena de enlace a retinol (PM, 2 1 0 0 0 ) y micro-
es la presencia de microalbuminuria. El trmino m icroal- globulina a , (PM, 3 0 0 0 0 ), aparece en la orina.
buminuria se emplea para describir las concentraciones de La proteinuria por sobreflujo es una sobreabundancia
albmina en la orina que son mayores de lo normal pero de protenas del suero que aparece en concentraciones tan
no detectables con ensayos comunes de tira reactiva con altas en el filtrado glomerular que se supera la capacidad
orina (concentraciones de albmina menores que el lmite de los tbulos para reabsorberlas. Este tipo de proteinu
de deteccin inferior). Los estudios de pacientes con dia ria se tipifica mediante la concentracin incrementada de
betes mellitus muestran que la microalbuminuria precede cadenas ligeras de inmunoglobulina en mieloma mltiple
a la nefropata relacionada con la diabetes, en particular (protena de Bence Jones). La determinacin de protenas
en la diabetes tipo 1 (diabetes mellitus dependiente de especficas produce mucho ms informacin que la prote
insulina ).40 El avance de la microalbuminuria a nefropata na urinaria total, en particular en el estudio de proteinuria
clnica se puede retrasar con terapia intensiva para nor tubular.
malizar la glucosa sangunea y la tensin sangunea. Por Para determinar el tipo que se excreta, la mayor parte
tanto, se recomienda que se realice un anlisis anual de de los mtodos requiere concentracin inicial de la orina.
microalbuminuria con los enfermos de diabetes. La tasa de Esto se lleva a cabo por precipitacin, ultrafiltracin, dili
excrecin normal de albmina es < 2 0 ug/min o < 3 0 mg/ sis o tcnicas de filtracin en gel. La orina se puede someter
da. La microalbuminuria se puede medir por radioinmu- entonces a electroforesis por un mtodo similar al descrito
noensayo, inmunodifusin radial, inmunonefelometra e para el suero. La medicin cuantitativa de protenas de ori
inmunoensayo enzimtico. na especficas se puede hacer mediante el uso de mtodos
La proteinuria tubular es un resultado de los tbulos inmunoqumicos, como radioinmunoensayo, inmunodifu
renales que son incapaces de llevar a cabo su funcin usual sin radial, electroinmunoensayo e inmunonefelometra.
de reabsorcin como resultado de disfuncin, o porque la Una protena que por lo comn se halla en la ori
cantidad de protena que aparece en el lquido tubular na pero no en el suero es la protena de Tamm-Horsfall,
214 PARTE II CORRELACIONES CLNICAS Y PROCEDIMIENTOS ANALTICOS
ES T U D IO D E C A S O 8-7
una mucoprotena producida en los tbulos renales. Es albmina srica es menor que 2 .7 a 7.3. Un valor mayor
el constituyente protenico principal de cilindros urina que ste indica que el incremento en la albmina del LCR
rios. Su concentracin en la orina es 40.0 mg/da. Una IgA provino del suero debido a una barrera hematoenceflica
(secretoria) se produce tambin en el rin, y se excretan daada. Los valores de protena de LCR bajos se hallan en
1.1 mg/dla. el hipertiroidismo y cuando se fuga lquido del SNC.
Aunque las concentraciones de protena total en el LCR
P rotenas d e lquido cefalorraqu deo son informativas, el diagnstico de trastornos especficos
El LCR se forma en el plexo coroideo de los ventrculos requiere medicin de cada una de las fracciones de prote
del cerebro por ultrafiltracin de sangre plasmtica. La na. El patrn de tipos de pro tena presentes se puede ver
medicin de protena es una prueba que se requiere en el por electroforesis del LCR que haya sido concentrado casi
LCR, adems de la concentracin de glucosa y el recuento cien veces. Esto se puede llevar a cabo en acetato de celu
diferencial, cultivo y sensibilidad. El intervalo de referen losa o gel de agarosa. El patrn obtenido normalmente del
cia aceptado para pacientes entre 10 y 40 aos de edad es LCR lumbar del adulto muestra prealbmina, una banda
15 a 45 mg/dl de protena de LCR. de albmina sobresaliente, globulina cq compuesta sobre
La protena total de LCR se puede determinar mediante todo de antitripsina oq, una banda ex, que consiste prin
varios de los mtodos qumicos y pticos ms sensibles cipalmente de haptoglobina y ceruloplasmina, una banda
mencionados antes en la explicacin sobre protenas uri Pj constituida de transferan, y una transferrina especfica
narias. Los procedimientos empleados con ms frecuen de LCR que es deficiente en carbohidrato, conocida como
cia son turbidimtricos con ATC, cido sulfosaliclico con protena T, en la zona P ,. La globulina presente en la banda
sulfato de sodio o cloruro de bencetonio. Tambin estn y es por lo regular IgG con una pequea cantidad de IgA.
disponibles mtodos de enlace a colorante (es decir, azul Los patrones electroforticos de LCR de pacientes con
brillante de Coomassie), una reaccin de biuret cintica y esclerosis mltiple tienen mltiples bandas distintas en la
el mtodo de Lowry con un reactivo fenlico de Folin. zona y. Esto se llama distribucin oligoclonal. Ms de 90%
Importancia fisiolgica del anlisis de protena de de pacientes con esclerosis mltiple tienen bandas oligo-
LCR. Las protenas de LCR total incrementadas anormal clonales, aunque las bandas tambin han sido encontradas
mente se pueden hallar en condiciones en las que hay en enfermedad neurolgica inflamatoria e infecciosa. La
una mayor permeabilidad de la barrera endotelial capilar identificacin de bandas discretas en la regin y que estn
a travs de la cual ocurre la filtracin. Ejemplos de tales presentes en el LCR pero no en el suero se relacionan con la
condiciones incluyen meningitis bacteriana, viral y fn- produccin de IgG en el LCR, un hallazgo caracterstico de
gica; golpeteo traumtico; esclerosis mltiple; obstruc las enfermedades de desmielinizacin, como la esclerosis
cin; neoplasma; herniacin de disco e infarto cerebral. mltiple. Estas bandas no se pueden ver en la electroforesis
El grado de permeabilidad se puede evaluar midiendo la rutinaria de acetato de celulosa sino requieren una tcnica
albmina de LCR y comparndola con la albmina srica. de alta resolucin en la que suele emplearse agarosa.
La albmina suele emplearse como protena de referencia La concentracin alta de IgG en el LCR no es nica
para permeabilidad porque no se sintetiza en el SNC. El para la esclerosis mltiple. Debido a que el incremento en
valor de referencia para la relacin de albmina de LCR/ IgG de LCR puede resultar de la sntesis intratecal o per
CAPTULO 8 AMINOCIDOS Y PROTENAS 215
ES T U D IO D E C A S O 8-8
el fibringeno, ayudan en el mantenimiento de la hemosta mediante electroforesis, que emplea las caractersticas de
sis. Las concentraciones bajas de protena total pueden ser carga de la protena por separacin. La EPS rutinaria dis
un resultado de prdida excesiva, sntesis reducida o cata pone las protenas en cinco bandas: la albmina viaja ms
bolismo acelerado, mientras que las concentraciones altas lejos hacia el nodo, seguida de las globulinas a p a 2, p y
se relacionan con deshidratacin o produccin excesiva. y. La EAR separa la protena en 12 zonas. La electroforesis
El mtodo que ms se usa para medir las concentra capilar permite la separacin ms rpida.
ciones de protena srica total es la reaccin de biuret, en La protena se puede medir tambin en otros lquidos
la cual los iones cpricos se acomplejan con dos o ms corporales. El dao glomerular o la disfuncin tubu
enlaces peptdicos. Para determinar la fraccin de alb lar origina concentraciones altas de protenas urinarias.
mina, las tcnicas de enlace de colorante se emplean con La protena de LCR incrementada de manera anormal
VBC o PBC. El colorante, cuando se une a la albmina, se encuentra en condiciones donde hay una mayor per
es un color distinto al colorante libre. El fraccionamiento meabilidad de la barrera endotelial capilar o aumento en
adicional de las protenas sricas se puede llevar a cabo la sntesis intratecal.
P R E G U N T A S DE R E P A S O
9. Se obtiene el siguiente patrn de electroforesis de pro 12. La alta concentracin de protena total srica con con
tenas sricas: centraciones altas de albmina y globulinas suelen
albmina: reducida observarse en:
a) Macroglobulinemia de Waldenstrm.
globulinas cq y cq: incrementadas
b) Glomerulonefritis.
globulinas y: normales c) Cirrosis.
d) Deshidratacin.
De cules de las siguientes condiciones es caracters
tico este patrn? Relacione la protena srica de la columna A con su fun
a) Cirrosis. cin especfica en la columna B:
b) Inflamacin aguda (respuesta prim aria).
Columna A Columna B
c) Sndrome nefrtico.
d) Gammapata. 13. La transferrina_ a) transporta cobre
10. Una de las ventajas de la electroforesis de alta reso 14. La haptoglobina _ b ) inhibe enzimas proteo-
lucin en agarosa sobre la electroforesis de corriente lticas
menor es:
15. La anti tripsina a . c) es un factor en la for
a) Los procedimientos de alta resolucin detectan
macin de un cogulo
bandas monoclonales y oligoclonales a concen
in vivo
traciones ms bajas.
b) Se requiere un volumen de muestra menor. d) transporta hierro
c) Los resultados se obtienen con ms rapidez.
e) se une con hemoglobi
d) Se puede aplicar ms muestra al medio de soporte.
na libre
11. Cuando se disuelve una pro tena en una disolucin
f ) regula la concentracin
amortiguadora, cuyo pH es ms alcalino que el pl, y
muscular
se pasa una corriente elctrica por la disolucin, la
protena actuar como: g) se combina con antge
a) Un anin y migrar hacia el nodo. nos especficos
b) Un catin y migrar hacia el ctodo.
c) Un anin y migrar al ctodo. h) es una catalizador en el
d) Una partcula cargada y no se mover. ciclo de la urea
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218 PARTE II CORRELACIONES CLNICAS Y PROCEDIMIENTOS ANALTICOS
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CAPTULO
Compuestos de
nitrgeno no protenico
Elizabeth L. Frank 9
C O N T E N I D O DE L C A P T U L O
O B J E T I V O S
Al completar este captulo, el laboratorista clnico Expresar los requisitos de recoleccin de muestra,
podr: transporte y almacenaje necesarios para determi
Listar las sustancias de nitrgeno no protenico en naciones de urea, creatinina, creatina, cido rico
la sangre y reconocer sus estructuras qumicas y y amoniaco.
concentraciones fisiolgicas relativas. Explicar los mtodos de uso comn para la deter
Describir la biosntesis y excrecin de urea, creati minacin urea, creatinina, creatina, cido rico y
nina, creatina, cido rico y amoniaco. amoniaco en plasma y orina. Identificar fuentes de
Describir las condiciones clnicas y metablicas error y variabilidad en estos mtodos y describir
principales relacionadas con las concentraciones los efectos de las mediciones de laboratorio en el
plasmticas incrementadas y reducidas de urea, servicio clnico.
creatinina, creatina, cido rico y amoniaco. Reconocer los intervalos de referencia para urea,
Describir el uso de la relacin de nitrgeno de creatinina, cido rico y amoniaco en plasma y orina.
urea/creatinina para distinguir entre causas de Expresar los efectos de la edad y gnero en estos
uremia prerrenal, renal y posrenal. valores.
Relacionar la solubilidad del cido rico con las Sugerir posibles condiciones clnicas relacionadas
consecuencias patolgicas del cido rico plasm con los resultados, dados valores del paciente para
tico incrementado. urea, creatinina, cido rico y amoniaco, adems del
Describir los efectos txicos relacionados con historial clnico.
una concentracin incrementada de amoniaco
plasmtico.
219
220 PARTE II CORRELACIONES CLNICAS Y PROCEDIMIENTOS ANALTICOS
___________________________________________ T R M I N O S C L A V E
Urea 45
Aminocidos 20
cido rico 20
Creatinina 5
Creatina 1 -2 h 2n nh2
El flujo sanguneo renal reducido causa azoem ia prerre- lo que causa una relacin alta de N de urea/creatinina.
nal. Menos sangre y, por tanto, menos urea se entregan al En condiciones posrenales se observa por lo comn una
rin; y, en consecuencia, se filtra menos urea. Los factores relacin alta de N de urea/creatinina con una concentra
causantes son insuficiencia cardaca congestiva, choque, cin de creatinina incrementada. Una relacin baja de N
hemorragia, deshidratacin y otros factores que dan como de urea/creatinina se observa en condiciones relacionadas
resultado una disminucin importante en el volumen san con produccin reducida de urea, como ingestin baja de
guneo. La cantidad de metabolismo de pro tena tambin protenas, necrosis tubular aguda y hepatopata grave.
causa cambios prerrenales en la concentracin de urea
en la sangre. Una dieta con alto contenido de protena o M todos analticos
catabolismo protenico incrementado, como ocurre en la
fiebre, enfermedad mayor, estrs, terapia con corticosteroi- Las mediciones de urea se realizaron al principio en un filtrado
des y hemorragia gastrointestinal, pueden incrementar la libre de protenas de sangre total y con base en la medicin de
concentracin de urea. La concentracin de urea plasm la cantidad de nitrgeno. Los mtodos analticos actuales han
tica se reduce durante perodos de baja ingestin de pro retenido esta costumbre y, por lo comn, la urea se expresa
tenas o sntesis incrementada de stas, como durante el en trminos de la concentracin de nitrgeno en vez de la
embarazo tardo y la infancia. concentracin de urea. La concentracin de nitrgeno de
La funcin renal reducida causa un incremento en la urea se puede convertir a concentracin de urea multiplican
concentracin de urea plasmtica como resultado de la do por 2.14, como se muestra en la ecuacin 9-1.
excrecin comprometida de urea. Las causas renales de
aumento de urea incluyen insuficiencia renal aguda y cr
nica, nefritis glomerular, necrosis tubular y otra enferme 1 mg de N de urea ^ 1 mmol N x 1 mmol urea
dad renal intrnseca (vase el captulo 24, Funcin renal). di 14 mg N 2 mmol N
La azoem ia posrenal puede ser debida a obstruccin del
60 mg urea 2.14 mg urea
flujo de orina en cualquier parte del tracto urinario por x -------= --------- T------ (Ec 9-1)
clculos renales, tumores de la vejiga o prstata, o infec 1 mmol urea di
cin grave.
Las causas principales de concentracin de urea plasmti La concentracin de nitrgeno de urea en miligramos
ca reducida son ingestin reducida de protenas y enfermedad por decilitro se puede convertir a concentracin de urea
heptica grave. Las condiciones que afectan a la concentra en milimoles por litro al multiplicar por 0.36.
cin de urea plasmtica se resumen en el cuadro 9-2. Se han empleado dos mtodos analticos para evaluar
El clculo de la relacin nitrgeno de urea/creatinina, la urea. El ms antiguo y el que se usa con ms frecuencia
que normalmente es 10:1 a 20 : 1, ayuda a la diferenciacin conlleva la hidrlisis de urea mediante la enzima ureasa
de la causa de concentracin anormal de urea. Las condi (amidohidrolasa de urea, EC 3 .5 .1 .5 ), seguida de la cuan-
ciones prerrenales tienden a aumentar la urea plasmtica, tificacin de ion amonio (NH4+) producido en la reaccin.
mientras que la creatinina plasmtica permanece normal, Con los primeros mtodos colorim tricos se empleaba el
reactivo de Nessler o la reaccin de Berthelot con nitropru-
siato para detectar NH++.5 El mtodo cintico ms comn
CUADRO 9-2. CAUSAS DE CONCENTRACIN DE
empleado clnicamente acopla la reaccin de ureasa con
UREA PLASM TICA ANORMAL
la deshidrogenasa de L-glutamato (GLDH, EC 1.4.1.3) y
Concentracin incrementada mide la tasa de desaparicin del dinucletido de nicotina-
mida y adenina (NADH reducido) a 3 4 0 nm (fig. 9 -2 ).6 Se
Prerrenal Insuficiencia cardaca congestiva
ha descrito una modificacin de este mtodo con ureasa
Choque, hemorragia bacteriana para medir urea en muestras de orina .7
Deshidratacin El amonio de la reaccin de ureasa se puede medir tam
bin por el cambio de color relacionado con un indicador
Catabolismo de protena
incrementado
Terapia de corticosteroides
Renal Insuficiencia renal aguda y crnica
Ureasa
Nefritis glomerular U rea 2 NH4+ + HC03~
de pH. Este mtodo ha sido incorporado en instrumentos El ensayo enzimtico acoplado de ureasa/GLDH realizado
que usan reactivos lquidos, un formato de pelcula multi- en un filtrado libre de protena ha sido usado como un
capas, y tiras de reactivo .8'10 mtodo de referencia .17 Los mtodos analticos se resu
Se puede usar un electrodo para medir la tasa de incre men en el cuadro 9-3.
mento en la conductividad cuando se producen iones
amonio de la urea .11 Debido a que se mide la tasa de cam Requisitos de la m uestra y sustancias
bio en la conductividad, la contaminacin con amoniaco
que interfieren
no es un problema como con otros mtodos. Se han desa
rrollado mtodos potenciomtricos en los que se usa un La concentracin de urea se puede medir en plasma, suero u
electrodo selectivo de iones amonio .12 orina. Si se recolecta plasma, se deben evitar los iones amo
La urea puede medirse por condensacin con diacetil nio y las concentraciones altas de citrato de sodio y fluoruro
monoxima con la presencia de un cido fuerte y un agente de sodio. El citrato y el fluoruro inhiben la ureasa. Aunque
oxidante para formar un derivado de diacina amarillo .13 El el contenido de protena de la dieta afecta la concentracin
hierro (III) y la tiosemicarbacida se adicionan para esta de urea, el efecto de una sola comida que contenga protena
bilizar la reaccin mixta a color .14 La ventaja principal de es mnimo y, por lo regular, no se requiere muestra de ayu
este mtodo directo de medicin de urea es que el amonia no. Se recomienda una muestra no hemolizada. La urea es
co no interfiere. En otro mtodo directo la urea reacciona susceptible a descomposicin bacteriana, as que se deben
con el o-ftalaldehdo y la naftiletilendiamina para formar refrigerar las muestras (en particular orina) que no se vayan
un cromgeno que se puede medir .15 a analizar en pocas horas. Las muestras de orina programa
Se ha propuesto la espectrometra de masa con dilu da se deben refrigerar durante el perodo de recoleccin.
cin de istopo como un mtodo definitivo para urea .16 Los mtodos para plasma o suero pueden requerir modifi-
ES T U D IO D E C A S O 9-1
Un varn de 65 aos de edad es admitido por primera vez CUADRO 9-1.1 DE ESTUDIO DE CASO.
para tratamiento de enfermedad pulmonar obstructiva RESULTADOS DE LABORATORIO
crnica, insuficiencia renal y cardiomegalia significativa. (PRIMERA ADMISIN) __________
Los datos de laboratorio pertinentes en la admisin (5/31)
se muestran en el cuadro 9-1.1 de estudio de caso. PRUEBA 5/31 6/3 6/7
Debido a la dificultad respiratoria grave, el paciente N de urea, mg/dl 45 24 11
fue transferido a la unidad de cuidado intensivo, se le
Creatinina, mg/dl 1.8 1.3 0.9
coloc en un respirador y se le administraron diur
ticos y lquidos intravenosos (IV) para promover diu N de urea/creatinina 25 18.5 12.2
resis. Este tratamiento trajo una mejora significativa pH 7.22 7.5
en el gasto cardiaco y la funcin renal, como muestran
PC02, mmHg 74.4 48.7
los resultados de laboratorio varios das despus (6/3).
Despus de dos das ms en el respirador con terapia P02, mmHg 32.8 57.6
IV, la funcin renal del paciente volvi a la normalidad Oz, sat, % 51.3 91.0
y, cuando se le dio de alta, sus resultados de laboratorio
fueron normales (6/7).
El paciente fue admitido de nuevo 6 meses despus CUADRO 9-1.2 DE ESTUDIO DE CASO.
debido a que su familia no pudo reanimarlo. En la admi RESULTADOS DE LABORATORIO
sin, el paciente present un corazn muy agrandado (SEGUNDA ADMISIN)___________________
con enfermedad pulmonar grave, insuficiencia cardiaca y
probable insuficiencia renal. Los estudios de laboratorio N de urea, mg/dl 90
en la admisin fueron como se muestra en el cuadro 9- Creatinina, mg/dl 3.9
1.2 de estudio de caso. Se hicieron numerosos intentos
para mejorar la funcin cardiaca y pulmonar del pacien cido rico, mg/dl 1 2 .0
MTODOS ENZiMTICOS
Ureasa
Los mtodos emplean un Urea + H2Q -------- * 2NH4+ + CO3 - 2
primer paso similar
Mtodos qumicos
No especfico; emplea
H+ reactivos txicos
Monoxima de diacetilo Monoxima de diacetilo+H 20 ---- * diacetilo +HONH 2
Calor
H+ Empleado en instru
Urea+ diacetilo ---- diacina (am arilla) +2H20 mentos automatizados;
H+ ninguna interferencia
o-Ftaldehdo Urea + o-ftalaldehdo ---- isoindolina de NH3, interferencia de
H' sulfamidas
Isoindolina + N-(1-naftil)etilendiamina ---- > producto coloreado
cacin para uso con muestras de orina debido a la alta con La creatinina se libera hacia la circulacin a una tasa rela
centracin de urea y la presencia de amoniaco endgeno. tivamente constante, que se ha demostrado es proporcional a
una masa muscular individual. Se elimina de la circulacin por
Intervalo de referencia18 filtracin glomerular y se excreta por la orina. El tbulo prxi
mad secreta cantidades adicionales de creatinina. Los tbulos
Nitrgeno de urea renales pueden reabsorber tambin cantidades pequeas.19
Adulto Suero o plasma 6-20 mg/dl (2.1-7.1 La concentracin de creatinina plasmtica es una funcin
mmol/L de urea) de la masa muscular relativa, la tasa de recambio de creatina
Orina de 24 h 12 a 20 g/da (0.43-0.71 y la funcin renal. La cantidad de creatinina en la corriente
mol/da de urea) sangunea es razonablemente estable, aunque el contenido
protenico de la dieta afecta la concentracin plasmtica.
CREATININA/CREATINA Como resultado de la constancia observada de produccin
endgena, la determinacin de excrecin de creatinina ha
Bioqumica sido empleada como una medicin de la integridad de las
recolecciones de orina de 24 h en un determinado individuo,
La creatina se sintetiza sobre todo en el hgado a partir de
aunque puede ser que este mtodo sea poco confiable.20
arginina, glicina y metionina .4 Luego, es transportada a otro
tejido, como el msculo, donde se convierte en fosfocrea-
tina, que sirve como una fuente de alta energa. El fosfato
Correlaciones de enferm edad
de creatina pierde cido fosfrico, y la creatina pierde agua C reatinina
para formar creatinina, que pasa hacia el plasma. Las estruc La alta concentracin de creatinina se relaciona con la
turas de estos compuestos se muestran en la figura 9-3. funcin renal anormal, en particular cuando se relaciona
224 PARTE II CORRELACIONES CLINICAS Y PROCEDIMIENTOS ANALITICOS
h 2o
+ ATP
CK
ADP +
Creatinina
Fosfato de creatina
FIGURA 9-3. Interconversin de creatina, fosfato
CK = cinasa de creatina (EC 2.7.3.2) de creatina y creatinina.
con la funcin glomerular. La tasa d e filtracin glom erular expresa como sigue, donde UCr es concentracin de crea
(GFR) es el volumen de plasma filtrado (V) por el glom- tinina en la orina y PCr es la concentracin de creatinina
rulo por unidad de tiempo (t). en el plasma.
V C r C l^ ^ JL (Ec. 9-6)
GFR = - (Ec. 9-2)
t Pcfi
Suponiendo que se puede medir una sustancia, S, y es fil Por lo general, el aclaramiento de creatinina se expre
trada sin dificultad en el glomrulo, y los tbulos nunca la sa en unidades de ml/min, y se puede corregir por rea de
secretan o reabsorben, el volumen de plasma filtrado sera superficie corporal (vase el captulo 24, Funcin renal). El
igual a la masa de S filtrada (Ms) dividida entre su concen aclaramiento de creatinina sobrestima la TFG porque los
tracin plasmtica (Ps). tbulos renales reabsorben una pequea cantidad de creati
nina y secretan hasta 10% de creatinina de orina. Sin embar
V= ^ - (Ec. 9-3) go, el ACr provee una aproximacin razonable de TFG .21
De la ecuacin 9-6, se ve que la concentracin de
creatinina en plasma es inversamente proporcional al
La masa de S filtrada es igual al producto de su concen aclaramiento de creatinina. Por tanto, cuando aumenta
tracin en la orina (L7S) y el volumen de orina (VL,). la concentracin de creatinina plasmtica, disminuye la
TFG , lo que indica dao renal. Por desgracia, la creatinina
Ms = U sVu (Ec. 9-4) plasmtica es una marcador de cierta forma insensible y
existe la posibilidad de que no se incremente de manera
Si se conocen las concentraciones de S en orina y plas mensurable hasta que la funcin renal se haya deteriora
ma, el volumen de orina colectado y el tiempo en el que se do ms de 50% .4 La relacin observada entre la creatinina
recolect la muestra, se puede calcular la TFG. plasmtica y la TFG y la observacin de que las concen
traciones de creatinina plasmtica son de cierta manera
constantes y no afectadas por la dieta, hacen que la creati
G F R A (Ec. 9-5)
nina sea un buen analito para la evaluacin de la funcin
PSt
renal. Sin embargo, debido a las dificultades encontradas
El aclaram iento de una sustancia es el volumen de plas al analizar la cantidad pequea de creatinina que por lo
ma del cual se elimin esa sustancia por unidad de tiem regular est presente (vase la explicacin en M todos an a
po. La frmula para el aclaram iento de creatinina (CrCl) se lticos), es posible que la medicin de creatinina plasm-
CAPTULO 9 COMPUESTOS DE NITRGENO NO PROTENICO 225
ES T U D IO D E C A S O 9-2
N de urea/creatinina 9.4 * *
10.1
*
Glucosa, mg/dl 86 80 113
tica no provea sensibilidad suficiente para la deteccin de como acetoacetato, acetona, ascorbato, glucosa y piruva-
disfuncin renal leve. Han sido propuestos varios analitos, to. Se obtienen resultados ms exactos cuando la creati
incluso la cistatina C, para monitorear la T F G .22 nina en un filtrado libre de protena se absorbe en tierra
de Fuller (silicato de magnesio de alum inio) o reactivo
C rea tin a de Lloyd (silicato de aluminio de sodio), luego se eluye
En la enfermedad del msculo como distrofia muscular, y se hace reaccionar con picrato alcalino .25 Debido a que
poliomielitis, hipertiroidismo y traumatismo, las concen este mtodo es tardado y no se automatiza con facilidad,
traciones de creatina plasmtica y creatinina urinaria sue no se emplea de forma rutinaria.
len ser altas. Las concentraciones de creatinina plasmtica Se han empleado dos mtodos para incrementar la
por lo regular son normales en estos pacientes. La medi especificidad de mtodos de anlisis para creatinina: un
cin de cinasa de creatina se emplea para el diagnstico mtodo de Jaffe cintico y reaccin con varias enzimas. En
de enfermedad del msculo porque los mtodos analti el mtodo de Jaffe cintico, el suero se mezcla con picrato
cos para creatina no estn disponibles con facilidad en los alcalino y se mide la tasa de cambio en la absorbancia .26
laboratorios clnicos. En la enfermedad renal no aumenta Aunque este mtodo elimina algunos de los reactantes no
la concentracin de creatina plasmtica .19 especficos, est sujeto a interferencia por cetocidos a y
cefalosporinas .27 La bilirrubina y la hemoglobina pueden
causar un sesgo negativo, probablemente un resultado de
M todos analticos para creatinina
su destruccin en la base fuerte utilizada. Un estudio del
Los mtodos empleados con ms frecuencia para medir mtodo de Jaffe cintico y varios mtodos enzimticos
creatinina se basan en la reaccin de Jaffe descrita por indicaron que an se tiene que lograr la eliminacin de
primera vez en 1886.23 En esta reaccin, la creatinina interferencia en la medicin de la creatinina srica .28 El
reacciona con el cido pcrico en disolucin alcalina para mtodo de Jaffe cintico se emplea de forma rutinaria a
formar un cromgeno rojo-naranja. En 1919 Folin y Wu pesar de estos problemas porque no es caro, es rpido y
adoptaron la reaccin para la medicin de creatinina fcil de realizar.
sangunea .24 La reaccin es inespecfica y est sujeta a En un esfuerzo por incrementar la especificidad de la reac
interferencia positiva de un gran nmero de compuestos, cin de Jaffe, se han elaborado varios mtodos enzimdticos
226 PARTE II CORRELACIONES CLNICAS Y PROCEDIMIENTOS ANALTICOS
acoplados.2930 El mtodo con creatininasa (amidohidrolasa con 3,5-dinitrobenzoato .32 Este mtodo ha sido adaptado
de creatinina [EC 3 .5 .2 .1 0 ]), creatinasa (amidinohidro- con xito a una tira reactiva. Sin embargo, el color produ
lasa de creatina [EC 3.5.3.3]), oxidasa de sarcosina (EC cido es menos estable que el del cromgeno de Jaffe.ls
1.5.3.1) y peroxidasa (EC 1.11.1.7) ha sido adaptado para Se han desarrollado mtodos de cromatografa lquida de
uso en un analizador de placa seca .31 alta presin (CLAP). En uno de los mtodos se emplea el
Otro mtodo para el anlisis de creatinina ha sido la pretratamiento de la muestra con cido tricloractico para
medicin del color formado cuando la creatinina reacciona remover protena, cromatografa de intercambio inico y
OH
Creatina +picrato complejo rojo-anaranjado El adsorbente mejora la
Jaffe con adsorbente Creatinina en el filtrado libre de protena es adsorbida en tierra especificidad; mtodo de
de Fuiler (silicato de aluminio y magnesio); luego, se hace referencia considerado pre
reaccionar con picrato alcalino para formar un complejo coloreado viamente
Sesgo positivo de cido
Jaff sin adsorbente La creatinina en el filtrado libre de protena reacciona con ascrbico, glucosa, glu-
picrato alcalino para formar complejo coloreado tatin, a-cetocidos, cido
rico y cefalosporinas
Mtodos enzimticos
Requiere muestra grande;
. . Creatinina no se emplea de forma
Creatininasa-CK Creatininasa + H , 0 * Creatina
amplia
CK
Creatina + ATP fosfato de creatina + ADP
PK
ADP+ fosfoenolpiruvato * piruvato + ATP
LD
Piruvato + NADH + H+ lactato + NAD+
Adaptado para uso como
Creatininasa
Creatininasa-H20 2 Creatinina + H,0 Creatina mtodo de placa seca;
potencial para reemplazar
Creatinasa a Jaffe; ninguna interfe
Creatina + H20 sarcosina + urea
rencia del acetoacetato o
Oxidasa de sacosina cefalosporinas; algn sesgo
Sarcosina + 0 2 + H20 Glicina + CH20 + H20 2 positivo debido a iidocana
Peroxidasa
H20 2 + sustrato incoloro producto coloreado+ H20
Otros mtodos
cido 3,5-dinitrobenzoico
OH Empleado en tiras reacti
(DNBA) Creatinina + D N BA producto prpura
vas; producto coloreado
inestable
CLAP Cromatografa de fase inversa o de intercambio catinico
Altamente especfico;
mtodo de referencia
propuesto
CAPTULO 9 COMPUESTOS DE NITRGENO NO PROTENICO 227
deteccin ultravioleta (UV) de creatinina .33 Otro mtodo CUADRO 9-5. INTERVALOS DE REFERENCIA
combina la separacin por CLAP con determinacin enzi- PARA CREATININA EN PLASM A O SUERO mg/dl
mtica de concentracin de creatinina .34 Ambos mtodos (umol/L) _ _ _ _ _ _ _ _ _
han sido recomendados como mtodos de referencia para
POBLACIN JAFFE ENZIM TICO
creatinina srica. La espectrometra de masas con dilucin
de istopo ha sido propuesta como un mtodo definitivo .35 Adulto
El desarrollo y uso de mtodos ms exactos para crea 0 .5 -0 .8 (44-71)
Mujer 0.6-1.1 (53-97)
tinina plasmtica que tienden a dar valores menores ten
dr un efecto significativo en los resultados obtenidos Varn 0.9-1.3 (80-115) 0.6-1.1 (53-97)
para aclaramiento de creatinina porque los resultados para Nio 0.3-0.7 (27-62) 0 -0 .6 (0-53)
creatinina urinaria no estn sujetos a tantas interferencias
como la creatinina plasmtica. El uso de mtodos ms
especficos para la medicin de creatinina plasmtica pue
de dar como resultado tasas de aclaramiento en apariencia
Intervalo de referencia18
ms altas. Estos resultados requerirn interpretacin cui Los intervalos de referencia varan con el tipo de ensayo,
dadosa .21 Los mtodos analticos para creatinina se resu edad y gnero .18 La concentracin de creatinina disminuye
men en el cuadro 9-4. con la edad comenzando en la quinta dcada de la vida.
Los intervalos de referencia del suero se enumeran en el
Requisitos de la m uestra y sustancias cuadro 9-5.
que interfieren Creatinina
Adulto, m ujer Orina de 600 a 1 8 0 0 (5.3 a 15.9
La creatinina se puede medir en plasma, suero u orina.
24 h mg/da mmol/da)
Las muestras hemolizadas e ictricas se deben evitar en
Adulto, varn 800 a 2 0 0 0 (7.1 a 17.7
particular si se emplea un mtodo de Jaffe. Las muestras
mg/da mmol/da)
lipmicas pueden producir resultados errneos en algunos
mtodos. No se requiere una muestra de ayuno, aunque la
ingestin alta de protenas puede elevar de forma transito M todos analticos para creatina
ria las concentraciones sricas. La orina se debe refrigerar El mtodo tradicional para la medicin de creatina depen
despus de la recoleccin o congelar si se requieren ms de del anlisis de la muestra con un mtodo de Jaffe de
de 4 das de almacenaje .18 punto final para creatinina antes y despus de que se
caliente en disolucin cida. El calentamiento convierte a
Fuentes de error la creatina en creatinina y la diferencia entre las dos mues
tras es la concentracin de creatina. Las temperaturas altas
El ascorbato, glucosa, a-cetocidos y el cido rico pueden podran originar la formacin de cromgenos adicionales,
incrementar la concentracin de creatinina medida por la y la precisin de este mtodo es deficiente. Se han desa
reaccin de Jaffe, en particular a temperaturas superiores rrollado varios mtodos enzimticos; uno es el ensayo de
a 30C. Esta interferencia se reduce de forma importante creatininasa. Se omite la enzima inicial y la cinasa de crea
cuando se aplica una medicin cintica. Dependiendo de la tina (EC 2 .7 .3 .2 ), cinasa de piruvato (EC 2.1 .7 .40 ) y la
concentracin de los reactivos y el tiempo de medicin, la deshidrogenasa de lactato (EC 1.1.1.27) se acoplan para
interferencia de los a-cetocidos puede persistir en mtodos producir un producto coloreado mensurable .38 La creatina
de Jaffe cinticos. Algunas de estas sustancias interfieren en se puede medir mediante CLAE 39,40
los mtodos enzimticos para medicin de creatinina. La
bilirrubina causa un sesgo negativo en los mtodos de Jaffe
y enzimticos. El ascorbato interferir en los mtodos enzi CIDO RICO
mticos que emplean peroxidasa como reactivo .28 Bioqumica
Los pacientes que toman antibiticos de cefalosporina
pueden tener resultados elevados falsamente cuando se En los primates superiores, como humanos y simios, el
emplea la reaccin de Jaffe. Se ha demostrado que otros cido rico es el producto de descomposicin final del
frmacos incrementan los resultados de creatinina. La metabolismo de la purina .4 La mayor parte de los mamfe
dopamina, en particular, afecta tanto a los mtodos enzi ros tienen la capacidad para catabolizar purinas a alanto-
mticos como a los de Jaffe. La lidocana causa un sesgo na, un producto final ms soluble en agua. Esta reaccin
positivo en algunos mtodos enzimticos .36 se muestra en la figura 9-4.
Un estudio del mtodo de Jaffe cintico y varios mto Las purinas, como la adenosina y la guanina de la des
dos enzimticos indicaron que an se tiene que lograr la composicin de cidos nucleicos ingeridos o de la destruc
eliminacin de interferencia en la medicin de creatinina cin de tejido, son convertidas en cido rico, sobre todo
srica .28 El uso de una tcnica de ajuste de curvas multi- en el hgado. El cido rico es transportado en el plasma del
punto y no la determinacin tradicional de tiempo fijo de hgado a los riones, donde se filtra a travs del glomrulo.
dos puntos para calcular la concentracin de creatinina es La reabsorcin de 98 a 100% del cido rico en el filtrado
una solucin propuesta .37 glomerular ocurre en los tbulos proximales. Los tbulos
228 PARTE II CORRELACIONES CLINICAS Y PROCEDIMIENTOS ANALTICOS
H
-N
Uricasa NH2
-O 4- O2 2 H20 -O + C 0 2 2 H20 2
"NH
distales secretan pequeas cantidades de cido rico en la enfermedad renal crnica causa un aumento en la concen
orina. Esta ruta representa casi 70% de la excrecin diaria tracin de cido rico porque se deterioran la filtracin y
de cido rico. El resto se excreta hacia el tubo digestivo y la secrecin. Sin embargo, el cido rico no es til como
las enzimas bacterianas se encargan de degradarlo. indicador de la funcin renal porque muchos otros facto
Casi todo el cido rico en el plasma se presenta como res afectan su concentracin plasmtica. Las concentracio
urato monosdico. En el pH del plasma, el urato es rela nes de urato en el plasma arriba de 6 mg/dl se relacionan
tivamente insoluble; a concentraciones mayores que 6.4 con el desarrollo de complicaciones de gota (cuadro 9-6).
mg/dl, el plasma se satura. Como resultado, los cristales La concentracin alta de cido rico es secundaria a la
de urato se pueden formar y precipitar en el tejido. En la enfermedad de almacenaje de glucgeno (deficiencia de
orina a un pld < 5 .7 5 , el cido rico es la especie predomi glucosa- 6-fosfatasa, EC 3.1 .3 .9 ) y otras deficiencias enzi-
nante y se podran formar cristales de cido rico. mticas congnitas. Se producen cantidades excesivas de
metabolitos, como lactato y triglicridos, y compiten con
Correlaciones de enferm edad el urato para excrecin renal en estas enfermedades .19
El sndrome de Lesch-Nyhan es un trastorno gentico
Tres estados morbosos principales se relacionan con la ligado al cromosoma X (visto slo en varones) causado
concentracin plasmtica alta de cido rico: gota, cata por deficiencia completa de guanina hipoxantina fosforri-
bolismo incrementado de cidos nucleicos, y enfermedad bosiltransferasa (HGPRT, EC 2 .4 .2 . 8 ), una enzima impor
renal. La gota es una enfermedad hallada sobre todo en los tante en la biosntesis de purinas. La falta de esta enzima
varones y, por lo comn, se diagnostica entre los 30 y 50 evita la reutilizacin de bases de purina en la va de resca
aos de edad. Los pacientes tienen dolor e inflamacin de te de nucletido. La sntesis incrementada de nucletidos
las articulaciones a causa de la precipitacin de uratos de
sodio. En 20 a 30% de estos pacientes, la hiperuricem ia es
un resultado de la sobreproduccin de cido rico, aun
que la hiperuricemia puede ser exacerbada por una dieta CUADRO 9-6. CAUSAS DE CIDO RICO
rica en purina, frmacos o alcohol. La concentracin de ______________ PLASMTICO INCREMENTADO
cido rico plasmtico en estos pacientes es por lo regular
Mayor ingestin en la dieta
mayor que 6.0 mg/dl. Los pacientes con gota son muy sus
ceptibles a desarrollar clculos renales, aunque no todos Aum ento de la produccin de urato
los pacientes con concentraciones altas de urato srico Gota
presentan esta complicacin. En las mujeres, la concen
Tratamiento de enfermedad mieloproliferativa
tracin de urato aumenta despus de la menopausia. Las
con frmacos citotxicos
mujeres posmenopusicas pueden desarrollar hiperurice
mia y gota. En casos graves, los depsitos de uratos llama Excrecin reducida
dos tofos, se forman en el tejido y causan deformidades. Acidosis lctica
Otra causa comn de concentracin plasmtica alta de
cido rico es el metabolismo incrementado de ncleos de Toxemia de embarazo
clulas, como ocurre en pacientes con quimioterapia para Enfermedad de almacenaje de glucgeno
enfermedades proliferativas como leucemia, linfoma, mie tipo I (deficiencia de glucosa-6-fosfatasa)
loma mltiple y policitemia. El monitoreo de cido rico
Tratamiento con frmacos
en estos pacientes es importante para evitar nefrotoxici-
dad. El alopurinol, que inhibe a la oxidasa de xantina (EC Venenos: plomo, alcohol
1.1 .3 .2 2 ), una enzima en la via de sntesis de cido rico, Enfermedad renal
se emplea como tratamiento.
Defectos enzim tico de la va catabolftica
Los pacientes con anemia hemoltica o megaloblsti-
ca pueden exhibir concentracin alta de cido rico. La Sndrome de Lesch-Nyhan
CAPITULO 9 COMPUESTOS DE NITRGENO NO PROTENICO 229
de purina y del producto de degradacin, cido rico, da piedad se aprovechaba en los primeros procedimientos
como resultado concentraciones altas de cido rico en analticos para la determinacin de cido rico. El mtodo
plasma y orina .41 Sntomas neurolgicos, retraso mental ms comn de este tipo es el de Caraway, que se basa en
y automutilacin caracterizan a esta enfermedad bastante la oxidacin de cido rico en un filtrado libre de prote
rara. Las mutaciones en la sintetasa de fosforribosilpiro- na, con una reduccin posterior de cido fosfotngstico a
fosfato (EC 2.7.6.1) tambin causan que aumente la con azul de tungsteno .42 El carbonato de sodio provee un pH
centracin de cido rico .19 alcalino necesario para la formacin de color. Este mtodo
La hiperuricemia es una caracterstica comn de toxe- carece de especificidad.
mia de embarazo y acidosis lctica presumiblemente como Los mtodos en los que se emplea uricasa (oxidasa de
resultado de la competencia por sitios de enlace en los tbu urato, EC 1.7.3.3), la enzima que cataliza la oxidacin de
los renales. Las concentraciones altas se pueden encontrar cido rico a alantona, son ms especficos. En el ms
despus de la ingestin de una dieta rica en purinas (p. simple de estos mtodos se mide la absorcin diferencial
ej., hgado, rin, mollejas, mariscos) o una disminucin de cido rico y alantona a 293 nm .43 La diferencia en
importante en la ingestin diettica total como resultado absorbancia antes y despus de la incubacin con uricasa
de catabolismo tisular incrementado o inanicin. es proporcional a la concentracin de cido rico. Se ha
La hipouricem ia es menos comn que la hiperurice propuesto una modificacin de este mtodo como posi
mia y, por lo comn, es secundaria a hepatopata grave o ble mtodo de referencia .44 Las protenas pueden causar
reabsorcin tubular defectuosa, como en el sndrome de absorbancia de fondo alta en este mtodo, lo que reduce
Fanconi. La hipouricemia puede ser causada por quimio la sensibilidad. La interferencia negativa puede ocurrir a
terapia con 6 -mercaptopurina o azatioprina, inhibidores causa de la hemoglobina y xantina .45
de la sntesis de purina de novo, as como el sobretrata- Se han desarrollado mtodos con reacciones enzimticas
miento con alopurinol.19 acopladas para medir el perxido de hidrgeno produci
do cuando el cido rico es convertido en alantona .46,47
La peroxidasa o catalasa (EC 1.11.1.6) se emplea para
M todos analticos catalizar una reaccin de indicador qumico. El color pro
Como se muestra en la figura 9-4, el cido rico se oxida ducido es proporcional a la cantidad de cido rico en
fcilmente a alantona y, por tanto, puede funcionar como la muestra. Los mtodos enzimticos de esta clase han
un agente reductor en las reacciones qumicas. Esta pro sido adaptados para uso en analizadores por va hmeda
ES T U D IO D E C A S O 9-3
tradicionales y para analizadores de placa por va seca. La obtenidos por mtodos de peroxidasa. La hemolisis signi
bilirrubina y el cido ascrbico que destruyen perxido ficativa, con liberacin concomitante de glutatin, podra
pueden interferir. Las preparaciones de reactivos comer dar como resultado valores bajos. Se ha demostrado que
ciales suelen incluir ferrocianuro de potasio y oxidasa de frmacos como salicilatos y tiacidas increm entan los valo
ascorbato para reducir estas interferencias. res para cido rico .36
Se han elaborado mtodos de CLAP con varios tipos de El cido rico es estable en plasma o suero despus
colum na .48,49 Estos mtodos son sensibles y especficos; de que han sido eliminados los eritrocitos. Las muestras
podra ser necesario el tratamiento previo de la muestra de suero pueden ser puestas en refrigeracin durante 3
para eliminar protena. La espectrometra de masas con a 5 das .18
dilucin de istopo ha sido propuesta como un posible
mtodo definitivo .50 Los mtodos analticos se resumen Intervalo de referencia18
en el cuadro 9-7.
Los valores son un poco menores en nios y mujeres pos-
menopusicas.
Requisitos de la m uestra y sustancias
que interfieren
cido rico (mtodo de uricasa)
El cido rico se puede medir en plasma heparinizado, M ujer adulta Plasma 2.6 a 6.0 (0 .1 6 a 0.36
suero u orina. El suero se debe remover de las clulas lo o suero mg/dl mmol/L)
ms pronto posible para evitar la dilucin por contenido Varn adulto 0.5 a 7.2 (0.21 a 0.43
intracelular. La dieta puede afectar la concentracin de mg/dl mmol/L)
cido rico en general, pero una comida reciente no tiene Orina de 250 a 750 (1 .4 8 a 4.43
efecto importante y es innecesaria una muestra en ayuno. 24 h mg/da mmol/da)
Se debe evitar la lipemia total. Una concentracin alta de Nio Plasma 2.0 a 5.5 (0 .1 2 a 0.33
bilirrubina podra disminuir de modo falso los resultados o suero mg/dl mmol/L)
Na7CO,/OH
cido fosfotngstico Acido unco + H3PW12O40 + 0 2 1 al anto na + No especfico; requiere
azul de tungsteno + C 0 2 eliminacin de
protena
Mtodos enzimticos Muy especfico
, , Uricasa
Primer paso similar Acido rico + 0 2 + 2 H20 ---------- * alantona + C 0 2 + H20 2
Espectrofotomtrico Disminucin de absorbancia a 293 nm Posible mtodo de
referencia; interfieren
hemoglobina y
xantina
Catalasa
Enzimtico acoplado H20 2 + CH3OH ---------- H2CO + 2 H20
0) CH20 + 3 C5Hs0 2 + NH3 -------------- * 3 H20 -t-compuesto coloreado Por lo comn es un
mtodo sesgo negativo
agentes reductores
Peroxidasa
Enzim tico acoplado H20 2 + colorante indicador ---------- * compuesto coloreado + 2 H20 Autom atizado con
(II) facilidad;interfieren
agentes reductores
Otros mtodos
CLAP Intercambio inico, permeacin en gel, columnas de fase inversa Especfico; por lo
regular requiere
extraccin de muestra
Dilucin isotpica/MS Muestra diluida con cantidad conocida de istopo; relacin de Mtodo definitivo
dos istopos detectada m ediante un espectrmetro de masas propuesto
CAPTULO 9 COMPUESTOS DE NITRGENO NO PROTENICO 231
Electrodo selectivo de iones Difusin de NH3 a travs de membrana selectiva en NH4C Buena exactitud y
que causa cambio de pH, el cual se mide con un potencimetro precisin; la
estabilidad de la mem
brana puede ser un
problema
Espectrofotomtrico NH3 + azul de b ro m o fen o l---- * colorante azul
La heparina y el cido etilendiaminotetractico (EDTA) lactosa, levodopa y varios antibiticos disminuyen los valo
son anticoagulantes adecuados. Los recipientes de reco res. La glucosa en concentraciones mayores que 600 mg/dl
leccin comerciales deben ser evaluados para interferencia (33 mmol/L) interfiere en mtodos de placa seca.
de amoniaco antes de utilizar un nuevo lote. Las muestras
se deben centrifugar a 0 a 4C dentro de 20 min de la Intervalo de referencia18
recoleccin y eliminar el plasma o suero. Las muestras se
deben evaluar lo ms pronto posible o congelar. El plasma Los valores obtenidos varan un poco con el mtodo usado.
congelado es estable por varios das a -2 0 C . Los eritro Las concentraciones mayores se ven en recin nacidos.
citos contienen dos a tres veces tanto amoniaco como el
plasma; se debe evitar la hemolisis. a m o n a c o
Una fuente importante de contaminacin con amoniaco Adulto Plasma 19-60 (11-35
se encuentra en pacientes que fuman. Se recomienda que (xg/dl xmol/L)
los pacientes dejen de fumar durante varias horas antes de
Orina 140-1500 (10-107
extraer la m uestra .10
de 24 h mg N/da mmol N/da)
Nio 68-136 (40-80
Fuentes de error (10 das a pug/dl xrnol/L)
La concentracin de amoniaco es un problema potencial 2 aos)
en la medicin de amoniaco en el laboratorio. Se deben
tomar precauciones para reducir la contaminacin en el
laboratorio en el que se lleva a cabo el ensayo. La elimina
RESUM EN
cin de fuentes de contaminacin de amoniaco mejora de
forma importante la exactitud de los resultados del ensayo Los compuestos de NNP clnicamente importantes halla
de amoniaco. Entre las fuentes de contaminacin estn el dos en el plasma son urea, creatinina, creatina, cido
humo del tabaco, orina y amoniaco en detergentes, mate rico, amoniaco y aminocidos. La urea, el producto
rial de vidrio, reactivos y agua. excretorio primario del metabolismo de protenas com
El contenido de amoniaco del material de control basa prende la mayor proporcin de la fraccin de NNP. Su
do en suero es inestable. Se pueden usar alcuotas congela concentracin en plasma se relaciona con el contenido de
das de albmina srica humana que contienen cantidades protena de la dieta, el flujo sanguneo renal, la cantidad
conocidas de cloruro o sulfato de amonio. Existen en el de catabolismo de protena y la funcin renal. Las condi
mercado disoluciones que contienen cantidades conoci ciones clnicas que causan concentraciones elevadas de
das de sulfato de amonio. urea se clasifican, segn la causa, como prerrenales, rena
Muchas sustancias afectan la concentracin de amoniaco les y posrenales. La relacin de nitrgeno de urea/crea
in vivo.18-45 Las sales de amonio, asparaginasa, barbituratos, tinina se puede usar para diferenciar estas condiciones.
diurticos, etanol, hiperalimentacin, analgsicos narcticos, La urea se mide por lo comn mediante un mtodo enzi-
y algunos otros frmacos pueden incrementar el amoniaco mtico que cuantifica la cantidad de amoniaco producida
en el plasma. La difenhidramina, Lactobacillus acidophilus, por hidrlisis de ureasa de la urea en la muestra.
CAPTULO 9 COMPUESTOS DE NITRGENO NO PROTENICO 233
La creatinina se forma como creatina y la fosfocreatina lismo incrementado de cido nucleico y enfermedad renal
en el msculo pierde de forma espontnea agua o cido se observa una mayor concentracin de ureato plasmtico.
fosfrico, respectivamente. La creatinina se excreta por el El aumento de cido rico se observa despus de condi
plasma a una tasa constante relacionada con la masa del ciones que dan como resultado produccin excesiva de
msculo. La TFG se puede estimar calculando el aclara- metabolitos, como lactato y triglicridos, que compiten
miento de creatinina, que requiere medicin de creatinina con el urato para secrecin en el tbulo distal. De ordina
en plasma y orina. La creatinina plasmtica se relaciona de rio, el cido rico se cuan tilica mediante un mtodo enzi
forma inversa con la TFG y, aunque es una medida imper mtico en el que la uricasa oxida al cido rico a alantona
fecta, se emplea por lo comn para monitorear la funcin y perxido. El perxido producido se detecta por reaccin
de filtracin renal. La medicin de creatinina en plasma con diversos colorantes. La bilirrubina en cantidad sufi
y orina se ha realizado de modo tradicional por medio de ciente y otras sustancias que destruyen perxido en la
la reaccin de Jaffe. Esta reaccin es relativamente inde muestra pueden reducir de manera falsa los resultados.
finida y est sujeta a interferencia de muchas sustancias, El amoniaco est presente en el plasma en bajas concen
incluso glucosa, a-cetocidos y protena. La especificidad traciones. ste proviene de la desaminacin de aminoci
de la reaccin se puede m ejorar si se emplea un mtodo dos durante el metabolismo de protenas, y por lo comn
cintico y no uno de punto final; sin embargo, el mtodo es eliminado de la circulacin y convertido en urea en el
de Jaffe cintico est sujeto a interferencia de la bilirrubi hgado. Las concentraciones altas de amoniaco son neuro-
na, a-cetocidos y algunos frmacos. Se han desarrollado txicas. La concentracin alta de amoniaco en el plasma
mtodos enzimticos que no tienen amplia aceptacin. se relaciona con insuficiencia heptica, sndrome de Reye
l uso de un mtodo ms especfico para la medicin de o una deficiencia hereditaria en el metabolismo de la urea.
creatinina puede requerir el reajuste de intervalos de refe El amoniaco se mide mediante un mtodo enzimtico con
rencia para creatinina plasmtica y aclaramiento de crea- deshidrogenasa de glutamato. Se mide el cambio de absor
tinina. Sin este ajuste es posible que pase desapercibida la bancia cuando la NADPH se convierte en NADPL La reco
disfuncin renal. leccin y manejo cuidadosos de la muestra son necesarios
El cido rico es el producto de la descomposicin de para controlar errores de medicin. La concentracin de
las purinas del catabolismo de cido nucleico. Se filtra en amoniaco de sangre recin extrada aumenta con rapidez
el glomrulo, es reabsorbido en los tbulos proximales y en reposo. Las muestras se deben colocar en hielo despus
lo secretan los tbulos distales hacia la orina. Ms cido de la recoleccin para evitar un incremento de NFI3 como
rico es excretado hacia el tubo digestivo y es degradado resultado de la desaminacin de aminocidos. El plasma
por enzimas bacterianas. El cido rico es relativamente se debe separar y analizar lo ms rpido posible. La con
insoluble en plasma y, a altas concentraciones, puede ser taminacin con amoniaco en el laboratorio y el humo del
depositado en las articulaciones y el tejido, lo que causa cigarrillo son fuentes potenciales de contaminacin de la
inflamacin dolorosa. En situaciones como gota, catabo- muestra.
P R E G U N T A S DE R E P A S O
1. Cul de las siguientes no es una sustancia de NNP? 4. Una relacin alta de N de urea/creatinina con una con
a) Urea. centracin alta de creatinina se ve por lo comn en:
b) Amoniaco. a) Hepatopata.
c) Creatinina. b) Baja ingestin de protenas.
d) Troponina T. c) Necrosis tubular.
d) Condiciones posrenales.
2. Cul fraccin de NNP constituye casi la mitad de las
sustancias de NNP en la sangre? 5. Normalmente las concentraciones de amoniaco se
) Urea. miden para evaluar:
b) Creatina. a) Insuficiencia renal.
c) Amoniaco. b ) Estado cido-base.
d) cido rico. c) Encefalopata heptica.
d) Filtracin glomerular.
3. La azoemia prerrenal es causada por:
a ) Insuficiencia cardaca congestiva. 6. Un especialista obtiene un valor de N de urea de 61
b ) Insuficiencia renal crnica. mg/dl y un valor de creatinina srica de 3.1 mg/dl en
c) Tumores renales. un paciente. Estos resultados indican:
d) Nefritis glomerular. a) Insuficiencia renal.
b) Falla del rin.
c) Gota.
d) Insuficiencia prerrenal.
234 PARTE II CORRELACIONES CLNICAS Y PROCEDIMIENTOS ANALTICOS
8. Las sustancias que incrementan los resultados al medir 10. El cido rico es el producto de descomposicin final
creatinina mediante la reaccin de Jaffe incluyen a las de:
siguientes EXCEPTO: a) Metabolismo de la urea.
a) Glucosa. b) Metabolismo de la purina.
b) Ascorbato. c) Metabolismo de la glucosa.
c) a-Cetocidos. d) Metabolismo de la bilirrubina.
d) Bilirrubina.
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Enzimas
Robin Gaynor Krefetz y Gwen A. McMillin
C O N T E N I D O DE L C A P I T U L O
O B J E T I V O S
Al terminar este captulo, el laboratorista clnico Describir qu enzimas son tiles en el diagnstico
podr: de varios trastornos, incluso cardacos, hepticos,
Definir el trmino enzima, incluso su composicin seos, musculares, malignos y pancreatitis aguda.
qumica y estructura. Explicar las fuentes de tejido, importancia diag
Clasificar las enzimas de acuerdo con la Internatio nstica y ensayos, adems de fuentes de error,
nal Union o f Biochemistry (IUB). para las siguientes enzimas: CK, LD, AST, ALT, ALP,
Describir diferentes factores que afectan la veloci ACP, GGT, amilasa, lipasa, colinesterasa y G-6-PD.
dad de una reaccin enzimtica. Evaluar las concentraciones de enzimas sricas del
Explicar la cintica de enzimas incluso la cintica paciente en relacin con los estados morbosos.
de orden cero y primer orden.
Explicar por qu la medicin de las concentracio
nes de enzima srica es til desde el punto de vis
ta clnico.
T E R MI N OS C L A V E
236
CAPTULO 10 ENZIMAS 237
Las enzim as son protenas biolgicas especficas que cata mente a la enzima, la coenzima se llama grupo prostti
lizan reacciones bioqumicas sin alterar el punto de equi co. La porcin de enzima (ap oen zim a), con su respectiva
librio de la reaccin o sin ser consumidas o experimentar coenzima, forma un sistema completo y activo, una holo-
algn cambio en su composicin. Las otras sustancias en enzima.
la reaccin son convertidas a productos. Las reacciones Algunas enzimas, en su mayor parte enzimas digesti
son con frecuencia especficas y esenciales para funciones vas, son secretadas al principio del rgano de produccin
fisiolgicas, como la hidratacin de dixido de carbono, en una forma estructuralmente inactiva, llamada proenzi
conduccin nerviosa, degradacin de nutrientes y uso de m a o zim geno. Otras enzimas alteran despus la estructu
energa. Halladas en el tejido corporal, las enzimas con ra de la proenzima para hacer disponibles los sitios activos
frecuencia aparecen en el suero despus de lesin celu hidrolizando residuos especficos de aminocido. Este
lar o, algunas veces, en pequeas cantidades, de clulas mecanismo evita que las enzimas digestivas digieran su
degradadas. Ciertas enzimas, como las que facilitan la coa lugar de sntesis.
gulacin, son especficas para el plasma y, por tanto, estn
presentes en concentraciones significativas en el plasma. CLASIFICACIN DE ENZIMAS Y
Por tanto, las concentraciones de enzimas de plasma o
NOM ENCLATURA
suero suelen ser tiles en el diagnstico de enfermedades
particulares o anormalidades fisiolgicas. En este captulo Para estandarizar la nomenclatura de enzimas, la Enzyme
se analizan las propiedades y principios generales de las Commission (EC) de la IUB adopt un sistema de clasifi
enzimas, aspectos que se relacionan con la importancia cacin en 1961; los estndares fueron revisados en 1972 y
diagnstica clnica de enzimas fisiolgicas especficas, y 1978. El sistema IUB asigna un nombre sistem tico a cada
mtodos de ensayo para esas enzimas. enzima, que define al sustrato en el que acta, la reaccin
catalizada y, posiblemente, el nombre de la coenzima que
PROPIEDADES GEN ERALES Y DEFINICIONES participa en la reaccin. Debido a que muchos nombres
sistemticos son extensos, el sistema IUB asigna tambin
Las enzimas catalizan muchas reacciones fisiolgicas espe un nom bre recom endado trivial, ms prctico .1
cficas. Estas reacciones se facilitan por la estructura de la Adems de nombrar las enzimas, el sistema IUB identi
enzima y otros cuantos factores. Como una protena, cada fica cada una mediante un cdigo num rico EC que con
enzima comprende una secuencia de aminocido espec tiene cuatro dgitos separados por puntos decimales. El
fica (estructura prim aria), con la torsin de las cadenas primer dgito coloca a la enzima en una de las seis clases
peptdicas resultantes (estructura secundaria), que luego siguientes:
se pliega (estructura terciaria) y da como resultado cavida
des estructurales. Si una enzima contiene ms de una uni 1. Oxidorreductasas: catalizan una reaccin de oxidacin-
dad polipeptdica, la estructura cuaternaria se refiere a las reduccin entre dos sustratos.
relaciones espaciales entre las subunidades. Cada enzima 2. Transferasas: catalizan la transferencia de un grupo dis
contiene un sitio activo, a menudo una cavidad sin agua, tinto al hidrgeno de un sustrato a otro.
donde la sustancia sobre la que acta la enzima (el sus 3. Hidrolasas: catalizan la hidrlisis de varios enlaces.
trato) interacta con residuos particulares de aminocidos
con carga. Un sitio alostrico una cavidad distinta al sitio 4. Liasas: catalizan la eliminacin de grupos de sustratos
activo puede enlazar molculas reguladoras y, por tanto, sin hidrlisis. El producto contiene enlaces dobles.
ser significativo para la estructura enzimtica bsica. 5. Isomerasas: catalizan la interconversin de ismeros
Aun cuando una determinada enzima mantiene la mis geomtricos, pticos y posicionales.
ma funcin cataltica en el cuerpo, esa enzima puede exis 6. Ligasas: catalizan la unin de dos molculas de sustra
tir en diferentes formas dentro del mismo individuo. Estas to, jun to con la rotura del enlace de pirofosfato en tri
formas pueden ser diferenciadas entre s con base en cier fosfato de adenosina (ATP) o un compuesto similar.
tas propiedades fsicas, como movilidad electrofortica,
solubilidad o resistencia a desactivacin. El trmino isoen- Los dgitos segundo y tercero del nmero de cdigo EC
zim a se usa por lo general cuando se analiza esa clase de representan la subclase y subclases de la enzima, respecti
enzimas; sin embargo, la International Union o f Biochem is- vamente, divisiones que se hacen de acuerdo con criterios
try (IUB) recomienda restringir este trmino a mltiples especficos a las enzimas en la clase. El nmero final es el
formas de origen gentico. Una isoform a resulta cuando nmero serial especfico para cada enzima en una subcla
una enzima est sujeta a modificaciones postraslacionales. se. En el cuadro 10-1 se dan los nmeros de cdigo EC, as
Las isoenzimas e isoformas contribuyen a la heterogenei como los nombres sistemtico y recomendado, para enzi
dad en las propiedades y funcin de las enzimas. mas medidas con frecuencia en el laboratorio clnico.
Adems de la estructura bsica de la enzima, una mo En el cuadro 10-1 se listan tambin las abreviaturas
lcula no protenica, llamada cofactor, puede ser necesaria usual y estndar para enzimas analizadas comnmente.
para actividad enzimtica. Gofactores inorgnicos, como Sin la recomendacin IUB, las letras maysculas han sido
los iones cloruro o magnesio, se llaman activadores. Una utilizadas como conveniencia para identificar las enzimas.
coenzim a es un factor orgnico, como el dinucletido de Las abreviaturas comunes, construidas a veces de nombres
nicotinamida y adenina (NAD). Cuando se une fuerte aceptados antes para las enzimas, se emplearon hasta que
238 PARTE II CORRELACIONES CLNICAS Y PROCEDIMIENTOS ANALTICOS
Adaptado de Competence Assurance, ASMT. Enzymology, An Educational Program. Bethesda, MD: RMI Corporation, 1980.
se elaboraron las abreviaturas estndar listadas en el cua estado de transicin en el pico de la barrera de energa.
dro .2,3 Estas abreviaturas estndar se emplean en Estados En el estado de transicin, cada molcula tiene las mismas
Unidos y se usan despus en este captulo para indicar probabilidades de participar en la formacin de producto
enzimas especficas. o permanecer sin reaccionar. Los reactantes que poseen
energa suficiente para vencer la barrera de energa partici
pan en la formacin de productos.
CINTICA DE ENZIMAS
Una manera de proveer ms energa para una reaccin
es incrementar la temperatura y, por tanto, colisiones inter
M ecanism o cataltico de enzim as
moleculares; sin embargo, esto no ocurre normalmente a
Una reaccin qumica puede ocurrir de forma espontnea nivel fisiolgico. Las enzimas catalizan reacciones fisiol
si la energa libre o la cintica disponible es mayor para gicas disminuyendo el nivel de energa de activacin que
los reactantes que para los productos. La reaccin procede los reactantes (sustratos) deben alcanzar para que ocurra
entonces hacia la energa ms baja si un nmero suficiente la reaccin (fig. 10-1). La reaccin puede ocurrir enton
de molculas reactantes posee suficiente energa en exceso ces ms fcil en un estado de equilibrio en el que no hay
para romper sus enlaces qumicos y colisionar para formar reaccin directa o inversa, aun cuando no se altere la cons
nuevos enlaces. La energa en exceso, llamada energa de tante de equilibrio de la reaccin. El grado al que avanza
activacin, es la que se requiere para elevar todas las mol la reaccin depende del nmero de molculas de sustrato
culas en 1 mol de un compuesto a cierta temperatura al que pasan la barrera de energa.
CAPTULO 10 ENZIMAS 239
una funcin de slo la concentracin de enzima. Como se C o n cen tra cin d e en zim a
designa en la figura 10-2, Km es especficamente la concen Debido a que las enzimas catalizan reacciones fisiolgicas,
tracin de sustrato a la que la enzima produce la mitad de la concentracin de enzima afecta la velocidad de la reac
la velocidad mxima posible. Por tanto, Km indica la can cin catalizada. Tan pronto como la concentracin de sus
tidad de sustrato necesaria para una reaccin enzimtica trato excede la concentracin de enzima, la velocidad de la
particular. reaccin es proporcional a la concentracin de la enzima.
La hiptesis de Michaelis-Menten de la relacin entre Mientras ms alta sea la concentracin de enzima, la reac
la velocidad de reaccin y la concentracin de sustrato se cin proceder con ms rapidez porque ms enzima est
puede representar matemticamente como sigue: presente para unirse al sustrato.
y VmaxL
. [S]1 pH
(Ec. 10-2)
Km+IS] Las enzimas son protenas que llevan cargas moleculares
netas. Los cambios de pH pueden desnaturalizar una enzi
donde
ma o afectar su estado inico, lo que da como resultado
V = velocidad de reaccin medida
cambios estructurales o un cambio en la carga de un resi
Vm a x = velocidad mxima duo aminocido en el sitio activo. Por consiguiente, cada
[S] = concentracin de sustrato enzima opera dentro de un intervalo de pH especfico.
La mayor parte de las reacciones enzimticas fisiolgicas
K m = constante de Michaelis-Menten de enzima
ocurren en el intervalo de pH de 7.0 a 8.0, pero algunas
para sustrato especfico
enzimas son activas en intervalos de pH ms amplios que
En teora, Vmx y despus Kmse podran determinar de otras. En el laboratorio, el pH de una reaccin se controla
la grfica de la figura 10-2. Sin embargo, es difcil deter de manera cuidadosa en el pH ptimo por medio de diso
minar Vmx de la grfica hiperblica, y a menudo no se luciones amortiguadoras apropiadas.
logra de manera exacta en reacciones enzimticas porque
es posible que las enzimas no funcionen de forma ptima T em pera tura
en presencia de sustrato excesivo. Una determinacin ms Al subir la temperatura normalmente se incrementa la
exacta y conveniente de Vmax. Jy K m se *puede hacer con una velocidad de una reaccin qumica porque aumenta el
J
grfica de Lineweaver-Burk, una grfica recproca doble de movimiento de las molculas, la tasa a la que ocurren las
la constante de Michaelis-Menten, que produce una rec colisiones intermoleculares, y la energa disponible para
ta (fig. 10-3). Se toma el recproco de la concentracin la reaccin. ste es el caso con las reacciones enzimticas
de sustrato y la velocidad de una reaccin enzimtica. La hasta que la temperatura es lo suficientemente alta para
ecuacin se convierte en desnaturalizar la composicin de protena de la enzima.
Por cada incremento de temperatura de 10 grados, la velo
1 Km 1 1 cidad de la reaccin aumenta casi el doble hasta que, por
(Ec. 10-3) supuesto, se desnaturaliza la protena.
V Vmx[S]
Cada enzima funciona de manera ptima a una deter
minada temperatura, que se ve afectada por otras variables
de reaccin, en particular el tiempo total para la reaccin.
La temperatura ptima por lo regular es cercana a la del
medio fisiolgico de la enzima; sin embargo, puede ocu
rrir cierta desnaturalizacin a la temperatura fisiolgica
humana de 37C. La tasa de desnaturalizacin se incre
menta conforme sube la temperatura, y normalmente es
significativa de 40 a 50C.
Debido a que las temperaturas bajas vuelven reversi
blemente inactivas a las enzimas, muchas muestras de
suero o plasma para medicin de enzima se refrigeran o
congelan para evitar prdida de actividad hasta el anli
sis. Los procedimientos de almacenaje pueden variar de
una enzima a otra como resultado de las caractersticas
de estabilidad individuales. No obstante, la congelacin y
descongelacin repetidas tienden a desnaturalizar la pro
tena, y esto se debe evitar.
Debido a su sensibilidad a la temperatura, las enzimas se
deben analizar bajo condiciones de temperatura controladas
en forma estricta. Las temperaturas de incubacin deben ser
FIGURA 10-3. Transformacin de Lineweaver-Burk de la curva de exactas dentro de 0 .1C. Por lo general, los laboratorios
Michaelis-Menten. Vmx es el recproco del intercepto x de la recta. Km intentan establecer una temperatura de anlisis para medi
es el recproco negativo del intercepto x de la misma recta. cin rutinaria de enzimas de 25, 30 o 37C. Han sido en
CAPITULO 10 ENZIMAS 241
[S ]
FIGURA 10-4. Grfica normal de Lineweaver-Burk (recta continua) comparada con cada tipo de inhibicin enz-
mtica (lnea discontinua). (A) Inhibicin competitiva Vmjx sin cambio; Kmaparece incrementada. (B) Inhibicin no
competitiva Vmx reducida; Kmsin cambio. (C) Inhibicin no competitiva Vmx reducida; Kmaparece reducida.
242 PARTE II CORRELACIONES CLNICAS Y PROCEDIMIENTOS ANALTICOS
la misma velocidad que una reaccin inhibida. La K m es reaccin se convierte en sustrato en el que acta una enzim a
una constante para cada enzima y no puede ser alterada. auxiliar intermediaria. Un producto de la reaccin interme
Sin embargo, debido que la cantidad de sustrato necesaria diaria se convierte en el sustrato para la reaccin final, que
para lograr una velocidad particular es mayor en presencia emplea como catalizador una enzim a indicadora y, por lo
de un inhibidor competitivo, la K m al parecer aumenta al general, tiene que ver con la conversin de NAD a NADH
mostrar el efecto del inhibidor. o viceversa.
El sustrato y el inhibidor, por lo general un ion met Al efectuar una cuanticacin enzimtica en cintica
lico, pueden unirse con una enzima al mismo tiempo en de orden cero, no debe haber inhibidores, y es necesario
inhibicin no competitiva. El inhibidor puede inactivar controlar de manera cuidadosa otras variables que pudie
ya sea un complejo ES o slo la enzima causando cam ran afectar la velocidad de la reaccin. Se debe mantener
bios estructurales en sta. Incluso si el inhibidor se une un pH constante por medio de una disolucin amortigua
de forma reversible y no desactiva la enzima, la presencia dora apropiada. La temperatura debe ser constante dentro
del inhibidor cuando se une con la enzima disminuye la de 0 .1C en todo el ensayo a una temperatura a la cual
velocidad de la reaccin. Por tanto, por inhibicin compe la enzima es activa (normalmente, 25, 30 o 37C).
titiva, no se puede lograr la velocidad de reaccin mxima. Durante el avance de la reaccin, el perodo para el an
Incrementar las concentraciones de sustrato no tiene efec lisis tambin debe ser seleccionado con cuidado. Cuando la
to en el enlace de un inhibidor no competitivo, de modo enzima se introduce al inicio a los reactivos y el sustrato en
que la Km no cambia. exceso se combina de forma estable con la enzima dispo
Debido a que la inhibicin no competitiva requiere la nible, aumenta la velocidad de la reaccin. Despus que se
formacin de un complejo ES, aumentar la concentracin satura la enzima, las tasas de formacin de producto, libe
de sustrato incrementa la inhibicin. Por tanto, no se pue racin de enzima y recombinacin con ms sustrato proce
de lograr una velocidad mxima igual a la de una reaccin den de forma lineal. Despus de ese tiempo, de ordinario
no inhibida, y la K m aparece reducida. 6 a 8 min despus del inicio de la reaccin, la velocidad
disminuye a medida que se agota el sustrato, la reaccin
M edicin de la actividad enzim tica inversa es ms notable y el producto comienza a inhibir
la reaccin. Por tanto, las cuantificaciones de enzima se
Debido a que las enzimas normalmente estn presentes deben llevar a cabo durante la fase lineal de la reaccin.
en cantidades muy pequeas en los lquidos biolgicos y Es posible usar uno de dos mtodos para medir el alcan
con frecuencia es difcil aislarlas de compuestos similares, ce de una reaccin enzimtica: a) de tiempo fijo y b) ensayo
un mtodo conveniente para la cuanticacin de enzimas de monitoreo continuo o cintico. En el mtodo de tiempo
es la medicin de la actividad cataltica. Entonces la acti fijo , los reactantes se combinan, la reaccin procede por un
vidad se relaciona con la concentracin. En los mtodos tiempo designado, se detiene la reaccin (por lo regular al
comunes se podra medir con un potencimetro un incre desactivar la enzima con un cido dbil) y se hace una medi
mento en la concentracin de producto, una disminucin cin de la cantidad de reaccin que ha ocurrido. Se supone
en la concentracin de sustrato, una reduccin en la con que la reaccin es lineal con el tiempo de reaccin; mientras
centracin de coenzima o un aumento en la concentracin ms grande sea la reaccin, ms enzima est presente.
de una coenzima alterada. En los ensayos de monitoreo continuo o cinticos, se hacen
Si la cantidad de sustrato y cualquier coenzima est en mediciones mltiples, normalmente de cambio de absorban
exceso en una reaccin enzimtica, la cantidad de sustrato cia, ya sea a intervalos de tiempo especficos (cada 30 o 60
o coenzima empleada, o producto o coenzima alterada for s) o en forma continua mediante un espectrofotmetro de
mada, depender slo de de la cantidad de enzima presen registro continuo. Estos ensayos ofrecen ventajas sobre los
te para catalizar la reaccin. Por tanto, las concentraciones mtodos de tiempo fijo porque la linealidad de la reaccin
de enzima son ejecutadas siempre en cintica de orden se puede comprobar de forma ms adecuada. Si la absorban
cero, con el sustrato en exceso suficiente para asegurar cia se mide a intervalos, son necesarios varios puntos para
que no ms de 20% del sustrato disponible se convierte incrementar la exactitud de la evaluacin de linealidad. Se
en producto. Cualquier coenzima tambin debe estar en prefieren las mediciones continuas porque cualquier desvia
exceso. El NADH es una coenzima que frecuentemente se cin respecto de la linealidad se observa sin dificultad.
mide en el laboratorio. El NADH absorbe luz a 340 nm, La causa ms comn de desviacin respecto de la linea
mientras que el NAD no lo hace, y se mide con facilidad lidad ocurre cuando la concentracin de la enzima es tan
un cambio de absorbancia a 340 nm. alta que se usa todo el sustrato al inicio del tiempo de
En metodologas de laboratorio especficas, son nece reaccin. Para el resto de la reaccin, el cambio de veloci
sarias otras sustancias distintas al sustrato o la coenzima dad es mnimo, lo que indica que la concentracin de la
y deben estar presentes en exceso. El NAD o NADH suele enzima es muy baja. Con el monitoreo continuo, el laborato-
ser conveniente como reactivo para un ensayo de enzim a- rista puede observar un cambio repentino en la velocidad
acop lad a cuando NAD ni NADH son coenzimas para la de la reaccin (desviacin de la cintica de orden cero) de
reaccin. En otros ensayos de enzima acoplada, se aade una determinacin particular y puede repetirla con menos
ms de una enzima en exceso como un reactivo y se cata muestra del paciente. La dism inucin en la cantidad
lizan mltiples reacciones. Despus que la enzima bajo de muestra del paciente opera como una dilucin, y la
anlisis cataliza su reaccin especfica, un producto de esa respuesta obtenida se puede multiplicar por el factor de
CAPTULO 10 ENZIMAS 243
dilucin para obtener la respuesta final. La muestra en control de calidad y prueba de competencia para todos los
s no se diluye para que el diluyente no interfiera con la laboratorios. Los problemas con materiales de control de
reaccin. (La dilucin de la muestra con disolucin salina calidad para prueba de enzimas han sido un tema impor
puede ser necesaria para minimizar los efectos negativos tante. Las diferencias entre muestras clnicas y sueros de
en el anlisis a causa de hemolisis o lipemia.) Las medi control incluyen especies de origen de la enzima, integri
ciones de actividad enzimtica pueden ser inexactas si las dad de las especies moleculares, formas de isoenzimas,
condiciones de almacenaje comprometen la integridad de matriz de la disolucin, adicin de conservadores y proce
la protena, si hay inhibidores enzimticos o si no estn so de liofilizacin. Se han realizado m uchos estudios para
presentes cofactores necesarios. asegurar mediciones exactas de enzimas y buenos mate
riales de control de calidad .4
Clculo de la actividad enzim tica
Enzim as como reactivos
Cuando se realiza la cuanticacin de las enzimas con
respecto a su actividad y no con una medicin directa Las enzimas se pueden usar como reactivos para medir
de concentracin, las unidades empleadas para expresar muchos constituyentes no enzimticos en el suero. Por
las concentraciones de enzima son unidades de actividad. ejemplo, la glucosa, el colesterol y el cido rico se cuanti
La definicin para la unidad de actividad debe conside fican con frecuencia por medio de reacciones enzimticas,
rar variables que pudieran alterar los resultados (p. ej., que miden la concentracin del analito debido a la espe
pH, temperatura, sustrato). A travs de la historia, quie cificidad de la enzima. Las enzimas se emplean tambin
nes elaboraban mtodos especficos solan establecer sus como reactivos para mtodos de cuanticacin de analitos
propias unidades para expresar resultados, y era comn que son sustratos para las cuantificaciones enzimticas
que designaran a las unidades con su nombre (es decir, correspondientes. Un ejemplo, la deshidrogenasa de lacta-
unidades Bodansky y King). Para estandarizar el sistema to, puede ser un reactivo cuando se evalan las concentra
para expresar resultados cuantitativos, la EC defini la ciones de lactato o piruvato. Para esta clase de mtodos, la
unidad internacional (UI) como la cantidad de enzima que enzima se aade en exceso en una cantidad suficiente para
catalizar la reaccin de un pinol de sustrato por minuto proveer una reaccin completa en un perodo corto.
en condiciones especficas de temperatura, pH, sustratos Las enzim as inm ovilizadas se enlazan qumicamente a
y activadores. Debido a que las condiciones especificadas adsorbentes, como la agarosa o ciertos tipos de celulo
pueden variar entre laboratorios, los valores de referencia sa, mediante grupos azida, diazo y triacina. Las enzimas
son an especficos del laboratorio. La concentracin de actan como reactivos recuperables. Cuando se pasa el sus
enzima se expresa por lo regular en unidades por litro (UI/ trato por la preparacin, se recupera el producto y se ana
L). La unidad de actividad enzimtica reconocida por el liza, y la enzima est presente y libre para reaccionar con
Sistema Internacional de Unidades (Systm e Internationale ms sustrato. Las enzimas inmovilizadas son convenientes
d Units [SI]) es el katal (mol/s). El mol es la unidad para para anlisis por lotes y ms estables que las enzimas en
la concentracin de sustrato, y la unidad de tiempo es el una disolucin. Las enzimas se emplean tambin como
segundo. La concentracin de enzima se expresa entonces reactivos en imnunoensayos competitivos y no com petiti
como katals por litro (kat/L). 1.0 UI = 17 nkat. vos, como los que se usan para medir anticuerpos de HIV,
Cuando las enzimas se cuantifican midiendo el aumen frmacos teraputicos y antgenos de cncer. Las enzimas
to o disminucin de NADH a 340 nm, la absortividad de uso comn son peroxidasa de rbano, fosfatasa alcali
molar (6.22 X 10 3 mol/L) de NADH se emplea para calcu na, deshidrogenasa de glucosa- 6-fosfato y p-galactosidasa.
lar la actividad enzimtica. La enzima en estos ensayos funciona como un indicador
que refleja la presencia o ausencia del analito.
M edicin de la m asa de enzim a
Tambin estn disponibles las metodologas de inmunoen-
ENZIMAS DE IMPORTANCIA CLNICA
sayo que cuantifican la concentracin de enzima por masa, En el cuadro 10-2 se listan las enzimas analizadas comn
y se emplean de manera rutinaria para la cuanticacin de mente, incluso sus nombres sistemticos e importancia
algunas enzimas, como CK-MB. Los inmunoensayos pue clnica.
den sobrestimar la enzima activa como un resultado de Cada enzima se analiza en este captulo con respecto a
posible reactividad cruzada con enzimas inactivas, como fuente tisular, importancia diagnstica, mtodo de ensayo,
zimgenos, isoenzimas inactivas, macroenzimas o enzima fuente de error e intervalo de referencia.
digerida en parte. La relacin entre actividad enzimti
ca y cantidad de enzima es por lo general lineal pero se
Cinasa de creatina
debe determinar para cada enzima. Las enzimas se pueden
determinar y cuantificar tambin por tcnicas electrofor- La cinasa de creatina (CK) es una enzima con un peso
ticas, que proveen resolucin de isoenzimas e isoformas. molecular de casi 82 000 , que por lo general est relaciona
Asegurar la exactitud de las mediciones de enzimas ha da con la regeneracin de ATP en sistemas contrctiles o de
sido por mucho tiempo una preocupacin de los laborato transporte. Su funcin fisiolgica predominante ocurre en las
ristas. La ley de 1988 de Enmiendas de Mejoramiento del clulas de msculo, donde participa en el almacenaje de fos
Laboratorio Clnico (CLIA 88 ) ha establecido normas para fato de creatina de alta energa. Todo ciclo de contraccin del
244 PARTE II CORRELACIONES CLNICAS Y PROCEDIMIENTOS ANALTICOS
ES T U D IO C A S O 10-1
lo comn no se pueden medir cuando hay dao tisular. Las las concentraciones de CK-MB comienzan a subir dentro de
concentraciones ms altas se hallan en el sistema nervioso 4 a 8 h, alcanzan el mximo en 12 a 24 h y vuelven a la nor
central, el tubo digestivo y el tero durante el embarazo. malidad dentro de 48 a 72 h. Este margen de tiempo se debe
Aunque el tejido del cerebro tiene concentraciones altas considerar al interpretar las concentraciones de CK-MB.
de CK, el suero rara vez contiene CK-BB de origen cere La actividad de la CK-MB ha sido observada en otros
bral. Debido a su tamao molecular (8 0 0 0 0 ), su paso por trastornos cardacos (cuadro 10-3). Por tanto, las cantida
la barrera hematoenceflica est impedido. Sin embargo, des incrementadas no son del todo especficas para IMA
cuando ha ocurrido dao extenso en el cerebro, a veces se sino que reflejan probablemente algn grado de dao car
detectan cantidades importantes de CK-BB en el suero. daco isqumico. La especificidad de las concentraciones
Se ha observado que la CK-BB puede estar en concen de CK-MB en el diagnstico de IMA se puede incrementar
traciones significativamente altas en pacientes con car si se interpretan jun to con isoenzimas de deshidrogenasa
cinoma de varios rganos. Se ha hallado en relacin con de lactato (LD) o troponinas, o ambas, y si se miden de
carcinoma prosttico no tratado y otros adenocarcinomas. forma secuencial durante un perodo de 48 h para detectar
Estos hallazgos indican que la CK-BB puede ser un marca el aumento y disminucin caractersticos de la actividad
dor til en relacin con tumores.9 enzimtica vista en el IMA (fig. 10-6).
Las causas ms comunes de incrementos de CK-BB son La isoenzima MB tambin ha sido detectada en el
dao del sistema nervioso central, tumores, parto y la pre suero de pacientes con trastornos no cardacos. Las con
sencia de CK macro, un complejo de enzima-inmunoglo- centraciones de CK-MB halladas en estas condiciones
bulina. En la mayor parte de los casos, la concentracin de es probable que representen filtracin desde el msculo
CK-BB es mayor que 5 U/L, por lo general en el intervalo esqueltico, aunque en la distrofia muscular tipo Duchen
de 10 a 50 U/L. Otras condiciones listadas en el cuadro ne puede haber tambin cierta intervencin cardaca. Las
10-3 muestran actividad de CK-BB abajo de 10 U/L.10 concentraciones de CK-MB en el sndrome de Reye tam
El valor de la separacin de isoenzima CK se puede hallar bin pueden reflejar dao miocrdico.
sobre todo en la deteccin de dao de miocardio. El tejido A pesar de los hallazgos de concentraciones de CK-MB
cardaco contiene cantidades significativas de CK-MB, casi en trastornos distintos al infarto de miocardio, su presencia
20% de toda la CK-MB. Mientras que la CK-MB se encuentra an es un indicador importante de IMA .11 El curso de tiem
en pequeas cantidades en otro tejido, el miocardio es en po representativo de aumento en la concentracin de CK-
esencia el nico tejido del que la CK-MB entra al suero en MB despus del IMA no se encuentra en otras condiciones.
cantidades importantes. La demostracin de concentracio Las protenas no enzimticas (troponina I y T) han sido
nes altas de CK-MB, mayores o iguales a 6% de la CK total, empleadas como un marcador ms sensible y especfico
se considera un buen indicador de dao miocrdico, en par de dao miocrdico. Estas protenas se liberan hacia el
ticular IMA. Se ha encontrado que otras protenas no enzi torrente sanguneo antes y persisten durante ms tiempo
mticas, llamadas troponinas, son incluso ms especficas y que la CK y su coenzima CK-MB. Ms informacin sobre
pueden tener una concentracin alta en ausencia de concen estos marcadores de protena de IMA se encuentra en el
traciones altas de CK-MB. Despus del infarto de miocardio, captulo 8 , Am inocidos y protenas.
10
<n 6
o
2
O
1 2 3 4 5 6 10
Tiempo durante el cual la concentracin permanece alta (das)
FIGURA 10-6. Curvas de actividad con el tiempo de enzimas en Infarto de miocardio para AST, CK, CK-MB y LD.
La CK, de manera especfica la fraccin MB, se incrementa al inicio, seguida de AST y LD. La LD es la que perma
nece incrementada por ms tiempo. Todas las enzimas vuelven al nivel normal en 10 das.
CAPTULO 10 ENZIMAS 247
Se han elaborado numerosos informes en donde se des insatisfactoria y permitir ver la cinasa de adenilato (AK).
cribe la presencia de bandas inusuales de isoenzima CK La AK es una enzima liberada de eritrocitos en muestras
que muestran propiedades electroforticas que difieren de hemolizadas y aparece como una banda catdica a CK-
las tres fracciones de isoenzima principales (fig. 10-5 ).12-16 MM. La AK puede interferir con mtodos qumicos o de
Estas formas atpicas son por lo general de dos tipos y se inmunoinhibicin, lo que causa un valor alto y falso de
conocen como CK macro y CK mitocondrial. CK o CK-MB.
La CK m acro al parecer migra a una posicin media La cromatografa de intercambio inico tiene el poten
entre CK-MM y CK-MB. Este tipo de CK macro compren cial para ser ms sensible y precisa que los procedimientos
de en gran medida CK-BB acomplejada con inmunoglo- electrnicos llevados a cabo con buena tcnica. Sin embar
bulina. En muchos casos la inmunoglobulina relacionada go, en una columna no satisfactoria, la CK-MM se integra
es IgG, aunque tambin ha sido descrito un complejo con con la CK-MB y la CK-BB se puede eluir con CK-MB. Tam
IgA. El trmino CK m acro se ha empleado tambin para bin, la CK macro se puede eluir con CK-MB.
describir complejos de lipoprotenas con CK-MM. Los anticuerpos contra las subunidades M y B han sido
La incidencia de CK macro en el suero vara de 0.8 a usados para determinar la actividad de CK-MB. El anti-M
1.6%. En la actualidad ningn trastorno especfico se rela inhibe toda la actividad de M pero no la actividad de B.
ciona con su presencia, aunque parece estar relacionada La actividad de CK se mide antes y despus de la inhi
con la edad y el gnero, y aparece con mayor frecuencia en bicin. La actividad restante despus de la inhibicin de
mujeres mayores de 50 aos. M es un resultado de la subunidad B de la actividad de
La CK m itocondrial ( CK-M i) se une a la superficie MB y BB. La actividad residual despus de la inhibicin se
exterior de las membranas mictocondriales internas del multiplica por 2 para tomar en cuenta la actividad de MB
msculo, cerebro e hgado. Migra hasta un punto catdico (inhibida 50% ). La desventaja principal de este mtodo es
a CK-MM y existe como una molcula dimrica de dos que detecta actividad de BB, la cual, aunque no es detec-
subunidades idnticas. Aparece en el suero en el estado table de manera normal, causar resultados de MB altos
dimrico y en la forma de agregados oligomricos de alto e incorrectos cuando est presente BB. Adems, las for
peso molecular (350 000). La CK-Mi no est presente en el mas atpicas de CK-Mi y CK macro no son inhibidas por
suero normal y por lo comn tampoco despus del infarto anticuerpos anti-M y tambin podran causar resultados
de miocardio. La incidencia de CK-Mi vara de 0.8 a 1.7%. errneos para actividad de MB.
Para que sea detectada en el suero, debe ocurrir dao tisu Con los inmunoensayos se detecta CK-MB de manera
lar extenso, que causa descomposicin de la mitocondria confiable con reactividad cruzada mnima. Los inmunoen
y la pared celular. Su presencia no tiene correlacin con sayos miden la concentracin de protena de enzima en
ningn estado morboso especfico pero parece ser un indi vez de actividad enzimtica y, por tanto, pueden detectar
cador de enfermedad grave. La CK-Mi ha sido detectada CK-MB enzimticamente inactiva. Esto lleva a la posibi
en casos de tumor maligno y anormalidades cardacas. lidad de permitir la deteccin de infarto antes que otros
En vista de la correlacin indefinida entre estas formas mtodos. Est disponible tambin un ensayo de inmuno-
de CK atpicas y su estado morboso especfico, parece que inhibicin de anticuerpo doble. Esta tcnica permite la
su importancia se relaciona sobre todo con los mtodos diferenciacin de actividad de MB debido a la cinasa de
primarios empleados para detectar CK-MB. En ciertos adenilato y las isoenzimas atpicas, y da como resultado
procedimientos analticos, estas formas atpicas se pueden un procedimiento analtico especfico para CK-MB .17 Los
medir como CK-MB, que da como resultado concentracio sistemas de ensayo que se emplean en el lugar de la aten
nes de CK-MB altas y errneas. cin para CM-MB estn disponibles pero su uso no es tan
Los mtodos empleados para la medicin de isoenzimas extendido como los que se emplean para troponinas.
de CK son electroforesis; cromatografa de intercambio ini
co, y varios inmunoensayos, incluso el radioinmunoensayo A ctividad enzim tica d e ensayo
(RIA) y mtodos de inmunoinhibicin. Aunque los mtodos Como se indica en la ecuacin 10-4, la CK cataliza las
de masa son ms sensibles y preferidos para cuanticacin reacciones directa e inversa que conllevan la fosforilacin
de CK-MB, la electroforesis ha sido el mtodo de referencia. de creatina o ADP. Por lo general, en el caso de anlisis de
Las propiedades electroforticas de las isoenzimas de CK se actividad de CK, esta reaccin va acoplada con otros siste
muestran en la figura 10-5. Por lo general, la tcnica consiste mas enzimticos y se determina un cambio de absorbancia
en realizar la electroforesis en la muestra, medir la reaccin a 340 nm. La reaccin directa va acoplada con el siste
con una tcnica de superposicin y visualizar despus las ma cinasa de piruvato-deshidrogenasa de lactato-NADH y
bandas bajo luz ultravioleta. Con la electroforesis, la ban procede de acuerdo con la ecuacin 10-5:
das atpicas se pueden separar, lo que permite su deteccin
aparte de tres bandas principales. Con frecuencia aparece ck
Creatina + ATP fosfato de creatina + ADP
una banda con fluorescencia intensa, que migra prxima a
la forma CK-BB. Se desconoce la naturaleza exacta de esta PK
ADP + fosfoenolpiruvato piruvato + ATP
fluorescencia, pero se ha atribuido a la unin de frmacos
fluorescentes o bilirrubina mediante albmina. CK
Piruvato + NADH + H+ lactato + NAD+
Adems de ver bandas de CK atpicas, otras ventajas de
los mtodos de electroforesis son detectar una separacin (Ec. 10-5)
248 PARTE II CORRELACIONES CLNICAS Y PROCEDIMIENTOS ANALTICOS
ES TU D IO D E C A S O 10-2
de consumir una comida grasosa. La ALP intestinal puede son idnticas a las de la fraccin de Regan. Sin embargo,
aumentar en distintos trastornos, como las enfermedades la leucina inhibe tambin a la isoenzima de Nagao. Su
del tubo digestivo y cirrosis. Las concentraciones altas se presencia ha sido detectada en carcinoma metasttico de
hallan tambin en pacientes que experimentan hemodi- superficies pleurales, y en adenocarcinoma del pncreas y
lisis crnica. el ducto biliar.
La diferencia de estabilidad trmica es la base de un
segundo mtodo empleado para identificar la fuente de Ensayo p a ra actividad enzim tica
isoenzima de una ALP de alta concentracin. Por lo gene Como resultado de la no especificidad relativa de la ALP
ral, la actividad de ALP se mide antes y despus de calentar en relacin con sustratos, ha sido propuesta una diversidad
el suero a 56C durante 10 min. Si la actividad residual de metodologas para su anlisis, y en la actualidad an no
despus del calentamiento es menor que 20 % de la activi estn en uso. Las diferencias principales entre stas se rela
dad total antes del calentamiento, entonces se supone que cionan con la concentracin y los tipos de sustrato y disolu
el incremento de ALP es un resultado de la fosfatasa sea. cin amortiguadora empleados y el pH de la reaccin. Una
Si permanece ms de 20% de la actividad, el incremento es tcnica de monitoreo continua basada en un mtodo dise
probable que sea resultado de la fosfatasa heptica. Estos ado por Bowers y McComb permite calcular la actividad
resultados se basan en el hallazgo de que la ALP placentaria de ALP con base en la absortividad molar de p-nitrofenol.
es la ms estable al calor de las cuatro fracciones principa La reaccin procede de acuerdo con la ecuacin 10-15:
les, seguida de las fracciones intestinal, heptica y sea en
orden de estabilidad trmica. La ALP placentaria resistir a ,o
la desnaturalizacin trmica a 65 durante 30 minutos. % S
La desactivacin trmica es un mtodo impreciso N
para diferenciacin porque la desactivacin depende de
muchos factores, como el control correcto de temperatura,
HO -
tiempo y mtodos analticos con la sensibilidad suficiente
para detectar pequeas cantidades de actividad residual de
ALP. Adems, hay cierto grado de traslape entre la desac
tivacin trmica de las fracciones heptica y sea tanto en
enfermedades hepticas como seas.
Un tercer mtodo de identificacin de las isoenzimas de HO P O -
ALP se basa en la inhibicin qumica selectiva. La fenilalani-
na es uno de varios inhibidores que han sido utilizados. La O
fenilalanina inhibe la ALP intestinal y placentaria a un gra
p-Nitrofenil- p-Nitro fenol Ion fosfato
do mucho mayor que la ALP heptica y sea. Sin embargo,
con el uso de fenilalanina es imposible diferenciar la ALP fosfato
placentaria de la intestinal o la ALP heptica de la sea. (Ec. 10-15)
Adems de las cuatro fracciones principales de isoen
zima de ALP, ciertas fracciones anormales se relacionan El p-nitrofenilfosfato (incoloro) se hidroliza a p-nitrofe-
con neoplasmas. Las que se observan con ms frecuencia nol (amarillo) y se mide el incremento de absorbancia a 405
son las isoenzimas de Regan y Nagao. stas se denomi nm, que es directamente proporcional a la actividad de ALE
nan fosfa ta sas alcalinas carcinoplacentarias debido a sus
similitudes con la isoenzima placentaria. La frecuencia de F u e n te d e e rr o r
intervalos de aparicin vara de 3 a 5% en pacientes con La hemolisis puede causas ligeros incrementos porque la
cncer. La isoenzima de Regan ha sido caracterizada como ALP est concentrada alrededor de seis veces ms en los
un ejemplo de una produccin ectpica de una enzima eritrocitos que en el suero. Los ensayos de ALP se deben
por tejido maligno. Ha sido detectada en varios carcino ejecutar lo ms pronto posible despus de la recoleccin.
mas; por ejemplo, de pulmn, mama, ovario y colon, con La actividad en suero se incrementa casi 3 a 10% si se
las incidencias ms altas en cnceres de ovario y ginecol mantiene a 25 o 4C durante varias horas. La dieta puede
gicos. Como resultado de su baja incidencia en pacientes inducir incrementos en la actividad de ALP de individuos
con cncer, el diagnstico de malignidad rara vez se basa del grupo sanguneo B u O que son secretores. Los valores
en su presencia. Sin embargo, es til en el monitoreo de pueden ser 25% ms altos despus de la ingestin de una
los efectos del tratamiento porque desaparecer si el trata comida con alto contenido de grasa.
miento resulta exitoso.
La isoenzima de Regan migra a la misma posicin que Intervalo d e referen cia
la fraccin sea y es la ms estable al calor de todas las ALP, 30 a 90 U/L (30C).
isoenzimas de ALE Resiste la desnaturalizacin a 65C
durante 30 minutos. La fenilalanina inhibe su actividad.
Fosfatasa cida
La isoenzima de Nagao puede ser considerada una
variante de la isoenzima de Regan. Sus propiedades electro La fosfatasa cida (ACP) pertenece al mismo grupo de
forticas, estabilidad trmica e inhibicin por fenilalanina enzimas de fosfatasa que la ALP y es una hidrolasa que
254 PARTE II CORRELACIONES CLNICAS Y PROCEDIMIENTOS ANALTICOS
cataliza el mismo tipo de reacciones. La diferencia princi carcinoma prosttico, aun cuando se puede hallar una
pal entre ACP y ALP es el pH de la reaccin. La ACP fun concentracin normal de PSA en tumores de etapa D. El
ciona a un pH ptimo de alrededor de 5.0. En la ecuacin PSA es en particular til para monitorear el xito del trata
10-16 se describe la secuencia de reaccin: miento; sin embargo, el PSA es controversial como prueba
de deteccin para malignidad prosttica porque el incre
0 O mento de PSA puede ocurrir en condiciones distintas a
ACP ! las del carcinoma prosttico, como hipertrofia prosttica
R P 0 + H20 ^ = R OH + HO P 0 benigna y prostatitis .27'29
1 pH 5 |
Otras condiciones prostticas en las que se han hallado
O- O- incrementos de ACP son la hiperplasia de la prstata y la
Fosfomonoster Alcohol Ion fosfato ciruga prosttica. Hay informes contradictorios de incre
mentos despus del examen rectal y masaje de la prstata.
(Ec. 10-16) En ciertos estudios se han descrito concentraciones altas
de ACP, y en otros no se ha hallado cambio detectable.
F u e n te d e tejido Cuando se hallan incrementos, las concentraciones vuel
La actividad de ACP se halla en la prstata, hueso, hga ven por lo regular a la normalidad en 24 horas .30
do, bazo, rin, eritrocitos y plaquetas. La prstata es la Se ha encontrado que los ensayos de la ACP son tiles
fuente ms rica, con muchas veces la actividad hallada en en la qumica clnica forense, en particular en la inves
otro tejido. tigacin de violacin. Los lavados vaginales se examinan
para detectar actividad de lquido seminal-ACP, que puede
Im portancia diagnstica
persistir durante hasta cuatro das .31 La actividad alta es
Desde hace tiempo, la medicin de ACP se ha empleado
supuesta evidencia de violacin en tales casos.
como auxiliar en la deteccin de carcinoma prosttico,
La actividad de la ACP srica puede ser alta la mayor
en particular carcinoma metasttico de la prstata. Las
parte de las veces en la enfermedad sea. Se ha mostra
determinaciones de ACP total son tcnicas relativamente
do que la actividad se relaciona con los osteoclastos .32 Se
insensibles, que permiten detectar concentraciones altas
han observado concentraciones altas en enfermedad de
de ACP que resultan de carcinoma prosttico en la mayor
Paget; cncer de mama con metstasis sea, y enfermedad
parte de los casos slo cuando el tumor es metastsico.
de Gaucher, en la que clulas de Gaucher ricas en activi
Los marcadores ms recientes, como el antgeno espec
dad de ACP se infiltran en la mdula sea y otro tejido.
fico de prstata (PSA), son las herramientas de deteccin
Debido a la actividad de ACP en las plaquetas, se observan
y diagnstico ms tiles (vase el captulo 30, M arcadores
incrementos cuando ocurre dao plaquetario, como en la
tumor ales en circulacin).
trombocitopenia que resulta de la destruccin excesiva de
Uno de los sustratos ms especficos para ACP prost
plaquetas por prpura idioptica trombocitopnica.
tico es el monofosfato de timolftalena. Los mtodos de
inhibicin qumica empleados para diferenciar la porcin
prosttica emplean tartrato como inhibidor. El tartrato E nsayo p a ra actividad enzim tica
inhibe la fraccin prosttica. El suero y el sustrato se incu En los procedimientos para ACP total se emplean las mis
ban con y sin la adicin de L - tartrato. La actividad de ACP mas tcnicas que en los ensayos para ALP pero se efectan
que permanece despus de la inhibicin con L-tartrato se a pH cido:
resta de la actividad de ACP total determinada sin inhibi ACP
cin, y la diferencia representa la porcin prosttica: p-Nitrofenolfosfato
pH 5
La reaccin no es del todo especfica para ACP pros Los productos de la reaccin son incoloros al pH cido
ttica, pero otras fuentes de tejido estn desinhibidas en de la reaccin, pero la adicin de lcali detiene la reaccin
gran medida. y transforma los productos en cromgenos, que se pueden
Ninguno de estos mtodos de determinacin de ACP medir por medios espectrofotomtricos.
es sensible a carcinoma prosttico que no se encuentre Ya se han analizado algunas especificidades de sustrato
metastsico. Por lo general, los valores son normales en la e inhibidores qumicos para mediciones de ACP prosttica.
mayor parte de los casos y, de hecho, pueden ser altos slo El monofosfato de timolftalena es el sustrato de eleccin
en 50% de los casos de carcinoma prosttico que estn para reacciones de punto final cuantitativas. Para mtodos
metastsicos. de moni toreo continuo, se prefiere el a-naftil fosfato.
Una tcnica con mucha ms sensibilidad sobre los ensa Las tcnicas inmunoqumicas para ACP prosttica usan
yos de ACP ordinarios es el mtodo inmunolgico con diversos mtodos, como RIA, contrainmunoelectroforesis
anticuerpos que son especficos para la porcin prosttica. e inmunoprecipitacin. Tambin, un ensayo inmunoenzi-
Sin embargo, las tcnicas inmunoqumicas no son de valor mtico (tndem E) incluye incubacin con un anticuerpo
como pruebas de deteccin para carcinoma prosttico. a ACP prosttica seguida de lavado e incubacin con
El PSA tiene ms probabilidades que la ACP de per p-NFE El p-NF formado, medido fotomtricamente, es pro
manecer en una concentracin alta en cada etapa de porcional al ACP prosttico en la muestra.
CAPTULO 10 M ENZIMAS 255
Hexocinasa
insuficiencia renal y, por tanto, no es del todo especfica 5-Glucosa + 5 ATP
para pancreatitis aguda. La isoamilasa tipo S representa 5-glucosa-6-fosfato 4- 5 ADP
casi dos tercios de la actividad de AMS de suero normal,
r r v j - u - r l
mientras que el tipo P predomina en la orina normal. 5-glucosa-6-fosfato + 5 NAD ^
Ensayo p a ra actividad enzim tica 5,6-fosfogluconolactona + 5 NADH
El estudio de la AMS se puede realizar mediante diversos
(Ec. 10-22)
mtodos, los cuales se resumen en el cuadro 10-6. Los cua
tro mtodos principales se clasifican como amiloclstico, Debido a que la AMS salival es inhibida preferencial-
saccarognico, cromognico y de monitoreo continuo. mente por lectina de germen de trigo, la AMS salival y
En el mtodo amiloclstico, se permite que la AMS pancretica se puede estimar midiendo la AMS total en
acte sobre un sustrato de almidn al que se ha aadido presencia y ausencia de lectina. Tambin estn inmunoen-
yodo. Cuando la AMS hidroliza la molcula de almidn sayos especficos para medir isoenzimas de AMS.
en unidades ms pequeas, se libera yodo y ocurre una
disminucin en la intensidad de color azul oscuro inicial F u e n te d e e rro r
del complejo almidn-yodo. La disminucin de color es La AMS en el suero y la orina es estable. Ocurre poca pr
proporcional a la concentracin de AMS. dida de actividad a temperatura ambiente durante una
El mtodo sacarognico emplea un sustrato de almidn semana o a 4C durante dos meses. Debido a que los tri-
que se hidroliza mediante la accin de AMS en sus molcu glicridos plasmticos suprimen o inhiben la actividad de
las de carbohidrato constituyentes que tienen propiedades la AMS srica, los valores de AMS pueden ser normales en
reductoras. As, la cantidad de azcares reductoras se mide pancreatitis aguda con hiperlipemia.
donde la concentracin es proporcional a la actividad La administracin de morfina y otros opiceos para ali
de AMS. El mtodo sacarognico, el mtodo de referencia viar el dolor antes del muestreo sanguneo darn lugar a
clsico para la determinacin de actividad de AMS, se expre concentraciones de AMS srica falsamente altas. Se presume
sa en unidades Somogyi. Las unidades Somogyi son una que los frmacos causan constriccin del esfnter de Oddi y
expresin del nmero de miligramos de glucosa liberados conductos pancreticos, con elevacin posterior de presin
en 30 min a 37C en condiciones de ensayo especficas. inarticulada que causa regurgitacin de AMS en el suero.
Los mtodos cromognicos emplean almidn como el
Intervalo d e referen cia
sustrato en el que se ha aadido un colorante cromogni
AMS: suero, 25 a 130 U/L; orina, 1 a 15 U/hora.
co, que forma un complejo insoluble colorante-sustrato.
Como resultado de los distintos procedimientos de AMS
Cuando la AMS hidroliza el sustrato de almidn, se pro
en la actualidad en uso, la actividad se expresa de acuerdo
ducen fragmentos ms pequeos de colorante-sustrato, y
con cada procedimiento. No hay expresin uniforme de
stos son hidrosolubles. El incremento en la intensidad
actividad de AMS, aunque con frecuencia se emplean uni
de color de la disolucin de colorante-sustrato soluble es
dades Somogyi. El factor de conversin aproximado entre
proporcional a la actividad de AMS.
unidades Somogyi y unidades internacionales es 1.85.
En fechas recientes, se han empleado sistemas de enzi
ma acoplada para determinar la actividad de AMS median
te una tcnica de monitoreo continuo en el que se mide el Lipasa
cambio de absorbancia de NAD+ a 3 40 nm. La ecuacin La lipasa (LPS) es una enzima que hidroliza los enlaces de
10-22 es un ejemplo de un mtodo de monitoreo conti ster de las grasas para producir alcoholes y cidos grasos.
nuo. Para actividad de AMS, el pH ptimo es 6.9. De manera especfica, la LPS cataliza la hidrlisis parcial
ALT
Maltopentosa maltrotriosa + maltosa de triglicridos de la dieta en el intestino al intermedia
rio 2-monoglicrido, con produccin de cidos grasos de
a-glucosidasa
Maltrotriosa + maltosa 5-glucosa cadena larga. La reaccin procede de acuerdo con la ecua
cin 10-23:
CUADRO 10-6. M ETO D O LO G A S D E A M IL A S A O
Amiloclstica Mide la desaparicin del
sustrato de almidn CH2 O C R i CH2OH
un tinte cromognico
c h 2 o c r 3
Monitoreo continuo Unin de varios sistemas de
Triacilglicerol 2-Monoglicrido
enzim as para vigilar la
actividad de la amilasa
(E c 10-23)
258 PARTE II CORRELACIONES CLNICAS Y PROCEDIMIENTOS ANALTICOS
Im portancia diagnstica
Los ensayos clnicos de mediciones de LPS srica estn con D eshidrogenasa de glucosa-6-fosfato
finados casi de manera exclusiva al diagnstico de pancrea La deshidrogenasa de glucosa-6 -fosfato (G - 6 -PD) es una
titis aguda. Es similar en este respecto a las mediciones de oxidorreductasa que cataliza la oxidacin de glucosa- 6 -fos-
AMS pero ms especfica para trastornos pancreticos que fato a 6-fosfogluconato o la lactona correspondiente. La
la medicin de AMS. Tanto la concentracin de AMS como reaccin es importante como primer paso en la derivacin
la de LPS aumentan con rapidez, pero los incrementos de de pentosa-fosfato del metabolismo de la glucosa con la
LPS persisten por casi 5 das en pancreatitis aguda, mien produccin ltima de NADPH. La reaccin se describe en
tras que los incrementos de AMS persisten durante slo 2 la ecuacin 10-25:
a 3 das. El alcance de los incrementos no tiene correlacin
con la gravedad de la enfermedad. Las concentraciones
altas de LPS se pueden hallar tambin en otras condicio OH
nes intraabdominales, pero con menos frecuencia que los
incrementos de AMS srica. Se han determinado incremen H C ----------
tos en casos de lceras duodenales penetrantes y ppticas
perforadas, obstruccin intestinal y colecistitis aguda. En HC OH
contraste con las concentraciones de AMS, las concentra G-6-PD
ciones de LPS son normales en condiciones de interaccin HO CH 0 4 NADP+
de las glndulas salivales. Por tanto, las concentraciones de
LPS son tiles para diferenciar el incremento de AMS srica HC OH
como resultado de interaccin pancretica contra salival.
De las tres isoenzimas de lipasa, se considera que L2 es la H C ----------
ms especfica y sensible desde el punto de vista clnico.
E nsayo p a ra actividad enzim tica CH2O P 0 3 =
Los procedimientos empleados para medir actividad de Glucosa- 6 -fosfato
LPS incluyen estimacin de cidos grasos liberados y
mtodos turbidimtricos. La reaccin se describe en la O
ecuacin 10-24: II
C -----------
Triglicrido + 2 H20
(p H , 8 .6 -9 .0 )
Im portancia diagnstica
RESUMEN
Casi todo el inters de la G - 6-PD se centra en su funcin
en el eritrocito. Aqu, funciona para mantener al NADPH Las enzimas, halladas en todos los tejidos del cuerpo,
en forma reducida. Se requiere una concentracin ade son protenas que catalizan reacciones bioqumicas. Las
cuada de NADPH para regenerar protenas que contienen reacciones catalizadas son especficas y esenciales para
sulfhidrilo, como el glutatin, del estado oxidado al redu el bienestar fisiolgico. En la lesin o en muchos estados
cido. El glutatin en la forma reducida, a su vez, protege morbosos, se liberan ciertas enzimas de sus ubicaciones
a la hemoglobina de oxidacin por agentes que podran normales y aparecen en cantidades incrementadas en la
estar presentes en la clula. Una deficiencia de G- 6 -PD da circulacin general. En el diagnstico y tratamiento de
como resultado un suministro inadecuado de NADPH y, ciertos estados morbosos es til comprender la importan
en ltima instancia, en la capacidad para mantener con cia biolgica de las enzimas y las reacciones que catalizan.
centraciones reducidas de glutatin. Cuando se exponen En este captulo se revisaron las propiedades generales
los eritrocitos a agentes oxidantes, ocurre hemolisis como de las enzimas y su clasificacin y mecanismos catalticos.
resultado de la oxidacin de hemoglobina y dao a la Se analizaron tambin varios factores que afectan la velo
membrana celular. cidad de las reacciones enzimticas y los mtodos genera
La deficiencia de G- 6-PD es un rasgo hereditario rela les para medir actividad enzimtica.
cionado con el sexo. El trastorno puede originar diferen Muchas enzimas son clnicamente importantes. Cuan-
tes manifestaciones clnicas, una de las cuales es anemia tificar las concentraciones sricas de ciertas enzimas o
hemoltica inducida por frmacos. Cuando son expuestos isoenzimas puede ayudar en el diagnstico y pronstico
a un frmaco oxidante como la primaquina, un frmaco de trastornos hepticos, del msculo esqueltico, seos,
antipaldico, los individuos afectados experimentan un cardacos; malignidad, o pancreatitis aguda. En este cap
episodio hemoltico. La gravedad de la hemolisis se rela tulo se analiz la fuente de tejido, la importancia diagns
ciona con la concentracin del frmaco. La deficiencia de tica, las metodologas en ensayo preferidas y los intervalos
G - 6-PD es ms comn en afroestadounidenses, pero ha de referencia de varias enzimas importantes desde el pun
sido descrita en todo grupo tnico. to de vista clnico.
P R E G U N T A S DE R E P A S O
3. Las velocidades de reacciones enzimticas se incre 7. Qu isoenzima de CK tiene una concentracin alta
mentan al aumentar las temperaturas hasta que alcan en enfermedades musculares?
zan el punto de desnaturalizacin en: d) CK-BB.
a) 40 a 60C. b ) CK-MB.
b) 25 a 35C. c) CK-MM.
c) 100C. d) CK-NN.
d) 37C.
8. Por lo general, el incremento en la concentracin de
4. Un ejemplo de usar enzimas como reactivos en el amilasa y lipasa sricas se observa en:
laboratorio clnico es: fl) Apendicitis aguda.
a) El mtodo de nitrgeno ureico sanguneo (US) b) Pancreatitis aguda.
monoxima de diacetilo. c) Enfermedad de la vescula biliar.
b ) El mtodo de la hexocinasa glucosa. d) Enfermedad de reflujo cido.
c) El mtodo de creatinina de picrato alcalino.
9. El mtodo saccarognico para determinaciones de
d) El mtodo de protena total de biuret.
amilasa mide:
5. Se puede determinar la actividad de las enzimas en el a) La cantidad de producto producida.
suero y no la concentracin porque: b) La cantidad de sustrato consumido.
a) La temperatura es demasiado alta. c) La cantidad de yodo presente.
b ) La cantidad de enzima es muy baja para medir. d) La cantidad de almidn presente.
c) No hay sustrato suficiente.
10. El incremento de la concentracin de enzimas tisula-
d) La cantidad de enzima es muy alta para medir.
res en el suero se puede usar para detectar:
6. Las concentraciones de las isoenzimas LD-4 y LD-5 a) Presencia de toxinas.
son altas en: b) Enfermedades infecciosas.
a) Embolismo pulmonar. c) Necrosis o dao tisular.
b) Enfermedad heptica. d) Diabetes mellitus.
c) Enfermedad renal.
d) Infarto de miocardio.
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C A P T U L O
Carbohidratos
Vicki S. Freeman
11
C O N T E N I D O D EL C A P T U L O
O B J E T I V O S
262
CAPTULO 11 CARBOHIDRATOS 263
T E R M I N O S C L A V E
Los organismos dependen de la oxidacin de compues Los carbohidratos son hidratos de derivados de aldehi
tos orgnicos complejos para obtener energa. Tres tipos do o cetona con base en la ubicacin del grupo funcional
generales de esta clase de compuestos son carbohidratos, CO (fig. 11-1). Las dos formas de carbohidratos son aldosa
aminocidos y lpidos. Aunque los tres se emplean como y cetosa (fig. 11-2). La aldosa tiene un aldehido como su
fuente de energa, los carbohidratos son la fuente prima grupo funcional, mientras que la cetosa tiene una cetona
ria del cerebro, eritrocitos y clulas retinales en humanos. como el grupo funcional. El carbono en el grupo funcional
Los carbohidratos son la fuente de alimento principal y se llama carbono anomrico.
suministro de energa del cuerpo, y se almacenan sobre Se emplean varios modelos para representar carbohi
todo como glucgeno del hgado y msculo. Los estados dratos. La proyeccin de F isher de un carbohidrato tiene
morbosos relacionados con carbohidratos se dividen en al aldehido o cetona en la parte superior del dibujo. Los
dos grupos: hiperglucemia e hipoglucemia. La deteccin carbonos se numeran comenzando en el extremo aldehido
oportuna de diabetes mellitus es el objetivo de las normas o cetona. El compuesto se puede representar como una
de la A m erican Diabetes Association establecidas en 1997. cadena recta o se podra unir para mostrar una represen
Las complicaciones aguda y crnica se pueden evitar con tacin de la forma hemiacetal cclica (fig. 11-3). La pro
el diagnstico, monitoreo y tratamiento. El laboratorio yeccin d e H aworth representa al compuesto en la forma
desempea un papel importante a travs de mediciones cclica que es ms representativa de la estructura real. Esta
peridicas de hemoglobina glucosilada y microalbmina. estructura se forma cuando el grupo funcional (cetona o
aldehido) reacciona con un grupo alcohol en el mismo
DESCRIPCIN GEN ERAL DE LOS azcar para formar un anillo llamado el anillo hem iacetal
CARBOHIDRATOS (fig. 11-4).
grupo cetona en el carbohidrato forma un enlace de oxge lactasa son otras dos enzimas importantes derivadas del
no. Si el enlace se forma con uno de los otros carbonos en intestino que hidrolizan la sucrosa a glucosa, y la fructosa
el carbohidrato distintos al carbono anomrico, este lti y lactosa a glucosa y galactosa.
mo (grupo funcional) no sufre ningn cambio y el grupo Cuando los disacridos son convertidos a monosa
resultante es una sustancia reductora. cridos, son absorbidos por el intestino y transportados
Si el enlace se forma con el carbono anomrico en el al hgado por el suministro sanguneo venoso del portal
otro carbohidrato, el compuesto resultante y a no es una heptico. La glucosa es el nico carbohidrato que se usa
sustancia reductora. Los carbohidratos no reductores no de manera directa para energa o se almacena como gluc
tienen un grupo cetona o aldehido activo. No oxidarn o geno. La galactosa y la fructosa deben convertirse a gluco
reducirn otros compuestos. El azcar no reductor ms sa antes que se puedan usar. Despus que la glucosa entra
comn es la sucrosa, azcar de mesa (fig. 11-7). a la clula, es desviada con rapidez hacia una de tres posi
Los monosacridos y m uchos disacridos son agentes bles vas metablicas, dependiendo de la disponibilidad
reductores. Esto se debe a que el aldehido o cetona libre de sustratos o del estado nutricional de la clula. El obje
(la forma de cadena abierta) se puede oxidar bajo condi tivo final de la clula es convertir la glucosa en dixido de
ciones apropiadas. Como un disacrido, uno de los alde carbono y agua. Durante este proceso, la clula obtiene
hidos o cetonas suele ser alfa para al enlace glucosdico. la molcula de alta energa trifosfato de adenosina (ATP)
El otro aldehido o cetona an est libre para funcionar de fosfato inorgnico y difosfato de adenosina (ADP). La
como agente reductor. Sin embargo, cuando ambos alde clula requiere oxgeno para las etapas finales en la cade
hidos o cetonas son alfa respecto al enlace glucosdico, na de transporte de electrones (C TE). El dinucletido
como en la sucrosa, entonces el disacrido es capaz de de nicotinamida y adenina (NAD) en su forma reducida
experimentar mutarrotacin y es, por tanto, incapaz de fun (NADH) actuar como un intermediario para acoplar la
cionar como un agente reductor. Tanto la maltosa como la oxidacin de glucosa a la CTE en las mitocondrias donde
lactosa son agentes reductores, mientras que la sucrosa se obtiene mucho del ATP.
no lo es. El primer paso para las tres vas requiere que la glucosa
sea convertida a glucosa- 6 -fosfato por medio de la mol
M etabolism o de la glucosa cula de alta energa, ATP. Esta reaccin se cataliza median
te la enzima hexocinasa (fig. 11-8). La glucosa 6 -fosfato
La glucosa es la fuente primaria de energa para los huma puede entrar a la va de E m bdm -M yerhoj o a la va del
nos. El sistema nervioso, incluso el cerebro, depende por m onofosfato de hexosa o se puede convertir en glucgeno
completo de la glucosa del lquido extracelular circundan (fig. 11-8). Las primeras dos vas son importantes para la
te (LEC) para la energa. El tejido nervioso no puede con generacin de energa a partir de glucosa; la conversin a
centrar o almacenar carbohidratos; por tanto, es crtico la va del glucgeno es importante para el almacenamiento
mantener un suministro permanente de glucosa para el de glucosa.
tejido. Por esta razn, la concentracin de glucosa en el En la va de Embden-Myerhof, la glucosa se descom
LEC se debe mantener en un intervalo reducido. Cuando pone en dos molculas de tres carbonos de cido pirvico
la concentracin cae abajo de cierto nivel, el tejido ner que pueden entrar al ciclo del cido tricarboxlico (ciclo
vioso pierde la fuente de energa primaria y es incapaz de ATC) en la conversin a acetil-coenzima A (acetil-CoA).
mantener la funcin normal. Esta va requiere oxgeno y se denomina va aerb ica (fig.
11-8). Otros sustratos tienen la oportunidad de entrar a
D estino de la glucosa la va en varios puntos. El glicerol liberado de la hidr
lisis de triglicridos puede entrar en 3-fosfoglicerato, los
La mayor parte de los carbohidratos que ingerimos son cidos grasos y cetonas, y algunos aminocidos pueden
polmeros, como el almidn y el glucgeno. La digestin
ser convertidos o catabolizados a acetil-CoA, que es par
de estos polmeros no absorbibles a dextrinas y disacri te del ciclo del ATC. Otros aminocidos entran a la va
dos, que luego son hidrolizados a monosacridos por la como piruvato o como a-cetocidos o a-oxocidos des
maltasa, una enzima liberada por la mucosa intestinal, se animados. La conversin de aminocidos por el hgado y
debe a la amilasa salival y a la pancretica. La sucrasa y la
otro tejido especializado, como el rin, a sustratos que
pueden ser convertidos a glucosa se llama gluconeognesis.
Esta ltima tambin comprende la conversin a glicerol,
lactato y piruvato a glucosa.
La gluclisis anaerbica es importante para tejido como
el msculo, que con frecuencia tiene requisitos de energa
importantes sin un suministro adecuado de oxgeno. Estos
tejidos pueden derivar ATP de la glucosa en un ambiente
con deficiencia de oxgeno al convertir el cido pirvico
en cido lctico. El cido lctico se difunde desde las clu
las del msculo, entra a la circulacin sistmica y luego
el hgado lo toma y emplea (fig. 11-8). Para que ocurra
FIGURA 11-7. Proyeccin de Haworth de la sucrosa. la gluclisis anaerbica, se deben consumir dos moles de
266 PARTE II CORRELACIONES CLNICAS Y PROCEDIMIENTOS ANALTICOS
GLUCOSA
EXTRACELULAR
GLUCGENO
' Slntasa de A TP ^C O S a
G A L A C T O S A \ \ 9 luc9 en0 Hexocinasa j T Glucosa-6-fosfatasa
(slo hgado)
ADP-
Glucosa 1-PO Glucosa 6-PO4 Acido 6-fosfoglucnico
I
MAOSA Fructosa 6-P0 4 Pentosas
ATP
Fosfofructocinasa 1 Fructosa-1,6-bisfosfatasa
ADP-r
Fructosa 1,6-dlfosfato
2 NAD+
il
3-Fosfoglicerl fosfato (2)
2 ADP
LIPIDOS
2 NADH 2 ATP
Glicerol 3-Fosfogllcerato (2)
Acidos grasos.
Fosfoenolpiruvato (2)
PROTENA 2AD P^ I A
^Cinasa de piruvatoj 2 NADH 2 NAD+
2ATP-<<Y I
Piruvato (2) -< Lactato (2)
Deshidrogenasa de lactato
CETONAS
Aminocidos Acetil-CoA
CICLO DEL CIDO
TRICARBOXLICO
-Cetocidos
-Oxocidos
ATP por cada mol de glucosa; sin embargo, se producen tambin permite a las pentosas, como la ribosa, entrar a
de modo directo 4 moles de ATP, lo que da como resultado la va glucoltica.
una ganancia neta de dos moles de ATP. Las ganancias adi Cuando se satisfacen los requisitos de energa de la
cionales de ATP resultan de la introduccin de piruvato en clula, la glucosa se puede almacenar como glucgeno.
el ciclo de ATC y el NADH en el CTE. Esta tercera va, que se llama glucognesis, es relativamente
La segunda va de energa es la desviacin de m onofos- directa. La glucosa 6-fosfato es convertida en glucosa 1-
fa to de hexosa (desviacin HMP), que es en realidad una fosfato, que luego se convierte en difosfoglucosa de uridina
desviacin de la glucosa 6 -fosfato de la va glucoltica y despus en glucgeno mediante la sintasa de glucgeno.
para convertirse en cido 6 -fosfoglucnico. El producto Varios tejidos pueden sintetizar glucgeno, en particular
oxidado permite la formacin de ribosa 5-fosfato y NDP el hgado y los msculos. Los hepatocitos son capaces de
en su forma reducida (NADPH). El NADPH es impor liberar glucosa de glucgeno y otras fuentes para mante
tante para los eritrocitos que carecen de mitocondrias y, ner la concentracin de glucosa en la sangre. Esto es por
por tanto, no pueden llevar a cabo el ciclo del ATC. La que el hgado sintetiza la enzima glucosa- 6-fosfatasa. Sin
capacidad reductora del NADPH se requiere para prote esta enzima, la glucosa es atrapada en la va glucoltica.
ger a la clula de dao oxidativo y por radicales libres. Las clulas del msculo no sintetizan glucosa- 6-fosfatasa
Sin NADPH, la membrana de bicapa lipdica de la clula y y, por tanto, no pueden desfosforilar glucosa. Una vez que
las enzimas crticas seran destruidas finalmente, y como la glucosa entra a la clula del msculo, permanece como
resultado se tendra muerte celular. La desviacin HMP glucgeno a menos que sea catabolizada. La glucogenlisis
CAPITULO 11 CARBOHIDRATOS 267
es el proceso mediante el cual el glucgeno se convierte de permite la conservacin de energa como lpidos cuando
nuevo en glucosa 6 -fosfato para entrar en la va glucolti se ingieren sustratos en exceso.
ca. En el cuadro 11-1 se describen las principales vas de La insulina es la hormona primaria a la que se debe la
energa relacionadas de manera directa o indirecta con el entrada de glucosa en la clula. Es sintetizada por las clu
metabolismo de la glucosa. las |3 de los islotes de Langerhans en el pncreas. Cuan
En general, el hgado y otras clulas pueden usar la do estas clulas detectan un incremento en la glucosa del
glucosa diettica y otros carbohidratos para energa o se cuerpo, liberan insulina. La liberacin de insulina causa
almacena como glucgeno para uso posterior. Cuando el un mayor movimiento de glucosa en las clulas y mayor
suministro de glucosa es bajo, el hgado usar glucgeno y metabolismo de glucosa. Por lo general, la insulina se libe
otros sustratos para aumentar la concentracin de glucosa ra cuando las concentraciones de glucosa son altas y no se
en la sangre. Estos sustratos incluyen glicerol de triglic- libera cuando disminuyen las concentraciones de gluco
ridos, cido lctico de la piel y msculos y aminocidos. sa. Esto reduce las concentraciones de glucosa plasmtica
Si se regula la liplisis de triglicridos, da como resultado al incrementar la entrada de transporte de glucosa en el
la formacin de cuerpos cetnicos, que el cerebro puede msculo y el tejido adiposo por medio de receptores no
usar como fuente de energa por el ciclo del ATC. La snte especficos. Tambin regula la glucosa al incrementar la
sis de glucosa de aminocidos es la gluconeognesis. Este glucognesis, lipognesis y gluclisis e inhibir la gluco-
proceso se usa junto con la formacin de cuerpos cetni genlisis. La insulina es la nica hormona que disminuye
cos cuando se agotan los depsitos de glucgeno con la concentraciones de glucosa y se le puede llamar agente
diciones relacionadas normalmente con la inanicin. La hipoglucm ico (cuadro 11- 2 ).
va fundam ental para la oxidacin de la glucosa es por El glucagon es la hormona primaria a la que se debe
la va de Embden-Myerhof. El NADPH se puede sintetizar el incremento de las concentraciones de glucosa. Se sin
por la desviacin HMP, que es una va lateral de la va glu tetiza mediante las clulas a de los islotes de Langer
coltica anaerbica (fig. 11- 8 ). hans en el pncreas y se libera durante estados de estrs
y ayuno. Cuando estas clulas detectan una disminucin
Regulacin del m ecanism o de carbohidratos en la glucosa del cuerpo, liberan glucagon. Esta sustan
cia incrementa las concentraciones de glucosa plasmtica
El hgado, pncreas y otras glndulas endocrinas intervie mediante glucogenlisis en el hgado y un incremento en
nen en el control de las concentraciones de glucosa san la gluconeognesis. Se puede llamar tambin agente hiper-
gunea en un intervalo reducido. Durante un ayuno breve, glucm ico (cuadro 11- 2 ).
la glucosa es suministrada al LEC desde el hgado por glu Dos hormonas que produce la glndula suprarrenal
coneognesis. Dos hormonas principales controlan la glu afectan el metabolismo de carbohidratos. La adrenalin a,
cosa sangunea: insulina y glucagon, ambas producidas en producida por la mdula espinal, incrementa la glucosa
el pncreas. Sus acciones se oponen entre s. Otras hormo plasmtica al inhibir la secrecin de insulina, incrementar
nas y sustancias neuroendocrinas tambin ejercen cierto la glucogenlisis y promover la liplisis. La adrenalina se
control sobre las concentraciones de glucosa sangunea, libera durante el estrs. Los glucocorticoides, sobre todo
que permite al cuerpo responder a mayores demandas de cortisol, se liberan de la corteza suprarrenal al estimular
glucosa o sobrevivir ayunos prolongados. Esto tambin la hormona adrenocorticotrpica (ACTH). El cortisol
incrementa la glucosa plasmtica al disminuir la entrada
intestinal en la clula e incrementar la gluconeognesis, el
glucgeno heptico y la liplisis.
Dos hormonas de la hipfisis anterior, hormona del
CUADRO 11-1. VAS EN EL METABOLISMO DE crecimiento y ACTH, promueven el incremento de glu
LA GLUCOSA cosa plasmtica. La horm ona del crecim iento incrementa la
glucosa plasmtica al disminuir la entrada de glucosa en
Gluclisis Metabolismo de la molcula de
las clulas e incrementar la gluclisis. Su liberacin de la
glucosa a piruvato o lactato para
hipfisis es estimulada por las concentraciones de gluco
produccin de energa
sa reducidas y se inhibe cuando se incrementa la gluco
Gluconeognesis Formacin de glucosa 6-fosfato de sa. Las concentraciones reducidas de cortisol estimulan
fuentes distintas a carbohidratos la hipfisis anterior para liberar ACTH. La ACTH, a su
vez, estimula la corteza suprarrenal para liberar cortisol e
Glucogenlisis Descomposicin de glucgeno a incrementa las concentraciones de glucosa plasmtica al
glucosa para uso como energa convertir el glucgeno heptico en glucosa y promover la
Glucognesis Conversin de glucosa a
gluconeognesis.
glucgeno para alm acenam iento
Otras dos hormonas afectan las concentraciones de
glucosa: tiroxina y somatostatina. La glndula tiroides es
Lipognesis Conversin de carbohidratos estimulada por la produccin de hormona estimulante
a cidos grasos de la tiroides (TSH) para liberar tiroxina que increm en
ta las concentraciones de glucosa plasmtica al aumentar
Liplisis Descomposicin de grasa la glucogenlisis, gluconeognesis y absorcin intestinal
268 PARTE II CORRELACIONES CLNICAS Y PROCEDIMIENTOS ANALTICOS
Accin de la insulina
Incrementa la glucognesis y la gluclisis: g lu co sa ------ * gluc g en o ---- p iru vato ---- * Acetil-CoA
Incrementa la lipognesis
Disminuye la glucogenlisis
Accin del glucagon
Incrementa la glucogenlisis:
G lu c g en o -------- > glucosa
Incrementa la gluconeognesis:
cidos g raso s-------- acetil-CoA -------- cetona
P ro ten as -------- aminocidos
de glucosa. La som atostatina, producida por las clulas 5 hgado, msculo y tejido adiposo. Tambin altera las vas
de los islotes de Langerhans del pncreas, incrementa las metablicas de la glucosa. La hiperglucemia, o concentra
concentraciones de glucosa plasmtica mediante la inhi ciones altas de glucosa plasmtica, es causada por un des
bicin de insulina, glucagon, hormona del crecimiento y equilibrio de hormonas.
otras hormonas endocrinas.
D iabetes m ellitus
HIPERGLUCEM IA
La diabetes mellitus es en realidad un grupo de enferme
La hiperglucem ia es un incremento en las concentraciones dades metablicas caracterizadas por hiperglucemia que
de glucosa plasmtica. En pacientes saludables, durante resultan de defectos en la secrecin de insulina, accin de
un estado de hiperglucemia, las clulas (3 de los islotes sta, o ambas. En 1979, el grupo N ational D iabetes D ata
pancreticos de Langerhans secretan insulina. sta incre elabor un esquema de clasificacin y diagnstico para la
menta la permeabilidad de la membrana a clulas del diabetes mellitus .1 En este esquema se incluy la diabetes
ES T U D IO D E C A S O 11-1
mellitus en dos categoras amplias: tipo 1, diabetes melli con un defecto secretorio de insulina. Una etapa interme
tus insulinodependiente (DM ID), y tipo 2, diabetes melli dia, en la que la glucosa de ayuno se incrementa arriba de
tus no insulinodependiente (DMNID). los lmites normales pero no a la concentracin de diabe
Establecido en 1995, el Comit de Expertos Internacio tes, ha sido denominada glucosa de ayuno alterada. Se retu
nal en el Diagnstico y Clasificacin de la Diabetes Melli vo el trmino intolerancia a la glucosa para indicar valores
tus, trabajando bajo el patrocinio de la ADA, se le asign de tolerancia a la glucosa arriba de lo normal pero abajo
la tarea de actualizar el sistema de clasificacin de 1979. de las concentraciones de diabetes. Asimismo, se retuvo
Los cambios propuestos incluyeron eliminar los trminos el trmino diabetes mellitus gestacional para mujeres que
antiguos DMID y DMNID. Se retuvieron las categoras de desarrollan intolerancia a la glucosa durante el embarazo.
tipo 1 y 2 , con la adopcin de nmeros arbigos en lugar La diabetes m ellitus tipo 1 es un resultado de la destruc
de nmero romanos (cuadro 11-3 ).2 cin autoinmune mediada por clulas de las clulas (3 del
Por tanto, las normas de la ADA y la Organizacin pncreas, que causa una deficiencia absoluta de secrecin
Mundial de la Salud (OMS) recomendaron las siguientes de insulina. El lmite superior de 110 mg/dl en la glucosa
categoras de diabetes: plasmtica de ayuno se designa como el lmite superior
de la glucosa sangunea normal. El tipo 1 constituye slo
Diabetes tipo 1
10 a 20% de toda la diabetes y, por lo general, ocurre en la
Diabetes tipo 2
niez y la adolescencia. Esta enfermedad se inicia normal
Otros tipos especficos de diabetes
mente por un factor ambiental o infeccin (por lo regular
Diabetes mellitus gestacional (DMG)
un virus) en individuos con predisposicin gentica y cau
La diabetes tipo 1 se caracteriza por hiperglucemia sa la destruccin inmune de las clulas |3 del pncreas y,
inapropiada que es resultado sobre todo de la destruccin por tanto, una produccin reducida de insulina. Las carac
de clulas (3 de los islotes pancreticos y una tendencia a tersticas de la diabetes tipo 1 incluyen inicio abrupto,
cetoacidosis. La diabetes tipo 2, en contraste, incluye casos dependencia de insulina y tendencia a cetoacidosis. El tipo
de hiperglucemia que resultan de resistencia a la insulina diabtico est relacionado de manera gentica. Uno o ms
de los marcadores siguientes se encuentra en 85 a 90% de
los individuos con hiperglucemia de ayuno: autoanticuer-
CUADRO 11-3. C LA SIFIC A C I N D E LA pos de las clulas de los islotes, autoanticuerpos de insuli
D IA B ETES M ELLITUS na, autoanticuerpos de descarboxilasa de cido glutmico
PATOGNESIS
y anticuerpos de fosfatasa de tirosina IA-2, IA-2B.
Los signos y sntomas incluyen polidipsia (sed exce
Tipo 1 Destruccin de clulas |3 siva), polifagia (mayor ingestin de alimentos), poliuria
Deficiencia de insulina absoluta (produccin excesiva de orina), prdida rpida de peso,
Autoanticuerpos hiperventilacin, confusin mental y posible prdida de
Autoanticuerpos de clulas de la conciencia (debido a mayor cantidad de glucosa para
los islotes el cerebro). Entre las complicaciones estn los proble
Autoanticuerpos de insulina mas microvasculares como nefropata, neuropata y reti-
Autoanticuerpos de descarboxilasa nopata. Una mayor cardiopata tambin se encuentra en
de cido glutmico pacientes con diabetes. En el cuadro 11-4 se listan los
Autoanticuerpos IA-2 y IA-2B de hallazgos de laboratorio en la hiperglucemia. La diabetes
fosfatasa de tirosina idioptica tipo 1 es una forma de diabetes tipo 1 que no
Tipo 2 Resistencia a la insulina con un tiene causas conocidas, depende mucho de la herencia y
defecto secretorio de insulina no tiene autoinmunidad de clulas (5. Los individuos con
Deficiencia de insulina relativa esta forma de diabetes tienen requisitos episdicos para
reemplazo de insulina.
Otra Relacionada con condiciones
La diabetes mellitus tipo 2 se caracteriza por hiperglu
secundarias
cemia como resultado de la resistencia de un individuo
Defectos genticos de la funcin de
a la insulina con un defecto secretorio de insulina. Esta
las clulas |3
Enfermedad pancretica
Enfermedad endocrina CUADRO 11-4. H A LLA ZG O S D E LABORATO RIO
Inducida por frmacos o sustancias EN H IP ER G LU CEM IA _____________________________________
qumicas
Concentracin alta de glucosa en plasma y orina
Anormalidades del receptor de
insulina Mayor densidad relativa de la orina
Otros sndromes genticos Mayor osmolalidad de suero y orina
Gestacional Intolerancia a la glucosa durante el Cetonas en suero y orina (cetonemia y cetonuria)
embarazo
Debida a cambios metablicos y pH reducido de sangre y orina (acidosis)
hormonales Desequilibrio electroltico
270 PARTE II CORRELACIONES CLINICAS Y PROCEDIMIENTOS ANALTICOS
resistencia origina una deficiencia de insulina relativa no Otros tipos especficos de diabetes se relacionan con cier
absoluta. El tipo 2 constituye la mayor parte de los casos tas condiciones (secundarias), que incluyen defectos gen
de diabetes. La mayora de los pacientes con este tipo de ticos de la funcin de las clulas |3 o accin de la insulina,
diabetes son obesos o tienen un alto porcentaje de distri enfermedad pancretica, enfermedades de origen endo
bucin de grasa corporal en la regin abdominal. Este tipo crino, anormalidades de receptores de insulina inducidas
de diabetes suele no ser diagnosticada durante muchos por frmacos o compuestos qumicos y ciertos sndromes
aos y se relaciona con una fuerte predisposicin genti genticos. Las caractersticas y pronstico de esta forma de
ca, donde los pacientes con mayor riesgo son los de mayor diabetes dependen del trastorno primario. La diabetes de
edad, con obesidad y falta de ejercicio fsico. De ordinario, la juventud de inicio en la madurez (MODY) es una forma
las caractersticas incluyen inicio de la enfermedad en la rara de diabetes que es heredada en un modo dominante
edad adulta y sntomas ms leves que en la diabetes tipo 1. autosm ico .3
Pocas veces se presenta cetoacidosis. Sin embargo, estos La diabetes mellitus gestacional (DMG) es cualquier
pacientes tienen ms probabilidades de entrar en un coma grado de intolerancia a la glucosa con inicio o primer reco
hiperosmolar y poseen mayor riesgo de desarrollar com nocimiento durante el embarazo .4 Las causas de DMG
plicaciones macro y microvasculares. son cambios metablicos y hormonales. Las pacientes con
ES T U D IO D E C A S O 11-2
ES T U D IO D E C A S O 11-3
DMG con frecuencia vuelven a la normalidad despus del resultado de la hipertrigliceridemia. La concentracin de
parto. Sin embargo, esta enfermedad se relaciona con com triglicridos incrementada en demasa desplazar al volu
plicaciones perinatales incrementadas y un mayor riesgo men plasmtico y dar la apariencia de una menor canti
de desarrollar diabetes mellitus en aos posteriores. Los dad de electrlitos cuando se empleen fotometra de flama
infantes que nacen de madres con diabetes tienen mayor o electrodos especficos de iones, prediluidos, para deter
riesgo de sndrome de dificultad respiratoria, hipocalce- minaciones de sodio. La hiperpotasemia casi siempre est
mia e hiperbilirrubinemia. La secrecin de insulina fetal presente como resultado del desplazamiento de potasio de
es estimulada en el neonato de una madre con diabetes. las clulas en la acidosis. Esto es un poco engaoso porque
Sin embargo, cuando nace el infante y se corta el cordn por lo general la concentracin de potasio en el cuerpo del
umbilical, se interrumpe de manera abrupta el suministro paciente es baja.
en exceso del infante, lo cual causa hipoglucemia aguda. Ms representativo del paciente con diabetes tipo 2
sin tratamiento es el estado hiperosmolar no cetsico. El
individuo que presenta este sndrome tiene una sobre
Fisiopatologa de la diabetes m ellitus produccin de glucosa; sin embargo, al parecer hay un
desequilibrio entre produccin y eliminacin en la orina.
En la diabetes tipo 1 y tipo 2, el individuo tendr hiperglu
Con frecuencia, este estado es precipitado por cardiopata,
cemia, que puede ser grave. La glucosuria tambin pue
de ocurrir despus que se satura el sistema de transporte accidente cerebrovascular o pancreatitis. Las concentra
ciones de glucosa exceden los 300 a 500 mg/dl (17 a 28
tubular renal para la glucosa. Esto sucede cuando la con
mmol/L) y hay deshidratacin intensa. sta contribuye a
centracin de glucosa del plasma excede casi 180 mg/dl
la incapacidad para excretar glucosa en la orina. La mor
en un individuo con funcin renal y produccin de orina
talidad es alta con esta condicin. No se observa presencia
normales. A medida que contina la sobreproduccin de
de cetonas porque el estado hiperosmolar agudo inhibe
glucosa heptica, la concentracin de glucosa plasmtica
la capacidad del glucagon para estimular la liplisis. Los
se estabiliza en alrededor de 300 a 500 mg/dl (17 a 28
hallazgos de laboratorio de coma hiperosmolar no cetsico
mmol/L). Siempre que se mantenga la produccin renal, la
incluyen valores de glucosa plasmtica mayores que 1000
excrecin de glucosa corresponder con la sobreproduc
mg/dl (55 mmol/L), concentraciones normales o altas de
cin, que causa el nivel relativamente estable.
sodio y potasio en el plasma, concentracin un poco baja
El individuo con diabetes tipo 1 tiene una mayor ten
de bicarbonato, concentraciones altas de nitrgeno ureico
dencia a producir cetonas. Los pacientes con diabetes tipo
sanguneo (US) y creatinina e incremento de la osmola
2 pocas veces generan cetonas, pero en cambio tienen una
mayor tendencia a desarrollar estados no cetsicos hipe- lidad. El aumento total de glucosa y osmolalidad, el incre
mento de US y la ausencia de cetonas distinguen a esta
rosmolares. Al parecer la diferencia en las concentraciones
de glucagon e insulina en estos dos grupos causa la gene condicin de la cetoacidosis diabtica.
Otras formas de metabolismo daado de la glucosa que
racin de cetonas a travs de la oxidacin (3 incrementada.
no satisfacen los criterios para diabetes mellitus incluyen
En el tipo 1, hay ausencia de insulina con un exceso de
glucosa de ayuno alterada e intolerancia a la glucosa. Estas
glucagon. Esto permite que ocurran la gluconeognesis y
formas se analizan en la siguiente seccin.
la liplisis. En el tipo 2, la insulina est presente como tal
(a veces) en la hiperinsulinemia; por tanto, el glucagon
est atenuado. En el tipo 2 se inhibe la oxidacin de ci Criterios para el diagnstico de
dos grasos. Esto causa que los cidos grasos se incorporen la d iabetes m ellitus
en los triglicridos para liberacin como lipoprotenas de
El Comit de Expertos de EUA modific los criterios de
muy baja densidad.
diagnstico para la diabetes mellitus a fin de permitir la
Los hallazgos de laboratorio de un paciente con dia
deteccin oportuna de la enfermedad. Segn las reco
betes o cetoacidosis tienden a reflejar deshidratacin,
mendaciones de la ADA, los adultos con ms de 45 aos
alteracin de electrlitos y acidosis. El acetoacetato, el |3-
deben solicitar una medicin de la glucosa sangunea de
hidroxibutirato y la cetona se producen de la oxidacin de
ayuno cada tres aos a menos que la persona est enterada
cidos grasos. Los dos primeros cuerpos cetnicos contri
buyen a la acidosis. El lactato, cidos grasos y otros cidos que tiene diabetes. La prueba se debe realizar a una edad
menor o con ms frecuencia en persona que muestren:
orgnicos tambin pueden contribuir en menor grado. De
ordinario, las concentraciones de bicarbonato y dixido Obesidad (120% del peso corporal deseable o ndice de
de carbono total son bajas debido a la respiracin de Kuss- masa corporal [1MC] de 27 kg/m2).
maul-Kien (respiraciones profundas). ste es un mecanis Antecedentes familiares de diabetes en un pariente de
mo de compensacin para expulsar dixido de carbono y primer grado.
eliminar iones hidrgeno en el proceso. El intervalo am Pertenencia a una poblacin minoritaria de alto riesgo
nico en esta acidosis puede exceder 16 mmol/L. La osmo (p. ej., afroestadounidense, hispanoamericano, nativo
lalidad srica es alta como resultado de hiperglucemia; las americano o asiaestadounidense).
concentraciones de sodio tienden a ser ms bajas en parte Antecedentes de DMG o dar a luz un beb > 4 . 1 kg.
debido a las prdidas (poliuria) y en parte a un cambio de Hipertensin (>140/90)
agua de las clulas como resultado de la hiperglucemia. Concentraciones bajas de colesterol de lipoprotenas de
El valor del sodio no se debe subestimar falsamente como alta densidad (HDL) (p. ej., < 3 5 mg/dl)
272 PARTE II CORRELACIONES CLNICAS Y PROCEDIMIENTOS ANALTICOS
ES T U D IO D E C A S O 11-4
Una adolescente de 13 aos de edad sufre un colapso Los resultados del laboratorio incluyeron
en el patio de la escuela. Cuando se contacta a la madre,
ORINA ALEATORIA QUMICA DEL SUERO
menciona que su hija ha estado perdiendo peso y que
va con frecuencia al bao durante la noche. La brigada pH 5.5 Glucosa 500 mg/dl
de rescate not un aliento con olor a frutas. Al ingresar Protena Negativo Cetonas Positivo
al departamento de urgencias sus signos vitales fueron
los siguientes: Glucosa 4+ US 6 mg/dl
Cetonas Moderada Creatinina 0.4 mg/dl
Presin arterial 98/50 Sangre Negativo
Respiraciones Rpidas
Temperatura 37.2C Preguntas
1. Identifique el tipo ms probable de diabetes de esta
paciente.
2. Con base en su identificacin, circule las caracters
ticas ms comunes relacionadas con el tipo de diabe
tes en el estudio de caso anterior.
3. Cul es la causa de aliento con olor a frutas?
CAPTULO 11 CARBOHIDRATOS 273
(7.8 mmol/dl), entonces es necesario llevar a cabo una (cuadro 11-8 ).5 Entre los pacientes que en apariencia son
POTG con una carga de 100 g de glucosa. La DMG se diag saludables, estn aqullos con una enfermedad coexistente
nostica cuando se satisfacen o exceden dos de los cuatro compensada o sin ella. En esta categora se incluye a indi
valores siguientes: ayuno, > 1 0 5 mg/dl, 1 hora, < 1 9 0 mg/ viduos en los que las medicaciones pueden ser la causa de
di; 2 horas, S 1 6 5 mg/dl; o 3 h, ^ 1 4 5 mg/dl. la hpoglucemia por ingestin incidental a causa de error
de dispensacin. Es posible que las personas enfermas
H IPO GLUCEM IA tengan una enfermedad que predispone a hpoglucemia, o
bien pueden experimentar interaccin entre el frmaco y
La hpoglucem ia tiene que ver con concentraciones redu la enfermedad que origina hpoglucemia. La hpoglucemia
cidas de glucosa plasmtica y puede tener muchas causas en pacientes hospitalizados se puede adscribir a factores
-algunas son transitorias y relativamente insignificantes; yatrognicos. Los sntomas de hpoglucemia son mucha
otras pueden ser una amenaza para la vida. La concentra hambre, sudacin, nusea y vmito, mareo, nerviosismo
cin de glucosa plasmtica a la que se liberan glucagon y y agitacin, habla titubeante y visin borrosa y confusin
otros factores glucmicos est entre 65 y 70 mg/dl (3.6 a mental. Los hallazgos de laboratorio incluyen concentra
3.9 mmol/L); en cerca de 50 a 55 mg/dl (2.8 a 3.0 mmol/ ciones bajas de glucosa plasmtica durante el episodio
L), aparecen sntomas observables de hpoglucemia. Los
signos y sntomas de advertencia de hpoglucemia estn
CUADRO 11-8. C A U SA S DE H IPO G LU CEM IA
relacionados con el sistema nervioso. La liberacin de
adrenalina hacia la circulacin sistmica y noradrenalina El paciente parece saludable
en las terminales nerviosas de neuronas especficas actan
Enfermedad no Frmacos
jun to con el glucagon para incrementar la glucosa plas
coexistente Insulinoma
mtica. El glucagon se libera de las clulas de los islotes del
Hiperplasia de los islotes/
pncreas e inhibe a la insulina. La adrenalina se libera de la
nesidioblastosis
glndula suprarrenal e increm enta el m etabolism o de
Hpoglucemia facticial de
la glucosa e inhibe a la insulina. Adems, el cortisol y la
insulina o sulfonilurea
hormona del crecimiento se liberan e incrementan el meta
Hpoglucemia cetsica
bolismo de la glucosa.
Histricamente, la hpoglucemia se clasific como Enfermedad coexistente Frmacos
posabsortiva (de ayuno) y posprandial (reactiva). Sin compensada
embargo, la hpoglucemia reactiva slo describa el momen El paciente parece enfermo
to de la hpoglucemia, no la causa. Los enfoques actuales
Frmacos
hacen pensar en una clasificacin con base en las caracte
Enfermedad predisponentes
rsticas clnicas. Esta clasificacin separa a los pacientes en
Paciente hospitalizado
los que parecen estar saludables y los que estn enfermos
ES T U D IO D E C A S O 11-5
ES T U D IO D E C A S O 11-6
ES T U D IO D E C A S O 11-7
otras pruebas de laboratorio para identificar insulinomas aldohexosa, y la maosa, una aldopentosa, reaccionarn
y monitorear el control glucmico y el desarrollo de com tambin con O-toluidina y producirn un compuesto
plicaciones renales. coloreado que puede interferir con la reaccin. La reac
cin de base de Schiff con O-toluidina es slo de inters
histrico y ha sido reemplazada por mtodos enzimticos
M todos de medicin de glucosa
ms especficos, que se analizan en la siguiente seccin.
La glucosa se puede medir del suero, plasma o sangre com En los mtodos ms comunes de anlisis de glucosa
pleta. En la actualidad, la mayor parte de las mediciones se emplean las enzimas oxidasa de glucosa o hexocinasa
de glucosa se realizan en suero o plasma. La concentracin (cuadro 11-9). La oxidasa de glucosa es la enzima ms
de glucosa en sangre completa es alrededor de 15% ms especfica que reacciona slo con p-D-glucosa. La oxidasa
baja que la concentracin de glucosa en suero o plasma. El de glucosa convierte a la p-D-glucosa en cido glucnico.
suero o el plasma se deben refrigerar y separar de las clu La mutarrotasa se puede aadir a la reaccin para facili
las en el plazo de una hora para evitar la prdida sustancial tar la conversin a-D-glucosa en fl-D-glucosa. Se consume
de glucosa por fraccionamiento celular, en particular si es oxgeno y se produce perxido de hidrgeno. La reaccin
alta la cuenta de leucocitos. Se emplean iones de fluoru se puede monitorear polarogrficamente ya sea midiendo
ro de sodio como anticoagulante y conservador de sangre la tasa de desaparicin de oxgeno con un electrodo de
completa, en particular si se retrasa el anlisis. El fluoruro oxgeno o consumiendo perxido de hidrgeno en una
inhibe las enzimas glucolticas. La glucosa sangunea de reaccin secundaria. La peroxidasa de rbano se emplea
ayuno (GSA) se debe obtener despus de un ayuno de casi para catalizar la segunda reaccin, y el perxido de hidr
10 horas (no > 1 6 h). El lquido cefalorraqudeo y la orina geno se emplea para oxidar un compuesto colorante. Dos
tambin se pueden analizar. La medicin de glucosa en cromgenos de uso comn son la hidrazona de 3-metil-
la orina no se emplea en el diagnstico de la diabetes; sin 2-benzotiazolinona y la N,N-dimetilanilina. El cambio
embargo, algunos pacientes usan esta medicin para pro de absorbancia se puede monitorear espectrofotomtrica-
psitos de monitoreo. mente y es proporcional a la cantidad de glucosa presen
La capacidad de la glucosa para funcionar como un te en la muestra. Esta reaccin acoplada se conoce como
agente reductor ha sido til en la deteccin y cuantifi- reaccin de Trinder. Sin embargo, la reaccin de acopla
cacin de carbohidratos en lquidos corporales. La glucosa miento de peroxidasa empleada en el mtodo de oxidasa
y otros carbohidratos son capaces de convertir los iones de glucosa est sujeta a interferencia positiva y negativa.
cpricos en disolucin alcalina a iones cuprosos. La diso Las concentraciones altas de cido rico, bilirrubina y ci
lucin pierde su color azul intenso y se forma un precipi do ascrbico pueden causar valores reducidos falsos como
tado rojo de xido cuproso. Los reactivos de Benedict y resultado de que la peroxidasa oxida a estas sustancias,
Fehling, que contienen una disolucin alcalina de iones lo que evita la oxidacin y deteccin de cromgeno. Las
cpricos estabilizados por citrato o tartrato, respectiva sustancias oxidantes fuertes, como el blanqueador, causan
mente, han sido utilizados para detectar agentes reductores valores altos falsos. Se puede usar un electrodo de con
en la orina y otros lquidos corporales. Otra caracterstica sumo de oxgeno para efectuar una medicin directa de
qumica que se aprovecha para cuantificar carbohidratos oxgeno mediante la tcnica polarogrfica, que evita esta
es la capacidad de estas molculas para formar bases de interferencia. Se mide el agotamiento de oxgeno y es pro
Schiff con aminas aromticas. La O-toluidina en una diso porcional a la cantidad de glucosa presente. Los analiza
lucin cida caliente producir un compuesto coloreado dores polarogrficos de glucosa miden la tasa de consumo
con una absorbancia mxima a 630 nm. La galactosa, una de oxgeno porque la glucosa se oxida en condiciones de
276 PARTE II CORRELACIONES CLNICAS Y PROCEDIMIENTOS ANALTICOS
oxidasa de glucosa
Oxidato de glucosa Glucosa + 0 2 + H20 --------------------- cido glucnico + H20 2
peroxidasa
H20 2 + cromogeno reducido ------------- cromgeno oxidado + H20
hexocinasa
Hexocinasa Glucosa + ATP ------------- glucosa 6-P04 + ADP
G-6-PD
Glucosa 6-P04 + NADP -------------* NADPH + H+ + 6-fosfogluconato
Clinitest Sustancia reductora + Cu+2--------------- Cu+10
primer orden con el reactivo oxidasa de glucosa. El H 20 , Los mtodos no especficos de medicin de glucosa an
formado se debe eliminar en una reaccin lateral para evi se usan en la seccin de anlisis de orina del laboratorio
tar la reaccin inversa. El molibdato se puede usar para sobre todo para detectar sustancias reductoras distintas a
catalizar la oxidacin del yoduro a yodo con o se la glucosa. El mtodo siguiente es una modificacin de
puede usar la catalasa para catalizar la oxidacin de etanol Benedict, llamada tambin reaccin Clinitest.
con H , 0 2 para formar acetaldehdo y H 20 .
Se considera que el mtodo de hexocinasa es ms exacto A utom onitoreo de glucosa sangunea (AM GS)
que los mtodos de oxidasa de glucosa porque la reaccin
de acoplamiento con deshidrogenasa de glucosa- 6-fosfa- La ADA ha recomendado que individuos con diabetes
to es muy especifica; por tanto, tiene menos interferencia deben automonitorear sus concentraciones de glucosa
que el procedimiento de oxidasa de glucosa. La hexoci sangunea en un esfuerzo por mantener las concentra
nasa en presencia de ATP convierte a la glucosa en glu ciones lo ms normal posible. Para personas con diabetes
cosa 6-fosfato. La glucosa 6 -fosfato y el cofactor NADP+ tipo 1, la recomendacin es 3 a 4 veces/da; para personas
se convierten a 6 -fosfogluconato y NADPH mediante la con diabetes tipo 2, se desconoce la frecuencia ptima. Es
deshidrogenasa de glucosa- 6 -fosfato. El NADPH tiene un importante ensear a los pacientes cmo usar disolucio
mximo de absorbancia fuerte a 3 40 nm; la tasa de apa nes de control y calibradores para asegurar la exactitud
ricin del NADPH se puede monitorear por medio de un de sus resultados .9 La prueba de glucosa en orina se debe
espectrofotmetro y es proporcional a la cantidad de glu reemplazar por el AMGS; sin embargo, la prueba de cetona
cosa presente en la muestra. Aceptado en general como en orina se conserva para la diabetes tipo 1 y gestacional.
mtodo de referencia, este mtodo no es afectado por el
cido ascrbico o el cido rico. La hemolisis total y la Tolerancia a la glucosa y pruebas posprandia-
concentracin extremadamente alta de bilirrubina puede les de dos horas
causar una disminucin falsa en los resultados. El mtodo
de la hexocinasa se puede llevar a cabo en suero o plasma Las normas para el desempeo e interpretacin de la pru e
recolectado con heparina, cido etilendiaminotetractico b a posprandial de 2 h las estableci el Comit de Expertos.
(EDTA), fluoruro, oxalato o citrato. El mtodo se puede Una variacin de esta prueba es usar una carga estandari
usar tambin para orina, lquido cefalorraqudeo y lqui zada de glucosa. Se administra una disolucin que contie
dos serosos. ne 75 g de glucosa, y 2 h despus se extrae una muestra
ES T U D IO D E C A S O 11-8
para medicin de glucosa plasmtica. Bajo estos criterios, Alc (HbAlc), la hemoglobina glucosilada detectada con
el paciente bebe una carga de glucosa estandarizada (75 ms frecuencia, es una molcula de glucosa unida a una
g) y dos horas despus se toma una medicin de glucosa. o ambas valinas N terminales de las cadenas de |3-poli-
Si la concentracin es a 200 mg/dl y se confirma en un pptido de la hemoglobina de adulto norm al .10 La HbAlc
da posterior ya sea mediante una concentracin aleatoria es un mtodo confiable para monitorear el control de la
incrementada o de glucosa de ayuno, el diagnstico para el diabetes de largo plazo en vez de la glucosa plasmtica
paciente es de diabetes (vase la explicacin anterior). aleatoria. Los valores normales van de 4.5 a 8.0. Con un
La pru eba oral de toleran cia a la glucosa (POTG) no modelo de regresin lineal, Rohlfing y col., determinaron
se recomienda para uso rutinario bajo las normas de la que por cada cambio de 1% en el valor de HbAlc, hay un
ADA. Este procedimiento es inconveniente para pacien cambio de 35 mg/dl (2 mmol/L) en la glucosa plasmti
tes, y los mdicos no lo usan para diagnosticar diabetes. ca promedio (cuadro 11-10 ).11 Recuerde que dos factores
Sin embargo, si se usa la POTG, la OMS recomienda los determinan las concentraciones de hemoglobina glucosi
criterios listados en el cuadro 11-7. Es importante que se lada: la concentracin de glucosa promedio y el lapso de
prepare de manera adecuada al paciente antes de efectuar vida de los eritrocitos. Si se reduce el lapso de vida de los
la prueba. El paciente debe estar en ayuno durante por lo eritrocitos debido a otro estado morboso como las hemo-
menos 10 horas y no ms de 16, y la prueba se debe reali globinopatas, la hemoglobina tendr menos tiempo para
zar en la maana debido al efecto diurno hormonal sobre glucosilarse y, por tanto, ser menor la concentracin de
la glucosa. Justo antes de la tolerancia y mientras la prueba hemoglobina glucosilada.
est en progreso, los pacientes deben evitar hacer ejerci El requisito de muestra para medicin de HbAlc es una
cio, comer, beber (excepto que el paciente pueda tomar muestra de sangre completa con EDTA. Antes del anlisis
agua) y fumar. Los factores que afectan los resultados de se debe preparar un hemolisato. Los mtodos de medicin
tolerancia incluyen medicaciones como dosis grandes de se agrupan en dos categoras principales: a) con base en
salicilatos, diurticos, anticonvulsivos, anticonceptivos las diferencias de carga entre la hemoglobina glucosilada
orales y corticosteroides. Asimismo, los problemas gas y la monoglucosilada y b) caractersticas estructurales de
trointestinales como problemas de malabsorcin, ciruga glucogrupos en la hemoglobina (cromatografa de afini
gastrointestinal y vmito y disfunciones endocrinas pue dad e inmunoensayo). No hay consenso sobre el mtodo
den afectar los resultados de la POTG. Las normas reco de referencia y ningn estndar simple disponible que se
miendan que slo se midan la muestra de ayuno y la de usar en los ensayos. Como resultado de esto, los valores
dos horas, excepto cuando se trata de una embarazada. La de HbAlc varan con el mtodo y el laboratorio que los
dosis de adulto de la disolucin de glucosa (glucola) es 75 realiza (cuadro 11- 11).
g; los nios reciben 1.75 g/kg de glucosa hasta una dosis La cromatografa de afinidad es el mtodo de medicin
mxima de 75 g. preferido. En este mtodo, la hemoglobina glucosilada se
une al grupo boronato de la resina y se eluye de modo
H em oglobina glucosilada selectivo de la cama de resina con una disolucin amor
tiguadora. Este mtodo no depende de la temperatura y
El objetivo del tratamiento del paciente diabtico es no es afectado por hemoglobina F, S o C. Otro mtodo de
mantener la concentracin de glucosa sangunea con un medicin emplea cromatografa de intercambio catinico
nmero mnimo de fluctuaciones. Un laboratorio puede en el que las hemoglobinas con carga negativa se unen a
medir las concentraciones de glucosa srica y plasmtica;
adems, el paciente puede automonitorear las concentra
ciones de glucosa sangunea completa. La regulacin de
glucosa sangunea de largo plazo se puede seguir mediante
la medicin de hemoglobinas glucosiladas. CUADRO 11-10. CO RRELA CI N E ST IM A D A
H em oglobina glucosilada es el trmino empleado para ENTRE CO N CEN TRA CIO N ES PRO M ED IO DE
describir la formacin de un compuesto de hemoglobina G LU C O SA P LA SM TIC A Y DE A 1C10__________
que se conjunta cuando la glucosa (un azcar reductor)
GLUCOSA PLASMTICA MEDIA A ,(% )
reacciona con el grupo amino de la hemoglobina (una pro
tena). La molcula de glucosa se une de manera no enzi 65 mg/dl (3.5 mmol/L) 4
mtica a la molcula de hemoglobina en una estructura de 100 mg/dl (5.5 mmol/L) 5
cetoamina para formar una cetoamina. La tasa de forma
135 mg/dl (7.5 mmol/L) 6
cin es directamente proporcional a las concentraciones
de glucosa plasmtica. Debido a que los eritrocitos prome 170 mg/d! (9.5 mmol/L) 7
dio viven casi 120 das, la concentracin de hemoglobina 205 mg/dl (11.5 mmol/L) 8
glucosilada en cualquier momento refleja la concentracin
240 mg/dl (13.5 mmol/L) 9
de glucosa sangunea promedio en los 2 a 3 meses pre
vios. Por tanto, la medicin de hemoglobina glucosilada 275 mg/dl (15.5 mmol/L) 10
provee al especialista clnico una representacin de tiem 310 mg/dl (17.5 mmol/L) 11
po promedio de la concentracin de glucosa sangunea
del paciente en los tres meses pasados. La hemo-globina 345 mg/d! (19.5 mmol/L) 12
278 PARTE II CORRELACIONES CLNICAS Y PROCEDIMIENTOS ANALTICOS
Hgb = hemoglobina.
la cama de resina cargada positivamente. La hemoglobina almacenamiento de glucgeno, las concentraciones san
glucosilada se eluye de modo selectivo de la cama de resi guneas se increm entan para satisfacer las necesidades
na con una disolucin amortiguadora de pH especfico en energticas. El trmino ketonem ia se refiere a la acumu
la que las glucohemoglobinas son las que tienen ms carga lacin de cetonas en la sangre, y el trmino cetonuria a la
negativa y eluyen primero de la columna. Sin embargo, acumulacin de cetonas en la orina (fig. 11-9). La medi
este mtodo depende mucho de la temperatura y es afec cin de cetonas se recomienda para pacientes con diabetes
tado por hemoglobinopatlas. La presencia de hemoglobi tipo 1 durante enfermedad aguda, estrs, embarazo, con
na F produce concentraciones incrementadas falsas, y la centraciones de glucosa sangunea arriba de 300 mg/dl, o
de hemoglobinas S y C produce concentraciones reduci cuando el paciente tiene signos de cetoacidosis.
das falsas. La cromatografa lquida de alta presin y los El requisito de muestra es suero u orina recientes; la
mtodos de electroforesis se emplean tambin para sepa muestra se debe cerrar hermticamente y analizar de inm e
rar varias formas de hemoglobina. Con la cromatografa diato. Ningn mtodo empleado para la determinacin de
lquida de alta presin, se pueden separar todas las formas cetonas reacciona con los tres cuerpos cetnicos. En la
de hemoglobina glucosilada, Ala, A]b, A prueba histrica (de Gerhardt), el cloruro frrico se haca
reaccionar con cloruro frrico para producir un color rojo.
Cetonas El procedimiento tena muchas sustancias interferentes,
incluso salicilatos. En un mtodo ms comn, el nitro-
A travs del metabolismo de cidos grasos el hgado pro prusiato de sodio (N aFe[CN ] 5NO) reacciona con cido
duce cuerpos cetnicos para proveer una fuente de ener actoactico en un pH alcalino para formar un color pr
ga de lpidos almacenados a veces de baja disponibilidad pura. Si el reactivo contiene glicerina, entonces se detecta
de carbohidratos. Los tres cuerpos cetnicos son acetona acetona. Este mtodo se emplea con la prueba de tira reac
(2% ), cido acetoactico (20% ) y cido 3-p-hidroxibutri- tiva para orina y tabletas Acetest. Un mtodo enzimtico
co (78% ). Una concentracin baja de cuerpos cetnicos ms reciente adaptado a algunos instrumentos automati
est presente en el cuerpo todo el tiempo. Sin embargo, zados emplea la enzima deshidrogenasa de p-hidroxibuti-
en casos de falta o uso reducido de carbohidratos como rato para detectar ya sea cido p-hidroxibutrico o cido
en la diabetes mellitus, inanicin o ayuno, dietas con alto acetoactico, dependiendo del pH de la disolucin. Un pH
contenido de grasas, vmito prolongado y enfermedad de de 7.0 hace que la reaccin proceda hacia la derecha (la
pH alcalino
Nitroprusiato cido acetoactico + nitroprusiato -------------- color prpura
absorbancia disminuye); un pH de 8.5 a 9.5 causa que la pacientes prediabticos en riesgo. Las mediciones de insu
reaccin proceda a la izquierda (se incrementa la absor lina no se requieren para diagnstico de diabetes mellitus.
bancia, cuadro 11- 12). Sin embargo, en ciertos estados hipoglucmicos, es impor
tante conocer la concentracin de insulina en relacin con
M icroalbum inuria la concentracin de glucosa plasmtica.
de insulina reducidas, normales o incrementadas, pero da posterior mediante cualquiera de los tres mtodos. El
son resistentes a insulina en el tejido. Hay una tendencia monitoreo a largo plazo del paciente con diabetes incluye
mayor en el tipo 2 hacia coma no cetsico. El tipo 2 se el automonitoreo de glucosa sangunea, hemoglobina glu
caracteriza por una concentracin de glucosa mayor que cosilada peridica y concentraciones de microalbmina
600 mg/dl (33 mmol/L) y una ausencia de cetonas. El US anuales.
y la osmolalidad se incrementan y se reduce la produccin La hipoglucemia se clasifica en la actualidad con base
de orina. La DMG se puede relacionar con el tipo 2. Las en los sntomas clnicos, con categoras divididas entre
tres pruebas definitivas para la diabetes son a) sntomas pacientes que parecen saludables y los que parecen enfer
de diabetes ms una concentracin de glucosa plasmti mos. La hipoglucemia neonatal, congnita y cetsica ocu
ca aleatoria >200 mg/dl, b ) glucosa plasmtica de ayuno rre en los nios. Las formas congnitas de hipoglucemia
S:126 mg/dl o c) una POTG con una concentracin de incluyen la enfermedad de von Gierke. La galactosemia
poscarga de 2 h (carga de glucosa de 75 g) ^ 2 0 0 mg/dl. es otra variedad de hipoglucemia congnita relativamente
Cualquiera de los tres criterios se debe confirmar en un comn.
P R E G U N T A S DE R E P A S O
1. Cul de las siguientes hormonas promueve la gluco- 7. Seleccione la enzima que es ms especfica para la (5-
neognesis? D-glucosa.
a) Hormona del crecimiento. a) Oxidasa de glucosa.
b) Hidrocortisona. b) Deshidrogenasa de glucosa- 6-fosfato.
c) Insulina. c) Hexocinasa.
d) Tiroxina. d) Fosfohexisomerasa.
2. La oxidasa de glucosa oxida la glucosa a cido gluc- 8. Seleccione la enzima de acoplamiento empleada en el
nico y: mtodo de hexocinasa para la glucosa.
a) H20 2. a) Deshidrogenasa de glucosa.
b) C 0 2. b) Glucosa- 6-fosfatasa.
c) H C 0 3. c) Deshidrogenasa de glucosa- 6-fosfato.
d) h 2o. d) Peroxidasa.
3. De la glucosa y ATP, la hexocinasa cataliza la forma 9. Las siguientes son caractersticas de la enfermedad de
cin de: von Gierke EXCEPTO:
a ) Acetil-CoA. a) Hipoglucemia.
b) Fructosa 6 -fosfato. b) Hipolipidemia.
c) Glucosa 6 -fosfato. c) Lactato plasmtico incrementado.
d ) Lactosa. d) Respuesta subnormal a adrenalina.
4. Cul es la muestra preferida para el anlisis de glucosa? 10. La prueba de deteccin preferida para diabetes en
a) Plasma y EDTA. mujeres adultas no embarazadas es la medicin de:
b) Plasma y oxalato de fluoruro. a ) Glucosa plasmtica de ayuno.
c) Plasma heparinizado. b) Glucosa plasmtica aleatoria.
d) Suero. c) Glucohemoglobina.
d) Glucosa plasmtica de 1 h despus de carga de
5. El factor hiperglucmico producido por el pncreas es:
50 g de carbohidrato.
a) Hormona foliculoestimulante (FSH).
b) Glucagon. 11. Segn las normas de la ADA de 2003, los tiempos de
c) Insulina. medicin para concentraciones de glucosa plasmtica
d) Hormona luteinizante (LH). durante una POTG en pacientes no embarazadas son
a) Ayuno y 2 horas.
6. En qu principio se basan los mtodos polarogrfi-
b ) Ayuno y 60 minutos.
cos de ensayo de glucosa?
c) 30, 60, 90 y 120 minutos.
a) Oxidacin no enzimtica de glucosa.
d) Ayuno, 30, 60, 90 y 120 minutos.
b ) Tasa de agotamiento de oxgeno medida.
c) Quimiluminiscencia causada por formacin de
ATE
d) Cambio de potencial elctrico cuando se oxida la
glucosa.
CAPTULO 11 CARBOHIDRATOS 281
12. Monitorear las concentraciones de cuerpos cetnicos 14. El monitoreo de las concentraciones de cuerpos cet
en la orina va reactivos de nitroprusiato provee una nicos en la orina:
medida semicuantitativa de: a) Es considerado esencial sobre una base diaria
a) Acetoacetato. para los pacientes diabticos.
b) 3-|3-hidroxibutirato. b ) Es un mtodo confiable para evaluar el control
c) Acetona. glucmico a largo plazo.
d) Los tres cuerpos cetnicos. c) Se recomienda para pacientes con diabetes tipo 1
en das mrbidos.
13. Un factor, distinto a los valores promedio de glucosa
d) No lo recomienda la ADA.
plasmtica, que determina la concentracin de hemo
globina glucosilada es:
a ) Concentracin de cuerpos cetnicos en el suero.
b ) Lapso de vida de los eritrocitos.
c) Ingestin de cido ascrbico.
d) Concentraciones de triglicridos incrementadas.
CONTENIDO DE L CAPTULO
O B J E T I V O S
Al terminar este captulo, el laboratorista clnico Identificar los intervalos de referencia para los
podr: principales lpidos analizados.
Explicar la fisiologa y metabolismo de lpidos y Explicar la interaccin en el cuerpo entre lpidos y
lipoprotenas. lipoprotenas y ias distintas hormonas.
Definir lipoprotena, exgeno, endgeno, quilo Relacionar la importancia clnica de valores de lpi
micrones, cidos grasos, fosfolpidos, triglicridos, dos y lipoprotenas en la medicin de cardiopata
colesterol, VLDL, LDL, HDL y Lp(a). coronaria.
Describir las pruebas clnicas empleadas para eva Describir la incidencia y tipos de anormalidades de
luar lpidos y lipoprotenas, incluso principios y lpidos y lipoprotenas.
procedimientos.
Evaluar el estado de lpidos o lipoprotenas de!
paciente, considerando los datos clnicos.
282
CAPTULO 12 LPIDOS Y LIPOPROTENAS 283
0 H o
li H3C (CH2)n C. h [I
H3C (CH2)n C OH \ C (CH2)n C ~O H
O
H2C--OH o H2C - 0 - C - R i
O H -C H r 2- C -0 -C H O
H2C OH H2C - 0 C R3
Glicero! Triglicrido
f
O H 2 C O C Ri
II I
r 2 C O C H O
O-
Fosfolpido (fosfatidilcoiina)
grasos son ms fluidos porque no se autodisocian tan fcil. que contienen cidos grasos insaturados cis, co n curvas
Los enlaces dobles C=C de los cidos grasos tambin pue en su estructura (fig. 12- 1), por lo general forman acei
den ocurrir en la configuracin trans, con ambos tomos tes a temperatura ambiente. Casi todos los triglicridos
de hidrgeno en el lado opuesto del enlace doble C=C. de origen vegetal, como el maz, semillas de girasol y de
Debido a la orientacin espacial de sus enlaces dobles, crtamo, son ricos en cidos grasos poliinsaturados y son
los cidos grasos trans no se curvan y tienen propiedades aceites, mientras que los triglicridos de fuentes animales
fsicas similares a las de los cidos grasos saturados. Los contienen principalmente cidos grasos saturados y, por lo
cidos grasos trans no se encuentran por lo comn en la general, son slidos a temperatura ambiente. Como puede
naturaleza; sin embargo, estn presentes en la dieta debido verse al inspeccionar la estructura del triglicrido (fig. 12-
a que en la hidrogenacin qumica empleada en el proceso 1), no hay grupos cargados o grupos polares hidroflicos,
de convertir los aceites vegetales poliinsaturados en mar lo que lo hace muy hidrfobo y casi insoluble en agua.
garina slida se introducen enlaces dobles trans.
Fosfolpidos35
Triglicridos2
Los fosfolp id os son similares en estructura a los triglicri
Como se puede inferir del nombre, los triglicridos con dos, excepto que slo tienen dos cidos grasos esterificados
tienen tres molculas de cidos grasos unidas a una mol (fig. 12-1). La tercera posicin en la estructura del glicerol
cula de glicerol por enlaces de ster (fig. 12-1). Debido contiene un grupo principal fosfolpido. Hay varios tipos
al gran nmero de formas posibles de cidos grasos, cada de grupos principales fosfolpidos, como colina, inositol,
cido graso en la molcula de triglicrido puede ser poten serina y etanolamina, que son de naturaleza hidroflica.
cialmente distinto en estructura, lo que origina muchas Los fosfolpidos se nombran con base en el tipo de gru
formas estructurales posibles de triglicridos; los que con po principal fosfolpido presente. La fosfatidilcoiina (fig.
tienen cidos grasos saturados, sin curvas en su estructura 12- 1), por ejemplo, tiene un grupo principal colina y es
(fig. 12- 1), estn ms agrupados y tienden a ser slidos el fosfolpido ms comn hallado en lipoprotenas y en
a temperatura ambiente. En contraste, los triglicridos membranas celulares. Los dos cidos grasos en fosfolipi-
CAPTULO 12 LPIDOS Y LIPOPROTENAS 285
Colesterol68
El colesterol es un alcohol esteroideo no saturado que
contiene 4 anillos (A, B, C y D), y tiene una sola cadena
lateral C-H similar a un cido graso en sus propiedades
fsicas (fig. 12-1). La nica parte hidroflica del colesterol
es el grupo hidroxilo en anillo A. Por tanto, el colesterol es
tambin un lpido anfiftico y se halla en la superficie de
capas lipdicas junto con fosfolpidos. El colesterol est
orientado en capas de lpido para que los cuatro anillos y
el extremo de cadena lateral estn enterrados en la mem
brana en una orientacin paralela a las cadenas de acilo
de cidos grasos en las molculas de fosfolpido adyacen
tes. El grupo hidroxilo polar en el anillo A del colesterol
est orientado hacia fuera, lejos de la capa lipdica, lo que nm (cuadro 12-1). Como lo indica su nombre, las lipopro-
le permite interactuar con el agua mediante puentes de tenas estn compuestas de lpidos y protenas, llamadas
hidrgeno no covalentes. apolipoprotenas.13 El colesterol anfiftico y las molculas
El colesterol puede existir tambin en una forma este- de fosfolpido se hallan sobre todo en la superficie de lipo-
rificada llamada ster de colesterilo, con el grupo hidroxilo protenas como una monocapa simple, mientras que el tri-
conjugado por un enlace de ster con un cido graso, en glicrido hidrfobo y las molculas de ster de colesterilo
la misma forma que en los triglicridos. En contraste con se hallan en la regin central o ncleo (fig. 12-2). Debido
el colesterol libre, no hay grupos polares en los steres de a que la funcin principal de las lipoprotenas es la entre
colesterilo, lo que los hace muy hidrfobos. Como resul ga de combustible a las clulas perifricas, el ncleo de
tado de su naturaleza hidrfoba, los steres de colesterilo la partcula de lipoprotena representa en esencia la carga
no se encuentran en la superficie de capas lipdicas sino que es transportada por las lipoprotenas. El tamao de la
en el centro de gotas de lpido, junto con los triglicridos. partcula de lipoprotena se correlaciona con su conteni
El colesterol es sintetizado casi de manera exclusiva do de lpido. Las partculas de lipoprotena ms grandes
por los animales, pero las plantas contienen otros ester tienen en correspondencia regiones nucleares ms gran
les similares en estructura al colesterol; tambin es nico des y, por tanto, contienen relativamente ms triglicrido
en que a diferencia de otros lpidos, no es catabolizado y ster de colesterilo. Las partculas de lipoprotena ms
de forma fcil por la mayor parte de las clulas y, por tan grandes tambin contienen ms lpido en relacin con la
to, no sirve como una fuente de combustible. Sin embar protena y, por tanto, son de menor densidad. Las distin
go, el colesterol puede convertirse en el hgado a cidos tas partculas de lipoprotena se separaban en un principio
biliares primarios, como cido clico (fig. 12- 1) y cido por ultracentrifugacin en fracciones de distinta densidad
quenodesoxiclico, que promueven la absorcin de grasa (quilomicrones [quilos]; lipoprotenas de muy baja den
en el intestino al actuar como detergentes. Ciertos tejidos, sidad [VLDL]; lipoprotenas de baja densidad [LDL], y
como la glndula suprarrenal, los testculos y los ovarios, lipoprotenas de alta densidad [HDL]), que an forman
pueden convertir una pequea cantidad de colesterol en la base para la mayor parte del sistema de clasificacin de
hormonas esteroideas, como glucocorticoides, mineralo- lipoprotenas empleado (cuadro 12- 1).
corticoides y estrgenos. Por ltimo, una pequea canti Las apolipoprotenas se localizan sobre todo en la super
dad de colesterol, despus de ser convertida primero en ficie de partculas de lipoprotena (cuadro 12-2). Ayudan
7-deshidrocolesterol, se puede transformar en vitamina D 3 a mantener la integridad estructural de las lipoprotenas y
cuando la piel recibe radiacin solar. tambin sirven como ligandos para los receptores de clu
las y como activadores e inhibidores de varias enzimas
que modifican las partculas de lipoprotena (cuadro 12-
ESTRUCTURA GENERAL DE LIPOPROTENAS912
2). Las apolipoprotenas contienen un adorno estructural
La estructura prototpica de una partcula de lipoprotena llamado hlice anfiftica ,14 que explica la capacidad de
se muestra en la figura 12-2. Por lo general, las lipoprote- estas protenas para enlazar lpidos. Las hlices anfifticas
nas son de forma esfrica y su tamao vara de 10 a 1200 son segmentos de protena dispuestos en espiras para que
286 PARTE I! CORRELACIONES CLNICAS Y PROCEDIMIENTOS ANALTICOS
CUADRO 12-1. CA R A C T ER STIC A S D E LA S PRIN CIPA LES LIPO PRO TEN A S H UM ANAS
CARACTERSTICAS QUILOMICRONES VLDL LDL HDL
los residuos de aminocidos hidrfobos interacten con de quilom icrn .19 Hay tres isoformas principales de apo E:
lpidos, mientras que la parte de la hlice que contiene apo E2, E3 y E4. Las isoformas apo E afectan el metabo
aminocidos hidroflicos est orientada hacia el ambiente lismo de las lipoprotenas porque difieren en su capacidad
acuoso lejos de los lpidos. para interactuar con el receptor de LDL .20,21 Por ejemplo,
La apo A-I, la protena principal en HDL, se emplea con los pacientes que son homocigticos para la isoforma apo
frecuencia como un ndice de la cantidad del HDL antiate- E2 tienen mayor riesgo de desarrollar hiperlipoproteine-
rognico presente en el plasma .15 La apo B es una protena mia tipo III. No se comprende del todo la relacin con el
grande con un peso molecular de casi 500 kD y es la pro metabolismo de lpidos, pero se ha demostrado que los
tena principal en LDL, VLDL y quilom icrones .16 La apo B individuos con la isoforma apo E 4 tienen mayor riesgo de
existe en dos formas, apo B -100 y apo B-48. La apo B-100 desarrollar enfermedad de Alzheimer .22
se halla en LDL y VLDL, y es un ligando para el receptor
de LDL 17 y, por tanto, es importante en la captacin de Q uilom icrones1924
LDL por las clulas. La apo B-48, se encuentra slo en los
quilomicrones, el primer 48% o primera mitad de la mol Los quilomicrones, que contienen apo B-48, son las partcu
cula de apo B y se produce por edicin postranscripcional las de lipoprotena ms grandes y menos densas, con di
del mRNA de apo B-100. La apo B -100 tambin se encuen metros tan grandes como 1 2 0 0 nm (cuadro 12-1). Como
tra unida de forma covalente a la apo (a )18, una protena resultado de su gran tamao, reflejan la luz y explican la
parecida a plasmingeno que se encuentra en una partcu turbidez del plasma posprandial. Debido a que son tan
la proaterognica llamada lipoprotena (a) [Lp(a)]. La apo ligeras, tambin flotan con facilidad sobre el plasma alma
E, otra apoliprotena importante hallada en muchos tipos cenado y forman una capa cremosa, que se caracteriza por
de lipoprotenas (LDL, VLDL y HDL), tambin sirve como la presencia de quilomicrones. Estos ltimos son produ
ligando para el receptor de LDL y el receptor remanente cidos por el intestino, donde son empacados con lpidos
dietticos absorbidos. Una vez que entran a la circulacin, ro diferente de secuencias peptdicas, llamadas kringles,
las lipasas hidrolizan rpido a los triglicridos y steres de en la porcin apo (a) de la molcula. La concentracin de
colesterilo en los quilomicrones y, en pocas horas, se trans Lp(a) se relaciona de manera inversa con el tamao de la
forman en partculas de quilomicrn remanentes, que son isoforma. Las concentraciones plasmticas de Lp(a) varan
captadas por receptores remanentes en el hgado .19 As, mucho entre individuos en una poblacin, pero permane
la funcin principal de los quilomicrones es la entrega de cen relativamente constantes dentro de un individuo.
lpidos dietticos a las clulas hepticas y perifricas. Se considera que las concentraciones altas de Lp(a)
confieren mayor riesgo para cardiopata coronaria prema
Lipoprotenas de m uy baja densidad2526 tura y accidente cerebrovascular. Debido a que los domi
nios de las kringles de Lp(a) tienen mucho parecido con el
El hgado produce VLDL, y contiene apo B-100, apo E y plasmingeno, una pro tena que promueve la lisis de co
apo Cs; como los quilomicrones, las lipoprotenas de muy gulos, se ha propuesto que la Lp(a) puede competir con el
baja densidad tambin son ricas en triglicridos. Son las plasmingeno por sitios de enlace y, por tanto, promueve
portadoras principales de triglicridos endgenos (deriva la coagulacin, un contribuyente importante para el infar
dos hepticos) y transfieren triglicridos del hgado al teji to de miocardio y el accidente cerebrovascular.29'30
do perifrico. Al igual que los quilomicrones reflejan la luz
con facilidad y explican la mayor turbidez observada en Protenas de alta densidad35-36
muestras de plasma hiperlipidmico de ayuno, aunque no
forman una capa superior cremosa como los quilomicrones La HDL, la partcula de lipoprotena ms pequea y densa,
porque son ms densas (cuadro 12-1). La ingestin en exce es sintetizada en el hgado y el intestino (cuadro 12- 1).
so de carbohidratos, cidos grasos saturados y cidos grasos Las HDL pueden existir como partculas con forma de dis
trans en la dieta incrementa la sntesis heptica de triglicri co o como partculas de forma esfrica .13 La HDL discoidal
dos que, a su vez, aumenta la produccin de VLDL. contiene por lo general dos molculas de apo A-I, que for
man un anillo alrededor de una bicapa lipdica central de
fosfolpido y colesterol. Se cree que la HDL discoidal repre
Lipoprotenas de baja d ensid ad 2728
senta HDL incipiente o recin secretada y es la forma ms
La LDL contiene apo B-100 y apo E y es ms rica en coles activa en la remocin de colesterol en exceso de las clulas
terol que otras lipoprotenas que contienen apo-B (cua perifricas. La capacidad de la HDL para eliminar coles
dro 12-1). Se forman sobre todo como consecuencia de terol de las clulas es uno de los mecanismos principales
la liplisis de VLDL. La LDL es captada con facilidad por que han sido propuestos para la propiedad antiaterognica
las clulas va el receptor de LDL y esto, en parte explica de la HDL. Cuando la HDL discoidal ha adquirido lpido
la razn de que las concentraciones altas de LDL promue adicional, los steres de colesterilo y los triglicridos for
van la aterosclerosis .29 Adems, debido a que las LDL son man una regin bsica entre la bicapa lipdica central, que
mucho ms pequeas que las VLDL y los quilomicrones, transforma a la HDL discoidal en HDL esfrica, la forma
se pueden infiltrar en el espacio extracelular de la pared predominante en el plasma. Con base en las diferencias de
de los vasos, donde los macrfagos las toman y oxidan densidad, hay dos tipos principales de HDL esfrica: HDL,
mediante varios receptores depuradores.30 Los macrfagos y HDL3. La HDL 2 tiene mayor tamao y es ms rica en
que captan demasiado lpido se llenan con gotas de lpido lpido que la HDL 3 y puede ser ms eficiente para entregar
intracelular y se convierten en clulas de espuma ,30 que es lpidos al hgado .37
el tipo de clulas predominante de las rayas de grasa, un
precursor inicial de las placas aterosclerticas. FISIOLOGA Y M ETABOLISM O DE
Las partculas LDL pueden existir en varios tamaos y LAS LIPOPROTENAS
composiciones y han sido separadas en hasta ocho sub
clases mediante ultracentrifugacin por densidad o elec Las cuatro vas principales que intervienen en el metabo
troforesis en gel por gradiente .3132 Las subclases de LDL lismo de las lipoprotenas se muestran en la figura 12-3.
difieren en gran medida en su contenido de lpidos princi La va de absorcin de lpidos, la exgena y la endgena,
pales; las partculas ms pequeas son ms densas y tienen que dependen de las partculas de lipoprotena que contie
relativamente ms triglicrido que los steres de colesteri nen apo B, se pueden considerar como medios para trans
lo. En fechas recientes, ha habido gran inters en cuantifi- portar lpidos dietticos y de origen heptico a las clulas
car las subfracciones de LDL porque se ha demostrado que perifricas. En trminos del metabolismo de energa, estas
las partculas de LDL pequeas y densas son ms proate- tres vas son decisivas en el transporte de cidos grasos a
rognicas y pueden ser un m ejor marcador para riesgo de las clulas perifricas, que son generadas durante la lip
cardiopata coronaria .31'32 lisis de triglicridos y, en menor grado, steres de coles
terilo en las lipoprotenas. En relacin con la patognesis
de la aterosclerosis, el resultado neto de estas tres vas es
Lipoprotena (a)1833-34
tambin la entrega neta o transporte directo de colesterol
Las Lp(a) son partculas parecidas a las LDL, cada una con a las clulas perifricas, lo cual puede originar ateroscle
una molcula de apo (a) enlazada a apo B -100 mediante rosis cuando las clulas en la pared de los vasos acumulan
un enlace de disulfuro. Las partculas de Lp(a) son hetero demasiado colesterol .29,30 Las clulas perifricas son pro
gneas en tamao y densidad como resultado de un nme clives a acumular colesterol porque tambin lo sintetizan
288 PARTE II CORRELACIONES CLNICAS Y PROCEDIMIENTOS ANALTICOS
cortisol desempean una funcin importante en la movili desreguladas (junto con el receptor de LDL) cuando hay
zacin e hidrlisis de triglicridos de adipocitos, mientras exceso de colesterol celular por un mecanismo complejo
que la insulina evita la liplisis por adipocitos y promueve en el que interviene la regulacin de genes y la de genes
el almacenamiento de grasa y el uso de glucosa. postranscripcional.46
Durante la liplisis de quilomicrones, hay transferencia Las anormalidades en la funcin del receptor de LDL
de lpido y apolipoprotenas sobre HDL, y los quilomicro dan como resultado el incremento de LDL en la circula
nes son convertidos en pocas horas despus de la comida cin y originan hipercolesterolemia y aterosclerosis pre
en partculas remanentes de quilomicrn. El hgado cap matura .1747 Los pacientes que son heterocigticos para
ta con rapidez los remanentes de los quilomicrones por una enfermedad llamada hipercolesterolemia familiar
la interaccin de la apo E con receptores de remanentes (incidencia, alrededor de 1 en 500) tienen slo la mitad de
especficos en la superficie de las clulas hepticas. Una los receptores de LDL normales, lo que da como resultado
vez en el hgado, las enzimas lisosomales descomponen la captacin heptica reducida de LDL por el hgado, y
las partculas remanentes para liberar cidos grasos libres, una mayor biosntesis de colesterol heptico. La LDL que
colesterol libre y aminocidos. Parte del colesterol se con se acumula en estos individuos con frecuencia da lugar al
vierte en cidos biliares. Los cidos biliares y el colesterol desarrollo de cardiopata coronaria a la mitad de la vida
libre son excretados de forma directa en la bilis, pero no adulta en heterocigotos e incluso antes para homocigo-
todo el colesterol excretado y la sal biliar salen del cuer tos .17,47
po. Como se describi antes, casi la mitad del colesterol
biliar excretado es reabsorbido por el intestino, y el resto Va inversa de transporte de colesterol48 51
aparece en las heces como esteroides neutros fecales. En el
Como se describi antes, una de las funciones principa
caso de los cidos biliares, casi la mitad son reabsorbidos y
les del HDL es mantener el equilibrio de colesterol en las
reutilizados por el hgado para produccin de bilis.
clulas perifricas mediante la va inversa de transporte de
colesterol (fig. 12-3). Se cree que el HDL elimina el exceso
V a endg ena25-28 de colesterol de las clulas por dos vas diferentes, la va
La mayor parte de los triglicridos en el hgado que son de difusin acuosa 31 y la de transportador ABCA1 .49 En
empacados en VLDL son obtenidos de la dieta despus de la va de difusin acuosa, HDL acta como un pozo para
la recirculacin desde el tejido adiposo. Slo una peque la pequea cantidad de colesterol que se puede difundir
a fraccin se sintetiza de novo en el hgado a partir de lejos de las clulas. Aunque el colesterol es relativamente
los carbohidratos dietticos. Las partculas de VLDL, una insoluble en agua, debido a que es un lpido anfiftico, es
vez secretadas en la circulacin, experimentan un proce soluble en plasma en cantidades micromolares y se pue
so lipoltico similar al de los quilomicrones (fig. 12-3). de disociar en forma espontnea desde la superficie de
Principalmente por la accin de la LPL, la VLDL pierde las membranas celulares y entrar al lquido extracelular.
lpidos bsicos, lo que causa la disociacin y transferen Parte del colesterol libre se unir entonces con el HDL en
cia de apolipoprotenas y fosfolpidos a otras partculas de el espacio extracelular y, una vez enlazado, queda atrapa
lipoprotena. Durante este proceso, la VLDL es convertida do en las lipoprotenas despus de que es convertido en
en remanentes VLDL, que se pueden transformar ms por ster de colesterilo por la lecitn-colesterol aciltransfera
liplisis en LDL. Casi la mitad de las VLDL son conver sa (LCAT ),52 que reside en el HDL. El HDL puede enton
tidas por completo en algn momento a LDL, y el resto ces entregar de manera directa colesterol al hgado por el
son captadas como remanentes VLDL por receptores de receptor SR-B153 y, posiblemente, otros receptores .9,36 Alre
remanentes hepticos. dedor de la mitad del colesterol en el HDL es regresado al
Como resultado de la captacin eficiente por los recep hgado por el receptor de LDL, despus de ser transferido
tores de LDL ,17 las LDL son las lipoprotenas principales primero del HDL al LDL por la protena de transferencia
encargadas de entregar colesterol exgeno a las clulas de ster de colesterilo (CETP ),34 que conecta las vas de
perifricas. Una vez enlazadas a los receptores de LDL, son transporte de colesterol directa e inversa (fig. 12-3). El
endocitosadas por las clulas y transportadas al lisosoma, colesterol que llega al hgado es excretado entonces de
donde son degradadas. Los triglicridos en la LDL son manera directa en la bilis o primero se convierte en cido
convertidos por la lipasa cida en cidos grasos libres y gli biliar antes de la excrecin.
cerol, y son metabolizados ms por la clula para energa y La otra va en la que el HDL media la eliminacin de
son reesterificados y almacenados en los lpidos para uso colesterol de las clulas, tiene que ver con el transportador
posterior. El colesterol libre obtenido de LDL degradada ABCA1. ste es un miembro de la familia de trasportado-
se puede usar para biosntesis de membrana, y el exceso res de casete de enlace a ATP que bombea varios ligan-
de colesterol se convierte mediante la acil-CoA:acil-coles- dos por la membrana plasmtica. Los defectos en el gen
terol aciltransferasa (ACAT) en steres de colesterilo y se para el transportador ABCA1 conducen a la enfermedad
almacena en gotas de lpido .45 La regulacin de la biosn- de Tangier,49 un trastorno relacionado con el HDL y una
tesis de colesterol celular es, en parte, coordinada por la predisposicin a la cardiopata coronaria prematura. No
disponibilidad de colesterol entregado por el receptor de se conoce el mecanismo exacto del transportador ABCA1,
LDL .17Muchas enzimas en la va biosinttica del colesterol pero se cree que el transportador modifica la membrana
(p. ej., HMG-CoA reductasa, el blanco principal para los plasmtica al transportar un lpido, que despus permite
frmacos tipo estatina que disminuyen el colesterol) son que la apo A-I que se ha disociado de HDL se enlace con la
290 PARTE II CORRELACIONES CLNICAS Y PROCEDIMIENTOS ANALTICOS
ES T U D IO D E C A S O 12-1
Un varn de 52 aos de edad acudi a su mdico para CUADRO 12-1.1 DE ESTUDIO DE CASO.
un reconocimiento. El paciente haba sido un gerente RESULTADOS DE LABORATORIOS
de distrito para una compaa aseguradora automotriz
durante los ltimos 10 aos y tena 11 kg de sobrepeso. AN ALITO VALOR DEL INTERVALO DE
PACIENTE REFERENCIA
Debido a cuestiones de negocios haba perdido sus dos
ltimas citas con el mdico. La tira reactiva de anlisis Na+ 151 135-143 mEq/l
de orina no fue notable. Su presin arterial fue alta. Se
K+ 4.5 3.0-5.0 mEq/l
obtuvieron los resultados de qumica sangunea lista
dos en el cuadro 12- 1.1 de estudio de caso. Cl- 106 98-103 mEq/l
Contenido de C 0 2 13 22-27 mmol/l
Preguntas Protena total 5.7 6.5-8.0 g/dl
1. Considerando las pruebas anormales, qu informa Albm ina 1.6 3.5-5.0 g/dl
cin adicional le gustara tener?
Calcio 7.9 9.0-10.5 mg/dl
2. Si este paciente tuviera triglicridos de 100 mg/dl Colesterol 210 140-200 mg/dl
(1.1 mmol/L) y un colesterol HDL de 23 mg/dl (0.6
cido rico 6.2 3.5-7.9 mg/dl
mmol/L), cul serla su valor de colesterol LDL cal
culado? Creatinina 2.5 0.5-1.2 mg/dl
membrana celular. En un mecanismo de extraccin pare con la edad .36'59'60 Las concentraciones de colesterol de
cido al del detergente, la apo A-I elimina entonces el exce HDL por lo general permanecen estables despus del ini
so de colesterol y fosfolpido de la membrana plasmtica cio de la pubertad y no disminuyen en las mujeres con el
de las clulas para formar una partcula de HDL de forma inicio de la menopausia .61 Los intervalos de referencia en
discoidal. As, el HDL recin formado es competente para el adulto se muestran en el cuadro 12-3.
aceptar colesterol adicional por la va de difusin acuosa Las concentraciones circulantes de colesterol total,
y en algn momento se convierte en HDL esfrico por la colesterol de LDL y triglicridos en nios jvenes son por
accin de la LCAT (fig. 12-3). lo regular mucho menores que las observadas en adul
tos .62,63 Adems, las concentraciones no difieren de modo
DISTRIBUCIONES DE LPIDOS Y importante entre nios y nias. Las concentraciones de
LIPOPROTENAS EN LA POBLACIN
Las concentraciones de lipoprotena srica difieren entre
CUADRO 12-3. IN TERVALO S D E R EFER EN C IA
varones y mujeres adultos, principalmente como resultado
de diferencias en los niveles de hormonas del sexo, donde
PARA LPIDO S EN ADULTOS
las mujeres tienen concentraciones mayores de colesterol AN A LITO INTERVALO DE REFERENCIA
LDL y menores de colesterol total y triglicrido que los
Colesterol total 140-200 mg/dl
varones .56 La diferencia en colesterol total, sin embargo,
desaparece despus de la menopausia a medida que dismi Colesterol HDL 40-75 mg/dl
nuye el estrgeno .37,38 Los varones y las mujeres muestran Colesterol LDL 50-130 mg/dl
una tendencia hacia mayores concentraciones de coleste
Triglicrido 60-150 mg/dl
rol total, colesterol LDL y concentraciones de triglicrido
CAPTULO 12 LPIDOS Y LIPOPROTENAS 291
colesterol HDL para nios y nias son comparables con CU A D RO 12-4. FACTO RES D i R IESG O D E
las de mujeres adultas. Sin embargo, en el inicio de la CA RD IO PA TA D ETERM IN A D O S POR LOS
pubertad, las concentraciones de HDL en nios caen a las GRUPO S D E TRATAM IENTO D E ADULTOS NCEP
concentraciones de varones adultos, una disminucin de
alrededor de 20%, mientras que las de las nias no cam Factores de riesgo positivos
bian. Es la menor concentracin de colesterol de HDL en Edad: >45 aos para varones; >55 aos o
los varones, combinada con sus mayores concentraciones menopausia prematura para mujeres
de colesterol de LDL y triglicridos lo que explica mucha Antecedentes familiares de CC prematura
de la relacin observada con el mayor riesgo de cardiopa Hbito de fum ar actual
ta prematura. Hipertensin (TA >140/90 mmHg o tom ar medica
La incidencia de cardiopata se relaciona de manera fir mentos antihipertensivos)
me con la concentracin de colesterol srico ,64-65 y se han Concentracin de colesterol LDL >160 mg/dl (>4.1
llevado a cabo comparaciones que muestran que los indi mmol/L), con factor de riesgo >1
viduos en sociedades que de manera tradicional comen Concentracin de colesterol LDL >130 mg/dl (3.4
menos grasa animal y ms granos, frutas y verduras, como mmol/L), con factores de riesgo >2
muchas poblaciones asiticas, tienen concentraciones Concentracin de colesterol LDL&10Q mg/dl (2.6
mmol/L), con CC o riesgo equivalente.
menores de colesterol LDL y tasas ms bajas de cardiopata
que las sociedades que ingieren ms grasa, en particular Concentracin de colesterol HDL >40 mg/dl (<1.0
grasa animal, en su dieta y son mas sedentarias .66-67 Estas mmol/L)
diferencias se pueden atribuir a factores genticos y de Diabetes mellitus = equivalente de riesgo de CC
estilo de vida. La importancia de los factores ditticos se Sndrome metablico (factores de riesgo metablico
mostr con claridad en un estudio en el que se compararon mltiples)
los patrones dietticos y las tasas de cardiopata en varones Factores de riesgo negativos
japoneses que viven en Japn, Hawaii y California .68En este Concentracin de colesterol HDL >60 mg/dl (>1.6
estudio, a medida que se volvi ms occidental la inges mmol/L)
tin diettica, con mayor consumo de grasa y colesterol, Colesterol LDL <100 mg/dl (<2.6 mmol/L)
las concentraciones de colesterol LDL se incrementaron de
forma significativa, al igual que las tasas de cardiopata, de
modo que los japoneses que vivan en California tuvieron
tasas mucho mayores de cardiopata que los japoneses que tena ,70-72 estableci normas de laboratorio para precisin
vivan en Japn; los de Hawaii fueron intermedios. Dentro y exactitud aceptables al medir colesterol total, triglicri
de las sociedades en las que la dieta tiende a ser ms homo dos y colesterol de lipoprotenas (colesterol LIDL y LDL)
gnea, las concentraciones de colesterol LDL se vuelven un (cuadro 12- 6 ).
poco menos discriminatorias como factor de riesgo, y las Es evidente que la mejor forma de reducir la prevalen
concentraciones de HDL se vuelven ms importantes como cia de cardiopata es a travs de la prevencin. Aprender
resultado de la capacidad del HDL para eliminar el exceso y practicar buenos patrones de dieta y ejercicio en los
de colesterol de la circulacin .69 primeros aos de la vida, mantener estos patrones toda
El N ational Cholesterol Education Program (NCEP) se la vida ,56 evitar fumar y controlar la presin arterial son
form para alertar a la poblacin estadounidense acerca medios importantes para reducir la incidencia de CC y
de los factores de riesgo relacionados con la cardiopata. accidente cerebrovascular .74-76 Las mediciones del perfil
El NCEP ha empleado grupos de expertos, entre otros los de lipoprotenas proporcionan una manera de identificar
grupos de tratamiento de adultos, el de tratamiento de a los individuos que pueden tener concentraciones que
nios y adolescentes y el de estandarizacin de laborato los ponen en riesgo, de modo que puedan recibir trata
rios, para producir recomendaciones dentro del alcance de miento para reducir el nivel de riesgo. El tratamiento de
las actividades de cada grupo .62-70'73 otras enfermedades que pueden afectar a las lipoprotenas,
En 1988, el grupo de tratamiento de adultos del NCEP como la diabetes mellitus, hipotiroidismo y enfermedad
(Adult Treatment Panel, ATP) elabor una lista de factores renal, tambin es importante.
de riesgo para cardiopata. Estas normas fueron actualiza Una dieta prudente, baja en grasa y colesterol, con
das por el ATP III en 2 0 0 2 .73 La lista actual de factores de una ingestin calrica ajustada para satisfacer y mantener
riesgo se muestra en el cuadro 12-4. El ATP III tambin ha el peso corporal ideal, junto con ejercicio regular, puede
recomendado que los adultos (a 20 aos) obtengan un per reducir el riesgo de cardiopata, accidente cerebrovascular,
fil de lipoprotena de ayuno (colesterol total, LDL y HDL diabetes y cncer .77"80 Se ha demostrado que la ingestin
y triglicridos), una vez cada cinco aos, y ha elaborado diettica de grasa y colesterol tiene un efecto sinergstico,
normas para el diagnstico y tratamiento de seguimiento de de modo que el colesterol diettico es absorbido de mane
individuos con concentraciones anormales (cuadro 12-5). ra ms eficiente en presencia de grasa .81 Adems, la grasa
El grupo de tratamiento de nios y adolescentes tambin ha saturada es ms aterognica que la grasa insaturada .56-82-83
elaborado criterios similares para la poblacin peditrica .62 La American Heart Association ha recomendado normas die
El grupo de estandarizacin de laboratorios del NCEP tticas para la ingestin de grasa y colesterol para la mayor
y su sucesor, el grupo de trabajo de medicin de lipopro- parte de los adultos estadounidenses (cuadro 12-7).
292 PARTE II CORRELACIONES CLINICAS Y PROCEDIMIENTOS ANALTICOS
CUADRO 12-5. NORM AS DE TRATAM IENTO E STA B LEC ID A S POR LO S GRUPOS DE TRATAM IENTO DE
ADULTOS N CEP (LA PRU EBA IN IC IA L D EB E CO N SISTIR EN A YUN O > 12 HORAS)___________________________
CATEG O RA DE RIESGO Y ACCIN
CT, <200 mg/dl (5.2 mmol/L); TG, <150 mg/dl (<1.7 mmol/L); CLDL, <130 mg/dl (<3.4 mmol/L); CHDL, >40 mg/dl
(>1.0 mmol/L)
Repetir dentro de cinco aos
Proveer informacin de reduccin de riesgo
CT, 200 a 239 mg/dl (5.2 a 6.2 mmol/L); TG, 150 a 199 mg/dl (1.7 a 2.2 mmol/L); CLDL, 130 a 159 mg/dl (3.4 a 4.1
mmol/L); CHDL, >40 mg/d (1.0 mmol/L), y 0 a 1 factores de riesgo
Proveer dieta con CTEV e informacin de actividad fsica y evaluar de nuevo en 1 ao
Proveer informacin de reduccin de riesgo
CT, >200 mg/dl (5.2 a 6.2 mmol/L); TG, >200 mg/dl (>2.2 mmol/L); CLDL, 130 a 159 mg/dl (3.4 a 4.1 mmol/L); CHDL,
<40 mg/dl (1.0 mmol/L), y factores de riesgo >2
Hacer la evaluacin clnica, incluso los antecedentes familiares
Iniciar tratam iento con dieta (vase a continuacin)
CT, >240 mg/dl (6.2 mmol/L)
Realizar anlisis de lipoprotenas (vase abajo)
DECISIONES DE TRATAM IENTO
Terapia diettica
Sin CC; factores de riesgo 0-1 >160 mg/dl (4.1 mmol/L) <160 mg/dl (4.1 mmol/L)
Sin CC; >2 factores de riesgo >130 mg/dl (3.4 mmol/L) <130 mg/dl (3.4 mmol/L)
(riesgo de 10 aos, >20% )
CC; equivalente de riesgo de >100 mg/dl (2.6 mmol/L) <100 mg/dl (2.6 mmol/L)
CC (riesgo de 10 aos, >20%)
Tratamiento con frmacos
Sin CC; factores de riesgo 0 a 1 >190 mg/dl (4.9 mmol/L) <160 mg/dl (4.1 mmol/L)
Sin CC; factores de riesgo <2 >160 mg/dl (4.1 mmol/L) <130 mg/dl (3.4 mmol/L)
(riesgo de 10 aos, <10% )
Sin CC; factores de riesgo <2 &130 mg/dl (4.1 mmol/L) <100 mg/dl (3.4 mmol/L)
(riesgo de 10 aos, 10 a 20%)
CC; equivalente de riesgo de CC >130 mg/dl (3.4 mmol/L) <100 mg/dl (2.6 mmol/L)
ES T U D IO D E C A S O 12-2
Un varn de 30 aos de edad con dolor de trax fue CUADRO 12-2.1 DE ESTUDIO DE CASO.
llevado al departamento de urgencias despus de un RESULTADOS DE LABORATORIOS
juego de softbol. Se coloc al paciente en la unidad de
VALO R DEL INTERVALO
atencin coronaria cuando su ECG mostr ondas err
AN ALITO PACIENTE DE REFERENCIA
ticas en la regin ST. En los antecedentes familiares se
encontr que su padre muri de ataque cardaco a la Sodio 139 135-143 mEq/L
edad de 45 aos. El paciente haba sido siempre atl Potasio 4.1 3.0-5.0 mEq/L
tico cuando curs la preparatoria y la universidad, as
que no se haba preocupado de llevar una rutina fsica. Cloruro 101 98-103 mEq/L
Se ejecutaron las pruebas de laboratorio listadas en el Contenido de C 0 2 29 22-27 mmol/L
cuadro 12- 2.1 de estudio de caso.
Protena total 6.9 6.5-8.0 g/dl
Albm ina 3.2 3.5-5.0 g/dl
Preguntas
Calcio 9.3 9.0-10.5 mg/dl
1. Considerando los sntomas y los antecedentes fami
liares, qu pruebas adicionales se deben recomen Colesterol 278 140-200 mg/dl
dar? cido rico 5.9 3.5-7.9 mg/dl
piel forman nodulos llamados xantom as, que son una pista concentraciones de colesterol total, HDL y LDL pueden
para anormalidades genticas. indicar la necesidad para terapia con dieta o con dieta y fr
La formacin de placa conlleva lesin celular, seguida macos. Como se muestra en el cuadro 12-5, los individuos
de infiltracin y proliferacin celular para reparar el sitio. con una dieta baja en grasa que continan con concen
Cuando la sangre viaja por los vasos sanguneos, ocurren traciones de colesterol LDL a 190 mg/dl ( > 4 .9 mmol/L)
pequeas lesiones que sirven de seal para que macrfa- en la medicin repetida se beneficiarn de la intervencin
gos y plaquetas sanen la lesin. La LDL lleva colesterol al con frmacos. Si tienen dos o ms factores de riesgo de
sitio para que se puedan formar nuevas membranas celu EC y continan con concentraciones de colesterol LDL
lares y los macrfagos puedan reparar el rea. La LDL que > 1 6 0 mg/dl (> 4 .1 mmol/L), tambin se beneficiaran de
ha sido modificada por procesos oxidativos y alteraciones la terapia con frmacos. Y si ya se les ha diagnosticado car
qumicas puede ser captada por los macrfagos, y se pro diopata, el tratamiento con frmacos se considera cuando
ducen clulas espumosas. stas se acumulan debajo de la la concentracin de colesterol LDL es > 1 3 0 mg/dl ( > 3 .4
capa endotelial de la pared arterial. Las lesiones futuras mmol/L). Para determinar el tratamiento se debe usar el
dan lugar a ms depsitos y, por ltimo, se forma la placa. promedio de por lo menos dos mediciones, tomadas con
La lesin continua y la reparacin causan ms estrecha separacin de 1 a 8 semanas .73
miento de la abertura de los vasos, o luz, lo que provoca Los tratamientos con frmacos secuestradores de ci
que la sangre circule bajo presin cada vez mayor. dos biliares, como la colestiramina, tienen como finalidad
Los depsitos en las paredes de los vasos se relacionan secuestrar colesterol en el intestino de modo que no sea
con frecuencia con concentraciones sricas incrementadas absorbido y, hasta hace poco, eran considerados como los
de colesterol LDL o concentraciones reducidas de coles nicos frmacos seguros para uso en nios .101Sin embargo,
terol HDL .65'93 95 Disminuir la concentracin de colesterol los secuestradores de cidos biliares tienen efectos adver
LDL es un paso importante en evitar y tratar la CC .95"100 sos incmodos, como distensin abdominal y estreimien
Se estima que para cada disminucin de 1% en la concen to, y son mal tolerados. La clase ms reciente de frmacos
tracin de colesterol LDL hay una disminucin de 2% en incluye los inhibidores lovastatina, simvastatina, pravas-
el riesgo de una persona de desarrollar arteriosclerosis .101 tatina, fluvastatina, atorvastatina y rosuvastatina de HMG-
Para pacientes con cardiopata establecida, los estudios CoA reductasa. Estos frmacos, conocidos como estatinas,
han mostrado que el tratamiento firme para reducir las bloquean la sntesis de colesterol intracelular al inhibir la
concentraciones de colesterol LDL debajo de 100 mg/dl enzima HMG-CoA reductasa. Las cuestiones de seguridad
(2 .6 mmol/L) es efectivo en la estabilizacin y a veces principales son los efectos hepatotxicos de la miositis;
regresin de las placas .102 105 Se considera que la estabi sin embargo, el monitoreo de pacientes en las pruebas cl
lizacin de la placa es al menos tan importante como la nicas ha mostrado que menos de 2% de los pacientes tie
regresin en trminos de rotura potencial .103104106 nen incrementos sostenidos de enzimas hepticas. Estos
En algunos individuos, las concentraciones altas de frmacos son eficaces para reducir el colesterol LDL 20
colesterol sanguneo o triglicridos son causadas por anor a 40% y, por lo general, son bien tolerados .97-100-102,115-117
malidades genticas en las que se sintetiza demasiado o se Estudios recientes de terapia con estatinas en nios con
elimina muy poco .86-107"112Sin embargo, en la mayora de las hipercolesterolemia familiar indican que esta terapia tam
personas las concentraciones altas de colesterol o triglicri bin es efectiva, bien tolerada, y al parecer tambin es
dos, o ambas, son resultado del alto consumo de alimentos segura para ellos .118-120 La niacina es un frmaco potente
ricos en grasa y colesterol, el hbito de fumar y la falta de para reducir el colesterol LDL y elevar las concentraciones
ejercicio, o por otros trastornos o estados morbosos que de colesterol HDL; sin embargo, causa rubor y diarrea en
afectan el metabolismo de lpidos, como la diabetes, hiper muchos pacientes, y puede ser hepatotxico y agravar la
tensin, hipotiroidismo, obesidad, otros desequilibrios intolerancia a la glucosa y la hiperuricemia .121 Otros fr
hormonales, enfermedades del hgado y rin y alcoholis macos son el probucol, que evita la oxidacin de lpidos y
mo. Las concentraciones bajas de colesterol HDL se rela la captacin de macrfagos ,122y derivados de cido fbrico,
cionan tambin con el mayor riesgo de cardiopata .65110111 como clofibrato, gemfibrozilo, fenofibrato y etiofibrato,
pero pocas terapias incrementan de modo significativo las que reducen las concentraciones de triglicrido y coleste
concentraciones de colesterol HDL. Las terapias con esta- rol VLDL e incrementan el colesterol HDL .113-121
tina y fibrato son bien toleradas y producen incrementos
pequeos (5 a 10%) en las concentraciones de colesterol Hiperlipoproteinem ia
HDL, al mismo tiempo que reducen el colesterol LDL y las
concentraciones de triglicridos, las cuales son benficas Las lipoprotenas son vehculos de transporte complejos
para la reduccin de riesgo de C C .113-117 El uso de genfibro- para mover colesterol, steres de colesterilo y triglicridos
zilo en Veterans Affairs HDL Intervention Triol para elevar en la sangre. Los estados morbosos relacionados con los
las concentraciones de colesterol HDL en pacientes con lpidos sricos anormales suelen deberse a disfunciones en
CC con concentraciones bajas en la lnea base, mostraron la sntesis, transporte o catabolismo de lipoprotenas .110121
beneficio directo, significativo, a partir del aumento de 7% Las dislipidemias se pueden subdividir en dos categoras
en las concentraciones de colesterol HDL en la prueba .114 principales: iiperlipoproteinemias, que son enfermedades
Los anlisis de laboratorio pueden ayudar al diagns relacionadas con concentraciones altas de lipoprotenas e
tico de arteriosclerosis. Las determinaciones exactas de hipolipoproteinemias, que se relacionan con concentra
CAPTULO 12 LPIDOS Y LIPOPROTENAS 295
ciones bajas de lipoprotena. Las hiperlipoproteinemias se La mayor parte de los individuos con concentraciones
pueden subdividir en hipercolesterolemia, hipertriglice- altas de colesterol LDL no tienen HF, pero an es alto el
ridemia e hiperlipidemia combinada con incrementos de riesgo de sufrir CC prematura 36-63-69-73-101 y se deben mante
colesterol y triglicridos. ner con una dieta baja en grasa y colesterol, con ingestin
calrica ajustada para conseguir o mantener un peso cor
Hipercolesterolem ia poral ideal.56-1125'127 Se debe incorporar la actividad fsica
regular, con tratamiento farmacolgico adicional cuando
La hipercolesterolem ia es la anormalidad lipdica que guar sea necesario (cuadro 12-5).
da una estrecha relacin con la cardiopata .63 Una forma
de la enfermedad, que se relaciona con anormalidades
Hipertrigliceridem ia
genticas que predisponen a los individuos afectados a
concentraciones altas de colesterol, se llama hipercoleste El grupo de tratamiento de adultos del NCEP ha estable
rolemia familiar (HF). Por fortuna los homocigotos para cido las concentraciones lmite altas de triglicridos como
HF son raros (1 :1 0 0 0 0 0 0 en la poblacin), pero pueden 150 a 200 mg/dl (1.7 a 2.3 mmol/L), altas como 200 a 500
tener concentraciones de colesterol total tan altas como mg/dl (2.3 a 5.6 mmol/L) y muy altas como > 5 0 0 mg/dl
8 0 0 a 1 0 0 0 mg/dl (20 a 26 mmol/L). Estos pacientes con (5 .6 mmol/L).73 La hipertrigliceridem ia puede derivar de
frecuencia tienen su primer ataque cardiaco cuando an anormalidades genticas, conocida como hipertrigliceride
estn en la adolescencia .123 Los heterocigotos para esta m ia fa m iliar, o de causas secundarias, como anormalida
enfermedad son mucho ms frecuentes porque la enfer des hormonales relacionadas con el pncreas, glndulas
medad es causada por un trastorno codominante autos- suprarrenales e hipfisis, o de diabetes mellitus o nefrosis.
mico. Los heterocigotos tienden a tener concentraciones La diabetes mellitus origina mayor desviacin de gluco
de colesterol total en el intervalo de 300 a 600 mg/dl (8 sa en la va de la pentosa, lo que causa mayor sntesis de
a 15 mmol/L) y, si no reciben tratamiento, muestran sn cidos grasos. La nefrosis reduce la eliminacin de cons
tomas de cardiopata en el intervalo de edad de 20 a 50 tituyentes de alto peso molecular como triglicridos, que
aos. Casi 5% de los pacientes menores de 50 aos con causan mayores concentraciones sricas. La hipertriglice
EC son heterocigotos para HE Otros sntomas relaciona ridemia es por lo general un resultado de un desequilibrio
dos con la HF incluyen xantomas tendinosos y tuberosos, entre la sntesis y aclaramiento de VLDL en la circula
que son depsitos de colesterol bajo la piel, y el arco, que cin 128'123 En la mayor parte de los estudios, la hipertri
son depsitos de colesterol en la crnea .110 gliceridemia no ha sido implicada por estadsticas como
En homocigotos y heterocigotos, el incremento de un factor de riesgo independiente para CC, pero muchos
colesterol se relaciona sobre todo con un incremento en pacientes con CC tienen concentraciones moderadamente
el colesterol LDL. Estos individuos sintetizan colesterol altas de triglicridos junto con concentraciones reducidas
intracelular normalmente, pero carecen, o tienen una defi de colesterol HDL .132-133 Es difcil separar el riesgo rela
ciencia, de receptores de LDL activos. En consecuencia, el cionado con concentraciones altas de triglicridos del de
colesterol derivado por absorcin e incorporado en LDL se una concentracin baja de colesterol HDL porque los dos
acumula en la circulacin porque no hay receptores para estn relacionados y las concentraciones sricas tambin
enlazar la LDL y transferir el colesterol a las clulas. Sin lo estn, por lo general, de manera inversa.
embargo, las clulas que requieren colesterol para uso en Los triglicridos estn afectados por varias hormonas,
la membrana celular y produccin de hormonas, sinteti como la insulina pancretica y el glucagon, la hormona de
zan colesterol intracelularmente a una tasa incrementa crecimiento pituitaria, la hormona adrenocorticotrpica
da para compensar la falta de colesterol del mecanismo (ACTH) y la tirotropina y la adrenalina y noradrenalina de
mediado por receptores. la mdula suprarrenal del sistema nervioso. La adrenalina
En los heterocigotos para HF y otras formas de hiperco y la noradrenalina afectan las concentraciones de trigli
lesterolemia en las que hay actividad insuficiente de recep cridos sricos al activar la produccin de lipasa sensible
tores de LDL, la reduccin en la tasa de sntesis interna de a hormona, que se localiza en el tejido adiposo .134 Otros
colesterol, a travs de la inhibicin de la actividad de HMG- procesos del cuerpo que provocan la actividad de la lipasa
CoA reductasa m ediante el uso de inhibidores de sensible a hormonas son el crecimiento celular (hormo
HM G-CoA reductasa (estatinas), estimula la produccin na del crecim iento), la estimulacin suprarrenal (ACTH),
de receptores adicionales, y se incrementa la interioriza estimulacin de la tiroides (tirotropina) y el ayuno (gluca
cin celular de colesterol de LDL que, a su vez, disminuye gon). Cada proceso, por su accin en la lipasa sensible a
las concentraciones sricas. No obstante, los homocigotos, hormona, da como resultado un incremento en la valores
no se pueden beneficiar en forma significativa de este tipo de triglicridos sricos.
de terapia porque no tienen receptores funcionales que Aunque la hipertrigliceridemia grave ( > 5 0 0 mg/dl [5.6
estimular. Los homocigotos dependen sobre todo de una mmol/L]) no se relaciona con riesgo alto para CC, es una
tcnica llamada fresis de LDL, un mtodo similar al trata anormalidad con posibilidad de poner en riesgo la vida
miento de dilisis empleada en personas con insuficiencia porque puede causar pancreatitis (inflamacin del pn
renal, en el que se extrae sangre del paciente en forma creas) aguda y recurrente .121-134-133 Por tanto, es imperativo
peridica, se procesa para eliminar LDL y se regresa al diagnosticar a estos pacientes y tratarlos con medicacin
paciente .123,124 para disminuir triglicridos y vigilarlos de cerca. Por lo
296 PARTE II CORRELACIONES CLNICAS Y PROCEDIMIENTOS ANALTICOS
general, la hipertrigliceridemia grave es causada por una vez de en la regin pre-(3 normal. El diagnstico definitivo
deficiencia de LPL o por una deficiencia de apolipopro- requiere una determinacin de isoformas apo E mediante
tena C-II, que es un cofactor necesario para actividad de enfoque isoelctrico o tipificacin de DNA, lo que da como
LPL .136 Normalmente, la LPL hidroliza los triglicridos resultado homocigosidad de apo E2/2 o, rara vez, deficien
llevados en quilomicrones y VLDL para proveer clulas cia de apo E. Sin embargo, el tratamiento no depende por
con cidos grasos libres para energa desde fuentes de tri completo del diagnstico porque estos pacientes se pue
glicridos exgenas y endgenas. Una deficiencia en la den tratar con terapia estndar de dieta, niacina, genfibro-
actividad de LPL o apo C-II evita que los triglicridos sean zilo e inhibidores de HMG-CoA reductasa, como dictan
eliminados, y los triglicridos sricos permanecen en con los resultados clnicos de lipoprotena. Como resultado
centraciones muy altas, aun cuando el paciente ha ayuna de la composicin rica en colesterol de estas partculas,
do durante 12 a 14 horas. el uso de la ecuacin de Friedewald 148 para calcular las
El tratamiento de la hipertrigliceridemia consiste en concentraciones de colesterol LDL dar como resultado
modificaciones dietticas, aceite de pescado, frmacos una subestimacin de colesterol VLDL y, por tanto, una
que disminuyen los triglicridos (sobre todo, derivados sobrestimacin de colesterol LDL, en comparacin con la
de cido fbrico) en casos de hipertrigliceridemia grave o betacuantificacin .149150
cuando un valor de colesterol HDL bajo indica riego de
CC y a veces aceites con composiciones especficas de ci Increm ento de Lp(a)
dos grasos .137,138 Es posible que slo ciertas subespecies de
quilomicrones y VLDL sean aterognicas. Los remanentes Se considera en la actualidad que los increm entos en la
de quilomicrones y las lipoprotenas de muy baja densidad concentracin srica de Lp(a) confieren un mayor ries
(VLDL) representan subespecies que han sido hidroliza- go de CC y E C V 151"155 Se han observado concentracio
das en parte por lipasas, y se considera que son en parti nes altas de Lp(a) en pacientes con CC que en sujetos
cular aterognicas .139"143 La nueva metodologa para aislar de control normales, aunque en los estudios prospectivos
remanentes de quilomicrones y VLDL posibilita estudiar no se ha determinado de manera concluyente la relacin
en la actualidad la aterogenicidad potencial de estas par positiva .156,157 La Lp(a) es una variante de la LDL con una
tculas .144"146 apoliprotena extra, llamada apo (a); el tamao y las con
centraciones sricas de Lp(a) estn determinadas genti
cam ente .158 Debido a que la apo (a) tiene un alto grado de
Hiperlipoproteinem ia com binada homologa con el factor de coagulacin, plasmingeno ,159
la hiptesis aterognica general tiene que ver con la com
La hiperlipoproteinem ia com binada se define por lo general
petencia entre plasmingeno y apo (a) por sitios de enlace
como la presencia de concentraciones altas de colesterol
de fibrina .160'162 Bajo esta hiptesis, la competencia exito
srico total y triglicridos. Se considera que los individuos
sa por apo (a) bloquear al plasmingeno, y se forman
que presentan este sndrome tienen mayor riesgo de CC.
cogulos a lo largo de la pared arterial que no se disol
En la forma derivada genticamente, llamada hiperlipopro
vern. La mayor parte de los frmacos que disminuyen
teinem ia com binada fa m ilia r (HCF), algunos individuos de
a la LDL no tienen efecto en la concentracin de Lp(a),
la familia afectada pueden tener slo colesterol alto; otros,
aun cuando se reduzca el colesterol en forma significati
slo concentracin alta de triglicridos, e incluso otros, con
va. Los dos frmacos que han mostrado algn efecto son
centraciones altas de ambos.
la niacina y el estrgeno de reemplazo en mujeres posme-
Otra forma gentica rara de hiperlipoproteinemia com
nopusicas. Sin embargo, hasta que se confirme mediante
binada se llama disbetalipoproteinem ia fa m iliar, o hiperli
estudios prospectivos la aterogenicidad de la Lp(a), no se
poproteinemia tipo III. El nombre hiperlipoproteinemia
recomienda el tratamiento con niacina excepto jun to con
tipo III es un vestigio de un sistema de clasificacin que
otras condiciones dislipidmicas en las que est indicada
desarrollaron Fredrickson y cois .147 que por lo dems en
la niacina.
general ya no se usa. La enfermedad resulta de una acu
mulacin de VLDL rica en colesterol y remanentes de qui
lomicrones como resultado del catabolismo defectuoso de Hipolipoproteinem ia
estas partculas. La enfermedad se relaciona tambin con Las hipolipoproteinem ias son anormalidades marcadas por
la presencia de una forma relativamente rara de apo E, lla concentraciones reducidas de lipoprotena. Hay dos cate
mada apo E2/2. Los individuos con hiperlipoproteinemia goras principales: hipoal/alipoproteinemia y hipobetali-
tipo III con frecuencia tendrn valores de colesterol total poproteinemia. La hipobetalipoproteinemia se relaciona
de 200 a 300 mg/dl (5 a 8 mmol/L) y triglicridos de 300 con concentraciones bajas aisladas de colesterol LDL (es
a 600 mg/dl (3 a 7 mmol/L). Para distinguirlos de los indi decir, sin otros trastornos lipoprotenicos adicionales),
viduos con otras hiperlipoproteinemias combinadas, es pero debido a que por lo general no est relacionada con
necesario aislar primero la fraccin de VLDL de su suero CC, no se analiza ms.
por centrifugacin. Una relacin obtenida de la concentra
cin de colesterol de VLDL a triglicridos sricos totales
Hipoalfalipoproteinem ia
ser > 0 .3 0 en presencia de hiperlipoproteinemia tipo III.
Si la fraccin de VLDL est sujeta a electroforesis de aga La hipoalfalipoproteinem ia indica una reduccin aislada
rosa, las partculas migrarn en una regin (3 amplia, en de HDL circulante, definido en la actualidad por el NCEP
CAPTULO 12 LPIDOS Y LIPOPROTENAS 297
ES T U D IO D E C A S O 12-3
ES T U D IO D E C A S O 12-4
Una m ujer de 60 aos de edad acude a consulta con CUADRO 12-4.1 DE ESTUDIO DE CASO.
su mdico porque tiene problemas urinarios. Como RESULTADOS DE LABORATORIO
antecedentes clnicos tiene hipertensin y episodios de
VALO RES DEL INTERVALO DE
edema. El mdico orden varias pruebas de laboratorio
A N A LITO PACIENTE REFERENCIA
en sangre extrada en su consultorio. Los resultados se
muestran en el cuadro 12-4.1 de estudio de caso. Na+ 149 135-143 mEq/L
K+ 4.5 3.0-5.0 mEq/L
Preguntas
ci- 120 98-103 mEq/L
1. Cules son los resultados anormales en este caso? Contenido de C 0 2 12 22-27 m mol/L
2. Por qu se considera que los triglicridos son anor Protena total 5.7 6.5-8.0 g/dl
males?
Albmina 2.3 3.5-5.0 g/dl
3. Cul es la enfermedad principal que exhiben los Calcio 7.6 9.0-10.5 mg/dl
datos de laboratorio para este paciente?
Colesterol 201 140-200 mg/dl
cido rico 15.4 3.5-7.9 mg/dl
Creatinina 4.5 0.5-1.2 mg/dl
US 87 7-25 mg/dl
Glucosa 88 75-105 mg/dl
Bilirrubina total 1.3 0 .2 - 1 .0 mg/dl
Triglicridos 327 65-157 mg/dl
Deshidrogenasa de lactato 200 90-190 IU/L
Trasaminasa de aspartato 45 8-40 IU/L
Amilasa 380 76-375 IU/L
298 PARTE II CORRELACIONES CLNICAS Y PROCEDIMIENTOS ANALTICOS
3. H20 2 + Colorante---r -asa > Color FIGURA 12-4. Secuencia de ensayo enzimtico, colesterol.
la bilirrubina son agentes reductores que pueden interferir libre endgeno, pero esta prctica es poco comn en los
con la reaccin de color catalizada por peroxidasa .180 laboratorios clnicos. La correccin ms comn, designada
blanco de cubeta doble, se lleva a cabo con una segunda
M edicin de triglicrido medicin paralela por medio de un reactivo de triglicri
do sin la enzima lipasa para cuantificar slo el blanco de
La medicin de triglicridos sricos junto con el colesterol glicerol libre. La medicin del blanco de glicerol se resta
es til para detectar ciertos trastornos genticos y otros de la medicin de glicerol total obtenida con el reactivo
tipos de trastornos metablicos, as como para caracterizar completo para determinar un resultado de triglicrido
el riesgo de desarrollar enfermedad coronaria. El valor de corregido por blanco .186 Otro mtodo, designado blan
triglicrido se emplea tambin por lo comn en la esti co de cubeta simple, comienza con el reactivo sin lipasa.
macin de colesterol LDL mediante la ecuacin de Frie- Despus de una incubacin breve, se toma una lectura del
dewald. Varias secuencias de reaccin enzimticas estn blanco para medir slo glicerol libre endgeno. La enzi
disponibles para medicin de triglicridos. En todas se ma lipasa se agrega entonces como un segundo reactivo
emplean lipasas para separar los cidos grasos del glice separado y, despus de incubacin adicional, se toma una
rol .181 El glicerol liberado participa en cualquiera de las lectura final que, posterior a realizar la correccin respecto
distintas secuencias enzimticas. En una de las primeras al blanco mediante el instrumento, da un valor neto o de
reacciones ms comunes, que finaliza en un producto triglicrido con supresin de glicerol .187 Estn disponibles
medido en la regin ultravioleta (UV), se emplean cinasas reactivos comerciales con supresin de glicerol, pero su
de glicerol y de piruvato, y termina en la conversin de alto costo no se justifica tan fcil mediante los requisitos
NADH a NAD+ con una disminucin correspondiente de de exactitud en la prctica clnica rutinaria. Una alterna
absorbancia .182 Esta reaccin es susceptible a interferencia tiva conveniente puesta en prctica, que no incrementa
y reacciones secundarias. El punto final UV es tambin el costo, designada puesta a cero de calibracin, se pue
menos conveniente para los analizadores modernos, as de hacer al ajustar los puntos de ajuste del calibrador a
que esta y otras secuencias UV han sido reemplazadas de valores netos o corregidos por blanco para compensar el
forma gradual por una segunda secuencia (fig. 12-5) en contenido promedio de glicerol libre de las muestras. Este
la que intervienen cinasa de glicerol y oxidasa de glice- mtodo empleado por ciertas compaas que elaboran
rol-fosfato, acoplada con la misma reaccin de color de reactivos para diagnstico, suele ser muy exacto porque
peroxidasa descrita para el colesterol .183 las concentraciones de glicerol libre son en general relati
Las secuencias enzimticas de reaccin de triglicri vamente bajas y bastante coherentes en la mayor parte de
dos tambin reaccionan con glicerol libre endgeno, que las muestras. Casi todas las muestras tendrn una correc
est universalmente presente en el suero y constituye una cin por blanco razonablemente buena y slo algunas
fuente importante de interferencia .184185 En casi todas las muestras estarn subcorregidas pero an mejor que sin el
muestras, el glicerol libre endgeno contribuye con una ajuste de calibracin.
sobrestimacin de triglicridos de 10 a 20 mg/dl. Cerca El mtodo de referencia de triglicrido conlleva hidrli
de 20% de las muestras tendrn alto contenido de glice sis alcalina, extraccin con disolvente y reaccin de color
rol, con concentraciones incrementadas en ciertas condi con cido crom otrpico ,188 un ensayo que es tedioso, est
ciones como diabetes y hepatopata o por medicaciones mal caracterizado y slo se aplica en el laboratorio de
basadas en glicerol. La mayor parte de los laboratorios estandarizacin de lpidos en los Centros para Control y
de investigacin incorporan una correccin para glicerol Prevencin de la Enfermedad de Estados Unidos (CDC).
Lipasa bacteriana ,
1. Triglicrido + H20 ---------------Acido graso + Glicerol FIGURA 12-5. Secuencia de ensayo enzimtica, triglicridos.
Glicerocinasa
2. Glicerol + ATP Glicerofosfato + ADP
Oxidasa de glicerofosfato
3. Glicerofosfato + 0 2 Dihidroxiacetona + H20 2
Peroxidasa
4. H20 2 + Colorante Color
300 PARTE II CORRELACIONES CLINICAS Y PROCEDIMIENTOS ANALTICOS
Se ha desarrollado un mtodo de comparacin designado Los mtodos electroforticos, en general, han sido con
ms adecuado con extraccin por disolvente seguido de siderados tiles para anlisis cualitativo pero menos que
un ensayo enzima tico ptimo, el cual en fechas recientes deseables para cuanticacin de lipoprotenas debido a la
han adoptado algunos laboratorios de estandarizacin. escasa precisin y sesgos sistemticos grandes en compa
Sin embargo, se debe notar que la exactitud en las medi racin con otros mtodos .204 Las evaluaciones de sistemas
ciones de triglicridos para propsitos clnicos podra ser electroforticos automatizados comerciales ms recientes,
considerada menos importante que para el colesterol por sin embargo, demuestran que la electroforesis puede ser
que la variacin fisiolgica es grande, con coeficiente de precisa y exacta .205
variacin (CV) en el intervalo de 25 a 30% , lo que hace La electroforesis en geles de poliacrilamida se emplea
que la contribucin de la variacin analtica sea relativa para la separacin de clases de lipoprotena ,206 subclases
mente insignificante. y las apolipoprotenas .207,208 De particular inters son los
mtodos que fraccionan subclases de LDL para caracte
M todos de lipoprotena rizar las fracciones ms aterognicas, pesadas, sin lpidos
y ms pequeas contra las subclases ms grandes y lige
Se han empleado varios mtodos para la separacin y ras .209
cuanticacin de lipoprotenas sricas, que aprovechan las La precipitacin qumica, por lo regular con polia-
propiedades fsicas como densidad, tamao, carga y conte niones, como la heparina y cationes divalentes, como el
nido de apolipoprotenas. El intervalo de densidad obser manganeso, se puede usar para separar las lipoprotenas,
vado entre las clases de lipoprotenas es una funcin del pero son ms comunes para HDL .210'212 La apo B en VLDL
contenido relativo de lpidos y permite el fraccionamiento y LDL es rica en aminocidos con carga positiva, que de
por ultracentrifugacin. Las separaciones electroforticas preferencia forma complejos con polianiones. La adicin
aprovechan las diferencias de carga y tamao. Los mto de cationes divalentes neutraliza los grupos cargados en
dos de precipitacin qumicos, que son ms comunes en las lipoprotenas, lo que hace que se agreguen y se vuelvan
laboratorios clnicos, dependen del tamao de partcula, insolubles y, como resultado, precipitan y dejan a la HDL
carga y diferencias en el contenido de apoliprotena. Se en disolucin. A concentraciones apropiadas de polianin
pueden usar anticuerpos especficos para enlazar y sepa y catin divalente, la separacin es bastante especfica.
rar clases de lipoprotenas. Los mtodos cromatogrficos En los mtodos inmunoquimicos, usr anticuerpos
aprovechan las diferencias de tamao en mtodos de cri especficos para epitopos en las apolipoprotenas, ha sido
bado molecular o la composicin en mtodos de afinidad til en mtodos de investigacin y de rutina .213,214 Los
con, por ejemplo, sefarosa de heparina. anticuerpos han sido inmovilizados en soportes slidos,
En el laboratorio de investigacin se han empleado como una matriz de columna o cuentas de ltex. Por ejem
muchos mtodos de ultracentrifugacin, pero sta es poco plo, las lipoprotenas que contienen apo B, como un gru
comn en el laboratorio clnico .189 El mtodo ms comn, po se pueden enlazar mediante anticuerpos a la apo B. La
llamado ultracentrifugacin preparativa, emplea ajustes selectividad dentro de las lipoprotenas que contienen apo
de densidad sucesivos de suero para fraccionar las clases de B, como en la eliminacin de VLDL mientras se retiene
lipoprotena mayores y menores .190 Los mtodos de gra LDL, se puede obtener al incluir anticuerpos para apoli
diente de densidad, ya sea tcnicas de no equilibrio en las poprotenas menores. La HDL se puede enlazar de manera
que las separaciones se basan en la tasa de flotacin, o selectiva con anticuerpos a la apo A-I, la protena princi
tcnicas de equilibrio en las que las lipoprotenas se sepa pal de HDL. Como ejemplo, los anticuerpos monoclonales
ran con base en su densidad, permiten el fraccionamiento inmovilizados han sido usados para separar una fraccin
de varias de las subclases en una sola corrida .191195 En los de lipoprotenas remanentes designada PPR (partculas
mtodos disponibles se emplean diferentes tipos de roto parecidas a las remanentes ).144'146
res de ultracentrifugadora: cubeta rotatoria, ngulo fijo,
vertical, zonal. Los mtodos ms recientes tienden hacia
M todos de HDL
las separaciones de menor escala en rotores pequeos
con ultracentrifugadoras de mesa .196197 La ultracentrifu La medicin de colesterol HDL ha asumido cada vez ms
gacin, aunque tediosa, cara y tcnicamente demandante, importancia en las normas de tratamiento NCEP ATP III,
an es un medio til para la separacin de lipoprotenas liberadas en 2001. En las primeras normas, el colesterol
para fines cuantitativos y aislamientos preparativos. La HDL se meda como factor de riesgo pero de otro modo no
ultracentrifugacin se emplea tambin en los mtodos se consideraba en las decisiones de tratamiento. Siguiendo
de referencia para cuanticacin de lipoprotenas, que es las recomendaciones de un grupo de consenso patrocina
apropiada porque las lipoprotenas se definen de manera do por los Institutos Nacionales de Salud ,96 las normas
clsica en trminos de densidad hidratada. de 1993 NCEP ATP II incluan la medicin de colesterol
Los mtodos electroforticos permiten la separacin y HDL con colesterol total en el primer estudio diagnstico
cuanticacin de las principales clases de lipoprotenas y mdico, que se reforzaron mediante las normas ATP III
proveen una representacin visual til para detectar patro de 2 0 0 1 .73 Debido al riesgo relacionado con el colesterol
nes inusuales o variantes .198,199 El gel de agarosa ha sido HDL se expresa sobre un intervalo de concentracin rela
el medio ms comn para la separacin de lipoprotenas tivamente pequeo, la exactitud en la medicin adquiere
intactas, y provee una base clara y uso conveniente .200'203 importancia especial.
CAPITULO 12 LPIDOS Y LIPOPROTENAS 301
ES T U D IO D E C A S O 12-5
Para propsitos de diagnstico rutinario, la HDL ha meros aos como resultado de la falta de estandarizacin.
sido separada casi de forma exclusiva por precipitacin Sin embargo, con un proceso de estandarizacin disponi
qumica y, durante muchos aos, la medicin de coles ble para los fabricantes de reactivo para certificacin de
terol HDL ha requerido un procedimiento de dos pasos exactitud, las diferencias han tendido a disminuir.
con pretratamiento manual. Un reactivo de precipitacin Un problema significativo con mtodos de precipita
aadido al suero o plasma agrega protenas no HDL, que cin de HDL es la interferencia de concentraciones altas
se sedimentan por centrifugacin. Los primeros mtodos de triglicrido .226 Cuando VLDL y quilomicrones ricos en
empleaban fuerzas de centrifugacin de alrededor de 1500 triglicrido estn presentes, la baja densidad de las lipo-
X gravedad, que requeran tiempos de centrifugacin pro protelnas agregadas puede evitar que sedimenten o incluso
longados de 10 a 30 min. Los nuevos mtodos pasaron a causar flotacin durante la centrifugacin. Esta sedimen
centrifugacin con fuerzas de 10 000 a 15 000 X gravedad, tacin incompleta, indicada por turbiedad o material
y los tiempos de centrifugacin se redujeron a 3 min. La compuesto por partculas que flotan en el sobrenadante,
HDL se cuantifica entonces como colesterol en el sobre da como resultado sobrestimacin de colesterol HDL. La
nadante normalmente por uno de los ensayos enzimticos centrifugacin de alta velocidad reducir la proporcin
modificados para el intervalo menor de colesterol HDL. de sobrenadante turbio. La dilucin previa de la muestra
En el primer mtodo de precipitacin comn se emplea tambin promueve el aclaramiento, pero puede conducir
ba heparina en combinacin con manganeso para preci a errores en el anlisis de colesterol. Los sobrenadantes
pitar las lipoprotenas que contenan apo B .215-218 Debido turbios tambin se pueden clarificar por ultrafiltracin, un
a que el manganeso interfera con los ensayos enzimti mtodo que es confiable pero tedioso e ineficiente. Debi
cos, se elaboraron otros reactivos .219 El fosfotungstato de do a estas desventajas y a la falta de automatizacin com
sodio 220,221 con magnesio se volvi comn en el uso rutina pleta, los mtodos de precipitacin se fueron quedando
rio pero, como resultado de su sensibilidad a condiciones rezagados en relacin con el laboratorio clnico moderno
de reaccin y mayor variabilidad, fue reemplazado en gran automatizado.
medida por sulfato de dextrano (una heparina sinttica) El resultado ha sido el desarrollo de una nueva clase de
con magnesio .222 En los primeros mtodos con sulfato de mtodos directos, denominados a veces hom ogneos, que
dextrano se empleaba material de 500 kD, que se reempla agilizan la cuantificacin de HDL. Polmeros especficos,
z por un material de 50 kD, considerado ms especfico .212 detergentes e incluso enzimas modificadas, se emplean
El polietilenglicol tambin precipita lipoprotenas, pero para suprimir la reaccin enzimtica de colesterol en lipo
requiere concentraciones de reactivo 100 veces mayores protenas distintas a HDL .227 Los reactivos son aptos para
con reactivos altamente viscosos, difciles de pipetear con automatizacin completa con la mayor parte de los anali
precisin.223-225. Numerosas versiones comerciales de estos zadores de qumica y son muy adecuados para el laborato
reactivos de precipitacin llegaron a estar disponibles pero rio moderno. En general, se agrega un primer reactivo para
a menudo daban resultados bastante diferentes en los pri bloquear liproprotenas no HDL, seguido de un segundo
302 PARTE II CORRELACIONES CLINICAS Y PROCEDIMIENTOS ANALTICOS
reactivo con las enzimas para cuantificar el colesterol acce la base para el mtodo de referencia aceptado para LDL. El
sible (HDL). Los ensayos homogneos, que al parecer son mtodo es el mismo que el descrito antes para HDL con
muy precisos y bastante exactos, fueron adoptados con el colesterol HDL medido restado del de la fraccin del
rapidez y en general reemplazaron a los mtodos de pre- fondo para obtener colesterol LDL.
tratamiento en el laboratorio rutinario .228 Sin embargo, se Un mtodo ms comn que evita la ultracentrifugacin,
ha mostrado que los mtodos carecen de especificidad para que se emplea tanto en los laboratorios de investigacin
HDL en muestras inusuales (como de pacientes con condi como los de rutina, es el clculo de Friedew ald o betacuan
ciones hepticas o renales ).229 Asimismo, los reactivos han tificacin derivada.1*8 El colesterol HDL se cuantifica ya
estado sujetos a modificaciones frecuentes por parte de los sea despus de la precipitacin o por medio de uno de los
fabricantes en un esfuerzo por m ejorar el desempeo, que mtodos directos, y el colesterol total y los triglicridos se
puede afectar los resultados en estudios de largo plazo. Por miden en el suero. El colesterol VLDL se estima como tri
estas razones, los mtodos no han sido recomendados para glicridos divididos entre 5 (cuando se emplean unidades
uso en laboratorios de investigacin. de mg/dl), una aproximacin que funciona bastante bien
El mtodo de referencia aceptado para colesterol HDL en la mayor parte de las muestras normolipmicas. La pre
es un procedimiento de tres pasos desarrollado en el CDC. sencia de concentraciones altas de triglicridos (400 mg/dl
Este mtodo conlleva centrifugacin para eliminar VLDL, es el lmite aceptado), quilomicrones y (3-VLDL caracters
precipitacin con manganeso de heparina desde el lqui tica de la hiperlipoproteinemia tipo III rara imposibilita
do subnadante de 1.006 g/ml para eliminar LDL y anlisis esta estimacin. El colesterol VLDL estimado y el coleste
de colesterol sobrenadante mediante el ensayo de Abell- rol HDL medido se restan del colesterol srico total para
Kendall.175 Debido a que este mtodo es tedioso y caro, el estimar o derivar el colesterol LDL.
CDC N etw ork Laboratory Group ha validado un mtodo LDL = colesterol total - LDL - trig/5. Este mtodo,
de precipitacin directa ms simple como un mtodo de conocido comnmente como panel de lpidos y empleado
comparacin designado, por medio de precipitacin direc casi de manera universal para estimar el colesterol LDL en
ta con sulfato de dextrano (50 kD) de suero con anlisis de la prctica clnica rutinaria, ha sido recomendado por las
colesterol Abell-Kendall.172 normas NCEP ATP III. Las investigaciones en los labora
torios de especialidad de lpidos han llevado a pensar que
M todos para LDL el mtodo es confiable para la clasificacin de pacientes,
siempre que las mediciones subyacentes se realicen con
El colesterol LDL, bien validado como una factor de riesgo exactitud y precisin adecuadas.231,232 Sin embargo, ha
tratable para CC, es la base primaria para decisiones de tra habido inters acerca de la confiabilidad en los laborato
tamiento en las normas clnicas del NCEP.73 El mtodo de rios rutinarios porque el error al calcular el colesterol LDL
investigacin ms comn para cuantificacin de colesterol se combina con el error en las mediciones subyacentes:
LDL y la base para el mtodo de referencia ha sido desig colesterol total, triglicridos y colesterol HDL. El grupo
nado betacuantificacin, donde beta se refiere al trmino de expertos de laboratorio del NCEP revis los datos de
electrofortico para LDL. La betacuantificacin combina desempeo y concluy que el nivel de desempeo analti
ultracentrifugacin y precipitacin qumica .218,230 La ultra- co requerido para derivar colesterol LDL con la exactitud
centrifugacin de suero en la densidad nativa de 1.006 suficiente para satisfacer las necesidades clnicas estaba
g/L se emplea para hacer flotar VLDL y quilomicrones ms all de la capacidad de la mayor parte de los laborato
para separacin. Las fracciones se recuperan pipeteando rios rutinarios. Para cumplir con el objetivo de precisin
despus de separar las fracciones al cortar en secciones el requerido NCEP de CV de 4% para colesterol LDL (cuadro
tubo. La centrifugacin ha sido preferida para separacin 12- 6), un laboratorio tendra que lograr la mitad de los
de VLDL porque otros mtodos, como la precipitacin, no objetivos NCEP para cada una de las mediciones subya
son especficos para VLDL y pueden estar sujetos a interfe centes. El grupo del NCEP concluy que son necesarios
rencia de quilomicrones. En general, la ultracentrifugacin mejores mtodos para uso diagnstico rutinario, de prefe
es una tcnica robusta pero tediosa que puede dar resulta rencia mtodos que separan LDL de manera directa para
dos confiables siempre que la tcnica sea meticulosa. cuantificacin de colesterol.71
En un paso separado, la precipitacin qumica se En respuesta a la peticin del NCEP, se han desarrollado
emplea para separar HDL del suero completo o del sub o refinado mtodos directos de colesterol LDL para uso
nadante obtenido por ultracentrifugacin. El colesterol se general, que son similares a los ensayos homogneos para
cuantifica en el suero, en el subnadante de 1.006 g/ml, colesterol HDL .230,233 Adems de lograr la automatizacin
y en el sobrenadante de HDL por mtodos enzimticos completa de la estimulante separacin de colesterol LDL,
u otros mtodos de ensayo. El colesterol LDL se calcula estos ensayos tienen el potencial para agilizar la medicin
como la diferencia entre el colesterol medido en el sub mientras se mejora la precisin. Sin embargo, separar LDL
nadante y en la fraccin de HDL. El colesterol VLDL se con especificidad adecuada de otras lipoprotenas de esta
calcula por lo general como la diferencia entre el suero manera es ms estimulante incluso que la de HDL, y las
total y la cantidad en la fraccin de subnadante. El requi pocas evaluaciones de los mtodos directos no han sido
sito para la necesidad de una ultracentrifugadora ha limi prometedoras .234 Se requerir ms experiencia, en particu
tado en general la betacuantificacin a laboratorios con lar con las muestras de composicin inusual, para juzgar la
especialidad en lpidos. La betacuantificacin es tambin conveniencia de las separaciones homogneas .235
CAPTULO 12 LPIDOS Y LIPOPROTENAS 303
A n alizad ores com pactos equipos comerciales disponibles .237 Ms comn en los
laboratorios rutinarios son los ensayos nefelomtricos para
Los lpidos y lipoprotenas comunes se pueden medir con nefelmetros dedicados. En particular para apo B y Lp(a),
sistemas de anlisis compactos diseados para uso en las estos ensayos de dispersin de luz pueden estar sujetos
pruebas realizadas en el lugar de la atencin al lado de la a interferencia de lipoprotenas ms grandes ricas en tri
cama del paciente, en el consultorio mdico, en centros glicridos (quilomicrones) y VLDL. Tambin han estado
de salud e incluso en el hogar .236 Los primeros sistemas, disponibles los mtodos de anlisis de inmunoabsorcin
introducidos en la dcada de 1980, eran relativamen ligado a enzimas (ELISA), la inmunodifusin radial (IDR)
te grandes y medan colesterol y triglicridos as como y el radioinmunoensayo, pero estos dos ltimos mtodos
otros analitos comunes, casi siempre por separado y en se estn volviendo cada vez menos comunes. Los anticuer
secuencia. Las separaciones de HDL que conllevan pretra- pos empleados en los inmunoensayos pueden ser mono
tamiento fuera de lnea se desarrollaron despus. Los sis clonales o policlonales. Los esfuerzos internacionales para
temas posteriores se volvieron ms pequeos y complejos, desarrollar materiales de referencia y programas de estan
y ofrecan la separacin integrada de HDL y anlisis de darizacin para los ensayos estn en progreso. Debido a
colesterol y triglicridos al mismo tiempo a partir de san que la Lp(a) es heterognea desde el punto de vista gen
gre obtenida por puncin digital. Ahora un sistema puede tico, y las concentraciones y riesgo de CC se correlacionan
medir colesterol, triglicridos, colesterol HDL y glucosa con el tamao de la isoforma, la evaluacin cualitativa de
en forma simultnea a partir de una muestra obtenida por la distribucin de isoformas tambin puede ser importan
puncin digital. Tambin estn disponibles sistemas sin te .138
instrumentos para colesterol total. Estas nuevas tecnolo
gas ofrecen la capacidad de medir lpidos y lipoprotenas
con confiabilidad razonable fuera del laboratorio conven M edicin de fosfolpidos
cional.
La medicin cuantitativa de fosfolpidos es rara en la prc
tica clnica rutinaria. A veces en la investigacin se miden
M todos de apolipoprotena fosfolpidos (p. ej., en estudios de influencias dietticas).
Los lpidos por naturaleza tienden a ser insolubles en Los fosfolpidos lecitina, lisolecitina y esfingomielina que
el medio acuoso de la circulacin; por consiguiente, las contienen colina, que explican por lo menos 95% de los
lipoprotenas incluyen varios constituyentes protenicos, fosfolpidos totales en el suero, se pueden medir mediante
designados apolipoprotenas, que adems de incrementar una secuencia de reaccin enzimtica con fosfolipasa D,
la solubilidad desempean otras funciones (cuadro 12- oxidasa de colina y peroxidasa de rbano .239,240 Los mto
2). En la investigacin suelen medirse apolipoprotenas, dos de equipo con esta secuencia enzimtica estn dispo
y algunos laboratorios de especialidades capaces de llevar nibles de forma comercial. Antes de la disponibilidad de
a cabo prcticas cardiovasculares o estudios clnicos las reactivos enzimticos, el mtodo cuantitativo comn tena
miden de manera rutinaria adems de las lipoprotenas. que ver con la extraccin y digestin cida con anlisis de
Para propsitos de diagnstico clnico, tres apolipoprote fsforo total ligado a lpidos .241
nas en particular han sido de inters. La apo B, la protena Ciertos fosfolpidos que contienen colina y, en algunas
principal de LDL y VLDL, es un indicador de concentra aplicaciones, sus relaciones, han sido determinados en el
cin combinada de LDL y VLDL que se puede medir de laboratorio clnico. Por ejemplo, la madurez pulmonar
manera directa en el suero de inmunoensayo .237 Algunos fetal ha sido evaluada de patrones caractersticos de fosfo
investigadores pueden sugerir apo B como una alternati lpidos en lquido amnitico. En este caso, los fosfolpidos
va para la separacin y medicin del colesterol LDL .238 La pueden ser recuperados por extraccin con disolventes,
Apo A-I, es la mejor protena de HDL, puede medir de aplicados a una placa de gel de slice para separacin al
forma directa en suero en lugar de la separacin y anlisis tratar con vapor de yodo. La relacin de lecitina a esfin
de colesterol HDL; sin embargo, debido a que la cuanti- gomielina ha sido empleada para predecir la madurez pul
ficacin en trminos del contenido de colesterol es ms monar fetal.
comn, esta ltima prctica ha prevalecido. La Lp(a),
la variante de LDL, que se ha mostrado es un indicador M edicin de cidos grasos
independiente de riesgo de CC, se determina a veces para
tratar a los pacientes. La medicin de estas tres apolipo Aunque los estudios indican que los cidos grasos tie
protenas puede ser til cuando mdicos expertos tratan nen potencial para evaluar el riesgo de CC, el anlisis se
al paciente, pero no ha sido aceptada o recomendada en emplea principalmente en laboratorios de investigacin
alguna de las normas de consenso para uso en la prctica para estudios de dieta .82 Menos comn es su medicin en
rutinaria. Los resultados de estudios prospectivos han sido el diagnstico de condiciones genticas raras. Por lo gene
inconsistentes en demostrar que son predictores indepen ral, los cidos grasos se analizan mediante cromatografa
dientes de riesgo de CC. gas-lquido, despus de la extraccin, hidrlisis alcalina y
La Lp(a) tiene movilidad pre-|3 en la electroforesis conversin a steres de metilo de diazometano. Un estn
de agarosa y puede ser cuantificada por esta tcnica. Sin dar de referencia contiene por lo general laurato, miris-
embargo, las apolipoprotenas suelen medirse mediante tato, palmitato, palmitoleato, fitanato, estearato, oleato,
inmunoensayos de varios tipos, con varios mtodos de linoleato, araquidato y araquidonato .242
304 PARTE II CORRELACIONES CLNICAS Y PROCEDIMIENTOS ANALTICOS
ES T U D IO D E C A S O 12-6
travs de una red de laboratorios estandarizados, la Red de desempeo para error total es 8.9%. Es decir, el error
de laboratorios para el mtodo de referencia de colesterol. global debe ser tal que cada medicin de colesterol caiga
Esta red fue establecida en Estados Unidos y algunos de dentro de 8 .9 % del valor del mtodo de referencia. En
los pases europeos y asiticos para ampliar la estandariza realidad, debido a que los objetivos se basan en certidum
cin a fabricantes y laboratorios clnicos .172 La red propor bre de 95% , 95 de 100 mediciones deben caer dentro del
ciona comparaciones de exactitud con muestras de suero lmite de error total. Se puede valorar una muestra muchas
nativo nuevo necesarias para la transferencia exacta con veces y calcular la media para determinar el valor usual o
fiable debido a problemas de interaccin analito-matriz en la tendencia central. La dispersin o variacin aleatoria en
materiales de referencia procesados .245'247 torno a la media se describe mediante la desviacin estn
dar, un intervalo alrededor de la media que incluye, por
definicin, dos tercios de las observaciones. En el labo
Interacciones de m atriz
ratorio, debido a que la dispersin o imprecisin es con
En las primeras etapas de estandarizacin de colesterol, frecuencia proporcional a la concentracin, la variacin
que estaban dirigidas hacia fabricantes de diagnstico y aleatoria suele especificarse en trminos relativos como
laboratorios rutinarios, se empleaban materiales liofili- CV, el coeficiente de variacin de la desviacin estndar
zados. Estos materiales, hechos en grandes cantidades, a relativa, calculada como la desviacin estndar dividida
menudo con adicin artificial de analitos, se analizaban entre la media. La exactitud global o error sistemtico se
mediante mtodos definitivos o de referencia, o ambos, describe como sesgo, la diferencia entre la media y el valor
y se distribuan de manera amplia para transferencia de verdadero. El sesgo es principalmente una funcin de la
exactitud. Posteriormente, se observaban los sesgos en calibracin del mtodo y puede variar por concentracin.
ensayos enzimticos en muestras nuevas del paciente. De mayor inters en este contexto es el sesgo en los pun
Aunque tales materiales de referencia fabricados son con tos de corte de decisin NCEP. El sesgo y los objetivos de
venientes, estables y recomendables para envo a tempera CV presentados en el cuadro 12-6 son representativos del
turas ambiente, el proceso de manufactura, en particular desempeo que satisfar los objetivos NCEP para el error
la adicin artificial y la liofilizacin, modificaba las propie total.
dades de medicin en ensayos enzimticos, de modo que
los resultados no eran representativos de los de las mues Control de calidad
tras del paciente. Para lograr la retroalimentacin confia
ble en la exactitud y facilitar la transferencia de la base de El desempeo analtico aceptable alcanzable requiere el
exactitud, se determin que eran necesarios mtodos de uso de materiales de control de calidad confiables, que de
referencia en las muestras reales del paciente .172 preferencia deben emular las muestras reales del pacien
te. En la actualidad, los mejores materiales se preparan a
partir de suero del paciente recin recolectado, del cual
Red de laboratorios para el m todo de
se toman alcuotas que se depositan en viales bien sella
referencia de colesterol del CDC
dos, se congelan con rapidez y se almacenan a -7 0 C . Esta
En respuesta, se organiz el programa de red de coleste clase de fondos comunes de suero congelado nuevo estn
rol del CDC. (Informacin disponible en: http://www.cdc. menos sujetos a interacciones matriciales que los mate
gov/nceh/dls/crmln/crmln.htm). La red ofrece programas riales comerciales usuales, ms importante es monitorear
de certificacin formales para colesterol total, HDL y LDL, la exactitud en la separacin y anlisis de lipoprotenas,
as que los laboratorios y fabricantes pueden documentar y preferible para monitorear colesterol y otras medicio
el seguimiento para los sistemas de referencia naciona nes de lpidos. Se deben analizar por lo menos dos fondos
les .172 A travs de este programa, los laboratorios clni comunes, de preferencia con concentraciones en o cerca
cos pueden identificar mtodos comerciales certificados. de los puntos de decisin para cada analito.
La certificacin no asegura todos los aspectos de calidad
en un sistema reactivo pero asegura principalmente que Recoleccin de la m uestra
la exactitud es fcil de seguir para mtodos de referencia
dentro de lmites aceptados, y que la precisin puede satis El suero, recolectado por lo general en tubos al vaco con
facer los objetivos del NCEP. El proceso de certificacin es separador de suero con intensificadores de coagulacin,
un poco tedioso y, por tanto, ms eficiente a travs de los ha sido el lquido de eleccin para medicin de lipopro
fabricantes, pero los laboratorios individuales que desean tenas en el laboratorio clnico rutinario. El plasma con
confirmar el desempeo de sus sistemas pueden completar cido etilendiaminotetractico (EDTA) era la eleccin tra
un protocolo de certificacin reducido para el colesterol. dicional en los laboratorios de investigacin de lpidos,
especialmente para separaciones de lipoprotenas, por
que el anticoagulante incrementa la estabilidad mediante
O bjetivos de desem peo analtico
la quelacin de iones metlicos. El EDTA tiene desven
Los grupos de laboratorio NCEP han establecido obje tajas potenciales que desalientan el uso rutinario. Los
tivos de desempeo analtico requeridos con base en las microcogulos, que se forman en el plasma durante el
necesidades clnicas para mediciones rutinarias (cuadro almacenamiento, taponan las sondas de muestreo de los
12-6 ).70'72 177 Para anlisis de colesterol total, el objetivo analizadores qumicos modernos. El EDTA extrae osmti
306 PARTE II CORRELACIONES CLNICAS Y PROCEDIMIENTOS ANALTICOS
camente agua de los glbulos rojos, de modo que se dilu manera, el metabolismo anormal de lipoprotenas pue
yen los constituyentes, y el efecto de dilucin puede variar de perturbar el sistema del cuerpo y causar enfermedad,
dependiendo de factores como el volumen de llenado, el como se observa en la pancreatitis y la enfermedad corona
analito que se est midiendo y el grado de mezcla. Debido ria. Algunos aspectos del desequilibrio de lipoprotenas se
a que los puntos de corte NCEP se basan en valores de determinan de manera gentica (es decir, gnero, enzima
suero, las mediciones de colesterol hechas en plasma de o defectos de receptor), mientras que otros se pueden con
EDTA requieren correccin por el factor de 1.03. trolar a travs de dieta, reduccin del consumo de tabaco,
ejercicio y el monitoreo de la presin arterial. Las medicio
RESUM EN nes precisas y exactas de lpidos y protenas son esenciales
para el diagnstico apropiado y tratamiento de dislipide-
Las lipoprotenas son partculas complejas que interac- mias. Por ltimo, las medidas de salud pblica para educar
tan con muchas otras vas metablicas del cuerpo. Su a la poblacin sobre factores de riesgo es importante en
homeostasis puede ser afectada por desequilibrios de otras la prevencin de enfermedades que se desarrollan como
vas como desequilibrios hormonales y diabetes y, de igual consecuencia de dislipidemia, como coronariopata.
P R E G U N T A S DE R E P A S O
1. Cules de los siguientes mtodos para electrofore 6. La causa ms probable para que el suero o el plasma
sis de lipoprotenas depende de la carga y el tamao tengan una apariencia lechosa es la presencia de:
molecular? a) VLDL.
a) Papel. b) LDL.
b) Gel de poliacrilamida. c) HDL.
c) Acetato de celulosa. d) Quilomicrones.
d ) Agarosa.
7. En la determinacin colorimtrica de colesterol, con
2. Cul de los siguientes enunciados relacionado con la enzima oxidasa de colesterol, el agente que oxida al
los quilomicrones es falso? compuesto orgnico incoloro 4-aminoantipirina a un
a ) Esta lipoprotena se produce en la mucosa intes complejo rosa es:
tinal. a) Colest-4-ene-3-ona.
b ) La funcin principal es llevar lpidos dietticos b ) NAD.
(exgenos) al hgado. c) Peroxidasa de hidrgeno.
c) El lpido principal que transporta esta lipoprote d) Fenol.
na es colesterol.
d) Permanece en el origen (punto de aplicacin)
8. Cul lipoprotena es el portador principal de coleste
rol ai tejido perifrico?
durante la electroforesis de lipoprotenas.
a) Quilomicrones.
3. La lipoprotena que contiene la mayor cantidad de b) VLDL.
protena se llama: c) LDL.
a) Quilomicrn. d) HDL.
b) VLDL.
9. Las concentraciones altas de apolipoprotena A-I se
c) HDL.
relacionan con el mayor riesgo de coronariopata.
d) LDL.
a) Verdadero.
4. Las lipoprotenas pre-p (VLDL) migran ms hacia el b) Falso.
nodo en gel de poliacrilamida que en acetato de celu
10-11. Un paciente es admitido al hospital con dolores
losa o agarosa.
de trax intensos. El mdico de atencin primaria
a) Verdadero.
del paciente solicita al mdico del departamento de
b) Falso.
urgencias que ordene varias pruebas, entre otras un
5. Varios mtodos enzimticos de triglicridos miden la perfil de lpidos con fraccionamiento de colesterol.
produccin o consumo de: Considerando los resultados del paciente provistos a
a) cidos grasos. continuacin, conteste las dos preguntas siguientes.
b) Glicerol.
Colesterol total = 4 0 0 mg/dl; triglicridos = 300 mg/
c) Lutidina de diacetilo.
di; colesterol HDL = 100 mg/dl; electroforesis LP, pen
d) NADH.
diente
CAPTULO 12 LPIDOS Y LIPOPROTENAS 307
10. El colesterol LDL para este paciente, considerando los 13. Cules de los siguientes resultados son los ms con
resultados anteriores, sera: sistentes con el alto riesgo de coronariopata?
) 160 mg/dl. a) 20 mg/dl de colesterol HDL y 250 mg/dl de coles
b ) 200 mg/dl. terol total.
c) 240 mg/dl. b ) 35 mg/dl de colesterol HDL y 200 mg/dl de coles
d) 300 mg/dl. terol total.
c) 50 mg/dl de colesterol HDL y 190 mg/dl de coles
11. El colesterol LDL del paciente es:
terol total.
a) ptimo.
d) 55 mg/dl de colesterol HDL y 180 mg/dl de coles
b) Deseable.
terol total.
c) Lmite.
e) 60 mg/dl de colesterol HDL y 170 mg/dl de coles
d) Alto.
terol total.
12. Como parte de una fenotipia de lipoprotenas, es
14. Cul es el presunto defecto en la mayor parte de los
necesario llevar a cabo determinaciones de colesterol
casos de hiperlipoproteinemia familiar tipo la?
total y triglicridos, as como la electroforesis de lipo
a) Deficiencia de reductasa de hidroximetilglutarilo
protenas. Los resultados de prueba obtenidos de tales
(HMG)-CoA.
estudios fueron:
b) Deficiencia de esterasa de colesterol.
Triglicrido, 340 mg/dl (intervalo de referencia,
c) Deficiencia de lipasa de lipoprotena.
< 1 5 0 mg/dl).
d ) Receptores defectuosos para LDL.
Colesterol total, 180 mg/dl (intervalo de referen
e) Enzimas de esterificacin defectuosas LCAT y
cia, <200 mg/dl).
ACAT.
Mayor fraccionamiento de lipoprotena pre-p.
Fraccionamiento normal de p-lipoprotena. 15. La hiperquilomicronemia (tipo I) en la infancia ha
Ningn quilomicrn presente. sido relacionada con qu de lo siguiente:
Suero con apariencia turbia. 1. Una deficiencia de apolipoprotena CII.
2. Una deficiencia de LCAT.
La m ejor explicacin para estos resultados sera que el
3. Una deficiencia de lipasa de lipoprotena.
paciente exhibe un fenotipo indicativo de:
4. Una deficiencia de apolipoprotena A l .
a) Hiperlipoproteinemia tipo 1.
a) 1 y 3.
b) Hiperlipoproteinemia tipo II.
b) 3 y 4.
c) Hiperlipoproteinemia tipo III.
c) 1, 3 y 4.
d) Hiperlipoproteinemia tipo IV
d) 1, 2 y 4.
e) Hiperlipoproteinemia tipo V.
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CAPTULO
Electrlitos
Joan E. Polancic
13
C O N T E N I D O D E L C A P I T U L O
AGUA Fosfato
Osmolalidad Lactato
ELECTRLITOS INTERVALO ANINICO
Sodio ELECTRLITOS Y FUNCIN RENAL
Potasio RESUMEN
Cloruro PREGUNTAS DE REPASO
Bicarbonato REFERENCIAS
Magnesio
Calcio
O B J E T I V O S
Al completar este captulo, el laboratorista clnico Correlacionar la informacin con el estado morbo
podr: so, considerando los datos del paciente.
Definir electrlito, osmolalidad, intervalo aninico. Identificar los intervalos de referencia para el
anin y catin. sodio, potasio, cloruro, bicarbonato, magnesio y
Analizar la fisiologa de cada electrlito definido calcio.
en este captulo. Establecer la muestra de eleccin para los principa
Establecer el significado clnico de cada uno de los les electrlitos.
electrlitos mencionados en el captulo. Explicar la funcin del rin en la excrecin y la
Calcular la osmolalidad, el espacio osmolal y el conservacin de electrlito en una persona
intervalo aninico, y explicar la utilidad clnica de saludable.
cada uno. Describir la utilidad de los resultados de electrli
Explicar las tcnicas analticas empleadas para eva tos en la orina: sodio, potasio, calcio y
luar concentraciones de electrlito. osmolalidad.
T R M I N O S C L A V E
314
CAPTULO 13 ELECTRLITOS 315
Los electrlitos son iones capaces de llevar una carga elc brana. Esto depende del tamao y carga del ion que es
trica. Se clasifican como aniones o cationes con base en el transportado y de la naturaleza de la membrana por la
tipo de carga que llevan. Estos nombres se determinaron que pasa. La tasa de difusin de varios iones tambin
hace aos con base en cmo el ion migra en un campo puede ser modificada por procesos fisiolgicos y hor
elctrico. Los aniones tienen una carga negativa y se mue monales.
ven hacia el nodo, mientras que los cationes migran en la Si se mantiene la concentracin de protenas y elec
direccin del ctodo debido a su carga positiva. trlitos en un ambiente controlado un poco flexible, la
Los electrlitos son un componente esencial en nume distribucin de agua en estos compartimientos tambin
rosos procesos, entre otros la regulacin volumtrica y puede ser controlada. Debido a que la mayor parte de los
osmtica (Na, Cl, K); ritmo cardaco y contractilidad (K, procesos biolgicos son permeables al agua pero no a los
Mg, Ca); cofactores en la activacin de enzimas (como Mg, iones o protenas, la concentracin de iones y protenas
Ca, Zn); regulacin de las bombas inicas (Mg) de adeno en un lado de la membrana o el otro afectar el flujo de
sina trifosfatasa (ATPasa); equilibrio acidobase (HCOa K, agua a travs de la membrana (un osmorregulador). Ade
Cl); coagulacin de sangre (Ca, Mg); excitabilidad neuro- ms de los efectos osmticos del sodio, otros iones, pro
muscular (K, Ca, Mg); y la produccin y uso de ATP a par tenas y la presin arterial afectan el flujo de agua por la
tir de glucosa (como Mg, PO ). Debido a que muchas de membrana.
estas funciones requieren concentraciones de electrlitos
para mantenerse dentro de intervalos reducidos, el cuerpo Osm olalidad
tiene sistemas complejos para moni torear y mantener con
centraciones de electrlito. La osm olalidad es una propiedad fsica de una disolucin
En este captulo se explora tanto la fisiologa metabli- que se basa en la concentracin de solutos (expresada
ca como la regulacin de cada electrlito, y se relacionan como milimoles) por kilogramo de disolvente (p/p). La
estos factores con la importancia clnica de las mediciones osmolalidad se relaciona con varios cambios en las propie
de electrlitos. Adems, se analizan las metodologas usa dades de una disolucin con respecto al agua pura, como
das para determinar las concentraciones de cada uno de depresin del punto de congelacin y disminucin de la
los analitos. presin de vapor. Estas propiedades coligativas (vase el
captulo 1, Principios bsicos y p rctica) son la base para
mediciones rutinarias de osmolalidad en el laboratorio.
AGUA
El trmino osm olaridad an se usa de manera ocasional,
El contenido de agua promedio del cuerpo humano vara con resultados expresados en miliosmoles por litro (p/v),
40 a 75% del peso corporal total, con valores que dismi pero es inexacto en casos de hiperlipidemia o hiperprotei
nuyen con la edad, y en particular con la obesidad. Las nemia; para muestras de orina; o en la presencia de cier
mujeres tienen menor contenido de agua promedio que tas sustancias osmticamente activas, como el alcohol o
los varones como resultado de un mayor contenido de gra manitol. Tanto la sensacin de sed como la secrecin de
sa. El agua es el disolvente para todos los procesos en el la hormona antidiurtica (ADH) son estimuladas por el
cuerpo humano. Transporta nutrientes a las clulas, deter hipotlamo en respuesta a mayor osmolalidad de la sangre.
mina el volumen celular por su transporte dentro y fuera La respuesta natural a la sensacin de sed es consumir ms
de las clulas, elimina productos de desecho por va de la lquidos, increm entar el contenido de agua el LEC, diluir
orina y acta como refrigerante del cuerpo por medio de las concentraciones altas de soluto (sodio) y disminuir la
la sudacin. El agua se localiza en compartimientos intra osmolalidad del plasma. La sed, por tanto, es importante
y extracelulares. El lquido intracelular (L1C) es el lquido para mediar la ingestin de lquidos. El otro medio para
dentro de las clulas y constituye cerca de dos tercios del controlar la osmolalidad es por secrecin de ADH (vaso-
agua corporal total. El lquido extracelular (LEC) equivale presina). Esta hormona es secretada por la glndula hip
al otro tercio del agua corporal total y se puede subdividir fisis y acta en las clulas de los conductos recolectores
en el lquido extracelular intravascular (plasm a) y el lquido en los riones para incrementar la reabsorcin de agua. El
celular intersticial que rodea a las clulas en el tejido. El agua se conserva, disminuye la osmolalidad y se desactiva
plasma normal tiene cerca de 93% de agua, con el volu la secrecin de ADH .1
men restante ocupado por lpidos y protenas. Las con
centraciones de iones dentro de las clulas y en el plasma Im portancia clnica de la osmolalidad
se mantienen tanto por procesos de transporte activo que La osmolalidad en el plasma es importante porque es el
consumen energa como difusin o procesos de transporte parmetro al que responde el hipotlamo. La regulacin
pasivo. de la osmolalidad tambin afecta la concentracin de
El tran sporte activo es un m ecanism o que requiere sodio en el plasma, en gran medida porque el sodio y sus
energa para mover iones por membranas celulares. Por aniones relacionados explican 90% de la actividad osm
ejem plo, para mantener una alta concentracin intra tica en el plasma. Otro proceso importante que afecta la
celular de potasio y una alta concentracin extracelu concentracin del sodio en la sangre es la regulacin del
lar (plasma) de sodio se requiere energa de ATP en las volumen de sangre. Como se explica despus, aunque la
bombas inicas dependientes de ATPasa. La difusin es osmolalidad y el volumen estn regulados por mecanis
el movim iento pasivo de iones a travs de una mem mos separados (excepto para ADH y la sed), se relacionan
316 PARTE II CORRELACIONES CLINICAS Y PROCEDIMIENTOS ANALTICOS
porque la osmolalidad se regula mediante cambios en el natremia. Aunque la hipernatremia rara vez ocurre en
equilibrio de agua, mientras que el volumen se regula una persona con un mecanismo de sed normal y acceso a
mediante cambios en el equilibrio del sodio .1 agua, es una preocupacin en infantes, pacientes incons
Para mantener una osmolalidad plasmtica normal cientes, o cualquier persona que sea incapaz de beber o
( -2 7 5 - 2 9 5 ) mosm/kg de plasma (H 20 ) , los osmorrecep- pedir agua. La estimulacin osmtica de la sed disminuye
tores en el hipotlamo responden con rapidez a cambios de manera progresiva en las personas mayores de 60 aos.
pequeos de osmolalidad. Un incremento de 1 a 2% en la En el paciente anciano con enfermedad y estado mental
osmolalidad causa un incremento de cuatro veces en la menguado, la deshidratacin es cada vez ms probable.
concentracin circulante de ADH, y una reduccin de 1 Como un ejemplo de la efectividad de la sed para evitar
a 2% en la osmolalidad termina la produccin de ADH. la deshidratacin, un paciente con diabetes inspida (sin
La ADH hace que se incremente la reabsorcin de agua ADH), puede excretar 10 L de orina por da; sin embargo,
en los tbulos de recoleccin corticales y medulares. La debido a que persiste la sed, la ingestin de agua corres
ADH tiene una semivida en la circulacin de slo 15 a 20 ponde con la excrecin, y el sodio plasmtico permanece
minutos. norm al .1
La regulacin del agua renal por ADH y la sed de
sempean funciones importantes en la regulacin de la Regulacin del volumen de sangre
osmolalidad del plasma. La excrecin de agua renal es ms El volumen de sangre adecuado es esencial para mantener
importante para evitar el dficit de agua o deshidratacin. la presin arterial y asegurar buena perfusin a los tejidos
Considere lo que sucede en varias condiciones. y rganos. La regulacin del sodio y el agua estn interre-
Carga de agua. Cuando la ingestin de agua en exceso lacionadas en el control del volumen sanguneo. El siste
(como en la polidipsia) comienza a disminuir la osmo- ma renina-angiotensina-aldosterona responde sobre todo
lalidad del plasma, se suprimen tanto ADH coma la sed. a un volumen reducido de sangre. La renina es excretada
En la ausencia de ADH, el agua no es reabsorbida, lo que cerca de los glomrulos renales en respuesta al flujo san
causa que se excrete un gran volumen de orina diluida, guneo renal reducido (volumen sanguneo o presin arte
algo as como 10 a 20 L, lo cual est muy arriba de la rial reducidos). La renina convierte al angiotensingeno
ingestin normal de agua. Por tanto, la hipoosmolalidad y en angiotensina I, que luego se convierte en angiotensina
la hiponatremia ocurren por lo general slo en pacientes II. sta causa vasoconstriccin, que incrementa con rapi
con excrecin renal deficiente de agua .1 dez la presin arterial, y la secrecin de aldosterona, que
D ficit de agua. Cuando un dficit de agua comienza incrementa la retencin de sodio y el agua que acompaa
a incrementar la osmolalidad plasmtica, se activan tanto al sodio. Los efectos del volumen sanguneo y la osmolali
la secrecin de ADH como la sed. Aunque la ADH con dad en el metabolismo del sodio y el agua se muestran en
tribuye a minimizar la prdida de agua renal, la sed es la la figura 13-1. Los cambios en el volumen sanguneo (en
defensa principal contra la hiperosmolalidad y la hiper- realidad en la presin) son detectados al inicio por una
Sed cerebro
Hiperosmolalidad
Hipernatremia
Presin de
perfusin renal Retencin de H2Q
FIGURA 13-1. Respuestas a cambios en la osmolalidad de la sangre y el volumen sanguneo. ADH, hormona anti
diurtica; ANP, pptido natriurtco atrial. Los estmulos primarios se muestran en cuadros (como hipovolemia).
CAPTULO 13 ELECTRLITOS 317
serie de receptores de estiramiento localizados en reas Los osm m etros que operan por depresin del punto de
como la circulacin cardiopulmonar, el seno carotdeo, el congelacin son estandarizados con disoluciones de refe
arco artico y las arteriolas glomerulares. Estos receptores rencia de cloruro de sodio. Despus de la calibracin, se
activan una serie de respuestas (efectores) que restable transfiere mediante una pipeta la cantidad apropiada en
cen el volumen al variar de manera adecuada la resistencia la cubeta requerida o taza de muestra y se coloca en el
vascular, el gasto cardaco y la retencin renal de sodio y analizador. Despus, se superenfra la muestra a -7 C y se
agua .1 siembra para iniciar el proceso de congelacin. Cuando
Otros cuatro factores afectan el volumen sanguneo: a ) se ha alcanzado el equilibrio de temperatura, se mide el
pptido natriurtico auricular (PNA), liberado de la aurcula punto de congelacin; los resultados para la osmolalidad
miocrdica en respuesta a expansin de volumen, promue del suero y la orina se expresan como miliosmoles por
ve la excrecin de sodio en el rin (el pptido natriur kilogramo.
tico tipo B [PNB] y el PNA actan juntos en la regulacin El clculo de la osmolalidad tiene cierta utilidad ya sea
de la presin arterial y el equilibrio de lquido); b) los como una estimacin de la osmolalidad verdadera o para
receptores de volumen independientes de la osmolalidad determinar el espacio osm olal, que es la diferencia entre la
estimulan la liberacin de ADH, que conserva agua por osmolalidad medida y la osmolalidad calculada. El espa
reabsorcin renal; c) la tasa de filtracin glomerular (TFG ) cio osmolal indica de manera indirecta la presencia de
aumenta con la expansin de volumen y disminuye con sustancias osmticamente activas distintas al sodio, urea
la reduccin de lquido, y d) con lo dems igual, la mayor o glucosa, como etanol, metanol, etilenglicol, lactato o (3-
cantidad de sodio plasmtico incrementar la excrecin de hidroxibutirato.
sodio urinario y viceversa. La reabsorcin normal de 98 a Se presentan dos frmulas, cada una con ventajas y des
99% del sodio filtrado por los tbulos conserva casi todos ventajas tericas. Ambas son adecuadas para el propsito
los 150 L de filtrado glomerular producidos diario. Una descrito antes. Para una explicacin ms amplia, se reco
reduccin de 1 a 2% en la reabsorcin tubular de sodio mienda al lector que consulte otras referencias .2
puede incrementar la prdida de agua en varios litros por
da. 2. glucosa(mg/dl)
iNci H- I-
NUS(mg/dl)
ES T U D IO D E C A S O 13-1
de ATPasa, estn presentes en las clulas. El potasio (vase Las concentraciones reducidas pueden ser causadas
P otasio) es el principal catin intracelular. Al igual que el por prdida incrementada de sodio o desequilibrio de
sodio, el potasio se difundir finalmente por la membrana agua (cuadro 13-2). La prdida increm entada de sodio en la
celular hasta que se alcance el equilibrio. La bomba inica orina puede ocurrir con produccin reducida de aldoste
de NaK ATPasa mueve tres iones sodio fuera de la clula a rona, ciertos diurticos (tiacidas), con cetonuria (prdida
cambio de dos iones potasio que se mueven hacia la clula de sodio con cetonas) o nefropata con prdida de sal (con
cuando el ATP se convierte en ADP. Debido a que el agua algunos trastornos tubulares renales). La deficiencia de
sigue a los electrlitos por las membranas celulares, la potasio tambin causa prdida de sodio debido a la rela
eliminacin continua de sodio de la clula evita la rotura cin inversa de los dos iones en los tbulos renales. Cuan
osmtica de sta al extraer tambin agua. do las concentraciones de K srico son bajas, los tbulos
conservarn K y excretarn N a cambio por la prdida
Regulacin del catin monovalente. Cada trastorno da como resulta
La concentracin de sodio plasmtico depende en gran do una mayor concentracin de sodio en la orina (>20
medida de la ingestin y excrecin de agua y, en menor mmol/da), que excede la cantidad de prdida de agua .5
grado, de la regulacin renal de Na. Tres procesos son de El vmito prologado, o diarrea, o las quemaduras gra
importancia primaria: a) la ingestin de agua en respuesta ves pueden dar como resultado prdida de sodio. Las con
a la sed, cuando se estimula o suprime mediante osmola centraciones de sodio en la orina son por lo general <20
lidad plasmtica; b ) la excrecin de agua, afectada en gran mmol/da en estos trastornos, que se pueden usar para
medida por la liberacin de ADH en respuesta a cambios diferenciar entre causas de prdida urinaria.
en el volumen sanguneo u osmolalidad, y c) el estado
del volumen sanguneo, que afecta la excrecin de sodio CUADRO 13-2. CAUSAS DE H IPERNATREM IA
a travs de la aldosterona, angiotensina II y PNA (pp-
tido natriurtico atrial). Los riones tienen la capacidad Prdida incrementada de iones
de conservar o excretar grandes cantidades de sodio, lo Hipoadrenalismo
cual depende del contenido de sodio del LEC y el volumen Deficiencia de potasio
sanguneo. Normalmente, 60 a 75% del sodio filtrado se Uso diurtico
reabsorbe en el tbulo proximal; la electroneutralidad se Cetonuria
mantiene por reabsorcin de C1 o secrecin de iones H. Un Nefropata con prdida de sal
poco de sodio se reabsorbe tambin en el asa y el tbulo Vm ito prolongado o diarrea
distal y (controlado por aldosterona) se intercambia por K Quemaduras graves
en el segmento conector y el tbulo colector cortical. La Retencin incrementada de agua
regulacin de la osmolalidad y el volumen se resumen en Insuficiencia renal
la figura 13-1. Sndrome nefrtico
Cirrosis heptica
Aplicaciones clnicas Insuficiencia cardaca congestiva
H iponatrem ia. La hiponatremia se define como una con
Desequilibrio de agua
centracin srica o plasmtica < 1 3 5 mmol/L.4 Las con
Ingestin de agua en exceso
centraciones menores de 130 mmol/L son clnicamente
SIADH
importantes. La hiponatremia se puede evaluar mediante
Seudohiponatremla
la causa de la disminucin o con el nivel de osmolalidad.
CAPTULO 13 ELECTRLITOS 319
La retencin incrementada de agua causa dilucin de ra de desplazamiento de agua con ESI indirectos, consulte
sodio srico o plasmtico como con la insuficiencia renal el captulo 4, Tcnicas analticas e instrumentacin.)
crnica. En el sndrome nefrtico y la cirrosis heptica, la La hiponatremia se puede clasificar de acuerdo con la
concentracin de protenas plasmticas es baja, lo que da osm olalidad plasm tica o srica (cuadro 13-3). Debido a
como resultado una disminucin de la presin osmtica que el Na es un contribuyente principal a la osmolalidad,
coloidal (POC) en la que el lquido intravascular migra al ambas concentraciones pueden ayudar a identificar la cau
tejido (resulta edema). El volumen plasmtico bajo causa sa de la hiponatremia. Hay tres categoras de hiponatremia:
que se produzca ADH, lo cual provoca retencin de lquido osmolalidad baja, osmolalidad normal u osmolalidad alta .4
y dilucin de Na. Este mecanismo compensatorio se obser La mayor parte de los casos de hiponatrem ia ocurren con
va tambin con la ICC como resultado de la mayor presin osm olalidad reducida. Esto puede ser resultado de prdida
venosa. Las concentraciones de sodio en la orina se pueden de Na o retencin de agua, como se mencion antes.
usar para diferenciar la causa de la mayor retencin de agua. La hiponatremia con una osmolalidad normal puede ser un
Cuando el sodio en la orina es > 2 0 mmol/da, la insuficien resultado de un incremento alto de cationes no sdicos como
cia renal crnica o aguda es la causa probable. Cuando las los listados en el cuadro 13-4. En el mieloma mltiple, las
concentraciones de orina son <20 mmol/da, la retencin y-globulinas catinicas reemplazan parte del sodio para man
de agua puede ser un resultado de sndrome nefrtico, cirro tener la electroneutralidad; sin embargo, debido a que es un
sis heptica o insuficiencia cardaca congestiva (IC C ).5 catin multivalente, tiene poco efecto en la osmolalidad.
El desequilibrio hdrco puede ocurrir como resultado de La seudohiponatremia, como se mencion antes, se pue
la ingestin excesiva de agua, como con la polidipsia (sed de observar tambin con hemolisis in vitro, considerada la
intensa). La ingestin incrementada debe ser crnica antes causa ms comn para una disminucin falsa.4 Cuando se
que ocurra el desequilibrio hdrico, que puede causar hipo- lisan los eritrocitos, se libera Na, K y agua. La concentracin
natremia leve o grave. En un individuo anormal, la inges de Na es baja en los eritrocitos, lo que da como resultado
tin en exceso no afectar las concentraciones de Na. El una disminucin falsa. La hiponatremia con una osm olalidad
sndrome de secrecin inapropiada de ADH (SIADH) causa alta se relaciona con hiperglucemia. Esta concentracin alta
un incremento en la retencin de agua debido a la mayor de soluto causa una desviacin de agua de las clulas a la
produccin de ADH. Un efecto de la regulacin de ADH ha sangre, lo que da como resultado una dilucin de sodio.
sido relacionado con enfermedad pulmonar, malignidades, Sntomas de hiponatremia. Los sntomas dependen de
trastornos del SNC, infecciones (p. ej., neumona por Pneu- la concentracin srica. Entre 125 y 130 mmol/L, los sn
mocystis carinii) o traumatismo .3 La seudohiponatremia tomas son principalmente gastrointestinales (G I). Los
puede ocurrir cuando se mide Na con ESI indirecto en un sntomas neuropsiquitricos ms graves se observan con
paciente que es hiperproteinmico o hiperlipidmico. En concentraciones menores que 125 mmol/L, incluso nu
una medicin indirecta con ESI se diluye la muestra antes sea y vmito, debilidad muscular, cefalea, letargo y ataxia.
del anlisis y como resultado del desplazamiento de agua en Los sntomas mas graves son convulsiones, coma y depre
el plasma o suero; las concentraciones inicas disminuyen sin respiratoria .5 Los electrlitos del suero y la orina se
de forma falsa. (Para informacin detallada acerca de la teo- monitorean cuando se da tratamiento para volver las con
centraciones de sodio al nivel norm al.6
Tratamiento de la hiponatremia. El tratamiento va diri
gido a la correccin de la condicin que caus la prdi
CUADRO 13-3. CLASIFICACIN DE da de agua o de sodio con exceso de prdida de agua.
HIPONATREMIA POR OSMOLALIDAD Corregir demasiado rpido la hiponatremia grave puede
causar mielinlisis cerebral; si la correccin es demasiado
Con osmolalidad baja lenta causa edema cerebral.6 El manejo apropiado de la
Prdida incrementada de sodio
Retencin incrementada de agua
Con osmolalidad normal CUADRO 13-4. CAUSAS DE HIPERNATREMIA
Cationes no sdicos incrementados
Exceso de litio Prdida excesiva de agua
y-Globulinas incrementadas: Diabetes inspida
catinicas (mieloma mltiple) Trastorno tubular renal
Diarrea prolongada
Hiperpotasemia grave
Hipermagnesemia grave Sudacin profusa
Hipercalcemia grave Quemaduras graves
Seudohiponatrem ia Ingestin reducida de agua
Hiperlipidemia Personas ancianas
Hiperproteinemia Infantes
Seudohiperpotasemia como resultado Dao mental
de hemolisis in vitro Ingestin incrementada o retencin
Con osmolalidad alta Hiperaldosteronismo
Hiperglucemia Exceso de bicarbonato de sodio
Infusin de manitol Exceso de lquido de dilisis
320 PARTE II CORRELACIONES CLINICAS Y PROCEDIMIENTOS ANALTICOS
administracin de lquidos es muy importante. Durante el CUADRO 13-5. HIPERN ATREM IA (150 MMOL/L)
tratamiento de la causa subyacente de la hiponatremia se R ELA C IO N A D A CON O SM O LA LID A D P E O RIN A
requiere administracin de lquidos y vigilancia.
Hipernatremia. La hipem atrem ia (concentracin de Osmolalidad de orina <300 mosm/kg
sodio srico incrementada) resulta de la prdida excesi Diabetes inspida (secrecin daada de ADH o los rio
va de agua en relacin con la prdida de sodio, ingestin nes no responden a ADH)
reducida de agua o ingestin o retencin incrementada de Osmolalidad de orina 300 a 700 mosm/kg
sodio. La hipernatremia es menos comn que la hipona Defecto parcial en la liberacin de ADH o
tremia en pacientes hospitalizados .3 respuesta a ADH
La prdida de lquido hipotnico puede ocurrir ya sea Diuresis osmtica
por el rin o por sudacin profusa, diarrea o quemaduras
Osmolalidad de orina >700 mosm/kg
graves.
Prdida de la sed
La hipernatremia puede resultar de prdida de agua
Prdida insensible de agua (respiracin, piel)
en la diabetes inspida, ya sea porque el rin no puede
Prdida Gl de lquido hipotnico
responder a ADH (diabetes inspida nefrognica) o est
Ingestin de sodio en exceso
daada la secrecin de ADH (diabetes inspida central).
La diabetes inspida se caracteriza por produccin copiosa
de orina diluida (3 a 20 IVda). Debido a que las personas
con diabetes inspida beben grandes volmenes de agua,
la hipernatremia por lo general no ocurre a menos que est Sntomas de hipem atrem ia. Los sntomas ms comu
daado el mecanismo de la sed. Tambin pueden ocurrir nes tienen que ver con el sistema nervioso central (SNC)
defectos parciales de liberacin de ADH o su respuesta. como resultado del estado hiperosmolar. Estos sntomas
En tales casos, la orina se concentra en menor grado que incluyen estado mental alterado, letargo, irritabilidad,
el apropiado para corregir la hipernatremia. La prdida inquietud, convulsiones, espasmo muscular repentino,
excesiva de agua tambin puede ocurrir en la enfermedad hiperrefiejos, fiebre, nusea o vmito, respiracin difcil
tubular renal, como la necrosis tubular aguda, en la que y sed intensa. El sodio srico de ms de 160 mmol/L se
los tbulos se vuelven incapaces de concentrar la orina. relaciona con una tasa de mortalidad de 60 a 75 %.3
La medicin de la osmolalidad de la orina es necesaria para Tratamiento de la hipem atrem ia. El tratamiento est diri
evaluar la causa de la hipematremia. Con la prdida renal de gido a la correccin de la condicin subyacente que caus la
agua, la osmolalidad de la orina es baja o normal. Con las disminucin de agua o la retencin de sodio. La velocidad
prdidas de lquidos extrarrenales, se incrementa la osmo de la correccin depende de la tasa con la que se desarroll
lalidad de la orina. La interpretacin de la osmolalidad de la la condicin. La hipernatremia se debe corregir de manera
orina en la hipernatremia se muestra en el cuadro 13-5. gradual porque la correccin demasiado rpida de hiper
La prdida de agua por la piel y la respiracin (prdida natremia (> 1 6 0 mmol/L) puede inducir edema cerebral y
insensible) constituye cerca de 1 L de prdida de agua por muerte, la tasa mxima debe ser 0.5 mmol/L por hora .1
da en adultos. Cualquier condicin que incrementa la pr
dida de agua, como la fiebre, quemaduras, diarrea o expo D eterm in a ci n d e s o d io
sicin al calor, incrementar la probabilidad de desarrollar Muestra. El suero, plasma y orina son aceptables para
hipematremia. Por lo general, la hipernatremia ocurre en mediciones de sodio. Cuando se usa plasma, la heparina de
las personas que pueden estar sedientas pero no pueden litio, la de amonio y el oxalato de litio son anticoagulantes
pedir u obtener agua, como los adultos con estado men adecuados. La hemolisis no causa un cambio importante
tal alterado o infantes. Cuando la orina no se puede con en los valores de suero o plasma como resultado de con
centrar por completo (p. ej., en neonatos, nios jvenes, centraciones reducidas de sodio intracelular. Sin embargo,
ancianos y ciertos pacientes con insuficiencia renal), puede con hemolisis remarcada, las concentraciones se pueden
ocurrir una osmolalidad de orina relativamente baja. reducir como resultado de un efecto de dilucin.
La hipernatremia crnica en un paciente alerta es seal Las muestras de sangre completa se pueden usar con
de enfermedad hipotalmica, por lo general con un defec algunos analizadores. Consulte el manual de operacin
to en los osmorreceptores en vez de un restablecimiento del instrumento para aceptabilidad. La muestra de elec
verdadero del osmostato. En el hiperaldosteronismo pri cin en el anlisis de sodio en la orina es una recoleccin
mario puede ocurrir un restablecimiento del ormostato, de 24 horas. El sudor tambin es adecuado para anlisis.
en el que el exceso de aldosterona induce hipervolemia La recoleccin y el anlisis de sudor se analizan en el cap
leve que retarda la liberacin de ADH, desplazamiento de tulo 27, Anlisis de los lquidos corporales.
sodio plasmtico hacia arriba en ~3 a 5 mmol/L.1 Mtodos. A travs de los aos, el sodio ha sido medi
La hipernatremia puede ser de ingestin excesiva de sal do en varias formas, incluso mtodos qumicos, espectro
o administracin de disoluciones hipertnicas de sodio, metra de emisin de flama (E E F ), espectrofotometra de
como bicarbonato de sodio o disoluciones de dilisis absorcin atmica (EAA) y electrodos selectivos de iones
hipertnicas. Los neonatos son especialmente susceptibles (ESI). Los mtodos qumicos son obsoletos debido a los
a hipernatremia por esta causa. En estos casos, la respues requisitos de volumen de muestra grandes y la falta de pre
ta a ADH es apropiada, y da como resultado osmolalidad cisin. El ESI es el mtodo ms usado en los laboratorios
de orina mayor que 8 00 mosm/kg (cuadro 13-5). clnicos.
CAPITULO 13 ELECTRLITOS 321
JL
\T"
j nJ brana de vidrio de intercambio inico en su sistema ESI
para medicin de sodio (fig. 13-2). Hay dos tipos de medi
cin ESI, con base en la preparacin de la muestra: directa
e indirecta. La medicin directa provee una muestra no
X diluida para interactuar con la membrana ESI. Con el mto
Alambre de
vinilo a do directo, se emplea una muestra diluida para medicin.
Selector No hay diferencia significativa en los resultados, excepto
cuando las muestras son hiperlipidmicas o hiperprotei-
Vidrio Electrodo de Cuerpo de nmicas. El exceso de lpidos o protenas desplazan agua
de Na+ referencia plstico plasmtica, lo cual origina una medicin reducida falsa de
interno la actividad inica en mmol/L de plasma, mientras que el
mtodo directo se mide slo en agua plasmtica. En estos
FIGURA 13-2. Diagrama de ESI de sodio con membrana capilar de
vidrio. (Cortesa de Nova Biomedical, Waltham, MA.)
casos, el ESI directo es ms exacto.
Una fuente de error con los ESI es la acumulacin de
protenas en la membrana por el uso continuo. Las mem
En el ESI se emplea una membrana semipermeable para branas recubiertas de protena causan selectividad defi
desarrollar un potencial producido al tener diferentes con ciente, lo que da como resultado mala reproducibilidad
centraciones de iones en cualquier lado de la membrana. En de resultados.
este tipo de sistema, se emplean dos electrodos. Un electro Los analizadores Vitros (Ortho-Clinical Diagnostics)
do tiene un potencial constante, de modo que es el electrodo usan un sistema ESI directo de un solo uso. Cada placa des
de referencia. La diferencia de potencial entre los electro echable contiene un electrodo de referencia y uno de medi
dos de referencia y medicin se puede usar para calcular la cin (fig. 13-3). Una gota del lquido de muestra y una del
Electrodo selectivo
de iones (se
requieren dos)
322 PARTE II CORRELACIONES CLNICAS Y PROCEDIMIENTOS ANALTICOS
CUADRO 13-6. IN TERVALO S DE REFEREN C IA requieren; el exceso se excreta por la orina pero se puede
PA RA SO D IO acumular hasta concentraciones txicas si ocurre insufi
ciencia renal.
Suero, plasma 136-145 mmol/L
La captacin de potasio del LEC hacia las clulas es
Orina (24 h) 40 a 220 mmol/da, vara con la dieta importante al normalizar un aumento agudo en la concen
LCR 136 a 150 mmol/L tracin de K plasmtico debido a una mayor captacin de
K. A medida que el K celular regresa de manera gradual
LCR Lquido cefalo rraqu deo al plasma, se elimina por excrecin urinaria. Note que la
prdida crnica de K celular puede dar como resultado
lquido de referencia se aplican al mismo tiempo en la placa, agotamiento celular antes de que haya un cambio consi
y se mide la diferencia de potencial entre los dos.7 derable en la concentracin plasmtica de K debido a que
su exceso se excreta normalmente por la orina.
In terv a lo s d e r eferen c ia Tres factores que influyen en la distribucin de potasio
Vase el cuadro 13-6. entre las clulas y el LEC son: a ) la prdida de potasio ocu
rre con frecuencia siempre que la bomba de NaK ATPasa
se inhiba por condiciones como hipoxia, hipomagnesemia
Potasio
o sobredosis de digoxina; b) la insulina promueve la entra
El potasio es el principal catin intracelular en el cuerpo, da considerable de iones K en el msculo esqueltico y el
con una concentracin 20 veces mayor dentro de las clu hgado al incrementar la actividad de NaK ATPasa, y c) las
las que afuera. Muchas funciones celulares requieren que catecolaminas, como la adrenalina (estimulador (32), pro
el cuerpo mantenga una concentracin de LEC baja de K+. mueven la entrada celular de K, mientras que el propranolol
Como resultado, slo 2% del potasio total del cuerpo cir (bloqueador (5) daa la entrada celular de K. La deficiencia
cula en el plasma. Las funciones del potasio en el cuerpo diettica o exceso rara vez es una causa primaria de hipo o
incluyen regulacin de la excitabilidad neuromuscular, hiperpotasemia. Sin embargo, con una condicin preexis
contraccin del corazn, volumen de LIC y concentracin tente, la deficiencia diettica (o exceso) puede incrementar
de ion hidrgeno .1 el grado de hipopotasemia (o hiperpotasemia).
La concentracin del ion potasio tiene un efecto impor Ejercicio. El potasio se libera de las clulas durante el
tante en la contraccin de los msculos esqueltico y ejercicio, lo cual puede incrementar el K plasmtico en 0.3
cardaco. Una concentracin alta de potasio plasmtico a 1.2 mmol/L con ejercicio leve a moderado y en hasta 2 a
disminuye el potencial de membrana en reposo (PMR) 3 mmol/L con ejercicio exhaustivo. Estos cambios normal
de la clula (el PMR es cercano a cero), que disminuye mente se invierten despus de varios minutos de reposo. El
la diferencia neta entre el potencial de reposo de la clula ejercicio con el antebrazo durante la venopuncin puede
y el potencial de umbral (accin). Una diferencia menor causar concentraciones de K plasmtico altas y errneas.8
que la normal incrementa la excitabilidad de la clula, lo Hiperosmolalidad. La hiperosmolalidad, como en
cual origina debilidad muscular. La hiperpotasemia grave la diabetes mellitus no controlada, causa que el agua se
puede, en ltima instancia, causar una falta de excitabili difunda desde las clulas, llevando iones K con el agua, lo
dad muscular (como resultado de un PMR mayor que el que origina disminucin gradual de potasio si la funcin
potencial de accin), que puede originar parlisis o arrit de rin es normal.
mia cardaca fatal.1La hipopotasemia disminuye la excita Descomposicin celular. La descomposicin celular
bilidad celular al incrementar el PMR, que con frecuencia libera K hacia el LEC. Ejemplos son traumatismo grave, sn
produce arritmia o parlisis .1 El corazn puede dejar de drome de lisis tumoral y transfusiones masivas de sangre.
contraerse en casos extremos de hiper o hipopotasemia.
La concentracin de potasio afecta tambin la concen A p lic a c io n e s cln ic a s
tracin del ion hidrgeno en la sangre. Por ejemplo, en Hipopotasemia. La hipopotasem ia es una concentracin
la hipopotasemia (baja concentracin de potasio srico), de potasio plasmtico abajo del lmite inferior del inter
cuando los iones potasio se pierden del cuerpo, los iones valo de referencia. La hipopotasemia puede ocurrir con
sodio e hidrgeno se mueven hacia la clula. La concen prdida G1 o urinaria de potasio. Las causas comunes de
tracin de ion hidrgeno es, por tanto, reducida en el LEC, hipopotasemia se muestran en el cuadro 13-7. De stas, el
lo que da como resultado alcalosis. tratamiento con diurticos tipo tiacida es la ms com n .9
La prdida GI ocurre cuando se pierde lquido GI por
R eg u la ci n vmito, diarrea, succin gstrica o descarga desde una fs
Los riones son importantes en la regulacin del equili tula intestinal. La prdida mayor de K en la heces ocurre
brio de potasio. Al inicio, los tbulos proximales reabsor tambin con ciertos tumores, malabsorcin, tratamiento
ben casi todo el potasio. Luego, baja la influencia de la del cncer (quimioterapia o terapia con radiacin) y dosis
aldosterona, el potasio adicional se secreta en la orina en grandes de laxantes.
intercambio por sodio en los tbulos distales y los con La prdida renal de potasio puede resultar de trastor
ductos colectores. As, la nefrona distal es el determinante nos renales como nefritis con prdida de potasio y acidosis
principal de la excrecin de potasio urinario. La mayor tubular renal (ATR). En la ATR, a medida que disminuye la
parte de los individuos consumen ms potasio del que excrecin tubular de H+, aumenta la excrecin de K. Debido
CAPITULO 13 ELECTRLITOS 323
C U A D R O 13-7. CAUSAS DE HIPOPOTASEMIA potasemia interesan a todos los pacientes, pero en particu
lar a quienes tienen trastornos cardiovasculares debido al
Prdida Gl
mayor riesgo de arritmia, que puede causar muerte repen
Vmito
Diarrea tina en ciertos pacientes. La hipopotasemia leve (3 .0 a 3.4
Succin gstrica mmol/L) es por lo general asintomtica.
Tumor intestinal Tratamiento de la hipopotasem ia. El tratamiento incluye
Malabsorcin por lo general el reemplazo oral de potasio con KCl por
Tratamiento del cncer: quimioterapia, radiacin varios das. En algunos casos, podra ser indicado el reem
Dosis grandes de laxantes plazo intravenoso (IV). En otros, la hipopotasemia leve
Prdida renal crnica se puede corregir con la inclusin de alimentos
Diurticos: tiacidas, mineralocorticoides con alto contenido de potasio, como frutas secas, cerea
Nefritis les de salvado, pltanos y jugo de naranja. Los electrlitos
Acidosis tubular renal (ATR) plasmticos se monitorean cuando se da tratamiento para
Hiperaldosteronismo regresar a la normalidad las concentraciones de K.
Sndrome de Cushing Hiperpotasemia. Las causas ms comunes de hiperpo-
Hipomagnesemia
tasemia se muestran en el cuadro 13-8. Los pacientes con
Leucemia aguda
hiperpotasem ia a menudo tienen un trastorno subyacente,
Desplazamiento celular como insuficiencia renal, diabetes mellitus o acidosis meta
Alcalosis blica, que contribuye a la hiperpotasemia .8 Por ejemplo,
Sobredosis de insulina durante la administracin de KCl, una persona con insufi
Ingestin reducida ciencia renal tiene mucha ms probabilidades de manifestar
hiperpotasemia que una persona con funcin renal normal.
La causa ms comn de hiperpotasemia en pacientes hos
pitalizados se debe a la administracin teraputica de K. El
a que la aldosterona promueve la retencin de Na y la pr riesgo es mayor con el reemplazo intravenoso de K .8
dida de K, el hiperaldosteronismo puede originar hipopo- En personas saludables, una carga oral aguda de pota
tasemia y alcalosis metablica .1La hipomagnesemia puede sio incrementar de manera breve el K plasmtico debido
ocasionar hipopotasemia al promover la prdida urinaria a que la mayor parte del potasio absorbido se mueve con
de potasio. La deficiencia de magnesio disminuye tambin rapidez intracelularmente. Los procesos celulares norma
la actividad de NaK ATPasa e incrementa la secrecin de les liberan poco a poco este exceso de K de nuevo hacia el
aldosterona. El tratamiento eficaz requiere complementar plasma, donde se elimina de manera normal por excrecin
con Mg y K .1 La prdida renal de K ocurre tambin con renal. El deterioro de la excrecin urinaria de K suele rela
las leucemias mielgena aguda, mielomonoctica aguda y cionarse con hiperpotasemia crnica .1
linfoctica aguda.9 Aunque la ingestin diettica reducida Si un desplazamiento de K de las clulas al plasma
de K rara vez causa hipopotasemia en personas saludables, ocurre con demasiada rapidez para ser eliminado por
la ingestin reducida puede intensificar la hipopotasemia excrecin renal, se desarrolla hiperpotasemia aguda. En
causada por el uso de diurticos, por ejemplo. la diabetes mellitus, la deficiencia de insulina promueve la
Tanto la alcalemia como la insulina incrementan la prdida celular de K. La hiperglucemia contribuye tambin
captacin celular de potasio. Debido a que la alcalemia
promueve la prdida intracelular de H+ para reducir la ele
C U A D R O 13-8. CAUSAS DE HIPERPOTASEMIA
vacin del pH intracelular, el K y el sodio entran a las clu
las para preservar la electroneutralidad. El K plasmtico Excrecin renal reducida
disminuye en alrededor de 0.4 mmol/L por cada aumento Insuficiencia renal aguda o crnica (TFG <20 ml/min)
de pH de 0.1 unidades .1 La insulina promueve la entra Hipoaldosteronismo
da de K en el msculo esqueltico y las clulas hepticas. Enfermedad de Addison
Debido a que el tratamiento con insulina puede a veces Diurticos
revelar un estado hipopotasimico subyacente, se debe Desplazamiento celular
vigilar con detenimiento el K plasmtico siempre que se Acidosis
administre insulina a pacientes susceptibles .1 Una causa Lesin muscular/celular
rara de hipopotasemia se relaciona con una muestra de Quimioterapia
Leucemia
sangre de un paciente leucmico con una cuenta significa
Hemolisis
tivamente alta de leucocitos. El K presente en la muestra
es captado por los leucocitos si se deja la muestra a tempe Ingestin reducida
ratura ambiente durante varias horas .9 Tratamiento de reemplazo de potasio oral o IV
Sntomas de hipopotasem ia. Los sntomas (como debili Artifactual
dad, fatiga y estreimiento) suelen ser evidentes cuando Hemolisis de la muestra
el potasio plasmtico disminuye por abajo de 3 mmol/L. Trombocitosis
La hipopotasemia origina debilidad muscular o parlisis, Uso prolongado de torniquete o cerrar con
fuerza el puo
que interfiere con la respiracin. Los peligros de la hipo
324 PARTE II CORRELACIONES CLNICAS Y PROCEDIMIENTOS ANALTICOS
con la produccin de plasma hiperosmolar qu jala agua y puede usar si fallan otras medidas .8 Los pacientes tratados
K de las clulas, as que se promueve la prdida adicional con estos agentes deben ser vigilados con detenimiento
de K en el plasma .1 para evitar hipopotasemia cuando el K se mueve de nuevo
En la acidosis metablica, un exceso de H+ se mueve hacia las clulas o se elimina del cuerpo.
intracelularmente para ser amortiguado, el K sale de la clu
la para mantener la electroneutralidad. El K plasmtico se R e c o le c c i n d e m u estras
incrementa en 0.2 a 1.7 mmol/L por cada reduccin de 0.1 La recoleccin y manejo apropiados de muestras para
unidad de pH .1 Debido a que con frecuencia el K celular anlisis de K es extremadamente importante porque hay
se agota en casos de acidosis con hiperpotasemia (incluso muchas causas de hiperpotasemia artefactual. Primero, el
cetoacidosis diabtica), el tratamiento con agentes como la proceso de coagulacin libera K de las plaquetas, as que
insulina y el bicarbonato puede causar un rpido movimien la concentracin srica de K puede ser 0.1 a 0.5 mmol/L
to intracelular de K, as que se produce hipopotasemia. mayor que las concentraciones plasmticas de K .2 Si se
Varios frmacos pueden causar hiperpotasemia, en eleva la cuenta de plaquetas del paciente (trom bocitosis),
particular en pacientes con insuficiencia renal o diabetes se podra elevar ms la concentracin de potasio srico.
mellitus. Estos frmacos son captopril (inhibe a la enzima Segundo, si se deja un torniquete en el brazo por mucho
convertidora de angiotensina), agentes antiinflamatorios no tiempo durante la recoleccin de sangre o si el paciente
esteroideos (inhiben a la aldosterona), espironolactona (diu cierra con fuerza sus puos de manera excesiva o ejercita
rtico ahorrador de K), digoxina (inhibe la bomba de NaK), sus antebrazos antes de la venopuncin, es posible que las
ciclosporina (inhibe la respuesta renal a aldosterona) y trata clulas liberen potasio en el plasma. La primera situacin
miento con heparina (inhibe la secrecin de aldosterona). se puede evitar si se usa un tubo heparinizado para evitar
La hiperpotasemia puede resultar cuando se libera la coagulacin de la muestra, y la segunda si se pone cui
potasio en el LEC durante la descomposicin tisular incre dado en la extraccin de la sangre. Tercero, debido a que
almacenar sangre en hielo promueve la liberacin de pota
mentada o catabolismo, en particular si hay insuficiencia
renal. La descomposicin celular incrementada puede sio de las clulas ,10 las muestras de sangre completa para
determinaciones de potasio se deben almacenar a tempe
ser causada por traumatismo, administracin de agentes
citotxicos, hemolisis masiva, sndrome de lisis tumoral ratura ambiente (nunca en hielo) y analizar de inmediato
o centrifugar para eliminar las clulas. Cuarto, si ocurre
y transfusiones de sangre. En la sangre depositada en los
hemolisis despus de extraer la sangre, la concentracin
bancos, el K se libera en forma gradual de los electrlitos
durante el almacenaje, lo cual con frecuencia causa con de potasio se podra elevar de manera falsa, la causa ms
centracin de K alta en el sobrenadante plasmtico. comn de hiperpotasemia artifactual.
Los pacientes con derivacin cardaca pueden manifestar D eterm in a ci n d e p o t a s io
aumentos leves en la concentracin de potasio plasmtico Muestra. El suero, plasma y orina pueden ser aceptables
durante el calentamiento despus de la operacin porque para anlisis. La hemolisis se debe evitar debido al alto
ste causa liberacin celular de potasio en las clulas. contenido de K de los eritrocitos. La heparina es el anti
Sntomas de hiperpotasem ia. La hiperpotasemia puede coagulante de eleccin. Mientras que el suero y el plasma
causar debilidad muscular, hormigueo, entumecimiento o dan por lo general concentraciones de potasio similares,
confusin mental si se modifica la conduccin neuromus- los intervalos de referencia del suero tienden a ser un poco
cular. La debilidad muscular no se manifiesta por lo gene ms altos. Las cuentas de plaquetas significativamente
ral hasta que el potasio plasmtico alcanza 8 mmol/L.1 altas podran dar como resultado la liberacin de pota
La hiperpotasemia perturba la conduccin cardaca, que sio durante la coagulacin a partir de la rotura de estas
puede conducir a arritmias cardacas y posible paro cardaco. clulas, que causa hiperpotasemia falsa. En este caso, se
Las concentraciones de potasio plasmtico de 6 a 7 mmol/L prefiere plasma. Las muestras de sangre completa se pue
pueden alterar el electrocardiograma, y las concentraciones den usar con algunos analizadores. Consulte el manual de
de ms de 10 mmol/L pueden causar paro cardaco fatal.1 operacin del instrumento para aceptabilidad. Las mues
Tratamiento de la hiperpotasem ia. El tratamiento se tras de orina se deben colectar en un perodo de 24 h para
debe iniciar de inmediato cuando el K srico es >6.0 a 6.5 eliminar la influencia de variacin diurna.
mmol/L o si hay cambios de EC G .8 Para contrarrestar el M todos. Como con el sodio, el mtodo actual de elec
efecto del potasio, que disminuye el potencial de reposo de cin es el ESI. Para mediciones con ESI, se emplea una
las clulas miocrdicas, se puede administrar calcio para membrana de valinomicina para enlazar K+ de manera
reducir el potencial de umbral de las clulas miocrdicas. selectiva, lo cual causa un cambio de impedancia que se
Por tanto, el calcio provee proteccin al miocardio corta puede correlacionar con la concentracin de K+. La disolu
pero inmediata contra los efectos de la hiperpotasemia. cin de electrlito interno est constituida por KC1.
Las sustancias que desplazan de manera aguda al potasio
hacia las clulas, como el bicarbonato de sodio, glucosa In terv a lo s d e r efere n c ia 3
o insulina, se pueden administrar tambin. El potasio se Vase el cuadro 13-9.
puede eliminar del cuerpo con rapidez mediante el uso
de diurticos (asa), si la funcin renal es adecuada, o ene Cloruro
mas de poliestireno sulfonato sdico (Kayexalato), que El cloruro (Cl) es el principal anin extracelular. Su fun
se une con el K secretado en el colon. La hemodilisis se cin precisa en el cuerpo no est bien entendida; sin embargo,
CAPTULO 13 ELECTRLITOS 325
FIGURA 13-4. Mecanismo de desplazamiento de cloruro. Vase el texto para los detalles. (Reimpresa con
autorizacin de Burtis, CA, Ashwood ER, eds. Tietz Texbook of Clinical Chemistry, 2a ed. Filadeifia: WB Saun
ders, 1994.)
326 PARTE II CORRELACIONES CLNICAS Y PROCEDIMIENTOS ANALTICOS
El ms utilizado es el ESI. Para medicin, se emplea una meables al bicarbonato, suele reabsorberse como C 0 2. Esto
membrana de intercambio inico para enlazar los iones C1 sucede cuando el bicarbonato, despus de la filtracin en los
de manera selectiva. tbulos, se combina con iones hidrgeno para formar cido
La titulacin amperomtrica-culombimtrica es un carbnico, que despus se disocia en H20 y C 0 2. El C 0 2 se
mtodo en el que se utiliza la generacin coulombimtrica difunde sin dificultad de nuevo hacia el LEC. Normalmen
de iones plata (Ag+), que se combinan con Cl para cuan- te, casi todos los iones bicarbonato son reabsorbidos desde
tificar la concentracin del ion Cl. los tbulos, con poca prdida en la orina. Cuando los iones
bicarbonato se filtran en exceso de iones hidrgeno dispo
Ag2+ + 2C1~ - * AgCl2 (Ec. 13-2) nibles, casi todo el exceso de H C 0 3 fluye hacia la orina.
En la alcalosis, con un incremento relativo de ion bicar
Cuando los iones Cl~ del paciente se enlazan con los
bonato en comparado con CO ,, los riones incrementan la
iones Ag+, el exceso de iones Ag+ libres se emplea para
excrecin de H C 0 3 en la orina, que lleva un catin como
indicar el punto final. Cuando se acumulan los iones Ag+, el sodio. Esta prdida de HCOy del cuerpo ayuda a corre
se desconectan el generador coulombimtrico y el tempo- gir el pH.
rizador. El tiempo transcurrido se emplea para calcular la
Entre las respuestas del cuerpo a la acidosis est una
concentracin de iones Cl en la muestra. El cloridmetro
excrecin incrementada de H+ en la orina. Adems, la
de Cotlove usa este principio en el anlisis de cloruro.
reabsorcin de H C 0 3 es casi completa, con 90% del bicar
bonato filtrado reabsorbido en el tbulo proximal y el res
In te rv a lo s d e r e feren c ia 3 to en el tbulo distal.1
Vase el cuadro 13-10.
A p lic a c io n e s cln ic a s
Los desequilibrios acidobase causan cambios en las con
Bicarbonato
centraciones de bicarbonato y CO,. Es posible que ocurra
El bicarbonato es el segundo anin ms abundante en el una disminucin de la concentracin de bicarbonato por
LEC. El C 0 2 comprende el ion bicarbonato (H C 0 3), ci la acidosis metablica cuando el bicarbonato se combina
do carbnico (H 2C 0 3) y C 0 2 disuelto, donde el bicarbo con H+ para producir C 0 2, que es exhalado por los pul
nato constituye ms de 90% del C 0 2 total a pH fisiolgico. mones. La respuesta caracterstica a la acidosis metablica
Debido a que el H C 0 3~ constituye la fraccin ms grande es la compensacin por hiperventilacin, que disminuye
del C 0 2 total, la medicin de C 0 2 total es indicativa de la P C 0 2. Las concentraciones altas de CO, ocurren en la
medicin de H C 0 3~. alcalosis metablica cuando se retiene bicarbonato, con
El bicarbonato es el componente principal del sistema frecuencia con PCO, incrementada como resultado de la
amortiguador en la sangre. La anhidrasa carbnica en los compensacin por hipoventilacin. Las causas representa
eritrocitos convierte el C 0 2y H20 en cido carbnico, que tivas de alcalosis metablica son vmito intenso, hipopo
se disocia en H+ y HCO r. tasemia e ingestin excesiva de lcali.
CA CA
C 0 2 + H20 H2C 0 3 H + h c o 3- D eterm in a ci n d e d i x id o d e c a r b o n o
Muestra. En este captulo se trata de manera especfica
(Ec. 13-3)
las determinaciones de suero o plasma venoso. Para una
CA, anhidrasa carbnica descripcin de las mediciones de P C 0 2 de sangre arterial
y completa, refirase al captulo 14, G ases en la sangre, pH
El bicarbonato se difunde fuera de la clula en intercam
y sistem as amortiguadores.
bio por cloruro para mantener la neutralidad de carga inica
El suero o el plasma con heparina de litio son adecua
dentro de la clula (desplazamiento de cloruro; vase la fig.
dos para anlisis. Aunque las muestras deben ser anaer-
13-4). Este proceso convierte al C 0 2 potencialmente txico
bicas para lograr la mayor exactitud, muchos analizadores
en el plasma a una disolucin amortiguadora efectiva: bicar
actuales (excepto los analizadores de gases sanguneos) no
bonato. El bicarbonato amortigua el exceso de ion hidrge
permiten el manejo de muestras anaerbicas. En muchos
no al combinarse con cido, y se disocia finalmente en HzO y
casos, la muestra se tapa hasta que el suero o el plasma se
CO, en los pulmones donde se elimina el CO, cido.
separan y la muestra se analiza de inmediato. Si la muestra
se deja destapada antes del anlisis, escapa el C 0 2. Las con
R e g u la ci n centraciones pueden disminuir en 6 mmol/L por hora .2
Casi todo el ion bicarbonato en los riones (85% ) es reab Las mediciones de dixido de carbono se pueden obte
sorbido por los tbulos proximales; los distales reabsorben ner de varias formas; sin embargo, la porcin real del C 0 2
un 15%. Debido a que los tbulos slo son ligeramente per- total que se mide puede variar con el mtodo empleado.
Dos mtodos comunes son el ESI y un mtodo enzimtico.
CUADRO 13-10. IN TERVALOS D E R EFER EN C IA Un tipo de ESI para medir CO, total emplea un reactivo
PARA CLO RURO cido para convertir todas las formas de C 0 2 en gas C 0 2
y se mide mediante un electrodo de PCO, (captulo 14,
Plasma, suero 98 a 107 mmol/L G ases en la sangre, p H y sistem as am ortiguadores).
Orina (24 h) 110 a 250 mmol/da, vara con la dieta El mtodo enzimtico alcaliniza la muestra para conver
tir las formas de CO, en H C 0 3. El H C 0 3 se emplea para
CAPTULO 13 ELECTRLITOS 327
carboxilar fosfoenolpiruvato (FEP) en presencia de carboxi- causar una ingestin inadecuada. Esto a su vez puede
lato de FEP, que cataliza la formacin de oxaloacetato. incrementar la probabilidad deficiencia de magnesio. El
intestino delgado puede absorber 20 a 65% del magnesio
Carboxilato de FEP diettico, lo cual depende de la necesidad y la ingestin.
Fosfoenolpiruvato + H C 0 3
La regulacin global de magnesio corporal es contro
lada en gran medida por el rin, que puede reabsorber
Oxaloacetato + H2P 0 4_ (Ec. 13-4)
magnesio en estados de deficiencia o excretar con facili
ste se acopla a la siguiente reaccin, en la que se con dad magnesio en exceso en estados de sobrecarga. Del Mg
sume NADH como resultado de la accin de la deshidro enlazado a protena que es filtrado por el glomrulo, 25
genasa de malato (MDH). a 30% es reabsorbido por el tbulo convoluto proximal
(TC P), a diferencia del Na, del cual 60 a 75% se reabsor
be en el TCP El asa de Henle es el sitio regulador renal
Oxaloacetato + NADH + H+ Malato + NAD+
principal, donde 50 a 60% del Mg filtrado se reabsorbe en
(Ec. 13-5) la extremidad ascendente. Adems, 2 a 5% se reabsorbe
en el tbulo convoluto distal.13 El umbral renal para el
La tasa de cambio en la absorbancia de NADH es pro magnesio es casi 0 .60 a 0.85 mmol/L (-1 .4 6 a 2.0 7 mg/
porcional a la concentracin de H C 0 3. di). Debido a que esto es cercano a la concentracin srica
normal, los riones excretan con rapidez el ligero exceso
In terv a lo s d e r eferen c ia 3 de magnesio en el suero. Normalmente, slo cerca de 6 %
Dixido de carbono, venoso 22 a 29 mmol/L (plasma, suero). del magnesio filtrado se excreta en la orina por da .11
La regulacin de magnesio al parecer se relaciona con
la de calcio y sodio. La hormona para tiroidea (PTH) incre
M agnesio
menta la reabsorcin renal de magnesio e incrementa la
F is io lo g a d el m a g n esio absorcin de magnesio en el intestino. Sin embargo, los
El magnesio (Mg) es el cuarto catin ms abundante en cambios en el calcio ionizado tienen un efecto mucho
el cuerpo y el segundo ion intracelular ms abundante. El mayor en la secrecin de PTH. La aldosterona y la tiroxina
cuerpo, humano promedio (70 kg) contiene 1 mol (2 4 g) al parecer tienen el efecto opuesto de PTH en el rin, as
de magnesio. Alrededor de 53% de magnesio en el cuerpo que se incrementa la excrecin renal de magnesio .12
se encuentra en los huesos, 46% en el msculo y otros
rganos y tejido suave, y menos de 1% est presente en A p lic a c io n e s cln ic a s
el suero y los eritrocitos .11 Del magnesio presente en el Hipomagnesemia. La hipom agnesem ia se observa con fre
suero, cerca de un tercio se enlaza a protena, sobre todo cuencia en pacientes hospitalizados en las unidades de
albmina. De los dos tercios restantes, 61% existe en el cuidado intensivo o en los que reciben tratamiento diu
estado libre o ionizado, y cerca de 5% est compuesto de rtico o digitlico. Es ms probable que estos pacientes
otros iones, como fosfato o citrato. Similar al calcio, es el tengan una disminucin tisular global de magnesio como
ion libre el que es fisiolgicamente activo en el cuerpo .12 resultado de enfermedad grave o prdida que origina con
La funcin del magnesio en el cuerpo es amplia. Es un centraciones sricas bajas. La hipomagnesemia es rara en
cofactor esencial de ms de 300 enzimas, incluso las que pacientes no hospitalizados .12
son importantes en la gluclisis, el transporte intracelu Hay muchas causas de hipomagnesemia; sin embargo,
lar de iones, la transmisin neuromuscular, la sntesis de se puede agrupar en categoras generales (cuadro 13-11).
carbohidratos, protenas, lpidos y cidos nucleicos, y la La ingestin reducida es la causa menos probable de defi
liberacin y respuestas a ciertas hormonas. ciencias graves en Estados Unidos. Una dieta deficiente de
La utilidad clnica de las concentraciones de magnesio magnesio como resultado de inanicin, alcoholismo cr
srico se ha incrementado en gran medida en los pasados nico o tratamiento IV con deficiencia de Mg puede causar
10 aos a medida que se ha descubierto ms informacin prdida del ion.
acerca del analito. Los hallazgos ms significativos son la Varios trastornos Gl pueden causar absorcin reduci
relacin entre las concentraciones anormales de magne da por el intestino, lo cual puede dar como resultado una
sio srico y los trastornos cardiovasculares, metablicos prdida excesiva de magnesio va heces. Los sndromes de
y neuromusculares. Aunque es posible que las concentra malabsorcin, reseccin intestinal o ciruga de derivacin;
ciones de suero no reflejen los depsitos corporales totales succin nasogstrica; pancreatitis, y vmito prolonga
de Mg, las concentraciones sricas son tiles para determi do, diarrea o uso de laxantes puede originar deficiencia
nar cambios agudos en el ion. de magnesio. Se sabe de hipomagnesemia neonatal como
resultado de varios procedimientos quirrgicos. Tambin
R e g u la ci n se tienen informes de deficiencia primaria en infantes
Las fuentes ricas en Mg en la dieta son nueces crudas, como resultado de malabsorcin selectiva del ion .12 Se ha
cereal y agua potable dura; otras fuentes son verduras, descrito una hipomagnesemia crnica con hipocalcemia
carnes, pescado y fruta .11 Los alimentos procesados, una secundaria (trastorno recesivo autosmico), los estudios
parte cada vez mayor de la dieta estadounidense prome moleculares han revelado un defecto especfico de prote
dio, tiene bajas concentraciones de magnesio que pueden na de transporte en el intestino .14
328 PARTE II CORRELACIONES CLNICAS Y PROCEDIMIENTOS ANALTICOS
cardiovasculares y neuromusculares resultan sobre todo va parenteral una disolucin de MgSO+. Antes de iniciar
del requisito de la enzima ATPasa para Mg. La prdida de el tratamiento, se debe evaluar la funcin renal para evitar
Mg origina concentraciones intracelulares de K reducidas inducir hipermagnesemia durante el tratamiento .13
debido a una bomba de NaK (ATPasa) defectuosa. Este Hipermagnesemia. La hiperm agn esan ia se observa con
cambio en el PMR celular causa mayor excitabilidad que menos frecuencia que la hipomagnesemia .12 Las causas de
puede dar lugar a arritmias cardacas. Esta condicin tam concentraciones sricas altas de magnesio se resumen en
bin puede ocasionar toxicidad por digitlicos. el cuadro 13-13; la ms comn es la insuficiencia renal
La contraccin muscular tambin requiere magnesio y (TFG <30 ml/min). Las concentraciones ms altas son por
ATPasa para captacin normal de calcio despus de la con lo general resultado de los efectos combinados de funcin
traccin. La estimulacin celular normal del nervio y el renal reducida e ingestin incrementada de medicaciones
msculo requiere magnesio para ayudar con la regulacin que contienen magnesio comnmente prescritas, como
de acetilcolina, un neurotransmisor potente. La hipomag anticidos, enemas o catrticos. Los pacientes de asilos de
nesemia puede causar diversos sntomas desde debilidad ancianos tienen alto riesgo de que esto ocurra .12
hasta temblores, tetania, parlisis o coma. El SNC tambin
puede ser afectado, lo que dara como resultado trastornos CUADRO 13-13. CAUSAS DE
psiquitricos que van desde cambios sutiles hasta depre HIPERMAGNESEM IA ________________
sin o psicosis.
Los trastornos metablicos se relacionan con hipomag Excrecin reducida
nesemia. Los estudios han indicado que alrededor de 40% Insuficiencia renal aguda o crnica
de los pacientes hospitalizados con hipopotasemia son Hipotiroidismo
hipomagnesmicos .13 Adems, 20 a 30% de los pacien Hipoaldosteronismo
tes con hiponatremia, hipocalcemia o hipofosfatemia son Hipopituitarismo (|G H )
tambin hipomagnesmicos .13 La deficiencia de Mg puede Ingestin reducida
daar la liberacin de PTH y la respuesta tisular objeti Anticidos
vo, que da como resultado hipocalcemia. Por lo general, Enemas
reabastecer cualquiera de estos iones no remedia el tras Catrticos
torno a menos que se provea tratamiento con magnesio. Teraputica: eclampsia, arritmia cardaca
El tratamiento con Mg puede restaurar ambas concentra
Diversas
ciones de iones al nivel normal; durante el tratamiento se
Deshidratacin
debe vigilar las concentraciones de los iones.
Carcinoma seo
Tratamiento de la hipom agnesem ia. La forma preferida
Metstasis sea
de tratamiento es por ingestin oral con lactato de Mg,
xido de Mg o cloruro de Mg o con un anticido que con Adaptada de Polancic JE. Magnesium: metabolism, clinical importance
tenga Mg. En pacientes muy enfermos, se administra por and analysis. Clin Lab Sci 1991 ;4(2).
La hipermagnesemia ha sido relacionada con varios Las concentraciones elevadas de Mg pueden inhibir la
trastornos endocrinos. La tiroxina y la hormona del cre liberacin de PTH y la respuesta tisular objetivo. Esto pue
cimiento causan una reduccin en la reabsorcin tubular de conducir a hipocalcemia e hipercaluria .12 La homeosta-
de Mg, y una deficiencia de cualquier hormona puede cau sis normal es un proceso dependiente del calcio que puede
sar una elevacin moderada de Mg srico. La insuficiencia ser inhibido como resultado de competencia entre las con
suprarrenal puede causar un aumento leve como resultado centraciones incrementadas de iones magnesio y calcio.
de la excrecin renal reducida de Mg .12 La generacin de trombina y la adhesin de plaquetas son
El MgSO+ se puede usar en forma teraputica con la dos procesos en los que puede haber interferencia .12
preeclampsia, arritmia cardaca o infarto de miocardio. El Tratamiento de hipermagnesemia. El tratamiento de exceso
Mg es un vasodilatador, y puede disminuir la hiperactivi- de Mg relacionado con la ingestin incrementada es des
dad uterina en estados eclmpsicos e incrementar el flu continuar la fuente de Mg. La hipermagnesemia asintom-
jo sanguneo uterino. Este tratamiento puede dar lugar a tica grave requiere tratamiento de apoyo inmediato para
hipermagnesemia materna, as como la hipermagnesemia anormalidades cardacas, neuromusculares, respiratorias
neonatal debida al rin inmaduro del recin nacido. Los o neurolgicas. Los pacientes con funcin renal normal
infantes prematuros tienen mayor riesgo de desarrollar pueden ser tratados con un diurtico y lquido IV
sntomas reales .12 En los estudios se ha mostrado que la
terapia IV con Mg en pacientes con infarto de miocardio D eterm in a ci n d e m a g n esio
puede reducir la mortalidad temprana .11 Muestra. El suero no hemolizado o plasma con heparina
La deshidratacin puede causar seudohipermagnese- de litio puede ser analizado. Debido a que la concentra
mia, que se puede corregir con rehidratacin. Debido a la cin de Mg2+ dentro de los eritrocitos es 10 veces mayor
prdida sea incrementada, los aumentos leves de magne que en el LEC, se debe evitar la hemolisis, y el suero se
sio srico ocurren en individuos con mieloma mltiple o debe separar de las clulas tan pronto como sea posible.
metstasis sea. Los anticoagulantes oxalato, citrato y cido etilendiamino-
Sntomas de hiperm agnesem ia. Por lo general, los snto tetractico (EDTA) son inaceptables porque se unirn con
mas de hipermagnesemia slo ocurren hasta que la con magnesio. Una orina de 24 horas se prefiere para anlisis
centracin srica excede 1.5 mmol/L.12 Los sntomas ms debido a una variacin diurna en la excrecin. La orina se
frecuentes tienen que ver con anormalidades cardiovascu debe acidificar con HC1 para evitar precipitacin.
lares, dermatolgicas, Gl, neurolgicas, neuromusculares, Mtodos. Los tres mtodos ms comunes para medir
metablicas y hemostticas (cuadro 13-4). Los sntomas Mg srico total son colorimtricos: calmagita, colorante de
leves a moderados, como hipotensin, bradicardia, enro formazn y azul de metiltimol. En el mtodo de calmagita,
jecim iento de la piel, mayor temperatura cutnea, nusea, el Mg se une con calmagita para formar un complejo vio
vmito y letargo pueden ocurrir cuando las concentracio leta rojizo que se puede leer a 532 nm. En el mtodo de
nes sricas son 1.5 a 2.5 mmol/L.12 Los sntomas crticos, colorante de formazn, el Mg se enlaza con el colorante
como cambios de electrocardiograma, bloqueo cardaco, para formar un complejo coloreado que se puede leer a
asistolia, sedacin, coma, depresin o paro respiratorio y 660 nm. En el mtodo de azul de timol, el Mg se une con
parlisis, pueden ocurrir cuando las concentraciones sri el cromgeno para formar un complejo coloreado. En la
cas alcanzan 5.0 mmol/L12 mayor parte de los mtodos se emplea un resguardo de cal
cio para prohibir la interferencia de este catin divalente.
El mtodo de referencia para medir magnesio es la EAA.
CUADRO 13-14. SNTOMAS DE Aunque la medicin de concentraciones de magnesio
HIPERM AGNESEM IA total en el suero an es la prueba diagnstica usual para
deteccin de anormalidades de magnesio, tiene sus limita
Cardiovascular Neuromuscular
ciones. Primero, debido a que alrededor de 25% de magne
Hipotensin Reflejos disminuidos
sio est enlazado a protena, es posible que el magnesio no
Bradicardia Disartria
refleje el magnesio libre fisiolgicamente activo. Segundo,
Bloqueo cardaco Depresin respiratoria
debido a que el magnesio es sobre todo un ion intracelular,
Parlisis
las concentraciones de suero no necesariamente reflejarn
Dermatolgico Metablico el estado del magnesio intracelular. Aun cuando el magne
Enrojecimiento Hipocalcemia sio tisular y celular se reduzca en 20%, las concentracio
Piel caliente nes de magnesio pueden permanecer normales.
Gl Hemosttico
Nusea Generacin reducida de trombina Lmites de referencia3
Vmito Adhesin reducida de plaquetas Vase el cuadro 13-5.
Neurolgica
Letargo
CUADRO 13-15. INTERVALO DE REFERENCIA
Coma
PARA M A G N ESIO _______________ ______________________
Adaptada de Polancic JE. Magnesium: metabolism, clinical importance
and analysis. Clin Lab Sci 1991 ;4(2). Suero, plasma 0.63 a 1.0 mmol/L(1.2 a 2.1 meq/L)
CAPTULO 13 ELECTRLITOS 331
Un residente de una casa para ancianos de 84 aos de CUADRO 13-3.1 DE ESTUDIO DE CASO.
edad es visto en el departamento de urgencias con los RESULTADOS DE LABORATORIO
siguientes sntomas: nusea, vmito, respiracin redu
INTERVALO DE
cida, hipotensin y baja frecuencia de pulso (46 ). En
RESULTADO REFERENCIA
el examen fsico se encontr que la piel estaba calien
te al tacto y enrojecida. Los datos de laboratorio en la Suero Protena total 5.6 g/dl 6.0-8.0 g/dl
admisin se muestran en el cuadro 13-3.1 de estudio Albm ina 3.0 g/dl 3.5-5.0 g/dl
de caso.
Calcio total 8.2 g/dl 8.6-10.0 g/dl
2. Cul es la causa probable para la hipermagnese- Plasma Na+ 129 mmol/L 136-145 mmol/L
mia? K+ 5.3 mmol/L 3.4-5.0 mmol/L
3. Cul sera la causa para la hipocalcemia? c i- 96 mmol/L
h c o 3- 16 mmol/L
Glndulas paratlroideas
Hipercalcemia Hipocalcemia
PTH
/ \ 25-OH vit D
circulante (inactiva)
Hueso Rin
FIGURA 13-5. Respuesta hormonal a hipercalcemia e hipocalcemia. PTH, hormona paratiroidea; 25-OH vit D,
25-hldroxi vitamina D; 1,25(OH)2 vit D, dlhidroxi vitamina D.
todo albmina y 15% est unido a aniones, como bicarbo mediciones de calcio total e ionizado estn disponibles en
nato, citrato, fosfato y lactato. De manera clara, esta dis muchos laboratorios, el calcio ionizado suele ser un marca
tribucin puede cambiar en la enfermedad. Es notable que dor ms sensible y especfico para trastornos de calcio.
la concentracin de citrato, bicarbonato, lactato, fosfato Hipocalcemia. Cuando no est presente la PTH, como
y albmina pueda cambiar de forma drstica durante la en el hipoparatiroidism o prim ario, las concentraciones de
intervencin quirrgica o atencin crtica. sta es la razn calcio srico no estn reguladas de manera apropiada. El
de que el calcio ionizado no se pueda calcular de un modo hueso tiende a depender de su reserva, y el rin incre
fiable a partir de mediciones de calcio total, en particular menta la excrecin de calcio. Debido a que tambin se
en individuos con enfermedad aguda. requiere PTH para el metabolismo normal de la vitamina
D, la falta de efectos de vitamina D tambin conduce a
A p lic a c io n e s cln ic a s una concentracin baja de calcio. La aplasia de la gln
En los cuadros 13-16 y 13-17 se resumen las causas de tras dula paratiroides, destruccin o eliminacin son razones
tornos hipocalcmicos e hipercalcmicos. Aunque ambas obvias para hipoparatiroidismo primario.
Debido a que la hipomagnesemia se ha vuelto frecuente
en pacientes hospitalizados, la hipomagnesemia ha sido
reconocida como una causa frecuente de hipocalcem ia.
CUADRO 13-16. CAUSAS DE HIPOCALCEMIA
La hipomagnesemia puede causar hipocalcemia por tres
Hlpoparatiroldismo primario: aplasia glandular,
destruccin o eliminacin
CUADRO 13-17. CAUSAS DE HIPERCALCEMIA
Hipomagnesemia
Hipermagnesemia Hiperparatiroidismo primario: adenom a o
hiperplasia glandular
Hipoalbuminemia (slo calcio tota!, ionizado no
afectado por): hepatopata crnica, sndrome Hipertiroidismo
nefrtico, desnutricin Hipocalciuria fam iliar benigna
Pancreatitis aguda Malignidad
Deficiencia de vitamina D Mieloma mltiple
Enfermedad renal Vitamina D incrementada
Rabdomilisis Diurticos de tiacida
Seudohipoparatiroidismo Inmovilizacin prolongada
CAPTULO 13 ELECTRLITOS 333
mecanismos: a) inhibe la secrecin glandular de PTH a de calcio total y calcio ionizado se pueden observar duran
travs de la membrana de la glndula paratiroides, b ) daa te operaciones quirrgicas importantes. En consecuencia,
la accin de la PTH en su sitio receptor en el hueso y c) las mediciones de calcio ionizado son las de mayor valor
causa resistencia de vitamina D .11 Las concentraciones clnico.
altas de Mg pueden inhibir la liberacin de PTH y la res La hipocalcemia suele ocurrir en pacientes con enfer
puesta tisular blanco, que quiz conduce a hipocalcemia medad crtica, es decir, aqullos con sepsis, quemaduras
e hipercalciuria .12 trmicas, insuficiencia renal o insuficiencia cardiopulmo-
Cuando el calcio total es el nico resultado reportado, nar. Estos pacientes con frecuencia tienen anormalidades
la hipocalcemia puede aparecer con hipoalbuminemia. de regulacin acidobase y prdidas de protena y albmi
Las causas comunes se relacionan con hepatopata cr na, que son ms adecuadas para vigilar el estado del calcio
nica, sndrome nefrtico y desnutricin. En general, por mediante mediciones de calcio ionizado. La normaliza
cada disminucin de 1 g/dl en la albmina srica, hay una cin de calcio ionizado puede tener efectos benficos en el
reduccin de 0.2 mmol/L (0.8 mg/dl) en las concentracio gasto cardaco y la presin arterial.
nes de calcio total .18 Monitoreo neonatal. Por lo regular, las concentraciones de
Cerca de la mitad de los pacientes con pancreatitis agu calcio ionizado sanguneo en neonatos son altas en el naci
da manifiestan hipocalcemia. La causa ms consistente al miento y luego disminuyen con rapidez en 10 a 20% despus
parecer es resultado del mayor enlace intestinal de calcio de uno a tres das. Despus de alrededor de una semana, las
cuando se incrementa la actividad de la lipasa intestinal .18 concentraciones de calcio ionizado en el neonato se estabili
La deficiencia de vitamina D y la malabsorcin pueden zan a niveles un poco mayores que en los adultos.19
causar absorcin reducida, que conduce a menor produc La concentracin de calcio ionizado puede disminuir
cin de PTH o hiperparatiroidismo secundario. rpido en el perodo neonatal temprano porque el infante
Los pacientes con enfermedad renal causada por insu podra perder calcio con rapidez y no absorberlo con faci
ficiencia glomerular con frecuencia tienen concentracio lidad. Han sido sugeridas varias causas posibles; metabo
nes alteradas de calcio, fosfato, albmina, magnesio e ion lismo anormal de PTH y vitamina D, hipercolesterolemia,
hidrgeno (pH). En la enfermedad renal crnica, el hiper hiperfosfatemia e hipomagnesemia.
paratiroidismo secundario se manifiesta cuando el cuerpo Sntomas de hipocalcem ia. La irritabilidad neuromuscu-
trata de compensar la hipocalcemia causada por hiperfos- lar y las irregularidades cardacas son los grupos princi
fatemia (el fosfato se enlaza y disminuye el calcio ionizado) pales de sntomas que ocurren con la hipocalcemia. Los
o metabolismo alterado de vitamina D. Moni torear y con sntomas neuromusculares son parestesia, calambres mus
trolar las concentraciones de calcio ionizado puede evitar culares, tetania y convulsiones. Los sntomas cardacos
problemas debidos a hipocalcemia, como osteodistrofia, pueden incluir arritmia o bloqueo cardaco. Los sntomas
gasto cardiaco inestable o tensin sangunea, o proble por lo general ocurren con hipocalcemia grave, en la que
mas que surgen de hipercalcemia, como clculos renales y las concentraciones de calcio total son menores que 1.88
otras calcificaciones. La rabdomilisis, como con la lesin mmol/L (7.5 mg/dL).18
por aplastamiento y el dao muscular, puede causar hipo Tratamiento de la hipocalcem ia. Puede haber tratamien
calcemia como resultado de la liberacin incrementada de to oral o parenteral con calcio, lo cual depende de la grave
fosfato de las clulas, que se une con iones calcio .18 dad de la disminucin y la causa. La vitamina D se puede
El seudohipoparatiroidismo es un raro trastorno hereditario administrar a veces adems del calcio oral para increm en
en el que la respuesta tisular blanco a PTH se reduce (resis tar la absorcin. Si la hipomagnesemia es un trastorno
tencia de rgano terminal). La produccin de PTH responde concurrente, se debe proveer tambin tratamiento con
normalmente a prdida de calcio; sin embargo, sin respuesta magnesio.
normal (produccin reducida de cAMP [adenosina 3':5'-fos- Hipercalcem ia. El hiperparatiroidismo primario es la
fato cclico]), el calcio se pierde en la orina o permanece causa principal de hipercalcem ia.18 El hiperparatiroidismo,
en la reserva sea. Los pacientes suelen tener caractersticas o excrecin de PTH en exceso, puede mostrar signos cl
fsicas comunes, como estatura baja, obesidad, metacarpia- nicos obvios o puede ser asintomtico. La poblacin de
nos y metatarsianos cortos y calcificacin anormal. pacientes que con ms frecuencia manifiestan hiperparati
Intervencin quirrgica y cuidado intensivo. Debido a que roidismo son las mujeres ancianas .18Aunque en casos gra
las concentraciones apropiadas de calcio promueven buen ves las mediciones de calcio ionizado y total son altas, el
gasto cardaco y mantienen la presin arterial adecuada, calcio ionizado se eleva con ms frecuencia en hiperpara
el mantenimiento de una concentracin normal de calcio tiroidismo sutil o asintomtico. En general, las mediciones
ionizado en la sangre es benfico para los pacientes ya sea de calcio ionizado se elevan en 90 a 95% de los casos de
en intervencin quirrgica o cuidado intensivo. El con hiperparatiroidismo, mientras que el calcio total se eleva
trol de las concentraciones de calcio puede ser crtico en en 80 a 85% de los casos.
la ciruga a corazn abierto cuando se reactiva el corazn La segunda causa principal de hipercalcemia se rela
o durante el trasplante de hgado porque se administran ciona con varios tipos de malignidad, con hipercalcemia
grandes volmenes de sangre citratada. a veces como el marcador bioqumico para enfermedad .18
Debido a que estos pacientes pueden recibir grandes Muchos tumores producen pptido relacionado con PTH
cantidades de citrato, bicarbonato, sales de calcio o lqui (PTH-rP), que se une a receptores de PTH normales y
dos, las mayores discrepancias entre las concentraciones causa incrementos en la concentracin de calcio. Existen
334 PARTE II CORRELACIONES CLNICAS Y PROCEDIMIENTOS ANALTICOS
ensayos para medir PTH-rP porque esta protena anor forma parcial con el calcio y reducen las concentraciones
mal no se detecta mediante la mayor parte de ensayos de de calcio ionizado. Una concentracin de heparina de 25
PTH. Ul/ml, por ejemplo, reduce el calcio ionizado en casi 3%.
Debido a la proximidad de la glndula paratiroides a la Existen productos de heparina seca titulados con cantida
glndula tiroides, el hipertiroidismo puede causar a veces des pequeas de iones Ca o Zn o con pequeas cantidades
hiperparatiroidismo. Se sabe de hipocalciuria familiar benig de heparina dispersa en un cojincillo inerte que en esen
na. Los diurticos de tiacida incrementan la reabsorcin de cia elimina la interferencia por heparina.
calcio, que conduce a hipercalcemia. La inmovilizacin pro Para anlisis de calcio en la orina, se prefiere una reco
longada puede causar mayor resorcin sea. La hipercalcemia leccin de orina programada. La orina se debe acidificar
relacionada con inmovilizacin se combina con insuficiencia con HC1 a 6 mol/L, con alrededor de 1 mi del cido aadi
renal. do por cada 100 mi de orina.
Sntomas de hipercalcem ia. Con frecuencia una hipercal Mtodos. En los dos mtodos comunes para anlisis de
cemia leve (2.62 a 3.00 mmol/L [10.5 a 12 mg/dl]) es asin- calcio total se emplea complexona de orto-cresolftalena
tom tica .18Las elevaciones de calcio de moderadas a graves (CC F) o colorante arsenzo III para formar un complejo
incluyen sntomas neurolgicos, G l y renales. Los snto con calcio. Antes de la reaccin de enlace a colorante, se
mas neurolgicos pueden incluir somnolencia o debilidad libera calcio de su portador de protena y se acompleja
leve, depresin, nusea, vmito, anorexia y enfermedad por acidificacin de la muestra. En el mtodo de CCF se
de lcera pptica. La hipercalcemia puede causar sntomas emplea 8-hidroxiquinolina para evitar la interferencia del
renales de nefrolitiasis y nefrocalcinosis. La hipercalciuria magnesio. La EAA es el mtodo de referencia para calcio
puede dar como resultado diabetes nefrognica inspida, total, aunque rara vez se usa en el entorno clnico.
que causa poliuria que produce hipovolemia, que se agra Los analizadores comerciales actuales que miden calcio
va a hipercalcemia .18 La hipercalcemia puede causar snto ionizado o libre emplean ESI para esta medicin. Estos
mas de toxicidad por digitlicos. sistemas pueden usar membranas impregnadas con mol
Tratamiento de la hipercalcem ia. El tratamiento de la culas especiales que de manera selectiva, pero irreversible,
hipercalcemia depende del nivel de hipercalcemia y la cau se unen con iones calcio. Cuando los iones calcio se unen
sa. Con frecuencia las personas con hiperparatiroidismo con estas membranas, se desarrolla un potencial elctrico
primario son asintomticas. La deficiencia de estrgeno a travs de la membrana que es proporcional a la concen
en mujeres ha sido relacionada con hiperparatiroidismo tracin de calcio ionizado. En la figura 13-6 se muestra un
primario en mujeres ancianas .18 En muchos casos, la tera diagrama de esta clase de electrodo.
pia de sustitucin de estrgeno reduce las concentracio
nes de calcio. La paratiroidectoma puede ser necesaria In terv a lo s d e r e fe ren c ia 3
en algunos pacientes hiperparatirodicos. Los pacientes Para el calcio total, el intervalo de referencia vara un poco
con hipercalcemia moderada a grave reciben tratamiento con la edad. En general, las concentraciones de calcio son
para reducir las concentraciones de calcio. Se estimulan mayores en la adolescencia cuando el crecimiento seo es
la ingestin de sal y agua para incrementar la excrecin ms activo. Las concentraciones de calcio ionizado pue
de calcio y evitar la deshidratacin, que puede complicar den cambiar con rapidez del da 1 al 3 de vida. Despus de
la hipercalcemia. Se deben descontinuar los diurticos de esto, se estabilizan a concentraciones relativamente altas,
tiacida. Los bisfosfanatos (un derivado del pirofosfato) con una disminucin gradual en la adolescencia; vase el
son la clase principal de frmacos para reducir las concen cuadro 13-18.
traciones de calcio, que se logra por su accin de enlace
con el hueso, lo cual evita la resorcin sea .18
Fosfato
D ete rm in a c i n d e c a lc io F is io lo g a d el fo s fa t o
Muestra. La muestra preferida para las determinaciones Encontrados en todas partes de las clulas vivientes, los
de calcio total es el suero o el plasma con heparina de litio compuestos de fosfato participan en muchos de los pro
colectados sin estasis venosa. Debido a que los anticoagu cesos bioqumicos ms importantes. Los materiales cido
lantes como el EDTA u oxalato se unen fuertemente con desoxirribonucleico (DNA) y cido ribonucleico (RNA)
el calcio e interfieren con la medicin, su uso es inacep son fosfodisteres complejos. La mayor parte de las coen
table. zimas son steres de cido fosfrico o pirofosfrico. Los
La recoleccin apropiada de muestras para mediciones depsitos ms importantes de energa bioqumica son ATP,
de calcio ionizado requiere mucha atencin. Puesto que la fosfato de creatina y fosfoenolpiruvato. La deficiencia de
prdida de C 0 2 incrementar el pH, las muestras se deben fosfato puede conducir a agotamiento de ATP, que en lti
recolectar en forma anaerobia. Aunque la sangre comple ma instancia es responsable de muchos de los sntomas
ta heparinizada es la muestra preferida, se puede usar el clnicos observados en la hipofosfatemia.
suero de tubos de recoleccin de sangre evacuados y sella Las alteraciones en la concentracin de 2,3-bisfosfogli-
dos si se hacen con rapidez la coagulacin y la centrifu cerato (2,3-BPG ) en los eritrocitos afectan la afinidad de
gacin (<30 min) y a temperatura ambiente. No se deben la hemoglobina hacia el oxgeno, con un incremento que
usar productos de heparina lquidos. La mayor parte de facilita la liberacin de oxgeno en el tejido y una dismi
los anticoagulantes de heparina (sodio, litio) se unen de nucin que hace menos disponible el enlace de oxgeno a
CAPTULO 13 ELECTRLITOS 335
Junta circular
Punta del electrodo
Punta de electrodo Alambre
Electrodo de plata interno Hp nieta
recubierto con AgCl
Junta circular
Membrana de celofn
Membrana
sensible a Ca
Electrlito S43916 Material aislante
Tallo del electrodo
FIGURA 13-6. Diagrama del electrodo de calcio ionizado para el analizador de calcio ionizado, ACI. (Cortesa
de Radiometer America, Westlake, OH.)
hemoglobina. Al afectar la formacin de 2,3-BPG, la con viduos saludables, todos estos procesos son relativamente
centracin de fosfato inorgnico afecta de modo indirecto constantes y fcilmente regulados por la excrecin o reab
la liberacin de oxgeno de la hemoglobina. sorcin renal de fosfato.
Entender la causa de una concentracin de fosfato La modificacin de cualquiera de estos procesos pue
alterada en la sangre suele ser difcil porque los cambios de alterar las concentraciones de fosfato en la sangre; sin
transcelulares de fosfato son una causa importante de hipo- embargo, la prdida de regulacin por los riones tendr el
fosfatemia en la sangre. Es decir, un desplazamiento incre efecto ms profundo. Aunque otros factores, como vitamina
mentado de fosfato hacia las clulas puede agotar el fosfato D, calcitonina, hormona del crecimiento y estado acidobase,
en la sangre. Una vez que la clula capta el fosfato, perma pueden afectar la regulacin renal de fosfato, el factor ms
nece ah para ser empleado en la sntesis de compuestos importante es la PTH, que en general disminuye las concen
fosforilados. Cuando se metabolizan estos compuestos de traciones de sangre al incrementar la excrecin renal.
fosfato, el fosfato inorgnico sale de la clula en forma lenta La vitamina D acta para increm entar el fosfato en la
hacia la sangre, donde el rin es el regulador principal. sangre. La vitamina D incrementa la absorcin de fosfato
en el intestino y la reabsorcin de fosfato en el rin.
R eg u la ci n La hormona del crecimiento, que ayuda a regular el
El fosfato en la sangre puede ser absorbido en el intestino desarrollo del esqueleto, puede afectar las concentracio
a partir de fuentes dietticas, ser liberado de las clulas nes circulantes de fosfato. En casos de secrecin excesiva
hacia la sangre y el hueso puede perder fosfato. En indi- o administracin de hormona del crecimiento, las concen
traciones de fosfato en la sangre podran aumentar como
resultado de la excrecin renal de fosfato.
pulmonar obstructiva crnica (EPO C), asma, malignidad, CUADRO 13-19. INTERVALOS DE REFERENCIA
tratamiento a largo plazo con nutricin parenteral total PARA FOSFATO
(NPT), enfermedad inflamatoria intestinal, anorexia ner
SUERO , PLASM A
viosa y alcoholismo. La incidencia se incrementa a 60 a
80% en pacientes de la UCI con sepsis. Adems, la hipo- Neonato 1.45 a 2.91 mmol/L (4.5 a 9.0 mg/dl)
fosfatemia tambin puede ser causada por mayor excrecin
Nio 1.45 a 1.78 mmol/L (4.5 a 5.5 mg/d!)
renal, como con el hiperparatiroidismo, y la reabsorcin
intestinal reducida, como la deficiencia de vitamina D o el Adulto 0.87 a 1.45 mmol/L (2.7 a 4.5 mg/dl)
uso de anticido .20 Orina (24 horas) 13 a 42 mmol/da (0.4 a 1.3 mg/da)
Aunque la mayor parte de los casos son moderados y
pocas veces causan problemas, la hipofosfatemia grave ( <
1.0 g/dl o 0.3 mmol/L) requiere monitoreo y posible tera
se reduce de manera drstica el aporte de oxgeno. El piru
pia de reemplazo. Hay una tasa de mortalidad de 30% en
vato es el producto terminal normal del metabolismo de
quienes padecen hipofosfatemia grave contra una tasa de
la glucosa (gluclisis). La conversin de piruvato a lactato
15% en quienes tienen hipofosfatemia normal o leve .20
se activa cuando una deficiencia de oxigeno da lugar a una
Hiperfosfatemia. Los pacientes con mayor riesgo de
acumulacin excesiva de NADH (fig. 13-7). Normalmen
hiperfosfatem ia son quienes manifiestan insuficiencia renal
te, el oxgeno suficiente mantiene una relacin alta favora
crnica o aguda.20 Una ingestin mayor de fosfato o libera
ble de NAD a NADH. En estas condiciones, el piruvato se
cin cada vez mayor de fosfato celular tambin puede cau
convierte en acetil-coenzima A (CoA), que entra al ciclo
sar hiperfosfatemia. Debido a que es posible que an no
del cido ctrico y produce 38 moles de ATP por cada mol
hayan desarrollado metabolismo maduro de PTH y vitami
de glucosa oxidada. Sin embargo, en condiciones hipxi-
na D, los neonatos son en especial susceptibles a hiperfosfa
cas, la formacin de acetil-CoA no ocurre y se acumula
temia causada por ingestin incrementada, como por leche
NADH, que favorece la conversin de piruvato a lactato
de vaca o laxantes. La descomposicin cada vez mayor de
por metabolismo anaerobio. Como resultado, slo se pro
clulas puede a veces ocasionar hiperfosfatemia, como con
ducen dos moles de ATP por cada mol de glucosa meta-
infecciones graves, ejercicio intenso, trastornos neoplsi-
bolizada a lactato, con el exceso de lactato liberado en la
cos o hemolisis intravascular. Debido a que los linfoblas-
sangre. Esta liberacin de lactato en la sangre tiene impor
tos inmaduros tienen cerca de cuatro veces el contenido de
tancia clnica porque la acumulacin de exceso de lactato
fosfato de linfocitos maduros, los pacientes con leucemia
en la sangre es un indicador inicial sensible y cuantitativo
linfoblstica son en especial susceptibles a hiperfosfatemia.
de la gravedad de falta de oxgeno (fig. 13-8).
D eterm in a ci n d e f s fo r o in o rg n ico
R eg u la ci n
Muestra. El suero o plasma con heparina de litio es acep
Debido a que el lactato es un subproducto del metabolis
table para anlisis. Los anticoagulantes oxalato, citrato o
mo anaerobio, no se regula de manera especfica, como
EDTA no se deben usar porque interfieren con el mtodo
con el potasio o calcio, por ejemplo. Cuando el aporte de
analtico. Se debe evitar la hemolisis como resultado de
oxgeno se reduce por debajo del nivel crtico, las concen
las concentraciones mayores dentro de los eritrocitos. Las
traciones de lactato sanguneo suben con rapidez e indi
concentraciones de fosfato circulante estn sujetas a ritmo
can hipoxia tisular antes que pH. El hgado es el rgano
circadiano, con las concentraciones ms altas tarde por la
principal para eliminar lactato al convertir el lactato de
maana y las ms bajas en la noche. El anlisis de orina
nuevo a glucosa por un proceso llamado gluconeognesis.
para fosfato requiere una recoleccin de muestra de 24
horas debido a las variaciones diurnas significativas.
Mtodos. La mayor parte de los mtodos actuales para Aplicaciones clnicas
determinacin de fsforo enen que ver con la formacin de Las mediciones de lactato sanguneo son tiles para moni-
un complejo de fosfomolibdato de amonio. Este complejo toreo metablico en pacientes enfermos en estado crtico,
incoloro se puede medir mediante absorcin ultravioleta a para indicar la gravedad de la enfermedad y para determi
340 nm o se puede reducir para formar azul de molibdeno, nar de manera objetiva el pronstico del paciente.
un cromforo azul estable, que se lee entre 600 y 700 nm. Hay dos tipos de acidosis lctica. El tipo A se relacio
na con condiciones hipotxicas, como choque, infarto de
In te rv a lo s d e referen cia miocardio, insuficiencia cardaca congestiva grave, edema
Los valores de fosfato pueden variar con la edad. Dividi pulmonar o prdida grave de sangre. El tipo B es de origen
dos en grupos de edad, los intervalos se muestran en el metablico, como con la diabetes mellitus, infeccin gra
cuadro 13-19. ve, leucemia, enfermedad renal o heptica y toxinas (eta
nol, metanol o envenenamiento con salicilato).
Lactato
D eterm in a ci n d e la c ta to
B io q u m ic a y fis io l o g a d el la c ta to Manejo de la muestra. Se debe tener cuidado especial al
El lactato es un subproducto de un mecanismo de emer recolectar y manejar las muestras para anlisis de lactato.
gencia que produce una cantidad pequea de ATP cuando De modo ideal, no se debe emplear un torniquete porque
CAPTULO 13 ELECTRLITOS 337
Metabolismo aerbico
1 mol de glucosa >piruvato ----- > > acetil-CoA - ciclo del cido ctrico
La fosforilacin oxidativa en
las mitocondrias rpidamente
oxida a la NADH de nuevo en NAD+
se producen 38 moles
de ATP
Metabolismo anaerobio
--NADH
Sin la fosforilacin
oxidativa, la NADH
se acumula, lo cual
NAD+ favorece la conversin
lactato de piruvato a lactato
se producen 2 moles
de ATP FIGURA 13-7. Metabolismo aerbico contra anaerbico de glucosa.
la estasis venosa incrementar las concentraciones de lac la gluclisis sin afectar la coagulacin, son por lo general
tato. Si se emplea un torniquete, la sangre se debe recolec aditivos satisfactorios, pero se deben consultar las indica
tar de inmediato y el paciente no debe ejercitar la mano ciones especificas del mtodo.
antes o durante la recoleccin .10 Despus de la recolec Mtodos. Aunque el lactato es un indicador sensible de
cin, la glucosa se convierte a lactosa por medio de glu oxigenacin tisular inadecuada, el uso de mediciones de
clisis anaerobia y se debe evitar. La sangre heparinizada lactato sanguneo ha sido obstaculizado porque los mto
se puede usar pero se debe entregar en hielo y separar con dos ms viejos eran lentos y laboriosos. Se han emplea
rapidez el plasma. El yodoacetato o fluoruro, que inhiben do otros mtodos para seguir la perfusin u oxigenacin,
CUADRO 13-20. INTERVALOS DE REFERENCIA Estos valores se pueden usar para aproximar el intervalo
PARA LACTATO am nico (IA), que es la diferencia entre amones no medi
dos y los cationes no medidos. Nunca hay un intervalo
MTODO ENZIMTICO,
entre las cargas catinicas totales y las cargas aninicas.
PLASMA
El IA se crea por la diferencia de concentracin entre los
Venoso 0.5 a 2.2 mmol/L (4.5 a 19.8 mg/dl) cationes medidos comnmente (Na + K) y los aniones (Cl
Arterial 0.5 a 1.6 mmol/L (4.5 a 14.4 mg/dl) + H C 0 3), como se ilustra en la figura 13-9. El IA es til
para indicar un incremento en uno o ms de los aniones
LCR 1.1 a 2.4 mmol/L (10 a 22 mg/dl) no medidos en el suero y tambin como una forma de
control de calidad para el analizador empleado para medir
estos electrlitos. Los espacios amnicos consistentemen
como los catteres internos para medir flujo de sangre,
te anormales en el suero de personas saludables pueden
oxmetros de pulso, determinaciones de exceso y medi
indicar un problema del instrumento.
ciones de consumo de oxgeno ( V 0 2). Los mtodos enzi-
Hay dos mtodos comunes para calcular el intervalo
mticos actuales facilitan la determinacin de lactato.
aninico. La primera ecuacin es
En el mtodo enzimtico comn se emplea oxidasa de
lactato para producir piruvato y H 2Oz. IA = Na+ - (CL + H C 0 3-) (Ec. 13-8)
error del instrumento. Los valores bajos del intervalo ani ) El cloruro es reabsorbido, en parte, por transporte
nico son raros pero se pueden ver con hipoalbuminemia pasivo en el tbulo proximal a lo largo del gradiente
(disminucin de aniones no medidos) o hipercalcemia de concentracin creado por Na+.
grave (incremento de cationes no m edidos). f ) El potasio se reabsorbe mediante dos mecanismos:
La reabsorcin activa en el tbulo proximal casi
ELECTRLITOS Y FUNCIN RENAL conserva por completo K+.
El intercambio con Na+ es estimulado por aldos
El rin es el centro para la regulacin y conservacin de terona. H+ compite con K+ para este cambio.
electrlitos en el cuerpo. Para una revisin de la estruc
tura del rin, refirase a la figura 13-10 y el captulo 24,
Funcin renal. El siguiente es un resumen de excrecin y
conservacin de electrlito en un individuo saludable:
Tbulo distal
1. Glomrulo: esta porcin de la nefrona acta como un
filtro, retiene las protenas grandes y los constituyentes Tbulo proximal
enlazados a protena mientras que otros constituyen
tes plasmticos pasan hacia el filtrado. Las concentra
ciones en el plasma filtrado deben ser casi iguales a la
protena sin LEC. Na Ducto
2. Tbulos renales: HCO3 co 2 + h 2o colector
a) La PTH inhibe la reabsorcin de fosfato y el 1,25-
dihidroxicolecalciferol la incrementa. La calcitonina
estimula la excrecin de P 0 4.
b) El calcio es reabsorbido bajo la influencia de PTH y Vaso tfiO 1 con ADH presente
sanguneo
1,25-dihidroxicolecalciferol. La calcitonina estimula
K+oH +
excrecin de calcio.
c) La reabsorcin de magnesio ocurre en gran medida con aldosterona presente
en el extremo ascendente grueso del asa de Henle.
d) La reabsorcin de sodio puede ocurrir por tres meca
nismos:
Alrededor de 70% del sodio en el filtrado es reab
sorbido en los tbulos proximales por reabsorcin
isoosmtica. Sin embargo, est limitada por la capa
cidad del cloruro para mantener la neutralidad elc Asa de Henle
trica.
El sodio es reabsorbido en intercambio por H+.
Esta reaccin est enlazada con H C 0 3 y depende de
la anhidrasa carbnica.
Estimulado por aldosterona, el Na+ es reabsorbi
do en intercambio por K+ en los tbulos distales. (H+ FIGURA 13-10. Resumen de movimientos de electrlito en tbulos
compite con K+ por este intercambio.) renales.
340 PARTE II CORRELACIONES CLNICAS Y PROCEDIMIENTOS ANALTICOS
g) El bicarbonato se recupera del filtrado glomerular y negativa y se mueven hacia el nodo; los cationes tienen
se convierte en C 0 2 cuando se excreta H+ en la orina. una carga positiva y migran hacia el nodo. Los electrli
Asa de Henle: con la funcin normal de ADH, tos son esenciales para numerosos procesos en el cuerpo,
crea un gradiente osmtico que permite que la como la regulacin del volumen y la presin osmtica,
reabsorcin de agua se increm ente o disminuya ritmo y contractilidad miocrdica, activacin de enzimas,
en respuesta a cambios de lquidos corporales de regulacin de las bombas de iones de ATPasa, equilibrio
osmolalidad. acidobase, coagulacin de sangre, excitabilidad neuro-
Ductos colectores: tambin bajo la influencia de muscular, y la produccin y uso de ATP a partir de glu
ADH, ste es el lugar donde se hace el ajuste final de cosa. Los electrlitos analizados en este captulo fueron
excrecin de agua. sodio, calcio, fosfato, cloruro, bicarbonato, magnesio, cal
cio, fosfato y lactato. En este captulo tambin se estudi
RESUMEN la fisiologa metablica y la regulacin de cada electrlito,
as como los mtodos de evaluacin comnmente usados.
Los electrlitos son iones capaces de llevar una carga elc La regulacin de concentraciones de electrlito en los
trica. Se clasifican como aniones o cationes con base en intervalos fisiolgicos reducidos es llevada a cabo sobre
el tipo de carga que llevan. Los aniones tienen una carga todo por los riones.
CAPTULO 13 ELECTRLITOS 341
PREGUNTAS DE REPASO
1. Cul es el catin intracelular principal? 7. La diferencia principal entre un mtodo de ESI directo
a) Calcio. e indirecto es:
b) Magnesio. a) El tipo de membrana que se usa.
c) Sodio. b) Que los ESI directos emplean un electrodo de
d) Potasio. referencia mientras que los ESI indirectos no.
c) La muestra se diluye en el mtodo indirecto, no el
2. Cul es el catin extracelular principal?
mtodo directo.
a) Cloruro.
d) Las muestras de sangre completa se pueden medir
b) Sodio.
con el mtodo directo y no con el indirecto.
c) Magnesio.
d) Calcio. 8. Cul mtodo de anlisis proporcionar los resultados
de electrlito ms exactos si se emplea una muestra
3. La osmolalidad se puede definir como una medida de
muy lipmica?
la concentracin de una disolucin con base en:
a ) El ESI indirecto.
a) El nmero de partculas inicas presentes.
b) El ESI directo.
b ) El nmero y tamao de partculas disueltas.
c) La fotometra de emisin de flama.
c) El nmero de partculas disueltas.
d) La absorcin atmica.
d) Densidad de las partculas disueltas.
9. La causa ms frecuente de hipermagnesemia se debe
4. La hiponatremia puede ser causada por cada una de
a:
las siguientes condiciones EXCEPTO:
a) Ingestin incrementada.
a) Hipomagnesemia.
b) Hipoaldosteronismo.
b ) Deficiencia de aldosterona.
c) Acidosis.
c) Vmito prolongado y diarrea.
d) Insuficiencia renal.
d) Insuficiencia renal aguda o crnica.
10. Una muestra hemolizada causar concentraciones
5. La hipopotasemia puede ser causada por cada una de
incrementadas falsas de lo siguiente EXCEPTO:
las siguientes condiciones EXCEPTO:
a) Potasio.
a) Acidosis.
b) Sodio.
b) Vmito prolongado y diarrea.
c) Fosfato.
c) Hipomagnesemia.
d) Magnesio.
d) Hipoaldosteronismo.
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342 PARTE II CORRELACIONES CLNICAS Y PROCEDIMIENTOS ANALTICOS
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Gases en la sangre, pH, y
sistemas amortiguadores
Sharon S. Ehrmeyer, Ronald H. Laessig
y John J. Ancy
CONTENIDO DE L CAPTULO
DEFINICIONES: CIDO, BASE, DISOLUCIN A nalizadores de gas en la sangre: pH, PC02y P02
AMORTIGUADORA Medicin de PO-,
EQUILIBRIO ACIDOBASE Mediciones de pH y P C 0 2
M antenim iento del H+ Tipos de sensores electroqumicos
Sistemas amortiguadores: regulacin del H+ Sensores pticos
Regulacin del equilibrio acidobase: pulmones Calibracin
y riones Parmetros calculados
VALORACIN DE LA HOMEOSTASIS ACIDOBASE Correccin de la temperatura
El sistema am ortiguador de bicarbonato y la ASEGURAMIENTO DE LA CALIDAD
ecuacin de Henderson-Hasselbalch Consideraciones preanalticas
Trastornos acidobase: acidosis y alcalosis Evaluaciones analticas: control de calidad y prueba
INTERCAMBIO DE OXGENO Y GAS de eficiencia
Oxgeno y bixido de carbono Interpretacin de los resultados
Transporte de oxgeno RESUMEN
Cantidades relacionadas con la evaluacin del PREGUNTAS DE REPASO
estado de oxigenacin del paciente REFERENCIAS
Disociacin hemoglobina-oxgeno
MEDICIN
Determinacin espectrofotomtrica (cooxmetro)
de la saturacin del oxgeno
O B J E T I V O S
______________________________ T R M I N O S CLAVE
Acidemia Compensacin f io 2 Oxihem oglobina
Acidosis Error analtico Hiperventilacin fraccional
Alcalemia Error preanalitico Hipoventilacin Saturacin de oxgeno
Alcalosis Exceso de base Hipoxemia
Todas las soluciones amortiguadoras estn integradas por Los pulmones y los riones juegan papeles importan
un cido dbil, como el cido carbnico (H ,C O ,), y su sal tes en la regulacin del pH sanguneo. La interrelacin de
o base conjugada, el bicarbonato CHCOy), para el sistema los pulmones con los riones en el mantenimiento del
amortiguador bicarbonato-cido carbnico. El H,CO, es pH se describe con la ecuacin de Henderson-Hasselbal-
un cido dbil porque no se disocia por completo en H+ y ch (ecuacin 14-4). El numerador (H C 0 3) representa la
H C 0 3.(En contraste, un cido fuerte, como el HC1, se diso funcin del rin, mientras que el denominador (PCO
cia totalmente en H+y Cl en disolucin). Cuando se agrega que representa al H2C 0 3) denota la funcin pulmonar. Los
un cido al sistema bicarbonato-cido carbnico, el HCOy pulmones regulan el pH a travs de la retencin o elimi
puede combinarse con el H+ del cido para formar H2C 0 3 nacin de C O ,, cambiando la proporcin y el volumen de
Cuando se agrega una base, el H ,CO, se combina con el gru ventilacin. Los riones regulan el pH excretando cido,
po OH para formar H20 y H C 03. En ambos casos, hay una principalmente el ion amonio, y recuperando H C 0 3 del
variacin ms pequea en el pH de la que se obtendra al filtrado glomerular.
agregar el cido o base a una disolucin no amortiguadora.
Aunque el sistema bicarbonato-cido carbnico tiene una Regulacin del equilibrio acidobase:
capacidad de amortiguacin baja, todava es un amortigua
pulmones y riones
dor importante por tres razones: a ) H2C 0 3se disocia en COz
y H ,0 , liberando C 0 2, que es eliminado por los pulmones El dixido de carbono, el producto final de la mayor parte
y desechando EE como agua; b) los cambios en C 0 2 modi de los procesos metablicos aerbicos, se difunde de forma
fican la tasa de ventilacin (respiracin); y c) los riones fcil fuera del tejido donde se produce, hacia el plasma y
pueden alterar la concentracin de H C 03~. Adems, este sis los glbulos rojos de los capilares circundantes. En el plas
tema amortiguador contrarresta inmediatamente los efectos ma, una cantidad pequea de CO, se disuelve fsicamente
de cidos no voltiles fijos (H+A) ligando el ion hidrgeno o se combina con protenas para formar compuestos de
disociado (H'A + IiCO , = H2C 0 3 + A"). El H2C 0 3resultante carbamino. Casi todo el CO, se combina con H20 para
se disocia, y el H+ es neutralizado por la capacidad amorti formar H2C 0 3, qu rpido se disocia en H+ y H C 0 3 (fig.
guadora de la hemoglobina. En la figura 14-1 se muestra la 14-1). La reaccin es acelerada por la enzima anhidrasa
mutua relacin entre la hemoglobina de los glbulos rojos y carbnica encontrada en la membrana de los glbulos
el H+ del sistema amortiguador de bicarbonato. rojos. La disociacin de H ,C 0 3causa que la concentracin
Otras soluciones amortiguadoras tambin son impor de H CO ; se incremente en los glbulos rojos y se difunda
tantes. El sistema amortiguador de fosfato (H P 0 4-2 en el plasma. Para mantener electroneutralidad (el mis
- H ,P 0 4) juega un papel importante en el plasma y los mo nmero de iones cargados positiva y negativamente
glbulos rojos, y participa en el intercambio del ion de en cada sitio de la membrana del glbulo rojo), se difunde
sodio en la orina por el H+ filtrado. La protena del plas cloruro en la clula. A esto se le conoce como cam bio de
ma, principalmente los grupos imidazol de la histidina, cloruro. Las protenas y los amortiguadores del plasma se
tambin forman un sistema amortiguador importante en combinan con los H+ para mantener un pH estable.
el plasma. Casi todas las protenas circulantes tienen una En los pulmones, el proceso se invierte. El 0 2 inspi
carga negativa neta y son capaces de enlazarse con H+. rado se difunde de los alvolos a la sangre y se liga a la
hemoglobina para formar la oxihemoglobina (0 ,H b ). El
H+ que es transportado por la hemoglobina (reducida)
dentro de la sangre venosa es liberado para combinarse
con el H C 0 3 para formar H ,C 0 3, que a su vez se diso
cia en H20 y C 0 2. El C 0 2se difunde en los alvolos y se
elimina a travs de la ventilacin. El efecto de la interac
cin de estos dos sistemas de amortiguacin es un cam
bio mnimo en la concentracin de H+ entre la circulacin
arterial y venosa. Cuando los pulmones no eliminan el
C 0 2 en proporcin a su produccin (com o resultado de
ventilacin disminuida o enfermedad), ste se acumula
en la sangre, causando un aumento en la concentracin
de H+. Pero si la elim inacin de C 0 2 es ms rpida que
la produccin (hiperventilacin), la concentracin de H+
disminuir. Por tanto, la ventilacin afecta el pH de la
sangre. Un cambio en la concentracin de H+ en la san
gre que se deba a disturbios no respiratorios, ocasionar
que el centro respiratorio responda alterando la propor
cin de ventilacin en un esfuerzo por restaurar el pH de
la sangre a la normalidad. Los pulmones, en cuestin
de segundos, junto con los sistemas amortiguadores, pro
FIGURA 14-1. Interrelacin de los sistemas amortiguadores de
porcionan la primera de defensa contra los cambios en el
bicarbonato y de hemoglobina. estado acidobase.
346 PARTE II CORRELACIONES CLNICAS Y PROCEDIMIENTOS ANALTICOS
Los riones tambin pueden excretar cantidades varia Varios factores afectan la reabsorcin de H C 0 3- Cuando
bles de cido o base, por lo que tienen un papel importante el nivel de H C 0 3- en sangre o en plasma es ms alto que 26
en la regulacin del equilibrio acidobase. El papel princi a 30 mmol/L, el H C 0 3- debe ser excretado. Es improbable
pal del rin en la estabilidad de la homeostasis acidoba que el plasma exceda un valor de H C 0 3- de 30 mmol/L, a
se es recuperar el H C 0 3- del filtrado glomerular. Sin esta menos que falle la capacidad excretoria (como cuando hay
recuperacin, la prdida de HCO,- en la orina dara como insuficiencia renal). Sin embargo, una excepcin frecuen
resultado una acidez excesiva en la sangre. El sitio prin te es la retencin compensatoria de P lC 03- por hipercarbia
cipal en la recuperacin del H C 0 3 es el tbulo proximal crnica como se ha observado con la enfermedad pulmo
(fig. 14-2). El filtrado glomerular contiene el mismo nivel nar crnica.
de H C 0 3 que el plasma. Este proceso no es un transporte El nivel de H C 0 3- puede aumentar si una cantidad
directo de HCC>3- a travs de la membrana tubular en la excesiva de lactato, acetato, o H C 0 3- se introduce por va
sangre. En cambio, se intercambia el sodio (Na+) del filtra intravenosa. Tambin puede aumentar si hay una prdida
do glomerular por el H+ en la clula tubular. El H+se com excesiva de cloruro sin reemplazo (como cuando se suda,
bina con el H C 0 3~ en el filtrado para formar H 2C 0 3 que se vomita o se prolonga una succin nasogstrica) debido a
convierte en EI20 y C 0 2mediante la anhidrasa carbnica. que el H C 0 3- ser retenido por el tbulo para conservar la
El C 0 2 se difunde fcilmente en el tbulo y reacciona con electroneutralidad.
H20 para formar de nuevo H 2C 0 3y luego H C 0 3, que es Varios factores pueden ocasionar la disminucin de los
reabsorbido en la sangre junto con el sodio. En condicio niveles de H C 0 3- . Casi todos los diurticos, sin tener en
nes alcaloides, el rin excreta H C 0 3- para compensar la cuenta el mecanismo de accin, favorecen la excrecin de
elevacin del pH sanguneo. El intercambio entre el H+ y H C 0 3- . La reabsorcin reducida del H C 0 3- tambin ocurre
el Na+ sugiere, en parte, por qu los mdicos solicitan an en condiciones en que hay una prdida excesiva de catio
lisis qumicos de pH y gases sanguneos juntos, adems nes. En trastornos del rin (como nefritis crnica o infec
del de electrlitos (Na+, K+y Cl), para evaluar al paciente. ciones), la reabsorcin de H C 0 3- puede verse afectada.
(La absorcin o recuperacin se refiere al proceso de rein-
troducir la sangre. La secrecin o excrecin por parte de las VALORACIN DE LA HOMEOSTASIS
clulas tubulares concentra o elimina sustancias del filtra
ACIDOBASE
do. Estas reacciones determinan el pEI de la orina, adems
del de la sangre.) El sistema amortiguador de bicarbonato y
Bajo condiciones normales, el cuerpo produce un exce la ecuacin de Henderson-Hasselbalch
so neto (de 50 a 100 mmol/L) de cido (H*) cada da, el
cual debe ser excretado por el rin. Debido a que el m ni Al evaluar la homeostasis acidobase, se miden y calculan
mo de pH en la orina es casi de 4.5, el rin excreta pocos los componentes del sistema amortiguador de bicarbona
H+ no reguladores. El resto de los H+ urinarios se combi to. De los datos, pueden hacerse inferencias procedentes
nan con fosfato dibsico (H P 04=) y amoniaco (NH ) y son de otros amortiguadores y de los sistemas que regulan la
excretados como fosfato dihidrgeno (H 2P 0 4=) y amonio produccin, retencin y excrecin de cidos y bases. Para
(NH4+). La cantidad de HPO+' disponible para combinarse el sistema amortiguador de bicarbonato, el C 0 2 disuelto
con H+ es constante; por tanto, la excrecin diaria de H+ (d C 0 2) est en equilibrio con el C 0 2gaseoso, que puede
en orina depende en gran parte de la cantidad formada de expulsarse por va pulmonar. Por tanto, el sistema amor
NH4+. Debido a que las clulas tubulares renales pueden tiguador de bicarbonato es conocido como un sistema
generar NH3 a partir de la glutamina y otros aminocidos, abierto, y el d C 0 2 que es controlado por los pulmones,
la concentracin de NH3 puede incrementarse como res es el componente respiratorio. Los pulmones participan de
puesta a un decremento en el pH sanguneo. inmediato en la regulacin del pH sanguneo a travs de la
PCO,2>r
C-A
C 0 2 + H20 ^=H2C03
H++ HCO3 Na++ H C O g
Glutamina -> Glutamina Na+
+ h p o 4-
, Glutaminasa Na+
cido glutmico- cido glutmico + NH3 Na++ CU
HCO3 + K+ K+ Na+
+S04
t
Na+ <------ Na++ HCO Na+
[A]
Na++ H C O j <- NaHCOg HCOg < - N a+ + HCOg
H+ --------
H XO ,
% 3
co2 < c o 2 <- c o 2+ h 2o
[B]
Na++ H C O g <- NaHCOg < HCOg <- Na+
+ HPO :
Na+
Na++ H2 P 0 4
[C]
Na++ HCOg -Na+
+SO ;
2NaHC03 < 2HCOg
Na++ HCO; -Na+
2H+ > 2H+
2NH, -> 2NH3
NH,
+ SO ;
NH.
[D]
Na++ H C O g <- N aH C O g < HCOg < - Na++ CU
K+ i
K+ + CU
FIGURA 14-2. Reabsorcin del bicarbonato por parte de la clula tubular proximal. CA, anhldrasa carbnica.
348 PARTE I I I I CORRELACIONES CLNICAS Y PROCEDIMIENTOS ANALTICOS
hipoventilacin o hiperventilacin. Por lo general, los CUADRO 14-1. RANGO DE REFERENCIA DE GAS
riones, los componentes metablicos y no respiratorios, EN L A S A N G R E A R T E R IA L A 37 C
controlan la concentracin de bicarbonato.
La ecuacin de H enderson-H asselbalch expresa la rela pH 7.35-7.45
cin acidobase en una frmula matemtica: P C 0 2 (mmHg)) 35-45
cA H C 0 3- (mmol/L) 22-26
pH = p K '+ log (Ec. 14-3)
cHA Contenido total de C 0 2 (mmol/L) 23-27
P 0 2 (mmol/L) 80-110
donde A~ = receptor del protn (p. ej., H C 0 3-), HA =
donador del protn, o cido dbil (como H2C 0 3), y el pK so 2 (%) >95
= pH en que hay concentracin igual de las especies proto Q 2Hb (%) >95
nada y no protonada. Conociendo cualquiera de las tres
variables se consigue calcular la cuarta.
En plasma y a temperatura corporal (37C ), el pK'del
sistema amortiguador de bicarbonato es 6.1. El equilibrio Al agregar el logaritmo de 20 (1.3) al pK' del sistema del
entre H,CO, y C 0 2en plasma es casi 1:800. La concentra bicarbonato se produce un pH normal de 7.40 (7.40 = 6.1
cin de H2CQ 3es proporcional a la presin parcial ejercida + 1.3).
por el C 0 2disuelto. En plasma a los 37C, el valor para la
combinacin de la constante de solubilidad para el PCO, y Trastornos acidobase: acidosis y aicalosis
el factor para convertir mmHg a milimoles por el litro es
de 0.0307 mmol L_1 mmHg-1. La temperatura y el solvente Los trastornos acidobase de la acidosis y la aicalosis son
afectan la constante. Si cualquiera de stos cambia, la cons resultado de diversas condiciones patolgicas. Cuando el
tante de solubilidad tambin cambiar. Tanto el pH como pH sanguneo es menor que el rango de referencia, se le
el P C 0 2se miden en el anlisis de gas sanguneo, y el pK es denomina acidem ia, que expresa exceso de cido o concen
una constante; por tanto, es posible calcular H C 0 3- : tracin de H+. A un pH mayor que el rango de referencia
se le denomina alcaletna, o exceso de base. A un trastor
cHCCL no causado por la disfuncin ventilatoria (un cambio en el
pH = p K '+ log (Ec. 14-4)
0.031 X PCO, P C 0 2, el componente respiratorio) se le denomina acidosis
respiratoria prim aria o aicalosis. A un trastorno que resulta
En condiciones de salud, cuando los riones y pul de un cambio en el nivel del bicarbonato (una funcin renal
mones estn funcionando de manera apropiada, es posi o metablica) se le denomina trastorno fio respiratorio (meta
ble mantener una proporcin de 20:1 de H C 0 3- a H2C 0 3 blico). La mezcla de trastornos respiratorios y no respirato
(produciendo un pH de 7.40). Esto se ilustra sustituyendo rios en ocasiones surge de ms de un proceso patolgico y
valores normales (cuadro 14-1) para H C 0 3- y PCO, en la representa la ms seria de las condiciones mdicas, porque
ecuacin anterior: la compensacin para el desorden primario est fallando.
Debido a que las actividades celulares y metablicas del
24 mmol/L cuerpo son dependientes del pH, el cuerpo trata de restaurar
(0.031 mmol/L - mm Hg) X 40 mm Hg la homeostasis acidobase siempre que ocurre un desequili
= 24 ^ 2 0 brio. A esta accin del cuerpo se le denomina compensacin:
(Ec. 14-5) el cuerpo logra esto alterando el factor no afectado en primer
1.2 ~ 1 trmino por el proceso patolgico. Por ejemplo, si el des-
equilibrio es de origen no respiratorio, el cuerpo lo com causando hipercarbia crnica (PCO, elevado). En la bron-
pensa alterando la ventilacin. En el caso de los disturbios coneumona, el intercambio de gases se impide debido a
del componente respiratorio, los riones compensan al secreciones, glbulos blancos, bacterias y fibrina en los
excretar o absorber de forma selectiva aniones y cationes. alvolos. La hipoventilacin causada por frmacos como
Los pulmones pueden compensar de inmediato, pero la barbitricos, morfina o alcohol aumentar los niveles de
respuesta es a corto plazo y a menudo incompleta. Sin P C 0 2sanguneos, adems de la obstruccin mecnica o la
embargo, los riones son ms lentos para responder (2 a asfixia (estrangulacin o aspiracin). La reduccin en el
4 das), pero la respuesta es a largo plazo y ms completa. rendimiento cardaco, como se ha visto en la cardiopata
Com pensado com pletam ente implica que el pH ha vuelto al congestiva, tambin producir el envo de menos sangre a
rango normal (se ha restaurado el cociente 20 : 1); com pen los pulmones para el intercambio de gases y, por lo tanto,
sado parcialm ente implica que el pH est cercano a lo nor un P C 0 2elevado.
mal. La compensacin puede volver con xito al cociente En la acidosis respiratoria primaria, la compensacin
normal 20 : 1, pero la anormalidad primaria no se corrige. ocurre mediante procesos no respiratorios. Los riones
La acidosis se puede deber a una anormalidad (metab aumentan la excrecin de H+ y la recuperacin de HCO, .
lica) no respiratoria primaria o a un problema respiratorio Aunque la compensacin renal comienza de inmediato,
primario. En la acidosis no respiratoria primaria, hay una se lleva das a semanas para que la compensacin mxi
disminucin del bicarbonato ( < 2 4 mmol/L), lo que lleva a ma ocurra. Cuando el HCO,- en la sangre aumenta como
un decremento en el pH como resultado de que la relacin resultado de la accin de los riones, se alterar el cocien
entre el componente no respiratorio y el respiratorio en la te base a cido y el pH volver a la normalidad.
ecuacin de Henderson-Hasselbalch es menor de 20:1: La alcalosis no respiratoria primaria es producto de un
aumento en el H C 0 3, causando un aumento en el compo
ic H C O , 20 nente y un aumento en el pH:
pHc (Ec. 14-6)
N (0 .0 3 0 7 x P C 0 2) 1
c H C O , 20
p L (Ec. 14-8)
donde N = el valor normal y < indica un nivel disminuido. N (0.0307 x P C O ,) 1
La acidosis no respiratoria puede ser causada por la admi
nistracin directa de una sustancia acidoproductora, como Esta condicin es resultado de la administracin exce
el cloruro de amonio o el cloruro de calcio, o por excesiva siva de bicarbonato de sodio o a travs de la ingesta de
formacin de cidos orgnicos como se ve con la cetoacidosis sales productoras de bicarbonato, como lactato de sodio,
diabtica o la inanicin. En la acidosis no respiratoria tam citrato, o acetato. La prdida excesiva de cido debida a
bin se ha observado una excrecin reducida de cidos, vmito, succin nasogstrica o uso prolongado de diurti
como en la acidosis tubular renal, y con prdida excesi cos que aumenta la excrecin renal de H+, puede producir
va de bicarbonato por diarrea o drenado con una fstula un aumento evidente de H C 0 3. El cuerpo responde depri
biliar, pancretica o intestinal. miendo el centro respiratorio. La hipoventilacin resul
El cuerpo compensa la acidosis no respiratoria median tante aumenta la retencin del CO,.
te la hiperventilacin que es un aumento en el grado o la La alcalosis respiratoria prim aria debida a una tasa
profundidad de la respiracin. Al espirar el CO,, la pro aumentada de la ventilacin alveolar causa la eliminacin
porcin base a cido volver a lo normal. La compensacin excesiva del C 0 2por los pulmones:
secundaria ocurre cuando el rgano original (los rio
nes, en este caso) empieza a corregir la proporcin rete NcHCO, 20
pl I c > (Ec. 14-9)
niendo bicarbonatos. i (0.0307 x P C O ,) 1
La acidosis respiratoria primaria es el resultado de una dis
minucin en la ventilacin alveolar (hipoventilacin) , causan Entre las causas de la alcalosis respiratoria se incluyen
do una eliminacin disminuida de C 0 2por los pulmones: hipoxem ia; estmulo qumico del centro respiratorio por
frmacos, como salicilatos; aumento en la temperatu
NcHCCb 20
pHc (Ec. 14-7) ra ambiental; fiebre; histeria (hiperventilacin); embolia
t (0.0307 xPC C L ) 1 pulmonar; y fibrosis pulmonar. Los riones compensan
excretando HCO y en la orina y recuperando H+ para la
La respiracin se regula en la mdula del cerebro. Los
sangre. El tratamiento popular para la hiperventilacin
quimiorreceptores presentes en el arc de la aorta y el seno
histrica (respiracin dentro de una bolsa de papel), se
carotdeo responden a los niveles de H+ (pH), O, y CO,
explica por s solo.
en la sangre y lquido cerebroespinal. Hay varias situacio
nes, incluidas muchas enfermedades pulmonares, en que
el CO, no se elimina efectivamente de la sangre. En ciertos INTERCAMBIO DE OXGENO Y GAS
pacientes con enfermedad pulmonar obstructiva crnica
Oxgeno y bixido de carbono
(EPO C), por ejemplo, cambios destructivos en las vas
areas y las paredes alveolares incrementan el tamao de La funcin del oxgeno en el metabolismo es crucial para
los espacios areos alveolares, con la reduccin resultante toda la vida. En la mitocondria de la clula, los pares de
del rea superficial pulmonar disponible para el intercam electrones de la oxidacin del NADH y FADH2 se transfie
bio de gas. Como resultado, el CO, es retenido en la sangre, ren al oxgeno molecular, lo que causa la liberacin de la
350 PARTE II CORRELACIONES CLNICAS Y PROCEDIMIENTOS ANALTICOS
energa usada para sintetizar ATP a partir de la fosforila ton establece que la presin atmosfrica total es la suma de
cin de ADP. Aunque la medida del 0 2 intracelular no es las presiones de los gases individuales. Una atmsfera ejer
factible con la tecnologa actual, la evaluacin del esta ce 760 mmHg de presin y se compone de O, (20.93% ),
do de oxgeno del paciente es posible usando la presin C 0 2 (0,03% ), nitrgeno (78.1% ), y gases inertes (alrede
parcial de oxgeno (PO ,) medida con el pH y PC 2 en el dor de 1%). El porcentaje de cada gas es igual en todas las
anlisis de gas en la sangre. altitudes; la presin parcial de cada gas en la atmsfera
Para la oxigenacin tisular adecuada, son necesarias es igual a la PB a una altitud particular manteniendo el
las siguientes siete condiciones: a) oxgeno atmosfrico porcentaje apropiado para cada gas. La presin del vapor
disponible, b) ventilacin adecuada, c) intercambio de gas de agua (47 mmHg a 37C ) debe tomarse en cuenta al cal
entre los pulmones y la sangre arterial, d) carga del 0 2en cular la presin parcial de los gases individuales (fig. 14-
la hemoglobina, e) hemoglobina adecuada, f ) transporte 3). En el cuerpo, estos gases siempre estn por completo
adecuado (ritmo cardaco) y g) liberacin de O, en tejido. saturados con agua. Por ejemplo,
Cualquier alteracin de estas condiciones puede dar lugar
a la mala oxigenacin del tejido. Presin parcial del O, a nivel del mar (en el cuerpo) = (760
La cantidad de 0 2disponible en aire atmosfrico depen mmHg - 4 7 mmHg) X 20.93% - 149 mmHg (a 37C)
de de la presin baromtrica (PB). A nivel del mar, la PB es
760 mrnHg. (En el Sistema Internacional de Unidades, 1 Presin parcial del C 0 2 a nivel del mar (en el cuerpo) =
mmHg = 0.133 kPa, donde 1 Pa = 1 N/ m2.) La ley de Dal- (760 mmHg - 47 mmHg) X 0.03% = 0.2 mmHg (a 37C )
disminuida que lleva a la hipercarbia. La capacidad de la O xihem oglobina fraccion al (o porcentual) (FO ,H b) es la
hemoglobina de transportar 0 2puede ser afectada de forma proporcin de la concentracin de oxihemoglobina entre
significativa por otras molculas. Por lo general la hemo la de la hemoglobina total (ctHb),
globina de la sangre est presente en una de estas cuatro
condiciones: _ , cO,Hb c 0 2Hb
F 0 2Hb = ? - (Ec. 14-11)
ctHb cO ,H b + cHHb + dysHb
1. Oxihemoglobina ( 0 2Hb), en que el oxgeno est com
binado de manera reversible con la hemoglobina. donde cdysHb representa derivados de la hemoglobina,
2. Desoxihemoglobina (HHb; hemoglobina reducida), como COHb, que no pueden unirse de manera reversible
que es hemoglobina no enlazada al O, pero capaz de con el O ,, pero an son la parte fija de la medida de la
formar un enlace cuando el 0 2est disponible. hemoglobina total.
3. Carboxihemoglobina (COHb), que es hemoglobina Estos dos trminos, SO, y FO zHb, pueden ser confu
unida al CO. El enlace entre el CO y Hb es reversible, sos porque, en la mayora de los individuos sanos (y aun
pero es casi 200 veces ms fuerte que el enlace entre el individuos con algunos estados de enfermedad), los valo
O, y la Hb. res numricos para la S 0 2 estn cerca a los de F 0 2Hb. Sin
embargo, los valores para FO,Hb y S 0 2 se desviarn cuan
4. Metahemoglobina (MetHb), es la hemoglobina incapaz do las dishemoglobinas estn presentes e incluso cuando
de enlazarse al 0 2porque el hierro (Fe) est en un esta el paciente es fumador, debido al enlace preferente del CO
do ms oxidado que reducido. La enzima reductasa de con la hemoglobina y a la prdida resultante de hemoglo
la hemoglobina, que se encuentra en los glbulos rojos, bina unida al O,.
puede reducir el Fe3+.
La presin parcial del oxgeno disuelto en el p lasm a (PO ,)
es responsable de parte de las reservas de 0 2en el cuerpo.
Los espectrofotmetros indicados (cooxm etros), que
Un adulto sano que respira aire en una habitacin tendr
se discuten ms adelante en este captulo, se utilizan para
un PO, de 90 a 95 mmHg. En el caso del volumen de san
determinar las concentraciones relativas (en relacin con
gre de un adulto de 5 L, slo 13.5 mi de O, estarn dispo
la hemoglobina total) de cada uno de estas formas de la
nibles a partir del PO, en plasma, en comparacin con ms
hemoglobina.
de 1000 mi de O, transportado como 0 ,Hb.
Las mediciones no invasivas para seguir las tenden
Cantidades relacionadas con la evaluacin del cias en la oxigenacin se logran con la oxim etra de pulso
estado de oxigenacin del paciente (SpO ,). Estos dispositivos pasan luz de dos o ms longi
tudes de onda a travs del tejido de los dedos del pie, o
Los cuatro parmetros que suelen usarse para evaluar el
del odo. El oxmetro de pulso distingue entre la absor
estado de oxigenacin del paciente son la saturacin de
cin de la luz como resultado de la oxihemoglobina y la
oxgeno (SO ,); oxihemoglobina fraccional medida (por
dioxihemoglobina en el cauce capilar, y calcula la satura
centual) ( F 0 2Hb); tendencias en la saturacin de 0 2 eva
cin de la oxihemoglobina. Debido a que S p 0 2 no mide la
luado por va transcutnea, valoracin de oximetra de
COHb o algunas otras dishemoglobinas, se sobrestima la
pulso (S p 0 2); y la cantidad de 0 2 disuelto en el plasma
oxigenacin cuando estn presentes una o ms. Adems,
(PO ,).
la exactitud de la oximetra de pulso se ve comprometida
La saturacin del oxgeno (SO ,) representa el cociente de
por muchos factores, incluido el pulso disminuido como
O, que est unido a la protena transportadora, la hem o
resultado de una mala perfusin y de anemia grave.
globina, comparada con la cantidad total de hemoglobina
La cantidad mxima de O, que puede ser transportada
capaz de unirse al O ,.2
por la hemoglobina en una cantidad dada de sangre es la
c 0 2Hb capacidad de oxigenacin de la hem oglobina (combinacin).
SO, -xlOO (Ec. 14-10) El peso molecular del tetrmero de hemoglobina es 64.458
(cCLHb + cHHb) g/mol. Un mol de un gas perfecto ocupa 22.414 mi. Por tan
to, cada gramo de hemoglobina transporta 1.39 mi de O,:
El smbolo c representa la concentracin. El software
incluido en los instrumentos del gas sanguneo puede cal 22.414 ml/mol4
---------------------i = 1.39 ml/g (Ec. 14-12)
cular el SO , a partir del P O ,, pH y tem peratura de la 64.458 g/mol
muestra. Sin embargo, estos resultados calculados pue
den diferir de forma significativa de los determinados Cuando la hemoglobina total (tHb) es 15 g/dl y la
por la m edicin directa debido a la suposicin de que hemoglobina est 100% saturada con 0 2, la capacidad de
slo la hemoglobina de un adulto est presente y la curva O, es:
de la disociacin de la oxihemoglobina tiene una forma
15 g/lOOml X 1.39 ml/g
y una localizacin especficas. Estos algoritm os para el
clculo no explican las otras formas de la hem oglobina,
= 20.8 mi O 2/100 mi de sangre
(Ec. 14-13)
com o COHb y MetHb, que son incapaces de unirse de
manera reversible al 0 2. Debido al potencial para gene El contenido de oxgeno es el O, total en sangre y es la
rar la inform acin errnea, el S 0 2calculado no se debe suma del 0 2 combinado con la hemoglobina ( 0 2Hb) y la
utilizar para evaluar el estado de oxigenacin .23 cantidad disuelta en el plasma ( P 0 2). (Debido a que P 0 2y
CAPTULO 14 * GASES EN LA SANGRE, pH, Y SISTEMAS AMORTIGUADORES 353
PCO-, son slo ndices de la eficiencia del intercambio de oxgeno, adems de la afinidad de la hemoglobina por el
gas en los pulmones, no revelan el contenido de cualquier 0 2 En el tejido con metabolismo activo, las condiciones
gas en la sangre.) Para cada mmHg de P 0 2, 0.00314 mi de en el microambiente promueven la liberacin de oxgeno.
Oz estarn disueltos en 100 mi de plasma a 37C. Por ejem El metabolismo oxidativo aumenta la temperatura, el H+,
plo, si el P 0 2 es de 100 mmHg, 0.3 mi de 0 2 estarn disuel el 0 2 y las concentraciones de 2,3-DPG en el tejido, lo
tos en cada 100 mi de plasma sanguneo. Por lo general, que da lugar a un cambio a la derecha de la curva de la
la cantidad de 0 2disuelto no es clnicamente significativa. disociacin. Esta afinidad disminuida de la hemoglobina
Sin embargo, con un tHb bajo o en condiciones hiperb- por el O., promueve la liberacin del oxgeno al tejido y
ricas, es una fuente significativa de 0 2para el tejido. Por permite que los pacientes, aun los que tienen niveles bajos
lo general, de 98 a 99% de la hemoglobina disponible est de P 0 2y hemoglobina, se beneficien con el 0 2liberado. En
saturada con el 0 2. Suponiendo un tHb de 15 g/dl, el conte los pulmones, la temperatura, el H+, el P C 0 2, y 2,3-DPG
nido de 0 2por cada 100 mi de plasma sanguneo sera disminuyen en relacin con los niveles del tejido, despla
zando la curva de disociacin de oxgeno de forma ligera a
0.3 mi + (20.8 mi X 0.97) = 20.5 mi
la izquierda. Esto aumenta el 0 2combinado con la hemo
(Ec. 14-14)
globina y mejora la captura de 0 2. El subproducto meta-
blico, 2,3-DPG, tambin participa en dos adaptaciones
sin relacin aparente con condiciones en potencia hipxi-
Disociacin hemoglobina-oxgeno
cas. Cuando las cadenas |3 de la molcula de hemoglobina
Adems de la ventilacin adecuada y el intercambio de gas se enlazan con el 2,3-DPG, la disociacin de la oxihemo-
con la circulacin pulmonar, el O, del gas se debe liberar globina cambia a la derecha, con el aumento de la libera
en los tejidos. La hemoglobina transporta el 0 2. El aumen cin de oxgeno. Muchos pacientes con ligeros sntomas
to en la concentracin de H+y en los niveles de P C 0 2 en el de anemia muestran niveles elevados de 2,3-DPG, lo que
tejido debido al metabolismo celular cambia la configura explica, en parte, por qu pueden funcionar los pacientes
cin molecular de O.Hb, facilitando la liberacin de 0 2. con valores en extremo bajos de hemoglobina. Adems,
El oxgeno se disocia de la hemoglobina de un adulto los niveles de 2,3-D PG aumentan como adaptacin a una
(Aj) de una manera caracterstica. Si esta disociacin se altitud elevada.
representa grficamente (fig. 14-4) con POz en el eje x y La hemoglobina es una molcula notable. Su estructura
el porcentaje de S 0 2 en el eje y, la curva que resulta es nica permite que acte como amortiguador acidobase y
sigmoidea, o con una ligera forma de S. La hemoglobina de 0 2. Como la hemoglobina recorre el cuerpo, su expo
se sujeta al 0 2hasta que la tensin del 0 2en el tejido se sicin a varios microambientes promueve la asociacin y
reduce alrededor de 60 mmHg. Por debajo de esta tensin, la disociacin apropiadas de 0 2, C 0 2, y H+. En tejido, la
el O, se libera rpido. La posicin de la curva de la diso exposicin a C 0 2 y IL lleva a una liberacin mejorada de
ciacin del oxgeno refleja la afinidad que la hemoglobina oxgeno (amortiguacin de oxgeno). Esta liberacin del
tiene por el O, y afecta el ritmo de esta disociacin. oxgeno de la hemoglobina acelera la captura de C 0 2 y H+
La actividad del ion hidrgeno, los niveles de P 0 2 y por parte de la hemoglobina (amortiguacin acidobase).
CO, la temperatura del cuerpo, y 2,3-DPG pueden afec En los pulmones, el microambiente promueve la captura
tar la posicin y la forma de la curva de disociacin del de 0 2 y la liberacin del C 0 2.
Las dishemoglobinas, como la carboxihemoglobina
(COHb) o metahemoglobina (MetHb), tambin afectan la
TPH (H+)
disociacin de la oxihemoglobina. Una elevacin en el CO
100 ocasionada por la exposicin al humo de cigarrillo o al
monxido de carbono causa que la curva se desplace a la
izquierda. Cuando el porcentaje de COHb se incrementa,
la forma de la curva pierde algunas de sus caractersticas
sigmoideas y se desplaza a la izquierda, dificultando an
C\l
O ms la liberacin del 0 2unido a la hemoglobina.
CO
La discusin anterior se refiere a la hemoglobina de un
adulto normal (Ax). En pacientes con hemoglobinopatas
jQ
X y en recin nacidos, el patrn de la disociacin puede
diferir. Por ejemplo, la hemoglobina fetal causa un des
plazamiento a la izquierda, pero con pequeo cambio en
la forma sigmoidea.
MEDICIN
20 40 60 80 100
P O 2 , mm Hg Determinacin espectrofotomtrica
FIGURA 14-4. Curvas de disociacin del oxigeno. La curva B es la
(cooxmetro) de la saturacin del oxgeno
curva humana normal. Las curvas A y C son de la sangre con afinidad El porcentaje real de la oxihem oglobina (O zHb) se determi
incrementada y afinidad disminuida, respectivamente. na por espectrofotometra usando un cooxmetro diseado
354 PARTE II CORRELACIONES CLNICAS Y PROCEDIMIENTOS ANALTICOS
para medir de forma directa las diversas especies de hemo S 0 2 ser normal con un valor de 0 ,I I b significativamente
globina. Cada especie tiene una curva de absorbencia disminuido.
caracterstica (fig. 14-5). El nmero de especies de hemo Como en cualquier medida espectrofotomtrica, exis
globina medidas depender del nmero y las longitudes de ten fuentes de error, incluidas las fallas en la calibracin
onda especficas incorporados en la instrumentacin. Por del instrumento y las sustancias que interfieren en el
ejemplo, los sistemas de instrumentos con dos longitudes espectro. La presencia de cualquier sustancia que absorbe
de onda slo pueden medir dos especies de hemoglobina la luz en las longitudes de onda usadas en la medicin
( 0 2Hb y HHb), que se expresan como una fraccin o por de cualquier pigmento de la hemoglobina puede ser una
centaje de la hemoglobina total. fuente de error. Deben consultarse las especificaciones de
Los instrumentos, como mnimo, deben tener cuatro instrumentos para interferencias especficas.
longitudes de onda para las mediciones de HHb, OzHb y Debido a que el principal objetivo para determinar OzHb
las dos dishemoglobinas ms comunes, COHb y MetHb. es evaluar el transporte de oxgeno desde los pulmones, es
Los instrumentos con ms de cuatro longitudes de onda mejor estabilizar el estado de la ventilacin del paciente
pueden reconocer tintas y pigmentos, turbiedad, otras antes de tomar la muestra de sangre. Despus de los cambios
especies de la hemoglobina y protenas anormales. Los en el O, suplementario o la ventilacin mecnica debe darse
microprocesadores controlan la secuencia de mltiples un perodo de espera apropiado antes de volver a tomar la
longitudes de onda de la luz a travs de la muestra y apli muestra. Todas las muestras de sangre deben tomarse bajo
can las ecuaciones de matriz necesarias despus de que condiciones anaerobias y mezclarse de inmediato con hepa
se han hecho las lecturas de absorbencia para calcular el rina u otro anticoagulante apropiado. Si el anlisis de gas
porcentaje de la especie de hemoglobina: en la sangre no se realiza en la misma muestra, puede usar
se cido etilendiaminotetraactico (EDTA) como anticoa
0 ,H
2
B = a,A,
1 1 2
+ a,A,2+ ... + a A
n n gulante. Todas las muestras se deben analizar rpido para
HHb = b.A,
11
+ b,A,
2 2
+ ... + b nAn evitar cambios en la saturacin como resultado del uso de
COHb = c.A,
11
+ c,A,
2 2
+ ... + cnAn oxgeno por parte de las clulas metabolizantes.2,4
MetHb = d.A,
1 1 + d,A,
2 2+ ... + d A
nn
(Ec. 14-15)
Analizadores de gas en la sangre:
donde a v aN, bN, etc., son coeficientes que son anlogos pH, PC02 y P02
de la constante de absorcin a que se derivan de mtodos
Los analizadores de gas en la sangre utilizan electrodos
establecidos, y A 1 A son las absorbencias de la mues
(sensores macroelectroqumicos o microelectroqumicos)
tra. Las ecuaciones de matriz cambiarn dependiendo del
como dispositivos de deteccin para medir P 0 2, PCO , y
nmero de longitudes de onda de la luz (que es especfico
pH. La medicin de P 0 2 es amperomtrica, lo que significa
del fabricante) que pasan a travs de la muestra. (El cl
que la cantidad de flujo de corriente es una indicacin de
culo hecho con estos instrumentos no se debe confundir
la presencia de oxgeno. Las mediciones de P C 0 2y pH son
con el S 0 2 calculado mediante un analizador de gas san
potenciomtricas; en ellas, un cambio en voltaje indica la
guneo, que en realidad estim a el valor a partir de un P 0 2
actividad de cada analito.
medido y una ecuacin emprica para la localizacin y
El ctodo se puede definir por lo menos de tres maneras:
forma de la curva de disociacin oxgeno-hemoglobina.)
a) el electrodo negativo, b) un sitio por el cual los cationes
Slo los valores de 0 ,H b reflejan el estado verdadero del
tienden a viajar o c) un sitio en que ocurre la reduccin.
paciente, porque el S 0 2 calculado y los valores de 0,11b
La reduccin es la ganancia de electrones por una partcula
sern muy diferentes en la presencia de dishemoglobinas.
(tomo, molcula o ion). El nodo es el electrodo posi
Por ejemplo, en el envenenamiento con CO, tal vez el
tivo, el sitio al que emigran los aniones o en que ocurre
la oxidacin. La oxidacin es la prdida de electrones por
parte de una partcula. Una celda electroqum ica se forma
cuando dos electrodos opuestos se sumergen en un lqui
do que debe conducir la corriente. El analizador de gas
en la sangre puede calcular varios parmetros adicionales:
bicarbonato, C 0 2total, exceso de base y S 0 2.
Medicin de P02
Los electrodos de P 0 2, llamados electrodos de C larke,
miden la cantidad de flujo de corriente en un circuito que
est relacionado con la cantidad de O, que se reduce en
el ctodo. Una membrana permeable al gas que cubre la
extremidad del electrodo permite selectivamente que el Oz
Longitud de onda (nm)
se difunda dentro de un electrlito y entre en contacto
FIGURA 14-5. Absorcin ptica de las fracciones de hemoglobina. con el ctodo. Los electrones son atrados de la superficie
(Reproducida con el permiso de Clin Chem News 1990 (enero).) del nodo a la del ctodo para reducir el Or Un pequeo
CAPTULO 14 GASES EN LA SANGRE, pH, Y SISTEMAS AMORTIGUADORES 355
potencial de polarizacin constante (por lo general, -0 .6 5 mmHg) puede dar lugar a un error significativo. Incluso
V) es aplicado entre el nodo y el ctodo. Un micrmetro despus de la toma de la muestra, los leucocitos siguen
colocado en el circuito entre el nodo y el ctodo mide metabolizando el 0 2. A menos que la muestra se analice
el movimiento de los electrones (corriente). Cuatro elec de inmediato despus de obtenerla, podran verse valores
trones son atrados por cada mol de O , reducido, lo que bajos de PO, con altas cuentas de glbulos blancos.
permite determinar PO,. La membrana semipermeable Tambin es posible hacer mediciones continuas de PO,
tambin permitir que otros gases pasen, por ejemplo el usando electrodos transcutneos (TC) colocados de forma
C 0 2 y el N , pero estos gases no se reducirn en el ctodo directa en la piel. La medida depende del oxgeno que se
si el voltaje polarizante se controla de manera firme. difunde de los capilares a travs del tejido al electrodo.
La principal fuente de error para la medicin de P 0 2 Aunque suele utilizarse en recin nacidos y nios peque
se relaciona con la acumulacin de material proteico en os, este mtodo no invasivo no est libre de problemas.
la superficie de la membrana. Esta acumulacin retarda la El grueso de piel y la perfusin del tejido con sangre
difusin y la respuesta del electrodo. La contaminacin bac arterial afectan los resultados de manera significativa. El
teriana dentro del compartimiento medidor, aunque poco calentamiento del electrodo colocado en la piel puede ace
frecuente, consumir el 0 2 y causar valores bajos y vagos. lerar la difusin del 0 2 al electrodo; sin embargo, pueden
Otros errores se relacionan por lo general con un mal fun producirse quemaduras, a menos que los electrodos se
cionamiento del sistema, como la calibracin incorrecta. muevan con regularidad. Aunque el P 0 2 medido por estos
Las consideraciones no analticas, incluidas la recolec electrodos refleja el P 0 2 arterial, estos dos valores no son
cin y el manejo de muestras, se tratarn ms adelante equivalentes. El consumo de oxgeno por parte del tejido
en este captulo. Sin embargo, es muy importante que la en el sitio del electrodo, los efectos de calor en el tejido y
muestra no se exponga al aire ambiente cuando se reco la posible hipoperfusin ocasionada por inestabilidad car
lecta, transporta y se realizan mediciones de 0 2. La con diovascular contribuyen, en conjunto, a que el gradiente
taminacin de la muestra con aire ambiente ( P 0 2 = 150 del O, tisular arterial sea impredecible.
356 PARTE II CORRELACIONES CLfNICAS Y PROCEDIMIENTOS ANALTICOS
Una m ujer de 64 de aos con enfermedad pulmonar Se le trat con un bolo de Lasix intravenoso y dos
obstructiva crnica (EPOC) fue admitida en urgencias tratamientos respiratorios con albuterol (broncodilata-
con falla respiratoria extrema. Tena un color azulado dor). Sus signos vitales mejoraron: ritmo cardaco, 124;
que era muy pronunciado en sus labios y en la base de presin arterial, 120/80; y ritmo respiratorio, 22. Los
las uas, y exhiba una tos dbil y persistente con soni gases en la sangre fueron repetidos con el paciente res
dos respiratorios disminuidos pero golpeantes. La auto- pirando O , al 28% (FiO , = 0 .2 8 ):
medicacin inclua broncodilatadores, esteroides, Lasix
(un diurtico que no conserva el potasio del plasma), pH = 7.306
y digital. Signos vitales: ritmo cardaco, 148; presin PC 02 = 75 mm Hg
arterial, 100/88; temperatura, 37; y ritmo respiratorio, P02 = 78 mm Hg
38. Los resultados iniciales de gas en sangre realizados H C 0 3~ = 3 6 mmol/L
en presencia de aire ambiente fueron:
Preguntas
pH = 7.289
PCO, = 91 mm Hg 1. Se debe administrar ms oxgeno a este paciente?
PO, ' = 53 mm Hg 2. Cmo beneficiaron al paciente la administracin de
HCOj- = 43 mmol/L Lasix y el tratamiento respiratorio?
muestra y el mantenimiento requeridos. Los microelectro- por una membrana, como en el caso de los electrodos, y el
dos son, en esencia, macroelectrodos miniaturizados. La analito se difunde en la tinta, lo que causa un aumento o
miniaturizacin lleg a ser posible con las mejores posibi una atenuacin de la fluorescencia proporcional a la can
lidades de fabricacin y con el desarrollo de la electrnica tidad de analito. La calibracin se utiliza para establecer la
sofisticada requerida para m anejar cambios minsculos en relacin entre la concentracin y la fluorescencia. Por lo
seales. general, una sola calibracin ser suficiente por perodos
La tecnologa de pelcula gruesa y fin a es otra modifica largos porque esta tecnologa no est sujeta a las desvia
cin de los sensores electroqumicos. Aunque el principio ciones vistas en la tecnologa electroqumica.
de medicin es idntico, los sensores se reducen a alambres La tecnologa ptica se ha aplicado a los sistemas de
minsculos ensamblados en una tarjeta de circuito impre gas en la sangre internados en un rgano. Los paquetes
so. La tarjeta especial tiene surcos grabados para separar fibropticos llevan la luz a sensores colocados en la punta
los componentes. Un material de goma especial que con de catteres y otros paquetes regresan la luz, permitiendo
tiene los componentes requeridos (de funcin similar a los que los cambios en la fluorescencia se midan en un cat
electrlitos de los macroelectrodos) est extendida sobre ter dentro del sistema arterial del paciente. El desarrollo
los sensores. Para reducir el volumen de muestra requeri comercial de sistemas internos ha estado limitado por la
do, se colocan varios sensores en una sola tarjeta pequea. probabilidad creciente de trombognesis y acumulacin
Estos sensores son desechables y su fabricacin resulta de protena en la membrana, al separar la muestra de los
menos costosa, lo que reduce el mantenimiento. tintes fluorescentes. Esta acumulacin impide la difusin
libre de la muestra en el compartimiento medidor.
Sensores pticos
Calibracin
Otra tecnologa para las mediciones de gas en la sangre se
basa en el hecho de que ciertos tintes fluorescentes reaccio La temperatura es un factor importante en la medicin de
nan predeciblemente con productos qumicos especficos, pH y gases en sangre. La ecuacin de Nernst especifica la
como 0 2, COz y H+. El tinte est separado de la muestra salida del voltaje esperada de una celda electroqumica a
358 PARTE II CORRELACIONES CLINICAS Y PROCEDIMIENTOS ANALITICOS
una temperatura dada. Si la temperatura del sistema de milimoles por litro de H 2C 0 2 es 0.0307. Si la temperatura
medicin cambia, la salida (voltaje) cambiar. La solubili o la composicin del plasma cambia (p. ej., un aumento
dad de gases en un medio lquido tambin depende de la en lpidos, en que los gases son ms solubles), la constante
temperatura: a medida que baja la temperatura, la solubi debe cambiar.
lidad del gas aumenta. Debido a que las mediciones de pH El contenido total de bixido de carbono ( c tC 0 2) es el
y de gas en la sangre son demasiado sensibles a la tempera bicarbonato ms el C 0 2 disuelto (cido carbnico) ms
tura, es fundamental que el electrodo del compartimiento el C 0 2 relacionado con protenas (carbamatos). Un ana
de la muestra se mantenga a una temperatura constante lizador de gas en sangre se aproxima a c tC 0 2 sumando
para todas las mediciones. Todos los analizadores de gas los valores del bicarbonato y el cido carbnico ( c tC 0 2 =
en la sangre tienen compartimientos del electrodo contro cH C 0 3- + [0.0307 X P C 0 2]).
lados por termostato a 37C 0.1. Algunos clnicos usan exceso de base para determinar el
El electrodo de pH suele calibrarse con dos disoluciones componente (metablico) no respiratorio de un desorden
amortiguadoras trazable a los estndares preparados por el acidobase del paciente. El exceso de base se calcula con un
N ational Institute ojStan dards and Technology (NIST). Tra algoritmo que utiliza el pH, el PCO, y la hemoglobina del
za b le significa por lo general que el valor real del calibra paciente. Un valor positivo (exceso de base) indica un exce
dor se ha determinado usando un estndar del NIST como so de bicarbonato o un dficit relativo de cido no carbni
referencia. Por lo comn, un calibrador est cerca de 6.8 y co y sugiere aicalosis (m etablica) no respiratoria. Un valor
el otro de 7.38 porque la mayor parte de los electrodos del negativo (dficit de base) indica un dficit de bicarbonato
pH producen un voltaje de 0 en este punto. Los calibra o exceso relativo de cidos no carbnicos y sugiere acidosis
dores se deben almacenar a la temperatura indicada y no (m etablica) no respiratoria. Sin embargo, la aicalosis o la
exponer al aire ambiente debido a los cambios del pH con acidosis no respiratoria indicadas pueden ser resultado de
la absorcin del COr alteraciones primarias o de mecanismos compensatorios.
La calibracin de cualquier analizador de gas en la san Por lo tanto, no deben usarse valores de exceso de base en
gre puede variar dependiendo del fabricante. Por lo gene la evaluacin del estado acidobase del paciente.
ral, dos mezclas de gas se utilizan para P C 0 2y P 0 2. Un
gas no tiene 0 2 para fijar el punto cero del electrodo de 0 2 Correccin de la temperatura
(que suele ser un punto estable). El mismo gas debe tener
casi 5% de C 0 2 porque ste es (potencial cero y estable) el Los valores de pH, P C 0 2 y P 0 2 son dependientes de
punto nulo para el electrodo de C 0 2. El otro gas establece la temperatura. Por conveniencia, todas estas mediciones
la ganancia (es decir, la variacin en la seal del electrodo se realizan a 37C. La pregunta sera: Cuando la tempe
relacionada con el cambio del analito). El gas puede tener ratura corporal del paciente difiere de 3 7 C, los valores
cualquier valor. de gas en la sangre deben corregirse a la temperatura real
Casi todos los instrumentos se calibran por s solos del paciente?. Aunque el software del instrumento de gas
(calibracin automtica a intervalos especificados) y estn en la sangre puede realizar de manera fcil la correccin,
programados para indicar un error en la calibracin si los datos pueden ser confusos porque se deben utilizar los
la seal electrnica del electrodo es inconsistente con el rangos de referencia apropiados p a ra la tem peratura del
valor previamente programado. Por ejemplo, si el valor pacien te para la interpretacin adecuada. Como referencia,
o los valores obtenidos durante la calibracin exceden los resultados suelen informarse a 37C cuando los valores
un lmite de tolerancia programado, se marcar un error tambin se dan a la temperatura real del paciente.
de desplazam iento a la fiora de la calibracin, y debern
tomarse acciones correctivas antes de que se analicen las ASEGURAMIENTO DE LA CALIDAD
muestras del paciente.
Consideraciones preanalticas
Parmetros calculados Las mediciones de gas en sangre, como todas las medi
ciones del laboratorio, estn sujetas a errores preanalti
Es posible calcular varios parmetros acidobase a partir cos, analticos, y posanalticos. Sin embargo, unas cuantas
de las mediciones de pEI y P C 0 2. Los fabricantes de los mediciones adicionales que son afectadas por errores
instrumentos de gas en la sangre incluyen algoritmos para preanalticos: las introducidas durante la recoleccin y el
realizar los clculos. Ningn parmetro calculado tiene transporte de las muestras antes del anlisis .2,4
uso universal; muchos mdicos tienen parmetros prefe En la figura 14-6 se describe el ciclo del aseguramiento
ridos para la identificacin de varias patologas. de la calidad. Los pasos incluidos en el rea analtica estn
El clculo de HCCfi- se basa en la ecuacin de Hender- bajo control directo del laboratorio. Debido a que gran
son-Hasselbalch. Puede calcularse cuando el pEI y el P C 0 2 parte del ciclo del aseguramiento de la calidad se encuen
son conocidos. Una suposicin bsica es que el pK' del tra fuera del laboratorio, el laboratorista debe tener un
sistema amortiguador de bicarbonato en plasma a 37C papel activo en la educacin de toda la gente involucrada
es 6 . 1. en el desarrollo de polticas y procedimientos para contro
La concentracin de cido carbnico se puede calcular lar todos los procesos del ciclo para asegurar la calidad.
usando el coeficiente de solubilidad del C 0 2 en plasma Slo el personal que tiene experiencia con el equipo y
a 37C. La solubilidad constante para convertir PCO , a la tcnica de obtencin, y que cuenta con conocimientos
CAPITULO 14 GASES EN LA SANGRE, pH, Y SISTEMAS AMORTIGUADORES 359
de las posibles fuentes de error puede manejar las mues Ciclo de aseguramiento de la calidad
tras para el anlisis del pH y de gas en la sangre. Debido del anlisis de gas en sangre
a que la toma de muestra puede ser dolorosa y ocasionar
la hiperventilacin en el paciente, lo que baja el P C 0 2 y Preanaltico Posanaitico
aumenta el pH, la capacidad de tranquilizar al paciente
es esencial. La eleccin del lugar (arteria radial, braquial,
femoral o temporal) suele ser una costumbre dentro de Evaluacin: plan de ^ Diagnstico
accin e interpretacin y accin
una institucin, dependiendo de la poblacin de pacien
tes predominantes (p. ej., pacientes peditricos, con que
madura, externos, etc.). La publicacin Procedures fo r the
C ollection o f A rterial Blood Specimens del National Com-
mittee for Clinical Laboratory Standards (NCCLS) es una
referencia excelente .4
Se recomienda el uso de muestras arteriales para los
estudios de pH y gas en la sangre. Sin embargo, pueden
usarse muestras de venas perifricas si no se estn eva
luando la funcin pulmonar o el transporte de O,. En el
caso de las muestras venosas, la fuente debe identificarse
de manera clara y deben incluirse los rangos de referen
cia (venosos) apropiados para la interpretacin de datos
con los resultados. Dependiendo del paciente, tal vez deba
usarse la sangre capilar en la medicin de pH y PCO,.
Aunque la correlacin con la sangre arterial es buena
para el pH y P C 0 2, los valores de P 0 2 capilar, aun con
calentamiento de la piel antes de obtener la muestra, no se
correlacionan bien con los valores arteriales de P 0 2 como Robert F. Moran
resultado de la exposicin de la muestra al aire ambiente. FIGURA 14-6. Ciclo de aseguramiento de la calidad del anlisis de
Se deben obtener muestras de sangre venosa central (arte gas en la sangre. (Reproducido con permiso de Robert F. Moran.)
ria pulmonar) para determinar el consumo de O ,, que se
calcula de la diferencia entre el contenido de O, de la san
gre arterial y la sangre arterial pulmonar multiplicada por rar la disolucin y la distribucin del anticoagulante de la
el rendimiento cardaco. heparina, y el transporte y el tiempo de almacenamiento
Entra las fuentes de error en la recoleccin y el manejo antes del anlisis. Para la interpretacin apropiada de los
de muestras de gas en la sangre se incluyen el dispositi resultados del gas en la sangre, se debe documentar el esta
vo recolector, la forma y concentracin de la heparina, la do del paciente cuando se toma la muestra en trminos de
velocidad del llenado de la jeringa, el mantenimiento del la ventilacin (en el aire ambiente o el O, suplementario),
ambiente anaerbico, la mezcla de la muestra para asegu- la temperatura y la postura.
360 PARTE II CORRELACIONES CLINICAS Y PROCEDIMIENTOS ANALTICOS
El dispositivo recomendado para la toma de muestras de general, se venden en ampolletas de cristal selladas que
sangre arterial es una jeringa plstica preheparinizada. Los contienen soluciones equilibradas con gases. El analista
tubos de recoleccin evacuados no son apropiados para gases puede estudiarlas, o pueden colocarse en un dispositivo
en la sangre. Las formas seca y lquida de la heparina son para que el instrumento realice el anlisis automtico en
anticoagulantes aceptables. Sin embargo, debido al potencial los intervalos programados. Algunos fabricantes ahora
para la dilucin de la muestra cuando se usan cantidades almacenan los mismos niveles de material de control lqui
excesivas y posible contaminacin de la heparina con aire do en una bolsa sellada que se coloca en el analizador para
ambiente, no se recomienda la heparina lquida .24 La sangre el anlisis automtico. Lo ideal sera que tales materiales
en la jeringa debe mezclarse con la heparina seca para evi resultaran estables y tuvieran una variacin mnima.
tar que se formen cogulos. Otra vez es importante realizar Hay controles lquidos disponibles en por lo menos tres
la mezcla adecuada de inmediato antes de que se inyecte o niveles, correspondientes a los valores bajo, esperado o
aspire la muestra dentro del analizador de gas en la sangre. normal y elevado para cada uno de los analitos medidos,
Aunque se recomiendan las sales del sodio y de litio de la que pueden incluir analitos adicionales, como sodio, pota
heparina para el anlisis del pH y gas en la sangre, existen sio, cloruro, lactato, calcio ionizado y magnesio, y gluco
otras formas: amonio, cinc, electrlito balanceado y calcio sa. La estabilidad de los materiales es variable, y stos son
titulado. La seleccin del tipo apropiado de heparina resulta susceptibles a la variacin de la temperatura en el alma
en especial importante con los instrumentos que combinan cenamiento y la manipulacin. Cada uno se debe usar de
anlisis de gas en la sangre y electrlito. Es importante con la manera descrita por el fabricante para eliminar errores
sultar la informacin del producto por parte del fabricante. de precisin causados por el manejo incorrecto del mate
El llenado lento de la jeringa puede ser causado por rial. Debido a que los materiales de control lquido tienen
un defecto en la unin de la jeringa con la aguja. Aunque matrices significativamente diferentes a la sangre fresca, el
una aguja demasiado pequea reduce el dolor y, por lo laboratorista debe estar consciente de que tal vez no detec
tanto, la probabilidad de arteriospasmo y hematoma, pue te los problemas que afectan las muestras de los pacientes,
de producir burbujas que afectan los valores de P C 0 2 y o que podra detectar errores originados por el manejo
P 0 2, adems de la hemolisis, que es importante cuando el incorrecto de los controles comerciales. Los controles
potasio se mide junto con el pH y los gases en la sangre. El acuosos, los materiales de control de calidad ms usados,
mantenimiento de un entorno anaerbico es crtico para tienen una solubilidad baja de 0 2, lo que los hace sensi
obtener resultados correctos. bles a los factores que afectan la determinacin de P 0 2.
El tiempo de transporte de la muestra debe ser m ni Los controles acuosos deben estar a temperatura ambiente
mo. Debido a que el enfriamiento en agua helada de las para el anlisis. Las recomendaciones del fabricante deben
muestras contenidas en las jeringas de plstico puede cau seguirse de cerca o tal vez los valores de P 0 2 no sern con
sar cambios significativos en los valores de P 0 2, las pautas fiables. Los controles con contenido de hemoglobina y los
de la NCCLS recomiendan que las muestras se guarden a basados en emulsin tienen una solubilidad de 0 2incre
temperatura ambiente y se analicen en menos de 30 m in .2 mentada y resisten mejor los cambios en el O,
Debido a la posibilidad de error preanaltico, la m ejor prc La tonom etra es el equilibrio de un lquido con los gases
tica consiste en analizar la muestra lo ms rpido posible. de concentracin conocida y bajo condiciones controla
Debido a que la obtencin y el manejo de la muestra das, como temperatura constante, presin baromtrica,
son fuente de muchos posibles errores en el anlisis de humidificacin.2Es una manera relativamente econmica
gases en la sangre, es necesario que se elaboren con cui de comprobar la precisin y la exactitud de las mediciones
dado los procedimientos y las polticas, y que se vigilen de P C 0 2 y PO , cuando la sangre entera o materiales acuo
para asegurar la calidad. Ningn producto de control de sos se miden por tonos. Cuando se utiliza sangre entera,
calidad puede supervisar los aspectos preanalticos del a sta se le considera la referencia del procedimiento para
anlisis de gases en la sangre. establecer la exactitud para el PCO, y el P 0 2; sin embar
go, se han documentado muchos problemas, que ocasiona
Evaluaciones analticas: control de calidad que los laboratorios consideren a la medicin por tonos
demasiado incmoda y tardada.
y prueba de eficiencia Otro mtodo son los ensayos duplicados que usan dos
El control de calidad para los sistemas de sangre slo eva o ms instrumentos para el anlisis simultneo de una
la la fase analtica del proceso de prueba. Aunque un muestra del paciente. Las com probaciones delta, o la dife
laboratorio trate de elegir un material de control que im i rencia en los valores obtenidos en los dos instrumentos,
te lo ms posible a las muestras de pacientes reales, esto a menudo detectan los problemas que podran pasarse
es imposible para los gases de la sangre. Por tradicin, el por alto con la rutina del control de calidad. Sin embar
control de calidad para los gases de la sangre ha incluido el go, debe aplicarse un cuidado extremo para expeler el aire
anlisis de controles lquidos comerciales, muestras para durante la rplica del anlisis para asegurar valores con
medir por tono, y duplicado de muestras de pacientes .2 fiables de PO,. La diferencia permisible en la realizacin
Todos estos mtodos tienen limitaciones. El mtodo ideal duplicada en muestras de pacientes divididas debera ser
incluira cierta combinacin de las tres. ms estrecha que la observada con controles de lquidos
Los m ateriales com erciales de control liquido son la base comerciales. Las discrepancias entre los resultados no pro
de casi todas las prcticas del control de calidad .5 Por lo porcionan indicios sobre cul punto de datos es incorrecto
CAPTULO 14 GASES EN LA SANGRE, pH, Y SISTEMAS AMORTIGUADORES 361
o cul instrumento est funcionando de manera incorrec calidad asegura la consistencia interna. El buen funciona
ta. Aunque es improbable que dos instrumentos tengan miento de un programa de pruebas de eficiencia asegura la
de forma simultnea el mismo error, esto no siempre es ausencia de sesgo significativo en relacin con otros labo
verdad. Por lo tanto, el mtodo de los ensayos duplicados ratorios, y confirma la validez de los resultados de labora
no puede usarse como nico mtodo de control de cali torio del paciente. Si un analizador individual no produce
dad. Utilizado junto con controles lquidos o tonometra, los resultados de prueba de eficiencia consistentes con los
puede ser una tcnica til para detectar errores, y tambin de otros laboratorios similares (que usan el mismo mtodo
para detectar y solucionar fallas en los instrumentos. e instrumentos) o si las diferencias entre los valores cam
Otro mtodo, en especial para dispositivos de prueba bian con el tiempo, la sospecha del funcionamiento del
pequeos usados en el punto de inters, es el control de instrumento est garantizada.
calidad electrnico, que incluye la sustitucin de una revi
sin electrnica para evaluar la lectura del instrumento, su
Interpretacin de los resultados
electrnica, o ambas, en lugar del anlisis de una muestra
de control. Aunque la comprobacin de la electrnica del Los laboratoristas profesionales necesitas ciertos cono
instrumento es esencial, sta no es suficiente para asegurar cimientos, actitudes y habilidades para obtener y ana
que todo el proceso analtico est funcionando de forma lizar las muestras para pH y gases en la sangre. Aunque
correcta. Es necesario usar el control de calidad electr el mdico del paciente asimila todos los resultados (de
nico junto con otros procedimientos para monitorear la laboratorio, radiologa, medicina nuclear, resultados qui
calidad del proceso de prueba total. rrgicos de la patologa, etc., jun to con la historia clnica
Un esquema eficaz de control de calidad tambin incluye del paciente) el personal del laboratorio debe evaluar de
la revisin por parte de colegas y el anlisis duplicado de la inmediato los resultados de los pacientes y hacer juicios
muestra (en el mismo instrumento) para reducir al mnimo preliminares sobre su pertinencia (es decir, los resultados
las insuficiencias de los controles comerciales que no son tienen sentido?) La evaluacin simple de los datos puede
idnticas a la sangre. La revisin de colegas la proporciona revelar un problema del instrumento (posible burbuja en
el fabricante de los controles. La exactitud se estima al com el compartimiento de la muestra o el enchufe de fibrina)
parar el valor medio del laboratorio obtenido en un lote de o un posible problema en el manejo de la muestra (PO,
controles al valor promedio (la media de las medias) obte inconsistente con resultados anteriores y los niveles ins
nido por muchos laboratorios en el mismo lote. La infor pirados actuales de F i 0 2). El uso del conocimiento ahorra
macin es similar a la prueba de eficiencia pero se hace de tiempo. La capacidad de correlacionar datos reduce rpido
manera continua. Adems de la desviacin estndar y del la prdida de tiempo y previene errores.
coeficiente de variacin calculados de datos acumulados de
control de calidad, la imprecisin se puede estimar por el
RESUMEN
anlisis duplicado de las muestras del paciente elaboradas
a travs de los das laborables. Los cambios en el funciona Las mediciones arteriales de pH y gas en la sangre se orde
miento del instrumento que puedan afectar la atencin del nan para facilitar el cuidado y el tratamiento de pacientes
paciente se detectan rpido usando este esquema. en estado crtico. El cuerpo mantiene el balance acidobase
Sin importar el mtodo que se use, las necesidades del a travs de varios sistemas amortiguadores. En el laborato
control de calidad del laboratorio de gas en la sangre con rio, el sistema amortiguador bicarbonato-cido carbnico,
trastan de forma fuerte con las de un laboratorio general, que trabaja en conjunto con los otros sistemas amortigua
que analiza muchas muestras de pacientes como un grupo dores del cuerpo y que refleja el estado de stos, se utiliza
e incluye muestras de control mltiple en cada corrida. para evaluar el estado acidobase. Las mediciones de pH y
En el laboratorio de gas en la sangre, la naturaleza crtica PCO, evalan el estado acidobase del paciente. Para dife
de las mediciones o el volumen de la muestra del pacien renciar las condiciones metablicas (no respiratorias) de
te no permiten siempre la repeticin del anlisis, si exis las respiratorias, a menudo es til evaluar parmetros cal
ten problemas. Por lo tanto, el laboratorio de gases en la culados, como H C 0 3 y exceso de base.
sangre debe realizar control de calidad prospectivo porque La medicin de PO, tambin es importante. En
los instrumentos deben estar precalificados para asegurar sangre arterial, evala de manera directa la capacidad de
su funcionamiento adecuado, antes de que la muestra del los pulmones de oxigenar la sangre. Se utiliza como una
paciente llegue para su anlisis. medicin indirecta del estado de la oxigenacin del teji
La participacin en encuestas externas, entre laborato do del cuerpo. Sin embargo, esta sola medicin puede ser
rios o los programas de prueba de eficiencia ayudan en la engaosa. Por ejemplo, un paciente anmico tendr con
identificacin y el monitoreo de problemas de exactitud .6 tenido y capacidad de O, disminuidos y un PO, normal,
Comparaciones continuas de resultados por medio de ex siempre y cuando los sistemas cardiovasculares y pulmo
menes de competencia aseguran que los errores sistem nares estn intactos. Por lo tanto, se utilizan otros par
ticos (exactitud) no aumenten poco a poco y no pasen metros en conjunto con P 0 2. stos incluyen FO,Hb, la
desapercibidos por procedimientos internos de control identificacin de dishemoglobinas y los parmetros calcu
de calidad. Un riguroso programa interno de control de lados de contenido y capacidad de 0 2.
362 PARTE II CORRELACIONES CLNICAS Y PROCEDIMIENTOS ANALTICOS
PREGUNTAS DE REPASO
1. La presencia de dishemoglobinas har que un porcen 8. Los resultados de gas en la sangre de un paciente son:
taje calculado de S 0 2 est falsamente (elevado, dismi pH, 7.48; PCO ,, 54 mmHg; H C 0 3~, 38 mmol/L. Estos
nuido) y un valor de porcentaje de SpO, por oxmetro valores son constantes con:
de pulso est falsamente (elevado, disminuido): a) Alcalosis respiratoria compensada.
a ) Elevado, elevado. b) Alcalosis no respiratoria compensada.
b) Disminuido, disminuido. c) Alcalosis respiratoria no compensada.
c) Elevado, disminuido. d) Alcalosis no respiratoria no compensada.
d) Disminuido, elevado.
9. En el sistema circulatorio, el bicarbonato deja los gl
2. El anticoagulante de eleccin para las mediciones de bulos rojos y entra al plasma a travs de un mecanis
gas en la sangre arterial e s _______ en estad o_______ . mo de intercambio c o n __________ para mantener la
a) EDTA; seco. electroneutralidad.
b ) Oxalato de potasio; lquido. a) cido carbnico.
c) Citrato de sodio; seco. b) Lactato.
d) Litio heparina; seco. c) Cloruro.
d) Sodio.
3. A un pH de 7.10, la concentracin de H+ es igual a:
a) 20 nmol/L. 10. La hipoventilacin puede compensarse por:
b) 40 nmol/L. a) Alcalosis mezclada.
c) 60 nmol/L. b) Acidosis mezclada.
d) 80 nmol/L. c) Acidosis no respiratoria.
d) Alcalosis no respiratoria.
4. Los riones compensan la alcalosis respiratoria por
(excrecin, retencin) de bicarbonato y excrecin de 11. La capacidad del enlace oxgeno hemoglobina para
NaH 2P 0 4 (incrementada, disminuida). una muestra que est 100% saturada con 0 2 tiene un
a) Excrecin, incrementada. valor total de hemoglobina de 12 g/dl es casi:
b) Retencin, incrementada. a) 4 mi de 0,/dl.
c) Ejecucin, disminuida. b) 8 mi de O,/di.
d) Retencin, disminuida. c) 17 mi de O,/di.
d) 34 mi de 0 2/dl.
5. La relacin normal de cido carbnico a bicarbonato
en sangre arterial es: 12. La concentracin del cido carbnico en plasma san
a) 7.4:6.1. guneo es igual a:
b) 1:20 . a) El pK aparente del cido carbnico, 6.1, ms el
c) 0.003:1.39. valor de la PCOz en mmHg.
d) 20 : 1. b) 0 .0 3 0 7 mmol-1 veces el valor de P C 0 2 en mmHg.
c) El valor de P C 0 2 en mmHg ms el valor de H C 0 3
6. Cuando la sangre arterial de un paciente normal se
en mmHg.
expone al aire ambiente:
d) La concentracin del bicarbonato dividida por el
a) PCO, decrece; P 0 2 aumenta.
valor de P C 0 2 en mmHg.
b) P C 0 2aumenta; P 2 decrece.
c) P C 0 2decrece; P 0 2 decrece. 13. El contenido de oxgeno en sangre refleja:
d) P C 0 2aumenta; PO, aumenta. a) 0 2Hb solamente.
b) 0 2 disuelto en plasma sanguneo.
7. Los resultados de gas en la sangre de un paciente son:
c) El valor de PO,.
pH, 7.37; P C 0 2, 75 mmHg; H C 0 3, 37 mmol/L. Estos
d) El valor de hemoglobina total del paciente.
valores son consistentes con:
e) Todas las anteriores.
a) Acidosis respiratoria compensada.
b) Acidosis no respiratoria compensada.
c) Alcalosis respiratoria no compensada.
d) Alcalosis no respiratoria no compensada.
CAPTULO 14 GASES EN LA SANGRE, pH, Y SISTEMAS AMORTIGUADORES 363
CAPTULO
151
Oligoelementos
John G. Toffaletti
CONTENIDO DE L CAPTULO
O B J E T I V O S
Al completar este captulo, el laboratorista clnico Indicar las funciones biolgicas de los oligoele
podr: m entos esenciales.
Definir los conceptos de m etaloprotena, metalo- A nalizar la importancia clnica de los oligoelem en
enzim a, cofactor, estado de oxidacin, oligoele- tos y las consecuencias de los estados de deficien
mento esencial y ultraoligoelementos. cia.
Describir la absorcin, el transporte y la excrecin Exam inar consideraciones de la recoleccin de
de los oligoelem entos esenciales. muestras y determinacin en laboratorio.
T R M I N O S C L A V E
364
CAPITULO 15 OLIGOELEMENTOS 365
Los oligoelementos que se analizan en este captulo poseen nes bioqumicas y su importancia clnica en los estados
cierta importancia bioqumica, sea menor o mayor. Por lo de enfermedad o la toxicidad. Por ltimo, se analizan el
general, se relacionana con una enzima (m etaloen zim a) u uso y las tcnicas para la determinacin en laboratorio. En
otra protena (m etaloprotena) como componente esencial el cuadro 15-2 se resume una parte de esta informacin
o cofactor. A menudo las deficiencias deterioran una o ms sobre oligoelem entos esenciales.
funciones bioqumicas y las concentraciones excesivas se
vinculan cuando menos con cierto grado de toxicidad
(cuadro 15-1). Los oligoelem entos, como el hierro, cobre
CUADRO 15-1. OLIGOELEMENTOS ESENCIALES
y cinc, se encuentran en concentraciones de mg/L. Por su
EN QUMICA CLNICA_____________________
parte, los ultraoligoelementos, como el selenio, cromo y ESENCIALES ESENCIALES NO ESENCIALES
manganeso, aparecen en concentraciones menores a pg/ COMPROBADOS PROBABLES HASTA LA FECHA
L. A un elemento se le considera esencial si la deficien
Oligoele-
cia del mismo altera un proceso bioqumico o funcional
mento Hierro
y su reemplazo corrige dicha alteracin. La ingesta baja, Cinc
la absorcin defectuosa, el aumento de la excrecin y las Cobre
anormalidades genticas son ejemplos de afecciones que
Ultraoligo-
tal vez conduzcan a la deficiencia de oligoelementos. La
elemento Manganeso Nquel Aluminio
Organizacin Mundial de la Salud estableci los reque Cobalto Vanadio Arsnico
rimientos dietticos de los nutrientes como la cantidad Selenio Estao Cadmio
mnima de nutriente requerida para conservar el funcio Molibdeno Flor
namiento y la salud ptimos. Cromo Oro
En este captulo se muestra informacin sobre los oli Yodo Plomo
goelementos en relacin con la absorcin, el transporte, Mercurio
la distribucin y la eliminacin. Se describirn las funcio Silicio
CONSIDERACIONES GENERALES DE LA ral abarca tanto individuos con deficiencia de hierro como
RECOLECCIN, EL PROCESAMIENTO Y LA aquellos con estado adecuado, existe debate en torno a si
los suplementos dietticos contribuyen al exceso de hierro
DETERMINACIN EN LABORATORIO DE LOS
en personas con concentraciones adecuadas .4'3
OLIGOELEMENTOS
Las muestras para el anlisis de oligoelementos deben Absorcin del hierro
recolectarse con atencin escrupulosa en detalles como el
anticoagulante, los aparatos para la recoleccin y el tipo La absorcin de hierro del intestino es el medio principal
de muestra (suero, plasma o sangre). Debido a la baja con para regular la cantidad que se encuentra dentro del cuer
centracin de las muestras biolgicas y la presencia ubicua po. De hecho, suele absorberse slo cerca de 10% de 1 g/
en el medio ambiente, se requieren medidas extraordina da de hierro diettico. La absorcin del hierro se controla
rias para prevenir la contaminacin de la muestra. Esto en varios sitios. Para que las clulas intestinales lo absor
incluye el uso de dispositivos especiales de muestreo y ban, es necesario que se encuentre en estado de oxidacin
recoleccin, cristalera limpiada para la ocasin, y agua y +2 (ferroso) y unido a la protena. El Fe +3 constituye la for
reactivos de elevada pureza. Es necesario evaluar con gran ma predominante de hierro en los alimentos. Por tanto,
cuidado la seleccin de agujas, tubos de recoleccin de en primer lugar debe reducise a Fe +2 a travs de agentes
sangre evacuada, anticoagulantes y otros aditivos, agua y como la vitamina C para absorberlo. En la clula mucosal
intestinal, el Fe +2 es enlazado por la apoferritina, y luego
otros reactivos, pipetas y tazas de muestra para su uso en
anlisis de oligoelementos y ultraoligoelementos. se oxida por la ceruloplasmina para que el Fe +3 se una a
La metodologa e instrumentacin deben contar con la ferritina. De all, el hierro se absorbe en la sangre por la
sensibilidad y especificidad analticas importantes debido apotransferrina, que se convierte en transferrina mientras
a las concentraciones extremadamente bajas de los oligo se encuentra unida a dos iones Fe+3. En plasma, la transfe
rrina transporta y libera el Fe a la mdula, donde se incor
elementos encontrados en lquidos corporales y la seme
janza fisicoqumica de algunos de ellos. Durante muchos pora a la hemoglobina de los glbulos rojos. Despus de
alrededor de cuatro meses en la circulacin, los glbulos
aos, el instrumento utilizado con mayor frecuencia en
los anlisis de oligoelementos ha sido el espectrmetro de rojos se degradan por el bazo, el hgado y los macrfagos,
que devuelven el Fe a la circulacin, donde se une y trans
absorcin atmica, a menudo con atomizacin sin flama.
porta por la transferrina para la reutilizacin (fig. 15-1).
En el cuadro 15-2 se enumeran los rangos de referencia
Es posible ajustar la absorcin del hierro para cumplir
de oligoelementos y ultraoligoelementos.
con las necesidades actuales. La absorcin y la capacidad
HIERRO de transporte del hierro tal vez aumente en afecciones
como deficiencia de hierro, anemia o hipoxia. En la clula
Distribucin del hierro mucosal de un individuo con concentracin adecuada de
De los 3 a 5 g de hierro que se observan en el cuerpo, entre 2 hierro en plasma, el hierro se asla por la ferritina. El breve
y 2.5 se encuentran en la hemoglobina, contenida sobre todo perodo de vida de una clula mucosal intestinal da como
en los glbulos rojos tanto de la sangre como de precursores resultado prdida de ferritina cuando la clula se libera .3
de la mdula. Una cantidad moderada de hierro (alrededor
de 130 mg) est en la mioglobina, la protena transportadora Transporte del hierro
de oxgeno del msculo. Una cantidad pequea (8 mg) pero Cuando la concentracin de hierro intracelular es baja, una
muy importante se encuentra en el tejido, donde el hierro protena regulatoria inhibe la sntesis de apoferritina y pro
se combina con varias enzimas que requieren el hierro para mueve la sntesis del receptor de transferrina.6,7 El hierro
realizar su actividad completa. Estas incluyen peroxidasas, recin absorbido, o hierro liberado de la ferritina, pasa de Fe +2
citocromos y muchas enzimas del ciclo de Krebs. El hierro a Fe+3por la ceruplasmina, transferido a la apotransferrina en
se almacena, tambin, como ferritina y hemosiderina, en la clula, y luego se libera a la circulacin como transferrina.3
especial en la mdula, el bazo y el hgado. Esta concentra En condiciones normales, tanto la ferritina intracelular como
cin crtica de hierro tal vez sea la primera que comenzar la transferrina circulatoria se saturan slo de manera parcial.
a disminuir en estados de deficiencia de hierro .1 Slo 3 a 5 La cantidad pequea de ferritina circulatoria consta, en su
mg de hierro se encuentran en el plasma relacionado con mayor parte, de apoferritina que contiene poco hierro .9 La
transferrina, albmina y hemoglobina libre .2 transferrina libera hierro a tejido, como la mdula, para la
sntesis de hemo por eritrocitos. En la ubicacin tisular, los
Requisitos dietticos de hierro receptores de transferrina proporcionan sitios de reconoci
En un hombre adulto, la prdida media de 1 mg de hie miento para la unin y el transporte dentro de la clula.
rro por da se reemplazar con las fuentes de la dieta .3Las
mujeres embarazadas o premenopusicas y los nios tie Excrecin del hierro
nen mayores requerimientos de hierro, que a menudo se La mayor parte de la pequea cantidad de hierro que se
obtienen a travs de los suplementos dietticos. En este suele perder cada da est contenida en las clulas epitelia
sentido, la Administracin de Frmacos y Alimentos de les y rojas excretadas en la orina o liberadas en las heces.
Estados Unidos emiti sus estndares para los suplemen Con cada ciclo menstrual, las mujeres pierden alrededor
tos alimenticios. Sin embargo, ya que la poblacin en gene de 20 a 4 0 mg de hierro.
CAPTULO 15 OLIGOELEMENTOS 367
Ceruloplasmina
Transferrina (Fe+3)2
Ferritina
(Fe+3)
FIGURA 15-1. Rutas para ei transporte y
Mdula Clulas rojas' uso del hierro en tejidos, clulas y sangre.
Hemoglobina (Fe Ntese que (1) los agentes reductores
promueven la conversin de Fe+3 a Fe*2,
Hgado, vaso, y los promotores de la ceruloplasmina la
macrfagos oxidacin de Fe+2 a Fe+3 y (2) las clulas
rojas se degradan luego de alrededor de
Hemo -----------
cuatro meses en la circulacin sangunea
/ \ ' ' (Ferritina) y se metabolizan por los macrfagos, el
Bilirrubina, etc. Fe+3 - bazo y el hgado.
Funciones bioqumicas del hierro cin de energa como ATP.3 La peroxidasa y la catalasa son
enzimas que contienen hierro. stas convierten al poten
El Fe +2 es un componente esencial de la hemoglobina. Per cialmente peligroso perxido de hidrgeno en agua. La
mite que sta se una de manera reversible con el oxgeno tiroperoxidasa incorpora el yoduro dentro de precursores
en el pulmn y que lo libere al tejido. A medida que el de hormona en la glndula tiroides.
oxgeno se libera en el tejido, la hemoglobina se enlaza
al bixido de carbono y luego lo libera al pulmn, donde
se expulsa por ventilacin. El hierro debe permanecer en
Trastornos clnicos de la deficiencia de hierro
estado Fe +2para que la hemoglobina transporte el oxge La deficiencia de hierro representa uno de los trastornos
no. Si el hierro se oxida a Fe*3, la hemoglobina se vuel ms frecuentes que se conocen: 15% de la poblacin mun
ve metahemoglobina no funcional. Es posible que el Fe *3 dial la padece. Entre los individuos con mayor riesgo que
pase de nuevo a Fe +2 por la reductasa de la metahemo el promedio de anemia por deficiencia de hierro se inclu
globina. La mioglobina proporciona mayor acidez (iones yen embarazadas, nios y adolescentes, y mujeres en edad
de H+) y PCOz en el entorno tisular para mejorar la libe reproductiva .310 El aumento de la prdida de sangre, la dis
racin de oxgeno de la hemoglobina. Adems, facilita la minucin del consumo de hierro en la dieta o el descenso
difusin del oxgeno en el tejido porque se une al oxgeno en la liberacin de ferritina tal vez conduzca a deficiencia
con mayor afinidad que la hemoglobina. La disminucin de hierro. Por lo general, la reduccin de las reservas de
de mioglobina causada por deficiencia de hierro tal vez hierro precede tanto a la reduccin en el hierro circulante
reduzca la difusin del oxgeno dentro del tejido .5 como a la anemia, segn se demuestra por una menor cifra
Los citocromos son esenciales para el transporte de de glbulos rojos, concentracin media de hemoglobina
electrones en la cadena respiratoria, con el ciclo reversible corpuscular y glbulos rojos microcticos (cuadro 1 5-3).3
de Fe *3 a Fe*2, lo que al final da como resultado la produc
La disminucin del hierro srico y el aumento de trans- sis ,13'14 dao al cido desoxirribonucleico (DNA ),1215 car-
ferrina/CTFH son indicios clsicos de deficiencia de hie cinognesis 16,17 y enfermedades neurodegenerativas .1819 El
rro. Sin embargo, la concentracin de ferritina srica se ha Fe+3, liberado de las protenas de unin, tal vez aumente la
vuelto la prueba ms sensible y confiable para confirmar produccin de radicales libres para ocasionar dao oxida-
esta afeccin. tivo. En individuos con exceso de hierro y talasemia que
se tratan con quelatos para unir y movilizar el hierro, el
Trastornos clnicos del exceso de hierro consumo de cido ascrbico quiz promueva en realidad
la generacin de radicales libres . 20
Por lo general, la sobrecarga de hierro se origina por una
absorcin excesiva anormal proveniente de una dieta nor
Evaluacin en laboratorio del estado de hierro
mal. En conjunto, a los estados de sobrecarga de hierro se
les agrupa como hemocromatosis, con o sin dao tisular. La Es posible evaluar los trastornos del metabolismo del hie
hemosiderosis se utiliza para designar de manera especfica rro a travs de las siguientes mediciones: volumen celular
un problema de exceso de hierro, segn se demuestra por empacado, hemoglobina, concentracin e ndices de gl
el aumento de hierro srico y CTFH o transferrina, pero sin bulos rojos, hierro total y CTFH, saturacin porcentual,
dao tisular comprobable. La hemocromatosis hereditaria transferrina y ferritina. Los resultados esperados se esbo
se debe a un defecto gentico que causa acumulacin de hie zan en los cuadros 15-3 y 15-4.
rro en el tejido, afecta la funcin heptica y a menudo con Una prueba de laboratorio reciente para evaluar el esta
duce a hiperpigmentacin de la piel. Aunque la elevacin do de hierro es la medicin de los receptores de transfe
del hierro srico y la transferrina es caracterstica de las eta rrina sricos (TrfR ciculatorios). En caso de deficiencia de
pas iniciales de hemocromatosis, la ferritina srica aumenta hierro, la cantidad de estos receptores aumenta; en caso
de manera constante con la progresin de la enfermedad, de exceso, disminuye .21 Aunque algunos manifiestan la
a menudo a niveles tan elevados que el trastorno se vuelve elevada confiabilidad de esta prueba en la deteccin de
grave. Algunas afecciones relacionadas con hemocromatosis la deficiencia de hierro, otros encuentran que es menos
grave incluyen diabetes mellitus, artritis, arritmia cardaca o sensible que la ferritina srica .1
cardiopata, cirrosis, hipotiroidismo, impotencia y cncer de
hgado. El tratamiento abarca flebotoma teraputica o admi Contenido de hierro total (hierro srico)
nistracin de quelatos, como la deferoxamina. En el caso de
atransferrinemia, es posible administrar transferrina.11 La medicin de la concentracin de hierro srico se refiere de
manera especfica al Fe +3unido a la transferrina, no al hierro
que circula como hemoglobina libre en el suero. La muestra
Papel del hierro en el dao tisular
se puede recolectar como suero sin anticoagulante o como
El hierro llega a desempear un papel de prooxidante al plasma con heparina. Oxalato, citrato o cido etilenodiami-
contribuir a la peroxidacin de lpidos ,1213 aterosclero notetraacticos se unen a iones de Fe y son anticoagulantes
inaceptables. Se prefiere el muestreo temprano matutino La ferritina se mide en suero a travs de mtodos inmu-
debido a la variacin diurna en la concentracin de hierro. noqumicos, como IRMA, ELISA y tcnicas quimiolumi-
Se deben rechazar las muestras con hemolisis visible. niscentes. Varios fabricantes proporcionan equipos para
A las determinaciones espectrofotomtricas se les adap medir la ferritina srica, sea por medios manuales o auto
t el anlisis automatizado. Por lo general, estos procedi matizados. En caso de anemia por deficiencia de hierro, la
mientos siguen los siguientes pasos: el Fe +3 se libera de las ferritina disminuye; en caso de exceso y hemocromatosis,
protenas de unin por acidificacin, se reduce a Fe +2 por aumenta. Con frecuencia la ferritina se eleva en muchos
ascorbato o un agente reductor similar y se complementa otros trastornos, como infecciones crnicas, malignidad y
con un reactivo de color, como ferrocina, fereno o batofe- hepatitis viral.
nantrolina.
COBRE
Capacidad total de fijacin del hierro
Requerimientos dietticos de cobre
La capacidad total de fijacin del hierro (CTFH) se refiere a
la cantidad de hierro que se une por transferrina saturada Las fuentes importantes de cobre incluyen mariscos, hga
y otras protenas menores de enlace de hierro presentes do, nueces y legumbres .22 Al parecer la ingesta adecuada
en la muestra de suero o de plasma. Por lo general, cerca de cobre se encuentra en el rango de 1.5 a 3 .0 mg/dl en
de una tercera parte de los sitios de unin de hierro en adultos, aunque la mayor parte de las dietas contiene una
transferrina estn saturados. La CTFF1 se calcula a partir menor cantidad .23
de la medicin directa de la transferrina srica mediante la
siguiente ecuacin: Absorcin, transporte y excrecin de cobre
CTFH (pg/dl) = transferrina srica (mg/dl) X 1.2521 Los intestinos desempean un papel importante en la
(Ec. 15-1) regulacin del cobre, con absorcin modulada por la nece
sidad, lo que da como resultado un ndice de absorcin de
Una pequea proporcin de hierro srico se enlaza por 55 a 75%. Tanto el cinc como el hierro compiten con el
otras protenas. Por tanto, en esta ecuacin se tiende a cobre en la absorcin intestinal .22'24 El cobre absorbido se
subestimar un poco la CTFH. Esta diferencia es de poca o une con la albmina o forma complejo con los residuos de
nula importancia clnica. histidina a medida que se transporta al hgado, donde se
La CTFH se determina al agregar suficiente Fe +3 para almacena en forma de cuproprotenas. Aunque una can
saturar los sitios de unin en la transferrina, con el exce tidad pequea de cobre circulante se une a la albmina
so de hierro eliminado al aadir MgCOa, para precipitar y transcuprenas, la mayor parte se incorpora dentro de
cualquier Fe +3 remanente en la solucin. Despus de la ceruloplasmina. sta se sintetiza en el hgado y tiene acti
centrifugacin para separar el Fe +3 precipitado, se analiza vidad ferroxidasa, que convierte Fe +2 a Fe +3 a medida que
la solucin flotante que contiene el hierro soluble ligado a se incorpora a la transferrina .25,26 Adems, la ceruloplas
las protenas para determinar el contenido de hierro total. mina es un reactivo de fase aguda, por lo que las concen
ste es la CTFH, que va de alrededor de 250 a 425 pg/dl. traciones elevadas rescatan radicales de oxgeno .27
El cobre se elimina sobre todo por excrecin fecal como
cobre diettico sin absorber y cobre contenido en secre
Saturacin porcentual
ciones biliares e intestinales. Menos de 3% del cobre de la
La saturacin porcentual, a la que tambin se le denomina dieta se pierde en orina y sudor .25
saturacin de transferrina, es la proporcin de hierro sri
co en la CTFH, que se calcula de la siguiente manera: Funciones bioqumicas del cobre
% de saturacin = hierro total (pg/dl)/CTFH (pg/dl) X 100% Una funcin importante del cobre es como componente
(Ec. 15-2) de las enzimas implicadas en reacciones redox, con varias
reacciones que implican oxgeno. Estas metaloenzimas
Su rango normal es de alrededor de 20 a 50% , pero
constan de ceruloplasmina, oxidasa del citocromo c, supe-
vara con la edad y el sexo (cuadro 15-4).
rxido dismutasa, dopamino-(3-hidroxilasa, trosinasa y
oxidasa de ascorbato. La ceruloplasmina, como ya se men
Transferrina y ferritina cion, tiene actividad de ferroxidasa (fig. 15-1). La oxida
La transferrina se mide a travs de mtodos inmunoqu- sa de citocromo c contiene dos grupos hemo y dos tomos
micos, como la nefelometra. En caso de deficiencia de de cobre y cataliza la reduccin del oxgeno a agua en el
hierro, la transferrina o CTFH aumenta; en caso de exce ltimo eslabn de la cadena de transporte de electrones. El
so y hemocromatosis, disminuye. Adems, la transferrina superxido dismutasa (SOD), que contiene cobre y cinc,
(CTFH) disminuye en presencia de infecciones crnicas y juega una funcin clave de defensa antioxidante al con
malignidades (cuadro 15-3). A la transferrina se le valora vertir los radicales O ,' altamente reactivos a 0 2, y H ,0 2.
sobre todo como indicador del estado nutricional. Al igual La tirosinasa participa en la produccin de melanina. La
que una protena en fase aguda negativa, su concentracin dopamino-(3-hidroxilasa es importante en el metabolismo
disminuye en afecciones inflamatorias. de la catecolamina .22
370 PARTE II CORRELACIONES CLNICAS Y PROCEDIMIENTOS ANALTICOS
mtica, siendo esencial para ms de 3 00 enzimas. Por lo las enzimas fosfatasa alcalina y anhidrasa carbnica tam
general, es un componente integral del sitio activo de la bin son indicadores tiles del estado del cinc.
enzima. La fosfatasa alcalina, la deshidrogenasa del alco
hol y la anhidrasa carbnica requieren cinc. Debido a que COBALTO
la actividad de la anhidrasa carbnica es alta en eritrocitos,
el agotamiento del cinc conduce a menudo a la disminu La nica funcin esencial conocida del cobalto es como
cin tanto de la actividad de esta enzima como de los nive constituyente de la vitamina B12, que est implicada en el
les de cinc en los eritrocitos. Las polimerasas del DNA y metabolismo del folato y la eritropoyesis. Aunque es posible
del RNA que requieren cinc y sus iones son esenciales para absorber las sales del cobalto por el mismo mecanismo que
mantener la conformacin estructural apropiada del DNA. el hierro, an existen muchas preguntas sobre su metabo
Entre las otras funciones importantes, las enzimas del cinc lismo y utilizacin. Al igual que con muchos otros oligoele
son esenciales para el crecimiento, la curacin de heridas, mentos, el cobalto tiene efectos txicos a dosis elevadas.24 El
la integridad del tejido conectivo, la funcin reproductiva, mtodo ms frecuente de medicin es la absorcin atmica.
el sistema inmunitario y la proteccin contra los daos
por radicales libres .2437 CROMO
Debido a su amplio uso industrial en aleaciones metlicas,
Deficiencia y toxicidad del cinc galvanoplastia metlica, tintas y curtido de cuero, el cro
Al parecer la dieta escasa de cinc constituye la causa principal mo es habitual en el medio ambiente. Se presenta tanto de
de deficiencia de cinc en todo el mundo, aunque las dietas manera natural como en desperdicios industriales. Aunque
altas en fibra o fosfato tambin estn relacionadas con dicha llega a existir en una cantidad grande poco habitual de esta
deficiencia.24Es posible que la administracin de esteroides o dos de oxidacin, slo los iones +3 y +6 estn presentes en
agentes quelantes de metal conduzca a deficiencia de cinc. sistemas vivientes. El ion +6 es mucho ms txico que e l +3.
Otras causas probables son los sndromes de malabsorcin Las carnes y los granos son fuentes relativamente ricas
Gl y la prdida urinaria por varios trastornos. A menudo las en cromo. Sin embargo, la dieta tpica es baja en crom o .40
concentraciones de cinc en plasma no cambian de manera Al parecer, a partir de 50 a 200 pg/da constituye una inges
im portante hasta que la deficiencia de cinc es pronuncia ta adecuada. El cromo debe presentarse en concentracio
da.36 Entre los sntomas de deficiencia del cinc se incluyen nes mucho ms elevadas para tener efectos txicos .41Una
retraso en el crecimiento, lesiones de la piel, curacin lenta vez que se absorbe el cromo, se transporta al tejido por la
de heridas, diarrea, impotencia, enanismo, alteraciones sen transferrina, que tiene una afinidad equivalente aproxima
soriales y susceptibilidad a la infeccin por descenso de la da para el ion Cr+3y para el Fe +3.42
funcin inmune de clulas T .24-36 Los efectos clnicos se El cromo es importante en el metabolismo de la glu
revierten con frecuencia al aumentar la ingesta diettica cosa como activador esencial de la insulina. Al parecer
del cinc a 30-40 mg/da. El cinc es relativamente no txico un complejo de peso molecular bajo de Cr+3 con cido
y el exceso del mismo es raro. nicotnico y otros compuestos orgnicos es el factor que
activa la insulina. La deficiencia de cromo est relaciona
Evaluacin en laboratorio del estado de cinc da con resistencia a la insulina .23 Est demostrado que los
suplementos de cromo mejoran la tolerancia a la glucosa,
Se deben valorar tanto las variaciones diurnas como las reducen las concentraciones de insulina y disminuyen el
posprandiales, con los valores ms elevados por la maana colesterol total en la diabetes tipo 2.41
al ayunar.39 Adems, los valores del suero son alrededor Los mtodos ms frecuentes para la medicin del cro
de 10% mayores que los de plasma como resultado de los mo se basan en la absorcin atmica sin flama .23
cambios osmticos causados por los anticoagulantes .23
Resulta notable el hecho de que la concentracin de cinc
FLOR
en eritrocitos es cerca de 10 veces mayor que en plasma.
La disminucin en el nivel de cinc en plasma o sue La importancia del flor es bien conocida por su papel en
ro quiz indique deficiencia de ste. Sin embargo, tam la prevencin de caries dentales. Aunque la ingesta exce
bin llega a relacionarse con disminucin de albmina. siva se relaciona con manchas en los dientes y calcifica
Adems, el cinc en plasma tiene una variacin diurna y ciones en tejido blando ,24 el flor tambin llega a reducir
en ocasiones se reduce con la inflamacin. Al parecer la al mximo la prdida del hueso o incluso estimula la for
medicin del cinc en clulas rojas y las actividades funcio macin sea .23 El flor se incorpora dentro del cristal del
nales de enzimas que lo contienen se correlaciona con su hueso, con lo que aumenta la masa sea en las vrtebras.
deficiencia y tal vez proporcionen informacin til en la La administracin de vitamina D, jun to con administra
evaluacin de su estado total. Por lo general, el cinc urina cin peridica de flor, tal vez mejore la formacin del
rio tambin se vincula con deficiencia de ste .23 hueso, corrija deficiencia de calcio y disminuya la ocu
El mtodo ms confiable para la medicin del cinc en rrencia de fracturas .43,44
plasma, suero u orina que es apropiado para uso rutinario El flor se absorbe con facilidad por el intestino y se
en el laboratorio clnico es la espectroscopia de absorcin distribuye casi por completo al hueso y a los dientes. La
atmica. Otros mtodos disponibles son la espectrofoto excrecin renal constituye la ruta principal para eliminar
metra y la espectroscopia de emisin. Las actividades de flor del cuerpo.
372 PARTE II CORRELACIONES CLNICAS Y PROCEDIMIENTOS ANALTICOS
La concentracin de flor es de alrededor de 10 a de deficiencia del manganeso son raros. En nios, dicha
200pg/L en suero, 4 50 pg/L en eritrocitos y 0.2 a 3.2 pg/ deficiencia se relaciona con convulsiones y quiz epilep
L en orina .23 Se han desarrollado electrodos selectivos de sia. Las dosis elevadas, excepto por inhalacin, no son
iones para la medicin de flor.43 txicas .24 En informes recientes, la deposicin del manga
neso en el cerebro se vincula con sntomas neurolgicos
MANGANESO en personas con exposicin a los agentes de manganeso y
pacientes con enfermedad heptica colesttica .46-47
Los iones de manganeso +2 y +3 estn presentes en los sis La concentracin de manganeso en la sangre entera, los
temas biolgicos, en gran parte como iones unidos a pro glbulos rojos o los linfocitos tal vez sea ms confiable
tenas. El manganeso es un activador de varias enzimas, que la concentracin en suero o plasma para evaluar las
como la arginasa, la carboxilasa de piruvato y la superxi- reservas de manganeso en el tejido. Aunque las concentra
do dismutasa. Resulta notorio que muchos otros iones ciones informadas varan en gran medida debido a las dife
de metal (como magnesio, cobre o hierro) sustituyen al rencias en la recoleccin de la muestra, el procesamiento y
magnesio como activador de estas enzimas, lo que llega a la metodologa, al parecer los rangos de referencia son de
ocultar una deficiencia de manganeso. 0 .4 a 0.8 pg/L en plasma y 7.7 a 12 pg/L en sangre ente
La ingesta de manganeso debe ser de 2 a 5 mg/da en ra .23El mtodo de laboratorio clnico mas prctico para la
adultos .23 El ndice de absorcin del manganeso es bajo y medicin de manganeso es la absorcin atmica sin flama
disminuye por fosfato, fitato, calcio y hierro. El manga con quelacin y extraccin selectivas .48
neso se transporta en plasma por la albmina, a , -m acro-
globulina y transferrina46, y se excreta en la bilis y en las
secreciones pancreticas.
MOLIBDENO
Muchas enzimas requieren manganeso para su activi El molibdeno es importante como cofactor esencial de
dad, como la carboxilasa de piruvato, superxido dismu varias enzimas oxidasas: deshidrogenasa de xantina/oxi-
tasa mitocondrial, arginasa y glucocinasa. El efecto de la dasa de xantina, aldehido oxidasa y oxidasa de sulfito. La
deficiencia de manganeso se reduce por la sustitucin de oxidasa de xantina convierte la hipoxantina en cido ri
otros iones similares en enzimas; por tanto, los sntomas co, la aldehido oxidasa cataliza la conversin de acetil-CoA
Una m ujer de 65 aos de edad con antecedente de dia En pruebas adicionales de hierro elevado se encontr
betes acudi a visitar a su mdico para una revisin por lo siguiente:
prdida de peso, anorexia y fatiga general. Como parte Hierro srico 170 pg/dl (45 a 150)
del examen fsico, se observaron pigmentacin bran Transferrina 210 mg/dl (2 0 0 a 380)
ce de la piel (hiperpigmentacin) e inflamacin del Ferritina 300 pg/L(10 a 250)
hgado. Su panel inicial de qumica mostr los siguien % de saturacin de
tes resultados relevantes: transferrina 80
a acetato y la oxidasa de sulfito convierte el sulfito en sul refleje el estado de selenio. A la deficiencia de selenio se le
fato .24Adems, la oxidasa de xantina y la aldehido oxidasa vincula con cardiomiopata y debilidad del msculo esque
producen radicales de oxgeno, como sucede durante la ltico, osteoartritis y aumento de la incidencia de cncer .52
reperfusin que sigue a la isquemia .40,50 Aunque se requiere ms trabajo, en los estudios sobre los
El molibdeno de la dieta se absorbe de manera primor efectos de los micronutrientes en el riesgo de cncer se
dial en el estmago e intestino delgado. Tanto el cobre demuestra que la suplementacin de selenio se relaciona
como el hierro inhiben la absorcin de molibdeno. Aun con menor riesgo de cncer, en especial en el estmago,
que al hgado toma la mayor parte del molibdeno, ste se el pulmn y la prstata. Dichos riesgos se reducen con la
libera y excreta tanto en la orina como en la bilis. ingesta concurrente de (3-caroteno y oc-tocoferol.53
Aunque el molibdeno es relativamente no txico, la El selenio se determina por absorcin atmica. Debi
exposicin excesiva llega a causar la inhibicin de las enzi do a la volatilidad de los compuestos de organoselenio,
mas dependientes del cobre, como la ceruloplasmina y la est demostrado que la generacin del hidrido de selenio
oxidasa de citocromo. La formacin del complejo cobre- voltil con deteccin por absorcin atmica es una tcnica
molibdeno es la base de un tratamiento para la enfermedad til. Los rangos de referencia para el selenio en adultos
de W ilson, como se analiz en la seccin sobre el cobre de son: 46 a 143 pg/L en plasma, 58 a 2 3 4 pg/L en sangre
este mismo captulo .34A la exposicin elevada al molibde entera y 75 a 240 pg/L en glbulos rojos .23
no se le vincula con aumento del cido rico y gota .23
Los rangos de referencia para el molibdeno en adultos RESUMEN
son de alrededor de 0.1 a 3.0 pg/L en suero o plasma, 0.8
a 33 pg/L en sangre entera y 18 pg/L en glbulos rojos. La Los oligoelementos son importantes o esenciales para
excrecin urinaria vara de 8 a 34 pg/L. muchos procesos bioqumicos crticos. Sus concentracio
nes se regulan de manera eficaz en individuos sanos. Las
deficiencias a menudo estn relacionadas con disminucin
SELENIO
de las actividades de las enzimas que requieren oligoele
En seres humanos, el selenio tiene varias funciones esen mentos para su actividad ptima. Por lo general, la fun
ciales: es cofactor en la peroxidasa de glutationa y en la cin se restablece mediante reemplazo diettico, pero debe
diodinasa yodotironina; la selenocistena es un amino tenerse cuidado de no inducir toxicidad. La evaluacin en
cido esencial codificado por el DNA; la selenometionina el laboratorio del estado de los oligoelementos incluye
puede sustituir a la metionina como aminocido esencial determinacin de las concentraciones de fluido corporal,
en algunas protenas. as como de la actividad de enzimas relevantes. An se
Adems, el selenio tiene propiedades antioxidantes y requiere mucha investigacin para determinar la funcin
participa en el metabolismo de la hormona tiroides .51 de los oligoelementos en la salud y en la enfermedad y las
Debido a que el selenio se incorpora en protenas como pruebas ms eficaces para el diagnstico preciso.
la peroxidasa de glutationa ,24 es posible que su actividad
374 PARTE II CORRELACIONES CLNICAS Y PROCEDIMIENTOS ANALTICOS
Un hombre de 36 aos de edad se someti a varias Calcio 7.9 mg/dl (8.4 a 10.2 mg/dl)
resecciones parciales del intestino delgado debido a Hemoglobina 10.4 g/dl (13.3 a 17.7 g/dl)
enfermedad de Crohn. Despus de la recuperacin Hematcrito 31% (40 a 52% )
de la ciruga, se le ubic en nutricin parenteral total Albmina 2.5 g/dl (3.5 a 5.5 g/dl)
(NPT). Despus de la rehabilitacin adecuada, lo die Transferrina 112 mg/dl (200 a 380 mg/dl)
ron de alta bajo el cuidado a domicilio de una enferme Cobre 38 pg/dl (70 a 150 pg/dl)
ra que lo visitaba tres veces a la semana para seguir su Cinc 46 pg/dl (66 a 110 pg/dl)
progreso total y revisar sus condiciones fsicas y vitales.
Se realizaron de manera peridica pruebas de laborato Preguntas
rio rutinarias para evaluar el estado nutricional. Aun
que en los primeros meses despus de la ciruga no 1. Qu sugieren los estudios del laboratorio como
se observaron datos relevantes, a la postre el paciente causa posible del problema de este paciente?
experiment sntomas de debilidad, diarrea, malestar 2. Cul es el significado de los niveles bajos de cobre
general y prdida de pelo. Al visitar a su mdico, ste
y de cinc? Es posible que su dieta sea la causa sub
realiz un chequeo completo y obtuvo los siguientes yacente de estas deficiencias?
valores del laboratorio:
3. Cul tratamiento mdico se debe instituir en este
Na+ 147 mmol/L (135 a 145 mmol/L) paciente?
K+ 4.9 mmol/L (3.5 a 5.0 mmol/L)
CL 118 mmol/L (98 a 106 mmol/L)
Glucosa 102 mg/dl (80 a 100 mg/dl)
Creatinina 0.6 mg/dl (0.6-1.2 mg/dl
PREGUNTAS DE REPASO
1. El hierro tiene actividad fisiolgica, slo en la forma 4. Cules de los siguientes metales son necesarios para
ferrosa en: la actividad ptima del superxido dismutasa?
a) Citocromos. a) Hierro y cromo.
b ) Ferritina. b) Cinc y selenio.
c) Hemoglobina. c) Magnesio y manganeso.
d) Transferrina. d) Cobre y cinc.
2. Qu patrn representa con mayor probabilidad defi 5. La deficiencia de cual de los siguientes metales llega
ciencia de hierro? a causar deficiencia de hierro?
a) Disminucin de ferritina, aumento de transferri a) Cobre.
na, aumento de hierro srico. b ) Cromo.
b ) Aumento de ferritina, aumento de transferrina, c) Cobalto.
aumento de hierro srico. d) Cinc.
c) Disminucin de ferritina, aumento de transferri
na, disminucin de hierro srico.
6. El trmino ms adecuado para un ion del metal reque
rido para la actividad enzimtica ptima es:
d) Disminucin de ferritina, disminucin de trans
a) Acelerador.
ferrina, disminucin de hierro srico.
b) Cofactor.
3. La deficiencia de cul oligoelemento est relacionada c) Coenzima.
con retraso en el crecimiento, dermatitis, disminucin d) Catalizador.
de la agudeza del gusto y deterioro de la curacin de
7. Qu afirmacin sobre el hierro NO es verdadera?
heridas?
a) La CTFH se calcula a partir de la concentracin
a) Cobre.
de transferrina.
b) Hierro.
b ) La mioglobina tiene mayor afinidad para el hierro
c) Selenio.
que la hemoglobina.
d) Cinc.
c) La transferrina srica suele estar 99% saturada
con hierro.
d) El hierro srico a menudo es ms elevado en
hombres que en mujeres.
CAPTULO 15 OLIGOELEMENTOS 375
8. Qu oligoelemento est contenido en el factor de 11. El oligoelemento que al parecer se relaciona con m ejor
tolerancia a la glucosa? formacin sea es:
a) Cromo. a) Hierro.
b ) Cobre. b) Flor.
c) Selenio. c) Cobre.
d) Cinc. d) Manganeso.
9. El sndrome de Menkes se origina por acumulacin 12. El ion de metal esencial para la actividad de la oxidasa
en las clulas mucosales intestinales y est relaciona de xantina y de la deshidrogenasa de xantina es:
do con bajas concentraciones en plasma de: a) Hierro.
a) Hierro. b ) Cinc.
b) Cinc. c) Molibdeno.
c) Cobre. d) Manganeso.
d) Manganeso.
10. Qu metal se utiliza como tratamiento para la enfer
medad de Wilson?
a) Cobre.
b ) Molibdeno.
c) Flor
d) Cinc.
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Porfirinas y hemoglobina
Louann W. Lawrence y Larry A. Broussard
CONTENIDO DE L CAPITULO
O B J E T I V O S
Al completar este captulo, el laboratorista clnico Explicar los principios de las pruebas cualitativas y
podr: cuantitativas bsicas de la porfirina, para incluir PBG,
Describir la naturaleza y estructura qumicas de las ALA, uroporfirina, coproporfirina y protoporfirina.
porfirinas y la hemoglobina. Describir la degradacin de la hemoglobina.
Establecer el papel de la porfirina en el cuerpo. A nalizar el significado clnico y los datos de labo
Esbozar las rutas bioqumicas de la porfirina y ratorio relacionados con hem oglobinopatas y
sntesis de hemo. talasem ias.
A nalizar el significado clnico de las porfirias. Identificar las pruebas usadas en el diagnstico de
Com parar y contrastar las porfirias con respecto a hem oglobinopatas y talasem ias.
la deficiencia de la enzim a, los sntomas clnicos y A nalizar la estructura y el significado clnico de la
los datos del laboratorio clnico. mioglobina en el cuerpo.
______________________________ T R M I N O S C L A V E ___________________
Citocromo Pirrol Porfirina Porfirinuria
Hemoglobinopata Porfiria Porfiringeno Talasemia
Mioglobina
377
378 PARTE II CORRELACIONES CLNICAS Y PROCEDIMIENTOS ANALTICOS
Sntesis de la porfirina
Todas las clulas contienen hemoprotenas y sintetizan
hemo. Sin embargo, la mdula sea y el hgado son los
sitios principales. En la figura 16-2 se esboza la serie de
reacciones irreversibles. Algunos pasos ocurren en la mito-
condria de la clula y otros en el citoplasma. El transporte
de sustratos a travs de la membrana mitocondrial cons
tituye un proceso complejo y momento potencial para las
interrupciones en la sntesis del hemo.
El control del ndice de la sntesis del hemo en las
clulas del hgado se logra en gran medida con la regu
lacin de la enzima cido 6-am inolevulnico (ALA)
sintasa. El m ecanism o principal es la represin de la
sntesis de una nueva enzima. O curre un m ecanism o de
FIGURA 16-1. Estructura bsica de las porfirinas. retroalim entacin negativo en el que el aum ento de la
CAPTULO 16 PORFIRINAS Y HEMOGLOBINA 379
Mitocondria
ALA sintasa
glicina + succinil-CoA Acido aminolevulnico
t
[plumboporfiria (PP)]
ferroquelatasa
[porfiria eritropoytica (PE)] Porfobilingeno (PBG)
protoporfirina IX PBG desaminasa
t
[porfiria intermitente aguda (PIA)]
protoporfiringeno oxidasa
[porfiria variegada (PV)] Hidroximetilbilana --- ^ uroporfiringeno I
protoporfiringeno IX Uroporfiringeno III sintasa
t coprofiringeno oxidasa
[coproporfiria hereditaria (CPH)]
4 [porfiria eritropoytica congnita
(PEC)]
Coproporfiringeno I Uroporfiringeno I
Uroporfiringeno descarboxilasa
[porfiria cutnea tarda (PCT)]
[porfiria hepatoeritropoytica (PHE)]
FIGURA 16-2. Sntesis de hemo. Dentro de los corchetes se indican las enfermedades relacionadas con deficiencias de la enzima.
reserva de hemo heptico disminuye la produccin de gora se incluyen la porfiria por deficiencia (PDA) de ALA
ALA sintasa. Por el contrario, la produccin de la ALA deshidratasa (ALAD) o plumboporfiria (PP) y la porfiria
sintasa se increm enta con la dism inucin de hemo. Es intermitente aguda (PIA). Los excesos de los intermedia
posible que el tamao de la reserva regulatoria de hemo rios tardos (URO, COPRO y PROTO) tal vez causen snto
sea afectada por el requerim iento de hem oprotenas mas cutneos, como fotosensibilidad, ampollas, exceso de
en el hgado. Al parecer las drogas y otros com pues pelo facial e hiperpigmentacin. La porfiria cutnea tarda
tos inducen la produccin de la ALA sintasa a travs (PC T), porfiria hepatoeritropoytica (PHE), porfiria eri
de varios m ecanism os diferentes, pero todos dan como tropoytica (PE) y porfiria eritropoytica congnita (PEC)
resultado reduccin de la reserva regulatoria de hemo. se relacionan con sntomas cutneos. La fotosensibilidad
Por tanto, el ndice de la sntesis de hemo es flexible y inducida por porfirina se manifiesta por mayor fragilidad de
tal vez cam bie con rapidez en respuesta a una amplia la piel expuesta a la luz, como en la PCT, o quemadura
gama de estm ulos externos. En los eritrocitos de la de la piel expuesta a la luz, como en la PE. Los efectos de
mdula sea, al parecer otras enzimas en el transcurso la fotosensibilizacin de las porfirinas son atribuibles a la
de la sntesis y el ndice del consum o interno de hierro absorcin de la luz. Adems, es posible que existan excesos
celular controlan el ndice de la sntesis de hem o .1 de intermediarios tempranos y tardos, lo que origina sn
tomas neurocutneos. La coproporfiria hereditaria (CPH)
Significado clnico y y porfiria variegada (PV) caen en esta categora. Todas las
porfirias se heredan como rasgos dominantes autosmicos
correlacin de la enfermedad
que producen alrededor de una reduccin de 50% en los
Las porfirias son deficiencias enzimticas adquiridas o niveles de la enzima, a excepcin de la PDA y PEC, que
heredadas que dan lugar a la sobreproduccin de los pre son recesivos autosmicos .2
cursores del hemo en la mdula sea (porfirias eritropoy- El diagnstico de porfirias se establece por una combi
ticas) o el hgado (porfirias hepticas). Estn identificados nacin de los hallazgos del historial mdico y fsicos y de
los estados de la enfermedad que corresponden a las defi laboratorio. Las porfirias cutneas son ms fciles de diag
ciencias de la enzima en cada paso de la sntesis del hemo, nosticar porque la fotosensibilidad suele ser el sntoma pre
a excepcin de la ALA sintasa. Algunos pacientes mues sente. El diagnstico de laboratorio, si es que es necesario,
tran una deficiencia de la enzima, pero no manifestaciones se realiza por el anlisis de las muestras apropiadas de los
clnicas o bioqumicas de la porfiria. Esto indica que otros intermediarios en la sntesis del hemo (cuadro 16-1). La
factores, como la demanda de incremento de la biosnte- diferenciacin de las porfirias neurolgicas de otros trastor
sis del hemo, tambin son importantes al causar la mani nos es ms difcil con base en el historial y la exploracin
festacin de la enfermedad. Un exceso de los precursores fsica, y debe verificarse por los hallazgos en el laboratorio.
tempranos en la ruta de la sntesis del hemo (ALA, porfo La PDA heredada es en extremo rara, con slo cuatro
bilingeno, o ambos) produce sntomas neuropsiquitri- casos informados .3 El ALA urinario se eleva de manera
cos, incluyendo dolor abdominal, vmito, estreimiento, importante con la excrecin normal del porfobilingeno
taquicardia, hipertensin, sntomas psiquitricos, fiebre, (PBG). El incremento de la coproporfirina urinaria III
leucocitosis y parestesia. Entre las porfirias en esta cate proporciona evidencia que apoya el diagnstico, pero esto
380 PARTE II CORRELACIONES CLNICAS Y PROCEDIMIENTOS ANALTICOS
tambin ocurre en caso de envenenamiento por plomo, ultravioleta y decoloracin roja o pardusca bajo luz normal
que es la causa ms frecuente de la baja actividad de la como resultado de depsitos de porfirina en el esmalte den
ALAD y hay que descartarla antes de hacer un diagnstico tal. Las porfirinas de orina y fecales, URO 1 y COPRO I, se
de la PDA. La PDA se distingue del envenenamiento por elevan en gran medida. A menudo la orina es roja debido a
plomo por la adicin in vitro del ditiotreitol u otros reacti la presencia de URO y COPRO. La fotosensibilidad repre
vos sulfhidrilo. Esto produce la restauracin de la actividad senta un problema clnico principal, que ocasiona lesiones
normal del eritrocito ALAD en pacientes con envenena que llegan a infectarse y dejan al paciente con cicatrices o
miento por plomo, pero ningn cambio en la reduccin de incidencias mltiples que tal vez produzcan la mutilacin
la actividad de ALAD en pacientes con PDA .3 de odos, nariz o dedos. Con frecuencia se observa creci
La PLA se origina por una deficiencia de la enzima PBG miento anormal de cabello en las reas expuestas. Se piensa
deaminasa (PBGD). En la mayor parte de los pases desarro que las desfiguraciones de este trastorno y la tendencia a
llados, la frecuencia estimada de ataques agudos de PIA es de evitar la luz del da (de ah que quienes lo padecen slo
uno a dos por cada 100 000, con una frecuencia ms alta en salgan en la noche) dio origen a la leyenda de los hombres
pases escandinavos.3 La PBGD se codifica en el cromosoma lobo .5Adems, los pacientes desarrollan anemia hemoltica
llq 2 3 , con ms de 100 mutaciones de este gen descritas.3 y esplenomegalia con hemolisis que sirve como estmulo
Aunque la herencia es dominante autosmica, slo alrede para aumentar la produccin de porfirina en la mdula
dor de 10% de los pacientes con la deficiencia sufren ataques sea .6 El trasplante alognico de mdula sea result cura
de la enfermedad, de modo que otros factores etiolgicos tivo en pacientes con PEC. El uso de clulas madre para el
estn implicados. Las drogas son la causa ms habitual para tratamiento de pacientes con PEC est bajo investigacin .3
la ocurrencia de la enfermedad, en especial barbitricos y En la PCT, la porfiria ms frecuente, y en la ms rara
sulfamidas. Sin embargo, una amplia gama de drogas llegan PHE, ocurre deficiencia de uroporfiringeno descarboxi-
a ser peligrosas. Esta enfermedad se caracteriza por varios lasa (UROD). La PCT se subdivide en dos tipos: el tipo
sntomas neurolgicos con dolorosos clicos estomacales I espordico, en el que la actividad reducida de la UROD
y, a veces, fiebre y vmito. Los hallazgos caractersticos de se restringe al hgado y no existe antecedente familiar de
laboratorio constan de una elevacin marcada de la ALA y la enfermedad; y el tipo II familiar, caracterizado por defi
el PBG en la orina, aunque estos resultados tal vez sean nor ciencia de UROD en todo el tejido y un patrn hereditario
males entre un ataque y otro. La orina de un paciente con autonmico dominante. En estudios genticos se demos
manifestaciones clnicas de PIA tal vez se vuelva roja o caf tr que la PCT no es un simple trastorno monognico,
oscuro debido a la conversin no enzimtica a uroporfirina sino ms bien un grupo de enfermedades caracterizadas
1, un proceso que tal vez se retrase con la refrigeracin, la por diversas mutaciones en la codificacin del gen (mapeo
proteccin contra luz y el ajuste alcalino a un pH de 8.0 a en el cromosoma lp 3 4 ) para UROD y tal vez en otros
9.0. Las anormalidades electrolticas, como la hiponatremia genes externos al sitio de la UROD .7 Por lo general, la PCT
durante ataques agudos, contribuyen a realizar el diagns se presenta en la edad adulta con ampollas y fragilidad
tico .3 Se realiza medicin de los niveles de eritrocito o de cutneas en reas expuestas a la luz, de manera tpica las
linfoblasto de la PBGD para confirmar el diagnstico .4 manos, junto con cierto crecimiento anormal de cabello.
La PEC, una deficiencia de la uroporfiringeno III cosin- En las muestras de biopsia del hgado de estos pacientes
tasa, es una de las porfirias ms raras (menos de 200 casos se observa fluorescencia, hemosiderosis, infiltracin de
informados). Por lo general, aparece poco despus del naci grasa y grados variables de necrosis y fibrosis. La PCT se
miento, con manifestaciones iniciales de manchas de color diferencia del resto de las porfirias por tres caractersticas:
rojo marrn de la orina en los paales y fotosensibilidad a) relacin de lesiones de la piel con deficiencia grave de
cutnea .4 Tambin se conoce como enferm edad de Gn- la UROD, lo que da como resultado aumento de la excre
ther. En los dientes se observa fluorescencia roja bajo luz cin de uroporfirina, porfirina heptacarboxlica, isocopro-
CAPTULO 16 PORFIRINAS Y HEMOGLOBINA 381
porfirina y otras porfirinas; b ) remisin seguida de dosis o dolor en la piel al exponerse a luz solar. Adems, algunos
baja de cloroquina o disminucin de hierro; y c) cierto padecen enfermedad heptica grave. El diagnstico de PE
grado de dao celular heptico en casi todos los pacien se establece al demostrar aumento de los niveles de PRO
tes .8 En sujetos con predisposicin gentica, la PCT se TO en eritrocitos, plasma y materia fecal, junto con porfiri
induce por varios factores, como el alcohol, el estrgeno, nas urinarias normales o aumento de COPRO I. En la PE se
los hidrocarburos aromticos halogenados (hexacloroben- observan concentraciones elevadas de protoporfirina libre
ceno y 2,3,7,8-tetraclorodibenzo-p-dioxina), la infeccin (no unida al cinc) en eritrocitos y plasma. La expresin
por hepatitis C y el virus de inmunodeficiencia humana clnica de la enfermedad vara en gran medida. En algu
(VIH), la talasemia, los tumores hepticos, la hemodi- nos individuos no se observan manifestaciones clnicas
lisis y el trasplante de la mdula sea .79 En las pruebas de la enfermedad, pero existe aumento de los niveles de
de laboratorio, la PCT se caracteriza por aumento de las PROTO-eritrocito. La herencia secundaria de una segunda
concentraciones de URO urinario, COPRO, y 7-carboxil mutacin dbil del gen de ferroquelatasa (adems de las
porfirina III, URO plasmtica e isocoproporfirinas fecales mutaciones primarias detectadas) tal vez explique las dife
(ISOCOPRO)4. Otro hallazgo de laboratorio que tambin rencias individuales importantes de la expresin clnica .3
se observa en esta enfermedad es elevacin de hierro sri El tratamiento de las porfirias hereditarias est destinado
co, ferritina y enzimas hepticas. a modificar las anormalidades bioqumicas que causan los
La PHE, una forma rara de la PCT, ocurre en individuos sntomas clnicos. Las manifestaciones cutneas se tratan
que padecen estados homocigticos u heterocigticos com al evitar la luz solar, usar bloqueadores y consumir [j-caro-
puestos por mutaciones que producen deficiencia marca teno por va oral, que acta como una trampa de oxgeno,
da de UROD .3 Las caractersticas clnicas son similares a para prevenir dao en la piel. La reduccin de la carga de
las de la PEC, incluyendo fotosensibilidad que comienza hemo se logra por flebotoma o al administrar desferrioxa-
en la niez. Los pacientes son afectados de manera grave y mina para quelar al hierro. Es posible utilizar la hematina
desarrollan exceso de vello facial y cicatrices en las manos intravenosa para contrarrestar los ataques agudos de la dis
y la cara. La gravedad de la fotosensibilidad mejora un funcin neurolgica. La hematina, una enzima inhibidora,
poco con la edad, pero la enfermedad heptica contina. limita la sntesis de porfirinas en clulas de la mdula sea.
Los niveles de porfirina urinaria y fecal son similares a El cese de factores precipitantes, como la ingestin de alco
los encontrados en la PCT. Las concentraciones de la cinc hol o de estrgenos, debe constituir la primera lnea del
protoporfirina (ZPP) del eritrocito aumentan en la PHE y tratamiento para la PCT .10 Al parecer la terapia de gen (la
son normales en la PCT .4 adicin del gen normal a las clulas madre de la mdula
La CPH, una deficiencia de la coproporfiringeno oxi sea del paciente, como aadir el gen normal de la ferro
dasa, es una afeccin muy leve con manifestaciones sobre quelatasa a las clulas de un paciente con PE) constituye
todo neurolgicas y fotosensibilidad cutnea en alrededor un tratamiento futuro factible para las porfirias .10
del 30% de los pacientes .4 Los ataques se precipitan por la El trmino porfirias secundarias, o porfirinurias, se aplica
exposicin a ciertas drogas, hormonas y cambios alimenti a trastornos adquiridos en los que se observa un aumento
cios .3 La caracterstica distintiva de la CPH es un aumento leve a moderado en la excrecin de porfirinas urinarias. En
importante de la excrecin de COPRO III en orina y heces este caso, dichos trastornos no son resultado de un defecto
y la presencia de harderoporfirina, una porfirina tres-car- bioqumico heredado en la sntesis del hemo, sino que se
boxil en las heces. Tambin ocurre un incremento de la originan por otro trastorno, toxina o droga que interfiere
COPRO en plasma. Durante ataques agudos, se eleva la con la sntesis del hemo. Los sntomas, en algunos casos,
excrecin urinaria de COPRO III, ALA y PBG. La PV es fre son similares a las porfirias heredadas. Varias anemias,
cuente en el sur de frica y sus orgenes se remontan a una enfermedades hepticas y toxinas, como el plomo y alco
pareja que emigr de Holanda en 1688. La causa es una hol, caen en esta categora. El plomo inhibe la actividad de
deficiencia de la actividad de la protoporfiringeno oxida la PBG sintasa y la incorporacin del hierro en el hemo.
sa. Las manifestaciones clnicas incluyen ataques agudos Las porfirias secundarias se distinguen de las verdaderas
de disfuncin neurolgica (como los de la PIA) o fotoder- al medir los niveles de ALA y PBG urinarios. En la porfiria
matitis (como en la CPH y la PCT), o ambos. Los hallazgos secundaria, las concentraciones de ALA aumentan en la
caractersticos en laboratorio constan de aumento de los orina, en tanto que la excrecin de PBG a menudo perma
niveles de COPRO y PROTO en heces, con concentracio nece normal. En el envenenamiento por plomo tambin
nes de PROTO que exceden las de COPRO y de COPRO se suele observar un aumento de COPRO en orina y del
III ms elevadas que las de COPRO I. Los complejos de eritrocito ZPP, as como elevacin de ALA. Sin embargo,
porfirina-protena especficos de la PV (X-porfirinas) estn la determinacin del plomo en sangre es el mtodo ms
presentes en plasma .4 Durante ataques agudos, aumenta la preciso para detectar envenenamiento por plomo.
excrecin urinaria de ALA y PBG. Sin embargo, en sujetos
asintomticos, la excrecin a menudo es normal. Mtodos para el anlisis de porfirinas
La PE, la segunda porfiria mas frecuente, se produce por
una deficiencia de la ferroquelatasa, la ltima enzima en Existen anlisis enzimticos individuales disponibles para
la ruta del hemo. El principal sntoma clnico es la foto cada enzima defectuosa que causa porfiria. Por lo general,
sensibilidad, que por lo general se presenta a partir de la estos procedimientos incluyen la adicin del sustrato bajo
infancia. Los pacientes se quejan de quemaduras, comezn condiciones cercanas al pH y temperatura fisiolgicos, el
382 PARTE II CORRELACIONES CLNICAS Y PROCEDIMIENTOS ANALTICOS
cese de la reaccin por la adicin de agentes precipitantes color rojo-anaranjado cuando se mezcla con el reactivo de
de protena y la separacin (a menudo por HPLC), segui Ehrlich (cido p-dimetilaminobenzaldehdo). En la prue
da por identificacin y cuanticacin fluoromtricas, de los ba de Watson-Schwartz, se realiza una extraccin con clo
productos de la porfirina .4 Sin embargo, la mayor parte an roformo o butanol para diferenciar al PBG de sustancias
est limitada para su uso en laboratorios especializados y no interferentes, como el urobilingeno o el indol. Si perma
se estudian aqu. Es posible realizar pruebas de valoracin nece un color rojo cereza en la fase acuosa despus de aa
con facilidad, mismas que tal vez sean benficas en situa dir cloroformo o butanol, esto indica una prueba positiva
ciones de urgencia. Sin embargo, se debe poner atencin para PBG. El reactivo de la prueba de Hoesch no reacciona
en la interpretacin por la ocurrencia de resultados falsos- con el urobilingeno; por tanto, a veces se utiliza para con
negativos y falsos-positivos .11'12 En los anlisis cuantitativos firmar los resultados de la prueba de Watson-Schwartz. El
es necesario seguir todas las pruebas de investigacin. Los porfobilingeno y ALA se determinan de manera cuantita
anlisis cuantitativos de las tres porfirinas (URO, PROTO tiva por separacin sucesiva en dos columnas de intercam
y COPRO) y de los dos precursores de porfirina (ALA y bio inico .4Una alcuota de orina se carga en una columna
PBG) sirven para clasificar la mayor parte de las porfirias. de intercambio aninico o de almina que retiene el PBG,
en tanto el ALA pasa a travs de ella. Despus de lavarlo
Pruebas para el PBG y ALA urinarios para quitar sustancias interferentes, el PBG se diluye con
Las dos pruebas de valoracin ms frecuentes del PBG uri cido actico y se mide de manera espectrofotomtrica a
nario son las de Watson-Schwartz y de Hoesch .4'13 Ambas travs del reactivo de Ehrlich. El sobrenadante de la pri
pruebas se basan en el principio de que el PBG forma un mera columna se carga en una columna de intercambio
catinico para retener el ALA y luego es eluido con acetato ZPP se informen como proporcin con la concentracin
de sodio. El ALA eluido acta con el reactivo de Ehrlich del hemo (por mol de hemo ).14
despus de condensarlo con acetilacetona para formar un Las tcnicas de diagnstico molecular comienzan a ser
pirrol y luego medirlo de manera espectrofotomtrica .4 tiles en el diagnstico de las porfirias .3,15 Estn identifica
dos la mayor parte de los genes que codifican las enzimas
Pruebas para las porfirinas de la sntesis del hemo, y descubiertas las mutaciones que
Las pruebas de valoracin y cuantitativas de porfirinas en causan varias porfirias. El uso de estas tcnicas para ayudar
orina, sangre (eritrocitos y plasma) y heces se basan en el en el diagnstico de porfirias tiene ciertas ventajas sobre
aumento de la fluorescencia de estos compuestos en solu los anlisis bioqumicos tradicionales. La interpretacin de
cin cida. Por lo general, se extrae una alcuota de la mues las pruebas tradicionales se complica por el hecho de que
tra en un solvente orgnico y luego se vuelve a extraer en los analitos que se miden tal vez sean normales, excepto
una capa acuosa acidificada. En procedimientos de valo durante ataque agudo. Adems, la cantidad de porfirina
racin, las muestras que contienen porfirinas exhibirn excretada en los distintos trastornos es bastante variable,
fluorescencia rosada o roja en la capa acuosa cuando se lo que produce traslape importante entre los pacientes
observan bajo la lmpara de Wood (ultravioleta). Los afectados y los normales. Al valorar la la mutacin causan
procedimientos cuantitativos incluyen mediciones fluoro- te de la enfermedad, es posible superar estos problemas de
mtricas a menudo a una longitud de onda de excitacin variabilidad biolgica y la actividad de la enfermedad. Sin
de 4 00 a 405 nm y longitud de onda de emisin de 594 a embargo, quiz la aplicacin ms importante de la evalua
5 98 nm. Las soluciones estndar de coproporfirina, uro cin molecular radica en su uso para detectar portadores
porfirina y, tal vez, protoporfirina se utilizan para calcu asintomticos del gen, que no se identifican con facilidad
lar las concentraciones de porfirina en las muestras. Cada en las pruebas estndar de laboratorio .15
porfirina exhibe diferentes longitudes de onda de exci
tacin y de emisin (depende del solvente). En algunos HEMOGLOBINA
procedimientos se utilizan longitudes de onda medias, en
tanto que en otros se incluyen varias mediciones y clculo Papel en el cuerpo
de los niveles de cada porfirina. Para verificar resultados La hemoglobina tiene muchas funciones importantes en
positivos y eliminar posibles interferencias, se recomienda el cuerpo. Su papel ms importante es el transporte del
comparar la tomografa de la fluorescencia con las tomo- oxgeno al tejido y del CO, de regreso a los pulmones.
grafas de estndares. Los procedimientos fluoromtricos La molcula de la hemoglobina est diseada para captar
son ms sensibles que aquellos que miden la absorbancia oxgeno en reas de alta tensin de oxgeno y liberarlo en
de porfirinas. reas de baja tensin. La hemoglobina se lleva a todos los
En otras pruebas de porfirinas se utiliza la separacin tejidos del cuerpo por los eritrocitos. Adems, la hemo
cromatogrfica y cuantificacin de las porfirinas indivi globina representa uno de los principales sistemas amorti
duales con espectrofotometra o fluorometra. La croma guadores del cuerpo.
tografa lquida de alta resolucin de fase inversa (CLAR)
separa las porfirinas, incluyendo los ismeros. La electro
foresis de zona capilar (EZC), que separa compuestos con
Estructura de la hemoglobina
base en la proporcin carga/masa (modificada por el ajus La hemoglobina es una molcula proteica grande y com
te del pH), constituye otra tcnica cromatogrfica usada pleja con peso molecular de alrededor de 6 4 0 0 0 . Tiene
para la cuantificacin de porfirinas. Esta tcnica es tan forma casi esfrica y consta de dos partes principales: el
sensible como la CLAR en la deteccin de fluorescencia hemo, que comprende 3% de la molcula, y las protenas
y tiene las ventajas de instrumentacin ms sencilla, uso globinas, que representan el 97% restante. La porcin del
mnimo de solvente orgnico y consumo de reactivo ms hemo abarca un anillo de porfirina con el hierro quelado
b ajo .4 en el centro. El tomo de hierro es el sitio de unin rever
La cinc protoporfirina, un metabolito normal formado sible del oxgeno. La porcin de pro tena consta de dos
por la quelacin de cinc en lugar de hierro con protopor pares de cadenas de globina que se tuercen juntas para
firina durante la biosntesis del hemo, es otra porfirina que los grupos hemo queden expuestos en el exterior de
que debe medirse. El aumento en la formacin de cinc la molcula (fig. 16-3). La molcula completa de hemoglo
protoporfirina ocurre durante perodos de insuficiencia de bina contiene cuatro grupos hemo unidos a cada una de
hierro o deterioro del uso del mismo. Desde el punto de las cuatro cadenas de globina y transportan hasta cuatro
vista clnico, se respalda el empleo de la ZPP como prueba molculas de oxgeno. Cada cadena de globina contiene
valiosa para evaluar la nutricin y el metabolismo del hie 141 o ms aminocidos.
rro en varios contextos, incluyendo el peditrico, obsttri La estructura de cada cadena es de cuatro pliegues. La
co y de donacin de sangre, as como prueba de valoracin estructura primaria consta de los aminocidos individuales
de anemia por deficiencia de hierro y exposicin al plomo y sus secuencias. stas varan y son la base de la nomencla
en adultos .14 Un mtodo rpido de valoracin de la deter tura de la cadena: a , |3, 8 y y. La estructura secundaria es
minacin de ZPP incluye la medicin de la fluorescencia la disposicin tridimensional de los aminocidos que com
de sangre entera y de eritrocitos lavados con un hema- ponen la cadena del polipptido. Regiones de aminoci
tofluormetro. Se recomienda que las concentraciones de dos forman hlices o una estructura plisada. La estructura
384 PARTE II CORRELACIONES CLNICAS Y PROCEDIMIENTOS ANALTICOS
mal de hemo y protena para formar la porcin de globina. recubren los tbulos renales se liberan y aparecer hemo
El hemo se sintetiza en la mitocondria de las clulas. El globina, metahemoglobina o hemosiderina libre, o una
hierro se transporta a los glbulos rojos desarrollados por combinacin de las anteriores, en la orina .16
la transferrina, una protena del plasma. El hierro atraviesa La hemoglobina que no se une por completo a la hapto
la membrana celular y la mitocondria, donde se inserta en globina o es procesada por los riones se oxida a metahe
el anillo de la PROTO para formar el hemo. La sntesis pro moglobina. Los grupos hemo se liberan y se captan por la
teica de las cadenas de globina ocurre en los polirriboso- protena hemopexina. El complejo hemo-hemopexina se
mas citoplsmicos. El hemo sale de la mitocondria y se une cataboliza y degrada por el hgado. Luego los grupos hemo
a las cadenas de globina en el citoplasma en la etapa final. presentes en exceso de la capacidad de unin del com
La hemoglobina se degrada por dos posibles rutas. A plejo de hemopexina se combinan con la albmina para
la va normal se le denomina extravascular porque ocurre formar metahemalbmina y se retiene por esta protena
fuera del sistema circulatorio: en el sistema reticuloendo- hasta que la hemopexina adicional queda disponible para
telial, o fagocito mononuclear. Dentro de las clulas fago- transportarla al hgado (fig. 16-5). La medicin en labora
citarias esplnicas, o macrfagos, la hemoglobina cede su torio de cualquiera de estos productos de la degradacin
hierro a la transferrina, su carbn a se expira como CO, de la hemoglobina contribuye a determinar el aumento de
las cadenas de globina vuelven al grupo de aminocidos la destruccin de glbulos rojos, como ocurre en una ane
y el resto de la molcula se convierte en bilirrubina, que mia hemoltica.
experimenta metabolismo adicional. En condiciones nor
males, 90% de toda la hemoglobina se degrada de esta Significado clnico y correlacin
manera (fig. 16-4). de la enfermedad
Por lo general, menos de 10% de la hemoglobina se
libera de forma directa en la corriente sangunea y se diso Defectos cualitativos de la hemoglobina:
cia en los dmeros a y (3. Grandes cantidades se liberan las hemoglobinopatas
durante episodios hemolticos. Los dmeros se enlazan a la Hemoglobina S. El defecto del aminocido de la hemo
haptoglobina, que previene la excrecin renal de la hem o globina S se encuentra en la sexta posicin sobre la cadena
globina del plasma y estabiliza el enlace hemo-globina. P, donde el cido glutmico se sustituye por valina, lo que
Despus, este complejo se elimina de la circulacin por proporciona a la hemoglobina una carga menos negativa
el hgado y se procesa de manera similar a la degradacin que la de hemoglobina A. En Estados Unidos, constituye
extravascular. Cuando la cantidad de haptoglobina circu la hemoglobinopata ms frecuente.
lante disminuye, como sucede en un episodio hemolti- Los individuos presentan el rasgo de clula falcifor-
co, los dmeros liberados pasan a travs de los riones, se me (HbAS, el estado heterocigtico) o anemia falciforme
les reabsorbe y el hierro se almacena como hemosiderina. (HbSS, el estado hom ocigtico). La incidencia ms elevada
Algunos dmeros de la hemoglobina se excretan por la ori se observa en habitantes negros de frica y afroestadouni-
na, lo que da como resultado hemoglobinuria. Si se excede denses: 1 de cada 500 nios padecen anemia falciforme y 8
el lmite de almacenamiento de los riones, las clulas que a 10% porta el rasgo HbAS. Tambin se le detecta en pases
f
Corriente sangunea Globina
)
1. Dmero de -Tetrmero de 4- Metahemoglobina
hemoglobina hemoglobina (
Hemo
2. Haptoglobina
Hepatocito
^ ..-H g a d o ^
Fe Bilirrubina
1
Elemosiderina Urobilingenof | Intestino
Hemoglobina fecal
Metahemoglobina
FIGURA 16-5. Degradacin intravascular de la
hemoglobina.
Degradacin intravascular de hemoglobina <10%
mediterrneos, como Grecia, Italia e Israel, as como en por tanto, destruidas de manera eficiente por las clulas
Arabia Saudita y la India. fagocticas .17
Debido a la mortalidad y morbilidad elevadas que se Cuando la hemoglobina S es desoxigenada in vitro bajo
relacionan con la expresin homocigtica del gen, se condiciones cercanas a las fisiolgicas, se vuelve relativa
esperara que la frecuencia del gen mutante declinara en la mente insoluble en comparacin con la hemoglobina A
reserva gentica. Sin embargo, existe un fenmeno cono y agregados en polmeros largos y rgidos denominados
cido como polimorfismo equilibrado, que indica que el tactoides. Estas clulas aparecen como formas falciformes
estado heterocigtico (HbAS) tiene una ventaja selectiva o de media luna sobre pelculas teidas de sangre. En oca
sobre cualquiera de los estados homocigticos (HbAA o siones las clulas falciformes regresan a su forma original
HbSS). Al parecer la condicin heterocigtica brinda pro cuando se oxigenan; sin embargo, despus de varios episo
teccin contra parsitos, en particular Plasmodium fa lcip a - dios falciformes, ocurre dao irreversible en la membrana
rum, sobre todo en nios. Cuando padecen infeccin por y las clulas son fagocitadas por macrfagos en el bazo, el
P. falciparu m , los nios con rasgo falciforme tienen menor hgado o la mdula sea, lo que causa anemia. La gravedad
concentracin del parsito, la infeccin es ms breve y la del proceso hemoltico se relaciona de forma directa con
incidencia de muerte es baja. Se piensa que los glbulos la cantidad de clulas daadas en la circulacin. Las clu
rojos infectados son de manera primordial falciformes y, las falciformes rgidas no se deforman ni circulan a tra-
vs de pequeos tubos capilares, de modo que se produce Hemoglobina SC. La enfermedad de la hemoglobina SC
obstruccin. Esto origina hipoxia del tejido, lo que causa es la hemoglobinopata mezclada ms frecuente. Un p-gen
dolor extremo y conduce a la muerte de ste. Los infartos codifica para las cadenas P-S y el otro P-gen para las cadenas
en el bazo son frecuentes, lo que provoca necrosis excesi P-C, sin dejar cadenas P normales para producir hemoglo
va y cicatrices, que conducen a prdida de la funcin del bina A. Desde el punto de vista clnico, esta enfermedad es
bazo en la mayora de los adultos con anemia falciforme. A menos grave que la anemia falciforme homocigtica, pero
esto se le conoce como autoesplenectom a. La cantidad de tiene sntomas clnicos similares. En la pelcula de sangre se
falciformes se relaciona con la cantidad de hemoglobina S observan de manera caracterstica muchas clulas blanco y
en las clulas. El efecto inhibidor informado de las hemo en ocasiones formas anormales que se asemejan a la clula
globinas A y F se debe a un efecto dilucional. Adems, falciforme o el cristal hexagonal de hemoglobina C, o una
la tendencia de la hemoglobina F a copolimerizarse con combinacin de ambos. La prueba de solubilidad es positiva,
la hemoglobina S es menor que con la hemoglobina A. en tanto que en la electroforesis sobre acetato de celulosa se
Se considera que esto es responsable del efecto protector observan cantidades casi iguales de hemoglobina S y C.
observado en presencia de niveles elevados de hemoglobi Hemoglobina E. Esta hemoglobina consta de una sus
na F en individuos con anemia falciforme. titucin del aminocido del lisina por cido glutmico en
En presencia de una enfermedad homocigtica, los la vigsimo sexta posicin de la cadena p, lo que da como
hallazgos de laboratorio incluyen anemia normoctica y resultado una carga positiva neta. La hemoglobina E es
normocrmica, aumento de la concentracin de reticulo- algo inestable cuando est sometida a agentes oxidantes.
citos y variacin en el tamao y la forma de los glbulos Se le encuentra en Asia y se estima que est presente en
rojos con clulas blanco y falciformes presentes. La policro- alrededor de 20 millones de personas, con 80% en el sudes
matofilia y los glbulos rojos nucleados son frecuentes. La te de Asia. En la forma homocigtica, hay anemia leve con
enfermedad heterocigtica es asintomtica desde el punto microcitosis y clulas blanco. En la forma heterocigtica,
de vista clnico, y por lo general tiene una pelcula normal el paciente es asintomtico. El diagnstico diferencial se
de sangre. La prueba de solubilidad para hemoglobina S obtiene por electroforesis. En acetato de celulosa, la hem o
ser positiva tanto en la forma homocigtica como en la globina E se mueve con A2, C y O. Est presente en la for
heterocigtica, pero siempre debe confirmarse con elec ma heterocigtica en cantidades que varan de 30 a 45% ,
troforesis de hemoglobina. En electroforesis de acetato de lo que constituye un porcentaje un poco ms bajo que el
celulosa a un pH alcalino, la hemoglobina S se mueve en de la hemoglobina C. Es probable que esto sea resultado
una posicin entre la hemoglobina A y Ar De la hemoglo de la naturaleza ligeramente inestable de la hemoglobina
bina total, 85 a 100% ser hemoglobina S en estado homo- E. Sobre agar de citrato, la hemoglobina E emigra con la A.
cigtico y a menudo menos de 50% en el heterocigtico. Es ms frecuente encontrar este defecto en relacin con a
Las hemoglobinas D y G emigran en la misma posicin y P-talasemia. La e-P-talasemia es un trastorno ms grave,
que la hemoglobina S, pero ambas seran negativas en la con anemia moderada y esplenomegalia.
prueba de solubilidad. La electroforesis sobre agar citrato Hemoglobina D. La letra D se aplica a cualquier varian
a pH cido es necesaria para separar estas hemoglobinas te de la hemoglobina con movilidad electrofortica en
de la hemoglobina S (vase fig. 16-7). acetato de celulosa similar a la de la hemoglobina S, pero
Hemoglobina C. El cido glutmico en la sexta posi que tiene prueba de solubilidad negativa. La hemoglobi
cin de la cadena |3 se sustituye por lisina, lo que da como na D,Los Angeles
, , Jy su variante idntica, la hemoglobina
DPunjab
.,,
resultado una carga positiva neta. La hemoglobina C se son las ms habituales, con glicina sustituida por el cido
encuentra en frica occidental, en las cercanas del norte glutmico en la posicin 121 de la cadena p. A la hemoglo
de Ghana en un 17 a 28% de la poblacin, y en Estados bina Dpunjab se le encuentra en el noroeste de la India, pero
Finidos en un 2 a 3% de afroestadounidenses. se le llega a observar en ingleses, portugueses y franceses
La forma heterocigtica, la hemoglobina AC, es asinto debido a la cercana conexin histrica de estos pases con
mtica. La forma homocigtica suele causar anemia leve la parte
r
del este de la India. La hemoglobina
o
D, Los,Angeles
. se
y compensada de manera adecuada que se caracteriza por encuentra en el 0 .02 % de afroestadounidenses.
dolor abdominal y esplenomegalia. La caracterstica ms El estado homocigtico es raro. Hay anemia o esple
prominente de laboratorio es la presencia de clulas blan nomegalia leve, o ambas, y slo anisocitosis ligera. La
co. Existe la tendencia a formar estructuras cristaloides afinidad por el oxgeno es ms elevada que en la sangre
grandes, oblongas y hexagonales dentro de la clula roja. normal. Los individuos heterocigticos son asintomticos.
Estas estructuras son ms prominentes en pacientes a los El diagnstico diferencial se establece con electroforesis.
que se somete a esplenectoma. Sobre el acetato de celulosa, la hemoglobina D emigra con
Se obtiene un diagnstico diferencial por electroforesis la hemoglobina S en proporciones de 35 a 50%. Sobre agar
sobre acetato de celulosa. La hemoglobina C se mueve con citrato, la hemoglobina D emigra con A.
la hemoglobina A2 y es negativa en la prueba de solubili
dad. En la forma heterocigtica, la hemoglobina C cae en D efectos cuantitativos d e la hem oglobina:
el rango de 35 a 48% . Las hemoglobinas E, O y CHarlememi las talasem ias
gran con la hemoglobina C. Estas variantes de la hemoglo Las talasemias son un grupo de enfermedades en las que
bina se distinguen con facilidad de la hemoglobina C por ocurre un defecto en el ndice de la sntesis de una o ms de
electroforesis sobre agar de citrato a un pH cido. las cadenas de la hemoglobina, pero las cadenas son normales
388 PARTE II CORRELACIONES CLNICAS Y PROCEDIMIENTOS ANALTICOS
A una mujer afroestadounidense de 54 aos de edad se de la electroforesis sobre acetato de celulosa y agar
le ingres en el hospital con la queja principal de dolor citrato. En la radiografa de rayos X del pecho se mos
en la parte izquierda de la cadera y letargo. Presentaba tr infiltracin en el lbulo derecho inferior con con
un largo historial de varias visitas a la sala de urgencias gestin vascular pulmonar y bazo inflamado. El lquido
por el dolor de la cadera en busca de medicacin. Antes aspirado del tubo nasogstrico fue positivo en sangre.
se le encontr prueba de solubilidad positiva para la A la paciente se le administr medicamento para
hemoglobina S, pero neg antecedente de anemia fal- neumona de aspiracin, sangrado gastrointestinal y
ciforme. Existan antecedentes familiares de rasgo de paro cardiaco congestivo. Se le proporcionaron glbu
clulas falciformes. Diez aos antes se le practic mas- los rojos empacados, plasma fresco congelado y plaque
tectoma para cncer de pecho. Los valores de ingreso tas, pero su estado continu empeorando. Seis horas
en laboratorio fueron los siguientes: ms tarde, las pruebas de laboratorio confirmaron coa
Hemoglobina 5.3 g/dl gulacin intravascular diseminada (CID). Se realiz
Hematcrito 17% una biopsia de la mdula sea, que revel la necrosis
VCM 82 0 extensa de los componentes de la mdula. Tres horas
MCHC 31 g/dl ms tarde, la paciente muri por un paro cardaco.
Cuenta de glbulos blancos 12 000/pl
Recuento de plaquetas 53 000/pl
Diferencial Normal Preguntas
Recuento de reticulocitos 6.4% (corregido, 2.4%) 1. Qu hemoglobinopata est indicada de acuerdo
Morfologa de glbulos rojos Clulas blanco; esfe- con los patrones de la electroforesis de la hemoglo
rocitos; esquistocitos; bina?
manchas basofilcas; y
formas bizarras, inclu 2. Qu caracterstica clnica de esta enfermedad difi
yendo alargadas, riere del cuadro tpico de la anemia falciforme?
en forma de bloque
3. Qu otras hemoglobinas interactan con la hemo
y clulas teidas de
globina S y cmo se diferencian de la hemoglobina C l
manera ms
densa 4. La muerte de esta paciente se debi a la hemoglobi
nopata? Es poco habitual que la hemoglobina SC
Se solicit electroforesis de hemoglobina. En la figu disminuya el tiempo de vida?
ra 16-4.1 de estudio de caso se muestran los patrones
m
CSFA -1 F A S C
ISJ
m Hb FA control
M 11
w
w
i ti HbASC control r< i
*
*
i Normal Hb A patient f
OI ft c
o
19 Case 13-3 patient
0 m
-4
i Hb FA control ti
III Hb ASC control If 1
m
Normal Hb A patient m
1 1
(O
Case 13-3 patient ce
mJk i 1
O o
0 . 0.
FIGURA 16-4.1 DE ESTUDIO DE CASO. Patrones electroforticos de la hemoglobina. (A) Acetato de celulosa
a pH 8.4. (B) Agar de citrato a pH 6.2. (Datos del estudio de caso cortesa de la Dra. Margaret Uthman, Facultad
de Medicina de la Universidad de Texas en Houston.)
CAPTULO 16 PORFIRINAS Y HEMOGLOBINA 389
el procesamiento o la traduccin defectuosa del RNAm del recuento de glbulos rojos en la talasemia menor es ms
gen que dirige la produccin de la cadena (3.18 Por lo gene elevado de lo que se esperara con la concentracin de
ral, las P'talasemias se dividen en enfermedad homocig- hemoglobina acompaante. Adems, se observan algunas
tica, denominada talasemia mayor o anemia de Cooley, y clulas blanco o manchado basoflico ocasional en frotis
enfermedad heterocigtica, a la que se le conoce como tala teido. El parmetro de distribucin ancha de las clulas
semia menor. Sin embargo, la expresin clnica de la enfer rojas (DAR) en instrumentos automatizados, que es una
medad es heterognea, lo que depende del tipo de defecto medicin cuantitativa de la variacin del tamao de gl
gentico y de la implicacin con otros sitios del gen. La bulos rojos, tal vez sea til para diferenciar ambos trastor
enfermedad se divide de manera amplia en dos subtipos nos. Dicho parmetro suele ser normal en la talasemia y se
principales de acuerdo con la expresin gentica: P1, en el incrementa en la deficiencia de hierro como resultado de
que las cadenas P se producen en cantidades reducidas, y la heterogeneidad de los glbulos rojos. En la electrofore
P, en el que estn ausentes por completo las cadenas p. sis de hemoglobina de la talasemia menor se muestra de
La Talasemia P1 es el tipo ms frecuente. Existe cierta manera caracterstica aumento de la hemoglobina Ar La
sntesis de las cadenas P-globina pero en cantidades bas cuantificacin de la hemoglobina A2 por cromatografa de
tante menores (5 a 30% ) de lo normal. El defecto bioqu columna a menudo revela valores de entre 3.5 y 7%.
mico muestra una deficiencia cuantitativa de p-globina La 8-P-talasemia es un tipo raro caracterizado por ausen
RNAm. El patrn de la electroforesis de la hemoglobina y cia total tanto de sntesis de la cadena P de la hemoglobina
la cuantificacin de hemoglobina F y A muestran alrededor A como de la sntesis de la cadena 8 de la hemoglobina Ar
de 2 a 8% de la hemoglobina A, una cantidad elevada pero Los pacientes homocigticos tienen 100% de hemoglobina
variable de hemoglobina F y el resto de hemoglobina A. El E Las personas heterocigticas tienen 93% de la hemoglo
volumen celular medio (VCM) es bajo, con anemia grave, bina A, 2 a 3% de hemoglobina A, y 3 a 10% de hemo
reticulocitos, glbulos rojos nucleados, manchado basofli- globina E
co, clulas blanco, poiquilocitosis extrema y anisocitosis. Los pacientes son anmicos y muestran un fenotipo
La p-talasemia explica 10% de la p-talasemia homoci- talasmico porque la sntesis de la cadena y de la hemo
gtica, con ausencia total de sntesis de la cadena P pero globina F no es igual a la sntesis de la cadena a . Existe una
sntesis intacta de las cadenas y. En la forma homocigtica, produccin de cadena y de alrededor de la tercera parte de
hay 1 a 6% de hemoglobina A, y 95% de hemoglobina E La la cadena a . La hemoglobina F se distribuye de manera
concentracin de hemoglobina es baja, con anemia grave. heterognea entre los eritrocitos, segn se revela por el
El aspecto clnico de la forma heterocigtica es similar a la procedimiento de tincin por elucin cida.
P1 talasemia homocigtica. La persistencia hereditaria de la hemoglobina fetal
La P-talasemia homocigtica (P-talasemia mayor), tanto (PHE1F) es gentica y heterognea desde el punto de vista
P1como p, es una enfermedad incapacitante en la infancia. hematolgico. En negros africanos y afroestadounidenses,
sta es diferente en la a-talasemia, en la que el nio muere hay ausencia total de la sntesis de la cadena P y de la 8
poco tiempo despus de nacer o lleva una vida normal. La debido a las supresiones en el cromosoma 11. En adultos, la
anemia hipocrmica y microctica es resultado del defecto sntesis de la cadena y est presente a un nivel alto. Adems,
en la sntesis funcional del tetrmero de la hemoglobina y en contraste con la sntesis de la hemoglobina F en la P-
de la destruccin prematura de los glbulos rojos, tanto talasemia o 8-P-talasemia, se distribuye de manera unifor
intramedular como extramedular, debido al aumento de me. En los heterocigotos, no hay desequilibrio en la sntesis
las cadenas a . La mdula sea se compensa al expandir en de la cadena de globina. Existe 17 a 33% de la hemoglo
gran medida su tamao, lo que algunas veces causa anor bina E Los pacientes son normales desde el punto de vista
malidades estructurales del hueso. El tratamiento de las clnico. En homocigticos, existe 100% de hemoglobina fi
formas graves de la enfermedad incluye la terapia regular sin sntesis de hemoglobina A o Ar No hay anormalidades
de transfusin, frmacos de quelacin de hierro para elimi hematolgicas significativas, con excepcin de la eritroci-
nar su exceso y suplementos de cido flico.20 El trasplante tosis. Estos pacientes son, tambin, asintomticos.
de mdula sea tiene xito si se encuentra disponible un
donador de HLA idntico.18 Est en estudio la terapia del M etodologa
gen como tratamiento alternativo a futuro.21,22
La p talasemia heterocigtica (talasemia menor) se pro La mayor parte de las hemoglobinopatas y talasemias
duce por herencia de un gen de la talasemia, sea p1o p. El se diagnostican por medio de recuento de sangre com
otro gen que dirige la produccin de la cadena P es normal pleto (RSC), evaluacin de pelcula de sangre, prueba
y la supervivencia de los glbulos rojos no se reduce. Cerca de solubilidad y electroforesis en acetato de celulosa. La
de 1% de los afroestadounidenses padecen la enfermedad y electroforesis en agar de citrato tal vez sea necesaria para
se observa con frecuencia, tambin, en personas de ascen la confirm acin de algunas hemoglobinas anormales. Es
dencia mediterrneas y rabes. Desde el punto de vista posible que las talasemias requieran cuantificacin de la
clnico, este trastorno es asintomtico, pero algunas veces hemoglobina A , o F a travs de mtodos ms definitivos.
causa anemia microctica leve. Los valores hematolgicos Tal vez la ferritina srica sea til para distinguir entre tala
de laboratorio se asemejan a los de la anemia por deficien semia menor y anemia por deficiencia de hierro. En los
cia de hierro. Es importante distinguir entre ambas porque casos ms complicados llegan a requerirse procedimientos
requieren tratamientos muy diferentes. Por lo general, el especializados, como el anlisis de la cadena de a-P-globi-
CAPTULO 16 * PORFIRINAS Y HEMOGLOBINA 391
ES T U D IO D E C A S O 16-5
Un nio caucsico de 5 aos de edad fue valorado por RSC y, despus, electroforesis de hemoglobina. Los
un mdico por una infeccin del tracto respiratorio resultados fueron:
superior y se observ esplenomegalia. Se solicit un
INTERVALO DE REFERENCIA
na 23,24 cromatografa lquida de intercambio catinico de des que refractan y desvan rayos de luz, lo que produce
alta resolucin24-23 o prueba con tecnologa de DNA.24-26 una solucin turbia. Se coloca una cantidad pequea de
glbulos rojos empaquetados en una solucin reguladora
P ru eb a d e solubilidad (p ru eb a d e valoracin d e de ditionita de sodio con saponina para lisar los glbulos
hem oglobinas dainas)2728 rojos en un tubo de cristal de 12 X 75 mm. Despus de
La prueba de solubilidad se basa en el principio de que mezclarse bien e incubarse a temperatura ambiente duran
la hemoglobina daina, en estado desoxigenado, es rela te 5 min, el tubo que contiene la solucin se coloca casi
tivamente insoluble y forma un precipitado cuando se a 2.5 cm frente a una tarjeta pesada de ndice de lneas
coloca en una solucin amortiguadora de fosfato con ele negras. Si no hay hemoglobina daina presente, las lneas
vada molaridad. El precipitado aparece debido a que las de la tarjeta se observarn con facilidad. De lo contrario,
molculas de la hemoglobina desoxigenada forman tactoi- las lneas sern indistintas o imposibles de leer. La prueba
392 PARTE II CORRELACIONES CLNICAS Y PROCEDIMIENTOS ANALTICOS
na en una solucin de 1.25 mol/L de NaOH durante dos La fortaleza especial de la tecnologa del DNA radica en
minutos. La hemoglobina A desnaturalizada se precipita el diagnstico prenatal de la talasemia mayor. Debido a que
con sulfato amonio y se separa por filtracin. La densidad los genes de la globina estn presentes en todos los tejidos,
ptica de la solucin sobrenadante clara se lee a 540 nm, incluyendo los que no estn activos, es posible establecer el
en tanto el porcentaje de la hemoglobina fetal se calcula diagnstico prenatal de los estados talasmicos a travs de
contra la densidad ptica de las soluciones de hemoglobi muestras de tejido que son relativamente fciles de obte
na total.28 Se recomienda la cromatografa lquida de alta ner, como villi corinica o clulas del lquido amnitico,
resolucin como mtodo de eleccin para la cuantifica- en lugar de sangre fetal, que se obtiene con mucha mayor
cin de la hemoglobina fetal .25 dificultad y con riesgo bastante ms elevado para el feto .26
El adulto promedio tiene menos de 1.5% de hemoglobi Adems, la tecnologa del DNA se utiliza en el diagnsti
na fetal. Sin embargo, es posible encontrar concentraciones co prenatal de la anemia falciforme. Las clulas fetales obte
elevadas en varias enfermedades heredadas y adquiridas. nidas por amniocentesis o muestreo de vellosidad corinica
Se sospecha persistencia hereditaria de hemoglobina fetal se analizan con tcnicas similares a las que se utilizan en las
en individuos que poseen 10% o ms de hem oglobina talasemias. Tambin es posible emplear la electroforesis de
fetal sin otras anormalidades clnicas evidentes. hemoglobina en un hemolisato de clulas de sangre fetal en
casos en los que la tecnologa de prueba de ADN es inase
Tecnologa del DNA quible o cuando se requieren resultados rpidos, debido a la
avanzada edad gestacional del paciente .28
El diagnstico definitivo de algunas hemoglobinopatas y
talasemias que implican combinaciones de defectos gen
ticos tal vez requiera anlisis de DNA. Con el aumento en M IOGLOBINA
el uso y la eficacia de la tcnica de reaccin en cadena de
Estructura y funcin en el cuerpo
la polimerasa, la secuencia de DNA en cuestin se analiza
con facilidad a partir de sangre entera o puntos de sangre La mioglobina es una hemoprotena encontrada slo en el
seca sobre filtro de papel. Con los mtodos de secuencia msculo esqueltico y cardaco de seres humanos. Se une de
automatizados disponibles en la actualidad, el tiempo manera reversible con el oxgeno de forma similar a la mo
requerido para realizar este tipo de anlisis no es mucho lcula de hemoglobina. Sin embargo, la mioglobina no libera
mayor al de la metodologa estndar. Las desventajas de oxgeno, excepto bajo tensin de oxgeno escaso. La mio
estos mtodos son el elevado costo y la falta de disponibili globina es una hemoprotena simple que contiene una cade
dad en la mayor parte de los laboratorios rutinarios. Entre na de polipptido y un grupo hemo por molcula. La cadena
las ventajas se encuentran el suministro de informacin de polipptido contiene 153 aminocidos, lo que hace que
definitiva del genotipo del paciente y, en algunos casos, sea un poco ms grande que una cadena en la molcula de
la deteccin directa de lesiones moleculares. Las tcnicas la hemoglobina. Por tanto, su tamao es un tanto mayor a
especficas se analizan en otra parte .24,26 una cuarta parte de una molcula de hemoglobina, con un
ES T U D IO D E C A S O 16-6
Una mujer caucsica de 22 aos de edad con herencia A partir de estos valores, el profesor de hematologa
italiana dijo que tena anemia leve y recibi tratamiento sospech un trastorno heredado en lugar de deficien
peridico con hierro durante su vida. Era estudiante de cia de hierro y sugiri que la estudiante se pusiera en
un programa cientfico de laboratorio clnico y se some contacto con su mdico para realizar pruebas adiciona
ti a RSC como parte de una clase de hematologa. les. La electroforesis de hemoglobina revel cantidades
Los valores del laboratorio fueron los siguientes: un poco mayores de hemoglobina F y Av que luego se
cuantificaron para mostrar 3.2% de hemoglobina F y
Intervalo de referencia 4.2% de hemoglobina Ar Los estudios de hierro eran
Hemoglobina 11.0 g/dl 11.7-15.7 g/dl normales.
Hematcrito 34% 35-47%
Glbulos Rojos 5.8 X 1012/L 3 .8-5.2 X 1012/L Preguntas
VCM 59.4 fl 80-100
MCHC 31.9% 32-36% 1. Cul es el trastorno ms probable?
RDW 14.2% 11.5-14.5% 2. Cules valores del RSC llevaron al profesor a suge
rir pruebas adicionales?
3. Por qu es importante que este trastorno se diag
nostique de manera adecuada?
394 PARTE II CORRELACIONES CLNICAS Y PROCEDIMIENTOS ANALTICOS
peso molecular de alrededor de 17 000. El tomo del hierro la isoenzima MB de la creatina cinasa (CKMB) o troponina
en el centro del grupo hemo constituye el sitio del enlace (T o ) . Aunque el incremento de mioglobina en la circu
reversible del oxgeno, idntico al de la molcula de hemo lacin proporciona un indicador temprano en el infarto
globina. En el cuerpo, la mioglobina acta como portador del miocardio, los resultados falso-positivos llegan a ocu
de oxigeno en el citoplasma de la clula muscular. Su fun rrir a partir de cualquier lesin del msculo esqueltico
cin principal es el transporte del oxgeno de la membrana que tambin contenga hemoglobina. El uso de mioglobina
de la clula muscular a la mitocondria. La mioglobina sirve como marcador temprano ser seguido por el uso de un
como reserva extra de oxgeno para ayudar al msculo a marcador definitivo, como la troponina (T o ) , que es mas
mantener por ms tiempo la actividad ejercitante. especfico para enfermedad cardaca pero no aparece en la
sangre tan rpido. A pesar de la especificidad deficiente de
Significado clnico la mioglobina para el miocardio, se debe descartar dao
al msculo esqueltico en muchos casos. Los resultados
El dao a los msculos a menudo produce aumento de las negativos de mioglobina en las primeras horas despus del
concentraciones de mioglobina en suero y orina (cuadro dolor en el pecho se utilizarn para descartar infarto del
16-2). La aclaracin renal es rpida, en tanto la mioglobi- miocardio. En los casos en que se emplea terapia trombo-
nemia posterior a una sola lesin tiende a ser transitoria. ltica en el tratamiento del infarto del miocardio, se usarn
Las concentraciones altas de mioglobina llegan a ocasio las concentraciones de mioglobina combinadas con CKMB
nar insuficiencia renal aguda (IRA). La medicin de m io e indicaciones clnicas como indicadores de la reperfusin
globina en suero y orina debe utilizarse para calcular el de la arteria ocluida .37A la mioglobina tambin se le ha
ndice de aclaracin de la mioglobina. La combinacin investigado para ayudar en el diagnstico y la diferencia
de mioglobina srica elevada ( ^ 4 0 0 ng/ml) y un ndice cin de los distintos tipos de distrofia muscular progresiva
de aclaracin bajo ( 4 mL/min) indica riesgo de IRA .35 hereditaria .38 En el captulo 8 , Am inocidos y protenas, se
La mioglobina en orina tendr una reaccin cruzada con analiza con mayor detalle la mioglobina.
la prueba de la hemoglobina en la marca de medicin y
causar una reaccin positiva. La confirmacin de la mio- M etodologa
globinuria por un anlisis ms especfico, como el inmu-
noanlisis, permite la diferenciacin de la hemoglobinuria. Existen varios mtodos de inmunoensayo para la medi
Es posible realizar medicin de la mioglobina en orina o cin e identificacin de la mioglobina. Estos procedi
suero cuando se sospecha que la rabdomilisis o cualquier mientos implican la unin de anticuerpos especficos a la
enfermedad o lesin produce dao muscular. mioglobina, lo que produce un cambio qumico o fsico
En la actualidad, la principal aplicacin de la prueba (p. ej., fluorescencia, quimioluminescencia, inmunocr-
de mioglobina srica radica en la investigacin del dolor m ico) que se mide y correlaciona con la concentracin de
de pecho para diagnosticar o descartar el infarto de mio mioglobina. Estos mtodos se adaptaron a los dispositivos
cardio agudo (IMA). La mioglobina se recomienda como del lugar de atencin para la evaluacin rpida del dolor
marcador opcional para la deteccin temprana del IMA .36 del pecho, as como los mtodos convencionales para pla
Las clulas del msculo cardaco daado liberan mioglobi taformas del analizador multianaltico .39,40 Aunque el plas
na en las primeras horas del comienzo del infarto del mio ma es la muestra de eleccin para el anlisis del marcador
cardio, con valores mximos en un plazo de 2 a 3 h o hasta cardaco, hay evidencia de que diferentes anticoagulantes
en 30 min. Por tanto, la mioglobina constituye el primer tienen diversos efectos sobre los anlisis comerciales par
marcador cardaco que aumenta, incluso ms pronto que ticulares para la mioglobina .39 Adems, est demostrado
que existen diferencias en la precisin y el rango de refe
rencia entre los diversos anlisis de mioglobina .39
CUADRO 16-2. C A U SA S DE ELEV A C I N DE LA
M IO G LO BIN A RESUM EN
Infarto del Infarto sin angina Las porfirinas son intermedias en las distintas etapas que
miocardio agudo conforman la sntesis del hemo, un grupo de quelacin de
Rabdomilisis Fracturas mltiples; hierro que se une al oxgeno. La sntesis de hemo comien
traumatismo muscular za en la mitocondria por combinacin de la glicina y la
succinil-CoA para formar ALA. El PBG se forma a partir
Insuficiencia renal Miopatas del ALA en el citoplasma. El ALA y PBG son precursores
Ejercicio vigoroso Inyecciones para la formacin de porfirinas. El uroporfiringeno y el
intramusculares coproporfiringeno se forman en el citoplasma, en tanto el
Ataques tnico-clnicos
protoporfiringeno se sintetiza en la mitocondria. Luego
Ciruga a corazn abierto
se forma la PROTO, que incorpora el hierro para formar el
Descarga elctrica Trombosis arterial hemo. La ALA sintasa es la enzima que controla el ndice
Ciertas toxinas Hipertermia maligna de la sntesis del hemo y se regula por la cantidad de hemo.
Las deficiencias de la enzima llegan a presentarse en casi
Distrofia muscular Lupus eritematoso
cualquier etapa de la sntesis de hemo, lo que da como
sistmico
resultado un grupo de trastornos heredados denominados
CAPTULO 16 PORFIRINAS Y HEMOGLOBINA 395
P R E G U N T A S DE R E P A S O
1. El propsito principal de las porfirinas en el cuerpo 5. Los niveles muy elevados de ALA y PBG en orina con
es: cifras normales de porfirina en las heces y la sangre lo
a) Llevar oxgeno al tejido. ms probable es que indiquen:
b) Transportar hierro. a) Porfiria intermitente aguda (PIA).
c) Combinarse con la hemoglobina libre. b) Porfiria eritropoytica (PE).
d) Contribuir a la sntesis del hemo. c) Coproporfiria hereditaria(CPH).
d) Porfiria cutnea tarda (PCT).
2. Los dos sitios principales en el cuerpo para la acumu
lacin del exceso de porfirinas son: 6. A los trastornos hereditarios en los que los defectos
a) El hgado y la mdula sea. genticos causan anormalidades en el ndice y la canti
b) El corazn y el pulmn. dad de sntesis de las cadenas de polipptidos norma
c) El msculo y la sangre. les desde el punto de vista estructural de la molcula
d) El hgado y el bazo. de la hemoglobina se les denomina:
a) Hemoglobinopatas.
3. Las dos clases principales de porfirias, de acuerdo con
b) Porfirias.
los sntomas, son:
c) Discrasias moleculares.
a) Eritropoytica y heptica.
d) Talasemias.
b) Neurolgica y cutnea.
c) Congnita y adquirida. 7. El aumento de la hemolisis intravascular est indica
d) Hematolgica y muscular. do por una disminucin de:
a) Metahemoglobina.
4. El porfobilingeno suele cuantificarse en la orina por:
b) Metahemalbmina.
d) El mtodo de Watson-Schwartz.
c) Haptoglobina.
b) Cromatografa de capa fina.
d) Hemopexina.
c) Columna de intercambio inico.
d) Electroforesis. 8. Cules de las siguientes hemoglobinas anormales,
encontradas con frecuencia en individuos de sureste
de Asia, emigran con la hemoglobina A 2 en electrofo
resis de acetato de celulosa?
a) Hemoglobina D.
b) Hemoglobina E.
c) Hemoglobina C.
d) Hemoglobina Lepore.
396 PARTE II CORRELACIONES CLNICAS Y PROCEDIMIENTOS ANALTICOS
9. Qu tipo de a-talasemia se origina por la supresin de 12. Cual de las siguientes pruebas es la m ejor para dife
tres genes y produce anemia hemoltica moderada? renciar la (3-talasemia menor de la anemia por defi
a) Enfermedad de la hemoglobina H. ciencia de hierro?
b) Hemoglobina de Bart. a) Electroforesis de la hemoglobina (acetato de celu
c) Hidropesa fetal. losa, pH alcalino).
d) Rasgo de talasemia. b ) Prueba de solubilidad.
c) Recuento de sangre completo.
10. La manera ms eficaz de cuantificar la hemoglobina
d) Cuanticacin de la hemoglobina Ar
A2 es por:
a) Densitometra. 13. Cul es la secuencia correcta de la migracin electro
b ) Electroforesis en agar de citrato. fortica de las hemoglobinas de la ms lenta a la ms
c) Prueba de desnaturalizacin alcalina. rpida sobre acetato de celulosa a un pH alcalino?
d) Cromatografa de columna. a) C, S, F, A.
b) C, A, S, E
11. Las concentraciones de mioglobina en suero o plasma
c) C, S,A, E
se utilizan como:
d) A, F, S, C.
a) Pruebas de la funcin heptica.
b ) Marcador temprano del infarto del miocardio
agudo.
c) Indicador de envenenamiento por plomo.
d) Indicador de cardiopata congestiva.
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CAPTULO 16 PORFIRINAS Y HEMOGLOBINA 397
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P A R T E
398
CA PTULO
Introduccin a las
hormonas y la funcin
hipofisaria
Robert E. Jones
17
C O N T E N I D O D E L C A P I T U L O
O B J E T I V O S
399
400 P A R T E III V A L O R A C I N D E L A S F U N C IO N E S D E L S IS T E M A O R G N IC O
___________________________________________ T R M I N O S C L A V E
El trmino pituitario (derivado del latn y del griego) sig sa de Rathke, una evaginacin del ectodermo bucal que
nifica, de manera literal, escupir m oco, lo que refleja la se extiende de manera gradual hacia arriba y a la postre
nocin primitiva de la funcin pituitaria. De cierta mane queda envuelta por el hueso esfenoide. La creacin de la
ra, los fisilogos antiguos estaban en lo correcto: crean em inencia m edia, la porcin inferior del hipotlamo, y el
que el cerebro era responsable de indicar a la pituitaria tallo hipofisario son otros acontecimientos crticos en la
el momento de secretar. Sin embargo, en lugar de moco, formacin de la unidad hipotalmica-hipofisaria. Es posi
ms adelante se descubri que el cerebro ordena a la ble detectar la funcin hipofisaria alrededor de la novena
pituitaria secretar hormonas que regulan otras glndulas semana de gestacin.
endocrinas. Cuando esto se descubri, a la pituitaria se La hipfisis reside en una bolsa del esfenoides (la sella
le denomin glndula maestra porque, sin ella, exista turcica, que significa silla turca) y est rodeada por la dura
cese del crecimiento, junto con alteraciones profundas en madre. La reflexin de la dura que separa la parte superior
el metabolismo intermediario y falla en la funcin gona- de la hipfisis del hipotlamo, la silla del diafragma, es
dal, tiroidea y suprarrenal. A la pituitaria tambin se le penetrada por el infundbulo, o tallo hipofisario, que conec
conoce como hipfisis, que en griego significa crecimiento ta la adenohipfisis con la em inencia m edia y el hipotlam o.
bajo, lo que hace referencia a su posicin nica debajo del El tallo hipofisario contiene estructuras neurales y vascu
hipotlamo. lares que terminan en la hipfisis. La hipfisis posterior
Nuestro concepto de la funcin hipofisaria (pituitaria) est conectada con los ncleos hipotalmicos supraptico
y de su papel en la regulacin de otras glndulas endocri y paraventricular (donde se producen la vasopresina y la
nas ha cambiado. Ms que verla como la glndula maestra, oxitocina) por medio de dos tubos neurosecretores distin
es ms apropiado reconocerla como un instrumento que tos que pasan a travs del tallo. La hipfisis anterior recibe
traduce los impulsos nerviosos en un producto hormonal 80 a 90% de su aporte sanguneo y muchos factores hipo
o endocrinolgico. Entre las caractersticas que distinguen talmicos a travs del sistem a portal hipotalm ico-hipofi-
la funcin de la hipfisis se incluyen asas de retroalim enta sario, tambin contenido en el tallo. El plexo primario de
cin, secreciones pulstiles, ritmos diurnos y la modificacin este sistema portal se localiza en la em inencia media, y
ambiental o externa de su desempeo. Estos elementos est compuesto de capilares que carecen de una barrera
distintivos de la operacin hipofisaria llegan a complicar sangre-cerebro (capilares fenestrados) donde terminan los
la evaluacin clnica de una enfermedad endocrina sospe axones de los ncleos hipotalmicos que modulan la fun
chada o, como alternativa, dan gran relevancia a los defec cin hipofisaria. A su vez, los vasos portales largos conec
tos sutiles de la funcin endocrinolgica. tan el plexo primario con la hipfisis anterior y sirven
como conducto para las hormonas hipotalmicas-hipofi-
EM BRIO LO GA Y ANATOM A siotrpicas. En la figura 17-1 se ilustran estas relaciones
anatmicas .1
Las tres diferentes partes de la hipfisis son la hipfisis
anterior, o adenohipfisis; el lbulo intermedio, o pares ASPECTO S FUNCIONALES DE LA UNIDAD
intermediales; y la hipfisis posterior, o neurohipfisis. El
HIPOTALM ICA-HIPOFISARIA
lbulo intermedio se desarrolla de manera deficiente en
los seres humanos, y tiene poca capacidad funcional dis Las rutas aferentes (entradas) al hipotlamo se integran en
tinta a la de confundir a los radilogos al formar exten varios ncleos especializados, se procesan y luego se divi
siones no funcionales, benignas y csticas de la hipfisis. den en respuestas de patrones especficos. Debido a que
La hipfisis posterior, que proviene del diencfalo, es res el hipotlamo tiene muchas conexiones neurales eferentes
ponsable del almacenamiento y la liberacin de la oxito (salidas) a los centros ms altos del cerebro (el sistema lm-
cina y de la vasopresina (a la que tambin se le conoce bico, el sistema nervioso autnomo y la hipfisis), al pare
como horm ona antidiurtica [ADH]). La hipfisis anterior, cer estas respuestas son ms bien difusas pero en realidad
la porcin ms grande de la glndula, se origina en la bol son estereotipadas.2 La patrones de respuesta hipotalmica
CAPTULO 17 INTRODUCCIN A LAS HORMONAS Y LA FUNCIN HIPOFISARIA 401
la luz del da y la oscuridad. El trmino zeitgeber (donante nifica que sus acciones son especficas para otra glndula
de tiempo) se refiere al proceso de arrastrar o sincronizar endocrina, o efectores directos, porque actan de manera
estos estmulos externos dentro de la funcin de los relo directa sobre tejido perifrico. La TSH y su papel nico en
jes biolgicos internos. Como resultado, muchas hormo la funcin reguladora de la tiroides es un ejemplo trpico;
nas hipofisarias se secretan en cantidades diferentes, lo que un ejemplo de efector directo es la GH. sta tiene efectos
depende de la hora del da. Estos ritmos circadianos, o diur directos sobre el metabolismo del substrato en varios teji
nos, se caracterizan por secrecin de la adrenocorticotropina dos y estimula, tambin, el hgado para producir factores
(ACTH), o de la TSH. Con la ACTH, el nadir de secrecin se de crecimiento que son crticos en la mejora del creci
encuentra entre las 11:00 p.m. y las 3:00 a.m., y el mximo miento lineal. Las hormonas trpicas son la LH, que dirige
ocurre al despertar o alrededor de las 6:00 a 9:00 a.m .6 El la produccin de la testosterona de las clulas de Leydig
ritmo circadiano de la ACTH es resultado de variaciones en hombres y la ovulacin en mujeres; la FSH, que es res
en la amplitud de la pulsacin, no de las alteraciones en la ponsable del reclutamiento ovrico y de la foliculognesis
frecuencia de la pulsacin .7 Las concentraciones nocturnas temprana en mujeres y espermatognesis en hombres; la
de la TSH son casi dos veces las del da y, al contrario de lo TSH, que controla la produccin de la hormona tiroides
que sucede con la ACTH, el aumento nocturno de la TSH es en la tiroides; y la ACTH, que regula la esteroidognesis
resultado del incremento en la amplitud de la pulsacin .8 suprarrenal. Tanto la GH como la prolactina son efectores
directos. En el cuadro 17-2 se muestra un resumen general
HORM ONAS HIPOFISIOTRPICAS de las relaciones entre las hormonas de la hipfisis anterior
O HIPOTALM ICAS y sus rganos objetivo, y efectores de retroalimentacin.
Las acciones de las hormonas trpicas se analizan en
El hipotlamo produce diversos productos. Sin embargo, en otros captulos dedicados a la glndula blanco especfica.
este captulo slo se analizan los que tienen efecto directo
en la funcin hipofisaria clsica. La mayor parte de los pro HORM ONA DEL CRECIMIENTO
ductos son pptidos, aunque tambin se sintetizan y trans
portan aminas bioactivas del hipotlamo. Las hormonas La hipfisis es vital para el crecimiento normal. El creci
hipotalmicas llegan a tener varias acciones. Por ejemplo, la miento cesa si se elimina la hipfisis. Adems, cuando se
TRH estimula la secrecin de TSH y de prolactina; la GnRH reemplazan los productos hormonales de otras glndulas
estimula la produccin de LH y FSH; y la som atostatina (SS) endocrinas que son accionadas por la hipfisis (tiroxina,
inhibe la hormona del crecimiento (GH) y libera TSH de la esteroides suprarrenales y esteroides gonadales), el creci
hipfisis. Adems de sus efectos sobre el metabolismo del miento no se restaura hasta que se administra hormona
agua, la vasopresina (ADH) estimula la secrecin de la adre del crecimiento. Sin embargo, cuando la hormona del cre
nocorticotropina (ACTH). Estas hormonas hipofisiotrpicas cimiento se presenta aislada sin las otras hormonas, el creci
se encuentran en todo el sistema nervioso central y varios miento no se promueve. Por tanto, se toma en cuenta el
otros tejidos, incluyendo el intestino, el pncreas y otras funcionamiento completo de la hipfisis para establecer las
glndulas endocrinas. Su funcin fuera del hipotlamo y condiciones adecuadas para el crecimiento del individuo.
de la hipfisis an no se comprende por completo. En el Adems, se requiere nutricin adecuada, concentraciones
cuadro 17-1 se resume la accin de las hormonas hipofisio normales de la insulina y buena salud general para alcan
trpicas en la funcin de la hipfisis anterior. zar el potencial de crecimiento gentico de una persona.
La hormona del crecimiento, tambin conocida como
HORM ONAS DE LA HIPFISIS ANTERIOR somatotropina, se relaciona desde el punto de vista estruc
tural con la prolactina y el lactgeno placentario humano.
Las hormonas secretadas de la hipfisis anterior son ms Un pptido simple con dos puentes disulfuro intramolecu
grandes y ms complejas que las sintetizadas en el hipot lares pertenece a la clase de efector directo de las hormonas
lamo. Estas hormonas hipofisarias son trpicos, lo que sig- de la hipfisis anterior. Los somatotropos, clulas hipofi-
Hormona luteinizante (LH) Gnada (trpica) Glucoprotena dimrica Esteroides sexuales (E/T)
Hormona foliculoestimulante (FSH) Gnada (trpica) Glucoprotena dimrica Inhibina
Hormona estimulante de la tiroides (TSH) Tiroides (trpica) Glucoprotena dimrica Hormonas tiroides (T4/T3)
Adrenocorticotropina (ACTH) Suprarrenal (trpica) Pptido simple derivado Cortisol
de POMC
Hormona del crecimiento M ltiple (efector Pptido simple Insulina sem ejante al fac
directo) tor de crecimiento (IGF-I)
Prolactina Seno (efector Pptido simple Desconocido
directo)
sarias que producen la hormona del crecimiento, afectan A cciones de la horm ona del crecim iento
alrededor de una tercera parte del peso hipofisario normal.
La hormona del crecimiento tiene muchos efectos diversos
La liberacin de somatotropina de la hipfisis es estimulada
sobre el metabolismo. Se le considera una hormona anfib-
por el pptido hipotalmico hormona liberadora de hormona
lica porque influye de forma directa en procesos anablicos
del crecimiento (GHRH). La secrecin de la somatotropina es
y catablicos. Uno de los efectos principales de la hormona
inhibida por la somatostatina (SS ).9 La hormona del creci
del crecimiento es que permite al individuo la transicin
miento se secreta en pulsaciones, con un intervalo prome
efectiva de un estado de alimentacin a un estado de ayu
dio de interpulsaciones de 2 a 3 h, con la cifra mxima al
no sin experimentar escasez de los sustratos requeridos
comienzo del sueo .10Entre estas pulsaciones, el nivel de la
para la oxidacin intracelular normal. La hormona del
hormona del crecimiento llega a caer por debajo del lmite
crecimiento antagoniza de manera directa el efecto de la
detectable, lo que origina la evaluacin clnica de la defi
insulina sobre el metabolismo de la glucosa, promueve la
ciencia de la hormona del crecimiento basada en una sola
gluconeognesis heptica y estimula la liplisis .9 Desde un
medicin desafiante.
punto de vista teleolgico, esto tiene perfecto sentido: el
Ningn otro sistema hipotalmico-hipofisario ilustra
mejoramiento de la liplisis proporciona sustrato oxidativo
de manera ms concreta el concepto de un paradigma de
para el tejido perifrico, como el msculo esqueltico, pero
circuito abierto que el que se observa con la hormona del
conserva la glucosa para el sistema nervioso central al esti
crecimiento. Las funciones intermitentes de GHRH/SS y el
mular la produccin heptica de la glucosa y oponerse a
patrn bsico de las pulsaciones secretoras de la hormona
la eliminacin de glucosa mediada por insulina. En efecto, la
del crecimiento son controladas en gran medida por otros
deficiencia de la hormona del crecimiento en nios a veces
factores (cuadro 1 7-3).11
se acompaa por hipoglucemia ;12 en adultos, tal vez ocurra
hipoglucemia si hay deficiencia de GH y ACTH.
CUADRO 17-3. OTROS MODIFICADORES DE LA Los efectos anablicos de la hormona del crecimiento
SECRECIN DE LA HORMONA DEL CRECIMIENTO se reflejan por la sntesis proteica mejorada en el msculo
esqueltico y otros tejidos. Esto se traduce a un equilibrio
ESTIMULAN LA SECRECIN DE LA INHIBEN LA SECRECIN DE LA
de nitrgeno positivo y retencin de fosfato.
HORMONA DEL CRECIMIENTO HORMONA DEL CRECIMIENTO Aunque la hormona del crecimiento tiene efectos direc
Sueo Carga de glucosa tos en muchos tejidos, tambin tiene consecuencias indi
Ejercicio p-Agonistas (p. ej.. rectas que son mediadas por factores a los que en principio
adrenalina) se les denomin som atom edinas. En experimentos tempra
nos, fue evidente que los suplementos de la hormona del
Estrs fisiolgico a-Bloqueadores (p. ej..
fentolam ina) crecimiento en animales hipofisectomizados indujeron la
produccin de un factor adicional que estimul la incor
Aminocidos Estrs emocional/
poracin de sulfato en cartlago. Como a esta protena
(p. ej., arginina) psicogemco
se le purific, result evidente que haba ms de una
Hipoglucemia Deficiencias nutricionales somatomedina y, debido a su homologa estructural con la
Esteroides sexuales Deficiencia de insulina proinsulina, la nomenclatura cambi a fa c to r de crecim ien
(p. ej., estradiol) to sem ejante a la insulina (FCI). Por ejemplo, la somatome
a-Agonistas Deficiencia de tiroxina dina C, el principal factor de crecimiento inducido por la
(p. ej., noradrenalina) hormona del crecimiento, ahora es FCI-I. Los FC I tambin
poseen receptores superficiales celulares que son distintos
p-Bloqueadores
(p. ej., propranolol)
de la insulina. Sin embargo, los niveles suprafisiolgicos
de F C I-II llegan a sangrar sobre el receptor insulnico y
404 PARTE III VALORACIN DE LAS FUNCIONES DEL SISTEMA ORGNICO
ES T U D IO D E C A S O 17-1
pero mantenidos de manera inadecuada, de la hormona sntesis de FCI-I, los receptores de FC I-I o los defectos en
del crecimiento, las concentraciones elevadas de FC I-I son la traduccin de las seales de la GH. Los pacientes con
provechosas. Sin embargo, la falta de supresibilidad de la insensibilidad a la GH no responden de manera normal
hormona del crecimiento a una dosis de glucosa constitu a la administracin exgena de hormona del crecimien
ye la prueba definitiva .21 to. Por ltimo, las lesiones estructurales de la hipfisis o
El tratamiento de la acromegalia llega a resultar desa el hipotlamo tambin causan deficiencia de la GH, y es
fiante. El objetivo del tratamiento es la ablacin del tumor, posible que se relacionen con otras deficiencias de la hor
con la continuacin de la funcin del resto de la hipfisis. La mona de la hipfisis anterior .32
adenomectoma transfenoidal es el procedimiento de elec En adultos, se ha descrito el sndrome de deficiencia de
cin .28Si los valores normales de hormona del crecimiento y hormona del crecimiento en pacientes que tienen falla com
de la cintica (supresibilidad normal a la glucosa) se restau pleta o incluso parcial de la hipfisis anterior. Los sntomas
ran despus de la ciruga, es probable que el paciente se cure. de este sndrome son bastante vagos e incluyen aislamien
Por desgracia, es posible que los tumores que producen la to social, fatiga, prdida de motivacin y disminucin del
hormona del crecimiento sean demasiado grandes o invadan sentimiento de bienestar,33 aunque en varios estudios se
estructuras locales que impidan la extirpacin quirrgica documenta aumento de la mortalidad en adultos con defi
completa y dejen al paciente con un tumor ms pequeo, ciencia de la GH .34 La osteoporosis y las alteraciones en la
pero con actividad hormonal. En esta situacin, suelen utili composicin corporal (es decir, reduccin de la masa cor
zarse la emisin externa o la radiacin enfocada, pero tal vez poral magra) son afecciones concomitantes frecuentes de la
se requieran varios aos para que disminuyan las concentra deficiencia de la hormona del crecimiento en adultos .35
ciones de la hormona del crecimiento .29Entre tanto, se reali La terapia de reemplazo de la hormona del crecimien
zan esfuerzos para suprimir la hormona del crecimiento. Es to se volvi relativamente sencilla con el surgimiento del
posible emplear dos clases diferentes de agentes: anlogos de recombinante humano de la hormona del crecimiento. En
somatostatina y agonistas dopaminrgicos.30 la actualidad, el costo de la hormona del crecimiento cons
tituye el factor limitante principal para el reemplazo.
Deficiencia de la horm ona del crecim iento
PROLACTINA
Ocurre en nios y adultos. En nios, tal vez sea familiar o
debida a tumores, como los craneofaringiomas. En adul La prolactina se relaciona desde el punto de vista estructural
tos, es resultado de las anormalidades estructurales o fun con la hormona del crecimiento y el lactgeno placentario
cionales de la hipfisis (vase la seccin H ipopituitarismo humano. Considerada como hormona del estrs, desempea
en este mismo captulo). Sin embargo, la declinacin de la funciones vitales en relacin con la reproduccin. A la pro
produccin de la hormona de crecimiento es consecuen lactina se le clasifica como hormona efectora directa (como
cia inevitable del envejecimiento, y la importancia de este oposicin a una hormona trpica) porque presenta tejido
fenmeno an no se comprende de manera adecuada.31 blanco difuso y carece de un rgano endocrino terminal.
Aunque la deficiencia de la hormona del crecimiento en La prolactina es nica entre las hormonas de la hipfi
nios se manifiesta por falta de crecimiento, no todos los sis anterior porque su principal forma de regulacin fiipo-
pacientes con estatura pequea tienen deficiencia de hor talmica es la inhibicin tnica, en lugar de la estimulacin
mona del crecimiento (como ya se m encion). Hay varios intermitente. Al fa ctor inhibitorio de la prolactina (FIP) se
defectos genticos identificados en el eje de la hormona le consideraba una hormona polipptida capaz de inhi
del crecimiento. El tipo ms frecuente es una mutacin bir la secrecin de la prolactina. Sin embargo, la dopamina
recesiva del gen de la GHRH que causa falta de secrecin es la nica seal neuroendocrina que inhibe la prolactina,
de la hormona del crecimiento. Tambin se ha llegado a y en la actualidad se cree que el FIP es impreciso. Adems,
observar una mutacin ms rara, la prdida del gen de la cualquier compuesto que afecta la actividad dopami-
hormona del crecimiento por s sola. Adems, se informan nrgica de la eminencia media del hipotlamo altera la
mutaciones que producen insensibilidad de la GH. Estas secrecin de la prolactina .36 Entre los ejemplos de las medi
mutaciones quiz impliquen al receptor de la GH, la bio- caciones que causan hiperprolactinemia se encuentran
406 PARTE III VALORACIN DE LAS FUNCIONES DEL SISTEMA ORGNICO
fenotiazinas, butirofenonas, metoclopramida, reserpina, ductiva en pacientes de mayor edad como una consecuen
antidepresivos tricclicos y a-metildopa. Cualquier tras cia inexorable del envejecim iento. Una complicacin
torno del tallo hipofisario (p. ej., tumores, traumatismo reconocida en fecha reciente del hipogonadismo inducido
o inflamacin) causa aumento de la prolactina como por la prolactina es la osteoporosis .39
resultado de la interrupcin del flujo de la dopamina del
hipotlamo a los lacttrofos, las clulas hipofisarias secre O tras causas de hiperprolactinem ia
toras de prolactina. La TRH estimula de manera directa
la secrecin de la prolactina, en tanto los aumentos de la Hay muchas causas fisiolgicas, farmacolgicas y pato
TRH (como se observa en el hipotiroidismo primario) ele lgicas de la hiperprolactinemia. Un error comn de los
van las concentraciones de la prolactina .37 Los estrgenos clnicos es atribuir cualquier elevacin de prolactina a un
estimulan, tambin, de forma directa a los lacttrofos para prolactinoma. Por lo general, las elevaciones importan
sintetizar prolactina. La estimulacin patolgica del refle tes de la prolactina ( > 1 5 0 ng/ml) indican prolactinoma, y
jo neural de succin constituye la explicacin probable de el grado de elevacin de la prolactina se correlaciona con
la hiperprolactinemia relacionada con lesiones en la pared el tamao del tumor.40 Se observan elevaciones modestas
del pecho. Asimismo, se observa hiperprolactinemia en de prolactina (25 a 100 ng/ml) con interrupcin del tallo
presencia de insuficiencia renal y sndrome ovrico poli- hipofisario, uso de medicamentos dopaminrgicos antago
cstico. Los estresores fisiolgicos, como el ejercicio y las nistas u otros trastornos mdicos.
convulsiones, tambin elevan la prolactina. Se desconoce
el efector de retroalimentacin para la prolactina. Evaluacin clnica de la hiperprolactinem ia
Como se mencion, el efector fisiolgico de la prolac
tina es la lactancia. La consecuencia habitual del exceso A menudo un historial clnico cuidadoso y examen fsico
de prolactina es el hipogonadismo, sea por supresin de son suficientes para excluir la mayor parte de las causas
la secrecin de gonadotropina a partir de la hipfisis o por ms frecuentes no endocrinas de la hiperprolactinemia. Es
inhibicin de la accin de la gonadotropina en la gnada.38 esencial obtener la TSH y T 4 libre (o tiroxina total y capta
La supresin de la ovulacin que se observa en el posparto en cin de la resina T3) para descartar hipotiroidismo prima
madres en lactancia est relacionada con este fenmeno. rio como causa de la elevacin de la prolactina. Cuando se
sospecha un tumor hipofisario, se debe obtener una eva
Prolactinom a luacin cuidadosa de otra funcin de la hipfisis anterior
(cortisol basal, LH, FSH y esteroide gonadal especifico del
Un prolactinoma es un tumor hipofisario que secreta gnero [sea estradiol o testosterona]) y evaluacin de la
directamente prolactina, y representa el tipo ms frecuen anatoma sellar con IRM de alta resolucin.
te de tumor hipofisario funcional. La presentacin clnica
de un paciente con un prolactinoma depende de la edad,
Control del prolactinom a
del sexo y del tamao del tumor. Las mujeres premeno-
pusicas se quejan con mayor frecuencia de irregularidad Los objetivos teraputicos constan de correccin de los
menstrual/amenorrea, infertilidad, o galactorrea. Por lo sntomas que se originan por invasin local o extensin del
general, los hombres o las mujeres posmenopusicas pre tumor por reduccin de la masa tumoral, restauracin de la
sentan sntomas de una masa hipofisaria, como dolores de funcin gonadal normal y la fertilidad, prevencin de osteo
cabeza o afecciones visuales. En ocasiones, en hombres porosis y preservacin de la funcin normal de las hipfisis
se observa reduccin de la libido o problemas de disfun anterior y posterior. Las diferentes opciones teraputicas
cin erctil. Las razones de la gama de presentaciones de abarcan observacin simple, ciruga, radioterapia o control
un prolactinoma son un poco imprecisas, pero es posible mdico con agonistas de la dopamina .36 Sin embargo, el
que se relacionen con alteracin importante evidente en control del prolactinoma tambin depende del tamao del
las menstruaciones, o el establecimiento abrupto de una tumor (es menos probable curar macroadenomas [tama
descarga de pecho en mujeres ms jvenes. En cambio, es o de tumor >10 mm] que microadenomas [tamao de
posible pasar por alto la declinacin en la funcin repro tumor <10 m m ])41 y las preferencias del paciente.
E S T U D IO D E C A S O 17-2
Una mujer de 23 aos de edad experimenta inicio recien 2. Cules afecciones mdicas (distintas a prolactino
te de una descarga de pecho espontnea bilateral y cese ma) se relacionan con hiperprolactinemia?
gradual de las menstruaciones. Informa crecimiento y
3. Cules medicamentos elevan la prolactina?
desarrollo normales y nunca ha estado embarazada.
4. Cmo cambiara su forma de pensar si la mujer
Preguntas
tuviera galactorrea pero concentraciones normales
1. Cules trastornos es probable que causen los snto de prolactina?
mas?
CAPITULO 17 INTRODUCCIN A LAS HORMONAS Y LA FUNCIN HIPOFISARIA 407
Los agonistas de la dopamina constituyen la terapia La prdida de los efectores directos (hormona del creci
empleada con mayor frecuencia para los microprolactino- miento y prolactina) tal vez no sea evidente con facilidad.
mas. Se observa reduccin del tumor en ms de 90% de Esta seccin se centra en las causas del hipopituitarismo y
los pacientes tratados con mesilato de bromocriptina o el ciertas sutilezas implicadas en la terapia del panhipopitui-
nuevo agonista de la dopamina, la cabergolina. Adems, tarismo. En otros captulos se muestran descripciones ms
ambos frmacos reducen los macroadenomas secretadores detalladas de varios estados de deficiencia hormonal.
de prolactina .42 A menudo, tambin se observan reanu El diagnstico del laboratorio del hipopituitarismo es
dacin de las menstruaciones y restauracin de la fertili relativamente sencillo. A diferencia de la falla primaria
dad durante la terapia mdica. Entre los efectos adversos de una glndula endocrina que se acompaa por aumen
de la bromocriptina se incluyen hipotensin ortosttica, tos importantes en los niveles circulantes de la hormona
mareos y nusea. Los efectos adversos gastrointestinales trpica hipofisaria correspondiente, la falla secundaria
de la bromocriptina se aminoran a travs de la adminis (hipopituitarismo) se relaciona con concentraciones bajas
tracin intravaginal, y su eficacia no se ve afectada por lo o normales de la hormona trpica. En el hipotiroidismo
dems .43 La cabergolina tiene menos efectos adversos, y es primario, por ejemplo, las concentraciones circulantes de
posible administrarla cada dos semanas debido a que su tiroxina son bajas y los valores de la TSH llegan a sobre
perodo de accin es ms prolongado. Cualquier agente pasar los 200 pU/ml (normal, 0 .4 a 5.0 ). Como resultado
se suspende durante el embarazo, a menos que se informe de la falla hipofisaria en el hipotiroidismo, las concentra
reaumento del tamao del tumor. ciones de TSH son bajas de manera inapropiada, y por lo
La neurociruga no representa una alternativa primaria general menores de 1.0 pU/ml.
de control del prolactinoma. Las indicaciones para la inter Hay varios elementos importantes en la distincin entre
vencin neuroquirrgica incluyen apopleja hipofisaria los estados primarios y secundarios de la deficiencia hormo
(hemorragia), prdida visual aguda debido al macroade- nal. Para diferenciar entre deficiencias primarias y secunda
noma, prolactinoma cstico o intolerancia a la terapia rias, se deben medir los valores tanto de la hormona trpica
mdica. Los ndices de curacin quirrgica son inversa como de la hormona blanco cuando exista cualquier sos
mente proporcionales al tamao del tumor y al grado de pecha de falla hipofisaria, o como parte de la evaluacin
aumento de la prolactina. Por lo general, la radioterapia rutinaria de la funcin gonadal o suprarrenal. Si est docu
de emisin externa est reservada para los pacientes con mentada una deficiencia secundaria, es esencial investigar
riesgo quirrgico elevado con macroadenomas agresivos otros estados de deficiencia y la causa de la falla hipofisaria.
en forma local que no toleran agonistas de la dopamina. Por ejemplo, la falta de reconocimiento del hipoadrenalis-
mo secundario tal vez tenga consecuencias catastrficas si
G alactorrea idioptica al paciente se le trata con tiroxina. Del mismo modo, el
hecho de pasar por alto al principio una lesin hipofisaria
A la lactancia que ocurre en mujeres con concentraciones o hipotalmica quiz excluya el diagnstico temprano y el
normales de prolactina se le define como galactorrea idio tratamiento de un tumor en potencia agresivo.
ptica. Esta afeccin se observa a menudo en mujeres que
llevan varios embarazos y no tiene implicacin patolgica.
Etiologa del hipopituitarism o
E S T U D IO D E C A S O 17-3
CUADRO 17-4. C A U SA S D EL HIPOPITUITARISM O prdida de funcin pudiera ser gradual y ocurrir durante
varios aos. Existen casos raros de panhipopituitarismo
1. Tumores hipofisarios
o deficiencias hormonales monotrpicas familiares. En el
2. Tumores parapltuitarios/hipotalmicos sndrome de Kallmann, por ejemplo, hay deficiencia de la
3. Traumatismo GnRH, y el paciente padece hipogonadismo secundario.
Por ltimo, cuando no se identifica una causa evidente de
4. Terapia/ciruga de radiacin
la prdida de la funcin hipofisaria, al paciente se le cla
5. Infarto sifica como poseedor de hipopituitarismo idioptico, aun
6. Infeccin que en un informe de un caso reciente se puso nfasis en
la necesidad de continuar la bsqueda de una etiologa .44
7. Enfermedad infiltrativa
8. Inmunolgica Tratam iento del panhipopituitarism o
9. Familiar
En el paciente promedio, la terapia de reemplazo para
10. Idioptica panhipopituitarismo es igual que para la falla primaria
del rgano blanco. A los pacientes se les trata con tiroxi
na, glucocorticoides y esteroides sexuales especficos del
tumores parasellares (meningiomas y gliomas), metast- gnero. Este mtodo es menos claro que el reemplazo de
ticos (pecho y pulmn) e hipotalmicos (craneofaringio- la hormona del crecimiento en adultos. Se requieren estu
mas o disgerminomas) causan hipopituitarismo a travs dios adicionales para aclarar este tema .43,46 El reemplazo
de mecanismos similares. La hemorragia en un tumor se vuelve ms complicado en pacientes panhipopituitarias
hipofisario (apopleja hipofisaria) es rara. Sin embargo, que desean mantenerse frtiles. Las infusiones pulstiles
cuando ocurre, a menudo causa falla hiposaria comple de GnRH han inducido pubertad y restauracin de la fer
ta. La necrosis isqumica posparto de la hipfisis despus tilidad en pacientes con sndrome de Kallmann, en tanto
de un alumbramiento complicado (sndrome de Sheehan) las preparaciones de gonadotropina restablecieron la ovu
suele presentarse como un choque profundo sin respuesta lacin/espermatognesis en personas con deficiencia de
o como deficiencia de lactato en el puerperio. Las enfer gonadotropina .47
medades infiltrativas, como la hemacromatosis, la sarcoi-
dosis o la histiocitosis, tambin llegan a afectar la funcin
H ORM ONA DE LA HIPFISIS POSTERIOR
hipofisaria. Las infecciones fungicidas, la tuberculosis y la
sfilis en ocasiones afectan la hipfisis o el hipotlamo y La hipfisis posterior es una extensin del prosencfalo y
causan deterioro de la funcin. La hipofisitis linfoctica, representa la regin de almacenamiento para la vasopresina
una enfermedad autoinmunitaria de la hipfisis, tal vez (tambin se le conoce como horm ona antidiurtica [ADH])
slo afecte a un tipo celular en la hipfisis, lo que da como y la oxitocina. Ambas hormonas ppticas pequeas se sin
resultado deficiencia hormonal monotrpica, o implique a tetizan en los ncleos supraptico y paraventricular del
todos los tipos celulares, lo que produce prdida total de la hipotlamo, y se transportan a la neurohipfisis a travs
funcin. Es posible que el traumatismo grave de la cabeza de sus axones en el tracto hipotalamoneurohipofisiario.
rompa el tallo hipofisario o interrumpa la circulacin por ste atraviesa la eminencia media del hipotlamo y conti
tal. Del mismo modo, la ciruga que implica a la hipfisis na hacia la hipfisis posterior a travs del tallo hipofisia-
llega a afectar el tallo o el aporte sanguneo a la hipfi rio. La sntesis de cada una de estas hormonas se vincula
sis, o ambos, o a disminuir de manera yatrognica la masa de manera estrecha con la produccin de neurofisina, una
del tejido hipofisario funcional. El panhipopituitarismo protena ms grande con funcin an no comprendida por
quiz se origine por la radioterapia usada para tratar un completo. Ambas hormonas se sintetizan fuera del hipot-
tumor hipofisario primario o una hipfisis que se incluy amo en varios tejidos, y resulta plausible que tengan una
por accidente en el puerto de la radiacin; sin embargo, la funcin autocrina o paracrina.
E S T U D IO D E C A S O 17-4
P R E G U N T A S DE R E P A S O
5. Cul de los siguientes es influenciado por la horm o 7. Cul es la secuela a largo plazo de la acromegalia no
na del crecimiento? tratada o tratada de manera parcial?
a) FCI-1. a ) Mayor riesgo de cncer de colon y pulmn.
b) PUFCI-III. b) Reduccin del riesgo de cardiopata.
c) Liplisis. c) Mayor longevidad.
d ) Todos los anteriores. d) Aumento de la fuerza muscular.
6. Cul enunciado referente a la secrecin de la vaso- 8. La hormona liberadora de tirotropina (TRH) estimula
presina NO es verdadero? la secrecin de:
a) La secrecin de vasopresina est vinculada de a) Prolactina.
manera estrecha con la osmolalidad plasmtica. b ) Hormona del crecimiento.
b) Los cambios en el volumen sanguneo tambin c) TSH.
alteran la secrecin de la vasopresina. d) a y e .
c) La reduccin del volumen sanguneo efectivo
9. El estrgeno influye en la secrecin de cul de las
neutraliza los efectos de la osmolalidad plasmti
siguientes hormonas?
ca en la regulacin de la secrecin de la vasopre
a) Hormona del crecimiento.
sina.
b) Prolactina.
d) Todos los anteriores.
c) Hormona luteinizante.
d) Todas las anteriores.
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Funcin suprarrenal
LeAnne Swenson y Daniel H. Knodel
C O N T E N I D O D E L C A P T U L O
LA G L N D U LA S U P R A R R EN A L: UN P A N O R A M A EXCESO DE A N D R G EN O
G EN ERAL Diagnstico de la produccin excesiva de andrgeno
E M B R IO L O G A Y A N A T O M A Tratamiento para la sobreproduccin andrgena
LA CO RTEZA SU PRA RREN A L POR ZO N A suprarrenal
Esteroidognesis de la corteza M D U LA SU PRA RREN A L
Hiperplasia suprarrenal congnita Desarrollo
D IA G N S T IC O D E L A L D O S T E R O N IS M O P R IM A R IO Biosntesis y almacenam iento de las catecolaminas
Algoritm o del diagnstico Degradacin de las catecolaminas
I N S U F IC IE N C IA S U P R A R R E N A L ( E N F E R M E D A D D E Mediciones de las catecolaminas urinarias y plas
A D D IS O N ) mticas
Diagnstico de insuficiencia suprarrenal Causas de hiperactividad simptica
Tratamiento con insuficiencia suprarrenal Diagnstico del feocromocitoma
H I P E R C O R T IS O L I S M O Tratamiento del feocromocitoma
S N D R O M E D E C U S H IN G Resultado y pronstico
Diagnstico del sndrome de Cushing IN C ID E N T A L O M A
Cuando se confirma Cushing, las pruebas de PREG U N TA S DE REPASO
estimulacin de la CRH ayudan a determ inar la R E F E R E N C IA S
dependencia de la ACTH (por lo general innecesaria)
Procedimientos de localizacin
Algoritmo para la determinacin de Cushing
Tratamiento
O B J E T I V O S
412
CAPTULO 18 FUNCIN SUPRARRENAL 413
T R M N O S C L A V E
F Azcar
portal, donde estimulan la produccin de adrenalina (A) Se presume que los tipos de clulas suprarrenales pro
(vase fig. 18-17). vienen de clulas madre. Una capa de tejido propuesta
Los axones simpticos y parasimpticos llegan a la entre la zona glomerular y la fasciculada llega a servir
mdula a travs de la corteza. En el camino, estos axones como sitio para que las clulas progenitoras regeneren las
liberan neurotransmisores (p. ej., catecolaminas, neuro- clulas de las zonas .3
pptido Y) que modulan el flujo sanguneo de la corteza,
el crecimiento celular y la funcin. En proyecciones medu Esteroidognesis de la corteza
lares dentro de la corteza se ha encontrado que contienen
clulas que tambin sintetizan y liberan neuropptidos, El control de la biosntesis de la hormona esteroidea es
como pptido inhibidor vasoactivo (P1V), adrenomedulina y complejo. Ocurre a travs de disponibilidad del sustrato,
pptido natriurtico auricular (PNA), e influyen de manera actividades enzimticas y circuitos de retroalimentacin
potencial en la funcin de la corteza. inhibidores que son especficos para cada capa. La defini
cin de la biosntesis y las acciones de la corteza suprarre
nal en trminos de tres capas simplifica su complejidad.
LA CORTEZA SUPRARRENAL POR ZONA
Todos los esteroides suprarrenales se derivan por conver
Las hormonas principales de la corteza, aldosterona, cortisol sin enzimtica secuencial de un sustrato comn: el coles
y sulfato de dehidroepiandrosterona (SDHEA), se sintetizan terol. Las clulas parenquimatosas suprarrenales acumulan
slo a partir de un precursor comn por clulas localizadas y almacenan alrededor de 80% de las lipoprotenas de baja
en una de las tres capas de las zonas distintas desde el pun densidad (LDL) circulantes. Adems, la glndula suprarre
to de vista funcional de la corteza suprarrenal: glomerulosa, nal sintetiza colesterol adicional a travs de acetil-CoA, lo
fa scic u la d a y reticular, respectivamente (fig. 18-1). que asegura que la esteroidognesis suprarrenal permanez
Zona G. Las clulas de la zona glomerulosa (10% exter ca normal en pacientes con trastornos de lpidos variables y
na) sintetizan mineralocorticoides (aldosterona) crticos en aquellos tratados con agentes rebajadores de lpidos.
para la homeostasis de sodio (volumen), potasio y acido- Slo el colesterol libre se incorpora a rutas esteroido-
base. Tienen proporciones citoplsmicas a nucleares bajas gnicas despus de transportarse a la membrana mitocon-
y pequeos ncleos con cromatina densa con inclusiones drial interna en respuesta a la horm ona adrenocorticotrpica
intermediarias de lpidos. (ACTH). La disponibilidad del colesterol intracelular libre
Zona F. Las clulas de la zona fasciculada (75% inter se regula desde el punto de vista metablico por LDL de
media) sintetizan glucocorticoides, como el cortisol, crti manera negativa y ACTH de manera positiva a travs de
cos para la homeostasis de la glucosa sangunea. Las clulas varios mecanismos. La horm ona liberad ora de corticotropi-
fasciculadas son cordones de clulas claras, con elevada na (CRH) se secreta del hipotlamo por seales circadia-
proporcin citoplsmica a nuclear y lpidos cargados con nas, cortisol srico y estrs, lo que produce la liberacin de
citoplasma espumoso. Adems, la fasciculada genera la ACTH almacenada. A su vez, sta estimula el transporte
precursores de andrgenos, como dehidroepiandrosterona del colesterol libre dentro de la mitocondria suprarrenal,
(DHEA), que est sulfatado en la zona reticular ms profunda lo que da inicio a la produccin esteroidea.
(icapa R). Los restos suprarrenales subcapsulares (slo cor La conversin de colesterol a pregnenolona constituye
teza) se regeneran dentro de las suprarrenales fasciculadas, el primer paso de contribucin limitada en la biosntesis
se metastatizan y sobreviven en lugares ectpicos, como el esteroidea: seis carbonos se eliminan del colesterol por la
hgado, la pared de la vescula biliar, los ligamentos amplios, enzima CYP450 de la membrana mitocondrial (fig. 18-2).
el plexo celiaco, los ovarios, el escroto y el crneo. Luego la pregnenolona recin sintetizada regresa al citosol
Zona R. Las clulas de la zona reticular (10% inter para la conversin zonal subsiguiente por enzimas micro-
na) sulfatan la DHEA a sulfato de dehidroepiandrosterona smicas en cada capa por capas F de enzimas o andr-
(DHEAS), un precursor para las hormonas suprarrenales genos, o ambos, por la enzima en la capa R (fig. 18-3).
sexuales. La zona se demarca de manera ntida con cordo Debido a que los glucocorticoides de la capa F suprimen
nes lpido deficientes de clulas densas e irregulares con de manera eficaz la liberacin de la ACTH, el cortisol es el
depsitos de lipofuscina. regulador primario de retroalimentacin de la produccin
ACTH - CRH
Hipofisaria Hipotlamo
COLESTEROL
de la hormona estimulada por ACTH en la corteza supra resultado de una deficiencia de 21-hidroxilasa que causa
rrenal. La ACTH no afecta en forma importante la sntesis acumulacin de la progesterona 17-OH y del andrgeno,
de la aldosterona (Aldo) de la capa G, aunque ciertos glu- en tanto el cortisol disminuye. El tratamiento con gluco-
cocorticoides tienen acciones mineralocorticoides. corticoides orales reemplaza a la deficiencia de cortisol y
La disminucin de la actividad de cualquier enzima suprime el exceso del andrgeno estimulado por ACTH .6
requerida para la biosntesis se presenta como un rasgo Slo las clulas G convierten el colesterol en pregnenolo-
adquirido o heredado (autosmico recesivo). Los defectos na, el precursor esteroide comn, y despus en aldosterona
que disminuyen la produccin de cortisol causan incre (15 a 20 mg/da) (fig. 18-3). La sntesis de la Aldo especfica
mentos en la secrecin de ACTH y CRH en un intento por de la capa G ocurre por varias razones. La actividad baja de
estimular las concentraciones de cortisol e inducir hiper- la 17a-hidroxilasa de la clula G evita la desviacin del sus
plasia suprarrenal o sobreproduccin de andrgenos, lo trato por otras rutas, y la actividad baja de la Aldo sintasa
que depende de la enzima afectada. en otras zonas asegura que la oxidacin final de la corticos-
La evaluacin de la funcin suprarrenal requiere medi terona a aldosterona sea especfica de clulas G (fig. 18-3).
ciones relevantes de hormonas suprarrenales, metabolitos La secrecin de Aldo est regulada por el sistem a renina-
y secretagogos reguladores. El diagnstico se basa en la angiotensina (SRA), que funciona para mantener la perfu
correlacin de los hallazgos clnicos y de laboratorio .4 sin del rgano. El agotamiento del volumen recibido, la
sal filtrada baja y la estimulacin del nervio simptico se
Hiperplasia suprarrenal congnita detectan como hipoperfusin por las clulas que estimulan
la produccin de renina. sta es una enzima proteoltica
La hiperplasia suprarrenal congnita (HSC) es una familia secretada por las clulas renales en el aparato yuxtaglo-
heredada de trastornos enzimticos que causan disminu merular. La renina da inicio a una secuencia de pasos de
cin de la produccin de cortisol. La presentacin clnica divisin del sustrato de angiotensingeno o renina para
depende de la enzima afectada, como se muestra en la figura formar angiotensina (A-I). La enzim a convertidor a de angio
18-4. Los hallazgos de laboratorio revelan aumento de sus tensina (ECA) transforma la A-I en A-II. Esta ltima acta
tratos de flujo ascendente con sobrecirculacin a travs de como vasoconstrictor potente para elevar la presin san
rutas abiertas, y decremento relativo de productos de fluido gunea y estimular la liberacin de Aldo. La estimulacin
descendente a partir de la enzima afectada .5 Los defectos crnica de A-Il o la restriccin diettica de sal llega a causar
parciales se observan despus de la pubertad. El 95% son hipersecrecin de Aldo e hipertrofia aislada de la capa G .7
Zonas
17-OH ase
Pregnenolona -
17-OH ase
Progesterona -
Q iT )
11-Deoxicorticosterona (DOC)
CD
Corticosterona
--
180H
Cortisona Estradiol
Aldosterona
17-hidroxicorticosteroides urinarios 17-OHCS 17-cetosteroides urinarios
(reemplazados en gran medida por cortisol urinario libre)
Nueva
Defecto enzimtico clasificacin HTN Virilizacin Valor de laboratorio elevado
La Aldo acta en el rin para aumentar la presin arte causados por K+srico bajo, como se esboza en la figura
rial a travs de la extensin del volumen. Esto ocurre al 18-6.
aumentar la reabsorcin de sodio; por tanto, hay retencin Entre las causas de hipertensin e hipopotasemia no
de agua. Adems, la Aldo estimula la excrecin de H+y provocada se encuentran:
K+, lo que produce alcalosis metablica con expansin del Aldosteronismo primario (renina baja): secrecin exce
volumen, hipertensin (HTN) e hipopotasemia. El fenme siva autnoma de Aldo.
no se mejora con dietas altas en sodio. Aldosteronismo secundario (renina elevada): secrecin
La angiotensina II, el potasio srico elevado (K+), la de Aldo activada por el SRA.
progesterona y la dopamina estimulan la sntesis de la Seudoaldosteronismo (concentraciones variables de
aldosterona (fig. 18-5). El PNA, el calcio intracelular y renina y Aldo): enfermedades tubulares renales que
ciertos frmacos son supresores de la Aldo, incluyendo causan la prdida de potasio urinario por mecanismos
ketoconazol, inhibidores de la ECA, antiinflam atorios no independientes de Aldo. En casi todos los casos, la Aldo
esteroideos (AINE) y heparina. es baja; sin embargo, dos sndromes se relacionan con
niveles elevados de Aldo: el sndrome de Bartter (muta
Hipoaldosteronismo aislado cin del canal Cl sensible a la bumetanida) y el sndro
La secrecin insuficiente de Aldo se observa en presencia me de Gitelman (mutacin del transportador sensible a
de destruccin de la glndula suprarrenal, terapia de hepa la tiacida).
rina crnica seguida de adrenalectoma unilateral (transi Al documentar la excrecin del exceso de aldosterona
toria) y deficiencias de la enzima de la capa G. Con mayor se establece el diagnstico de aldosteronismo (las medi
frecuencia, ocurre en pacientes con insuficiencia renal ciones de orina son superiores a las de plasma), pero no es
leve, como en personas con diabetes que presenten acido- posible discernir entre etiologas subyacentes. Las medi
sis metablica ligera, K+ srico elevado, excrecin baja de ciones de la actividad de la renina p lasm tica (ARP) refle
K+ urinario (K+urinario < Na+urinario) y reninemia baja. ja n el estado de la activacin del SRA y son tiles para esa
El tratamiento farmacolgico es con dieta; bicarbonato; determinacin. Debido a que la ARP vara con el estado
furosemida (diurtico eliminador de K+; o, a veces, Florin- del volumen, la posicin erguida y el consumo diettico
ef (mineralocorticoide sinttico), que mejora la retencin de sodio, una medicin aislada de la ARP tiene valor clni
de sal, K+y secrecin cida. co limitado. La valoracin de la ARP relativa a la aldostero
na plasm tica (AP) ayuda a distinguir la forma primaria de
Hiperaldosteronismo otras presentaciones del aldosteronismo.
Los pacientes con produccin excesiva de aldosterona En la figura 18-7 se ilustran los tipos de aldosteronismo
desarrollan alcalosis metablica, hipertensin e hipopo de acuerdo con sus valores de AP (eje y ) y ARP (eje x) en
tasemia. Por lo general, stos se presentan con sntomas grupos, segn esos cocientes.
Potasio elevado
Angiotensina II
Esteroide principal: Aldosterona
Regulador principal: Sistema renina-angiotensina (SRA)
& Funcin principal: Homeostasis de presin arterial y K+
Aldosteronismo primario
Adenoma aldosterona (APA)
Hiperplasia suprarrenal (IHA) Bajo volumen sanguneo efectivo
Glucocorticoide remediable (GPA) Estenosis de la arteria renal
Defectos del receptor de glucocorticoide (virilizado) Sndrome hepatorrenal
Carcinoma suprarrenal (virilizado) Tumor productor de renina
Prdida de sal (diurticos)
Prdida de lquidos (prdida de sangre, filtracin capilar)
Sndrome de Gitelman (Mg2+)
Activacin simptica (Feo)
Sndrome de Bartter (presin sangunea baja)
P
A
HTN por renina baja
Retencin de sal (dosis)
Exceso de corticoides minerales
Exceso de glucocorticoides Hipopotasemia (enfermedad tubular renal)
Deficiencia de 1ip-hidroxilasa Estrs (hipoglucemia, traumatismo)
Ingesta de regaliz Postura erguida
Sndrome de Liddle HTN por renina elevada
ACTH
Esteroide principal: Cortisol
* Regulador principal:
Funcin:
ACTH
Presin sangunea y homeostasis de glucosa
ip : Sndrome: Sntomas:
la estimulacin anormal de la glndula. En ocasiones, los homeostasis normal de la glucosa y el mantenimiento del
adenomas secretores de Aldo se pierden porque son dema tono vascular, la deficiencia produce sntomas semejantes a
siado pequeos para resolverse o se ocultan dentro de las falla para prosperar, como debilidad, fatiga, anorexia, nusea,
glndulas hiperplsicas. Cuando las imgenes son negati diarrea y dolor abdominal, acompaados por hallazgos fsi
vas, es posible repetir la exploracin en 6 a 12 meses. cos, como prdida de peso. Los valores anormales de labora
La gammagrafa o muestreo de la vena suprarrenal se torio dependen de la causa subyacente de la produccin baja
utiliza en resultados discordantes. En un estudio, 50% de de cortisol e incluyen hiponatremia, hiperpotasemia, hiper
pacientes diagnosticados con APA por muestreo venoso calcemia, azoemia prerrenal y acidosis metablica leve.
tenan hiperplasia en la T C .8 La suprarrenalitis autoinmunitaria explica 70% de los
La sntesis del cortisol (15 a 20 mg/da) es crtica para casos de insuficiencia suprarrenal primaria. Sin embar
la homeostasis hemodinmica y de glucosa. Los trastor go, otros trastornos tambin llegan a destruir la glndula
nos de la zona F se manifiestan con anormalidades de la suprarrenal. Dichos padecimientos incluyen enfermedades
presin arterial y de la glucosa (fig. 18-8). Los glucocorti- infecciosas como micosis (sin candida), virus de inmu-
coides mantienen la glucosa sangunea por induccin de nodeficienca humana (VIH) y tuberculosis; hemorragia
liplisis y liberacin del aminocido a partir de la degrada suprarrenal bilateral; adrenoleucodistrofia; procesos de
cin muscular para la conversin en glucosa (gluconeog- infiltracin; y metstasis. La terapia con glucocorticoides
nesis) y almacenamiento como glucgeno heptico. representa la causa ms frecuente de insuficiencia supra
La produccin de cortisol est regulada por la horm o rrenal secundaria. No obstante, los tumores, la hemorra
na adrenocorticotrpica (ACTH). sta se secreta de mane gia, los procesos de infiltracin, las anormalidades y las
ra pulstil por la hipfisis. Las variaciones diurnas hacen malignidades del desarrollo tambin interfieren con la
que las concentraciones de la ACTH y del cortisol sean produccin de la ACTH por la hipfisis.
ms elevadas por la maana ( 8:00 a.m.) y ms bajas en la
noche (10:00 p.m. a 12:00 a.m .). La amplitud de pulso (no Diagnstico de insuficiencia suprarrenal
la frecuencia) de la ACTH aumenta entre las 2:00 y 4 :00
a.m. Los valores mximos adicionales de ACTH se pre Los valores bajos de vaselina (8 :0 0 a.m., en posicin
sentan despus de ingesta de comidas ricas en protenas supina) son sugerentes, pero no confiables, para el esta
y de la estimulacin de la horm ona antidiurtica (ADH), blecimiento del diagnstico de insuficiencia. Las con
as como de la CRH. La hipoglucemia estimula de mane centraciones aleatorias de cortisol slo son tiles para
ra indirecta la ACTH al aumentar la liberacin de CRH y descartar el diagnstico cuando estn elevadas (>20 pg/
ADH. Adems, el estrs agudo (fsico y psicolgico) esti d i). La cosintropina es un estimulador sinttico de la secre
mula de manera directa la secrecin de ACTH, lo que pro cin de cortisol y aldosterona, que prueba la capacidad de
duce la elevacin de los valores de cortisol. A su vez, la la glndula suprarrenal para aumentar la produccin de la
elevacin de los glucocorticoides (endgenos y exgenos) hormona en respuesta a la estimulacin. Es segura y ofrece
suprime la ACTH a travs de la inhibicin de la respuesta, resultados confiables sin importar la ingesta alimenticia
con lo que se disminuye la transcripcin del gen de la pro- ni la hora del da. Adems, la hipoglucemia es un potente
opiomelanocortina en clulas corticotropinas hipofisarias, estimulador de la secrecin de cortisol pero tal vez resulte
y tambin al bloquear la produccin, la secrecin y los
efectos estimulantes de la CRH en la sntesis y liberacin Frecuencia Sntomas Signos
de la ACTH en la hipfisis.
100% Debilidad Prdida de peso
Fatiga
INSUFICIENCIA SUPRARRENAL (ENFERM EDAD Anorexia
DE ADDISON)
90% Hiperpigmentacin
La insuficiencia suprarrenal (cortisol bajo) se origina por (insuficiencia suprarrenal primaria)
un problema suprarrenal primario (destruccin de 90% de la 50% Nusea
corteza suprarrenal) o es secundaria a la deficiencia de ACTH Diarrea
(anormalidad a nivel hipotalmico-hipfisis ).9
10% Dolor Calcificacin suprarrenal
Los sntomas de la deficiencia tal vez sean vagos y enga
osos (fig. 18-9). Puesto que el cortisol es crtico para la FIGURA 18-9. Signos y sntomas de insuficiencia suprarrenal.
CAPTULO 18 FUNCIN SUPRARRENAL 419
Estrs
Infeccin
El sndrome de Cushing yatrognico es raro ( < 1%) pero concentraciones de cortisol libre se elevan con rapidez, lo
tal vez sea difcil de discernir de trastornos reales. Todos los que aumenta el cortisol libre filtrado en la orina. Este valor
glucocorticoides, que incluyen los sintticos, inhalados, y tal vez sea errneo con un volumen urinario elevado ( > 3
tpicos, llegan a inhibir la secrecin de ACTH. Por tanto, la L) porque los pacientes que beben ms de 5 L/da tendrn
ACTH plasmtica, el cortisol srico y la excrecin de cor un aumento de 64% en el cortisol de la orina. En cambio,
tisol tal vez sean bajos (a menos que se utilicen cortisol o la excrecin de 17-hidroxicorticosteroide (1 7-OHCS) ocurre
cortisona). En contraste, la contaminacin de la orina con a un ritmo constante y no se ve afectada por los cambios
hidrocortisona tpica (uso vulvovaginal o perineal) quiz de volumen.
eleve de manera falsa los valores de cortisol urinario. Los El cortisol libre urinario a las 24 h constituye la prueba
valores urinarios relativamente mayores que los de cortisol de valoracin ms sensible (95 a 100%) y especfica (98% )
y cortisona sricos sugieren adicin de hidrocortisona en de produccin excesiva de cortisol excesiva. Al parecer un
la orina. En caso de sospecha, es posible detectar los gluco mtodo revisado, en el que se recolectan muestras de orina
corticoides sintticos de manera cromatogrfica. durante la noche ( 10:00 p.m. a 8:00 p.m.) para factorizar el
cortisol por creatinina urinaria, es igual de vlido (especifi
D iagnstico del sndrom e de Cushing cidad y sensibilidad de 97 a 100% ). En un estudio grande,
21 a 47% de los pacientes con sndrome de Cushing tena
Los sntomas clnicos son corroborados por hallazgos de cuando menos una valoracin normal de cortisol urinario
laboratorio de exceso de cortisol, prdida de ritmo diur de 24 h. Por tanto, a los pacientes con valores intermedios
no, y resistencia a la supresin (una vez que se excluye se les volver a evaluar de 2 a 3 meses despus .12
administracin exgena de glucocorticoides debido a que Los valores aleatorios de cortisol plasmtico resultan de
no se establece el algoritmo de diagnstico universal para poca utilidad para el diagnstico del sndrome de Cushing.
sndrome de Cushing): a) la ACTH y el cortisol se secretan En personas normales, los valores varan en gran medida
en erupciones y tal vez ocurra secrecin excesiva de mane durante el da, y se traslapan con las cifras encontradas en
ra episdica; b) cada paciente cuenta con metabolismo, pacientes con sndrome de Cushing.
metabolitos e ndices de depuracin metablica nicos; c) Las concentraciones basles de cortisol por la maana
los umbrales de estimulacin y supresin varan a menudo no tienen ningn valor para el diagnstico, a menos que se
(las lesiones no suprimibles en ocasiones se suprimen, y encuentren de manera evidente por arriba del rango normal.
los pacientes normales exhiben resistencia a la supresin);
y d) los problemas de seguimiento y precisin con respecto D eterm in a r si se p ierde el ritmo diurno (los valores en
a la recoleccin y el procesamiento de la muestra son fre una etapa avanzada d e la noche p erm a n ecen elevados)
cuentes. A continuacin se mencionan las pruebas de valo El cortisol plasmtico es mayor entre las 6:00 y 8:00 a.m.
racin estndar para diagnosticar sndrome de Cushing .12 y 50 a 80% ms bajo entre las 10:00 p.m. y 12:00 a.m. La
medicin del cortisol en una etapa avanzada de la noche se
D o cu m en ta r exceso d e cortisol justifica por el hecho de que su nadir normal vespertino se
Cortisol libre urinario (o metabolitos, o ambos) (fig. 18-3). pierde en el sndrome de Cushing y en la hiperplasia nodular
El cortisol de la orina constituye un indicador sensible de bilateral, pero se preserva en pacientes obesos y deprimidos.
cortisolismo endgeno. Cuando el cortisol del suero exce En condiciones ideales, se obtiene una muestra de sangre
de la capacidad de unin proteica de su transportador, las (para valorar cortisol y ACTH) ntrelas lLO O p.m .ylas 12:00
CAPTULO 18 FUNCIN SUPRARRENAL 421
a.m. Las muestras se estabilizan, se almacenan y se envan al equivalente a la supresin estndar por dexametasona a
laboratorio si el cortisol urinario previamente determinado dosis baja durante dos das (0.5 mg cada 6 h X 2 das, con
es elevado. Los valores de cortisol salival y sanguneo en una cortisol libre urinario normal < 10 pg en el da 2) por an
etapa avanzada de la tarde tal vez sean ms confiables que el lisis retrospectivo de 426 pacientes con Cushing.
cortisol urinario para el diagnstico de Cushing. Si bien el valor indicador para una prueba negativa es
En dos estudios, una sola concentracin de cortisol cercano a 100%, los resultados falsos positivos son fre
srico a la medianoche (> 7 .5 pg/dl) mostr sensibilidad cuentes (hasta un 15%). Las causas de esto abarcan errores
de 90 a 96% y especificidad de 100% para sndrome de en la prueba, otros estados resistentes a la supresin del
Cushing .12 cortisol (p. ej., estrs fsico, anorexia nerviosa, alcoholis
En otro estudio de pacientes con Cushing (30 normales mo, depresin, enfermedad aguda, obesidad e insuficien
y 18 obesos), un solo valor de cortisol salival a las 11:00 cia renal) y alteracin del metabolismo del frmaco y de
p.m., cuando se combin con la concentracin del cortisol las interacciones del mismo (p. ej., dilantina, barbitricos,
salival a las 8:00 a.m. despus de una prueba nocturna de carbamacepina y rifampina).
supresin de dexametasona de 1 mg, tuvo sensibilidad y Excepto en casos raros, una prueba de supresin por
especificidad de 100%.12 dexametasona normal (nocturna o durante dos das) casi
El cortisol de la saliva es estable a temperatura ambiente excluye la posibilidad de sndrome de Cushing. Aunque
durante varios das y la recoleccin no es invasora, es posi no se requiere para el diagnstico, los cambios medidos
ble realizarla en casa y tiene mayor especificidad ( 100%). en el cortisol de la saliva (normal, < 2 ng/ml) y la ACTH
Sin embargo, es menos sensible (92% ) que los valores sri despus de la supresin por dexametasona tal vez resulten
cos y urinarios en la deteccin de sndrome de Cushing. complementarios .13
A medianoche (12:00 a.m .), los valores < 1 .3 ng/ml por Al igual que en la insuficiencia suprarrenal, los valores
radioinmunoensayo (RIE) o > 1 .5 ng/ml por examen com de la ACTH, tanto bsales como posteriores a la supresin
petitivo de unin proteica ayudan a excluir el diagnstico. por dexametasona baja (1 mg) o elevada (8 mg), quiz ayu
Las mediciones de saliva son tiles en los pacientes con den a determinar una etiologa subyacente en los estados
sospecha de Cushing interm itente que tienen la necesidad de exceso de cortisol. En un estudio se demostr que la
de recolectar varias muestras por perodos extensos. dosis elevada de dexametasona tuvo una especificidad de
slo 57% para distinguir una fuente ectpica de un origen
D e term in a r la p rd id a d e la supresin n orm al d e hipofisario de la hipersecrecin de ACTH (fig. 1 8 -1 2 ).12
cortisol p o r d exa m etason a
La dexametasona acta como sustituto exgeno del corti Cuando se confirm a Cushing, las pruebas de
sol, que suprime la ACTH cuando la glndula hipofisaria estim ulacin de la CRH ayudan a determ inar
es normal y la secrecin de cortisol cuando la glndula la dependencia de la ACTH (por lo general
suprarrenal es normal. innecesaria)
A menudo se utiliza una prueba nocturna de supresin
por dexametasona para estudiar a pacientes con sobrepro La estimulacin de la CRH es una prueba ms reciente
duccin autnoma de cortisol. La dexametasona (1 mg) y til para distinguir los tipos de Cushing (enfermedad
administrada cerca de las 11:00 p.m. acta para suprimir central contra sndrome suprarrenal prim ario). Se obtiene
la elevacin matutina temprana de cortisol estimulada por un valor de ACTH y cortisol srico a las 8 :00 a.m. des
la ACTH. Al cortisol libre suprimido < 3 .6 pg/dl medido pus de la inyeccin de CRH. En el sndrome de Cushing
entre las 8:00 y 9 :00 a.m. se le considera una prueba nega independiente de la ACTH, el cortisol es elevado (> 2 5
tiva. Aunque al parecer la ingestin repetida de dexame pg/dl), en tanto la ACTH est suprimida ( < 1 0 pg/ml), lo
tasona reduce al mximo las diferencias individuales en que demuestra que la produccin de ACTH no est contro
la depuracin del frmaco, la prueba de supresin a dosis lando a la produccin excesiva de cortisol. En este caso, se
baja (1 mg) tuvo una precisin de 95% y confiabilidad busca una etiologa suprarrenal para el exceso de cortisol.
A C T H elevado
C u s h in g co n
hip erp igm entacin ACTH baja
En Cushing dependiente de la ACTH, tanto el cortisol afecta otras capas suprarrenales con DHEA de capa
( > 2 5 pg/dl) como la ACTH ( > 1 0 pg/ml) estn elevados. R elevada en carcinoma; los marcadores immunohis-
La ACTH autnoma es de origen hipofisario o ectpico. toqumicos, p53 y MIB-1 tambin son positivos en
Para determinar si el exceso de ACTH se origina por carcinomas.
una fuente hipofisaria o ectpica, se realiza muestreo Cushing hipofisario
bilateral inferior petrosal (B1PSS, por sus siglas en ingls) IRM hipofisaria (detecta el 85% de microadeno-
estimulante de la CRH y muestreo venoso perifrico. Los mas).
resultados se expresan como una proporcin. Una propor Cushing ectpico
cin entre la ACTH del seno petrosal y la ACTH venosa TC del pecho (p. ej., adenoma bronquial de la ACTH,
perifrica > 3 es diagnstica de enfermedad hipofisaria. carcinoma medular de la tiroides y carcinoma celu
Una proporcin < 2 .5 sugiere un origen ectpico (no lar escamoso [CC E]).
hipofisario) de produccin de ACTH. Los ndices de remi
sin para el microadenoma hipofisario son de alrededor
A lgoritm o para la determ inacin de Cushing
de 85% ; para adenomas invasivos, < 5 0 % cuando se rese
can. Con tratamiento adicional (radiacin hipofisaria con Da 1:
rayos X ), los ndices de remisin de adenomas invasivos 8:00 a.m.: vaciar por completo la vejiga y comenzar la
tal vez alcancen de manera gradual el 85%. recoleccin de orina basal.
Para la produccin ectpica de ACTH, se lleva a cabo 11:00 p.m.: recolectar la muestra de saliva para obtener el
determinacin del neoplasma. Se intenta la localizacin y valor del cortisol; ingerir dexametasona (1 mg); vaciar
extirpacin quirrgica de las lesiones producidas por la la vejiga; terminar la recoleccin de la orina basal.
ACTH autnoma. Otras opciones de tratamiento incluyen Determinaciones extendidas opcionales: comenzar la
adrenalectoma e inhibidores enzimticos suprarrenales. recoleccin nocturna de orina con supresin de dexa
metasona.
Procedim ientos de localizacin Da 2:
8:00 a.m.: vejiga vaca (postsupresin completa de corti
Cushing suprarrenal
sol urinario); sangre venosa o saliva para determinar
La TC suprarrenal distingue tumor contra hiperpla
cortisol; ACTH; dexametasona (cum plim iento); man
sia (DHEA normal de la capa R con adenomas supra
tener las muestras hasta necesitarlas.
rrenales de capa F).
La imagen suprarrenal de IRM ponderada con T2 Vase la interpretacin del diagrama de flujo de la
ayuda a distinguir el carcinoma. El cncer a menudo determinacin de Cushing (fig. 18-13).
FIGURA 18-13. Determinacin del sndrome de Cushing. Ntese que los valores sricos de la dexametasona (para la prue
ba estndar = 2 ng/ml; prueba de supresin = 6.5 ng/ml) se obtienen a las 8:00 a.m. (o seis horas despus de la ltima dosis)
para ayudar a aclarar o determinar el cumplimiento. Los valores salivales normales de dexametasona no se determinan.
CAPTULO 18 FUNCIN SUPRARRENAL 423
FIGURA 18-14. Biosntesis de la zona R. Las manifestaciones del hiperandrogenismo suprarrenal varan con la edad, el comienzo y el gnero.
424 PARTE III VALORACIN DE LAS FUNCIONES DEL SISTEMA ORGNICO
t Sin cambio
FCI-1 HDL (transitoria) Estradiol
DHEA(S) Estrona
Testosterona
Androstenediona
utilizan frmacos con propiedades antiandrognicas (p. ej., del SNC a un espacio que se encuentra detrs de la aorta,
minoxidil, espironolactona, pldoras de control natal). donde se diferencian en simpatoblastos (clulas ganglio-
La DHEA exgena es un suplemento alimenticio popu nares simpticas) o feocromoblastos (clulas cromafines
lar con varias propiedades importantes (slo algunas medulares). Los tumores que se originan por cualquiera
estudiadas), como las de vasodilatador, antiinflamatorio, de estas lneas celulares comparten propiedades histolgi
anti envejecimiento y antiaterosclerosis. cas y bioqumicas similares. Los neuroblastomas malignos
An se desconoce la importancia clnica de las interac y los ganglioneuromas benignos surgen de los simpato
ciones de la DHEA(S) con los receptores no suprarrenales/ blastos, secretan cido homovanlico (AHV) y rara vez
estrgenos. La DHEA (30 a 50 mg/da) se secreta como el se observan despus de la adolescencia. En cambio, los
principal componente de los andrgenos suprarrenales. No tumores de las clulas cromafines (feocrom ocitom as [Feo])
existe evidencia de que esta molcula se requiera para man mantienen la capacidad para sintetizar y almacenar cate
tener un estado saludable o que contribuya a enfermedad. colaminas (noradrenalina [NA] y adrenalina [A]) durante
Todava no se identifica ningn receptor esteroide para la toda la vida .13
DHEA. Las acciones de la DHEA se atribuyen a sus produc
tos de flujo descendente: la testosterona y el estrgeno. Biosntesis y almacenamiento de las catecolaminas
En pacientes normales y afectados (p. ej., personas con
La biosntesis de la NA y A comienza con la conversin
insuficiencia suprarrenal, terapia con glucocorticoides,
secuencial de los sustratos de la fenilalanina de una mane
depresin o edad avanzada y atletas entrenados), es posible
ra fragmentada y regulada de manera estrecha. Todas las
que la DHEA aumente la sensacin de bienestar e incre reacciones ocurren en el citoplasma, a excepcin de la
mente o bien disminuya varios de los marcadores sricos
produccin de NA, que tiene lugar dentro de las vesculas
(fig. 18-15), aunque los cambios son pequeos. En algu
lipdicas o membranas mitocondriales externas, como se
nos pacientes con deficiencia de andrgeno (p. ej., insu
ilustra en la figura 18-16.
ficiencia suprarrenal, deficiencia de ACTH y terapia con
En neuronas simpticas, la dopamina citoplsmica se as
glucocorticoides), los suplementos (50-100 mg/da) tal vez
la dentro de las vesculas, se convierte en NA y se almacena
contribuyan a aminorar los efectos nocivos de la deficien
hasta que la estimulacin del nervio causa su liberacin.
cia e inhiban la prdida sea inducida por glucocorticoides.
En clulas cromafinas medulares, la NA se difunde de
Sin embargo, la DHEA podra causar efectos andrognicos
manera pasiva en el citosol. En este ltimo, la NA se con
adversos en mujeres, adems de que an se desconocen las
vierte en A a travs de una enzima dependiente del cortisol
consecuencias a largo plazo de los suplementos.
denominada FNMT. Cualquier forma de estrs que aumente
las concentraciones de colesterol estimula la produccin de
M D ULA SUPRARRENAL
A. La A citoslica libre (como la dopamina) se transporta de
La mdula suprarrenal forma parte del sistema de capta manera activa dentro de vesculas secretorias por transpor
cin y descarboxilacin del precursor de la amina. Como tadores monoaminovesiculares (VMAT) en feocromocitos. En
respuesta a la estimulacin, la mdula secreta catecola condiciones normales, la proporcin entre NA y A en suero es
minas en la circulacin en lugar de transmitir mensajes a de 9:1 (98% de neuronas posganglinicas, 2% de la mdula).
travs de los axones eferentes. Funciona como un ganglio En presencia de insuficiencia suprarrenal (cortisol bajo), esta
simptico atpico. Los productos medulares de la cateco- proporcin se eleva a 45:1 en mujeres y 24:1 en hombres.
lamina sirven como primera respuesta al estrs al actuar
en segundos (el cortisol requiere 20 min) para promover Degradacin de las catecolam inas
la respuesta de pelea o huida, que aumenta el rendimiento
Todas las catecolaminas se eliminan con rapidez de las clu
cardaco y la presin sangunea, desva la sangre hacia el
las blanco y de la circulacin mediante tres mecanismos:
msculo y el cerebro, y moviliza combustible almacenado.
1. Recaptacin dentro de las vesculas secretorias.
Desarrollo 2. Captacin en clulas no neurales (hepticas en su
Las clulas simpticas provienen de clulas del tallo supe mayor parte).
rior neural primordial (simpatogonia), que emigran fuera 3. Degradacin.
CAPITULO 18 FUNCIN SUPRARRENAL 425
Citoplasma
La degradacin depende de dos enzimas, la catecol metil- centraciones plasmticas amplias que fluctan con rapidez
transferasa (COMT) (en tejidos no neuronal) y la monoam - que hacen que la determinacin e interpretacin precisas
nooxidasa (MAO) (dentro de las neuronas), para producir sean desafiantes desde el punto de vista tcnico.
metabolitos (metanefrinas y MAV) de las catecolaminas Las catecolaminas de la orina (NA y A libres) se anali
libres. Los metabolitos y las catecolaminas libres se elimi zan a travs de cromatografa lquida o fluorometra. A las
nan por filtracin directa en la orina y se excretan como 24 h, los valores de catecolaminas y metabolitos urinarios
NA libre (5% ); NA conjugada ( 8%); metanefrinas (20% ); son ms confiables y no se alteran por la edad o el gnero.
y MAV (30% ). La A urinaria (50% ) se convierte a partir La mayor parte de los frmacos antihipertensivos y
de NA por la feniletanolam ina N -m etltransferasa (FNMT) muchos otros medicamentos interfieren con la medicin
renal, no suprarrenal, antes de la excrecin (fig. 18-17). precisa de las catecolaminas. Las sustancias que producen
autofluorescencia (p. ej., tetraciclinas, efedrina, a-m etil-
M ediciones de las catecolam inas urinarias y dopa) llegan a causar resultados errneos cuando se miden
por anlisis fluoromtricos. Los a antagonistas centrales
plasm ticas
(clonidina) y las tiacidas son los agentes de eleccin para
Las catecolamina son hidroflicas; circulan en concen controlar la hipertensin durante la evaluacin de trastor
traciones bajas (50% ligadas a la albmina); tienen vida nos que causan activacin simptica excesiva (estados de
media corta (segundos a dos minutos); y producen con catecolaminas elevadas).
DOMA
FIGURA 18-17. Degradacin de la catecolamina. Las catecolaminas libres (A y NA) se aslan en las vesculas conte
nedoras de VMAT o se convierten en metabolitos, DOMA por MAO neuronales y metanefrinas por COMT no neuro-
nales. Al final estos metabolitos se degradan a MAV (DOMA por COMT y metanefrinas por MAO) y se excretan.
426 PARTE III VALORACIN DE LAS FUNCIONES DEL SISTEMA ORGNICO
C ausas de hiperactividad sim ptica jantes, un paciente raro con la evidencia clnica y bioqu
mica de hipersecrecin por catecolamina tal vez presente
Disfuncin autonmica.
un adenoma o carcinoma adrenocortical, en lugar de un
Ataque de pnico (emociones).
tumor medular, que produce los sntomas. Los sntomas
Respuestas al estrs: hipoglucemia, lesin, infarto, de Feo se relacionan con el tipo de catecolaminas secreta
infeccin, psicosis y convulsiones. das por el tumor y los receptores que activan.
Frmacos: descongestionantes, supresores del apeti
to, estimulantes, broncodilatadores, inhibidores de la
MAO, hormona tiroides, cortisol, abstinencia de nicoti Diagnstico del feocrom ocitom a
na o antagonistas simpticos de accin breve (clonidina Todava se desconoce cul es la m ejor prueba para diagnos
o propranolol). ticar Feo. Aunque en la mayora de pacientes con feocro
Alimentos que contienen tiramina: cerveza, vino tinto, mocitoma se observan anormalidades diagnsticas obvias
salsa de soya, alimentos sobremadurados/fermentados, en la mayor parte de las pruebas, en otros se manifiestan
carnes ahumadas o maduradas. resultados confusos. Cuando una prueba es ambigua, se
Feocromocitoma (tumor productor de catecolam ina). debe realizar una prueba diferente si es que la sospecha
Los feocromocitomas son raros (<0.1% de pacientes clnica an es elevada .18,19
hipertensos). Se trata de tumores productores de cateco La medicin de las catecolaminas plasmticas totales
lamina que provienen de tejido cromafn, que causa HTN (NA y A) y las metanefrinas urinarias constituye el perfil
relacionada con sntomas clnicos no especficos que semejan ms sensible de valoracin. Las catecolaminas plasmticas
ansiedad. Los sntomas incluyen palpitaciones, diaforesis >2 000 pg/ml en un paciente en reposo en posicin supina
y dolores de cabeza. En un estudio retrospectivo, 40% de con una cnula no mantenida representa casi un diagnstico
pacientes evaluados para feocromocitoma cumpli con los de feocromocitoma. De 287 pacientes con Feo, el 88% pre
criterios de trastorno de pnico, en comparacin con 5% de sent NA y A plasmticas elevadas, que aumentaron hasta
pacientes control con hipertensin (fig. 18-18).16,17 en 100% durante episodios hipertensos a pesar de no existir
La presentacin del paciente es muy variable. En la correlacin entre la presin arterial y los valores bsales de
mayora se observan episodios de HTN (diastlica/ortos- catecolamina .24 Con valores lmites (1 0 0 0 a 2 0 0 0 pg/ml),
ttica), palpitaciones y diaforesis, con perodos no espe tal vez sea til una prueba de supresin de clonidina.
cficos de sntomas iniciados por varios estmulos, como Las metanefrinas en plasma, medidas por HPLC o
esfuerzo fsico, torcimiento del torso, Valsalva, miccin RIA, se promueven como las pruebas de diagnstico ms
o coito. Otros padecen HTN constante (algunos refracta especficas y sensibles. Sin embargo, investigadores de la
rios al tratamiento) y muchos no muestran sntomas. Rara Clnica Mayo en Estados Unidos encontraron que las meta
vez los pacientes con Feo padecen hipotensin episdica nefrinas plasmticas carecen de especificidad (15% falsos
(secrecin exclusiva de A o dopamina). Los signos adicio positivos) y no se recomiendan como pruebas de primera
nales tal vez incluyan lividez, mayor ndice de sedimenta lnea, sino que se reservan para pacientes con riesgo eleva
cin de eritrocitos, cardiomiopata dilatada y eritrocitosis do o aquellos incapaces de recolectar una muestra urina
como resultado de sobreproduccin de eritropoyetina. El ria precisa a las 24 h. Las metanefrinas urinarias (normal,
diagnstico de Feo pocas veces se confirma. > 1.2 mg/da) quiz constituyen la prueba de orina ms
Los mecanismos de secrecin de catecolamina por per sensible; es menos probable que sea alterada por frmacos
sonas con Feo an son imprecisos (los tumores no son o ciertos alimentos. Al parecer una recoleccin urinaria
inervados). Es probable que el aumento de la sntesis de nocturna (8 a 12 h) es tan precisa y ms conveniente que
catecolamina, la capacidad de degradacin limitada y el una recoleccin de orina a las 24 h. Los MAV urinarios por
almacenamiento restringido por exceso de NA y metabo- HPLC o anlisis fluoromtrico tienen el ndice de falsos
litos causen desbordamiento en la sangre, lo que eleva la negativos ms elevado (hasta el 41% ) entre las pruebas de
NA o A libre circulante, o ambas, jun to con otros pptidos catecolamina en orina .20
activos que causan sntomas. Debido a que las catecola La cromogranina A se coalmacena y secreta en cuanto
minas medulares y las hormonas corticales suprarrenales a las catecolaminas. En 80% de los pacientes con feocro
cumplen funciones similares y producen efectos seme mocitoma se observan concentraciones elevadas de cro-
10% 90%
Descubiertos sin intencin (imgenes, ciruga, necropsia) Intrasuprarrenal
Mltiples Intraabdominai (95%)
Extrasuprarrenales (pecho, cuello, abdomen, vejiga) Sencillo
Malignos (invasin, metstasis distante) Benigno
Familiares (Von Hippel-Lindau, MEN-II, hiperplasia de la
paratiroides, carcinoma medular de la tiroides,
neurofibromatosis, paraganglioma)
ES T U D IO D E C A S O
P R E G U N T A S DE R E P A S O
1. Cundo se considera una causa endocrina para la 4. Describa cada producto final de la corteza suprarrenal
hipertensin del paciente? Cul es el rgano del que por capa funcional y mencione un regulador especfi
se suele sospechar? La hipertensin se origina por co para cada uno.
un estado de sobreproduccin o de subproduccin?
5. Cuando se producen, las catecolaminas libres (NA y
2. En trminos generales, cules son algunas seales de A) son de vida breve. Describa sus destinos generales
advertencia importantes de enfermedad suprarrenal? y cmo se miden.
3. Cul es el sustrato habitual del que se producen 6. Cul esteroide suprarrenal es responsable de la pro
todos los esteroides suprarrenales? duccin de adrenalina?
16. Kaplan N. Pheochromocytoma. In: Pine J , ed. Clinical Hyperten- of The Endocrine Societys 83rd Annual Meeting, Denver, June 2 0 -
sion. Baltimore: Lippincott Williams & Wilkins, 1998:345-365. 23, 2001, Abstract # P l-642. Denver, CO: The Endocrine Society,
17. Sowers K. Pheochromocytomas. In: Lavin M, ed. Manual of Endo 2001:285.
crinology and Metabolism. Philadelphia: Lippincott Williams & 21. Sjoberg R, Kidd G. The clonidine suppression test for pheochro
Wilkins, 2 0 0 2 :139-145. mocytoma: a review of its utility and pitfalls. Arch Int Med
18. Bravo E. Diagnosis and Management of Pheochromocytoma. In: 1992:152:1193.
Pinchera A, et al, eds. Endocrinology and Metabolism. London: 22. Pacak K, Eisenhofer G, Carrasquillo J, et al. 6 -[18F]fluorodopamine
McGraw-Hill, 2001:341-349. positrn emission tomographic (PET) scanning for diagnostic loca-
19. Fogarty J , Russo J , et al. Hypertension and pheochromocytoma lization of pheochromocytoma. Hypertension 2001:38:6-8.
testing: the association with anxiety disorders. Arch Fam Med 23. Lutton J . The incidentally discovered adrenal mass. In: Pinchera A,
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but less specific than urinary total metanephrines and catechola- 24. Young W, Kaplan N. Diagnosis and treatment of pheochromocytoma
mines in detection of pheochromocytoma. Program and Abstracts in adults. www.UpToDate.com, online 12.2, 1/04.
C A P T U L O
Fundn gonadal
Dev Abraham y A. Wayne Meikle
19
C O N T E N I D O DE L C A P T U L O
O B J E T I V O S
Al completar este captulo, el laboratorista clnico Explicar los principios de cada prueba de diag
podr: nstico para la disfuncin de los ejes hipofisario-
Analizar la biosntesis, la secrecin, el transporte gonadales.
y la accin de los esteroides y las gonadotropinas Correlacionar la informacin de laboratorio con
sexuales. respecto a los trastornos gonadales sospechados,
Identificar la localizacin de la hipfisis, los ova de acuerdo con los datos clnicos del paciente.
rios y los testculos. Describir el protocolo de prueba de laboratorio
Describir los ejes hipotalmico-hipofisario-ovrico adecuado para evaluar o monitorear de manera
e hipotalmico-hipofisario-testicular y cmo regu efectiva pacientes con enfermedad gonadal sospe
lan la produccin del esferoide sexual y la hormo chada.
na gonadotropina.
T E R M I N O S C L A V E
431
432 PARTE III VALORACIN DE LAS FUNCIONES DEL SISTEMA ORGNICO
OVARIO E strgeno
Los estrgenos sintetizados de forma natural son compuestos
Los ovarios son rganos pares y, al igual que las gnadas
de carbono 18. El principal estrgeno producido en el ovario
masculinas, realizan funciones duales: la produccin del
es el estradiol. La estrona y el estriol son, en su mayor parte,
gameto femenino (el vulo) y la elaboracin de esteroi-
metabolitos de conversin intraovrica y extraglandular. En
des ovricos .1'3 A diferencia de las clulas reproductivas
mujeres, los estrgenos promueven el desarrollo de las carac
primordiales masculinas, las femeninas producen (en la
tersticas sexuales secundarias. El desarrollo de senos, uteri
mayor parte de los ciclos) un gameto solitario. Los proce
no y vaginal se debe a los efectos del estrgeno, en particular
sos ovricos estn orquestados de manera cuidadosa con
el desarrollo glandular y de los vasos sanguneos.4,589La falta
los ciclos menstruales mediante una interaccin compleja
de estrgenos que ocurre de manera natural con el comien
de hormonas entre los ovarios, la hipfisis y el hipotlamo
zo de la menopausia conduce a cambios atrofeos en estos
que prepara el tero para la implantacin del embrin. En
rganos. Adems, los estrgenos afectan la piel, los msculos
la ausencia de dicho proceso, la cubierta uterina se des
lisos vasculares, las clulas seas y el sistema nervioso central
prende, lo que produce la menstruacin .45
(cognicin). El estrgeno es responsable de los cambios en la
La duracin del ciclo menstrual es el tiempo entre dos
fase folicular en el tero. La deficiencia de estrgenos origina
ciclos consecutivos establecidos. La duracin tpica es de
un desarrollo irregular e incompleto del endometrio .2,10
alrededor de 28 das ( 3 das). El flujo mensual promedio
es de entre dos y cuatro das.
P rogesteron a
La progesterona es un compuesto de carbono 21 de la fami
A natom a funcional del ovario lia de los esteroides, que se produce por el cuerpo lteo. La
Los ovarios son estructuras ovoides (de cerca de 5 cm de progesterona induce la actividad secretora de las glndulas
longitud) situados en la fosa plvica. Se encuentran sus endometriales que son inducidas por el estrgeno, lo que
pendidos por el ligamento ancho del ovario y en relacin prepara al endometrio para la implantacin embrionaria.
estrecha con la posicin de la terminacin fimbrial de las Otros efectos incluyen el espesamiento del moco cervical,
trompas de Falopio, que estn conectadas a la cavidad ute la reduccin de las contracciones uterinas y el efecto ter-
rina. Los ovarios contienen alrededor de 2 a 4 millones mognico. La elevacin de la temperatura basal del cuerpo
de folculos primordiales .2,6En cada ciclo, se renen unos que sucede despus de la ovulacin se debe a la progeste
cuantos folculos primordiales para su maduracin pro rona. En la prctica clnica, a este efecto se le utiliza como
gresiva. La mayor parte de los folculos se atrofian, con modelo de hormona luteinizante que se presenta de
excepcin de un solo folculo (folculo de De Graaf) que manera natural para indicar la ocurrencia de la ovulacin.
al final libera un vulo maduro. El folculo de De Graaf La progesterona es la hormona dominante responsable de
tiene una capa interna, la teca interna; una capa externa, la fase ltea en el ciclo. La deficiencia de la progesterona
la teca externa; y una cavidad central que contiene lquido ocasiona falla en la implantacin del embrin .2,4'68
proveniente del plasma. La capa secretoria del folculo es
la capa granulosa .25-7 A n d r gen o s
E l vulo desarrollado est adherido en el interior de la Los ovarios producen andrgenos, que son compuestos
cavidad del folculo de De Graaf por clulas granulosas de carbono 19 (androstenediona, dehidroandrostenedio-
denominadas clulas cmulo. En una secuencia coreogra- na, testosterona y dihidrotestosterona). En mujeres, la
fiada de manera precisa de la estimulacin ovrica por produccin excesiva de andrgenos ovricos conduce al
hormonas estimulantes del folculo y hormonas lutei- crecimiento excesivo de vello (hirsutism o), prdida de las
nizantes, los ovarios producen las hormonas esteroides caractersticas femeninas (desfemenizacin) y, en casos
principales: la progesterona y el estrgeno. Cuando se graves, francas caractersticas sexuales secundarias mas
expulsa el vulo, el folculo de De Graaf experimenta un culinas (masculinizacin, o virilizacin ).11M A diferencia
cam bio m orfolgico al cuerpo lteo, con hipertrofia de los estrgenos, que no se producen en los ovarios des
de las clulas de la teca y granulosas. A este proceso se pus de la menopausia, la sntesis de andrgenos contina
le denomina luteinizacin. El cuerpo lteo, un sustrato de manera adecuada en la edad avanzada.
para la produccin continua de progesterona y estrgeno, Las inhibinas A y B, que se producen por los ovarios,
es rico en colesterol y mantiene el endometrio para una son hormonas que inhiben la produccin de FSH .6,15 La
concepcin anticipada. Si no se presenta la concepcin activina es una hormona que aumenta la secrecin de
o im plantacin, el endometrio se desprende y el cuerpo la FSH e induce esteroidognesis. La foliculostatina, la
lteo se atrofia a folculo atrtico. relaxina, la protena reguladora del folculo, el factor de
maduracin oocito y la sustancia inductora de la meio-
Produccin horm onal por los ovarios sis son hormonas que al parecer son importantes, aunque
todava no se caracterizan con claridad sus funciones.
Al igual que en las glndulas suprarrenales y los testculos,
la ruta esteroidognica y las enzimas sintticas tambin
Ciclo m enstrual
se observan en los ovarios. El colesterol se sintetiza, sea a
partir de acetato o se transporta de manera activa de la par Consta de dos fases de fenmenos paralelos que ocurren
tcula lipoprotena de baja densidad (LDL) en la sangre .45'8,9 en los sitios ovricos y endometriales. La primera es la fase
CAPTULO 19 FUNCIN GONADAL 433
folicular (ovario) o proliferativa (tero); la segunda es la Etapa 3: vello terminal que cubre labios mayores y se
fase ltea (ovario) o secretora (tero ).1'2'4'6,13'16 extiende sobre el montculo pbico.
Etapa 4: vello terminal que cubre por completo los labios
F a s e fo licu la r mayores y el pubis.
L os estrgenos secretados por el folculo en desarrollo Etapa 5: vello terminal que cubre los labios mayores, el
aumentan el grosor del endometrio por estimulacin de montculo pbico y la parte interna de los muslos.
las clulas epiteliales, crecimiento de los vasos sanguneos
y desarrollo de las glndulas endometriales. La capacidad A n orm alidades del ciclo m enstrual
secretoria intensa de las glndulas uterinas proporciona
El ciclo menstrual promedio tiene una duracin de 28
una secrecin que ayuda a la implantacin del embrin.
das, con un rango de 25 a 35 das al que se le considera
normal. La edad promedio en que ocurre la menopausia es
F a s e ltea entre los 45 y 55 aos .1'2,4'615'16
Fase que sigue a la folicular, inmediatamente despus de La am enorrea se refiere a la ausencia de menstruaciones.
la extrusin del vulo y la luteinizacin subsiguiente del Cuando una m ujer nunca ha menstruado, se le denomina
folculo de De Graaf para formar el cuerpo lteo. ste am enorrea p rim ara.7-17'20 Cuando una m ujer con cuando
mantiene la secrecin de la progesterona y ayuda en la menos un ciclo menstrual tiene cese posterior durante
implantacin del embrin. Despus de 14 das, el endome un perodo mnimo de 3 a 6 meses, se le denomina am e
trio uterino es expulsado para que comience el prximo norrea secundara.10-17-1S En el cuadro 19-1 se muestra la
ciclo. La duracin tpica del sangrado es de 3 a 5 das, con frecuencia de los sitios etiolgicos de la amenorrea. En la
prdida de sangre de alrededor de 50 ml. figura 19-1 se ilustra un mtodo diagnstico de amenorrea
secundaria. La oligom enorrea se refiere al sangrado mens
Control horm onal de la ovulacin trual poco frecuente o irregular, con duracin excesiva del
ciclo de 35 a 40 das. El sangrado excesivo uterino durante
El control central de la secrecin de la hormona folicu-
siete das es disfuncional y se le denomina m enorragia. En
loestimulante (FSH) y la hormona luteinizante (LFI) reside
una paciente con infertilidad, el diagnstico de fase ltea
en el generador de la pulsacin de la hormona liberado
inadecuada se establece cuando dicha fase es menor a 10
ra de gonadotropina (GnRH) del ncleo arqueado y del
das o cuando en la biopsia endometrial se observa que la
ncleo preptico medial del hipotlamo .1'24'615'16 Existen
progresin de los cambios endometriales est retrasada en
repuestas de retroalimentacin positiva y negativa entre
la preparacin para la implantacin.
los estrgenos, la progesterona y la produccin de LH y
Los principios subyacentes en la evaluacin de los tras
FSH. Debido a la falta de estrgenos despus de la m eno
tornos de las funciones menstruales normales son los
pausia, se elevan los valores de FSH y LH.11516El torrente
mismos que para la disfuncin ovrica o hipofisaria. En el
a medio ciclo en la produccin de la LH desemboca en el
cuadro 19-2 se muestran las diversas causas de la infertili
fenmeno culminante de la ovulacin. Las concentracio
dad masculina y femenina.
nes de FSH son elevadas al comienzo de la fase folicular y
disminuyen despus de la ovulacin. Cualquier dao en el
hipotlamo o estrs (psicosocial o fsico) conduce a ano- Clasificacin d e la a m en o rrea p o r la O rganizacin
vulacin y amenorrea .101718 M undial d e la Salud (O M S)20-21
Tipo 1. Hipogonadismo hipotalmico (FSH u LH, o ambas,
D esarrollo puberal fem enino bajas o normales):
Amenorrea hipotalmica (anorexia nerviosa, idiopti-
Estadios d e T an ner ca, ejercicio inducido).
El sistema de estadios propuesto por Marshall y Tanner 9 Sndrome de Kallmann.
se aplica para la vigilancia de las etapas de crecimiento de Deficiencia de gonadotropina aislada.
mamas y vello pbico.
Estadio d e desarrollo d e la m am a
Etapa 1: elevacin papilar.
CUADRO 19-1. A M EN O R R EA : SITIO S
Etapa 2: elevacin del botn de la mama y de la papila.
ETIO L G IC O S D E A N O R M A LID A D
Etapa 3: elevacin del tejido mamario y la papila.
Etapa 4: elevacin de papila y areola que forman el pecho; la PRIMARIA SECUNDARIA
papila est en el ecuador de la mama o arriba del mismo.
Hipotlamo 27% 38%
Etapa 5: la areola est anidada dentro de la mama o la
papila est debajo del ecuador de la mama, o ambas. Hipfisis 2% 15%
SOPQ 7% 30%
Estadio d e cam bios del vello pbico Ovario 43% 12%
Etapa 1: vello tipo lanugo.
tero/salida 19% 7%
Etapa 2: vello terminal oscuro sobre labios mayores.
434 PARTE III VALORACIN DE LAS FUNCIONES DEL SISTEMA ORGNICO
Obtener (i-hCG
Positivo Negativo
Embarazo
Obtener: altura/peso,
prolactina srica (PRL),
FSH y, si est indicado,
testosterona o TSH
Tipo 2. Anovulacin crnica euestrognica (FSH y LH fisarios que interrumpen la secrecin de FSH u LH llegan
normales): a inducir hipogonadismo hipogonadotrpico. La produc
Sndrome ovrico poliqulstico (LH > FSH en algunos cin de prolactina por prolactinomas tambin tiene efectos
pacientes, 2:1 o mayor). similares .10,17Cualquier causa secundaria de hipogonadis
Hipertecosis. mo crnico podra inducir prdida sea patolgica, que
ocasiona osteopenia y, en casos graves, osteoporosis.
Tipo 3. Hipogonadismo hipertalm ico (FSH suele ser ele
vada, pero tambin llega a estarlo la LH):
Falla ovrica prematura Insuficiencia ovrica p rim a ria
Sndrome de Turner Se origina por anormalidad cromosmica congnita (sn
drome de Turner) o por menopausia prematura .17,18,20,23
Las pacientes con sndrome de Turner no informan los
H ipogonadism o hipogonadotrpico
mismos bochornos experimentados por pacientes con
Muchas causas fisiolgicas y patolgicas inducen ameno hipogonadismo hipergonadotrpico secundario .20 La ele
rrea secundaria; en particular, prdida de peso sea como vacin de la FSH constituye un indicio en el diagnstico
resultado de anorexia nerviosa o prdida de peso secunda de menopausia prematura. La insuficiencia ovrica pre
ria inducida por varios procesos de enfermedad .101718,20'22 matura llega a presentarse junto con otras insuficiencias
Es posible que el ejercicio fsico intenso (al que a menu glandulares (hipoparatiroidismo, hipotiroidismo, hiposu-
do se le conoce como am enorrea de la corredora) tambin prarrenal o candidiasis mucocutnea ).6,17,18,20,22 La meno
induzca amenorrea secundaria. Adems, los tumores hipo- pausia representa un fenmeno natural e inevitable que
CAPTULO 19 FUNCIN GONADAL 435
CUADRO 19-2. R E S U L T A D O S A N D R G E N O S E N H IR S U T IS M O Y V IR IL IZ A C IO N
ANALITO
Tumores de virilizacin
Ovario ttt ttt t
Suprarrenal ft tt ttt
Modificado de Demers LM, Hirsutism and Vlrllization, News and Views, Washington, D.C.: American Association for Clinical Chemistry, 1989.
SDHEA = sulfato de dehidroepiandrosterona.
produce la elevacin de las concentraciones de FSH y LH, les y mejora la tasa de concepcin, aunque la Administra
con cifras bajas de estrgeno .1,616,24 cin de Frmacos y Alimentos (FDA) de Estados Unidos
no lo aprueba para este uso.
S n d ro m e d e ovrico poliqustico
Este trastorno frecuente se observa en muchas presen Hirsutism o
taciones: infertilidad, hirsutismo, anovulacin crnica,
El hirsutismo consiste en crecimiento anormal de cabello
intolerancia a la glucosa, hiperlipidemia o dislipidemia e
terminal sensible al andrgeno en mujeres, en reas donde
hipertensin .11,13,14El comienzo suele ser perimenarquial,
los folculos de vello terminal son escasos o no se encuen
crnico y notable por su progresin lenta. Las investiga
tran en condiciones normales. En Estados Unidos, se
ciones en este trastorno implican la estimacin de testoste
calcula que alrededor de 5 a 10% de las mujeres padecen
rona libre, concentraciones de globulina unida a hormona
hirsutismo. ste se cuantifica por una tcnica de medicin
sexual, FSH y LH, glucosa en ayunas y cifras de insulina y
practica desarrollada por Ferriman y Gallwey.11,12,14,25 Las
lipidos. En el ultrasonido del ovario se revelan varios quis
reas ms relevantes de crecimiento excesivo de vello con
tes en casi todas las pacientes (cerca de 30% no los presen
trolado por andrgenos se encuentran en la lnea media
tan). La mayora con este trastorno padecen sobrepeso; sin
del cuerpo, como resultado de una preponderancia inhe
embargo, las pacientes con sndrome ovrico poliqustico
rente de la actividad de la 5a-reductasa, que convierte la
(SOPQ) de descendencia asitica oriental o sudamericana
testosterona en dehidrotestosterona (DHT). El hirsutismo
tienen peso normal. La mayor parte de los sntomas y las
slo debe considerarse en el contexto del origen tnico
anormalidades de laboratorio se revierten con prdida de
de las mujeres que se someten a evaluacin. Las mujeres
peso y aumento de la actividad fsica. Un frmaco (metfor-
con descendencia italiana, de Europa del este, del oriente
mina), que suele utilizarse para el tratamiento de la dia
de la India e irlandesa estn dotadas con ms vello termi
betes, es til para esta afeccin, incluso en ausencia de
nal sensible al andrgeno que sus contrapartes del norte
diabetes .13 Se informa que normaliza los ciclos menstrua
de Europa. La obtencin cuidadosa de los antecedentes
tnicos de las personas nacidas en la Unin Americana es
importante antes de comenzar una evaluacin de labora
ES T U D IO D E C A S O 19-1 torio a gran escala. En el cuadro 19-3 se resumen las anor
malidades hormonales relacionadas con hirsutismo.
Una m ujer de 39 aos de edad informa bochornos
y ciclos menstruales irregulares durante seis meses. Escala d e Ferrim an -G a llw ey
El examen clnico no revela anormalidades. La eva Por lo general, se identifican nueve reas para la valo
luacin de laboratorio muestra los siguientes resul racin: el labio, el mentn, el cuello, el abdomen, la
tados: RSC, normal; glucosa sangunea, 89 mg/dl; espalda baja y superior, el rea de la patilla, la espalda,
HET, 1.5 UI; FSH, 128 UI; y LH, 30 UI. el muslo y la parte media del pecho. Una versin modi
Esta situacin clnica es consistente con una de ficada de esta escala usa aras adicionales.
las siguientes afecciones: Los sitios se clasifican en una escala del 1 al 4, con base
en el espesor y la pigmentacin del vello.
1. SOPQ
Una clasificacin >8 indica hirsutismo.
2. Prolactinoma
C lasificacin del hirsutism o11,12,1423
3. Tumor hipofisario Funcional (concentraciones de andrgeno normales
4. Menopausia con crecimiento excesivo de vello) o exceso de andr-
geno verdadero (andrgenos elevados).
5. Deficiencia hormonal hipotalmica Ovrico (mediado por LH) o suprarrenal (mediado por
ACTH).
436 PARTE III VALORACIN DE LAS FUNCIONES DEL SISTEMA ORGNICO
Mujeres
Hipotlamo Disminucin de GRH Frmacos
Aum ento de estrs
Dieta
Hipfisis Disminucin de FSH y LH Tumor destructivo y lesin vesicular
Ovarios Descenso de estradiol o Insuficiencia orgnica
progesterona Disgnesis orgnica
Anticuerpos antiovricos
Desnutricin, peso muy bajo, enfermedad
metablica
Trompas de Endometrio inadecuado Gasto bajo de progesterona
Falopio y tero Cicatrizacin y cierre de las trompas Enfermedad inflamatoria plvica
Disminucin de moco cervical Infecciones cervicales
Concepcin Inmovilizacin y Anticuerpos antiespermatozoides
destruccin de esperm atozoide
Hombres
Hipotlamo e Azoospermia (falta de Defectos primarios en glndulas hipotalmica
hipfisis espermatozoides) a oligospermia o hipofisaria
Andrgenos exgenos
Disfuncin testicular, con disminucin de la
produccin testicular
Testculos Azoospermia (falta de Orquitis; infecciones testiculares, como
espermatozoides) a oligospermia paperas; alcoholismo y abuso de sustancias
Retraso o deficiencia de madurez Defectos cromosmicos
sexual; reduccin de testosterona
Prstata Disminucin del lquido seminal Infecciones de prstata o vesculas seminales
Tracto uretrogenital Eyaculacin retrgrada o ausente Anorm alidades fsicas; diabetes crnica
terona al conducto de W olff propicia la diferenciacin de nuacin se muestran algunas causas relevantes encontra
los diversos componentes del aparato genital masculino. das en la prctica clnica:
Las clulas de Sertoli producen el factor de regresin de
Pubertad tarda o hipogonadismo, con aumento de gona-
Mller, que contribuye a la regresin del aparato genital
dotropinas (FSH u LH, o ambas)
femenino primordial. La piel escrotal es rica en 5a-reduc-
Sndrome de Klinefelter
tasa, que convierte la testosterona a DHT. La exposicin
Insuficiencia gonadal bilateral
fetal a frmacos que bloquean esta hormona conduce a la
Insuficiencia testicular primaria
feminizacin del feto masculino.
Anorquia
Desarrollo posnatal. La funcin testicular se reactiva
Desvanecimiento de testculos
durante la pubertad despus de un perodo de inactividad
Cncer por agentes citotxicos
al producir testosterona que ocasiona crecimiento de vello
Radiacin
sexual secundario (cara, pecho, axila y pubis); mayor desa
Traumatismo
rrollo esqueltico lineal; crecimiento de los genitales internos
Infeccin (paperas, orquitis)
y externos; aumento de la musculatura corporal superior; y
Pubertad retardada con concentraciones normales o bajas
desarrollo de la laringe y de las cuerdas vocales, con pro-
de FSH u LH, o ambas
fundizacin de la voz .37-39 Los posibles cambios de humor
Pubertad retardada constitucional43,44
y la agresividad son efectos indeseables que llegan a ocurrir
Disfuncin hipotalmica
durante la pubertad. Los efectos del crecimiento lineal de
Desnutricin
la testosterona son finitos, con cierre epifisario cuando se
Enfermedad sistmica crnica
alcanza la altura determinada por factores genticos. Duran
Obesidad grave
te la pubertad, el hipogonadismo conduce a terminacin
Tumores del SNC
imprecisa de las placas de crecimiento, lo que conlleva a
Hipopituitarismo
mayor altura, extremidades largas y segmentos del cuerpo
Panhipopituitarismo
superiores e inferiores desproporcionados. Es posible cla
Sndrome de Kallmann (anosmia, paladar hendido y
sificar las caractersticas sexuales masculinas secundarias
reduccin de los valores de FSH y LH)
mediante un sistema de desarrollo propuesto por Tanner.
Deficiencia GH aislada
Efectos sobre la espermatognesis. La estimulacin de las
Hiperprolactinemia (inducida por prolactinoma o fr
clulas de Leyding induce la produccin de testosterona.
macos)
sta, al actuar con la FSH, tiene efectos paracrinos en las
Hipotiroidismo
clulas seminferas y de Sertoli, lo que propicia la esperma
Diversas44
tognesis. La concentracin intratesticular de testosterona es
Sndrome de Prader-Willi
50 a 100 veces mayor que la de la sangre perifrica. El mante
Sndrome de Laurence-Moon
nimiento de un valor intratesticular elevado de testosterona
Sndrome de LEOPARD
es importante para lograr una espermatognesis efectiva. El
Sndrome de florecimiento
uso excesivo o abuso exgeno (atletas) de la testosterona dis
Neoplasia por grmenes
minuye la concentracin intratesticular elevada, con lo que
Seudohermafroditismo masculino
se reduce la produccin de espermatozoides.
Ataxia-telangiectasia
E fecto sobre los resultados sexuales secundarios. La tes
Defectos enzimticos esteroidognicos
tosterona tiene efectos que promueven el crecimiento en
varios tejidos blanco. Las caractersticas sexuales secun El diagnstico diferencial de hipogonadismo incluye el
darias que se desarrollan durante la pubertad se conservan anterior grupo grande y diverso de trastornos que afectan
en la edad adulta madura por la testosterona .9 La expo los testculos y la regulacin hipotalmica-hipofisaria de
sicin del pelo del cuero cabelludo da como resultado la los testculos. En la siguiente seccin se explican ciertos
regresin de los folculos del cabello (recesin temporal). trastornos importantes.
La prstata se agranda de manera progresiva durante la
edad adulta. La prdida posterior de las caractersticas
H ipogonadism o hipergonadotrpico
sexuales secundarias debe indicar la evaluacin en busca Las caractersticas relevantes de este subconjunto de tras
de hipogonadismo. Las concentraciones bajas de testoste tornos incluyen testosterona baja jun to con concentra
rona ocasionan la prdida de la masa sea y osteoporosis ciones elevadas de FSH o LH y produccin defectuosa de
en hombres de cualquier edad. espermatozoides.
Sndrome de Klinefelter. Este trastorno ocurre en alre
Trastornos del desarrollo sexual dedor de 1 de cada 4 0 0 hombres. Se origina por un cro
e hipofuncin testicular mosoma extra. El cariotipo ms frecuente es 47,XY .45 Los
hombres con sndrome de Klinefelter presentan testculos
El desarrollo puberal llega a ser prematuro (precoz) o retar pequeos (< 2 .5 cm) y firmes. En ocasiones se observa,
dado, incluso cuando el desarrollo es normal al nacer .4142 tambin, ginecomastia (agrandamiento del pecho mascu
Las descripciones detalladas de la secuencia de las anor lino) en el momento del diagnstico. Debido a la produc
malidades puberales hormonales del vello, los genitales y cin reducida de testosterona, los valores de FSH y LH
el pecho est ms all del alcance de este texto. A conti estn elevados.
CAPTULO 19 FUNCIN GONADAL 439
ES T U D IO D E C A S O 19-3
Adems, estos pacientes padecen azoospermia y esteri falta de genitales internos femeninos se vuelve evidente.
lidad resultante. Los pacientes con mosaicismo tal vez pro Los testculos a menudo no descienden y no se eliminan
duzcan algunos espermatozoides y se informan embarazos de manera oportuna estos rganos, lo que ocasiona trans
en dichos casos. La elevacin de las concentraciones de formacin maligna. En la evaluacin bioqumica se reve
FSH y LH induce incremento de la actividad de la aromata- lan concentraciones normales de testosterona, con valores
sa, lo que produce concentraciones elevadas de estrgenos. elevados de FSH y LH. No hay utilidad ni respuesta en la
Los hombres con sndrome de Klinefelter quiz muestren administracin de testosterona exgena.
reduccin de la densidad sea y cncer de pecho. D eficiencia de 5a-redu ctasa. El genotipo es XY. La dis
Sndrome de fem in izacin testicular. sta es la forma ms minucin de esta enzima genera la reduccin de la con
grave del sndrome resistente a andrgenos, que produce centracin de testosterona. El desarrollo fsico es similar al
falta de accin de la testosterona en el tejido blanco. Como fenotipo femenino hasta la pubertad, momento en que la
resultado de la ausencia del efecto de la testosterona, el actividad residual de la 5a-reductasa convierte suficiente
desarrollo fsico sigue el fenotipo femenino, con pechos testosterona a dihidrotestosterona, lo que da como resul
desarrollados por completo, y distribucin femenina de tado el desarrollo del fenotipo masculino.
grasa y vello. La mayora de los pacientes se presentan para Distrofia m iotnica. La distrofia miotnica es un tras
la evaluacin de amenorrea primaria; en ese momento, la torno hereditario predominantemente autosmico que se
440 PARTE III VALORACIN DE LAS FUNCIONES DEL SISTEMA ORGNICO
ES T U D IO D E C A S O 19-4
Laboratorio
Testosterona, total 115 ng/dl (normal, 30 0 a 1 0 0 0 )
LH 42 mU/ml (normal,adulto, 3-18)
Cario tipo 47, XXY
presenta con hipogonadismo, debilidad muscular, calvicie trastorno .46,47 Ciertos pacientes padecen ceguera al color
frontal, diabetes y distona muscular. La insuficiencia tes rojo-verdoso, sordera congnita o disfuncin cerebelar.
ticular aparece en la cuarta dcada. Hiperprolactinem ia. La elevacin de la prolactina ori
Lesin testicular e infeccin. La orquitis de paperas ocu ginada por cualquier causa (inducida por frmacos o
rre en la infeccin de paperas pospuberal. La orquitis viral tumores productores de prolactina de la hipfisis) llega a
tambin se observa en algunos pacientes. Adems, se des ocasionar hipogonadismo hipogonadotrpico .48,49
cribe que la infeccin por VIH destruye los testculos. La Edad. Existe reduccin gradual de la testosterona des
radiacin y la quimioterapia para cncer tambin daan pus de los 30 aos de edad, con una declinacin prome
los testculos. dio de alrededor de 110 ng/dl cada dcada. En el Baltim ore
Sndrome de slo clulas de Sertoli. Este trastorno se Longitudinal Study o f Aging se encontr reduccin de las
caracteriza por falta de clulas germinales. Los pacientes concentraciones de testosterona total de 19% a los 60 aos,
se presentan con testculos pequeos, concentraciones de 28% a los 70 aos y de 49% a los 80 aos ,30,31 con valo
elevadas de FSH, azoospermia y valores normales de tes res de testosterona libre mucho menores en esos pacientes.
tosterona. La biopsia testicular constituye el nico proce Adems, la edad se relaciona con la elevacin de SHBG en
dimiento para confirmar este diagnstico. alrededor de 1% por ao. Los valores de testosterona total
tal vez sean normales en hombres de edad avanzada, pero
H ipogonadism o hipogonadotrpico las concentraciones libres (no unidas) de testosterona son
El sello distintivo de este grupo de trastornos es la ocu indicadores ms confiables de la reduccin bioqumica.
rrencia de concentraciones bajas de testosterona, ju n to Las caractersticas relacionadas con la reduccin del creci
con valores bajos o normales inapropiados de FSH u miento de vello sexual secundario, la prdida del volumen
LH. y la fuerza musculares y la prdida de densidad sea consti
Sndrome de Kallmann. El sndrome se origina por un tuyen evidencia corroborativa que indica la falta de efectos
rasgo recesivo hereditario vinculado a X que se manifiesta tisulares de la testosterona. La deficiencia de la testosterona
como hipogonadismo durante la pubertad. La frecuencia abarca una constelacin de caractersticas clnicas de hipo
de este sndrome es de 1 por cada 1 0 0 0 0 hombres. Los gonadismo combinado con concentraciones bajas de tes
defectos relacionados, como la anosmia (ausencia de sen tosterona srica. La combinacin de evidencia bioqumica
tido del olfato) y defectos de la lnea media (labio y pala y clnica de testosterona debe indicar la consideracin del
dar hendidos), deben indicar al mdico la sospecha de este reemplazo de testosterona en hombres mayores.
CAPTULO 19 FUNCIN GONADAL 441
E nferm edad hipofisaria. El hipogonadismo adquirido tal edad avanzada a menudo presentan disfuncin secundaria
vez sea secundario a una lesin en la hipfisis como resul o terciaria (hipotalmica) como resultado de la reduccin
tado de tumores, traumatismo quirrgico, lesin vascular, de la frecuencia hipotalmica del generador del pulso, lo
hipfisitis autoinmunitaria o enfermedad granulomatosa que produce concentraciones bajas o normales de manera
o metastsica. Adems, la hemocromatosis es una causa inapropiada de FSH y LH. Los signos y sntomas clnicos
rara de la disfuncin hipofisaria. (p. ej., prdida de las caractersticas sexuales secundarias,
osteoporosis) del hipogonadismo se corroborarn con
valores bajos de testosterona, en particular cuando se con
D iagnstico del hipogonadism o
temple la terapia de reemplazo de testosterona.
Se deben cumplir tanto las caractersticas clnicas como
las bioqumicas (fig. 19-2). Las concentraciones de tes Terapia de reem plazo de testosterona
tosterona tienen un ritmo circadiano y es necesario tomar
Las siguientes formas de administracin estn disponibles
en cuenta el momento del muestreo. Se obtendrn varias
para uso clnico en Estados Unidos:
estimaciones de las concentraciones de testosterona libre
y unida en diferentes das antes de realizar el diagnstico 1. Testosterona parenteral. ste es el modo de adminis
de hipogonadismo .52 La distincin entre primario (enfer tracin ms disponible y rentable (en particular si se
medad o destruccin de los testculos) contra secundario aplica por la esposa o pareja). Los steres de cipionato
(enfermedad o destruccin de la hipfisis) es relativamente y enantato de testosterona estn disponibles por inyec
fcil de establecer. Los valores de FSH u LH, o ambas, son cin intramuscular. El valor mximo se logra en 72 h,
elevados en el hipogonadismo primario y son normales de con una duracin del efecto por un perodo de una a
manera inapropiada o bajos con etiologa secundaria. En dos semanas. Cuando la administracin semanal pro
individuos jvenes, se llevar a cabo IRM hipofisaria en porciona un valor mximo menor o fluctuacin en la
presencia de hipogonadismo secundario. Las personas de concentracin de testosterona entre rangos normales,
Caractersticas de
semen defectuoso
Medicin de
testosterona
Testosterona PRL
disminuida normal
Medicin Medicin
de FSH, LH de FSH, LH
Deficiencia Deficiencia
hipotalmica de la hipfisis
la dosis habitual es de 50 a 100 mg cada semana o 200 complicaciones hepticas potenciales. Se han descrito
a 250 mg una vez cada dos semanas. La dosis de la tes anormalidades de la funcin heptica, formacin de
tosterona se basar en la masa corporal magra, no en adenoma y desarrollo de quistes hemorrgicos en el
el peso corporal. Esto se logra a menudo al adminis hgado. Una preparacin particular disponible en Euro
trar una dosis estndar de testosterona, con aumentos de pa, el ster undecenoato de testosterona, se absorbe
dosis menores basados en el punto medio estimado de los dentro de la circulacin linftica, desviando de forma
valores de testosterona srica entre dos inyecciones. El directa la circulacin portal heptica.
objetivo es mantener este punto medio en el nivel de
Las complicaciones del reemplazo de testosterona son
los rangos normales del anlisis que se est utilizando.
las siguientes:
2. Terapia de testosterona transdrmica. Este modo de
adm inistracin proporciona ms valores fisiolgicos Policitemia.
de testosterona. El parche tiene permeabilidad reforzada Agrandamiento de la prstata.
para ayudar en la absorcin de la testosterona a tra Posible efecto promotor del crecimiento en cncer pre
vs de la piel normal. La posible irritacin de la piel a existente de prstata no diagnosticado.
menudo limita su uso. Empeoramiento de la apnea del sueo.
3. Parche escrotal. La piel escrotal es delgada y absorbe Edema perifrico.
testosterona con facilidad. Este modo de administra
cin conduce a concentraciones elevadas de dihidro-
M onitoreo de la terapia de reem plazo
testosterona como resultado de la conversin mediada
de testosterona
por 5a-reductasa, en la que la piel escrotal es rica. sta
debe afeitarse segn se requiera para contribuir a la El antgeno especfico de la prstata (AEP), el recuen
adhesin del parche, que es en lo que tal vez ciertos to sanguneo y las concentraciones lipdicas se vigilarn
pacientes no estn de acuerdo. Los pacientes con sn durante tres a seis meses despus del reemplazo de tes
drome de Klinefelter con frecuencia presentan un saco tosterona. La evaluacin clnica de edema de la pierna,
escrotal desarrollado de manera deficiente que no es lo empeoramiento de la apnea del sueo y agrandamiento
bastante grande para ajustarse al tamao del parche. de la prstata tambin se recomienda de manera rutinaria.
4. Testosterona en gel. sta preparacin de gel hidroal- Adems, el uso farmacolgico de la testosterona reducir
cohlico se aplica a la piel no genital una vez al da. La la cifra de espermatozoides al disminuir la concentracin
absorcin es gradual y proporciona una concentracin de la testosterona intracelular que es varias veces mayor
sangunea de testosterona en el rango normal por 24 que la concentracin srica. Si se observa elevacin del
h. La preocupacin principal con esta preparacin es AEP despus del reemplazo de la testosterona, se reco
la posible transmisin a parejas femeninas o nios en mienda la evaluacin de la prstata con posible biopsia. El
contacto estrecho con la piel. cncer de prstata activo constituye una contraindicacin
5. Preparaciones orales. En la actualidad, el uso de este para el reemplazo de la testosterona.
modo de administracin se desalienta debido a las
P R E G U N T A S DE R E P A S O
1. Si los valores sricos de estradiol no aumentan des 3. Cul de los siguientes es el precursor de la formacin
pus de la inyeccin de gonadotropina corinica de estradiol en la placenta?
humana, el paciente padece: a ) Testosterona maternal.
a) Deficiencia hipofisaria. b) Progesterona maternal.
b) Deficiencia ovrica primaria. c) hCG placentaria.
c) Deficiencia ovrica terciaria. d) Colesterol suprarrenal fetal.
d) Deficiencia ovrica secundaria. e) DHEAS suprarrenal fetal.
2. Si un paciente presenta un defecto de la fase ltea, 4. Cul de los siguientes tejidos blanco es incapaz de
cul hormona es ms probable que sea deficiente? producir hormonas esteroideas?
a) Estrgeno. a) Placenta.
b) hCG. b) Ovario.
c) FSH. c) Testculo.
d) Prolactina. d) Corteza suprarrenal.
e) Progesterona. e) Mdula suprarrenal.
CAPTULO 19 FUNCIN GONADAL 443
5. La sustancia madre en la biosntesis de andrgenos y 8. Cul de las siguientes se secreta por la placenta y se
estrgenos es: utiliza para la deteccin temprana del embarazo?
a) Cortisol. a) Hormona foliculoestimulante (FSH).
b) Catecolaminas. b ) Gonadotropina corinica humana (hCG).
c) Progesterona. c) Hormona luteinizante (LH).
d) Colesterol. d) Progesterona.
6. El andrgeno natural con mayor actividad biolgica 9. El dolor metablico fetal crnico est demostrado por:
es: a) Disminucin del estrgeno en el plasma materno
a) Androstenediona. y aumento del lquido amnitico de estriol.
b) Dehidroepiandrosterona. b) Aumento de estradiol en el plasma materno, con
c) Epiandrosterona. incremento correspondiente de estriol en el liqui
d) Testosterona. do amnitico.
c) Incremento de la excrecin de estriol urinario y
7. Durante las ltimas tres semanas, las concentraciones
aumento del estradiol srico materno.
de estradiol srico de una m ujer embarazada aumen
d) Disminucin de la excrecin de estriol urinario y
taron de manera constante. Esto es consistente con:
disminucin del estriol srico materno.
a) Un embarazo normal.
b) Enfermedad hemoltica del recin nacido. 10. La secrecin de andrgeno por los testculos es esti
c) Muerte fetal. mulada por:
d) Infeccin de citomegalovirus congnita. a) Hormona luteinizante (LH).
b) Hormona foliculoestimulante (FSH).
c) Testosterona.
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CAPITULO
Funcin de la
glndula tiroides
Daniel H. Knodel 20
C O N T E N I D O D E L C A P T U L O
O B J E T I V O S
445
446 PARTE III VALORACIN DE LAS FUNCIONES DEL SISTEMA ORGNICO
Tirogiobulina
nn
- w
T4
#
FIGURA 20-1. Biosntesis de la hormona tiroidea. La sntesis de la hormona tiroidea incluye los siguientes pasos: (1)
yodo (I-) atrapado por clulas foliculares; (2) difusin de yodo al pice de la clula y transporte en el coloide; (3) oxida
cin del yodo inorgnico a yodo e incorporacin de yodo en los residuos de tiroxina dentro de molculas de tiroglobu-
lina en el coloide; (4) combinacin de dos molculas de diyodotiroxina (DIT) para formar tetrayodotironina (tiroxina, T4),
o de monoyodotiroxina (MIT) con DIT para formar triyodotironina (T3); (5) captacin de tirogiobulina a partir del coloide
en la clula folicular por endocitosis, fusin de la tirogiobulina con un lisosoma y protelisis y liberacin de T4 y T3; (6)
liberacin de T4 y T3 en la circulacin.
la contribucin ms grande al depsito circulante de T 3 proporciona otro nivel de control en la actividad de la hor
Ciertos frmacos (p. ej., propiltiouracil, glucocorticoides mona tiroidea distinto al control hipotalmico-hipofisario
y propranolol) llegan a retardar la actividad de esta deyo- por medio de la TRH y TSH (fig. 2 0 -2 ).1
dinasa y se utilizan en el tratamiento de hipertiroidismo
grave. El tipo 2,5'-deyodinasa se encuentra en el cere Unin proteica de la horm ona tiroidea
bro y la hipfisis. Su funcin es mantener constantes las
concentraciones de T 3 en el sistema nervioso central. Su Cuando se libera en la circulacin, slo 0.04% de la T 4 y
actividad disminuye cuando los valores circulantes de T+ 0.4% de la T 3 no se unen a protenas y estn disponibles
son elevados y se incrementa cuando las concentraciones para la actividad hormonal. Las tres principales prote
son bajas. La actividad de las enzimas de deyodinacin nas de unin son, en orden de importancia, la globulina
Hormona tiroidea
Tiroxina (T4)
Monodeyodinasa
\ - \ j \ NH2 / \ / \ NHp
0H \\ / )0 Y. 0H /) \ \ / CH2_CH
} / 7 COOH I I COOH
se utilizan de manera rutinaria para vigilar y ajustar la tera lina. Incluso con anlisis modernos, los autoanticuerpos
pia de reemplazo de la hormona tiroidea, as como para valo antitiroglobulina conducen a resultados de tirogiobulina
rar hipertiroidismo e hipotiroidismo.4 Nuestra confianza en poco confiables. Por esta razn, resulta de importancia cr
estas pruebas dio lugar a un aumento de nuevos diagnsti tica la valoracin de anticuerpos siempre que se mida la
cos ante grados leves de disfuncin tiroidea, a lo que se le tirogiobulina. Si estn presentes anticuerpos, el valor del
denomina enfermedad subclnica. En el hipotiroidismo su bd anlisis de tirogiobulina es marginal. Alrededor de 25% de
nico, la TSH muestra una elevacin mnima, en tanto la T 4 es los pacientes con cncer tiroideo bien establecido presenta
normal. En el hipertiroidismo subdnico, la TSH se suprime, rn autoanticuerpos antitiroglobulina. Esto es alrededor de
en tanto la T 4 es normal. El valor del anlisis de TSH se basa dos veces ms elevado que en la poblacin general. Cuan
en el hecho de que pequeos cambios en las concentracio do a un paciente con cncer tiroideo bien diferenciado y
nes de T 4 libre (a menudo dentro del rango normal) inducen autoanticuerpos antitiroglobulina se le trata de manera exi
un importante cambio recproco en la cifra de TSH .5 tosa con ciruga y ablacin con yodo radioactivo, se espera
que los autoanticuerpos desaparezcan con el tiempo .4
T 4 y T3 sricos
Por lo general, los valores sricos totales de T4y T3son por A utoinm unidad d e la tiroides
radioinmunoanlisis (RIA), anlisis quimioluminomtrico o Muchas enfermedades de la glndula tiroides se relacionan
tcnica inmunomtrica similar. Debido a que ms de 99.9% con procesos autoinmunitarios. En la enfermedad de la
de la hormona tiroidea se une a protena, las alteraciones en tiroides autoinmunitaria, los anticuerpos se dirigen al tejido
las protenas de unin a la hormona tiroidea, sin relacin con tiroideo con respuestas variables. La causa ms frecuente de
la enfermedad tiroidea, a menudo conducen a valores de T 3 hipertiroidismo es una enfermedad autoinmunitaria deno
total y T 4totales fuera del rango normal. Por esta razn, se rea minada enfermedad de Graves. El anticuerpo de este trastor
lizan esfuerzos para desarrollar anlisis que midan la T 4 y T 3 no se dirige al receptor de TSH y estimula al receptor, lo que
libres, las formas con actividad biolgica de la hormona tiroi origina el crecimiento de la glndula tiroides y la produccin
dea.6 Por desgracia, los equipos disponibles en la actualidad de cantidades excesivas de hormona tiroidea. Es posible diag
tienen limitaciones en la medicin de las concentraciones de nosticar esta afeccin con pruebas que detectan anticuerpos
T 4 libre. Es decir, muestran dificultad para proporcionar valo en el receptor de la TSH. En los anticuerpos estimuladores
res precisos de T 4 libre a travs de todas las anormalidades de de la tiroides (TSAb, TSI) se utiliza un bioanlisis para deter
protenas de unin conocidas.7 A pesar de estas desventajas, minar la presencia de hipertiroidismo autoinmunitario. Las
los equipos de T 4 libre reemplazaron las determinaciones de pruebas para los anticuerpos del receptor de la TSH (TRAb,
T. total en el mbito clnico, debido a su facilidad de inter- TSHR-Ab) detectan el anticuerpo del receptor de la TSH sea
pretacin y menor costo de procesamiento. Sin embargo, los que acten para estimular o bloquear el receptor de la TSH.
equipos que sirven para calcular las concentraciones de T 3 Ambos tipos de anlisis con anticuerpos sern positivos en
libre tambin cuentan con desventajas tericas puesto que su 70 a 100% de los pacientes con enfermedad de Graves. La
utilidad clnica an est por definirse con claridad. tiroiditis linfoctica crnica se encuentra en el otro extre
mo del proceso autoinmunitario. Se trata de la causa ms
Tirogiobulina frecuente de hipotiroidismo en el mundo desarrollado. En
La tirogiobulina es sintetizada y secretada de manera exclu este trastorno, los anticuerpos propician el descenso de la
siva por las clulas foliculares tiroideas. Esta prohormona en produccin de la hormona tiroidea por la glndula tiroides.
la circulacin demuestra la presencia de tejido tiroideo resi La mejor prueba para esta afeccin es el anticuerpo de la
dual, sea benigno o maligno. Este hecho hace que la tirog- peroxidasa tiroidea, que se encuentra presente en 10 a 15%
lobulina sea un indicador ideal de tumor para pacientes con de la poblacin general, y en 80 a 99% de los pacientes con
cncer de la tiroides. Los pacientes con cncer de la tiroides hipotiroidismo autoinmunitario (cuadro 20- 1).
bien establecido, que recibieron tratamiento de manera exi
tosa con ciruga y ablacin con yodo radiactivo, tal vez pre OTROS INSTRUMENTOS PARA LA
senten concentraciones indetectables de tirogiobulina. EVALUACION DE LA TIROIDES
En la actualidad, la tirogiobulina se mide por mtodos de
radioinmunoanlisis (RIA) de doble anticuerpo, inmunoa-
Evaluacin por m edicina nuclear
nlisis ligado a enzimas (ELISA, por sus siglas en ingls), El yodo radiactivo es til en la evaluacin de la actividad
anlisis inmunorradiomtrico (IRMA, por sus siglas en metablica del tejido de la tiroides y contribuye a la evalua
ingls) y anlisis inmunoquimioluminiscente (ICMA, por cin y el tratamiento del cncer de la tiroides. Cuando el yodo
sus siglas en ingls). La precisin del anlisis de tirogiobu radiactivo se administra de manera oral, la glndula tiroides
lina depende sobre todo de la especificidad del anticuerpo capta un porcentaje de la dosis. A este porcentaje se le deno
utilizado y la ausencia de autoanticuerpos antitiroglobu- mina captacin de yodo radiactivo (CYRA). La captacin ele
vada sugiere que la glndula presenta actividad metablica y por una concentracin baja de T 4 libre (en hipotiroidismo
produce cantidades importantes de hormona tiroidea. La cap primario o central) o TSH elevada (en hipotiroidismo pri
tacin baja sugiere que la glndula tiene inactividad metab m ario), o ambas. Los sntomas de hipotiroidismo varan,
lica. Debido a que la TSH estimula la captacin de yodo por lo que depende del grado de hipotiroidismo y de la velo
la glndula tiroides, es importante interpretar la tomografa cidad de su desarrollo (cuadro 2 0-2). Cuando la hormona
en conjuncin con esta prueba de la funcin de la tiroides. tiroidea disminuye en gran medida, se informan sntomas
Una TSH indetectable debe suprimir la captacin de yodo de intolerancia al fro, fatiga, piel seca, estreimiento,
por parte de la glndula tiroides. Cuando la captacin es ele ronquera, disnea en el ejercicio, disfuncin cognoscitiva,
vada, con una TSH indetectable, la tiroides acta de manera prdida de cabello y aumento de peso. En el examen fsi
autnoma (sin tomar en cuenta el sistema de retroalimenta co, es posible que los pacientes con hipotiroidismo grave
cin habitual) o a travs de un sustituto de la TSH. En el caso presenten temperatura corporal baja, movimientos lentos,
de la enfermedad de Graves, una inmunoglobulina activa el bradicardia, retraso en la fase de relajacin de los refle
receptor de la TSH sobre la glndula tiroides, lo que conduce jo s del tendn profundo, decoloracin amarilla de la piel
a ndices elevados de produccin de la hormona tiroidea y (debido a la hipercarotenemia), prdida de cabello, hiper
CYRA elevada. La concentracin alta de hormona tiroidea en tensin diastlica, efusiones pleurales y pericrdicas, irre
la circulacin se retroalimenta en la hipfisis y el hipotlamo, gularidades menstruales e hinchazn periorbital.
lo que suprime la TSH. Por desgracia, esto no tiene efecto El hipotiroidismo conduce a varias anormalidades. En
en la inmunoglobulina estimulante de la tiroides (sustituto presencia de concentraciones inapropiadas de hormona
de la TSH). Si la TSH es indetectable con captacin baja de antidiurtica, tal vez ocasione hiponatremia .9 Adems,
yodo radiactivo, el diagnostico diferencial incluye ingestin el hipotiroidismo importante llega a producir miopata y
oral excesiva de hormona tiroidea, consumo elevado de yodo cifras elevadas de creatina fosfocinasa (CPK ).10 Tambin se
o un trastorno en el que la hormona tiroidea almacenada se observa anemia en el hipotiroidismo .11 La etiologa de la
est fugando de la glndula tiroides (por lo general a partir de anemia es resultado de la demanda mas baja en la capa
una causa de tiroiditis subaguda). cidad de transporte de oxgeno o bien a travs de anemia
El yodo radiactivo es til, tambin, en la evaluacin de perniciosa autoinmunitaria asociada. Asimismo, es posible
los nodulos tiroideos seleccionados. Es poco probable que los que el hipotiroidismo conduzca a hiperlipidemia ,12en espe
nodulos de la tiroides que captan cantidades importantes cial cuando la TSH es mayor a 10 mU/L. En un estudio se
de yodo radiactivo en las tomografas de la tiroides (nodu document que el 4.2% de los pacientes con hiperlipidemia
los calientes) representen cncer tiroideo. Por desgracia, lo padeca hipotiroidismo .13 En otro estudio se inform que
opuesto no contiene la verdad. La mayor parte de los nodu ms de la mitad de los pacientes con hipotiroidismo pade-
los tiroideos son fros o indeterminados en la tomografa de
la tiroides e incluso la mayor parte son benignos.
CUADRO 20-2. SNTOMAS Y SIGNOS DEL
Ultrasonido de la tiroides HIPOTIROIDISMO
Los ultrasonidos de la tiroides se volvieron ms impor
SNTOMAS SIGNOS
tantes en las valoraciones de la anatoma de la tiroides
y en la determinacin de las caractersticas de cualquier Intolerancia al fro Movimientos y lenguaje lentos
anormalidad palpable de la tiroides. Los ultrasonidos de la
Disnea en el ejercicio Retraso en la relajacin de los
tiroides sirven para detectar pequeos nodulos tiroideos,
reflejos del tendn
a menudo sin importancia desde el punto de vista clni
co. En hasta 50% de las glndulas tiroideas normales, se Aum ento de peso Bradicardia
observan nodulos tiroideos pequeos (<1 cm). Disfuncin cognoscitiva Carotenemia
Retardo mental Piel tosca
Aspiracin con aguja fina (nios)
La biopsia de la tiroides por aspiracin con aguja fina (AAF) Estreimiento Cara hinchada y prdida
a menudo constituye el primer paso y es el instrumento de cejas
ms preciso en la evaluacin de los nodulos tiroides. El uso Falta de crecimiento Edema periorbital
rutinario de la biopsia por AAF permite la identificacin y Piel seca Agrandam iento de la lengua
el tratamiento oportunos de malignidades tiroideas y evita
Ronquera Hipertensin diastlica
cirugas innecesarias en la mayora de los pacientes con
lesiones benignas de la tiroides. En este procedimiento, se Edema Efusiones pleurales y
coloca a los pacientes agujas de calibre pequeo insertadas pericrdicas
en los nodulos, en tanto las clulas se aspiran para evalua Mialgia y Ascitis
cin citolgica. parestesia
Depresin Galactorrea
TRASTORNOS DE LA TIROIDES
Menorragia
Hipotiroidism o Artralgia
Una de las enfermedades ms frecuentes de la glndula
Retraso puberal
tiroides es el hipotiroidismo. Este trastorno se diagnostica
CAPTULO 20 FUNCIN DE LA GLNDULA TIROIDES 451
Primaria Tiroiditis linfoctica crnica TPOAb o TgAb son positivos en 80 a 99% de los
pacientes
Tiroides de yodo radiactivo para Los antecedentes son clave para el diagnstico
bocio txico
Tiroidectoma subtotal para bocio txico Los antecedentes y el examen fsico (cicatriz del
cuello) son claves para el diagnstico
Ingesta excesiva de yodo Los antecedentes y el yodo urinario son
tiles para el diagnstico
Tiroiditis subaguda (con dolor, sin El hipotiroidismo por lo general es transitorio
dolor o posparto)
Secundaria Hipopituitarismo Causado por adenoma hipofisario, terapia de radia
cin hipofisaria o destruccin hipofisaria.
Terciaria Disfuncin hipotalmica Raro
452 PARTE III VALORACIN DE LAS FUNCIONES DEL SISTEMA ORGNICO
los ojos relacionados con inflamacin e infiltracin del sibles, como la tomografa por computadora (TC) orbital o
tejido periorbital) y dermopata (cambios en la piel en las las imgenes de resonancia magntica (IRM), la mayora de
extremidades inferiores que tienen una textura de csca los pacientes con hipertiroidismo de Graves tienen oftalmo
ra de naranja). Existe una fuerte disposicin familiar para pata .17 Entre los hallazgos de la oftalmopata de Graves se
la enfermedad de Graves: 15% de los pacientes tendr un encuentran inflamacin de tejido blando orbital, inyeccin
pariente cercano con este trastorno. Es cinco veces ms de la conjuntiva, proptosis (protrusin frontal del ojo, secun
probable que las mujeres desarrollen este trastorno que los daria a la infiltracin de msculos y grasa retroorbitales),
hombres. Por lo general, en las pruebas de laboratorio se visin doble (secundaria a la afeccin del msculo orbital y
documentar una concentracin elevada de T 4 y T 3libres, fibrosis) y enfermedad de la crnea (a menudo relacionada
asi como TSH indetectable. Los anticuerpos receptores con dificultad para cerrar los prpados). El tratamiento de
de TSI y TSH suelen se positivos en esta enfermedad. La la oftalmopata de Graves es controversial. En ocasiones, los
CYRA ser elevada, en tanto la tomografa de la tiroides pacientes requieren descompresin quirrgica de las rbitas
mostrar captacin difusa (cuadro 20-5). para prevenir dao al nervio ptico y ceguera.
La oftalmopata de Graves tal vez resulte bastante proble La enfermedad de la tiroides relacionada con enfermedad
mtica .16 Alrededor de 20 a 25% de los pacientes con hiper- de Graves es tratada con medicamentos, yodo radiactivo o
tiroidismo de Graves presentan oftalmopata de Graves ciruga. Al principio, la mayora de los pacientes tirotxicos
obvia desde el punto de vista clnico. Con pruebas ms sen reciben tratamiento con (3-bloqueadores para controlar los
sntomas del exceso adrenrgico, como temblor y taquicar
ES T U D IO D E C A S O 20-2 dia. Es posible agregar propiltiouracilo (PTU) o metimazol
(MMI) para inhibir la biosntesis y secrecin de la hormona
tiroidea .18 Adems, estos medicamentos presentan efectos
A una mujer de 67 aos de edad se le prescribe trata
inmunomodulatorios en la enfermedad autoinmunitaria
miento para hiperlipidemia. Su colesterol y triglicridos
subyacente, lo que ayuda a promover la remisin del tras
son elevados, a pesar del tratamiento con medicamen
torno despus de varios meses de terapia. En Estados Uni
tos reductores de lpidos. Se observa que padece prdi
dos, los ndices de remisin a largo plazo varan, pero por
da de cabello (porta una peluca) y ronquera en su voz.
lo general se encuentran entre 20 y 50%. Al parecer es ms
Se queja de intolerancia al fro y fatiga.
probable que se logre remisin en mujeres que en hom
bres. Del mismo modo, los pacientes con bocios pequeos
Preguntas e hipertiroidismo leve tienen ms probabilidad de lograr
1. Qu estudio sera til para valorar la enferme la remisin. El yodo diettico bajo aumenta la posibilidad
dad tiroidea? de permanencia de la remisin a largo plazo. Los pacientes
que experimentan dicha remisin no requieren terapia con
2. Qu tratamiento recomendara? reemplazo de la hormona tiroidea.
3. Qu otras anormalidades de laboratorio son fre Cuando se utiliza yodo radiactivo o ciruga, el objetivo
cuentes en pacientes con hipotiroidismo, adems es destruir o eliminar suficiente tejido tiroideo para que el
de hiperlipidemia y pruebas de funcin tiroidea paciente se vuelva hipotiroideo. Por lo general se requiere
anormal? tratamiento subsiguiente de por vida con terapia de reem
plazo de la hormona tiroidea. La terapia con yodo radiac
CAPTULO 20 FUNCIN DE LA GLNDULA TIROIDES 453
tivo se ha utilizado para el tratamiento de la enfermedad la tiroides, los nodulos son calientes, es decir, captan yodo
de Graves durante ms de 50 aos, y suele ser segura y radiactivo con avidez. Adems, la captacin de yodo radiac
efectiva. La ciruga est relacionada con riesgo de lesin tivo es elevada de manera inapropiada para el nivel suprimi
del nervio larngeo recurrente, lo que ocasiona ronquera do de la TSH. En bocios multinodulares txicos, hay varias
permanente o lesin a las glndulas paratiroides, o ambas, reas dentro de la glndula tiroides que producen de manera
con lo que se origina hipocalcemia secundaria a hipopa autnoma hormona tiroidea. El tratamiento para estos dos
ratiroidismo. Existen dos situaciones en la enfermedad de trastornos incluye ciruga, yodo radiactivo o medicamen
Graves en las que se prefiere la ciruga sobre otras formas tos (MMI o PTU). Aunque es posible que los medicamen
de terapia. Si hay preocupacin de que el paciente padezca tos bloqueen la produccin de hormona tiroidea en estos
cncer tiroideo adems de enfermedad de Graves, la ciru pacientes, no se espera que conduzcan a la remisin de estos
ga constituye la mejor manera de asegurar la eliminacin dos trastornos. A menudo, los nodulos txicos producen
del cncer potencial. En pacientes con oftalmopata grave, tanta hormona tiroidea que el resto de la glndula tiroidea
algunos expertos en el control de la enfermedad de Gra est suprimida e inactiva desde el punto de vista metablico.
ves prefieren la ciruga debido a la preocupacin de que el Cuando se administra yodo radiactivo, ste tiende a destruir
tratamiento con yodo radiactivo cause un destello agudo slo las porciones hiperactivas (autnomas) de la glndula
relacionado con problemas del ojo. tiroidea, lo que deja sin dao el tejido tiroideo normal (supri
mido). Los pacientes que reciben este tipo de tratamiento a
A denom as txicos y bocios m ultinodulares menudo quedan con funcin normal de la tiroides sin nece
sidad de terapia de reemplazo de la hormona tiroidea.
Los adenomas txicos y bocios multinodulares son dos cau
sas relativamente frecuentes de hipertiroidismo. Estos tras
DISFUNCIN DE LA TIROIDES INDUCIDA
tornos se originan por tejido tiroideo de funcin autnoma.
No se requieren TSH ni inmunoglobulina estimulante del POR FRM ACOS
receptor de TSH para estimular la produccin de la hor Enferm edad de la tiroides inducida
mona tiroidea. En algunos nodulos txicos, se identifican
por am iodarona
mutaciones. Estas mutaciones tienen el mismo efecto que
la estimulacin crnica del receptor de la TSH en la produc Varios frmacos, como el PTU y metimazol, afectan la fun
cin de la hormona tiroidea. Desde el punto de vista clnico, cin tiroidea. La amiodarona, utilizada para tratar arritmias
en pacientes con hipertiroidismo estn presentes adenomas cardacas, es uno de estos frmacos .19 Es soluble en grasa y,
txicos y un nodulo tiroideo palpable. En la tomografa de por tanto, tiene una larga vida media (50 das) en el cuerpo.
454 PARTE III VALORACIN DE LAS FUNCIONES DEL SISTEMA ORGNICO
El hecho de que 37% del peso molecular de la amiodaro- en pruebas de la funcin de la tiroides (com o ya se ana
na sea yodo explica una parte importante de la disfuncin liz). Se piensa que las infecciones virales desencadenan
tiroidea observada. El yodo, cuando se administra en dosis este trastorno. Por lo general, los anticuerpos POT estn
grandes, conduce de manera sutil a la inhibicin de la ausentes; el ndice de sedimentacin eritrocita y las con
produccin de la hormona tiroidea. A esto se le denomi centraciones de tiroglobulina a menudo son elevadas.
na efecto de Wolff-Chaikoff. La amiodarona tambin blo
quea la conversin de T+ a T 3 La combinacin de estas dos ENFERM EDAD NO TIROIDEA
acciones produce hipotiroidismo en 8 a 20% de los pacien
tes en terapia crnica. Adems, la amiodarona origina Los pacientes hospitalizados, en especial aquellos con
hipertiroidismo en 3% de los pacientes tratados de manera enfermedad crtica, a menudo presentan anormalidades
crnica con esta medicacin. Ciertos pacientes desarrollan en sus pruebas de la funcin tiroidea. Por lo general, el
hipertiroidismo a medida que eluden el efecto de Wolff- patrn de laboratorio consta de T , FT 4 y (algunas veces)
Chaikoff y utilizan el exceso de yodo para la produccin de TSH bajas. Debido a que la enfermedad disminuye la acti
la glndula tiroides. Otros desarrollan hipertiroidismo si la vidad de la 5'-monodeyodinasa, se convierte menos T 4 a
medicacin conduce a inflamacin de la glndula tiroides T 3 activa. Esto conduce a reduccin de las concentracio
(tiroiditis subaguda) y prdida subsiguiente de la hormona nes de T 3 y mayores valores de T 3 inversa. Al parecer tam
tiroidea almacenada en la circulacin. bin hay un elemento de hipotiroidismo central y cambios
de unin de la hormona tiroidea relacionados con enfer
medad grave. Se cree que muchos de estos cambios son
Tiroiditis subaguda una adaptacin apropiada a la enfermedad, y la terapia de
reemplazo de la hormona tiroidea no est indicada.
Varios trastornos ocasionan cambios transitorios en las
concentraciones de la hormona tiroidea .20Estos trastornos
estn relacionados con inflamacin de la glndula tiroides, NODULOS TORO IDEOS
prdida de la hormona tiroidea almacenada y reparacin Los nodulos tiroideos son comunes. En clnica, los nodu
posterior de la glndula. Aunque la nomenclatura vara los tiroideos evidentes estn presentes en 6.4% de m uje
entre autores, donde algunos agrupan juntas a la tiroiditis res adultas y en 1.5% de hombres adultos, de acuerdo con
posparto, no dolorosa y dolorosa como formas de tiroidi los datos de Framingham .23 Con el ultrasonido tiroideo
tis subaguda, se trata de uno de los esquemas de clasifica se localizan nodulos tiroideos insospechados en 20 a 45%
cin ms sencillos. Estos trastornos a menudo se vinculan de las mujeres, y 17 a 25% de los hombres .24 La princi
con una fase tirotxica cuando se pierde hormona tiroidea de pal preocupacin con los nodulos tiroideos es que tal vez
la circulacin, con una fase hipotiroidea cuando la glndula representan un cncer tiroideo. Por fortuna, slo en 5 a
tiroides se repara por s misma y con una fase eutiroidea cuan 9% de los nodulos tiroideos se demuestra que se trata de
do la glndula es reparada. Estas fases llegan a durar de cncer tiroideo. La aspiracin con aguja fina (AAF) de
semanas a meses. estos nodulos, con examen citolgico del aspirado, se ha
La tiroiditis posparto es la forma ms frecuente de tiroi vuelto una prctica rutinaria para ayudar a diferenciar los
ditis subcutnea. Ocurre en 3 a 16% de las mujeres pos nodulos que requieren extirpacin quirrgica de aquellos
parto .21 Se relaciona en gran medida con los anticuerpos que no la necesitan .23
POT y la tiroiditis linfoctica crnica. Los pacientes quiz
experimenten tirotoxicosis seguida por hipotiroidismo o
RESUMEN
slo hipotiroidismo o hipertiroidismo. Por lo general, las
concentraciones de hormona tiroidea regresan a lo nor La glndula tiroides es responsable de la produccin de
mal despus de varios meses; sin embargo, durante cuatro la hormona tiroidea. Se producen dos tipos de hormonas
aos despus del parto, 25 a 50% de las pacientes presenta tiroideas con actividad metablica: la T 4 y Ty La mayor
hipotiroidismo persistente o bocio, o ambos .22 Durante la parte de la T 4 liberada por la glndula tiroides se con
fase tirotxica, es posible utilizar (3-bloqueadores si es que vierte en la periferia a T 3 con actividad metablica. Estas
el tratamiento es necesario. Durante la fase hipotiroidea, hormonas son crticas en la regulacin del metabolismo
se puede administrar la terapia de reemplazo de la hor corporal, el desarrollo neurolgico y otras numerosas
mona tiroidea, por lo general durante tres a seis meses, funciones corporales. La deficiencia de la hormona tiroi
a menos que evolucione el hipotiroidismo permanente. dea es frecuente, y por lo general se diagnostica con una
La fase tirotxica de este trastorno, as como otras for TSH elevada en pruebas de laboratorio. Los pacientes con
mas de tiroiditis subaguda, se distingue de la enfermedad este trastorno a menudo presentan sntomas relacionados
de Graves por una CYRA baja y ausencia de anticuerpos con un metabolismo lento. La tirotoxicosis es resultado
receptores de TSI o TSH. La tiroiditis indolora o linfoctica del exceso de hormona tiroidea. Desde el punto de vis
subaguda comparte muchas caractersticas de la tiroiditis ta clnico, los pacientes con este trastorno tienen valores
posparto, excepto que no hay embarazo asociado. indetectables de TSH y cifras elevadas de T 3 y T 4libre. Las
La tiroiditis dolorosa, tambin denominada granulo m a afecciones tiroideas tienden a ser muy tratables. Es impor
tosa subaguda, tiroiditis no supurativa subaguda o tiroiditis tante estar familiarizado con los sntomas, las pruebas de
de Quervain, se caracteriza por dolor del cuello, fiebre de diagnstico y los algoritmos de tratamiento de la enferme
bajo grado, mialgia, bocio difuso delicado y oscilaciones dad tiroidea.
CAPITULO 20 FUNCIN DE LA GLNDULA TIROIDES 455
P R E G U N T A S DE R E P A S O
1. Todas las siguientes afirmaciones sobre el yodo son 6. Una m ujer de 34 aos de edad presenta bocio, taqui
verdaderas, EXCEPTO: cardia, y perdida de peso de dos meses de duracin.
a) La deficiencia de yodo es una de las causas ms La TSH es indetectable y la T 4 libre es elevada. Todas
frecuentes de hipotiroidismo en el mundo. las siguientes pruebas son tiles en el diagnstico de
b) La T 4 tiene cuatro molculas de yodo. la causa del hipertiroidismo, EXCEPTO:
c) El tratamiento con yodo radiactivo de la enferme a) Anticuerpos receptores de TSH.
dad de Graves es efectivo en menos de 40% de los b) CYRA.
pacientes tratados con este agente. c) Biopsia por aspiracin con aguja fina de la gln
d) La captacin de yodo radiactivo a menudo es til dula tiroides.
en la determinacin de la causa de tirotoxicosis. d) TSH.
2. El feto: 7. Una m ujer de 65 aos de edad presenta fatiga, hipo
a) Es dependiente de la hormona tiroidea para el termia, efusiones pericrdicas y prdida de cabello.
desarrollo neurolgico normal. En las pruebas de funcin de la tiroides se muestra
b) No desarrolla la glndula tiroides hasta el tercer una TSH bastante elevada y una T 4 libre baja. Todas
trimestre. las siguientes anormalidades de pruebas de labora
c) No es susceptible de dao por terapia de yodo torio se relacionan con su enfermedad subyacente,
radiactivo proporcionada a la madre. EXCEPTO:
d) Nacer con hipotiroidismo en alrededor de 1 de a) Concentracin elevada de colesterol.
cada 4 00 nacimientos en pases desarrollados. b) Anemia.
c) Concentraciones elevadas de CPK.
3. La glndula tiroides:
d) W BC elevada.
a) Es una trampa de yodo ineficaz.
b) Depende de la peroxidasa tiroidea (POT) para 8. Un hombre de 26 aos de edad presenta un nodulo de
permitir la yodinacin de los residuos de tirosil 3 cm en el lbulo derecho y una TSH normal. Cul
para producir MIT y DIT. es la prxima prueba que debe realizarse?
c) Depende la peroxidasa tiroidea (POT) para per a) AAF del nodulo.
mitir la unin de dos residuos de DIT para formar b) Valor de T+ libre.
t 3- c) Ultrasonido de la tiroides.
d) Por lo general funciona de manera independiente d) Tomografa de la tiroides.
con los valores de TSH.
9. Las siguientes son opciones de tratamiento para
4. La glndula tiroides produce todas las siguientes, hipertiroidismo relacionado con enfermedad de Gra
EXCEPTO: ves, EXCEPTO:
a) TSH. a) PTU.
b) Tirogiobulina. b) p-bloqueadores.
c) Yodo radiactivo.
d) Hormona tiroidea.
5. Por lo general, el hipotiroidismo se relaciona con 10. Todas las siguientes anormalidades se esperan en un
todos los siguientes, EXCEPTO: paciente con enfermedad grave, EXCEPTO:
a) Aumento de peso. a) T 4baja.
b) Elevacin de las concentraciones de TSH. b) T 3 baja.
c) Anticuerpos POT. c) TSH baja.
d) Anticuerpos receptores de TSH. d) T 3 inversa baja.
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Funcin paratiroidea y
control de la homeostasis
del calcio
Thomas P. Knecht y Lauren E. Knecht
21
C O N T E N I D O D E L C A P T U L O
O B J E T I V O S
Al completar este captulo, el laboratorista clnico Analizar las herramientas de laboratorio utilizadas
podr: para evaluar el metabolismo del calcio.
Describir la fisiologa endocrina y orgnica del Aplicar las herramientas de laboratorio en los esta
metabolismo del calcio. dos patolgicos clnicos del metabolismo del calcio.
T R M I N O S C L A V E
457
458 PARTE III VALORACIN DE LAS FUNCIONES DEL SISTEMA ORGNICO
Calcio diettico Hueso FIGURA 21-1. Homeostasis del caldo. Tejidos y rga
Fisiologa orgnica nos incluidos en la homeostasis del calcio (intestino,
El nico captador Fisiologa endocrina esqueleto, y riones) y cmo ellos relacionan al calcio
de la sangre. Tambin se muestran los medios de
Hbitos dietticos, incorporacin del calcio nuevo al sistema (absorcin
Calcio sanguneo
suplementos Gl) y la eliminacin del caldo del sistema (excrecin
renal) bajo condiciones fisiolgicas normales.
Absorcin intestinal' Riones'
Fisiologa orgnica Fisiologa orgnica Orina
Fisiologa endocrina Fisiologa endocrina
El principal expulsador
CAPTULO 21 FUNCIN PARATIROIDEA Y CONTROL DE LA HOMEOSTASIS DEL CALCIO 459
hu 25-hidroxilasa 1a--hidroxilasa
FIGURA 21-2. Sntesis de la vitamina D. Tejidos implicados
en la sntesis de la vitamina D y los pasos por los que es res
Vitamina Dq 25(OH)vitamina D 1,25(OH)2 ponsable cada tejido. Adems, se muestran las enzimas que
vitamina D se encargan de los dos pasos mediados por enzimas (25-
(metabolito activo) hidroxilacin heptica y 1cx-hidroxilacin renal). El producto
de este proceso, 1,25(OH)2vitamina D, es responsable de
Respuestas de la vitamina D especficas de tejidos los efectos especficos de los tejidos de la vitamina D.
lasa renal es una enzima regulada por la horm ona parati- so biosinttico del colesterol proporciona los precursores
roidea (PTH). sta estimula la la-hidroxilasa y, por tanto, de la vitamina D y de las hormonas esteroideas. Existen
tambin la sntesis del metabolito activo de la vitamina D, una relacin evolutiva adicional, en la que el receptor de
l,2 5 (O H )2D. vitamina D est en la misma familia del supergn que los
La edad, la exposicin a la luz solar y la latitud llegan a receptores de las hormonas esteroideas, la hormona tiroi
influir en la pertinencia de las concentraciones de vitami dea, los receptores retinoides y varios receptores hur
na D. Es ms probable que los individuos de edad avan fanos (estos receptores hurfanos no tienen un ligando
zada, aquellos con exposicin a la luz solar baja o nula y conocido; al parecer algunos funcionan a travs de la regu
aquellos que habitan en latitudes de los hemisferios norte lacin del estado de fosforilacin). Al igual que con todos
y al sur desarrollen deficiencia de vitamina D (si es que no los receptores en esta familia de supergn, el receptor de
reciben suplementos en la dieta). vitamina D es un receptor nuclear y lleva a cabo la regu
La vitamina D se obtiene, tambin, a partir de fuentes lacin fisiolgica al dirigir la transcripcin de los genes
dietticas. En Estados Unidos, la vitamina D es relativamen especficos de respuesta a la vitamina D. La l,2 5 (O H )2D es
te rara en la mayor parte de los alimentos tpicos que se con el ligando natural para el receptor de vitamina D.
sumen en ese pas, cuando no estn fortificados. Las nicas El complejo l,25(O H ) D-receptor de vitamina D se une
fuentes dietticas de vitamina D que suelen encontrarse son al flujo ascendente (5') del elemento de respuesta de la
las vitaminas (en especial multivitamnicos o suplementos vitamina D del sitio inicial de transcripcin de genes que
especificados que contienen vitamina D) y la leche forti influyen en la vitamina D e interviene en la trascripcin
ficada con vitamina D. A la leche se le fortifica por radia del gen por la interaccin con otros elementos de trans
cin ultravioleta, de manera similar a la luz ultravioleta que cripcin y la polimerasa RNA para regular la transcripcin
penetra a la piel y media la formacin de vitamina Dy Por lo del gen en cuestin (fig. 21-3).
general, en los multivitamnicos se proporcionan 400 uni La influencia fisiolgica de la vitamina D se realiza a
dades de vitamina D3 casi la misma cantidad que se obtiene travs de slo algunos sistemas/tejidos orgnicos. En las
de un litro de leche fortificada con vitamina D. Otra de estas clulas epiteliales (sobre todo duodenales) del intesti
fuentes frecuentes es el aceite de hgado de bacalao. no delgado, la l,2 5 (O H )2D regula la expresin de varios
Como ya se mencion, existen similitudes de evolucin genes que estimulan el transporte de calcio transepitelial
entre la vitamina D y las hormonas esteroideas. El proce del lumen intestinal a la sangre. El sitio de mayor absorcin
En el ncleo
FIGURA 21-3. Mecanismo de accin de la vitamina D. Se muestra el enlace y la interaccin del DNA con
otros componentes de la maquinaria de transcripcin del complejo vitamina D-receptor de la vitamina D.
Observe la notable similitud evolutiva entre este mecanismo y el de otras hormonas esteroidea y tiroidea.
Como ejemplo primario, la vitamina D inhibe la transcripcin del gen de la PTH en el tejido de la paratiroides y
estimula la transcripcin del transportador del calcio en el epitelio intestinal del borde spero.
460 PARTE III VALORACIN DE LAS FUNCIONES DEL SISTEMA ORGNICO
es el duodeno. La i,2 5 (O H ))D tambin estimula la absor Para remarcarlo, el nombre de paratiroides slo se
cin de fosfato. refiere a la proximidad anatmica con la glndula tiroides.
En el hueso, la l,2 5 (O H )2D estimula la diferenciacin No existe relacin metablica entre la glndula tiroides y
terminal de los precursores de osteoclastos a osteoclastos. la paratiroides. Cuando se mide la PTH, se debe valorar
La 1,25 (OH )2D tambin estimula a los osteoblastos para la molcula intacta (hormona paratiroidea intacta, PTH
influir en los osteoclastos en la movilizacin del calcio intacta, PTH.), no la molcula media ms antigua u otros
seo. La l,2 5 (O H )2D no afecta de forma directa la fisiolo fragmentos de la molcula intacta .6
ga del osteoclasto maduro. La l,2 5 (O H )2D juega un papel La PTH acta de manera primordial para aumentar el
importante en la mineralizacin del hueso. Se observa calcio sanguneo. Cuando ste es bajo, representa la pri
hueso anormal cuando la vitamina D es deficiente o tiene mera seal para que la paratiroides afecte esta respuesta.
metabolismo defectuoso. La PTH acta sobre el hueso (para causar resorcin sea e
Como ya se indic, la l,2 5 (O H )2D aumenta el calcio incrementar el calcio sanguneo) y los riones (para elevar
sanguneo mediante el incremento de la absorcin intes la reabsorcin fraccional del calcio tubular renal [filtrado
tinal de calcio luminar. El calcio sanguneo retroalimenta glomerular] y, por tanto, incrementar el calcio sangu
el tejido paratiroideo y afecta la sntesis y secrecin de la neo). Adems, estimula la la-hidroxilacin renal de la
PTH (que se analiza en la siguiente seccin). Sin embar 2 5 -hidroxivitamina D, para producir l,2 5 (O H )2D, el meta-
go, la l,2 5 (O H )2D tambin tiene control de transcripcin bolito activo de la vitamina D; al hacerlo, la PTH estimula
directo sobre el gen de PTH en la paratiroides. El complejo de manera indirecta la absorcin intestinal de calcio, lo que
l,25(OH),D-receptor de vitamina D se une al flujo ascenden contribuye a aumentar el calcio sanguneo. La PTH tam
te del elemento de respuesta de la vitamina D del gen de la bin disminuye las concentraciones de fosfato sanguneo.
PTH y subregula la transcripcin del gen de la PTH. ste Existe un receptor sensible al calcio en las glndulas
es un caso tpico de regulacin endocrina de la funcin paratiroides .5 Este receptor est en la familia que abarca
tisular (fig. 21-4): la PTH estimula la produccin de la siete transmembranas de receptores. El receptor sensible al
l,2 5 (O H )2D, y sta, a su vez, se retroalimenta para dis calcio detecta el calcio sanguneo del entorno y origina una
minuir la secrecin de la PTH, todo ello para mantener al respuesta para contribuir a la regulacin de la secrecin de
calcio sanguneo dentro del rango normal. PTH. La respuesta de la PTH al calcio ambiental se centra
en un punto de ajuste, con respuestas ms pronunciadas
Hormona paratiroidea cerca de la parte media del rango normal del calcio sangu
Desde el punto de vista fisiolgico, la PTH mantiene el neo (fig. 21-5). El receptor sensible al calcio detecta si el
calcio sanguneo y el fosfato en el rango normal.5En con calcio ambiental es demasiado bajo y la secrecin de PTH
diciones normales, hay cuatro glndulas paratiroides, que se eleva. El incremento de la PTH circulante aumenta la
por lo general se encuentran en la regin de la glndula resorcin sea, produce retencin renal de calcio (reabsor
tiroides (de ah el nombre de paratiroides). Algunas veces, cin tubular del calcio en el filtrado glomerular) y estimula la
una o ms glndulas paratiroides se encuentran dentro de la absorcin intestinal de calcio (a travs del efecto de la PTH
glndula tiroides. Las glndulas paratiroides se encuentran, sobre la produccin de l,25(O H ),D ). En respuesta a este
tambin, fuera de su sitio anatmico normal, en cualquier proceso, el calcio ambiental aumenta. A su vez, la elevacin
lugar entre el hueso hioideo del cuello y el mediastino. del calcio retroalimenta la glndula paratiroides. Cuando el
calcio sanguneo aumenta demasiado, el receptor sensible
al calcio lo detecta y la secrecin de HPT se suprime, lo
que permite mayor prdida urinaria de calcio, y que el cal
cio permanezca en el hueso y no se estimule la absorcin
intestinal de calcio (al dejar de estimular la produccin de
l,2 5 (O H )2D). La supresin de HPT por concentraciones
elevadas de calcio se utiliza en clnica para valorar una cau
sa de hipercalcemia (vase ms adelante).
En resumen, la PTH regula la concentracin de cal
cio sanguneo y el metabolismo de la vitamina D, lo que
retroalimenta la paratiroides para regular la secrecin de
PTH (otro ejemplo de la regulacin endocrina exquisita
de la fisiologa).
Al igual que sucede con todas las hormonas, la PTH
media su efecto por unin saturable de afinidad elevada a
un receptor especfico .5El receptor de la PTH es un recep
tor de protena transmembrana que media el efecto de la
FIGURA 21-4. Circuitos de alimentacin hacia delante y hada atrs. PTH, cuando menos en parte, por activacin de la enzi
Se muestra la respuesta endocrina a los cambios en el calcio sangu ma adenalito ciclasa y la segunda va del mensajero que
neo (elevacin o descenso). Una respuesta concertada de la hormona, comprende el AMP cclico (AMPc), con sus efectos en la
mediada a nivel orgnico por los rganos que se muestran en la figu fosforilacin de la protena. Un ejemplo interesante de la
ra 21-1, ayuda a restaurar el calcio sanguneo a valores normales. medicina molecular es el seudohipoparatiroidism o, que se
CAPITULO 21 FUNCIN PARATIROIDEA Y CONTROL DE LA HOMEOSTASIS DEL CALCIO 461
Sistem a gastrointestinal
La funcin intestinal normal se requiere para la absorcin
del calcio .8 Las interrupciones en la funcin intestinal,
como se observa con los defectos genticos o fisiolgicos
de los sndromes del intestino delgado, llegan a afectar
la absorcin del calcio. Se requiere la disponibilidad y el
metabolismo normales de la vitamina D para la absorcin
ptima del calcio. Es necesaria la ingesta adecuada de
Rango normal calcio diettico. El calcio duodenal casi se duplica por la
Calcio sanguneo l,2 5 (O H )2D, de alrededor de 30% de ingesta a casi 60 a
FIGURA 21-5. Receptor sensible al calcio: efecto en la secrecin
70%. Cabe hacer notar que el fosfato diettico se une al
de PTH. Se muestra la respuesta del tejido paratiroideo (como se calcio diettico en el lumen intestinal, se forma el precipi
demuestra por la secrecin de PTH) al calcio sanguneo. El punto tado insoluble fosfato de calcio y se evita la absorcin tan
fijo se determina por la respuesta de la paratiroides mediada por to de calcio como de fosfato. La insolubilidad del fosfato
la transmembrana del receptor sensible al calcio. La curva normal de calcio se refleja en su constante de producto de solubili
corresponde a heterocigocidad para el receptor sensible al calcio dad, Kps, que es igual a 1.2 X 1CL29. sta es la base para que
"tipo comodn" (+/+). La curva desplazada a la derecha que se mues el carbonato de calcio se utilice como enlazador de fosfato
tra corresponde al caso en que hay heterocigocidad para el receptor en pacientes con insuficiencia renal. Por esta razn, una
(hipercalcemia hipocalcirica benigna familiar): una copia tipo como dieta con elevado contenido de fosfato (p. ej., una dieta de
dn del gen y mutacin desactivadora (+/-).
alimento chatarra o consumo elevado de refresco) tender
a inhibir la absorcin de calcio.
ES T U D IO D E C A S O 21-1
Una mujer de 4 0 aos de edad acude a su mdico con g/dl) y PTH intacta, 162 pg/ml (normal, 11 a 54 pg/ml).
queja de dolor importante en el costado izquierdo que La funcin renal es normal (US, 25; creatinina, 0.9).
comenz la noche anterior. Ella asegura que el dolor es El anlisis de la orina es notable en sangre, y > 5 0 glbu
peor que el que se produce al dar a luz. Adems, infor los rojos por campo de poder elevado. Esto indica una
ma la presencia de sangre en su orina ms temprano recoleccin de orina a las 24 h, que revela calcio elevado
ese mismo da. Se siente fatigada y ms olvidadiza, y a 483 mg/24 h (normal, 100 a 250 mg/24 horas).
cree que su concentracin no fue tan buena durante el
ltimo ao. No presenta antecedentes mdicos impor Preguntas
tantes, no toma medicamentos y su historial familiar no
es contributivo. En un examen fsico, al parecer sufre 1. Cules resultados de laboratorio son anormales?
dolor agudo. Hay sensibilidad marcada a la percusin
2. Cul es el presunto diagnstico para esta paciente?
suave sobre el ngulo costovertebral izquierdo. La san
Y el diagnstico diferencial?
gre est plida y notable en calcio, 11.2 mg/dl (normal,
8.5 a 10.2 mg/dl); albmina, 3 .8 g/dl (normal, 3.5 a 4.8 3. Qu tratamiento est indicado para esta patologa?
462 PARTE III S VALORACIN DE LAS FUNCIONES DEL SISTEMA ORGNICO
de calcio y fosfato, deposicin ectpica de fosfato de calcio manera adecuada a las necesidades de los huesos largos. El
en tejidos suaves y salud sea deficiente). hueso trabecular consta de miles a millones de conexiones
Los riones responden a la PTH de varias maneras cla de hebras transversales, a las que se les denomina trabculas.
ve, para conservar el calcio sanguneo y evitar hipocalce- Gracias a estas trabculas interconectadas, el hueso tra
mia. Ya se revis el papel de la PTH en la estimulacin de becular es fuerte y el hueso compacto que origina, como
la la-h idroxilacin de la 25(O H ) vitamina D. Adems, la los cuerpos vertebrales de la espina dorsal, proporcionan
PTH estimula la reabsorcin tubular de calcio a partir del fuerza e integridad. La contribucin de los huesos trabecu-
filtrado glomerular, lo que regresa el calcio filtrado a la lares y corticales vara en diferentes sitios del esqueleto.
sangre, conserva el calcio sanguneo y previene hipocal Los huesos largos son en esencia corticales y los cuerpos
cemia. vertebrales de la columna espinal son principalmente tra-
Al analizar la fisiologa renal con relacin a la homeos beculares. Otros sitios del esqueleto consisten en una com
tasis del calcio, resulta importante diferenciar entre reab binacin de huesos corticales y trabeculares, que incluyen
sorcin fraccional de calcio a partir del tbulo y la carga el cuello femoral, el radio distal y el hmero proximal. El
excretada neta de calcio. En la hipercalcemia que se origina hueso trabeclar es el que ms est sujeto a prdida sea
por hiperparatiroidismo primario y en el establecimiento debido a hipogonadismo (considrese menopausia) o dosis
de la hipercalcemia en la mayor parte de otras causas, la farmacolgica de glucocorticoides (prednisona) que, a su
carga filtrada de calcio aumenta en gran medida. Aunque vez, estn relacionados con mayor riesgo de fractura.
la PTH estimula la reabsorcin tubular de calcio, por la En resumen, la homeostasis del calcio constituye un
mayor carga filtrada, la excrecin neta de calcio an per equilibrio complejo entre los factores internos y externos
manece elevada en comparacin con el estado normal (no de la sangre, lo que refleja la fisiologa endocrina y org
hiperparatiroideo). La hipercalciuria se origina como un nica integrada. Es este equilibrio lo que permite un meta
componente estndar del hiperparatiroidismo primario. bolismo de calcio normal; cuando se altera, el resultado
Cabe notar que la hipercalciuria originada por cualquier son trastornos en el metabolismo del calcio que llegan a
causa plantea un mayor riesgo de clculos que contienen originar varias afecciones mdicas que se analizan a con
calcio en los riones. Esto explica el aparente aumento tinuacin.
paradjico de la reabsorcin renal fraccional de calcio y el
mayor riesgo de clculos renales en el hiperparatiroidismo HIPERCALCEM IA
primario. De hecho, la hipercalcemia por casi cualquier
causa aument el riesgo de clculos de calcio. La hipercalcemia se define como el estado de concentra
ciones de calcio sanguneo por arriba del rango norm al .12
El calcio ionizado (libre) es el componente con actividad
Sistem a seo
biolgica del calcio circulante. Alrededor de la mitad del
A lo largo de la vida, tiene lugar un proceso acoplado en calcio circulante forma complejo (se une) con protenas
el hueso con formacin y resorcin seas, al que a menu sricas, sobre todo albmina, con la mitad remanente ioni
do se le conoce como renovacin sea.10 En condiciones zada (libre). Cuando el calcio total se mide en un panel
normales, este proceso est acoplado de manera estrecha, qumico de suero, hay que recordar que slo casi la mitad
de modo que uno no ocurre sin el otro. La formacin sea se ioniza. Por tanto, el valor del calcio total es limitado,
es mediada por los osteoblastos y la resorcin sea por a menos que se considere en el contexto de la albmina
los osteoclastos (una clula de la familia monocito/macr- srica del paciente. En pacientes con albmina srica baja,
fago). Resulta interesante que el osteoclasto requerido para se esperara que tengan calcio total bajo y calcio ioniza
movilizar el calcio del esqueleto no defina receptores do normal; lo contrario ocurre en pacientes con albmina
para 1.25(O H ),D o PTH, las hormonas principales que srica elevada. Al solicitar una valoracin de calcio ioni
estimulan la resorcin sea. En cambio, estas hormonas zado, es posible eliminar esta salvedad. sta es una medi
actan de manera directa en los osteoblastos que, a su vez, cin directa del calcio libre y refleja el estado de calcio, sin
producen una serie compleja de citocinas, que luego acti necesidad de tomar en cuenta la fraccin unida a protenas
van los osteoclastos y causan resorcin sea y la libera sricas. El calcio ionizado se correlaciona de m ejor mane
cin del calcio del esqueleto. Cuando la formacin sea ra con la actividad biolgica del calcio, as como con sn
mediada por osteoblastos y la resorcin sea mediada por tomas de hipercalcemia o hipocalcemia cuando el calcio se
osteoclastos se desacoplan, de tal modo que el ndice de encuentra fuera del rango normal. La unin del calcio ioni
resorcin sobrepasa la tasa de formacin (con lo que se zado a las protenas es una funcin del pH; ms calcio se
favorece la resorcin neta), el efecto global con el tiempo une a pH ms alcalino y menos a pH ms cido. La sangre
es la prdida de masa sea. La resorcin neta sea tal vez arterial, que debe presentar un pH de alrededor de 7.4, por
afecte la salud del esqueleto, lo que ocasiona prdida de lo general tiene ms calcio unido a protenas que la sangre
masa sea y deterioro de la microarquitectura del esquele venosa, que debe de tener un pH cercano a 7.2. Debido a
to, con lo que aumenta el riesgo de fractura. la diferencia arterial-venosa en el calcio ionizado, ste sue
Los dos tipos principales de hueso en el esqueleto son el le medirse en sangre arterial. En la actualidad es posible
trabecular y el cortical.11 Este ltimo es el tipo principal en medir el calcio ionizado en sangre venosa; el laboratorista
los huesos largos. El hueso cortical es fuerte en las dimen clnico calcula el equivalente de calcio ionizado a un pH
siones axial y seccin transversal, por lo que se adapta de de 7.4 e informa ese valor.
CAPTULO 21 FUNCIN PARATIROIDEA Y CONTROL DE LA HOMEOSTASIS DEL CALCIO 463
ES TU D IO D E C A S O 21-2
Un hombre de 58 aos de edad ha sido fumador duran prueba de fuerza muscular. Los hallazgos de laborato
te muchos aos. Segn recuerda, fuma tres cajetillas rio son notables: calcio, 16.8 mg/dl (normal, 8.5 a 10.2
por da, e insiste en que sus cigarrillos no me hacen mg/dl); albmina, 3 .4 (normal, 3.5 a 4 .8 g/dl); US,
ningn dao, doc. Sin embargo, ltimamente se siente 27; y creatinina, 1.3. En la radiografa se revela una
enfermo, con ausencia de apetito, malestar y prdida masa hilar de 3 cm en la regin derecha proximal con
de peso. Su estado mental se volvi aptico en fecha manchado distal. Se indican pruebas adicionales y se
reciente, y no recuerda de un momento a otro lo que descubre PTH intacta indetectable a < 1 pg/ml (normal,
est haciendo en su trabajo. Hace poco su tos bsica 11 a 54 pg/ml) y PTHrP elevada a 18.3 pmol/L (normal,
empeor, y observa manchas de sangre en su expecto 0 .0 .a 1.5 pmol/L).
racin cuando la examina. No tiene antecedentes mdi
cos importantes distintos al abuso de tabaco. No toma Preguntas
medicamentos. Su historial familiar slo es notable
porque su padre muri de cncer pulmonar a la edad 1. Considera que el tabaquismo de este paciente se
de 63 aos y su madre de enfisema, a los 68 aos. relaciona con su hipercalcemia?
En un examen fsico, se muestra que se trata de un
hombre delgado, con aspecto mucho ms viejo que su 2. Qu otros resultados de laboratorio son anormales?
edad cronolgica. Cuando produce algunas expecto
raciones a solicitud del mdico, se observa que tienen 3. Cul es el diagnstico del paciente? Y su prons
tinte rosa y manchas de sangre. El examen del pecho tico?
revela resuellos y estertores esparcidos en la regin pul
monar superior derecha. Muestra debilidad difusa en la
464 PARTE III VALORACIN DE LAS FUNCIONES DEL SISTEMA ORGNICO
de 5 a 10% de los pacientes con HPT I o presentan PTH en relacionada con afecciones granulomatosas o tejido linfoi-
el rango normal alto. Por lo general, la hipercalcemia de deo anormal .16 Es difcil consumir demasiada vitamina D
HPT I o no es extrema, a menos que est acompaada por en la dieta, suponiendo que todos los sistemas orgnicos
factores adicionales, como deshidratacin o insuficiencia funcionen de manera normal. La causa observada ms a
o falla renal. En el HPT I o, aunque la PTH aumente la menudo (aunque an es muy poco frecuente) de hiper
reabsorcin tubular fraccional de calcio, la carga filtrada calcemia con hipervitaminosis D se debe a la actividad
de calcio es mucho mayor de lo normal, de modo que extrarrenal de la la-hidroxilasa en los granulomas o el
hay un aumento neto en la excrecin de calcio a pesar del tejido linfoideo. sta no es la misma enzima la-hidroxila-
incremento en la reabsorcin fraccional. La hipercalciu- sa encontrada en los riones, con actividad regulada por la
ria es un hallazgo esperado en el HPT I o. Por lo comn, PTH y el calcio. Se trata de un producto gentico diferente
la PTH tambin incrementa la excrecin renal de fosfato, que no muestra regulacin por retroalimentacin de cal
por lo que tal vez el HPT I o ocasione hipofosfatemia. Sin cio. Esta actividad de la la-hidroxilasa funciona de mane
embargo, esto depende de la dieta y, en trminos genera ra constitutiva para producir l,2 5 (O H )2D, que, a su vez,
les, el fosfato srico slo es til si se mide en ayunas (el llega a causar hipercalcemia por los mecanismos ya anali
fosfato srico no se mide de manera rutinaria en pacientes zados (fisiolog a endocrina y fisiolog a orgnica). La hiper
tratados por HPT I o). En el HPT I o, se espera encontrar calcemia que se produce por exceso de vitamina D est
calcio sanguneo elevado (en condiciones ideales, medido mediada de manera primordial por estimulacin de absor
como calcio ionizado), PTH elevada (o normal elevada) cin G l de calcio y por reclutamiento de osteoclastos, lo
y aumento en la excrecin de calcio urinario (medida en que ocasiona resorcin sea .16 La l,2 5 (O H )2D suprime la
una recoleccin de orina a las 24 horas); en ayunas, tam trascripcin gentica de PTH; por tanto, el perfil de labo
bin llega a observarse hipofosfatemia. ratorio esperado en un paciente con hipervitaminosis D
En la mayor parte de los casos, el hiperparatiroidismo a partir de la-hidroxilacin ectpica de 25-hidroxivita
primario ocurre de manera espordica, pero tambin se mina D es hipercalcemia, PTH suprimida y l,2 5 (O H )2D
presenta en varios sndromes genticos: elevada. Las afecciones granulomatosas relacionadas ms
a menudo con esto son la sarcoidosis y la tuberculosis.
La neoplasia endocrina mltiple tipo 1 (NEM 1) produ
Ciertos cnceres producen hipercalcemia mediada por
ce tumores de la paratiroides, la hipfisis y el pncreas.
hormonas como un sndrome paraneoplsico. En algunos
Se origina por la prdida de un gen supresor del tumor
casos, estos factores actan ms de una manera paracrina
que realiza el mapeo para el cromosoma humano 11.14
que endocrina real. En todos estos casos, el factor o los
La neoplasia endocrina mltiple tipo 2A (NEM 2A) da
factores producidos por el tumor no estn sujetos a regu
como resultado tumores de la paratiroides, hiperplasia
lacin de retroalimentacin por calcio.
o cncer de la tiroides medular y feocromocitoma. Se
El mieloma mltiple es una malignidad de (3-linfocitos
origina por una mutacin activadora en el protoon-
que produce anticuerpos (es decir, clulas plasmticas).
cogn ret, que reside en el cromosoma humano 10. Se
Estas malignidades a menudo producen hipercalcemia
debe medir de manera rutinaria el protooncogn ret en
por secrecin de citocinas, que activan osteoclastos para
el laboratorio clnico. Se medir siempre que se sos
la resorcin del hueso, y resorcin desacoplada a partir de
peche este trastorno, de modo que otros miembros de
formacin sea mediada por osteoblastos .17 Debido a que
la familia, cuando sea apropiado, deben ser alertados y
el tejido paratiroideo no es anormal en estos pacientes, la
examinarse . 14
PTH se suprime de manera apropiada en la hipercalcemia
El hiperparatiroidismo familiar causa HPT I o, sin otros
de mieloma mltiple. La hipercalcemia tal vez sea extre
tumores relacionados. El gen es desconocido, pero se le
ma. Es posible que las cadenas ligeras de inmunoglobulina
ha ubicado en el cromosoma humano l .14
de la enfermedad tambin causen necrosis tubular renal y
Hipercalcemia hipocalcirica benigna familiar (HH BF).
produzcan insuficiencia renal, lo que empeora la hiper
Por lo general, este interesante sndrome se origina por
calcemia. En radiografas del hueso afectado, se observan
mutaciones en el receptor sensible al calcio (vide supra).
lesiones lticas seas.
Se relaciona con hipercalcemia e hiperparatiroidismo
La protena relacionada con la horm ona paratiroidea
leves (fig. 21-5) y excrecin del calcio urinario dism i
(PTHrP) representa una causa hormonal frecuente de
nuida (o normal baja ).15La disminucin de la excrecin
hipercalcemia relacionada con varias malignidades.1819 Se
del calcio urinario distingue la HHBF del HPT I o, lo
produce, tambin, por tumores benignos y causa hiper
que hace que sea la nica prueba que diferencia entre
calcemia .20 La PTHrP comparte la homologa secuencial
ambos. Como su nombre lo indica, se trata de un tras
N-terminal con la PTH (de ah el nombre de protena rela
torno benigno y no requiere tratamiento. No predispo
cionada con la PTH). La PTH y la PTHrP se unen al mismo
ne a fractura ni clculos renales. El reconocimiento es
receptor en riones y hueso; el receptor tambin se encuen
crtico, de modo que no sea necesaria la paratiroidecto-
tra en varios otros tejidos. El papel fisiolgico normal de
ma.
la PTHrP no est claro. Tal vez desempea una funcin en
La hipervitaminosis D es un trastorno que se produce la regulacin paracrina normal de varios tejidos, como el
por la ingesta excesiva de vitamina D, o por la produccin cartlago, la piel, las neuronas del SNC y el pecho (calcio
aberrante de l,2 5 (O H )2D como resultado de la-h id ro xi- de la leche materna). Los cnceres que suelen relacionar
lacin extrarrenal de 25-hidroxivitamina D, por lo general se con la produccin de PTHrP (a la que histricamente
CAPITULO 21 FUNCIN PARATIROIDEA Y CONTROL DE LA HOMEOSTASIS DEL CALCIO 465
se le conoce como hipercalcem ia hum oral de m alignidad) relaciona, cuando menos en parte, con aumento de la
incluyen cncer pulmonar de clulas escamosas, cncer absorcin intestinal y disminucin de la depuracin renal
de pecho y cncer renal. Otros tumores que llegan a vicu- de calcio y bicarbonato. La PTH se suprime en la hipercal
larse con hipercalcemia mediada por la PTHrP constan cemia del sndrome leche-lcali.
de feocromocitoma, algunos tumores celulares del islote La insuficiencia renal causa varias anormalidades en el
y ciertos linfomas. La secrecin de la PTHrP no est regu metabolismo de calcio, como hipercalcemia e hipocalce
lada de una manera de retroalimentacin por el calcio san mia, lo que depende de varios factores .21-22 No es correcto
guneo (fig. 21-6). Cuando la PTHrP (que tal vez funcione por completo decir si se trata de una causa no hormonal
desde el punto de vista fisiolgico de una manera paracri- de hipercalcemia porque a menudo tambin se encuentran
na) se produce por cnceres, se produce en exceso en gran variaciones anormales en el metabolismo de la PTH y la
medida a tal grado que circula de manera sistemtica, lo vitamina D. En la insuficiencia renal, la excrecin renal de
que le permite actuar de una manera endocrina (desde una calcio y fosfato se encuentra suprimida en gran medida, si
perspectiva clnica, afecta de manera primordial al hueso y no es que por completo. El fosfato de calcio es insoluble
al rin). Es posible medirla en sangre cuando se sospecha y tiende a precipitarse en tejido blando. Por lo general, la
hipercalcemia humeral de malignidad. La PTHrP y la PTH PTH aparece elevada en presencia de insuficiencia renal y,
no hacen reaccin cruzada entre s en inmunoanlisis, lo en equilibrio con la precipitacin de fosfato de calcio y la
que permite medir de manera confiable cada protena en el prdida de excrecin del calcio urinario, tal vez contribu
laboratorio clnico. La hipercalcemia mediada por PTHrP ya a hipercalcemia. La 1-hidroxilacin de la 25-hidroxivi-
se relaciona con la supresin de la PTH. Al igual que con tamina D es abolida en la insuficiencia renal, de modo que
la hipercalcemia mediada por la PTH, la hipercalcemia no se produce la forma activa de la vitamina D. Se sue
mediada por la PTHrP se origina sobre todo por resorcin le administrar l,2 5 (O H )2D a pacientes con insuficiencia
sea y aumento de la reabsorcin tubular renal fraccio renal, lo que quiz contribuya a hipercalcemia.
nal de calcio. Los cnceres que producen PTHrP y cau
san hipercalcemia se vinculan con un pronstico bastante F rm a co s q u e ca u sa n hipercalcem ia
malo. Los sntomas relacionados con el sndrome incluyen Varios frmacos causan hipercalcemia .21 Estos frmacos se
cambios en el estado mental, clculos renales y fracturas, analizan ms adelante con mayor detalle ( Frmacos que
as como otras manifestaciones relacionadas con cncer. afectan el metabolismo del calcio).
Los diurticos tiacdicos cuentan con una larga historia
C ausas p o r el sistem a orgnico en el tratamiento de hipertensin y llegan a causar reten
El sndrome leche-lcali es una causa rara de hipercalce cin del calcio filtrado de manera glomerular y producen
mia, pero a lo largo del tiempo ha tenido importancia .21 hipercalcemia o contribuyen a ella. A las dosis utilizadas
Se le describi por primera vez en la dcada de 1920 en de rutina para tratar hipertensin, la hipercalcemia es
pacientes tratados por lceras ppticas con leche o crema, poco habitual. Cualquier otro factor que exacerbe el efecto
o ambas, y sales de carbonato o bicarbonato. El consumo hipercalcmico de las tiazidas tal vez aumente la probabi
de dosis elevadas de calcio y anticidos absorbibles (p. ej., lidad de hipercalcemia relacionada con la tiazida (p. ej,
bicarbonato de sodio; ambos agentes se encuentran juntos insuficiencia renal, hiperparatiroidismo primario).
en el carbonato de calcio) tal vez ocasione hipercalcemia El litio, a dosis usadas de rutina para tratar el trastorno
y aicalosis metablica. El sndrome leche-lcali se relacio afectivo bipolar, quiz se relaciona con hipercalcemia. Al
na a menudo con insuficiencia renal. El mecanismo actual parecer el litio cambia el punto de ajuste de regulacin
del sndrome leche-lcali es un poco impreciso, pero se de calcio para la secrecin de PTH, lo que favorece una
concentracin ms elevada de calcio sanguneo. Adems,
esto aumenta la sealizacin de PTH al tejido blanco de la
Tumor
PTH (en particular hueso y rin), lo que incrementa el
calcio sanguneo.
-Hueso: resorcin-------------
PTHrP - Las dosis elevadas de vitamina A o los anlogos/meta-
-Rin: reabsorcin tubular
bolitos de vitamina A de la familia del cido retinoico se
Paratiroides: Hipercalcemia relacionan con hipercalcemia. En la hipercalcemia de vita
supresin de la secrecin de PTH mina A/cido retinoico, la PTH y la l,2 5 (O H )2D se supri
Nota: sin men, en tanto la PTHrP no se eleva. Al parecer la vitamina
circuitos de A/cido retinoico funciona a travs de la activacin de
retroalimentacin osteoclastos y resorcin sea.
al tumor
ES T U D IO D E C A S O 21-3
Un hombre de 26 aos de edad acude con su mdico de presin sangunea inflado por arriba de la presin
tres semanas despus de someterse a extirpacin qui sistlica induce una contractura muscular involuntaria
rrgica de la tiroides por cncer de la tiroides. Su doc en la mano ipsolateral despus de 60 s (signo de Trous
tor le asegura que todo est resuelto. Sin embargo, a seau). Los resultados de laboratorio son notables para
partir del momento en que regres a casa, not calam calcio, 5.6 mg/dl (normal, 8.5 a 10.2 mg/dl); albmina,
bres musculares involuntarios bastante dolorosos. Ade 4.1 g/dl; US, 20; y creatinina, 1.0. La PTH intacta es
ms, tuvo entumecimiento y hormigueo alrededor de la indetectable a <1 pg/ml.
boca y en manos y pies. Su novia informa que ha esta
do ms irritable durante el ltimo par de semanas. Preguntas
Su historial mdico slo es notable por el diagnstico
reciente de cncer de la tiroides y la reseccin de tres 1. Cules resultados de laboratorio son anormales?
semanas antes de su visita. El nico medicamento que
2. Qu trastorno est experimentando a partir de la
toma es L-tiroxina. Los antecedentes familiares no con tiroidectoma?
tribuyen. En el examen fsico, se observa la cicatriz de
la tiroidectoma bien cicatrizada. El golpeteo en la cara, 3. Cul es la causa de esta afeccin sintomtica?
en la parte interior de los odos, causa contraccin en
4. Cul es el tratamiento para este paciente, adems
la esquina ipsolateral de la boca (signo de Chvostek).
de la medicacin con tiroxina?
No hay masas palpable en el lecho tiroideo. El puo
CAPTULO 21 FUNCIN PARATIROIDEA Y CONTROL DE LA HOMEOSTASIS DEL CALCIO 467
CUADRO 21-1. HIPERPARATIROIDISMO tor, pero no activa al segundo mensajero, la AMP cclica
PRIMARIO (1) CONTRA SECUNDARIO (2)a (AMPc). Los pacientes tienen hipocalcemia y a menudo
hiperfosfatemia, similar a los pacientes con hipoparati
HPT 1o HPT 2o
roidismo; sin embargo, al medir la PTH, sta es elevada.
Calcio sanguneo Elevado Bajo o normal Ntese que la PTH elevada constituye la respuesta fisio
Concentracin Elevado Elevado
lgica de tejido paratiroideo normal y sano a la hipocal
de PTH cemia porque el defecto radica en la sealizacin a travs
del receptor de la PTH y no en la glndula paratiroides.
Calcio urinario Elevado Por lo general ste es un ejemplo clsico de un sndrome de resistencia
bajo hormonal. Adems, los pacientes con seudohipoparatiroi
Anormalidad/ Paratiroidismo dismo tienen baja estatura, y 4 y 5o metacarpianos cortos.
disfuncin Se trata de un trastorno raro, pero un caso instructivo de
la medicina molecular y el metabolismo del calcio. El tra
a En este cuadro se resumen importantes distinciones entre el hiper
paratiroidismo primario (HPT 1o) y el hiperparatiroidismo secundario tamiento consta de calcio y vitamina D, como ya se descri
(HPT 2o), como calcio sanguneo y PTH, calcio urinario y la ubicacin del bi para el hipoparatiroidismo.
defecto subyacente. La hipovitaminosis D describe de manera amplia un
grupo de estados que amenazan al cuerpo con hipocal
cemia, como disponibilidad baja de vitamina D ,23 meta
en varias situaciones, de las cuales la ms frecuente es la bolismo defectuoso de la vitamina D ,26 o mutaciones en
posquirrgica. La ciruga del cuello llega a eliminar las el receptor de la vitamina D .26 Estos problemas causan
glndulas paratiroides o las daa de manera irreversible. accin insuficiente de la vitamina D (el efecto de la vita
El contexto ms habitual es la ciruga de la tiroides, como mina D es mediado por 1,25 (OH )2vitamina D que se une
resultado de la proximidad anatmica de la paratiroides al receptor de la vitamina D, un miembro de la familia
a la glndula tiroides. No es posible resaltar lo suficiente del supergn receptor nuclear, y regula la transcripcin de
la importancia de un cirujano experimentado en cabeza y los genes responsables de la vitamina D). Esto causa la
cuello para ayudar a reducir al mximo la posibilidad de amenaza de hipocalcemia, enfrentada por el desarrollo de
eliminacin o dao accidental de la paratiroides. Al igual hiperparatiroidismo secundario, que reducir a su mnima
que sucede con muchas glndulas endocrinas, el tejido expresin la hipocalcemia o la eliminar. El hiperparati
paratiroideo es atacado por el sistema inmunitario y ori roidismo secundario es una respuesta de adaptacin para
gina destruccin de la paratiroides autoinmunitaria. Al reducir al mximo la fisiopatologa de la accin defectuosa
hipoparatiroidismo autoinmunitario se le agrupa con otras de la vitamina D y nunca se tratar con paratiroidectoma.
enfermedades autoinmunitarias, como la diabetes tipo 1, El tratamiento depende del defecto subyacente. La insufi
enfermedad de la tiroides autoinmunitaria y enfermedad ciencia de vitamina D se trata por reemplazo de la vitami
de Addison. El hipoparatiroidismo autoinmunitario es un na D con fuentes dietticas (leche fortificada con vitamina
poco raro en comparacin con otras enfermedades que se D o suplementos vitamnicos). Los defectos genticos del
observan con mayor frecuencia. El tratamiento del hipo metabolismo de la vitamina D se tratan al suministrar
paratiroidismo se centra en el mantenimiento normal del el metabolito activo, l,2 5 (O H )2D, para evitar el defecto
calcio sanguneo, sin ocasionar otros efectos adversos. La metablico. Las anomalas genticas del receptor de la
PTH no est disponible en clnica para la terapia de reem vitamina D tal vez sean ms difciles de tratar; por lo gene
plazo (dada la reciente disponibilidad de la PTH recom- ral, se administra l,2 5 (O H )2D en dosis farmacolgicas, y
binante humana, es posible que pronto se utilizar la PTH la respuesta es variable.
para tratar el hipoparatiroidismo). Cuando la paratiroides El fenmeno del hiperparatiroidismo terciario se men
ya no est presente o funciona de manera apropiada, la ciona de manera breve porque se aborda con frecuencia
deficiencia se trata con una dosis relativamente elevada de en la literatura. Por lo general, este trastorno (sin implica
vitamina D y calcio .24 La vitamina D estimula la absorcin ciones respecto a la fisiopatologa subyacente) se encuen
intestinal de calcio. Sin embargo, en ausencia de la PTH, el tra en pacientes con insuficiencia o falla renal crnica. La
calcio absorbido tal vez se excrete en la orina libre, lo que insuficiencia o falla renal es una etiologa frecuente para
produce hipercalciuria que, a su vez, pudiera increm en hiperparatiroidismo secundario. Se piensa que la estimu
tar el riesgo de clculos renales con contenido de calcio. lacin prolongada de la funcin de la paratiroides en el
Por tanto, es necesario que exista cierto equilibrio en el hiperparatiroidismo secundario pudiera estimular el desa
consumo de calcio y vitamina D para prevenir de manera rrollo de un adenoma paratiroideo o hiperplasia parati
simultnea hipocalcemia e hipercalcemia. Por lo general, roidea, lo que se asemeja al hiperparatiroidismo primario
el objetivo es mantener el calcio sanguneo en el extremo en el establecimiento de hiperparatiroidismo secundario
inferior de lo normal para ayudar a lograr este equilibrio. previo .27 Los autores ponen en duda esta supuesta fisio
El seudohipoparatiroidismo es una enfermedad gen patologa del hiperparatiroidismo terciario: es como si el
tica que da como resultado desacoplamiento del receptor hipotiroidismo crnico estimulara el desarrollo de adeno
de la PTH de la adenilato ciclasa, debido a una protena G mas tirotrficos hipofisarios o la enfermedad de Addison
estimulatoria mutante (GE) .7En esta enfermedad, no hay estimulara el desarrollo de adenomas corticotropos hipo
un efecto fisiolgico de la PTH. sta se une con su recep fisarios o la enfermedad de Graves estimulara el desarrollo
468 PARTE III VALORACIN DE LAS FUNCIONES DEL SISTEMA ORGNICO
de adenomas tiroideos con hiperfuncin (ninguna de de calcio y la resorcin sea y aminora la tendencia a hipo
estas situaciones sucede en realidad). No obstante, abun calcemia, pero no incrementa la reabsorcin tubular de
da la literatura sobre el hiperparatiroidismo terciario. A calcio debido al defecto gentico. Por tanto, estos pacien
diferencia de lo que sucede con el hiperparatiroidismo tes presentan hipercalciuria y tendencia a clculos renales.
secundario, el terciario casi siempre se trata con medios El tratamiento para este trastorno es la hidroclorotiazida
quirrgicos. (HCTZ) a dosis ms elevadas que las utilizadas para tratar
hipertensin .9 Los aspectos finales del tratamiento son la
Causas en el sistem a orgnico normalizacin de la excrecin de calcio urinario y la nor
Las causas de hipocalcemia en el sistema orgnico se rela malizacin de la PTH.
cionan con los sistemas orgnicos que juegan papeles cla
ve en la homeostasis del calcio. FRM ACO S QUE AFECTAN EL
Los problemas intestinales, que incluyen sndrome del
M ETABOLISM O DEL CALCIO
intestino delgado, sndromes de malabsorcin y sndromes
de secrecin, llegan a producir malabsorcin de calcio y, Una vez analizada la homeostasis del calcio y la hipercal
por tanto, amenaza de hipocalcemia. Una vez ms, la ame cemia y la hipocalcemia, hay que m encionar ciertas cla
naza de hipocalcemia se contrarresta por el desarrollo de ses importantes de frmacos que afectan el metabolismo
hiperparatiroidismo secundario, que trata de mantener el del calcio. Es posible que estos frmacos se relacionen de
calcio sanguneo dentro de los lmites normales al extraer manera directa con la fisiologa endocrina y orgnica ya
calcio del hueso y aumentar la reabsorcin tubular renal analizada.
de calcio. Por lo general, el tratamiento consta de dosis Los frmacos antirresortivos inhiben la resorcin sea
elevadas de vitamina D y calcio. mediada por osteoclastos .28 Los frmacos de esta cate
La insuficiencia o falla renal causa hipocalcemia por gora amplia incluyen frmacos que han estado disponi
hiperfosfatemia (la constante del producto de baja solubi bles por varios aos para tratar o prevenir osteoporosis,
lidad, Kbs, para el fosfato de calcio es Kbs= 1.2 X 10-29) y como estrgenos, bisfosfonatos, moduladores receptores
por metabolismo defectuoso de la vitamina D .27 Adems, de estrgeno selectivo (SERMS; el prototipo es la raloxife-
estos pacientes desarrollarn hiperparatiroidismo como na), y calcitonina. Estos frmacos actan a travs de varios
respuesta adaptable. El calcio srico de pacientes tratados mecanismos sobre los osteoclastos para prevenir la resor
con hemodilisis o dilisis peritoneal es fcil de normali cin sea mediada por osteoclastos, de ah el nombre de
zar (el fosfato no se controla con tanta facilidad mediante la categora, antirresortivos. Estos frmacos se utilizan en
dilisis). Por lo general, el trasplante corrige el defecto. varias situaciones clnicas para ayudar a prevenir la reno
El tratamiento con calcitriol (l,2 5 (O H ),D ) a menudo es vacin sea y la prdida de masa esqueltica y a dismi
til, pero conlleva el riesgo concomitante de desarrollo de nuir el riesgo de fractura. Entre los ejemplos clnicos ms
hipercalcemia. sobresalientes en encuentran la osteoporosis posmeno-
Otra causa de hipocalcemia es un defecto gentico en pusica, la osteoporosis inducida por glucocorticoides y la
el tbulo renal que causa incapacidad para recuperar de osteoporosis idioptica. En algunos casos, varios de estos
manera normal el calcio filtrado fuera del lquido tubular. frmacos se utilizan para tratar hipercalcemia (vide supra).
El calcio filtrado se pierde en esencia por la orina. Esto De manera especfica, varios bisfosfonatos administrados
tambin causa hiperparatiroidismo secundario para preve por va intravenosa se emplean para tratar la hipercalcemia
nir la hipocalcemia, que generara el consumo inapropiado maligna. Adems, la calcitonina subcutnea se utiliza para
de calcio. El hiperparatiroidismo aumenta la absorcin GI tratar el calcio sanguneo peligrosamente elevado, aunque
ES T U D IO D E C A S O 21-4
la taquifilaxia se desarrolla con rapidez y se establecern que parece paradjico, la PTH, la hormona ya descrita para
otros medios para reducir el calcio en el momento en que reabsorber hueso, tambin se utiliza para construir hueso.
se ponga en prctica. Esto tiene que ver con la farmacocintica de la teriparatida.
Adems, existen frmacos que estimulan la resorcin En las clulas seas, slo los osteoblastos expresan recepto
sea, sobre todo los glucocorticoides, como la predniso- res de la PTH. La teriparatida, administrada una vez al da,
na y la metilprednisolona. Estos frmacos se utilizan de tiene una vida media breve en el suero, de alrededor de una
manera amplia para tratar trastornos inflamatorios, como a dos horas, y sale del sistema en slo unas cuantas horas.
asma, artritis reumatoide y lupus, as como en el rgimen La administracin una vez al da de la teriparatida seala
de medicamentos antirrechazo que se emplean en pacien a los osteoblastos la construccin de hueso; sin embargo,
tes con trasplantes orgnicos. Las dosis farmacolgicas de debido a la duracin de la seal, no permite que los osteo
glucocorticoides semejan el efecto del cortisol elevado en blastos enven la seal de la citocina a los osteoclastos (a los
el sndrome de Cushing endgeno .29 La prednisona (p. ej., que habran respondido por resorcin del hueso). La teri
glucocorticoide) afecta al metabolismo del calcio de varias paratida estimula la formacin del hueso cortical y trabe
maneras. Una de ellas es a travs de la estimulacin de los cular sin una respuesta de resorcin sea acoplada. Slo
osteoclastos para la resorcin sea. Esto desacopla relati est aprobada para tratar osteoporosis grave. Sin embargo,
vamente la formacin y resorcin seas, lo que favorece tiene otros usos, como el tratamiento de hipoparatiroidis-
esta ltima. El resultado es una prdida neta de masa sea mo y aumento de la curacin de fracturas, que estn bajo
(y arquitectura sea). Una fuente principal de morbilidad estudio. Adems, es posible utilizarla en combinacin con
relacionada con dosis farmacolgicas de glucocorticoides un frmaco antirresortivo, que llega a potenciar an ms el
es la osteoporosis inducida por glucocorticoides. Dos bis- efecto del medicamento sobre el esqueleto.
fosfonatos, el alendronato y risedronato, estn aprobados Est en desarrollo una interesante nueva clase de fr
por la Administracin de Frmacos y Alimentos (FDA, por macos, los calcimimticos, para tratar el hipertiroidismo.
sus siglas en ingls) de Estados Unidos para el tratamiento El congnere de esta clase, cinacalcet, es un agonista del
de la prdida sea inducida por glucocorticoides. Otros receptor sensible al calcio .31 Al unirse al receptor sensi
medicamentos relacionados con la resorcin sea acele ble al calcio en el tejido para tiroideo, este agente seala
rada incluyen anticonvulsivos (en particular la fenitona), a la clula paratiroidea que hay calcio ambiental adecua
ciclosporina A y varios agentes cito txicos. do, que subregula la transcripcin del gen de la PTH y la
El litio, un catin monovalente pequeo de la familia secrecin de PTH. Este agente se encuentra bajo estudios
alcalino-terra/primera columna de la tabla peridica, se clnicos para evaluar su funcin en el tratamiento no qui
emplea para tratar el trastorno afectivo bipolar. A dosis rrgico del hiperparatiroidismo primario y como coadyu
rutinarias para tratar dicho trastorno, el litio se relaciona vante para el tratamiento del carcinoma paratiroideo y el
con hipercalcemia. Al parecer el litio cambia el punto de hiperparatiroidismo secundario.
ajuste para la regulacin del calcio de la secrecin de la
PTH, lo que favorece una concentracin elevada del calcio EN FERM EDADES SEAS M ETABLICAS
sanguneo. Adems, es posible que esto aumente la seali
Varios estados patolgicos afectan la microarquitectura
zacin de la PTH al tejido objetivo de la PTH (en particu
y macroarquitectura, la fuerza y la integridad del esque
lar hueso y rin), lo que eleva el calcio sanguneo.
leto. Los ejemplos que se proporcionan aqu constituyen
Los diurticos de la tiazida, que cuentan con un lar
modelos para la enseanza o suelen encontrarse en ciertas
go historial en el tratamiento de la hipertensin, llegan a
poblaciones de pacientes. En la mayor parte de los casos,
causar retencin de calcio filtrado de manera glomerular
estos modelos se relacionan con los principios fisiolgicos
e hipercalcemia o contribuyen a ella. En Estados Unidos,
antes revisados.
la HCTZ es el agente de esta clase ms utilizado. A dosis
rutinarias para tratar la hipertensin, la hipercalcemia es
Raquitism o y osteom alacia
rara, aunque los factores que exacerban el efecto hiper-
calcmico de las tiazidas tal vez incrementen la probabi El raquitismo y la osteom alacia son enfermedades del meta
lidad de hipercalcemia relacionada con la tiazida (p. ej., bolismo de la vitamina D .25,26 Ambas enfermedades mues
enfermedad renal, hiperparatiroidismo primario ).21 Sin tran defectos en la mineralizacin del esqueleto (deposicin
embargo, la causa de un problema quiz sea el tratamiento de calcio y fosfato, o hidroxiapatita, en hueso). Una diferen
de otro. La HCTZ es el tratamiento de eleccin para la cia distintiva entre estas enfermedades es la edad de inicio:
filtracin renal gentica de calcio que causa hipercalciuria el raquitismo se caracteriza por comenzar en la infancia, en
(y predisposicin a clculos renales que contienen calcio) tanto que la osteomalacia aparece en la edad adulta. Varios
e hiperparatiroidismo secundario. defectos causan raquitismo y osteomalacia; de acuerdo con
En fecha reciente, la FDA aprob la PTHj 34 recombi- el momento de inicio, las manifestaciones esquelticas difie
nante humana, o teriparatida, un frmaco con el que, por ren. El raquitismo est relacionado con deformidades seas
primera vez, se logra la estimulacin directa de la forma debido a la presin de los huesos largos bajo la influencia de
cin sea mediada por osteoblastos .30 Debido a que se trata la gravedad. Puesto que los huesos ya estn formados para
de una hormona peptdica, debe administrarse de manera el momento de inicio de la osteomalacia, dicha deformi
parenteral (de manera semejante a la insulina); se inyecta dad sea no se manifiesta. Por lo general, ambos trastornos
por va subcutnea de la misma forma que la insulina. Aun estn vinculados con el desarrollo del hiperparatiroidismo
470 PARTE III VALORACIN DE LAS FUNCIONES DEL SISTEMA ORGNICO
secundario. En ambos casos, es posible que surjan fractu causa una fractura, con frecuencia a un grado de trauma
ras a causa de la deficiente estructura sea; es probable que tismo que no habra causado una fractura en un esqueleto
stas contribuyan a hiperparatiroidismo secundario. En no osteoportico (es decir, la fractura por fragilidad osteo-
ocasiones se observa hipocalcemia, aunque tambin llega portica). En la actualidad, se reconoce que la osteoporo
a encubrirse por los efectos del hiperparatiroidismo secun sis es una enfermedad especfica con significado personal
dario. Gracias a la existencia de la leche fortificada con y consecuencias en la salud pblica. Con este reconoci
vitamina D y a la conciencia pblica, ambos trastornos se miento, se lograron avances importantes en el diagnstico,
volvieron menos frecuentes que a principios del siglo pasa la prevencin y el tratamiento de la osteoporosis.
do. No obstante, la gente de cualquier edad que no recibe la En Estados Unidos, la osteoporosis afecta a un estimado
luz solar y aquella que no incluye suplementos en su dieta de 20 a 25 millones de habitantes (con predominancia de
estn en riesgo de deficiencia en vitamina D. La pertinencia alrededor de 4:1, mujeres:hombres) y causa cerca de un
de la vitamina D en el cuerpo se valora por la concentra milln y medio de fracturas cada ao .32 La mayor parte
cin sangunea de la 25-hidroxivitamina D. Debido a que son compresiones vertebrales, seguida por la cadera, y des
en estas condiciones tambin se espera hiperparatiroidismo pus por el antebrazo distal, las costillas y el hmero. La
secundario, se obtendrn PTH intacta en suero y calcio, y fractura osteoportica ms mrbida es la de cadera, en sta
albmina o calcio ionizado para su confirmacin. todas las fracturas requieren ciruga. Aunque alrededor de
El raquitismo se origina, tambin, por los defectos gen la mitad de las compresiones vertebrales llega a ser asin-
ticos en el metabolismo de la vitamina D o en el receptor tomtica, la fractura de cadera conlleva una morbilidad
de la vitamina D .26 El anlisis bioqumico de pertinencia de importante, as como mayor mortalidad. De hecho, la mor
la vitamina D (2 5 (OH)vitamina D) tal vez sea normal, lo talidad por fractura de cadera aumenta alrededor de 20%
que depende del defecto. La l,2 5 (O H )2D es baja, normal en el primer ao despus de la fractura. Adems, se piensa
o elevada, de acuerdo con el defecto gentico. Los defec que en la actualidad la cantidad de muertes relacionadas
tos en el metabolismo de la vitamina D se tratan de mejor con fractura de cadera es igual a la de cncer de pecho.
manera al administrar el compuesto de actividad metab Existen varios factores de riesgo para la disminucin
lica, l,2 5 (O H )2D (calcitriol). Se han descrito varios defec de la masa sea con aumento concomitante de riesgo de
tos del receptor de la vitamina D, que incluyen la unin fractura ,32 pero la valoracin del factor de riesgo por s sola
anormal del ligando, la unin anormal del DNA y la tran constituye un pobre factor pronstico de osteoporosis. Los
sactivacin anormal de la maquinaria transcripcional en el factores de riesgo aceptados de disminucin de la masa sea
sitio regulatorio de los genes de respuesta de la vitamina D. incluyen hipogonadismo (ms a menudo el estado posme-
El defecto determina la conveniencia con que el paciente nopusico en mujeres, pero tambin hipogonadismo en
responder a las dosis farmacolgicas de calcitriol. hombres), incremento de la edad, antecedente familiar de
osteoporosis (aunque el gen o los genes implicados no se
conocen), hbitos corporales de delgadez, ascendencia cau
O steoporosis
csica o asitica, tabaquismo, alcoholismo, exceso de gluco
Se le considera una consecuencia inevitable de la edad y es corticoides (sndrome de Cushing o, con mayor frecuencia,
la enfermedad sea metablica ms frecuente en adultos. administracin exgena), hiperparatiroidismo, trastornos
La osteoporosis es una enfermedad silenciosa hasta que del metabolismo de la vitamina D, hipertiroidismo end-
ES TU D IO C A S O 21-5
Una nia de 6 aos de edad es llevada con el pediatra (normal, 20 a 57 ng/ml); y l,2 5 (O H )2 vitamina D inde
debido a que sus padres informan que su altura no se tectable a < 1 pg/ml (normal, 20 a 75 pg/ml).
desarrolla de la manera en que ellos piensan que debe
ra hacerlo (o como lo hizo su hermana de 8 aos) Preguntas
y sus piernas tienen aspecto arqueado. La paciente
toma leche y, ms all de su baja estatura y sus pier 1. Cul trastorno indican las pruebas preliminares de
nas arqueadas, tiene las caractersticas normales de sus laboratorio?
amigos de 6 aos. No toma medicamentos. Sus ante 2. Cul es el significado de las concentraciones de
cedentes familiares incluyen primos en la familia del 25(O H ) vitamina D y de l,2 5 (O H )2 vitamina D en
padre con un problema similar. El pediatra obtiene
las pruebas de laboratorio de seguimiento?
resultados de laboratorio que son notables para calcio,
7.2 mg/dl (normal, 8.5 a 10.2 mg/dl), con albmina, 3. Describa el error innato del metabolismo de esta
4.1 g/dl (normal 3.5 a 4.8 g/dl). En la radiografa de la paciente.
extremidad inferior se muestra arqueado de los huesos
4. Cul trastorno secundario recurrir si el tratamien
largos y desmineralizacin generalizada. Esto indica la
to de la vitamina D se interrumpe en una etapa pos
obtencin de otras pruebas de laboratorio, mismas que
terior de su vida?
revelan una PTH intacta elevada a 866 pg/ml (normal,
11 a 54 pg/ml); 2 5 (OH) vitamina D, normal a 35 ng/ml
CAPTULO 21 FUNCIN PARATIROIDEA Y CONTROL DE LA HOMEOSTASIS DEL CALCIO 471
CUADRO 21-2. PRU EBA S DE LABORATO RIO osteoporosis. Varias pruebas de laboratorio son tiles en el
Q U E SON TILES EN LA EV A LU A CI N DE diagnstico de osteoporosis u otros procesos patolgicos
PACIEN TES PARA D EN SID A D S E A BA JA O que tal vez ocasionen salud sea deficiente (cuadro 21- 2).
FRA CTU RA 3________________________________________________ La osteoporosis se diagnostica con base en una frac
tura que ocurre a un grado inapropiado de traumatismo
US, creatinina {osteopor tico, o fractura por fragilidad). Dichas fracturas
Bicarbonato no incluyen aquellas que suceden a un grado apropiado de
traumatismo. La ocurrencia de una primera fractura por
Calcio y albmina (o calcio ionizado)
fragilidad predice ms fracturas de este tipo. Es preferible
Fraccin de globulina (protena-albmina total) diagnosticar osteoporosis antes de la ocurrencia de una pri
Fosfatasa alcalina, fosfatasa alcalina especfica del mera fractura por fragilidad. Esto es posible al utilizar absor-
hueso, osteocalcina ciometra de rayos X de energa dual (DEXA, por sus siglas
en ingls) de la espina lumbar y la cadera. Esta tcnica, a la
TSH,' T,4 ___________________
libre
que se le suele conocer como densitometra mineral sea (o
Gonadotropinas, estradiol o testosterona densidad mineral sea o densidad sea), en esencia mide la
PTH intacta mineralizacin sea. Lo que DEXA mide en realidad son los
RSC, WBC diferencial gramos de calcio por centmetro cuadrado del rea seccional
transversal de hueso (g/cm2), es decir, no una densidad masa/
25-hidroxivitamina D volumen, o g/cm3 en absoluto; sin embargo, la terminologa
1,25 dihidroxivitamina D de densidad ha permanecido. El riesgo mnimo de fractura
Calcio urinario a las 24 horas en la vida sucede cuando la densidad sea est en su valor
mximo, por lo general alrededor de los 30 aos de edad
Otras pruebas de laboratorio de acuerdo con el perfil tanto en hombres como en mujeres, y se incrementa cuando
del paciente: PTHrP, cortisol libre urinario, electroforesis
se pierde masa sea (fig. 21-7). El diagnstico de osteoporo
proteica en suero, protena de Bence Jones
sis basado en la densitometra sea se establece al comparar
Radiografas del sitio del esqueleto en cuestin la densidad sea del paciente con el promedio de densidad
Densitometra mineral sea (DEXA) sea mxima correspondiente al grupo tnico y gnero en la
vida. Esto se informa como desviaciones estndar por arriba
Otros anlisis de acuerdo con el perfil del paciente
o debajo de la masa sea mxima, como una calificacin T
a Se enum eran las pruebas de laboratorio (no todas concluyentes) que ( + = arriba del promedio mximo en la vida; - = debajo del
son tiles en la determ inacin de insuficiencia renal, acidosis, hipercal promedio mximo en la vida). La densidad sea normal se
cem ia, aum en to de la fraccin de globulina, renovacin sea, funcin
encuentra por arriba de una calificacin T de -1 .0 . La osteo
tiroidea, hiperparatiroidism o, hipercalciuria, anem ia, pertinencia de
vitam ina D y otras dirigidas de m anera ms especfica a cualquier anor
porosis se indica por una calificacin T de - 2 .5 o menor.
m alidad encontrada o considerada. Un intermedio entre normal y osteoporosis, la osteopenia, se
diagnostica como una calificacin T entre - 1 .0 y -2 .5 .
La terapia de la osteoporosis est dirigida a un objetivo:
geno (en particular mujeres posmenopusicas) y algunas la prevencin de la fractura. El tratamiento debe incluir
malignidades (incluyendo la ausencia de metstasis sea). modificacin de factores de riesgo evitables, como el taba
Algunos de estos factores cuentan con terapias especficas, quismo, el estilo de vida sedentario, el alcohol excesivo y
en las que se pone nfasis en la importancia de la evalua la ingesta adecuada de calcio (por lo general, 1 5 0 0 mg por
cin y el tratamiento de las causas secundarias de la prdida da) y vitamina D (400 Ul/dia es el mnimo recomendado;
sea antes de tan slo comenzar con la terapia general para lo dosis ptima tal vez sea cercana a 800 a 1 0 0 0 Ul/da).
E S T U D IO D E C A S O 21-6
La terapia llega a incluir prevencin de osteoporosis y tra medidas para disminuir el riesgo de cada, como andadores,
tamiento de la osteoporosis establecida. El objetivo de la barandales, luces nocturnas y almohadillas para la cadera.
prevencin de la osteoporosis es intervenir antes de que
exista prdida importante de masa sea. Por lo general, las RESUM EN
terapias farmacolgicas utilizadas con mayor frecuencia se
clasifican como antirresortivas, ya que inhiben la resorcin Se revisaron los componentes clave de la homeostasis y el
sea mediada por osteoclastos .28-29 Estos frmacos incluyen metabolismo del calcio, as como los principales sistemas
los bisfosfonatos (alendronato y risedronato), el modulador orgnicos y hormonas implicados en la regulacin del cal
receptor de estrgeno selectivo (raloxifeno), el reemplazo cio sanguneo. En este captulo se abordaron los estados
hormonal gonadal (estrgeno progestina en mujeres y patolgicos de hipercalcemia e hipocalcemia y se les rela
testosterona en hombres) y la calcitonina. La teriparatida cion como los mismos sistemas orgnicos y hormonas,
(PTH 3 recombinante humana), lanzada en fecha recien en tanto se incorpor al anlisis los factores genticos y
te, es el primer agente disponible para el tratamiento de ambientales que afectan la homeostasis del calcio. Se estu
osteoporosis que funciona a travs de la estimulacin diaron, tambin, varios estados patolgicos vinculados con
directa de la formacin sea mediada por osteoblastos .30 La los sistemas orgnicos y la fisiologa endocrina, adems de
experiencia con la teriparatida es limitada hasta el momen varios frmacos que es posible utilizar para tratar estos
to. Las contraindicaciones para la teriparatida incluyen trastornos. La esperanza de los autores es que este breve
hipercalcemia; hiperparatiroidismo; falta de cierre epifisa- resumen ayude al lector a relacionarse de m ejor manera
rio (nios); y osteosarcoma, un raro cncer seo. con el cuidado del paciente con respecto a problemas de la
La parte del tratamiento de la osteoporosis debe incluir homeostasis del calcio.
anlisis sobre la prevencin de caldas y recomendacin de
P R E G U N T A S DE R E P A S O
1. Cules hormonas principales participan en la regula 5. Cul es la mejor prueba sangunea para determinar
cin fisiolgica normal de la homeostasis del calcio? la pertinencia de vitamina D?
2. Cules rganos principales estn implicados en el 6. Cul hormona es ms probable que sea producida
mantenimiento de la homeostasis del calcio? por cnceres y cause hipercalcemia relacionada con
cncer? En este trastorno, la PTH est elevada, nor
3. Cul tejido participa en la produccin del metabolito
mal o suprimida?
activo de la vitamina D?
7. Cul hormona es ms probable que sea producida
4. Cules son las fuentes principales de vitamina D?
por enfermedades granulomatosas o trastornos linfoi-
des y cause hipercalcemia? En este trastorno, la PTH
est elevada, normal o suprimida?
CAPTULO 21 FUNCIN PARATIROIDEA Y CONTROL DE LA HOMEOSTASIS DEL CALCIO 473
8. Dnde se localiza el defecto en el hiperparatiroidismo 12. Cules clulas del hueso son responsables de la
primario? Y en el hiperparatiroidismo secundario? resorcin sea? Y de la formacin sea?
9. Cul es el riesgo principal de hipercalciuria (aumen 13. Cul es la enfermedad sea metablica mas preva-
to de la excrecin urinaria de calcio)? Cmo se mide lente en Estados Unidos?
la hipercalciuria?
14. M encione tres categoras de frmacos que llegan a
10. Cul es la causa ms frecuente de hipoparatiroi inhibir la resorcin sea en pacientes osteoporticos.
dismo?
15. M encione el nico frmaco aprobado en la actualidad
11. Cules son los dos tipos de hueso? Cul se pierde para el tratamiento de osteoporosis grave que estimu
con mayor rapidez en respuesta al hipogonadismo y a la de manera directa la formacin sea (es decir, no se
la terapia con glucocorticoides? trata de un medicamento antirresortivo).
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Funcin heptica
Edward P. Fody
C O N T E N I D O D E L C A P T U L O
O B J E T I V O S
Al completar este captulo, el laboratorista clnico Clasificar los tres tipos de ictericia y analizar las
podr: causas.
Hacer el diagrama de la anatoma del hgado. Explicar los principios de las pruebas para la bili
Explicar las funciones fisiolgicas del hgado para rrubina.
incluir secrecin de la bilis, actividad sinttica y Identificar las enzimas ms comunes usadas en la
desintoxicacin. evaluacin de la enfermedad hepatobiliar.
Analizar los trastornos bsicos del hgado y las Diferenciar los diversos tipos de hepatitis para
pruebas de laboratorio que pueden realizarse para incluir causa (es decir, bacteria o virus), transmi
diagnosticarlos. sin, ocurrencia, nombre alterno, fisiologa, diag
Evaluar la informacin para determinar cualquier nstico y tratamiento.
trastorno, considerando los datos clnicos del
paciente.
T E R M I N O S C L A V E
475
476 PARTE III VALORACIN DE LAS FUNCIONES DEL SISTEMA ORGNICO
Rama de la
vena portal
Espacio inter heptica
lobular del Rama de
rea portal o la arteria
espacio de heptica
Kiernan
Conducto biliar
Lbulo heptico
Cordones hepticos
Sinusoides
Vena
central
FIGURA 22-2. Lbulo heptico (vsta panormica) (Fotografa cortesa de James Furlong, MD.)
CAPTULO 22 FUNCIN HEPTICA 477
hepticas (hepatocitos) irradiados desde una vena central. rojos antiguos son fagocitados por el sistema reticuloen-
El lmite de cada lbulo est formado por un tracto portal dotelial, sobre todo en el bazo, el hgado y la mdula sea.
compuesto de tejido conectivo que contiene una rama de Cerca de 80% de la bilirrubina formada diariamente proviene
la arteria heptica, de la vena portal y un conducto biliar. de la degradacin de la hemoglobina. El resto proviene de
Entre los cordones de las clulas hepticas se encuentran la destruccin de las protenas que contienen hemo (mio
espacios vasculares, llamados sinusoides, que estn alinea globina, citocromos, catalasa) y del catabolismo del hemo
dos por clulas endoteliales y de Kupffer. Estos espacios (hg. 22-3).
reciben sangre de las ramas pequeas de la arteria heptica Cuando se destruye la hemoglobina, el cuerpo recicla
y la vena portal, que estn localizadas en los tractos porta parte de la protena (globina). El hierro entra a los almace
les. Las clulas de Kupffer son macrfagos fagocticos capa nes de hierro del cuerpo y tambin se recicla. La porfirina
ces de ingerir bacterias u otro material extrao desde la
sangre que uye a travs de los sinusoides. La sangre desde COOH
los sinusoides drena dentro de las venas centrales (vnula I
heptica) y luego hacia las venas hepticas y la vena cava CH2
inferior. Los canalillos biliares primarios son canalizacio
nes, de 1 a 2 mm de ancho, localizados entre los hepatoci
tos. Los canalillos biliares se interconectan extensamente
e incrementan su tamao hasta que se conectan con los
conductos biliares ms grandes en los tractos portales .2,3
FISIOLOGA
ch 2 ch 3 CH
El hgado realiza varios centenares de funciones conocidas II
HEMO CH2
cada da, incluyendo numerosas funciones metablicas,
secretoras y excretoras. La prdida total del hgado suele
ocasionar la muerte por hipoglucemia en 24 h. Aunque
existen muchas funciones hepticas, en este captulo se
analizan las ms importantes en la patologa del hgado.
se rompe como un producto de desecho y se excreta. Esta Un adulto sano produce un total de 200 a 300 mg de
accin de divisin del anillo de porfirina y la liberacin de bilirrubina al da. Para eliminar esta cantidad de bilirrubi
hierro y globulina forma biliverdina, que se reduce fcil na del cuerpo se requiere un hgado con funcionamiento
mente a bilirrubina. normal. Esta funcin excretora requiere que la bilirrubi
La bilirrubina es transportada al hgado en el torrente na est en la forma conjugada; es decir, el diglucurnido
sanguneo ligada a protenas, principalmente la albmi soluble en agua. Casi toda la bilirrubina formada se eli
na. Luego es separada de la albmina y capturada por las mina en las heces, y una pequea cantidad del producto
clulas hepticas. Dos protenas no albminas, aisladas del incoloro urobilingeno se excreta por la orina. Bajo cir
citoplasma celular heptico y designadas Y y Z, cuentan cunstancias normales, en el suero se encuentra una con
para la unin intracelular y el transporte de la bilirrubina. centracin baja de bilirrubina (de 0.2 a 1.0 mg/dl), casi
La conjugacin (esterificacin) de la bilirrubina ocurre en toda en forma no conjugada. Un porcentaje pequeo (0.2
el retculo endoplsmico del hepatocito. Una enzima, la mg/dl) de esta bilirrubina total existe en el suero normal
uridildifosfato glucuronil transferasa (UDPGT), transfie en forma conjugada .8
re una molcula de cido glucurnico a cada una de las Cuando aumenta la concentracin de bilirrubina en la
dos cadenas del lado del cido propinico en bilirrubina, sangre, el pigmento empieza a ser depositado en la escle
convirtiendo la bilirrubina en un ster diglucurnido. Este rtica y en la piel. Esta pigmentacin amarillenta en estas
producto, diglucurnido de bilirrubina, es mencionado partes es conocida como ictericia.9-10
como bilirrubina conjugada. La bilirrubina conjugada, que La ictericia puede deberse a varios mecanismos fisiopa-
es soluble en agua, es secretada a partir de la clula hep tolgicos. Por ejemplo, puede haber un incremento en la
tica en los canalillos biliares y luego pasa con el resto de carga de bilirrubina en la clula heptica o una perturba
la bilis a los conductos biliares ms grandes y eventual cin en la captacin y transporte de la bilirrubina dentro
mente en el intestino. En la porcin mas baja del tracto de esta clula. Adems, puede haber defectos en la con
intestinal, sobre todo en el colon, las enzimas presentes en jugacin o excrecin de la bilirrubina dentro de la bilis.
las bacterias intestinales actan sobre los pigmentos bilia Pueden surgir dificultades adicionales debido a la obstruc
res. El primer producto de esta reaccin es la mesobilirru- cin de los grandes conductos de la bilis antes de que la
bina, que es reducida a la forma mesobilirrubingeno y en bilirrubina alcance el intestino. Varias clasificaciones de
seguida en urobilingeno, un producto incoloro. La oxida ictericia se encuentran en la literatura. Una de las que se
cin del urobilingeno produce la urobilina, un pigmento usan con ms frecuencia est basada en el sitio en que tal
de color rojo castao, que es excretado en las heces fecales. vez se encuentre la anormalidad fisiolgica o anatmica.
Una pequea porcin de urobilingeno es reabsorbida en En esta clasificacin, existen tres tipos predominantes de
la circulacin portal y regresado al hgado, donde se excre ictericia: preheptica, heptica y posheptica .9
ta de nuevo en la bilis. Sin embargo, una pequea cantidad La ictericia preheptica se produce cuando una cantidad
permanece en la sangre. Este urobilingeno es finalmente excesiva de bilirrubina se presenta en el hgado para su
filtrado por el rin y excretado en la orina (fig. 22-4). metabolismo, como en la anemia hemoltica. Este tipo de
ictericia se caracteriza por hiperbilirrubinemia no conjuga
da. Sin embargo, los niveles de bilirrubina sricos rara vez
exceden los 5 mg/dl, porque el hgado normal es capaz de
Hemoglobina manejar casi todo el exceso de carga. La bilirrubina no con
Sistema fagoctico mononuclear jugada es insoluble en agua y se liga a la albmina para que
,r (principalmente el bazo) el rin no la filtre fuera de la sangre. Por lo tanto, la bili
Bilirrubina rrubina no aparecer en la orina en este tipo de ictericia.
El porcentaje ms grande de pacientes tiene icteri
| Sangre
Rin cia heptica. sta puede surgir a partir de problemas en
Bilirrubina-aibmina 'Urobilingeno la captacin celular, conjugacin defectuosa o secrecin
| H gado-<------------------- urinario anormal de la bilirrubina por parte de la clula heptica .10
Bilirrubina intracelular El sndrome de Gilbert es un trastorno relativamente
^ Hgado comn caracterizado por la captura celular de bilirrubina.
Diglucurnido de bilirrubina Los individuos afectados no tienen sntomas, pero pueden
presentar ictericia leve. El nivel elevado de bilirrubina es
^ Intestino Sangre
menos de 3 mg/100 mi y no es conjugada. El sndrome
Diglucurnido de bilirrubina portal
de Crigler-Najjar es un trastorno ms serio causado por
+
la deficiencia de la enzima UDPGT. Se han descrito dos
Bilirrubina
tipos. El I, en que existe una completa ausencia de la enzi
,, Bacteria intestinal ma, es raro. Se forma bilirrubina no conjugada, y la bilis
Urobilingeno-------------------- es incolora. Este tipo es uniformemente fatal. En el tipo II,
1
i Urobilina el sndrome de Crigler-Najjar, hay una deficiencia menos
t I grave de la enzima y se forma una parte de bilirrubina con
Excrecin fecal jugada. El sndrome de Dubin-Johnson y el de Rotor son
FIGURA 22-4, Metabolismo de la bilirrubina. dos trastornos hereditarios caracterizados por hiperbili-
CAPTULO 22 FUNCIN HEPTICA 479
rrubinemia conjugada a partir de una excrecin defectuo La grasa se forma a partir de carbohidratos en el hgado
sa por parte de la clula heptica. Cualquier causa de dao cuando la nutricin es adecuada y la demanda de glucosa
grave hepatocelular tambin interfiere con la captacin, se satisface con las fuentes dietticas. El hgado tambin
conjugacin o secrecin de la bilirrubina. Esto conduci desempea un papel clave en el metabolismo de las grasas.
r tanto a la hiperbilirrubinemia no conjugada como a la Es el principal sitio para la eliminacin de los remanentes
conjugada .11'16 del quilom icrn y para la conversin de acetil CoA en ci
La ictericia posheptica se debe a una excrecin de bili dos grasos, triglicridos y colesterol. En el hgado tambin
rrubina defectuosa causada por la obstruccin mecnica ocurre un metabolismo adicional del colesterol en cidos
del flujo biliar dentro del intestino. Puede deberse a clculos biliares. Las lipoprotenas de muy baja densidad, que son
biliares o a un tumor. Cuando la bilis deja de fluir en el las responsables de transportar triglicridos dentro de los
intestino, hay un incremento en el nivel srico de la bili tejidos, son sintetizadas principalmente en el hgado, en el
rrubina conjugada, y las heces pierden su fuente de pig que tambin se producen las lipoprotenas de alta densi
mentacin normal y adquieren el color de la arcilla. La dad, como los fosfolpidos .20
bilirrubina conjugada aparece en la orina, y los niveles de La formacin de cuerpos cetnicos ocurre casi en
urobilingeno urinario disminuyen .17 Las diversas prue exclusiva en el hgado. Cuando la demanda de la gluco
bas de laboratorio que ayudan a realizar la distincin entre neognesis agota el oxaloacetato y la acetil-CoA no pue
las diferentes causas de la ictericia se analizan en pginas de convertirse lo suficientemente rpido en citrato, esta
posteriores de este captulo. ltima se acumula y una deciclasa en el hgado libera los
cuerpos cetnicos en la sangre .21
Actividad principal de sntesis El hgado es el sitio de almacenamiento de todas las
vitaminas solubles en grasa (A, D, E y K) y de varias vita
Entre las muchas y diversas funciones metablicas llevadas minas solubles en agua, como la B12. Otra funcin rela
a cabo por el hgado est la sntesis de varios compuestos cionada con vitaminas es la conversin del caroteno en
biolgicos importantes, incluidos protenas, carbohidratos vitamina A.
y lpidos. El hgado desempea un papel importante en la El hgado es la fuente de somatomedina (un factor pare
produccin de protena plasmtica, sintetizando albmina cido a la insulina que media la actividad de la hormona del
y casi todas las a - y (i-globulinas. Todos los factores de la crecimiento) y angiotensingeno, y es un sitio importante
coagulacin sangunea (excepto el V III) se sintetizan en de limpieza metablica de muchas otras hormonas. Como
el hgado. Adems, la desaminacin del glutamato en el fuente de transferrina, ceruplasmina, y metalotionena, el
hgado es la fuente principal de amoniaco, que entonces hgado desempea un papel importante en el transporte,
se convierte en urea. almacenamiento y metabolismo del hierro, el cobre y otros
La sntesis y el metabolismo de los carbohidratos tam m etales .22
bin est centrada en el hgado. La glucosa se convierte Las clulas hepticas sintetizan muchas enzimas, pero
en glucgeno, del que se almacena una parte en el hgado no todas resultan tiles en el diagnstico de los trastor
y ms tarde se reconvierte a glucosa, si es necesario. Una nos hepatobiliares. Entre las enzimas que se han usado
funcin heptica importante adicional es la gluconeogne con frecuencia estn la aspartato aminotransferasa (AST,
sis de los aminocidos .18'19 o glutmico-oxaloactico transferasa srica [SGOT]) y
ES T U D IO D E C A S O 22-1
Se obtuvieron los siguientes resultados de la prueba de CUADRO 22-1.1 DEL ESTUDIO DE CASO.
laboratorio de una paciente con ictericia grave, dolor RESULTADOS DE LABORATORIO
abdominal del cuadrante superior derecho, fiebre y
Fosfatasa alcalina srica 4 veces ms que lo normal
escalofros (cuadro 22-1.1 del Estudio de caso).
Colesterol srico Incrementado
Preguntas AST (SGOT) Normal o ligeramente
incrementado
1. Cul es la causa ms probable de ictericia en este
paciente? 5'-Nudeotidasa Incrementado
Bilirrubina total srica 25 mg/dl
Bilirrubina conjugada 19 mg/dl
Tiempo de protrombina Prolongado pero mejora con
una inyeccin de vitamina K
480 PARTE l!l VALORACIN DE LAS FUNCIONES DEL SISTEMA ORGNICO
la alanina aminotransferasa (ALT, o glutmico-pirvico Aunque todos los casos de ictericia se deben a la hiper
transaminasa srica [SG PT]), que escapa de las clulas bilirrubinemia, no todos son causados por disfuncin
hepticas daadas al plasma; la fosfatasa alcalina (ALP) heptica. Aunque casi todos los casos de ictericia estn
y la 5'-nucleotidasa (5N T), que son inducidas o libera relacionados con trastornos hepticos, la hiperbibrrubine-
das cuando la membrana canicular est daada y ocurre mia tambin puede tener su origen en la destruccin del
obstruccin biliar; y y-glutamiltransferasa (G G T), que eritrocito, o hemolisis, en pacientes con funcin heptica
aumenta en trastornos hepatocelulares y obstructivos .23 normal. La distincin entre enfermedad heptica y hemo-
ltica en el paciente que se presenta con ictericia es una
tarea importante para la cual el mdico que asiste depen
Desintoxicacin y m etabolism o de frm acos der en gran medida de los resultados del laboratorio. Esta
distincin se analiza de manera detallada ms adelante en
Debido a que el hgado se interpone entre la circulacin este captulo .2829
esplnica y la sangre sistmica, sirve para proteger al cuer La hipercarotenem ia, un desorden causado por la
po de sustancias potencialmente dainas absorbidas desde ingestin excesiva de vitamina A, puede producir una
el tracto intestinal y derivados txicos del metabolismo. El decoloracin en la piel indistinguible de la debida a la
mecanismo ms importante en esta actividad de desintoxi hiperbilirrubinemia. Sin embargo, en la hipercarotenemia
cacin es el sistema metabolizador de frmacos del hga la esclertica no suele presentar decoloracin.
do. Este sistema es inducido por muchos frmacos (como
el fenobarbital) y otros compuestos extraos, y es respon
sable de muchos mecanismos de desintoxicacin, incluidas Cirrosis
la oxidacin, reduccin, hidrlisis, hidroxilacin, carboxila- La cirrosis se deriva de la palabra griega que significa
cin y desmetilacin. Estos mecanismos convierten muchos amarillo. Sin embargo, en el uso actual, cirrosis se refiere
compuestos comparativamente insolubles o nocivos en al proceso de cicatrizacin irreversible mediante el cual la
otras formas menos txicas o ms solubles en agua, de modo arquitectura heptica normal se transforma en una arqui
que las puede extraer el rin. Por ejemplo, el amoniaco, tectura nodular anormal. Una manera para clasificar la
una sustancia txica que se origina en el intestino median cirrosis es por la apariencia del hgado (es decir, por el
te la accin bactericida en aminocidos, es transportada al tamao de los nodulos). A estas condiciones se les deno
hgado por la vena portal y los hepatocitos la convierten mina cirrosis m acronodular y m icronodular, aunque se pre
en urea, un compuesto inocuo. sentan formas combinadas .30
La conjugacin con fragmentos de glicina, cido glu- Otra forma de clasificar la cirrosis es por etiologa. En
curnico, cido sulfrico, glutamina, acetato, cisterna y Estados Unidos, Canad y Europa Occidental, la causa
glutationa, ocurre ms en el citosol o en el retculo endo- principal de cirrosis es el abuso del alcohol, que conduce
plsmico liso. Este mecanismo es el modo de la excrecin a un tipo micronodular de cirrosis .3132 Otras causas son
de bilirrubina y cidos biliares. hemocromatosis, cirrosis posnecrtica (que ocurre como
una consecuencia tarda de la hepatitis) y cirrosis biliar
primaria (que es un desorden autoinmunitario). Exis
TRASTORNOS DEL HGADO ten otras etiologas poco comunes de cirrosis. Entre 10 y
20% de los casos no pueden clasificarse por etiologa. La
Ictericia cirrosis es un trastorno serio y una de las diez principa
La ictericia es la decoloracin amarillenta de la piel y la les causas de muerte en Estados Unidos; provoca muchas
esclertica debida a hiperbilirrubinemia. Aunque el lmite complicaciones.
superior del total de la bilirrubina srica es 1 mg/dl, la La hipertensin portal se produce cuando el hgado
ictericia slo es clnicamente evidente hasta que el nivel cirro tico obstruye el flujo sanguneo en la vena portal.
de bilirrubina excede los 2 o 3 mg/dl. En pacientes afroes Esto puede ocasionar esplenomegalia, que no siempre es
tadounidenses y asiticos, lo amarillento de la esclertica clnicamente significativa, y varices esofgicas, que pueden
puede ser la nica evidencia clnica de ictericia ;9 es uno de romperse y llevar a una hemorragia fatal. La habilidad de
los trastornos mdicos ms antiguos que se conoce, y se sntesis del hgado se reduce, causando hipoalbuminemia
ha descrito en textos griegos, romanos, chinos y hebreos y deficiencia de los factores de coagulacin, que pueden
antiguos. Hipcrates relacion la ictericia con disfuncin producir hemorragia. El fluido asctico puede acumular
heptica. se en el abdomen. Aunque algunos pacientes con cirrosis
Excepto en infantes, la hiperbilirrubinemia suele tole pueden tener una sobrevivencia prolongada, por lo gene
rarse bien y no produce efectos adversos clnicos serios. ral este diagnstico es amenazante .33,34
Sin embargo, en infantes la hiperbilirrubinemia (nive
les que exceden 15 a 20 mg/dl), puede relacionarse con Tumores
kem cteru s, trastorno serio del sistema nervioso central
inmaduro que se debe a niveles aumentados de bilirrubi En una base mundial, los tumores malignos primarios del
na. Esto slo ocurre en infantes porque el sistema nervioso hgado, conocidos como carcinom a hepatocelular, hepato-
central inmaduro no tiene una barrera cerebral sangunea carcinom a o hepatom a, son una causa importante de mor
bien desarrollada .24'27 talidad cancergena. En Estados Unidos, estos tumores
CAPTULO 22 FUNCIN HEPTICA 481
son poco comunes. Casi todos los casos de carcinoma el etanol. En cantidades pequeas, el alcohol puede causar
hepatocelular se relacionan con infecciones previas con lesiones leves, poco evidentes. El consumo ms exagerado
un virus de la hepatitis. Estos tumores son especialmen lleva a dao ms serio, y el abuso prolongado puede oca
te comunes en partes de frica y Asia, y poco frecuentes sionar cirrosis. Se desconoce la cantidad exacta de alcohol
en Estados Unidos y Europa Occidental. Sin embargo, a necesaria para causar cirrosis, y slo una minora de los
menudo el hgado se ve invadido de manera secundaria alcohlicos desarrolla esta condicin. Sin embargo, es una
por tumores que surgen en otros rganos. Son comunes causa importante de morbididad y mortalidad .32
los tumores metastsicos al hgado provenientes de sitios Ciertos frmacos pueden causar lesin heptica, inclui
primarios como pulmn, pncreas, tracto gastrointesti dos tranquilizantes como fenotiazinas, ciertos antibiti
nal u ovarios. Los tumores benignos del hgado son poco cos, agentes antineoplsicos y frmacos antiinflamatorios.
com unes .33,36 Por lo general, la lesin es leve y slo se manifiesta por la
Sea primario o secundario, cualquier tumor maligno elevacin de las pruebas de la funcin heptica, que regre
en el hgado es un hallazgo serio con un pronstico muy san a lo normal cuando se descontina el agente daino.
malo. Por lo general, la nica esperanza de cura depende Sin embargo, en ocasiones puede producir insuficiencia
de una extirpacin quirrgica, que suele ser imposible. heptica masiva o cirrosis .43'47
Los pacientes con tumores malignos en el hgado suelen Uno de los frmacos ms comunes que se relaciona con
tener una supervivencia medida en meses .3738 dao heptico serio es el acetaminofeno. Cuando se toma
en sobredosis masiva, es casi seguro que producir necro
Sndrom e de Reye sis heptica fatal, a menos que se reciba un tratamiento
rpido .4849
El sndrome de Reye es un trastorno de causa descono
cida, que afecta al hgado y surge ms en nios, aunque
EVALUACIN DE LA FUNCIN HEPTICA
se han reportado casos en adultos. Se trata de una forma
de destruccin heptica que suele ocurrir despus de la A n lisis de la bilirrubina
recuperacin de una infeccin viral, como la varicela o
influenza. Se ha relacionado con la terapia de la aspirina. R evisin brev e d e la m etodologa clsica
Poco despus de la infeccin, el paciente desarrolla anor Debido a que el ojo humano puede detectar su color
malidades neurolgicas, que incluyen ataques o coma. amarillo, las concentraciones de bilirrubina srica se han
Las funciones hepticas son siempre anormales, pero el estimado durante siglos. En 1883, Ehrlich describi por
nivel de bilirrubina no suele estar elevado. Sin tratamien primera vez una reaccin en muestras de orina de la for
to, puede presentarse deterioro clnico rpido, que con macin de un pigmento rojo o azul cuando la bilirrubina
duce a la m uerte .39'42 se acopl con una solucin de cido sulfanlico diazoti-
zado. En 1913, Van den Bergh aplic la reaccin de Ehr
Trastornos relacionados con frm acos lich a las bilirrubinas sricas. Tambin us alcohol como
acelerador para el acoplamiento de la bilirrubina al ci
y alcohol
do sulfanlico diazotizado. Malloy y Evelyn desarrollaron
Muchas sustancias qumicas y frmacos son txicos para la primera tcnica cuantitativa til para la bilirrubina en
el hgado. Esta toxicidad puede tomar la forma de necrosis 1937, mediante la aceleracin de la reaccin con una solu
heptica agobiante, que conduce a coma y muerte, o pue cin a 50% de metanol, tcnica que evit la precipitacin
de ser subclnica y pasar completamente inadvertida. De de protenas que era una fuente de error en el mtodo
todas las toxinas hepticas, tal vez la ms importante sea de Van den Bergh. En 1938, Jendrassik y Grof usaron un
ES T U D IO D E C A S O 22-2
Los siguientes resultados de una prueba de laboratorio CUADRO 22-2.1 DEL ESTUDIO DE CASO.
provienen de un paciente con prdida leve de peso y RESULTADOS DE LABORATORIO
nuseas y vmito, quien ms tarde desarroll ictericia e
hgado agrandado (cuadro 22-2.1 del Estudio de caso) Bilirrubina srica total 20 mg/dl
Bilirrubina conjugada 10 mg/dl
Preguntas Fosfatasa alcalina Ligeramente elevada
1. Qu proceso patolgico es ms probable en este AST (SGOT) Significativamente elevada
paciente? ALT (SGPT) M oderadam ente elevada
Albmina Disminuida
y-Globulina Incrementada
482 PARTE III VALORACIN DE LAS FUNCIONES DEL SISTEMA ORGNICO
procedimiento que contena cafena-benzoato-acetato las tcnicas disponibles darn resultados exactos para la
como acelerador para la reaccin azoacopladora. bilirrubina total, siempre que se disponga de estndares
La bilirrubina tambin se ha cuantificado con mto buenos. As, la eleccin del mtodo debe considerar si se
dos diferentes al acoplamiento al cido sulfanlico. Entre prefiere una tcnica manual sobre una automatizada, y si
estos mtodos se incluye una medicin directa de su color se determinar la bilirrubina directa. La eleccin de un
natural. Este principio se us con xito en el desarrollo mtodo para la bilirrubina directa plantea los problemas
del ndice de la ictericia, que fue introducido en 1919. La ms grandes porque no hay mtodo de referencia o estan
prueba incluye suero diluido con salina hasta que igua darizacin adecuada disponible.
le visualmente el color de una solucin de dicromato de Si se desea un procedimiento manual, entonces se
potasio a 0.01% . Al nmero de veces que debe diluirse el aconseja el mtodo de Evelyn-Malloy o el de Jendrassik-
suero se le denomina ndice de ictericia. Sin embargo, otras Grof. El segundo es ligeramente ms complejo pero tiene
sustancias en el suero, adems de la bilirrubina, como el ventajas sobre el mtodo de Evelyn-Malloy porque:
caroteno, la xantofila y la hemoglobina, tambin contribu
Es insensible a cambios del pEI en la muestra.
yen al ndice de ictericia, limitando su utilidad clnica. En
Es insensible a una variacin de 50 veces la concentra
la actualidad esta prueba es obsoleta. En aos recientes,
cin proteica de la muestra.
la bilirrubina se ha cuanticado por dilucin en una diso
Tiene sensibilidad adecuada, aun en concentraciones
lucin amortiguadora, seguida por la medicin directa de
bajas de bilirrubina.
la absorcin, usando un espectrofotmetro bien calibrado.
Tiene una turbiedad mnima y un blanco del suero rela
Este mtodo se usa en el laboratorio peditrico en recin
tivamente constante.
nacidos en quienes el suero no contiene todava lipocro-
No se ve afectado por la hemoglobina superior a 750
mas amarillos que interfieran. La hemolisis, que suele
mg/dl.
ser un problema en muestras peditricas, se elimina al
medir una segunda longitud de onda. La bilirrubinometra Desde que Jendrassik-Grof desarrollaron el procedi
no invasiva es ahora posible .50,51 miento original, se han realizado varias modificaciones
Con varios mtodos, se determin la existencia de dos para acelerar la reaccin, reducir la interferencia, etc.
tipos de bilirrubina .17 La fraccin que produjo un color Varios procedimientos de bilirrubina comercial ahora usan
en solucin acuosa en el mtodo de Van den Bergh fue un mtodo modificado de Jendrassik-Grof. Actualmente
descrita como bilirrubina directa, en tanto que la fraccin es una tcnica popular para los analizadores de muestreo
que produjo un color slo despus de que se agreg el discreto que hay en el mercado.
alcohol fue denominada bilirrubina indirecta. Durante Los mtodos recomendados para la determinacin de
muchos aos, los resultados de las determinaciones de la la bilirrubina total que usan todas las mquinas automa
bilirrubina se reportaron como directas e indirectas. Esta tizadas suelen dar resultados equivalentes. Por desgracia,
terminologa es ahora anticuada. Desde 1956 se conoce las tcnicas para la bilirrubina directa no son tan con
que la reaccin directa se da por el diglucurnido de bili- fiables. El m ejor mtodo para la medicin de pequeas
rrubina o bilirrubina conjugada, que es soluble en agua. cantidades de la bilirrubina srica conjugada es uno de
La reaccin indirecta, por lo tanto, est considerada por la investigacin que usa cromatografa lquida de alta reso
bilirrubina no conjugada, que es insoluble en agua pero se lucin, pero es demasiado difcil para uso rutinario en el
disuelve en alcohol para acoplarse con el reactivo diazo. laboratorio. Casi todos los laboratorios clnicos usan el
Las bilirrubinas directa e indirecta deben reportarse como mtodo de Evelyn-Malloy o el de Jendrassik-Grof. Debido
conjugada y no conjugada, respectivamente. Con mayor a que este captulo no permite una descripcin detallada
frecuencia, se reportan bilirrubina total y conjugada .32La de todas las metodologas de las pruebas de bilirrubina
bilirrubina no conjugada puede determinarse al restar la mencionadas antes, se destacan slo los principios ms
bilirrubina conjugada de la bilirrubina total. ampliamente usados para la medicin de la bilirrubina en
adultos y peditrica .52-55
S elecci n del m todo
Por desgracia, ningn mtodo nico para la determinacin M todo d e Jen d ra s sik -G ro f p a ra la
de bilirrubina reunir todos los requisitos del laboratorio d eterm in aci n d e la bilirru bina conjugada 56,57
clnico. Para la evaluacin de ictericia en recin nacidos el Principio. Se agrega suero o plasma a una solucin de ace
mtodo de la espectrofotometra directa es satisfactorio. tato de sodio y benzoato de sodio-cafena, a la que lue
Las fuentes de error en esta tcnica son la turbiedad, la go se le agrega cido sulfanlico diazotizado para formar
hemolisis y los pigmentos lipocromos amarillos. La hemo azobilirrubina prpura. El acetato de sodio amortigua el
lisis y la turbiedad pueden eliminarse al medir una segun pH de la reaccin de diazotizacin, mientras el benzoato
da longitud de onda, pero los lipocromos amarillos no se de sodio-cafena acelera el acoplamiento de la bilirrubina
pueden eliminar. Por lo tanto, este mtodo slo es vlido con el cido sulfanlico diazotizado. Esta reaccin es ter
para recin nacidos, cuyo suero no contiene lipocromos. minada con la adicin de cido ascrbico, que destruye el
En pacientes con ms de un mes, es necesario un procedi exceso del reactivo diazo. Se agrega una solucin tetrato
miento colorimtrico-diazo. La mayora de los investiga fuertemente alcalina para convertir la azobilirrubina pr
dores que han comparado los diferentes mtodos para la pura en azobilirrubina azul, y la intensidad del color se lee
medicin de bilirrubina estn de acuerdo en que casi todas a 600 nm.
CAPTULO 22 FUNCIN HEPTICA 483
R ecoleccin de la m uestra y alm acenam iento. Es cm. Debe usarse un control con un nivel cercano a los 20
preferible una muestra srica en ayunas, que no sea de mg/dl, que es un punto de decisin crtico para el clnico
naturaleza hemolizada ni lipmica. Antes de la prueba, el porque ser necesario el intercambio de transfusin si este
suero debe guardarse en la oscuridad y medirse en cuanto nivel se excede.
sea posible (antes de 2 o 3 h) despus de la recoleccin. Tambin deben tomarse precauciones como las men
El suero puede almacenarse en la oscuridad en un refri cionadas en el mtodo anterior para la recoleccin y el
gerador por ms de una semana, y en el congelador por almacenamiento de las muestras. Este mtodo es relativa
un mes sin un apreciable cambio en la concentracin de mente insensible a la hemolisis, que suele presentarse en
bilirrubina. las muestras obtenidas de infantes, debido a la dificultad
C om entarios y fuentes de error. La sangre normal en la tcnica de perforacin de la piel. Sin embargo, se ve
contiene bilirrubina no conjugada. Alguna bilirrubina de forma significativa afectada por la presencia de lipro-
conjugada se reporta como normal porque la metodolo cromos y, por lo tanto, slo puede ser usada en infantes de
ga disponible actual recupera parte de la bilirrubina total unos cuantos meses de edad .32
como un falso positivo. Sin embargo, los mejores mto Rango de referencia. Vase el cuadro 22-2.
dos de rutina mantienen este error tcnico a un mnimo y
reportan lmites superiores de lo normal de menos de 0.2 Urobilingeno en orina y heces
mg/dl para la bilirrubina srica conjugada. En este mtodo
se compensan los pigmentos lipocromos, que estn pre El urobilingeno es un producto final incoloro del meta
sentes en el suero de adultos y nios de varios meses o bolismo de la bilirrubina; las bacterias intestinales lo oxi
mayores. Sin embargo, una muestra hemolizada causar dan para convertirlo en urobilina, un pigmento caf. En el
una disminucin en la bilirrubina srica en este mtodo. individuo normal, parte del urobilingeno es excretado en
Adems, debido a que la lipemia causa interferencia, son las heces, y el resto es absorbido en la sangre portal y regre
preferibles las pruebas sanguneas en ayunas. Ocurre una sado al hgado. El rin excreta una pequea parte que no
prdida seria de bilirrubina despus de la exposicin a la es captada por los hepatocitos, como urobilingeno. En la
luz fluorescente y a la del sol indirecta y directa. Por tanto, patologa hemolitica y en la funcin celular defectuosa del
es imperativo que se mantenga al mnimo la exposicin de hgado, como la vista en la hepatitis, se encuentran niveles
muestras y estndares a la luz, y que las pruebas y estn incrementados de urobilingeno urinario. La ausencia de
dares se refrigeren en la oscuridad hasta que se realicen urobilingeno en la orina y en las heces suele verse ms a
las pruebas. menudo con obstruccin biliar completa. El urobilinge
Rango de referencia. Los rangos de referencia para no fecal tambin disminuye en la obstruccin biliar, como
infantes mayores de un mes y adultos se muestran en el en la enfermedad hepatocelular .6
cuadro 22 - 1. Casi todos los mtodos cuantitativos para el urobilin
geno se basan en la reaccin de esta sustancia con p-dime-
til-aminobenzaldehdo para formar un color rojo. Ehrlich
M todo espectrofotom trico directo p a ra la
describi esta reaccin por primera vez en 1901. A travs
determ in aci n d e la bilirru bina total en su ero .52'57 de los aos, se han hecho muchas modificaciones a este
Principio. La absorbancia de la bilirrubina en suero a 4 5 5 procedimiento para mejorar la especificidad. Terwen reali
nm es proporcional a su concentracin. El suero de los z las principales mejoras en 1925; us hidrxido ferroso
recin nacidos no contiene lipocromos, como carotenos, alcalino para reducir la urobilina a urobilingeno y agreg
que pueden incrementar la absorbancia a 4 5 5 nm. La acetato de sodio para eliminar la interferencia proveniente
absorbancia de la hemoglobina a 4 5 5 nm se corrige sus de compuestos como el indol. Watson, en 1936, introdujo
trayendo la absorbancia a 5 7 5 nm. el uso de ter de petrleo en lugar de ter de dietilo para la
M uestra. El suero se recolecta y almacena con la misma extraccin del urobilingeno para ayudar a la eliminacin
precaucin con que se mencion anteriormente para las de otras sustancias que interferan. Sin embargo, debido
muestras de adultos. a los estudios que indican que los mtodos cuantitativos
C om entarios y fuentes de error. Se introducir un error descritos no recuperan por completo el urobilingeno a
si la disolucin amortiguadora es turbia. Debido a que el partir de la orina, casi todo los laboratorios usan el mto
mtodo depende del coeficiente de extincin de la bilirru- do semicuantitativo, menos laborioso y ms rpido, que se
bina, todos los volmenes deben ser exactos y las curvetas describe a continuacin .58-62
deben tener superficie plana con una longitud exacta de 1
D eterm in a ci n del urobilingeno urin ario cia en diferentes formas conjugadas, sugiere que es posible
(sem icuantitativo) obtener ms informacin relevante de la disfuncin hep
Principio. El urobilingeno reacciona con p-dimetil-ami- tica examinando modelos de cidos biliares individuales y
nobenzaldehdo (reactivo de Ehrlich) para formar un color su estado de conjugacin. Por ejemplo, se ha sugerido que
rojo, que se mide entonces espectrofotomtricamente. Se la proporcin de los cidos biliares trihidroxi a dihidroxi en
agrega cido ascrbico como agente reductor para mantener suero diferenciar a los pacientes con ictericia obstructiva
al urobilingeno en el estado reducido. El uso de acetato de de los que padecen lesin hepatocelular, y que el diagnsti
sodio saturado detiene la reaccin y minimiza la combina co de cirrosis biliar primaria y colestasis extraheptica pue
cin de otros cromgenos con el reactivo de Ehrlich. de hacerse sobre la base de la proporcin entre los cidos
M uestra. Se recolecta orina fre sc a de 2 h. Esta muestra clicos a los quenodesoxiclicos. Sin embargo, el alto costo
debe mantenerse fra y protegida de la luz. de estas pruebas, el tiempo requerido para realizarlas y la
Comentarios y fuentes de error. controversia actual sobre su utilidad clnica lo convierte en
un mtodo poco satisfactorio para el uso rutinario.
1. Los resultados de esta prueba se reportan en unidades
Ehrlich en lugar de miligramos de urobilingeno, por
Pruebas enzimticas en la enfermedad heptica
que algunas sustancias, adems del urobilingeno, son
responsables de parte del desarrollo del color final. Cualquier lesin del hgado que produzca histlisis y
2. Entre otros compuestos, adems del urobilingeno, necrosis causa la liberacin de varias enzimas. La medi
que pueden presentarse en la orina y reaccionar con el cin de estas enzimas hepticas en el suero se usa para
reactivo de Ehrlich, se incluyen porfobilingeno, sul- evaluar la extensin del dao heptico y para diferenciar
fonamidas, procana y cido 5-hidroxiindolactico. La la patologa hepatocelular (funcional) de la obstructiva
bilirrubina formar un color verde y, por lo tanto, debe (mecnica). Los mtodos usados para medir estas enzi
eliminarse, como se ha descrito previamente. mas, los rangos de referencia normales y otros aspectos
3. Se necesita orina reciente, y la prueba debe realizarse generales de enzimologa se consideraron en el captulo
sin retraso para evitar la oxidacin del urobilingeno a 10, Enzimas. En este captulo, el anlisis se concentra en
urobilina. De manera similar, deben hacerse las lecturas los cambios caractersticos en los niveles enzimticos del
espectrofotomtricas dentro de los 5 min posteriores a suero vistos en varios trastornos hepticos.
la produccin del color, porque disminuye la intensi Entre las enzimas ms comunes ensayadas en la enfer
dad del color de urobilingeno-aldehdo. medad hepatobiliar estn la ALP y la aminotransferasa.
Las menos usadas son y-glutamiltransferasa, lactato deshi
Rango de referencia. Urobilingeno urinario, 0.1 a 1.0
drogenasa (LD) y sus isoenzimas, 5'-nucleotidasa, orniti-
unidades Ehrlich/2 h o 0.54 unidades Ehrlich/da (0.86
na carbamoiltransferasa y leucina aminopeptidasa .66'70
mmol/da); 1 unidad Ehrlich es un equivalente aproxima
do a 1 mg de urobilingeno.
Fosfatasa alcalina
La ALP se encuentra en diversos tejidos, pero se usa con
U robilingeno fe c a l
ms frecuencia en el diagnstico clnico de las enfermeda
La inspeccin visual del excremento suele bastar para des
des seas y hepticas. Incrementos de leves a moderados
cubrir urobilingeno disminuido. Sin embargo, es posible
en la actividad de la ALP ocurren en muchos pacientes con
la determinacin cuantitativa del urobilingeno fecal e
trastornos hepatocelulares, como la hepatitis y cirrosis, y
involucra el mismo principio antes descrito para la ori
aumentos pasajeros llegan a ocurrir en todos los tipos de
na .11 Se lleva a cabo en un extracto acuoso de excremento
patologa heptica. Las elevaciones ms notables ocurren
reciente, y cualquier urobilina presente se reduce a urobi-
en la obstruccin biliar extraheptica, como clculos en
lingeno por tratamiento con hidrxido ferroso alcalino
el conducto biliar comn o en la colestasis intraheptica,
antes de que se agregue el reactivo de Ehrlich. Un rango
como colestasis de frmacos o cirrosis biliar primaria. Esta
de 75 a 275 unidades Ehrlich/100 g de heces recientes o de
enzima casi siempre se incrementa en la patologa hep
75 a 4 0 0 unidades Ehrlich para una muestra a las 24 h se
tica metastsica y puede ser la nica anormalidad en las
considera como un rango de referencia norm al .62
pruebas rutinarias de la funcin heptica. Debido a que el
hueso es una fuente de enzimas, la enfermedad de Paget, la
M edicin de los cidos biliares en el suero metstasis sea y otras enfermedades relacionadas con el
Por desgracia, se requieren mtodos complejos para el incremento de la actividad osteoblstica pueden producir
anlisis de cidos biliares en el suero. Esto incluye extrac niveles altos de ALP en ausencia de la enfermedad hep
cin con solventes orgnicos, cromatografa de particin, tica. La enzima se encuentra en la placenta, y las mujeres
cromatografa de gases-espectroscopia de masa, espectro- embarazads tambin tienen niveles elevados .71'74
fotometra, absorcin de luz ultravioleta, fluorescencia,
radioinmunoensayo y mtodos de inmunoensayos enzim A m in otra nsfera sa s (transam inasas)
ticos .63'65 Aunque los niveles del cido biliar sean elevados La AST (SGOT) y la ALT (SGPT) son las enzimas ms usa
en la enfermedad heptica, la concentracin total es dema das para evaluar el dao hepatocelular. La AST (SGOT) se
siado variable y no da un valor de diagnstico para otras encuentra en todos los tejidos, sobre todo en el cardaco,
pruebas de la funcin heptica. La variabilidad de los tipos heptico y musculoesqueltico. La ALT (SGPT) se presen
de cidos biliares presentes en suero, junto con su existen ta por lo general en el hgado y, en menor grado, en el
CAPTULO 22 FUNCIN HEPTICA 485
rin y en el tejido musculoesqueltico, hacindola ms debido a varias lesiones tisulares. Sin embargo, la divisin
especfica para el hgado. de la LD en sus cinco isoenzimas especficas de tejido pro
En ausencia de necrosis aguda o isquemia de otros rga porciona informacin til acerca del sitio de origen de la
nos, los niveles elevados de aminotransferasa sugieren dao elevacin de la LD. La LD-5 se presenta ms en el hgado
hepatocelular. En hepatitis viral grave, que causa necrosis y el tejido musculoesqueltico. Una interpretacin de los
aguda extensa, se pueden encontrar niveles de aminotrans patrones de la isoenzima puede ser simple; una LD-5 eleva
ferasa del suero significativamente elevados, mientras que da se encuentra en un paciente con ictericia. Sin embargo,
slo se encuentran incrementos moderados en casos menos la similitud de los patrones de la isoenzima entre diferentes
graves. Es posible que enfermedades hepticas levemente estados de dao tisular puede necesitar el uso de pruebas
crnicas o focales, como hepatitis viral subclnica o anictri- de laboratorio adicionales para la interpretacin.
ca, cirrosis alcohlica, infiltracin granulomatosa e invasin Las elevaciones moderadas de los niveles de LD sri
tumoral, estn relacionadas con anormalidades slo leves. cos totales son comunes en la hepatitis viral aguda y en la
Elevaciones mnimas ocurren en la obstruccin biliar. cirrosis, mientras la patologa del tracto biliar puede pro
Por lo general, es til realizar determinaciones en ducir slo elevaciones leves. Niveles sricos elevados pue
serie de aminotransferasa cuando se sigue el curso de un den encontrarse en el carcinoma metastsico del hgado .88
paciente con hepatitis aguda o crnica. Sin embargo, debe
tomarse precaucin al interpretar estos niveles anorma Pruebas de medicin de la
les, porque las transaminasas sricas pueden disminuir en
capacidad sinttica del hgado
algunos pacientes con hepatitis grave a aguda, debido a la
liberacin exhaustiva de enzimas hepatocelulares .73'78 La medicin de los productos finales de la actividad sint
5'-Nucleotidasa. La 5'-nucleotidasa es otra fosfatasa; tica heptica puede usarse para evaluar la patologa hep
se origina en el hgado y se usa en clnica para determi tica. Aunque estas pruebas no son sensibles a un dao
nar si una elevacin de ALP es causada por enfermedad heptico mnimo, resultan tiles para cuantificar la grave
heptica u sea. Los niveles de la 5'-nucleotidasa y la ALP dad de la disfuncin heptica.
son elevados en la patologa heptica, mientras que en la Casi todas las protenas sricas se producen en el hga
enfermedad sea primaria, el nivel de la ALP es elevado, do. Una disminucin en la albmina srica puede ser
pero el de la 5'-nucleotidasa suele ser normal o slo estar resultado de la disminucin de la sntesis proteica hepti
de manera ligera. Esta enzima es mucho ms sensible a ca. El nivel de albmina se relaciona bien con la gravedad
la enfermedad heptica metastsica que la ALP porque, a del deterioro funcional y se encuentra con ms frecuencia
diferencia de sta, su nivel no es significativamente ele en la enfermedad heptica crnica que en la aguda. Las
vado en otras condiciones, como embarazo o infancia. a-globulinas sricas tambin tienden a disminuir con la
Adems, puede notarse algn incremento en la actividad enfermedad heptica crnica. Sin embargo, una a-globuli
enzimtica despus de la ciruga abdominal.79'81 na baja o ausente sugiere que la deficiencia en a-antitrip-
y-Glutamiltransferasa. La Y-gluiamillransferasa (GGT) sina es la causa de la enfermedad heptica crnica. Los
se encuentra en altas concentraciones en el rin y el hga niveles de y-globulina srica aumentan de forma temporal
do, y est elevada en el suero de la mayora de los pacientes en la enfermedad heptica aguda y permanecen elevados
con trastornos hepatobiliares. No es especfica de algn tipo en la enfermedad heptica crnica. Los mayores incre
de enfermedad heptica pero suele ser la primera prueba de mentos se encuentran en la hepatitis activa crnica y en
funcin heptica anormal mostrada en el suero de perso la cirrosis posnecrtica. En particular, los niveles de IgG e
nas que consumen grandes cantidades de alcohol. Niveles IgM estn elevados ms consistentem ente en la hepatitis
ms altos se han visto en la obstruccin biliar. Por lo tanto, activa crnica, de IgM en la cirrosis biliar primaria y de
es una prueba sensible de enfermedad heptica alcohlica. IgA en la cirrosis alcohlica.
La medicin de esta enzima tambin es til si hay ausencia El tiempo de protrombina suele incrementarse en la
de ictericia para la confirmacin de neoplasmas hepticos, enfermedad heptica porque el hgado no puede producir
y es una prueba til para confirmar la patologa heptica en cantidades adecuadas del factor de coagulacin o porque
pacientes con fosfatos alcalinos elevados.82'86 la interrupcin del flujo biliar ocasiona una inadecuada
Leucina aminopeptidasa. La leucina aminopeptida- absorcin de la vitamina K del intestino. La respuesta del
sa, distribuida ampliamente en los tejidos humanos, se tiempo de protrombina a la administracin de vitamina K
encuentra en el pncreas, la mucosa gstrica, el hgado, el tiene, por lo tanto, algn valor en diferenciar a la enferme
bazo, el cerebro, los intestinos grueso y delgado y el rin. dad intraheptica con disminucin en la capacidad de sn
La mayora de los investigadores creen que no es posible tesis de la obstruccin extraheptica con disminucin en la
utilizar la actividad srica de la leucina aminopeptidasa absorcin de las vitaminas solubles en grasa. Una marcada
para diferenciar la ictericia hepatocelular de la obstructi prolongacin del tiempo de protrombina indica una enfer
va. Ms an, la medicin de esta enzima no proporciona medad heptica difusa grave y un diagnstico m alo .89
informacin til que no pueda obtenerse con otras prue
bas, como la determinacin de la 5'-nucleotidasa o y-glu- Pruebas de medicin del
tamiltransferasa .87
m etabolism o del nitrgeno
Lactato deshidrogenasa. Por lo general, la medicin de la
LD srica total no es til para el diagnstico, porque la LD El hgado desempea un papel importante en la eli
est presente en todos los rganos y se libera en el suero minacin del amoniaco del torrente sanguneo y en la
486 PARTE III VALORACIN DE LAS FUNCIONES DEL SISTEMA ORGNICO
conversin de ste a urea para que lo puedan eliminar los de la hepatitis A se realiza por la deteccin serolgica de
riones. En la insuficiencia heptica, aumenta la cantidad sus anticuerpos. La produccin de los anticuerpos de la
de amoniaco y otras toxinas en el torrente sanguneo, lo hepatitis A (anti-HAV) representa una respuesta especfica
que puede llevar a coma heptico. En esta condicin, el del husped a la HA\( y se cree que confiere inmunidad
paciente se desorienta cada vez ms y gradualmente cae contra la reinfeccin. El uso del microscopio electrnico
en inconsciencia. La causa del coma heptico no est por inmunitario en el excremento y los radioinmunoensayos
completo definida, aunque se supone que el amoniaco para la deteccin de este anticuerpo sugieren que dife
desempea un papel importante. Sin embargo, la relacin rentes tipos de anticuerpo (tanto IgM como IgG) pueden
entre los niveles de amoniaco sanguneo y la gravedad aparecer en diversos momentos de la enfermedad. Los
del coma heptico es mala. Por lo tanto, el nivel de amo anticuerpos especficos del IgM llegan al punto mximo en
niaco es ms til cuando los pacientes sirven como su una semana y desaparecen antes de las ocho, mientras los
propio control, y se toman mediciones mltiples con el anticuerpos de IgG llegan al punto mximo en un perodo
tiem po .89'91 de uno a dos meses y persisten por aos.
La produccin de glutamina en una reaccin intracelu La documentacin de la positividad del anti-HAV indi
lar enzimtica entre el amoniaco y el cido glutmico pro ca exposicin a HAV, ausencia de capacidad de infeccin
porciona un mecanismo para eliminar el amoniaco desde y presencia de inmunidad a una infeccin recurrente. La
el sistema nervioso central. La elevacin de la CSF glu positividad del anti-HAV no implica hepatitis previa en
tamina ha sido descrita en la encefalopata heptica y en clnica evidente ni establece una relacin etiolgica entre
algunos casos del sndrome de Reye. Los niveles de gluta HAV y una enfermedad heptica aguda crnica. La demos
mina se miden por varios mtodos, incluidas la hidrlisis tracin de la seroconversin o prdida fecal del antgeno
cida y la fluorescencia inducida por lser.92 durante la fase aguda de la enfermedad es el nico mtodo
confiable para el establecimiento de una etiologa de HAV
Mucha gente tiene anticuerpos anti-HAV sin haber tenido
Hepatitis
una infeccin clnicamente evidente .93'98
Hepatitis significa inflamacin del hgado; puede ser
causada por virus, bacterias, parsitos, radiacin, frma H epatitis B
cos, qumicos, enfermedad autoinmunitaria o toxinas. A la hepatitis B tambin se le conoce como hepatitis sri
Entre los virus causantes de hepatitis estn los tipos A, B, ca o hepatitis de incubacin larga. Hay tres rutas principa
C, D (o delta) y E; los citomegalovirus; los virus de Eps- les de transmisin: parental, perinatal y sexual. Tambin
tein-Barr; y tal vez otros ms (cuadro 22-3). existe una ruta de transmisin fecal-oral extra, aunque
no es importante en cuanto a su base epidemiolgica.
H epatitis A Los pacientes infectados manifiestan la hepatitis B en casi
La hepatitis A, tambin conocida como hepatitis infecciosa todos los fluidos corporales, incluidos sangre, heces, ori
y hepatitis de incubacin corta, se transmite por lo comn na, saliva, semen, lgrimas y leche materna.
por alimentos o agua contaminados. Los datos epidemio El virus de la hepatitis B (HBV) es una partcula esf
lgicos han sugerido que un estado portador de hepatitis A rica de 42 nm, de doble concha, con un ncleo central de
es improbable o es de corta duracin. La hepatitis del virus cido desoxirribonucleico (DNA) rodeado por una capa
A (HAV) se ha identificado con microscopio electrnico proteica. Originalmente, a esta partcula, presente en baja
como una partcula esfrica (27 nm de ancho) que contie concentracin en el suero de los pacientes con hepatitis
ne RNA. Se ha cultivado recientemente in vitro. Sin embar viral activa, se le llam partcula de Dae. Despus de la
go, este sistema tejido-cultivo es ms una herramienta de infeccin con HBV, el ncleo del antgeno se sintetiza en
investigacin que una ayuda en el diagnstico. La prdida el ncleo de los hepatocitos y luego pasa al citoplasma de
fecal del antgeno de la hepatitis A es pasajera, y el antge la clula heptica, donde es rodeado por la capa protei
no desaparece del excremento despus de las elevaciones ca. En estudios serolgicos se ha identificado un antgeno
al punto mximo de las enzimas hepticas. El diagnstico presente en el centro del virus (HBcAg) y uno superficial
CUADRO 22-3. L O S V IR U S D E L A H E P A T IT IS
PERIODO DE M O DO PRIMARIO INFECCIN DIAGNSTICO
NUCLETIDO INCUBACIN DE TRANSM ISIN VACU N A CRNICA SERO L G ICO DISPONIBLE
presente en la protena de la superficie (HbsAg), adems parejas sexuales y contactos familiares de pacientes que
de otro denominado antgeno e (HbeAg).29 tienen hepatitis B. Aunque todava ocurre la transmisin
El curso clnico de la hepatitis B es demasiado variable. de sta por productos sanguneos, las pruebas de m onito
Casi dos terceras partes de los casos pueden ser asintom- reo efectivas hacen que ahora resulte raro. Los trabajadores
ticos o producir slo una ligera enfermedad, como gripe. del cuidado de la salud, incluido personal de laboratorio,
En la tercera parte restante, un paciente puede desarrollar pueden estar en mayor riesgo de desarrollar hepatitis B,
un sndrome como hepatitis con malestar, fiebres irregula dependiendo de su grado de exposicin a sangre y fluidos
res, sensibilidad en el cuadrante superior derecho, icteri corporales .100
cia y orina oscura .98'101 Hay una vacuna efectiva para la hepatitis B y tam
En casi 1% de los pacientes infectados, puede desarro bin un tratamiento con inmunoglobulina. La vacuna es
llarse el sndrome de la hepatitis fulminante. Se trata de muy efectiva para estimular la produccin del anticuerpo
una enfermedad clnica grave con alta mortalidad. superficial de la hepatitis B y, por tanto, deja al destinata
Alrededor de 90% de los pacientes infectados con HBV rio inmune. Despus de una exposicin aguda, como una
se recupera en un perodo de 6 meses. Esta recuperacin se lesin con arma punzocortante, el paciente debe recibir
manifiesta por el desarrollo de anticuerpos para el antge la vacuna de la hepatitis y la inmunoglobulina. Un tra
no superficial de la hepatitis B. Casi 10% de los pacientes tamiento similar es muy efectivo para la prevencin del
infectados desarrollaran hepatitis crnica, que se analiza desarrollo de la hepatitis en infantes con madres infecta
ms adelante en la seccin Hepatitis B crnica. das.
En todo el mundo, la infeccin con HBV es muy comn En especial, resulta importante que todos los trabaja
y suele darse al momento de nacer. En algunas reas, como dores del cuidado de la salud que estn expuestos a sangre
partes de frica, Asia y las islas del Pacfico, ms de 80% y fluidos corporales se apliquen la vacuna de la hepatitis.
de la poblacin en general muestra evidencia serolgica de Cada ao, miles de casos de hepatitis B ocurren entre los
una infeccin de hepatitis pasada. La proporcin de por trabajadores al cuidado de la salud, y varios cientos mue
tador crnico es alta. Tales personas estn en alto riesgo ren debido a sus complicaciones. Se trata de un mal que
de desarrollar cirrosis o carcinoma hepatocelular (hepa- se puede prevenir. Todos los que trabajan en el laboratorio
toma ).102 clnico deben aplicarse la vacuna de la hepatitis.
En Estados Unidos, menos de 10% de la poblacin
muestra evidencia serolgica de una infeccin pasada con H epatitis BsA g
HBV. La proporcin del portador crnico es menos de 1% La hepatitis BsAg (HBsAg), antes conocida como antgeno
de la poblacin general. Entre las personas con alto ries A ustralia y antgeno asociado a hepatitis (HAA), es el ant
go de infeccin en ese pas se incluye a homosexuales, geno para el que se realiza la prueba de rutina en todas
personas que abusan de drogas intravenosas, recin naci las unidades de sangre donadas. El HBsAg es el primer
dos de madres que son positivas al antgeno superficial marcador serolgico que aparece durante el desarrollo de
al momento del parto, inmigrantes de reas endmicas, y la hepatitis B aguda, e identifica a los pacientes infectados
ES T U D IO D E C A S O 22-3
Los siguientes resultados de laboratorio se obtuvieron CUADRO 22-3.1 DEL ESTUDIO DE CASO.
de una estudiante universitaria de 19 aos que consult RESULTADOS DEL LABORATORIO
el servicio de salud de la escuela debido a fatiga y falta
A LI \bvjr 1) Elevado
de apetito. Ella agrega que not recientemente que su
esclertica parece algo amarillenta y que su orina se ha AST (SGOT) Elevado
puesto oscura (cuadro 22-3.1 del estudio del caso). Fosfatasa alcalina Mnimamente elevada
LD Elevado
Preguntas
Bilirrubina srica 5 mg/dl
1. Cul es el diagnstico ms probable? Bilirrubina urinaria Incrementada
2. Qu factores adicionales deben buscarse en el his Anticuerpo de la Negativo
torial del paciente? hepatitis A (IgG)
Anticuerpo de la Positivo
3. Cul es el diagnstico?
hepatitis A (IgM)
Antigeno superficial Negativo
de la hepatitis B
Anticuerpo superficial Negativo
de la hepatitis B
Anticuerpo de la hepatitis C Negativo
488 PARTE III VALORACIN DE LAS FUNCIONES DEL SISTEMA ORGNICO
antes del comienzo de la enfermedad clnica ms confia presencia del HbeAg en los portadores HBsAg es un signo
blemente que cualquier otro. Aunque se ha demostrado de pronstico desfavorable y predice un desarrollo grave
que la capa proteica viral aislada no es infecciosa, debe y una enfermedad heptica crnica. De manera recproca,
considerarse que las personas que llevan crnicamente la presencia de anticuerpos anti-HBe en portadores indica
el BsAg en el suero tienen la capacidad de infectar por una baja capacidad de infeccin del suero (fig. 2 2-6). El
que no puede excluirse la presencia del virus intacto. Los antgeno e slo se detecta en suero cuando est presente el
pacientes que se recuperan de la hepatitis B desarrollan antgeno superficial (fig. 22-7).
el anti-HBs que sigue a la desaparicin del HBsAg en un
tiempo cercano al de la recuperacin clnica (fig. 22-5). Ensayo del D N A d e la hepatitis B viral
Este anticuerpo es comn en la poblacin en general y se Es posible detectar el DNA de la HBV real en la sangre usan
cree que confiere inmunidad para una futura reinfeccin do hibridacin cida nucleica o reacciones en cadena de la
con HBV 100 polimerasa. stas proporcionan una medicin ms sensible
que la serologa de la capacidad de infeccin y el progreso
H epatitis B cA g de la enfermedad. stas pueden usarse para vigilar la efec
El antgeno central, HBcAg, no se ha manifestado en el tividad de la terapia antiviral en pacientes con infeccin
plasma de las vctimas de la hepatitis o donadores de de HBV crnica, pero complementa los actuales ensayos
sangre. Este antgeno slo se ha visto en el ncleo de los serolgicos de HBY en lugar de reemplazarlos.103-105
hepatocitos durante una infeccin aguda con hepatitis B.
El anticuerpo del antgeno central, anti-HBc, suele desa H epatitis C
rrollarse antes que el anticuerpo del antgeno superficial Hasta hace muy poco, casos de hepatitis viral que no
(fig. 22-5). Un ensayo reciente del marcador serolgico podan identificarse como marcadores serolgicos tipo A
desarrollado para el uso general es una prueba del anti o B se registraban en la categora general de hepatitis no A
cuerpo IgM para el antgeno central de la hepatitis B. En la o no B. Recientemente, se identific que el agente respon
situacin clnica apropiada, este ensayo IgM ha demostra sable de casi 80% de estos casos es el cido ribonucleico
do ser especfico para la hepatitis B aguda. Estrechamente (RNA) que contiene el virus de la hepatitis C (HCV).
relacionada con el antgeno central se encuentra una poli- Ahora se dispone de pruebas para detectar a quienes
merasa DNA viral dependiente de DN. Esta enzima viral es tienen riesgo de transmitir la HCV Dichas pruebas detec
necesaria para la replicacin viral y se detecta en el suero tan anticuerpos para la HCV e identifican a la mayora de
en los inicios de la hepatitis viral, durante la fase de la los portadores infecciosos .106 Aunque an queda mucho
replicacin viral activa .98 por aprender sobre la hepatitis C, aparentemente se trans
mite de manera parental con mayor frecuencia. Tambin
H epatitis B eA g existen las rutas sexual y fecal-oral, y puede ser transmiti
Otro marcador de la infeccin con HBV es el antgeno e. da por transfusin sangunea .107-109
Al parecer, ste se relaciona de forma ms estrecha con Casi 3% de los donadores en Estados Unidos son posi
el centro que con la superficie de la partcula viral. La tivos para HCV Se cree que la mayora de estos pacien
presencia del antgeno e parece relacionarse bien con el tes son contagiosos. La prueba del anticuerpo de la HCV
numero de partculas virales infecciosas y con el grado de detectar a casi todos los pacientes infecciosos, aunque
capacidad de infeccin de los sueros positivos a HBsAg. La ocurren resultados que son falsos positivos .108
FIGURA 22-6. Ningn anticuerpo se forma contra el HBsAg. La persistencia del HbeAg implica una alta capacidad de
infeccin y, por lo general, un diagnstico desafortunado. Tal vez este paciente desarrolle cirrosis, a menos que ocurra la
seroconversin o que se le administre un tratamiento.
FIGURA 22-7. Serologfa de la hepatitis crnica con formacin de anticuerpos para HbeAg. Se trata de un signo
favorable y sugiere que la hepatitis crnica pueda resolverse. La recuperacin completa seria marcada por la desapa
ricin del HBsAg y la formacin de sus correspondientes anticuerpos.
490 PARTE III VALORACIN DE LAS FUNCIONES DEL SISTEMA ORGNICO
ES T U D IO D E C A S O 22-4
Los siguientes resultados se obtuvieron del paciente CUADRO 22-4.1 DEL ESTUDIO DE CASO.
del estudio de caso 22-2 (cuadro 2 2 -4 .1 del estudio de RESULTADOS DE LABORATORIO__________
caso).
Anticuerpo de la hepatitis A (IgG) Positivo
simultnea. Es probable que un paciente con esta coin- de incubacin es corto, por lo general entre 21 y 4 2 das.
feccin desarrolle complicaciones serias y tenga una tasa El virus puede ser detectado en las heces y la bilis alrede
ms alta de progresin a hepatitis crnica. Sin embargo, la dor de siete das despus de la infeccin.
mayora de los pacientes todava se recuperan. La infeccin con hepatitis E suele ser leve, excepto en
La otra posibilidad es la superinfeccin, en que un mujeres embarazadas, en quienes llega a ser una enferme
paciente que es portador de HBV crnico es superinfecta- dad devastadora. Las pruebas serolgicas estn disponi
do con la HDV Puede desarrollarse hepatitis fulminante o bles para el diagnstico .113,117'124
puede acelerarse la progresin hacia cirrosis. En el mundo, la hepatitis E es un virus tipo RNA rela
Por epidemiologa, la infeccin HDV parece concentrar cionado con hepatitis crnica y aguda.
se en los pases que se encuentran alrededor de los mares
Mediterrneo, Negro, y Rojo. En Estados Unidos, entre 10 y H epatitis cr n ica 102104'125'129
20% que son portadores HBV crnicos sern serolgicamen- Cuando hay evidencia de hepatitis, como niveles de transa
te positivos a HDV Los factores de riesgo para la infeccin mina srica elevados, durante ms de seis meses, se dice que
HDV suelen ser los mismos que para la infeccin HBV 111'116 existe hepatitis crnica. Varios agentes diferentes, incluidos
virus, drogas y alcohol, pueden causar hepatitis crnica. Sin
H epatitis E embargo, esta discusin se centra sobre las causas virales.
El virus de la hepatitis E que contiene RNA se transmite Alrededor de 10% de los casos de HBV progresan a hepa
por lo comn por la ruta fecal-oral. Esta enfermedad se titis crnica. La gravedad de la enfermedad inicial no tiene
encuentra sobre todo en pases subdesarrollados, aunque nada que ver con el riesgo del desarrollo de cronicidad. Por
se han reportado casos espordicos en Estados Unidos y lo tanto, muchos pacientes pueden desarrollar hepatitis cr
Europa Occidental, en especial entre viajeros. El perodo nica sin haber estado conscientes de que tenan una infec-
ES T U D IO D E C A S O 22-5
Un hombre de 36 aos consult a su mdico familiar debi CUADRO DEL ESTUDIO DE CASO 22-5.1.
do a anormalidades en la funcin heptica, que inicial- RESULTADOS DE LABORATORIO
mente fueron notadas durante un examen fsico previo a
Anticuerpo de la hepatitis A (IgG) Positivo
la contratacin de un seguro hace 6 meses. Se obtuvieron
los siguientes resultados de laboratorio, que son idnticos Anticuerpo de la hepatitis A (IgM) Negativo
a los obtenidos 6 meses antes (cuadro 22-5.1 del estudio Antgeno superficial de la Positivo
de caso). hepatitis B
Anticuerpo superficial de la Negativo
Preguntas
hepatitis B
1. Cul es el diagnstico ms probable? Anticuerpo central de la Positivo
2. Cul es el prediagnstico? hepatitis B (IgM)
Anticuerpo de la hepatitis C Negativo
3. Qu complicaciones pueden desarrollarse?
4. Qu pruebas adicionales deben realizarse?
CAPTULO 22 FUNCIN HEPTICA 491
P R E G U N T A S DE R E P A S O
1. La hiperbilirrubina en recin nacidos por lo general: 6. En pacientes con hepatitis B, el antgeno e de la hepa
a) Ocasiona un dao cerebral permanente. titis se encuentra en el suero slo cuando cul de los
b) Es causada por hemolisis. siguientes tambin est presente:
c) Es causada por atresia biliar. a ) Antgeno superficial.
d) Debe tratarse si los niveles de bilirrubina exceden b) Anticuerpo para el antgeno superficial.
los 5 mg/dl. c) Anticuerpo para la hepatitis E.
d) Anticuerpo de la hepatitis C (IgG).
2. La cirrosis se deriva de la palabra griega que significa:
e) Anticuerpo de la hepatitis C (IgM).
a) Amarillo.
b) Duro. 7. Cul de las siguientes enzimas se usa con ms fre
c) Largo. cuencia para establecer el origen heptico de una ele
d) Tumor. vada fosfatasa alcalina srica?
e) Hgado. a) Alanina aminotransferasa.
b) Aspartato aminotransferasa.
3. Todas las afirmaciones siguientes relacionadas con el
c) Ornitina carbamoiltransferasa.
urobilingeno son correctas EXCEPTO:
d ) y-Glutamil transpeptidasa.
a) Incolora.
e) Lactato deshidrogenasa.
b ) Es producido por acciones oxidativas de bacterias
intestinales. 8. Es probable que la infeccin por hepatitis E tenga
c) Experimenta circulacin enteroheptica signifi serias consecuencias en:
cativa. a) Nios.
d) Los niveles urinarios se incrementan en la obs b) Mujeres embarazadas.
truccin biliar. c) Viajeros en pases del tercer mundo.
e) Los niveles fecales disminuyen en la obstruccin d) Gente mayor
fecal. e) Pacientes que toman aspirina.
4. Niveles elevados de la glutamina CSF se encuentran 9. En el mundo, casi todos los tumores malignos prima
en pacientes con: rios del hgado se relacionan con:
a ) Encefalopata heptica. a) Alcoholismo.
b) Tumores cerebrales. b ) Clculos biliares.
c) Ataques cerebrales. c) Infeccin previa con un virus de la hepatitis.
d) Esquizofrenia. d) Sndrome de Reye.
e) Insuficiencia renal. e) Paludismo.
5. Qu forma de hepatitis es causada por un virus de 10. El reactivo de Ehrlich se usa en la medicin de:
DNA? a) Bilirrubina.
a ) Hepatitis A. b) Urobilingeno.
b) Hepatitis B. c) Amoniaco.
c) Hepatitis C. d) cidos biliares.
d) Hepatitis D.
e) Hepatitis E.
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CAPTULO 22 FUNCIN HEPTICA 493
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Fundn cardaca
Lynn R. Ingram
CONTENIDO DE L CAPTULO
O B J E T I V O S
496
CAPTULO 23 FUNCIN CARDACA 497
T R M I N O S C L A V E
parestesia o dolor en uno (usualmente el izquierdo) o la circulacin pulmonar con la sangre no oxigenada de la
ambos brazos. Suele agravarse con el ejercicio y se alivia circulacin sistmica, desviaciones, anormalidades en la
con el reposo. Con mayor frecuencia, el dolor es causado posicin o forma de las arterias aorta o pulmonar, o una
por falta de oxgeno en el miocardio, como resultado de combinacin de estas condiciones .6Existen muchas varia
un inadecuado flujo sanguneo coronario .1 ciones y grados de gravedad.
Una palpitacin puede ser el aumento en la percepcin Con frecuencia, se desconoce la etiologa de la cardio
de un latido normal o la sensacin de un ritmo cardaco pata congnita; sin embargo, al parecer en casi todos los
lento, rpido o irregular. La arritmia ms comn sentida defectos intervienen varios factores y reflejan una combi
como palpitaciones son los latidos ectpicos prematuros .1 nacin de influencias genticas y del entorno. Debido a que
Por lo general, stos se perciben como latidos fallidos, por el corazn se desarrolla en una etapa temprana de la vida
que el latido inicial es seguido por una pausa antes del embrionaria y a que est completamente formado y fun
prximo latido normal, que es ms bien enrgico debido cionando a las 10 semanas de gestacin, todos los defectos
al perodo de llenado diastlico ms largo. cardacos congnitos se desarrollan antes de las 10 semanas
Los sncopes ms comunes son de naturaleza vasova- del embarazo. Entre los factores relacionados ntimamente
gal (desmayos simples) y no resultado de una enfermedad con el desarrollo de la cardiopata congnita se incluyen
seria. Pueden deberse a una acumulacin venosa o provo las infecciones de rubola materna, abuso de alcohol por
cados por miedo o choque, y son acompaados a menudo parte de la madre, tratamiento con frmacos y radiacin, y
por vrtigo, nusea, sudoracin, zumbidos, sensacin de ciertas anormalidades genticas y de los cromosomas.
hundimiento y aburricin. El sincope cardiovascular suele Desde hace mucho tiempo se conoce que el virus de la
ser sbito y breve, y la variedad clsica es resultado de una rubola, el agente causante del sarampin alemn, es una
perturbacin del ritmo cardaco, adems de un ritmo car causa de los defectos cardacos congnitos. La infeccin
daco retardado. Sin darse cuenta, el paciente cae al suelo de la madre durante los tres primeros meses del embara
con pulso lento o ausente y, despus de pocos segundos, zo est relacionada con una incidencia alta de cardiopa
recupera la conciencia. A menudo, no hay secuelas .1 ta congnita en el beb. Al parecer, el virus atraviesa la
La fatiga es un sntoma cardaco comn, pero no espe placenta, entra a la circulacin fetal y daa al corazn en
cfico. El letargo est relacionado con insuficiencia carda desarrollo .4
ca, arritmia cardaca persistente y cardiopata ciantica. El sndrome del alcoholismo fetal tambin suele relacio
Puede deberse a una mala perfusin cerebral y perifrica, narse a defectos del corazn. El alcohol afecta el corazn
y a una oxigenacin insuficiente de la sangre .1 del feto porque interfiere directamente con su desarrollo.
El fluido retenido se acumula en pies y tobillos de Aunque el mecanismo teratognico exacto del sndrome
pacientes ambulatorios, y en el sacro de pacientes en del alcoholismo fetal sigue siendo desconocido,4se ha pro
cama. El edema relacionado con cardiopata a menudo est puesto que el alcohol es txico para las clulas cardacas
ausente por la maana debido a que el fluido es reabsor fetales y las destruye. Muchos frmacos teraputicos e ile
bido al acostarse, pero empeora progresivamente durante gales ingeridos por la madre pueden atravesar la placenta
el da. Cuando es grave, la pantorrilla y el muslo pueden para daar el corazn del feto.
volverse edematosos, y es posible que se desarrolle edema Las anormalidades cromosmicas estn relacionadas
abdominal o efusin pleural .1 con varios sndromes de desarrollo, muchos de los cuales
Una tos puede ser la primera queja en algunos pacien incluyen la cardiopata. El ejemplo mejor conocido es el
tes con congestin pulmonar. Una tos seca es la diferencia sndrome de Down (o sndrome de la trisoma 21), que
entre estos pacientes y los que tienen condiciones pulmo suele relacionarse con defectos septales de la aurcula .4
nares infecciosas. La hemoptisis ocurre en la insuficiencia Los sntomas de la cardiopata congnita pueden ser
cardaca congestiva, y es especialmente comn en pacien evidentes al nacer o en los primeros aos, o slo pueden
tes con estenosis mitral .1 evidenciarse hasta ms adelante en la vida. Entre los signos
La nicturia tambin es comn en pacientes con insufi y sntomas comunes de muchas enfermedades cardacas
ciencia cardaca congestiva. En pacientes con insuficiencia congnitas se incluyen cianosis, hipertensin pulmonar,
cardaca avanzada se observan anorexia, pesadez abdomi dedos morados, embolia o formacin de trombos, dismi
nal, sensibilidad en el cuadrante superior derecho y prdida nucin del crecimiento, o sncope .1 Las lesiones cardiacas
de peso, pero son raros en una cardiopata ligera o inicial. congnitas ms comunes son los defectos septales ventricu-
lares y auriculares, ductos arteriosos persistente, coarta
CARDIOPATA CONGNITA cin de la aorta, defectos valvulares y tetraloga de Fallot .1
Los defectos cardacos congnitos son la causa de casi 2% El defecto septal ventricular (DSV), comnmente cono
de todas las patologas del corazn ,4 y ocurren en cerca de cido como agujero en el corazn, es la malformacin car
8 % de los nacimientos vivos.5 Es predominante en varo daca congnita ms comn. En esta condicin, la sangre
nes, aunque algunas lesiones especficas ocurren con ms fluye por el defecto septal del ventrculo izquierdo al
frecuencia en las mujeres, y es una causa comn de muer derecho, causando que se bombee menos sangre desde el
te en el primer ao de vida. ventrculo izquierdo, y reduciendo la salida hacia la circu
La cardiopata congnita incluye defectos valvulares lacin sistmica. Ms sangre entra a la circulacin pulmo
que interfieren con el flujo normal de la sangre, defectos nar, la que sobrecarga y daa irreversiblemente a los vasos
spticos que permiten la mezcla de la sangre oxigenada de pulmonares, causando hipertensin pulmonar. Algunos
CAPTULO 23 FUNCIN CARDACA 499
DSV pequeos se cerrarn espontneamente, pero los DSV que son anatmicamente normales pero inmaduros porque
moderados o largos deben repararse con ciruga antes del les falta el mecanismo para cerrar. Estos bebs pueden ser
desarrollo de una hipertensin pulmonar grave.1 tratados con indometacina, que estimula la produccin de
Los defectos septales auriculares (DSA) suelen diagnos prostaglandina y el cierre del conducto; tambin es posible
ticarse por primera vez en la madurez. Esta anormalidad corregir ste quirrgicamente con un pequeo riesgo .1
causa la derivacin de izquierda a derecha de la sangre entre La coartacin de la aorta es un estrechamiento de la aor
la aurcula. La hipertensin pulmonar y la arritmia auricu ta en la insercin del ductus arteriosus. En casi todos los
lar son comunes cuando el paciente pasa de los 30 aos de casos, esta condicin se relaciona con una vlvula artica
edad, pero la mayora de los nios con esta condicin son bicspide, en lugar de la tricspide. Esta condicin pue
asintomticos. Un DSA significativo debe repararse quirr de permanecer asintomtica por muchos aos, y el trata
gicamente en cuanto sea posible despus del diagnstico .1 miento es la escisin quirrgica de la coartacin.
Los ductus arteriosus conectan la arteria pulmonar con Los problemas de la vlvula congnita se clasifican como
la aorta descendente. En la vida fetal, los ductus alejan la estenosis (estrechamiento de una vlvula que restringe el
sangre de la circulacin pulmonar y la llevan a la circula flujo hacia adelante de la sangre) o incompetencia valvular
cin sistmica, donde la sangre se vuelve a oxigenar cuando (una vlvula que no cierra por completo, permitiendo que
atraviesa la placenta. Al nacer, el alto contenido de oxgeno la sangre se filtre hacia atrs). Son comunes el prolapso de
en la sangre activa el cierre del ductus. Si est malformado la vlvula mitral, anormalmente agrandada, y hojas suel
o no contiene suficiente tejido elstico, no cerrar. Un duc tas de la vlvula que se inflan hacia atrs con presin .6La
tus persistente produce una desviacin continua de la aorta tetraloga de F allot es la anormalidad cardaca congnita
a la arteria pulmonar, ocasionando una insuficiencia car ciantica ms comn en nios que sobreviven el pero
daca izquierda grave (ductus persistentes). Muchas veces, do neonatal. Es una combinacin de cuatro defectos: DSV,
slo hay sntomas hasta ms adelante en la vida, cuando se obstruccin de la salida ventricular derecha, posiciona-
desarrollan insuficiencia cardaca o endocarditis. Los bebs miento anormal de la aorta anterior a la DSV e hipertrofia
prematuros suelen nacer con ductus arteriosus persistentes ventricular derecha (fig. 23-1).1 Esta combinacin de lesiones
ES T U D IO D E C A S O 23-1
Se evalu a una nia de 15 meses con un murmullo Se realiz cateterizacin cardaca y se encontr un
del corazn desde el nacimiento por infecciones pul defecto septal ventricular grande.
monares repetidas, deficiencia en el desarrollo, ciano
sis y dedos ligeramente amoratados de pies y manos. Preguntas
Ha estado en terapia con digitalis por recomendacin
mdica. Los rayos X mostraron un corazn moderada 1. Cmo afecta este defecto congnito a la circulacin
mente agrandado y una arteria pulmonar agrandada. Se del cuerpo?
obtuvieron los datos de laboratorio pertinentes. 2. Por qu aumentaron las mediciones de glbulos
rojos en esta paciente?
Protena total (6.0 a 8.3 g/dl) 5.4
3. Qu tratamiento ser sugerido para esta paciente?
Albm ina (3.5 a 5.2 g/dl) 3.0
Hemoglobina (14 a 18 g/dl) 19.2 4. Cul es el pronstico para este paciente?
lleva al incremento de la presin ventricular derecha y a dad arterial coronaria, las cardiomiopatas, la miocarditis,
la derivacin de derecha a izquierda de la sangre a tra la enfermedad valvular y las arritmias cardacas (cuadro
vs del DSV La circulacin pulmonar recibe una cantidad 23-2).
pequea de sangre no oxigenada del ventrculo derecho, La enfermedad arterial coronaria es la causa ms comn
y la circulacin sistmica recibe una cantidad ms grande de insuficiencia cardaca en Estados Unidos. El manejo y
de sangre mezclada, oxigenada y no oxigenada .6Los nios el pronstico de la insuficiencia cardaca congestiva cau
con esta condicin pueden presentarse con disnea, fatiga y sada por enfermedad arterial coronaria son desfavorables,
episodios hipxicos cuando hacen ejercicio. Es posible la con mortalidad a 5 aos de casi 50% .9 La aterosclerosis de
correccin quirrgica completa, aun en la infancia .1 las arterias coronarias conduce a isquemia, proceso que
reemplaza el msculo cardaco activo con tejido fibroso
INSUFICIENCIA CARDACA CONGESTIVA que no funciona como msculo cardaco. La oclusin de
los vasos cardacos reduce el flujo sanguneo y fuerza al CUADRO 23-3. CO N D ICIO N ES QUE
msculo cardaco en el metabolismo anaerbico, produ CO N TRIBU YEN A LA IN SU FICIEN CIA C A R D A C A
ciendo productos de desecho que pueden tambin daar CO N G ESTIVA ______________________________
las clulas tisulares. La disminucin de la masa muscular
cardaca incrementa la carga llevada por el tejido restante, Hipertensin
ocasionando aumento en la tensin y el dao cardaco. Enfermedades del tejido conectivo
La combinacin de estos factores resalta la gravedad de la
Anemia/policitemia
insuficiencia cardaca congestiva en isquemia.
Las cardiom iopatas son producto de una anormalidad Trastornos endocrinos
del msculo cardaco. Si el corazn no logra contraerse Mala nutricin
de manera eficiente, se dilata desproporcionadamente y lo
Drogas/alcohol
hace alargado y con paredes cardacas relativamente delga
das. Se clasifican como cardiomiopatas dilatadas, restric Obesidad
tivas o hipertrficas. Enfermedad pulmonar
Las cardiomiopatas dilatadas pueden ser el resultado
de una respuesta autoinmunitaria; enfermedad de vasos
sanguneos pequeos; o toxicidad miocardaca directa,
como la vista en la cardiomiopata inducida por el alco SNDROM E CORONARIO A G U D O
hol y cardiotoxicidad por antraciclina. Los sntomas que
La cardiopata isqumica incluye una progresin de condi
se presentan en la cardiomiopata dilatada son disnea y
ciones patolgicas entre las que se encuentran erosin y rotu
malestar en el pecho similar a la angina.
ra de las placas arteriales coronarias, activacin de plaquetas
Los pacientes con cardiomiopata restrictiva tienen pre
y trombos. A esta progresin se le denomina sndrome coro
sin diastlica aumentada, lo que ocasiona llenado inefi
nario agudo, y va de la angina inestable a la necrosis extensa
ciente de los ventrculos y menos distribucin de sangre
del tejido en el infarto del miocardio. El laboratorio clnico es
al cuerpo. Esta condicin puede causarse por amiloidosis,
critico en el diagnstico de estas condiciones, la valoracin
fibrosis endometrial, almacenamiento de glucgeno, fibro-
de la reperfusin despus de la terapia tromboltica, la clasifi
elastosis, infiltracin neoplsica y enfermedad colgeno-
cacin del infarto de acuerdo con su dimensin, la identifica
vascular.9 La hemocromatosis, una infiltracin de hierro
cin de nuevos infartos y la estratificacin del riesgo.10
en el tejido, tambin puede afectar el msculo cardaco
La enfermedad cardaca coronaria es causada por falta de
y conducir a la prdida de contractilidad y de la funcin
nutrientes y oxgeno que llega al msculo cardaco y oca
muscular.
siona isquemia del miocardio. La isquemia es la reduccin
La cardiomiopata hipertrfica se caracteriza por el
del suministro sanguneo a un rea del corazn, y suele ser
agrandamiento del septo ventricular, que est fuera de
resultado de aterosclerosis, trombosis, espasmos o embolis
proporcin con las otras paredes ventriculares y a menu
mos, pero tambin puede deberse a anemia, carboxihemo-
do es llamada hipertrofia septal asim trica. Al parecer, esta
globinemia o hipotensin, que causa la reduccin del flujo
condicin se hereda en casi todos los casos como un rasgo
sanguneo hacia el corazn. El incremento en la demanda
dominante autosmico. Puede ser resultado de la miocar
de oxgeno y nutrientes como resultado del ejercicio extre
ditis causada por infecciones, lesin inmunolgica al teji
mo o de tirotoxicosis tambin puede causar isquemia.
do, o puede ser idioptica. Tambin puede desarrollarse
Lo ms frecuente es que la isquemia sea resultado de
en pacientes con cardiopata valvular. Las malas funciones
arterias coronarias anormales, por lo general causadas por
valvulares alteran el volumen sanguneo que el corazn
una obstruccin en una o ms de estas arterias. La ate
debe regular. Tales pacientes progresarn a insuficiencia
rosclerosis es un engrosamiento y endurecimiento de las
cardaca a medida que los cambios del volumen sanguneo
paredes de la arteria causados por depsitos de placas de
alteran la carga de la sangre a los ventrculos y atrios.
colesterol-lpidos-calcio en el revestimiento de las arte
La arritm ia, o disfuncin del sistema cardaco de con
rias .11Los siguientes nueve factores de riesgo predisponen
duccin, tambin puede ocasionar insuficiencia cardaca
a los individuos a desarrollar estas placas arteriales:
congestiva. La arritmia puede deberse a isquemia, infarto,
infiltraciones, desequilibrios electrolticos o toxinas qu 1. Edad. La aterosclerosis puede desarrollarse al principio
micas. de la vida pero se vuelve un riesgo ms significativo con
Las indicaciones clnicas de la insuficiencia carda el aumento de la edad. Es ms comn hallarla despus
ca congestiva van de sntomas leves, que slo aparecen de los 40 aos y se encuentra casi universalmente en las
con el ejercicio, a condiciones ms avanzadas en que el personas de edad avanzada en el mundo occidental .11
corazn no funciona sin apoyo externo. La insuficiencia 2. Sexo. Los hombres tienden a verse ms afectados por la
cardaca congestiva se detecta rpidamente si involucra a aterosclerosis que las mujeres premenopusicas de una
un paciente con infarto del miocardio, angina, problemas edad comparable. Despus de la menopausia, las diferen
pulmonares o arritmia, pero se investiga con ms frecuen cias tienden a desaparecer. Se considera que las mujeres
cia debido a disnea, edema, tos o angina. Otros sntomas, estn protegidas por niveles elevados de colesterol de lipo
como intolerancia al ejercicio, fatiga, y debilidad, son protenas de alta densidad (HDL) hasta que los niveles de
comunes (cuadro 23-3). estrgeno descienden en la menopausia.4
502 PARTE III VALORACIN DE LAS FUNCIONES DEL SISTEMA ORGNICO
3. Antecedentes familiares. La aterosclerosis suele encon 9. Respuesta al estrs. Las personas agresivas, ambiciosas
trarse en miembros de la misma familia, pero an falta y compulsivas tienen casi el doble de riesgo de enfer
por mostrarse un modelo de herencia directo. Los esti medad coronaria que las personas que no muestran
los de vida familiar tienen un papel en este proceso, y estas caractersticas.
es difcil distinguir entre factores genticos y de estilo
de vida en la prediccin de la enfermedad arterial coro Sin importar la etiologa de la isquemia, existen tres
naria. Algunas condiciones se heredan directamente, consecuencias generales de la isquemia cardaca: insufi
como la hipercolesterolemia familiar y la hiperlipide ciencia cardaca congestiva, angina de pecho e infarto del
mia combinada familiar.1 miocardio (fig. 23-2). La insuficiencia cardaca congestiva
4. Hiperlipidemia. Se ha demostrado una fuerte relacin se origina cuando hay una reduccin en el suministro de
entre el incremento en la concentracin de colesterol oxgeno al msculo cardaco, que causa que ste deje de
srico y la aterosclerosis. Al bajar el colesterol srico, bombear la sangre eficientemente.
sobre todo la fraccin del colesterol de lipoprotena de La angina de pecho es un sntoma de inadecuada perfu
baja densidad (LDL), se ha demostrado que disminu sin del msculo cardaco, ocasionando dolor en el pecho.
ye la incidencia de la enfermedad arterial coronaria y La tpica angina de pecho ocurre con un incremento en
el progreso de la aterosclerosis coronaria .9 La relacin el ejercicio fsico o estrs, y se resuelve normalmente con
entre la formacin de placas y los niveles de triglicri descanso. En pacientes con enfermedad arterial coronaria,
dos no est bien definida. los vasos cardacos estrechados no permiten el aumento
5. Tabaquismo. Existe una relacin directa entre el nme del flujo sanguneo en el msculo cardaco en momen
ro de cigarros fumados y el riesgo de enfermedad arterial tos adicionales de tensin fsica o emocional, causando el
coronaria en hombres que se vincula con la disminu dolor. Otros tipos de angina son la variante, la nocturna
cin de los niveles de colesterol HDL, con el incremento y la inestable. La angina variante no est relacionada con
en los niveles de colesterol LDL y con el aumento en el ejercicio o aumento de estrs sino que es causada por
la adhesin de plaquetas, vasoconstriccin y aumento espasmos de una arteria coronaria. Suele tener una dura
del fibringeno y formacin de cogulos causados por el cin mayor que la angina normal, y el dolor es ms grave.
tabaquismo .9 Esta relacin no est bien definida en las La angina nocturna por lo general ocurre en pacientes con
mujeres o en personas que fuman pipa o puros. enfermedad coronaria grave y despierta a los pacientes del
6 . Hipertensin. Tanto la hipertensin sistlica como la sueo con un fuerte dolor de pecho. La angina inestable es
diastlica se relacionan con un aumento en el riesgo de la forma ms grave y el dolor suele presentarse al descan
aterosclerosis tanto en hombres como en mujeres. sar. A menudo, el dolor es provocado por un aumento leve
7. Estilo de vida sedentario. Se ha demostrado que el ejer en el ejercicio o estrs, y puede incluso ser iniciado por la
cicio regular ofrece alguna proteccin contra el desa ingestin de una comida sustanciosa. El dolor es de larga
rrollo de cardiopatas; por el contrario, un estilo de vida duracin y fuerte, y no responde bien o tan rpidamente a
sedentario es un factor de peso en el desarrollo de la car los tratamientos estndares. Muchos pacientes con angina
diopata coronaria. de pecho inestable progresarn rpidamente a infarto al
8 . Diabetes mellitus. Debido a la fuerte relacin entre miocardio. Aunque en algunos casos no es fcil diferenciar
la diabetes y la enfermedad vascular, existe tambin la angina de un infarto del miocardio, no existen cambios
un mayor riesgo de enfermedad arterial coronaria en en el electrocardiograma clsico (ECG) ni elevaciones
pacientes con diabetes, sobre todo en aquellos en que enzimticas en la angina, y el dao cardaco normalmente
la diabetes est mal controlada. no ocurre a menos que sea prolongado o grave.
Aterosclerosis coronarla
I
Placas Trombosis coronaria
I" '.. I I
Arritmia Arresto Aneurisma Rotura
cardaco ventricular miocrdica
Insuficiencia cardaca congestiva Arritmia Cicatrizacin Insuficiencia
cardaca
,_____________________I
MUERTE
FIGURA 23-2. Presentacin de la cardiopata coronaria. Puede presentarse como angina de pecho, insuficiencia carda
ca congestiva, o infarto del miocardio. (Reimpreso con permiso de Damjanov I. Pathology for the Health Related Profes-
sions. Philadelphia WB Saunders, 1996.)
CAPTULO 23 FUNCIN CARDACA 503
El infarto del m iocardio, o ataque al corazn, ocurre tencia de un evento cardaco inm inente, la mayora admi
cuando el ujo sanguneo hacia un rea del msculo car tir una reciente historia de disnea, angina inestable y
diaco es bloqueado de repente, provocando isquemia y una vaga sensacin de mala salud. Las com plicaciones de
muerte del tejido del miocardio. El tejido cardaco se infla un infarto del miocardio son comunes e incluyen muerte
ma y se necrotiza en el punto de obstruccin y en seguida repentina debido a arritmias y fibrilacin ventricular,
se liberan las enzimas celulares y las protenas dentro de corazn bloqueado si las fibras de la conduccin se loca
la sangre. El rea daada del corazn rpidamente pierde lizan en el rea del infarto, y otras irregularidades, lo que
su habilidad para contraerse y conducir los impulsos elc ocasiona arritmia, insuficiencia cardaca congestiva y
tricos, y los suministros de oxgeno se agotan. Este tipo de trom boem bolism o .6
dao es irreversible y el rea de necrosis se reemplaza en
un momento u otro con una cicatriz fibrosa tisular. CARDIOPATA HIPERTENSIVA
La gravedad del dao de un infarto del miocardio es muy
variable y se relaciona sobre todo con su tamao y localiza La World Health Organization define la hipertensin como
cin. Si la arteria coronaria descendiente anterior izquierda la presin sistlica mayor de 160 mmHg, y la presin dias-
est bloqueada, las paredes anterior y lateral del corazn, tlica mayor de 95 mmHg. Es una de las enfermedades
el septo ventricular y el msculo papilar anterolateral se cardiovasculares ms comunes, y se estima que alrededor
ven afectados. Si la arteria coronaria derecha dominante es de 50% de las personas de mediana edad tiene hiperten
la afectada, se ocasionar un dao a la pared inferior pos sin. La prevalencia de la hipertensin se incrementa con
terior, al msculo papilar posteromedial y al septo inferior. la edad, de 4% en personas de 20 a 29 aos a 65% en per
Si se ha desarrollado cualquier circulacin colateral debido sonas mayores de 80 aos .12 Es ms comn en la pobla
al flujo sanguneo reducido crnico en esa rea particular cin negra que en la blanca o en los grupos hispanos. La
del corazn, el dao resultante ser menos significativo hipertensin puede afectar a todos los rganos, pero sobre
que si no hubiera ocurrido la colateralizacin. todo a riones, cerebro y corazn.
Los infartos ms comunes involucran a las tres capas El factor ms importante que determina la presin san
del corazn. Los pacientes suelen presentarse con grados gunea es la resistencia perifrica; cuando sta se encuen
variables de dolor en el pecho durante varias horas y tra aumentada lleva a la cardiopata. Aumenta la carga de
otros sntomas como dolor en el brazo izquierdo, respira trabajo del ventrculo izquierdo, lo que ocasiona, con el
cin breve, hipotensin, sudoracin, nusea y vmito. tiempo, hipertrofia y dilatacin. El aumento en tamao del
Ciertos pacientes, sobre todo los que padecen diabetes o ventrculo izquierdo causa que la vlvula mitral permita la
hipertensin, o de edad avanzada, no tendrn dolor en el regurgitacin de la sangre en el atrio izquierdo que, con el
pecho y presentarn pocos sntomas. Aunque muchos tiempo, produce dilatacin y tambin aumenta la presin
pacientes podran indicar que no haba signos de adver en el atrio izquierdo. Esta presin aumentada se transfiere
ES TU D IO D E C A S O 23-2
los estafilococos son causas comunes, al igual que las bacte 3. Marcadores cardacos sricos: cambio inequvoco que
rias gramnegativas y algunos hongos .4Estos microorganis consiste en cambios en serie enzima/pro tena, con un
mos atacan al endocardio, invaden las vlvulas, y forman aumento inicial y una cada subsecuente de las concen
vegetaciones de fibrina, plaquetas, clulas sanguneas y traciones sricas .16
otros microorganismos. Estas vegetaciones interfieren con
Debido a que no existe una prueba diagnstica de labo
la funcin de las vlvulas y pueden desalojarla, formando
ratorio simple, que sea rpida y evalu con precisin la
embolias que pueden causar una infeccin extendida o el
funcin cardaca, se necesita una combinacin de marca
infarto de otros rganos. Dos tipos de endocarditis infec
dores cardacos. Contina la bsqueda de un marcador
ciosa son la subcutnea y la aguda. Los sntomas de la
cardaco que sea til en la evaluacin de muchos tipos
endocarditis subcutnea son vagos e insidiosos en muchos
de condiciones cardacas; las siguientes caractersticas se
casos. Fiebres de bajo grado, anorexia y esplenomegalia son
requieren para un marcador ideal:
comunes al inicio en esta condicin, y pueden desarrollarse
murmullos cardacos y la insuficiencia cardaca congestiva El marcador debe ser absolutamente especfico para
en infecciones avanzadas. La endocarditis aguda tiene un el corazn, para permitir el diagnstico confiable del
comienzo sbito de picos de fiebres, fros y adormecimien dao miocrdico en presencia de una lesin del mscu
tos. Ambos tipos de endocarditis infecciosas responden a la lo esqueltico.
terapia antibitica apropiada si se tratan en su inicio. El marcador debe ser muy sensible para detectar el ms
La pericarditis suele ser secundaria a otra condicin, a mnimo dao cardaco.
menudo a otras condiciones cardacas. Puede ser causada El marcador debe ser capaz de diferenciar un dao
por bacterias, virus u hongos y est relacionada con varios reversible de uno irreversible.
trastornos autoinmunitarios, como lupus eritematoso sis- En un infarto de miocardio agudo, el marcador debe
tmico. La acumulacin de fluido en el saco pericardaco es permitir el monitoreo de la terapia de reperfusin y la
el aspecto definitivo de esta condicin, y los diversos tipos estimacin de la dimensin del infarto y el pronstico.
de fluido dentro del saco diferenciarn el tipo de pericar El marcador debe ser estable y la medicin rpida, fcil
ditis. Exudados purulentos indican infecciones bacteria de realizar, cuantitativa, y costeable.
nas, los fluidos sricos claros son causados por infecciones El marcador no debe detectarse en pacientes que no tie
virales, y un exudado serofibrinoso est relacionado con nen dao del miocardio .17
dao grave como en la cardiopata reumtica.
Los sntomas de la pericarditis varan con la causa sub Casi todos los esfuerzos a la fecha se han orientado al
desarrollo de tal marcador cardaco ideal para el diagns
yacente pero son comunes la taquicardia, el dolor de pecho,
la respiracin breve y la tos. Cantidades grandes de fluido tico temprano y exacto del IMA. Deben tomarse en cuenta
pueden llevar a venas distendidas del cuello, sonidos dbi muchos factores en la seleccin de la mayor parte de las
les del corazn y cambios en el EC G .6 pruebas de laboratorio para diagnstico clnico, efectivas,
Los agentes infecciosos se han vuelto recientemente los y de costo eficaz para pacientes con dolor de pecho. El
tiempo que ha pasado despus de iniciar el dolor de pecho;
objetos de inters en la bsqueda continua de causas adi
cionales de enfermedad arterial coronaria, adems de ser cualquier enfermedad concomitante; la posibilidad de una
tratamientos efectivos y estrategias preventivas para sta. lesin del msculo esqueltico; la facilidad de medicin y
tiempo de vuelta para los resultados; y la especificidad del
Los virus, como los virus del herpes y el virus coxsackie B,
y las bacterias Chlam ydia pneum oniae y H elicobacter pylori ensayo, la sensibilidad y las interferencias son slo unas
han sido ampliamente estudiadas. Se ha encontrado que la cuantas consideraciones en estas decisiones .18
infeccin crnica est significativamente relacionada con el La Academia Nacional de Bioqumica Clnica de Esta
dos Unidos recomienda que dos marcadores bioqumicos
desarrollo de la aterosclerosis y con complicaciones clnicas
de la angina inestable, el infarto del miocardio y el derrame se usen para el diagnstico de rutina del IMA: un marca
cerebral. En su mayor parte, stas son slo vnculos y no se dor inicial que aumenta confiablemente dentro de las 6 h
han establecido relaciones causales especficas .15 despus del inicio de los sntomas y un marcador definiti
vo que permanece incrementado despus de 6 a 9 h, pero
que tiene una alta sensibilidad y especificidad para el dao
DIAGNSTICO DE LA CARDIOPATA miocrdico y permanece anormal por varios das .16
Debido a sus terribles consecuencias, se han realizado gran
des esfuerzos para determinar las mejores herramientas Diagnstico de laboratorio para el infarto
para el diagnstico temprano y exacto del infarto de mio agudo del miocardio
cardio agudo (IMA). La Organizacin Mundial de la Salud
E nzim as
ha establecido tres criterios para el diagnstico del IMA:
Aunque la prueba de sensibilidad a la angiotensina (AST)
1. Historia: la historia es tpica si est presente el dolor de fue el primer marcador usado para el diagnstico de labo
pecho agudo, grave y prolongado. ratorio del IMA, carece de especificidad cardaca y actual
2. ECG: Los cambios inequvocos son el desarrollo de mente no tiene significado clnico para el diagnstico del
ondas Q anormales, persistentes, o equivalentes, en por IMA. La lactato dehidrogenasa (LD) tambin era usada para
lo menos dos guas continuas del ECG estndar, y la indicar IMA. Es una enzima citoplsmica encontrada en
evolucin de la herida dura ms de un da. casi todas las clulas del cuerpo, incluido el corazn, y, por
506 PARTE III VALORACIN DE LAS FUNCIONES DEL SISTEMA ORGNICO
tanto, no es especfica para el diagnstico de la cardiopata. tejido cardaco es mayor a 85% ,18 tambin se encuentra
Aunque las determinaciones de la isoenzima LD incremen en el msculo esqueltico y llegan a causarse resultados
tan la especificidad para el tejido cardaco (las subfraccio- falsos positivos por interferencias analticas y condiciones
nes LD1 y LD2 son ms indicativas del desenvolvimiento clnicas como la enfermedad muscular y lesiones muscu
cardaco), la Academia Nacional de Bioqumica Clnica lares agudas o crnicas.
recomienda que las isoenzimas LD y LD ya no tengan un En aos recientes, los ensayos de la actividad CK-MB
papel en el diagnstico de las enfermedades cardacas.16 se han reemplazado cada vez ms con los ensayos de masa
La creatinina cinasa (CK) es una enzima citoslica que de la CK-MB, que miden la concentracin proteica de
participa en la transferencia de energa en el metabolismo CK-MB en lugar de su actividad cataltica. Estos proce
muscular. Es un dmero comprimido de dos subunidades dimientos de laboratorio se basan en tcnicas de inmu
(la B, o forma cerebral, y la M, o forma muscular), que noensayos que usan anticuerpos monoclonales y tienen
produce tres isoenzimas CK. Las isoenzimas CK-BB (CK1) menos interferencias y una sensibilidad analtica ms alta
son de origen cerebral y slo se encuentran en la sangre si que los ensayos basados en la actividad. Los ensayos de
se ha abierto una brecha en la barrera sangre-cerebro. La masa pueden detectar un aumento en la concentracin de
isoenzima CK-MM (CK3) participa en la mayor parte de la CK-MB alrededor de 1 h antes que los mtodos basados
la actividad de la CK en el sistema musculoesqueltico, en la actividad, y las concentraciones de masa de la CK-
mientras la CK-MB (CK2) tiene una mayor especificidad MB persistentemente normales sobre un perodo de 6 a 8
para el msculo cardiaco, aunque slo participa entre 3 h tienen un valor predictivo negativo de 9 7 %.19
y 20% de la actividad CK total en el corazn .17 Como un Para aumentar la especificidad de la CK-MB por el teji
marcador del IMA inicial, la CK muestra sensibilidad de do cardaco, se ha propuesto que se calcule una relacin
slo alrededor de 40% y una especificidad de slo 80% .18 (ndice relativo) entre masa CK-MB y actividad CK. Si esta
La CK-MB es una herramienta valiosa para el diagns relacin es mayor de 3, resulta indicativa de IMA en lugar
tico del IMA debido a su especificidad relativamente alta de dao muscular esqueltico.
para lesin cardaca. La amplia experiencia con la CK-MB En todo el suero se encuentran presentes isoformas CK, y
la ha establecido como la referencia y la norma de oro para son producidas como parte del mecanismo de limpieza nor
otros marcadores cardacos. Sin embargo, se toma por lo mal de las isoenzimas CK. Slo existe una isoforma CK-MB
menos de 4 a 6 h despus de iniciado el ataque de dolor (MB2) y una CK-MM (MM3) en el miocardio. Hay problemas
de pecho antes de que las actividades de CK-MB aumen inherentes con el uso de isoformas como marcador carda
ten a niveles significativos en la sangre. Los niveles pico co, como la falta de especificidad cardaca para la CK-MB,
ocurren en un perodo de 12 a 24 h, y las actividades del el contenido pequeo de CK-MB en el tejido del miocardio
suero suelen regresar a los niveles bsicos en 2 o 3 das normal y niveles perceptibles de CK-MB en individuos nor
(fig. 23-3). Aunque la especificidad de la CK-MB para el males. Sin embargo, las isoformas CK pueden usarse efec
tivamente como indicadores de reperfusin despus de la
Troponina I Mioglobina O -C K -M B terapia tromboltica en pacientes con IMA confirmado .17
Protenas cardacas
Es posible monitorear varias protenas en casos sospecho
sos de IMA para dar informacin de un diagnstico signi
ficativo. La m ioglobina, una protena heme que se une al
oxgeno y que representa de 5 a 10% de todas las prote
nas citoplsmicas, se libera rpidamente desde el msculo
estriado (msculo esqueltico y cardaco) cuando se daa.
Sin embargo, debido a su tamao pequeo, los riones eli
minan rpido la mioglobina, hacindola un marcador de
dao cardaco inestable a largo plazo. Debido a la abundan
cia de mioglobina en tejidos cardaco y musculoesquelti
co, el lmite de referencia superior de la mioglobina srica
refleja de manera directa la masa muscular del paciente y,
por tanto, vara con el gnero, la edad y la actividad fsica .20
Tiempo posterior al inicio del IMA (horas) Aunque existe evidencia de que hay varias formas de miog
lobina, no se ha identificado una mioglobina especfica car
FIGURA 23-3. Perfiles de tiempo de los marcadores cardacos carac daca. La utilidad de la mioglobina como marcador cardaco
tersticos despus del IMA. Aqu se ilustran los perfiles temporales se determin a mediados de 1970, cuando se desarroll
plasmticos de los marcadores comnmente usados para el diag
una tcnica de radioinmunoensayo para su determinacin,
nstico cardaco, a saber, CK-MB, CK total, troponina I, troponina T,
pero slo cuando se dispuso de ensayos rpidos, cuantita
mioglobina y subformas CK-MB. El diagnstico temprano del infarto
(6 h) slo es en potencia posible con dos de los marcadores, en con tivos y automatizados la mioglobina gan aceptacin como
creto, las subformas CK-MB y la mioglobina. (Reimpreso con permiso ensayo de diagnstico rutinario para IMA .21
de Roberts R. Rapid MBCK subform assay and the early diagnosis of La mioglobina es significativamente ms sensible que las
myocardial infarction. Clin Lab Med 1997; 17(4):669-683.) actividades de la CK y la CK-MB durante las primeras horas
CAPTULO 23 FUNCIN CARDACA 507
despus de iniciar el dolor de pecho. Empieza a elevarse de msculo esqueltico, porque la TnT resultar clara y espe
1 a 4 h despus y es detectable en casi todos los pacientes cialmente indicativa de la magnitud del dao cardaco en
con IMA de 6 y 9 h despus del inicio del dolor de pecho, oposicin al dao muscular.22La TnT cardaca tambin tiene
y regresa a los niveles bsicos de 18 a 24 h ms adelante18 valor en el monitoreo de pacientes despus de la reperfusin
(fig. 23-3). Si la concentracin de hemoglobina permanece de una arteria coronaria relacionada con el infarto. En los
dentro del rango de referencia 8 h despus de iniciado el pacientes con IMA con reperfusin ms temprana que en
dolor de pecho, puede descartarse el IMA. Aunque resul los pacientes con reperfusin retardada o incompleta, la TnT
tan comparables las sensibilidades tempranas de la masa de aparece y alcanza su pico en el suero de manera significativa
CK-MB, las isoformas CK y la mioglobina, las determinacio ms temprana que en los pacientes con reperfusin retarda
nes de CK-MB son preferibles a la mioglobina en pacientes da o incompleta. Un incremento significativo en la TnT des
admitidos entre 10 y 12 h despus del inicio del dolor de pus de empezar la terapia tromboltica indica reperfusin
pecho, porque es posible que la concentracin de mioglobi aceptable de la arteria coronaria relacionada con el infarto .23
na est todava regresando a los rangos de referencia dentro El grado de elevacin de la TnT de 3 a 4 das despus del
del marco de tiempo.18No debe usarse la mioglobina para el IMA tambin puede usarse como una estimacin prctica y
diagnstico temprano de IMA en pacientes con enfermedad rentable de la dimensin del infarto del miocardio .24
renal, sobre todo con insuficiencia renal, porque la mioglo La troponina I (Tnl) slo se encuentra en el miocardio
bina se incrementar consistentemente como resultado de la de adultos, lo que la hace extremadamente especfica para
disminucin de la limpieza presente en riones enfermos. La la cardiopata. Tambin se encuentra en concentracin
desaparicin rpida de la mioglobina del suero permite usar mucho ms alta que la CK-MB en el msculo cardaco, lo
la como indicador de reinfarto. Una concentracin de mio que la convierte en un indicador sensible de lesin carda
globina persistentemente normal descartar el reinfarto en ca. La Tnl no se encuentra en cantidades detectables en el
pacientes con dolor de pecho recurrente despus del IMA. suero de pacientes con lesiones mltiples o atletas despus
Las fibras musculares convierten la energa qumica del de un ejercicio activo, en pacientes con insuficiencia renal,
adenosintrifosfato (ATP) en trabajo mecnico. A medida que o en pacientes con CK-MB elevada, a menos que tambin
esto ocurre, se activan enzimas, electrlitos y protenas, y estn presentes lesiones del miocardio .18 La Tnl tambin
se convierten en materiales que estimulan la contraccin de es una buena valoracin bioqumica de la lesin cardaca
las fibras musculares. La actomiosina ATPasa, el calcio, la en pacientes crticamente enfermos, los que tienen insufi
actina, la miosina y un complejo de tres protenas conocidas ciencia en varios rganos y en situaciones en que es difcil
como complejo troponina son los protagonistas principales interpretar las elevaciones de CK/CK-MB.
de esta conversin. Los tres polipptidos del complejo de Despus de un IMA, la TNI se incrementa por arriba
troponina son las troponinas T, I y C. La troponina C no es del rango de referencia entre 4 y 6 h despus del inicio del
especfica del corazn. Al contrario de la CK-MB, las tro- * dolor de pecho, alcanza su pico entre 12 y 18 h despus y
poninas sricas no se encuentran en el suero de individuos regresa a los lmites de referencia en unos 6 das, depen
sanos. Aunque se piensa que las enzimas tradicionales slo diendo del tamao del IMA 18 (fig. 23-3). La TnT tiende a
se liberan del tejido despus de que ha ocurrido un dao permanecer elevada mucho tiempo y mantiene una mayor
irreversible del miocardio, pueden liberarse troponinas car sensibilidad 7 das despus del infarto que la T n l .18
dacas en la isquemia reversible y en la necrosis irreversible. Se ha desarrollado un ensayo ultrasensible de la Tnl,
La troponina T (TnT) permite los diagnsticos tempra que mejora la sensibilidad temprana en la evaluacin
no y tardo del IMA. Las concentraciones sricas de TnT del dao miocrdico. El ensayo inmunoluminomtrico
empiezan a elevarse unas horas despus de iniciado el dolor (ILMA) mejora la exactitud de la Tnl para el monitoreo
de pecho, y llegan al mximo a los dos das. Por lo general, del dao miocrdico durante ciertos tipos de quimiotera
sigue una meseta que dura de 2 a 5 das, y la concentracin pia e insuficiencia cardaca congestiva .22
srica de TnT permanece elevada ms all de los 7 das Las cadenas ligeras de miosina (CLM) cardacas tambin
antes de regresar a los valores de referencia (fig. 23-3). La intervienen en las concentraciones musculares. Se pensaba
aparicin temprana de la TnT no da una mejor informa primero que eran las nicas protenas del miocardio, pero
cin diagnstica que las concentraciones de la CK-MB o investigaciones recientes han determinado que la CLM no es
de mioglobina dentro de las primeras 4 h despus del ini ms especfica para la lesin cardaca que las determinacio
cio del dolor de pecho, pero la sensibilidad de la TnT para nes de CK-MB. Como las troponinas, la CLM se libera a par
detectar el infarto del miocardio es del 100% de las 12 h a tir de tejido reversiblemente isqumico. Aunque se dispone
los 5 das despus del inicio del dolor de pecho .18Adems, de comprobacin rpida de CLM, la determinacin de CLM
el grado de elevacin de la TnT despus del IMA es signi no ofrece ventaja alguna sobre los ensayos de la troponina
ficativo, a menudo aumenta ms de 200 veces por encima cardaca. Por tanto, La CLM permanece con una importan
del lmite superior de los intervalos de referencia .20 cia clnica limitada como marcador cardaco rutinario .18
Las concentraciones de TnT son muy usadas para el
diagnstico del infarto del miocardio en pacientes que no M arcadores de trastornos inflam atorios
buscan atencin mdica dentro del perodo usual de 2 a 3
y de coagulacin
das en que la CK total y la CK-MB son elevadas.17 Tambin
es til en el diagnstico diferencial del dao del miocardio Debido a que los factores clsicos de riesgo para los sn
en pacientes con sntomas cardacos, adems de lesin del dromes coronarios agudos, como gnero, edad, historia
508 PARTE III VALORACIN DE LAS FUNCIONES DEL SISTEMA ORGNICO
ES T U D IO D E C A S O 23-3
familiar e hiperlipidemia, slo se encuentran en 50% de no est presente en cantidades apreciables en individuos
todos los pacientes con IMA, la habilidad para predecir un saludables. Aunque es una respuesta no especfica para la
riesgo en individuos con IMA es deficiente. Se sigue inves inflamacin, su presencia indica un proceso inflamatorio
tigando para desarrollar herramientas adicionales que en el cuerpo. Se ha probado que estos incrementos en CRP
ayuden en la prediccin del riesgo y en la prevencin de son mnimos en sndromes coronarios agudos, permane
un evento. Existe gran cantidad de datos que indican que ciendo a menudo dentro del rango de referencia estableci
la respuesta inflamatoria desempea un papel crtico en la do. Se han desarrollado ensayos confiables, automatizados
patognesis de la cardiopata isqumica. Los pacientes con con alta sensibilidad para CRP (hs-CRP), que permiten la
angina inestable muestran placas aterosclerticas, con una deteccin de los pequeos incrementos de CRP que suelen
infiltracin significativa de clulas inflamatorias y niveles observarse en la cardiopata.
sistm icos elevados de reactantes de la fase aguda.25 Las Los datos epidemiolgicos documentan una relacin
sustancias relacionadas con la activacin de las funciones positiva entre hs-CRP y la prevalencia de la enfermedad
de coagulacin y fibrinolticas tambin pueden tener valor arterial coronaria. Los niveles bsicos de hs-CRP se corre
clnico en el monitoreo de la isquemia coronaria aguda. lacionan con un futuro riesgo ms alto de morbilidad car
diovascular y mortalidad entre quienes presentan y carecen
Hs-CRP de evidencia clnica de enfermedad vascular. En pacientes
En estudios se han evaluado varias protenas de fase aguda con enfermedad vascular establecida, cada incremento en
como potenciales marcadores para la evaluacin del riesgo la desviacin estndar de hs-CRP basal est relacionado
cardiovascular, y existe evidencia de que la pro tena C-reac- con un incremento de 45% en el riesgo relativo de un infar
tiva (CRP) es un predictor confiable del riesgo del sndrome to del miocardio no fatal, o de muerte cardaca repentina
coronario agudo. La CRP es un reactante de fase aguda pro en un perodo de ms de dos aos de seguimiento .27
ducida principalmente por el hgado. Es estimulada por la Los hs-CRP tambin muestran capacidad de pronstico
interleucina -6 y se incrementa rpido en la inflamacin. La en quienes todava no tiene un diagnstico de enfermedad
concentracin en plasma de la CRP se determina sobre todo vascular. Una elevacin leve de los niveles bsicos de hs-
por su grado de sntesis y, siempre que haya una funcin CRP entre individuos aparentemente saludables est rela
heptica normal, es un marcador sensible de la inflama cionada con un mayor riesgo a largo plazo para futuros
cin crnica continua que no se ve afectada por una lesin eventos cardiovasculares. Esta capacidad predictiva ofrece
isqumica .26Aumenta significativamente como respuesta a a los pacientes la capacidad de recibir tratamiento para
una lesin, infeccin u otras condiciones inflamatorias, y reducir la inflamacin y, con ello, su riesgo .27
CAPTULO 23 FUNCIN CARDACA 509
E S T U D IO D E C A S O 23-4
ser por completo especifico para el dao muscular cardaco las troponinas, que son productos de la necrosis tisular del
y aplicarse de manera fcil (vase cuadro 23-6). miocardio. La IMA se produce de forma continua durante
la isquemia y aumenta de 2 a 3 h despus de un evento
Isoenzim a glu c gen o fosfo rila sa BB (GPBB) isqumico. Un estudio demuestra que la presentacin de
La GPBB es una enzima gluclica que desempea un papel una prueba negativa de IMA en urgencias tiene un 96% de
esencial en la regulacin del metabolismo de los carbo valor predictivo negativo de un resultado negativo de tro-
hidratos mediante la movilizacin del glucgeno. No es ponina, 6 h ms tarde.36Se necesitan ms datos futuros para
especfica del tejido cardaco, pero es significativamente determinar si la IMA es especfica para isquemia cardaca o
ms sensible que la CK, la masa de la CK-MB, la mioglobi si est relacionada con todas las isquemias tisulares.
na y la TnT en pacientes con IMA durante las primeras 3
o 4 h despus de iniciar el dolor de pecho. En la mayora H om ocistena
de los pacientes con IMA, la GPBB aumenta entre 1 y 4 h L a hom ocistena es un aminocido natural que se encuen
despus del inicio del dolor de pecho, y regresa al nivel de tra en la sangre, y que est relacionado con las vitaminas
referencia entre 1 y 2 das despus. B 12, B6, y el cido flico. Un nivel de homocistena elevado
es un factor de riesgo potencial para cardiopata coronaria,
P rotena cardaca d e en lace a cidos gra so s enfermedad vascular cerebral, enfermedad arterial carti
La protena cardaca de enlace a cidos grasos (H-FABP) es da y enfermedad vascular perifrica debido al estmulo en
una protena de bajo peso molecular que se encuentra en la formacin de plaquetas. Se sabe que la adicin de vita
grandes cantidades en el citoplasma del miocardio y en clu minas con cido flico, Bu y Bgreduce las concentraciones
las musculares que intervienen en el metabolismo de los de homocistena, pero el beneficio de tal tratamiento sigue
cidos grasos y la homeostasis de los lpidos. Aunque la siendo incierto .37
H-FABP no es especfica del corazn, el contenido de H-
FABP del msculo esqueltico es slo de 10 a 30% de la Pruebas cardacas centradas en el paciente
que se encuentra en msculo cardaco, mientras el conte Est ampliamente aceptado que el diagnstico temprano de
nido de mioglobina del msculo esqueltico es casi dos pacientes con IMA puede dar como resultado menos dao
veces ms que la del tejido cardaco. As, se espera que H- tisular cardaco, menos complicaciones, reduccin en la
FABP sea un marcador ms sensible y especfico que la duracin de la estancia hospitalaria y una recuperacin ms
mioglobina para el uso en la deteccin temprana de lesin rpida. Adems, las opciones de tratamiento, como la tera
miocrdica .33 sta se incrementa rpido en el dao celular, pia tromboltica o la angioplastia, que puede prevenir un
por lo comn de 2 a 4 h despus, alcanza su pico en 5 a 10 dao adicional al msculo cardaco deben administrarse en
h, y regresa a lo normal entre 24 y 36 h despus del inicio forma oportuna. Por lo general, 90% de los pacientes admi
del dolor de pecho. La magnitud del incremento en el tidos en el hospital requieren comprobacin bioqumica
plasma de la H-FABP ha mostrado tambin una buena para confirmar o descartar el IMA .38El Colegio Estadouni
correlacin con la magnitud del infarto .34 dense de Cardiologa y la Asociacin Estadounidense del
Corazn recomiendan que la evaluacin inicial del paciente
Isoenzim a III anhidrasa ca rb n ica (C A ) se realice en los 20 primeros minutos despus de la llegada
La CA es una enzima soluble que cataliza la hidratacin a urgencias, y que el tiempo ptimo de espera (TAT) entre la
del dixido de carbono a bicarbonato y un protn, e inter llegada del paciente y la disponibilidad de los resultados de
viene en la regulacin del pH, el transporte de iones, el la prueba para los marcadores cardacos debe ser de menos
equilibrio de agua y electrlitos, y el metabolismo de car de 30 min .39 La Academia Nacional de Estndares de Bio
bohidratos, urea y lpidos .35 Existen siete isoenzimas CA qumica Clnica de Prcticas de Laboratorio recomienda
con un rango amplio de distribucin tisular, pero un sitio que los resultados del marcador cardaco deben estar dispo
importante de actividad de la CA es el msculo esquel nibles en menos de 1 h despus del muestreo .16La presin
tico. La CAIII no se encuentra en el msculo cardaco y, para cumplir con estos estndares es grande, y tambin dif
por tanto, puede ser usada para diferenciar entre dao del cil de lograr, en instituciones grandes con salas de urgencias
msculo esqueltico y del msculo cardaco cuando se ocupadas. La prueba en el punto de atencin (POC) para
realiza en conjuncin con un analito ms especifico del los marcadores cardacos es una estrategia que sirve para
corazn como la mioglobina. En el paciente con lesin reducir el tiempo de espera, y el reciente desarrollo de dis
coexistente real o posible musculoesqueltica, la TnT o positivos para la realizacin de ensayos cardacos de sangre
la Tnl podran todava ser ls marcadores preferibles para completos al lado de la cama del paciente han hecho facti
confirmar o descartar el dao del miocardio .18 ble satisfacer estas directrices estrictas.
Deben atenderse varios problemas mdicos y tcnicos
A lbm in a m odificada p o r isquem ia cuando se toma en cuenta la prueba cardaca en el POC.
Un marcador bioqumico identificado recientemente para Existen sistemas de prueba cualitativos y cuantitativos, y
la isquemia, la albm ina m odificada p or isquem ia (IMA) , est sistemas que producen un panel de resultados de marca
en las etapas finales de la investigacin. La IMA se produce dores cardiacos, adems de resultados discretos de un solo
cuando la albmina entra en contacto con el tejido isqu analito. Laboratoristas y mdicos deben colaborar para
mico, modificndolo y hacindolo ms resistente a meta determinar cules marcadores cardacos se ofrecen en su
les de enlace. El mecanismo para la produccin de IMA es institucin. La determinacin de los valores diagnstico de
diferente de otros marcadores tempranos como la CK-MB y corte para IMA en los resultados en el POC y la correlacin
CAPTULO 23 FUNCIN CARDACA 511
de estos resultados con los que pueden realizarse en el labo cas puede indicar pericarditis, endocarditis o infecciones
ratorio clnico ms adelante tambin son importantes. valvulares. Si ha ocurrido disfuncin del rin como resul
Bajo el Clinical Laboratory Improvement Amendments Act tado de la cardiopata, puede desarrollarse anemia debida
(CLIA), la prueba de marcadores cardacos en el POC se al decremento en la produccin de eritropoyetina renal.
clasifica como una prueba moderada compleja, no como Una infeccin relacionada con pericarditis, endocardi
una prueba aplazada. Esta clasificacin requiere pautas tis y problemas valvulares podra ser identificada mediante
regulatorias ms graves, y es ms difcil de llevar a cabo y cultivos sanguneos. Tambin pueden realizarse cultivos
mantenerse en entornos de POC. Los problemas como el de muestras del pericardio y el endocardio si se sospecha
mantenimiento de la habilidad continua para la prueba, el una infeccin pericrdica.
control de calidad y la competencia del operador requeri El papel del laboratorio durante el tratamiento de la
rn una supervisin mayor por parte de los laboratorios .39 cardiopata puede extenderse a proporcionar los compo
nentes sanguneos cuando se necesita intervencin qui
rrgica. En injertos de derivacin, correccin de defectos
El papel del laboratorio en la vigilancia
valvulares y otros procedimientos quirrgicos para corre
de la cardiopata
gir la insuficiencia cardaca puede requerirse el uso de los
El papel del laboratorio en la vigilancia de la funcin car componentes sanguneos durante la ciruga y la recupera
daca incluye sobre todo la medicin de los efectos del cin del paciente.
corazn sobre otros rganos, como los pulmones, el hga
do y el rin. Los gases sanguneos arteriales miden el
TRATAMIENTO
estado acidobase y de oxgeno del paciente, y se usan para
determinar la acidosis respiratoria y los niveles elevados de Cuando se diagnostica la cardiopata, se recomiendan cier
dixido de carbono que suelen observarse en pacientes con tos cambios en el estilo de vida para mejorar la calidad de
cardiopata. El paciente con edema desarrollar electrlitos sta y la longevidad. El ejercicio es efectivo en la reduccin
y cambios en la osmolalidad como resultado de la reten del riesgo de una cardiopata adicional, y en la rehabilita
cin de fluidos y de la distribucin inica. La disminucin cin despus del infarto del miocardio y otros desrdenes
de los resultados cardacos ocasiona retencin de sodio por cardacos crnicos. Dejar de fumar es un paso impor
parte de los riones, pero tambin causa el incremento en tante en la reduccin de los riesgos de complicaciones y
la retencin de fluido; por tanto, el sodio srico permanece empeoramiento de las condiciones cardacas. La dieta es
por lo general dentro de los rangos de referencia o llega a un componente necesario del control de los sntomas de
disminuir de forma ligera. Las determinaciones de los elec la cardiopata. La reduccin del peso disminuir la carga
trlitos sricos, incluidos el sodio, el potasio, el cloruro y el de trabajo del corazn, y se recomienda la restriccin die
calcio, son importantes para monitorear la terapia diurtica ttica de sodio y grasas. Tal vez se necesite la terapia con
y de frmacos en pacientes con cardiopata .4 frmacos para reducir las concentraciones del colesterol
Las elevaciones de la aspartato aminotransferasa (AST), LDL, si la reduccin en la ingestin de grasas animales y
la alanina aminotransferasa (ALT) y la fosfatasa alcalina saturadas no baja las concentraciones a un nivel aceptable.
(ALP) suelen observarse en pacientes con insuficiencia Tambin se fomenta el manejo del estrs, para minimizar
ventricular derecha cronica4y el valor de la y-glutamiltrans- la ansiedad relacionada con las condiciones cardacas y
ferasa (GGT) puede ser dos veces el del lmite superior del para controlar las reacciones ante las situaciones estresan
rango normal en la insuficiencia cardaca congestiva, lo tes de la vida.
que sugiere congestin y dao heptico. La fuerte correlacin entre la hipertensin y la cardio
La evaluacin de los lpidos evaluar el riesgo de enfer pata requiere un control estricto de la hipertensin. El
medad de la arteria coronaria. Es muy recomendable man tratamiento para la hipertensin esencial est dirigido a
tener cerca de lo normal los niveles del colesterol HDL, reducir los factores de riesgo, como reduccin de peso,
del LDL y de los triglicridos en el caso de pacientes car restriccin de sal y alcohol e incremento del ejercicio.
dacos. La determinacin de una lipoprotena similar a la En los ltimos 20 aos, se han realizado ms de 30
LDL, llamada lipoprotena (a), tambin puede indicarse estudios para comparar la enfermedad cardiovascular en
porque es un factor de riesgo independiente relacionado mujeres posmenopusicas con terapia de reemplazo de
con el desarrollo de la enfermedad de la arteria coronaria estrgenos y en usuarias sin estrgenos que indican que la
prematura y la vascular. incidencia de la enfermedad de la arteria coronaria entre
Es posible identificar al paciente con insuficiencia las usuarias de estrgeno es casi la mitad de las no usuarias.
cardaca secundaria debido a disfuncin de la tiroides Se ha reconocido por mucho tiempo que estos resultados
mediante un ensayo altamente sensible con la hormona pueden deberse al hecho de que la poblacin de usuarias
estimulante de la tiroides. El laboratorio es tambin inva- de estrgeno es inherentemente ms saludable que las que
luable para vigilar frmacos teraputicos siguiendo el no hacen uso de la terapia del reemplazo de estrgenos.
diagnstico de cardiopata. Sin embargo, estudios recientes no han mostrado benefi
El conteo de rutina de la sangre total es importante para cio alguno de la terapia de estrgenos contra un placebo
detectar anemia e infeccin. La hemolisis puede indicar en la reduccin del riesgo de la enfermedad cardiovascu
comprobacin adicional de hemoglobinuria y mioglobinu- lar. En la actualidad, la conclusin es que la enfermedad
ria, indicadores de dao cardiovascular y enfermedad del de la arteria coronaria no se previene con estrgenos entre
miocardio. Un incremento en las clulas sanguneas blan las mujeres ms maduras con cardiopata establecida .40
512 PARTE III VALORACIN DE LAS FUNCIONES DEL SISTEMA ORGNICO
ES T U D IO D E C A S O 23-5
Colesterol total (<200 mg/dl) 187 mg/dl 3. Existe algn tratamiento especfico que pueda ser
instituido para reducir el riesgo de esta paciente?
Colesterol HDL (30 a 75 mg/dl) 52 mg/dl
4. Cmo debera vigilarse a esta paciente?
Colesterol LDL (60 a 130 mg/dl) 95 mg/dl
Lipoprotena (a) (<30 mg/dl) 34 mg/dl
Triglicridos (60 a 160 mg/dl) 203 mg/dl
Glucosa (60 a 110 mg/dl) 83 mg/dl
CK total (15 a 130 Ul/L) 65 Ul/L
CK-MB (<8 Ul/L) 1.9 Ul/L
% CK-MB (0-6%) 3 %
Homocistena (<15 (xmol/L) 18 |xmol/L
Fibringeno (2 a 4.5 mg/dl) 4.3 mg/dl
D-Dmero (0 a 250 (xg/ml) 160 |xg/L
Hs-CRP (0.016 a 0.76 mg/dl) 0.91 mg/dl
Tratam iento con frm acos Los f rm a cos bloqueadores f-adrenrgicos reducen el rit
mo cardaco o la fuerza de las contracciones, reduciendo
El tratamiento con varios frmacos es rutinario para el la demanda de oxgeno para el corazn por bloqueo de
control de muchos y diversos problemas relacionados con los receptores (3 en el modo de seno y el miocardio. Este
la cardiopata. Por lo general, consiste en una combina grupo de frmacos se usa para tratar taquicardia, latidos
cin de vasodilatadores, diurticos, bloqueadores (3, anta ectpicos y arritmias, adems de dolor de angina e hiper
gonistas de los canales del calcio, glucsidos cardacos y tensin. El propranolol es un tpico bloqueador |3.
anticoagulantes (cuadro 23-5).
Los antagonistas de los canales del calcio disminuyen
Los nitratos son dilatadores de la arteria coronaria que
las contracciones del msculo liso y producen vasodila
incrementan el suministro sanguneo al corazn y dismi cin. Estos frmacos se combinan con las subunidades de
nuyen la presin sangunea. La nitroglicerina sublingual los canales del calcio para limitar la habilidad del calcio
suele usarse para aliviar la angina, y es parte del tratamien de atravesar la membrana celular. Suelen usarse con ms
to de rutina de la insuficiencia cardaca congestiva y del frecuencia para tratar la hipertensin, la angina y la taqui
infarto del miocardio. Tambin pueden usarse ungentos cardia ventricular .41
tpicos y parches de la piel que suministran una dosifi Los glucsidos cardacos, sobre todo la digoxina, se usan
cacin consistente de nitroglicerina para tratar la angina para incrementar la contractilidad cardaca y disminuir
inestable y limitar el dao cardaco debido a isquemia.
la conduccin de impulsos. La digoxina es el glucsido
Los vasodilatadores ms comnmente usados son los cardaco ms comn recetado debido a su farmacocin-
inhibidores de la enzima convertidora de la angiotensina tica conveniente, sus rutas alternas de administracin y
(ACE), como la hidralazina o el captopril. Estos frmacos su amplia disponibilidad en las mediciones del nivel del
dilatan las arterias y venas perifricas, disminuyen la can frmaco en suero .42La mayora de los pacientes con insu
tidad de esfuerzo que el corazn expende para bombear ficiencia cardaca congestiva, fibrilacin auricular o taqui
sangre, y suelen ser parte integral del tratamiento de con cardia, hipertensin, o isquemia cardaca pueden recibir
diciones cardacas como la insuficiencia cardaca conges un frmaco de este tipo para controlar los sntomas.
tiva y el infarto del miocardio.
CAPTULO 23 FUNCIN CARDACA 513
Los diurticos se administran para ayndar a los riones sanguneos en IMA, embolismo pulmonar agudo, trom
en la eliminacin del agua y el sodio excesivos para redu bosis de la vena profunda aguda, trombosis arterial o embo
cir el volumen sanguneo y, con ello, la carga de trabajo lismo .41 El uso de agentes trombolticos en pacientes con
situada en el corazn. Los diurticos proporcionan alivio IMA, comparado con la terapia mdica estndar, reduce la
de los sntomas en el edema pulmonar y en la insuficien morbilidad global en 18%.43El beneficio ms grande ocu
cia cardaca congestiva. Esto es importante para vigilar el rre cuando estos agentes son administrados en un perodo
equilibrio y la hidratacin electroltica para prevenir tam de 3 h despus del inicio de los sntom as .44
bin la diuresis agresiva. La terapia antiplaquetaa, a menudo la aspirina, es efec
Gran cantidad de ensayos han demostrado que la tiva en reducir el riesgo de progresin de aterosclerosis a
reperfusin inducida por tromblisis temprana reduce la infarto del miocardio. Reduce la activacin y agregacin
dimensin del infarto y la mortalidad. Los agentes trombo- de plaquetas, un factor significativo en el proceso tromb
lticos, como la estreptocinasa, la urocinasa, o el activador tico y, como un resultado, reduce el riesgo de cardiopata
plasmingeno tisular, pueden ser indicados para cogulos isqumica.
Hs-CRP Inflamacin
Predictor del riesgo de futura ACS
Fibringeno Inflamacin
Predictor del riesgo y pronstico de la cardiopata
D-Dmero Indicador de la inestabilidad de plaquetas
Identifica pacientes con alto riesgo cuando otros
marcadores no estn presentes
Pptido B-natriurtico Diagnostica la cardiopata congestiva
Isoenzima glucgeno fosforilasa BB indicador sensible de IMA tras 1 a 4 h del inicio del dolor
Protena cardaca de enlace a cidos grasos Indicador sensible y especfico de la lesin cardaca
Grado de elevacin que refleja la dimensin Grado de elevacin que refleja la dimensin del
de infarto en IMA infarto en IMAI
Anhidrasa carbnica III Diferencia entre el dao cardaco y el dao muscular
Albm ina modificada por isquemia Indicador de isquemia
El resultado negativo "descarta" IMA
Homocistena Factor de riesgo de la cardiopata coronaria y de la
enfermedad vascular
514 PARTE III VALORACIN DE LAS FUNCIONES DEL SISTEMA ORGNICO
El uso de heparina, warfina, u otros anticoagulantes El trasplante cardaco ortotpico es una opcin para el
reduce la formacin de protrombina o inhibe la accin de tratamiento de la cardiopata avanzada o cuando los pacien
la trombina. La terapia con anticoagulantes se recomienda tes tienen contraindicaciones significativas para los otros
para prevenir la trombosis venosa y el tromboembolismo, procedimientos. Actualmente, el grado de supervivencia a
y la extensin y recurrencia de un infarto, y para reducir la un ao despus del trasplante cardaco es de 82% y el de
mortalidad relacionada con estas condiciones .45 3 aos de 74 %.47La disponibilidad limitada de suficientes
corazones donados es el factor limitante para esta opcin
Tratamiento quirrgico de tratamiento.
P R E G U N T A S DE R E P A S O
3. Cul de los siguientes analitos tiene la ms alta espe 7. La angina, un sntoma comn de la insuficiencia car
cificidad para la lesin cardaca? daca congestiva, suele aliviarse con la administracin
a) Troponina I. de
b ) Ensayos de masa CK-MB. a) Diurticos.
c) CK-MB total. b) Frmacos bloqueadores (3-adrenrgicos.
d) AST. c) Glucsidos cardacos.
d) Nitratos.
4. Qu de lo siguiente NO es una consideracin duran
te la investigacin de la prueba en el punto de aten 8. Cul de los siguientes marcadores cardacos es el
cin (POC) de los marcadores cardacos? indicador ms usado en la insuficiencia cardaca con
a ) La facilidad y costo de la prueba. gestiva?
b ) El tiempo requerido para obtener los resultados. a) Fibringeno.
c) El mantenimento de los requisitos regulatorios b) D-Dmero.
porque se considera una prueba atenuada. c) Isoenzima glucgeno fosforilasa BB.
d) La correlacin entre los resultados obtenidos por d) Pptido B-natriurtico.
mtodos POC con los obtenidos en el laboratorio
9. Cul de los siguientes marcadores cardacos es el
principal.
m ejor indicador de la dimensin del infarto en IMA?
5. Cul de las pruebas siguientes no vigila niveles de a) Fibringeno.
inflamacin o factores de coagulacin que pueden b) Pptido B-natriurtico.
contribuir al sndrome coronario agudo? c) Pro tena cardaca de enlace a cidos grasos.
a) hs-CRP. d) Troponina I.
b) albmina modificada por isquemia.
10. Qu de lo siguiente NO es una caracterstica de un
c) D-Dmero.
marcador cardaco ideal?
d) Fibringeno.
fl) Especificidad absoluta.
6. La cardiopata reumtica es resultado de una infec b) Alta sensibilidad.
cin con cul de los siguientes microorganismos? c) Estimacin aproximada de la magnitud de dao
a) Staphylococcus aureus. cardaco.
b) Estreptococos del grupo A. d) Habilidad para predecir la ocurrencia futura de la
c) Pseudomonas aeruginosa. cardiopata.
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Funcin renal
Carol J. Skarzynski y Alan H. B. Wu
C O N T E N I D O D E L C A P I T U L O
O B J E T I V O S
T R M I N O S C L A V E
CUADRO 24-1. FUN CIO N ES D EL RIN cubre cada rin. Al diseccionar de manera longitudinal,
es posible distinguir con claridad dos regiones: una exte
Formacin de orina
rior denominada corteza y una interna conocida como
Equilibrio de lquidos y electrlitos mdula (fig. 2 4 -1A). Tambin se observa la pelvis. sta es
Regulacin del equilibrio acidobsico una cavidad semejante a una cuenca que se encuentra en el
extremo superior del urter, por la que pasa la orina recin
Excrecin de los productos de desecho del metabolismo
formada. Los urteres bilaterales son canales de paredes
de las protenas
gruesas, que conectan los riones con la vejiga urinaria. La
Excrecin de frmacos y toxinas orina se almacena temporalmente en la vejiga hasta que se
Secrecin de hormonas evaca del cuerpo a travs de la uretra. En la figura 24- IB
se muestra la disposicin de las nefronas en el rin, que son
Renina unidades funcionales del rin que slo es posible obser
Eritropoyetina var en el microscopio. Cada rin contiene alrededor de
1 milln de nefronas. Cada nefrona es un aparato complejo
1,25-dihidroxivitamina D3
compuesto de cinco partes bsicas, que se ilustran en la
Prostaglandinas figura 24-2.
Cliz
Urter
1 cm
el volumen de cada sustancia valiosa a la circulacin de cial de la mdula se vuelve hiperosmtico en comparacin
la sangre. As, 75% del agua, sodio y cloro; 100% de la con el lquido de la extremidad ascendente. Este lquido
glucosa (hasta el umbral renal); casi todos los aminoci se vuelve hipotnico o se diluye a medida que los iones
dos, las vitaminas y las protenas; y cantidades variables de de sodio y cloruro se reabsorben sin prdida de agua, por
urea, cido rico y iones, como el magnesio, calcio, pota lo que a la extremidad ascendente a menudo se le conoce
sio y bicarbonato, son reabsorbidos. Casi todo (98 a 100%) como segm ento diluyente. La extremidad descendente, a
el cido rico, un producto de desecho, se reabsorbe de diferencia de la ascendente, es bastante permeable al agua
manera activa, slo para ser secretado en el extremo distal y no reabsorbe sodio ni cloruro. La elevada osmolalidad
del tbulo proximal. del lquido medular intersticial circundante constituye la
Al proceso en que las sustancias pasan del lumen fuerza fsica que acelera la reabsorcin de agua a partir
tubular al plasma capilar peritubular se le conoce como del filtrado de la extremidad ascendente. La hiperosmola
reabsorcin tubular. Con excepcin del agua y los iones lidad intersticial se mantiene debido a que la extremidad
de cloruro, el proceso es activo; es decir, las clulas epite ascendente contina el bombeo de iones sodio y cloruro
liales tubulares utilizan energa para unirse y transportar hacia ella. Esta interaccin de agua que deja el asa descen
las sustancias a travs de la membrana plasmtica a la san dente, y sodio y cloruro que dejan el asa ascendente para
gre. Los procesos de transporte implicados en condiciones conservar una osmolalidad elevada dentro de la mdula
normales tienen reserva suficiente para la reabsorcin efi del rin produce orina hipoosmolal a medida que sale del
ciente, pero son saturables. Cuando la concentracin de asa. A este proceso se le denomina sistem a m ultiplicador en
las sustancias filtradas supera la capacidad del sistema de contracorriente.2
transporte, la sustancia es entonces excretada por la orina.
A la concentracin plasmtica por arriba de aquella en que
la sustancia aparece en la orina se le conoce como um bral T bulo contorneado distal
renal, y su determinacin es til en la evaluacin de la El tbulo contorneado distal es mucho ms corto que el
funcin tubular y en los estados de patologa no renal. No tbulo proximal, con dos o tres espirales que se conec
existe un umbral renal para el agua porque sta siempre se tan a un conducto recolector. El filtrado que entra a esta
transporta de manera pasiva por difusin bajo un gradien seccin de la nefrona est cerca de su com posicin final.
te de concentracin. En este caso, los iones de cloruro se Alrededor de 95% de los iones de sodio y cloruro, y de
difunden detrs del sodio. 90% de agua ya se reabsorbieron del filtrado glomerular
Una segunda funcin del tbulo proximal es secretar original. La funcin del tbulo distal es efectuar peque
productos del metabolismo celular tubular del rin, como os ajustes para lograr la homeostasis electroltica y
los iones de hidrgeno, y frmacos, como la penicilina. El acidobsica. Estos ajustes ocurren bajo control horm o
trmino secrecin tubular se utiliza de dos maneras: a) des nal tanto de la horm on a antidiurtica (ADH) como de la
cribe el movimiento de las sustancias del plasma capilar aldosterona. En la figura 24-4 se describe la accin de
peritubular hacia el lumen tubular y b) indica, tambin, el estas hormonas.
momento en que las clulas tubulares secretan productos ADH. La ADH es una hormona peptldica secretada por
de su propio metabolismo celular dentro del filtrado en el la hipfisis posterior, sobre todo en respuesta a un aumen
lumen tubular. Una vez ms, el transporte a travs de la to de la osmolalidad sangunea. Adems, la ADH se libera
membrana de la clula es activo o pasivo. cuando el volumen sanguneo disminuye ms de 5 a 10%.
Los descensos importantes del volumen sanguneo esti
mularn la secrecin de ADH, aun cuando disminuya la
A sa d e H en le osmolalidad del plasma .3 La ADH estimula la reabsorcin
Sistem a m ultiplicador en contracorriente. La osmolalidad de agua. En condiciones normales, las paredes de los tbu
de la mdula de esta porcin de la nefrona aumenta de los recolectores distales son impermeables al agua (al igual
manera constante a partir de la unin corticomedular que el asa ascendente de Henle), pero se vuelven permea
interna y facilita la reabsorcin de agua, sodio y cloru bles con la ADH. El agua se difunde de manera pasiva a
ro. La hiperosmolalidad que se desarrolla en la mdula se partir del lumen de los tbulos, lo que da como resultado
mantiene en forma continua a travs del asa de Henle, un orina ms concentrada y disminucin de la osmolalidad
dispositivo semejante a un gancho que se encuentra entre del plasma.
el tbulo proximal y el tbulo contorneado distal. A los Aldosterona. Esta hormona se produce por la corteza
flujos opuestos del asa, el flujo hacia abajo de la extre suprarrenal bajo la influencia del mecanismo renina-angio-
midad descendente y el flujo hacia arriba de la extremi tensina. Su secrecin se desencadena por la disminucin
dad ascendente, se les denomina flu jo de contracorriente. del flujo o la presin sanguneos en la arteriola renal afe
Para comprender la manera en que la hiperosmolalidad rente y por disminucin del sodio en plasma. La aldostero
se mantiene en la mdula, es m ejor ver primero lo que na estimula la reabsorcin de sodio en los tbulos distales,
sucede en la extremidad ascendente. El sodio y el cloru y la secrecin de potasio y del ion de hidrgeno. La secre
ro se reabsorben de manera activa y pasiva en el lquido cin del ion de hidrgeno se vincula con la regeneracin
intersticial de la mdula a lo largo de toda la extremidad del bicarbonato y la secrecin de amoniaco, que tambin
ascendente. Debido a que esta ltima es relativamente ocurre aqu. Adems de estos iones, se reabsorben cantida
impermeable al agua, poca agua fluye y el lquido intersti des pequeas de iones de cloruro.
CAPTULO 24 FUNCIN RENAL 521
FIGURA 24-4. Control de ADH y aldosterona de la reabsorcin renal de agua y Na+. (Reimpreso con autorizacin de
Kaplan A, etal., The kidney and tests of renal function, en Kaplan A, Jack R, Opheim KE, Toivola B, Lyon AW, eds. Clini
cal Chemistry: Interpretation and Techniques, 4th ed. Baltimore: Williams & Wilkins, 1995:158, fig. 6-2.)
C onducto colector convierte con rapidez en urea, con lo que se evita toxici
Los conductos colectores constituyen el sitio final de la orina dad. El rin es la nica ruta importante de excrecin de
concentrada o diluida. Las horm onas ADH y aldostero la urea. Esta ltima tiene un peso molecular de 60 y, por
na actan sobre este segmento de la nefrona para controlar tanto, se filtra con rapidez por los glomrulos. En los con
la reabsorcin de agua y sodio. El cloruro y la urea tambin ductos recolectores, se reabsorbe 40 a 60% de la urea. La
se reabsorben aqu. La urea desempea un papel importan urea reabsorbida contribuye a la elevada osmolalidad de la
te en el mantenimiento de la hiperosmolalidad de la mdu mdula, lo que representa uno de los procesos de concen
la renal. Debido a que los conductos recolectores de la tracin urinaria ya mencionados (vase A sa de Henle).
mdula son bastante permeables a la urea, sta se difunde
bajo su gradiente de concentracin hacia fuera del tbulo y C reatinina
en el intersticio medular, lo que aumenta su osmolalidad .4 El msculo contiene fosfato de creatina, un compuesto alto
en energa para la formacin rpida de trifosfato de adeno-
Elim inacin de los com puestos sina (ATP). Esta reaccin se cataliza por la creatina cinasa
(CK) y constituye la primera fuente de combustible metab
nitrogenados no proteicos
lico usado en la contraccin muscular. La creatinina se for
Los compuestos nitrogenados no proteicos (NNP) son ma a partir de creatina, como se muestra a continuacin.
productos de desecho formados en el cuerpo como resul
tado del metabolismo degradante de cidos nucleicos, Fosfato de creatina + ADP + H+
aminocidos y protenas. La excrecin de estos compues no enzimtico
tos representa una funcin importante de los riones. Los creatina + ATP creatinina
tres principales compuestos son urea, creatinina y cido (Ec. 24-1)
rico .5-6 Para conocer una descripcin ms detallada de su Cada da, hasta 20% de la creatina muscular total (y su
bioqumica y correlaciones patolgicas, vase el captulo fosfato) se deshidrata de manera espontnea y se cicla para
9, Compuestos de nitrgeno no protenico. formar creatinina de producto de desecho. Por tanto, las
concentraciones de creatinina estn en funcin de la masa
U rea muscular y permanecen casi iguales en un individuo sobre
La urea constituye la mayor parte (> 7 5 % ) de los NNP de una base diaria, a menos que cambie la masa muscular o la
desecho excretados a diario como resultado del catabolis funcin renal. La creatinina tiene un peso molecular de 113
mo oxidante de las protenas. La sntesis de la urea ocurre y, por tanto, se filtra con facilidad por los glomrulos. Sin
en el hgado. Las protenas se degradan a aminocidos, embargo, una pequea cantidad de creatinina se secreta por
que luego se desaminan para formar amoniaco. ste se los tbulos del rin a elevadas concentraciones en suero.
522 PARTE III VALORACIN DE LAS FUNCIONES DEL SISTEMA ORGNICO
cido rico
Osmolalidad plasmtica
El cido rico es el principal producto de desecho del meta Equilibrio de H20
bolismo de la purina. Las purinas, adenina y guanina, son negativo
precursores del ATP de cidos nucleicos y del trifosfato de
guanosina (GTP), respectivamente. El cido rico tiene un
peso molecular de 168. Al igual que la creatinina, se filtra con
facilidad por los glomrulos, pero luego se somete a un ciclo
complejo de reabsorcin y secrecin a medida que atraviesa Hipotlamo
la nefrona. Al final, slo se excreta 6 a 12% del cido rico (reduccin neural)
filtrado original. El cido rico existe en su forma ionizada y
ms soluble, por lo general urato de sodio, a un pH urinario
> 5 .7 5 (el primer pKa de cido rico). A un pH < 5 .7 5 , est
disociado. Este hecho tiene importancia clnica en el desa
rrollo de urolitiasis (formacin de clculos) y gota.
Fosfato, calcio y magnesio. El ion fosfato se encuentra Este bicarbonato regenerado se transporta en la sangre
en concentraciones ms elevadas en entornos de lquido para reemplazar lo que se elimina por el metabolismo.
intracelular que en los de lquido extracelular. Existe tanto Los iones de hidrgeno acompaantes se secretan una vez
en su forma unida con protenas como en la no unida. El ms en el lumen tubular y de all entran en la orina. El
equilibrio homeosttico se determina de manera primor bicarbonato filtrado es reabsorbido en la circulacin, lo
dial por la reabsorcin tubular proximal bajo el control que ayuda a regresar el pH sanguneo a su concentracin
de la hormona paratiroides (PTH). El calcio, el segundo ptima y funciona de manera efectiva como otro sistema
catin intracelular ms predominante, es el mensajero amortiguador.
inorgnico ms importante en la clula. Existe, tambin, Excrecin de los cidos metabolizados. Los iones
en estados de unin con protenas y no unido con prote hidrgeno son producidos en los tbulos renales como
nas. El calcio en la forma no unida con protenas est ioni parte del mecanismo de regeneracin del bicarbonato.
zado y tiene actividad fisiolgica o no ionizado, y forma Estos iones de hidrgeno, as como otros que se disocian
complejo con iones difundibles pequeos, como fosfato y de cidos orgnicos no voltiles, se eliminan a travs de
carbonato. La forma ionizada se filtra de manera libre por varias reacciones diferentes con bases amortiguadoras.
los glomrulos y se reabsorbe en los tbulos bajo control Reaccin con amoniaco (NH3). Los glomrulos no fil
de la PTH. Sin embargo, el control renal de las concen tran el NH3 Sin embargo, esta sustancia se forma en los
traciones de calcio no representa el principal medio de tbulos renales cuando el aminocido glutamina se des
regulacin. La regulacin controlada por la PTH y la cal amina por la glutaminasa. Luego este NH3reacciona con
citonina de la absorcin de calcio a partir del intestino y iones de hidrgeno secretados para formar iones de amo
de las reservas seas es ms importante que la secrecin nio (NH4+), que no se difunden con facilidad fuera del
o reabsorcin renal. El magnesio, un catin intracelular lumen tubular y, por tanto, se excretan por la orina.
principal, es importante como cofactor enzimtico. Al G lu t a m in a s a
igual que el fosfato y el calcio, existe en estados de unin Glutamina > cido glutmico + NH 3
con protenas y tambin ionizado. La fraccin ionizada se
NH 3 + H+ 4 NaCl - * NH4C1 + Na+ (Ec. 24-3)
filtra con facilidad por los glomrulos y se reabsorbe en los
tbulos bajo la influencia de la PTH. Vase el captulo 21, Este modo de excrecin cida constituye el principal
Funcin paratiroidea y control de la hom eostasis del calcio, medio por el que los riones compensan los estados de
para conocer informacin ms detallada. acidosis metablica.
Reaccin con fosfato de monohidrgeno (H P 0 42~). Los
E quilibrio acidobsico iones de fosfato filtrados por los glomrulos llegan a pre
Muchos productos de desecho acidificados no voltiles se sentarse en el lquido tubular como fosfato de hidrgeno
forman cada da por el metabolismo corporal normal. El de disodio (N a,H P 04) (dibsico). Es posible que este com
cido carbnico, el cido lctico, los cetocidos y otros puesto reaccione con iones de hidrgeno para producir
deben transportarse de manera continua en el plasma y fosfato de dihidrgeno (monobsico), que luego se excreta.
excretarse del cuerpo, lo que produce slo alteraciones Ms adelante, el sodio liberado se combina con bicarbona
menores a un pH fisiolgico. El sistema renal constitu to para producir bicarbonato de sodio y ser reabsorbido.
ye uno de los tres medios por los que se logra el control
constante del pH corporal global. Las otras dos estrategias Na2H P 0 4+ H+ -*- NaH2P 0 4 + Na+ (Ec. 24-4)
implicadas en esta regulacin son el sistema respiratorio y Estos mecanismos llegan a excretar cantidades cre
el sistema amortiguador acidobsico .11 cientes de cido metablico hasta que se alcanza un pH
Los riones llevan a cabo su parte de responsabilidad en urinario mximo de alrededor de 4.4. Despus de esto,
el control del pH corporal por medios duales: al conservar la compensacin renal es incapaz de ajustarse a cual
los iones de bicarbonato y eliminar los cidos metablicos. quier disminucin adicional en el pH sanguneo y surge
Para conocer un estudio ms a fondo de estos procesos, la acidosis metablica. Pocos iones de hidrgeno libres se
consltese el captulo 14, G ases en la sangre, pH y sistem as excretan directo por la orina.
am ortiguadores.
Regeneracin de los iones de bicarbonato. En un pro Funcin endocrina
ceso complicado, los iones de bicarbonato son los prime
ros que se filtran fuera del plasma por los glomrulos. En el Adems de las numerosas funciones excretoras y regu
lumen de los tbulos renales, este bicarbonato se combina ladoras, el rin tambin posee funciones endocrinas.
con iones de hidrgeno para formar cido carbnico, que Representa un sitio endocrino primario, como productor
luego se degrada a dixido de carbono ( C 0 2) y agua. Pos de sus propias hormonas, y un sitio secundario, como
teriormente este C 0 2se difunde en el borde escobillado de lugar designado para las hormonas producidas por otros
las clulas tubulares proximales, donde se reconvierte por rganos endocrinos. Los riones sintetizan renina, eritro-
la anhidrasa carbnica a cido carbnico y luego se vuelve poyetina, 1,25-dihidroxivitamina D3 y prostaglandinas.
a degradar a iones de hidrgeno y iones de bicarbonato Renina. La renina es el componente inicial del sistema
regenerados. Esta reaccin se detalla a continuacin: renina-angiotensina-aldosterona. La renina se produce por
las clulas yuxtaglomerulares de la mdula renal cuando
H20 + C 0 2 H2C 0 3 H+ + H C 0 3- (E c. 24-2) disminuye el volumen de lquido extracelular o la presin
524 PARTE III VALORACIN DE LAS FUNCIONES DEL SISTEMA ORGNICO
sangunea. Cataliza la sntesis de la angiotensina por des to, antes de que la concentracin de cualquier sustancia
doblamiento del angiotensingeno precursor plasmtico comience a aumentar en la sangre. A la tasa en que la creati
circulante. La angiotensina se convierte a angiotensina nina y la urea se eliminan o depuran de la sangre en la orina
II por la enzima convertidora de angiotensina (ACE). La se le denomina eliminacin. sta se define como el volumen
angiotensina II es un potente vasoconstrictor que aumenta de plasma a partir del cual una cantidad medida de sustan
la presin sangunea y estimula la liberacin de aldostero cia debe eliminarse por completo en la orina por unidad de
na a partir de la corteza suprarrenal. La aldosterona, a su tiempo expresada en ml/min.5La medicin de la eliminacin
vez, promueve la reabsorcin de sodio y la conservacin se usa para calcular el ndice de filtracin glomerular.
de agua .810 Para conocer un panorama ms detallado de
las complejidades de este circuito de retroalimentacin, C reatinina
consltese el captulo 18, Funcin suprarrenal. La creatinina es una sustancia casi ideal para las medicio
Eritropoyetina. La eritropoyetina es un polipptido de nes de eliminacin. Se trata de un producto metablico
cadena simple producido por clulas cercanas a los tbulos endgeno sintetizado a una tasa constante para un indivi
proximales. Su produccin est regulada por los valores de duo dado y, en esencia, slo se elimina por filtracin glo
oxgeno sanguneo. La hipoxia produce aumento de las con merular (no se reabsorbe y slo se secreta ligeramente por
centraciones sricas a las dos horas. La eritropoyetina acta el tbulo proximal). El anlisis de la creatinina es sencillo
sobre las clulas progenitoras eritroides en la mdula sea, lo y econm ico a travs de anlisis colorimtricos.
que incrementa la cantidad de glbulos rojos. En la insufi
ciencia renal crnica, la produccin de eritropoyetina se
Elim inacin d e la creatinina e ndice
reduce en gran medida. En fecha reciente, se desarroll la
eritropoyetina humana recombinante y en la actualidad es d e filtra ci n g lo m eru la r
de uso rutinario en pacientes con insuficiencia renal. Antes de El clculo de la eliminacin de la creatinina se ha vuelto el
esta terapia, la anemia era una realidad clnica en estos mtodo estndar de laboratorio para determinar el ndice
pacientes .5,8 Es posible medir las concentraciones de eri de filtracin glom erular (IFG). Este valor se deriva por la
tropoyetina en la sangre a travs de inmunoensayos. relacin matemtica de la concentracin de creatinina sri
ca con la concentracin de creatinina urinaria excretada
1,25-Dihidroxivitam ina D durante un perodo, por lo general de 24 h. Por tanto, la
recoleccin de la muestra debe incluir una muestra de orina
Los riones son los sitios de formacin de la forma activa en 24 h y un valor de creatinina srica, en condiciones idea
de la vitam ina D; l,2 5 (O H )2vitamina Dr 3-5 Esta forma de les obtenido a la mitad de la recoleccin de orina de 24 h. Se
vitamina D es una de las tres principales hormonas que debe mantener refrigerado el recipiente de la orina (limpio,
determinan el equilibrio de fosfato y calcio y la calcifica seco y libre de contaminantes o conservadores) a lo largo
cin sea en el cuerpo humano. Por tanto, a menudo la del procedimiento de recoleccin y del subsiguiente pero
insuficiencia renal crnica est relacionada con osteom ala do de almacenaje hasta que se realice el anlisis de laborato
cia (calcificacin sea inadecuada, la forma de raquitismo rio. La concentracin de creatinina en suero y orina se mide
en adultos), debido a la distorsin continua del metabolis por los mtodos aplicables que se analizan en el captulo
mo normal de la vitamina D. 9, Compuestos de nitrgeno no protenico. El volumen total
Prostaglandinas. Las prostaglandinas conforman un gru de orina se mide de manera cuidadosa, y la eliminacin de
po de cidos grasos cclicos potentes constituidos a partir de creatinina se calcula a travs de la siguiente frmula:
cidos grasos esenciales (dietticos), sobre todo cido ara-
quidnico. Se forman en casi todos los tejidos, y sus acciones CCr (ml/min) =
son diversas. Las prostaglandinas producidas por los riones
UCr (mg/dl) x VUr(ml/24 h) 1.73
aumentan el flujo sanguneo renal, la excrecin de sodio y
agua, y la liberacin de renina. Actan en oposicin a la vaso PCr (mg/dl) x 1440 min/24 h A
constriccin debida a la angiotensina y la noradrenalina. (Ec. 24-5)
donde
PROCEDIM IENTOS ANALTICOS CrCr = eliminacin de creatinina
Existen varias pruebas disponibles para evaluar varios UrCr = concentracin de creatinina urinaria
aspectos de la funcin de la nefrona, incluyendo filtracin VUr = volumen de orina excretada en 24 h
glomerular, y secrecin y reabsorcin de los tbulos proxi P,Cr = concentracin de creatinina srica
males y distales. 1.73/A = factor de normalizacin para el rea superfi
cial corporal
M ediciones de elim inacin 1.73 es el promedio aceptado en forma general de superfi
Todos los mtodos de laboratorio empleados para la valo cie corporal en metros cuadrados.
racin de la funcin renal dependen de la medicin de los A es el rea de superficie corporal real del individuo
productos de desecho en la sangre, por lo general urea y determinada por la altura y el peso.
creatinina, que aumentan cuando los riones comienzan a Si el rea de superficie corporal del paciente vara en
fallar. Es necesario anticipar la insuficiencia renal, con slo gran medida del promedio (p. ej., pacientes obesos o pedi
alrededor de 20 a 30% de las nefronas an en funcionamien tricos), esta correccin de la masa corporal debe incluirse
CAPTULO 24 FUNCIN RENAL 525
en la frmula. En el apndice G, N om ogram a p ara la deter da y proteinuria tubular; tambin, para valorar globulinas
minacin del rea de la superficie corporal, se muestran monoclonales o policlonales anormales. Se realizar iden
nomogramas para la determinacin ms precisa del rea de tificacin positiva y determinacin del subtipo de las para-
superficie corporal a partir de los valores de peso y altura. protenas urinarias por electroforesis de inmunofijacin.
Los rangos de referencia para la eliminacin de creati
nina son: |32-M icroglobulina
Hombres: 97 ml/min por 1.73 m 2 a 137 ml/min por La (32-m icroglobulina (|32-M) es un pequeo polipptido
1.73 m2. no glucosilado (peso molecular de 1 1 8 0 0 daltons) que se
Mujeres: 88 ml/min por 1.73 m 2 a 128 ml/min por encuentra en la superficie de la mayor parte de las clulas
1.73 m nucleadas. La membrana plasmtica pierde (3,-M como una
En condiciones normales, la eliminacin de la creatinina molcula relativamente intacta en el lquido extracelular
disminuye con la edad, con una disminucin de alrede circundante. Debido a que este proceso es bastante cons
dor de 6.5 ml/min por 1.73 m 2 por cada dcada de vida. tante en adultos, las concentraciones de (32-M permanecen
estables en pacientes normales. Los valores elevados en
n d ice d e filtra ci n g lo m eru la r estim ado suero indican incremento en la renovacin celular, como
La National Kidney Foundation recomienda que se calcule se observa en trastornos mieloproliferativos y linfoprolife-
el ndice de filtracin glom eru lar estim ado (IFGE) cada vez rativos, inflamacin e insuficiencia renal. Como pptido
que se informe una creatinina srica. (Hay informacin pequeo endgeno, la |32-M se filtra con facilidad por los
adicional disponible en el sitio Web de la National Kidney glomrulos. Luego se reabsorbe alrededor de 99.9% por
Foundation). La ecuacin se usa para predecir el IFG y se los tbulos proximales y se cataboliza. La medicin de la
basa en la creatinina srica, la edad, el tamao corporal, |32-M srica se utiliza en clnica para evaluar la funcin
el gnero y la raza, sin necesidad de una creatinina en la tubular renal en pacientes con trasplante renal, con valo
orina. Puesto que el clculo no requiere la recoleccin de res elevados que indican rechazo al rgano. En algunos
orina programada, se utilizar ms a menudo que la elimi estudios se ha encontrado que la p2-M es un marcador ms
nacin de cretinina tradicional y dar como resultado la eficiente del rechazo del trasplante renal que los valores de
deteccin ms temprana de la enfermedad renal crnica. creatinina srica porque no depende de la masa muscular
Consultse la seccin Enferm edad renal crnica que apa magra ni de la variacin diaria en la excrecin .1314
rece ms adelante para conocer la interpretacin del IFG
(por lo general, por el IFG E ).12 M ioglobina
IFG(ml/min) = U 40 - Edad) X Peso(kg) x
La m ioglobina es una protena de bajo peso molecular
72 x S Cr (mg/dl)
(1 6 9 0 0 daltons) relacionada con lesiones esqueltica y
(0.85 si es mujer)* muscular cardaca agudas. La funcin de la mioglobina es
enlazar y transportar oxigeno de la membrana plasmtica
(Ec. 24-6)
a la mitocondria en clulas musculares. En la rabdom ili
U rea sis, la mioglobina que se libera del msculo esqueltico es
La eliminacin de la urea fue una de las primeras pruebas de suficiente para sobrecargar los tbulos proximales y causar
eliminacin realizadas. La urea se filtra de manera libre en los insuficiencia renal aguda. El diagnstico temprano y tra
glomrulos, y alrededor de 40% se reabsorbe por los tbu tamiento agresivo de la elevacin de la mioglobina llega a
los. Por esta razn, no proporciona una valoracin completa prevenir o disminuir la gravedad de la insuficiencia renal.
de la eliminacin, y ya no se utiliza en forma amplia. En fecha reciente, se propuso la eliminacin de la mioglobi
En las pruebas antiguas de eliminacin se utilizaba na como indicador temprano efectivo de insuficiencia renal
inulina, yotalamato de sodio [ 125I] o p-aminohipurato para aguda inducida por mioglobina. Una eliminacin elevada o
evaluar la filtracin glomerular o la secrecin tubular. Estas una eliminacin y concentracin srica bajas indican riesgo
pruebas son tardadas, costosas y difciles de administrar, bajo, y una eliminacin baja y concentracin srica elevada
por lo que en su mayor parte estn descontinuadas. indican riesgo elevado .15 La mioglobina srica y urinaria se
mide con facilidad y rapidez a travs de inmunoanlisis. La
mioglobina urinaria se mide, tambin, mediante mtodos de
Electroforesis de la orina
tira sumergible despus de eliminar la hemoglobina, pero
Debido a la eficacia de la filtracin glomerular y la reab este mtodo no tiene sensibilidad ni especificidad.
sorcin tubular renales, la excrecin de protena urinaria
normal es de slo 50 a 150 mg/24 h. Es posible que se desa M icroalbm ina
rrolle proteinuria cuando hay defectos en la reabsorcin
renal o en la permeabilidad capilar glomerular, o cuando El trmino microalbum inuria describe cantidades peque
hay un aumento importante en las inmunoglobulinas sri as de albmina en orina. La medicin de la m icroalbm i
cas. Como resultado, la electroforesis de la orina se utiliza na urinaria es importante en el cuidado de los pacientes
sobre todo para distinguir entre neuropata glomerular agu con diabetes mellitus, que se encuentran en riesgo impor
tante de desarrollar nefropata a lo largo de su vida. El tipo
* De Cockcroft-Gault (Nephron 1976;16:31) 1 tiene un riesgo de 30 a 45% , en tanto que el tipo 2 tiene
526 PARTE III VALORACIN DE LAS FUNCIONES DEL SISTEMA ORGNICO
un riesgo de 30%. En las primeras fases de nefropata, hay la retencin de toda la noche en la vejiga. La muestra se
hipertrofia renal, hiperfuncin y aumento del grosor de obtiene mediante captura o cateterizacin media limpia.
las membranas glomerular y basal tubular. En esta fase La orina se recolecta en un recipiente limpio y seco con
temprana, no hay seales evidentes de disfuncin renal. una tapa bien cerrada. Se analiza en la primera hora de
En los siguientes 7 a 10 aos, existe progresin hacia glo- la recoleccin si se mantuvo a temperatura ambiente, o
merulosclerosis, con incremento en la permeabilidad capi refrigerada a 2 a 8C durante no ms de ocho horas antes
lar glomerular. Esta permeabilidad permite que cantidades del anlisis. De no examinarse en estos lmites de tiem
pequeas (microscpicas) de albmina pasen a la orina. po, ocurren varios cambios. La multiplicacin de bacterias
Si se detecta en esta fase temprana, es posible establecer produce pruebas de nitritos falso positivas, en tanto los
control rgido de la glucosa, jun to con tratamiento para microorganismos productores de ureasa degradan la urea a
prevenir hipertensin, para impedir la progresin hacia la amoniaco y alcalinizan el pH. La prdida de CO, por difu
enfermedad renal de estado terminal (ERET ).16 En los cri sin en el aire contribuye a esta elevacin del pH, que, a su
terios de la A m erican D iabetes Association para la frecuen vez, causa degeneracin de matiz y lisis de clulas rojas.
cia de pruebas de albmina urinaria en todas las personas Se requiere que el contenedor de la orina sea estril si la
con diabetes, se recomienda una comprobacin en la eva orina ser cultivada. Por lo general, las muestra para el UA
luacin inicial del paciente, y cada ao en lo sucesivo para rutinario son recolecciones aleatorias o al azar.
todos los pacientes pospberes que han tenido diabetes Apariencia visual. La intensidad del color de la ori
durante cuando menos cinco aos .17 na se relaciona con la concentracin: cuanto ms oscu
Se utilizan de manera extensa inmunoanlisis cuantita ra, ms concentrada es la muestra. Los diversos colores
tivos especficos para albmina, por lo general con nefe observados en la orina se deben a los distintos pigmentos
lometra o inmunoturbidimetra. Las concentraciones de excretados. El amarillo y el mbar suelen originarse por
albmina urinaria de 50 a 200 mg/24 h predicen nefropa los urocromos (derivados de la urobilina, el producto final
ta diabtica .18 Se prefiere una recoleccin de orina de 24 de la degradacin de la bilirrubina), mientras que un color
h, pero tambin es posible utilizar una muestra aleatoria castao amarillento o verde es resultado de la oxidacin
de orina en la que se utilice una proporcin entre albmi del pigmento biliar. El rojo y caf despus de una expo
na y creatinina. Una proporcin de albmina/creatinina de sicin se deben a las porfirinas, en tanto el castao rojizo
20 a 30 mg/g indica microalbuminuria .19 Aunque muchos en muestras recientes proviene de la hemoglobina o las
mtodos de tira reactiva de orina no son lo bastante sensi clulas rojas. El negro castao despus de la exposicin
bles para detectar estas concentraciones bajas de albmi se observa en presencia de alcap ton u a (como resultado
na, ahora estn disponibles mtodos de tira reactiva ms del cido homogentsico excretado) y melanoma maligno
recientes para la deteccin especfica de albmina y la pro (en el que el melangeno precursor se oxida en el aire a
porcin de albmina/creatinina. melanina). Los frmacos y algunos alimentos, como las
remolachas, tambin llegan a alterar el color de la orina.
Cistatina C Olor. Por lo general, el olor tiene poca importancia
en el diagnstico. El caracterstico olor agrio de la orina
La cistatina C es una pro tena de bajo peso molecular pro
reciente se debe a cidos aromticos voltiles, en contraste
ducida por clulas nucleadas. Se filtra de manera libre por
con el olor tpico a amoniaco de la orina que permanece
los glomrulos, y se reabsorbe y cataboliza por el tbulo
expuesta. Las infecciones del tracto urinario confieren un
proximal. Se produce a una tasa constante, por lo que los
olor nocivo fecal a la orina; mientras tanto, la orina de dia
valores permanecen estables si la funcin def rin es nor
bticos a menudo huele a afrutado debido a las cetonas.
mal. En estudios recientes se demostr que las mediciones
Turbidez. La turbidez de una muestra de orina depen
de cistatina C son cuando menos tan tiles como la crea
de del pH y de la composicin de los slidos disueltos. La
tinina srica y la eliminacin de creatinina en la deteccin
turbidez a menudo se debe a bacteriuria evidente, en tanto
de cambios tempranos en la funcin renal. La cistatina C
que un aspecto ahumado se observa en la hematuria. Se
se mide a travs de mtodos de inmunoanlisis .20
detecta turbidez con aspecto de hilo cuando la muestra
est llena de moco. En la orina alcalina, los precipitados
Urianlisis
suspendidos de fosfatos y carbonatos amorfos tal vez sean
El urianlisis (UA) permite una valoracin detallada a fon responsables de la turbidez; en la orina cida, los uratos
do del estado renal con una muestra obtenida con facilidad. amorfos constituyen la posible causa .13
El UA sirve, tambin, como indicador rpido del estado de Volumen. El volumen de la orina excretada indica el
glucosa y de la funcin heptica biliar de un individuo. El equilibrio entre la ingestin de lquidos y la prdida de
UA rutinario incluye la evaluacin de las caractersticas agua a partir de los pulmones, el sudor y el intestino. La
fsicas, anlisis qumicos y un examen microscpico del mayora de los adultos produce de 750 a 2 0 0 0 ml/24 h,
sedimento de una muestra de orina (aleatoria). con un promedio de alrededor de 1.5 por persona. (Para
un UA rutinario, una alcuota de 10 a 12 mi tomada de
C aractersticas fsicas una muestra bien mezclada es ptima para el anlisis pre
Recoleccin de a muestra. Es necesario enfatizar en la ciso de los constituyentes sedimentarios.) La poliuria se
importancia de una muestra recolectada y almacenada de observa en la diabetes mellitus e inspida (en sta, como
manera apropiada para el UA. Se prefieren las muestras al resultado de la falta de ADH), as como en enfermedad
inicio de la maana porque estn ms concentradas por renal crnica, acrom egalia (sobreproduccin de la soma-
CAPTULO 24 FUNCIN RENAL 527
tostatina de la hormona del crecimiento) y m ixedem a (ede diabetes mellitus, y acidosis tubular. En la acidosis tubular
ma hipotiroideo). Se encuentra anuria u oliguria (< 2 0 0 renal, los tbulos son incapaces de excretar exceso de EL,
ml/da) en presencia de nefritis, ERET, obstruccin del aunque el cuerpo se encuentre en estado de acidosis meta
tracto urinario e insuficiencia renal aguda. blica, y el pH urinario permanezca en alrededor de 6 .
Gravedad especfica. La gravedad especfica (GE) de Se detecta orina alcalina (pH, > 7 .0 ) posprandial como
la orina es el peso de 1 mi de orina en gramos dividido una reaccin normal a la acidez del EIC1 gstrico bombea
entre el peso de 1 mi de agua. La GE indica la densidad de do en el duodeno y luego en la circulacin. Adems, las
un lquido que depende de la concentracin de los slidos infecciones del tracto urinario y la contaminacin bacte
totales disueltos. La GE vara con la carga de soluto que ricida alcalinizan el pH. Medicamentos como el citrato de
debe excretarse (consiste sobre todo en NaCl y urea), as potasio y el bicarbonato de sodio reducen el pH urinario.
como con el volumen de orina. Se usa para evaluar el esta Tambin se observa orina alcalina en presencia de sndrome
do de hidratacin/deshidratacin de un individuo o como de Fanconi, una aminoaciduria congnita generalizada que
indicador de la capacidad de concentracin de los riones. se origina por un defecto en la funcin tubular proximal.
M todos d e la b oratorio. El mtodo analtico encontrado
ms a menudo consta de un refractmetro, o medidor de A nlisis qum icos
slidos totales. ste opera con base en el principio de que El anlisis qumico rutinario de orina es rpido y fcil de
el ndice de refraccin de una muestra de orina variar de realizar con las tiras reactivas o sumergibles disponibles en
manera directa con la cantidad total de slidos disueltos en el mercado. Estas tiras estn cubiertas de plstico y cuen
la muestra. Este instrumento mide el ndice de refraccin tan con diferentes bandas de reactivo dirigidas hacia varios
de la orina en comparacin con el agua en una escala que analitos. Cuando se sumergen en la orina, un cambio de
se calibra directamente en el ocular y se observa a contra color seala una desviacin de la normalidad. Los colores
luz. La calibracin correcta es vital para la precisin. En de las bandas de las tiras reactivas se comparan con un
fecha ms reciente, se agreg un mtodo indirecto de tira cuadro de colores proporcionado con los reactivos. Los
con reactivo colorimtrico para analizar la GE a la mayor instrumentos automatizados y semiautomatizados que se
parte de las valoraciones con tiras reactivas. A diferencia detectan por fotometra de reflectancia proporcionan una
del refractmetro, las tiras reactivas miden slo solutos alternativa al cuadro de colores, y ofrecen mayor precisin
inicos y no toman en cuenta la glucosa ni la protena. y estandarizacin. La obtencin de resultados anormales
C orrelacin con en ferm edad. El rango normal para debe seguirse por anlisis de orina cuantitativos o con
la GE urinaria es de 1.005 a 1.030. Las muestras dilui firmatorios. Los analitos examinados de manera rutinaria
das se clasifican en el rango de 1.000 a 1.010 , en tanto son glucosa, protena, cetonas, nitrito, leucocito esterasa,
las muestras concentradas caen entre 1.025 y 1.030. La bilirrubina/urobilingeno y hemoglobina/sangre.
GE llega a variar en estados patolgicos. Se observa GE Glucosa y cetonas. En condiciones normales, estos
baja en presencia de diabetes inspida, en la que tal vez componentes estn ausentes en la orina. En el captulo 11,
nunca sobrepase el rango de 1.001 a 1.003, y en pielo- C arbohidratos, se analiza la importancia clnica de estos
nefritis y glomerulonefritis, en las que la capacidad de analitos y sus mtodos de prueba.
concentracin renal se vuelve disfuncional. En ocasiones Protena. Las tiras de reactivo para el UA se utilizan
se observa GE elevada en diabetes mellitus, insuficiencia como valoracin cualitativa general para la proteinuria.
cardaca congestiva, deshidratacin, insuficiencia supra Son especficas sobre todo para albmina, pero tal vez
rrenal, enfermedad heptica y nefrosis. La GE aumentar produzcan resultados falso-positivos en muestras que son
alrededor de 0.004 unidades por cada cambio de 1% en la alcalinas y muy amortiguadas. Los resultados positivos de
concentracin de glucosa, y alrededor de 0.003 unidades las tiras sumergibles deben confirmarse por anlisis qu
por cada cambio de 1% en protenas. En dao renal grave, micos ms especficos, como se describi en el capitulo 8 ,
en el que los riones excretan orina que es isoosmtica A m inocidos y protenas, o ms a menudo por evaluacin
con el plasma, se observa una GE fija (isostenuria) de casi microscpica para detectar matices.
1.010. Por lo general, esto ocurre despus de un perodo Nitrito. Este anlisis semicuantifica la cantidad de reduc
inicial de anuria debido a que los tbulos daados son cin urinaria de nitrato (en la almohadilla de la tira del
incapaces de concentrar o diluir el filtrado glomerular.9,13 reactivo) a nitrito por las enzimas de las bacterias gramne-
pH. Las determinaciones del pH urinario deben reali gativas. Este esquema se muestra en la siguiente reaccin.
zarse con muestras recientes debido a la importante ten
dencia de la orina a la alcalinizacin ante la exposicin. El Nitrito + p-cido arsanlico - compuesto de diazonio
pH urinario normal cae en el rango de 4.5 a 8.0. La acidez + N-l-naftiletilenediam ina - color rosa
de la orina (pH, < 7 .0 ) se origina sobre todo por fosfa (Ec. 24-7)
tos, que se excretan como sales conjugadas de Na+, K+,
Ca2+ y NH4+. Adems, la acidez refleja la excrecin de los Un resultado negativo no significa que la bacteriuria no
cidos metablicos no voltiles piruvato, lactato y citra est presente. Un patgeno grampositivo, como estafiloco
to. Debido al mecanismo de bombeo de intercambio del co, enterococo o estreptococo, tal vez no produzca enzi
Na+/H+ de los tbulos renales, el pH (concentracin del mas reductoras del nitrato; como alternativa, una muestra
ion de EL) aumenta a medida que se retiene sodio. Los de orina al azar quiz no se haya retenido el tiempo nece
estados patolgicos, en los que se observa aumento de la sario en la vejiga para recolectar una cantidad suficiente de
acidez, incluyen acidosis sistmica, como se observa en la microorganismos que se registren en la tira del reactivo .13
528 PARTE III VALORACIN DE LAS FUNCIONES DEL SISTEMA ORGNICO
Leucocito esterasa. Los glbulos blancos, en especial los vaginales escamosos, grandes y aplanados en muestras de
fagocitos, contienen esterasas. Una tira sumergible positiva orina de pacientes femeninos. Adems, tal vez se obser
para esterasas indica posibles clulas blancas en la orina. ven aglomerados o lminas de estas clulas en muestras
Bilirrubina/urobilingeno. El resultado final de la degra muy contaminadas con flujo vaginal. Las clulas epite
dacin de la hemoglobina es la formacin de bilirrubina, un liales renales son clulas redondas sin ncleo; cuando se
producto de desecho, que luego se convierte en urobilinge presentan en una cantidad mayor de 2/cap, indican lesin
no en el intestino a travs de la accin bacteriana. Aunque la o degeneracin tubular activa de importancia clnica. Las
mayor parte de este urobilingeno se excreta como urobilina clulas epiteliales transicionales de la vejiga (clulas uro-
por las heces, una parte lo hace por la orina como producto de teliales), que tambin llegan a observarse en la orina, son
desecho incoloro. En condiciones normales, esta cantidad planas, cuboidales o columnares. Se detectarn cantida
es demasiado pequea para detectarla como una reaccin des grandes de estas clulas slo en caso de cauterizacin,
positiva en la tira sumergible. Sin embargo, en problemas de inflamacin de la vejiga o neoplasma.
ictericia preheptica, heptica y posheptica, las pruebas Elementos diversos. A menudo se encuentran esper
con tiras sumergibles en orina para urobilingeno y bilirru matozoos en la orina tanto de mujeres como de hombres.
bina son positivas o negativas, lo que depende de la natura Por lo general, no se informa porque no tienen importan
leza de la ictericia del paciente. En el captulo 22, Funcin cia patolgica. Sin embargo, en hombres, es posible que
heptica, se proporciona un panorama ms detallado del su presencia indique anormalidades de la prstata. En las
metabolismo de la bilirrubina y los mtodos de anlisis. Las muestras de orina se observan con frecuencia, tambin,
pruebas con tira de reactivo para bilirrubina implican la dia- clulas de levadura. Debido a que son en extremo refrcti-
zotizacin y formacin de un cambio de color. Los mtodos les y de tamao similar a los glbulos rojos, se confunden
de tira sumergible para urobilingeno son diferentes, pero la con facilidad bajo una amplificacin baja. El anlisis a una
mayor parte cuenta con una modificacin de la reaccin de mayor potencia para formas botnales o miceliales diferen
Ehrlich con p-dimetilaminobenzaldehdo .13 cia estos elementos fngicos de los eritrocitos. Los par
Hemoglobina/sangre. Los glbulos rojos intactos o Usa sitos encontrados en la orina suelen ser contaminantes de
dos producen un resultado positivo en la tira sumergible. material fecal o vaginal. En la categora de contaminantes
sta ser positiva en casos de traumatismo/lesin renal, fecales, el microorganismo encontrado ms a menudo es la
infeccin u obstruccin que causa clculos o neoplasmas. infestacin con Enterobius verm icularis (parsito de alfiler)
en nios. En la categora de contaminacin vaginal, el ms
E x a m e n d e sedim ento habitual es el flagelo de intensa movilidad Tricomonas vagi-
Una alcuota de orina decantada y centrifugada deja un nalis. Un parsito urinario verdadero, algunas veces visto
sedimento de elementos formados que se utiliza para el en pacientes de reas endmicas del mundo, es el vulo
examen microscpico. del trematodo Schistosom a haem atobium . Por lo general,
Clulas. En el caso de los elementos celulares, la eva esta afeccin ocurrir jun to con hematuria importante .13
luacin se logra de m ejor manera por conteo y despus se Bacterias. La orina normal es estril y no contiene bac
obtiene el promedio de cuando menos 10 campos micros terias. Las cantidades pequeas de microorganismos obser
cpicos. vadas en una muestra de orina reciente suelen representar
G lbu los rojos. A los eritrocitos mayores de 0-2/campo contaminacin de la piel o area. Sin embargo, en mues
de alta potencia (cap) se les considera anormales. Es posi tras recientes, cantidades grandes de microorganismos o
ble que esta hematuria tan slo se deba a ejercicio exce volmenes pequeos acompaados por glbulos blancos
sivo o contaminacin sangunea menstrual. Sin embargo, y los sntomas de infeccin del tracto urinario, constitu
tambin llega a indicar traumatismo, en particular lesin yen un diagnstico favorable para infeccin verdadera. Se
vascular, obstruccin de clculos renales/urinarios, pie- considera bacteriuria de importancia clnica con ms de 20
lonefritis o cistitis. La hematuria junto con leucocitos es microorganismos/cap o, como alternativa, 105 o un regis
diagnstica de infeccin. tro mayor en un recuento microbiolgico de colonias. La
G lbulos blancos. A los leucocitos mayores de 0-2/cap mayor parte de los patgenos observados en la orina son
se les considera anormales. Por lo general, estas clulas son coliformes gramnegativos ( bastones microscpicos),
fagocitos polimorfonucleares, a menudo conocidos como como las especies E scherichia coli y Proteus. La bacteriu
neutrfilos segmentados. Se observan cuando existe glomeru- ria asintomtica, en la que hay cantidades importantes de
lonefritis aguda, infeccin del tracto urinario o inflamacin bacterias sin sntomas clnicos apreciables, ocurre un poco
de cualquier tipo. En la orina hipo tnica (concentracin ms a menudo en mujeres jvenes, embarazadas y pacien
osmtica baja), los glbulos blancos aumentan de tama tes con diabetes. Se debe tomar en cuenta este trastorno
o, en tanto muestran un efecto brillante en sus grnulos con seriedad, ya que si no se trata tal vez ocasione pielone-
citoplsmicos. Estas clulas poseen movimiento de Brown fritis y, como resultado, dao renal permanente.
notable y se les conoce como clulas brillantes, aunque care Cilindros. Los cilindros son impresiones cilindricas
cen de importancia desde el punto de vista patolgico. precipitadas de las nefronas. Comprenden la mucoprote-
C lulas epiteliales. A menudo se encuentran varios na de Tamm-Horsfall (uromucoide) de los epitelios tubu
tipos de clulas epiteliales en la orina normal porque se lares de la extremidad ascendente del asa de Henle. Los
desprenden con frecuencia de la cubierta de las nefronas cilindros se forman cada vez que hay estasis renal sufi
y del tracto urinario. Por lo general, se observan epitelios ciente, concentraciones elevadas de sal o pro tena urinaria
CAPTULO 24 FUNCIN RENAL 529
y descenso del pH urinario. En pacientes con enfermedad uratos amorfos, consistentes en masas amarillentas-rojizas
renal grave, la clasificacin precisa real de los cilindros tal normales con aspecto de granos de arena. Los cristales de
vez requiera el uso de centrifugacin de citospina y la cido rico encontrados en este ambiente son cristales
prueba de Papanicolaou para realizar diferenciacin ade normales amarillentos a rojizos-castaos con formas muy
cuada. A diferencia de las clulas, los cilindros se exami irregulares, como escrpelas, prismas o romboides. Los
narn bajo potencia baja, y a menudo se localizan en torno cristales de colesterol de la orina cida son lminas rec
a los bordes del cubreobjetos. tangulares, claras y planas con esquinas hendidas. A stos
H ialinos. La matriz de estos cilindros es clara y gela siempre se les considera anormales y se observan en pre
tinosa, sin materia celular o particulada incrustada. Tal sencia de sndrome nefrtico y en afecciones que produ
vez sean difciles de visualizar, a menos que se use una cen quiluria. Algunas veces tambin se observan cristales
lmpara de alta intensidad. Su presencia indica filtracin de cistina en la orina cida; son bastante patolgicos y su
glomerular de protena. Esta filtracin es temporal (como aspecto es de hexgonos incoloros, refrctiles y casi pla
resultado de fiebre, postura erguida, deshidratacin o nos, con cierta semejanza al cido rico. Se les observa en
estrs emocional) o permanente. A su presencia ocasional la cistinuria (aminoaciduria heredada que produce retraso
no se le considera patolgica. mental) y mocistinuria (raro defecto de la reabsorcin de
G ranulares. Estos cilindros se clasifican de manera des cistina que ocasiona clculos renales).
criptiva en granulares speros o finos. El tipo de materia A m bien te alcalino. Los cristales detectados en orina
particulada insertada slo depende de la cantidad de dege con valores de pH mayores de 7 incluyen fosfatos amorfos,
neracin que sufren las inclusiones de clulas epiteliales. que son cristales normales con aspecto de masas finas e
Su presencia ocasional no es patolgica; sin embargo, tal incoloras semejantes a la arena. Adems, se han encontra
vez se encuentren cantidades grandes por toxicidad crni do cristales de carbonato de calcio, consistentes en formas
ca por plomo y pielonefritis. normales similares a pesas o esferas pequeas incoloras.
Celulares. En esta categora se incluyen diversos tipos de Otros cristales observados en orinas alcalinas son los de
cilindros. A los cilindros de glbulos rojos o eritrocitos siem fosfato triple, que constan de prismas incoloros de tres a
pre se les considera patolgicos porque son diagnsticos de seis lados semejantes a tapas de atad. Los cristales de
inflamacin glomerular que produce hematuria renal. Se biurato de amonio son formas que se encuentran de mane
observan en presencia de endocarditis bacterial subcutnea, ra ocasional en este medio, con aspecto de esferas castao-
infartos del rin, enfermedades del colgeno y glomerulo- amarillentas espinosas, o manzanas con espinas.
nefritis aguda. A los cilindros de glbulos blancos o leucoci Otros. Los cristales de sulfonamida son precipitados
tos siempre se les considera, tambin, patolgicos porque anormales con formas de vainas, racimos o agujas casta-
son diagnsticos de inflamacin de las nefronas. Se obser o-amarillentas encontrados en pacientes que se someten
van en pielonefritis, sndrome nefrtico y glomerulonefritis a terapia antimicrobiana con frmacos sulfa. En la actua
aguda. En pielonefritis asintomtica, estos cilindros consti lidad, rara vez se utilizan estos frmacos. Los cristales de
tuyen el nico indicio para la deteccin. Algunas veces se tirosina/leucina son tipos anormales semejantes a racimos
forman cilindros de clulas epiteliales por fusin de los epi de agujas o esferas lisas amarillentas. En ocasiones se
telios tubulares renales despus de descamacin; la presen observan en pacientes con enfermedad heptica grave.
cia ocasional es normal. Sin embargo, se observan muchos
en procesos descamativos graves y estasis renal, que se pre FISIOPATOLOGA
sentan por envenenamiento con metales pesados, toxicidad
renal, eclampsia, sndrome nefrtico y amiloidosis. Los Enferm edades glom erulares
cilindros de cera son uniformemente amarillentos, refrcti- Es posible que, al menos en principio, los trastornos o
les y de aspecto quebradizo, con bordes bien definidos a enfermedades que daan de forma directa a los glomru
menudo rotos. Casi siempre son patolgicos porque indi los renales muestren funcin tubular normal. Sin embar
can infamacin o deterioro tubular. Se forman por estasis go, con el tiempo, la progresin de la enfermedad tambin
renal en los conductos colectores y, por tanto, se les encuen abarca los tbulos renales. Los siguientes sndromes tienen
tra en enfermedades renales crnicas. Los cilindros de grasa sntomas discretos que son reconocibles por sus patrones
son cilindros granulares anormales, speros y granulares de hallazgos en el laboratorio clnico .58
con inclusiones de lpidos que aparecen como glbulos
refrctiles de tamaos diferentes. Los cilindros am plios (insu G lom erulonefritis aguda
ficien cia renal) son entre dos a seis veces ms anchos que los Las lesiones patolgicas de la glom erulonefritis aguda afec
cilindros regulares, y su composicin es celular, de cera o tan sobre todo los glomrulos. En el examen histolgico se
granular. Al igual que los cilindros de cera, se derivan de los muestran glomrulos grandes e inflamados con disminu
conductos recolectores en la estasis renal. cin del lumen capilar. Por lo general, entre los hallazgos
de laboratorio anormales se encuentran inicio rpido de
C ristales hematuria y proteinuria (a menudo albmina, < 3 g/da).
A m bien te cido. Los cristales que se observan en orina con El rpido desarrollo de un descenso en el IFG , anemia,
valores de pH menores de 7 incluyen oxalato de calcio, que elevacin del nitrgeno ureico sanguneo (US) y creati
son octaedros o moldes incoloros normales. Tienen un nina srica, oliguria, retencin de sodio y agua (con hiper
aspecto semejante a una estrella. Adems, se han detectado tensin consecuente y cierto edema localizado) y, algunas
530 PARTE III VALORACIN DE LAS FUNCIONES DEL SISTEMA ORGNICO
veces, insuficiencia cardaca congestiva son tpicos. En el adquiere la forma de cuerpos de grasa ovalados en la ori
UA se observan numerosos cilindros hialinos y granulares. na. Estos cuerpos son clulas tubulares renales degenera
A los cilindros de glbulos rojos reales se les considera das que contienen lipoprotenas reabsorbidas. Las causas
bastante sugerentes de este sndrome primarias estn relacionadas de forma directa con los esta
A menudo la glomerulonefritis aguda se relaciona con dos de enfermedad glomerular.
infeccin reciente por estreptococos p-hemolticos del
grupo A. Se piensa que la circulacin de complejos inmu- Enferm edades tubulares
nitarios desencadena una fuerte respuesta inflamatoria en
la membrana basal glomerular, lo que produce una lesin En cierto grado, ocurren defectos tubulares en la progre
directa en el propio glomrulo. Otras causas posibles com sin de todas las enfermedades renales a medida que des
prenden exposiciones relacionadas con frmacos, infeccio ciende el IFG. Sin embargo, en algunos casos, este aspecto
nes agudas en el rin debido a otros agentes bacterianos de la disfuncin global se vuelve predominante. El resul
(y, quiz, virales) y otras enfermedades del complejo tado es descenso en la excrecin/reabsorcin de ciertas
inmunitario sistmico, como lupus sistmico eritema toso sustancias, o reduccin en la capacidad de concentracin
(LES) y endocarditis bacteriana subaguda (EB S). urinaria. Desde el punto de vista clnico, el defecto ms
importante es la acidosis tubular renal (ATR), el trastorno
tubular primario que afecta el equilibrio acidobsico. Esta
G lom erulonefritis crnica
enfermedad se clasifica en dos tipos, de acuerdo con la
La inflamacin glomerular prolongada tal vez conduzca a
naturaleza del defecto tubular:
cicatrizacin glomerular y prdida eventual del funciona
miento de las nefronas. Este proceso a menudo permanece ATR distal, en la que los tbulos renales son incapaces
sin detectar por perodos prolongados porque al principio de conservar el gradiente del pH vital entre la sangre y
slo ocurren disminuciones menores en la funcin renal el lquido tubular
y nicamente aparecen proteinuria y hematuria leves. El ATR proxim al, en la que hay disminucin en la reabsor
desarrollo gradual de uremia (o a z oem ia, exceso de com cin del bicarbonato, lo que ocasiona acidosis hiper-
puestos nitrogenados en la sangre) pudiera ser el primer clormica. En trminos generales, la reduccin de la
signo de este proceso. reabsorcin en el tbulo proximal se manifiesta por
hallazgos de valores sricos anormalmente bajos de
fsforo y cido rico, y por glucosa y aminocidos en la
S n dro m e nefrtico
El sndrom e nefrtico (fig. 24-6) llega a originarse por varias orina. Adems, tal vez exista cierto grado de proteinu
enfermedades diferentes que dan como resultado lesin e ria (por lo general <2 g/da).
incremento en la permeabilidad de la membrana basal glo Tambin se observa inflamacin aguda de los tbulos
merular. Este defecto casi siempre produce varios hallaz y el intersticio circundante como resultado del frmaco
gos anormales, como proteinuria extremadamente masiva analgsico o toxicidad de radiacin, reacciones de hiper-
( > 3 .5 g/da) e hipoalbuminemia resultante. La subsiguien sensibilidad a la meticilina, rechazo del trasplante renal e
te disminucin en la presin onctica del plasma causa un infecciones virales-fngica-bacteriana. En estos casos, los
edema generalizado como resultado del movimiento de los hallazgos clnicos caractersticos son decrementos en IFG,
lquidos corporales hacia fuera de los espacios vasculares capacidad de concentracin urinaria y excrecin def cido
y dentro de los intersticiales. Otras caractersticas de este metablico; cilindros de leucocitos en la orina; y control
sndrome son la hiperlipidemia y la lipiduria. Esta ltima inapropiado del equilibrio del sodio .5-8
Infeccin/obstruccin del tracto urinario desde luego, similares a los encontrados en otros procesos
obstructivos: hematuria, infecciones del tracto urinario y
Infeccin dolor abdominal caracterstico .5,8,13
El sitio de infeccin se encuentra en los riones (pielonefritis)
o en la vejiga urinaria (cistitis). En trminos generales, a un
Insuficiencia renal
recuento de colonias microbiolgicas de ms de 105colonias/
ml se le considera diagnstico para infeccin en cualquier Insuficiencia ren a l aguda
sitio. La bacteriuria (cuando se evidencia por hallazgos posi Consiste en una marcada declinacin sbita en la funcin
tivos con tiras sumergibles de nitrito para algunos microor renal producida por un txico agudo o agresin hipxica
ganismos), hematuria y piura (leucocitos en la orina, segn a los riones, definida como reduccin del IFG a menos
se demuestra por tiras sumergibles positivas de leucocito de 10 ml/min. Este sndrome se subdivide en tres tipos, lo
esterasa) constituyen resultados de laboratorio anormales que depende de la ubicacin del defecto precipitante.
encontrados con frecuencia en estos casos. En particular, a
los cilindros de glbulos blancos (leucocitos) en la orina se Insuficiencia prerrenal: el defecto permanece en el apor
les considera diagnsticos para pielonefritis.5-813 te sanguneo antes de llegar al rin. Entre las causas
se incluyen insuficiencia del sistema cardiovascular e
O bstruccin hipovolemia resultante.
Las obstrucciones renales causan enfermedad de dos Insuficiencia renal prim aria: el defecto implica el rin.
La causa ms frecuente es la necrosis tubular aguda;
maneras. Elevan de manera gradual la presin intratubu
lar hasta que las neuronas sufren necrosis y surge insu otras causas incluyen obstrucciones/inflamaciones
ficiencia renal, o bien predisponen al tracto urinario a vasculares y glomerulonefritis.
infecciones repetidas. Insuficiencia posrenal: el defecto permanece en el tracto
urinario despus de salir del rin. Por lo general, la
Las obstrucciones llegan a localizarse en el tracto urina
rio superior o inferior. Los bloqueos en el tracto superior insuficiencia renal aguda ocurre como consecuencia de
la obstruccin del tracto urinario inferior o rotura de la
se caracterizan por lesin de constriccin debajo de un
vejiga urinaria.
conducto recolector dilatado. Las obstrucciones del trac
to inferior se evidencian por la orina residual en la vejiga Entre las agresiones txicas al rin que son lo bastante
despus del cese de la m iccin. Entre los sntomas se inclu graves para iniciar insuficiencia renal aguda se incluyen
yen lentitud en la evacuacin, tanto al principio como a reacciones de transfusin hemoltica, mioglobinuria debi
lo largo de la miccin. Las causas de obstruccin abarcan da a rabdomilisis, envenenamiento con metales pesa
neoplasmas (como carcinoma de prstata/vejiga o tumores dos/solventes, ingestin de anticongelante y toxicidades
linfticos nodulares que constrien los urteres), enfer analgsicas y aminoglucsidas. Estos trastornos daan de
medades adquiridas (como estricturas uretrales o clcu manera directa los tbulos renales. Las agresiones hipxi-
los renales); y deformidades congnitas del tracto urinario cas abarcan problemas que afectan de forma grave el flujo
inferior. Los sntomas clnicos del avance de la enfermedad sanguneo renal, como choque sptico/hemorrgico, que
obstructiva son disminucin en la capacidad de concentra maduras e insuficiencia cardaca.
cin urinaria, reduccin en la excrecin cida metablica,
descenso del IFG y reduccin en el flujo sanguneo renal.
Las pruebas de laboratorio tiles en la determinacin de la CUADRO 24-2. TIPOS DE CLCULOS RENALES
naturaleza del obstculo son urianlisis, cultivo de orina, COM POSICIN DE CA U SA DE LA FORM ACIN DE
US, creatinina srica y RSC. Por lo general, el diagnsti LOS CLCU LO S LOS CLCU LO S
co final se establece por tcnicas de imgenes .3,6,10
Oxalato de calcio Hiperparatiroidismo
Los clculos renales, o piedras del rin, se forman por Toxicidad de la vitamina D
la combinacin de varias sustancias cristalizadas, mismas Sarcoidosis
que se listan en el cuadro 24-2. De stas, las piedras de
Osteoporosis
oxalato de calcio son, por mucho, las ms frecuentes, en
particular en los trpicos y subtrpicos. Fosfato de amonio de Proceso infeccioso
En la actualidad, se cree que la recurrencia de clculos magnesio
en individuos susceptibles se debe a varias causas, pero Fosfato de calcio Consumo excesivo de lcalis
sobre todo a reduccin en la tasa del flujo sanguneo (lo
Infeccin con microorganismos
que se relaciona con disminucin en la ingesta de lqui
productores de ureasa
dos) y saturacin de la orina con grandes cantidades de
sustancias esencialmente insolubles. El anlisis qumico cido rico Gota
de los clculos es importante para determinar la causa Concentraciones elevadas de
del trastorno. Con este propsito, se utilizan de manera cido rico en sangre y orina
extensa la difraccin especializada de rayos X y las tcni
Cistina Cistinuria heredada
cas de espectroscopia infrarroja. Los sntomas clnicos son,
532 PARTE III VALORACIN DE LAS FUNCIONES DEL SISTEMA ORGNICO
ES T U D IO D E C A S O 24-1
Un hombre de 52 aos de edad con antecedente de pus del ingreso al hospital. La causa de la muerte fue
SIDA, hipertensin, diabetes mellitus y abuso de alco insuficiencia multiorgnica secundaria a SIDA, sepsis y
hol fue encontrado inconsciente en su casa por su com cirrosis alcohlica.
paero de cuarto. En la sala de urgencias, se encontr
hipotenso (103/60), febril (38.3C ) y sin respuesta. En Preguntas
la imagen de TC del abdomen se observaron colecistitis
y clculos biliares. En la parte inferior se muestran los 1. Cul es la importancia de la elevacin de la CK del
datos de laboratorio. (Caso desarrollado por Cynthia paciente? Explique por qu el mdico solicit una
Batangen Santos, mdico residente en patologa del CKMB y medicin de la concentracin de troponi
Departamento de Patologa y Medicina de Laboratorio na. Cul es la conclusin que se obtiene del estado
del Hospital Harford, Harford, CT. Modificado e impre cardaco del paciente?
so con autorizacin.)
2. Cul es la causa de su insuficiencia renal aguda?
Al paciente se le diagnostic insuficiencia renal
aguda. Se le administraron lquidos por va IV; el US 3. Cul es la importancia de la alta hemoglobina en la
descendi a 68 mg/dl y la creatinina a 2.2 mg/dl. El orina?
informe del cultivo sanguneo del paciente fue positivo
4. Cmo interpretara estas pruebas de la funcin
para E. coli. Se le trat con tobramicina y cefepima. El
heptica del paciente dado su historial clnico?
deterioro del paciente continu y muri cinco das des
Los sntomas de insuficiencia renal aguda ms frecuen de la progresin adicional de la enfermedad. Vase el cua
tes son la oliguria y anuria (< 4 0 0 ml/da). La disminucin dro 24-3 para conocer las cinco fases de la enfermedad del
en la capacidad para excretar electrlitos y agua ocasiona rin crnica. El IFG y la evidencia del dao al rin con
un aumento importante en el volumen del lquido extra- base en la medicin de la proteinuria u otros marcadores
celular, lo que conduce a edema perifrico, hipertensin e conforman la base de las clasificaciones .21
insuficiencia cardaca congestiva. Sin embargo, es ms pro Es posible que los trastornos que precipitan insuficien
minente el inicio del sndrome u rn ico o ERET, en el que se cia renal aguda tambin conduzcan a insuficiencia renal
observa aumento de los valores del US y de la creatinina crnica .514 Otras causas de este sndrome se listan en el
srica juntos con los sntomas precedentes. El resultado de cuadro 24-4.
esta enfermedad es la recuperacin o, en caso de dao renal
irreversible, progresin a insuficiencia renal crnica .5'8 D iab etes m ellitus
La diabetes mellitus llega a tener efectos profundos en el
Insuficiencia rena l crnica (en fe rm e d a d del rin sistema renal. Los pacientes con diabetes tipo 1 padecen
crnica) dficit de insulina. Alrededor de 45% de los pacientes con
La enferm edad del rin crnica (terminologa de eleccin) tipo 1 desarrollarn deterioro progresivo de la funcin del
es un sndrome clnico que ocurre cuando hay declina rin (nefropata diabtica) en los 15 a 20 aos posteriores
cin gradual en la funcin renal con el tiempo (fig. 24-7). al diagnstico. Un menor porcentaje de personas con dia
La deteccin y el tratamiento tempranos son necesarios betes tipo 2 tambin desarrollar esta afeccin. Los efectos
para prevenir progresin a ERET y complicaciones como son sobre todo glomerulares, pero es posible que tambin
la enfermedad vascular coronaria. En Estados Unidos, la afecten todas las estructuras del rin, y se cree que se
N ational Kidney Foundation formul directrices para el originan por el medio hiperglucmico anormal que cubre
diagnstico, el tratamiento y la prevencin ms oportunos de manera constante el sistema vascular .5,8
CAPTULO 24 FUNCIN RENAL 533
Tendencia
a hemorragia
En aumento del riesgo3 >90 (con factores de Enfermedades Trombosis de la vena renal.
riesgo) circulatorias renales hipertensin maligna
1 Dao renal con >90 Enfermedades LES, glomerulonefritis-
IFG normal o f glomerulares primarias cromca
2 Dao renal con IFG 60 a 89 Secuencia renal hacia Gota, diabetes
normal o | enfermedad metablica mellitus, amiloidosis
3 4 IFG moderada 30 a 59 Enfermedades Tuberculosis, pielonefritis
4 i IFG grave 15 a 29
inflamatorias crnica
Obstrucciones renales Agrandam iento prosttico.
5 Insuficiencia renal <15
clculos
Se debe valorar a los pacientes en riesgo. Las etapas 1 a 5 ilustran la Deformidad renal Riones policsticos,
progresin de la ERC. (Fuente: National Kidney Foundation, K/DOQI
congnita hipoplasia renal
Clinical Practice Guidelines for Chronic Kidney Disease: Executive
Summary, New York, 2002:16.) Diversos trastornos Nefritis por radiacin
534 PARTE III VALORACIN DE LAS FUNCIONES DEL SISTEMA ORGNICO
ES T U D IO D E C A S O 24-2
Un hombre de 45 aos de edad se present en el hospi ju n to con restricciones fsicas para control de la con
tal con sndrome de abstinencia al alcohol. Despus de ducta. La maana siguiente, se le transfiri a la unidad
beber una copa de brandy cada da durante los ltimos de cuidado intensivo, donde se le evalu en busca de
cinco a seis aos, decidi dejar de beber hace cuatro insuficiencia renal aguda. El paciente fue rehidratado
das. El hombre experiment temblores y luego aluci y se suspendieron los medicamentos para la artritis y
naciones visuales y auditivas. Al llegar al hospital, se antidepresivos. Los resultados de laboratorio se enume
encontraba diafortico y con taquicardia, con un pulso ran a continuacin:
de 102. Sus resultados qumicos fueron los siguientes:
Na+ 139 mmol/L Creatinina 1.4 mg/dl
Na+ 130 mmol/L Protena total 7.1 g/dl
K+ 3.5 mmol/L CK 1626 U/L
K+ 3.7 mmol/L Albmina 3.7 g/dl
ci- 107 mmol/L CKMB 3.4 ng/ml
ci- 90 mmol/L ALP 63 U/L C02 23 mmol/L ndice relativo 0.2
co2 20 mmol/L AST 42 U/L
US 16 mg/dl
US 81 mg/dl ALT 16 U/L
Creatinina 4.0 mg/dl GGT 131 U/L Preguntas
Magnesio 1.4 mg/dl CK 591 U/L
1. An se encuentra el paciente en insuficiencia renal
Alcohol Negativo Bilirrubina total 0.5 mg/dl aguda?
2. Cul fue la causa de su insuficiencia renal aguda?
Entre los antecedentes se encontraban artritis,
hipertensin, depresin y alcoholismo. Haba tomado 3. Por qu ha mejorado el estado de electrlitos del
un medicamento antiinflamatorio para la artritis y un paciente?
antidepresivo. Durante la noche anterior, estuvo agita
do y requiri aumento de la dosis de benzodiazepina, 4. Por qu su CK es muy elevada?
Por lo general, la diabetes afecta a los riones ya que se Es posible evaluar la hipertensin renal a travs de
vuelven glucosricos, poliricos y nictricos. Estos esta monitoreo de la aldosterona srica, Na+, y las concentra
dos se originan por las fuertes demandas ejercidas sobre ciones de renina. Como resultado del efecto de la aldos
los riones para que produzcan diuresis en la orina hipe- terona, aumenta el Na+ srico, disminuye el K+ srico y
rosmtica. Adems, a menudo se desarrolla proteinuria aumenta el K+ de la orina.
leve (m icroalbum inuria) entre 10 y 15 aos despus del
diagnstico original (vase la seccin M icroalbm ina en Terapia d e insuficiencia renal
este mismo captulo). A menudo surge hipertensin ms D ilisis. En pacientes con insuficiencia renal aguda, los
adelante, lo que exacerba an ms el dao renal. A la pos sntomas urmicos, la hiperpotasemia incontrolada y la
tre, es posible que evolucione a insuficiencia renal crnica acidosis fueron indicadores tradicionales de que los rio
o sndrome nefrtico, de modo que a cada uno se le identi nes eran incapaces de excretar los productos de desecho
fica por sus sntomas y hallazgos de laboratorio caracters del cuerpo, y se requera un mtodo sustituto en la forma
ticos. El tratamiento temprano de la diabetes que se centra de dilisis. Sin embargo, a menudo la dilisis se instituye
en el control estrecho de la glucosa sangunea y la preven antes de esta fase. Existen diversas formas de dilisis dis
cin de la presin sangunea elevada pudiera prolongar el ponibles, aunque en todas se utiliza una membrana semi
inicio de la insuficiencia renal crnica. permeable rodeada por un bao del dializante.
En la hem odilisis tradicional (elim inacin de desechos
H ipertensi n renal de la sangre), la membrana es sinttica y se encuentra fue
La hipertensin inducida por enfermedad renal tal vez se ra del cuerpo. La sangre arterial y el dializante se bombean
deba al decremento en la perfusin de todo el rin o par a tasas elevadas (150 a 250 ml/min y 500 ml/min, respecti
te de l (isquemia). La falta de perfusin llega a originarse vamente) en direcciones opuestas. La sangre se regresa a la
por traumatismo, dao o estrechamiento de una arteria o circulacin venosa y el dializante se desecha. La difusin
de arteriolas intrarrenales. La isquemia crnica de cual de los solutos de bajo peso molecular ( < 5 0 0 daltons) den
quier rin ocasiona disfuncin de la nefrona y necrosis tro del dializante es favorecida por este proceso, pero los
eventual. Los cambios resultantes en los volmenes de solutos de peso molecular medio (500 a 2 000 daltons) se
sangre y lquido corporal dentro del rin desencadenan eliminan de manera inadecuada. La eliminacin de creati
la activacin del sistema renina-angiotensina-aldosterona, nina es alrededor de 150 a 160 ml/min.
lo que produce vasoconstriccin que se manifiesta como En la dilisis peritoneal, la pared peritoneal acta como
hipertensin persistente. la membrana dializante, y se utiliza la gravedad para intro
CAPTULO 24 FUNCIN RENAL 535
ducir y remover el dializante. Estn disponibles dos varia membrana de la dilisis, lo que ocasiona difusin continua
ciones de esta forma: la dilisis peritoneal ambulatoria y duplicacin de la eliminacin de la urea.
continua (DPAC) y la dilisis peritoneal cclica continua. Terapia de enfermedad renal de etapa terminal (ERET)
Sin embargo, el proceso es continuo en ambas al realizarse En pacientes con insuficiencia renal irreversible, la di
24 h al da los siete das de la semana. Este mtodo no lisis y el trasplante son las nicas dos opciones teraputi
es tan riguroso como el tradicional. Los solutos pequeos cas. El establecimiento de este tratamiento ocurre cuando
(p. ej., potasio) tienen ndices de eliminacin mucho ms el IFG cae a 5 ml/min (10 a 15 ml/min en pacientes con
bajos en comparacin con el mtodo tradicional, pero los nefropata diabtica).
solutos ms grandes se eliminan, y se mantienen concen Dilisis. La hemolisis tradicional o su forma ms
traciones estables de analitos sanguneos. reciente de elevada eficiencia, as como la dilisis perito
La hem ofiltracin arteriovenosa continua (ultrafiltra- neal, son los mtodos disponibles. El uso de pruebas de
cin de la sangre), hemofiltracin venovenosa continua, laboratorio clnico y la hemodilisis servirn para vigilar
hemodilisis arteriovenosa continua y hemodilisis veno de manera adecuada la eficiencia de procedimientos en
venosa continua constituyen, en conjunto, las terapias de una amplia gama de reas. La dilisis renal tiene objetivos
reemplazo renal lento continuo desarrolladas para tratar la bsicos. La realizacin de pruebas de laboratorio espec
insuficiencia renal aguda en pacientes con enfermedad cr ficas contribuir a evaluar la consecucin de cada una de
tica en entornos de cuidado intensivo. En estos mtodos, las metas.
la membrana semipermeable se encuentra, una vez ms, Trasplante. La tcnica de hemodilisis ms eficien
fuera del cuerpo. En los primeros dos mtodos, los solutos te proporciona slo 10 a 12% de eliminacin de solutos
de hasta 5 000 daltons (el tamao del poro de la mem pequeos de dos riones normales y mucho menos en
brana) y el agua se filtran de manera lenta (1 ml/min) y solutos grandes. Incluso pacientes con buena dilisis pade
continua a partir de la sangre, lo que causa cambios m ni cen discapacidades fsicas y disminucin en la calidad de
mos en la osmolalidad del plasma. Es posible reemplazar vida. El trasplante de rin ofrece la mayor oportunidad
la prdida de volumen en forma de nutricin parenteral y para el regreso completo a una vida sana y productiva. Sin
medicamentos intravenosos. Los dos ltimos mtodos son embargo, esta opcin es limitada por la importante escasez
similares a los mtodos de filtracin, pero el goteo con de donadores de rganos. En pacientes con ERET, la espe
tinuo del lquido de la dilisis se bombea despus de la ra de la donacin de un rgano vara de meses a aos.
ES T U D IO D E C A S O 24-3
El trasplante renal debe provenir de un donador com Las pruebas de la funcin renal se centran en su mayor
patible con un destinatario que padece insuficiencia renal parte en las eliminaciones glomerulares, valoradas por
irreversible. El rgano se obtiene de un cadver o de un mediciones de cretinina y urea, y las funciones tubulares,
individuo vivo (en Estados Unidos, 80 y 20%, respecti valoradas por mediciones de protena (p. ej., electrofore
vamente, de todos los trasplantes realizados). Para que sis de la orina). Los anlisis de orina para analitos, como
este procedimiento sea exitoso, es necesario suprimir la pH, glucosa, cetonas y bilirrubina, an constituyen prue
respuesta inmunitaria al rgano trasplantado. Por tanto, bas de evaluacin importantes para muchas enfermeda
se valora de manera cuidadosa al donador y el receptor des no renales, como diabetes mellitus, cetoacidosis (y
para conocer grupo sanguneo ABO, compatibilidad con otros desequilibrios acidobsicos), hemolisis y enferme
el antgeno leucocito (HLA) y anticuerpos HLA preforma- dad heptica. Los anlisis de protena ms recientes, como
dos. El sistema HLA representa el principal inhibidor del microalbmina de orina, P2-M, cistatina C y mioglobina
trasplante. de suero y orina, llegan a proporcionar informacin de
Aunque los trasplantes de rin tienen capacidad para pronstico im portante que resulta til para el control
funcionar durante dcadas, la vida media de un trasplante del paciente. La microalbuminuria contribuye a la detec
a partir de un cadver es de alrededor de siete aos. La tasa cin temprana de la nefropata diabtica; la P,-M, al rechazo
de mortalidad no es muy diferente a la hemodilisis. Las temprano de trasplante renal; y los ndices de eliminacin
cifras de supervivencia de un injerto de tres aos varan de mioglobina, a la prediccin de insuficiencia renal aguda
de 65 a 85% ; con injertos vivos, mejoran. Hay informes de inducida por rabdomilisis.
que no existe diferencia en la supervivencia de pacientes Entre las infecciones renales frecuentes se incluyen
entre hemodilisis, DPAC y trasplante de rin cadav procesos infecciosos e inflamatorios en glomrulos, tbu
rico. El trasplante relacionado con un donador vivo est los y tracto urinario; obstrucciones en la funcin normal
relacionado con m ejor supervivencia del paciente que del rin; e insuficiencia renal crnica. En esta ltima, los
otras opciones teraputicas de ERET. mtodos teraputicos agresivos basados en la dilisis y el
trasplante permiten supervivencia prolongada de lo que
RESUM EN alguna vez fue un trastorno terminal. Las variaciones en
las tcnicas de dilisis han hecho que este proceso se vuel
El rin desempea un papel vital en el mantenimiento va ms disponible y conveniente y, con la implantacin de
del equilibrio de agua y electrlitos, la homeostasis y la potentes frmacos inmunosupresores, el trasplante renal
eliminacin de productos de desecho. Los riones produ extendido ahora slo est limitado por la disponibilidad
cen diversas hormonas importantes (p. ej., renina y 1,25- de rganos donantes apropiados.
dihidroxivitamina D) necesarias para realizar esas tareas.
Otras hormonas renales (p. ej., eritropoyetina) son impor
tantes para otras funciones fisiolgicas.
P R E G U N T A S DE R E P A S O
1. Calcule la eliminacin de la creatinina, con la siguien 4. La insuficiencia renal aguda se clasifica en tres tipos.
te informacin: creatinina srica, 1.2 mg/dl; creatinina Mencinelos y proporcione un ejemplo de cada uno
en orina, 120 mg/dl; volumen urinario, 1 750 ml/24 h; de ellos.
rea superficial corporal, 1.80 m2. a ) ___________________________________________________
2. Determine el IFG en una m ujer de 50 aos de edad
w _______________________________________
c) :_____
que pesa 60 kg. Su concentracin de creatinina srica
es de 2.5 mg/dl. 5. La funcin del tbulo proximal es:
a) Concentrar sales.
3. La m edicin de cistatina C srica, una protena peque
b) Reabsorber 75% de sal y agua.
a producida por clulas nucleadas, es til para:
c) Formar el umbral renal.
a ) Calcular la eliminacin de la creatinina.
d) Reabsorber urea.
b) Diagnosticar enfermedad renal en etapa terminal.
c) Vigilar pacientes con dilisis. 6. La tasa de filtracin glomerular normal es de alrede
d) Detectar disminucin temprana en la funcin del dor de:
rin. a) 2 ml/min.
b) 125 ml/min.
c) 800 ml/min.
d) 1 200 ml/min.
CAPITULO 24 FUNCIN RENAL 537
7. La eliminacin renal es: 9. El conjunto de resultados que refleja con mayor preci
a) El volumen de orina producido por da. sin la enfermedad renal grave es:
b ) La cantidad de creatinina en orina. Creatinina Elim inacin de
c) El volumen de plasma del que se elimina una sus srica creatinina US
tancia por unidad de tiempo. a) 1.0 mg/dl 110 ml/min 17 mg/dl
d) La concentracin de orina de una sustancia dividi b ) 2.0 mg/dl 120 ml/min 14 mg/dl
da por el volumen de orina por unidad de tiempo. c) 1.0 mg/dl 95 ml/min 43 mg/dl
8. La liberacin de la renina por el rin es estimulada d) 3 .7 mg/dl 4 4 ml/min 88 mg/dl
por: 10. Los resultados de la eliminacin de creatinina se corri
a ) Aumento en la concentracin de sodio en plas gen a travs del rea superficial corporal del paciente
ma. que corresponden a diferencias en:
b) Decremento en el volumen o presin del lquido a) Edad.
extracelular. b ) Ingesta diettica.
c) Incremento en el sodio de la dieta. c) Sexo.
d) Reabsorcin tubular renal. d) Masa muscular.
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C A P T U L O
Funcin pancretica
Edward P. Fody
C O N T E N I D O D E L C A P I T U L O
O B J E T I V O S
Al completar este captulo, el laboratorista clnico Describir los siguientes trastornos pancreticos y
podr: enumerar las pruebas de laboratorio relacionadas
Analizar el papel fisiolgico del pncreas en el que contribuiran en el diagnstico: pancreatitis
proceso digestivo. aguda, pancreatitis crnica, carcinoma pancretico,
Enumerar las hormonas excretadas por el pn fibrosis qustica y malabsorcin pancretica.
creas, junto con sus papeles fisiolgicos.
T E R M I N O S C L A V E
538
CAPTULO 25 FUNCIN PANCRETICA 539
Diafragma
Hgado Ligamento
coronario
Estmago del hgado
Peritoneo Omentum
visceral menor
Mesocolon Pncreas
Vejiga Ano
urinaria
Vagina
FIGURA 25-1. Peritoneo y mesenterios. El peritoneo parietal recubre la cavidad abdominal; y el peritoneo visceral, los
rganos abdominales. Los rganos retroperitoneales estn protegidos por el peritoneo parietal. Los mesenterios son
membranas que conectan los rganos abdominales entre s y a la pared del cuerpo. (Reimpresa con autorizacin de
Thompson JS y Akesson EJ, eds. Thompson's Core Textbook of Anatomy, 2nd. ed. Philadelfia: JB Lippincott, 1990:115.)
consta de los islotes de Langerhans, que son racimos esf tienen capacidad para digerir las tres clases principales de
ricos u ovoides bien delineados compuestos de cuando sustancias alimenticias (protenas, carbohidratos y grasas)
menos cuatro tipos diferentes de clulas. Las clulas del e incluyen: a) enzimas proteolticas tripsina, quimotripsi-
islote secretan un mnimo de cuatro hormonas dentro de na, elastasa, colagenasa, leucina aminopeptidasa y algunas
la sangre: insulina, glucagon, gastrina y somatostatina. El carboxipeptidasas; b ) enzimas que digieren lpidos, sobre
componente pancretico exocrino (liberador de enzimas), todo lipasa y lecitinasa; c) amilasa pancretica degradan
que es ms grande, secreta alrededor de 1.5 a 2 L/da de te de carbohidratos; y d) diversas nucleasas (ribonuclea-
lquido, que es rico en enzimas digestivas, dentro de los sa), que separan las bases que contienen nitrgeno de sus
conductos que al final se vacan en el duodeno. olgoelementos de azcar-fosfato.
El lquido digestivo se produce por clulas acinares pan La actividad pancretica se encuentra bajo control ner
creticas (semejantes a racimos de uvas), que recubren el vioso y endocrino. Las ramificaciones del nervio vago llegan
pncreas y se conectan por conductos pequeos. stos se a producir una cantidad pequea de secrecin de lquido
vacan de manera progresiva dentro de los conductos ms pancretico cuando la comida se huele o se observa. Estas
grandes, con lo que al final forman un conducto pancretico
Primera porcin del duodeno
principal y uno accesorio ms pequeo. El conducto pan
cretico principal y el biliar comn se abren dentro del duo
Conducto biliar comn
deno en la papila duodenal principal (fig. 25-2). El lquido
pancretico normal rico en protenas es claro, incoloro y
acuoso, con un pH alcalino que alcanza 8.3. Esta alcalinidad
se debe a la elevada concentracin de bicarbonato de sodio Conducto Pncreas
presente en el lquido pancretico, que al final se utiliza para principal
neutralizar el cido clorhdrico en el lquido gstrico del
estmago a medida que ingresa al duodeno. Las concentra Papila
ciones de bicarbonato y cloruro varan en forma recproca, duodenal
de modo que totalizan aproximadamente 150 mmol/L.
El lquido pancretico tiene casi las mismas concen
traciones de potasio y sodio que de suero. Las enzimas Tercera porcin del duodeno
digestivas, o sus proenzimas secretadas por el pncreas, FIGURA 25-2. Esquema del pncreas y su relacin con el duodeno.
540 PARTE III VALORACIN DE LAS FUNCIONES DEL SISTEMA ORGNICO
secreciones aumentan a medida que el bolo alimenticio 5% de todas las muertes por neoplasmas malignos en ese
entra al estmago. Sin embargo, la mayor parte de la accin pas. La tasa de supervivencia de cinco aos es menor de
pancretica est bajo el control hormonal de la secretina y 2%. Ms de 90% de los pacientes mueren en el primer ao
colecistocinina (CCK; antes conocida como pancreozim ina). de diagnstico. La mayor parte de los tumores pancreti
La secretina es responsable de la produccin de lquido pan cos surgen como adenocarcinomas del epitelio conductal.
cretico rico en bicarbonato y, por tanto, alcalino, que prote Debido a que el pncreas cuenta con un suministro abun
ge el revestimiento del intestino. La secretina se sintetiza en dante de nervios, el dolor es una caracterstica prominente
respuesta a los contenidos cidos del estmago que llegan al de la enfermedad. Si el tumor surge en el cuerpo o la cola
duodeno. Esto tambin afecta la actividad de la gastrina en del pncreas, la deteccin a menudo no ocurre hasta una
el estmago. Este lquido pancretico contiene pocas enzi fase avanzada de la enfermedad debido a su ubicacin cen
mas digestivas. La CCK, en presencia de grasas o aminoci tral y a los sntomas vagos relacionados. Por lo general, el
dos en el duodeno, se produce por las clulas de la mucosa cncer de la cabeza del pncreas se detecta ms pronto por
intestinal y es responsable de liberar enzimas de las clulas su proximidad con el conducto biliar comn. Los signos
acinares a travs del pncreas en el lquido pancretico. de estos tumores son ictericia, prdida de peso, anorexia
y nusea. La ictericia se relaciona con signos de hiper
EN FERM ED AD ES DEL PNCREAS bilirrubinemia posheptica (colestasis intraheptica) y
Adems del traumatismo, slo tres enfermedades atraen bajas concentraciones de bilirrubina fecal, lo que da como
ms de 95% de la atencin mdica dedicada al pncreas. resultado heces de color arcilla. Sin embargo, los hallazgos
Si afectan la funcin endocrina del pncreas, estas enfer no son especficos para tumores pancreticos, por lo que
medades llegan a ocasionar alteracin en la digestin y el deben descartarse otras causas de obstruccin.
metabolismo de nutrientes. En el captulo 11, C arbohidra Los tumores celulares del islote del pncreas afectan la
tos, se analiza el papel del pncreas en la diabetes mellitus. capacidad endocrina del pncreas. Si el tumor ocurre en las
1. La fibrosis qustica (conocida por varios otros trminos, clulas beta, a menudo se observa hiperinsulinismo, que
como enferm edad fibroqustica del pncreas y mucoviscidosis) ocasiona concentraciones bajas de glucosa sangunea, algu
es un trastorno autosmico recesivo heredado, caracteri nas veces seguidas por choque hipoglucmico. A los tumo
zado por disfuncin de las glndulas mucosas y exocrinas res de las clulas alfa pancreticas, con sobreproduccin de
en todo el cuerpo. Esta enfermedad es relativamente fre gastrina, se les denomina gastrnomas. stos producen el
cuente y ocurre en cerca de 1 de cada 1 600 nacidos vivos. sndrome de Zollinger-Ellison y llegan a ser de origen duode
Tiene varias manifestaciones y al principio llega a presen nal. Estos tumores estn relacionados con diarrea acuosa,
tarse en formas tan variables como obstruccin intestinal lcera pptica recurrente e hipersecrecin e hiperacidez
del recin nacido, infecciones pulmonares excesivas en la gstricas importantes. Los tumores pancreticos que secre
niez o, rara vez, malabsorcin pancreatgena en adultos. tan glucagon en las clulas a son raros. La hipersecrecin
La enfermedad hace que los conductos pequeos y grandes de glucagon se relaciona con diabetes mellitus.
y los cinos se dilaten y se conviertan en quistes pequeos 3. La pancreatitis, o inflamacin del pncreas, es bsica
rellenos de mucosidad, que a la postre ocasionan la preven mente causada por autodigestin del pncreas como resul
cin de secreciones pancreticas que llegan al duodeno o, tado del reflujo de la bilis o contenidos duodenales dentro
dependiendo de la edad del paciente, un tapn que bloquea de los conductos pancreticos. Los cambios patolgicos
el lumen del intestino, lo que conduce a la obstruccin. A incluyen edema agudo, con grandes cantidades de lquido
medida que la enfermedad avanza, existe un aumento en la que se acumula en el espacio retroperitoneal y decremento
destruccin y cicatrizacin fibrosa del pncreas y un decre relacionado con el volumen sanguneo circulante efectivo;
mento correspondiente en la funcin. La fibrosis qustica infiltracin celular, que conduce a necrosis de las clulas
se transmite como un trastorno recesivo autosmico con acinares, con hemorragia como posible resultado de los
elevado grado de penetracin. Ocurre sobre todo en perso vasos sanguneos necrticos; y necrosis adiposa pancre
nas con ascendencia europea del norte. El gen de la fibrosis tica intraheptica y extraheptica. Por lo general, la pan
qustica, conocido como CFTR, se presenta en el cromo creatitis se clasifica como aguda (dao no permanente al
soma 7. Estn identificadas ms de 900 mutaciones que pncreas), crnica (lesin irreversible) o reincidente/recu
causan este trastorno, aunque algunas ocurren con mayor rrente, que tambin puede ser aguda o crnica. A menudo
frecuencia que otras. En reas de elevada frecuencia, como ocurre en la madurez. Es posible que se presenten episo
Britania en el occidente de Francia, ms de 10% de la pobla dios dolorosos de manera intermitente, que suelen alcan
cin llega a presentar una m utacin de fibrosis qustica, zar intensidad mxima en minutos u horas y duran varios
y 1 de cada 3 000 nios se ve afectado, lo que la vuelve el das o semanas, con frecuencia acompaados por nusea
trastorno gentico ms frecuente en esas poblaciones. En la y vmito. La pancreatitis a menudo est relacionada con
actualidad, se llevan a cabo varias evaluaciones genticas.1"3 abuso de alcohol o enfermedad del tracto biliar, pero los
2. El carcinom a pancretico es la quinta forma ms fre pacientes con hiperlipoproteinemia y aquellos con hiper
cuente de cncer fatal, y causa alrededor de 27 000 muer paratiroidismo tambin se encuentran en mayor riesgo
tes cada ao en Estados Unidos, lo que representa cerca de para esta enfermedad.
CAPTULO 25 FUNCIN PANCRETICA 541
E S T U D IO D E C A S O 25-1
Un hombre de 38 aos de edad ingresa a urgencias con CUADRO 25-1.1. DE ESTUDIO DE CASO.
dolor grave e intenso en la parte media del abdomen RESULTADOS DE LABORATORIO
de seis horas de duracin. Un amigo, que lo transpor
Amilasa srica 640 unidades (3.5 a 260)
t al hospital, inform que el paciente se desmay tres
veces en el automvil. El paciente presenta antecedente Sodio srico 133 meq/L (135 a 145)
de 15 aos de alcoholismo y bebe uno o dos vasos de Potasio 3.4 meq/L (3.8 a 5.5)
whisky por da. Se le hospitaliz por ltima vez debido Calcio 4.0 meq/L (4.5 a 5.5)
a alcoholismo agudo hace tres meses, momento en que
Nitrgeno de urea 32 mg/dl (8 a 25)
se observaron anormalidades relativamente menores de
sanguneo
la funcin heptica. En este ingreso, su presin san
Recuento de glbulos 16 500
gunea fue de 80/40 mmHg; pulso, 110 latidos/min y
blancos
constante; y respiraciones, 24/min y poco profundas.
En el cuadro 25-1.1 de estudio de caso se muestran los Hemoglobina 12 g/dl
resultados de la prueba de laboratorio clnica.
Preguntas
1. Cul es la enfermedad probable?
Otros factores etiolgicos relacionados con pancreatitis ridos. sta es la esencia del sndrome de la malabsorcin
aguda incluyen paperas, obstruccin causada por enferme general, que abarca hinchamiento e incomodidad abdomi
dad del tracto biliar, clculos biliares, tumores pancreti nales; paso frecuente de heces voluminosas y con mal olor;
cos, lesin tisular, enfermedad aterosclertica, choque, y prdida de peso. La incapacidad para digerir o absorber
embarazo, hipercalcemia, pancreatitis hereditaria, facto grasas, conocida como esteatorrea, proporciona un aspec
res inmunolgicos relacionados con trasplante posrenal to grasiento a las heces (ms de 5 g de grasa fecal por 24
e hipersensibilidad. Los sntomas de la pancreatitis aguda horas). Por lo general, el sndrome de malabsorcin implica
constan de dolor abdominal grave generalizado o en los digestin o absorcin anormal de protenas, polisacridos,
cuadrantes superiores, y que a menudo se irradia hacia la carbohidratos y otras molculas complejas, as como lpidos.
parte posterior o baja del costado derecho o izquierdo. La Es posible que tambin ocurra dao grave en la absorcin
etiologa de la pancreatitis crnica es similar a la de la pan y el metabolismo de electrlitos, agua, vitaminas (en parti
creatitis aguda, pero al parecer el consumo excesivo crni cular vitaminas A, D, E y K solubles en grasa) y minerales.
co de alcohol es el factor ms frecuente de predisposicin. La malabsorcin quiz afecte a una sola sustancia, como la
Los hallazgos de laboratorio abarcan aumento de ami vitamina B12, lo que ocasiona anemia megaloblstica (ane
lasa, lipasa, triglicridos e hipercalcemia, lo que a menudo mia perniciosa), o lactosa causada por una deficiencia de
se relaciona con hiperparatiroidismo subyacente. Tal vez lactasa. Adems de la deficiencia exocrina pancretica, el
se encuentre hipocalcemia y se atribuya a la eliminacin sndrome de malabsorcin se produce por obstruccin
repentina de grandes cantidades de calcio del lquido extra- biliar, que priva al intestino delgado del efecto emulsificante
celular debido a dao en la movilizacin o como resultado de la bilis, y por varias enfermedades del intestino delgado,
de la fijacin de calcio por cidos grasos liberados debido a que inhiben la absorcin de los productos digeridos.
incremento en la accin de la lipasa sobre los triglicridos.
La hipoproteinemia se atribuye de manera primordial a la
PRUEBAS DE LA FUNCION PANCRETICA12
prdida notable de plasma en el espacio retroperitoneal. Un De acuerdo con la etiologa y el cuadro clnico, se sospecha
cambio del flujo sanguneo arterial de las clulas pancre funcin pancretica cuando hay evidencia de aumento de la
ticas inflamadas a las clulas menos afectadas o normales amilasa y lipasa. Consulte el captulo 10, Enzimas, para cono
origina la privacin de oxgeno e hipoxia tisular en el rea cer un anlisis ms detallado de estas enzimas. Otras pruebas
daada, que incluye a los rganos y tejido circundantes. de laboratorio de la funcin pancretica incluyen aquellas
Estos tres trastornos llegan a producir disminucin grave que se utilizan para la deteccin de la malabsorcin (p. ej.,
en la funcin exocrina pancretica, que afectan de manera examen de las heces en busca de exceso de grasa, prueba de
importante la digestin y absorcin de los nutrientes inge-. la D-xilosa y anlisis de la grasa fecal), las que miden otra
542 PARTE III VALORACIN DE LAS FUNCIONES DEL SISTEMA ORGNICO
ES T U D IO D E C A S O 25-2
funcin exocrina (p. ej., secretina, CCK, grasa fecal, tripsina describen de manera breve las siguientes pruebas de la
y quimotripsina), las que evalan cambios relacionados con funcin pancretica: prueba de secretina/CCK, anlisis de
obstruccin heptica (p. ej., bilirrubina) y las relacionadas grasa fecal, determinaciones de cloruro en sudor e inter
con sustancias endocrinas (p. ej., gastrina, insulina y glucosa) pretacin de la amilasa y lipasa.
que reflejan cambios en las clulas endocrinas del pncreas.
En ocasiones la evaluacin directa del lquido pan Prueba de secretina/CCK
crtico incluye medicin del volumen total del lquido La prueba de secretina/CCK es una determinacin directa
pancretico y la cantidad o concentracin de bicarbonato de la capacidad secretoria exocrina del pncreas. La prue
y enzimas, lo que requiere estimulacin pancretica. Es ba incluye entubacin del duodeno sin contaminacin por
posible lograr la estimulacin a travs de una comida pres lquido gstrico, lo que neutralizara cualquier bicarbonato.
crita o con la administracin de secretina, que permite la La prueba se realiza despus de un ayuno de seis horas o
evaluacin del volumen y del bicarbonato, o estimulacin durante toda la noche. La secrecin pancretica es estimulada
de la secretina seguida por estimulacin de CCK, lo que por secretina administrada por va intravenosa en dosis que
agrega enzimas a la evaluacin del lquido pancretico. varan de 2 a 3 U/kg del peso corporal, seguida por la admi
La ventaja de estas pruebas, que requieren la intubacin nistracin de CCK. Si se desea una prueba simple de secreti
del paciente, es que los exmenes qumico y patolgico se na, slo se proporciona la dosis ms elevada de secretina.
realizan sobre secreciones pancreticas reales. A menudo No se ha establecido ningn protocolo de manera uni
el examen citolgico del lquido establece la presencia, o forme para la prueba. Las secreciones pancreticas se reco
cuando menos la sospecha, de neoplasmas malignos, aun lectan de manera variada por 30, 60 u 80 min despus
que no es posible la localizacin precisa del rgano prima de la administracin de los estimulantes, sea como mues
rio implicado (es decir, pncreas, sistema biliar, mpula de tras de 10 min o como una sola recoleccin depositada.
Vater o duodeno) por aspiracin duodenal. Se determinan el pH, el ndice secretorio, las actividades
Debido a los avances en las tcnicas de imagen, estas enzimticas (p. ej., tripsina, amilasa o lipasa), y la canti
pruebas de estimulacin se utilizan con menor frecuencia. dad de bicarbonatos. La cantidad promedio de bicarbo
Ninguna ha mostrado ser de particular utilidad en el diag nato excretada por hora es de alrededor de 15 mM para
nstico de la enfermedad pancretica leve o aguda, en la hombres y 12 mM para mujeres, con un flujo promedio
que la fase aguda se reduce. La mayor parte de las pruebas de 2 ml/kg. Dado el gasto del volumen total, se debe obte
son de utilidad clnica en la exclusin del pncreas del ner la valoracin de las enzimas. La disminucin del flujo
diagnstico. La prueba de sudor, utilizada para valorar la pancretico est relacionada con obstruccin pancretica
fibrosis qustica, no es especfica para evaluar la afeccin e incremento de las concentraciones enzimticas. Las con
pancretica pero, cuando se usa jun to con el cuadro clni centraciones bajas de bicarbonato y enzimas estn rela
co en el momento de comprobacin, tal vez proporcione cionadas con fibrosis qustica, pancreatitis crnica, quistes
informacin diagnstica importante. A continuacin se pancreticos, calcificacin y edema del pncreas .1
CAPTULO 25 FUNCIN PANCRETICA 543
aceite o lpido durante dos das antes de la prueba y Se acepta de manera amplia que las concentraciones del
durante la misma. cloruro en sudor mayores a 60 mmol/L son diagnsticas de
El rango de referencia para lpidos fecales en adultos es fibrosis qustica en nios .12 Las concentraciones de sodio o
de 1 a 7 g/24 horas. cloruro en el sudor en mujeres ejercen fluctuaciones en el
ciclo menstrual y alcanzan un valor mximo cinco a 10 das
D eterm inaciones de electrlitos en sudor69 antes del comienzo de la menstruacin, pero no se super
ponen con los rangos relacionados con fibrosis qustica.
La medicin de la concentracin de sodio y cloruro en el
sudor es la prueba ms til para el diagnstico de fibrosis
Enzim as sricas11
qustica. Se observan concentraciones bastante elevadas de
ambos iones, que ocurren en ms de 99% de los pacientes La amilasa representa la enzima srica que ms se utiliza
afectados. Los aumentos de dos a cinco veces de sodio y clo para la deteccin de enfermedad pancretica. Sin embargo,
ruro en sudor son diagnsticos de fibrosis qustica en nios. no se trata de una prueba de la funcin. La amilasa es til
Incluso en adultos, ningn otro trastorno causa incremen sobre todo en el diagnstico de pancreatitis aguda, en la que
tos del cloruro y sodio en sudor por arriba de 80 meq/L. El ocurren aumentos importantes en las concentraciones sri
potasio en sudor tambin es elevado, pero en menor medi cas en alrededor de 75% de los pacientes. Por lo general, la
da, por lo que no suele tomarse en cuenta para el diagnsti amilasa en suero aumenta pocas horas despus del comien
co. Al contrario de algunas aserciones, las determinaciones zo de la enfermedad, alcanza un valor mximo en alrededor
de electrlitos en sudor no distinguen transportadores hete de 24 h y, debido a su eliminacin por los riones, regresa a
rocigotos de fibrosis qustica de los homocigotos normales. lo normal en tres a cinco das, lo que a menudo hace que la
Los mtodos antiguos para la obtencin de las muestras amilasa en la orina sea un indicador ms sensible de la pan
de sudor requeran tecnlogos experimentados, quienes a creatitis aguda. La magnitud de la elevacin de la enzima
menudo realizaban la prueba. La induccin de sudor inclua no se correlaciona con la gravedad de la enfermedad.
la aplicacin de bolsas de plstico o el envolvimiento del La determinacin de la eliminacin renal de la amilasa es
paciente en mantas, lo que conllevaba importantes riesgos til en la deteccin de incrementos menores o interm iten
de deshidratacin, trastornos electrolticos e hiperpirexia. tes en la concentracin srica de esta enzima. Para corregir
En 1959, se inform la administracin de pilocarpina por la disminucin en la funcin glomerular, la expresin ms
iontoforesis como un mtodo eficiente para la recoleccin til es la proporcin entre eliminacin de amilasa y la eli
y estimulacin del sudor.1011 En la iontoforesis se emplea minacin de creatinina, como se muestra a continuacin:
una corriente elctrica que hace que la pilocarpina emigre
% de eliminacin de amilasa _ AO CS
al rea limitada de la piel, por lo general la parte interna ---------------------------------------- = 1 0 0 x X (Ec. 25-1)
Creatinina AS CO
del antebrazo, hacia el electrodo negativo a partir de una
almohadilla humedecida sobre el electrodo positivo. Lue
donde AO = amilasa en orina
go se aplica un recipiente de recoleccin a la piel. Despus
AS = amilasa en suero
se analiza el sudor para cloruro. Para la confirmacin, se
CS = creatinina en suero
debe repetir la prueba. Los electrodos de superficie comer
CO = creatinina en orina
ciales para analizar el cloruro del sudor se consiguen con
facilidad. Para conocer detalles, consulte el captulo 27, Los valores normales son menores de 3.1%. Se obser
Anlisis de los lquidos corporales. van valores muy elevados, que promedian alrededor de 8
ES T U D IO D E C A S O 25-3
o 9%, en presencia de pancreatitis aguda, pero tambin ca. Otro problema es que la gelatinizacin de almidn, en
ocurren en otras afecciones, como quemaduras, sepsis y fro, interfiere con la digestin y la absorcin. Adems, la
cetoacidosis diabtica. digestin del almidn se inicia por secrecin de saliva, que
El uso de la lipasa srica en la deteccin clnica de la contina en el intestino de pacientes con falta de acidez
enfermedad pancretica ha sido afectada en el pasado por gstrica. Como resultado, esta prueba rara vez se utiliza.
problemas tcnicos inherentes a los diversos mtodos ana La determinacin de la actividad enzimtica proteol-
lticos. Al parecer los mtodos analticos mejorados indican tica en heces constituy un procedimiento habitual para
que la lipasa se eleva en suero tan pronto como la amilasa la evaluacin de la funcin exocrina pancretica, en par
en la pancreatitis aguda, y que dicha elevacin persiste ticular en el diagnstico de fibrosis qustica. Dicho proce
por un poco ms tiempo que la de amilasa. Como resultado, dimiento determina la actividad proteoltica fecal por su
algunos mdicos consideran que la lipasa es ms sensi capacidad para digerir gelatina en una pelcula de rayos X
ble que la amilasa como indicador de pancreatitis aguda u al producir aclaracin de la pelcula. Desafortunadamen
otras causas de necrosis pancretica. te, los resultados son de confiabilidad limitada porque
Tanto la amilasa como la lipasa se elevan de manera muchas bacterias intestinales producen enzimas proteol-
importante en suero en presencia de muchos otros tras ticas, adems de que las bacterias tambin destruyen enzi
tornos (p. ej., administracin de opiceo, carcinoma pan mas pancreticas. Existen anlisis ms especficos, pero
cretico, infarto intestinal, obstruccin o perforacin y han recibido poca aceptacin.
traumatismo pancretico). Adems, las concentraciones Las pruebas radiogrficas, incluyendo rayos X abdomi
de amilasa se elevan con frecuencia en paperas, colecisti nal y de pecho, ultrasonido, duodenografia, tomografa
tis, hepatitis, cirrosis, embarazo ectpico interrumpido y por computadora, endoscopia, angiografa y biopsia pan
macroamilasemia. La electroforesis de amilasa total, si es cretica, son herramientas esenciales para el diagnstico
que est disponible, revelara incremento en la isoenzima apropiado de los trastornos pancreticos .13
tipo p que, ju n to con la lipasa, permanece elevada mucho
ms tiempo que la amilasa total en la pancreatitis aguda. RESUMEN
Los valores de lipasa suelen elevarse de manera importante
El pncreas es una glndula digestiva que pesa 70 a 105
en fracturas seas y en relacin con embolismo de grasas.
g. Consta de dos tejidos diferentes desde el punto de vis
ta morfolgico y funcional: tejido endocrino y exocri-
O tras pruebas de la funcin pancretica
no. El componente endocrino consiste en los islotes de
En el cuadro 25-2.1 de estudio de caso se resumen las Langerhans, que secretan cuando menos cuatro hormo
pruebas de laboratorio que tal vez sean tiles en el diag nas en la sangre: insulina, glucagon, gastrina y somatos-
nstico de enfermedades pancreticas. Otras pruebas, que tatina. El componente pancretico exocrino, que es ms
diferencian la malabsorcin pancretica de la entrica, se grande, secreta enzimas digestivas en los conductos que
analizan en detalle en el captulo 26, Funcin gastrointesti al final se vacan en el duodeno. La actividad pancretica
nal. Una de ellas es la prueba de absorcin de la D-xilosa. se encuentra bajo control nervioso y endocrino. Adems
La D-xilosa es un azcar pentosa que no requiere enzimas del traumatismo, slo tres enfermedades causan ms de
pancreticas para la absorcin. En un paciente con sos 95% de la atencin mdica dedicada al pncreas: fibrosis
pecha de sndrome de malabsorcin, una D-xilosa normal qustica, carcinoma pancretico y pancreatitis. El papel del
indica insuficiencia pancretica. pncreas en la diabetes mellitus se analiza en el captulo
La prueba de tolerancia al almidn se desarroll para 11, Carbohidratos. De acuerdo con la etiologa y el cuadro
diferenciar la malabsorcin pancreatgena de la intestinal. clnico, la funcin pancretica tal vez resulte sospechosa
En teora, un paciente con liberacin inadecuada de ami cuando hay evidencia del incremento de amilasa y lipasa.
lasa pancretica en el intestino delgado tendra un aumen Las pruebas de la funcin pancretica incluyen aquellas
to mucho ms bajo en las concentraciones de glucosa usadas para la deteccin de malabsorcin (p. ej., D-xilosa,
sangunea despus de la ingestin de una preparacin de exceso de grasa, fibra de carne y grasa fecal), pruebas para
almidn purificado que una persona con cantidades nor la medicin de otras funciones exocrinas (p. ej., secretina,
males de amilasa. Los resultados se comparan con los de CCK, tripsina y quimotripsina), pruebas para evaluar los
una prueba estndar de tolerancia a la glucosa. Por desgra cambios relacionados con obstruccin extrahpatica (p.
cia, este mtodo de referencia es confuso por el hecho que ej., bilirrubina) y pruebas de relacin endocrina que refle
la prueba de tolerancia a la glucosa a menudo es anormal ja n cambios en las clulas endocrinas del pncreas (p. ej.,
en pacientes con malabsorcin intestinal, as como en ms gastrina, insulina, glucosa y cortisol).
de la mitad de los pacientes con insuficiencia pancreti
546 PARTE III VALORACIN DE LAS FUNCIONES DEL SISTEMA ORGNICO
P R E G U N T A S DE R E P A S O
1. Los hallazgos de laboratorio en la pancreatitis inclu 4. Es menos p robable que la fibrosis qustica produzca
yen todos los siguientes, EXCEPTO: cul de los siguientes trastornos?
a) Incremento de amilasa. a) Obstruccin intestinal del recin nacido.
b) Incremento de lipasa. b) Infecciones pulmonarias.
c) Incremento de triglicridos. c) Cicatrizacin del pncreas.
d) Incremento de cortisol. d) Cirrosis heptica.
e) Malabsorcin intestinal.
2. Cul de las siguientes pruebas representa una deter
minacin directa de la capacidad secretoria exocrina 5. El perodo apropiado para la recoleccin de una mues
del pncreas? tra de grasa fecal es:
a) Amilasa. a) 24 horas.
b ) Anlisis cuantitativo de la grasa fecal. b) 36 horas.
c) Prueba de secretina/CCK c) 48 horas.
d) Ninguna de las anteriores. d) 72 horas.
e) 96 horas.
3. Cul de las siguientes afirmaciones concernientes a
la fibrosis qustica NO es correcta? 6. El conducto pancretico principal drena en:
a) Ocurre predominantemente en poblaciones de a ) Duodeno.
extraccin del norte de Europa. b) Estmago.
b) Se diagnostica con frecuencia por mediciones del c) Vescula.
cloruro en el sudor. d) Colon.
c) Afecta a hombres y mujeres casi por igual.
e) Hgado.
d.) Se origina por varias mutaciones en el cromosoma.
e) La valoracin gentica suele ser infructuosa.
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Funcin gastrointestinal
Edward P. Fody
C O N T E N I D O D E L C A P T U L O
O B J E T I V O S
Al completar este captulo, el laboratorista clnico Explicar los aspectos clnicos del anlisis gstrico.
podr: Evaluar el trastorno de un paciente, considerando
Describir la fisiologa y bioqumica de la secrecin ciertos datos clnicos.
gstrica.
Enumerar las pruebas usadas para evaluar la fun
cin gstrica e intestinal.
T R M I N O S CLAVE
Factor Pepsina Prueba de tolerancia a la Sndrome de Zollinger-
intrnseco Prueba de absorcin de la lactosa Ellison
Gastrina D-xilosa Secretagogos
547
548 PARTE III VALORACIN DE LAS FUNCIONES DEL SISTEMA ORGNICO
La hormona gastrina representa el estmulo ms potente letos. De 1953 a finales de la dcada de 1970, se emple el
para la secrecin gstrica; se secreta por clulas G especia fosfato cido de histamina como un estmulo mximo para
lizadas en la mucosa gstrica y en el duodeno en respues la secrecin gstrica. Debido a sus efectos adversos, algunos
ta a la estimulacin vagal y el contacto con secretagogos. de ellos graves, en la actualidad a la histamina se le ha reem
plazado por la pentagastrina, que es un pentapptido sint
Las influencias inhibidoras incluyen acidez gstrica
tico compuesto de los cuatro aminocidos C-terminales de
elevada, que disminuye la liberacin de la gastrina por las
la gastrina ligada a un derivado de alanina sustituido.
clulas G gstricas. El polipptido inhibidor gstrico se
El lquido gstrico normal es translcido, color gris
secreta por las clulas K en el duodeno medio y distal, y en
plido y un poco viscoso, adems de que a menudo tiene
el yeyuno proximal en respuesta a productos alimenticios,
un ligero olor acre. El volumen residual no debe exceder
como grasas, glucosa y aminocidos. El polipptido intes
75 mi. En ocasiones las muestras residuales contienen
tinal vasoactivo, producido por las clulas H en la mucosa
manchas de sangre o son verdes, marrn o amarillas debi
intestinal, inhibe de forma directa la secrecin gstrica, la
do al reflujo de bilis durante el procedimiento de intuba
liberacin de gastrina y la motilidad gstrica.
cin. La presencia de partculas alimenticias es anormal e
El lquido gstrico cuenta con un elevado contenido de
indica obstruccin.
cido clorhdrico, pepsina y moco. El cido clorhdrico se
secreta contra un gradiente del ion hidrgeno de hasta 1
PRUEBAS DE LA FUNCIN GSTRICA
milln de veces la concentracin en plasma (es decir, el
lquido gstrico alcanza un pH de 1.2 a 1.3 bajo condiciones M ediciones del cido gstrico en pruebas
de estimulacin aumentada o mxima). La pepsina se refiere secretorias bsales y m xim as2 5
a un grupo de enzimas proteolticas relativamente dbiles, Despus de un ayuno durante la noche, suele realizarse an
con un pH ptimo de alrededor de 1.6 a 3.6, que cataliza lisis gstrico como prueba basal de una hora, seguido por
todas las protenas nativas excepto el moco. El componen una prueba estimulada de una hora subsiguiente a la admi
te ms importante de la secrecin gstrica en trminos de nistracin de pentagastrina (6 ug/kg por va subcutnea).
fisiologa corporal es el fa cto r intrnseco, que facilita en gran Los resultados de la prueba revelan un amplio traslape entre
medida la absorcin de la vitamina B 12en el leon. sujetos sanos y pacientes enfermos, excepto por la anacidez,
(p. ej., en anemia perniciosa) y la hipersecrecin extrema
ASPECTOS CLNICOS DEL ANLISIS GSTRICO2 5 encontradas en el sndrome de Zollinger-Ellison. Por lo gene
ral, la lcera pptica se relaciona con un volumen de secre
El anlisis gstrico se utiliza en medicina clnica primor
cin normal y produccin cida. La lcera pptica duodenal
dialmente con los siguientes propsitos:
suele relacionarse con incremento en el volumen secretorio
El anlisis gstrico se utiliz de manera amplia en la en las pruebas de secrecin basal y mxima. Sin embargo, se
medicina clnica, pero en la actualidad se le ha reempla observa traslape importante con el rango normal.
zado en gran medida por la endoscopia de fibra ptica y
procedimientos radiolgicos mejorados. M edicin del cido gstrico2
El anlisis gstrico se utiliza en clnica sobre todo para
En muestras de secrecin estimulada, la capacidad del est
detectar caractersticas de hipersecrecin del sndrome
mago para secretar contra un gradiente del ion de hidrge
de Zollinger-Ellison. Este sndrome implica un neoplas
no est determinada por la medicin del pH. La produccin
ma secretador de gastrina, que por lo general se locali
cida total en un intervalo programado se determina a par
za en los islotes pancreticos, y de manera excepcional
tir de la acidez titulable y los volmenes de las muestras del
concentraciones elevadas de gastrina plasmtica. A
componente. Despus de la intubacin, la secrecin resi
menudo la secrecin basal de una hora sobrepasa los 10
dual se aspira y retiene. La secrecin en los 10 a 30 min
meq, en tanto la proporcin entre la secrecin basal de
subsiguientes se desecha para permitir el ajuste del paciente
una hora y la mxima suele superar el 60% (p. ej., en
al procedimiento de intubacin. Las muestras se obtienen
realidad el estmago no se encuentra en estado basal,
de manera ordinaria como recolecciones de 15 min para un
sino que ms bien est estimulado de manera patolgica
perodo de una hora.
por la concentracin elevada de gastrina plasmtica).
La respuesta de la gastrina a la estimulacin intraveno
Adems, en ocasiones se utiliza el anlisis gstrico para sa de secretina se utiliza para investigar a pacientes con
evaluar la anemia perniciosa en adultos. En este trastorno, concentraciones ligeramente elevadas de gastrina en sue
se observa atrofia gstrica y el estmago no secreta el factor ro. En esta prueba, la secretina porcina pura se inyecta por
intrnseco, que se enlaza a la vitamina B 12para impedir su va intravenosa, en tanto se recolectan las cifras de gastri
degradacin por el cido gstrico. Por lo general, el pEl del na a intervalos de cinco minutos durante los siguientes
fluido gstrico en este trastorno no cae por debajo de 6 , 30 min. En pacientes con sndrome de Zollinger-Ellison,
incluso con estimulacin mxima. El anlisis gstrico rara la concentracin de gastrina se eleva cuando menos 100
vez contribuye en la determinacin del tipo de procedi pg/ml sobre el nivel basal. Los pacientes con ulceracin
miento quirrgico requerido para el tratamiento de lcera. pptica, aclorhidria u otros trastornos muestran un ligero
Previamente se utilizaron varias sustancias para estimu decremento en la concentracin gstrica .6
lar la secrecin gstrica (p. ej., cafena, alcohol y alimentos Se informan el volumen, el pH y la acidez titulable y
de prueba), pero stos son estmulos submximos y obso el clculo de la produccin cida de cada prueba, como
CAPTULO 26 FUNCIN GASTROINTESTINAL 549
es el volumen total y la produccin cida de cada perodo complejas se degradan a monosacridos, aminocidos y
de prueba (suma de las muestras del componente). Existe oligopptidos, cidos grasos, purinas, pirimidinas y otros
importante variacin en la produccin cida gstrica entre componentes simples. En la mayor parte de las molculas
sujetos sanos en las pruebas de secrecin basal y mxima. grandes, la digestin es necesaria para que se produzca la
No obstante, en la prueba basal, la mayora de los individuos absorcin. Cada da, el duodeno recibe alrededor de 7 a
sanos secretan 0 a 6 meq de cido en un volumen total de 10 10 L de agua y alimento ingeridos, y secrecin de las gln
a 100 mi. En la prueba mxima de una hora, con el uso de dulas salivales, el estmago, el pncreas y el tracto biliar.
histamina o pentagastrina como estmulo, la mayora de los Luego los materiales ingresan al yeyuno y al leon, donde
hombres secreta 1 a 40 meq de cido en un volumen total de se agregan 1 a 1.5 L de secreciones adicionales. Sin embar
40 a 350 mi. Por lo general, las mujeres y personas mayores go, al final slo alrededor de 1.5 L de material lquido llega
secretan un poco menos de cido que los hombres jvenes. al ciego, que es la primera porcin del colon o intestino
grueso. Esta importante capacidad de absorcin es posible
G astrina plasm tica6 porque el intestino delgado (de alrededor de 6 m de largo)
posee numerosos pliegues mucosales, proyecciones dimi
La medicin de las concentraciones de gastrina plasm
nutas de la superficie luminal denominadas vellosidades y
tica resulta invaluable en el diagnstico del sndrome de
proyecciones microscpicas en las clulas mucosas cono
Zolliger-Ellison, en el que los valores en ayunas a menudo
cidas como m icrovellosidades, que en conjunto aumentan
sobrepasan los 1 0 0 0 pg/ml y alcanzan los 400 000 pg/ml, en
en gran medida la superficie secretora y de absorcin a un
comparacin con el rango normal de 50 a 150 pg/m . Por lo
estimado de 200 m 2. La absorcin tiene lugar por difusin
general, la gastrina no aumenta en presencia de enfermedad
pasiva para algunas sustancias y por transporte activo para
de lcera pptica simple. En la mayora de los pacientes con
otras. Adems, el intestino delgado secreta de manera acti
anemia perniciosa, no ocurre aumento de la gastrina plasm
va electrlitos y otros productos metablicos. El intestino
tica, pero sta disminuye a lo normal cuando el cido clorh
grueso (de alrededor de 1.5 m de largo) tiene dos funcio
drico se introduce de manera artificial en el estmago.
nes principales: reabsorcin de agua, en la que los 1.5 L de
lquido recibidos por el ciego se reducen a 100 a 300 mi
FISIOLOGA INTESTINAL
de heces, y el almacenamiento de heces antes de la defe
La digestin, predominantemente una funcin del intes cacin. En la figura 26-1 se muestran de manera grfica
tino delgado, constituye el proceso en el que almidones, las estructuras abdominales que constituyen el tracto ali
protenas, lpidos, cidos nucleicos y otras molculas mentario.
Cardias
550 PARTE III VALORACIN DE LAS FUNCIONES DEL SISTEMA ORGNICO
ES T U D IO D E C A S O 26-1
Un hombre de 34 aos de edad se someti a evaluacin gstrico revel 6 4 0 ml de secrecin en la hora basal,
diagnstica, con queja de dolor epigstrico de dos aos con un gasto cido de 38 meq, y 780 ml de secrecin
de duracin, descrito de manera diversa como corrosi en la prueba de estimulacin de pentagastrina de una
vo o quemante. Se le diagnostic lcera peptdica duo hora, con un gasto cido de 4 8 meq.
denal hace 18 meses; en aquel momento, la terapia de
anticidos y la revisin de la dieta proporcionaron ali Preguntas
vio considerable de los sntomas. En fecha reciente, el
dolor se volvi ms persistente y despertaba al paciente 1. Cul es la enfermedad probable?
entre cuatro y seis veces cada noche. Los estudios radio 2. Ante los datos existentes, cul otra prueba sera
lgicos revelaron un crter de la lcera de 2.5 cm en la diagnstica para esta enfermedad?
primera porcin del duodeno y una lcera de 0.5 cm en
el antro del estmago. Los electrlitos sricos fueron 3. Cul es la explicacin de la disminucin de hemo
normales. La hemoglobina fue de 8.3 g/dl con ndices globina y el aumento del recuento de clulas sangu
de clulas sanguneas rojas normales. El recuento san neas blancas?
guneo de clulas blancas fue de de 13 100. El anlisis
libres de protenas de orina y plasma para convertir xilosa causan, tambin, disminucin de las concentraciones sri
a furfural, que luego reacciona con la p-bromoanilina para cas. La prueba no distingue entre las diversas etiologas de
formar un producto rosa, con una absorbancia medida a la malabsorcin.
520 nm. La tiourea se aade como antioxidante para pre
venir la formacin de cromgenos interferentes. Despus
A nlisis de la grasa fecal
del ayuno nocturno, el paciente evaca y bebe una solu
cin de D-xilosa: 25 g en 250 mi de agua en adultos y 0.5
Como se analiz en el capitulo 25, Funcin pancretica, el
g/kg en nios, o la dosis que se establezca. El paciente
incremento en la prdida de grasa fecal, o estatorrea, cons
ingiere una cantidad equivalente de agua durante la prxi tituye una manifestacin integral del sndrome de malab
ma hora. No se tomar ningn alimento o lquido adicio sorcin general. Sin embargo, la presencia de esteatorrea y
nal hasta que se complete la prueba. La orina se recolecta la documentacin de su gravedad no son tiles en la dis
a las cinco horas despus de la ingestin de D-xilosa. Se
tincin entre las diversas etiologas de malabsorcin, con
recolecta una muestra sangunea en oxalato de potasio a excepcin de que la esteatorrea grave rara vez se origina
las dos horas (por lo general, se elige una hora en nios). por obstruccin biliar.
Las concentraciones sanguneas normales de D-xilo-
sa en relacin con decremento en la excrecin de orina
sugieren deterioro de la funcin renal o recoleccin de ori Otras pruebas de m alabsorcin intestinal
na incompleta. La terapia con aspirina disminuye la excre
Deficiencia de numerosos analitos ocurren en relacin con
cin renal de la D-xilosa, en tanto la indometacina reduce
malabsorcin intestinal. Por lo general, la medicin de
la absorcin intestinal. Despus de la ingestin de una
estos analitos es valiosa, no tanto para confirmar el diagns
dosis de 25 g de D-xilosa, los adultos sanos deben excretar
tico de malabsorcin, sino para determinar la magnitud
cuando menos 4 g en el perodo de cinco horas. En lactan
de deficiencia nutritiva y, por tanto, la necesidad de tera
tes y nios, la excrecin despus de una dosis de 0.5 g/kg
pia de reemplazo. La disminucin del apetito y la ingesta
para varias edades expresada como porcentajes de dosis
diettica suele ser ms graves en pacientes que padecen
ingerida se muestra en el cuadro 26-1. La concentracin
malabsorcin con etiologa intestinal. El desgaste cor
sangunea en adultos sanos vara de manera amplia, pero
poral o caquexia tal vez sean graves. A menudo, debido
si es menor a 25 mg/dl a las dos horas se le considerar
a que la prdida de albmina en el lumen intestinal y la
anormal despus de la dosis de 25 g. Con la dosis de 0.5
disminucin de ingesta diettica de protena acompaan
g/kg, los lactantes menores de 6 meses de edad mostrarn
la reduccin de la absorcin de oligopptidos y amino
una concentracin sangunea de cuando menos 15 mg/dl
cidos, ocurre equilibrio de nitrgeno negativo jun to con
a una hora, en tanto los mayores de 6 meses y nios alcan
disminucin de protena y albmina totales en suero. Una
zarn cuando menos 30 mg/dl.511
albmina srica de menos de 2.5 g/dl es mucho ms carac
terstica de enfermedad intestinal que de enfermedad pan
Carotenoides sricos cretica. En relacin con enfermedad grave del intestino
Los carotenoides son varios pigmentos de color amarillo delgado, ocurren deficiencias de las vitaminas A, D, E y K
a naranja o prpura que se distribuyen de manera extensa solubles en grasa. La deficiencia de vitamina K, a su vez,
en el tejido animal. Son sintetizados por muchas plantas e causa deterioro de los factores de coagulacin II (protrom
imprimen color amarillo a algunos vegetales y frutas. Los bina), VII (proconvertina), IX (componente tromboplasti-
principales carotenoides en el suero humano son licope- na del plasma) y X (factor Stuart-Prower) dependientes de
no; xantofila; y beta-caroteno, el precursor principal de la vitamina K, lo que se refleja en el tiempo de protrombina
la vitamina A en seres humanos. Al ser solubles en gra anormal y pruebas de tiempo de tromboplastina parcial.
sa, los carotenoides se absorben en el intestino delgado En presencia de enfermedad grave del intestino delgado,
en relacin con lpidos. Por lo general, la malabsorcin como esprue tropical o celiaco, llega a aparecer malabsorcin
de lpidos da como resultado una concentracin srica de de folato y vitamina B12, en tanto la anemia megaloblstica es
carotenoides ms baja que el rango de referencia de 50 a ms bien frecuente y de cierta utilidad en distincin entre
250 mg/dl. La inanicin, idiosincrasias dietticas y fiebre enfermedad intestinal y pancretica. Por lo general, la absor
cin de hierro disminuye. Adems, la tendencia a valores de
hierro srico bajos tal vez se agrave por prdida sangunea
CUADRO 26-1. R E S U L T A D O S D E L A D - X IL O S A intestinal. La absorcin intestinal de calcio a menudo dismi
E N P A C IE N T E S P E D I T R IC O S 24 nuye como resultado de la unin del calcio por cidos grasos
sin absorber, y la deficiencia de vitamina D y disminucin del
EDAD RANGO DE REFERENCIA
magnesio srico. Debido a que la absorcin y el metabolismo
Menor de 6 meses 11 a 33% de sodio, potasio y agua tambin pudieran estar daados en
6 a 12 meses 20 a 32% forma importante, las concentraciones sricas de sodio y
potasio se reducen y sobreviene deshidratacin. El deterioro
1 a 3 aos 20 a 42%
en la absorcin de carbohidratos en presencia de enfermeda
3a 10 aos 25 a 45% des intestinales, como esprue, ocasiona disminucin hacia
Mayor de 10 aos 25 a 50% las curvas de concentracin sangunea horizontales en las
pruebas de tolerancia a la glucosa, lactosa y sucrosa.
552 PARTE III VALORACIN DE LAS FUNCIONES DEL SISTEMA ORGNICO
E S T U D IO D E C A S O 26-2
Una m ujer de 26 aos apareci en la clnica de pacien CUADRO DE ESTUDIO DE CASO 26-2.1.
tes externos con molestia abdominal, diarrea y prdida RESULTADOS DE LABORATORIO
de peso no intencional de 8 kg durante los ltimos dos
AN ALITO RESULTADO
a tres aos. Ella informa un perodo similar de cinco a
seis aos de dolor abdominal y diarrea en la niez, pero Hemoglobina 8.1 g/di
en esencia desapareci alrededor de los 12 a 13 aos de 30%
Hematcrito
edad. Ahora tiene entre tres y cinco movimientos intes
tinales diarios, que describe como voluminosos, ftidos RSC 4.1 x 106/|xl
y fluctuantes. La mujer present un peso de 48 kg y Sodio srico 134 meq/L
estatura de 1.70 m. Nunca se haba sometido a proce
Potasio 3.4 meq/L
dimientos quirrgicos. El examen fsico revel turgor
deficiente de la piel, palidez general y abdomen protu Carotenoides sricos 14 jxg/dl
berante. Los valores de laboratorio clnico anormales Grasa fecal 22 g/24 h
incluyeron los que se muestran en el cuadro 26-2.1 del
Prueba de absorcin de Excrecin de cinco horas
estudio de caso.
D-xilosa (dosis de 25 g) de 1.3 g y concentracin
El examen fecal no revel vulos ni parsitos, en
sangunea a las dos
tanto el cultivo bacteriolgico no mostr patgenos.
horas de 8 mg/dl
Tiempo de protrombina 15.8 segundos
Preguntas
(12 a 14 s)
1. Cul es el proceso de enfermedad?
Tiempo de 56 segundos
2. Cul es la probable etiologa en este caso? tromboplastina (30 a 45 s)
parcial activado
3. Cul es la causa de las pruebas de coagulacin anor
males?
4. Cul es la probable causa principal de la anemia, y
cules son otras posibles causas contribuyentes?
P R E G U N T A S DE R E P A S O
1. Cul de las siguientes pruebas es slo de la capacidad 2. En condiciones normales, la cantidad ms pequea de
de absorcin del intestino? D-xilosa se absorbe por pacientes:
a) Prueba de tolerancia a la lactosa. d) Menores de 1 ao de edad.
b) Prueba de la D-xilosa. b) De entre 1 y 3 aos de edad.
c) Grasa fecal (recoleccin de 72 h). c) De entre 3 y 5 aos de edad.
d) Carotenoides sricos. d) De entre 5 y 10 aos de edad.
e) Albmina srica. e) Adultos.
CAPTULO 26 FUNCIN GASTROINTESTINAL 553
O B J E T I V O S
Al completar este captulo, el laboratorista clnico Establecer la utilidad clnica de las pruebas de los
podr: lquidos amnitico, cefalorraqudeo, sinovial, pleu
Identificar las fuentes de los lquidos amnitico, ral, pericrdico y peritoneal, y sudor.
cefalorraqudeo, sinovial, pleural, pericrdico y Interpretar el estado del paciente, considerando
peritoneal, y sudor. los resultados de un ndice de estabilidad de la
Describir el propsito fisiolgico de los lquidos espuma, ndice L/E y prueba del sudor.
amnitico, cefalorraqudeo, sinovial, pleural, peri Diferenciar entre un trasudado y un exudado.
crdico y peritoneal, y sudor.
T R M I O S C L A V E
554
CAPITULO 27 ANLISIS DE LOS LQUIDOS CORPORALES 555
En este captulo se trata de dar a conocer al lector varios lisan, de modo que es necesario determinar los contenidos
lquidos que a menudo se analizan en el laboratorio de enzimticos para la valoracin en busca de defectos meta-
qumica clnica. En trminos generales, se pone nfasis en blicos. Este procedimiento ha sido reemplazado en gran
la fuente, el propsito fisiolgico y la utilidad clnica de las medida por el uso del muestreo de vello corinico (MVC)
mediciones de laboratorio para cada uno de estos lquidos y anlisis citognico. Es posible que el MVC plantee un
corporales. riesgo para el feto, en tanto la amniocentesis del primer
trimestre quiz proporcione una muestra con menos sus
LQUIDO AM NITICO tancias de interferencia.
Al principio la valoracin de los defectos del tubo neural
El saco amnitico proporciona un ambiente cerrado para (DTN) se realiza mediante suero maternal. Originalmente
el desarrollo fetal. Este saco posee doble cubierta como se pensaba que la presencia de concentraciones elevadas de
resultado de la fusin de las membranas amnitica (inter a-fetoprotena (AFP) indicaba DTN, como espina bfida y
na) y corinica (externa) en una fase inicial del desarrollo anencefalia. Adems, la elevacin de la AFP srica materna
fetal. El feto est suspendido en el lquido am nitico (LA) se relaciona de manera estrecha con hernias abdominales
dentro del saco. El LA proporciona un medio amortigua dentro del cordn umbilical, higroma cstico y resultados
dor para el feto y sirve como matriz para el influjo y eflujo deficientes en el embarazo. La AFP srica materna baja se
de los componentes. relaciona con incremento en la incidencia de sndrome de
Obviamente, la madre ser la ltima fuente fisiolgica Down y otros aneuploides. Por lo general, se considera
de LA. Dependiendo del intervalo del perodo de gestacin, que el protocolo para la comprobacin de AFP incluye:
el lquido se deriva de diferentes fuentes. Al comienzo del a) AFP srica materna, a menudo con examen de hCG,
embarazo, cierta secrecin materna a travs del amnios estriol no conjugado e inhibina; b ) repeticin, si es que
contribuye al volumen. Poco despus de la formacin de es positivo; c) ultrasonido diagnstico; y d) amniocentesis
la placenta, el embrin y la fusin de membranas, el LA se para confirmacin. La interpretacin de la prueba de AFP
produce en gran medida por transudacin a travs de la srica materna es compleja, ya que se trata de una funcin
piel fetal. En la ltima mitad del embarazo, la piel se vuelve de la edad, la raza, el peso, la edad gestacional y el nivel
mucho menos impermeable, y la miccin fetal, o urinacin, de nutricin.
se convierte en la principal fuente de volumen. El destino La prueba de la AFP del lquido amnitico (AFPLA)
del lquido tambin vara de acuerdo con el perodo de ges constituye el procedimiento confirmatorio. La AFP es un
tacin. Se presume que ocurre un intercambio bidireccio- producto primario del saco vitelino fetal y, despus, del
nal a travs de las membranas y en la placenta. Del mismo hgado fetal. Se libera en la circulacin fetal y se presume
modo, durante las primeras etapas del embarazo, la piel que entra al LA por trasudacin. La entrada en la circula
fetal est implicada. En la segunda mitad del embarazo, el cin materna podra darse por traspaso de la placenta o a
mecanismo de deglucin fetal constituye el principal desti partir del LA. Si hubiera un defecto abierto (p. ej., espina
no del LA. Existe un equilibrio dinmico establecido entre bfida) que causara un incremento en la AFPLA, habra
la produccin y la degradacin. La miccin y deglucin un aumento concomitante en la AFP srica materna. Bajo
fetales mantienen este equilibrio. La deglucin continua condiciones normales, la AFPLA se eliminara por deglu
conserva el contacto ntimo del LA con el tracto gastroin cin y metabolismo fetal. Una mayor presencia sobrecarga
testinal fetal, la cavidad bucal y el rbol broncotraqueal. este mecanismo, lo que produce elevacin de la AFPLA.
Este contacto se evidencia por el material desprendido del A menudo se realiza examen de la protena por medios
feto que proporciona la ventana al desarrollo y las fases inmunolgicos. La falta de tratamiento de una presencia
funcionales fetales. positiva y la ausencia de 100% de especificidad aumenta la
Las clulas encontradas en el lquido se originan con el necesidad de cuidado extremo en el anlisis. Las preocu
feto, y el contenido qumico refleja la deglucin y elimi paciones sociales y clnicas establecen que se practiquen
nacin continuas de lquido. Se obtiene una muestra de los niveles ms elevados de control de calidad.
liquido por am niocentesis transabdominal (perforacin del Esta preocupacin gener la necesidad de una segunda
saco amnitico), que se realiza bajo condiciones aspticas. prueba para confirmar DTN y defectos de la pared abdo
Antes de tratar de obtener lquido, las posiciones de la pla minal. El mtodo empleado es el anlisis de una acetilcoli-
centa, el feto y las bolsas de lquido se visualizan mediante nesterasa (ACE) especfica para el sistema nervioso central
ultrasonografa. La aspiracin de cualquier material dis (SNC). El DTN permite el paso directo, o menos difcil, de
tinto al lquido tal vez conduzca a conclusiones errneas, la ACE al LA. El anlisis de la ACE especfica del SNC en
as como posible dao al feto. el LA ofrece entonces un grado de confirmacin para la
Se realizan amniocentesis y anlisis subsiguiente del LA AFPLA. Los mtodos usados para la ACE del SNC inclu
para la prueba de a) enfermedades congnitas, b) defectos yen los enzimticos, inmunolgicos y electroforticos con
en el tubo neural, c) enfermedad hemoltica, d) edad gesta inhibicin. Estos ltimos abarcan el uso de acetiltiocolina
cional y e) desarrollo pulmonar fetal. El primero, diagns como sustrato y BW 284C 51, un inhibidor especfico del
tico de anormalidad gentica, se logra por cultivo celular. SNC, para diferenciar la seudocolinesterasa srica de la
El lquido obtenido entre las semanas 14 y 20 de emba ACE especfica del SNC.
razo se recolecta para clulas de origen fetal. Las clulas El anlisis del LA para valorar enfermedad hemolti
se cultivan, se recolectan para anlisis cromosmico y se ca en el recin nacido (eritroblastosis fetal) fue el primer
556 PARTE III VALORACIN DE LAS FUNCIONES DEL SISTEMA ORGNICO
Liley Freda
i
E
o
LO
350 nm 400 nm 450 nm 500 nm 550 nm
o j o[j y *y y
a alterar de manera radical la interpretacin clnica. Antes
de la adopcin de un mtodo para el anlisis del LA, se debe
adoptar y cumplir de forma estricta un protocolo para la
separacin centrfuga que incluya la fuerza relativa (no revo
luciones por minuto) y la duracin de la centrifugacin.
0 1+ 2+ 3+ 4+ Al parecer el ndice de estabilidad de la espuma (IE E ),3
una variante de la prueba de la burbuja original de Cle-
FIGURA 27-5. Sistema de graduacin empleado en la evaluacin
m ent ,4 es aceptable como anlisis rpido, econm ico e
de la prueba FS-50. (Reimpresa con autorizacin de Statland et al.,
Evaluation of a modlfied foam stablllty [FS-50] test. An assay perfor-
informativo. Esta prueba cualitativa dependiente de la tc
med on amniotic fluid to predict fetal pulmonary maturlty, Am J Clin nica requiere slo equipo comn. Se basa en la capacidad
Pathol, 1978;69:51. Reimpreso con autorizacin de la American Jour del agente surfactante para generar una tensin superficial
nal o f Clinical Pathology.) ms baja que la de una solucin etanol-agua de 0.47 de
fraccin molar. Si se encuentra presente suficiente surfac
10 y 70%, respectivamente, de la concentracin total de tante, permanece un anillo estable de burbujas de espu
fosfolpidos, son ms importantes como surfactantes. Su ma en la interfaz aire-lquido. A medida que el surfactante
presencia en concentraciones lo bastante elevadas acta aumenta (la probabilidad de madurez pulmonar fetal se
de manera concertada para permitir la contraccin y reex eleva), se requiere una fraccin mol ms grande de eta-
pansin de los alvolos neonatales. Para formarse una nol para sobrepasar la tensin superficial controlada por
idea de su importancia, piense en la dificultad de inflar el surfactante. La fraccin mol ms elevada usada en tanto
un globo nuevo de juguete en comparacin con otro que an se mantiene un anillo estable de burbujas en la inter
ha sido inflado de manera parcial. Para el recin nacido, faz aire-lquido se informa como el IEE (cuadro 27-1). La
la cantidad normal de surfactante apropiado permite la prueba depende de la tcnica y es posible que se encuentre
contraccin de los alvolos sin colapso. La siguiente ins sesgada por contaminacin de cualquier tipo en el LA (p.
piracin es la diferencia entre un globo inflado de manera ej., contaminacin de sangre o m econio). La interpretacin
parcial en comparacin con uno nuevo desinflado. La can de los patrones de burbuja de IEE es difcil y depende de la
tidad insuficiente de surfactante permite que los alvolos tcnica. Los resultados varan entre laboratorios clnicos.
colapsen, lo que requiere una gran proporcin de energa En la mayor parte de stos se ha encontrado que un IEE
para reexpandir los alvolos en la inspiracin. Esto no slo de 0.47 o 0 .48 representa un estado de madurez lmite.
crea una demanda extrema de energa en un recin nacido, Resulta imperativo determinar los intervalos de referencia
sino que es probable que tambin cause dao fsico a los especficos del laboratorio. Los valores mayores al lmite
alvolos con cada colapso. El dao tal vez conduzca a depo indican un aumento en la probabilidad de madurez.
sicin hialina, o a que el recin nacido no tenga la fuer Se puso nfasis en las pruebas cuantitativas sobre todo
za para continuar la inspiracin a costa de la energa. El por el trabajo de G luck .5 Los fosfolpidos de importancia
resultado final en ambos casos tal vez sea fatal. son el fosfatidilglicerol (PG), la fosfatidilcoiina (FC , leci-
Los mtodos para la evaluacin del estado pulmonar tina) y la esfingomielina (EP). Las cantidades relativas de
fetal se dividen en anlisis funcionales y bioqumicos. Los PG y FC aumentan en gran medida con la madurez pulmo
primeros proporcionan una medida fsica directa del LA en nar, mientras que la concentracin de EP es relativamente
un esfuerzo por evaluar la capacidad del agente surfactante constante. Los incrementos en PG y PC corresponden a
para disminuir la tensin superficial. Entre los ejemplos de cantidades ms grandes de surfactante producidas por las
este grupo se encuentran la tensin superficial, la polari clulas alveolares tipo II a medida que los pulmones feta
zacin de la fluorescencia y el ndice de estabilidad de la les maduran.
espuma. Estas pruebas reflejan la concentracin bruta de La tcnica clsica para la separacin y evaluacin de los
agentes surfactantes ms que las concentraciones de fos lpidos implica la cromatografa de capa fina (TLC) de un
folpidos especficos. A este ltimo grupo pertenecen los extracto del LA. El procedimiento de extraccin elimina
anlisis que cuantifican dipalmitoilfosfatidilcolina (la leci- la mayor parte de las sustancias interferentes y da como
tina principal), fosfatidilgliceroles, todos o la mayor parte resultado una solucin concentrada de lpido. En las prc
de los fosfolpidos y el ndice clsico entre lecitinas y esfin- ticas actuales se utiliza TLC unidimensional o bidimensio-
gomielinas (ndice L/E). Cada grupo de pruebas tiene sus nal para la identificacin. Las necesidades del laboratorio
defensores y menciones extensas en la literatura. En todas determinan si se efecta un mtodo unidimensional o
se trata de indicar los cambios ms importantes en las con bidimensional. En la figura 27-6 se muestra un ejemplo de
centraciones de fosfolpidos que ocurren alrededor de las la separacin de fosfolpidos por TLC unidimensional .6
36 semanas de gestacin y establecen la maduracin pul
monaria fetal (fig. 27-5). Con todas las pruebas, es necesa CUADRO 27-1. D ETERM IN ACI N DEL IEE
ria la centrifugacin del LA para eliminar sedimentos.
La fuerza excesiva (cualquiera mayor a la necesaria para TUBO 1 TUBO 2 TUBO 3
eliminar los sedimentos) tal vez cambie el perfil de los lpi Vol. LA 0.50 0.50 0.50
dos al hacer que los lpidos presentes se fraccionen como
Vo!. 95% EtOH 0.51 0.53 0.55
resultado de la fuerza centrfuga. La diferencia en propor
ciones observada a 1 000 en comparacin con 3 000 g llega IEE 0.47 0.48 0.49
CAPTULO 27 ANLISIS DE LOS LQUIDOS CORPORALES 559
MM
selectiva y eliminacin de los fosfolpidos insaturados, de
i modo que es posible obtener una medicin directa de la
dipalmitoilfosfatidilcolina. Resulta difcil comparar estos
I
i i anlisis en forma emprica.
An existen informes opuestos sobre los valores de
decisin para las mediciones de fosfolpidos cuando se
T T A A ST aplican a ciertas patologas, en particular diabetes. En los
FIGURA 27-6. Cromatografa de capa fina de fosfolpidos del lqui primeros informes se sugera que la diabetes causaba cier
do amnitico. Se muestran fosfolpidos estndar (ST), extracto total tas tensiones que requeran un ndice L/E mayor de 2 y
(7) y compuestos precipitables en acetona (A) en el lquido amnitico. un PG mayor que 6% para ser comparable con una situa
Los estndares de fosfolpidos contienen, por litro, 2 g de lecitina y cin no diabtica. Se desconoce si los informes reflejaban
P1, por cada uno; 1 g de PG y esfingomielina, por cada uno; y 0.3 g la dificultad en el control de la diabetes o un efecto real en
de PS y PE, por cada uno. Se obtuvo manchado de 10 mi del estn la madurez fetal. Al parecer en los informes ms recientes
dar. (Reimpresa con autorizacin de Tsai MY y Marshall JG, Phospha- se coincide en que, en la diabetes, la interpretacin del
tidylglycerol in 261 samples of amniotic fluid. Clin Chem 25[5]:683.
ndice L/E est intacta, pero la fraccin de lecitina tal vez
Copyright 1979 American Association for Clinical Chemistry.)
presente una menor proporcin de las especies dipalmitoil
de la habitual.
ES T U D IO D E C A S O 27-1
Una m ujer de 26 aos de edad, embarazada por pri ndice L/E = 1.8 con FG = 2%
mera vez, se present en la sala de urgencias con posi Creatinina LA 1.5
=
ble trabajo de parto. Su presin sangunea fue 180/110
mmHg, y temperatura de 99.6E Sus antecedentes IEE = 0.47
revelaron una mujer ansiosa, con embarazo de dura AST = 40 (35)
cin desconocida, que nunca haba visto a un mdico.
ALT = 40 (35)
Admiti un aumento rpido de peso durante las lti
mas dos semanas, pero afirma que se haba sentido bien ALP = 250 (100)
hasta entonces. En fecha reciente, experiment debili Mg2+ = 1.6 (2.2)
dad y episodios de vrtigo. El urinlisis fue importante
Ca2* = 9.0(10.5)
para la glucosa 3+ y protena. La hematologa mostr
una baja concentracin de hemoglobina y recuento de P04 = 4.0 (4.3)
plaquetas moderadamente bajo, pero los valores de leu Alb = 3.2 (5.0)
cocitos fueron normales. En el panel qumico se encon
tr Na, 132 mmol/L; K, 3.0 mmol/L; Cl, 100 mmol/L;
C 0 2 29 mmol/L; US, 7 mg/dl; creatinina, 0.5 mg/dl; y
glucosa, 351 mg/dl. Se tom la decisin de ingresarla y Preguntas
realizar varias pruebas ms. Se obtuvieron los siguien
1. Los resultados de laboratorio indican un embarazo
tes resultados de laboratorio (lmite superior de inter
normal?
valo de referencia dado):
Despus de 24 h de descanso en cama, la PS de la 2. Comente sobre la madurez del feto.
paciente descendi a 140/90, y las contracciones des
cendieron.
560 PARTE III VALORACIN DE LAS FUNCIONES DEL SISTEMA ORGNICO
Debido a que el anlisis del LA para un ndice L/E es y cundo deben usarse, as como los efectos de trastornos
dependiente de la tcnica, resulta absolutamente obligato como la hipertensin inducida por el embarazo .10,11
rio que el laboratorio evale por completo la metodologa
usada. Es ms importante relacionar la metodologa con LQUIDO CEFALORRAQUDEO
el entorno clnico particular en el desarrollo de intervalos
interpretativos. No es raro observar un grado de madurez El lquido cefalorraqudeo (LCR) es el lquido que ocupa
con un ndice L/E nominal de 2.0 0.3 en un hospital, los espacios del SNC. Como tal, rodea todas las facetas del
en comparacin con 2 . 2 . 0.2 en otro centro a travs cerebro y de la mdula espinal. Estos espacios son conti
del mismo mtodo. Es necesaria una cooperacin estrecha nuos y, por tanto, reflejan todos los aspectos del SNC. El
con el personal mdico en la definicin de los rangos que LCR realiza cuando menos cuatro funciones principales:
se emplearn. a) soporte fsico y proteccin, b) mtodo para excre
La aplicacin de la tcnica de polarizacin fluorescente cin, c) provisin de un ambiente qumico controlado y
para el LA proporciona otro tipo de medicin. Este pro d) transporte intracerebral y extracerebral (fig. 2 7 -7 ).
cedimiento, segn se utiliza en un polarmetro comercial La funcin principal y ms obvia del LCR es como col
con sistema reactivo completo (Abbott Laboratories), chn flotante para el cerebro. El cerebro ms denso flota
ofrece una prueba realizada con rapidez (menos de una en el lquido menos denso, lo que permite el movimien
hora) sobre un analizador verstil que es relativamente to dentro del crneo. La importancia se demuestra por
independiente de la tcnica. Su uso se ha extendido tanto el resultado de un golpe a la cabeza. El choque inicial se
que se ha sugerido como examen inicial en una amplia transfiere al cerebro completo, en lugar de infligir dao a
gama de pruebas .7 El mtodo empleado se basa en la dis un rea. Tal vez resulte daado el lado opuesto al golpe, lo
tribucin de una tinta fluorescente sinttica semejante a la que depende de la fuerza impartida.
lecitina entre agregados de fosfolpidos y albmina. La tin La segunda funcin principal del LCR es el manteni
ta relacionada con los agregados de fosfolpidos disminuye miento de una matriz qumica flagrante constante para
la polarizacin; con la albmina, la polarizacin aumen el SNC. Los componentes sricos llegan a variar en gran
ta. A la polarizacin total se le compara con un conjunto medida, pero los valores de los constituyentes del LCR se
de estndares lpido: albmina para producir un valor de mantienen dentro de lmites estrechos.
menor unidad. A medida que el pulmn fetal madura, la
cantidad de surfactante (fosfolpido) se incrementa y, por
tanto, la polarizacin se ve afectada. El uso de este siste
ma es amplio, en parte, por la accesibilidad de todos los
laboratorios, la sencillez del procedimiento analtico y la
consistencia en la interpretacin de resultados. En fecha
reciente, se inform sobre un protocolo para la interpreta
cin basado en la edad gestacional.8
El valor de pronstico se ve influido por patologas
sanguneas o del meconio (lpidos) o fetales, que causan
alteracin de las concentraciones de albmina, como ano
malas del tracto urinario. Adems, si el LA es centrifuga
do, no filtrado, el valor de lpidos se altera, por lo que la
polarizacin disminuye.
Otra medicin funcional propuesta en fecha reciente es
la cuantificacin de cuerpos lamelares. Estos paquetes de
surfactante, liberados por las clulas tipo 2 , son casi del
tamao de las plaquetas y, por tanto, se cuantificarn con
el canal de plaquetas de un analizador de hematologa. Se
sugieren valores tentativos de un LA sin contaminacin a
3 0 0 0 0 a 5 0 0 0 0 equivalentes de plaquetas. An conti
na la investigacin para validar el anlisis. Se desarroll
un protocolo estandarizado en un esfuerzo por hacer que
el examen sea transferible entre laboratorios .9
Los intervalos de referencia, o puntos de corte, son
fijos para embarazos normales. Todas las pruebas mues
tran una eficacia razonable para excluir inmadurez. Sin
embargo, tienen fallas en los ndices de falsos negativos;
de manera especfica, cuando se relacionan con partos en
los que no se desarroll sndrome de angustia respiratoria,
aunque se predijera que existira con base en un resultado FIGURA 27-7. Vas principales del LCR. (A) Vista sagital; (B) vista
inmaduro. Se recomiendan dos estupendas reseas para lateral. (Reimpresa con autorizacin de Milhorat TH, Hldrocephalus
conocer anlisis sobre las pruebas de madurez pulmonar and the Cerebrospinal Fluid, Baltimore: Williams & Wilkins, 1972:25.)
CAPTULO 27 ANLISIS DE LOS LQUIDOS CORPORALES 561
La funcin excretora no est bien definida, pero se pre ejemplo, a traumatismo. Es obvio que esta ltima es seria.
sume que es efectiva, en especial en estados patolgicos. Ambas se diferencian a travs de observacin y, tal vez,
Debido a que no hay un sistema linftico en el cerebro, mediante pruebas. Un color rojo brillante y descenso en
slo estn disponibles dos vas para la eliminacin de los la cantidad de eritrocitos cuando se extrae la muestra del
desechos: intercambio capilar y excrecin por medio del lquido indican extraccin traumtica. Los pigmentos de
LCR. La funcin de transporte se describe como una tarea avera, xantocromla o hemoglobina, sealan que la lisis y
neuroendocrina. El LCR participa en la distribucin de las el metabolismo de los eritrocitos ya ocurrieron, cuando
hormonas hipofisarias dentro del cerebro y la eliminacin menos dos horas antes. Despus de excluir una extraccin
de hormonas del cerebro a la sangre. traumtica previa o hiperbilirrubina (>20 mg/dl), la xan-
El volumen total del LCR es de alrededor de 150 ml, o tocroma indicara hemorragia.
cerca de 8 % del volumen total de la cavidad del SNC. El El anlisis bioqumico (qumico) del LCR ha condu
lquido se forma sobre todo en el plexo coroideo de mane cido a recopilaciones del mbito de los posibles consti
ra profunda dentro del cerebro y por las clulas ependima- tuyentes. Sin embargo, en la prctica clnica, se reduce la
rias que cubren a los ventrculos. cantidad de indicadores tiles. Las pruebas de inters son
El LCR se forma a un ndice promedio de alrededor de glucosa, protena (total y especfica), lactato, lactato des
0 .4 ml/min, o 500 ml/da. La formacin es resultado de hidrogenasa, glutamina y los parmetros acidobsicos. Los
la ultrafiltracin selectiva del plasma y la secrecin activa utilizados con mayor frecuencia son la glucosa y protena.
por las membranas epiteliales. La absorcin del LCR ocu Antes de cualquier anlisis, se debe centrifugar el lquido
rre en bolsillas externas en la dura a las que se les deno para evitar la contaminacin por elementos celulares. Se ha
mina vellosidades aracnoideas, y el LCR drena en los senos sugerido la enzima lactato deshidrogenasa como marcador
venosos de la dura. Otra de las funciones de las vellosi de tumor, pero es relativamente no especfica. sta tambin
dades es la eliminacin de materia particulada, como res se eleva en presencia de infeccin bacteriana, aunque otros
tos celulares. La reabsorcin, al igual que la formacin, es parmetros son ms especficos. La concentracin de gluta
selectiva y especfica. Obviamente, si se mantiene un volu mina debe reflejar la cifra de amoniacos del SNC elimina
men constante a un ndice de formacin de 500 ml/da, la dos por la formacin de glutamina a partir de glutamato. Se
resorcin es constante. elevara en caso de encefalopata heptica por sndrome de
Las muestras de LCR se obtienen por perforacin lum Reye. A la prueba se le ha reemplazado en gran medida por
bar, por lo general en el interespacio vertebral L3-L4 o ms las relativas facilidad y simplicidad de las determinaciones
abajo, a travs de tcnica asptica. Al lquido obtenido se le confiables de amoniaco plasmtico. El establecimiento de
suele separar en tres alcuotas: a) para qumica y serologa, los parmetros acidobsicos especficos obtenidos a travs
b) para bacteriologa y c) para microscopa. Es muy impor de un instrumento de sangre-gas es pertinente debido al
tante recordar que esta matriz es de volumen limitado y ambiente vital del LCR y al efecto sobre el control de la res
se debe analizar de manera inmediata. Cualquier muestra piracin. La falta de capacidad amortiguadora del LCR y los
remanente se preservar debido a su disponibilidad limita requerimientos rigurosos para la integridad de la muestra en
da. El orden de los tubos refleja el orden supuesto para la los procedimientos de recoleccin y anlisis propician que
minimalizacin de interferencia a partir de la tcnica de la el uso rutinario de esta serie de pruebas sea imprctico.
recoleccin menos ptima, con el tubo 3 presumiblemente Las pruebas que han sido ms confiables desde el punto
menos contaminado por clulas de tejido intermedio. de vista diagnstico y accesibles en lo analtico son aquellas
La investigacin de laboratorio del LCR est indicada en para glucosa, protena total y protenas especficas del LCR.
casos de sospecha de infeccin del SNC, enfermedad des- La glucosa ingresa al lquido espinal sobre todo por un
mielinizante, malignidad y hemorragia en el SNC. A lo lar transporte promotor cuando se compara con un transporte
go de la historia, se ha realizado antes de los procedimientos pasivo (difusional) o uno activo (dependiente de energa);
radiolgicos como melografa, pero la utilidad diagnstica es llevada a travs de la membrana epitelial por una especie
en estos casos es bastante pequea. Al igual que con todas de portador estereoespecfico. El mecanismo del portador
las muestras del paciente que ingresan al laboratorio, el es el responsable del transporte de materiales insolubles en
examen visual de la muestra es la primera observacin, y a lpidos a travs de la membrana en el LCR. Por lo general,
menudo la ms importante, que se realiza. El LCR, cuando ste es un proceso descendente consistente con un gra
es normal, es claro, incoloro y libre de grumos y de san diente de concentracin. La concentracin de la glucosa del
gre. Las diferencias a partir de estos estndares indican una LCR es alrededor de dos terceras partes de la plasmtica.
patologa probable y ameritan examen adicional. Por lo Debido a que una concentracin de glucosa del LCR
general, los lquidos turbios requieren examen microscpi aislada tal vez resulte engaosa, se recomienda la obten
co, en tanto un color amarillo a caf o rojizo indica sangre. cin de una muestra de plasma al mismo tiempo, de modo
Las dos razones ms habituales para encontrar pigmen que las concentraciones de glucosa del plasma y LCR
tos de sangre y hemoglobina en el LCR son la extraccin se evalen en conjunto. A la glucosa del LCR normal se
traumtica y la hemorragia subaracnoidea. La primera le considera mayor a 45 mg/dl (2.5 mmol/L). El aumento
consiste en la presencia de sangre o derivados debido a la de las concentraciones de glucosa no es informativo desde
interdiccin de los vasos sanguneos durante la perfora el punto de vista clnico, ya que por lo general slo pro
cin lumbar. La hemorragia se origina por una avera en porciona confirmacin de hiperglucemia. Esta generalidad
la barrera del SNC y el sistema circulatorio debido, por debe ser atenuada a travs de dos factores: a ) el equilibrio
562 PARTE III VALORACIN DE LAS FUNCIONES DEL SISTEMA ORGNICO
despus de la carga de glucosa suele requerir entre 3 y 4 a la filtracin de LCR del odo o hacia la nariz, respectiva
h; y b ) con el aumento de las concentraciones de glucosa mente. La identificacin de la fuente de dicha filtracin se
sangunea, la glucosa del LCR se eleva, pero no de manera lleva a cabo de manera ms ptima a travs de un anlisis
proporcional. Lo primero es importante en casos de comi para x-transferrina, una protena nica del LCR.
das ingeridas en un momento cercano a la obtencin de El incremento de la concentracin de protena total en el
la muestra. Lo segundo resulta trascendente debido a que LCR constituye un indicador no especifico til de los estados
implica que el ndice de glucosa plasmtica/LCR disminu patolgicos. Los aumentos se generan por: a) lisis de san
ye a medida que ocurre hiperglucemia primaria. gre contaminada por extraccin traumtica, b) incremento
La disminucin del ndice de glucosa plasmtica/LCR a en la permeabilidad de la membrana epitelial, c) elevacin
medida que aumenta la glucosa plasmtica es consistente de la produccin por tejido del SNC, d) obstruccin o e)
con un proceso del portador saturable. No sera raro que disminucin en el ndice de eliminacin. La contaminacin
el ndice fuera de 0 .4 :0 .6 con concentraciones de glucosa de la sangre es importante debido al ndice en la concen
en plasma masivos (mayores de 600 mg/dl), pero un valor tracin de 200:1. Es posible que la presencia de cualquier
de glucosa del LCR de 80 mg/dl, con concentracin plas cantidad de sangre eleve las concentraciones de protena
mtica de 300 mg/dl, es importante desde el punto de vista en el LCR. La membrana epitelial se vuelve ms permeable
clnico y ameritara preocupacin. por infeccin bacteriana o fngica o hemorragia cerebral,
La reduccin de las concentraciones de glucosa del LCR en vista de que un aumento en la produccin de SNC ocu
(hipoglucorraquia) tal vez sea resultado de: a) alteracin en rre en la panencefalitis esclerosante subcutnea (PEES) o
el transporte mediado por el portador de glucosa en el LCR, esclerosis mltiple (EM). Adems, existen combinaciones
b) metabolismo activo de la glucosa por clulas u organis de permeabilidad y produccin, como las enfermedades
mos, o c) aumento del metabolismo por el SNC. El meca colgeno-vasculares. Un proceso obstructivo, como tumor
nismo de la disminucin del transporte an se encuentra o absceso, tambin genera un incremento en la protena. La
bajo intenso debate, pero se especula que es la causa en la ltima causa mencionada del aumento de las concentracio
meningitis tuberculosa y sarcoidosis. Las meningitis aguda nes de protena total del LCR, la disminucin de la absor
purulenta, amebiana, fngica y trichintica son ejemplos de cin, es posible en teora, pero no se ha demostrado.
consumo por organismos, en tanto la neoplasia menngea Se obtiene informacin ms sensible desde el punto de
difusa y el tumor cerebral son ejemplos de consumo por vista diagnstico a travs del anlisis de las fracciones de
tejido del SNC. Por lo general, el consumo de glucosa se protena presentes. Se requiere una comparacin con los
acompaa por un aumento en la concentracin de lactato patrones sricos para obtener conclusiones precisas. En con
debido a la gluclisis anaerbica por organismos o tejido diciones normales, la prealbmina y una forma nica de la
cerebral. Se ha sugerido un incremento en el lactato con transferrina (x-protena) se encuentran presentes en el LCR
valor de glucosa normal a disminuido como indicador acce en una concentracin ms elevada que en el suero. Aunque
sible oportuno de meningitis bacteriana en comparacin con es posible determinar las protenas respectivas tanto en suero
viral.12 El anlisis de glucosa y lactato en el LCR se logra de como en LCR, las protenas de mayor inters son la albmina
manera sencilla mediante tcnicas empleadas para plasma y la inmunoglobulina G (IgG). Debido a que la albmina se
y suero. Es importante que la provisin para el anlisis de produce slo en el hgado, su presencia en el LCR ocurrir
glucosa o lactato en el LCR sea inmediata o que la muestra mediante transporte de membrana. Sin embargo, tal vez surja
se conserve con un antiglucoltico, como el ion fluoruro. IgG por sntesis local de clulas plasmticas dentro del LCR.
Luego se utiliza la medicin de la albmina en suero y LCR
Las concentraciones de protena en el LCR reflejan
para normalizar los valores de la IgG de cada matriz con el
la ultraltracin selectiva de la barrera epitelial del LCR
objetivo de determinar la fuente de la IgG. Este ndice IgG-
y su capacidad secretoria. Toda la protena que se suele
albmina contribuye de manera primordial al diagnstico de
encontrar en el plasma se localiza en el LCR, excepto a
enfermedades de desmielinizacin, como esclerosis mltiple
cifras muy disminuidas. La protena total es de alrededor
y PEES. La EM es la enfermedad desmielinizante inflamato
de 0.5% , o V200, que la del plasma. Las concentraciones de
ria ms comn del SNC.
protena especfica en LCR no son proporcionales con los
valores plasmticos debido a la especificidad del proceso SL f e l LCR/IgG srica =^ ^ LCR
de ultraltracin. La correlacin se lleva a cabo de mejor Albmina del LCR/albmina srica
manera a travs del uso de ndices hidrodinmicos de las
Normal=0.5
especies de protena en lugar del peso molecular. Debido a
la relacin de las protenas del LCR con el suero, el anlisis (Ec. 27-1)
de suero acompaar al anlisis de protena del LCR espe La elevacin de la protena srica causa increm entos en
cfico. El decremento en la concentracin de la protena los valores del LCR debido a permeabilidad. Sin embargo,
total del LCR se origina por: a) disminucin de la dilisis el aumento en la IgG del LCR, sin la elevacin concom i
del plasma; b) aumento de la prdida de pro tena (p. ej., tante de la albmina del LCR, sugiere produccin local
eliminacin de volmenes excesivos de LCR); o c) filtra (esclerosis mltiple o PEES). Se observan increm entos en
cin del LCR por una fisura en la dura, otorrea o rinorrea. la permeabilidad y produccin en presencia de meningitis
La ltima razn es la ms frecuente. La fisura en la dura bacterial. Los mtodos para analizar las concentraciones
ocurre como resultado de perforacin lumbar anterior o de IgG y albmina son los mismos que para el suero, pero
traumatismo grave. La otorrea y rinorrea hacen referencia se optimizan para los valores ms bajos encontrados.
CAPTULO 27 ANLISIS DE LOS LQUIDOS CORPORALES 563
ES T U D IO D E C A S O 27-2
Un hombre de 32 aos de edad tuvo buena salud hasta LCR Lquido claro e incoloro, al
hace ms o menos un ao, cuando ingres en un pro parecer libre de residuos; el
grama acelerado de programacin de computadoras. cultivo no producen crecimiento
Durante el ltimo ao, comenz a notar vista borrosa WBC Normal
episdica, vrtigo leve y dolor de cabeza. El hombre
atribuy las manifestaciones de prdida sensorial en sus Glucosa = 60 mg/dl (plasma = 80 mg/dl)
manos y sentimiento de debilidad despus del ejercicio ndice IgG/Alb = 1.7
fsico al hecho de estar fuera de forma. Decidi visitar
IgG Bandas oligoclonales presentes
a su mdico despus de un ataque de visin borrosa
acompaado por sensacin de parlisis, seguida por
sensacin de alfileres y agujas en su pierna izquierda.
El examen ptico fue negativo. El examen neurolgi- Preguntas
co condujo a la realizacin de extraccin espinal para 1. Cul es la importancia de la protena de LCR nor
obtener hallazgos de laboratorio y mielografa. Esta mal y el ndice IgG/Alb variante?
ltima fue negativa. Los resultados del laboratorio fue
ron los siguientes: 2. Cul patologa es consistente con estos resultados?
Por lo general, el aumento de las concentraciones de nstico ms aceptada para la identificacin clnica de esta
protena del LCR o la sospecha clnica indica la necesidad enfermedad. En condiciones normales, la parte inferior
de separacin electrofortica de las protenas respectivas. enrollada de la glndula del sudor secreta un presudor
A veces, esta separacin demuestra bandas mltiples de la bajo estimulacin colinrgica. A medida que el presudor
banda de IgG. A esta observacin se le conoce como pro atraviesa la parte conductora de la glndula que pasa por
tenas oligoclonales (una pequea cantidad de clones de la la dermis, se absorben varios constituyentes. En la FQ,
IgG del mismo tipo celular con propiedades electroforti- los electrlitos, sobre todo los iones de cloruro y sodio, se
cas casi idnticas). Esta ocurrencia suele relacionarse con reabsorben de manera inadecuada debido a una mutacin
enfermedades inflamatorias y esclerosis mltiple o PEES. en el gen regulador de la conductancia de transmembrana
Estos tipos de trastornos estimularan las clulas inmuno- de la fibrosis qustica (RTFQ), que controla un canal de
competentes. El reconocimiento de un patrn oligoclonal cloruro regulado por la AMP cclica.
reemplaza el informe de concentraciones de protena nor La FQ (mucoviscidosis) es una enfermedad recesiva
males y es causa de preocupacin si en la separacin de autosmica hereditaria que afecta las glndulas exocrinas,
suero correspondiente no se demuestran bandas idnticas. y causa anormalidades en la secrecin de electrlitos y
Otra protena a la que se le considera especfica para escle mucosidad. Esta exocrinopata se presenta slo en el esta
rosis mltiple es la protena bsica de mielina (MBP). En los do homocigo. En Estados Unidos, se calcula una frecuen
primeros informes se sugiri elevada especificidad, pero la cia del estado del portador (heterocigo) de 1 por cada 20 .
MBP tambin se ha detectado en trastornos no desmielini- La enfermedad afecta sobre todo a individuos caucsicos.
zantes y no siempre se observa en aquellos que s lo son. El ndice observado de expresin clasifica a la FQ como
Algunos utilizan las concentraciones de la MBP para vigilar la enfermedad hereditaria letal ms frecuente en Estados
la terapia de la esclerosis mltiple. Las directrices internacio Unidos, con fallecimiento que ocurre por lo general en
nales actuales para el diagnstico de EM reconocen tanto un la tercera dcada. La causa primaria de la muerte es neu
ndice de IgG elevado y la presencia de diferentes bandas oli mona, secundaria a la secrecin espesa y anormalmente
goclonales del LCR en el suero como evidencia de apoyo. viscosa en los pulmones. Estas secreciones espesas causan
obstruccin de las microvas areas, lo que predispone al
SUDOR paciente con FQ a episodios repetidos de neumona. La
tercera parte de la trada diagnstica es la insuficiencia
Las glndulas de sudor ecrinas comunes actan en la regu pancretica. Una vez ms, secreciones anormalmente vis
lacin de la temperatura del cuerpo. Estn inervadas por cosas obstruyen los conductos pancreticos. Esta ostensi
las fibras del nervio colinrgico y constituyen un tipo de ble obstruccin causa acumulacin y autoactivacin de las
glndula exocrina. Se ha analizado el sudor por sus diver enzimas pancreticas. Luego las enzimas causan destruc
sos contenidos inorgnicos y orgnicos pero, con una cin del tejido pancretico exocrino.
excepcin notable, no est demostrado que sea un modelo Los algoritmos diagnsticos para FQ an dependen de
til desde el punto de vista clnico. Esa excepcin es el electrlitos de sudor anormales, defectos pancreticos o
anlisis de sudor para determinar las concentraciones de bronquiales y antecedentes familiares. Se ha propuesto el
cloruro y sodio en el diagnstico de fibrosis qustica (FQ ). uso de la tripsina inmunorreactiva sangunea, un produc
La prueba de sudor es la herramienta individual de diag to pancretico, como mtodo para la valoracin del recin
5 64 PARTE III VALORACIN DE LAS FUNCIONES DEL SISTEMA ORGNICO
nacido y coadyuvante diagnstico. El rea en rpido desa rica en cido hialurnico en el dializado, lo que hace que
rrollo de la gentica molecular proporciona la metodologa el lquido sinovial sea viscoso. La membrana se compone
definitiva. Al defecto del gen causante de la FQ se le locali de tres tipos de clulas diferentes: las clulas tipo A son
z en el cromosoma 7, y se obtuvieron las huellas digita ricas en vacuolas y lisosomas y funcionan como fagocitos;
les de DNA de las mutaciones ms frecuentes que causan las clulas tipo B son ricas en retculo endoplsmico rugo
FQ. Se anticipa que en la prxima dcada, el anlisis de so y se presume que tienen una funcin secretoria; y las
DNA directo catalogar todas las mutaciones, y ofrecer la clulas tipo C al parecer son un hbrido de los tipos A y
evaluacin y el diagnstico definitivos. Aunque se informa B en aspecto y funcin. Se supone que el lquido sinovial
que existe una forma de FQ con cloruro de sudor normal, funciona como lubricante para las articulaciones y como
la prueba de cloruro de sudor an constituye la herramien medio de transporte para la liberacin de nutrientes y la
ta de laboratorio ms accesible para la deteccin de F Q .13 eliminacin de desechos celulares. El volumen de lquido
Las glndulas del sudor, aunque afectadas en su secre encontrado en una articulacin grande, como la rodilla,
cin, permanecen intactas desde el punto estructural por la rara vez sobrepasa los 2 mi. El lquido normal es claro,
FQ. El anlisis del sudor tanto para sodio como para cloru incoloro a amarillo plido, viscoso y no coagulante. Las
ro es vlido pero, a lo largo de la historia, el cloruro fue y es variaciones son indicativas de situaciones patolgicas.
el elemento principal, lo que conlleva al uso de la prueba La recoleccin de una muestra se logra mediante artro-
de cloruro del sudor. Debido a su importancia, la Cystic centesis de la articulacin bajo condiciones aspticas. Se
Fibrosis Foundation de Estados Unidos sugiri un mtodo debe preservar la muestra de inmediato con heparina para
estndar. ste se basa en el mtodo de iontoforesis de nitra cultivo, con cido etilendiaminotetractico (EDTA) para
to de pilocarpina de Gibson y Cooke .14 La pilocarpina es anlisis microscpico o con fluoruro para anlisis de gluco
un frmaco semejante a los colinrgicos usada para esti sa. El examen microscpico es el ms provechoso en impor
mular las glndulas del sudor. El sudor se absorbe en una tancia diagnstica. Aunque se han determinado muchos
almohadilla de gasa durante el procedimiento. Hay otras analitos desde el punto de vista qumico, la proporcin
pruebas (p. ej., osmolalidad y conductividad) que reflejan entre lquido sinovial y glucosa plasmtica (normalmente,
las concentraciones de sodio y cloruro, pero la prueba de 0.9:1) sigue siendo la ms til. Se observan disminuciones
cloruro del sudor sigue siendo el mtodo de referencia. en la proporcin en presencia de trastornos inflamatorios
Despus de recolectar el sudor por iontoforesis, se lle (p. ej., gota, artritis reumatoide, lupus eritematoso sistmi-
va a cabo el anlisis de cloruro y sodio. Se han sugerido co) y purulentos (artritis bacteriana, viral). Los mtodos
muchos mtodos, todos dependientes de los requerimien estndar para el anlisis de la glucosa son aplicables.
tos del laboratorio. Por lo general, el sudor se filtra en
un volumen conocido de agua destilada y se analiza para LQUIDOS SEROSOS
cloruro (cloridmetro) y sodio (fotometra de flama). En
trminos generales, a los valores superiores a 60 mmol/L Los pulmones, el corazn y la cavidad abdominal estn
se les considera positivos para ambos iones. rodeados por sacos de clulas simples, membranosos y
Aunque se suele reconocer un valor de 60 mmol/L por la de doble capa permeables a los componentes del suero.
prueba cuantitativa iontofortica de pilocarpina, es impor Cuando el suero se dializa a travs de estas membranas,
tante tomar en cuenta varios factores en la interpretacin. al lquido que se forma se le denomina lquido seroso; de
No slo existir variacin analtica respecto a los valores manera especfica, el lquido pleural (pulmn), pericrdi-
extremos, tambin ocurrir en el establecimiento un rea co (corazn) y peritoneal (abdominal).
epidemiolgica de lmite. Con esto en mente, el rango de Imagine los sacos como un globo que contiene una
45 a 65 mmol/L para el cloruro sera ms apropiado en la cantidad pequea de agua. Al colocar un baln de ftbol
determinacin de la necesidad de repeticin. Se deben con americano dentro del globo, ste expele el aire residual
siderar otras variables. Por lo general, la edad aumenta el hasta que slo queda agua (fig. 27-8). El agua se extiende
lmite, a tal grado que es cada vez ms difcil clasificar a los
adultos. Obviamente, el estado de hidratacin del paciente
tambin afecta las concentraciones de sudor. Debido a que el
procedimiento completo es exigente desde el punto de vista
tcnico, se desarrollar experiencia en su uso antes de que
la prueba se encuentre disponible en clnica. Existe una
descripcin completa de la recoleccin y el anlisis del
sudor, que incluye las justificaciones del procedimiento.
Corte de globo
LQUIDO SINOVIAL
Las articulaciones se clasifican en mviles e inmviles. Las
mviles contienen una cavidad que est encerrada por una
cpsula; la cubierta interna de la cpsula es la membrana
sinovial. Esta cavidad contiene lquido sinovial, que se for
ma por ultrafiltracin del plasma a travs de la membrana
sinovial. La membrana tambin secreta una mucoprotena FIGURA 27-8. Ejemplo de la formacin del lquido seroso.
CAPTULO 27 ANLISIS DE LOS LQUIDOS CORPORALES 565
para llenar el espacio potencial de doble capa de globo CUADRO 27-2. CAUSAS DE LAS EFUSIONES
resultante. Las membranas serosas son anlogas al globo; PLEURALES
los rganos internos, al baln de ftbol americano. El saco
TRASUDATIVA EXUDATIVA
pleural (pulmn) es continuo al hilio del rbol bronquial;
el pericardio, a los vasos principales; y el peritoneo, alre Insuficiencia Neumona bacteriana8
dedor de cada rgano. Todos son expandiles y presen cardaca congestiva3
tan espacios potenciales para la recoleccin de lquido o Sndrome nefrtico Tuberculosis
gases. La formacin de los lquidos serosos es un proceso
Hipoproteinemia Absceso pulmonar
continuo controlado por la presin hidrosttica de la circu
lacin sistmica y el mantenimiento de la presin onctica Cirrosis heptica Malignidad
debida a la protena. Por lo general, el espacio potencial (obstruccin linftica)
se encuentra lleno; es decir, no hay gas presente. El lqui Insuficiencia renal crnica Infeccin viral/fngica
do reduce o elimina la friccin causada por la expansin
y contraccin de los rganos protegidos. Un trastorno en Infarto pulmonar
el equilibrio dinmico que causa un aumento en el lqui Pleuresa
do constituye un estado anormal. A un incremento en el Malignidad pulmonar
volumen del lquido se le denomina efusin.
Linfoma
El exceso de lquido ( > 5 0 mi) en la cavidad peritoneal nal. Las funciones del LCR incluyen soporte y la proteccin
indica enfermedad. A dicho exceso se le denomina ascitis; fsicos, mtodo de excrecin, provisin de un ambiente
y al lquido, lquido asctico. El proceso de obtencin de qumico controlado y transporte intracerebral y extracere-
las muestras de este lquido por aspiracin con aguja es bral. El volumen total del LCR es de alrededor de 150 mi.
la paracentesis. Por lo general, el lquido se visualiza por Las muestras de LCR se obtienen por perforacin lum
ultrasonido para confirmar su presencia y volumen antes bar. La investigacin de laboratorio del LCR est indicada
de realizar la paracentesis. para casos de sospecha de infeccin en el SNC, enfermedad
En teora, el mismo mecanismo que causa efusiones sero desmielinizante, malignidad y hemorragia en el SNC. Las
sas en otros espacios potenciales funciona para la cavidad pruebas ms confiables desde el punto de vista diagnstico y
peritoneal. De modo especfico, una alteracin en el ndice accesibles desde una perspectiva analtica son aquellas para
de dilisis secundaria a una patologa remota primaria es un la glucosa, protena total y protenas especficas del SNC.
trasudado, en comparacin con una patologa primaria de la El sudor es un producto de las glndulas de sudor ecrinas
membrana peritoneal (exudado). Los diversos factores que comunes, que participan en la regulacin de la temperatura
se aplican a este gran espacio, que incluyen la funcin renal, corporal. La prueba de sudor es la herramienta diagnstica
tienden a empaar la distincin. La causa ms frecuente de ms aceptada para la FQ. Dentro de la articulacin movible,
ascitis con un peritoneo normal es la hipertensin portal. se encuentra una cavidad rellena con lquido sinovial, que
Las obstrucciones al flujo heptico, como la cirrosis, insu se forma mediante ultraltracin del plasma a travs de la
ficiencia cardaca congestiva e hipoalbuminemia por cual membrana sinovial. El lquido normal es claro, incoloro a
quier causa, demuestran la incidencia ms elevada. amarillo plido, viscoso y no coagulante. Algunas variacio
Las causas exudativas de ascitis son sobre todo cncer nes son indicativas de trastornos patolgicos. La recoleccin
ovrico metastsico y peritonitis infectiva. La diferenciacin de este lquido se realiza por artrocentesis. Los pulmones,
entre ambas es anloga a las mediciones de protena y LD el corazn y la cavidad abdominal estn rodeados por un
descritas para el lquido pleural. Sin embargo, la capacidad saco de doble capa, clulas simples y membranoso, que es
para la diferenciacin constituye un reto. El gradiente de permeable a los constituyentes del suero.
albmina suero/ascitis (GASA, o albmina srica-albmina El lquido que se forma cuando el suero se dializa a tra
del lquido) de 1.1 g/dl o ms, usado para indicar hiperten vs de esas membranas es el lquido seroso; en especial, los
sin portal, representa la medicin ms aceptada. Una cifra lquidos pleural (pulm n), pericrdico (corazn) y perito
de neutrfilos mayor de 0.5 X 109/L indica peritonitis. neal (abdominal). La formacin de liquido seroso es un
proceso continuo que se controla por presin hidrosttica
RESUM EN de la circulacin sistmica y mantenimiento de la presin
Adems del suero y el plasma, el laboratorio de qumi onctica debido a la protena. Bajo condiciones normales,
ca analtica a menudo analiza otros lquidos corporales, hay 3 a 20 mi de lquido pleural en el espacio pleural.
como el LA, LCR, sudor, lquido sinovial y lquidos sero A la extraccin del lquido se le denomina toracentesis.
sos. El LA proporciona un medio de amortiguacin para La relacin del pericardio y del lquido pericrdico con el
el desarrollo fetal. corazn es similar a la que mantiene con los pulmones; el
Se realizan amniocentesis y anlisis subsiguiente del LA muestreo pericrdico en el laboratorio es raro. Un exceso
en la prueba para enfermedad congnita, defectos del tubo de lquido en la cavidad peritoneal indica enfermedad. A
neural, enfermedad hemoltica, edad gestacional y desa sta se le denomina ascitis. Al lquido se le conoce como
rrollo pulmonar fetal. El LCR es un lquido que ocupa los lquido asctico y se obtiene por un procedimiento deno
espacios del SNC, que incluye el cerebro y la mdula espi- minado paracentesis.
P R E G U N T A S DE R E P A S O
1. Las pruebas de laboratorio para la evaluacin de la 3. Los recuentos de cuerpos lamelares reflejan:
madurez del pulmn fetal se basan en: fl) Recuento de plaquetas del feto.
a) Diferenciacin de productos de neumocitos tipo I. b) Recuento de plaquetas de la madre.
b) Produccin de acetilcolinesterasa. c) Recuento de meconio del feto.
c) Produccin de AFP. d) Paquetes de fosfolpidos surfactantes.
d ) Productos de neumocitos tipo II. e) Todos los anteriores.
e) Presencia de meconio.
4. Con frecuencia, se observa sangre en el LCR despus
2. El lquido amnitico: de:
a) Provee amortiguacin para el feto. fl) Administracin de verde de indocianina.
b) Es una mezcla de lquidos maternos y fetales. b) Extraccin traumtica.
c) Se valora por cateterizacin umbilical. c) Anemia hemoltica.
d) a y b. d) Perforacin lumbar.
e) a, b y c. e) pH bajo.
CAPTULO 27 ANLISIS DE LOS LQUIDOS CORPORALES 567
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PARTE
IV
reas de especialidad
de la qumica clnica
569
CAPITULO
Monitoreo de frmacos
teraputicos
David P. Thorne
C O N T E N I D O D E L C A P I T U L O
28
VAS DE ADMINISTRACIN cido valproico
ABSORCIN Carbamacepina
FRMACOS LIBRES EN COMPARACIN CON Etosuximida
COMBINADOS FRMACOS PSICOACTIVOS
DISTRIBUCIN DEL FRMACO Litio
ELIMINACIN DE FRMACOS Antidepresivos tricclicos
Eliminacin metablica BRONCODILATADORES
Eliminacin renal Teofilina
FARMACOCINTICA FRMACOS INMUNOSUPRESIVOS
RECOLECCIN DE LA MUESTRA Ciclosporina
FRMACOS CARDIOACTIVOS Tacrlimo
Digoxina ANTINEOPLSICOS
Lidocana Metotrexato
Quinidina RESUMEN
Procainamida PREGUNTAS DE REPASO
Disopramida REFERENCIAS
ANTIBITICOS LECTURAS RECOMENDADAS
Aminoglucsidos
Vancomicina
FRMACOS ANTIEPILPTICOS
Fenobarbital
Fenitona
O B J E T I V O S
T E R M I N OS C L A V E
Absorcin del frmaco Distribucin del frmaco Monitoreo del frmaco Valores depresivos del
Concentracin mxima del Eliminacin del frmaco teraputico frmaco
frmaco Farmacocintica Rango teraputico
570
CAPTULO 28 MONITOREO DE FRMACOS TERAPUTICOS 571
manera predecible en gente sana. Sin embargo, los cam cos que son polares pero no ionizados atraviesan, tambin,
bios en la motilidad intestinal, el pH, la inflamacin, asi las membranas celulares pero no se aslan dentro de los com
como los alimentos u otros frmacos, modifican de mane partimientos lipdicos. Las especies ionizadas se difunden
ra importante las caractersticas de absorcin .7 En estos fuera de la vascularidad, pero con lentitud. El volumen del
casos, el uso del M FT tal vez contribuya al establecimiento ndice de distribucin (Vd) se utiliza para describir las carac
de un rgimen de dosificacin eficaz. tersticas de distribucin de un frmaco. Desde el punto de
Todas las sustancias, incluyendo los frmacos, absor vista matemtico, esto se expresa de la siguiente manera:
bidos del intestino (excepto el recto), ingresan al sistema
portal heptico. En este sistema, toda la sangre del tracto Vd = D/Ct (Ec. 28-1)
gastrointestinal viaja a travs del hgado antes de entrar donde: Vd = volumen de distribucin (en litros)
en la circulacin general. Ciertos frmacos estn sujetos a D = dosis inyectada (miligramos [mg] o gramos
asimilacin y metabolismo heptico importantes durante [gix
este paso a travs del hgado. A este proceso se le conoce C = concentracin en plasma (mg/L o g/L)
como m etabolism o de prim er p aso.8
En ciertos frmacos, existe un amplio grado de variacin Los frmacos que son hidroflicos llegan a presentar
en estos procesos, incluso dentro de una poblacin normal. una Vd grande. Las sustancias que estn ionizadas o se
Adems, muchas de las caractersticas de absorcin de un combinan de manera primordial en el plasma tienen valo
frmaco llegan a cambiar con la edad, el embarazo o los res de Vd pequeos.
trastornos patolgicos. En estos casos, quiz resulte difcil la
prediccin de la concentracin circulante final de una dosis ELIMINACIN DE FRM ACOS
oral estndar. Sin embargo, con el uso del MFT, es posible
Los frmacos se eliminan del cuerpo por varios mecanis
determinar regmenes de dosificacin oral efectivos.
mos. Ms all del mecanismo de eliminacin, los decre
mentos en la concentracin srica de la mayor parte de
FRM ACO S LIBRES EN COMPARACIN CON los frmacos a menudo ocurre como un proceso de primer
COM BINADOS orden (ndice exponencial de prdida). Esto implica que
La mayor parte de los frmacos en la circulacin estn suje el ndice de cambio en la concentracin del frmaco con el
tos a la combinacin con componentes del suero. Aunque es tiempo vara de manera continua en relacin con la con
posible que se formen muchas especies, en su mayor parte se centracin del frmaco. La eliminacin de primer orden
trata de complejos de frmaco y protena. Un aspecto impor obedece a la siguiente ecuacin general:
tante necesario para comprender la dinmica del frmaco es AC/AT = -k C (Ec. 28-2)
que slo la fraccin libre interacta con su sitio de accin y
ocasiona una respuesta biolgica. La fraccin libre es la que Esta ecuacin define la manera en que el cambio en la
mejor se correlaciona con los efectos teraputicos y toxicol- concentracin por unidad de tiempo (AC/AT) se relaciona
gicos de un frmaco. En muchos medicamentos, el porcen directamente con la concentracin del frmaco (C ) y la
taje libre depende de parmetros fisiolgicos y bioqumicos. constante (k). El valor de k es un factor de proporcionali
A una dosis estndar, el contenido total en plasma tal vez dad simple que describe el cambio de porcentaje (negativo
se encuentre dentro del rango teraputico, pero el paciente debido a que disminuye) por unidad de tiempo; a menudo
experimenta efectos txicos adversos (fraccin libre eleva se le denomina constante de elim inacin o ndice de elim i
da) o no obtiene un beneficio teraputico (fraccin libre nacin. La solucin grfica a esta ecuacin es una funcin
baja). Esto llega a ocurrir como resultado de cambios en el exponencial que declina de la manera curvilnea prevista,
contenido proteico en suero. En ocasiones aparecen cam con aproximacin asintomtica a cero (fig. 2 8-2). En la
bios en las protenas combinadas con suero en presencia de grfica que se muestra en la figura 28-2 se ilustra un ndice
inflamacin, malignidades, embarazo, enfermedad heptica, rpido de cambio a concentraciones elevadas del frma
sndrome nefrtico y desnutricin. El porcentaje libre tal vez co e ndices lentos de cambio a concentraciones bajas del
se vea influido por la concentracin de sustancias que com frmaco. Su registro en las dimensiones semilogartmicas
piten por los sitios de unin, que tal vez sean otros frmacos (fig. 28-3) llega a hacer lineal esta funcin.
o sustancias endgenas, como urea, bilirrubina u hormonas. El metabolismo heptico o la filtracin renal, o una
Se debe tomar en cuenta las mediciones de frmaco libre com binacin de ambos, eliminan la mayor parte de los
en aquellos medicamentos que estn combinados en gran frmacos. En ciertos medicamentos, la eliminacin por
medida con protena, y en los que los signos qumicos son estas vas es bastante variable. Adems, los cambios fun
inconsistentes con las concentraciones totales del frmaco. cionales en estos rganos tal vez ocasionen modificaciones
en el ndice de eliminacin. En estas situaciones, la infor
DISTRIBUCIN DEL FRM ACO macin con respecto al ndice de eliminacin y el clculo
de la concentracin circulante de un frmaco despus de
La fraccin libre de los frmacos circulantes est sujeta a un perodo determinado constituyen factores importantes
difusin fuera de la vascularidad en los espacios intersticiales en el establecimiento de un rgimen de dosificacin efec
e intracelulares. La capacidad para abandonar la circulacin tivo y seguro. La ecuacin 28-2 y las figuras 28-2 y 28-3
depende bastante de la solubilidad lipdica del frmaco. Los son tiles en la determinacin del ndice de eliminacin
frmacos que son muy hidrofbicos atraviesan con facilidad y la concentracin de un frmaco despus de un perodo
las membranas celulares y se dividen en los compartimientos determinado. En la siguiente ecuacin se ilustra la manera
lipdicos, como las clulas adiposas y nerviosas. Los frma en que se usa la ecuacin.
CAPTULO 28 MONITOREO DE FRMACOS TERAPUTICOS 573
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La integracin de la ecuacin 28-2 produce lo siguiente: sta es la forma ms til de la ecuacin de eliminacin.
A partir de ella, es posible calcular la constante de elimi
CT = C 0e"kT (Ec. 28-3) nacin o, si se conoce el valor de k, determinar la canti
dad de frmaco que se presentar despus de un perodo
donde: C0 = la concentracin inicial del frmaco,
determinado.
CT = la concentracin del frmaco despus del
perodo determinado (T ), Por ejemplo:
k = la constante de eliminacin, y La concentracin de la gentamicina es de 10 pg/ml a las 12:00.
T = el perodo evaluado. A las 16:00, la concentracin de la gentamicina es de 6 pg/ml.
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Cul es la constante de eliminacin (k) para la gentamicina en La funcin bsica de este sistema implica la captacin de
este paciente? sustancias hidrfobas y, a travs de una serie de reaccio
A travs de la ecuacin 28-3: nes enzimticas, su conversin en sustancias solubles en
agua. Luego estos productos son bombeados en la bilis o
c=io
Ct=6 liberados en la circulacin general, donde se eliminan por
T = 4 lloras filtracin renal.
Al sustituir estos valores en la ecuacin, se obtiene: Existen muchas enzimas implicadas en el sistema OFM.
6 - 10 0- k (4 horas)
stas suelen dividirse en dos grupos o fases funcionales. Las
Al dividir ambos lados entre 10, se obtiene: reacciones de la fase I producen intermediarios reactivos.
06 = 0- k (4 horas)
Las reacciones de la fase II conjugan grupos funcionales
Para eliminar el signo exponencial, se toma el logaritmo con estos sitios reactivos, que tienen productos solubles en
natural de ambos lados:
agua. Es posible que los intermediarios reactivos se conju
En 0.6 = -k (4 horas)
Resolviendo el logaritmo natural: guen con varios grupos funcionales: la glutationa, la glici
-0.51 = -k (4 horas) na, el fosfato y el sulfato son frecuentes. El sistema OFM no
Multiplicando por -1: es especfico y permite que muchas sustancias endgenas
0.51 = k (4 horas) y exgenas diferentes pasen por estas series de reacciones.
Dividiendo ambos lados entre 4 horas: Aunque hay muchos sustratos potenciales en esta ruta, los
0.13/h = k productos formados a partir de una sustancia individual
Este valor calculado para k indica que el paciente est elimi son especficos. Por ejemplo, el acetaminofeno es un sustra
nando 13% de gentamicina srica por hora. to para OFM y siempre forma un conjugado de glutationa.
En este mismo paciente el mismo dia, cul sera la concentra Adems, si el grupo de conjugacin para un frmaco deter
cin en suero prevista de gentamicina a media noche (24:00)?
minado se reduce, los productos de la fase an se generan.
Para CQ, es posible utilizar el valor de las 12:00 o de las 16:00,
En esta situacin, la acumulacin de los productos de la
siempre y cuando se use el valor de tiempo correspondiente
adecuado. En este ejemplo, se utiliza el valor de las 16:00 de 6 fase I llegan a ocasionar efectos txicos adversos.
xg/ml. Adems, resulta notable que el sistema OFM es indu-
C0= 6 ng/ml cible. Esto se observa como un aumento en la sntesis y
T = 8 horas la actividad de las enzimas de ndice limitante dentro de
k = 0.13/h esta ruta. Los inductores ms frecuentes son xenobiticos,
Sustituyendo en la ecuacin 28-3: que son sustratos en esta va. Ciertos frmacos estimulan
_ 6 0 -0 .1 3 /h o ra (8horas)
su propio ndice de eliminacin. Debido a la variabilidad
Resolviendo para el exponente: biolgica en el grado de induccin, el M FT tal vez contri
CT= 6 e'104
buya, una vez ms, al establecimiento de un rgimen de
Ntese que la unidad de tiempo (horas) se ha cancelado. Al
dosificacin apropiado.
resolver el exponente:
CT=6 (0.35) Puesto que muchos sustratos potenciales ingresan al
CT= 2.1 pg/ml sistema OFM, ocurren muchas interacciones frmaco-fr
Ntese que se llevaron a cabo las unidades de concentracin. maco en este cam ino .9 Llegan a presentarse interacciones
competitivas y no competitivas. Esto ocasiona alteracin
Aunque la constante de eliminacin (k) es un valor en los ndices de eliminacin de los frmacos implicados .10
til, no es la nomenclatura habitual en el entorno clnico. En la mayor parte de los casos, el grado de alteracin es
En cambio, se utiliza el trmino vida m edia. sta represen imprevisible. El valor de MFT vuelve a ser evidente.
ta el tiempo necesario para que la concentracin en suero Parte de este anlisis es que los cambios en el estado
disminuya a la mitad. Es posible determinarla de manera heptico quiz originen modificaciones en la concentra
grfica (fig. 28-2) o por conversin de la constante de eli cin de los frmacos circulantes eliminados por esta ruta .11
m inacin (k) a la vida media (T 1/2) a travs de la frmu Por lo general, la induccin del sistema OFM produce una
la de la ecuacin 28-4. De estos dos mtodos, el clculo eliminacin acelerada y menor vida media correspon
proporciona una manera fcil y precisa para determinar la diente. Por el contrario, el estado de enfermedad heptica
vida media. caracterizado por prdida de tejido funcional tal vez oca
sione ndices de eliminacin ms lentos y vidas medias
T 1/2 = 0.693/k (Ec. 28-4)
correspondientes ms largas .8 En estas situaciones, el M FT
contribuye al ajuste de la dosificacin.
Elim inacin m etablica En algunos frmacos, hay variacin importante en el
Los xenobiticos son sustancias que no suelen encon ndice de metabolismo heptico y no heptico del frmaco
trarse dentro de los sistemas humanos, aunque llegan a dentro de una poblacin normal. Esto da como resulta
introducirse por vas bioqumicas destinadas a sustancias do un ndice de eliminacin bastante variable, incluso en
endgenas. La mayor parte de los frmacos son xenobiti ausencia de enfermedad. El establecimiento de regmenes
cos. Existen m uchos caminos bioqumicos potenciales por de dosificacin para estos frmacos es, en muchos casos,
los que avanzan los frmacos. La va bioqumica respon asistido por el uso de MFT. Con el empleo de la gentica
sable de una gran parte del metabolismo del frmaco es el molecular, ahora es posible identificar variantes genticas
sistema de la oxidasa de funcin mixta (OFM ) heptica. frecuentes de algunas rutas metabolizantes de frmacos .12
CAPTULO 28 MONITOREO DE FRMACOS TERAPUTICOS 575
La identificacin de estos individuos es til en el estableci ro como se observara despus de la administracin oral
miento de un rgimen de dosificacin individualizado. de un frmaco. A medida que el frmaco absorbido ingresa
a la circulacin, est sujeto a la distribucin y elimina
Elim inacin renal cin simultneas. Las concentraciones en suero se elevan
cuando el ndice de absorcin sobrepasa la distribucin y
La fraccin libre plasmtica de frmacos de origen o sus eliminacin. La concentracin disminuye cuando el ndi
metabolitos est sujeta a filtracin glomerular o secrecin ce de eliminacin y distribucin excede la absorcin. El
renal, o ambas.13 En aquellos frmacos no secretados o suje ndice de eliminacin slo se determina despus de que se
tos a reabsorcin, el ndice de eliminacin del frmaco libre completan la absorcin y la distribucin.
se relaciona directamente con la tasa de eliminacin de la La mayor parte de los frmacos no se administran como
creatinina. La disminucin de la tasa de filtracin glomeru un simple bolo, sino que se liberan de manera fija (p. ej.,
lar ocasiona aumento en la vida media y en la concentracin una vez cada ocho horas). Con este tipo de administra
sricas. Los antibiticos aminoglucsidos y la ciclosporina cin, la concentracin del frmaco en suero oscila entre
son ejemplos de frmacos con este comportamiento. un valor mximo (concentracin pico del f rm a co ) y uno
mnimo (concentracin de depresin del f rm a co). El obje
tivo de un rgimen de dosificacin mltiple es lograr un
FARM ACOCINTICA
valor mnimo que se encuentre en el rango teraputico y
La farm acocin tica es el modelo matemtico de la concen un mximo que no est en el rango txico. La evaluacin
tracin del frmaco en la circulacin. Este proceso contri de esta funcin oscilante no se realiza inmediatamente
buye al establecimiento o la modificacin de un rgimen despus del inicio de un rgimen de dosificacin estable
de dosificacin. Se toman en cuenta todos los factores que cido. Se requieren alrededor de siete dosis antes de que se
determinan la concentracin de un frmaco en suero y su adquiera una oscilacin fija. En la figura 28-6 se demues
ndice de cambio. Muchos factores ya estudiados en este tra la base de esta cantidad (siete dosis).
mismo captulo se incluirn en este campo de estudio. En Despus de la primera dosis oral, ocurren la absorcin y
la figura 28-3 se muestra una grfica idealizada de la eli distribucin, seguidas slo por la eliminacin. Antes de que
m inacin despus de un bolo IV Se asume que no hay la concentracin del frmaco disminuya de manera impor
distribucin de este frmaco. Un medicamento que se dis tante, se administra la segunda dosis. El valor mximo de
tribuye fuera del espacio vascular producira una grfica la segunda dosis se agrega al que permanece de la primera
de eliminacin como la que se muestra en la figura 28-4. dosis. Debido a que la eliminacin es de primer orden, la
El ndice rpido de cambio que se observa inmediatamente concentracin elevada produce un mayor ndice de elimi
despus del bolo IV inicial es resultado de la distribucin y nacin. De la tercera a la sptima dosis programadas tienen
eliminacin. Slo es posible determinar el ndice de elimi el mismo efecto, lo que aumenta la concentracin en suero
nacin (k) despus de que se completa la distribucin. En y la tasa de eliminacin. Para el final de la sptima dosis,
la figura 28-5 aparece una grfica de concentracin en sue la cantidad de frmaco administrado en una sola dosis es
B
o
M
'CO
E
SSO
Cl
c
O
o
<0
tc*m
->
o
o
c
o
O
flj
o
E
w
ro
Q.
C
O
o
2
+*
c
<D
O
c
o
igual a la cantidad eliminada durante el perodo de dosifi de la dosis administrada por va oral. Esta regla general
cacin. Para este momento, se establece el estado estable y siempre se utiliza en el contexto clnico de la situacin. Un
se evalan las concentraciones mxima y mnima. frmaco empleado con frecuencia que es la excepcin a esta
regla es la digoxina. En los frmacos que se absorben de
manera lenta, tal vez se requieran varias horas antes de eva
RECOLECCIN DE LA M UESTRA
luar las concentraciones del frmaco. En todas las situacio
La programacin de la recoleccin de la muestra es el factor nes, se realizarn las determinaciones en suero slo despus
individual ms importante en el MFT. En trminos genera de lograr el estado fijo.
les, las concentraciones mnimas para la mayor parte de los El suero o plasma es la muestra de eleccin para la deter
frmacos se registran a la derecha antes de la prxima dosis; minacin de las concentraciones circulantes de la mayor
las concentraciones mximas se registran una hora despus parte de los frmacos. Se debe tener cuidado de utilizar el
Tiempo (f)
FIGURA 28-6. Cintica de estado fijo en un rgimen de dosificacin mltiple. El carcter t Indica el intervalo de dosificacin. Las dosis iguales
en este intervalo alcanzan estado fijo despus de seis o siete intervalos de dosificacin, c significa concentracin del frmaco.
CAPTULO 28 MONITOREO DE FRMACOS TERAPUTICOS 577
recipiente adecuado cuando se recolecten estas muestras. contractilidad cardaca (efecto inotrpico). Este efecto se
Algunos frmacos muestran tendencia a ser absorbidos en observa en el rango de la concentracin srica de 0.8 a 2 ng/
el gel de ciertos tubos de recoleccin separadores de sue mi. Las concentraciones de suero ms elevadas (3 ng/ml) dis
ro. Es necesario seguir las recomendaciones del vendedor minuyen el ndice de despolarizacin ventricular. Aunque
cuando este efecto sea posible. De lo contrario, tal vez se es posible utilizar este valor para el control de la taquicar
produzcan valores bajos falsos. El plasma heparinizado es dia ventricular, se realiza con poca frecuencia debido a los
adecuado en la mayor parte de los anlisis de frmacos. efectos txicos adversos que se vuelven evidentes a con
Los anticoagulantes unidos al calcio agregan varios anio centraciones sricas mayores de 2 ng/ml. La toxicidad de
nes y cationes que llegan a interferir con el anlisis o cau la digoxina afecta muchos rganos y tipos de clulas. Son
sar que un frmaco se distribuya de manera diferente entre habituales la nusea, el vmito y los trastornos visuales.
las clulas y el plasma. Como resultado, el plasma de cido Los efectos cardacos, como las contracciones ventricula-
etilendiaminotetraactico (EDTA), citrado y oxalatado no res prematuras (CVP) y la obstruccin del nodo auriculo-
suele ser una muestra aceptable. ventricular, tambin son frecuentes.
La absorcin de la digoxina administrada por va oral es
FRM ACO S CARDIOACTIVOS variable. Se ve influida por factores dietticos, movilidad
gastrointestinal y la formulacin del frmaco. En la circu
Muchos trastornos cardacos se tratan con frmacos. De lacin, alrededor de 25% est unida a protenas. La forma
stos, slo algunos requieren MFT .14 Los glucsidos cardia no enlazada (libre) de la digoxina en suero se asla dentro
cos y los antiarrtmicos son dos clases de frmacos en que de las clulas musculares. En equilibrio, la concentracin
la valoracin de la concentracin srica contribuye en las tisular es de 15 a 30 veces mayor que en plasma. La eli
decisiones con respecto a su rgimen de dosificacin . 15 minacin de la digoxina ocurre sobre todo por filtracin
renal de la forma libre en el plasma. El resto se metaboliza
Digoxina en diversos productos por el hgado. La vida media de la
digoxina plasmtica es de 38 horas en un adulto prome
La digoxina es un glucsido cardaco utilizado en el tra dio. El factor de mayor contribucin a la vida media es la
tamiento de insuficiencia cardaca congestiva .16 Funcio liberacin lenta de digoxina en tejido hacia la circulacin.
na por inhibicin de la membrana Na+-K+-ATPasa. Esto
Debido a la absorcin gastrointestinal variable de la
origina una disminucin del potasio intracelular, lo que
digoxina, el establecimiento de un rgimen de dosifica
da como resultado aumento del calcio intracelular en cin a menudo requiere la valoracin de las concentra
los miocitos cardacos. La elevacin de calcio m ejora la ciones sricas despus del inicio de la dosificacin para
ES T U D IO D E C A S O 28-1
1. Si estos resultados se obtuvieron de una muestra Osmolalidad 275 282 a 300 mOsm/kg
aleatoria, de qu manera el tiempo transcurrido Digoxina 2.5 0.9 a 2 ng/ml
desde la ltima dosis afecta la interpretacin de los
resultados de la digoxina?
asegurar que se logren concentraciones sricas efectivas Los cambios en la funcin renal tienen poco efecto en la
y no txicas .17Adems, es posible que los cambios en el lidocana plasmtica. El producto principal del metabo
ndice de filtracin glomerular ejerzan un efecto dramti lismo heptico de la lidocana es el monoetilglicinexidilo
co en la concentracin en suero. En pacientes con enfer (M EGX). Aunque esta sustancia tiene poca actividad tera
medad renal, es necesario realizar ajustes de dosificacin putica, su toxicidad se agrega al frmaco de origen. Al
frecuentes, en conjunto con las concentraciones sricas. evaluar posibles reacciones txicas, se debe tomar en cuen
Las acciones y toxicidades teraputicas de la digoxina son ta la suma de la lidocana y el MEGX. Es posible valorar la
afectadas por la concentracin de los electrlitos en suero. lidocaina y el M EGX mediante cromatografa o inmunoa
El potasio y magnesio sricos bajos potencian las acciones nlisis. Adems, muchos inmunoanlisis de lidocana tam
de la digoxina. En estas condiciones, quiz se requiera el bin miden el MEGX. Consulte la descripcin del mtodo
ajuste de las concentraciones sricas bajo el rango tera inserto en el empaque o el manual del operador.
putico para evitar toxicidad. El estado tiroideo influye,
tambin, en las acciones de la digoxina. Los pacientes Quinidina
hipertiroideos muestran resistencia a las acciones de la
digoxina; los pacientes hipotiroideos son ms sensibles. La quinidina es un frmaco que se produce de manera
La programacin de la evaluacin de los valores mximos natural. Se utiliza para tratar varias situaciones de arritmia
de digoxina es crucial. En un adulto promedio, las concen cardaca .19 Las dos formulaciones ms frecuentes son el
traciones sricas alcanzan su cifra mxima entre dos y tres sulfato de quinidina y el gluconato de quinidina. La admi
horas despus de la dosis oral. Sin embargo, la captacin nistracin oral es la forma de liberacin ms habitual. La
dentro del tejido constituye un proceso relativamente len absorcin gastrointestinal es completa y rpida para el
to. Como resultado, las concentraciones sricas mximas sulfato. Las concentraciones sricas mximas se alcanzan
no se correlacionan con las concentraciones tisulares. Se ha alrededor de dos horas despus de una dosis oral del sul
establecido que la concentracin srica ocho horas despus fato. El gluconato es una formulacin de liberacin lenta.
de una dosis administrada por va oral se correlaciona con La concentracin srica mxima se obtiene cuatro a cinco
la concentracin tisular, por lo que los valores mximos se horas despus de una dosis oral. Los efectos txicos adver
suelen evaluar en ese momento. Las cifras mximas obteni sos predominantes de la quinidina son nusea, vmito y
das antes de este perodo son engaosas y no son vlidas. molestia abdominal. Llega a observarse toxicidad cardio
El inmunoanlisis se utiliza para medir la concentracin vascular, como las CVP, a dos veces el lmite superior del
de la digoxina total en suero. Con la mayor parte de los rango teraputico. En la mayor parte de los casos, el moni-
anlisis comerciales, la reactividad cruzada con metabolitos toreo de la quinidina slo implica determinacin del valor
hepticos es mnima. Sin embargo, los recin nacidos, las mnimo para asegurar que se encuentra dentro del rango
mujeres embarazadas y los pacientes con uremia o enfer teraputico. La valoracin de la concentracin mxima se
medad heptica de etapa terminal producen una sustancia lleva a cabo slo cuando existen sntomas de toxicidad.
endgena que reacciona en forma cruzada con los anticuer Debido a su lento ndice de absorcin, los valores mnimos
pos usados para medir la digoxina srica .18En pacientes con de gluconato por lo general se registran una hora despus de
estas sustancias inmunorreactivas semejantes a la digoxina, la ltima dosis.
son frecuentes las concentraciones falsamente elevadas. La quinidina absorbida est unida en alrededor de 70%
a protenas sricas. La mayor parte se elimina por meta
Lidocana bolismo heptico. La induccin de este sistema, como por
barbitricos, aumenta el ndice de eliminacin. El dete
La lidocana se utiliza para corregir la arritmia ventricu rioro de este sistema, como se observa en la enfermedad
lar y prevenir la fibrilacin ventricular. Esto es importante heptica de etapa terminal, tal vez prolongue la vida media
sobre todo en pacientes con infarto al miocardio agudo. del frmaco. Es posible determinar la concentracin de
La lidocana no se administra por va oral debido a la eli quinidina plasmtica por cromatografa o inmunoanlisis.
minacin heptica casi completa del frmaco absorbido
(metabolismo de primer paso). Por lo general, la lidoca
Procainam ida
na se libera por infusin intravenosa continua despus
de una carga de dosis. Por tanto, las concentraciones en Al igual que la quinidina, la procainamida se utiliza para
plasma permanecen relativamente constantes durante la tratar arritmia cardaca. La administracin oral es la ms
administracin. Las razones primarias para el monitoreo frecuente. La absorcin gastrointestinal es rpida y comple
de la concentracin de lidocana plasmtica son asegurar ta. Las concentraciones plasmticas mximas ocurren en
que se encuentra en el rango teraputico de 1.5-4 pg/ml alrededor de una hora. La procainamida est unida en alre
y evitar toxicidad, que aparece justo por arriba del rango dedor de 20% con protenas plasmticas. Se elimina por una
teraputico. La lidocana plasmtica en el rango de 4 a 8 combinacin de filtracin renal y metabolismo heptico. La
pg/ml est relacionada con depresin del sistema nervio N-acetil procainamida (NAPA) es un metabolito heptico
so central. Las concentraciones plasmticas mayores de 8 del frmaco de origen, con actividad antiarrtmica similar
pg/ml se vinculan con ataques y disminuciones graves en a la procainamida. Para determinar el potencial antiarrt
la presin sangunea y en el ritmo cardaco. La lidocana mico total de este frmaco, hay que tomar en cuenta el
se elimina principalmente por metabolismo heptico. La medicamento de origen y este metabolito. La alteracin en
concentracin de lidocana plasmtica depende del ndi la funcin renal o heptica tal vez conduzca a aumento de la
ce de administracin y de la tasa de eliminacin heptica. concentracin srica del frmaco de origen y sus metabolitos.
CAPTULO 28 MONITOREO DE FRMACOS TERAPUTICOS 579
ES T U D IO D E C A S O 28-2
El aumento de la concentracin da como resultado depre Todos comparten un mecanismo comn de accin, pero
sin miocrdica y arritmia .20 Tanto la procainamida como su efectividad contra las diferentes cepas de bacterias es
su metabolito activo se miden por inmunoanlisis. variable. Adems, comparten nefrotoxicidad y ototoxici-
dad. Los efectos ototxicos implican rotura del coclear
Disopram ida del odo interno y de las membranas vestibulares, lo que
ocasiona dao auricular y en el equilibrio .23 Estos efectos
La disopiramida es otro frmaco empleado para tratar arrit son irreversibles. Tal vez se observen efectos acumulati
mias cardacas. Con frecuencia se le utiliza como sustituto vos con la exposicin repetida a concentraciones elevadas.
de la quinidina cuando los efectos adversos de sta son exce La nefrotoxicidad constituye, tambin, una preocupacin
sivos. Se administra ms a menudo como preparacin oral. importante. Los aminoglucsidos afectan la funcin de los
La absorcin gastrointestinal es completa y rpida. Se une a tbulos proximales del rin, lo que es posible que desen
varias protenas plasmticas. La unin es bastante variable cadene un desequilibrio electroltico y tal vez proteinuria.
entre individuos, y su concentracin depende de lo siguien Por lo general, estos efectos son reversibles. Sin embargo,
te: a medida que se elevan las concentraciones sricas, tam la exposicin prolongada a concentraciones elevadas pro
bin lo hace el porcentaje libre. Como resultado, es difcil duce necrosis de estas clulas e insuficiencia renal subsi
correlacionar la concentracin srica total con el beneficio guiente. Se consideran concentraciones txicas a cualquier
teraputico y la toxicidad. En la mayora de los pacientes, valor sobre el rango teraputico.
se observa que las concentraciones sricas totales en el ran Debido a que los aminoglucsidos no se absorben de
go de 3 a 5 pm/L son efectivas y no txicas. Sin embargo, manera adecuada del tracto gastrointestinal, la adminis
en la interpretacin de los resultados de la disopiramida se tracin se limita a la va IV o IM, por lo que estos frmacos
debe tomar en cuenta la perspectiva clnica. Las toxicidades no se utilizan en clnicas de pacientes externos. Los ami
primarias de la disopiramida dependen de la dosis. Tal vez noglucsidos se eliminan por filtracin renal. En pacien
aparezcan efectos anticolinrgicos, como boca seca y estre tes con afeccin de la funcin renal, se debe realizar los
imiento, a concentraciones sricas mayores de 4.5 pm/L. ajustes apropiados con base en las concentraciones en sue
Por lo general, los efectos cardacos, como la bradicardia y ro. La cromatografa y el inmunoanlisis son los mtodos
la obstruccin del nodo auriculoventricular, se presentan a primarios empleados para las determinaciones de amino
concentraciones sricas mayores de 10 pm/L. El mecanismo glucsidos.
primordial de eliminacin de disopiramida es por filtracin
renal y, en menor proporcin, por metabolismo heptico.
Vancom icina
En situaciones con ndice de filtracin glomerular bajo, la
vida media se prolonga y los valores en suero aumentan. La La vancomicina es un antibitico glucopptido que es
concentracin de disopiramida plasmtica se determinar efectivo contra cocos y bacilos grampositivos. Debido a
por cromatografa o inmunoensayo. su deficiente absorcin oral, la vancomicina se administra
por infusin IV A diferencia de otros frmacos, an no
se establece con firmeza una relacin clara entre la con
ANTIBITICOS21 centracin srica y los efectos adversos txicos. En efecto,
Am inoglucsidos muchos de los efectos txicos ocurren en el rango terapu
tico (5 a 10 pm/L). Las principales toxicidades de la van
Los aminoglucsidos son un grupo de antibiticos relacio comicina son sndrome del hombre rojo, nefrotoxicidad y
nados desde el punto de vista qumico que se utilizan para ototoxicidad. El sndrome del hombre rojo se caracteriza
el tratamiento de infecciones con bacterias gramnegativas por sonrojado eritmico de las extremidades. Los efectos
que son resistentes a antibiticos menos txicos. Existen renales y auditivos son similares a los de los aminogluc
muchos agentes individuales dentro de esta clasificacin. sidos. Al parecer los efectos nefrticos ocurren con mayor
Los encontrados con mayor frecuencia en clnica son la frecuencia a concentraciones mnimas que son mayores
gentamicina, la tobramicina, la amikacina y la kanamicina .22 de 10 pm/L. El efecto ototxico sobreviene ms a menudo
580 PARTE IV REAS DE ESPECIALIDAD DE LA QUMICA CLNICA
cuando las concentraciones sricas mximas sobrepasan inicio de la terapia, por lo general se requiere ajuste de la
los 40 itm/L. Debido a que la vancomicina tiene una fase dosis despus de completar el perodo de induccin. En la
de distribucin prolongada, en la mayor parte de los casos mayora de los individuos, esto sucede entre 10 y 15 das
slo se vigilan los valores mnimos para asegurar que la despus de la primera dosis.
concentracin del frmaco en el suero se encuentre dentro La prim idona es una proforma del fenobarbital. Des
del rango teraputico .24 La vancomicina se elimina sobre pus de la absorcin de una dosis oral, este frmaco se
todo por filtracin y excrecin renales. Se valora por mto convierte con rapidez a su forma activa, el fenobarbital. La
dos de inmunoanlisis y cromatogrficos. primidona se utiliza en lugar del fenobarbital cuando es
necesario establecer con rapidez la cintica de estado fijo.
La primidona se absorbe con rapidez y se convierte al fr
FRM ACO S ANTIEPILPTICOS
maco activo. Es necesario medir tanto la primidona como
La epilepsia, las convulsiones y los ataques son trastornos el fenobarbital para evaluar la cantidad potencial total de
neurolgicos frecuentes. Debido a que estos frmacos se este ltimo en la circulacin.
utilizan como profilcticos, a los rangos teraputicos se les
considera directrices a seguir. Las concentraciones efecti Fenitona
vas se determinan como el valor que funciona con efectos
adversos aceptables o sin ellos .25 La mayor parte de los fr La fenitona (Dilantin) se utiliza para tratar problemas de
macos antiepilpticos se evalan por inmunoanlisis o por ataques. Adems, se emplea como agente profilctico de
cromatografa. corto plazo en presencia de lesin cerebral para prevenir
la prdida de tejido funcional. La fenitona se administra
principalmente como preparacin oral. La absorcin gas
Fenobarbital
trointestinal es variable y, algunas veces, incompleta. La
El fenobarbital es un barbitrico que controla de mane fenitona circulante tiene un grado alto, pero variable, de
ra efectiva varios tipos de ataques. La absorcin del feno unin con protenas (87 a 97% ). Al igual que la mayor
barbital oral es lenta pero completa. En la mayora de los parte de los frmacos, la fraccin no enlazada (libre) es la
pacientes, la concentracin srica mxima se alcanza alre porcin con actividad biolgica de la concentracin sri
dedor de 10 h despus de una dosis oral. El fenobarbital ca total. Es posible que ocurra reduccin de la unin con
circulante est unido a 50%. Se elimina de manera pri protena con anemia, hipoalbuminemia y otros frmacos.
mordial por metabolismo heptico. Sin embargo, la filtra Se observa toxicidad cuando la concentracin srica total
cin renal tambin es importante. Con la funcin renal del frmaco se encuentra dentro del rango teraputico.
y heptica afectadas, el ndice de eliminacin disminuye. La principal toxicidad de la fenitona consiste en la pro
La vida media del fenobarbital srico es de 70 a 100 h. duccin de ataques. En pacientes que reciben tratamiento
Debido a su lenta absorcin y vida media larga, las con con fenitona, los ataques tal vez se originen por concen
centraciones en suero no cambian en forma importante traciones subteraputicas o txicas. Los efectos adversos
en un intervalo de dosificacin. Por tanto, a menudo slo adicionales de la fenitona incluyen hirsutismo, hiper-
se elevan los valores mnimos, a menos que se sospeche plasia gingival y deficiencia de vitamina D y de folato.
de toxicidad. Los efectos txicos adversos del fenobarbital La fenitona se elimina slo por metabolismo heptico. A
incluyen adormecimiento, fatiga, depresin y capacidad concentraciones teraputicas, esta va de eliminacin tal
mental reducida. vez se sature (cintica de orden 0). Por tanto, los cambios
La eliminacin del fenobarbital ocurre a travs del sis relativamente pequeos en la dosificacin o eliminacin
tema OFM heptico. Hay que destacar que tambin se tra tal vez produzcan efectos drsticos en la concentracin
ta de un potente inductor de este sistema. Despus del plasmtica.
ES T U D IO D E C A S O 28 3
En la mayora de los pacientes, las concentraciones La toxicidad por carbamacepina es diversa y variable.
sricas totales de 10 a 20 g/ml son efectivas. Sin embar Ciertos efectos ocurren en una forma dependiente de
go, en muchas situaciones, se debe individualizar el rango la dosis; otros no. Existen varios efectos idiosincrsicos
efectivo de la concentracin srica total para ajustarse a de la carbamacepina, que afectan a una porcin de la
la situacin clnica. El rango teraputico para la fenito- poblacin a concentraciones teraputicas, como salpulli
na srica libre es de 1 a 2 pg/ml. ste se correlaciona de dos, leucopenia, nusea, vrtigo y reacciones febriles. De
manera adecuada con las acciones farmacolgicas de este stos, la leucopenia es el ms grave. A menudo se realizan
frmaco. En pacientes con alteracin de la unin proteica recuentos de leucocitos durante las primeras dos sema
srica, la determinacin de la fraccin libre contribuye al nas de terapia para detectar este posible efecto txico.
ajuste de la dosificacin. Durante este perodo, tambin se lleva a cabo la prueba
La fosfen iton a es una proforma inyectable de fenito- de la funcin heptica. Con frecuencia se detecta disfun
na que se metaboliza con rapidez en suero, con liberacin cin heptica transitoria leve en este mismo intervalo. Los
del frmaco de origen .26 Se requieren alrededor de 75 min aumentos grandes y persistentes en los ndices hepticos
para que esta conversin tenga lugar. La mayor parte de los o la leucopenia importante suelen propiciar la interrup
inmunoanlisis para la fenitona no detectan esta proforma. cin del frmaco. El rango teraputico para la carbamace
De este modo, las concentraciones mximas slo se evalua pina es de 4 a 12 pg/ml.28 Las concentraciones plasmticas
rn despus de completar la conversin al frmaco activo. mayores que 15 pg/ml estn relacionadas con discrasias
hematolgicas y posible anemia aplsica.
cido valproico
El cido valproico se utiliza para el tratamiento del peque Etosuxim ida
o mal y ataques de ausencia .27 Se administra como pre La etosuximida se utiliza para el control del ataque de
paracin oral. La absorcin gastrointestinal es rpida y pequeo mal. Se administra como preparacin oral. El
completa. El cido valproico circulante se encuentra bas rango teraputico es de 40 a 100 pg/ml. Las toxicidades
tante unido a protenas (93% ). El porcentaje enlazado dis relacionadas con concentraciones plasmticas elevadas
minuye en presencia de insuficiencia renal, en enfermedad son raras, tolerables y autolimitantes. Se efecta M FT de la
heptica tarda y con otros frmacos que llegan a competir etosuximida para asegurar que las concentraciones sricas
por su sitio de unin. Se elimina por metabolismo hep se encuentren dentro del rango teraputico.
tico. El rango teraputico del cido valproico es relativa
mente amplio (50 a 120 pg/ml). La determinacin de la
FRM ACO S PSICOACTIVOS
concentracin srica se realiza sobre todo para asegurar
que no se presenten valores txicos (ms de 120 pg/ml). Litio
La nusea, el letargo y el aumento de peso son los efectos
adversos ms habituales. La pancreatitis, hiperamonemia El litio es un frmaco administrado por va oral emplea
y alucinaciones se relacionan con cifras sricas elevadas do para tratar depresin maniaca (trastorno bipolar). La
(ms que 200 pg/ml). En ocasiones ocurre disfuncin absorcin es completa y rpida. El litio es un metal catini-
heptica en algunos pacientes, incluso a concentraciones co que no se une a las protenas. La distribucin es uniforme
sricas teraputicas, por lo que se debe verificar con fre en toda el agua corporal. Se elimina de manera primordial
cuencia los indicadores hepticos durante los primeros por filtracin renal y est sujeta a la reabsorcin. Por lo
seis meses despus del comienzo de la terapia. Muchos general, la afeccin en la funcin renal ocasiona acumu
factores influyen en la fraccin no enlazada (libre) de ci lacin. No estn bien establecidas las correlaciones entre
do valproico srico total. Por tanto, la determinacin de la la concentracin srica y la respuesta teraputica. Sin
fraccin libre proporciona un ndice ms confiable de las embargo, las concentraciones sricas en el rango de 0.8
concentraciones teraputicas y txicas. a 1.2 mmol/L son efectivas en una proporcin grande de
la poblacin enferma. El propsito del M FT para el litio
Carbam acepina es evitar concentraciones sricas relacionadas con efectos
txicos .29 Las concentraciones sricas en el rango de 1.2 a
La carbamacepina es un tratamiento efectivo en varios 2 mmol/L llegan a causar apata, letargo, dificultades del
trastornos de ataques. Debido a sus importantes efectos lenguaje y debilidad muscular. Las concentraciones sri
txicos adversos, se utiliza con menor frecuencia, excep cas mayores de 2 mmol/L se relacionan con rigidez mus
to cuando los pacientes no responden a otros frmacos. cular, ataques, y posible coma. La determinacin del litio
Administrada por va oral, se absorbe con alto grado de srico suele realizarse por electrodo selectivo del ion. La
variabilidad. La carbamacepina circulante est unida con fotometra de emisin de flama y la absorcin atmica son,
protenas en un 70 a 80%. Se elimina principalmente por tambin, mtodos viables.
metabolismo heptico. Muchas formas de disfuncin
heptica ocasionan la acumulacin en suero. La carbama A ntidepresivos tricdicos
cepina es un inductor de su propio metabolismo. De este
modo, se deben analizar las concentraciones plasmticas Los antidepresivos tricclicos (ATC) son una clase de
frecuentes al comienzo de la terapia hasta que se complete frmacos usados para tratar depresin, insomnio, apata
el perodo de induccin. extrema y prdida de libido. Desde una perspectiva del
582 PARTE IV REAS DE ESPECIALIDAD DE LA QUMICA CLNICA
laboratorio clnico, la imipramina, la amitriptilina y la doxe- est unida a 50% con protenas en el plasma. Se elimina
pina son los ms relevantes .24 La desipramina y la nortrip- por una combinacin de filtracin renal y metabolismo
tilina son productos metablicos activos de la imipramina heptico. Los cambios pequeos en el contenido de pro
y amitriptilina, respectivamente, por lo que tambin se tena srica y el ndice de filtracin glomerular tienen poca
incluirn. Los ATC son frmacos administrados por va influencia en las concentraciones plasmticas. La principal
oral con un grado variable de absorcin. En muchos razn para el monitoreo de la teofilina srica es asegurar
pacientes, retardan el vaciado gstrico y la motilidad intes que las concentraciones no estn en el rango txico, que
tinal, lo que hace lento de manera importante su ndice de es de 10 a 20 pg/ml. Los efectos txicos se observan a con
absorcin. Como resultado, las concentraciones mximas centraciones sricas mayores de 20 pg/ml. Los sntomas de
en suero se alcanzan en el rango de 2 a 12 horas. toxicidad incluyen nusea, vmito y diarrea. Las concen
Los ATC se encuentran bastante ligados a protenas traciones sricas mayores que 30 pg/ml estn relacionadas
(85 a 95% ). En la mayor parte de los ATC, los efectos tera con arritmia cardaca, ataques y un pronstico deficiente.
puticos no se observan en las primeras dos a cuatro semanas
despus del comienzo de la terapia. Las correlaciones entre FRM ACO S INM UNOSUPRESIVOS
la concentracin en suero y los efectos teraputicos de la
mayor parte de los ATC son de moderadas a dbiles. Se La medicina de trasplante es una disciplina de surgimiento
eliminan por metabolismo heptico. Muchos de los pro rpido dentro de la medicina clnica. El laboratorio clnico
ductos metablicos formados tienen acciones teraputi desempea muchos papeles importantes que determinan
cas. El ndice del metabolismo de esos agentes es variable el xito de cualquier programa de trasplante .31 Entre estas
y se ve influido por una amplia gama de factores. Como responsabilidades, el monitoreo de los frmacos inmu-
resultado, la vida media de los ATC vara de manera impor nosupresivos usados para prevenir el rechazo constituye
tante entre los pacientes. Adems, la administracin una preocupacin clave. En la mayor de estos frmacos se
secundaria de otros frmacos que se eliminan por metabo requiere el establecimiento de regmenes de dosificacin
lismo heptico influye en el ndice de eliminacin. La individuales para optimizar los resultados teraputicos y
toxicidad de los ATC depende de la dosis. A concentracio reducir al mximo la toxicidad .32
nes sricas de alrededor de dos veces el lmite superior del
rango teraputico, son efectos adversos frecuentes de Ciclosporina
adormecimiento, estreimiento, visin borrosa y prdida
La ciclosporina es un polipptido cclico que tiene activi
de la memoria. Las concentraciones ms elevadas llegan a
dad inmunosupresora potente. Su principal uso clnico es
causar ataque, arritmia cardaca e inconsciencia.
la supresin del rechazo receptor contra injerto de rganos
Debido a la elevada variabilidad de la vida media y la
heterotpicos trasplantados. Se administra como una pre
absorcin, no se evaluarn las concentraciones plasmticas
paracin oral. La absorcin de la ciclosporina se encuen
de los ATC hasta que se logre un estado jo. En ese momen
tra en el rango 5 a 50%. Debido a su elevada variabilidad,
to, se determina la eficacia teraputica a partir de la evalua
la relacin entre dosis oral y concentracin sangunea es
cin clnica del paciente, en tanto la toxicidad potencial se
escasa, por lo que el M FT constituye una parte importante
establece por la concentracin srica. Muchos de los inmu
del establecimiento de un rgimen de dosificacin inicial.
noanlisis para los ATC utilizan anticuerpos policlonales,
La ciclosporina circulante se asla en las clulas, incluyen
que presentan reaccin cruzada entre los diferentes ATC y
do los eritrocitos. El contenido de eritrocitos depende en
sus metabolitos. En este sistema analtico, los resultados se
gran medida de la temperatura; por tanto, la evaluacin de
informan como tricclicos totales. En otros inmunoanli
la concentracin plasmtica requiere control riguroso de la
sis se emplea un paso de extraccin para separar los frma
temperatura de la muestra. Para evitar esta variable preana-
cos de origen de los metabolitos. La interpretacin de estos
ltica, la sangre entera es la muestra de eleccin. Se han esta
resultados despus de la extraccin requiere una compren
blecido correlaciones entre las concentraciones en sangre
sin a fondo del anlisis. Los mtodos cromatogrficos pro
entera y los efectos teraputicos y txicos. La ciclosporina es
porcionan evaluacin simultnea de los frmacos de origen
eliminada por metabolismo heptico a productos inactivos.
y de los metabolitos, lo que proporciona una base para la
Los requisitos de inmunosupresin difieren de acuer
interpretacin inequvoca de los resultados.30
do con el rgano trasplantado. Los trasplantes cardacos,
hepticos y pancreticos cuentan con los requerimientos
BRONCODILATADORES ms elevados (300 ng/ml). Las concentraciones de sangre
entera en el rango de 350 a 4 0 0 ng/ml se relacionan con
Teofilina
efectos txicos. Los efectos txicos de la ciclosporina son
La teofilina se utiliza en el tratamiento de asma y otras principalmente disfuncin tubular renal y glomerular, lo
enfermedades pulmonares obstructivas coronarias. Es efec que ocasiona hipertensin. Elay varios inmunoanlisis
tiva en situaciones agudas y de manera profilctica. En ata disponibles para la determinacin de la concentracin de
ques de asma agudos, la terapia con teofilina por lo general ciclosporina en la sangre entera. Muchas reaccionan en
se inicia por va intravenosa y despus se cambia a admi forma cruzada con metabolitos inactivos. Los mtodos
nistracin oral. La teofilina oral se absorbe por completo, cromatogrficos estn disponibles; stos proporcionan la
pero a un ndice variable, que depende de la formulacin separacin y cuantificacin del frmaco de origen a partir
del frmaco y los factores dietticos. La teofilina absorbida de los metabolitos.
CAPTULO 28 MONITOREO DE FRMACOS TERAPUTICOS 583
P R E G U N T A S DE R E P A S O
El frmaco X tiene una vida media (T ) de dos das. La 7. De las siguientes afirmaciones con respecto al litio,
concentracin a medioda es de 10 pg/ml. Cul sera cul es/son VERDADERA/S?
la concentracin esperada del frmaco X al medio da a) El litio es un elemento.
de maana? b) El litio se utiliza como frmaco para tratar depre
a) 7.5 pg/ml. sin y mana.
b) 7 pg/ml. c) A la concentracin de litio en suero se le evala
c) 5 pg/ml. con mayor frecuencia por el electrodo especfico
d) 3.5 pg/ml. del ion.
d) Todas las anteriores son verdaderas.
El cido saliclico es un componente frecuente de
e) Solo a y c son verdaderas.
muchos frmacos que se venden sin receta. En un
paciente que sufre de aclorhidria gstrica, cul sera 8. Cul es el propsito de la determinacin de las con
la concentracin en suero prevista de este frmaco centraciones en suero del frmacos antineoplsico
despus de una dosis estndar? metotrexato?
a) Ms grande que la esperada. a) Asegurar que las concentraciones sricas se
b ) Menor que la esperada. encuentren en el rango teraputico.
c) Ningn cambio. b) Asegurar que las concentraciones sricas no se
encuentren en el rango txico.
A cul de los siguientes frmacos se le clasificara de
c) Determinar la cantidad de leucovorina necesaria
manera adecuada como antiepilptico?
para detener la accin del metotrexato.
a) Digoxina.
d) Todas las anteriores.
b) Disopiramida.
e) Slo a y c.
c) Cloranfenicol.
d) Fenitona. 9. Soy un frmaco inmunosupresivo usado para con
e) Tacrlimo. trolar el rechazo receptor contra injerto de rganos
trasplantados. La toxicidad renal es m i problema prin
De los siguientes, cul sera el momento ms apro cipal. Por lo general, soy analizado a travs de tcni
piado para la evaluacin de una concentracin m xi
cas cromatogrficas con sangre entera como muestra.
ma de digoxina despus de la administracin oral?
Quin soy?
a) Inmediatamente antes de la prxima dosis.
a ) Ciclosporina.
b) Inmediatamente despus de una dosis.
b) Carbamacepina.
c) Ocho horas despus de una dosis.
c) Tacrlimo.
d) Tres das despus de una dosis.
d) Cualquiera de las anteriores.
De las siguientes afirmaciones con respecto a la lido- e) a o c.
cana, cules son VERDADERAS?
10. Un paciente, que recibi gentamicina en las dos
a) La lidocana slo se administra como preparacin
ltimas semanas con buenos resultados, desarroll
oral. de manera repentina una afeccin renal en la que el
b) El fenobarbital es uno de los productos del meta
ndice de filtracin glomerular desciende de manera
bolismo de la lidocana. importante. Cul sera el ajuste esperado en la dosi
c) La toxicidad de la lidocana est relacionada con
ficacin en respuesta a esto?
la concentracin del frmaco de origen y uno de
a) Aumentar la dosificacin.
sus metabolitos (M EGX).
b) Aumentar el intervalo entre las dosificaciones.
d) Todas las anteriores son verdaderas.
c) Coadministrar fenobarbital para estimular el
e) Slo a y c son verdaderas.
metabolismo heptico.
De las siguientes afirmaciones con respecto a la pro- d) No se requiere ajuste de la dosificacin.
cainamida, cul es/son VERDADERA/S? e) Interrumpir el frmaco.
a) La procainamida es un antibitico.
11. El salicilato y la bilirrubina compiten por el mismo
b) La N-acetilprocainamida es un producto activo
sitio de unin en la albmina srica. Qu efecto ten
del metabolismo de la procainamida.
dra la ictericia preheptica sobre el salicilato?
c) La toxicidad primaria de la procainamida es la
a) Aumento en el ndice de eliminacin del salicilato.
supresin de la mdula sea.
b) Disminucin en la respuesta farmacolgica al
d) Todas las anteriores son verdaderas.
salicilato.
e) Solo a y c son verdaderas.
c) Aumento en la concentracin libre del salicilato.
d) Todas las anteriores.
e) Slo a y c.
CAPITULO 28 MONITOREO DE FRMACOS TERAPUTICOS 585
12. Un frmaco con un pequeo volumen de distribucin: 14. En su institucin se introdujo un nuevo frmaco
a) Se confina a la vasculatura. administrado por va oral. Resulta poco claro si se
b ) Se difunde fuera de la vasculatura hacia el espacio requiere M FT para este frmaco. Qu factores debe
intersticial. tomar en cuenta al plantear esta pregunta?
c) Se difunde fuera de la vasculatura hacia el espacio a ) Consecuencias de una concentracin subterapu-
intracelular. tica en la circulacin.
d) Se divide de manera selectiva en el compartimien b) Gravedad de los efectos txicos adversos.
to graso. c) Previsin de las concentraciones sricas despus
e) Se elimina con rapidez por exhalacin. de una dosis oral estndar.
d) Proximidad del rango txico al rango teraputico.
13. Se inyectaron 20 mg de un frmaco por va intraveno
e) Todas las anteriores.
sa. Una hora despus de la inyeccin, se extrajo san
gre y se analiz para el frmaco. La concentracin en
esta muestra fue de 0.4 mg/dl. Cul es el volumen de
distribucin de este frmaco?
a) 0.8 L.
b) 8 L.
c) 20 L.
d) 50 L.
e) Imposible de determinar con los datos proporcio
nados.
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586 PARTE IV REAS DE ESPECIALIDAD DE LA QUIMICA CLNICA
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CAP TULO
Toxico logia
David P. Thorne
29
C O N T E N I D O DE L C A P T U L O
O B J E T I V O S
Al completar este captulo, el laboratorista clnico Explicar la diferencia entre las pruebas cuantitati
podr: vas y cualitativas en toxicologa.
Definir el trmino toxicologa. Valorar de manera crtica los datos clnicos de
Enumerar los principales txicos. laboratorio en casos de envenenamiento y propor
Definir los mecanismos patolgicos de los txicos cionar recomendaciones de pruebas adicionales.
descritos en este captulo. Definir el papel del laboratorio clnico en la eva
Indicar los mtodos de laboratorio usados para luacin de la exposicin a venenos.
evaluar la toxicidad.
T R M I N O S C L A V E
587
588 PARTE IV REAS DE ESPECIALIDAD DE LA QUMICA CLNICA
La toxicologa es el estudio de los venenos. El mbito de este ras celulares. Las sustancias hidrofbicas tienen capacidad
campo es muy amplio. Existen cuatro disciplinas dentro de para difundirse a travs de las membranas celulares y, por
la toxicologa: mecanicista, descriptiva, forense y clnica. La tanto, se absorben en cualquier parte a lo largo del tracto
toxicologa mecanicista aclara los efectos celulares y bio gastrointestinal. Las sustancias ionizadas no se difunden de
qumicos de las toxinas. Estos estudios proporcionan una manera pasiva a travs de las membranas. Es posible que los
base para el diseo de la terapia racional y el desarrollo de cidos dbiles se protonicen en el cido gstrico. El resulta
pruebas para valorar el grado de exposicin de individuos do es una especie no ionizada, que tal vez se absorba en el
envenenados. La toxicologa descriptiva utiliza los resulta estmago. Del mismo modo, las bases dbiles favorecen la
dos de experimentos con animales para predecir cul nivel absorcin en el intestino, donde el pH es en su mayor parte
de exposicin causar dao en seres humanos. A este pro neutral o ligeramente alcalino. Otros factores influyen en la
ceso se le conoce como valoracin del riesgo. Los toxiclo- absorbancia de las toxinas a partir del tracto gastrointestinal,
gos reguladores son responsables de la interpretacin de los como el ndice de disolucin, la motilidad gastrointestinal, la
datos a partir de estudios mecanicistas y descriptivos para resistencia a la degradacin en el tracto intestinal y la inte
establecer estndares que definen el grado de exposicin que raccin con otras sustancias. Las toxinas que no se absorben
no plantear un riesgo para la salud o la seguridad pbli en el tracto gastrointestinal no producen efectos sistmicos,
cas. Por lo general, estos toxiclogos trabajan para agencias pero quiz originen efectos locales, como diarrea, sangrado
gubernamentales o junto con ellas. La toxicologa forense o absorcin deficiente de nutrientes, lo que conduce a efec
se interesa sobre todo por las consecuencias mdicolega- tos sistmicos secundarios a la exposicin a la toxina.
les de la exposicin a la toxina. Un aspecto primordial de
esta rea es el establecimiento y la validacin del desempe RELACIN DOSIS-RESPUESTA
o analtico de los mtodos usados para generar evidencia
en situaciones legales, que incluyen la causa de muerte. La Un veneno se define como cualquier sustancia que causa un
toxicologa clnica es el estudio de las interrelaciones entre efecto daino debido a la exposicin. Aunque esta defini
la exposicin a la toxina y los estados de enfermedad. Esta cin bsica es til, se deben tomar en cuenta otros factores.
rea pone nfasis no slo en la comprobacin del diagnsti Entre stos, la dosis es un aspecto clave. En la toxicologa,
co, sino tambin en la intervencin teraputica. el concepto de que cualquier sustancia tiene potencial para
Dentro del esquema organizacional de un laboratorio causar dao si se administra a la dosis correcta (incluso
mdico tpico, a la toxicologa por lo general se le considera agua) constituye un tema central. Existe la necesidad de
parte de la qumica, sobre todo debido a que los mtodos usa establecer un ndice de la toxicidad relativa de las sustan
dos para evaluar las toxinas desde el punto de vista cualitati cias que permita la valoracin de su potencial para cau
vo y cuantitativo se adaptan de mejor manera a esta rea. Sin sar efectos patolgicos. Varios sistemas estn disponibles.
embargo, el diagnstico y control apropiados de las vctimas La mayor parte correlaciona la dosis de una toxina que
de envenenamiento, en muchos casos, requieren un mtodo ocasionar una respuesta daina. Un sistema de este tipo
integrado de todas las secciones del laboratorio clnico .1 correlaciona un solo rango de dosis oral aguda con la pro
babilidad de un resultado letal en un hombre promedio de
70 kg (cuadro 29-1). ste es un sistema til para compa
EXPOSICIN A TOXINAS
rar las toxicidades relativas de las sustancias. La respuesta
La exposicin a los agentes txicos ocurre por varias razones. esperada en este sistema es la muerte, lo que es vlido. Sin
Desde una perspectiva clnica, cerca de 50% de los casos de embargo, la mayor parte de las toxinas expresan efectos
envenenamiento obedece a intentos de suicidio. La exposi patolgicos distintos a la muerte, a grados inferiores de
cin accidental explica alrededor de 30% de los casos. El res exposicin. Por tanto, se deben desarrollar otros ndices.
to se debe a homicidio o exposicin laboral. Entre todos, el Es posible lograr una caracterizacin ms profunda al
suicidio tiene el ndice de mortalidad ms elevado. La exposi evaluar los datos de un histograma de frecuencia acumulada
cin accidental ocurre a menudo en nios. Sin embargo, con
relativa frecuencia se presenta sobredosis accidental de fr CUADRO 29-1. SISTEM A DE
macos teraputicos o ilcitos en adultos. La exposicin labo CLASIFICACIN DE TOXICIDAD
ral ocurre sobre todo en ambientes industriales o agrcolas.
DOSIS O RA L LETAL EN
CLASIFICACIN DE TO XICIDAD UN ADULTO PRO M EDIO
VAS DE EXPOSICIN Supertxica <5 mg/kg
Las toxinas ingresan al cuerpo por varias vas. La ingestin, Extremadamente txica 5 a 50 mg/kg
inhalacin y absorcin transdrmica son las ms frecuentes.
Muy txica 50 a 500 mg/kg
De stas, la ingestin es la que se observa ms a menudo
en el mbito clnico. Para que la mayor parte de las toxinas Moderadam ente txica 0.5 a 5 g/kg
ejerzan un efecto sistmico, es necesario que se absorban en Ligeramente txica 5-15 g/kg
la circulacin. La absorcin de las toxinas del tracto gastro
intestinal ocurre por varios mecanismos. Algunos son rea Prcticamente no txica >15 g/kg
lizados por procesos destinados a los nutrientes dietticos. A d ap tado de Klaassen CD, Principies o f toxicology, en Klaassen CD,
Sin embargo, la mayor parte se absorbe por difusin pasiva. A m d ur M O, Doull J, eds., Toxicology: The Basic Science of Poisons, 3a.
Este proceso requiere que la sustancia atraviese las barre ed., Nueva York: M acm illan, 1986:13.
CAPITULO 29 TOXICOLOGA 589
A diferencia de los efectos generales en el SNC, las toxi la progresin a cirrosis es habitual. La cirrosis tal vez se
cidades especficas de cada tipo de alcohol suelen estar caracterice como fibrosis irreversible que conduce a prdida
mediadas por biotransformacin de los alcoholes a pro de la masa heptica funcional. El progreso a travs de esta
ductos txicos. Existen varios mecanismos por los que es secuencia est relacionado con cambios en muchas pruebas
posible metabolizar los alcoholes alifticos de cadena cor de laboratorio relacionadas con la funcin heptica.
ta. De stos, la conversin heptica a un aldehido, por la Varios indicadores de laboratorio del consumo excesi
alcohol deshidrogenasa (ADH), y la conversin adicional vo de etanol tienen suficiente sensibilidad y especificidad
a un cido, por la aldehido deshidrogenasa (ALDH), son diagnsticas para identificar el consumo excesivo de eta
los ms importantes. nol como la causa de un estado de enfermedad .5 La mayor
parte se vincula con la progresin de la enfermedad hep
Alcohol ~'nH> Aldehido APH> cido (Ec. 29-1) tica inducida por el etanol. En el cuadro 29-2 se enume
ran los indicadores frecuentes de laboratorio del consumo
La exposicin a etanol es frecuente .3 El consumo exce
peligroso prolongado.
sivo de etanol, con sus consecuencias relacionadas, cons
Se han propuesto varios mecanismos para mediar los
tituye una causa principal de los problemas econmicos,
efectos patolgicos del consumo de etanol a largo plazo. De
sociales y mdicos en todo el mundo. Se calcula que el
stos, al parecer la formacin de aducto con acetaldehdo
impacto econmico sobrepasa los 100000 millones de
juega un papel clave. El metabolismo heptico del etanol
dlares por ao en trminos de sueldos y productividad
representa una reaccin enzimtica de dos pasos. El produc
perdidos. Muchos problemas sociales y familiares se vin
to final es cido actico. El acetaldehdo es un reactivo inter
culan con el consumo excesivo de etanol. La carga al sis
medio en esta cadena. La mayor parte del etanol se convierte
tema de cuidado de la salud es significativa. A menudo los
en cido actico en este proceso; sin embargo, una porcin
trastornos relacionados con el etanol constituyen una de
importante del intermediario se libera en el estado libre.
las 10 causas principales de ingresos hospitalarios. Alrededor
de 20% de todas las admisiones hospitalarias se relacionan de Etanol * Acetaldehdo * Acetato (Ec. 29-2)
cierto modo con problemas relacionados con el alcohol.
En Estados Unidos, se estima que 80 000 habitantes mueren Aducios de acetaldehdo
cada ao, sea directa o indirectamente, como resultado del
El acetaldehdo extracelular constituye una especie
abuso en el consumo de alcohol. Esto se correlaciona con
transitoria como resultado de la formacin rpida de aduc
un aumento de alrededor de cinco veces en la mortalidad
to con grupos amino de protenas. Est demostrado que la
prematura. Adems, es posible que el consumo de etanol
formacin de aductos de acetaldehdo cambia la estruc
durante el embarazo conduzca a sndrome de alcoholismo
tura y funcin de varias protenas. Muchos de los efectos
fetal o a efectos del alcoholismo fetal, ambos relacionados
patolgicos del etanol se correlacionan con la formacin
con retardo en el desarrollo motor y mental en nios.
de estos aductos.
Se han establecido correlaciones entre concentraciones
de alcohol en sangre, y los signos y sntomas clnicos de
intoxicacin aguda. Una concentracin de alcohol sangu CUADRO 29-2. INDICADORES FRECUENTES DE
neo en el rango de 80 a 100 mg/dl es el lmite legal para ope ABUSO DE ETANOL
rar un vehculo automotor en la mayor parte de los estados
de la Unin Americana. Esto se relaciona con disminucin PRUEBA COM ENTARIOS
del juicio y del desempeo motor. La determinacin de la GGT Se observan aumentos antes del comienzo
concentracin de etanol sanguneo por el laboratorio en de las consecuencias patolgicas
casos de manejo en estado de ebriedad requiere una cade
Los incrementos en la actividad srica se
na apropiada de custodia, documentacin del control de
presentan en muchos trastornos no
calidad y registros en los que se compruebe competencia .4
relacionados con el etanol
Alrededor de la mitad de los 40 000 a 50 000 decesos anua
les en Estados Unidos relacionados con el uso del autom AST Los incrementos en la actividad srica
vil implican el consumo de alcohol como factor. ocurren en muchos trastornos no
Adems de los efectos a corto plazo del etanol, la mayor relacionados con el etanol
parte de las consecuencias fisiopatolgicas del abuso de eta ndice Un ndice mayor de 2.0 es bastante
nol estn relacionadas con consumo crnico por un perodo AST/ALT especfico para enfermedad heptica
largo. En un adulto promedio, esto se correlaciona con el relacionada con etanol
consumo de alrededor de 50 g de etanol por da durante
casi 10 aos. El consumo a este grado se relaciona con la HDL Un HDL srico elevado es especfico
afeccin en la funcin de varios rganos, tejidos y tipos de para consumo de etanol
clulas. Sin embargo, el hgado es el rgano ms sensible. La MCV A menudo se observa incremento en
secuencia patolgica comienza con la acumulacin de lpi MCV de eritrocitos con el consumo
dos en los hepatocitos. Con el consumo continuo, es posible excesivo de alcohol
que esto progrese a hepatitis alcohlica. Alrededor de 20%
Los incrementos no se relacionan con
de los individuos con ingesta elevada a largo plazo desarro deficiencia de folato o vitamina B12
lla esta forma de hepatitis txica. En aquellos que lo hacen,
CAPTULO 29 TOXICOLOGA 591
ES T U D IO D E C A S O 29-1
A un paciente con diagnstico provisional de depresin posterior revel GGT srico tres veces mayor al lmite
se le envi a una revisin rutinaria de laboratorio. El superior normal. No se detect etanol en el suero. Las
recuento completo de clulas de la sangre fue normal, pruebas de valoracin para formas infecciosas de hepa
excepto por un volumen celular medio (MCV) de eri titis fueron negativas.
trocitos elevado. Los resultados del urinlisis fueron
irrelevantes. La prueba de qumica srica mostr lige Preguntas
ro aumento de las concentraciones de aspartato amino
transferasa (AST), bilirrubina total y lipoprotena de 1. Los resultados anteriores son consistentes con un
alta densidad (HDL). El resto de los resultados qumi paciente que est consumiendo cantidades riesgosas
cos, incluyendo glucosa, urea, creatinina, colesterol, de etanol?
pH, P C 0 2 alanina amino transferasa (ALT), sodio y
2. Se requieren pruebas adicionales para considerar el
potasio, estuvieron dentro del rango de referencia nor abuso de etanol o descartarlo? Si es el caso, qu
mal. El mdico sospech abuso de etanol; sin embar pruebas recomendara?
go, el paciente afirm no ser consumidor. Una prueba
El m etanol es un disolvente frecuente. En ocasiones, se de manera uniforme en el agua corporal total, el suero,
ingiere de manera accidental como componente de muchos que cuenta con un mayor contenido de agua que la san
productos comerciales o como contaminante de licores case gre entera, tiene una concentracin ms elevada por unidad
ros. En principio el metanol se metaboliza por la ADH de volumen. En la mayor parte de los estados de la Unin
heptica a formaldehdo intermediario. El formaldehdo Americana se han estandarizado los tipos de muestras acep
se convierte con rapidez a cido frmico por la ALDH tables admisibles como evidencia.
heptica. La formacin del cido frmico causa acidosis Cuando se obtiene una muestra para la determina
grave, que en ocasiones produce la muerte. Adems, el cin de etanol, es necesario limpiar el sitio de puncin
cido frmico es responsable de una neuropata ptica que en la vena con un desinfectante libre de alcohol. Debido
quiz conduzca a ceguera. a la naturaleza voltil de los alcoholes alifticos de cade
El isopropanol, tambin conocido como alcohol frota- na corta, deben mantenerse las muestras tapadas en todo
ble, est disponible de manera extensa. Se metaboliza por momento para evitar la evaporacin. Es posible refrigerar
la ADH heptica a acetona, que es su principal produc o almacenar a temperatura ambiente las muestras selladas
to metablico final. Ambos, tanto el isopropanol como la durante hasta 14 das sin prdida de etanol. Las muestras
acetona, tienen efectos depresores en SNC similares al eta sin esterilizar o aquellas destinadas al almacenamiento por
nol. Sin embargo, la acetona tiene una vida media larga. un perodo prolongado se conservarn con fluoruro de
La intoxicacin con isopropanol, por tanto, tal vez cause sodio para evitar aumentos en el volumen de etanol que se
sntomas graves de fase aguda semejantes al etanol, que originan por contaminacin por fermentacin bacteriana.
llegan a mantenerse por un perodo prolongado. Hay varios mtodos analticos disponibles para la deter
El etilenglicol (1 ,2-etanediol) es un componente habitual minacin de etanol en suero. Entre stos, los mtodos
de lquidos hidrulicos y anticongelantes. La ingestin por enzimticos, de cromatografa de gases y osmomtreos
nios es relativamente frecuente debido a su sabor dulce. son los ms utilizados. Cuando la osmolaridad se mide por
Los efectos inmediatos de la ingestin de etilenglicol son disminucin del punto de congelacin, los incrementos en
similares a los del etanol. Sin embargo, el metabolismo por la osmolaridad srica se correlacionan con los aumentos
la ADH y ALDH hepticas origina la formacin de varias en la concentracin del etanol srico. El grado de eleva
especies txicas, incluyendo cido oxlico y gluclico, que cin de la osmolaridad debido al etanol se expresa como
producen acidosis metablica grave. Esto se complica por la diferencia entre la osmolaridad medida y calculada. A
la formacin y deposicin rpidas de cristales de oxalato esta diferencia se le denomina intervalo osm olar. La osmo
de calcio en los tbulos renales. Con el consumo de con laridad srica se incrementa alrededor de 10 mosm/kg por
centraciones elevadas, la formacin de cristales de oxalato cada aumento de 60 mg/dl en el etanol srico.
de calcio quiz ocasione dao tubular renal.
Intervalo osmolar = osmolaridad medida
- osmolaridad calculada (Ec. 29-3)
Determinacin de alcoholes
Desde una perspectiva medicolegal, la determinacin de la Esta relacin no es especfica para el etanol. Los aumen
concentracin de etanol sanguneo debe ser certera y pre tos en el intervalo osmolar ocurren, tambin, con ciertos
cisa .6 El suero, el plasma y la sangre entera son muestras desequilibrios metablicos. Por tanto, el uso del intervalo
aceptables. Se han establecido correlaciones entre la con osmolar para la determinacin de la concentracin de eta
centracin de etanol en esas muestras y el deterioro de la nol srico o sanguneo carece de especificidad analtica.
funcin psicomotora. Debido a que el etanol se distribuye Sin embargo, se trata de una prueba de valoracin til.
592 PARTE IV REAS DE ESPECIALIDAD DE LA QUMICA CLNICA
dos anlisis cuantitativos primarios para la carboxihemo- un producto no txico eliminado con rapidez por filtracin
globina: espectrofotometra diferencial y cromatografa de renal. La toxicidad del cianuro est relacionada con exposi
gases. El nico tratamiento para el envenenamiento por cin aguda a concentraciones suficientes para sobrepasar el
monxido de carbono es la terapia con 100% de oxgeno. ndice de eliminacin por este proceso enzimtico.
En casos graves, es posible utilizar oxgeno hiperbrico. En la evaluacin de la exposicin a cianuro se requiere
La cromatografa de gases es certera y precisa, y constituye un tiempo de respuesta rpida. Existen varios mtodos dis
el mtodo de referencia para la determinacin de la carboxi- ponibles. Los mtodos de electrodo especfico del ion y el
hemoglobina. El monxido de carbono se libera a partir de anlisis fotomtrico que siguen a la separacin por micro-
la hemoglobina despus del tratamiento con ferrocianu- difusin de dos receptculos son los ms frecuentes. La
ro de potasio. Despus de la separacin analtica, el monxido exposicin crnica a concentraciones bajas se evala por
de carbono se detecta por cambios en la conductividad tr determinacin de la concentracin del tiocianato urinario.
mica. Los mtodos espectrofotomtricos funcionan con base
en el principio de que formas diferentes de hemoglobina se M etales
presentan con distintas curvas de absorbancia espectral. Al
medir la absorbancia de cuatro a seis diferentes longitudes Arsnico
de onda, es posible determinar la concentracin de las dife El arsnico se presenta ligado a muchos diferentes com
rentes especies de hemoglobina (incluyendo la carboxi- puestos orgnicos e inorgnicos o como componente pri
hemoglobina) por clculo. ste es el mtodo ms empleado mario de los mismos. Existe en sustancias tanto naturales
y conforma la base para varios sistemas automatizados. como sintticas, por lo que la exposicin a arsnico ocurre
en varias situaciones. La exposicin ambiental a travs del
aire y del agua es frecuente en muchas reas industria
A gen tes custicos
les .11 La exposicin laboral sucede en la agricultura y en
Los agentes custicos se encuentran en muchos productos industrias de fundicin. Adems, es un agente habitual de
caseros y entornos laborales. Aunque cualquier exposi homicidio y suicidio.
cin a un cido fuerte o sustancia alcalina est relacionada La absorcin del arsnico depende de la forma del com
con lesin, la aspiracin e ingestin representan el mayor puesto. Los compuestos orgnicos que contienen arsnico
peligro. Por lo general, la aspiracin est relacionada con se absorben con rapidez por difusin pasiva. Otras for
edema pulmonar y choque, lo que progresa con rapidez a mas son absorbidas con mayor lentitud. La eliminacin
la muerte. La ingestin produce lesiones en el esfago y del arsnico es, de manera primordial, por filtracin renal
tracto gastrointestinal, que tal vez produzcan perforacio del estado libre ionizado. Sus efectos txicos se expresan
nes. Esto ocasiona hematemesis, dolor abdominal y posi a travs de la unin de alta afinidad con los grupos tiol
ble choque. El ataque de acidosis metablica o alcalosis de las protenas. Por tanto, la porcin disponible para la
ocurre con rapidez despus de la ingestin. Por lo general, filtracin en el suero es baja. Esto ocasiona una vida media
la terapia correctiva para la ingestin es por dilucin. larga en el cuerpo. El contenido corporal total de arsnico
llega a ser acumulativo con la exposicin crnica.
Cianuro El arsnico unido a protenas a menudo produce un
cambio en la estructura y la funcin. Debido a que muchas
Al cianuro se le clasifica como una sustancia supertxica 9 protenas tienen capacidad de unin con el arsnico, los
que existe como gas o slido o en solucin. La exposicin sntomas txicos del envenenamiento con arsnico no son
ocurre, tambin, por inhalacin, ingestin o absorcin trans- especficos. Muchos sistemas celulares y orgnicos se ven
drmica. El cianuro se utiliza en muchos procesos indus afectados. Con la ingestin crnica o aguda a concentra
triales.10 Adems, es componente de algunos insecticidas y ciones bajas, se observan fiebre, anorexia y dolor gastro
venenos para roedores, y se le produce como un producto intestinal. El dao perifrico y central al sistema nervioso,
de la pirlisis a partir de la combustin de algunos plsticos, los efectos renales, los efectos hematopoyticos y la enfer
entre los que se incluyen espumas de urea usadas como ais medad vascular que conduce a la muerte estn relaciona
lantes en las casas. De este modo, la exposicin a monxi dos con la exposicin a dosis altas.
do de carbono y cianuro explica una porcin importante de El anlisis del arsnico suele realizarse por espectro-
las toxicidades relacionadas con la inhalacin de humo. La fotometra de absorcin atmica. La sangre y orina son
ingestin de cianuro es un agente frecuente para el suicidio. muestras aceptables para evaluar la exposicin durante
El cianuro expresa toxicidad al unirse con el hierro del un perodo corto. Se ha encontrado que el contenido en
hemo. La unin con la citocromo oxidasa mitocondrial causa cabello y uas es til en la valoracin de la exposicin por
desacoplamiento de la fosforilacin oxidativa. Esto produce tiempo prolongado.
disminucin rpida del trifosfato de adenosina celular como
resultado de la incapacidad del oxgeno para aceptar elec Cadmio
trones. Los aumentos en la tensin del oxgeno celular y del El cadmio es un metal encontrado en muchos procesos
P 0 2venoso ocurren como resultado de la falta de utilizacin industriales, con uso principal en electrodeposicin y gal
de oxgeno. Con una exposicin baja, los pacientes experi vanizado. A menudo se encuentra en la minera y el pro
mentan dolores de cabeza, mareo y depresin respiratoria, cesamiento de muchos metales. El cadmio es un pigmento
lo que progresa con rapidez a ataque, coma y muerte a dosis encontrado en pinturas y plsticos, adems de que es el
ligeramente mayores. La eliminacin del cianuro est media material catdico de las bateras de nquel-cadmio. Cons
da sobre todo por conversin enzimtica rpida a tiocianato, tituye un contaminante importante del ambiente .13
594 PARTE IV REAS DE ESPECIALIDAD DE LA QUMICA CLNICA
La exposicin excesiva ocurre con mayor frecuencia por mulacin importante en rin, mdula sea, eritrocitos
inhalacin de partculas de cadmio en la industria y por inges circulantes y nervios perifricos y centrales.
tin de alimentos contaminados. La toxicidad del cadmio se La toxicidad del plomo es variada y depende de la dosis
manifiesta sobre todo por su unin con protenas. Sin embar (fig. 29-3). La mayor parte de los efectos txicos son resul
go, tambin llega a unirse con otros constituyentes celula tado de la unin con protenas, lo que ocasiona cambio en
res. El cadmio se distribuye en todo el cuerpo, pero tiende a la estructura y funcin. Los efectos neurolgicos del plomo
acumularse en el rin, donde se expresan la mayor parte de son de particular importancia. La exposicin al plomo pro
sus efectos txicos .13 Un hallazgo temprano de la toxicidad duce encefalopata caracterizada por edema cerebral e isque
del cadmio es la disfuncin tubular renal. Por lo general, se mia. El envenenamiento grave con plomo origina estupor,
observan proteinuria tubular, glucosuria y aminoaciduria. La convulsiones y coma. En la exposicin a concentraciones
evaluacin del exceso de cadmio suele realizarse por deter menores, tal vez no se presenten estos sntomas. Sin embar
minacin del contenido en sangre entera o en la orina a tra go, la exposicin baja quiz desencadene efectos subclni-
vs de espectrofotometra de absorcin atmica. cos tipificados por cambios conductuales, hiperactividad,
trastorno de dficit de atencin y descenso en las evalua
Plomo ciones del cociente de inteligencia. Al parecer los nios son
El plomo es un contaminante ambiental frecuente .14 Fue los ms sensibles a estos efectos9 y, en Estados Unidos, en
un elemento constitutivo habitual de las pinturas caseras la actualidad se realizan evaluaciones para envenenamiento
antes de 1972 y an se le encuentra en pinturas comer con plomo antes de entrar a la escuela. Las concentraciones
ciales y de arte. La gasolina contuvo plomo hasta 1978. ms elevadas de exposicin se relacionan con desmieliniza
Todava es posible encontrar residuos en los escapes de cin de los nervios perifricos, lo que ocasiona una dismi
automviles en concentraciones elevadas en las carreteras. nucin en la velocidad de la conduccin nerviosa.
Las caeras construidas con tubos de plomo o unidas con El plomo es un potente inhibidor de muchas enzimas.
conectores de plomo contribuyen en gran medida a la con Esta inhibicin media muchos efectos txicos. Cabe desta
centracin de plomo en el agua. El plomo es un subpro car los efectos sobre el metabolismo de la vitamina D y la
ducto o componente de muchos procesos industriales. El ruta sinttica del hemo. Esto produce cambios en el hueso
contenido en alimentos es muy variable. En Estados Uni y metabolismo del calcio y anemia. En la exposicin exce
dos, el promedio de ingesta diaria en adultos es de 75 a siva, se observa disminucin en las concentraciones sri
120 irg/da. Este valor de ingesta no est relacionado con cas de 25-hidroxi y 1,25-dihidroxivitamina D. La anemia
toxicidad evidente .15 Debido a que el plomo se encuen surge principalmente por inhibicin de la ruta sinttica
tra presente en todos los sistemas biolgicos y no se ha del hemo, que ocasiona incrementos en la concentracin
encontrado su funcin siolgica y bioqumica, el aspecto de varios intermediarios de esta ruta, entre los que se
clave es la dosis a la que causa un efecto txico. La suscep incluyen el cido aminolevulnico y la protoporfirina. Los
tibilidad a la toxicidad con plomo depende principalmen incrementos en la protoporfirina producen concentracio
te de la edad. Los adultos son ms tolerantes a los efectos nes elevadas de protoporfirina de cinc en los eritrocitos
del plomo en comparacin con los nios .16 circulantes. La protoporfirina de cinc es un compuesto
La exposicin al plomo ocurre por cualquier va. Sin bastante fluorescente. La medicin de esta fluorescencia es
embargo, la ingestin de los constituyentes de la dieta til para valorar la toxicidad del plomo. El aumento en
contaminados explica la mayor parte de las exposicio el cido aminolevulnico urinario constituye un indicador
nes. La absorcin gastrointestinal de plomo est influida muy sensitivo y especfico de la toxicidad con plomo que
por varios factores. Los adultos absorben de 5 a 15% del se correlaciona en buena medida con las concentraciones
plomo ingerido. Los nios poseen un grado de absorcin sanguneas. Otro hallazgo hematolgico es la presencia
mayor: de 30 a 40%. Los factores que controlan el ndice de manchado basoflico en los eritrocitos como resultado de
de absorcin son inciertos .17 El plomo absorbido se une la inhibicin de la nucleotidasa pirimidina eritroctica. Esta
con elevada afinidad a muchas estructuras macromolecu- enzima es responsable de la eliminacin del DNA residual
lares. Se distribuye en todo el cuerpo en dos compartimen despus de la extrusin del ncleo. El manchado basoflico
tos tericos. Uno es el esqueleto, que es el depsito ms es un indicador sensible a la exposicin con plomo.
grande. El plomo se combina con la matriz del hueso y La exposicin excesiva al plomo est relacionada con
llega a permanecer en este compartimiento por un largo hipertensin, carcinognesis, defectos al nacer y afeccin
perodo. La vida media del plomo en hueso es superior a a la inmunidad. El plomo causa diversos efectos renales
los 20 aos. El otro compartimiento terico es el tejido blan txicos .18 Los estados iniciales se vinculan con disfuncin
do. La vida media del plomo en este compartimiento es un tubular, que producen glucosuria, aminoaciduria e hiper-
poco variable, con un promedio de 120 das. fosfaturia. Los estados avanzados se relacionan con atrofia
La eliminacin del plomo ocurre sobre todo por filtra tubular y fibrosis glomerular. La fibrosis llega a disminuir
cin renal. Debido que slo una porcin pequea del plo el ndice de filtracin glomerular.
mo corporal total se presenta en la circulacin, el ndice de El tratamiento del envenenamiento con plomo implica
eliminacin es lento. Dada la tasa relativamente constante la eliminacin de la exposicin y la terapia con queladores
de exposicin y el ndice de eliminacin lento, el plomo teraputicos, como cido etilendiaminotetractico (EDTA)
corporal total se acumula durante la vida. La acumulacin y cido dimercaptosuccnico (DMSA). Estas sustancias
ms grande ocurre en el hueso. Adems, se observa acu son capaces de eliminar el plomo del tejido blando y seo
CAPTULO 29 TOXICOLOGA 595
Concentracin de
plomo en la
t
Nios Adultos
sangre (Ng Pb/dl)
Muerte
Encefalopata
Encefalopata!
Nefropata Anemia franca
Anemia franca
Reduccin de la longevidad
Clico
Sntesis de hemoglobina
~~Neuropatas perifricas
Sntesis de hemoglobina Infertilidad (hombres)
Nefropata
r Presin sangunea
Metabolismo de la vitamina D i 30 < sistlica (hombres) T
L Acuidad ael odo l
Eritrocito protoporfirina
Velocidad de la conduccin (hombres) T
del nervio 1 20
FIGURA 29-3. Comparacin de los efectos del plomo en nios y adultos. (Reimpresa de Royce SE y Needleman HL,
eds. Case Studies in Environmental Medicine: Lead Toxicity, Washington, D.C.: U.S. Public Health Service, ATSDR, 1990.)
por formacin de complejos de peso molecular bajo y alta sobre todo por inhalacin e ingestin. El consumo de alimen
afinidad, que se depuran por filtracin renal. La eficacia de tos contaminados constituye la principal fuente de exposicin
esta terapia se determina por monitoreo de la concentra en la poblacin general. La inhalacin e ingestin accidental
cin urinaria de plomo. de formas inorgnicas y orgnicas en entornos industriales
La valoracin de la carga corporal total de envenena representa la razn ms habitual de las concentraciones txi
miento por plomo se logra de m ejor manera por la deter cas .19 Cada forma de mercurio tiene diferentes caractersticas
minacin cuantitativa de la concentracin de plomo en la toxicolgicas. El mercurio elemental (Hg) se ingiere sin
sangre entera. El uso de la orina tambin es vlido, pero se efectos importantes. La inhalacin de mercurio elemental
correlaciona de manera ms estrecha con el grado de expo resulta insignificante debido a su presin de vapor baja.
sicin reciente. Se debe tener cuidado durante la obtencin E l mercurio catinico (Hg2+) es moderadamente txico. El
de la muestra para asegurar que sta no se contamine con mercurio orgnico, como el mercurio de metilo (CH 3Hg+),
fuentes exgenas. Con este propsito, se recomiendan los es muy txico .20 Considerando que la va de exposicin
recipientes libres de plomo. ms frecuente al mercurio es por ingestin, el factor pri
Es posible utilizar varios mtodos para medir la con mario que determina la toxicidad es la absorbancia gastro
centracin de plomo. En ocasiones se emplean reacciones intestinal.
cromognicas y mtodos volumtricos de tira andica, El mercurio elemental no se absorbe en gran medida
pero carecen de utilidad clnica debido a la falta de sen debido a su naturaleza lquida viscosa. El mercurio inorg
sibilidad analtica. En la actualidad, la espectrofotometra nico slo se absorbe en forma parcial. Este ltimo, aunque
de absorcin atmica (EAA) con horno de grafito es el no se absorbe de manera significativa, presenta toxicidad
mtodo ms frecuente. local importante en el tracto gastrointestinal. La porcin
que es absorbida se distribuye uniformemente a todo el
Mercurio cuerpo. Las formas orgnicas del mercurio se absorben con
El mercurio es un metal que existe en tres formas: elemental rapidez y eficiencia por difusin pasiva. El mercurio org
(lquido a temperatura ambiente), sales inorgnicas o como nico sistmico se divide en compartimientos hidrofbi-
componente de compuestos orgnicos. La exposicin ocurre cos. Esto ocasiona concentraciones elevadas en el cerebro
596 PARTE IV REAS DE ESPECIALIDAD DE LA QUMICA CLNICA
y en los nervios perifricos. En estos compartimientos vez produzca estados de enfermedad crnica. La exposicin
lipofilicos, el mercurio orgnico se biotransforma al estado a valores elevados es de preocupacin primordial, porque
divalente, lo que permite que se una a protenas neurona- quiz produzca estados de enfermedad agudos o muerte.
les .21 La eliminacin de mercurio sistmico ocurre sobre Las vctimas ms frecuentes del envenenamiento agudo son
todo por filtracin renal de las especies con peso molecu las personas que aplican pesticidas y no toman las precau
lar bajo o en estado libre (ionizado). Puesto que la mayor ciones apropiadas para evitar la exposicin. La ingestin en
parte del mercurio se encuentra unido con protenas, el casa por nios tambin es frecuente. Adems, la ingestin
ndice de eliminacin es lento. Por tanto, la exposicin de pesticida constituye un vehculo habitual de suicidio.
crnica ejerce un efecto acumulativo. Existe amplia variacin en la configuracin qumica de
La toxicidad del mercurio es resultado de la unin con los pesticidas, que va de las sales simples de metales pesados
protenas, lo que genera cambio en la estructura y funcin. a complejos compuestos orgnicos de elevado peso molecu
La consecuencia ms importante de esta interaccin es la lar. Los insecticidas son los pesticidas ms frecuentes. De
inhibicin de muchas enzimas. La unin con protenas acuerdo con la configuracin qumica, los organofosfatos,
intestinales despus de la ingestin de mercurio inorg carbamatos e hidrocarburos halogenados son los insectici
nico ocasiona alteraciones gastrointestinales agudas. La das ms comunes. Los organofosfatos son los pesticidas ms
ingestin de cantidades moderadas tal vez produzca dia abundantes y son responsables de alrededor de una tercera
rrea sangunea grave debido a la ulceracin y necrosis del parte de todos los envenenamientos por pesticidas.
tracto gastrointestinal. En casos graves, es posible que Los organofosfatos y carbamatos funcionan a travs de
esto conduzca a estado de choque y muerte. La porcin la inhibicin de la aceticolinesterasa, una enzima presente
absorbida de mercurio inorgnico ingerido afecta muchos en insectos y mamferos. En estos ltimos, la acetilcolina
rganos. Entre los hallazgos clnicos se encuentran taqui es un neurotransmisor que se encuentra en los nervios
cardia, temblores, tiroiditis y, sobre todo, interrupcin central y perifrico. Es responsable, tambin, de estimular
de la funcin renal. El efecto renal est relacionado con las clulas musculares y varias glndulas endocrinas/exo-
proteinuria glomerular y prdida de la funcin tubular. El crinas. Las acciones de la acetilcolina se finalizan por las
mercurio orgnico tal vez ejerza un efecto renal a concen acciones de la acetilcolinesterasa postsinptica unida a la
traciones elevadas de exposicin. Sin embargo, los sntomas membrana. La inhibicin de esta enzima por estos agentes
neurolgicos son los efectos txicos primarios de esta for ocasiona la presencia prolongada de la acetilcolina sobre su
ma hidrofbica. La exposicin moderada causa temblores, receptor, lo cual produce un amplio rango de efectos sist-
cambios de conducta, lenguaje en murmullos y prdida del micos. La exposicin a concentraciones bajas se relaciona
equilibrio. Los valores elevados de exposicin ocasionas con salivacin, lagrimeo, y miccin y defecacin involun
hiporreflexia, hipotensin, bradicardia, disfuncin renal y tarias. La exposicin a valores elevados produce bradicar
muerte. El anlisis de mercurio es por absorcin atmica, dia, contraccin muscular, calambres, apata, lenguaje mal
con sangre entera u una alcuota de una muestra de orina de articulado y cambios en la conducta. Adems, es posible
24 horas o voltametra de tira andica. El anlisis de mercu que ocurra muerte debido a insuficiencia respiratoria.
rio por absorcin atmica requiere tcnicas especiales como Los organofosfatos absorbidos se unen con alta afinidad
resultado de la volatilidad del mercurio elemental. a diversas protenas, como la acetilcolinesterasa. La unin
con protenas impide el anlisis directo de los organofosfa
Pesticidas tos. De este modo, la exposicin se evala directamente por
Los pesticidas son sustancias que se agregan de manera la medicin de la inhibicin de la acetilcolinesterasa. Se ha
intencional al ambiente para matar o daar una forma de encontrado que la inhibicin de esta enzima constituye un
vida indeseable. Los pesticidas se clasifican en varias cate indicador sensible y especfico de la exposicin a organo
goras, como insecticidas y herbicidas. Estos agentes llegan fosfatos. Debido a que la acetilcolinesterasa es una enzima
a aplicarse para el control de la enfermedad por vectores y de unin con la membrana, la actividad srica es baja. Para
pestes urbanas, y para mejorar la productividad agrcola. aumentar la sensibilidad analtica de este ensayo, a menudo
Los pesticidas se encuentran en entornos laborales y en se utilizan eritrocitos con elevada actividad superficial. Sin
casa. Por tanto, existen oportunidades frecuentes para la embargo, la evaluacin de la actividad de la acetilcolineste
exposicin. La contaminacin de alimentos es la princi rasa eritroctica para la deteccin de la exposicin a organo
pal va de exposicin para la poblacin general. La inhala fosfatos no est disponible de manera habitual a causa de la
cin, absorcin transdrmica e ingestin como resultado baja demanda y la falta de un mtodo automatizado.
del contacto mano a boca son vas de exposicin laboral y La prueba alternativa que se ha vuelto ms a menudo dis
accidental habituales .22 ponible es la medicin de la actividad de la seudocolinestera-
En condiciones ideales, las acciones de los pesticidas sa srica (SChE). Esta enzima es inhibida por organofosfatos
seran sobre el blanco especfico. Por desgracia, la mayor de una manera similar a la enzima eritroctica. Sin embargo,
parte no son selectivos y producen efectos txicos en muchas a diferencia de la enzima eritroctica, los cambios en la activi
especies distintas al objeto, que incluyen a los seres huma dad srica de la SChE carecen de sensibilidad y especificidad
nos. Los pesticidas aparecen en muchas formas diferentes para la exposicin a organofosfatos. La seudocolinesterasa se
con un amplio rango de posibles efectos txicos .23 An no encuentra en el hgado, pncreas, cerebro y suero. La funcin
se aclaran los efectos en la salud de la exposicin moderada biolgica de esta enzima no est bien definida. En presencia
a corto plazo de la mayor parte de estos agentes. La exposi de infeccin aguda, embolismo pulmonar, hepatitis y cirro
cin moderada pero prolongada a concentraciones bajas tal sis, llega a observarse disminucin en los valores de la SChE.
CAPTULO 29 TOXICOLOGA 597
Adems, existen diversas variantes de esta enzima que mani funcin gastrointestinal. Adems, existe una relacin epide
fiestan reduccin de la actividad. De este modo, los decre miolgica entre la aspirina, las infecciones virales en nios
mentos en la SChE no son especficos del envenenamiento (p. ej., varicela e influenza) y el inicio del sndrome de Reye.
con organofosfatos. El rango de referencia normal de SChE se La ingesta aguda de dosis elevadas de aspirina se rela
encuentra entre 4000 y 12000 U/L. La variacin intraindivi- ciona con varios efectos txicos a travs de diversos meca
dual (el grado de variacin en un individuo promedio) es de nismos diferentes .24 Debido a que se trata de un cido, la
alrededor de 700 U/L. Ocurren sntomas relacionados con la ingestin excesiva de salicilato se vincula con acidosis
toxicidad de los organofosfatos ante una reduccin de alrede metablica. Adems, el salicilato es un estimulador direc
dor de 40% en la actividad. Un individuo con SChE normal to del centro respiratorio. La hiperventilacin produce
en el lado alto del rango de referencia normal y que ha estado aicalosis respiratoria. En muchos casos, el resultado neto
expuesto a concentraciones txicas de organofosfatos an lle es alteracin acidobsica mixta inmediata. El salicilato
ga a presentar actividad de la SChE dentro del rango normal tambin inhibe el ciclo de Krebs, lo que origina conver
de referencia. Debido a estos factores, la determinacin de la sin excesiva de piruvato a lactato. Asimismo, a concen
actividad de SchE carece de sensibilidad en el diagnstico del traciones elevadas de exposicin, los salicilatos estimulan
envenenamiento por organofosfatos. Por tanto, a la SChE se la movilizacin y el uso de cidos grasos libres, lo que
le considera una prueba de valoracin, por lo que se debe produce formacin excesiva de cuerpos cetnicos. Todos
tomar en cuenta el contexto clnico al momento de interpre estos factores contribuyen a la acidosis metablica que
tar los resultados. Es posible instaurar terapia con antdoto quiz conduzca a la muerte. El tratamiento para la sobre-
inmediata en casos de sospecha de envenenamiento por orga dosis incluye la neutralizacin y eliminacin del exceso de
nofosfatos con decremento en la actividad de la SChE. Sin cido y el mantenimiento del equilibrio electroltico.
embargo, la continuacin de la terapia y la documentacin de Se han establecido correlaciones entre las concentra
dicho envenenamiento deben confirmarse por comprobacin ciones sricas de salicilatos y resultados txicos. Estn
de la enzima eritroctica. disponibles varios mtodos para la determ inacin cuan
titativa del salicilato en suero. Los mtodos con croma
TO X ICO LO G A DE LOS FRM ACOS tografa de gases o lquida proporcionan la sensibilidad y
especificidad analticas ms elevadas, pero no se encon
TERAPUTICOS
tr utilidad clnica debido a lo costos del equipo y la
Muchas situaciones de sobredosis son resultado de la dosi dificultad tcnica. Hay varios mtodos de inm unoan
ficacin excesiva accidental o intencional de frmacos far lisis disponibles; el ms frecuente es un anlisis cromo-
macuticos. Todos los frmacos llegan a ocasionar efectos gnico conocido como reaccin de Trinder, en el que el
txicos a la dosis correcta. Esta seccin se centra en los salicilato reacciona con el nitrato frrico para formar
frmacos teraputicos observados en situaciones clnicas un com plejo coloreado que luego se evala por medios
de sobredosis. espectrofotom tricos.
El acetaminofeno absorbido se une con alta afinidad a proporciona una razn para el tratamiento de la adiccin.
varias protenas, lo que da como resultado una baja fraccin Por estas razones, a menudo se realizan pruebas de abuso
libre. De este modo, la filtracin renal del frmaco padre es de frm acos. Por lo general, esto implica la valoracin de
mnima. La mayor parte se elimina por captacin heptica, una sola muestra de orina para muchas sustancias a travs
biotransformacin, conjugacin y excrecin. El acetami de procedimientos de evaluacin cualitativa. En la mayor
nofeno sigue distintos caminos diferentes a travs de este parte de los casos, este procedimiento slo detecta el uso
proceso; cada uno con formacin de un producto diferente. reciente del frmaco. Por tanto, con la abstinencia de dura
La ruta de mayor preocupacin es el sistema heptico oxi cin relativamente corta, tal vez no se identifique a muchos
dasa de funcin mixta. En este sistema, el acetaminofeno pacientes con abuso. Adems, un examen de frmaco posi
primero se transforma a intermediarios reactivos, que lue tivo no diferencia entre el uso ocasional y el abuso crnico.
go se conjugan con glutationa reducida. En situaciones de Por lo general, la identificacin del abuso crnico implica
sobredosis, la glutationa disminuye, aunque los intermedios varios resultados positivos de la prueba en conjunto con
reactivos se siguen produciendo. Esto ocasiona acumula evaluacin clnica. De manera similar, un examen positivo
cin de intermediarios reactivos dentro de la clula. Debido del frmaco no determina el marco temporal o la dosis de
a que algunos intermediarios son radicales libres, se produ frmaco ingerida.
ce un efecto txico en la clula que conduce a necrosis del El abuso de frmacos o sobredosis llega a ocurrir con sus
hgado, el rgano en el que ocurren estas reacciones .25 tancias de prescripcin, sin receta o ilcitas. El centro de este
El marco temporal para el comienzo del dao a los anlisis gira en torno a sustancias con potencial adictivo.
hepatocitos es relativamente prolongado. En un adulto El uso de drogas para propsitos recreativos o m ejo
promedio, los indicadores sricos de dao heptico no se ra del desempeo es relativamente frecuente. En Estados
vuelven anormales hasta tres a cinco das despus de la Unidos, el N ational Institute on Drug Abuse informa que
ingestin de una dosis txica. Los sntomas iniciales de alrededor del 30% de la poblacin mayor de 15 aos de
la toxicidad por acetaminofeno son vagos, no especfi edad ha usado una droga ilcita. Las pruebas de abuso de dro
cos y no predicen necrosis heptica. Se ha determinado gas se volvieron lugar comn en el ambiente profesional,
la concentracin srica del acetaminofeno que ocasiona industrial y atltico. Las medidas punitivas potenciales
disminucin de la glutationa en un adulto promedio. Por relacionadas con estas pruebas conllevan u ocasionan un
desgracia, el acetaminofeno se elimina con rapidez del litigio civil o criminal. Por tanto, el laboratorio debe ase
suero y su determinacin suele realizarse muchas horas gurarse que los datos sean admisibles y defendibles desde
despus de la ingestin. En estas situaciones, se descono el punto de vista legal. Esto requiere el uso de mtodos
ce si se presentaron concentraciones txicas de acetami analticos validados como exactos y precisos. Adems, se
nofeno en algn momento anterior. Para ayudar en esta necesita documentacin de seguridad de la muestra. Se
situacin, estn disponibles monogramas que predicen establecern protocolos y procedimientos que prevengan
hepatoxicidad con base en las concentraciones sricas de y descubran adulteracin de la muestra para prevenir la
acetaminofeno en un momento conocido despus de la deteccin de la droga. En condiciones normales, se realiza
ingestin. Adems, se debe destacar que los consumidores medicin de la temperatura, el pH, la gravedad especfica
asiduos crnicos de etanol metabolizan el acetaminofeno a y la creatinina urinarios para asegurar que estas muestras
un ndice ms rpido que el promedio, lo que produce una no se diluyeron ni trataron con sustancias que interfieran
formacin ms rpida de intermediarios reactivos y mayor con las pruebas. La recoleccin de la muestra se vigilar
posibilidad de disminucin de glutationa a una dosis ms y una cadena de custodia establecida servir para brindar
baja que la normal. Por tanto, los pacientes alcohlicos resguardo contra el intercambio de la muestra.
son ms susceptibles a la toxicidad por acetaminofeno, lo Las pruebas de abuso de frmacos se realizan por
que hace que resulte inapropiado el empleo de un mono varios mtodos. Por lo general, se emplea un mtodo de
grama para la interpretacin en estos pacientes .26 valoracin y confirm acin de dos titulaciones .27 Los pro
El mtodo de referencia para la cuantificacin del aceta- cedimientos de valoracin sern sencillos, rpidos, eco
minofeno en suero es la cromatografa lquida de alta resolu nmicos y capaces de automatizacin. A menudo se les
cin. Sin embargo, este mtodo no suele utilizarse en clnica conoce como pruebas d e la m ancha. En trminos generales,
debido a que es costoso y plantea dificultad tcnica. En la los procedimientos de valoracin cuentan con buena sen
actualidad, el inmunoanlisis es el mtodo analtico que ms sibilidad analtica con especificidad marginal; un resulta
se utiliza para la determinacin del acetaminofeno srico. do negativo descarta un analito con un grado razonable de
Los sistemas de inmunoanlisis de la enzima competitiva y certeza. Estos mtodos suelen detectar clases de frmacos
de la polarizacin fluorescente son los ms empleados. con base en las similitudes en la configuracin qumica.
Esto permite la deteccin de compuestos padre y sus con
gneres, que tienen efectos similares. Dado que muchos
TO X ICO LO G A DE FRM ACOS DE A BU SO
frmacos de diseador son formas modificadas de frma
La valoracin del abuso de frmacos es de inters mdico cos de abuso establecidos, estos mtodos incrementan el
por muchas razones. En la sobredosis de un frmaco, resul mbito del proceso de valoracin. Una desventaja de este
ta esencial identificar el agente responsable para asegurar tipo de anlisis es que detecta, tambin, sustancias relacio
el tratamiento apropiado. De manera similar, la identifica nadas desde el punto de vista qumico que tienen un bajo o
cin del abuso de frmacos en situaciones sin sobredosis nulo potencial para el abuso. Por tanto, la interpretacin de
CAPITULO 29 TOXICOLOGA 599
CUADRO 29-4. PREVALENCIA DE FRMACOS elevado grado de sensibilidad y se automatizan con facili
DE ABUSO FRECUENTES dad. Existe una amplia gama de tcnicas cromatogrficas
para la identificacin cualitativa y cuantificacin de fr
SUSTANCIA PREVALENCIA (% )a
macos. La cromatografa de capa fina es un mtodo eco
Alcohol 75 a 80 nmico para la valoracin de muchos frmacos, y tiene la
Marihuana 20 a 26
ventaja de que no se requiere instrumentacin. La croma
tografa lquida y de gas permite que mezclas complejas de
Cocana 5 a 13 frmacos se separen y cuantifiquen. Por lo general, estos
Benzodiacepinas 1a 5 mtodos son laboriosos y no son lo ms adecuados para
la valoracin.
Barbitricos 0.5 a 5
Muchos frmacos tienen potencial para el abuso .28 Las
Opiceos 0.1 a 2 tendencias en el abuso de drogas varan entre los luga
Fencididina 0.1 a 2 res y los diferentes grupos socioeconmicos. Para que un
laboratorio clnico proporcione un servicio de toxicologa
Anfetam inas 0.1 a 1
eficaz, se requiere el conocimiento del frmaco o los gru
Otros estimulantes 0.8 a 2 pos de frmacos que quiz se encontrarn en la poblacin
Otros sedantes hipnticos 0.6 a 2 del paciente que se atiende. Por fortuna, el proceso de
seleccin de cules frmacos se examinarn es auxiliado
sEn este cuadro se proporcionan frecuencias aproxim adas de los por estudios nacionales en los que se identifican los fr
frm acos de abuso relevantes encontrados en el laboratorio clnico.
macos de abuso que se observan con mayor frecuencia en
Los valores porcentuales calculan la prevalencia del uso en individuos
universitarios, los usuarios principales, quienes de acuerdo con los datos
la poblacin (cuadro 29-4). Esto proporciona la base para la
del estudio utilizaron frm acos en los ltimos 30 das, e individuos que seleccin de la prueba en la mayor parte de las situaciones.
dieron positivo en el mismo grupo de edad. (A daptado de los sitios Las siguientes secciones de este captulo se centran en fr
W eb de NIDA Capsules e InfoFacts: URL http://w ww .nida.nih.gov; acceso, macos seleccionados con elevado potencial de adiccin.
12/04/04.)
A nfetam inas
La anfetamina y metanfetamina son frmacos teraputi
los resultados de la prueba positivos requiere la integracin cos empleados en la narcolepsia y el trastorno del dficit
del contexto clnico y pruebas adicionales. En las pruebas de atencin. Estos frmacos son estimulantes con elevado
de confirmacin se utilizan mtodos que poseen sensibi potencial de abuso .29 Producen una sensacin inicial de
lidad y especificidad elevadas. Muchas de estas pruebas mayor capacidad mental y fsica, jun to con percepcin de
proporcionan tanto informacin cuantitativa como cuali bienestar. Estos efectos iniciales son seguidos por inquie
tativa. Las pruebas de confirmacin requieren el uso de tud, irritabilidad y, quiz, psicosis. La disminucin de
un mtodo diferente del empleado en el procedimiento estos efectos tardos a menudo es opuesta al uso conti
de valoracin. nuo. Se desarrollan tolerancia y dependencia psicolgica
Existen varios procedimientos analticos generales que con el uso crnico. La sobredosis, aunque rara en usuarios
se emplean con frecuencia para el anlisis de frmacos de experimentados, ocasiona hipertensin, arritmias carda
abuso. Las reacciones cromognicas, la generacin de un cas, convulsiones y tal vez la muerte. Varios compuestos
producto coloreado de manera habitual por una reaccin relacionados desde el punto de vista qumico con las anfe
qumica, se utilizan en ocasiones como procedimientos de taminas son componentes de medicamentos sin receta,
valoracin. Los procedimientos basados en inmunoanli como efedrina, seudoefedrina y fenilpropanolamina. Estos
sis se usan en forma amplia como anlisis de valoracin y compuestos semejantes a la anfetamina son frecuentes en
confirmatorios. En general, los inmunoanlisis ofrecen un medicamentos para alergia y resfros.
ES T U D IO D E C A S O 29-2
La identificacin del abuso de anfetamina incluye el txicos fisiolgicos especficos. Tal vez se desarrollen tole
anlisis de orina para conocer los frmacos de origen. Por rancia y ligera dependencia con el uso crnico. La THC es
lo general, los sistemas de inmunoanlisis se utilizan como una sustancia lipoflica, que se elimina con rapidez de la
procedimiento de valoracin. Debido a la variable de reac circulacin por difusin pasiva dentro de compartimientos
tividad cruzada con medicamentos sin receta que contie hidrofbicos, como el cerebro y la grasa. Esto ocasiona la
nen compuestos semejantes a anfetaminas, a un posible eliminacin lenta como resultado de la distribucin inver
resultado por inmunoanlisis se le considera presuntivo. sa a la circulacin y el posterior metabolismo heptico.
La confirmacin de pruebas positivas del inmunoanlisis La vida media del THC en la circulacin es de un da
suele realizarse por cromatografa lquida o gaseosa. despus de un solo uso, y de tres a cinco das en con
sumidores habituales crnicos. El metabolismo heptico
Esteroides anablicos del THC genera varios productos que se elim inan sobre
todo por la orina. El metabolito urinario principal es el cido
Los esteroides anablicos conforman un grupo de compo 11 -nor-A-tetrahidrocanabinol-9-carboxlico (THC-COOH).
nentes relacionados, desde el punto de vista qumico, con Es posible detectar este metabolito en orina durante tres
la testosterona, la hormona sexual masculina. Estas sustan a cinco das despus de un solo uso o hasta por cuatro
cias artificiales se desarrollaron en 1930 como terapia para semanas en un consumidor habitual crnico despus de
el hipogonadismo en hombres. Pronto se descubri que el la abstinencia. Los inmunoanlisis para el THC-COOH
uso de estos compuestos en sujetos saludables aumenta la representan la base de la prueba de valoracin para el con
masa muscular. En muchos casos, esto produce mejora sumo de marihuana. Para la confirmacin, se utiliza cro
en el desempeo atltico. En estudios recientes se encon matografa de gases con espectrometra de masas. Ambos
tr que 6.5% de adolescentes varones y 11.9% de mujeres mtodos son sensibles y especficos. Debido al bajo lmite
informaron del uso de esteroides sin prescripcin .30 de deteccin de estos mtodos, es posible encontrar THC-
La mayor parte de los esteroides ilcitos se obtienen a tra COOH en orina como resultado de la inhalacin pasiva.
vs del mercado negro de laboratorios clandestinos y fuentes Se establecieron estndares de concentracin urinaria para
extranjeras. La calidad y pureza de estos frmacos son bas diferenciar entre inhalacin pasiva y directa.
tante variables. En la mayor parte de los casos, los efectos
txicos agudos estn relacionados con formulacin incon
Cocana
sistente, que tal vez produzca dosificaciones e impurezas
elevadas. Varios efectos fsicos y fisiolgicos se relacionan La cocana es un anestsico local efectivo con pocos efec
con el abuso de esteroides. El uso crnico se vincula con tos adversos a concentraciones teraputicas. A valores cir
hepatitis txica. Adems, se relaciona con arterosclerosis culantes ms elevados, representa un potente estimulador
acelerada y agregacin anormal de plaquetas, que predispo del SNC que desencadena una sensacin de excitacin y
nen al derrame cerebral e infarto al miocardio. Adems, el euforia .33 La cocana es una sal alcaloide que se administra
abuso de esteroides causa agrandamiento del corazn. En directamente (p. ej., por insuflacin o inyeccin intrave
este trastorno, las clulas musculares cardacas se desarro nosa) o se inhala como vapor cuando se fuma en la forma
llan ms rpido que la vasculatura relacionada. Es posible de base libre (crack). Tiene un alto potencial de abuso.
que esto conduzca a isquemia de las clulas musculares del La vida media de la cocana circulante es breve: 0.5 a 1
corazn, lo que predispone a arritmias cardacas y posible hora. La toxicidad aguda de la cocana est relacionada
muerte repentina. En hombres, el uso crnico de esteroides con hipertensin, arritmia, ataques e infarto al miocardio.
se relaciona con atrofia testicular, esterilidad e impotencia. Los efectos subjetivos y txicos son evidentes cuando las
En mujeres, causa desarrollo de rasgos masculinos, reduc concentraciones circulantes aumentan. Debido a su vida
cin del pecho y esterilidad. media breve, el mantenimiento de los efectos subjetivos
La identificacin de los individuos con abuso de este en un solo perodo prolongado requiere dosificaciones
roides mediante pruebas de laboratorio se limita a los repetidas de cantidades crecientes. Por tanto, no es posi
mtodos cromatogrficos. Se emplean los sistemas de gas ble establecer correlaciones entre la concentracin srica y
y lquido .31 La cromatografa de gases con espectrofotome los efectos subjetivos o txicos. Debido a que el ndice de
tra de masas es el mtodo ms empleado. cambio es ms importante que la concentracin srica, un
factor primario que determina la toxicidad de la cocana
Canabinoides es la dosis y va de administracin; por va intravenosa
implica el riesgo ms grande, seguida de cerca por la forma
Los canabinoides constituyen un grupo de compuestos de que se fuma.
psicoactivos encontrados en la marihuana .32 De stos, el La vida media de la cocana es resultado de la rpida
tetrahidrocanabinol (THC) es el ms potente y abundante. hidrlisis heptica de los metabolitos inactivos. sta es la
La marihuana o su producto procesado, el hachs, se fuma principal ruta de eliminacin. Slo una pequea porcin
o ingiere. Una sensacin de bienestar y euforia es el efecto del frmaco de origen se encuentra en la orina despus
subjetivo de la exposicin. Adems, est relacionada con de la administracin de una dosis. El producto primario
deterioro de la memoria a corto plazo y la funcin inte del metabolismo heptico es la benzoilecgonina, que se
lectual. An no se establece con claridad los efectos del elimina la mayor parte por la orina. La vida media de la
uso crnico. La sobredosis no se relaciona con resultados benzoilecgonina es de cuatro a siete horas. La presencia
CAPTULO 29 TOXICOLOGA 601
de este metabolito en la orina es un indicador sensible y heptico forma varios productos. La identificacin del
especfico del uso de cocana. Se le detecta en orina duran abuso de PCP se realiza a travs de deteccin del frma
te tres das despus de un solo uso. En usuarios habituales co de origen en la orina. En usuarios habituales crnicos,
crnicos, tal vez se encuentre en orina durante hasta 20 es posible detectar la PCP entre siete y 30 das despus
das despus de la ltima dosis. El procedimiento de valo de la abstinencia. E l inmunoanlisis se utiliza como pro
racin principal para la identificacin del uso de cocana cedimiento de valoracin. La cromatografa de gases con
es la deteccin de la benzoilecgonina en orina median espectrometra constituye el mtodo confirm atorio.
te inmunoanlisis. La prueba de confirmacin se realiza
mediante cromatografa de gases con espectrometra de Hipnticos sedantes
masas.
Muchos frmacos teraputicos se clasifican como hip
nticos sedantes o tranquilizantes. Todos los miembros
O piceos
de esta clase son depresivos del SNC. Tienen un amplio
Los opiceos son una clase de sustancias capaces de analge rango de funciones teraputicas y se les utiliza con fre
sia, sedacin y anestesia .34 Se derivan de sustancias extra cuencia. La mayor parte de estos frmacos tiene poten
das de la amapola del opio o se relacionan desde el punto cial de abuso, que va de elevado a bajo. Estos frmacos
de vista qumico con stas. Las sustancias que se producen se han vuelto disponibles para el uso ilegal a travs de
de manera natural incluyen el opio, la morfina y la code- la desviacin de las fuentes aceptadas. Los barbitricos
na. La herona, hidromorfona (Dilaudis) y la oxicodona y las benzodiacepinas son los tipos ms frecuentes de
(Percodan) son formas qumicamente modificadas de los hipnticos sedantes de abuso. Aunque los barbitricos
opiceos que ocurren en forma natural. La meperidina cuentan con mayor potencial de abuso, las benzodiace
(Demerol), metadona (Dolopina), propoxifeno (Darvon), pinas se encuentran con mayor frecuencia en situaciones
pentazocina (Talwin) y fentanil (Sublimaza) constituyen de abuso y sobredosis. Al parecer esto es resultado de
los opiceos sintticos ms comunes. Los opiceos poseen la disponibilidad. Existen m uchos frmacos individuales
elevado potencial de abuso. El empleo crnico conduce a dentro de la clasificacin de barbitricos y benzodiacepi
tolerancia con dependencia fsica y psicolgica. La sobre- nas. El secobarbital, fentobarbital y fenobarbital son los
dosis aguda se presenta con acidosis respiratoria debido barbitricos de mayor abuso. El diacepam (Valium), el
a la depresin de los centros respiratorios, mioglobinuria clordiacepxido (Librium ) y el loracepam (Activan) son
y tal vez incremento en los indicadores sricos del dao las benzodiacepinas ms empleadas para abuso. En la
cardiaco (CKMB), troponina). La sobredosis de opiceos a sobredosis con hipnticos sedantes, al principio se presen
una concentracin elevada llega a producir la muerte cau ta letarga y discurso mal articulado, que llega a progresar
sada por insuficiencia cardiopulmonar. El tratamiento de con rapidez a coma. La depresin respiratoria es el efecto
la sobredosis incluye el uso de naloxona, un antagonista txico ms importante de la mayor parte de estos agentes.
del opiceo. En ocasiones, ocurre hipotensin con los barbitricos. La
Por lo general, las pruebas para opiceos implican la detec toxicidad de m uchos de estos agentes se potencia por el
cin inicial (valoracin) por inmunoanlisis. La mayor par etanol.
te de los inmunoanlisis estn diseados para detectar sobre El inmunoanlisis es el procedimiento de valoracin
todo morfina y codena. Sin embargo, la reactividad cruzada ms frecuente para barbitricos y benzodiacepinas. La
como resultado de similitudes en la estructura qumica per amplia reactividad cruzada dentro de los miembros de
mite la deteccin de muchos de los opiceos: que ocurren cada uno de los grupos permite la deteccin de muchos
de manera natural, modificados qumicamente y sintticos. frmacos individuales. Para la prueba de confirmacin, es
La cromatografa de gases con espectrometra de masas es el posible utilizar cromatografa lquida o de gases.
mtodo confirmatorio de eleccin.
RESUM EN
Fenciclidina
Los casos de envenenamiento representan una cantidad
La fenciclidina (PCP) es un frmaco ilcito con propieda importante de admisiones hospitalarias y visitas a consul
des estimulantes, depresivas, anestsicas y alucingenas. torio mdicos .35 El laboratorista clnico desempea varios
Posee un elevado potencial de abuso. Con frecuencia papeles que afectan el resultado del paciente en estos casos.
se observan efectos adversos a dosis que producen los La identificacin y cuanticacin de la toxina es una res
efectos subjetivos deseados, como agitacin, hostilidad ponsabilidad primaria. Adems, es necesario que el labo
y paranoia. La sobredosis est relacionada con estupor ratorista se encuentre listo para sugerir procedimientos
y coma. La PCP se ingiere o se inhala al fumar tabaco o de comprobacin que contribuyan a definir el diagnstico
marihuana que contiene PCP. Se trata de un frmaco lipo- y proporcionen una base para el monitoreo de la eficacia
flico que se distribuye con rapidez dentro de la grasa y el de la terapia. El suministro de un servicio de toxicologa
cerebro. La elim inacin es lenta como resultado de la dis clnico eficaz requiere la comprensin de la poblacin de
tribucin dentro de la circulacin y el metabolismo hep pacientes a la que se atiende y una comprensin bsica
tico. Alrededor de 10 a 15% de una dosis administrada se de los mecanismos txicos de los venenos que a menudo
elimina de manera intacta por la orina. El metabolismo se encuentran .36
602 PARTE IV REAS DE ESPECIALIDAD DE LA QUIMICA CLNICA
P R E G U N T A S DE R E P A S O
1. Se informa que el compuesto A tiene una LD 50 oral 5. Cul es el producto primario del metabolismo del
de 5 mg/kg de peso corporal; el compuesto B tiene metanol por el sistema alcohol-aldehido deshidroge
una LD 50 oral de 50 mg/kg de peso corporal. De las nasa?
siguientes afirmaciones con respecto a la toxicidad a) Acetona.
relativa de estos dos compuestos, cules son VER b) Acetaldehdo.
DADERAS? c) cido oxlico.
a) La ingestin de cantidades bajas del compuesto A d) Formaldehdo.
predecira que causa ms muertes que una dosis e)' cido frmico.
equivalente del compuesto B.
b ) Se esperara que la ingestin del componente B
6. Cules de las siguientes afirmaciones respecto a la
toxicidad del cianuro son VERDADERAS?
no produzca efectos txicos a dosis mayores que
a) La inhalacin del humo de plstico en combustin
100 mg/kg de peso corporal.
es una causa frecuente de exposicin a cianuro.
c) Ni el compuesto A ni el compuesto B son txicos
b) El cianuro es un compuesto relativamente no
a cualquier valor de exposicin oral.
txico que requiere exposicin crnica para pro
d ) El compuesto A se absorbe con mayor rapidez del
ducir un efecto txico.
tracto gastrointestinal que el compuesto B.
c) El cianuro expresa su toxicidad por inhibicin de
e) Se predecira que el compuesto B es ms txico
la fosforilacin oxidativa.
que el compuesto A si la va de exposicin fue
d) Todas las anteriores son verdaderas.
transdrmica.
e) Solo a y c son verdaderas.
2. Cul de las siguientes afirmaciones describe de m ejor
7. Cul de los siguientes resultados de laboratorio
manera la TD J0 de un compuesto?
seran consistentes con la exposicin oral aguda a
a) La dosificacin de una sustancia que es letal para
una concentracin elevada a una forma inorgnica del
el 50% de la poblacin.
mercurio (Hg2+)?
b ) La dosificacin de una sustancia que producira
a) Concentraciones elevadas de mercurio en sangre
beneficio teraputico en 50% de la poblacin.
entera y orina.
c) La dosificacin de una sustancia que se esperara
b) Proteinuria.
que cause un efecto txico en 50% de la pobla
c) Sangre oculta positiva en las heces.
cin.
d) Todas las anteriores son verdaderas.
d) El porcentaje de individuos que experimentaran
e) Todas las anteriores son falsas.
una respuesta txica a 50% de la dosis letal.
e) El porcentaje de la poblacin que experimentara 8. Un nio se presenta con anemia hipocrmica microc-
una respuesta txica despus de una dosificacin tica. El mdico sospecha anemia por deficiencia de hie
oral de 50 mg. rro. Las pruebas adicionales de laboratorio revelan una
capacidad normal de hierro srico total y de unin con
3. De los siguientes mtodos analticos, cul es el ms
hierro; sin embargo, la concentracin de protoporfirina
utilizado como mtodo confirmatorio para la identifi
de cinc fue muy elevada. El examen urinario para por
cacin de frmacos de abuso?
firinas fue positivo. En el manchado basoflico eritro-
a) Colorimetra diferencial con escaneo.
ctico se observ una mancha perifrica. Cul de las
b ) Electrodo especfico del ion.
siguientes pruebas de laboratorio serla ms aplicable en
c) Cromatografa de gases con espectrometra de
este caso?
masas.
a) Tiocianato urinario.
d) Inmunoanlisis.
b) Carboxihemoglobina.
e) Nefelometra.
c) Plomo en sangre entera.
4. Una toxina cida dbil (pk = 4.0) que se ingiere: d) Esteroides anablicos urinarios.
a) No ser absorbida porque est ionizada. e) Benzoilecgonina urinaria.
b) No ser absorbida a menos que est presente un
9. Un paciente con sospecha de envenenamiento por
transportador especfico.
organofosfatos se presenta con una concentracin baja
c) Ser absorbida de manera pasiva en el colon (pH =
de SchE. Sin embargo, en la prueba confirmatoria, eri-
7.5).
trocito-acetilcolinesterasa, se observa un resultado nor
d.) Ser absorbida de manera pasiva en el estmago
mal. Sin incluir el error analtico, cul de las siguientes
(pH = 3.0).
situaciones explicara estos resultados opuestos?
e) Ser absorbida slo si se ingiere una base dbil al
a ) El paciente tiene cirrosis heptica en fase tarda.
mismo tiempo.
b) El paciente estuvo expuesto a concentraciones
bajas de organofosfatos.
CAPTULO 29 TOXICOLOGA 603
c) El paciente tiene una variante de SchE que mues cos, benzodiazepinas, TE1C, anfetaminas y PCP fue
tra una actividad baja. negativa. Se detecto etanol en suero. Es posible que
d) Todas las anteriores son correctas. el mdico excluya la sobredosis como causa de estos
e) Slo a y c son correctas. resultados?
a) S.
10. Un paciente ingresa a la sala de urgencias en coma. El
b) No.
mdico sospecha una sobredosis de frmaco. La valo
c) Tal vez.
racin con inmunoanlisis para opiceos, barbitri-
O B J E T I V O S
Al completar este captulo, el laboratorista clnico Enumerar los principales tumores y sus marcado
podr: res relacionados.
Analizar la incidencia de cncer en Estados Unidos. Describir las principales propiedades, los mtodos
Explicar el papel de los marcadores tumoraies en de anlisis y el uso clnico de ACE, AFP, CA125,
el tratamiento del cncer. CA19-9, PSA, (3 -hCG, y PALP.
Identificar las caractersticas o propiedades de un Explicar el uso de enzimas y hormonas como mar
marcador tumoral ideal. cadores tumoraies.
Establecer el valor clnico principal de los marcado
res tumoraies.
T R MI N O S C L A V E
604
CAPITULO 30 MARCADORES TUMORALES EN CIRCULACIN: CONCEPTOS BSICOS Y APLICACIONES CLNICAS 605
Factor de
crecimiento
Hormona
c-erbB-2
Ras y otras
oncoprotenas
Subconjuntos
Diferenciacin de genes Proliferacin
Ciclina
A y CDK2
Fase S (sntesis de DNA)
G2 Ciclina
E y CDK2
Fase M (mitosis)
Clulas
sin divisin
FIGURA 30-2. Fases del ciclo celular en mamferos.
ES T U D IO D E C A S O 30-1
ESPECIFICIDAD Y SENSIBILIDAD vada incidencia de cncer heptico en esa rea del mundo.
Se requiere informacin y estudio adicionales para con
Resulta esencial comprender el significado de la sensibili firmar esto.
dad de la prueba y la especificidad del marcador tumoral
antes de estudiar sus aplicaciones. De hecho, la utilidad
clnica de un marcador tumoral se vuelve dependiente casi Antgeno especfico de la prstata (PSA) y PSA libre
por completo de su especificidad y sensibilidad. Cuando Debido a la especificidad tisular, el PSA se volvi el primer
se dice que un examen de marcador tumoral tiene una sen marcador tumoral recomendado para la valoracin de cn
sibilidad de 100%, el mismo servir para detectar a todos cer de prstata en hombres mayores de 50 aos de edad .9El
los pacientes con un tipo particular de cncer, en tanto un propsito fue detectar cncer de prstata en fases tempra
examen con especificidad de 100% identificar slo a los nas curables, cuando el tumor an est confinado dentro
pacientes con el tipo especfico de tumor y no a aquellos del rgano. El denominado PSA en realidad se encuentra
con enfermedades benignas. Por desgracia, ninguno de presente en la circulacin sangunea en dos formas princi
los marcadores tumorales descubiertos hasta ahora alcan pales: PSA libre y un complejo PSA-oq-antiquimiotripsina
za 100% de especificidad y sensibilidad de un marcador (PSA-ACT). La medicin del porcentaje de PSA libre (PSA
tumoral ideal. libre/PSA total X 100) o de la proporcin entre PSA libre y
PSA-ACT tal vez contribuya a diferenciar la hiperplasia de
prstata benigna (BPH) del cncer de prstata .10
UTILIDADES CLNICAS DE LOS
M ARCAD O RES TU M ORALES
Susceptibilidad de genes
Valoracin Varios cnceres familiares estn relacionados con muta
ciones de la lnea del germen en varios genes. Los ms
Hasta el momento, ninguno de los marcadores tumorales prominentes de stos son los genes para susceptibilidad a
descubiertos tuvo la especificidad y sensitividad suficientes cncer de pecho y ovrico, como BRCA1 y BRCA2. En el
para la valoracin en la poblacin en general. En la mayor colon, el gen coli de poliposis adenomatoso (CPA) quiz
parte de los marcadores tumorales no est recomendada sea hereditario y predisponga a cncer. En la actualidad se
la valoracin, en especial en una poblacin asintomtica. encuentran disponibles pruebas de BRCA1 y BRCA2 para
Adems de la falta de especificidad y sensibilidad deseadas evaluar esas familias para la identificacin de los porta
en los marcadores tumorales, la baja prevalencia de cncer dores.
en general tambin desalentarla las valoraciones para cn
cer. Adems, se tema que la naturaleza no especfica de
M onitoreo en el tratam iento
la mayor parte de las pruebas con marcadores tumorales
causaran una alarma innecesaria o ansiedad en la pobla Una de las dos aplicaciones mas tiles de los marcadores
cin general. tumorales corresponde a su uso en el monitoreo del curso
Sin embargo, hay excepciones en las que se llevaron a durante el tratamiento del paciente con cncer. La medi
cabo valoraciones exitosas de cncer al medir marcadores cin de los marcadores tumorales sricos durante el trata
tumorales en poblaciones definidas de manera cuidadosa. miento proporciona una indicacin de la efectividad del
frmaco anti tumoral empleado, y proporciona una gua
a -Fetoprotena (AFP) para la seleccin del frmaco ms efectivo para cada caso
En pases asiticos, el examen del hepatoma primario se individual (es decir, ofrece un medio para determinar la
basa en la medicin de la AFP srica. Se considera que es eficacia teraputica).
buen ejemplo de una excepcin como resultado de la ele
ES T U D IO D E C A S O 30-2
enfermedades malignas .13 En estudios se ha demostrado celular bloquear de manera selectiva la expresin de cier
en forma repetida que la elevacin de ciertas isoenzimas tos fenotipos (supresin) y permitir que slo unos cuan
especficas es responsable de los incrementos observa tos continen. Sin embargo, este proceso bien regulado
dos de las actividades enzimticas globales en muchas se perder en distintos grados cuando la clula normal se
enfermedades malignas. Es posible que la medicin de las transforme en una clula tumoral, lo que depende de la
isoenzimas especficas, en lugar de la actividad enzimtica etapa del tumor. En otras palabras, la expresin de algunas
total, mejorara la especificidad de la prueba. protenas, que se espera que resulten bloqueadas durante
los procesos de desarrollo normal, tal vez se reactive en
clulas tumorales. La deteccin de cantidades casi equi
Protenas carcinoem brinicas
valente de productos del gen de oncodesarrollo durante
Bajo condiciones normales, la expresin de todas las pro el desarrollo fetal y la carcinognesis conduce a creer que
tenas est sujeta a la regulacin gentica. En cierta fase hay un proceso bsico comn relacionado con el gen en el
del desarrollo celular, el comienzo de la diferenciacin desarrollo, al igual que en la carcinognesis. Por la misma
ES T U D IO D E C A S O 30-3
razn, la transformacin maligna debe tratarse como una para el tratamiento de pacientes con varios carcinomas.
fase especial de desarrollo. En efecto, estos anticuerpos monoclonales proporcionan
Muchas de estas protenas carcinoembrionarias, como un grado mayor de especificidad y sensibilidad que el an
el antgeno carcinoembrionario (ACE) y la AFP, no tienen lisis del ACE en el control de pacientes con carcinomas de
funciones fisiolgicas definidas con claridad. La mayor par pecho, ovricos y pancreticos (cuadro 30-3).
te de estas molculas estn presentes en concentraciones Cabe hacer notar que ms de un tipo de molcula expre
en nanogramos y en picogramos en la circulacin sangu sa el mismo epitopo; de hecho, muchos epitopos relacio
nea. La cuantificacin de sus concentraciones circulantes nados con tumores tambin son compartidos por varios
en la sangre para el diagnstico y el control del paciente marcadores tumorales derivados de diferentes tumores.
requiere la sensibilidad de los radioinmunoanlisis (RIA) o Como resultado, los anlisis monoclonales llegan a reac
inmunoanlisis enzimticos (IAE ).14 Sin embargo, la espe cionar con diferentes molculas, siempre y cuando ambas
cificidad y sensibilidad de estas protenas carcinoembrio expresen el mismo epitopo.
narias no son de 100%; no obstante, son mucho mayores
que las de enzimas, protenas sricas y hormonas cuando M arcadores tum orales no especficos
se usan como marcadores pulmonares. La concentracin
srica de estas protenas carcinoembrionarias no slo se Ciertos marcadores tumorales son detectables de mane
correlaciona con la actividad tumoral, sino que tambin ra no especfica en muchos tipos de cncer. Son mucho
tiene potencial para establecer pronsticos. menos especficos que la mayor parte de los marcadores
tumorales usados en forma rutinaria para el control de
pacientes con cncer. No obstante, sus concentraciones
M arcadores tum orales definidos m onoclonales son sensibles a cambios de la actividad tumoral. Muchos
Varios epitopos que aparecen en el marcador tumoral se de estos marcadores tumorales no especficos son econ
identifican por anticuerpos monoclonales. En principio micos y sencillos de medir, por lo que son tiles para el
se desarrollaron en un esfuerzo por reemplazar el ACE monitoreo de la terapia y la deteccin de recurrencia en
pacientes con diagnstico conocido. Por ejemplo, el ci
do silico relacionado con lpidos en plasma (ASAL-P) se
CUADRO 30.3. INMUNOANLISIS CON
puede cuantificar con un procedimiento calorimtrico sim
M ARCADORES TUMORALES MONOCLONALES ple, rpido y econmico, y sus concentraciones sricas son
KIT M O N O CLO N AL EN FERM EDA D M ALIGN A bastante cercanas a las de muchos marcadores tumorales
PRINCIPAL RELACIO N ADA de alta especificidad.
CA 125 Carcinoma ovrico
M arcadores tum orales especficos celulares
Hibri-BREScan Carcinoma de pecho
(CA 549) o CA 15-3a La mayor parte de los marcadores tumorales antes descri
tos estn relacionados con carcinomas, que se derivan de
Hibri-Cmark Carcinoma pancretico clulas epiteliales. Sin embargo, es posible encontrar clu
(CA 195) o CA 19-9a
las neuroendocrinas y escamosas en varios tumores, que
CA 72-4 Carcinoma gstrico tal vez progresen a malignidad. Por ejemplo, el antgeno
PSA libre Diferenciacin entre BPH y
celular escamoso (ACCE) es el marcador para el carcino
carcinoma prosttico
ma celular escamoso (CC E), en tanto la cromogranina A
(CgA) y la enolasa neuroespecfica (ENE) son marcadores
Hybritech (San Diego, CA). del carcinoma celular neuroendocrino.
612 PARTE IV REAS DE ESPECIALIDAD DE LA QUMICA CLNICA
Efecto de gancho
Antgeno de cncer 125 (CA 125)
Una desventaja del popular inmunoanlisis de fase slida El CA 125 se defini por primera vez por un anticuer
tipo sndwich es su relacin con el efecto de gancho. ste po OC 125 m onoclonal murino elevado en comparacin
tiende a proporcionar un valor falsamente bajo cuando la con una lnea de carcinoma celular ovrico srico. Este
concentracin srica del marcador tumoral aumenta por epitopo se relaciona con una glucoprotena semejante a la
arriba de un determinado nivel elevado. La consecuencia del mucina de elevado peso molecular ( > 2 0 0 kD) expresada
efecto de gancho llega ser importante, en especial cuando en el epitelio celmico durante el desarrollo embrionario,
los valores caen dentro del rango normal y se malinterpre- y en las clulas del carcinoma ovrico humano. El CA 125
tan como normales cuando, en realidad, el paciente padece es un antgeno glucoprotenico en el que una mitad del
una enfermedad maligna. Por ejemplo, no es raro encontrar carbohidrato tambin es parte del antgeno determinante.
muestras que miden ms de 1 0 0 0 0 0 U/ml de CA 19-9 en Se observa un CA 125 srico elevado en ms de 80% de
pacientes con carcinoma pancretico. En esos pacientes, tal los carcinomas ovricos epiteliales no mucinosos, como
vez se informe CA 19-9 falsamente bajo, como resultado el cistadenocarcinoma srico del ovario. El CA 125 no es
del efecto de gancho. Por tanto, es importante determinar especfico para el carcinoma ovrico. Sin embargo, se ha
a cul nivel del marcador tumoral comenzar a ocurrir el encontrado que la manifestacin de un CA 125 elevado
efecto de gancho con el equipo que se utiliza para las medi precede a los diagnsticos clnicos de enfermedades recu
ciones. La medicin de los marcadores tumoraies a dos rrentes de uno a cuatro meses.
diluciones diferentes, con cuando menos una diferencia de El CA 125 tal vez sea til para la deteccin de tumores
10 veces, por lo general evitar el efecto de gancho. Cabe ovricos en una fase temprana, y para el monitoreo de tra
hacer notar que no hay efecto de gancho en inmunoanlisis tamientos sin procedimiento quirrgico. El lmite superior
con base en un formato de unin competitiva. normal para el CA 125 en suero es de 35 U/ml.
CAPTULO 30 MARCADORES TUMORALES EN CIRCULACIN: CONCEPTOS BSICOS Y APLICACIONES CLNICAS 613
toma. Su medicin tambin es til para el diagnstico de nal, una proteasa serina semejante a calicrena producida
neuroblastoma en nios. slo por las clulas epiteliales que recubren los cinos y los
conductos de la glndula prosttica. Se trata de una prote
cido silico relacionado con lpidos na principal del plasma seminal. Debido a que el PSA libre
es una proteasa serina, el PSA libre forma complejos con
en plasm a (ASAL-P)
varios inhibidores de la proteasa y crea complejos en el sue
Los cidos silicos (cidos N-acetilneuramnicos) son los ro. El principal complejo del PSA detectado en suero es el
derivados acilados del cido neuramnico y los residuos complejo PSA-ACT. Todos los equipos comerciales actuales
terminales del final no reducido de las cadenas de carbo para PSA srico miden tanto el PSA libre como el PSA-ACT,
hidratos en muchas glucoprotenas, glucolpidos y proteo- al que se le denomina PSA total (PSA). El PSA es quiz el
glucanos. Las sialoglucoprotenas de la superficie celular mejor marcador tumoral descubierto hasta ahora. La espe
tumoral tienen un largo historial de relacin con invasivi- cificidad tisular del PSAt hace que sea el marcador tumo-
dad y metstasis. El ASAL-P se encuentra elevado en varias ral ms til disponible para el diagnstico y tratamiento de
enfermedades malignas, como en las de pecho, GI o pulmo cncer de prstata. La falta de especificidad para cncer es
nares. Adems, se altera en presencia de leucemia, linfoma, el nico inconveniente con el PSA. Los trastornos benignos,
enfermedad de Hodgkin y melanoma, as como en enfer como hiperplasia de prstata benigna (BPH), prostatitis e
medades inflamatorias no malignas. Al parecer, el ASAL-P infarto, tambin llegan a ocasionar elevacin de los valores
no es especfico para cualquier tipo especfico de tumor, y de PSA srico. Debido a su especificidad tisular, el anli
se utiliza junto con otros marcadores tumorales para detec sis de PSA es en particular til para monitorear el xito de
tar aumento de los niveles de sensibilidad y especificidad. prostatectoma quirrgica y para detectar recurrencia. La
extirpacin completa de la prstata debe dar como resulta
Enolasa especfica de la neurona (ENE) do una concentracin indetectable de PSA. Cualquier PSA-
La ENE es la subunidad y de una isoenzima enolasa en medible despus de prostatectoma radical indicara tejido
la va glucoltica, que se encuentra sobre todo en clulas prosttico residual o metstasis. En estos pacientes, las
neuronales y neuroendocrinas. La ENE se detecta, tam concentraciones crecientes de PSA despus de una ciruga
bin, en varias clulas, entre las que se encuentran aque exitosa indican en gran medida la presencia de una enfer
llas que componen la captacin del precursor amino y los medad recurrente. Se ha recomendado el uso del PSA sri
sistemas de descarboxilacin (APUD) y las clulas del sis co en combinacin con examen rectal digital (ERD) como
tema neuroendocrino difuso. herramienta de valoracin para detectar cncer de prstata
Es posible encontrar concentraciones elevadas de ENE de importancia clnica. La valoracin permite el tratamiento
en tumores que se originan en el sistema celular neuroen del cncer de prstata confinado al rgano potencialmen
docrino, como glucagonomas e insulinomas. Los niveles te curable descubierto en hombres con esperanza de vida
ms elevados se encontraron en carcinomas de clulas de ms de 10 aos. La medicin del PSA libre (PSAl) y el
de avena, clulas pequeas y carcinoma pulmonar. Ade clculo del porcentaje de PSA ([PSA/PSA] X 100) son tiles
ms, se observa aumento de la ENE srica en nios con para diferenciar entre BPH y tumor de prstata.
neuroblastoma; ms de la mitad de estos nios presentan
concentraciones de ENE mayores de 100 ng/ml. Algunos
Antgeno de carcinoma celular escamoso (ACCE)
pacientes con otros cnceres pulmonares tambin podran
mostrar cifras elevadas de ENE srica; sin embargo, no se El antgeno de CCE es una subfraccin neutral prxima
encontr elevacin alguna en pacientes con enfermedades del antgeno tumoral TA-4, que es posible purificar a par
del pulmn benignas. tir de tejido con carcinoma celular escamoso del cuello
cervical uterino. El ACCE es til para vigilar carcinomas
Receptor de progesterona (RPg) celulares escamosos de cabeza y cuello, pulmn, esfago
El RPg es miembro de una superfamilia de factores de y canal anal. Las concentraciones sricas de ACCE son
transcripcin nuclear de ligando activado, y se compone las ms elevadas en pacientes con metstasis. Hasta 50%
de dominios especficos implicados en el DNA, la unin de los pacientes con insuficiencia renal pueden mostrar
con hormonas y la transactivacin. En seres humanos, aumento de las concentraciones sricas de A CCE .19 Ms
el RPg se detecta como dos protenas distintas de pesos de 70% de los pacientes con cncer cervical avanzado tie
moleculares diferentes de alrededor de 94 y 120 kD, res nen ACCE elevado. Los anlisis del ACCE srico en serie
pectivamente. Debido a que la sntesis del RPg en tumores se correlacionan con la progresin y regresin de cncer
de pecho depende del RE, el RPg constituye un indicador cervical durante la quimioterapia. En un estudio, ms de
an ms sensible que el RE de la sensibilidad potencial a 90% de los pacientes con enfermedad recurrente mostr
terapia endocrina. Cuando los pacientes fueron positivos niveles de ACCE elevados. Sin embargo, el ACCE tambin
para RE y para RPg, casi 80% respondi a diversas terapias se incrementa en algunos trastornos no malignos, como
hormonales, en tanto el ndice de respuesta fue de slo enfermedad heptica extensa.
alrededor de 60% en pacientes positivos slo para RE.
por pacientes con neuroblastoma y feocromocitoma y, por miento. La determinacin urinaria del AVM constituye
tanto, pudieran utilizarse como marcadores tumoraies para una prueba diagnstica til en pacientes con neuroblastoma
el diagnstico y monitoreo de pacientes durante el trata- y feocromocitoma.
P R E G U N T A S DE R E P A S O
1. Cul porcentaje de muertes anuales en Estados Uni 6. El uso clnico principal del CA 125 es el monitoreo de
dos corresponde a cncer? la respuesta al tratamiento de:
a) 5%. a) Carcinoma ovrico.
b) 13%. b ) Cncer colorrectal.
c) 20%. c) Cncer de prstata.
d) 23%. d) Cncer de pecho.
2. Las pruebas con marcadores tumoraies se usan para: 7. Cul de los siguientes marcadores tumoraies se utili
a) Ayudar en el tratamiento del cncer. za en el tratamiento de pacientes con cncer de prs
b) Monitorear la respuesta a la terapia. tata?
c) Detectar enfermedad recurrente. a) cido prosttico-fosfatasa.
d) Todas las anteriores. b) Antgeno especfico de la prstata.
c) CA 549.
3. Los marcadores tumoraies pueden definirse como:
d) Antgeno del polipptido celular.
a) Pruebas analticas (p. ej., citometra de flujo) usa
das para marcar clulas cancergenas. 8. Cul de las siguientes enzimas suele emplearse como
b) Sustancias y qumicos radiactivos empleados para marcador tumoral?
ayudar al mdico a identificar las clulas cancer a) Lipasa.
genas. b ) LD.
c) Sustancias biolgicas sintetizadas y liberadas por c) Aldolasa.
clulas cancergenas, o sustancias producidas por el d) Catalasa.
husped en respuesta a las clulas cancergenas.
9. Un marcador tumoral usado en la evaluacin del car
d) Ninguna de las anteriores.
cinoma o lunar hidatidiforme es:
4. Cul de los siguientes es un antgeno oncofetal? a) |3-hCG.
a) a-Fetoprotena. b) ACE.
b) LD. c) AFP.
c) PAP. d) IgG.
d) Enolasa especfica de la neurona.
10. El anlisis del DNA (medicin del contenido del DNA
5. Cul de los siguientes marcadores tumoraies se nuclear) puede utilizarse para:
encuentra tanto en el carcinoma como en el tejido a) Diagnosticar cncer.
embrionario, y es til como indicador de pronstico b) Marcar clulas cancergenas para la extirpacin
en el carcinoma colorrectal? por ciruga.
a) AFP. c) Diferenciar entre enfermedad benigna y maligna.
b ) ACE. d) Detectar alteraciones en genes.
c) PAP.
d) CA 120.
8. Weider N, Semple JP, Welch WR, et al. Tumor angiognesis and Mizejewski GJ, Porter IH, eds. AFP and Congenital Disorders. Birth
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Vitaminas, grasas
esenciales y
macronutrientes
Larry H. Bernstein
C O N T E N I D O DE L C A P T U L O
O B J E T I V O S
Al completar este captulo, el laboratorista clnico Describir las interacciones frmaco-nutriente que
podr: influyen en el estado vitamnico.
Analizar la contribucin de las clases de nutrientes Delinear los procedimientos de laboratorio usados
individuales al metabolismo humano. en la evaluacin del estado vitamnico.
Describir el soporte nutricional teraputico por Establecer el papel del laboratorio en la evalua
vas enteral y parenteral. cin y el monitoreo nutricionales.
Enumerar los parmetros bioqumicos para moni- Enumerar las poblaciones en riesgo de desnutri
torear el estado nutricional. cin.
Describir las funciones bioqumicas de las vitaminas. Identificar los cambios proteicos en el plasma
Correlacionar alteraciones en los estados vita como resultado del estrs.
mnicos con circunstancias de aumento de los Describir algunas de las anormalidades electrolti
requerimientos metablicos, cambios fisiolgicos cas y de minerales relacionadas con NPT.
relacionados con la edad o trastornos patolgicos.
T E R M I N O S C L A V E
617
618 PARTE IV REAS DE ESPECIALIDAD DE LA QUMICA CLNICA
El nfasis actual en la nutricin y salud origin el aumento todo el nitrgeno no proteico excretado en la orina se deriva
de la importancia de la evaluacin nutricional. Los mdicos slo de la oxidacin de aminocidos libres, que representan
y el pblico por igual son ms conscientes de la manera 16% del contenido de nitrgeno. La calorimetra indirecta
en que la nutricin afecta tanto la salud como la curacin. mide la prdida neta del sustrato por oxidacin, sin importar
Los compuestos nutricionales de la dieta incluyen tanto los ciclos que ocurran a lo largo del proceso. La calorimetra
macronutrientes como micronutrientes. Los macronu- indirecta y el principio de Fick miden el consumo de oxge
trientes usados para la energa incluyen carbohidratos, no (VO,) y la produccin de dixido de carbono (VCO,). La
protenas y grasas. Los micronutrientes, requeridos por el calorimetra indirecta mide el consumo de oxgeno (VO,) y
cuerpo slo en concentraciones mnimas de miligramos el gradiente de 0 2 transpulmonar del intercambio de gas res
o menos, abarcan vitaminas, minerales y oligoelemen piratorio. Fick propuso medir el V 0 2 y CO, del intercambio
tos. En la primera parte de este captulo se analizan los de gas y el gradiente de 0 2 y CO, transpulmonar por carac
micronutrientes, incluyendo la bioqumica, la deficiencia, terizacin cardaca. En este modelo idealizado, se miden la
la toxicidad y los mtodos de anlisis. En el captulo 15, entrada de 0 2y la salida de C 0 2, en tanto el rendimiento
Oligoelementos, se estudian varios minerales (es decir, ele cardaco (RC) proporciona la tasa de flujo.
mentos o compuestos inorgnicos) y oligoelementos (p.
ej., hierro, cinc, cobre). En la segunda parte de este captu ENERGA DE COM BUSTIBLES
lo se analiza la evaluacin de los macronutrientes.
El cociente respiratorio (CR), definido como VCO/V'O,, es
El riesgo de la desnutricin est relacionado con com
la medida de la eficiencia respiratoria. El CR calorimtrico se
plicaciones inesperadas, como neumona, infeccin urina
encuentra entre 0.69 y 1.00. El gasto energtico que se mide
ria, sepsis y sndrome de respuesta inflamatoria sistmica por el VOz, un valor menor de 1.0, es combustin incom
(SRIS). Aunque es posible reconocer la desnutricin grave
pleta. El CR es importante para calcular los requerimientos
simplemente por prdida de peso extrema o importante, nutricionales al proporcionar apoyo nutricional asistido. El
prdida de la fuerza y prdida de la funcin, a menudo CR para grasas es de 0.7, en tanto que para carbohidratos
se pasan por alto grados moderados de desnutricin al
es de 1.0. Es necesario ponderar la ventaja de la administra
momento de la admisin. Por tanto, la confianza en las cin de grasa en comparacin con las fuentes energticas de
mediciones antropomtricas, a las que se les consideraba
carbohidratos. La grasa tiene una ventaja sobre los carbohi
indicadores estndares de desnutricin grave, fue reempla dratos porque es una fuente densa de caloras y se oxida de
zada por una combinacin de evaluacin global subjetiva manera eficiente, con base en un CR bajo. El efecto de las
y parmetros bioqumicos. Las mediciones bioqumicas caloras excesivas de carbohidratos es la produccin de C 0 2
tienen mayor contribucin en el monitoreo de la respuesta
en exceso, lo que conduce a hiperpnea, perjudicial para el
del paciente a los suplementos nutricionales. paciente con afeccin pulmonar. El lpido tiene una tasa de
administracin que est limitada a la tasa por su eliminacin.
REQUERIM IEN TOS ENERGTICOS La administracin excesiva de grasa es inmunosupresora.
La Organizacin Mundial de la Salud (OMS) define el reque
VITAMINAS
rimiento energtico de un individuo como: la cantidad de
captacin de energa que equilibrar el gasto de energa Las vitaminas tienen una amplia gama de funciones en
cuando el individuo tiene un tamao y composicin cor el tejido biolgico, donde funcionan como cofactores en
porales, as como un grado de actividad fsica, consistentes muchas reacciones enzimticas, de modo que esas enzi
con una buena salud a largo plazo .1 El cuerpo est en mas tienen baja actividad cataltica en las reacciones celu
equilibrio energtico cuando la captacin de energa est lares si no estn presentes las vitaminas. Estos compuestos
en equilibrio con el gasto energtico. El exceso de caloras se y sus precursores inactivos desde el punto de vista biol
almacena como depsito de grasa y se refleja en un aumento gico deben obtenerse parcialmente de fuentes alimenticias
del ndice de m asa corporal (IMC). Existe una fuerte relacin y, en algunos casos, por sntesis bacteriana. Cuando los
entre IMC excesivo, hipertensin y resistencia a la insulina. niveles celulares y de actividad de la vitamina de la dieta o
La inanicin conduce a un estado marsmico, con prdida de la absorcin intestinal son inadecuados, se le denomina
de grasa y protena somtica, lo que disminuye el IMC. El deficiencia vitam nica. El termino vitam ina tiene una base
traumatismo, el estrs y la sepsis elevan el gasto energti histrica en estados de deficiencia que fueron aliviados
co .24 Es posible determinar el gasto energtico por calorime por una ingesta alimenticia especfica. Los ejemplos ms
tra directa (calor generado), calorimetra indirecta (por la notables son escorbuto (vitamina C), mareos y consumo
medicin del consumo de oxgeno y la produccin de dixi de cal; raquitism o, vitamina D en los primeros aos de la
do de carbono) y mtodos de dilucin istopo, mediante el poca industrial; beriberi, alcoholismo y tiamina; pelagra,
uso de agua de doble etiquetado. niacina, ceguera nocturna, vitamina A; anemia megalo-
La calorimetra indirecta mide la oxidacin del sustrato blstica, cido flico, espina bfida; y anemia perniciosa
y el gasto de energa por la produccin de CO, a partir de la (con neuropata), vitamina Bp A los incrementos anor
medicin de las tasas de intercambio de gas respiratorio. El males del metabolismo que requieren aportes elevados de
mtodo supone que el CO, espirado es proporcional a la tasa uno de esos cofactores se les denomina insuficiencia vita
de respiracin. La suposicin depende de que el O, que des m nica o dependencia vitam nica, de acuerdo con el nivel de
aparece del aire inspirado se utilice exclusivamente para oxi aporte exigido para la funcin fisiolgica .5,6
daciones biolgicas, de modo que todo el COz espirado se Las variabilidades en la expresin clnica de las anor
derive de la combustin de sustratos. Adems, se asume que malidades vitamnicas se originan por diferencias en la
CAPTULO 31 VITAMINAS, GRASAS ESENCIALES Y MACRONUTRIENTES 619
causa especfica, el grado y la duracin de la insuficiencia disponible, son suficientes para satisfacer las necesidades
vitamnica; la presencia sim ultnea de las insuficiencias nutricionales de individuos sanos.5,6
nutricionales; y el aum ento de las dem andas m etablicas La inform acin sobre los requerim ientos de ingesta
im puestas por condiciones com o embarazo, infeccin y dietticos necesarios para evitar sntom as de deficiencia y
cncer. Por lo general, los sntom as clnicos de las defi m antener funciones especificas define los requerim ientos
ciencias vitam nicas son inespecficos en las fases iniciales dietticos de esas vitaminas. Los requerim ientos dietti
y en los estados leves de deficiencia crnica. A m enudo cos recom endados se establecen para satisfacer las n ece
se requiere una com binacin de antecedentes dietticos, sidades de 9 7 .5 % de la poblacin. Sin embargo, en ciertos
exam en fsico y m ediciones de laboratorio para diagnos casos, son m ayores si el nutriente se absorbe de manera
ticar deficiencia vitamnica. El m etabolism o vitam nico es deficiente o se utiliza en forma insuficiente.7
com plejo, y son frecuentes los suplem entos de vitaminas La determ inacin qumica de los estados vitam nicos
de los alim entos. N o es raro encontrar toxicidades vitam hum anos se realiza de las siguientes maneras:
nicas por el uso inadecuado de suplem entos vitam nicos.
M edicin de los cofactores o precursores activos en los
Por sim plicidad, las vitam inas de estructura qumica
fluidos b iolgicos o clulas sanguneas.
diferente se clasifican en solubles en agua y solubles en
M edicin de los m etabolitos urinarios de la vitamina.
grasa. Las vitam inas solubles en grasa incluyen la A, D, E y
M edicin de una funcin bioqum ica en la que se
K. Las vitam inas solubles en agua constan de las vitam inas
requiere la vitam ina (p. ej., actividad enzim tica), con
del com plejo B (tiamina, riboflavina, niacina, vitam inas EL
o sin adicin in vitro de la forma cofactor.
y B12, biotina, folato y vitamina C). Las vitam inas solubles
M edicin de la excrecin urinaria de la vitamina o m eta
en agua se excretan con rapidez por la orina y es m enos
bolitos despus de una carga de prueba de la vitamina.
probable que se acumulen en concentraciones txicas en el
M edicin de los m etabolitos urinarios de una sustan
cuerpo en com paracin con las vitam inas solu b les en
cia, el m etabolism o del que requiere la vitam ina des
grasa. En el cuadro 31-1 se m uestran las vitaminas, clasi
pus de la adm inistracin de una carga de prueba de la
ficadas com o solubles en grasa o en agua, y los sntom as
sustancia.
que suelen observarse en estados de deficiencia.7
La investigacin de la deficiencia diettica de vitaminas La reduccin de las concentraciones sricas de una
( hipovitaminosis) se sostiene sobre todo por el con ocim ien vitam ina no siem pre indica una deficiencia que interrum
to de las fuentes y prcticas dietticas que producen in ges pe la funcin celular. Por el contrario, los valores dentro
ta o absorcin inadecuada. Los requerim ientos dietticos del intervalo de referencia no siem pre reflejan funcin
recom endados se definen por el Food and Nutrition Board adecuada. La interpretacin de los valores del laboratorio
de Estados U nidos com o valores de ingesta de nutrien deben realizarse con el conocim iento de la bioqum ica y
tes esenciales que, con base en el conocim iento cientfico fisiologa de las vitam inas.7'9
trado que las dosis elevadas tengan beneficios a la salud. El lism o seos y, jun to con la horm ona tiroidea, estim ula el
RDR es de 10 mg/da para hombres adultos y de 8 mg/da hueso para aumentar la m ovilizacin del calcio y fosfato.
para mujeres adultas.12 La forma de distribucin ms amplia El l,2 5 ( O H ) ,D 3 tiene un efecto proapopttico im portan
y con mayor actividad biolgica de vitamina E es el alfa-toco- te, que acta a travs de un sistem a horm onal de la vita
ferol, que es la forma que se mide de manera habitual en el m ina D, que depende de la u nin con el ligando activo a
laboratorio a travs de m todos de HPLC. un receptor de la vitamina D. Esto condujo a desarrollos
del descubrim iento de frmacos im portantes, en los que
Vitam ina D se reduce al m xim o la liberacin del calcio y fosfato, y se
La vitamina D se refiere a un grupo de m etabolitos rela m odulan los efectos antiinflamatorios y proliferativos de
cionados que se utilizan para la form acin apropiada del los D-anlogos.
esqueleto y la hom eostasis mineral. La exp osicin de la En los climas del norte de la U nin Americana, resulta
piel a la luz solar (luz ultravioleta) cataliza la form acin difcil recibir exposicin ultravioleta suficiente para satis
de colecalciferol a partir de 7-dihidrocolesterol. La otra facer por com pleto los requerimientos m nim os (2 h/da).
forma principal de vitamina D es el ergocalciferol (vitam i Las fuentes dietticas principales de vitamina D incluye ali
na D ,). La vitamina D se presenta en los alim entos com o m entos radiados y leche preparada de manera comercial.
colecalciferol o ergocalciferol. El m etabolito ms activo de Cantidades pequeas se encuentran en la mantequilla, la
la vitamina D es l,2 5 (O H )2 D3. ste estim ula la absorcin yema de huevos, el hgado, las sardinas, el arenque, el atn
intestinal de calcio y fosfato para el crecim iento y m etabo y el salmn. La RDR de la vitamina D para adultos es de
U n nio de cuatro aos de edad es llevado a una clnica CUADRO 31-1.1 DE ESTUDIO DE CASO.
infantil de Alaska por el Sistema de Servicios Sociales RESULTADOS DE LABORATORIO
de dicho estado. El nio viva en una casa de adop
PRUEBA RESULTADO RANGO DE
cin. C on pocas salidas al aire libre, su dieta consista
REFERENCIA
en escasos vegetales verdes, productos lcteos o carnes.
C om enz a caminar a los 14 meses; en sus piernas se Hgb 14.1 g/dl 12.0 a 18.0 g/dl
observ cierto arqueamiento. Hay ttanos o con vu lsio
Hct 46% 34.0 a 52.0%
nes. Es pequeo para su edad: 1 2 .2 kg, con 9 0 .6 cm
de altura en el tercer percentil. En el cuadro 31-1.1 de WBC 8.4 x 103/|xL 4.0 a 11.0 (cL
estudio de caso se m uestran los resultados de las prue Diferencial normalI
bas de laboratorio. Urianlisis
Gravedad 1.010 1.003 a 1.030
Preguntas especfica
1. Es probable que este trastorno se relacione con: PH 6.8 5.0 a 9.0
a ) Enfermedad de W ilson.
Glucosa Negativo Negativo
b) Enfermedad de orina de jarabe de arce.
c) Galactosemia y galactosuria. Protena Negativo Negativo
d ) Alguna forma de trastorno de m etabolism o m ine Microscpico Negativo Negativo
ral o vitam nico, quiz relacionado con alguna
Examen de Negativo Negativo
deficiencia de vitamina D.
aminocidos
2. El agente causante de esta enfermedad es: Suero
a) Ingesta inadecuada de lpidos y cidos grasos.
b) Enfermedad viral relacionada con el rinovirus. Na 140 meq/L 132 a 143 meq/L
c) Anormalidad relacionada con la vi tamina D o inges K 4.0 meq/L 3.2 a 5.7 meq/L
ta inadecuada o resistencia a la vitam ina D. Cl 101 meq/L 98 a 116 meq/L
d ) Ingesta inadecuada de azcar.
13 a 29 mg/dl
O
14.3 mg/dl
n
NJ
5 ug/da. Al absorberla en el intestino delgado, la vitami Una deficiencia evidente de vitamina K quiz conduzca a
na D requiere sales biliares para la absorcin. Se almacena u n episodio hem orrgico o se produce cuando se utilizan
en el hgado y se excreta por la bilis. La deficiencia grave en anticoagulantes, com o la warfina sdica.14-15
nios causa deficiencia para la calcificacin del cartlago de La determ inacin del tiem po de protrombina (veloci
la placa de crecimiento en la formacin metafisiaria sea, dad de coagulacin despus de la adicin de tromboplas-
lo que conduce al desarrollo de raquitismo. En adultos, la tina y calcio al plasma citratado) constituye un estupendo
deficiencia conduce a desmineralizacin de la matriz sea ndice de pertinencia de la protrombina. El tiem po de pro
en la rem odelacin, lo que ocasiona osteomalacia. Se infor trombina se prolonga en presencia de deficiencia de vita
man concentraciones bajas de vitamina D con el uso de fr m ina K y de enfermedades hepticas caracterizadas por
m acos anticonvulsivos y en presencia de enfermedad del reduccin de la sntesis de protrombina. La deficiencia de
intestino delgado, insuficiencia renal crnica, enfermedad la vitamina K ocasiona, tambin, prolongacin del tiem po
hepatobiliar, insuficiencia pancretica e hipoparatiroidis parcial de tromboplastina, pero el tiem po de trombina se
mo. La vitamina D llega a ser txica, en especial en nios. encuentra dentro del intervalo de referencia.
En el hipoparatiroidismo y la hipofosfatemia, y durante el Por lo general, en adultos no se observa toxicidad de
embarazo existen concentraciones elevadas de vitamina D. vitamina K. En lactantes, las dosis grandes tal vez ocasio
El exceso de esta vitamina produce hipercalcemia e hiper- nen hiperbilirrubinemia. El RDR de vitamina K en adultos
calciuria, que tal vez conduzcan a depsitos de calcio en es de 8 0 ug/da para hombres y de 6 5 ug/da para m ujeres.16
tejido blando, y daos renal y cardaco irreversibles.10 En la mayor parte de los laboratorios, no se analiza la vita
Es im portante medir la forma m etablica de vitamina D mina K. Sin embargo, el tiempo de protrombina se utiliza
( 1 ,2 5 (O H ), D 3), la horm ona paratiroidea y las concentra com o indicador funcional del estado de vitamina K.12 El
ciones de calcio al diagnosticar hiperparatiroidismo pri tiem po normal de protrombina es de 11 a 15 segundos, lo
mario y diferentes tipos de raquitismo, cuando se vigila a que vara de acuerdo con el mtodo. Con la deficiencia de
pacientes con insuficiencia renal crnica y al m om ento de vitamina K, el tiem po de protrombina se prolonga. Varios
evaluar a pacientes som etidos a terapia con l,2 5 (O H )2D3. suplem entos herbolarios (p. ej., ajo, gingko y ginseng)
D os formas son las m edidas ms a m enudo en el labora refuerzan los efectos de la warfarina sdica o interactan
torio clnico: 2 5 (O H )D 3 y l,2 5 (O H )2D3. La 2 5 (O H )D 3 es con las plaquetas, lo que aumenta el riesgo de hemorragia.
la principal forma circulante de vitamina D. Su m edicin
constituye un b uen indicador del estado nutricional de Vitaminas solubles en agua
vitamina D, as com o de intoxicacin por vitamina D. El
rango de referencia es de 2 2 a 4 2 ng/ml para 2 5 (O H )D 3 Tiam ina
y 3 0 a 5 3 pg/ml para l,2 5 (O H ),D r La cuanticacin de La tiamina (vitam ina B3) acta com o coenzim a en las
los m etabolitos de la vitamina D debe realizarse a travs reacciones de descarboxilacin en las vas principales de
del uso de radioinm unoanlisis (RIA) o HPLC jun to con los carbohidratos y en el m etabolism o de am inocidos
u n in com petitiva con pro tena.13 de cadena ramificada. Se absorbe con rapidez de los ali
m entos en el intestino delgado y se excreta por la orina.
Vitam ina K La afeccin clnica relacionada con la deficiencia de la tia
La vitam ina K (nom bre derivado del alemn, koagulation ) m ina es el beriberi. A unque por lo general se localiza en
es el grupo de sustancias esenciales para la form acin pases subdesarrollados del m undo, el beriberi se presenta
de protrombina y cuando m enos otras cinco protenas de en Estados U nidos entre personas con alcoholism o crni
coagulacin, que incluyen los factores VII, IX y X, y las co. Al parecer la ingesta reducida, la absorcin deficiente y
protenas C y S. Los com puestos que contienen quinona el increm ento de los requerim ientos participan en el desa
representan una descripcin genrica para la m enadiona rrollo de deficiencia de la tiamina en personas con alco
y los derivados que exhiben esta actividad. La vitam ina K holism o. En adultos, el RDR de tiamina es de 1.5 mg/da
ayuda a convertir las formas precursoras de estas prote para hom bres y de 1.1 mg/da para m ujeres.17 La actividad
nas de coagulacin a las formas funcionales. Esta trans funcional de la tiamina se m ide de mejor manera a travs
form acin ocurre en el hgado. La vitam ina K diettica se de la actividad de la eritrocito transcetolasa (ETC), antes y
absorbe sobre todo en el leon terminal y, posiblem ente, en despus de la adicin de pirofosfato de tiamina (PFT). Se
el colon. La vitamina K se sintetiza por bacterias intesti produce deficiencia de tiamina cuando el increm ento en la
nales. Esta sntesis proporciona 5 0 % del requerim iento de actividad despus de la adicin de PFT es mayor de 25% .
vitamina K. Las fuentes dietticas principales son la col, la
coliflor, la espinaca y otros vegetales frondosos, la carne de Riboflavina
cerdo, el hgado, las sem illas de soya y los aceites vegeta La riboflavina (vitam ina B2) funciona de manera primor
les. A la deficiencia de la vitamina K en una dieta sencilla dial com o com ponente de dos coenzimas: m ononucletido
se le considera rara en nios y adultos saludables. de flavina y adenina dinucletido de flavina (ADF). Estas
La deficiencia de la vitamina K se origina por terapia con dos coenzim as catalizan varias reacciones de oxidacin-
antibiticos, que se debe a la dism inucin en la sntesis de reduccin. La riboflavina diettica se absorbe en el intesti
la vitamina por bacterias intestinales. Cuando se utilizan no delgado. Los depsitos corporales de una persona con
los antagonistas de la vitamina K, com o la warfina sdica nutricin correcta son adecuados para prevenir deficiencia
para la terapia anticoagulante, los factores anticoagulan de riboflavina durante cinco m eses. El exceso de ribofla
tes II, VII, IX y X se sintetizan pero no son funcionales. vina se secreta por la orina y no tiene toxicidad conocida.
CAPTULO 31 VITAMINAS, GRASAS ESENCIALES Y MACRONUTRIENTES 623
Entre los alim entos altos en riboflavina se encuentran la mujeres.20 Los valores sanguneos y urinarios son tiles en la
leche, el hgado, los huevos, la carne y los vegetales fron evaluacin del estado nutricional de niacina.
dosos. La deficiencia de riboflavina se presenta con otras
deficiencias nutricionales, alcoholism o y diarrea crnica
y absorcin deficiente. Ciertos frmacos antagonizan la Folato
accin o el m etabolism o de la riboflavina, que incluyen la
El folato es el trm ino genrico para los com ponentes con
fenotiazina, los anticonceptivos orales y los antidepresivos
caractersticas nutricionales y qum icas similares al cido
tricclicos.18 En adultos, el RDR de riboflavina es de 1.7
flico. En el aspecto m etablico, el folato funciona com o
mg/da para hombres y de 1.3 mg/da para m ujeres.18 La
coenzim as im plicadas en varias reacciones de transferencia
reduccin de la actividad de la glutatin reductasa mayor
de u n carbn. El folato y la vitamina Bp se relacionan de
de 4 0 % indica deficiencia.
manera estrecha desde el punto de vista m etablico. Los
cam bios hem atolgicos que se originan por la deficiencia
P iridoxina de cualquier vitam ina son indistinguibles. El folato de
La piridoxina (vitamina B6) es ubicua. Consta de tres com la dieta se absorbe en el yeyuno, y el exceso se secreta
puestos relacionados: piridoxina, que se localiza sobre por la orina y las heces. Adems, se sintetizan cantidades
todo en plantas; y piridoxal y piridoxam ina, que estn grandes de folato por bacterias en el colon. Los com pues
presentes en productos de origen animal. Las principales tos con actividad m etablica a los que por lo general se les
fuentes dietticas de vitamina B,. son la carne, el pollo, el con oce com o folatos son anlogos estructurales del cido
pescado, las papas y los vegetales. Los productos lcteos y pteroilglutm ico (cido flico). Los folatos alim enticios
los granos contribuyen en m enor cantidad. La vitamina B. se encuentran sobre todo en vegetales frondosos y verdes,
se absorbe con rapidez del tracto intestinal y se excreta por frutas, carnes orgnicas y levadura. Los alim entos hervidos
la orina en forma de m etabolitos.19 Rara vez ocurre defi y el uso de grandes cantidades de agua ocasionan la des
ciencia de vitamina B6 de manera aislada; se observa ms truccin del folato. En Estados U nidos, la dieta prom edio
a m enudo en pacientes con deficiencia de varias vitaminas tal vez sea inadecuada en folato para adolescentes y m uje
B. Los pacientes con mayor riesgo de deficiencia son aque res embarazadas o en lactancia.21
llos que padecen uremia, enfermedad heptica, sndrom es El sntom a clnico principal de deficiencia de folato
de absorcin, m alignidades o alcoholism o crnico. La es la anem ia m egaloblstica. Los ndices qum icos de la
ingesta elevada de protenas aumenta los requerim ientos deficiencia son, en orden de ocurrencia, folato srico bajo,
de vitamina B6. La deficiencia est relacionada con hiper- hipersegm entacin de neutrfilos, cido form im inoglu-
hom ocistena. La vitamina B6 tiene baja toxicidad debido tm ico (FIGLU) (un m etabolito de histidina que se acu
a su naturaleza hidrosoluble. Sin embargo, las dosis extre m ula ante la ausencia de folato) urinario elevado, folato
m adam ente elevadas quiz produzcan neuropata perif eritrocltico bajo, m acroovalocitosis, m dula m egaloblsti
rica. En adultos, el RDR de vitamina Bg es de 2 .0 mg/da ca y anemia. Las concentraciones de folato srico, aunque
para hombres y de 1.6 mg/da para m ujeres.19 constituyen un ndice temprano de deficiencia, con fre
cuencia son bajas a pesar de depsitos tisulares normales.
N iacina D ebido a que la m ayor parte del alm acenam iento de folato
El requerimiento de niacina en seres hum anos se cubre, ocurre despus de la fase dependiente de la vitamina Bp ,
hasta cierto grado, por la conversin de triptfano dietti es posible que el folato del eritrocito tambin dism inuya
co a niacina. La niacina es el trmino genrico tanto para en presencia de deficiencia de vitam ina Bp o de folato.
el cido nicotnico com o para la nicotinamida. La niacina A pesar de esta coincidencia, se acepta la concentracin
funciona com o com ponente de las dos coenzim as (NAD y del folato del eritrocito com o el mejor ndice de laborato
NADP), que son necesarias para m uchos procesos m etab rio de deficiencia de folato.22 La mayora de los m dicos
licos, com o la respiracin tisular, el m etabolism o de lpidos, solicitan m edicin de concentraciones de folato tanto en
el m etabolism o de cidos grasos y la gluclisis. La reduc suero com o en eritrocitos porque los valores sricos indi
cin de la coenzim a produce dihidronicotinam ida (NADE! can depsitos ms aproxim ados a las concentraciones cir
o NADPH), que posee una fuerte absorcin a 3 4 0 nm, una culantes de folato y eritrocito. En la deficiencia de folato
caracterstica utilizada de manera amplia en anlisis de las ocurre elevacin de la hom ocistena en suero y orina.22
enzim as dependientes del nucletido de piridina. Por lo general, se m ide la hom ocistena total, que consti
La niacina se absorbe en el intestino delgado, en tanto el tuye la sum a de todas las especies de hom ocistena, tanto
exceso se excreta en forma de metabolitos por la orina.20 La las formas libres com o las unidas con p roten as.23
pelagra, el sndrome clnico ocasionado por deficiencia de El requerimiento de folato aumenta durante el emba
niacina, est relacionado con diarrea, demencia, dermatitis razo y, en especial, durante la lactancia. En esta ltima, el
y muerte. La deficiencia de niacina llega a originarse por incremento se debe, en parte, por la presencia de enlaces de
alcoholismo. Para disminuir las concentraciones de lpidos, folato de alta afinidad en la leche. Los suplem entos dietti
se administran de manera teraputica dosis farmacolgicas cos de folato en mujeres embarazadas reducen la incidencia
de cido nicotnico. La toxicidad de la niacina es baja. Sin de defectos del tubo neural fetal. Otros casos de aumen
embargo, cuando se ingieren dosis elevadas, com o ocurre a to del requerimiento de folato incluyen anemia hemoltica,
m enudo en terapias que dism inuyen lpidos, tal vez aparez deficiencia de hierro, nacim iento prematuro y m ielom a
can enrojecimiento de la piel y vasodilatacin. En adultos, mltiple. Los pacientes que reciben tratamiento de dilisis
el RDR es de 19 mg/da para hombres y de 15 mg/da para pierden folato con rapidez. Entre las afecciones clnicas22-24
624 PARTE IV REAS DE ESPECIALIDAD DE LA QUMICA CLNICA
relacionadas con deficiencia de folato se encuentran anemia obtienen de productos de origen animal (p. ej., carne, huevos
megaloblstica, alcoholism o, sndrom e de malabsorcin, y leche) y algunos vegetales. Por tanto, es probable que las
carcinoma, enfermedad heptica, hem odilisis crnica, y dietas vegetarianas totales originen deficiencias de vitamina
anemia hem oltica y sideroblstica. Ciertos anticonvulsivos Bp. La vitamina Bp proveniente de los animales se produce
y otros frmacos que interfieren con el m etabolismo del por sntesis intestinal microbiana. La dieta diaria promedio
folato son la sulfasalazina, isoniazida y cicloserina. La defi contiene 3 a 3 0 pg de vitamina Bp, de la que se absorben 1 a
ciencia de folato de origen diettico suele ocurrir en perso 5 pg. La frecuencia de la deficiencia diettica se incrementa
nas mayores. La terapia con fenitona acelera la excrecin con la edad, con una ocurrencia de ms de 0.5% en personas
de folato e interfiere con la absorcin y el m etabolismo del mayores de 6 0 aos de edad,24 aunque los sntomas origina
m ismo. El alcohol interfiere con la circulacin enterohep- dos por deficiencia en la dieta son raros.
tica del folato, y el metotrexato, un agente quimoterapu- La mayor parte de la absorcin de vitamina B]2 se rea
tico, inhibe la enzima dihidrofolato reductasa. Se observan liza a travs de un com plejo con el factor intrnseco, una
concentraciones bajas de folato srico con el uso de anti protena secretada por las clulas parietales gstricas. Este
conceptivos orales. com plejo factor intrnseco B12 se u ne con receptores ilea-
N o existen casos conocidos de toxicidad del folato. les especficos. Los anticuerpos bloqueadores del factor
En adultos, el RDR es de 2 0 0 pg/da para hom bres y de intrnseco previenen la unin de la vitamina B12 con el fac
1 8 0 pg/da para mujeres. Los rangos de referencia son los tor intrnseco, en tanto los anticuerpos de u n i n se com
siguientes: binan con el factor intrnseco libre o con el com plejo factor
intrnseco-B12, lo que evita la adhesin del com plejo a los
Suero: 3 a 16 ng/ml
receptores ileales y la captacin intestinal de la vitamina.
Eritrocito: 1 3 0 a 6 3 0 ng/ml
Adems, se ha identificado a los anticuerpos celulares
Reservas deficientes: m enos de 1 4 0 ng/ml
parietales com o causa de anemia perniciosa. D espus de la
Es posible m edir los valores de folato en suero a travs liberacin a partir del com plejo del factor intrnseco den
de u n exam en m icrobiolgico en el que se em plea Lacto- tro de la clula m ucosa, la vitamina B12 circula en el plasma
bacillus casei, o un anlisis de u n in con protena com pe unida a protenas de transporte especficas, y se deposita
titivo para determinar las concentraciones en suero y en en el hgado, la m dula sea y otros tejidos. Existe circula
eritrocito. Cuando se desarrolla deficiencia de folato, en pri cin enteroheptica im portante de vitamina Bp . El plasma
mer lugar dism inuyen los valores sricos, seguido por contiene am bos tipos de protenas de transporte, transco-
reduccin del folato de eritrocito y, al final, m anifestacin balaminas y las tres formas de vitamina B12 (hidroxicobala-
hem atolgica.24 La m edicin de los niveles sricos y de m ina, m etilcobalam ina y desoxiadenosilcobalam ina).
eritrocito es til porque los valores en suero indican reser En la prueba de Schilling, el paciente recibe una dosis
vas ms aproximadas de las concentraciones circulantes oral pequea de vitamina B12 radiomarcada. La B12 parente-
de folato y eritrocito.22-24 ral se administra de manera sim ultnea para saturar sitios
El suero contiene protenas de u n in endgena que lle de unin. El suero y la orina se recolectan a intervalos, y
gan a unirse al folato y producir m ediciones bajas falsas se m ide la Bp marcada en las muestras. Los pacientes que
de la concentracin de folato srico. Aunque la m edi no absorben la vitamina Bp (que por lo general constituye
cin de la concentracin de folato en glbulos rojos tiene una deficiencia del factor intrnseco, com o en la anemia
ventajas sobre el anlisis en suero para el diagnstico de perniciosa) no lo hacen tampoco con la Bp marcada, por lo
anem ia megaloblstica, es probable que se originen pro que presentan concentraciones bajas en sangre y orina.
blem as analticos a partir de las distintas formas de folato En la actualidad, el trmino anemia perniciosa se apli
en eritrocitos. El folato en suero est presente casi exclusi ca ms a m enudo a la deficiencia de vitam ina Bp debida
vam ente en forma de m onoglutam ato. Sin embargo, en los a la ausencia del factor intrnseco. Los anticuerpos para
glbulos rojos, se encuentra en forma de poliglutam ato y el factor intrnseco y las clulas parietales son frecuentes
com o com plejos de peso m olecular elevad o.24 en pacientes con anemia perniciosa, sus parientes sanos y
pacientes con otros trastornos autoinm unitarios. En oca
Vitam ina B n siones aparece deficiencia de Bp en vegetarianos estrictos
La vitamina Bp (cobalamina) se refiere a un grupo grande de com o resultado de la deficiencia diettica. Adems, ocurre
com puestos que contienen cobalto. La absorcin intestinal prdida de Bp en individuos infectados con tenia de p es
de vitamina B12 tiene lugar en el leon, y est mediada por una cado o a causa de enfermedades de absorcin deficiente,
protena de unin nica denominada factor intrnseco, que se com o esprue o enfermedad celiaca. Se observan con cen
secreta por el estmago. La vitamina Bp participa com o coen traciones bajas de vitamina Bp en presencia de deficiencia
zima en las reacciones enzimticas necesarias para la hema de folato, y es posible enmascarar dicha deficiencia a tra
topoyesis y el metabolismo de cidos grasos. El exceso de vs de dosis grandes de folato. N o hay inform es de toxici
vitamina Bp se secreta en la orina. La vitamina B ,, compren dad de la vitamina Bp . El RDR de vitam ina Bp en adultos
de un anillo de cortina (que contiene pirrles similares a la es de 2 ug/da. Los m todos de anlisis de la Bp consisten
porfirina) unido a un tomo de cobalto central. Los diferen en exam en m icrobiolgico con el uso de radioinm unoan-
tes com puestos corrinoides, o cobalaminas, se distinguen por lisis de u n in con protena com petitiva con Lactobacillus
el sustituyem e ligado al cobalto. Las formas activas del cofac leichmanii o un inm unoanlisis enzim tico.
tor de la vitamina B12 son la metilcobalamina y la desoxia- La deficiencia de la vitamina Bp causa dos trastornos
denosilcobalamina. Las fuentes dietticas de vitamina Bp se principales: anemia megaloblstica (anemia perniciosa)
CAPTULO 31 VITAMINAS, GRASAS ESENCIALES Y MACRONUTRIENTES 625
Una mujer de 6 5 aos de edad ingresa al hospital con CUADRO 31-2.1 DE ESTUDIO DE CASO.
leve insuficiencia cardiaca congestiva. En la clnica RESULTADOS DE LABORATORIO
familiar, inform entum ecim iento, horm igueo en las
pantorrillas y los pies y prdida de peso. En el exam en PRUEBA RESULTADO RANGO DE
1. Cul de las siguientes es una forma con actividad CI 102 meq/L 96 a 106 meq/L
biolgica de cobalamina en plasma? co2 26 mg/dl 22 a 33 mg/dl
a ) Cianocobalamina.
Ca 9.7 mg/dl 8.4 a 10.3 mg/dl
b ) Hidrocobalamina.
c) D esoxiadenosilcobalam ina. Glucosa 100 mg/dl 70 a 110 mg/dl
) Acuocobalamina. US 14 mg/dl 10 a 20 mg/dl
e) Transcobalamina.
Creatina 1.0 mg/dl 0.4 a 1.4 mg/dl
2. Dnde se produce el factor intrnsico en el cuerpo?
a) Estmago. B12 srica 130 pg/ml 180 a 900 pg/ml
b) Esfago. Folato srico 6 ng/ml 5 a 12 ng/ml
c) Intestino delgado.
Folato RBC 105 ng/ml 200 a 700 ng/ml
d) Intestino grueso.
3. Cul es la protena de u nin para la vitamina B,,?
a ) Protena de u nin con retinol.
b) Factor extrnseco.
c) Corticotropina.
d ) Transcobalamina II.
4. Enumere sustancias alim enticias que contienen vita
m ina Bir
5. Enumere sustancias alimenticias que contienen folato.
y una afeccin neurolgica denominada trastorno de sis ner m ediciones especiales para eliminar la interferencia
temas combinados.24 Las m anifestaciones neurolgicas son causada por otros ligadores protenicos no especficos de la
variables y quiz sutiles. Por esta razn, se debe conside vitamina B12. Existen varios anlisis no radioisotpicos de
rar la deficiencia de vitamina B12 com o causa de cualquier vitamina B12 para uso rutinario en el laboratorio.
anemia macroctica o afeccin neurolgica inexplicada, en
especial en personas de edad avanzada. Es posible utilizar Biotina
la vitamina Bp srica en la valoracin inicial.24 Los valores La biotina es una coenzim a para varias enzimas que trans
de cido m etilm alnico tal vez sean ms definitivos debido portan unidades de carboxilo en tejido, y desempea una
a que el lm ite inferior de referencia es incierto. Por lo gene funcin integral en la gluconeognesis, lipognesis y sn
ral, los pacientes con anemia perniciosa padecen gastritis tesis de cidos grasos. La biotina diettica se absorbe en el
atrfica y muestran aumento en la incidencia de carcinoma intestino delgado, pero tambin se sintetiza en el intestino
gstrico. El rango de referencia para la vitamina B12 es de por bacterias. Varios alimentos contienen biotina, aunque
1 1 0 a 8 0 0 pg/ml.24,25 Los m todos ms frecuentes para la ninguno es demasiado abundante en ella (hasta 2 0 u g/100
determ inacin de la vitamina B12 son los radioinmunoan- g). La ingesta diettica, baja en el perodo neonatal, aumen
lisis de u n in con protena competitiva, que se basan en el ta a medida que los recin nacidos pasan del calostro a la
principio de que la vitamina B12 liberada de las protenas leche madura de pecho. La deficiencia de biotina se produ
de unin endgena se pueden medir por su com petencia ce por ingestin de cantidades grandes de avidina, encon
con B12 comarcada para una cantidad limitada de protena trada en las claras de huevo crudo, que se unen a la biotina.
de u nin especfica. Las protenas de u nin que suelen uti Se observa deficiencia de biotina en pacientes que reciben
lizarse son factores intrnsecos de animales. Se deben obte- nutricin parenteral a largo plazo, y en lactantes con defec
626 PARTE IV REAS DE ESPECIALIDAD DE LA QUMICA CLNICA
tos genticos de las enzimas carboxilasa y biotinidasa. El togulnico, y est sujeto a interferencia de am inocidos
RDR de la biotina no est establecido; sin embargo, se reco y tiosulfatos. La HPLC proporciona mayor sensibilidad y
m ienda un rango provisional de 3 0 a 1 0 0 pg/da.26 En el especificidad. El rango de referencia para el cido ascrbi
entorno clnico, rara vez se m iden los valores de biotina.26 co es de 0 .4 a 0 .6 mg/dl.28
CUADRO 31-2. ACCIONES DE FRMACOS Y Los cidos grasos esenciales que se describen a conti
ANTICONCEPTIVOS ORALES EN LAS VITAMINAS nuacin son los cidos grasos poliinsaturados y sus deri
vados. Los AG poliinsaturados pertenecen a las familias
Frmaco o nutriente
om ega-6 (to) y om ega-3 (co3).30,31 Los AG om ega-3 son
Piridoxina: antagonizada por isoniazida, esteroides, antiinflam atorios y est dem ostrado que son benficos en
penicilamina frmulas entrales especiales para regular el sndrom e de
respuesta inflamatoria sistmica (SRIS). Los AG omega-6 son
Riboflavina: antagonizada por fenotiazinas, algunos
antibiticos
proinflamatorios. Actan a travs de las rutas del eicosanoi-
de; los AG co3 afectan la adhesividad de las plaquetas.32,33
Folato: antogonizado por fenitona, alcohol, Los AG om ega-3 forman prostaglandinas y leucotrienos
metotrexato, trimetoprim (en particular, PG3 y LT5), que son conocidos por redu
Ascorbato: antagonizado por (incremento en la cir la inflam acin e inm unosupresin, en tanto los cidos
excrecin) aspirina, barbituratos, hidantonas grasos cd6 producen PG2y LT4, que inducen inflam acin e
inm unosupresin. Es posible que los AG poliinsaturados
Exceso de ascorbato: interfiere con las acciones de
sean atacados por radicales libres y oxidados en perxidos
cido aminosaliclico, antidepresivos tricclicos,
lipideos. En la actualidad, se encuentra bajo investigacin
anticoagulantes; tal vez cause "escorbuto de rebote"
la funcin de los AG en la progresin de la aterosclerosis
y sndrome de abstinencia
y la esteatosis no alcohlica, co n u n v n cu lo p o ten cia l
Los agentes anticonceptivos orales causan co n la diabetes tipo 2 a travs de la FNT-a. El com plem en
Aum ento de vitamina A srica, PUR to de co3/ co6 en todo el cuerpo se refleja en la fluidez
m em branosa.33
Disminucin de los requerimientos de las vitaminas K y C
La m edicin de cidos grasos esenciales se realiza a tra
Disminucin de los ndices del estado de vitamina B6 vs de cromatografa de gases-espectrometra de masa (CG-
Reduccin del uso de riboflavina EM). Debido a las enormes mejoras en la tecnologa, la
proporcin trieno:tetreno normal se redujo de 0 .4 a 0.02.
Incremento en la ruta del triptfano de niacina En el cuadro 31-3 se muestra la com posicin de los ci
Disminucin de la induccin de la deficiencia de tiamina dos grasos esenciales de las clulas plasmticas y rojas. La
proporcin trieno:tetraeno baja m ide una deficiencia rela
Reduccin del folato srico (dependiente del ciclo-da)
tiva de AGco3. En la enfermedad de Crohn, ocurre deficien
Disminucin de la induccin de la deficiencia de cia absoluta de AG, pero se observa insuficiencia relativa
folato cervical con una ingesta desequilibrada de carbohidratos y de ci
dos grasos poliinsaturados (AGPI), ct3 en particular.
las causas secundarias, com o los problem as relacionados
con las necesidades nutritivas, que incluyen absorcin
deficiente, uso ineficiente, dao en el transporte, aum ento CUADRO 31-3. V A LO R ES DE R EFER EN C IA
de los requerim ientos y excrecin excesiva de nutrientes. M EDIOS PARA LO S PO RCEN TAJES DE C ID O S
Adems, los frmacos y anticonceptivos orales tienen GRASOS C LA V E EN P LA SM A Y G L B U LO S
im pacto en el m etabolism o de las vitaminas. En el cuadro ROJOS (GR )3_________________ ________________ __________
3 1 -2 se resum en las acciones de los anticonceptivos orales
CIDO GRASO PLASMA GR
y de los frmacos en el m etabolism o de las vitaminas.
16:1 o>7 <2.1 <0.4
D ietas especiales 18:2co6 30 a 40 8 a 12
La calidad de protena en los alim entos de origen vegetal, 18:3o)3 0.3 a 1.5 0.5
sobre todo los granos de cereal, suele ser m enor que en d fa 6 8 a 14 7 a 25
aquellas protenas de origen animal. Cuando la m ezcla de
d fa3 >3 >5
protenas de origen vegetal se realiza de manera ju icio
sa, las com binaciones de alim entos protenicos de inferior 20:3w9/20:4u)6 <0.02 <0.01
calidad quiz proporcionen m ezclas de casi el m ism o valor
SFA <30 <35 a 40
nutricional que los alim entos de protena animal de alta
calidad.7-8 Por lo general, la ingesta de vitamina B |2 es baja MUFA <28 <14 a 20
en la m ayor parte de las dietas vegetarianas. o)6 40 a 55 30 a 35
o)3 2 a 4 5a 8
CID O S GRASO S ESENCIALES
AGPI 45 a 55 45 a 55
Los cidos grasos (AG) se clasifican de acuerdo con dos
Reimpreso con autorizacin de Siguel E, Deficiencies and abnormalities
caractersticas: of essential fats in gastrointestinal and coronary artery disease,
J Clin Ligand Assay, 2000;23[12]: 104-111.
Longitud de cadena (p. ej., cadena corta, media o larga). aLos valores de referencia no estn bien establecidos; dependen de los
N m ero de enlaces dobles (p. ej., saturados, m onoinsa- mtodos usados y de la poblacin de referencia. Los valores son
turados o poliinsaturados). aproximados para ilustrar las diferencias entre el plasma y los GR.
628 PARTE IV REAS DE ESPECIALIDAD DE LA QUMICA CLNICA
por la prdida de peso. Varios m eses despus de la ciru Albm ina 3.4 g/dl 3.5 a 5 g/dl
ga, se le practic una laparotoma, en la que se dem os
Prealbmina 15 mg/dl 18 a 40 mg/dl
tr que el tum or carcinoide no se elim in por completo;
se extirp otra parte del intestino delgado debido a las Sodio 139 mmol/L 136 a 145 mmol/L
adhesiones obstructivas. El hom bre se recuper de la Potasio 3.7 mmol/L 3.5 a 5 mmol/L
segunda ciruga y se interrum pi la alim entacin con
Cloruro 101 mmol/L 99 a 109 ni mol/L
sonda. Regres a la clnica 1 8 m eses despus de la pri
mera ciruga un poco plido y m anifestando problemas Bicarbonato 23 mmol/L 22 a 28 mmol/L
para m antener el peso. En la evaluacin de laboratorio Calcio 8.6 mg/dl 8.5 a 10.5 mg/dl
se revel anem ia macroctica hipocrm ica leve y fun
Magnesio 1.7 mg/dl 1.5 a 2.5 mg/dl
ciones renal y heptica normales. La muestra de heces
fue negativa para ova, parsitos y patgenos entricos. 3 mg/dl 2.8 a 4 mg/dl
Se le reingres para som eterlo a reem plazo electroltico Tiempo de 17 seg
y de lquido intravenoso. protrombina
Ferritina 22 ng/ml 20 a 250 ng/ml
Preguntas
Vitamina A 207 |xg/L 300 a 800 mg/L
1. Cul es la evidencia bioqum ica existente para la
Vitamina D 6 ng/ml 30 a 53 ng/ml
m alabsorcin de grasas?
Vitamina E 2 mg/L 5 a 18 mg/L
2. Qu parmetros nutricionales se veran afectados
por la m alabsorcin de grasas? Vitamina C 0.4 mg/dl 0.4 a 0.6 mg/dl
Vitamina B12 100 pg/ml 110 a 800 pg/ml
3. Identifique las vitaminas solubles en grasa.
Grasa fecal (72 h) 30 g/da <6 g/dia
4. Qu trastorno se origina por la deficiencia de la
vitamina B ?
La insuficiencia de AG om ega-3 se relaciona con un prdida m uscular grave (protelisis)42 debido a una res
increm ento en la adhesividad plaquetaria y estado hiper- puesta obligatoria controlada por la citocina a la que se
coagulable.33 Estos pacientes estn en riesgo particular de le denom ina dicotoma adaptativa nutricional dependiente
derrame cerebral y enfermedad coronaria. Los AG ome- (DAND ) , 42,42 con prdida im portante de nitrgeno a cau
ga 3 se com plem entan con pescado (p. ej., atn, salm n, sa de la protelisis. Los pacientes que son obesos y cata-
bacalao) y aceite de pescado, aceite de sem illa de lino y b licos y a los que no se les considerara desnutridos se
sem illa de lino, cacahuates y tof. encuentran en riesgo elevado de com plicaciones relacio
nadas con desnutricin: en particular, curacin de heridas
RIESGO DE DESNUTRICIN daadas. Este estado tambin es marsmico. El kwashior-
kor, un estado relacionado con la desnutricin crnica
La desnutricin es un estado de uso o ingesta inadecuado y enfermedad heptica o con estrs fisiolgico, ocasiona
involuntario de caloras, protenas o grasa esenciales, o alteracin de la sntesis proteica y reduccin de las prote
m icronutrientes (vitam inas y oligoelem entos), que oca nas sricas de transporte.
siona riesgo de alteracin la funcin fisiolgica relacio
nada con aum ento de la morbilidad y mortalidad.34'40 Los
Personas en riesgo de desnutricin
pacientes con desnutricin crnica de caloras padecen
prdida de tejido adiposo y m uscular com o resultado de La desnutricin afecta a ms de 1 3 0 0 m illones de personas
aum ento de la actividad lipoltica y gluconeognica, res en el m undo, con una cifra de entre 1 0 y 2 0 m illones de
pectivam ente.41 Sin embargo, estos pacientes no dem ues individuos en Estados Unidos. En este pas, la prevalencia
tran deficiencia proteica, lo que se com prueba por las de desnutricin im portante entre pacientes alim entados
concentraciones norm ales de protenas sricas de trans en casa, personas de edad avanzada y pacientes hospitali
porte. A este estado de desnutricin se le con oce com o zados por causas m dicas o quirrgicas ya no es desafian
marasmo. Adems, la desnutricin aguda de protenas- te. En el cuadro 3 1 - 4 se m uestran los grupos que estn en
caloras aguda est relacionada de manera estrecha con riesgo de desnutricin.
CAPTULO 31 VITAMINAS, GRASAS ESENCIALES Y MACRONUTRIENTES 629
Se ha docum entado en varias ocasiones durante 3 0 aos nutricin a largo plazo y prdida primaria de grasa corpo
que 3 0 a 5 0 % de los pacientes hospitalizados llega a pade ral usa cidos grasos cetognicos, no carbohidratos, com o
cer desnutricin.3337'38 Esto ocurre en el m bito hospita com bustible principal. Estos individuos tienden a ser del
lario cuando la ingesta nutricional oral es inadecuada o gados, con aspecto decado, y cuentan con pocas reservas
im posible debido a los procedim ientos del tratamiento o a de tejido adiposo. En el paciente fam lico hipom etabli
com plicaciones despus de la ciruga. Es posible que ocu co, tal vez no sea recom endable la alim entacin agresiva,
rra desnutricin crnica antes de la hospitalizacin com o en especial con carbohidratos. En estos pacientes, con la
resultado de u n proceso de enfermedad crnica o trastorno capacidad del cuerpo para adaptarse a la inanicin crnica
m dico que conduce a elecciones deficientes de alim enta m ediante la reduccin del ndice metablico basaI (IMB),
cin, agotam iento de protena o baja ingesta de protena. el rendim iento cardaco, la temperatura y la actividad
Entre las enfermedades crnicas que producen desnu fsica, la provisin intensiva del sustrato energtico quiz
tricin crnica se encuentran malignidad; enfermedad induzca sndrom e de realim entacin.43 En el sndrom e de
gastrointestinal, que incluye sndrom e de malabsorcin; realim entacin, la alteracin de lquidos y electrlitos que
enfermedades infecciosas, com o sndrom e de inm unode- p onen en peligro la vida ocurre despus del com ienzo de
ficiencia adquirida (SIDA) y tuberculosis; alcoholism o; y las terapias de apoyo nutricional agresivas. El sndrom e de
enfermedad renal en fase terminal y enfermedad heptica. realim entacin llega a inducir hipofosfatem ia e hipopota
Adems, es posible que el paciente hospitalizado padezca sem ia a m edida que estos electrlitos se m ueven con la glu
dism inucin reciente de la ingesta de alim entos secundaria cosa hacia fuera de la circulacin en el tejido. Sin embargo,
a enfermedad, quimioterapia, o depresin, o ingesta redu el paciente hiperm etablico necesita energa y protena,
cida debido a nusea. El estado hiperm etablico relacio lo que requiere apoyo nutricional agresivo para reducir al
nado con traumatismo im portante, quemaduras, ciruga, m xim o el catabolismo y las prdidas de protena, y apoyar
insuficiencia orgnica m ltiple, insuficiencia renal aguda, la respuesta inmunitaria.47 Cuando la desnutricin no se
septicem ia y sndrom e de respuesta inflamatoria sistm i detecta ni se trata en los pacientes durante su estancia en
ca constituye la causa ms im portante de la desnutricin el hospital, existe increm ento de la m orbilidad y morta
aguda a partir de increm ento en el gasto energtico.46 lidad.36 ste es el caso sobre todo en pacientes con dao
U n paciente enfermo de manera grave con hipermeta- grave y enfermedad heptica e inanicin crnica previas;
b olism o (com o el kwashiorkor) e insuficiencia multior- en estos pacientes se observa curacin deficiente de heri
gnica es diferente desde el punto de vista m etablico al das e increm ento en los ndices de infeccin,36 con pero
paciente hipom etablico fam lico (com o en el m arasm o), dos extensos de estancia hospitalaria y tasas de m ortalidad
aunque a m enudo no se observa una distincin clara en la ms elevadas. D e estos pacientes identificados com o des
presentacin clnica. El paciente hipom etablico con des- nutridos, m uy p ocos reciben apoyo nutricional oportuno.
La identificacin temprana de los pacientes desnutridos
y el establecim iento de la intervencin nutricional se ha
CUADRO 31-4. GRU POS EN RIESGO DE vuelto una cualidad del problema de la atencin.48
D ESN UTRICI N_________________________
Personas deprimidas o con enfermedad mental que Respuesta inflamatoria sistmica y la dicoto
no comen ma adaptativa nutricional dependiente42-43
Personas de edad avanzada, en especial aquellas que El dao de cualquier causa mediada por citocinas, princi
se encuentran en centros de asistencia palmente las interleucias 1 y 6 (IL-1, IL-6) y el factor a de
Personas de estado socioeconmico bajo la necrosis tumoral (FN T -a), desencadena un efecto en cas
cada que conlleva tres pasos sucesivos:42 a ) la fase de des
Poblacin con prdida de lquidos y nutrientes debido censo o hem odinm ica, caracterizada por fiebre, anorexia,
a diarrea prolongada, fstula drenante o heridas taquicardia y cambios circulatorios en las primeras 1 2 h; b)
Personas que sufrieron derram e cerebral la fase de flujo, que ocurre durante varios das y se relaciona
con procesos catablicos con prdida masiva de nitrgeno
Pacientes en estado posoperatorio y aquellos con leo
con perodos prolongados sin ingesta oral
urinario; y c) la fase anablica, que sucede com o punto de
partida de las actividades de reparacin, y que coincide con
Pacientes con trastornos hipermetablicos: traumatismo dism inucin de la prdida y retencin de nitrgeno.44
en la cabeza, traumatismo mltiple, quemaduras
mayores, insuficiencia orgnica y sepsis Hipermetabolismo por estrs
Pacientes con cncer del tracto gastrointestinal o
Al increm ento en el m etabolism o relacionado con dao
caquexia
por estrs se le denom ina estado hipermetablico A442-43
Pacientes con prdida de peso no intencional que El estado catablico relacionado con traumatismo y
sobrepasa el 10% en seis meses sepsis es un fenm eno m etablico controlado por la cito-
Pacientes con enfermedad crnica; dilisis de largo cina al que debe diferenciarse de la prdida que ocurre con
plazo la inanicin. Est controlado por la interleucina 1 (IL-1),
la interleucina 6 (IL-6) y el factor a de necrosis tumoral
Pacientes con pancreatitis
(FNT-a). La liberacin de estos m ediadores es proporcio-
630 PARTE IV REAS DE ESPECIALIDAD DE LA QUIMICA CLINICA
nal a la dim ensin del dao. La liberacin de citocinas est ejercen a travs de la u n in a ligandos activos y los efectos
vinculada a la sobrerregulacin horm onal y a fenm enos sobre stos. Ingenbleek hace referencia a la relacin entre
hum orales. Entre los fenm enos horm onales se in clu las protenas de unin y sus ligandos respectivos, bajo
yen la liberacin de glucagon y catecolam inas, horm ona la influencia de citocinas, com o la dicotom a adaptativa
tiroides, horm ona del crecim iento y cortisol y sus efectos: nutricional dependiente (D A N D ).42 En el cuadro 3 1 -5 se
hiperglucem ia, ndice m etablico, liberacin de cidos ilustra la DAND. Se debe tomar en cuenta, tambin, que
grasos libres y cetosis relacionada, factor 1 de crecim iento esta relacin de adaptacin en presencia de dao por estrs
sem ejante a la insulina (FCI-1) y equilibrio negativo de se ve afectada por la desnutricin proteica anterior al esta
nitrgeno a partir de la gluconeognesis. El aum ento de la do daado. Por qu? Porque el nivel basal de las protenas
tasa m etablica, proporcional a la gravedad del trastorno, de u nin es bajo y la respuesta de adaptacin dism inuye.
ocasiona protelisis masiva, con conversin de protena El efecto m etablico del dao por estrs en la fase cata-
corporal magra a am inocidos para los precursores gluco- blica aumenta el flujo de sustratos com bustibles para
neognicos. Esto se relaciona con hiperglucem ia, resisten procesos que em plean energa por su efecto sobre el hga
cia a la insulina, m ovilizacin de triglicridos y cetosis. El do. La dism inucin de GUC, GUT, TTR y PUR increm enta
marasmo es la prdida gradual de tejido adiposo (grasa) el efecto hiperm etablico. En la hiptesis de la horm ona
nicam ente relacionada con inanicin. La prdida aguda libre se establece que el efecto horm onal sobre el tejido
de tejido m uscular en dao por estrs es marsmica. El b lanco es resultado de la horm ona libre. La glndula
kwashiorkor, identificado por prdida visceral de prote suprarrenal libera el cortisol elevado, lo que tiene u n efecto
nas, tambin se observa en presencia de dao por estrs. amplificado con su u n in a una concentracin plasmtica
Esta fase dura de tres a 1 0 das, pero tal vez se extienda. La ms baja de GUC. El hgado representa el depsito para la
fase de flujo anablico surge a m edida que el m etabolism o T4 extratiroidea. sta se libera con dism inucin de la GUT
cambia a actividades sintticas y procesos reparadores. y TTR circulantes,42 lo que ocasiona aum ento de la activi
El primer fenm eno horm onal en las primeras 2 4 h es dad tiroidea m edida por increm ento de la T4 libre (T+L ). A
la accin de las catecolam inas y el glucagon en la conver esto se le con oce com o sndrom e del enfermo eutiroideo.
sin de glucgeno heptico a glucosa, lo que eleva el valor La TSH no se ve afectada o dism inuye de manera leve, pero
de glucosa en plasma. La horm ona tiroidea (T4) tiene un no en el rango hipertiroideo. La vitamina A se almacena en
efecto en los rganos blanco a travs de la tiroxina libre el hgado, y se transporta en la circulacin en un com plejo
(T4L). El efecto catablico de la horm ona del crecim iento con TTR y PUR. La vitamina A y PUR son dependientes
en el m etabolism o de los lpidos es recproco a un efec del valor de TTR.
to anablico y se disocia de ste a travs de FCI-1. Una La captacin energtica al nacim iento es de alrededor de
respuesta secretoria de cortisol suprarrenal se opone a la 1 2 0 kcal/kg por da tanto para hombres com o para mujeres.
accin de la insulina y prom ueve una respuesta diabeto- Durante los dos primeros aos de vida, existe un descenso
gnica. La hipercortisolem ia da com o resultado protelisis gradual a 9 0 - 1 0 0 kcal/kg por da. De los 2 a 1 4 aos de
muscular. Los am inocidos, en especial am inocidos de edad, los requerim ientos energticos dism inuyen de m ane
cadena ramificada del m sculo esqueltico, proporcionan ra gradual a alrededor de 4 0 kcal/kg por da, donde los
precursores gluconeognicos a travs de la alanina. Estas hombres requieren 5 kcal/kg por da ms que las mujeres.
horm onas, liberadas m ediante la respuesta por estrs,
controlan los procesos m etablicos necesarios para el Subregulacin del tejido sano
u so de com bustibles de carbohidratos y cidos grasos, y Estos fenm enos m etablicos, que son proporcionales a
son necesarias para apoyar la reparacin de tejido daa la d im ensin del dao, se caracterizan por la liberacin,
do. Entre los fenm enos hum orales se incluyen cam bios inducida por citocina, de glucagon, catecolam inas y cor
e interacciones entre las protenas sricas en la respuesta tisol, lo que da com o resultado hiperglucem ia plasmtica,
inflamatoria. Los efectos sistm icos de fiebre, taquicardia, aum ento de la tasa catablica, liberacin de cidos grasos
aum ento del gasto energtico y debilidad y prdida m us
cular se relacionan con elevaciones de los reactivos de fase CUADRO 31-5. ALTER AC IO N E S RECPROCAS
aguda (RFA) (p. ej., protena C-reactiva, FNT-a y cq-cido DE LA S C O N C EN TR A C IO N ES EN P L A S M A DE
glucoprotena) y cam bios horm onales. LA S PR O TE N AS VISC ER ALES Y SUS LIGANDOS
TR AN SP O R TA D O S EN EL D A N D 3
Dicotoma adaptativa nutricional dependiente
La respuesta por estrs suprime de inm ediato la actividad p r o t e n a d e u n i n CAMBIO HORMONAL
sinttica del hgado, que tiene una sola funcin sinttica Albmina V
con las rutas dominadas por NADE El colesterol srico
GUT V T4 libre A
dism inuye, al igual que lo hace la produccin de prote
nas de transporte esenciales, com o albmina, transferrina, GUC V Cortisol libre A
globulina de u n i n con cortisol (G U C ), glob u lin a de Transtiretina V T4 libre A
u n i n con tiroxina (GUT), transtiretina o prealbmina
RBF V Retinol libre A
de u nin con tiroxina (TTR), factor 1 de crecimiento insull-
nico (FCI-1). Aunque las protenas de transporte declinan FCI-1 -BP3 V FCI-1 libre A
de manera abrupta hasta en un 40% , la sntesis de RFA no aEste patrn de adaptacin dism inuye en caso de desnutricin
se altera. La funcin en esencia adaptadora y de control la preexistente.
CAPTULO 31 VITAMINAS, GRASAS ESENCIALES Y MACRONUTRIENTES 631
y cetonas, y equilibrio de nitrgeno negativo. Los efec m uscular con aum ento del gasto de energa relacionada
tos sistm icos de fiebre, taquicardia, increm ento del gasto con esta respuesta sistmica.
energtico y debilidad y prdida m usculares se relacionan
con la elevacin de los RFA. La FNT-a e hipercortisolem ia Sobrerregulacin de los territorios inflamados
controlan la prdida de masa muscular, lo que explica la El hgado es central a esos cam bios de adaptacin, una
debilidad y gasto m uscular que se relacionan con estrs caracterstica relevante que im plica la repriorizacin
grave. Las horm onas contrarreguladoras anulan la accin mediada por IL-6 de la sntesis. A unque la produccin
de la insulina, reforzadas por resistencia a la insulina tisu de RFA mejora en gran m edida por la provisin de am i
lar. La funcin tiroidea se altera de manera concom itante nocidos derivados de la degradacin muscular, la mayor
cuando dism inuye la conversin de T+ a T3 y la produc parte de las protenas viscerales (albm ina, transferrina,
cin de T3 declina a valores m nim os com patibles con euti- TTR, PUR, GUT, GUC y protenas de u nin con el fac
roidismo. La resistencia a la insulina se com bina con el tor-1 de crecim iento semejante a la insulina [sobre todo,
sndrom e de T3 baja para crear el entorno de prdida FCI-BP3]) se suprimen. El declive en la concentracin
ES T U D IO D E C A S O 31-4
Una mujer posm enopusica de 6 6 aos de edad infor c) Continuarse durante tres a seis m eses despus de
ma debilidad grave y disnea durante los ltim os seis que el hem atcrito regrese a la norm alidad para
m eses en que ha practicado ejercicio. N ot que su ape remplazar los depsitos de hierro corporales.
tito se redujo, con prdida de peso resultante. Su h is d) Continuarse slo hasta que exista una respuesta
toria m dica revela la existencia de lceras. Al ingresar rpida en el ndice del reticulocito y en el hem a
al hospital, presentaba presin sangunea y pulso nor tcrito.
males. La piel, la conjuntiva y las membranas m ucosas
CUADRO 31-4.1 DE ESTUDIO DEL CASO.
estaban em palidecidas. En la auscultacin, se observa
RESULTADOS DE LA B O R A T O R IO
ron pulm ones lim pios. Se encontr un soplo cardaco
sistlico grado 3/6, que se escuch mejor en el borde PRUEBA RESULTADOS RANGO DE REFERENCIA
esternal izquierdo inferior, y se extenda hacia las car
CBC
tidas y axila. El exam en con guayaco de heces fue 2+.
Las bases de las uas estaban plidas, sin edem a del pie. Hct 15% 36 a 48%
En el cuadro 31-4.1 de estudio de caso se muestran los Hb 3.8 g/d l 12 a 16 g /d l
datos de laboratorio al ingreso.
RBC 2.79 x 10/ml 3.6 a 5.0 x 106/ml
MCV 53.8 fl 82 a 98 fl
Preguntas
MCHC 25.3 d/dl 31 a 37 g/d l
1. Es probable que la anemia de esta paciente se expli
que de mejor manera por: WBC 8.2 X 103/ml 4.0 a 11.0 x 103/ml
) Hbitos dietticos. Neutrfilos 80% 40 a 80%
b) Prdida sangunea crnica.
Linfa 20% 15 a 40%
c) H em olisis intravascular crnica.
d) Enfermedad inflamatoria crnica. Cuenta de 5.5% 0.5 a 1.5%
2. Las m anifestaciones clnicas de su anemia pudieran reticulocitos
incluir todas las siguientes, EXCEPTO: ndice de 0.8% >3
a) Glositis. reticulocito
b) Pica. Qumica
c) Ua de cuchara (coiloniquia).
d) Neuropata perifrica. US 15 mg/dl 7 a 18 mg/dl
3. Los depsitos de hierro de la m dula sea son: Glucosa 150 mg/dl En ayunas,
a) Reducidos. 70 a 100 mg/dl
b ) Norm ales. Sin ayunar.
c) Ausentes. 70 a 150 mg/dl
d) Aum entados pero presentes slo en las clulas
Electrlitos Normal
reticuloendoteliales.
4. Si el tratamiento correcto de esta anemia es con su l Bilirrubina 1.0 mg/dl 0.2 a 1 mg/dl
fato ferroso oral, el tratamiento debe: Directa 0.4 mg/dl 0 a 0.2 mg/dl
a ) D etenerse en cuanto el hem atcrito retorne a la Normal
T3 y T 4
normalidad.
b) Continuarse de manera indefinida, incluso si se Fe srico 15 pg% 30 a 150 jxg/dl
ha corregido la causa de la deficiencia. TIBC 439 gg% 241 a 421 |xg%
632 PARTE IV REAS DE ESPECIALIDAD DE LA QUIMICA CLINICA
Minerales 6%
80
o
FIGURA 31-1. Trminos bioqumicos y celulares usados para describir masa corporal y la contribucin porcentual a
la masa total en un hombre de 75 kg con buena nutricin.
La masa corporal descrita en trminos celulares se divide anorexia, asi com o durante el retiro de nutrientes y reali
en dos componentes: masa corporal magra (tejido despro m entacin en el periodo posoperatorio.
visto de toda la grasa) y grasa corporal. La masa corporal
magra com prende el tejido m etablicam ente activo, al que M arcadores protenicos en la
se le conoce com o masa celular corporal, y la masa extra- evaluacin nutricional
celular sin actividad metablica. La masa celular corporal
representa todo el consum o de oxgeno y la produccin de El objetivo principal de la evaluacin nutricional es iden
dixido de carbono.61 La funcin primaria de la masa extra- tificar al paciente que est desnutrido y luego, m ediante
celular es el transporte intracelular y apoyo estructural. Los terapia nutricional, conservar o reabastecer los com ponen
pacientes hospitalizados desnutridos tienen una masa cor tes protenicos del cuerpo. La evaluacin nutricional de
poral 4 0 .5 % m enor que los no hospitalizados sanos del m is laboratorio se realiza de mejor manera por el m onitoreo
m o grupo de edad. La obesidad, grasa corporal expandida de protenas sricas seleccionadas. Las protenas ideales
en gran medida, debe relacionarse con dism inucin de la tienen una vida media biolgica breve y reflejan los cam
masa corporal magra. sta declina con la edad, y es mayor bios en los estados proteicos a travs de la m edicin de los
en hombres que en mujeres, adems de que se encuentra cam bios de concentracin en el suero. La concentracin de
bastante reducida en pacientes obesos con sarcopenia. los marcadores proteicos de desnutricin se ve afectada por
la desnutricin proteica relacionada con enfermedad renal
y heptica en fase terminal e infeccin grave y, sobre todo,
Pruebas funcionales
por dao por estrs. Debido a que el efecto de la respuesta
La funcin m uscular es susceptible a los efectos del retiro inflamatoria se relaciona de manera estrecha con el declive
de nutrientes y realim entacin. U no de los m todos de la de las protenas de transporte esenciales, tal vez una sepa
evaluacin de la funcin m uscular es la dinam om etra de racin del estado inflamatorio por desnutricin protenica
presin m anual.62 En este m todo, la fuerza de la presin resulte problemtica, excepto por el uso de RFA, com o la
tiene una sensibilidad de 9 0 % en la prediccin de com pli protena C-reactiva. Se pretende que el ndice nutricional
caciones posoperatorias. En la dinam om etra de presin inflamatorio de pronstico (INIP), en el que se utiliza la
m anual se usa la tcnica de estim ulacin elctrica del ner proporcin del producto CRP-orosomucoide (cq-cido
vio cubital de la mueca. El ndice de relajacin del m scu glucoprotena) con el producto albmina-transtiretina,
lo abductor largo del pulgar estim ulado por va elctrica resuelva este problema.63 En el cuadro 31 -7 se ofrece infor
m ide el estado de nutrientes en estados crnicos y en la m acin detallada sobre estos marcadores protenicos.
Cuando la transtiretina dism inuye a concentraciones miento y la ingesta nutricional. La hormona del crecimiento
menores de 8 0 mg/L, se desarrolla desnutricin de prote estimula al hgado para que produzca FCI, que circula unido
nas-caloras grave; sin embargo, el apoyo nutricional tal al FCI-BP3. El FCI-BP3 modula el efecto biolgico del FCI-1
vez cause u n increm ento diario en la transtiretina de hasta en la respuesta por estrs, lo que ocasiona aumentos y des
10 mg/L.67 Al parecer estas concentraciones no estn censo en la actividad biolgica. Al FCI-1 se le ha utilizado
influenciadas de manera significativa por las fluctuaciones com o marcador nutricional en adultos y nios.81'83
en el estado de hidratacin. A unque pareciera que la enfer
m edad heptica en fase terminal afecta todos los valores F ib ron ectin a
proteicos en el cuerpo, la enfermedad heptica no altera la La fibronectina es una glucoprotena opsnica con vida
transtiretina tan pronto o en la m ism a m agnitud que otros media en seres hum anos de alrededor de 15 h. Esta prote
marcadores protenicos sricos, en particular PUR. Sin na tiene bloques repetidos de una secuencia hom ognea
bien los valores de transtiretina pudieran estar elevados en de am inocidos y es una a 2 glucoprotena que desem pe
pacientes con enfermedad renal, si se observa tendencia a funciones im portantes en la adherencia clula a clula
en direccin de cambio, es probable que los cam bios refle y diferenciacin celular, curacin de heridas, integridad
jen alteracin en el estado nutricional y el equilibrio de microvascular y opsonizacin de materia particulada. Se
nitrgeno. Los esteroides llegan a causar u n ligero aumento le considera la principal protena que regula la fagocitosis.
de la transtiretina, pero an es posible seguir la tendencia Entre los sitios de sntesis se incluyen las clulas endo-
nutricional debido a que la transtiretina responde tanto a teliales, los m acrfagos peritoneales, los fibroblastos y el
la sobrealim entacin com o a la subalim entacin. hgado. Las concentraciones de fibronectina tal vez dis
La transtiretina se utiliza, tambin, com o indicador de la m inuyan despus de dao fisiolgico causado por choque
pertinencia de un plan de alim entacin nutricional,67 ya que grave, quemaduras o infeccin. Los valores regresan a la
los cambios en la protena plasmtica se correlacionan con norm alidad en la recuperacin. La fibronectina resulta de
el equilibrio de nitrgeno. Las concentraciones de transti inters porque no se sintetizada slo en el hgado.84 A de
retina aumentan en pacientes con equilibrio de nitrgeno ms, se trata de u n indicador de sepsis en pacientes con
positivo y dism inuyen en aquellos con equilibrio negativo. quemaduras. Est dem ostrado que las concentraciones de
Cuando el valor de transtiretina es s i 8 0 mg/L, esto se vin fibronectina dism inuyen durante infeccin o estrs grave,
cula con un equilibrio de nitrgeno positivo e indica un en particular debido a su propiedad opsnica. Sin embar
retorno al estado nutricional adecuado. Est demostrado go, la infeccin o el traumatismo no dism inuye de manera
tanto en la poblacin peditrica com o en la neonatal que se im portante la concentracin de fibronectina.85 sta slo
trata de un marcador bastante preciso y relativamente eco aumenta en caso de infeccin grave, en la que perm anece
nm ico del estado nutricional.7172 Adems, se encontr que estable y no aumenta tan pronto com o el FCI-1. N o se u ti
constituye el indicador ms sensible y til cuando se obser liza de manera rutinaria com o marcador nutricional.
va el estado nutricional de pacientes m uy enferm os.73
E quilibrio d e nitrgeno
En resum en, la transtiretina dem uestra de manera efec
Otra herramienta de la evaluacin nutricional, el equili
tiva una respuesta anablica a la alim entacin, y es un
brio de nitrgeno, constituye la diferencia entre captacin y
buen marcador para la sntesis proteica visceral en pacien
excrecin de nitrgeno. Se trata de uno de los indicadores
tes que reciben apoyo m etablico o nutricional.73'75
de cambio proteico ms utilizados. En la poblacin sana,
Protena d e unin con retinol los ndices anablico y catablico estn en equilibrio, en
A la PUR se le ha utilizado en el m onitoreo de cam bios a tanto el equilibrio de nitrgeno se aproxima a cero. En
corto plazo en el estado nutricional.76'78 Su utilidad com o casos de estrs, traumatismo o quemaduras, la captacin
marcador m etablico se basa en su vida m edia biolgica nutricional dism inuye y la prdida de nitrgeno llega a
de 1 2 horas y pequeo tamao de reserva corporal. Como exceder la captacin, lo que conduce a equilibrio de nitr
cadena de polipptido sencilla, la PUR interacta de m ane geno negativo. Durante la recuperacin de la enfermedad,
ra im portante con la transtiretina plasmtica y circula en el equilibrio de nitrgeno debe volverse positivo con el
plasma com o com plejo transtiretina-PUR 1:1 mol/L.79 Sin apoyo nutricional. En seres hum anos, 9 0 a 9 5 % de la pr
embargo, existe un problema potencial en el uso de la PUR dida de nitrgeno se explica por elim inacin a travs de
com o marcador nutricional. A unque tiene una vida media los riones. Alrededor de 9 0 % de esta prdida es en forma
ms breve que la transtiretina (1 2 h, en com paracin con de urea. Por tanto, la determ inacin de nitrgeno ureico
2 das), se excreta por la orina, y su concentracin se ele urinario (U U N ) de 2 4 h constituye un m todo para calcu
va en mayor m edida que la transtiretina en pacientes con lar la cantidad de excrecin de nitrgeno. El equilibrio de
insuficiencia renal. En contraste con la PUR, la concentra nitrgeno se calcula de la siguiente manera86:
cin de transtiretina slo aumenta en forma moderada en _ . . . . . . . . Captacin proteica en 2 4 horas (g)
Equilibrio de nitrgeno = :
la insuficiencia renal crnica avanzada. 6.25
F a cto r 1 d e crecim iento insulnico UUN 2 4 h + 4
El factor 1 de crecimiento insulnico (FCI-1) (al que antes se le
Volumen total (L)
denominaba somatomedina C) es importante para la estimu
lacin del crecimiento. El tamao y la estructura moleculares (Ec. 31-1)
del FC1-1 es similar a la proinsulina.80 Las concentraciones La captacin proteica incluye gramos de protena que
sricas de FCI-1 estn reguladas por la hormona del creci son proporcionados por am inocidos intravenosos o por
636 PARTE IV REAS DE ESPECIALIDAD DE LA QUMICA CLNICA
alimentacin entera!. La ingesta proteica se convierte en separada, pero sin duda origina prdida de peso con dis
gram os de nitrgeno al dividir entre 6.2 5. El factor 4 de m inucin de los valores de albmina y prealbmina.
la ecuacin representa un estim ado de prdida de nitrge
no no urinaria (p. ej., de piel, heces, cabello y u as).86 El h iterleu cin a s
equilibrio de nitrgeno, de acuerdo a com o se calcula por La investigacin nutricional se ha centrado en las interleu-
esta ecuacin, no es vlido en pacientes con estrs grave o cinas, un grupo com plejo de protenas y glucoproteinas
sepsis, lo que se observa en reas de cuidado crtico o en que llega a ejercer efectos pleiotrpicos sobre varias clu
pacientes con enfermedad renal. La determ inacin de la las objetivo diferentes. La mayor parte de las interleucinas
validez de esta ecuacin en otras condiciones clnicas que se producen por macrfagos y linfocitos T, en respuesta a
por lo general im plican prdidas elevadas de nitrgeno tal la estim ulacin antignica o m itognica, y afectan la fun
vez sea difcil o in clu so incorrecta. cin primaria del linfocito T. La mayor parte de las in ves
tigaciones nutricionales se realizaron sobre la interleucina
Protena C-reactiva 1 (IL-1), IL-6 y FNT-a.
La protena C-reactiva es una protena de fase aguda que
se increm enta de manera im portante bajo condiciones de
Nutricin parenteral total
sepsis, inflam acin e infeccin. La protena C-reactiva lle
ga a aumentar en forma drstica hasta 1 0 0 0 veces despus La nutricin parenteral total (NPT) es un m edio de apo
de dao al tejido, lo que es ms de dos o tres rdenes de yo nutricional intenso m uy utilizado en pacientes que se
m agnitud m ayor que cualquier otro reactivo de fase aguda. encuentran desnutridos, o en peligro de estarlo, porque
La concentracin de protena C-reactiva aumenta cuatro a son incapaces de consum ir los nutrientes requeridos o
seis horas antes que otros reactivos de la fase aguda.87,88 recibirlos por va enteral. La terapia con nutricin paren
La fase de flujo de catabolism o marcado se presenta con teral im plica la administracin de cantidades apropiadas
m anifestaciones clnicas de taquicardia, fiebre, aum ento de carbohidratos, am inocidos y soluciones lipdicas, as
de la tasa respiratoria e increm ento del ritm o cardaco. com o electrlitos, vitaminas, minerales y oligoelem entos,
Durante este tiem po, las tasas de sntesis de la protena para satisfacer los requerimientos de nutrientes, protenas
C reactiva y otras protenas de fase aguda se increm entan y caloras en tanto se m antiene el equilibrio electroltico y
y la albm ina y la prealbmina dism inuyen89 (g. 31 -2). del agua.91 Por lo general, las preparaciones nutricionales
Incluso con este aum ento en las protenas de fase aguda, parenterales se administran a travs de un catter subclavi-
por lo general ocurre equilibrio de nitrgeno negativo cular. Por va enteral, un tubo nasogstrico libera nutrientes
im portante secundario al mayor catabolism o proteico.90 directo en el estm ago o duodeno, o los pacientes som e
Se d esconoce si este estado catablico produce desnutri tidos a ciruga gastrointestinal pudieran tener un catter
cin definida desde el punto de vista clnico o una entidad de alim entacin gastrostmica o yeyunostm ica instaura
Das
FIGURA 31-2. Se obtuvieron ios valores secuenciales de protena C-reactiva y transtiretina en un hombre de 26 aos de edad que sufri acci
dente automovilstico. Este patrn muestra una elevacin inicial de protena C-reactiva, que se eleva debido a la respuesta inflamatoria surgida
por el accidente automovilstico. A medida que comienza a disminuir, la transtiretina, un reactivo de fase aguda inverso, desciende. A los cinco
das, la respuesta de fase aguda est en la parte superior, y la transtiretina se vuelve un marcador nutricional. En este momento, comienza la
alimentacin por sonda porque el paciente muestra signos bioqumicos y fsicos de desnutricin. La alimentacin por sonda se suspende cuando
la transtiretina alcanza un valor de 180 mg/l. Esto ilustra el uso de la transtiretina en una situacin de respuesta de fase aguda.
CAPTULO 31 VITAMINAS, GRASAS ESENCIALES Y MACRONUTRIENTES 637
do durante el procedim iento quirrgico. Debido a que la ta con facilidad. El uso de acetato no slo increm enta el
adm inistracin para NPT evita las rutas de absorcin y cir bicarbonato srico, sino que tambin dism inuye la canti
culacin normales, el m onitoreo cuidadoso de laboratorio dad de cloruro liberado al paciente.
de estos pacientes es crtico. El objetivo es proporcionar un
estado nutricional ptim o por cualquier m edio que asegu P ru eba s con m in era les p a ra m on ito rear
re la administracin de los nutrientes. Una prdida de peso U no de los aspectos ms im portantes del m onitoreo de
no intencional de ms del 10 a 12% conduce a sospecha de NPT es la determ inacin de las deficiencias y los excesos
enfermedad o desnutricin. Adems, se tom an en cuenta la de calcio, fosfato y m agnesio. Cuando se regulan de m ane
estatura, la edad y el nivel de actividad del paciente.92 ra inadecuada, estos minerales no slo afectan la masa
Es im portante m onitorear al paciente con NPT para sea, sino que tambin precipitan situaciones que ponen
evitar posibles com plicaciones. D icho m onitoreo de labo en peligro la vida. El calcio y el fosfato se relacionan de
ratorio proporciona la inform acin necesaria requerida manera estrecha en la im portante funcin de la mineraliza-
para la adm inistracin apropiada de la terapia de NPT. cin sea. El calcio est presente en el suero en dos formas:
unido con protenas, o no difundible, y difundible ioniza
P ru eba s urin aria s do. El calcio ionizado es la forma con actividad fisiolgica,
En lactantes prematuros pequeos, la glucosuria durante y constituye slo 2 5 % del calcio srico total. Independien
la primera fase de la NPT constituye una seal de que la tem ente del calcio srico total, es posible que la dism inu
infusin de glucosa es demasiado rpida. Sin embargo, si la cin del calcio ionizado ocasione ttanos. La reduccin
glucosa aparece en la orina de lactante pequeos despus del calcio ionizado a m enudo se debe a un aum ento en
de que se establece la tolerancia a la glucosa, el m edico el pH sanguneo (alcalosis). Es im portante monitorear el
debe cuestionar la presencia de enfermedad respiratoria, calcio srico ionizado y el pEl sanguneo, en especial en un
sepsis o cam bios cardiovasculares. paciente con NPT que recibe suplem entos de calcio junto
con ingredientes en la solu cin de NPT que llegan a alterar
P ru eba s p a ra m on ito rear trastornos electrolticos el pH sanguneo. Aunque el desequilibrio de calcio es fre
La regulacin del sodio es u n problema en nios duran cuente en recin nacidos som etidos a NPT, resulta m ucho
te la NPT. Los requerim ientos diarios de sodio llegan a m enos habitual en adolescentes y adultos. Sin embargo, se
variar, lo que depende de la madurez renal y la capacidad ha informado hipercalciuria con nefrolitiasis com o com
del cuerpo del nio para regular sodio. Los factores que p licacin en pacientes con NPT a largo plazo.
increm entan la cantidad de sodio necesario para m ante Existe una relacin recproca entre calcio y fsforo. El
ner las concentraciones norm ales de sodio srico tanto en fosfato intracelular es necesario para prom over la sntesis
n ios com o en adultos son la glucosuria, el uso de diurti proteica y otras funciones celulares. Se debe monitorear
cos, la diarrea u otra prdida gastrointestinal excesiva, y el de manera cuidadosa el calcio y fosfato para m antener el
increm ento de prdidas posoperatorias de lquido. equilibrio correcto entre estos dos m inerales. Se informa
La hiperpotasem ia es un problema frecuente en nios hipofosfatem ia grave en pacientes som etidos a NPT pro
cuando la sangre se obtiene por puncin del taln. El apre longada.9394 El m agnesio, com o un aditivo de la solu cin
tado del taln tal vez cause hem olisis de clulas rojas, lo de NPT, se relaciona de manera estrecha con el calcio y
que ocasiona concentraciones de potasio falsam ente ele fsforo. E xiste una relacin recproca entre m agnesio
vadas. Aunque quiz se proporcione una nutricin ade y calcio y, en ciertas situaciones, entre m agnesio y fsfo
cuada para prom over el anabolismo, pudiera desarrollarse ro. Las concentraciones bajas de m agnesio tal vez causen
hipopotasem ia cuando se utiliza un sum inistro extracelu ttanos, en tanto que los niveles elevados llegan a aumentar
lar para la sntesis celular. el tiempo de conduccin cardaco auriculoventricular. En el
La funcin primaria del cloruro es la regulacin osm cuadro 31-9 se muestran ciertas anormalidades electrolticas
tica. La acidosis m etablica por hipercloremia constituye y m inerales relacionadas con la nutricin parenteral.
u n problema cuando se em plean solu ciones cristalinas de
am inocidos, pero es posible prevenir o tratar dicha acido- O ligoelem entos p a ra m onitorear
sis al alterar la cantidad de sal de cloruro contenida en la Las dietas de la mayora de los pacientes con NPT deben
solu cin de nutricin parenteral. Al cubrir algunos de los com plem entarse con suplem entos para m antener niveles
requerim ientos de sodio y potasio com o sales de acetato o ptim os de varios oligoelem entos. Adems, estos elem en
fosfato, quiz se reduzca la cantidad requerida de cloruro. tos deben m onitorearse para prevenir deficiencia o toxici
La reform ulacin de soluciones sintticas de am inoci dad. El cobre y cinc son los oligoelem entos ms frecuentes
dos por fabricantes com erciales contribuy a evitar esta agregados a las soluciones de NPT. La palidez, la dism inu
im portante com plicacin. Si ocurre acidosis m etablica cin de la pigm entacin, el agrandamiento de la vena y el
por hipercloremia, se utiliza el tratamiento con soluciones salpullido sem ejante a dermatitis seborreica representan
de acetato de sodio o potasio porque el acetato se meta- los principales signos clnicos por deficiencia de cobre,
boliza con rapidez a bicarbonato. Las sales de acetato son que a veces pasa inadvertida. Algunas otras anormalida
com patibles con todos los dem s com ponentes com unes des incluyen leucopenia recurrente (recuento de glbulos
de nutricin parenteral y son ideales para em plearse cuan blancos, m enor de 5 X 109/L) y neutropenia (neutrfilos,
do la acidosis est presente. N o es posible utilizar bicarbo m enores de 1.5 x 1 0 9/L).
nato de sodio en soluciones de nutricin parenteral que El diagnstico de deficiencia de cobre se confirma cuan
con tien en calcio porque el carbonato de calcio se precipi do el cobre srico y la ceruloplasm ina (la glucoprotena de
638 PARTE IV REAS DE ESPECIALIDAD DE LA QUMICA CLNICA
u n in con el cobre) son bajos. Es difcil realizar este diag La cardiomiopata tal vez sea grave, y se ha informado
n stico en lactantes prematuros. Sin embargo, debido a muerte. Sin embargo, se requiere ms trabajo para estable
sus valores de cobre srico, perm anecen deprim idos hasta cer su im portancia en la NPT.
cerca de las nueves semanas de edad. Las concentraciones
bajas de cobre se han informado, tambin, en sndrom e de Uso d e las p ru eb a s con panel
m alabsorcin, enfermedades intestinales de gasto protei Para regular el estado m etablico de los pacientes con
co, sndrom e nefrtico, traumatismo grave y quemaduras. enfermedad crtica som etidos a NPT, es necesario m onito
Los pacientes con NPT quiz desarrollen deficiencia rear su terapia nutricional de manera consistente. La con s
aguda de cinc.95,96 Al principio sufren prdida urinaria tante dem anda por m onitorear a estos pacientes produce
m asiva de cinc durante la fase de catabolism o. Cuando se una situacin ideal para los paneles de laboratorio. Al so li
com ienza a aumentar de peso, el paciente con deficiencia citar estos paneles, es posible realizar un grupo de pruebas
en cinc quiz experim ente diarrea, dermatitis peritoneal en forma rentable. Esto perm ite al laboratorio la opcin
y alopecia. Los recin nacidos prematuros estn en parti de trabajar con lotes y anlisis autom atizado, lo que da
cular predispuestos a deficiencia de cinc debido a que, en com o resultado el procesam iento de una cantidad m enor
con d icion es norm ales, el cinc se adquiere a razn de alre de muestra, anlisis qum ico ms eficiente y, por tanto,
dedor de 5 0 0 mg/da durante el ltim o m es de gestacin. con ten cin del costo. Los paneles slo deben consistir en
Para com pensar esta deficiencia, los suplem entos de cinc pruebas rutinarias solicitadas de manera repetida.
para los recin nacidos prematuros deben ser 50 % ms
elevados que para los recin nacidos de trm ino com p le RESUMEN
to. Luego esta concentracin se reduce de manera gradual
hasta que es igual a la del lactante de trm ino com pleto. El nfasis actual en la nutricin y salud dio com o resultado
Las concentraciones de cinc y cobre sricos deben la creciente importancia de la valoracin vitam nica y nutri
m oni torearse de manera sem anal o, cuando m enos, cada cional en el laboratorio clnico. Las vitaminas, com puestos
dos m eses. El estado de cinc se vigilar incluso con mayor de bajo peso m olecular con un am plio rango de funciones
frecuencia en pacientes con prdida gastrointestinal con en el tejido biolgico, deben obtenerse de forma parcial
tinua, incluso si reciben suplem entos de cinc en sus so lu o com pleta a partir de fuentes alim enticias y, en algunos
ciones parenterales.97 casos, de la sntesis bacteriana. La valoracin nutricional
Se ha descrito deficiencia de crom o en pacientes con consiste en la evaluacin de las necesidades m etablicas y
nutricin parenteral de largo plazo.98 Los signos y sn nutricionales del paciente. Se realiza de mejor manera por
tomas iniciales incluyen prdida de peso, aum ento de la m ediciones clnicas y de laboratorio del estado nutricional.
intolerancia a los carbohidratos y neuropata. El diagns La valoracin nutricional se ha vuelto cada vez ms im por
tico se apoya por concentraciones bajas de crom o srico, tante en el cuidado m dico, en especial en el tratamiento
y por la respuesta clnica a la adm inistracin de cromo. de pacientes con enfermad crtica y dem acracin crni
La evidencia indica que los valores de crom o en plasma ca. Es raro identificar pacientes con riesgo de desarrollar
estn reducidos, no slo en la deficiencia sino tambin en com plicaciones relacionadas con la nutricin en el curso
enferm edades agudas.99 Se elevan al aumentar las cargas de de una enfermedad. Sin embargo, ste no tiene que ser el
insulina y glucosa. caso. Estn disponibles estndares para la identificacin de
Se describe deficiencia de selenio en la NPT a largo pla pacientes con alto riesgo y el m onitoreo de la efectividad
zo .100 Se le relaciona con cardiomiopata y malabsorcin. de la alim entacin para reponer prdidas nutricionales.
CAPTULO 31 VITAMINAS, GRASAS ESENCIALES Y MACRONUTRIENTES 639
PREGUNTAS DE REPASO
1. V incule la vitamina con su categora apropiada: 6. El mtodo usado con mayor frecuencia para la deter
a ) Liposoluble; b) Hidrosoluble. m inacin de la vitamina B 12 es:
Vitamina A _____ a) Anlisis quimiluminiscente.
Vitamina E _____ b ) Inmunoanlisis de separacin magntica.
F o la to ____ c) Radioinmunoanlisis de unin competitiva con
B iotin a _____ protena.
Vitamina K _____ d) CLAR.
2. Cul de los siguientes describe la fuente correcta, la 7. El trmino que describe a los pacientes con desnu
funcin y el estado deficiente de la vitamina m en cio tricin calrica crnica que pierden tejido adiposo y
nada? muscular pero no demuestran deficiencia proteica es:
a ) Vitamina E: tejido vegetal, antioxidante, osteo a) Kwashiorkor.
malacia. b ) Marasmo.
b) Tiamina (Bj): granos ntegros, m etabolism o de c) Debilitamiento.
carbohidratos, beriberi. d) Ninguna de las anteriores.
c) Niacina: carne, reacciones de oxidorreduccin,
8. El porcentaje de pacientes hospitalizados con posible
escorbuto.
desnutricin es de:
d ) cido flico: productos lcteos, form acin de
a) 5 a 8%.
mielina.
b ) 10 a 15%.
3. Cul vitam ina sera afectada si el paciente recibi el c) 20 a 25%.
diagnstico de trastorno que im plica la absorcin de d) 30 a 50%.
grasa?
9. Cul marcador nutricional se ha encontrado que es
a) Vitamina Bir
el indicador ms sensible y til del estado nutricional
b) c id o a s c rb ic o .
en pacientes muy enfermos?
c) Tiamina.
a) Transtiretina.
d ) Vitamina K.
b ) Transferrina.
4. Cul vitamina es u n potente antioxidante, se en cu en c) Albmina.
tra sobre todo en aceites vegetales, que protege la d) Factor 1 de crecimiento insulnico.
membrana eritroctica del estrs oxidativo?
10. El monitoreo del laboratorio del paciente con terapia
a ) Vitamina K.
de NPT es importante para evitar posibles complica
b) Vitamina C.
ciones. Cul oligoelemento debe monitorearse de
c) Vitamina E.
manera semanal?
d) cido flico.
a) Cobre.
5. U n hombre de 7 0 aos se present con su m dico b ) Selenio.
con u n brazo roto. El trabajo de laboratorio indic c) Molibdeno.
tiem po de protrombina elevado, con todos los dems d) Cromo.
resultados de laboratorio normales. El hombre estu
vo tom ando un antibitico para infeccin respiratoria
anterior. Cul de las siguientes vitaminas, si es que
hay alguna, pudiera estar implicada?
a ) Vitamina K.
b) Vitamina D.
c) Biotina.
d) N inguna de las anteriores.
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Qumica clnica y
el paciente geritrico
Larry H. Bernstein
CONTENIDO DE L CAPTULO
O B J E T I V O S
Al completar este captulo, el laboratorista clnico Explicar los problemas relacionados con el estable
podr: cimiento de los intervalos de referencia para los
Definir envejecim iento, apoptosis, aterosclerosis, ancianos.
radicales libres, geriatra, gerontologa, hom eosta Describir los efectos de la medicacin en los resul
sis, menopausia y osteoporosis. tados de la qumica clnica en los ancianos.
Analizar el impacto de los pacientes geritricos en A nalizar los efectos del ejercicio y la nutricin en
el laboratorio clnico. los resultados qumicos en los ancianos.
Describir las teoras actuales del envejecim iento. Correlacionar los cambios fisiolgicos vinculados
Evaluar los cambios fisiolgicos que ocurren con el con la edad y los resultados con condiciones pato
proceso de envejecim iento. lgicas.
Identificar los cambios relacionados con la edad en
los analitos de la qumica clnica.
TERMINOS CLAVE
Apoptosis Geriatra Homeostasis Osteoporosis
Aterosclerosis Gerontologa M enopausia Radical libre
Envejecim iento
642
CAPTULO 32 QUMICA CLNICA Y EL PACIENTE GERITRICO 643
El envejecim iento es un proceso com plejo que no est aos de edad, o in clu so llegan a los 8 5 aos con buen fun
com prendido de manera adecuada. N o existe una defini cionam iento. Para propsitos de este captulo, la informa
cin universal aceptada del envejecimiento. Una definicin cin se vincula sobre todo con individuos de 6 5 aos de
es la prdida progresiva y desfavorable de adaptacin, edad y m ayores, excepto donde se indique lo contrario.
que conduce a aum ento de la vulnerabilidad, dism inucin D ebido a los avances en el cuidado m dico, la mejor
de la viabilidad y reduccin de la esperanza de vida.1 El nutricin y el nfasis en el ejercicio, una cantidad crecien
problem a con esta definicin radica en que los procesos te de personas vive hasta los 6 5 de edad y ms. Por tanto,
de envejecim iento son variables con respecto a la edad en la poblacin de Estados U nidos el porcentaje global
y prdida de la funcin. En efecto, es posible que exista de ancianos contina en aum ento. Entre stos, las perso
prdida temprana o prdida marginal y tarda a una edad nas ms grandes (es decir, aquellos de 8 5 de edad o ms)
avanzada. Adems, la funcin m ental tal vez se mantenga representan el grupo de edad de ms rpido crecim ien
independiente del ndice de prdida de funcionam iento to. D e acuerdo con un inform e de la Oficina de C ensos
fsico. C m o se refleja esta prdida progresiva y desfa de Estados U nidos, la cantidad de personas de 6 5 aos de
vorable de adaptacin en los resultados del laboratorio edad y ms se increm ent en un factor de 11 entre 1 9 0 0 y
clnico, de manera especfica en los resultados de la qu 1 9 9 4 , de 3.1 m illones a 3 3 .2 m illones. En 1 9 9 4 , 1 de cada
m ica clnica? Este captulo se centra en el laboratorio de 8 estadounidenses era anciano, pero la proyeccin para el
qum ica clnica y los procesos bioqum icos y fisiolgicos ao 2 0 3 0 es de 1 de cada 5 .2 En la figura 32-1 se muestra
del envejecim iento. el aum ento en el porcentaje de la poblacin de Estados
U nidos con 6 5 aos de edad y ms de 1 9 0 0 a 2 0 4 0 .
EL IMPACTO DE LOS PACIENTES GERITRICOS El aum ento en el porcentaje de ancianos plantea un
reto im portante para los sistem as de cuidado de la salud y
EN EL LABORATORIO CLNICO
sociales, as com o para el laboratorio clnico. En Estados
Adems de la definicin de envejecim iento, el lector debe U nidos, el establecim iento de los beneficios de Medicare
familiarizarse con los trm inos gerontologa y geriatra. La a los 6 5 aos de edad se bas en el estim ado de que 1%
gerontologa es el estudio de los procesos de envejecim ien de la poblacin tendra 65 aos cuando los beneficios fue
to. La geriatra es la rama de la m edicina general que trata ran requeridos, sin consecuencias para la econom a. Esta
con los problem as fisiolgicos, psicolgicos, econm icos visin cambi.
y sociolgicos del envejecim iento. A unque no existe una Los laboratoristas clnicos deben familiarizarse con
base fisiolgica especfica, com o pubertad o m enopausia, problem as nicos o frecuentes de la poblacin geritrica.
para la distincin en nuestra sociedad, por lo general se Es necesario que sean conscientes de las consideraciones
utilizan los trm inos ancianos, personas m ayores y pacien especiales con respecto a la recoleccin de muestras san
tes geritricos para incluir a cualquier persona de ms de guneas, el desarrollo de intervalos de referencia, el efecto
6 5 aos de edad. Sin embargo, debido a que el clnico se de los m edicam entos en los resultados qum icos y el diag
enfrenta con variacin im portante en la prdida relacio n stico de enfermedades en los ancianos. Sin embargo, lo
nada con la edad, tambin hay personas m ayores jven es ms im portante es com prender por com pleto los efectos
y ancianos jven es y mayores, que van de los 6 0 a los 75 del envejecim iento en los valores del laboratorio.
HE % de 65 aos de edad
CM CO CM y ms
Ao
FIGURA 32-1. Porcentaje de la poblacin de Estados Unidos con 65 aos de edad y ms (1900-2040). Las canti
dades para 2000, 2020 y 2040 son proyecciones. (Fuente: U.S. Bureau of the Census, Current Populatlon Reports,
Speclal Studies, P23-190, 65+ in the United States, Washington, D.C., U.S. Government Prlnting Office, 1996.)
644 PARTE IV REAS DE ESPECIALIDAD DE LA QUMICA CLNICA
La m itocondria juega un papel primordial en el m eca esperanza de vida y el lapso de vida m ximo, y retard el
nism o de la apoptosis. inicio de algunas enfermedades tpicas relacionadas con la
edad, as com o el deterioro de los procesos fisiolgicos (p.
Adems, ocurren cam bios por la accin de las espe
ej., capacidad de respuesta del sistema inmunitario y meta
cies oxgenorreactivas generadas y rescatadas de manera
bolism o de glucosa).4 Las razones de estos efectos al pare
incompleta a lo largo del ciclo celular que afectan las inter
cer slo se relacionan con la restriccin calrica y no con la
acciones celulares a travs de alteraciones en la matriz
reduccin de algn factor diettico, com o la ingesta de gra
intracelular, el intercambio intercelular de factores trpi
sa, o suplem ento diettico, com o vitaminas o antioxidantes.
cos, la liberacin de m ediadores de citocina inflamatorios
Por desgracia, an se desconoce el im pacto de la restriccin
y otros efectos. La base de la teora de los radicales libres es
calrica en el envejecim iento en seres hum anos.4
que los radicales libres de oxgeno causan dao progresivo
y aleatorio a los com ponentes celulares. U n radical libre es
un tom o o m olcula con uno o ms electrones impares; CAMBIOS BIOQUMICOS Y FISIOLGICOS DEL
por tanto, los radicales libres tienen una cantidad impar de ENVEJECIMIENTO
electrones, lo que produce un enlace abierto, o una enlace Las teoras del envejecim iento tienen puntos de inter
medio, de m odo que se vuelven bastante reactivos. El radical seccin y no son excluyentes entre s. Existen m uchos
libre se representa por un punto de exponente que indica el cam bios bioqum icos y fisiolgicos relacionados con el
electrn impar, por ejemplo, H20 = HO- + H-. El ion hidroxi- envejecim iento. En trminos generales, el envejecim ien
lo (H O ) es un radical libre bastante reactivo y quizs uno to est relacionado con dism inucin de la eficiencia en
de los ms dainos para las clulas. Adems, los radicales la adaptacin al estrs. Los sistem as de envejecim iento
libres son electroflicos y atacan sitios de densidad electrni continan funcionando de manera adecuada siem pre y
ca incrementada (p. ej., DNA, RNA, protenas, membranas). cuando no estn som etidos a estrs fisiolgico excesivo.
Al final, el dao del radical libre a los com ponentes celulares La capacidad del cuerpo para afrontar con xito el estrs
causa la muerte de la clula.3'511 dism inuye con el avance de la edad y vara entre los indi
El superxido ( 0 2) es otros radical libre generado en viduos. La m agnitud y el ndice en que declina la capa
el cuerpo por varias reacciones, entre las que se encuen cidad de adaptacin depende de m uchos factores, com o
tran fosforilacin oxidativa y reacciones citoplsmicas. Por la herencia, el estilo de vida y la nutricin; por tanto, se
fortuna, el cuerpo tiene una manera de manejar la mayor vuelve difcil generalizar en cuanto al com plejo proceso
parte de estos radicales libres. Por ejemplo, la superxido de envejecim iento. Existe u n envejecim iento relacionado
dismutasa, una enzima presente en todas las clulas del con la dism inucin del agua corporal total, la masa m us
cuerpo, convierte el superxido a perxido de hidrgeno. cular, el aum ento de densidad sea con rem odelacin (y
Luego otras enzimas (p. ej., glutatin peroxidasa y catalasa) dism inucin de la masa con la osteoporosis); increm ento
inactivan el perxido de hidrgeno. Los radicales hidroxilo de lpidos (p. ej., colesterol, colesterol de lipoprotena de
se neutralizan por com puestos no enzimticos, com o las alta densidad [HDL] y triglicridos); y un declive gradual
vitamina C y E y la provitamina A y fi-caroteno (los antioxi en las funciones respiratorias, cardiovasculares, renales,
dantes).3,6,11 En fecha reciente, surgi bastante apoyo e hepticas, gastrointestinales, inmunitarias, neurolgicas y
investigacin en esta particular teora de envejecim iento.11 del sistem a endocrino.1'4,6'1213
Aunque hay m uchas teoras del envejecim iento propues Adems, el envejecim iento suele vincularse con el desa
tas, no se ha comprobado por com pleto ningn m ecanism o rrollo de varias enfermedades y trastornos.414 En el cuadro
a travs de investigacin. De hecho, en estudios de varias 3 2 -2 se m uestran algunas enfermedades frecuentes y tras
especies, la nica intervencin conocida para retardar el tornos relacionados con el proceso de envejecim iento. Las
envejecim iento es la restriccin calrica. En roedores, por causas principales de m uerte en personas de 6 5 aos de
ejemplo, la restriccin calrica aument el prom edio de edad y ms se enumeran en el cuadro 32-3.
Los cam bios bioqum icos y fisiolgicos especficos del
CUADRO 32-2. ENFERM EDADES Y proceso de envejecim iento, puestos que se relacionan con
TRASTORNOS QUE SUELEN RELACIONARSE las pruebas de qum ica clnica, se analizan en las sigu ien
CON EL ENVEJECIMIENTO311_________________________ tes secciones. En el cuadro 3 2 -4 se resum en los cam bios
en los analitos qum icos relacionados con el proceso de
Aterosclerosis (p. ej., infarto al miocardio, enfermedad
envejecim iento. Los cam bios de los analitos son aquellos
renal, derram e cerebral)
que su elen m encionarse en la literatura.413 Siempre que
Cncer sea posible, los laboratoristas deben examinar la p osi
Diabetes mellitus bilidad del establecim iento de intervalos de referencia
ajustados con la edad basados en los valores de analitos
Hiperparatiroidismo determ inados para adultos m ayores sanos.
Hipertiroidismo
Hipotiroidismo Cambios de la funcin endocrina
Gamm opatas monoclonales (p. ej., mieloma mltiple) Durante m ucho tiem po se ha sabido que las anormalida
des relacionadas con la funcin endocrina son habituales
Osteoporosis
en el anciano, y su frecuencia tiende a aumentar durante
646 PARTE IV REAS DE ESPECIALIDAD DE LA QUIMICA CLINICA
CUADRO 32-3. LA S 10 PRIN CIPA LES C A U SA S el proceso de envejecim iento. N o slo hay cam bios obvios
D E M UERTE (65 A O S DE ED A D Y M S) en la produccin de horm onas por los rganos sexuales,
sino que tam bin existen variaciones en la funcin tiroi
1. Enfermedad del corazn dea, hiposaria y suprarrenal. Loas cam bios ms notables
2. Neoplasma maligno se relacionan con las horm onas gonadales y tiroides.
3. Enfermedad cerebrovascular Varios cam bios horm onales com plejos e im portantes
que se relacionan con la funcin gonadal ocurren tanto
4. Enfermedad pulmonar obstructiva crnica y
en hom bres com o en mujeres, entre los que se en cu en
trastornos relacionados
tran dism inucin de la produccin gonadal de estrge
5. Neumona e influenza no en mujeres (m enopausia) y testosterona en hombres
6. Diabetes mellitus (andropausia); produccin suprarrenal de dehidroepian-
7. Accidentes y efectos adversos drosterona (DHEA) y sulfato de DHEA (DHEAS) (adreno-
pausia); y decrem ento en la actividad de la horm ona del
8. Nefritis, sndrome nefrtico y nefrosis
crecim iento (GH)/eje del factor de crecim iento sem ejante
9. Enfermedad de Alzheim er a la insulina (FCI) (som atopausia).15,16 Com o resultado,
10. Septicemia se desarrollan regm enes de reem plazo horm onal com o
estrategia para retrasar o prevenir algunas consecuencias
Tomado de Birth and Deaths: United States, 1996. Mon Vital Stat Rep
1997;46(1 Supl 2): 1-40. del envejecim iento. Entre los 6 0 y 8 0 aos de edad, la pro
porcin entre testosterona y estradiol cae de 12:1 a 2:1.1,4
CUADRO 32-4. C A M B IO S EN AN A LITO S D E La dism inucin de testosterona se vincula de manera pri
Q U M IC A CLNICA SELECCIO N A D O S CON LA m ordial a la dism inucin de la funcin testicular.1,17 En
mujeres, los cam bios en el sistem a endocrino se relacio
E D A D 1,3'4'6'18'20-25'28
nan sobre todo con la m enopausia, m om ento en que hay
AUMENTO DISMINUCIN SIN CAMBIO cese de la produccin de estrgeno ovrico. La menopausia
GGT Albmina Cloruro es la su spensin perm anente de la m enstruacin causada
por declive de la actividad folicular ovrica; por lo g en e
Fosfatasa alcalina. Aldosterona Cortisol
ral, ocurre entre los 3 8 y 5 8 aos de edad. El proceso de
mujeres
apoptosis, m uerte celular desinflamatoria y no traumtica,
cq-Antitripsina Bilirrubina T, libre equilibra la proliferacin celular y m antiene la homeostasis.
Amilasa Eliminacin Haptoglobina El envejecim iento interrumpe la regulacin ordenada de la
de creatinina retroalim entacin neuroendocrina de la secrecin de GH,
horm ona luteinizante (LH), horm ona folculo estim ulan
AST DHEA Insulina, en
te (FSH) y horm ona adrenocorticotropina (AC TH ).17 Los
ayunas
productos especficos del gen prom ueven (Bax) la m uerte
US Hormona P C 0 2, o aumento celular regulada a travs de efectos m itocondriales o se
del crecimiento ligero oponen a la m ism a (B cl-2). A la desregulacin de la apop
Creatina cinasa P02 pH, o disminucin tosis se le ha im plicado en el desarrollo de enfermedades
ligero ligera que son ms frecuentes en individuos de edad avanzada,
com o cncer y trastornos neurodegenerativos (enferm e
y-Globulina, ligero 3 Sodio
t dades de A lzheim er y Parkinson). Las principales con se
Glucosa, en ayunas Protena total T4, o decremento cuencias de la deficiencia de estrgeno son la osteoporosis
ligero y la enfermedad cardaca coronaria (E C C ).18,19
HDL Transferrina Globulina unida La osteoporosis es un problema tanto de hombres com o
a la tiroides (GUT) de mujeres de edad avanzada, pero en particular en m uje
res despus de la menopausia (alrededor de los 5 0 aos de
Fosfato inorgnico edad). En esta poblacin, se calcula que alrededor de 30%
Lactato de las mujeres y 20 % de los hombres padecen osteoporo
deshidrogenasa (LD) sis.18,19 La osteoporosis implica una prdida gradual de la
masa sea. El esqueleto se debilita y se vuelve m enos denso
PC02
com o resultado del aumento del desequilibrio de la resor
Potasio, ligero cin sea debido a la rem odelacin sea. Las clulas osteo-
Colesterol total blsticas m antienen la hom eostasis del hueso. La resorcin
y formacin seas se llevan a cabo en una secuencia orde
Triglicridos
nada a lo largo de la vida por los osteoclastos y los osteo-
TSH, ligero blastos. Los osteoclastos eliminan la matriz sea a una tasa
cido rico de 1 5 0 um/da; el recambio se realiza por los osteoblastos
a una tasa de 1 um/da. El recambio del hueso aumenta la
Nota: Los cambios de los analitos son aquellos que suelen citarse en la
literatura. Tal vez exista un poco de variacin en los resultados de fuerza del m ism o por la estructura del osten. El recambio,
estudios sobre envejecimiento y en los resultados de laboratorio controlado en parte por la tensin muscular, se ve afectado
(es decir, tal vez un autor informe que no hay cambio importante para por el estrgeno. Es posible que la prdida descom pensa
un analito; en tanto otro pudiera informar un decremento o da de masa esqueltica conduzca a microfracturas y dolor.
incremento ligero para el mismo analito).
CAPTULO 32 QUMICA CLNICA Y EL PACIENTE GERITRICO 647
Por lo general, los valores de qumica clnica presentes en funcin tiroidea.24 La enfermedad llega a deprimir las con
la osteoporosis son normales, entre los que se encuentran centraciones en suero de la triyodotironina (T ) y T+ m ien
calcio, fsforo, magnesio y fosfatasa alcalina sricos, y las tras que la TSH permanece normal o incluso disminuye. Las
horm onas paratiroides y tiroides,1819 debido a que la pr alteraciones en la u nin proteica, el m etabolism o horm onal
dida sea no se relaciona con elim inacin masiva rpida de la tiroides y supresin de la liberacin pituitaria de TSH
de minerales, com o por hiperparatiroidismo (hipercalce quiz expliquen estos hallazgos en la enfermedad no rela
mia paratiroidea) o enfermedad de Paget (renovacin sea cionada con la tiroides. Por lo general, a estos pacientes se
incontrolada). Despus de que se establece el diagnstico les considera eutiroideos (es decir, tienen funcin tiroidea
de osteoporosis, las pruebas de laboratorio para evaluar el normal) y no se prescriben suplem entos horm onales.23 En
m etabolism o seo (renovacin) son tiles al seguir su pro m uchos de los primeros estudios se atribuyeron los cam
greso en respuesta para la terapia. Los factores principales bios en la funcin de la tiroides al proceso de envejecim ien
de riesgo son la dieta, el estilo de vida inactivo, la predispo to natural. Sin embargo, en estudios ms recientes se indica
sicin gentica, el tabaquismo, los trastornos endocrinos y que la funcin tiroidea anormal tal vez sea secundaria a
los m edicam entos.20 El problema secundario ms importan algn trastorno subyacente o relacionado, y no slo a la
te de la osteoporosis es la fractura de cadera, que es discapa- vejez.3 Debido a que los trastornos de la tiroides quiz se
citante y se relaciona con la falta de curacin en la poblacin presenten de manera sutil y a m enudo son difciles de diag
de mayor edad. Por tanto, la osteoporosis, es un problema nosticar, la evaluacin del laboratorio se vuelve importante.
importante entre los ancianos, que ocasiona increm ento de En personas sanas de edad avanzada, en esencia no existe
la morbilidad y de los costos para el cuidado de la salud. ningn cambio en T , T4 libre, globulina de unin a la tiroi
Adems, existe una relacin importante entre la hipovita- des y concentraciones de T3 inversas.6,23,24 Sin embargo, en
m inosis D y el hiperparatiroidismo secundario (fosfatasa algunos estudios se demostr una dism inucin importante
alcalina elevada y cambios osteoporticos) en ancianos.21,22 en los valores de T3 despus de los 5 0 aos de edad, con un
Es posible que esto se relacione con ingesta diettica, falta ligero aumento en la TSH, quiz com o respuesta normal a
de exposicin a luz del sol y reduccin de la conversin de la baja concentracin de Ty An no est claro si estos cam
25-hidroxivitamina D3a la forma 1,25 por el rin. bios estn relacionados con la edad o son resultado de una
La glndula tiroides es fundamental para la regulacin enfermedad subyacente.6,23
del proceso m etablico (p. ej., regulacin de la tasa meta Existen p ocos cam bios m orfolgicos del pncreas en
blica). Aunque existe poca evidencia de cambios en la ancianos, ms all de cierto grado de atrofia y aum ento
funcin tiroidea en ancianos, la incidencia del hipotiroidis de la incidencia de tum ores.23 A unque otros aspectos de la
m o y del hipertiroidismo se eleva.1,3,4 Se informa que la pre funcin endocrina, com o el sistem a hipotlam o-hipfisis
valencia de hipotiroidism o en ancianos est entre 0.5% y anterior y las glndulas suprarrenales, no m uestran alte
4.4% , en tanto que la del hiperparatiroidismo se encuentra racin en la produccin de cortisol, tanto la aldosterona
entre 0.5% y 3% .23 El hipotiroidism o, aunque ms frecuente com o la DHEA declinan con la edad.26,27 La prevalencia de
en ancianos, a m enudo resulta ms difcil de diagnosticar.24 la hipertensin tambin se increm enta con la edad: alrede
Por lo general, los signos y sntom as del hipotiroidism o se dor de 6 0 % de las personas m ayores de 6 0 aos padecen
interpretan de manera inadecuada tan slo com o vejez.3 esta afeccin.27 Entre las causas se incluyen increm en
En el hipotiroidism o subclnico, por ejemplo, los pacientes to de la resistencia perifrica debido a la aterosclerosis,
tienen pocos o nulos sntomas clnicos, pero presentan un trastornos endocrinos y renales crnicos y m edicaciones
valor normal de tiroxina (T4) con concentracin elevada m ltiples. En trm inos generales, existe un declive en la
de la horm ona estim ulante de la tiroides (TSH).24 La deter deficiencia de la regulacin hom eosttica.4,27
m inacin de si se tratar a estos pacientes con hormona
tiroides o se les dar seguim iento con pruebas peridicas
Diabetes mellitus y resistencia a la insulina
de la tiroides es controversial. La interpretacin de la fun
cin tiroidea en pacientes m uy enfermos y hospitalizados La tolerancia a la glucosa dism inuye con la edad. Las perso
tambin es difcil debido al efecto de la enfermedad no rela nas de edad avanzada presentan un valor de glucosa srica
cionada con la tiroides sobre las pruebas habituales de la en ayunas un poco mayor que los adultos ms jvenes. La
ES T U D IO CASO 32-1
Una mujer de 6 5 aos de edad hospitalizada debido a CUADRO 32-1.1 DE ESTUDIO DE CASO.
neum ona y diabetes incontrolada tuvo los resultados RESULTADOS DE LABORATORIO
de prueba de la tiroides que se m uestran en el cuadro
32-1.1 de estudio de caso. PRUEBA RESULTADO RANGO DE
REFERENCIA
glucosa en ayunas se eleva alrededor de 1 a 2 mg/dl (0 .1 1 dad abdom inal por el uso de la circunferencia de la cintura
mmol/L) por dcada a lo largo de la vida.628 El umbral o la proporcin cintura-cadera. La cintura suele m edirse en
renal (el lm ite en que la glucosa desem boca en la orina) su punto ms estrecho, y la cadera en su punto ms amplio
tambin se increm enta con la edad. Adems, existe altera alrededor de las nalgas. Una proporcin cintura-cadera
cin de la respuesta de la insulina a la glucosa.1,13 La diabe mayor de 1.0 en hombres o de 0 .8 en mujeres se correlacio
tes m ellitus es un problema frecuente en ancianos, con una na en gran medida con obesidad abdom inal y resistencia a
prevalencia de alrededor de L8.4% en personas de 6 5 aos la insulina, y confiere un mayor riesgo de enfermedades
de edad y ms. Las observaciones anteriores sobre los valo relacionadas. Se da por hecho que los productos finales de
res esperados en ancianos sanos tal vez resulten engaosas. glucacin avanzada (FGA) desem pean un papel clave en
La definicin de diabetes y prediabetes se revis para valo la nefropata diabtica (N D ) y otras com plicaciones diabti
res de glucosa por arriba de 1 2 6 mg/dl y 1 0 0 - 1 2 6 mg/dl, cas. stos ejercen efectos marcados en clulas endoteliales,
respectivamente. Se observa un aum ento alarmante de la m onocitos, macrfagos y unin a receptores FGA (RFGA).
obesidad con increm ento de la diabetes tipo 2 y aumento Los FGA se forman por la unin de aldosas en grupos NEl2
relacionado de hipertensin y riesgo cardiovascular. Este libres en las protenas. La unin de FGA a RFGA activa
sndrom e se caracteriza por grados variables de intoleran las clulas endoteliales, los m onocitos y los macrfagos,
cia a la glucosa, valores de colesterol y/o triglicridos anor que, al activarse, producen citocinas y expresan m olcu
m ales, presin sangunea elevada, obesidad corporal alta, las de adhesin y factores tisulares. stos participan en el
todos factores de riesgo independientes para la enfermedad increm ento del estrs oxidante y las lesiones microvascu-
cardaca. En el estudio PROCAM ( Prospective Cardiovascu lares en la diabetes.32 Adems, existe tambin una relacin
lar Munster), donde se exam in la relacin entre varios fac com pleja entre la masa adiposa, el factor a de necrosis
tores de riesgo cardaco y la incidencia de ataque cardaco tumoral (FNT-a) y la resistencia a la insulina. Sin embar
en 2 7 5 4 hombres de 4 0 a 6 5 aos en un periodo de cuatro go, an se desconocen los m ecanism os por los que FNT-a
aos, se dem ostr que tan slo la presencia de diabetes o induce resistencia a la insulina. Los genes inductores de
presin arterial elevada aument 2.5 veces el riesgo de ata FNT-a incluyen factores de transcripcin im plicados en la
que cardaco. Cuando estuvieron presentes tanto diabetes expresin del gen preadipocito o activacin del factor-a B
com o presin sangunea elevada, el riesgo se increm ent nuclear, citocinas y protenas inducidas por citocina, facto
ocho veces. U n perfil lipdico aum ent el riesgo 16 veces; res de crecim iento, enzim as y m olculas de sealizacin.33
cuando se observaron valores lipdicos anormales con pre Con base en esto, la diabetes tipo 2 es ms sospechosa
sin sangunea elevada o diabetes, o ambas, el riesgo fue 2 0 com o enfermedad inflamatoria crnica que com o trastorno
veces mayor. Estas anormalidades constituyen el sndrom e de la disfuncin endocrina pancretica.
de resistencia a la insulina. A ste se le describi por pri
mera vez en 1 9 8 8 , cuando se sugiri que el defecto estaba Cambios en la funcin renal
relacionado con la insulina.29 Se calcula que este sndrom e
afecta entre 7 0 y 8 0 m illones de estadounidenses.30 Debido Todos los aspectos de la funcin renal se ven afectados por
a que por lo general la resistencia se desarrolla m ucho antes el proceso de envejecim iento. La edad de com ienzo, los
de que aparezcan estas enfermedades, la identificacin y el cam bios especficos y las consecuencias son lo que vara
tratamiento de los pacientes con resistencia a la insulina en esta poblacin.34 La funcin renal com ienza a declinar
tiene un valor potencialm ente preventivo enorme. La afec despus de los 3 0 aos de edad y, para los 6 0 aos, se
cin es frecuente entre personas con obesidad (definida reduce a la mitad.34 Este declive se atribuye a la prdida gra
com o ndice de masa corporal [IMC] de 3 0 kg por m 2 o dual de nefronas, dism inucin de la actividad enzimtica
m s). El patrn de obesidad tambin es m uy importante. y m etablica de las clulas tubulares y aum ento de la in ci
Existe fuerte relacin entre la obesidad abdom inal y el gra dencia de procesos patolgicos (p. ej., aterosclerosis).34
do de resistencia a la insulina, lo que es independiente del La funcin renal se evala a cualquier edad a travs
peso corporal total.31 Es posible calcular el grado de obesi de pruebas clnicas, com o volum en urinario, anlisis de
U n hombre de 7 0 aos de edad por lo dem s sano ingre CUADRO 32-2.1 DE ESTUDIO DE CASO.
s al hospital para som eterse a ciruga abdominal. Los RESULTADOS DE LABORATORIO
resultados de prueba qum ica preoperatoria se m ues
tran en el cuadro 32-2.1 del estudio de caso. PRUEBA RESULTADO RANGO DE REFERENCIA
constituyentes y concentracin, nitrgeno ureico sangu jven es.28 A sim ism o, las inm unoglobulinas se reducen en
neo ( U S), cido rico y varias pruebas de elim inacin.34 una parte de la poblacin.
La elim inacin de creatinina, la tasa de filtracin glom eru Ciertas enzim as tambin cambian. La fosfatasa alcali
lar (TFG) y el flujo del plasma renal dism inuyen con la na (ALP) y la lactato deshidrogenasa (LD), por ejemplo,
edad.6,34 Los analitos, el US, el cido rico y el fosfato aum entan tanto en hombres com o en mujeres, pero es
inorgnico que refleja la TFG se elevan.6 poco probable que estos cam bios se relacionen con la edad.
En trm inos generales, los ancianos padecen d ism inu La sntesis de la urea, un proceso que ocurre en los hepa-
cin de la capacidad para conservar agua a travs de los tocitos, y el m etabolism o de la bilirrubina declinan con la
riones y una sensacin m ucho ms baja de sed.35 Esto, edad.3 36 La funcin de destoxificacin o m etabolism o del
por supuesto, llega a conducir a deshidratacin, un pro frmaco por parte del hgado es im portante al tomar en
blem a habitual y subestim ado en ancianos. La deshidrata cuenta el aum ento de las cantidades de m edicaciones que
cin no slo es un hallazgo frecuente en personas de edad por lo general se prescriben para pacientes ancianos. A un
avanzada, sino que tambin pudiera ser grave, lo que con que la poblacin de 6 5 aos de edad y ms es alrededor
ducira a una mayor tasa de m ortalidad.3 Entre las prue del 12% de la poblacin de Estados U nidos, recibe cerca
bas de laboratorio clnico indicativas de deshidratacin se de la tercera parte de todas las m edicaciones prescritas.3
incluyen hipernatremia, aum ento de la proporcin US/ Adems de las posibles interacciones farmacolgicas, la
creatinina, increm ento de osm olalidad srica y elevacin toxicidad del frmaco representa un problema potencial.
de gravedad especfica de la orina.3 Com o ya se m encion, con el proceso de envejecim iento
Adems de los cam bios renales caractersticos del enve existe cierta atrofia del hgado, as com o reduccin en el
jecim iento ya m encionados, existe m ayor incidencia de flujo sanguneo heptico. Esto, a su vez, tal vez conduzca
enfermedad renal y reduccin de la capacidad para con a la acum ulacin de algunos frmacos (p. ej., lidocana
trolar la excrecin de frmacos. Los problem as que afectan y m orfina) y la posibilidad de toxicidad.3 El tema de las
la funcin renal se relacionan con dao por infecciones o m edicaciones en el envejecim iento se analiza ms adelante
frmacos (m edicaciones), hipertensin o trastornos com o con mayor detalle.
diabetes m ellitus, tuberculosis y nefritis.34
Funcin pulmonar y cambios electrolticos
Cambios en la funcin heptica
Durante el proceso de envejecim iento, ocurren varios
En trm inos generales, la atrofia y la reduccin del peso cam bios anatm icos y fisiolgicos conocidos en la fun
heptico, as com o el declive de la funcin del hgado, cin cardiopulmonar. En realidad la funcin pulm onar
son frecuentes en ancianos.3,36 A unque el hgado reali com ienza a declinar despus de los 2 5 aos de edad com o
za m uchas funciones (captulo 2 2 , Funcin heptica ), en resultado de cam bios en el pulm n, la caja torcica, los
esta seccin se tratan tres de sus papeles ms importantes m sculos respiratorios y los centros respiratorios del sis
(sntesis, excrecin y secrecin y destoxificacin y m eta tema nervioso central.37 Desde luego, la funcin pulm onar
bolism o de frm acos) con relacin a los procesos de enve es, quiz, ms afectada por hbitos personales, com o el
jecim iento. tabaquismo, y por contam inacin am biental.37
La funcin sinttica del hgado se m onitorea por m edio Entre los cam bios descritos ms a m enudo relaciona
de las concentraciones de protenas en plasma. Tietz y dos con la funcin pulm onar en ancianos se incluyen los
colegas informaron una ligera dism inucin de la protena valores de P 0 2 y PCO,. Estos cam bios reflejan la dism i
total en personas ancianas adaptadas.28 Se observa una n ucin de la capacidad vital (pu lm n) encontrada en la
declinacin, tambin, de la albm ina y transferrina. Hay mayora de la gente de edad avanzada.37 El P 0 2 arterial,
que tomar esta observacin con cierta reserva. La homo- por ejemplo, dism inuye durante el proceso de envejeci
genizacin de la muestra de poblacin de edad avanzada m iento, en tanto se informa que el P C 0 2 aumenta un poco
adaptada se tomar con reserva. El descenso en la albm i o perm anece intacto.4-37 Est docum entado que el valor del
na y transferrina pudiera atribuirse a un grado im portante pH sanguneo perm anece bastante constante o dism inuye
de desnutricin y enfermedad heptica en la poblacin slo de manera ligera.6'37
estudiada. N o se descuenta la existencia de desnutricin, En los electrlitos de sodio, potasio y cloruro se obser
enfermedad heptica alcohlica, depresin e ingesta defi va poco cambio en ancianos sanos en com paracin con
ciente de nutrientes en la poblacin ambulatoria de edad los encontrados en adultos ms jven es.27 El sodio per
avanzada. En la poblacin de asilo, las tasas de desnutri m anece m uy constante en el com ienzo de la edad adulta
cin energtica proteica alcanzan hasta 4 0 a 50% . Si la a la madurez. Los valores de cloruro son, tambin, m uy
tasa de desnutricin fuera de 10% y las personas am bu constantes, pero se ha encontrado que son u n poco ms
latorias de edad avanzada tuvieran albmina de 2 .8 g/dl, elevados en personas mayores de 9 0 aos de edad. Sin
la concentracin de albmina srica para una muestra de embargo, el potasio se increm enta ligeram ente a partir de
1 0 0 0 0 personas a un nivel de 3.5 g/dl disminuira a 3 .4 g/dl. los 6 0 a 9 0 aos.27
Adems, la diabetes tipo 2 quiz est relacionada con Las enfermedades relacionadas con el sistem a respira
esteatosis no alcohlica y esteatohepatitis, lo que con d uci torio son frecuentes en ancianos, y explican 2 5 % de todas
ra a reduccin de la albmina y transferrina e increm en las m uertes en individuos mayores de 8 5 aos.37 Entre
to de la fosfatasa alcalina. Sin embargo, la y-globulina y las enfermedades respiratorias de ancianos se encuentran
la oq-antitripsina se elevan un poco con la edad, en tanto la bronquitis crnica, enfisema, neoplasia e infecciones p ul
haptoglobulina perm anece en esencia igual que en adultos m onares, en particular tuberculosis y neum ona.37
650 PARTE IV REAS DE ESPECIALIDAD DE LA QUMICA CLNICA
Cambios lipideos y cardiovasculares si es que lo hace, entre los 6 0 y 9 0 aos de edad, pero se
eleva en forma definitiva en m ayores de 9 0 aos.28
La enfermedad cardiovascular an constituye una causa
im portante de m uerte tanto en hombres com o en mujeres
de edad avanzada. En Estados U nidos, la aterosclerosis, un
RESULTADOS DE QUMICA CLNICA
tipo de arteriosclerosis, es la causa principal de m uerte por Y ENVEJECIMIENTO
enfermedad cardiovascular.3 La aterosclerosis , un proceso Adems del conocim iento de los cam bios bioqum icos y
patolgico progresivo que com ienza en etapas tempranas fisiolgicos del envejecim iento, es necesario que los labo
de la vida, com prende alteraciones vasculares caracteriza ratoristas clnicos com prendan otros factores que tal vez
das por acum ulaciones de grasa en las paredes vascula afecten los resultados qum icos clnicos en ancianos. Por
res.3 La aterosclerosis se desarrolla con lentitud a travs ejemplo: el proceso de envejecim iento afecta lo bastan
de los aos. Entre las consecuencias de la aterosclerosis te los resultados de pruebas de laboratorio para garantizar
se incluyen hipertensin, hemorragia, trom bosis, derrame intervalos de la referencia separados en esta poblacin?
cerebral y enfermedad cardaca coronaria (ECC). La ECC, Cules variables preanalticas (p. ej., dieta, postura, m edi
a la que tambin se le denom ina enfermedad cardaca isqu caciones) relacionadas con los ancianos afectan los resul
mica , todava es causa principal de discapacidad y m uerte tados de qum ica clnica? De qu manera el proceso de
en Estados U nidos. Su prevalencia se increm enta con el envejecim iento afecta la interpretacin de los valores del
aum ento de edad.38 Los factores de riesgo para ECC abar frmaco en el anciano? Cules son los efectos del ejercicio
can la edad, el sexo, la predisposicin gentica, la obesi y la nutricin en personas de edad avanzada y los resultados
dad, la hipertensin, el estado fsico deficiente, la diabetes qum icos? En el cuadro 32-5 se m uestran algunos factores
m ellitus, el consum o de tabaco y la hiperlipidem ia.3 que los laboratoristas deben tomar en cuenta al m om ento
Est dem ostrado que los lpidos desem pean un papel de interpretar los valores de laboratorio en ancianos.
im portante en el proceso aterosclertico y el riesgo de
ECC son colesterol de HDL y lipoprotena de baja den
sidad (LDL), colesterol total y triglicridos. En un estu
Establecimiento de intervalos de
dio de Tietz y colegas con ancianos en buen estado de referencia en ancianos
adaptacin, se encontr elevacin del colesterol total, el La interpretacin de los resultados de las pruebas y de los inter
colesterol HDL y los triglicridos com o parte del proceso valos de referencia para ancianos tal vez sea confusa y comple
de envejecim iento.28 Sin embargo, se consider al coleste ja. Adems, al parecer existe cierta confusin respecto al tema
rol HDL, o colesterol bueno, com o un factor de riesgo de los intervalos de referencia para los ancianos entre expertos
opuesto im portante para ECC, con valores de m enos de en el campo de la qumica clnica y el envejecimiento.
alrededor de 3 5 mg/dl que indican riesgo elevado y valores
de ms de 3 5 mg/dl que indican riesgo bajo.3
CUADRO 32-5. FACTORES PARA TOMAR
EN CUENTA EN LA INTERPRETACIN DE
Cambios enzimticos
RESULTADOS DE LABORATORIO CLNICO EN
Los cambios en los valores enzim ticos durante el proceso ANCIANOS322 33_________________________________________
de envejecim iento estn estudiados de manera exhaustiva.
Ejercicio
Son variados y com plejos. La concentracin y sntesis enzi
mtica estn bajo control gentico y son afectadas por hor Duracin
monas, sustratos y otros factores. Al parecer las enzim as no Tipo
siguen ningn patrn en particular relacionado con la edad;
aumentan, dism inuyen o perm anecen constantes durante Medicaciones
el proceso de envejecim iento. Sin embargo, se encontr Polifarmacia
que la capacidad para com enzar los cambios de adaptacin
Movilidad
en la actividad de las enzimas se altera con la edad.3
Entre las enzim as que se informa que cambian en las Inmovilidad
personas ancianas sanas se encuentran la aspartato am i Postura
notransferasa (AST), alanino aminotransferasa (ALT),
Estado nutricional
ALP, y-glutamiltransferasa (GGT), creatina cinasa (CK),
lactato deshidrogenasa y amilasa.28 Se observa que la AST, Hbitos personales
GGT, LD y amilasa aumentan tanto en hom bres com o en Uso del alcohol
mujeres. Las concentraciones de ALT slo se increm entan
Tabaquismo
de manera marginal en hombres, en tanto que en mujeres
no se observa cambio. Sin embargo, la ALP aumenta de Presencia de varios trastornos crnicos o subclnicos
manera im portante en mujeres, mientras que en los h om Validez del intervalo de referencia
bres no se eleva hasta los 9 0 aos de edad. Los valores de
CK en hombres aumentan un poco entre los 6 0 y 6 9 aos Variables para la recoleccin de la muestra
de edad; sin embargo, entre los 7 0 y 9 0 aos, dism inuyen. Lugar
En mujeres, los valores de CK tambin se increm entan
Traumatismo
ligeram ente de los 6 0 a 7 0 aos de edad, pero dism inuyen
en m ayores de 7 0 aos. La lipasa slo aumenta un poco, Volumen
CAPTULO 32 QUMICA CLNICA Y EL PACIENTE GERITRICO 651
resultado de la dism inucin relacionada con la edad, de la tran la dism inucin del riesgo cardiovascular, el control del
masa heptica y el flujo sanguneo.44 peso, el increm ento de la capacidad funcional, la mayor
El cam bio farm acocintico ms im portante est rela captacin de nutrientes y mejor sueo.3,47,48
cionado con la elim inacin de frmacos a travs de los A m edida que una m ayor cantidad de personas de edad
riones. La masa renal y el flujo sanguneo descienden con avanzada busque la participacin en programas del ejerci
la edad.44 La albmina srica tal vez tambin dism inuya cio, los laboratoristas necesitarn una mejor com prensin
debido a la desnutricin por energa proteica, lo que afec de la manera en que el ejercicio afecta los resultados de
ta los frmacos que se transportan ligados a la albmina. las pruebas de estos individuos; por ejem plo, el ejercicio
A sim ism o, la tasa de filtracin glom erular (al medirla por afecta los lpidos al reducir los triglicridos y aumentar el
elim inacin de la creatinina) declina de manera lineal con colesterol HDL, la insulina dism inuye y la horm ona del
la edad.4,44 En frmacos excretados sobre todo por la ori crecim iento se increm enta.47
na, se debe tener precaucin en el tratamiento para evitar Se tomarn en cuenta el tipo de ejercicio, la sincroni
cualquier sobredosificacin o efectos txicos.44 zacin de la recoleccin de la muestra y las m edicaciones
La dosis del frmaco se ajusta a la elim inacin de la prescritas. La glucosa e insulina, por ejem plo, no respon
creatinina a travs de la frmula de Cockroft-Gault:43 den de la m ism a manera a diferentes tipos de ejercicio.
Ambas perm anecen estables en esencia durante ejercicio
C1 _ ( 1 4 0 - edad) (peso en kg) 3
isom trico con grupos de m sculos grandes, en tanto la
cr (7 2 ) (creatinina srica) insulina dism inuye durante ejercicio dinm ico de inten
sidad moderada a elevada.47 La sincronizacin de la reco
En mujeres, hay que m ultiplicar por 0 .8 5 . El peso ideal,
leccin de la muestra es im portante porque la secrecin
ms que el peso habitual, corrige el peso en individuos
de glucagon se estim ula despus de ejercicio intenso en
obesos. Debido a que la creatinina srica m enor a 0 .9 pro
pacientes con diabetes tipo 2, lo que ocasiona aum ento
porciona elim inacin de creatinina falsam ente elevada, se
transitorio de las concentraciones de glucosa durante alre
debe redondear la creatinina.
dedor de una hora despus del ejercicio.47
Los factores psicosociales frecuentes entre ancianos,
Los problemas nutricionales son frecuentes en pacien
com o la depresin, demencia, pobreza y soledad, tambin
tes de edad avanzada. Existe un volum en creciente de
son factores que contribuyen a los problem as de m edica
inform acin sobre las necesidades nutritivas de esta pobla
cin. Los pacientes ancianos, por ejemplo, tal vez sean
cin. Los ancianos estn en mayor riesgo de estado nutri
m enos dciles (p. ej., debido a la pobreza) o incapaces de
cional deficiente (p. ej., desnutricin calrica-proteica) en
seguir las instrucciones de m edicacin, lo que aumenta el
com paracin con adultos ms jvenes, com o resultado de
problema.44 D ebido a que es ms probable que los efectos
factores fisiolgicos y psicolgicos, entre los que se encuen
de los frmacos sean exagerados en ancianos, los labora
tran cam bios en el sabor y olor relacionados con la edad;
toristas deben dominar los principios del m onitoreo tera
malabsorcin causada por m edicam entos o cam bios en la
putico del frmaco y los efectos del envejecim iento en
acidez estomacal; y m ovilidad, discapacidad, depresin y
la vigilancia teraputica del frmaco. Para proporcionar la
pobreza.46,49,50 Se informa que la incidencia de desnutricin
mejor calidad de atencin a los ancianos, tal vez sean n ece
entre residentes de edad avanzada de centros de cuidado de
sarios el m onitoreo frecuente del frmaco y el desarrollo de
la salud a largo plazo oscila entre 5 0 y 85% ; en hospitales
rangos teraputicos para personas de edades avanzadas.
de cuidado intensivo, el porcentaje va de 17 a 65 % .51
Las relaciones entre nutricin, salud general, envejeci
Los efectos del ejercicio y la nutricin en
m iento y enfermedad son importantes y requieren de investi
ancianos y resultados qumicos gacin adicional. Un dficit calrico-proteico quiz conduzca
En m uchos estudios se indica que el ejercicio constituye una a dism inucin de la resistencia a la infeccin y linfopenia. El
estupenda manera para que el anciano mantenga la salud y exceso de caloras da com o resultado obesidad y la probabi
aum ente la longevidad. Rowe, en u n estudio con ms de lidad de diabetes tipo 2. Las deficiencias en las vitaminas A,
4 0 0 0 0 muj eres posmenopusicas durante un periodo de siete C y E (los antioxidantes) quiz conduzcan a aterosclerosis
aos, inform que aquellas que practicaban ejercicio regu y aumento del riesgo de cncer.8 Las dietas bajas en fibra tal
lar tenan 20 % m enos probabilidad de morir que aquellas vez produzcan diverticulitis y cncer de colon.3
que eran sedentarias.35 Shephard concluye que l ejercicio A travs de la valoracin nutricional, habra la p osibi
pudiera beneficiar a la poblacin sedentaria de edad avan lidad de prevenir e identificar deficiencias nutricionales
zada (7 5 a 8 0 aos) al mejorar su salud general, aumentar en ancianos, para evitar m uchas enfermedades crnicas
los contactos sociales y elevar la funcin cerebral.46 La obe de envejecim iento y prom over una mejor salud.38,52,53 En
sidad, com o resultado de cambios metablicos, actividad el laboratorio clnico, la valoracin nutricional incluye la
reducida y alteraciones relacionadas con la edad en msculos, m edicin de varias protenas (p. ej., albmina, prealbm i
constituye un problema frecuente en ancianos, que tambin na, transferrina y protena unida con retinol) y las con cen
resulta beneficiado por el ejercicio.47,48 En otros estudios se traciones vitamnicas. En el captulo 3 1 , Vitaminas, grasas
indica que: a ) cuanto ms frecuente sea el ejercicio, mayor esenciales y macronutrientes , se muestra un anlisis detalla
ser el beneficio, b) el ejercicio moderado (p. ej., caminar) do sobre la valoracin nutricional y las vitaminas.
es casi tan benfico com o el ejercicio vigoroso y c) el ejer
cicio llega a anular los efectos adversos de otros factores de RESUMEN
riesgo, com o presin sangunea elevada e hiperglucemia.27 En Estados Unidos, la proporcin de personas de edad
Entre los beneficios a la salud debido al ejercicio se encuen avanzada va en aumento entre la poblacin, lo que cons
CAPTULO 32 QUMICA CLNICA Y EL PACIENTE GERITRICO 653
tituye un desafo primordial para el sistema de cuidado de seleccionados. Adems del con ocim ien to de los cam bios
la salud.38 Con este incremento, se volver cada vez ms bioqum icos y fisiolgicos bsicos del envejecim iento, es
importante que los laboratoristas clnicos conozcan el pro necesario que los laboratoristas clnicos com prendan otros
ceso de envejecim iento y sus efectos en los resultados de la factores que pudieran afectar los resultados de la prueba
qumica clnica.3 Se ha descrito al proceso de envejecim ien de qum ica clnica, que incluyen el establecim iento y la
to com o una prdida de adaptacin con dism inucin en la interpretacin de los intervalos de referencia, ciertas varia
viabilidad y esperanza de vida. El conocim iento del proceso bles preanalticas, m edicaciones prescritas y los efectos del
de envejecim iento y las enfermedades crnicas relacionadas ejercicio y la nutricin.
con dicho proceso constituyen la base para comprender los Sin embargo, el laboratorista clnico tiene que recordar
cambios en los valores del laboratorio. Aunque se han des que el envejecim iento no est determ inado por la b iolo
crito teoras del envejecim iento, ninguna es adecuada. ga de un individuo o por un marco de tiem po especfico.
El envejecim iento est relacionado con varios cam bios Existe extensa individualidad entre las personas con res
fisiolgicos: dism inucin de la eficiencia en el m anteni pecto al ritmo en que ocurre el envejecim iento. Los facto
m iento de la homeostasis; reduccin de la masa m uscular res del m edio am biente y sociales tambin son im portantes
y descenso de las funciones respiratoria, cardiovascular, y desem pean una funcin en el proceso de envejecim ien
renal, heptica, inmunitaria, neurolgica y del sistem a to. Con el increm ento de la proporcin de ancianos en
endocrino. El m etabolism o de carbohidratos, protenas, la poblacin, se vuelve an ms im portante investigar los
lpidos y calcio cambia con la edad. En el cuadro 3 2 - 4 se aspectos fisiolgicos y psicosociales del envejecim iento.
m uestran los cam bios especficos en analitos qum icos
PREGUNTAS DE REPASO
1. Cul de los siguientes analitos del suero perm anece 4. Al interpretar resultados de pruebas de laboratorio en
esencialm ente intacto en adultos ancianos sanos? ancianos, los laboratoristas clnicos deben tomar en
a) Triglicridos. cuenta todo lo siguiente, EXCEPTO:
b) Glucosa. a) M edicacin m ltiple (polifarmacia).
c) Cloruro. b ) N utricin deficiente o desnutricin.
d) Bilirrubina. c) Trastornos subclnicos.
d) C ociente de inteligencia (IQ).
2. Cul de los siguientes constituye un trastorno habi
tual y subvalorado en ancianos? 5. Cul de las siguientes teoras de envejecim iento
a) Hiponatremia. im plica la acum ulacin de productos de desecho que
b) Deshidratacin. im piden a la clula llevar a cabo sus funciones norm a
c) A m iloidosis. les?
d ) M ielom a mltiple. a) Teora de la programacin gentica.
b ) Teora proteica de la glucacin.
3. Cul de las siguientes NO es una de las diez cau
c) Teora del dao gentico aleatorio.
sas principales de m uerte en personas mayores de 6 5
d) Teora del radical libre.
aos de edad?
a ) Enfermedad de Alzheimer.
b) Neum ona.
c) Diabetes m ellitus.
d) Diverticulitis.
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Qumica clnica
peditrica
Michael J. Bennett
CONTENIDO DE L CAPTULO
O B J E T I V O S
Al completar este captulo, el laboratorista clnico funcin endocrina, la funcin heptica y el m eta
podr: bolismo seo.
Definir los cambios de adaptacin que ocurren en Explicar de qu manera el tratam iento de frm a
el recin nacido. cos y la farmacocintica diferencian entre nios y
Describir los cambios del desarrollo que ocurren adultos.
durante la niez. A nalizar los procedimientos usados para diagnos
A nalizar los problemas relacionados con la recolec ticar enferm edades metablicas hereditarias.
cin de sangre en nios pequeos. Describir el desarrollo y los trastornos del sistem a
Comprender el papel de las pruebas en el punto inmunitario.
de atencin en el entorno peditrico.
Resumir los cambios que ocurren en nios con
respecto al equilibrio electroltico y del agua, la
655
656 PARTE IV REAS DE ESPECIALIDAD DE LA QUMICA CLNICA
________________________________________ T R M I N O S C L A V E
Crecimiento Espectrometra de masas M adurez sexual Pruebas en el punto
Desarrollo fisiolgico en tndem M etabolismo del de atencin
Enfermedad gentica Inmunidad frmaco Sistema endocrino
Las pruebas en el punto de atencin (PPDA), o pruebas cerca Sitios de oxigenacin de membrana extracorporal
del paciente, desem pean un papel importante y en expan
sin en la prctica peditrica. Los dispositivos de las pruebas
N o se permitir que el dispositivo pase al anlisis de la
que son porttiles y fciles de usar, requieren un volum en
muestra del paciente sin ejecutar y validar los procedi
de muestra pequeo, no necesitan preparacin de sta y
m ientos de aseguramiento de la calidad apropiados.
proporcionan resultados rpidos a un costado de la cama, y
Posibilidad de descargar los datos en el sistem a de
se suministran al m om ento para incrementar las PPDA.
inform acin de laboratorio (SIL) del hospital para
Para proporcionar rentabilidad y aseguramiento de la
su evaluacin por parte del responsable del asegura
calidad para las PPDA, es necesario abordar varios factores.
m iento de la calidad del hospital. Adems, la descar
1. El analito realmente requiere tiempo de respuesta inm e ga de los datos permitir el registro y la entrada de
diato para el control ptim o del paciente? Se empieza a datos en las grficas de evolucin del paciente, fun
disponer de analizadores que m iden cantidades crecien ciones que se pierden con rapidez cuando se utilizan
tes de diferentes analitos al lado de la cama del paciente. analizadores que no se vinculan con el SIL.
Por lo general, el costo de la m edicin de PPDA es mayor
Los datos generados por dispositivos de PPDA tienen
que la m edicin del laboratorio tradicional. La idea de
lim itaciones. La interpretacin analtica tpica no es tan
resultados instantneos es tan seductora que los usuarios
buena com o el analizador de laboratorio principal. Los
no laboratoristas a m enudo ignoran los factores econ
datos de PPDA son m enos precisos y no son adecuados
m icos. En la institucin del autor de este libro, el labora
para m onitorear la terapia en circunstancias donde los cam
torio clnico juega un papel preponderante al determinar
bios pequeos son importantes. El rango lineal de la mayor
cules anlisis de PPDA estarn disponibles y en cul
parte de los dispositivos de PPDA n o es tan amplio com o el
situacin clnica tienen valor real (cuadro 33-3).
analizador qum ico principal. Es necesario que los usuarios
2. Q uin elije el dispositivo de PPDA? Puesto que el cam
sean conscientes de estas lim itaciones. U n ejemplo primor
po de PPDA se est expandiendo, la cantidad de dispo
dial en la institucin del autor es el uso de analizadores
sitivos en el mercado tambin aumenta. El laboratorio
de PPDA de glucosa. El instrum ento usado para el control
clnico constituir el sitio en que se evalen por primera
diabtico agudo pierde linealidad por arriba de los 4 0 0 mg/
vez los dispositivos de PPDA para uso institucional. El
di, en particular en pacientes que son hem oconcentrados.
laboratorio realizar selecciones en cuanto a la instru
El autor recom ienda que cualquier concentracin de glu
m entacin. Entre las caractersticas im portantes de un
cosa de PPDA por arriba de los 4 0 0 mg/dl se verifique de
buen dispositivo de PPDA se incluyen las siguientes:
inm ediato en el laboratorio central. La hipoglucem ia tam
La capacidad para bloquear a los usuarios sin prepa bin es bastante frecuente en pediatra y suele ser difcil de
racin. Slo se permitir acceso a individuos acre cuantificar con precisin a travs de dispositivos de PPDA.
ditados para el uso del dispositivo a travs de un Adems, las concentraciones bajas de glucosa se verificarn
cdigo personal. con un analizador del laboratorio central ms sensible.
CAPTULO 33 QUMICA CLNICA PEDITRICA 659
El m antenim iento primario de la hom eostasis del gas san ACIDOSIS RESPIRATORIA HIPOVENTILACIN/RETENCIN DE C 02
guneo y del pH despus del nacim iento requiere que los Acidosis metablica Prdida de bicarbonato tubular
pulm ones y riones estn lo bastante m aduros para regu renal
lar el m etabolism o cido y base. Alrededor de las 2 4 sem a
Anoxia
nas de gestacin, el pulm n expresa dos distintos tipos de
clulas: n eum ocitos tipo 1 y tipo 2. Los neu m ocitos tipo 2 Perfusin tisular deficiente
son responsables de la secrecin de surfactante, que con Enfermedad metablica
tiene la lecitina y esfingom ielina de fosfolpidos. El sur
Alcalosis respiratoria Hiperventilacin
factante es necesario para la expansin de los pulm ones y
la transferencia de gases sanguneos despus del parto. El Amoniaco sanguneo elevado/
oxgeno atraviesa la circulacin y el dixido de carbono enfermedad metablica
se elim ina y espira. La inm adurez del sistem a surfactante Alcalosis metablica Estenosis pilrica/prdida de
com o resultado de estado prematuro o RCI ocasiona sn cido gstrico
drom e del dolor respiratorio (SDR). En este ltim o, hay
insuficiencia para excretar dixido de carbono y, com o Administracin excesiva de
resultado, los valores de C 0 2 aumentan, lo que causa aci bicarbonato
dosis respiratoria. Las concentraciones de oxgeno son Potasio sanguneo bajo
bajas y producen requerim ientos adicionales de oxgeno
para el beb.
Las cantidades relativas de lecitina y esfingom ielina
son crticas para la funcin normal del surfactante. La
m edicin de lecitina/esfingom ielina del lquido am nitico oxgeno y la m ed icin transcutnea. Los m onitores de
(ndice L7E) se ha utilizado por m uchos aos para predecir C 0 2 transcutneos tambin se utilizan de manera extensa.
la madurez pulm onar fetal. A un ndice m enor de 1.5 se le La m edicin del estado acidobase requiere el m uestreo
considera indicativo de deficiencia de surfactante. sanguneo. La m ayor parte de los analizadores de gas san-
La prueba de la fibronectina fetal es una nueva prueba guneo/acidobase se adaptan para la obtencin de m ues
prom isoria diseada para determinar la probabilidad de tras capilares pequeas, que se recolectan de manera
parto prematuro y riesgo de madurez fetal.4 La fibronec rutinaria en situaciones peditricas. Es im portante que la
tina es una protena secretada slo por el feto; hacia el persona que extraiga la sangre capilar lo haga en forma
trmino, se encuentra en el lquido cervical materno. Se anaerbica, lo que requiere el calentam iento com pleto del
encuentra disponible u n dispositivo de PPDA, que est sitio capilar y la recoleccin de una m uestra sangunea de
diseado para su uso en el consultorio del obstetra. Posee flujo libre a partir de una perforacin con bistur. Se debe
elevado valor de prediccin de parto tem prano inm inente sellar la m uestra para asegurar un m nim o intercambio
del beb y es posible emplearlo para alertar al pediatra del de gas. El anlisis se realizar de inm ediato para no afectar
potencial de SDR. la integridad de la muestra. En el laboratorio donde labora
El traumatismo y la anoxia relativa durante el parto el autor de este libro se m antiene un objetivo de tiem po de
inducen, tambin, acidosis en el recin nacido. Por lo respuesta de 10 m in a partir de la recepcin de la m ues
general, se trata de acidosis m etablica relacionada con tra.
increm ento en la produccin de cido lctico. En esta La mayora de los analizadores de gas sanguneo m iden
situacin, las concentraciones de bicarbonato srico son PO,, P C 0 2, y el pH por electrodos del ion especfico y cal
reducidas en comparacin con la acidosis respiratoria en culan la concentracin del bicarbonato por la ecuacin de
presencia de SDR. La acidosis metablica persistente en el Henderson-Hasselbalch. sta es m enos vlida cuando el
recin nacido que es difcil de corregir con reem plazo de pH est lejano, fuera del rango fisiolgico norm al (acido-
bicarbonato constituye una indicacin de evaluacin adi sis o alcalosis extrem a). En esas ocasiones, puede volverse
cional intensa para detectar posible error innato del m eta im portante medir la concentracin de bicarbonato usando
bolism o u otras etiologas que requieren diferenciacin una m ed icin directa.
(cuadro 33-4). En aos recientes se han m ejorado m uchos analizado
La alcalosis es inusual en pediatra. Una causa impor res de gas sanguneo para medir analitos adicionales, entre
tante es la hiperamonemia, la cual puede ser secundaria a los que se incluyen sodio, potasio y cloruro sanguneos,
algunas etiologas, incluyendo enfermedad heptica y erro a travs de electrodos especficos del ion y lactato y urea.
res del m etabolism o en el recin nacido (cuadro 33-4). La principal ventaja de este tipo de analizador en pedia
tra es que se puede utilizar sangre entera. Por lo general,
los volm enes son ms pequeos que los que se requieren
Medicin del gas sanguneo y acidobase
para el analizador qum ico central, y la falta de necesi
Es posible m edir con facilidad el estado de oxgeno a tra dad de centrifugacin acorta el tiem po de respuesta. Una
vs del m onitoreo transcutneo no invasor. Est dem os desventaja del uso de sangre entera es que el analista no
trada la buena correlacin entre la presin arterial de puede detectar si una muestra est hem olizada.
660 PARTE IV REAS DE ESPECIALIDAD DE LA QUMICA CLNICA
CUADRO 33-5. DESARROLLO DE LA FILTRACIN nefastos, con riesgo elevado de ataques. Esto es resulta
GLOMERULAR EN EL RECIN NACIDO do del cam bio de agua dentro o fuera de las clulas cere
brales, con reduccin o expansin concurrente de estas
n d ic e d e f il t r a c i n g l o m e r u l a r
clulas. La hipernatremia se origina por prdida de lquido
EDAD (ml/min por 1.73 m2 MEDIA) RANGO
hipertnico. La hiponatrem ia se debe, tambin, a conteni
1 da 24 3 a 38 do excesivo de agua corporal y es necesario distinguirla de
2 a 8 das 38 17 a 60
la prdida hipertnica. La evaluacin clnica y la m edicin
de otros com ponentes, com o el hem atcrito, la albmina
10 a 22 das 50 32 a 68 srica, la creatinina y el nitrgeno de la urea sangunea, se
37 a 95 das 58 30 a 86 utilizan para diferenciar estas etiologas. Todos estos com
ponentes sern elevados con hem oconcentracin. D esde el
1 a 2 aos 115 95 a 135a
punto de vista clnico, en condiciones norm ales es posible
Valores de adultos. distinguir la deshidratacin de la hidratacin excesiva.
El tratamiento de la prdida de electrlitos y agua se
REGULACIN DE LOS ELECTRLITOS Y DEL dirige al reem plazo de la prdida para recobrar los valores
fisiolgicos norm ales. Se debe tener cuidado de evitar un
AGUA: FUNCIN RENAL reem plazo dem asiado apresurado, en particular en la des
A partir de la semana 3 5 de gestacin, los riones fetales se hidratacin hipertnica. Si el reem plazo de agua se realiza
desarrollan con rapidez en preparacin para la vida extrau m uy rpido, tal vez ocurra expansin rpida del volum en
terina.1 Los riones, rganos crticos para el m antenim iento celular neuronal, lo que ocasiona ataques.
de la hom eostasis electroltica y del agua, controlan la pro Las causas de la hiperpotasemia e hipopotasemia se m ues
porcin de prdida y retencin de sal y agua. Al trmino, tran en el cuadro 33-7. Los sntomas de la hiperpotasemia
ni los glom rulos ni los tbulos renales funcionan al ritmo (potasio srico, > 6 .5 meq/L) comprenden debilidad m uscu
normal. El ndice de filtracin glomerular es de alrededor de lar y defectos en la conduccin cardaca que quiz produz
25 % del que se observa en nios ms grandes y no alcanza can insuficiencia cardaca. En pediatra, es m uy importante
potencial com pleto hasta los 2 aos de edad (cuadro 33-5). reconocer la hiperpotasemia artificial com o resultado de
La funcin tubular tambin se desarrolla a un ritmo similar. hem olisis y recoleccin sangunea capilar deficiente, sin
La eficacia de concentracin m xima del rin slo es de hem olisis pero con filtracin elevada de potasio tisular.
alrededor de 78% de la del rin de adultos en este m om en D ebido a que la situacin con respecto a la hom eosta
to, aunque la respuesta tubular a la horm ona antidiurtica al sis electroltica y del agua puede cambiar con rapidez en
parecer es normal. Este proceso gradual del desarrollo renal infantes pequeos, es im portante monitorear con frecuen
en el recin nacido ocasiona dism inucin de la filtracin y cia la intervencin teraputica.1'2 La disponibilidad de dis
alteracin de la reabsorcin de sal y agua; por tanto, en el positivos de PPDA en los que se usan volm enes pequeos
perodo de recin nacido e infancia temprana, se observan
grandes cambios en los valores electrolticos sricos. Estos
problemas se exacerban en el lactante pretrmino con la CUADRO 33-6. CAUSAS DE LA HIPERNATREMIA
funcin renal, que incluso es m enos madura. E HIPONATREMIA__________ __________
Adems, los riones mantienen de manera primaria la pr
Hipernatremia
dida y retencin de agua. Sin embargo, en el perodo de recin
nacido, la prdida insensible de agua a travs de la piel tambin Prdida excesiva de agua a travs de calentam iento
es causa importante del desequilibrio de agua y electrlitos. La radial elevado
prdida de agua y la consecuente hemoconcentracin a menu Prdida de fluido gastrointestinal
do se originan por el uso de calentadores radiantes que se
Suspensin de lquidos
emplean para mantener la temperatura corporal. Asimismo,
ocurre incremento de la prdida de agua a travs de la respira Prdida renal de agua/diabetes Inspida nefrognica
cin en nios con SDR. A travs de esta va llega a presen Administracin de lquidos hipertnicos que contienen
tarse hasta una tercera parte de la prdida insensible de sodio
agua. El contenido de agua corporal total de un recin
Hiponatremia
nacido es de alrededor de 80%; 5 5 % es lquido intracelular
y 45 % , lquido extracelular. El agua extracelular es 20% Secrecin inapropiada de ADH debido a traumatismo
agua de plasma y 80 % intersticial. Durante el primer m es o infeccin
de vida extrauterina, el contenido de agua corporal total Administracin de lquidos hipotnicos
dism inuye cerca de 60% , sobre todo com o resultado de la
prdida del com ponente intersticial.1 Acidosis tubular renal
Hiperplasia suprarrenal congnita con prdida de sal
Trastornos que afectan el equilibrio (deficiencia de 21-hidroxilasa)
electroltico y del agua Fibrosis cstica
En el cuadro 3 3 -6 se enumeran las causas de hipernatre Diurticos
m ia (sodio, > 1 4 5 meq/L) e hiponatrem ia (sodio, < 1 3 0
Insuficiencia renal
meq/L). A m bos trastornos llegan a presentar resultados
CAPTULO 33 QUMICA CLNICA PEDITRICA 661
culacin, com o la albmina, la transferrina y los factores y la enfermedad heptica crnica de otra etiologa. Ade
de coagulacin de com plem ento. El hgado no sintetiza ms, la alteracin de la funcin hepatocelular produce
inm unoglobulinas. Adems, es responsable de completar m enor capacidad reducida para conjugar bilirrubina, con
el m etabolism o de los productos de degradacin del recam el aum ento resultante de la forma no conjugada, que en
bio de nitrgeno, com o am oniaco y urea a travs del ciclo condiciones norm ales es apenas perceptible.
de la urea y creatinina y cido rico a partir de los dep Otras pruebas, com o la m edicin de las enzim as hep
sitos de energa y cidos nucleicos, respectivam ente. Las ticas, en realidad reflejan ms la integridad de la clula
concentraciones de am oniaco sanguneo son ms elevadas heptica y n o son anlisis funcionales en sentido estricto.
en el perodo de recin nacido que en etapas posteriores Elevaciones grandes en AST y ALT sricas indican dao
de la vida, lo que tal vez se deba a la inm adurez de las hepatocelular y filtracin resultante de los contenidos
enzim as del ciclo de la urea y la circulacin portal. A un celulares en el suero, en tanto la ALP elevada sugiere alte
valor de am oniaco sanguneo de 1 0 0 pmol/L en un recin racin biliar heptica, pero proporciona poca inform acin
nacido se le considerara m enos im portante que la m isma funcional.
cifra un ao despus. Las concentraciones de am oniaco
elevadas de manera persistente alertarn al investigador CALCIO Y METABOLISMO SEO EN PEDIATRA
sobre posible dao heptico e insuficiencia secundaria del
ciclo de la urea. Los valores elevados de am oniaco sugie El crecimiento seo normal, que es paralelo al crecimiento
ren un posible defecto primario en el ciclo de la urea, y se corporal, requiere la integracin del m etabolismo del calcio,
evaluar a los pacientes respecto a dicho defecto. fosfato y magnesio, con regulacin endocrina de la vitamina
D, hormona paratiroides (PTH) y calcitonina.5 El metabolito
activo de la vitamina D es la 1,25-dihidroxivitamina D. La
Productos nitrogenados finales como
hidroxilacin de la vitamina D de la dieta tiene lugar en el
marcadores de la funcin renal hgado y en los riones, y requiere el funcionamiento normal
En contraste con los valores elevados de am oniaco n eo de estos rganos. La absorcin de la vitamina D del tracto
natal, las concentraciones de creatinina y cido rico son gastrointestinal, la conversin a su forma activa en el rin, y
m s bajas en recin nacidos. A m bos m etabolitos aumentan la incorporacin de calcio y fosfato en el hueso en crecimien
al final a rangos norm ales del adulto. Las concentracio to requiere, en condiciones normales, la PTH activa. A su
nes de creatinina en sangre se increm entan con la masa vez, la secrecin de PTH est regulada por los valores de cal
m uscular y son independientes de la dieta. Se filtran en cio y magnesio sricos. Las concentraciones bajas de ambos
los glom rulos y no se absorben de manera extensa por los cationes divalentes inhiben la secrecin de PTH. La calcito
tbulos renales. Su m edicin com o ndice de elim inacin nina tiene un efecto antagonista en la accin de la PTH.
en sangre y en una muestra de orina de 2 4 h se ha utilizado El rpido crecim iento seo que ocurre durante la infan
com o marcador de la filtracin glomerular durante m uchos cia, y ms tarde durante la pubertad, requiere la coordi
aos. La cistatina C srica, un marcador nuevo y quiz ms nacin ptima de la absorcin mineral, el transporte y la
sensible, apareci en fecha reciente en el mercado com o incorporacin endocrina controlada de los m inerales en el
sustituto potencial de la creatinina.6 Se espera mayor eva hueso en crecim iento. Alrededor de 9 8 % del contenido de
luacin de este marcador en poblaciones peditricas, pero calcio corporal total est presente en el hueso, y m enos del
tal vez reem place el anlisis de elim inacin de creatinina 1% es m edible en la sangre. El calcio srico se encuentra
y suprima la necesidad de la difcil recoleccin de la orina presente com o fraccin ionizada libre (alrededor de 50%
de 2 4 h en nios. Las recolecciones incom pletas forman la del total en sangre), con el resto unido a pro tena (4 0 % ) o
base de la mayor parte de los errores en este anlisis. quelado a aniones en la circulacin, com o fosfato y citra
to. Las concentraciones sricas de calcio ionizado y ligado
Pruebas de la funcin heptica son reguladas y m antenidas en gran parte dentro de lm ites
hom eostticos estrictos. Las anorm alidades de cualquiera
Com o ya se m encion, el hgado es responsable de la rea de los com ponentes regulatorios tienen profundos efectos
lizacin de una gran parte de procesos sintticos y catab- clnicos sobre los nios.
licos, y la funcin heptica norm al es primordial para el
m antenim iento de la hom eostasis del cuerpo. Han surgido
varias pruebas de laboratorio a las que en trm inos gene
Hipocalcemia e hipercalcemia
rales se les clasifica com o pruebas de la funcin heptica. La hipocalcem ia se define com o el calcio srico total por
La m ed icin de la albm ina srica y de la bilirrubina debajo de 7 .0 m g/dl o calcio ionizado por debajo de 3 .0
total y conjugada son pruebas verdaderas de la funcin mg/dl. En recin nacidos y en particular en los inmaduros,
heptica debido a que m iden las rutas sintticas y meta- estos valores suelen encontrarse a m enudo con p ocos sn
blicas de esos com puestos. En la desnutricin proteica- tomas. Sin embargo, la hipocalcem ia llega a producir irri
calrica, la reduccin de la disponibilidad de am inocidos tabilidad, contracciones y ataques. Por lo general, el calcio
para la sntesis de nuevas protenas ocasiona dism inucin srico se m ide en lactantes con ataques de etiologa d es
del ndice sinttico funcional y bajas concentraciones de conocida. La hipocalcem ia prolongada da com o resultado
protenas sintetizadas recientem ente, com o la albmina. reduccin del crecim iento seo y raquitismo. En el cuadro
Los valores m uy bajos de albmina indican exp osicin 33-9 se enum eran las causas de hipocalcem ia. C on fre
prolongada a restriccin proteica, y a m enudo se utiliza cuencia aparece hipom agnesem ia en presencia de hipocal
su m edicin en sangre com o gua del estado nutricional cemia. D ebido a que las bajas concentraciones sricas de
664 PARTE IV REAS DE ESPECIALIDAD DE LA QUMICA CLNICA
CUADRO 33-9. CAUSAS DE HIPOCALCEMIA otras clulas objetivo. Algunas de estas horm onas son poli-
pptidos, otras son derivados de am inocidos o esteroides.
Estado prematuro
Se han descrito cuatro sistemas endocrinos principales.
Acidosis metablica Todos ellos desempean funciones crticas en el desarrollo
Deficiencia de vitamina D hum ano normal. Estos sistemas im plican al hipotlamo
com o centro de control cerebral principal ms elevado, a la
Enfermedad heptica (insuficiencia para activar la glndula hipofisaria com o principal secretor de horm onas
vitamina D)
y luego a varios rganos terminales, que presentan elem en
Enfermedad renal (insuficiencia para activar la tos sensibles para la hormona hipofisaria, y afectan m uchas
vitamina D) funciones m etablicas y del desarrollo. Entre estos rga
Hipoparatiroidismo
nos terminales se incluyen la glndula tiroides, la corteza
suprarrenal, el hgado y las gnadas. Cada sistem a abarca
Ingesta baja de calcio la secrecin regulada de una horm ona trfica por el hipo-
Ingesta elevada de fsforo tlamo, que, a su vez, controla la secrecin endocrina por
la hipfisis y, en ocasiones, la secrecin horm onal secu n
Uso de diurticos
daria por el rgano terminal, m ism o que luego produce el
Hipomagnesemia efecto endocrino apropiado. Existe retroalim entacin en
Transfusin de intercambio (anticoagulantes en el hipotlam o por el producto final del proceso (retroa
sangre transfundida) lim entacin de ciclo largo) y, tambin, por el producto
endocrino de la hipfisis (retroalim entacin de ciclo cor
to). La retroalim entacin regula el control hipotalm ico
CUADRO 33-10. CAUSAS DE HIPERCALCEMIA3 del m ecanism o. Sin duda, existen m uchas reas que llegan
a funcionar de manera inadecuada en cada una de estas
Hiperparatiroidismo vas, que dan com o resultado la enfermedad. Ciertos tras
Insuficiencia renal aguda tornos patolgicos son exclusivos de n ios y se analizan
Ingesta excesiva de vitamina D
m s adelante.
general, el tratamiento con terapia de reem plazo tiroideo llegan a volverse m uy hiponatrm icos e hiperpotasmicos.
produce buenos resultados al establecer el diagnstico. La La falla para sintetizar cortisol provoca hipoglucem ia indu
mejor prueba de diagnstico es m edir las concentraciones cida por estrs. Adems, los intermediarios del m etabolis
sricas de TSH, que se elevan debido a la insuficiencia del m o de los esteroides, que se acumulan com o resultado del
ciclo de retroalim entacin largo. Los valores de horm ona bloqueo m etablico, causan androgenizacin. Las nias que
tiroidea en pacientes no tratados son m uy bajos. nacen con este trastorno con frecuencia presentan genitales
El hipotiroidism o secundario es resultado de la falla de ambiguos, y es posible que se les clasifique en primera ins
la glndula hipfisis para secretar TSH, lo que origina falta tancia com o nios. Los nios tal vez no tengan dichas anor
de estim ulacin de la glndula tiroides y produccin subsi malidades pronunciadas al nacer, pero quiz desarrollen
guiente de horm ona tiroides. El diagnstico diferencial se crisis electroltica. Por lo general, este problema se detecta
establece a travs de la m edicin de concentraciones bajas por la m edicin de los valores de 17-hidroxiprogesterona
de TSH circulante. Debido a que la hipfisis est implicada en muestras sanguneas neonatales.
con todos los sistemas endocrinos principales, es importan
te estudiar las otras vas de la parte inferior para determi Factores del crecimiento
nar si el hipotiroidism o es resultado de un defecto aislado
de la TSH o del panhipopituitarism o que abarca todas las El hipotlamo secreta dos hormonas reguladoras que afec
otras vas. El panhipopituitarism o constituye una situacin tan el crecimiento. La hormona liberadora de hormona del
compleja desde el punto de vista clnico, que tal vez in clu crecimiento es un polipptido 40-aminocido que estimu
ya hipoglucem ia, prdida de sales, crecim iento som tico la la liberacin de hormona del crecimiento (GH) a partir
y seo deficiente, falla para prosperar e insuficiencia para de la hipfisis anterior. El factor que inhibe la hormona del
desarrollar las caractersticas sexuales secundarias. crecimiento, tambin conocido com o s omatostatina, inhibe
la secrecin de GH. Los factores adicionales de los centros
Sistema hipotalmico-hipofisario-corteza cerebrales superiores, entre los que se incluyen catecolami
nas, serotonina y endorfinas, tienen un efecto positivo en la
suprarrenal5
secrecin de GH. La inhibicin de la secrecin de GH ocurre,
Este sistema es esencial para regular el m etabolismo m ine tambin, cuando a los nios se les asla del contacto social. Se
ral y de carbohidratos. El hipotlamo secreta la horm ona desconoce el mecanismo de esta inhibicin reversible, pero la
liberadora de corticotropina (CRH), un polipptido 41- negligencia y el abuso infantil potencial constituyen los prin
aminocido, que reacciona con la hipfisis anterior, lo que cipales diferenciales en nios con crecimiento retardado.
desencadena la liberacin de la horm ona corticotropina o La GH es un polipptido 191-am inocido, con el hga
adrenocorticotrpica (ACTH). La ACTH se libera en la cir do com o su principal sitio de accin. Los receptores de
culacin y llega a su rgano terminal, la corteza suprarrenal, la GH del hgado que son ocupados por una m olcula de
que luego es estimulada para secretar las horm onas este GH hacen que el hgado secrete un grupo de horm onas
roides, cortisol y aldosterona. Esta va resulta estimulada, polipptidas relacionadas, a las que se denom ina factores
tambin, por estrs en el centro cerebral superior. La ACTH de crecimiento semejantes a la insulina (IG F), y sus prote
acta com o control de retroalimentacin de ciclo corto. Las nas de unin, conocidas com o protenas de unin con IGF.
horm onas esteroides secretadas por la corteza suprarrenal EL IGF-1 y IGF-BP3 son los productos ms im portantes
son reguladores de ciclo largo. La aldosterona funciona en de la actividad de la GH en el hgado. La IGF-1 tiene una
los riflones, y regula el equilibrio de sales y agua. El cortisol estructura m olecular similar a la insulina; sin embargo, es
acta en m uchos tejidos perifricos y tiene m uchas reaccio u n estim ulador m ucho ms potente del crecim iento lineal
nes, entre las que se encuentran regulacin del metabolis y el aum ento del m etabolism o en nios.
m o de carbohidratos, protenas y lpidos. Adems, tiene la Esta va de crecim iento tal vez representa la ruta endo
funcin de proporcionar resistencia a la infeccin e inflama crina ms im portante responsable del crecim iento nor
cin, un m ecanism o poco estudiado que explica el u so tera mal; las deficiencias de cualquier com ponente de la va
putico de esteroides en estas situaciones clnicas. Al igual son conocidas por producir crecim iento deficiente, lo que
que con todos los sistemas endocrinos, ocurren enferme ocasiona adultos de baja estatura.
dades que se originan de la hiperfuncin o hipofuncin de
esta va. Las enfermedades son primarias, ocasionadas por CUADRO 33-11. E N E FE R M E D A D E S
la disfuncin del rgano terminal, o secundarias, debidas a CO N GN ITAS D E LA CO RTEZA SU PRA RR EN A L
enfermedad hipofisaria o hipotalmica. En el cuadro 33-11
se muestran las enfermedades peditricas relacionadas con PERFIL METABLICO
trastornos primarios de la corteza suprarrenal. Muchas de 21-hidroxilasaa f 17-hidroxiprogesterona,
las afecciones que se enumeran son enfermedades genticas 1cortisol
raras; sin embargo, una enfermedad en particular, la defi
3p-hdroxides- f dehidroepiandrosterona (DEA)
ciencia de esteroide 21-hidroxilasa, es lo bastante frecuente
hidrogenasa
(alrededor de 1 por cada 5 0 0 0 nacim ientos) para ameritar
la valoracin de la poblacin com pleta por los laboratorios 1 ip-hidroxilasa | 11-desoxicortisol, 1 cortisol
que exam inan el estado. Este trastorno produce falla para 17a-hidroxilasa f 17-cetosteroides, j, testosterona
sintetizar de manera adecuada tanto la aldosterona com o el
18-hdroxilasa 1 aldosterona, f renina
cortisol. La deficiencia de la aldosterona ocasiona crisis de
prdida de sal, y los pacientes en perodo de recin nacidos Trastorno frecuente valorado en todos los recin nacidos.
666 PARTE IV REAS DE ESPECIALIDAD DE LA QUMICA CLNICA
Conceptos bsicos de inmunidad husped infectadas por partculas virales. Las clulas AN
se unen a estas clulas objetivo y llegan a destruirlas a
El sistema inmunitario se divide en dos partes funcionales: ellas y al virus. Las clulas AN responden a interferonas,
el sistema inmunitario innato y el sistema inmunitario adap- que son m olculas de citocina producidas por las clulas
tativo. El sistema inmunitario innato constituye la primera husped cuando se infectan por virus. Adems, las interfe
lnea de defensa, en particular en recin nacidos y lactantes ronas forman parte del sistem a inm unitario innato, y son
no expuestos a infeccin. El sistema inmunitario adaptativo capaces de proporcionar resistencia a la infeccin en las
genera una reaccin especfica despus de la exposicin a clulas husped no infectadas por virus.
un agente infeccioso, y proporciona mayor inmunidad con
exposicin subsiguiente a ese agente. Sin embargo, al princi
pio la primera respuesta a la exposicin tal vez sea subpti- Protenas d e fa s e aguda
Las protenas de fase aguda son protenas de defensa pro
ma y produzca enfermedad relacionada con esa exposicin.
ducidas por el hgado en respuesta a la infeccin, en parti
cular infeccin bacteriana. Ciertas protenas aumentan en
Componentes del sistema inmunitario5 suero entre dos y 1 0 0 veces. A la protena de fase aguda
ms im portante se le denom ina protena C reactiva (PCR)
Piel
por su habilidad para unirse a la protena C de los neumo
En condiciones norm ales, la piel es una barrera efectiva
contra la mayor parte de m icroorganism os, aunque en
cocos. La PCR unida a la bacteria prom ueve la u nin del
bebs prematuros esta barrera est m enos desarrollada y com plem ento que, a su vez, contribuye a la fagocitosis. Los
valores sricos de PCR se m iden de manera rutinaria para
es posible que se vuelva con facilidad una fuente de infec
determinar el grado de infeccin en pacientes peditricos.
cin. La m ayor parte de los agentes infecciosos entran al
La sensibilidad requerida del anlisis PCR para este prop
cuerpo por la nasofaringe, el tracto gastrointestinal, los
sito clnico es m enor que la utilizada para el anlisis PCR
pulm ones y el tracto genitourinario. Las incisiones qui
de alta sensibilidad empleado en clnica com o factor de
rrgicas y las lneas intravenosas o centrales tambin son
riesgo independiente de enfermedad cardaca. En la apli
sitios potenciales de entrada. Por lo general, varias defen
cacin peditrica de este anlisis, la obtencin rpida de
sas fsicas y bioqum icas protegen los sitios no quirrgicos
resultados es m uy importante. El sistem a de com plem en
de entrada. La lisozim a, una enzim a distribuida de manera
to consiste en cuando m enos 2 0 protenas, la mayor parte
extensa en diferentes secreciones, por ejem plo, es capaz
de fase aguda. stas interactan en forma secuencial entre
de digerir en forma parcial un enlace qum ico de la m em
s, con com plejos antgeno-anticuerpo, y con membranas
brana de m uchas paredes celulares bacterianas.
celulares de manera coordinada para destruir al final bac
terias y virus. D esde el punto de vista clnico, las protenas
Fagocitos de com plem ento que se m iden ms a m enudo son C3 y C4.
Los fagocitos estn presentes en m uchos tipos de clulas. Los valores bajos de cualquiera de estas protenas indican
Cuando un organismo extrao penetra en la superficie deficiencia en la capacidad de destruir partculas extraas.
epitelial, encuentra clulas fagocitadas, que se derivan de
la m dula sea y se depositan en el tejido en respuesta
P roduccin d e anticuerpos
al organismo. Estas clulas engullen y digieren partcu
Las inm unoglobulinas se clasifican en cinco grupos prin
las. Entre las clulas fagocticas se incluyen clulas poli-
cipales, con base en la estructura y funcin: IgG, IgM, IgA,
m orfonucleares, que tienen vida breve en la circulacin, y
m ocitos que, cuando se exponen a partculas extraas, se IgD e IgE. Son secretadas por clulas plasmticas derivadas
de B-linfocitos, y sus propiedades se enumeran en el cuadro
desarrollan a macrfagos que luego reconocen al organis
m o cuando el individuo vuelve a quedar expuesto. 33-12. La IgG es la principal subclase de inmunoglobulina,
que proporciona respuesta de anticuerpo en adultos, y repre
senta 7 0 a 75% del contenido de inm unoglobulina total. La
C lulas B IgG se degrada de manera adicional en cuatro subclases adi
Las clulas B son linfocitos que se caracterizan por la pre cionales: IgGj Cada inmunoglobulina se construye a partir
sencia de inm unoglobulinas superficiales. Estas clulas se de unidades estructurales similares, con base en dos cadenas
diferencian de las clulas plasm ticas en que son capaces de polipptidos pesadas (A, G, M, D y E) y dos cadenas lige
de responder a antgenos extraos en la circulacin por la ras (kappa y lambda). La capacidad para reconocer canti
produccin de anticuerpos neutralizantes. La activacin, dades grandes de antgenos extraos se debe a la capacidad
proliferacin y diferenciacin de clulas B son asistidas mfinita de los genes en la denominada regin variable de la
por la secrecin de citocina a partir de linfocitos de clulas m olcula de inmunoglobulina por reestructurar. Esta rea
T, que no producen anticuerpos. En el antgeno de unin, reconoce .antgenos extraos, y una reestructuracin y pro
es posible que los anticuerpos activen una cascada que duccin genticas de un anticuerpo nico cubre cada ant
abarque al com plem ento, lo que al final produce lisis y geno nuevo expuesto al cuerpo. Debido a la gran cantidad
m uerte celular de los organism os extraos. de diferentes especies de inmunoglobulina, la separacin
electrofortica de estas protenas sricas sobre un gel con
C lulas asesinas naturales enfoque isoelctrico durante el anlisis de electroforesis pro
Las clulas asesinas naturales (A N ) son leucocitos capa teica srica (EFP5) es difusa, a diferencia de la separacin de
ces de reconocer cam bios superficiales celulares en clulas albmina o transferrina, que genera distintas bandas.
668 PARTE IV REAS DE ESPECIALIDAD DE LA QUMICA CLNICA
con slo una m utacin. En am bos patrones heredados, el Valoracin del recin nacido en
padre con u n gen norm al ser, en su m ayor parte, asin- poblaciones completas
tomtico. Las enfermedades predom inantem ente here
dadas, que tal vez se hereden com o una sola m utacin a Ciertas enfermedades hereditarias son lo bastante frecuen
travs de cualquier lnea paterna, tienden a no presentarse tes en la poblacin para considerarlas candidatas a la valo
en la niez ni afectan la fertilidad. Los ejem plos abarcan racin de la poblacin completa. La fenilcetonuria fue el
hipercolesterolem ia familiar, enfermedad de H untington y primer trastorno m etablico gentico que se valor en cada
trom bolia del factor V de Leiden, que son enfermedades beb nacido en Occidente. Otras enfermedades que son
de la poblacin adulta. En fecha reciente, se identific un tratables con facilidad se agregaron a la lista en aos p os
nuevo m odo de herencia gentica. Todas las enfermeda teriores, com o la deficiencia de la 21-hidroxilasa esteroi-
des antes descritas constituyen alteraciones del DNA que de, la enfermedad de clulas falciformes, el hipotiroidism o
se replica en el ncleo celular. La m itocondria, el organe- congnito y, en algunos estados de la U nin Americana, la
lo responsable de generar la energa celular y otras vas galactosemia. Estas enfermedades genticas responden de
m etablicas importantes, contiene una m olcula pequea manera adecuada a la terapia sim ple, a m enudo diettica.
de DNA (m tD N A ) que codifica protenas im plicadas en la En Estados U nidos, este proceso tiene lugar en los labora
generacin de energa. La m tDNA tiene un ndice eleva torios de valoracin estatales, centros que dan seguim ien
do de m utacin espontnea y ocasiona una gran cantidad to en forma sencilla a resultados anormales de la prueba.
de enferm edades de prdida de energa. La m itocondria La naturaleza del procedim iento de la prueba requiere un
slo se hereda de la madre, de m odo que las m utaciones exam en de valoracin sensible con p ocos resultados fal
que no son espontneas slo pueden provenir del linaje sos-negativos. Luego debe confirmarse a travs de una
materno. prueba que sea ms especfica para descartar resultados
falso-positivos. Una nueva tecnologa, la espectrometra de
masas en tndem, perm ite la valoracin de entre 2 5 y 3 0
Fibrosis cstica enfermedades genticas bioqum icas en una sola muestra
La fibrosis cstica (FC) representa una de las enfermeda al m ism o tiem po (cuadro 3 3 - 1 3 ). Esta tcnica perm ite el
des genticas heredadas que se encuentran ms a m enudo anlisis de grupos com pletos de com puestos similares en
en los laboratorios de qum ica clnica peditrica. En uno volm enes de muestra pequeos sin la preparacin com
de cada 2 4 0 0 nacim ientos vivos se observa esta enferm e pleja de la muestra. El tiem po analtico es de alrededor de
dad debilitante, que se origina por m utaciones heredadas dos m inutos por muestra, lo que significa que es posible
en forma recesiva en el gen regulador transmembrana de realizar con rapidez el anlisis para u n estado com pleto.
la fibrosis cstica (RTFC). Es posible que los pacientes pre En Estados U nidos, el ndice de natalidad es de alrededor
senten, en el perodo de recin nacido, insuficiencia pan de 3 .5 a 4 m illones de nacim ientos por ao. Est dem os
cretica grave causada por acum ulacin de secreciones de trado que la espectrometra de masas en tndem controla
m ucosidad espesa en los conductos pancreticos, lo que esta carga de trabajo. Al m om ento de escribir esto, nueve
inhibe la secrecin de enzim as digestivas pancreticas. estados de la U nin Americana ya respaldaron este proceso
Estos bebs padecen esteatorrea y falla para prosperar. Los y otros se encuentran en fases avanzadas de la evaluacin.
pacientes con FC no siem pre desarrollan sntom as pan
creticos; sin embargo, en la mayor parte de los casos, la Diagnstico de enfermedad
m ucosidad espesa que se acum ula en los pulm ones causa
metablica en clnica
enfermedad respiratoria y desencadena gran sensibilidad a
enferm edades infecciosas raras, com o pseudomonas. A un En la actualidad, se requiere del laboratorio clnico para con
que las terapias paliativas mejoraron en las ltim as genera firmar el diagnstico de la mayor parte de las enfermedades
ciones debido a la disponibilidad de mejores antibiticos, que se enumeran en el cuadro 33 - 1 3 y, tambin, del resto de
an se considerara intratable a la FC. los 5 0 0 defectos sim ples del gen que producen enfermedad
Durante m uchos aos ha estado disponible la prueba gentica bioqum ica no detectable por espectrometra de
de diagnstico estndar para la FC. Im plica la m edicin masas en tndem. Por lo general, estos errores innatos del
del contenido de cloruro en sudor recolectado despus de m etabolism o se dividen en dos tipos principales.
iontoforesis de pilocarpina. Este tipo de anlisis consum e
tiem po y requiere experiencia especializada del operador. E n ferm ed a d es d e m olcula g ra n d e
La base gentica de la FC est establecida. A unque existen Las enfermedades de m olcula grande cuentan con un
algunas m utaciones que se encuentran con frecuencia en la interm ediario acum ulado del m etabolism o com puesto
poblacin, com o la A F 508, existen cientos de otras m uta por m olculas com plejas grandes; en el cuadro 3 3 - 1 4 se
ciones. En fecha reciente, el American College of Medical m uestran ejemplos. M uchos de estas enfermedades im pli
Genetics y el American College of Obstetrics and Gynecology can acum ulacin intracelular del qum ico anorm al con
recom endaron la valoracin del heterocigoto en parejas excrecin relativam ente pequea de lquidos corporales.
seleccionadas.9 Esto plantea un desafo analtico debido En las enfermedades de alm acenam iento de glucgeno,
a la gran cantidad de m utaciones, y tal vez requerir el ste se acum ula en hgado y m sculo, pero no se obser
desarrollo de una tecnologa de m icrochip aceptable desde va en m uestras de sangre u orina. El histopatlogo, que
el punto de vista clnico antes de que se im planten por em plea el exam en m icroscpico del tejido, a m enudo rea
com pleto (vase captulo 2 6 , Funcin gastrointestinal). liza estos diagnsticos. Algunas pruebas, sobre todo las
670 PARTE IV REAS DE ESPECIALIDAD DE LA QUMICA CLNICA
CUADRO 33-13. EN FER M ED A D ES perm ite la confirm acin en una muestra sangunea. La
M ETA B LICA S D ETECTA B LES POR confirm acin enzim tica tal vez sea difcil de establecer en
VA LO R A CI N EXPA N D ID A D EL RECIN N ACID O bebs pequeos debido a que con frecuencia se requieren
muestras sanguneas grandes para la com probacin del
Aminocidos diagnstico.
Fenilcetonuria (PKU)
Enfermedad de la orina de jarabe del arce (EOJA) E n ferm ed a d es d e m olcula p eq u e a
Las enfermedades de m olcula pequea se originan por
Tirosinemia, tipos 1 y 2
defectos en las vas m etablicas del m etabolism o del inter
Homocistinuria mediario. Por lo general, los com puestos anorm ales que
Hipermetioninemia estn presentes en estas enfermedades son de bajo peso
m olecular y se excretan con rapidez en los lquidos cor
Ciclo de la urea
porales; los tipos de vas im plicadas se enum eran en el
Argininem ia cuadro 33 -15. Al principio, el laboratorio qum ico clnico
Citrulinemia contaba con pocas herramientas de diagnstico capaces
de identificar la gran cantidad de interm ediarios m etab
Aciduria argininosuccnica (ASA) licos que llegan a acumularse en estas enfermedades, por
cidos orgnicos lo que se desarrollaron varias pruebas urinarias calorim
tricas sim ples, com o la prueba de la dinitrofenilhidrazina
Acidem ia propinica (AP)
(D N PH ) para cetocidos, para establecer el diagnstico.
Acidem ia metilmalnica (AMM) Estos m todos carecen tanto de sensibilidad y especifici
Acidem ia isovalrica (AIV) dad, y no forman parte del laboratorio de qum ica clnica
m oderno. Se les reem plaz por anlisis con sensibilidad y
Acidem ia glutrica, tipos 1 y 2 (GA1, GA2)
especificidad mayores, a m enudo basados en la espectro
Deficiencia de p-cetotiolasa metra de masas.
Deficiencia de 3-hidroxi-3-metilglutaril-CoA liasa Las enfermedades de m olcula pequea tienen m ani
(HMG-CoA liasa) festacin clnica variable, y podran presentarse en casi
cualquier subespecialidad m dica con cualquier sistem a
Deficiencia 3-metilcrotonil-CoA carboxilasa (MCC) orgnico im plicado. (En el cuadro 3 3 - 1 6 se muestran
Deficiencia de malonil-CoA descarboxilasa algunas enfermedades y cules especialistas habra que
2-metil-3-hidroxibutiril-CoA-deshidrogenasa
consultar.) Por lo general, las pruebas bioqum icas para
estas enfermedades se describen en dos fases. En primer
cidos grasos lugar, es im portante reconocer el grado de afeccin tisu-
Deficiencia de acil-CoA deshidrogenasa de cadena
media (MCAD)
Deficiencia de acil-CoA deshidrogenasa de cadena CUADRO 33-14. EJEM PLO S DE TR ASTO R N O S DE
corta (SCAD) A L M A C E N A M IE N T O DE M O L C U L A G R A N D E
Deficiencia de acil-CoA deshidrogenasa de cadena Enferm edades de alm acenam iento de
muy larga (VLCAD) mucopolisacridos (MPS) o glucosam inoglucano
Carnitina palmitoiltransferasa, tipos 1A y 2 (CPT1 A, CPT2) Enfermedad de Hurler (MPS, tipo I)
Deficiencia de carnitina acilcarnitina translocasa (CAT) Enfermedad de Hunter (tipo II)
Deficiencia de 3-hidroxiacil-CoA deshidrogenasa de Enfermedad de Morquio (tipo IV)
cadena larga (LCHAD)
Alm acenam iento lipdico complejo
Deficiencia de la protena mitocondrial trifuncional (PMT)
Enfermedad de Gaucher
Enfermedad de Tay-Sachs
de orina, estn disponibles para la obtencin de indicios
Enfermedad de Niemann-Pick (tipos A, B, C)
de enfermedades de m olcula grande, entre las que se
incluyen anlisis de glucosam inoglucano en el que se usa Enferm edades de alm acenam iento de glucgeno
electroforesis de alto voltaje para identificar m etabolitos Von Gierke (tipo 1)
raros relacionados con enfermedades del alm acenam ien
Pompe (tipo 2)
to de m ucopolisacridos. Estas pruebas son relativam ente
insensibles, y la confirm acin del diagnstico requiere la McArdle (tipo 5)
m edicin de la actividad enzimtica deficiente en u n teji Alm acenam iento de pptidos
do corporal. Por fortuna, m uchas enzim as que producen
Lipofuscinosis ceroide neuronal, tipos 1-8
enferm edades del alm acenam iento de m olcula grande
(enferm edad de Batten)
se encuentran en las clulas sanguneas blancas, lo que
CAPTULO 33 QUMICA CLNICA PEDITRICA 671
*La teofilina es metabolizada a cafena en neonatos, pero no en adultos. Se utiliza para tratar apnea.
6EI valor mximo se obtendr 30 min despus de la ltima dosis para frmacos amlnoglucsldos. Los nios son propensos en particular a la prdida del
odo a niveles txicos.
672 PARTE IV REAS DE ESPECIALIDAD DE LA QUMICA CLNICA
adecuados de la razn por la que a los n ios no se les Problemas toxicolgicos en qumica
considerar adultos pequeos. D esde el punto de vista clnica peditrica
clnico, no es apropiado prorratear la cantidad de frma
co prescrita a n ios con base en el peso corporal relativo En pediatra, los problem as relacionados con la provisin
cuando se compara con una dosis para adulto. de un servicio toxicolgico se dividen en dos grupos dis
El metabolismo del frm aco depende de los siguientes tintos. El primer grupo im plica a lactantes y n ios p eque
factores: absorcin, circulacin y distribucin, y m etabo os que consum en por accidente agentes farm acolgicos
lism o y elim inacin. A m enudo, el m edio en que se pro y otros qum icos. Por lo general, esto im plica que el nio
porciona un frmaco a un nio difiere de aquel en el que el encuentra acceso a la m edicacin perteneciente a otro
adulto ingiere el m ism o frmaco. Los jarabes, por ejemplo, individuo en el hogar y la consum e com o si fuera un dul
proporcionan una liberacin ms rpida de u n frmaco y ce. Resulta relativam ente fcil para el investigador deter
mayor disponibilidad de absorcin gastrointestinal que minar la naturaleza de la m edicacin al identificar lo que
las tabletas, que traen el frmaco atrapado en una matriz est disponible en la casa. La investigacin toxicolgica
slida que requiere digestin. Es ms probable que a los suele restringirse a unas cuantas pruebas especficas
nios se les administre una m edicacin de una forma ape U n trastorno raro, pero potencialm ente peligroso, es el
titosa, com o el jarabe, y requieran dosis ms bajas. El pH de la enfermedad de M unchausen por el encargado. En
de las secreciones gstricas difiere en lactantes. Al nacer, sta, la enfermedad m ental de un cuidador lo lleva a pro
el pH gstrico es casi neutro, alcanza el nivel de acidez porcionar frmacos innecesarios y que causan enfermedad
del adulto despus de varios aos. Esta diferencia de pH a un nio por lo dems sano. Esto llega a pasar inadvertido
quiz afecte la absorcin de ciertos frmacos, com o algu y ocasionar varias hospitalizaciones e incluso la m uerte
nas penicilinas prescritas a m enudo. La distribucin de los del nio. La sospecha clnica de esta forma de abuso infan
frmacos suele diferir entre adultos y nios. Los frmacos til com prende la realizacin de un exam en exhaustivo de
liposolubles se tom an dentro de reservas lipdicas, y slo frmacos para identificar los agentes causantes. D ebido a
se liberan con lentitud en la circulacin. D ebido a que los la naturaleza interm itente de la m anifestacin clnica del
lactantes tienen u n tejido adiposo relativam ente pequeo, sndrom e de M unchausen por el apoderado, a m enudo
estos frmacos no se alm acenan de manera tan eficiente. se le confunde con enfermedad metablica. Tal vez sean
El efecto global es que los frmacos liposolubles alcanzan necesarias pruebas m etablicas, as com o estudios toxico-
un valor ms elevado con mayor rapidez que en individuos lgicos com pletos.
con depsitos de grasa considerables; sin embargo, el fr D ebido a que la probabilidad de autoingesta de drogas
m aco tambin se elim ina ms rpido. Se vuelve apropiado callejeras de abuso est presente en n ios mayores, los
que los frmacos se proporcionen en dosis ms pequeas y laboratorios de qum ica clnica peditrica deben contar
frecuentes para optim izar el efecto. El m etabolism o hep con anlisis disponibles para drogas callejeras similares a
tico de m uchos frmacos es inmaduro en n ios pequeos. los utilizados en la prctica con adultos.
Es posible que esto retrase la conversin m etablica a un
frmaco activo o increm ente el tiem po en que circula. La RESUMEN
funcin heptica adecuada es im portante para eliminar
esos frmacos m etabolizados por el hgado, al igual que La pediatra es una rama de la medicina que trata con el diag
una buena funcin renal lo es para elim inar los frmacos nstico y tratamiento de la enfermedad en nios. Esto incluye
que tienen productos finales hidrosolubles. la investigacin de individuos pequeos del nacimiento a la
adolescencia. La diferencia ms importante entre esta pobla
cin y la adulta est relacionada con el desarrollo fisiolgico
Monitoreo teraputico del frmaco de lo s n i o s. Los sistem as orgnicos inm aduros p u d ie
Los principios del m onitoreo teraputico del frmaco ran tener profundos efectos en los parmetros bioqumicos.
se establecen de la m ism a manera en la qum ica clnica Los nios se presentan al hospital con diferentes perfi
de adultos y peditrica. Es im portante medir los niveles les de enfermedad. Existen m uchas ms m anifestaciones
sanguneos de varios frmacos si esa inform acin propor con enfermedad infecciosa com o resultado de inm unidad
cionar gua im portante para el m dico con respecto a la subdesarrollada. Las enfermedades genticas m etablicas
dosificacin ptima. sta es ms im portante si un frmaco son casi exclusivas a la pediatra. Adems, se requieren
tiene un ndice teraputico bien definido. Esto significa farm acuticos clnicos peditricos para com prender el
que se con oce que el frmaco es ineficaz si el nivel san proceso analtico vinculado con el diagnstico.
guneo se encuentra por debajo de cierto valor, que hay El tamao pequeo de m uchos pacientes en un centro
un rango teraputico bien definido en el que el frmaco peditrico necesita un m todo diferente a los m ens de
es efectivo y que existe un nivel ms elevado en que el se prueba qum ica y la eleccin de instrum entacin.
vuelve txico. Esto es im portante al m onitorear los niveles
de los frmacos con esa caracterstica. En el cuadro 3 3 - 1 6
se enum eran los frmacos en los que est establecida la
im portancia del m onitoreo teraputico.
CAPTULO 33 QUMICA CLNICA PEDITRICA 673
PREGUNTAS DE REPASO
1. Cul de los siguientes fenm enos ocurre en lactantes 6. Cul de las siguientes inm unoglobulinas son propor
inm ediatam ente despus de nacer? cionadas al nuevo beb por la madre?
a ) F uncin heptica y m etabolism o de la bilirrubina fl) IgG.
normales. b) IgD.
b) Cierre de los conductos arteriosos y respiracin c) IgM.
adulta. d) IgA.
c) Tasas adultas de filtracin glom erular por los
7. Cual de las siguientes horm onas secreta la hipfisis?
riones.
fl) Horm ona del crecimiento.
d ) H om eostasis normal del agua.
b) Testosterona.
2. Cunta sangre se obtendr en cualquier m om ento c) Factor de crecim iento sem ejante a la insulina.
dado de u n beb de 3.1 kg? d) Hormona estim ulante de la tiroides.
a) N o ms de 10 ml.
8. La espectrom etra de masas en tndem se utiliza para
b) N o ms de 2 0 ml.
detectar:
c) N o ms de 1 ml.
a ) Fibrosis cstica.
d) N o ms de 2.5 ml.
b) D eficiencia inmunitaria combinada.
3. Al elegir un analizador qum ico para un laboratorio c) Entre 2 5 y 3 0 enfermedades metablicas.
peditrico, es necesario que: d) Panhipopituitarism o.
fl) Tenga u n tiem po de respuesta rpido.
9. Los niveles de frmacos am inoglucsidos, com o la
b) Pueda analizar volm enes pequeos.
gentamicina, son medidos:
c) Tenga un m en extenso.
a) Treinta m inutos despus de una dosis.
d) Tenga autom atizacin de principio a fin.
b) Tres horas despus de una dosis.
4. Los valores elevados de amoniaco sanguneo ocasionan: c) De manera constante.
fl) A cidosis metablica. d) En cualquier m om ento.
b) Aicalosis metablica.
c) Aicalosis respiratoria.
d) A cidosis respiratoria.
5. Las pruebas en el sitio de cuidado son tiles cuando:
a) Se requieren los resultados con rapidez.
b) Solo estn disponibles tamaos pequeos de
muestra.
c) El dispositivo se puede conectar al SIL del hospital.
d) N o se necesitan muestras con control de calidad.
REFERENCIAS 5. Burtis CA, Ashwood ER, eds. Tietz Fundamentis of Clinical Che
1. Green A, Morgan I, Gray J. Neonatology and Laboratory Medicine. mistry, 5th ed. Philadelphia: WB Saunders, 2001.
London: ACB Venture Publications, 2003. 6. Newman DJ. Cystatin C. Ann Clin Biochem 2002;39:89-104.
2. Soldin SJ, Rifai N, Hicks JMB, eds. Biochemical Basis of Pediatric 7. Scriver CR, Beaudet AL, Valle D, Sly WS, eds. The Metabolic and
Disease. Washington, D.C.: American Association for Clinical Che Molecular Bases of Inherited Disease, 8th ed. New York: McGraw-
mistry, 1992. Hill, 2001.
3. Gil FN, Bennett MJ. The pediatrics unit. In: Price CP, Hicks JM , eds. 8. Hommes FA, ed. Techniques in Diagnostic Human Biochemical
Point of Care Testing. Washington, D.C.: American Association for Genetics. New York: Wiley-Liss, 1991.
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patterns of cervicovaginal fetal fibronectin as predictors of sponta- 10. Hallworth M, Capps N. Therapeutic Drug Monitoring and Clinical
neous preterm delivery. Am J Obstet Gynecol 1997;177:8-12. Biochemistry. London: ACB Venture Publications, 1993.
dices
Unidades bsicas del SI J Cuadro de conversin de transmitancia-
Prefijos por utilizarse con unidades del SI absorbancia porcentual
Conversiones bsicas de laboratorio clnico K Pesos atmicos seleccionados
Conversin de unidades tradicionales a unidades L Caractersticas de los tipos de vidrio
del SI para analitos qumicos frecuentes M Caractersticas de los tipos de plstico
Concentraciones de cidos y bases usados con fr N Resistencia qumica de los tipos de plstico
mulas relacionadas O Limpieza del material de laboratorio
Ejemplos de qumicos incompatibles P Cuadro de resumen de parmetros farmacocinticos
Nomograma para la determinacin del rea de la Q Informacin seleccionada sobre frmacos que
superficie corporal suelen causar adiccin
Nomograma de fuerza centrfuga relativa R Tabla peridica de los elementos
Centrifugacin: ajuste de la velocidad y el tiempo
Para conocer informacin adicional, consulte la ltima edicin de una de las siguientes estupendas referencias:
Bold AM y Wilding P, Clinical Chemistry Companion, Oxford, Reino Unido: Blackwell Scientific Publications.
Weast RC, CRC Handbook of Clinical Chemistry, Boca Ratn, FL: CRC Press.
Werner M, CRC Handbook of Clinical Chemistry, Boca Ratn, FL: CRC Press.
674
APNDICE C CONVERSIONES BSICAS DE LABORATORIO CLNICO 675
10-2 ce n ti c
Nota: Las unidades del SI (Sistema Internacional de Unidades) son
aquellas que tienen una definicin reconocida por acuerdo 1 0 -1 deci d
Internacional. Observe que algunas unidades del SI tienen smbolos
escritos con maysculas. Esto es para evitar confusin con prefijos del SI 101 d eca da
en los que se usa el mismo smbolo en letra.
102 h e cto h
103 k ilo k
106 m ega M
1o9 g ig a G
1o 15 p eta P
1018 exa E
Nota: los prefijos se usan para indicar una subunidad o mltiplo de una
unidad bsica del SI.
MULTIPLIQUE
PARA CONVERTIR EN POR PARA CONVERTIR EN USO
'Para obtener la unidad del SI, multiplique la unidad comn por el factor de conversin. Para obtener la unidad convencional o comn, divida la
unidad del SI entre el factor de conversin.
APNDICE E CONCENTRACIONES DE CIDOS Y BASES USADOS CON FRMULAS RELACIONADAS 677
Conc. = concentracin.
Vara de acuerdo con la porcin y/o fabricante. Frmulas relacionadas:
Molaridad (M) = g/L/PGM
Peso equivalente (peso eq) = PGM/valencia
Normalidad (N) = g/L/p eq
Gravedad especfica (gr esp.): gr esp. x % de pureza (en forma decimal) = g de soluto/ml
678 APNDICES
cido actico cido crmico, cido ntrico, compuestos hidroxilo, etilenglicol, cido
perclrico, perxidos, permanganatos
Acetileno Cloro, bromo, cobre, flor, plata, mercurio
Acetona Mezclas concentradas de cido ntrico y sulfrico
lcali y los metales de tierra alcalina Agua, tetracloruro de carbono u otros hidrocarburos clorinados, dixido
(como aluminio o magnesio en polvo, de carbono, halgenos
calcio, litio, sodio, potasio)
Amoniaco (anhidro) Mercurio (en manmetros, por ejemplo), cloro, hipoclorito del calcio,
yodo, bromo, el cido hidroflurico (anhidro)
Nitrato de amonio cidos, metales en polvo, lquidos inflamables, cloratos, nitritos, azufre,
materiales orgnicos o combustibles finam ente divididos
Anilina cido ntrico, perxido de hidrgeno
Materiales arsenicales Cualquier agente reductor
Azidas cidos
Bromo Vase cloro
xido del calcio Agua
Carbono (activado) Hipoclorito del calcio, todos los agentes oxidantes
Tetracloruro de carbono Sodio
Cloratos Sales de amonio, cidos, metales en polvo, azufre, materiales orgnicos
o combustibles finam ente divididos
cido crmico y tritxido de cromo cido actico, naftaleno, alcanfor, glicerol, alcohol, lquidos
inflamables en general
Cloro Amoniaco, acetileno, butadieno, butano, metano, propano (u otros
gases del petrleo), hidrgeno, carburo de sodio, benceno, metales
finam ente divididos, trementina
Dixido del cloro Amoniaco, metano, fosfuro, sulfuro de hidrgeno
Cobre Acetileno, perxido de hidrgeno
Hidroperxido de cumina cidos (orgnicos o inorgnicos)
Cianuros cidos
Lquidos inflamables Nitrato de amonio, cido crmico, perxido de hidrgeno, cido
ntrico, perxido de sodio, halgenos
Flor Todos
Hidrocarburos (como butano, propano, Flor, cloro, bromo, cido crmico, perxido de sodio
benceno)
cido hidrocinico cido ntrico, lcali
cido hidroflurico (anhidro) Amoniaco (acuoso o anhidro)
Perxido de hidrgeno Cobre, cromo, hierro, la mayora de los metales o sus sales, alcohol,
acetona, materiales orgnicos, anilina, nitrometano, materiales
combustibles
APNDICE F EJEMPLOS DE QUMICOS INCOMPATIBLES 679
Nitritos cidos
Nitroparafinas Bases inorgnicas, aminas
cido oxlico Plata, mercurio
Oxgeno Aceites, grasa, hidrgeno, lquidos inflamables, slidos o gases
cido perclrico Anhdrido actico, bismuto y sus aleaciones, alcohol, papel, madera,
grasa, aceites
Perxidos, orgnicos cidos (orgnicos o minerales), evitar friccin, alm acenam iento fro
Fsforo (blanco) Aire, oxgeno, lcalis, agentes reductores
Potasio Tetracloruro de carbono, dixido de carbono, agua
Clorato de potasio Sulfrico y otros cidos
Perclorato de potasio (vase Sulfrico y otros cidos
tam bin cloratos)
Permanganato de potasio Glicerol, etilenglicol, benzaldehdo, cido sulfrico
Selenidas Agentes reductores
Plata Acetileno, cido oxlico, cido tartrico, compuestos de amonio,
cido fulmnico
Sodio Tetracloruro de carbono, dixido de carbono, agua
Nitrito de sodio Nitrato de amonio y otras sales de amonio
Perxido de sodio Alcohol etlico o metlico, cido actico glacial, anhdrido actico,
benzaldehdo, disulfuro de carbono, glicerina, etilenglicol, acetato
de etilo, acetato de metilo, furfural.
Sulfuras cidos
cido sulfrico Clorato de potasio, perclorato de potasio, perm anganato de
potasio (compuestos similares o metales ligeros, como sodio, litio)
Teluros Agentes reductores
Reimpreso con autorizacin de National Research Council, Commitee on Hazardous Substances in the Laboratory. Prudent Practices for Handling
Hazardous Chemicals in Laboratories. Washington, D.C.: National Academy Press, 1981. Para conocer informacin adicional, vase Pipitone DA. Safe
Storage of Laboratory Chemicals, 2a. ed., Nueva York: John Wiley & Sons, 1991.
Reimpreso con autorizacin de N Engl J Med, 1921;185:337.
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Altura en centmetros
Peso en libras
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o o o o o o o o o o o o o o o o o o o o o o o
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r\5 co co en en en s n co oo (O eo
en o en o en en o en o en o en o en o
o o o o o o o o o o o
Peso en kilogramos
APNDICE H NOMOGRAMA DE FUERZA CENTRFUGA RELATIVA 681
MEDIO ULTRA
20
50 20,000 e ; 200,000
18 45 15,000 150,000
16 ; 40
MEDIO ULTRA
14- 10,000 100,000
: 35 30.000 3,000,000
20.000 2 , 000,000
12
30
60,000
10,000 1 , 0 0 0 ,00 0 6 000
10- 25
5,000 500.000
9 Uso del nomograma de FCR 4,000 40,000
(0
o
Para determinar la fuerza centrfuga -o c
</>
20 relativa (FCR), coloque una regla sobre
el nomograma que conecta la velocidad
|> 2,000 200.000 3,000 30,000 I
o
(O <o o Q.
O 18 2 conocida (rpm) y el radio rotante
0 1 000
CO
O) 5 conocido (r). El punto en el que la regla , - 100,000
3
intercepta el eje FCR es la fuerza.
<
>
C
O
Q. 16 J 2,000 20,000
<L> 6*
o o 500 50,000 3
Por ejemplo, si el radio rotante es de O
10 cm y la velocidad es de 3000 rpm, (6 >
14 Cl 1,500 - 15,000
c la fuerza centrfuga relativa ser de
CQ
o O 1000 x g (gravedad).
73
(0
(0 200 20,000 73
ir f 12 o O
CC
Si la fuerza y el radio son conocidos, 1,000 10,000 I
es posible determinar la velocidad 100 10,000 >
03)
10 correspondiente. U.
Para calcular FCR 50 5,000
9
FCR = .000011 1 8 x rx N 2
FCR = fuerza centrfuga relativa
(gravedades) 20 2,000 500 5,000
r = radio rotante (centmetros)
N = velocidad rotante
10 1,000
(revoluciones por
minuto o rpm)
3 J 300
FCR 200 L - 2,000
RPM
30 .5 2 3 .5 2 0 .5 1 6 .5 1 2 81 .0 9 2 .0 9 0 .0 8 9 .0 8 8
31 .5 0 9 .5 0 5 .5 0 2 .4 9 8 82 ,0 8 6 .0 8 5 .0 8 4 .0 8 2
32 .4 9 5 .4 9 1 .4 8 8 .4 8 5 83 .081 .0 8 0 .0 7 8 .0 7 7
33 .4 8 2 .4 7 8 .4 7 5 .4 7 2 84 .0 7 6 .0 7 4 .0 7 3 .0 7 2
34 .4 6 9 .4 6 5 .4 6 2 .4 5 9 85 .071 .0 6 9 .0 6 8 .0 6 7
35 .4 5 6 .4 5 3 .4 5 0 .4 4 7 86 .0 6 6 .0 6 4 .0 6 3 .0 6 2
36 .4 4 4 .441 .4 3 8 .4 3 5 87 .061 .0 5 9 .0 5 8 .0 5 7
37 .4 3 2 .4 2 9 .4 2 6 .4 2 3 88 .0 5 6 .0 5 4 ,0 5 3 .0 5 2
38 .4 2 0 .4 1 7 .4 1 4 .4 1 2 89 .051 .0 4 9 .0 4 8 .0 4 7
39 .4 0 9 .4 0 6 .4 0 3 .401 90 .0 4 6 .0 4 5 .0 4 3 .0 4 2
40 .3 9 8 .3 9 5 .3 9 2 .3 9 0 91 .041 .0 4 0 .0 3 9 .0 3 7
41 .3 8 7 .3 8 5 .3 8 2 .3 8 0 92 .0 3 6 .0 3 5 .0 3 4 .0 3 3
42 .3 7 7 .3 7 4 .3 7 2 .3 6 9 93 .0 3 2 .0 3 0 .0 2 9 .0 2 8
43 .3 6 7 .3 6 4 .3 6 2 .3 5 9 94 .0 2 7 .0 2 6 .0 2 5 .0 2 4
44 .3 5 7 .3 5 4 .3 5 2 .3 4 9 95 .0 2 2 .021 .0 2 0 .0 1 9
45 .3 4 7 .3 4 4 .3 4 2 .3 4 0 96 .0 1 8 .0 1 7 .0 1 6 .0 1 4
46 .3 3 7 .3 3 5 .3 3 2 .3 3 0 97 .0 1 3 .0 1 2 .0 1 1 .0 1 0
47 .3 2 8 .3 2 5 .3 2 3 .3 2 1 98 .0 0 9 .0 0 8 .0 0 7 .0 0 6
48 .3 1 9 .3 1 7 .3 1 4 .3 1 2 99 .0 0 4 .0 0 3 .0 0 2 .001
49 .3 1 0 .3 0 8 .3 0 5 .3 0 3 100 .0 0 0 0 .0 0 0 0 .0 0 0 0 .0 0 0 0
50 .301 .2 9 9 .2 9 7 .2 9 5
51 .2 9 2 .2 9 0 .2 8 8 .2 8 6
"Absorbancia = 2 - log % T.
684 APNDICES
Aluminio Al 13 26.98 3
Antim onio Sb 51 121.75 3,5
Argn Ar 18 39.95 0
Arsnico As 33 74.92 3,5
Bario Ba 56 137.34 2
Berilio Be 4 9.01 2
Bismuto Bi 83 208.98 3,5
Boro B 5 10.81 3
Bromo Br 35 79.90 1,3,5,7
Cadmio Cd 48 112.40 2
Calcio Ca 20 40.08 2
Carbono C 6 12.01 2,4
Cerio Ce 58 140.12 3,4
Cesio Cs 55 132.91 1
Cinc Zn 30 65.37 2
Cloro Cl 17 35.45 1,3,5,7
Cromo Cr 24 51.99 2,3,6
Cobalto Co 27 58.93 2,3
Cobre Cu 29 63.55 1,2
Estao Sn 50 118.69 2,4
Estroncio Sr 38 87.62 2
Flor F 9 18.99 1
Fsforo P 15 30.97 3,5
Helio He 2 4.00 0
Hidrgeno H 1 1.01 1
Hierro Fe 26 55.85 2,3
Litio Li 3 6.94 1
Magnesio Mg 12 24.31 2
Manganeso Mn 25 54.94 2,3,4,6,7
Mercurio Hg 80 200.59 1,2
Molibdeno Mo 42 95.94 3,4,6
Nquel Ni 28 58.71 2,3
Nitrgeno N 7 14.01 3,5
Oro Au 79 196.97 1,3
Oxgeno 0 8 16.00 2
Plata Ag 47 107.87 1
Platino Pt 78 195.09 2,4
Plomo Pb 82 207.19 2,4
Potasio K 19 39.10 1
Rubidio Rb 37 85.47 1
Selenio Se 34 78.96 2,4,6
Silicio Si 14 28.09 4
APNDICE L CARACTERSTICAS DE LOS TIPOS DE VIDRIO 685
Sodio Na 11 22.99 1
Tungsteno W 74 183.85 6
Xenn Xe 54 131.30 0
Zirconio Zr 40 91.22 4
Los pesos atmicos estn basados en C'2 y se han redondeado a dos decimales.
Resistencia Borosilicato con Pyrex Para todos los propsitos, No debe enfriarse con
trmica bajo contenido Kimax todos los tipos de vasos de demasiada rapidez despus
elevada alcalino precipitados, frascos, etc. del calentam iento
Puede tolerar calentam iento Pueda opacarse despus del
y esterilizacin por largos uso con un lcali fuerte
perodos a 510C
Sujeto al rayado
Aluminosilicato Corex Tubos para centrifugar Resistencia al rayado
y termmetros Sujeto a cierto ataque
Extrem adamente duro y resistente de cido o lcali a
Estabilidad de tem peratura tem peratura de 100C
a 672C; uso de corto plazo a
850C.
Vycor Tcnicas para cenizas e ignicin.
Resiste tem peraturas muy altas
(900 a 1 200C), as como cambios
drsticos de tem peratura. La mayor
parte son resistentes a lcalis en
esta categora
Slice elevada 96% slice Cuvets y termmetros
Pueden usarse a temperaturas
altas (900 a 1 200C) y resisten
un cambio marcado en temperatura
Se le considera puro desde el punto
de vista ptico (cuvets, termmetros)
Resistencia alta Aluminosilicato Puede usarse con lcalis fuertes Debe calentarse y
a los lcalis y sufrir ataque mnimo (0.09 enfriarse con cuidado
contra 1.4 mg/cm2 para La tem peratura ms
borosilicato o 0.35 mg/cm2 para elevada para su uso
aluminosilicato regular) seguro es de 578C.
686 APNDICES
Los tubos de PVC pueden calentarse a 120C, se autoesterilizan y son muy flexibles.
Poliestireno til con agua y soluciones salinas acuosas. No se recomienda para el uso con cidos, aldehidos,
cetonas, teres, hidrocarburos, o aceites esenciales. Es posible utilizar alcoholes y bases, pero no se
recomienda el alm acenam iento por ms de 24 horas.
Polietileno Ambas clasificaciones del polietileno (es decir, convencional y lineal) tienen similar resistencia
qumica. Cuentan con estupenda resistencia qumica a la mayor parte de las sustancias, con la
excepcin de aldehidos, aminas, teres, hidrocarburos y aceites esenciales. En el caso de polietileno
convencional, las excepciones tam bin incluyen lubricantes y silicones. El empleo de cualquiera de
los grupos antes mencionados se limitar a 24 h a tem peratura ambiente.
Polipropileno Tiene la misma resistencia qumica que el polietileno lineal.
Tefln Esta resina posee estupenda resistencia qumica a casi todos los qumicos usados en el
laboratorio qumico.
Policarbonato Muy sensible al dao por la mayor parte de los qumicos. Es resistente al agua, sales acuosas,
alim ento y cidos inorgnicos por un largo perodo.
Hay que notar que esta informacin se basa en la temperatura ambiente (22C) y presin atmosfrica normal. La resistencia a qumicos disminuye a
medida que la temperatura de la resina se acerca a su valor mximo. La resistencia qumica tambin variar a medida que aumente la concentracin
del qumico.
APNDICE O LIMPIEZA DEL MATERIAL DE LABORATORIO 687
Uso general (el 1. La cristalera sucia se colocar de inmediato en una solucin jabonosa o de blan
procedimiento 1 es queador diluida y se pemitir que se remoje. Se debe lavar con cualquier detergente
recomendado para diseado para el material de laboratorio. Enjuague con agua del grifo tres veces,
necesidades rutinarias seguido por un enjuague con agua destilada. Seque al horno a una tem peratura
de lavado) menor de 140C.
2. Dicromato cido. Disuelva 50 g de dicromato de sodio de grado tcnico en 50 mi
de agua destilada. Agregue esta mezcla a 500 mi de cido sulfrico concentrado de
grado tcnico. Esta solucin es til hasta que se desarrolla un color verde. Alm acene
en un recipiente de vidrio cubierto. Remoje la cristalera durante la noche y luego
enjuague con amoniaco diluido. Vuelva a lavar la cristalera de acuerdo con el pro
cedimiento 1.
3. cido ntrico (20%). Remoje por 12 a 24 h. Lave de acuerdo con el procedimiento 1.
Cogulos de sangre 4. Hidrxido de sodio (10%). Remoje por 12 a 24 h; luego contine con el
procedimiento rutinario. Seque micropipetas con un enjuague de acetona.
Pipetas nuevas (S1 alcalina) 5. Enjuague con cido hidroclrico o cido ntrico al 5%. Lave de acuerdo con el
procedimiento de rutina.
Determinaciones 6. Remoje en cido (cido ntrico al 20%), por 12 a 24 h. Enjuague con agua
del ion del metal destilada entre tres y cuatro veces. El agua debe ser fresca en cada paso que se
enjuague.
Grasa 7. Remoje en cualquier solvente orgnico.
8. Disuelva 100 g de hidrxido de potasio en 100 mi de agua destilada. Deje enfriar.
Agregue 900 mi de etanol a 10% de grado comercial. No se utilice en cristalera
delicada.
9. Contrad 70 (fabricado por Decon Labs).
Manchas de perm anganato 10. cido hidroclrico al 50%. Enjuague con agua del grifo. Lave.
11. Disuelva sulfato ferroso al 1% en cido sulfrico al 25%.
688 APNDICES
Frmacos cardioactivos
0.5-1.5 free
Procainamida 4-10 pg >12 1-2 2.5-4.7 15 1.7-2.2 70-95 50
NAPA 15-25 pg 4.3-15
Total 5-30 pg
Propranolol 50-100 ng Variable 1-2 2-6 90-95 4-6 20-40" 1-4
4-8c
Frmacos antiepilpticos
Carbamazepina 6-12 pg >15 6-12 18-54rf 72-75 0.8-1.4 75-85 2
10-25'
Etosuximida 40-100 pg >150 1-4 40-60 <10 0.6-0.9 100 10-20
Antibiticos
Aminoglucsidos 0.5-IM8
Amikacina 5-12 pg
Mximo 50-100 pg >32
Mnimo 10-20 pg >5
Gentamicina
Mximo 20-25 pg >12
Mnimo 1-4 pg >2
Kanamicina
Mximo 5-10 pg >30
Mnimo 0.5-1.5 pg >10
Netilmicina
Mximo 5-12 pg >12
Mnimo 0.5-1.5 pg >2
APNDICE P CUADRO DE RESUMEN DE PARMETROS FARMACOCINTICOS 689
Antibiticos (continua)
Estreptomicina
Mximo 20-25 pg >30
Mnimo 1-3 pg >10
Tobramicina
Mximo 5-12 pg >12
Mnimo 0.5-1.5 pg >2
Vancomcna
Mximo 30-40 pg >80 3-9 50 0.5-0.8 <2 80-90
Mnimo 5-10 pg >20
Cloranfenicol 10-20 pg >25 2 1.5-3 50 0.5-1 90 10
Frmacos psicoactivos
APNDICES
Estimulantes
Cocana Coca, crack, Nasal, oral, 1a 2 2a 5 < 10% Benzoilecgonina; ecgonina; Anestesia, euforia, confusin,
copos de nieve IV, fum ada ster de metil ecgonina depresin, convulsiones,
cardiotoxicidad
A nfetam ina Bennies, dexies, Oral, IV 2a4 4 a 24 -3 0 % cido benzoico; Insomnio, anorexia, euforia,
superiores p-hidroxinorefedrina; tolerancia y dependencia,
fenilacetona psicosis paranoide
Metanfetam ina Meth, anfeta, Oral, IV 2a 4 9 a 24 10-20% 4-hidroximetanfetam ina; Euforia, agitacin, psicosis,
cristal anfetam ina; 4-tiroxianfetamina; depresin, agotam iento
norefedrina
Narcticos
Herona Caballo, bofetada. IV, nasal, 3a 6 1 a 1.5 <1% 6-acetilmorfina; morfina; Euforia, somnolencia,
Doa blanca, scag fum ada glucurnido de morfina depresin respiratoria,
convulsiones, coma
Codena C; Co-Dine; Oral, IV, IM 3a 6 2a4 5-20% Morfina; norcodena; Sedacin, convulsiones,
Lean y den; conjugados insuficiencia respiratoria
Muchacho escolar;
Jarabe
Morfina Basura, material IV, IM, oral, 3a 6 2 a4 <10% Morfina-3-glucurnido; Analgesia, euforia, nusea,
blanco, morfo, M, fum ada Morfina-6-glucornido; coma respiratorio
Sulfato de morfina;
normorfina; codena
Metadona Metadosa Oral, IV, IM, 12 a 24 15 a 60 5-50% 2-etiliden-1,5-dimetil-3,3- Analgesia, sedacin, depresin
difenilpirrolina; 2-etil- respiratoria, coma
5-metil-3,3-difenil-pirrolina
metadoi; norm etatadol;
conjugados
Meperdina (Demerol) IV, oral 3a 6 2 a 5 5% Normeperidina; cido Analgesia, estupor, depresin
meperidnico: cido respiratoria, hipotensin,
normeperidnico coma
Propoxifeno Futboles amarillos Oral 1a 6 8 a 24 < 1% Norpropoxifeno; Analgesia, estupor, depresin
(Darvon) dinorpropoxifeno respiratoria, coma
Alucingenos
Fenciclidina (PCP) PCP, polvo de IV, oral, 2 a 4; las 7 a 16 30 a 50% 4-fenil-4- Anestesia disociativa,
ngel, polvo nasal, psicosis piperidinociclohexanol; depresin, psicosis, estupor,
csmico, ozono fum ada llegan a 1-(1-fenilciclohexil)-4- coma, ataques
term inar en semanas conjugados de glucurnido
LSD cido, LSD-25, Oral 8 a 12 3a4 1% N-desmetil-lisergida; Alucinaciones,
relm pago blanco, 13-hidroxilisrgido retrospecciones, psicosis,
micropuntos vmito, parlisis, depresin
respiratoria
M ariguana Hachs Olla, THC, Mary Oral, fumada 2 a 4 14 a 38 < 1% 11-Nor-9-carboxi-A9-THC; Percepcin alterada, prdida
691
692 APNDICES
fH rn TT
Fuente: Monroe M y Abrams K, Experimental Chemistry: A Laboratory Course. Belmont, CA: Star Publishing Company, 1991. Reimpreso con autorizacin.
Glosan o
Aminocentesis: puncin del saco amnitico para obtener lqui Antgeno especfico de tumor: un antgeno tumoral; se conside
do para anlisis. ra que es un producto directo de la oncognesis inducida por
Amoniaco: NH3; formado in vitro de la descomposicin de ami oncogenes virales, radiacin, carcingenos qumicos o facto
nocidos. res de riesgo desconocidos.
Amplicn: secuencias de DNA blanco amplificadas. Antgeno oncofetal: una protena producida en grandes cantida
Analgsico: un frmaco que alivia el dolor. des durante la vida fetal y liberada hacia la circulacin fetal.
Anlisis centrifugo: tcnica analtica que usa la fuerza generada Despus del nacimiento, se reprime la produccin de antge-
por centrifugacin para transferir y luego contener lquidos nos oncofetales, y slo pequeas cantidades estn presentes
en cubetas separadas para medicin en el permetro de un en la circulacin de adultos.
rotor giratorio. Antgeno relacionado con tumores: un antgeno relacionado
Anlisis de orina: un grupo de pruebas selectivas llevadas a con un tumor; se deriva del mismo tejido o de uno que ten
cabo como parte del estudio diagnstico de admisin de un ga relacin estrecha con l. Las protenas oncofetales son un
paciente o examen fsico. Incluye la evaluacin de caracters ejemplo de antgenos relacionados con tumores. Estn pre
ticas fsicas, anlisis qumicos y examen microscpico de una sentes en tejido embrionario/fetal y clulas cancerosas.
muestra (aleatoria) de orina. Antioxidante: sustancia (p. ej., vitamina) que inhibe o evita la
Anlisis discreto: un enfoque al anlisis automatizado en el cual oxidacin.
cada muestra y reactivos adjuntos estn en recipientes separa Apoenzima: porcin de protena de una enzima.
dos. Los analizadores discretos tienen la capacidad de ejecu Apoptosis: muerte programada de clulas; desintegracin de
tar varias pruebas con una muestra a la vez o varias muestras clulas del cuerpo en partculas unidas a la membrana que
con una prueba a la vez. luego pueden ser fagocitadas por otras clulas.
Analito: un soluto biolgico o constituyente (p. ej. calcio, glu Arritmia: latido cardaco o accin irregular.
cosa, sodio). Arteriosclerosis: incluye varias condiciones patolgicas en las
Analizadores modulares: instrumentos de laboratorio flexibles que hay un aumento de espesor o endurecimiento de las pare
que pueden ser ampliados o modificados al aadir o quitar des de las arterias.
componentes a fin de satisfacer los requerimientos de prueba Asa de Henle: asas descendentes o ascendentes del tbulo renal.
cambiantes del laboratorio. Ascitis: lquido en exceso en la cavidad peritoneal; el lquido se
Andrgeno: cualquier sustancia (hormona) que estimula el desa llama liquido asctico.
rrollo de las caractersticas masculinas (p. ej., testosterona). Aseguramiento de la calidad: sistema o proceso que abarca (en
Anfotrico: que tiene dos o ms sitios ionizables que pueden el laboratorio) factores preanalticos, analticos y posanalti
producir una carga neta positiva o negativa dependiendo del cos. El control de calidad es parte de un sistema de asegura
pH del medio. miento de la calidad.
Angina de pecho: dolor y una sensacin de constriccin alre Aterosclerosis: una enfermedad en la que hay una acumulacin
dedor del corazn; podra irradiarse al brazo y hacia la man de material lipdico en las venas y las arterias.
dbula, y es el resultado de la deficiencia de oxgeno en el ATT: vase Albmina transportadora de tiroxina.
msculo cardaco. Automatizacin total del laboratorio: dispositivos automatiza
Angiotensina: un polipptido producido cuando se libera renina dos y robots integrados con los analizadores existentes para
de los riones; una sustancia vasopresora. llevar a cabo las fases del anlisis de laboratorio.
Anhidro: sin agua. Automatizacin: mecanizacin de los pasos en un procedimien
Anillar: la accin de formas pares de secuencias complementa to. Los fabricantes de analizadores qumicos clnicos disean
rias para formar una molcula de doble hebra, por lo regular sus instrumentos para imitar las tcnicas manuales en un pro
molculas de DNA o RNA. cedimiento analtico.
Anin: un ion con carga negativa; los aniones se mueven hacia el Avidez: resistencia de enlace del complejo antgeno-anticuerpo;
nodo (polo positivo) debido a su carga positiva. atraccin.
Anticoagulante: inhibe la accin de coagulacin de la sangre; Azoemia: concentracin elevada de urea en la sangre.
produce especmenes que contienen factores de coagulacin
intactos. B
Anticuerpo: glucoprotenas (inmunoglobulinas) secretadas por
clulas plasmticas, que a su vez estn bajo el control de Balance de nitrgeno: equilibrio entre anabolismo y catabolismo
muchos linfocitos y sus citocinas. Los anticuerpos se produ de protenas.
cen en respuesta a los antgenos. Bandera: en analizadores automatizados, una advertencia impre
Anticuerpos de tiroperoxidasa (TPO): anticuerpos tiroideos; sa por computadora de un error o problema del instrumento.
antes conocidos como anticuerpos antimicromosmicos Base: una sustancia que puede producir iones hidroxilo (OH-).
tiroideos. Beriberi: deficiencia crnica de la vitamina tiamina que produce
Anticuerpos receptores de tirotropina (TSHR): anticuerpos la enfermedad beriberi.
tiroideos relacionados con estados hipertiroideos e hipotiroi- Bicarbonato: el anin H C03.
deos. Bilirrubina conjugada: diglucurnido de bilirrubina; es hidroso-
Antgeno: agentes que el sistema inmunitario reconoce como luble y se secreta de la clula heptica hacia los canalculos
extraos. En respuesta el sistema inmunitario produce anti biliares y luego pasa junto con el resto de la bilis hacia los duc-
cuerpos. tos biliares ms grandes y, por ltimo, hacia los intestinos.
GLOSARIO 695
Bilirrubina: el pigmento principal de la bilis; derivado de la des Carbohidrato: aldehidos polihidroxilados o cetonas polihidroxi-
composicin de la hemoglobina cuando en sistema reticulo- ladas, o unidades multimricas de esta clase de compuestos.
endotelial fagocita los eritrocitos envejecidos, sobre todo en La frmula general de un carbohidrato es (CH20 ) n.
el bazo, hgado y mdula espinal. Carcingeno: agente causante de cncer.
Bilis: un lquido que produce el hgado y est compuesto de Cardiomiopata: enfermedad del miocardio.
cidos o sales biliares, pigmentos biliares (sobre todo steres Cardiopata congestiva: (tambin insuficiencia cardaca conges
de bilirrubina), colesterol y otras sustancias extradas de la tiva) resulta de una incapacidad del corazn para bombear
sangre. La produccin biliar total promedia cerca de 3 L/da, sangre de forma efectiva.
aunque slo se excreta un litro. Cardiopata reumtica: afecta a todas las capas del corazn.
Biorriesgo: cualquier dao o posible dao al hombre, otros orga Inflamacin de la superficie interna del corazn (endocardi
nismos o al ambiente. Algunos ejemplos son sangre o produc tis), en particular las vlvulas del corazn izquierdo, conduce
tos sanguneos y desechos de laboratorio contaminados. a ulceracin y crecimiento de vegetaciones en el revestimien
Bucles de retroalimentacin: un sistema de control de una fun to del corazn y en ltima instancia a dao irreversible de las
cin fisiolgica que permite la retroalimentacin y la correc vlvulas.
cin con base en condiciones o concentraciones circulantes Catin: un ion con carga positiva; los cationes migran en la
de una hormona o sustancia. direccin del ctodo como resultado de su carga positiva.
Bureta: una pipeta graduada amplia y larga con una llave en un CCK: vase Colecistocinina.
extremo. Clula de Sertoli: clula de tbulos seminferos que nutren a los
espermtides.
c Clulas de Kupffer: macrfagos fagocticos capaces de ingerir
bacterias u otro material extrao de la sangre que fluye por
Cadena de custodia: registra cada paso y cada persona que los sinusoides.
maneja una muestra (para anlisis toxicolgico) desde la Clulas de Leydig: clulas de los testculos que producen tes
recoleccin hasta el anlisis. tosterona.
Cadenas pesada y ligera de miosina: protenas de miocardio. Clulas foliculares (o cuboideas): uno de dos tipos de clulas de
Calcitonina: hormona producida por la glndula tiroides; impor la tiroides; son clulas secretoras y producen tiroxina (T4) y
tante en el metabolismo seo y del calcio. triyodotironina (T3).
Clculo de Friedewald: clculo usado para estimar colesterol de Clulas perifoliculares: uno de dos tipos de clulas que forman
LDL en la prctica clnica rutinaria. la glndula tiroides. Tambin clulas C; se sitan en grupos
Calibracin de un punto (o clculo): un trmino que se refiere a lo largo de los espacios interfoliculares o intersticiales. Las
al clculo de la comparacin de una concentracin conocida clulas C producen la calcitonina polipeptdica, que participa
de estndar/calibrador y su absorbancia correspondiente con en la regulacin del calcio.
la absorbancia de un valor conocido. Centrifugacin: un proceso donde se usa la fuerza centrfuga
Calibracin: estandarizacin o la determinacin de la exactitud para separar materia slida de una suspensin lquida.
de un instrumento. Ceruloplasmina: una glucoprotena a 2 a la que se une el cobre;
Canal: en un analizador automatizado, una trayectoria o paso para ms de 90 a 95% del cobre en el plasma est unido a cerulo
reactivos, muestras o impulsos elctricos. Los analizadores plasmina.
automatizados pueden ser analizadores de un canal o varios. Cetona: un compuesto que contiene un grupo carbonilo (C=0)
Cncer: el crecimiento incontrolado de clulas del tejido normal. unido a dos tomos de carbono.
Las clulas cancerosas pueden crecer y dispersarse, matando Ciclosporina: un polipptido cclico de origen fngico. Consiste
al husped. en 11 aminocidos y tiene un peso molecular de 1203. Inhibe
Capacidad de enlace de hierro total (CEHT): una estimacin de la respuesta inmunitaria de forma selectiva al inhibir la pro
concentraciones de transferrina srica; se obtiene al medir la liferacin de clulas T activadas dependientes de interleuci-
capacidad de enlace de hierro total del suero de un pacien na 2 que destruyen el aloinjerto. La respuesta inmunitaria se
te. Puesto que la transferrina representa la mayor parte de paraliza y adormece.
la capacidad de enlace de hierro del suero, la CEHT es, por Cifras significativas: el nmero mnimo de dgitos necesarios
lo comn, una buena estimacin de las concentraciones de para expresar un valor particular en notacin cientfica sin
transferrina srica. prdida de precisin.
Capacidad de hemoglobina-oxgeno (enlace): la cantidad mxi Cintica de orden cero: punto en la reaccin enzimtica cuando
ma de oxgeno que puede llevar la hemoglobina en una deter se forma el producto, y la enzima libre resultante se combina
minada cantidad de sangre. de inmediato con sustrato libre en exceso; la velocidad de
Captacin de T3: ensayo utilizado para medir el nmero de reaccin depende slo de la concentracin de la enzima.
sitios de enlace disponibles de las protenas transportadoras Cintica de primer orden: punto en la reaccin enzimtica en el
de tiroxina, de manera notable GTT. No se debe confundir que la rapidez de la reaccin depende slo de la concentra
con el ensayo de Tr cin de enzima.
Carcter: el nmero a la izquierda del punto decimal en una Cirrosis: derivada de la palabra griega que significa amarillo. Sin
expresin logartmica. embargo, en el uso actual, la cirrosis se refiere al proceso de cica
Caracterizacin cardaca: tcnica invasiva donde se coloca un cat trizacin irreversible mediante el cual la arquitectura heptica
ter en un vaso perifrico y se hace avanzar hacia el corazn. normal se transforma en una arquitectura nodular anormal.
696 GLOSARIO
Citocinas: factores extracelulares producidos por diversas clu cin mxima en el cuerpo. Una regla emprica que da a enten
las como monocitos, linfocitos u otras clulas linfoides. Son der que, para concentraciones mximas de frmaco, se debe
importantes en el control de las respuestas inflamatorias loca recolectar la muestra una hora despus que se administr la
les y sistmicas. dosis.
Citocromo: un pigmento que desempea un papel en la respira Conductividad: se relaciona con la facilidad con la cual pasa la
cin, como la hemoglobina o mioglobina. electricidad por una solucin.
Citometria de flujo: el uso de etiquetas inmunofluorescentes para Constante de Michaelis-Menten (Km): constante para una enzi
identificar antgenos especficos o clulas vivas en suspensin. ma y sustrato especficos bajo condiciones de reaccin defi
Las suspensiones de clulas teidas son transportadas bajo nidas, y es una expresin de la relacin entre la velocidad de
presin ms all de un haz lser, y la fluorescencia emitida (a una reaccin enzimtica y concentracin de sustrato.
90 respecto al haz) se mide y se analiza por computadora con Contenido de oxgeno: suma de oxgeno unido a hemoglobina
esta tcnica. Al usar varias etiquetas, las clulas pueden ser como 0 2Elb y la cantidad disuelta en la sangre.
identificadas y clasificadas ya sea de forma electrnica o fsica. Control: una sustancia o material de valor determinado, utiliza
La tcnica ha sido empleada para analizar una subpoblacin do para monitorear la exactitud y la presin de una prueba.
de clulas linfocticas en diversos diagnsticos clnicos. Los controles se corren con las muestras del paciente.
Coartacin de aorta: estrechamiento de la aorta en la intersec Control de calidad: sistema para reconocer y reducir errores
cin del ducto arterioso. (analticos). El propsito del sistema de control de calidad
Cdigo de barras: un conjunto de barras verticales de ampli es monitorear procesos analticos, detectar errores analticos
tud variable utilizado para codificar informacin. Se usa con durante el anlisis y evitar el informe de valores incorrectos
mucha frecuencia en el laboratorio clnico para informacin del paciente. El control de calidad es un componente del sis
del paciente y muestras. tema de aseguramiento de la calidad.
Coeficiente de actividad (CA): en relacin con el estudio de Corpus albicans: tejido fibroso que remplaza un cuerpo lteo
vitaminas, una expresin que indica el incremento de la acti generado.
vidad enzimtica en la saturacin con una vitamina. Mientras Cortisol: una hormona esteroidea que producen las glndulas
mayor sea el CA, hay ms probabilidades de que el paciente suprarrenales.
tenga deficiencia de vitaminas. Creatina: compuesto encontrado en el msculo sintetizado de
Coenzima: un activador enzimtico (p. ej., coenzima a). varios aminocidos. Se combina con fosfato de alta energa
Cofactor: una molcula no protenica que puede ser necesaria para formas fosfato de creatina, que funciona como un com
para actividad enzimtica. puesto energtico en el msculo.
Colecistocinina: CCK, conocida antes como pancreozimina; una Creatinina: compuesto formado cuando la creatina o el fosfato
hormona que produce el pncreas. Las clulas de la muco de creatina pierden agua de forma espontnea o cido fosfri
sa intestinal producen CCK, en presencia de grasas o ami co. Se secreta hacia el plasma una tasa relativamente constan
nocidos, o ambos, en el duodeno. A la CCK se debe que el te en un determinado individuo y se excreta por la orina.
pncreas libere enzimas de las clulas acinares hacia el jugo Cromatografa de gases: tcnica analtica que se utiliza para
pancretico. separar mezclas de compuestos que son voltiles o se pueden
Colesterol: un alcohol esteroideo insaturado de alto peso mole hacer voltiles. La cromatografa de gases puede ser croma
cular, que consta de un anillo de perhidrociclopentantrolina tografa gas-slido (CGS), con una fase estacionaria slida, o
y de una cadena lateral de ocho tomos de carbono. En su cromatografa gas-lquido (CGL), con una fase estacionaria
forma esterificada, contiene una molcula de cido graso. lquida no voltil.
Compensacin: el intento del cuerpo por volver el pH a la nor Cromatografa lquida: tcnica de separacin en la que la fase
malidad siempre que ocurra un desequilibrio. mvil es un lquido.
Complejo enzima-sustrato: la unin fsica de un sustrato con el CTHT: vase Capacidad de enlace de hierro total.
sitio activo de una enzima. Cuerpo lteo: cuerpo pequeo que se desarrolla dentro de un
Comprobacin delta: un algoritmo en el que el resultado ms folculo ovrico roto; secreta progesterona.
reciente de un paciente se compara con el valor determinado Curva de disociacin hemoglobina-oxgeno: una representacin
previamente. grfica (en forma de S) del contenido de oxgeno como satu
Comunicacin interauricular (CIA): anormalidad que causa racin de oxgeno en por ciento en funcin de P 0 2; basada en
cortocircuito izquierda-derecha de la sangre en las aurculas. el principio de que el oxgeno se disocia de la hemoglobina de
Comunicacin peligrosa: basada en el hecho de que se debe adulto en un modo caracterstico.
informar a todos los empleados de cualquier riesgo para la CHR: vase Hormona liberadora de corticotropina.
salud relacionado con el uso de sustancias qumicas; del
Estndar de comunicacin peligrosa de 1987 (Derecho a D
conocer la ley).
Concentracin de frmaco de punto bajo: la concentracin Defecto septal arterial: anormalidad del corazn que causa cor
mnima de frmaco obtenida en la sangre. Las concentracio tocircuito izquierda-derecha de sangre entre las aurculas.
nes de punto bajo se deben retirar de inmediato antes de la Defecto septal ventricular: defecto en el septo entre los ven
dosis siguiente. trculos izquierdo y derecho del corazn.
Concentracin mxima de frmaco: el tiempo despus de la Densidad: peso de una sustancia que se compara con un estn
administracin hasta que un frmaco alcanza la concentra dar; expresada en trminos de masa por unidad de volumen.
GLOSARIO 697
Densidad relativa: trmino empleado para expresar densidad. Dopamina: la nica seal neuroendocrina que inhibe a la pro
Densitometra de minerales seos (DMO): procedimiento de lactina.
rayos X que mide la densidad mineral sea, gramos medidos DT30: dosis de un frmaco que se predice producira una res
de calcio por centmetro cuadrado de rea de seccin trans puesta txica en 50% de la poblacin.
versal del hueso (g/cm2). Dplex: un hbrido formado de hebras complementarias de ci
Desecador: una cmara cerrada para secar sustancias. do nucleico de fuentes no relacionadas enlazadas.
Desecante: que causa sequedad; material que puede eliminar
humedad del aire asi como de otros materiales. E
Desecho peligroso: cualquier material residual potencialmente
peligroso. ECG: vase Electrocardiografa.
Deshidroepiandrosterona (DHEA): un andrgeno derivado Ecocardiografa: tcnica de diagnstico no invasiva que utiliza
principalmente de la glndula suprarrenal. ondas sonoras de alta frecuencia para mostrar la estructura
Desnaturalizacin: alteracin de una sustancia (p. ej., protenas) cardaca en una pantalla de TRC.
para alterar las propiedades fsicas y qumicas. Ectpico: en una posicin o ubicacin anormal.
Desnutricin: un estado de ingestin reducida de caloras o Ecuacin de Henderson-Hasselbalch: ecuacin que describe en
micronutrientes (vitaminas y oligoelementos) que da como forma matemtica las caractersticas de disociacin de cidos
resultado una funcin fisiolgica deteriorada; relacionada y bases dbiles y el efecto sobre el pH; pH = pKa (6.1) + log
con mayor morbididad y mortalidad. de la relacin de bicarbonato a dixido de carbono (HC03/
Desplazamiento: un cambio repentino en los datos y la media. h 2c o 3).
Determinante antignico: una parte de una estructura de ant EDTA: cido etilendiaminotetraactico; anticoagulante usado en
geno que el sistema inmunitario reconoce como extraa. Este tubos con tapn para recoleccin de sangre lavanda y azul
dominio estructural tambin se conoce como epitopo. marino. Usados comnmente para estudios de hematologa
DHEA: vase Deshidroepiandrosterona. sangunea.
Diabetes mellitus: un grupo diverso de trastornos hiperglucmi- Efector directo: hormona que acta directamente en los tejidos
cos con diferentes causas y cuadros clnicos. perifricos.
Dilisis: un mtodo para separar macromolculas de un disol Efusin: acumulaciones anormales de lquido pleural o pericr
vente. dico.
Difusin: el movimiento de las molculas de una sustancia desde EHHS: eje hipotalmico-hipofisario tiroideo.
un lugar de mayor concentracin a uno de menor concentra Eje hipotalmico-hipofisario tiroideo (EHHT): el sistema endo
cin; como en la precipitacin de difusin en gel. crino que regula la produccin y secrecin de hormonas tiroi
Dilucin: una dilucin representa la relacin del material con deas.
centrado o stock al volumen final total de una solucin, y Electrocardiografa (ECG): prueba empleada para evaluar la
consiste en el volumen o peso del concentrado ms el volu estimulacin elctrica del corazn.
men del diluyente (las unidades de concentracin son las Electrodos: dispositivos de deteccin electrnicos para medir
mismas). P 0 2, PC02 y pH.
Dilucin serial: diluciones progresivas mltiples que van de solu Electrodos selectivos de iones: la semicelda o electrodo (indica
ciones ms concentradas a soluciones menos concentradas. dor) que corresponde a un ion especfico en solucin.
Disacrido: carbohidratos deparados o monosacridos unidos. Electroforesis: migracin de solutos o partculas con carga en un
Disfuncin erctil: incapacidad para tener o mantener una erec campo elctrico.
cin. Electrlito: iones capaces de llevar una carga elctrica.
Dislipidemias: enfermedades relacionadas con concentraciones Electroqumica: uso de celdas galvnicas o electrolticas (celdas
lipdicas anormales. electroqumicas) para anlisis qumico. Los ejemplos incluyen
Disolucin: un lquido que contiene una sustancia disuelta; la potenciometra, amperometra, coulometra y polarografla.
combinacin de soluto y disolvente. Elemento esencial: un elemento que es absolutamente necesario
Disolvente: lquido en el que se disuelve el soluto. para la vida. Deficiencia o ausencia del elemento causar una
Dispersin: la dispersin de datos; la mayor parte de las veces se alteracin grave de funcin, y en ltima instancia conducir
estima simplemente mediante el intervalo, la diferencia entre a la muerte.
las observaciones mayor y menor. La estadstica ms comn Eliminacin del frmaco: aclaracin de un frmaco del cuerpo
para describir la dispersin de grupos de observaciones sim mediante diversos mecanismos.
ples es la desviacin estndar, que por lo comn se representa Encefalopata: trastorno o disfuncin del cerebro.
mediante el smbolo s. Encocartitis infecciosa: inflamacin del revestimiento interno
Disposicin del frmaco: la forma en la que el cuerpo maneja un de las cmaras y vlvulas cardacas; causada por diversos
compuesto extrao, el frmaco. Los mecanismos que emplea microorganismos.
el cuerpo para manejar un frmaco se pueden explicar en tr Endgeno: triglicridos sintetizados en el hgado u otros tejidos.
minos de cuatro procesos generales: absorcin, distribucin, Energa de activacin: energa requerida para llevar las molculas
metabolismo y excrecin. en un mol de un compuesto a una determinada temperatura al
Distribucin del frmaco: la circulacin y difusin de un frma estado de transicin en el mximo de la barrera de energa.
co hacia los espacios intersticiales e intracelulares. Enfermedad de Addison: enfermedad a causa de una deficiencia
Diurticos: agentes que incrementan la secrecin de orina. en la secrecin de hormonas adrenocorticales.
698 GLOSARIO
Enfermedad de Grave: bocio txico difuso. La enfermedad de Estadstica descriptiva: estadsticas o valores (p. ej., media,
Grave ocurre seis veces ms en mujeres que en hombres. mediana, moda) utilizados para resumir caractersticas
Ocurre con frecuencia en la pubertad, durante el embarazo, importantes de un grupo de datos.
en la menopausia o despus de estrs grave. Estadstica inferencial: valores o estadsticas utilizadas para
Enfermedad de Hashimoto: tiroiditis autoinmunitaria crnica; comparar caractersticas de dos o ms grupos de datos.
es la causa ms comn de hipotiroidismo primario. Estado basal: temprano en la maana antes que el paciente haya
Enlace peptdico: enlace que combina el grupo carboxilo de un comido o tenido actividad fsica. Es un buen momento para
aminocido con el grupo amino de otro aminocido. tomar muestras de sangre debido a que el cuerpo est en
Enmiendas de mejoramiento del laboratorio clnico (CLIA): reposo y no se ha ingerido alimento durante la noche.
regulaciones suscritas en la Ley federal de 1988; estndares Estndar: una sustancia o disolucin en la que se determina la
obligatorios en las operaciones y examen de laboratorio clnico. concentracin. Los estndares se usan en la calibracin de un
Ensayo cintico: un tipo de prueba o procedimiento en el cual instrumento o mtodo.
hay una reaccin que procede a una velocidad particular. Estndar de laboratorio: una regla o criterio relacionado con el
Ensayo heterogneo: una tcnica (p. ej., EMIT) que no requiere laboratorio.
la separacin fsica del antgeno enlazado y libre. Estndar primario: una sustancia qumica altamente purificada
Ensayo heterogneo: una tcnica (p. ej., radioinmunoensayo) que se puede medir de modo directo para producir una sus
donde es necesario separar fsicamente el antgeno marcado o tancia de concentracin conocida exacta.
hapteno ligado a anticuerpo de un antgeno marcado o hapte Estndar secundario: una sustancia de menor pureza cuya con
no que permanece libre en solucin. centracin se determina por comparacin con un estndar
Envejecimiento: maduracin; prdida progresiva de adaptacin primario.
que da lugar a viabilidad y esperanza de vida reducidas e Esteatorrea: insuficiencia para digerir o absorber grasas.
incrementa la vulnerabilidad. Esteroides: clasificacin de hormonas; se sintetizan de colesterol
Enzima: protenas especficas sintetizadas biolgicamente que por medio de las mismas trayectorias bioqumicas iniciales.
catalizan reacciones bioqumicas sin alterar el punto de equi El resultado final depende de la maquinaria enzimtica que
librio de la reaccin o ser consumidas o experimentar cam predomina en un rgano particular.
bios en su composicin. Estriol: una hormona estrognica; el estriol no se produce en
Epitopo: componente de un antgeno que funciona como un cantidades significativas en la madre y es slo un reflejo de la
determinante antignico, lo que permite la fijacin de ciertos funcin fetoplacentaria. As, la medicin de estriol proporcio
anticuerpos. na informacin valiosa acerca del bienestar fetal.
Eritropoyetina: una hormona que estimula la produccin de eri Estrgeno: cualquiera del grupo de sustancias (hormonas) que
trocitos. introduce actividad estrognica; en particular las hormonas
Error aleatorio: un tipo de error analtico; el error aleatorio afec estrognicas, estradiol y estrona que produce el ovario.
ta la precisin, y es la base para la discordancia entre medicio Estrona: una hormona estrognica que se encuentra en la orina
nes repetidas. Los incrementos en el error aleatorio pueden de mujeres embarazadas.
ser causados por factores como fluctuaciones tcnicas y de Estructura cuaternaria: la configuracin de dos o ms cadenas de
temperatura. polipptido para formar una molculas protenica funcional.
Error analtico: error debido a instrumentos, procedimientos o Etapas: determinacin del perodo en el curso de una enfer
laboratoristas en el manejo de una muestra durante el anlisis. medad. El valor clnico principal de marcadores tumorales
Error preanaltico: errores introducidos durante la recoleccin y radica en secuenciar el tumor, monitorear respuestas terapu
transporte de muestras antes del anlisis. ticas, predecir resultados del paciente y detectar recurrencia
Error sistemtico: un tipo de error analtico que surge de facto de cncer.
res que contribuyen a una diferencia constante, ya sea posi Evaluacin nutricional: evaluacin de las necesidades metabli
tiva o negativa, y afecta de manera directa la estimacin de cas y dietticas (nutricionales) de un paciente.
la media. Los incrementos de error sistemtico pueden ser Exactitud: sin error; proximidad al valor verdadero.
causados por estndares o reactivos de mala calidad, instru Exceso de base (EB): la cantidad terica de cido o base titulable
mentacin con fallas, procedimientos mal escritos, etc. requerida para volver el pH del plasma a 7.40 a una PC 02 de
Espacio aninico: la diferencia entre aniones no medidos y 40 mmHg a 37C.
cationes no medidos. Exgeno: triglicridos obtenidos de fuentes dietticas.
Especificidad: en relacin con el control de calidad, la capacidad Extrauterino: fuera del tero o matriz.
de un mtodo analtico para cuantificar un analito en presen Exudado: acumulacin de lquido en una cavidad; tambin la
cia de otros en una mezcla como el suero. produccin de pus o suero. En comparacin con un transu-
Espectrofotometra: una tcnica analtica para medir la luz que dado, un exudado contiene ms clulas y protena. Los exu
absorbe una disolucin. Se usa un espectrofotmetro para dados demandan atencin inmediata.
medir la luz transmitida por una solucin a fin de determinar la
concentracin de la sustancia que absorbe luz en la disolucin. F
Espectrometra de masas en tndem: tcnica analtica que per
mite analizar grupos completos de compuestos similares en Factor intrnseco: una sustancia presente en el jugo gstrico que
volmenes de muestra muy pequeos sin preparacin de permite la absorcin de vitamina BI2.
muestras complejas. Falange: cualquiera de los huesos de los dedos o pies.
GLOSARIO 699
Frmaco bloqueador |3: frmaco que reduce la frecuencia cardiaca lo que significa que contienen grupos con cabeza hidroflica
o la fuerza de las contracciones, o ambas, de modo que se redu (amante del agua) y cadenas laterales de cidos grasos hidro-
ce la demanda de oxgeno del corazn al bloquear los recepto fllicos no polares (que tienen fobia al agua).
res p en el nodo sinusal y el miocardio (p. ej., propranolol). Fotometra de flama: una tcnica analtica que mide la longitud
Farmacocintica: caracterizacin matemtica de la disposicin de onda e intensidad de luz emitida de una solucin inflama
de un frmaco con el tiempo a fin de entender e interpretar da (muestra del paciente).
mejor las concentraciones sanguneas y ajustar de modo efi Fructosamina: cualquier protena srica glucada.
caz la cantidad de dosis e intervalo para mejores resultados FSH: vase Hormona estimuladora de folculos.
teraputicos con efectos txicos mnimos. Fuerza inica: concentracin o actividad de iones en una solu
Frmacos de abuso: frmacos usados de manera ilegal o inapro cin o disolucin amortiguadora.
piada; muchos frmacos tienen el potencial para abuso.
Frmacos vasodilatadores: frmacos que dilatan las arterias y
G
venas perifricas, de modo que se reduce el esfuerzo del cora
zn para bombear sangre. Gastrina: una hormona gastrointestinal. Es un pptido secretado
Fase folicular: la primera mitad del ciclo menstrual, cuando el por clulas G del antro (tercio inferior) del estmago. Se libe
efecto del estrgeno no tiene oposicin de la progesterona, ra en respuesta al contacto de alimento.
conocida tambin como fase proliferativa. Geriatra: rama de la medicina general que trata con problemas
Fase ltea: fase en el ciclo menstrual; durante esta fase el cuerpo clnicos teraputicos y prevenibles en los ancianos, as como
lteo sintetiza progesterona. Tambin fase secretoria. las consecuencias sociales de tal enfermedad.
Fase slida: en el radioinmunoensayo (RIE), partculas slidas o Gerontologa: estudio del proceso de envejecimiento en el cuer
tubos en los que se absorbe el anticuerpo. po humano.
FCU: vase Fenilcetonuria. Ginecomastia: aumento anormal de la glndula mamaria en el
Fenilcetonuria (FCU): cido fenilpirvico en la orina; una enfer varn.
medad recesiva hereditaria. Glndula endocrina: una glndula sin conductos que produce
Feocromocitoma: tumores de la mdula suprarrenal o ganglios una secrecin (hormona) en la sangre o linfa que la circula
simpticos que producen y liberan grandes cantidades de cin llevar a otras partes del cuerpo.
catecolaminas. Glndula exocrina: cualquier glndula que se excreta externa
Ferritina: una corteza protenica esfrica compuesta de 24 subu mente por un conducto. Las secreciones de glndulas exocri-
nidades con una masa molecular de 500 kDa. La protena nas no entran de modo directo a la circulacin.
puede unir hasta 4000 molculas de hierro, lo cual la con Glndulas paratiroideas: cuatro glndulas adyacentes a la gln
vierte en una gran fuente potencial de hierro. dula tiroidea. Dos de estas glndulas se encuentran en la
Filtracin: separacin de slidos de lquidos. porcin superior y dos cerca de la porcin inferior de la gln
Filtrado: el lquido que pasa por papel filtro se llama filtrado. dula tiroides. Las glndulas paratiroides producen hormona
Filtrado glomerular: filtrado plasmtico que contiene agua y paratiroidea, la cual controla el metabolismo del calcio y el
molculas pequeas pero carente de clulas y molculas gran fosfato.
des como la mayor parte de las protenas. Glndulas suprarrenales: rganos en pares localizados en el
Filtrado libre de protenas: filtrado claro de sangre total o plas polo superior de cada rin. Cada glndula consta de una
ma preparado mediante la adicin de cido u otros iones para corteza externa y una mdula interna, que tienen orgenes
remover protenas. embriolgicos diferentes, mecanismos de control distintos y
Filtro HEPA: filtro de aire particulado de alta eficiencia; un res productos diferentes.
pirador. Globulina transportadora de tiroxina (GTT): una protena que
F I0 2: la fraccin de oxgeno inspirado; puede ser tanto como se une a las hormonas tiroideas. El anlisis de GTT se usa
100% cuando se suministra oxgeno. para confirmar resultados de FT3 o FT4 o anormalidades en
Flebotoma: procedimiento para extraer sangre del cuerpo. la relacin de la prueba de TT4 y T3U; o como un marcador
Flebotomista: un individuo que obtiene o extrae muestras de posoperatorio de cncer de la tiroides.
sangre. Globulinas: grupo heterogneo de protenas que se pueden sepa
Flujo continuo: un enfoque al anlisis automatizado en el que rar por electroforesis en fracciones cq, a 2 y y.
los lquidos (reactivos, diluyentes y muestras) se bombean Glomrulo: vasos sanguneos pequeos en la neurona que se
por un sistema de tubera continua. Las muestras se introdu proyectan hacia el extremo circular del tbulo proximal y sir
cen de manera secuencial, una despus de otra por la misma ven como mecanismo de filtracin.
red. Una serie de burbujas de aire a intervalos regulares sirven Glomerulonefritis: inflamacin de los glomrulos del rin.
como medios de separacin y limpieza. Puede ser aguda, subaguda o crnica.
Flujo renal plasmtico: capacidad secretoria renal. Glucagon: una hormona de protena relacionada con el metabo
Fluorometra: tcnica analtica utilizada para medir fluorescen lismo de carbohidratos, grasa y protenas. Es sintetizado por
cia (luz emitida como resultado de energa absorbida). las clulas a del islote pancretico y est compuesto de 29
Forense: que pertenece a la ley o asuntos legales (p. ej., toxico- aminocidos.
logia y la ley). Glucocorticoide: una clasificacin general de hormonas sinte
Fosfolpidos: formados por la conjugacin de dos cidos gra tizadas en la zona fasciculada de la corteza suprarrenal. El
sos y un glicerol fosforilado. Los fosfolpidos son anfifticos, cortisol es la hormona glucocorticoide principal.
700 GLOSARIO
Glucgeno: un polisacrido similar al almidn; forma en la que Hibridacin in stu: una tcnica llevada a cabo en las clulas, teji
se almacenan los carbohidratos. do o cromosomas que se fijan en un portaobjetos de micros
Glucogenlisis: proceso mediante el cual el glucgeno se con copio. Despus que se desnaturaliza el DNA por calor, se
vierte de nuevo en glucosa 6-fosfato para entrar en la va glu- aade una sonda marcada e hbrida a la secuencia blanco des
coltica. pus que se enfra la placa. Por lo comn se usan productos
Gluclisis: hidrlisis de glucosa mediante una enzima en piru colorimtricos o fluorescentes.
vato o lactato; el proceso es anaerbico. Hibridacin: produccin de hbridos.
Gluconeognesis: la conversin de aminocidos por el hgado Hidrato: compuesto y su agua relacionada.
y otros tejidos especializados, como el rin, a sustratos que Hidrolasa: una enzima que cataliza la hidrlisis de enlaces de ter,
se pueden convertir en glucosa. La gluconeognesis tambin ster, anhdrido de cido, glucosilo, C-C, C-haluro o P-N.
abarca la conversin de glicerol, lactato y piruvato a glucosa. Higiene qumica: procedimientos y prcticas de trabajo para
Glucsidos cardacos: frmacos utilizados para incrementar la regular la exposicin del personal de laboratorio a sustancias
contractilidad del corazn y desacelerar los impulsos de con qumicas peligrosas.
duccin (p. ej., digoxina). Higroscpica: sustancias que captan agua al estar expuestas a
Gonadotropina corinica humana (hCG): una hormona de protel- condiciones atmosfricas.
na producida por la placenta y consiste en subunidades a y (3. Hiperaldosteronismo: produccin excesiva de aldosterona por
Gota: artritis relacionada con concentraciones incrementadas de la glndula suprarrenal. Podra ser primario (debido a una
cido rico en la sangre, que luego se deposita en las articula lesin suprarrenal) o secundario a anormalidades en el siste
ciones o tejidos causando hinchazn dolorosa. Es ms comn ma renina-angiotensina.
en hombres que en mujeres. Hiperandrogenemia: produccin excesiva de andrgenos en las
GTT: vase Globulina transportadora de tiroxina. mujeres.
Hipercalcemia: concentraciones elevadas de calcio en la sangre.
H Hipercloremia: concentraciones elevadas de cloro en la sangre.
Hipercoagulabilidad: capacidad incrementada (es decir, de la
Elapteno: una sustancia que se puede unir con un anticuerpo sangre) para coagular.
pero no puede iniciar una respuesta inmunitaria a menos que Hipercortisolismo: concentraciones incrementadas de cortisol.
se una a un portador. Hiperfosfatemia: concentraciones elevadas de fsforo en la sangre.
HbAj : vase Hemoglobina Aj . Hiperglucagonemia: produccin excesiva de glucagon. La hiper-
HC: hormona de crecimiento. glucagonemia debida a tumores se debe diferenciar de otras
hCG: vase Gonadotropina corinica humana. causas de glucagon incrementado, que incluyen diabetes,
HDL: vase Lipoprotenas de alta densidad. pancreatitis y traumatismo.
HDSM: hojas de datos de seguridad de materiales. Hiperglucmico: concentracin incrementada de azcar san
Hemodilisis: una tcnica o procedimiento que provee la fun gunea.
cin de los riones cuando uno o ambos estn daados. La Hiperinsulinemia: liberacin excesiva o inapropiada, o ambas,
sangre del paciente se hace circular por membranas para eli de insulina.
minar residuos. Hipermagnesemia: concentraciones altas de magnesio en la
Hemofiltracin: un procedimiento o tcnica de ultrafiltracin sangre.
(similar a la hemodilisis) utilizado para eliminar una acu Hipernatremia: concentraciones elevadas de sodio en la sangre.
mulacin en exceso de productos metablicos normales de Hiperoxemia: oxgeno incrementado en la sangre.
la sangre. Hiperparatiroidismo: condicin que resulta de la actividad
Hemoglobina Alc (HbAlc): la subfraccin ms grande de HbA incrementada de las glndulas paratiroideas.
normal en individuos diabticos y no diabticos. Se forma Hiperplasia suprarrenal congnita (HSC): resulta de la falta de
mediante la reaccin de la cadena (3 de HbA con glucosa. una enzima necesaria para la produccin de cortisol.
Refleja la concentracin de glucosa presente en el cuerpo Hiperpotasemia: concentraciones elevadas de potasio en la sangre.
sobre un tiempo prolongado relacionado con la vida media Hiperprolactinemia: secrecin de prolactina en exceso debido a
de 60 das de eritrocitos. disfuncin hipotalmica-hipofisaria. Por lo comn debido
Hemoglobinopata: un trastorno relacionado con la presencia de a neoplasma hipofisario.
hemoglobina anormal. Hiperproteinemia: concentracin total de protena en la sangre
Hemolisis: dao a las membranas de eritrocitos, que causa libe que es mayor que el intervalo de referencia.
racin de constituyentes celulares (p. ej., hemoglobina) en el Hipertensin: presin arterial elevada de forma anormal.
plasma sanguneo o suero. Hipertensin esencial: hipertensin sin ninguna causa conocida.
Heparina: un anticoagulante empleado en la recoleccin de sangre. Hipertensin secundaria: hipertensin con una fuente identi
Hepatitis: inflamacin del hgado; podra ser causada por un ficada.
virus, bacteria, parsitos, radiacin, frmacos, sustancias qu Hipertiroidismo: secrecin excesiva de las glndulas tiroideas.
micas o toxinas. Entre los virus que causan hepatitis estn los Hiperuricemia: concentraciones plasmticas de cido rico
tipos de hepatitis A, B, C, D (o A) y E, citomegalovirus, virus mayores que 7.0 mg/dl en varones y 6.0 mg/dl en mujeres.
de Epstein-Barr y probablemente otros. Hipervitaminosis: una condicin que resulta de la ingestin
Hepatoma: tumores malignos primarios del hgado; conocido excesiva de una vitamina.
tambin como carcinoma hepatocelular o hepatocarcinoma. Hipoaldosteronismo: concentracin reducida de aldosterona.
GLOSARIO 701
Hipocalcemia: concentraciones reducidas de calcio. Hormona de crecimiento (GH): un pptido compuesto de 191
Hipocloremia: concentraciones reducidas de cloro en la sangre. aminocidos. En contraste con la mayor parte de las hormo
Hipocortisolismo: concentraciones bajas o reducidas de cortisol. nas de protena, la GH no acta por cAMR La unin de GH a
Hipfisis anterior: adenohipfisis. La hipfisis se localiza en una su receptor de membrana conduce a la captacin de glucosa,
cavidad pequea en el hueso esplenoide del crneo llama transporte de aminocidos y liplisis. Secretada por la hip
da silla turca. Las hormonas trpicas de la hipfisis anterior fisis anterior.
estn mediadas por retroalimentacin negativa, que conlleva Hormona estimuladora de folculos (FSH): una hormona de
interaccin de las hormonas efectoras con el hipotlamo, as protena que secreta la hipfisis anterior.
como con las clulas de la hipfisis anterior. Hormona Uteinizante (LH): una hormona glucoprotenica
Hipfisis posterior: una porcin de la hipfisis; tambin la neu- secretada por la hipfisis anterior.
rohipfisis. Hormona liberadora de corticotropina (CRH): una hormona
Hipofosfatemia: concentraciones reducidas de fsforo en la sangre. que se libera del hipotlamo que acta en la hipfisis anterior
Hipoglucmico: concentracin reducida de azcar en la sangre. para incrementar la secrecin de ACTH.
Hipoglucorraquia: concentraciones reducidas de glucosa en el Hormona liberadora de tirotropina (TRH): un tripptido libera
LCR. do por el hipotlamo. Viaja a lo largo del tallo hipotalmico
Hipogonadismo: secrecin interna aberrante de las gnadas. a las clulas (3 de la hipfisis anterior, donde estimula la sn
Hipoinsulinemia: concentracin reducida de insulina. tesis y liberacin de tirotropina o la hormona estimulante del
Hipomagnesemia: concentraciones reducidas de magnesio en la tiroides (TSH).
sangre. Hormona paratiroidea (PTH): hormona sintetizada como pro
Hiponatremia: concentraciones reducidas de sodio en la sangre. hormona que contiene 115 aminocidos. La forma activa de
Hipoparatiroidismo: la mayor parte de las veces debido a la des la hormona contiene 84 aminocidos, y es secretada por las
truccin de las glndulas suprarrenales y, como tal, se relacio clulas principales de las glndulas paratiroides.
na con la deficiencia de glucocorticoides. HSC: vase Hiperplasia suprarrenal congnita.
Hipopotasemia: concentraciones reducidas de potasio. Hueso cortical: tipo de hueso que es muy fuerte en las dimen
Hipoproteinemia: concentracin de protena total en la sangre siones axial y de seccin transversal, muy adecuado para las
que est abajo del intervalo de referencia. necesidades de los huesos largos.
Hipotlamo: la porcin del cerebro localizada en las paredes y
el piso del tercer ventrculo. Est directamente arriba de la I
hipfisis y est conectado a la hipfisis posterior mediante el
tallo hipofisario. Ictericia: pigmentacin amarilla en la piel o esclertica (incluso
Hipotiroidismo: secrecin tiroidea reducida. tejidos, membranas y secreciones); un resultado de la con
Hipouricemia: concentraciones plasmticas de cido rico centracin excesiva de bilirrubina en la sangre.
menores que 2.0 mg/dl. IDR: vase Inmunodifusin radial.
Hipovitaminosis: una condicin que resulta de la carencia o Imagen nuclear cardiovascular: tcnica en la que se utilizan radio-
deficiencia de vitaminas en la dieta. nucletidos para evaluar el funcionamiento cardiovascular y la
Hipovolemia: volumen reducido de sangre. perfusin del miocardio y la viabilidad del msculo cardaco.
Hipoxemia: oxigenacin insuficiente o reducida de la sangre. ndice de DNA (ID): ploida de tumores; la cantidad de DNA
Hipoxia: condicin fisiolgica causada por una deficiencia de la medido en clulas cancergenas en relacin con sus clulas
cantidad de oxigeno que llega a los tejidos. normales.
Hirsutismo: crecimiento excesivo y anormal del pelo. ndice de tiroxina libre (FT4I): una media indirecta de la con
Histograma: representacin grfica de datos donde el nmero o centracin de hormona libre y se basa en la relacin de equili
frecuencia de cada resultado se coloca en el eje y y el valor del brio de T4 ligada y FT+. El FT4I se calcula mediante la frmula
resultado se grfica en el eje x. siguiente: FT+I = T+ X relacin de T3U.
Hojas de datos de seguridad de materiales (HDSM): una fuente ndice ictrico: una prueba que conlleva diluir suero con solu
importante de informacin de seguridad para empleados que cin salina hasta que visualmente corresponde al color de
pudieran usar materiales peligrosos en sus trabajos. una solucin a 0.01% de dicromato de potasio. El nmero de
Holoenzima: enzima que consiste en una porcin de protena y veces que se debe diluir el suero se llama ndice ictrico.
una porcin de cido no amino o grupo prosttico. Infancia: infante; perodo de vida donde el nio es incapaz de
Homeostasis: estado de equilibrio en el cuerpo mantenido caminar o alimentarse por s mismo.
mediante procesos dinmicos. Infarto de miocardio: tambin ataque al corazn; ocurre cuando
Hormona: una sustancia qumica que un rgano o tejido produ el flujo de sangre a un rea del msculo cardaco se bloquea
ce y secreta en la sangre, y tiene un efecto especfico en un en forma repentina, lo que da lugar a isquemia y muerte del
tejido blanco. tejido miocrdico.
Hormona adrenocorticotrpica (ACTH): una hormona peptdi- Infertilidad: incapacidad o capacidad disminuida para producir
ca que secreta la hipfisis anterior. Estimula la corteza de las descendencia.
glndulas suprarrenales para producir hormonas corticales Inhibidor glucoltico: sustancia que evita la hidrlisis de azcar.
suprarrenales. El fluoruro de sodio es un inhibidor glucoltico.
Hormona antidiurtica (ADH): vasopresina; producida por Inhibina: una hormona testicular que inhibe a la hormona lutei
hipotlamo. nizante.
702 GLOSARIO
Liquido amnitico: un lquido en el cual se suspende el feto; Un resultado de muestra podra ser empleado como evidencia
proporciona un medio de amortiguamiento para el feto y sir en una corte para probar causa de muerte, la inocencia o cul
ve como matriz para el influjo o eflujo de constituyentes. pabilidad de un individuo acusado o posiblemente abuso del
Lquido cefalorraqudeo (LCR): un ultrafiltrado selectivo del alcohol o drogas.
plasma que rodea al cerebro y la mdula espinal. Megavitamina: ingestin de una vitamina en exceso extremo de
Liquido extracelular: agua (lquido) fuera de la clula; se pue los requerimientos diarios.
de subdividir en lquido extracelular intravascular (plasma) Mejoramiento de la calidad: actividades y sistemas diseados
y liquido celular intersticial (LCI) que rodea las clulas en para evaluar y mejorar la atencin del paciente.
los tejidos. Menopausia: el cese permanente de la actividad menstrual.
Lquido intracelular (LIC): lquido dentro de las clulas. Metabolito: cualquier producto del metabolismo como en el
Liquido pericrdico: lquido que rodea y protege al corazn. La derivado de un frmaco.
frecuencia de muestreo pericrdico y anlisis de laboratorio Metaloenzima: oligoelemento relacionado con una enzima como
es raro. un componente o cofactor esencial.
Lquido peritoneal: un liquido claro a color paja que secretan las Metaloprotena: oligoelemento relacionado con una protena
clulas del peritoneo (cavidad abdominal). Sirve para hume como un componente o cofactor esencial.
decer las superficies de las visceras. Metanefrina: un producto metablico de adrenalina y noradre-
Lquido pleural: en esencia liquido intersticial de la circulacin nalina.
sistmica; est contenido en una membrana que rodea los Mtodo cintico de medicin: cuantificacin mediante la deter
pulmones. minacin de la velocidad a la ocurre una reaccin o se forma
Lquido seroso: lquido del cuerpo similar al suero sanguneo; un producto.
secretado en parte por las membranas serosas. Mtodo enzimtico acoplado: uso de varias reacciones enzim
Lquido sinovial: lquido que se forma por ultrafiltracin de ticas secuenciales que producen un producto que puede ser
plasma en la membrana sinovial de una articulacin. La detectado mediante un espectrofotmetro, y cuya concentra
membrana secreta tambin hacia el dializador una mucopro- cin est relacionada con el analito en cuestin.
tena rica en cido hialurnico, que causa la viscosidad del Mtodos anfotricos: utilizados para evaluar el estado nutricio
lquido sinovial. nal general de un paciente. Incluye prueba de pliegue cutneo
Lobulillo: forma la unidad estructural del hgado, que mide 1 a 2 y circunferencia del brazo y medidas de estatura y peso.
mm de dimetro. Se compone de cordones de clulas hepti Microalbuminuria: pequeas cantidades de albmina en la ori
cas (hepatocitos) que irradian desde una vena central. na; las concentraciones de microalbmina estn entre 20 y
Lp(a) : vase Lipoprotena (a). 300 mg/da.
LPH: vase Lactgeno placentario humano. Microglobuina P2: un pptido pequeo no glucosilado; usado
como un indicador de TFG.
M Microqumica: anlisis qumico clnico que requiere slo varios
microlitros de muestra.
Mantisa: la porcin del logaritmo a la derecha del punto decimal, Mineralocorticoide: un grupo de sustancias producidas por la
derivada del nmero. corteza suprarrenal. La aldosterona es el principal mineralo
Marasmo: una condicin causada por insuficiencia calrica sin corticoide (hormona reguladora de electrlitos) producido
insuficiencia de protenas, de modo que la concentracin de por la zona glomerular.
albmina srica permanece normal; hay prdida considerable Miocarditis: inflamacin del miocardio.
de peso corporal. Mioglobina: la mioglobina es una protena de heme encontrada
Marcador tumoral: sustancias biolgicas sintetizadas y liberadas slo en el msculo esqueltico y cardaco en los humanos.
por clulas cancerosas o sustancias producidas por el hus Se puede unir de forma reversible al oxgeno de una mane
ped en respuesta a tejido canceroso. Los marcadores tumo- ra similar a la molcula de hemoglobina, pero la mioglobina
rales pueden estar presentes en la circulacin, lquidos de es capaz de liberar oxgeno, excepto bajo tensin de oxgeno
cavidades corporales, membranas celulares o el citoplasma y muy baja.
ncleo de la clula. Mixedema: condicin resultante de hipofuncin de la tiroides.
Marcadores cardacos: prueba de diagnstico o analito que se El trmino se usa para describir la hinchazn peculiar sin
utiliza para evaluar la funcin cardaca. fvea de la piel.
Material criognico: material llevado a temperaturas bajas; por Molalidad: representa la cantidad de soluto por kilogramo de
ejemplo, los gases licuados. disolvente.
Material peligroso: un material con la posibilidad de causar Molaridad: nmero de moles por litro de solucin.
lesin o dao personal si se maneja. Monoclonal: que proviene de una lnea de clulas.
Material radiactivo: cualquier material capaz de emitir energa Monosacrido: un carbohidrato simple; no puede ser descom
radiante (rayos o partculas). puesto por hidrlisis. Como ejemplos se tiene glucosa, galac
Materiales de referencia estndar (MRE): establecidos por la tosa y fructosa.
autoridad. Se usan para comparacin o medicin. MRE: vase Materiales de referencia estndar.
Medial: en la mitad. MTF: vase Monitoreo teraputico de frmacos.
Medicina forense: conocimiento o resultados mdicos que apli Muestra aleatoria de orina: una muestra de orina en la cual no
can a cuestiones legales que afectan a la vida o la propiedad. son importantes el tiempo y el volumen de recoleccin. La
704 GLOSARIO
primera miccin de la maana se requiere con frecuencia Normalidad: nmero equivalentes gramo por litro de disolu
porque es la ms concentrada; por lo comn se usa para el cin.
anlisis de orina rutinario (pH, glucosa, protena, densidad Normetanefrina: un metabolito de adrenalina.
relativa y osmolalidad). Northern blot: tcnica para deteccin de molculas de RNA o
Muestra de orina programada: muestras recolectadas a interva especies con secuencias definidas.
los especficos, como antes y despus de las comidas, o mues Nutricin parenteral total (NPT): un medio muy empleado de
tras que se recolectarn en perodos especficos. Por ejemplo, apoyo nutricional intenso para pacientes que estn desnutri
las muestras discretas recolectadas en un perodo se usan dos o en peligro de volverse desnutridos, debido a que son
para pruebas de tolerancia (p. ej., glucosa). incapaces de consumir los nutrimentos requeridos.
Muestras de ayuno: una muestra de sangre tomada despus que Nutricin parenteral: apoyo nutricional intenso para pacientes
el paciente no ha comido durante por lo menos 12 horas. que estn desnutridos, o en riesgo de volverse desnutridos,
Muestreo en tubo cerrado: una capacidad del instrumento para porque son incapaces de consumir los nutrientes requeri
retirar la muestra del paciente para anlisis desde el tubo de dos o tomar nutrientes por completo. La terapia de nutri
recoleccin primario al perforar el tapn. cin parenteral requiere administrar cantidades apropiadas
de disoluciones de carbohidratos, aminocidos y lpidos as
N como electrlitos, vitaminas, minerales y oligoelementos
para satisfacer los requerimientos calricos, protenicos y de
Nanofiltracin: tcnica de filtracin para eliminar materia particu nutrientes mientras se mantiene el equilibrio de agua y elec
lada, microorganismos y pirgenos o endotoxinas cualesquiera. trlitos.
Narctico: cualquier grupo de sustancias (frmaco) que produ
ce el grupo de sustancias opiceas; abarca no slo herona,
O
morfina y codeina, sino tambin varios compuestos sintti
cos como meperidina, metadona, propoxifeno, pentazocina y Oligoelemento: un elemento que aparece en sistemas biolgicos
otros. Todas tienen cierta posibilidad de adiccin. en concentraciones de mg/kg o menos (partes por milln).
NCCLS: National Committee fo r Clinical Laboratory Standards; Por lo comn, el requerimiento diario de esta clase de ele
una agencia que establece estndares de laboratorio. mento es de pocos miligramos al da.
Nefelometra: tcnica analtica que mide la cantidad de luz dis Oncogenes: segmentos de DNA virales que pueden transformar
persada por partculas (complejos inmunitarios) en una solu clulas normales en clulas malignas.
cin. Las mediciones se hacen a un ngulo de 5 a 90 respecto Opsonizacin: accin de opsoninas para facilitar la fagocitosis.
a un haz. OSHA: Occupational Safety and Health Act (Ley ocupacional de
NEM: vase Neoplasia endocrina mltiple. seguridad y salud); decretada por el congreso en 1970. El
Neonato: un recin nacido de hasta seis semanas de edad. objetivo de esta regulacin federal fue proveer a los emplea
Neoplasia endocrina mltiple (NEM): la presencia de varios dos (incluso el personal de laboratorio clnico) un ambiente
tumores o hiperplasias relacionados con diversos rganos de trabajo seguro.
endocrinos. Osmolalidad: propiedad fsica de una disolucin, basada en la
Neoplasma: un crecimiento nuevo y anormal de clulas o tejido; concentracin de solutos (expresada en milimoles) por kilo
tambin tumor. gramo de disolvente.
Neuroblastoma: tumores malignos de la mdula suprarrenal que Osmolaridad: concentracin de partculas osmticamente acti
ocurren en los nios. Producen catecolaminas, y en ocasiones vas en disolucin reportadas en miliosmoles por litro; no se
podran estar relacionadas con hipertensin. emplea de forma rutinaria.
Neurohipfisis: porcin posterior de la hipfisis. Osmmetro: instrumento de laboratorio empleado para medir
NFPA: National Fire Protection Association. osmolalidad o concentracin de un soluto por kilogramo de
Nictalopia: visin deficiente en luz tenue debido a deficiencia de disolvente.
vitamina A. Esta condicin se conoce tambin como ceguera Osteoblasto: clulas que construyen hueso cuando son acciona
nocturna. das mediante seales hormonales apropiadas.
Nitrgeno no protenico (NNP): compuesto que contiene nitr Osteoclasto: clulas que causan reabsorcin de hueso cuando
geno que permanece en una muestra de sangre despus de la son activadas por seales hormonales apropiadas.
eliminacin de constituyentes de protenas. Osteomalacia: condicin que resulta de una deficiencia de vita
NNP: vase Nitrgeno no protenico. mina D. La deficiencia de vitamina D causa que los huesos
Nomograma de Done: una grfica que aproxima la toxicidad de sean blandos y quebradizos. Es la forma de raquitismo en el
frmacos, dado el tiempo de ingestin y el nivel de frmaco adulto.
en la sangre. Osteoporosis: una enfermedad que conlleva la prdida gradual
Noradrenalina: una hormona (y catecolamina) producida por la de masa sea que da como resultado un esqueleto menos den
mdula suprarrenal. Como hormonas, tanto la noradrenalina so y dbil.
como la adrenalina sirven para movilizar depsitos de energa Otorrea: descarga del odo; tambin filtracin de LCR del odo.
y preparar al cuerpo para actividad muscular (incremento de Ovulacin: descarga peridica de un vulo del ovario.
la frecuencia cardaca y la presin arterial, mayor cantidad de Oxidado: prdida de electrones; combinado con oxgeno.
azcar en la sangre, etc.). Son secretadas en cantidades mayo Oxidorreductasa: una enzima que cataliza una oxidacin; reac
res con estrs (dolor, temor, etc.). cin de reduccin entre dos sustratos.
GLOSARIO 705
Oxihemoglobina fraccionaria (F 0 2Hb): es la relacin entre Pirrol: una estructura heterocclica o compuesto que es la base
la concentracin de oxihemoglobina y la concentracin de para sustancias como la hemoglobina.
hemoglobina total (ctHb). pK: el logaritmo negativo de la constante de ionizacin.
Oxitocina: una hormona producida en el hipotlamo. Estimula Placa de qumica seca: una tecnologa de pelcula en varias capas
la contraccin del tero grvido a trmino y tambin produce (sustancias qumicas secas) que utiliza la serie Vitros de ana
la contraccin de clulas mioepiteliales en la mama, lo cual lizadores automatizados. Todos los reactivos necesarios para
causa la eyeccin de leche. una prueba particular estn contenidos en la placa.
Placenta: una estructura en el tero por la cual se nutre el feto.
P La placenta sintetiza y secreta diversas hormonas protefni-
cas, asi como los esteroides estrgeno y progesterona. La eva
P50: representa la presin parcial de oxgeno a la que la saturacin de luacin del suero materno y la concentracin en la orina de
oxgeno de hemoglobina (S02) es 50%. La P50 es una medida de estas hormonas podra ser valiosa no slo para diagnosticar el
las caractersticas de unin de 0 2Hb e identifica la posicin de la embarazo sino tambin para monitorear el desarrollo placen-
curva de disociacin oxgeno-hemoglobina a media saturacin. tario y el bienestar fetal.
Pancreatitis: inflamacin del pncreas causada en ltima instan Plasma: porcin lquida de la sangre que contiene factores de
cia por autodigestin del pncreas como resultado de reflujo coagulacin.
de bilis o contenido duodenal hacia el conducto pancretico. Pliegue del codo: rea del antebrazo en la curvatura del codo; se
Panhipopituitarismo: una condicin que resulta de las deficien utiliza por lo comn para venipuncin.
cias hormonales hipofisarias. Estas hormonas se pierden en P 0 2: presin parcial del oxgeno.
un orden caracterstico, donde la hormona del crecimiento Policlonal: que surge de diferentes lneas de clulas.
y las gonadotropinas desaparecen primero, seguidas de TSH, Polidipsia: ingestin excesiva de H.,0 debido a sed crnica.
ACTH y prolactina. Polimorfismos de longitud del fragmento de restriccin (PLFR):
Paracentesis: aspiracin de lquido por la piel; como en la eli una tcnica para evaluar diferencias en las secuencias de DNA
minacin o aspiracin de lquidos pericrdicos, pleurales y genmico.
peritoneales. Polisacrido: carbohidratos complejos; los polisacricos son las
Paracrina: secrecin de una hormona de otra que no sea una molculas orgnicas ms abundantes en la naturaleza.
glndula endocrina. Porfinuria: cantidad incrementada de porfirinas en la orina.
Patgeno llevado en la sangre: cualquier agente infeccioso o Porfiria: trastornos que resultan de alteraciones en la sntesis de
patgeno transmisible por medio de la sangre o productos heme.
sanguneos. Porfirina: intermediarios qumicos en la sntesis de hemoglo
Patgeno transportado por el aire: cualquier agente infeccioso bina, mioglobina y otros pigmentos respiratorios llamados
transmisible mediante el aire, por ejemplo, tuberculosis. citocromos.
Patrn de deshidrogenasa de lactato descontrolado: situacin Porfiringenos: la forma reducida de las porfirinas.
en la que las concentraciones sricas de LD-1 se incrementan Posheptico: alteracin extraheptica en la excrecin de bili
hasta un punto donde estn presentes en mayor concentra rrubina. La ictericia posheptica resulta de la excrecin dete
cin que LD-2. riorada de bilirrubina causada por obstruccin mecnica del
PATT: vase Prealbmina transportadora de tiroxina. flujo de bilis hacia los intestinos. Esto podra ser debido a
P C 02: presin parcial del dixido de carbono. clculos biliares o a un tumor.
Peditrico: en relacin con el tratamiento de los nios. Posrenal: obstruccin en el flujo de orina del rin a la vejiga y
Pelagra: una condicin que resulta de una deficiencia de niacina. su excrecin.
Los signos iniciales de pelagra incluyen anorexia, cefaleas, Poszona: en las reacciones de inmunoprecipitacin, la concen
debilidad, irritabilidad, indigestin e insomnio. stos pro tracin de antgeno est en exceso y se reduce la unin cru
gresan a las clsicas cuatro letras D de la pelagra avanzada: zada.
dermatitis, diarrea, demencia y defuncin. Potencial redox: una medida de la capacidad de una solucin
Pepsina: un grupo de enzimas proteolticas relativamente dbi para aceptar o donar electrones.
les, con pH ptimo de alrededor de 1.6 a 3.6, que catalizan a Proyeccin de Fisher: modelo que se puede usar para represen
las protenas nativas excepto el moco. tar carbohidratos. La proyeccin de Fisher de un carbohidrato
Pptidos: compuestos formados por la divisin de peptonas, que tiene al aldehido o cetona en la parte superior del dibujo. Los
contienen dos o ms aminocidos. Las hormonas peptdicas carbonos se numeran comenzando en el extremo aldehido
incluyen insulina, glucagon, hormona paratiroidea, hormona o cetona, y el compuesto se puede representar como cadena
del crecimiento y prolactina. recta o en una forma cclica, hemiactica.
Pericarditis: inflamacin del pericardio. Prealbmina transportadora de tiroxina (PATT): protena de
Peso equivalente: igual al peso molecular de una sustancia divi transporte de tiroxina; tambin transtirretina (TTR).
dido entre su valencia. Precauciones estndar: normas que consideran infecciosos a la
PG: vase Prostaglandinas. sangre y otros lquidos corporales de los pacientes; incluyen
pH: representa el logaritmo negativo o inverso de la concentra lavado de manos, guantes, proteccijr para los ojos, etc.
cin de ion hidrgeno; -log[H+]. Precisin: la proximidad de resultados repetidos; expresada en
Pipeta: utensilio hecho de vidrio o plstico que se usa para trans forma cuantitativa como desviacin estndar o coeficiente de
ferir lquidos; pueden ser reutilizables o desechables. variacin.
706 GLOSARIO
Preheptico: antes del hgado. La ictericia preheptica resulta ma lactasa es esencial para la absorcin de lactosa del tubo
cuando est presente una cantidad excesiva de bilirrubina digestivo.
para que la metabolice el hgado, como en la anemia hemol Prueba en el lugar de atencin (PLEA): prueba analtica de
tica. Este tipo de ictericia se caracteriza por hiperbilirrubine- muestras del paciente llevada a cabo fuera del laboratorio fsi
mia no conjugada. co y en el lugar de atencin del paciente.
Prerrenal: anterior al plasma que llega al rin. Prueba F: prueba estadstica utilizada para comparar las caracte
Presin osmtica: presin que permite al disolvente fluir entre rsticas de dos o ms grupos de datos.
una membrana semipermeable para establecer un equilibrio Prueba T: se emplea para determinar si hay diferencia estadsti
entre compartimientos de osmolalidad diferente. camente importante entre las medias de dos grupos de datos.
Presin parcial: la presin que ejerce un gas en la atmsfera; Pruebas descartadas: listado de complejidad ms simple en las
igual a la presin arterial a una altitud particular multiplicada enmiendas de mejoramiento del laboratorio clnico (CLIA).
por el porcentaje apropiado de cada gas. Tiene que ver sobre todo con sistemas de prueba aprobados
Produccin de hormona ectpica: hormonas producidas por por la Food and Drug Administration para uso domstico. Los
clulas en sitios distintos a la glndula de la cual normalmen requerimientos son que no haya riesgo de dao razonable
te se derivan. para el paciente si la prueba se realiza de manera incorrecta.
Progesterona: una hormona esteroidea producida por el cuer La probabilidad de resultados errneos es insignificante; el
po lteo y la placenta. La progesterona sirve para preparar mtodo de prueba es simple y sin complicaciones, y est dis
el tero para el embarazo, y los lbulos de la mama para la ponible para uso en el hogar.
lactacin. PTH: vase Hormona paratiroidea.
Prohormona: un precursor de la hormona activa. Pubertad precoz: inicio de la pubertad (desarrollo sexual nor
Proinsulina: precursor de la insulina; se empaqueta hacia los mal) antes del tiempo esperado (por lo comn, 10 a 14 aos
grnulos secretorios, donde se descompone en cantidades de edad).
equimolares de insulina y un pptido C. Puncin cutnea: un sistema de recoleccin abierto. La sangre se
Prolactina: una hormona protenica cuya composicin de ami lleva a la superficie de la piel al aplicar presin en el sitio. Se
nocidos es similar a la de GH. Es producida por la glndula dejan caer gotas de muestra en un colector capilar de sangre (en
hipofisaria. En los humanos, al parecer funciona slo en la lugar de jalar la muestra por presin de vaco hacia el tubo). La
iniciacin y mantenimiento de la lactancia. muestra contiene tanto sangre venosa como arterial.
Propiedad coligativa: las propiedades de la presin osmtica, Punto isoelctrico (pl): el pH en el que la molcula no tiene
punto de congelacin, punto de ebullicin y vapor de pre cambio neto.
sin.
Prostaglandinas (PG): un grupo de cidos grasos no saturados Q
biolgicamente activos; metabolitos de cido araquidnico.
Quelador: causa la unin de un ion (p. ej., metal) y una sustan
Protena conjugada: compuesta de una protena (aminocidos) y
cia qumica con estructura de anillo.
una mitad de nonoprotena.
Quilomicrones: partculas grandes ricas en triglicridos.
Protena simple: compuesta slo de aminocidos. Quimioluminiscencia: luz producida como resultado de una
Proteinuria: protena en la orina. reaccin qumica. Las reacciones quimioluminiscentes ms
Protooncogenes: los genes celulares normales que desempe importantes son las reacciones de oxidacin del luminol,
an papeles esenciales en la diferenciacin y proliferacin steres de acridinio y dioxietanos, y se caracterizan por un
de clulas y posiblemente se pueden volver oncognicos. La incremento rpido en la intensidad de luz emitida seguido de
transformacin de protooncogenes en oncogenes puede ocu una disminucin gradual.
rrir mediante mutaciones de un solo punto, translocacin y
amplificacin.
R
Proyeccin de Haworth: representa glucosa en una forma cclica
que es ms representativa de la estructura real. Cuando se Rabdomilisis: destruccin de las clulas del msculo esquel
dibuja la glucosa en una proyeccin de Haworth, la forma de tico.
la d-glucopiranosa se representa mediante el grupo hidroxi Radical libre: una molcula muy radiactiva que contiene un
del carbono 1 orientado hacia abajo o abajo del plano del enlace abierto o mitad de un enlace; los radicales libres son
papel. dainos para el cuerpo (p. ej., OH-).
Prozona: en las reacciones de inmunoprecipitacin, la concen Radiologa cardaca: uso de rayos X para evaluar el tamao y la
tracin de anticuerpos est en exceso y disminuye el enlace posicin del corazn, etc.
cruzado. Raquitismo: la clsica enfermedad por deficiencia de vitamina D
Prueba de absorcin de d-xilosa: una tcnica analtica que eva en los nios. Podra tener origen metablico o nutricional.
la la capacidad de absorber d-xilosa; es valiosa para diferen RCP: vase Reaccin en cadena de la polimerasa.
ciar malabsorcin de etiologa intestinal de la de insuficiencia Reabsorcin: proceso de absorber de nuevo.
pancretica exocrina. Reabsorcin tubular: proceso en el que el movimiento de una
Prueba de competencia: confirmacin de la calidad del anlisis sustancia (p. ej., calcio) es de la luz tubular al plasma capilar
de laboratorio por medio de muestras desconocidas. tubular.
Prueba de tolerancia a la lactosa: cualquier ensayo para deter Reaccin en cadena de la ligasa: tcnica de amplificacin por
minar el contenido de lactasa en la mucosa intestinal. La enzi sonda que utiliza dos pares de sondas marcadas que son com
GLOSARIO 707
plementarias para dos secuencias cortas de DNA blanco muy Sangre venosa: sangre obtenida de una vena.
prximas. Saturacin de oxgeno: (S02) representa la relacin de oxgeno
Reaccin en cadena de la polimerasa (RCP): un proceso in vitro que est unido a la protena portadora, hemoglobina, en com
empleado para replicar regiones cortas especificas, ilimitadas, paracin con la cantidad total que podra enlazar la hemo
de DNA. globina.
Reaccin en cadena de la polimerasa-transcriptasa inversa: Saturacin de transferrina: porcentaje de molculas de trans
conversin de RNA a DNA mediante transcriptasa inversa; ferrina que tienen hierro enlazado. Una relacin de hierro
el DNA complementario (cDNA) se puede analizar entonces srico (hierro real en el suero) y transferrina srica o CEHT
mediante la RCR (cantidad potencial de hierro que puede ser enlazado). Tam
Reactividad cruzada: capacidad de un anticuerpo para reaccio bin porcentaje de saturacin.
nar con un antgeno que es similar en estructura al antgeno Secrecin tubular renal: proceso que transporta sustancias del
homlogo. plasma al filtrado tubular para excrecin en la orina.
Recambio seo: proceso acoplado que se lleva a cabo durante la Secrecin tubular: movimiento de sustancias del plasma capilar
vida en el hueso con formacin y resorcin sea. tubular a la luz tubular; tambin secrecin de algunos produc
Receptor: sustancia que ha ganado electrones. tos del metabolismo celular hacia el filtrado en la luz tubular.
Reducida: sustancia que ha ganado electrones. Secrecin: proceso en el cual las clulas de rganos glandulares
Regla de control: criterio para juzgar si un proceso analtico est producen sustancias a partir de la sangre.
fuera de control; criterios de deteccin de errores. Secretagogo: un agente que estimula o causa secrecin.
Relacin de lecitinas/esfingomielinas (relacin de L/E): una Secretina: la secretina es sintetizada por las clulas en el intesti
prueba clsica que evala la relacin de lecitinas a esfingo- no delgado en respuesta al contenido cido del estmago que
mielinas para determinar la madurez pulmonar fetal. llega al duodeno. Puede controlar la actividad de la gastrina
Relacin de NUS/creatinina: relacin de nitrgeno ureico en plas en el estmago, y causar la produccin de jugo pancretico
ma o suero (mg/dl) a creatinina plasmtica o srica (mg/dl). rico en bicarbonato alcalino y, por consiguiente, proteger de
Relacin de transporte de hormona tiroidea (RTHT): prueba dao el revestimiento del intestino.
utilizada para medir sitios de enlace disponibles de las pro Serotonina (5-OH triptamina): una amina derivada de la
tenas de transporte de tiroxina; tambin prueba de captacin hidroxilacin y descarboxilacin de triptfano. Es sintetizada
de T3. por clulas enterocromafines, que se localizan sobre todo en
Relacin dosis-respuesta: comparacin de la dosis de una sus el tubo digestivo y, en menor grado, en la mucosa bronquial,
tancia (es decir, frmaco o sustancia qumica) con sus posi tracto biliar y gnadas.
bles efectos patolgicos. La relacin dosis-respuesta implica SI: vase Sistema Internacional de unidades.
que habr un incremento en la respuesta txica con una dosis SIADH: sndrome de ADH inapropiado; resulta cuando se libera
cada vez mayor. ADH a pesar de la baja osmolalidad srica en relacin con un
Relacin L/E: vase Relacin de lecitinas/esfingomielinas. volumen sanguneo normal o incrementado.
Renina: enzima producida por los riones que acta en la angio- Silla turca: una cavidad pequea en el hueso esplenoide del cr
tensina para formar angiotensina I. neo; en esta cavidad se localiza la hipfisis.
Replicacin de secuencia autosostenida: mtodo de amplifica Sndrome carcinoide: sndrome producido por tumores carci-
cin que detecta RNA blanco, y tiene que ver con ciclos iso noides que secretan cantidades excesivas de serotonina.
trmicos continuos de transcripcin inversa. Sndrome de angustia respiratorio: una condicin que puede
Residuos clnicos: material que es infeccioso o fsicamente peli ocurrir en la transicin a aire como fuente de oxgeno al nacer
groso; incluye sangre, tejidos, lquidos, partes del cuerpo, si no est presente la cantidad apropiada y tipo de fosfolpido
material punzante, etc. (surfactante). Se denomina tambin enfermedad de la mem
Retinoides: derivados de la vitamina A. brana hialina debido a la membrana hialina encontrada en los
Riesgo mecnico: cualquier peligro potencial de equipo como pulmones afectados.
centrfugas, autoclaves y homogenizadores. Sndrome de Conn: adenoma suprarrenal que secreta aldosterona.
Rinorrea: descarga de la nariz; tambin filtracin de LCR hacia Sndrome de Cushing: sndrome resultante de la produccin
la nariz. excesiva de glucocorticoides en la corteza suprarrenal.
Robtica: automatizacin frontal para manejar una muestra Sndrome de Zollinger Ellison: un neoplasma que secreta gas-
por las etapas de procesamiento y cargar la muestra en el ana trina, localizado por lo regular en los islotes pancreticos,
lizador. relacionado con concentraciones de gastrina plasmtica
Rotor: un dispositivo redondo en algunos analizadores autom excepcionalmente altas. Las concentraciones de gastrina plas
ticos que sujeta tasas de muestra y es capaz de girar. mtica de ayuno por lo comn exceden de 1000 pg/ml y pue
RTHT: vase Relacin de transporte de hormona tiroidea. den alcanzar 400 000 pg/ml, en comparacin con el intervalo
normal de 50 a 150 pg/ml.
s Sndrome nefrtico: lesin glomerular; una permeabilidad incre
mentada de forma anormal de la membrana fundamental glo
Sangre arterial: sangre de las arterias. merular. Puede ser resultado de muchas causas diferentes.
Sangre capilar: sangre de diminutos vasos sanguneos. Sndromes coronarios agudos: un avance de las condiciones
Sangre total: sangre completa que contiene la porcin lquida patolgicas relacionadas con la cardiopata isqumica, que
(plasma) y elementos celulares. incluyen erosin y rotura de las placas de arterias corona
708 GLOSARIO
rias, activacin de las plaquetas y trombos. A este avance se ren. Ejemplos son cidos (actico, sulfrico, ntrico y clorh
le conoce como sndromes coronarios agudos, y varia desde drico) y bases (hidrxido de amonio, hidrxido de potasio e
angina inestable hasta necrosis insular extensa en infarto de hidrxido de sodio).
miocardio agudo. Sustancia qumica reactiva: sustancias que, bajo ciertas condi
Sinusoides: espacios entre los cordones de clulas hepticas; ciones, explotan o encienden de manera espontnea, o que
estn revestidos por clulas endoteliales y clulas de Kupffer. emiten calor y gases inflamables o explosivos.
Sistema autocrino: secreciones celulares que actan para afectar Sustancias delicuescentes: compuestos que absorben agua sufi
slo su propio desarrollo. ciente de la atmsfera para causar disolucin.
Sistema de recoleccin cerrado: un tipo de sistema de recolec
cin en el que la sangre se toma directamente de la vena de T
un paciente en un tubo provisto de un tapn; la muestra est
contenida por completo, as que reduce el riesgo de contami Talasemia: trastorno que conlleva un defecto en la tasa y canti
nantes externos a la muestra y reduce el riesgo de exposicin dad de produccin de hemoglobina.
de los colectores a la sangre; conocido tambin como sistema Tasa de filtracin glomerular (TFG): tasa a la que el glomrulo
de tubo evacuado. filtra el plasma, expresado en ml/minuto.
Sistema inmunitario: una serie compleja de sucesos en el cuer Tasa de filtracin glomerular estimada (TFGE): ecuacin que
po que protege al individuo de agentes dainos externos. La se emplea para predecir la tasa de filtracin glomerular, y se
supervivencia del individuo depende de un sistema que fun basa en creatinina srica, edad, tamao del cuerpo, gnero y
ciona de forma apropiada. raza, sin la necesidad de creatinina de orina.
Sistema inmunitario adaptativo: una de dos partes funcionales TDR: vase Tolerancia diettica recomendada
del sistema inmunitario; produce una reaccin especfica para Tendencia: un cambio gradual en los datos y la media.
cada agente infeccioso, luego erradica de modo normal a ese Teora de valor predictivo: en relacin con la sensibilidad, espe
agente y lo recuerda; as, evita que cause enfermedad poste cificidad y valor predictivo del diagnstico. El valor predicti
rior. Por ejemplo, la rubola y la difteria producen inmunidad vo de una prueba se puede expresar como una funcin de la
de por vida despus de una infeccin. sensibilidad, especificidad y prevalencia de enfermedad.
Sistema inmunitario innato: una de dos divisiones funcionales Terapia antiplaquetaria: terapia que destruye plaquetas.
del sistema inmunitario; es la primera lnea de defensa. Teratgeno: cualquier cosa que pudiera causar desarrollo anor
Sistema Internacional de unidades (SI): sistema de medicin mal de un embrin.
adoptado internacionalmente. Establecido en 1960 y es el Termistor: termmetro electrnico.
nico sistema empleado en muchos pases. Las unidades del Tetania: espasmos musculares irregulares.
sistema se conocen como unidades SI. Tetraedro del fuego: una pirmide tridimensional que represen
Sistema multiplicador de contracorriente: proceso que ocurre ta el elemento de fuego; antes el tringulo del fuego.
en el asa de Fenle, por lo cual se mantiene una alta osmolali Tetraloga de Fallot: una condicin congnita del corazn que
dad dentro del rin y se produce orina hipoosmolal. incluye defectos septales, estenosis de la arteria pulmonar, dex-
Solucin amortiguadora: una sustancia que reduce cualquier troposicin de la aorta e hipertrofia del ventrculo derecho.
cambio en la concentracin del ion hidrgeno; un cido o TFG: vase Tasa de filtracin glomerular.
base dbil y sal conjugada. Tirogiobulina: una protena que contiene yodo secretada por la
Solucin en por ciento: la cantidad de soluto por 100 unidades glndula tiroides.
totales de disolucin. Tiroides: una glndula que consiste en dos lbulos localizados en
Soluto: una sustancia que se disuelve en un lquido o disolvente. la parte inferior del cuello. Los lbulos estn conectados por
Sonda: en un analizador automatizado, un dispositivo mecnico una banda estrecha llamada istmo, y por lo comn son asim
que se sumerge en una taza de muestra y aspira una porcin tricas, con el lbulo derecho ms grande que el izquierdo.
del lquido. Tiroiditis: inflamacin de la glndula tiroides.
Sonda de DNA: un fragmento conocido de molcula de DNA Tiroiditis subaguda: uno de los esquemas de clasificacin ms
utilizado para unir o localizar una hebra de DNA desconoci simples de tiroiditis. Las condiciones suelen relacionarse con
da o comparable. El DNA del virus del papiloma humano ha una fase tirotxica cuando la hormona tiroidea descarga hacia
sido detectado en sondas de DNA. la circulacin, una fase tiroidea cuando la glndula tiroides se
Sondas de cido nucleico: uso de cidos nucleicos para investi repara a s misma y una fase eutiroidea una vez que se repara
gar cambios celulares; los cidos nucleicos almacenan toda la la glndula. Estas fases pueden durar semanas a meses.
informacin gentica y dirigen la sntesis de protenas espe Tirotoxicosis: un grupo de sndromes causados por concentra
cficas. ciones altas de hormonas tiroideas libres en la circulacin.
Sndrome de Sheehan: hipopituitarismo que surge de un infarto Tirotoxicosis significa que el paciente padece las consecuen
(necrosis) de la hipfisis. cias metablicas de cantidades excesivas de hormonas tiroi
Southern blot: una tcnica para detectar secuencias de DNA deas.
especficas por medio de una mezcla de molculas de DNA. Tirotropina (TSH): tirotropina, u hormona estimuladora de la
Suero: porcin lquida de la sangre sin factores de coagulacin. tiroides (TSH), es una glucoprotena que consiste en dos
Sustancia qumica corrosiva: sustancias qumicas perjudiciales subunidades, a y p, unidas mediante un enlace covalente. Es
para la piel u ojos por contacto directo o para los tejidos de liberada por la hipfisis anterior.
los tractos respiratorio y gastrointestinal si se inhalan o ingie Tiroxina (T4): hormona producida por la glndula tiroides.
GLOSARIO 709
Ttulo: la dilucin ms alta de suero que muestra una reaccin Ultraoligoelemento: presente en tejidos en concentraciones de mg/
positiva en presencia de antgeno (p. ej., precipitacin de kg o menores (partes por milln, ppm) y tiene requerimientos
complejo antgeno-anticuerpo). diarios extremadamente bajos (por lo comn, menos de 1 mg).
Tolerancia diettica recomendada (TDR): la cantidad de una Umbral renal: concentracin de plasma arriba de la cual una
vitamina que debe ingerir un individuo saludable para satis sustancia aparece en la orina.
facer las necesidades metablicas de rutina, y permitir las Unidad Internacional: UI, la cantidad de enzima que catalizar
variaciones biolgicas, mantener concentraciones sricas la reaccin de 1 pinol de sustrato por minuto bajo condicio
normales, evitar el agotamiento de los depsitos del cuerpo y, nes especficas de temperatura, pH, sustratos y activadores.
por lo tanto, conservar la funcin y salud normales. Unin protenica competitiva: tambin inmunoensayo compe
Toracentesis: eliminacin de lquido del espacio pleural median titivo. El antgeno marcado y sin marcar compite por sitios
te aguja y jeringa despus de la visualizacin por radiologa. de anticuerpo limitados. El antgeno marcado ligado al anti
Toxicologa: el estudio de venenos, sus acciones, deteccin y el cuerpo ser inversamente proporcional a la concentracin de
tratamiento de las condiciones que producen. antgeno.
Toxina qumica: una sustancia que es un veneno. Urea: compuesto sintetizado en el hgado a partir de amoniaco y
Transferasa: una enzima que cataliza la transferencia de un gru dixido de carbono, y excretado por la orina.
po distinto al hidrgeno de un sustrato a otro. Uremia o sndrome urmico: concentraciones muy altas de urea
Transferencia de energa de resonancia fluorescente (TERF): en la sangre acompaadas de insuficiencia renal.
transferencia no radiactiva de energa de una molcula dona Urobilingeno: producto incoloro o derivado de bilirrubina for
dora a una molcula aceptora. mado por la accin de bacterias.
Transporte activo: un mecanismo que requiere energa a fin de
mover iones por membranas celulares.
Trastorno autoinmunitario: enfermedad o trastorno en el que el
Valencia: masa de material que se puede combinar con o reem
cuerpo produce anticuerpos (respuesta inmunolgica) contra
plazar un mol de iones hidrgeno.
s mismo.
Variaciones analticas: mediciones no idnticas que tienen
Trasudado: lquido que pasa por una membrana; en compa
diversas causas, que incluyen variaciones del instrumento,
racin con el exudado tiene menos clulas y una densidad
reactivo y operador.
relativa menor. Los trasudados son secundarios a patologa
Vasopresina: una hormona secretada por el hipotlamo. Tiene
remota (no pleural) e indican que el tratamiento debe comen
que ver en la regulacin de la presin arterial.
zar en otra parte.
Veneno: cualquier sustancia que causa un efecto daino por
Trazador: istopo radiactivo utilizado para marcar una molcu
exposicin.
la; conocido tambin como identificador.
Venipuncin: puncin de una vena. Por ejemplo, para obtener
TRH: vase Hormona liberadora de tirotropina.
sangre para anlisis.
Triglicrido: consta de una molcula de glicerol con tres molculas
Va de Embden-Myerhof: serie de pasos relacionados con el
de cido graso unidas (de ordinario tres cidos grasos distin
metabolismo anaerobio de la glucosa, glucgeno o almidn
tos que incluyen molculas saturadas e insaturadas).
a cido lctico; medios principales para producir energa en
Triosa: un monosacrido que tiene tres carbonos.
el hombre.
Triyodotironina (T3): una hormona derivada de la glndula
Vigilancia de frmacos teraputicos (VFT): determinacin de
tiroides.
las concentraciones de frmaco en el suero a fin de producir
Troponina F protena globular; marcador especfico para enfer un efecto deseable.
medad cardaca.
Virilizacin: desarrollo de caractersticas sexuales masculinas en
Troponina T: pro tena globular asimtrica; marcador cardaco la mujer.
que permite el diagnstico oportuno y tardo de IAM. Vitmero: compuestos relacionados que se interconvierten en o
TSH: vase Tirotropina. sustituyen la forma funcional de la vitamina.
Tubo al vaco: tubo para recoleccin de muestra con un vaco. Vitamina: molculas orgnicas que requiere el cuerpo en canti
Tbulo distal: porcin del tbulo renal que va de la extremidad dades que van de microgramos a miligramos por da para el
ascendente del asa de Henle al tubo colector. mantenimiento de la integridad estructural y el metabolismo
Tbulo proximal: porcin del tbulo renal que comienza en la normal. Realizan diversas funciones en el cuerpo.
cpsula de Bowman y se extiende al asa de Henle. VLDL: vase Lipoprotenas de muy baja densidad.
Tbulos: tubos o canales que constituyen una parte del rin;
como en los tbulos contorneados.
Turbidimetrla: una tcnica analtica que mide la cantidad redu
cida de luz transmitida por una solucin como resultado de Western blot: tcnica de transferencia usada para analizar antge
la dispersin de luz mediante partculas. Las mediciones se nos de protena. Los antgenos se separan mediante electrofo
hacen a 180 respecto al haz incidente (luz no dispersada). resis, y se transfieren a un nuevo medio por absorcin o enlace
covalente y luego se detectan mediante una amplia variedad
u de sondas de anticuerpos. La sonda podra ser marcada con
una etiqueta radiactiva, una enzima que puede producir un
Ultrafiltracin: tcnica de filtracin para remover materia particu producto visual o una etiqueta fluorescente o quimiluminis-
lada, microorganismos y pirgenos o endotoxinas. cente, respectivamente. La deteccin se llevara a cabo con
710 GLOSARIO
Los nmeros de pginas en cursiva silico relacionado con lpidos en el plasma Acomodos moleculares, 160,164
denotan figuras; los que van seguidos de (ASAL-P), 614 ACP (Vase Fosfatasa de cido)
valproico, 581 Acreditacin, 35
una c, cuadros. vanililmandlico, 425, 426, 614 Acromegalia, 404-405, 526
cido -aminolevulnico (ALA) ACTH (Vase Hormona adrenocorticotrpica)
deficiencia de deshidratasa, 379-380 Activadores, 237, 241
A pruebas para, 382-383 Actividad de la renina plasmtica, 416, 417
cido nucleico, sondas, 160-164 Actividad plasmtica de la renina, 416, 417
Absorbancia (A)delta, 26
aplicaciones de, 164 Acumulaciones de clulas, 432
hemoglobina, 354
definicin, 161 Adenocarcinoma, 429
ley de Beer, 25, 92
diagnstico de porfirias, 383 Adenohipfisis (hipfisis anterior), 400
medicin de anlisis automatizado, 136-137
panorama de las, 160 Adenomas
por ciento de transmitancia, 682c-683c
propiedades qumicas de, 161 produccin de aldo, 417
Absorciometra de rayos X de energa dual
tcnicas de hibridacin, 161-164 productores de aldo (APA), 417
(DEXA), 471
amplificacin de la seal, 163-164 suprarrenales, 417-418
Absorcin
duplicacin de la sucesin automantenida, txicos, 453
cobre, 369
163 ADH (Vase Hormona antidiurtica)
energa, 91, 92
hibridacin in situ, 164 ADP (porfiria por deficiencia de deshidratasa de
frmacos, 571-572
Northern blot, 162 ALA), 379-380
fluorometra, 98
polimorfismo para la longitud del fragmento Adrenalina (EPI)
hierro, 366
de restriccin, 164 biosntesis de, 414, 424, 425
intestinal, 549, 550-551
reaccin en cadena de la ligasa, 163 degradacin de, 425
lpidos, 288
reaccin en cadena de la polimerasa, medicin de orina y plasma de, 425
ultravioleta, 205
162-163 regulacin de la glucosa, 267
Absortividad molar (e), 26, 92-93
reaccin en cadena de la transcriptasa Adsorcin en inmunoensayos, 155
AC (anhidrasa carbnica) isoenzima III, 510, 513c
polimerasa inversa, 163 Afresis de LDL, 295
AC 125, 612
resumen de, 162c Afinidad
AC 15-3, 613
sistema de la replicasa Q-beta, 163 anticuerpos, 146-147
AC 19-9, 613
Southern blot, 162,164 hemoglobina y oxgeno, 353
ACA (Analizador clnico automatizado) Star
cido rico, 227-230 AFP (Vase cq-Fetoprotena)
calibracin de, 139
anlisis de, 229-230 Agammaglobulinemia, 668
cromatografa de columna automatizada en, 135
cantidad necesaria de muestras, 230 Agente hiperglucmico, 267
estaciones de retardo en, 136
eliminacin del, 522 Agente hipoglucmico, 267
fotmetro en, 137
intervalos de referencia para, 230 Agentes casticos, 593
historia de, 125
pacientes peditricos, 663 Agentes oxidantes, 8
medicin y entrega muestra en, 132
propiedades bioqumicas del, 227-228 Agentes reductores, 8
mezclado en, 134-135
relacin con enfermedades, 228-229 carbohidratos como, 264-265
reactivos en, 132-133,134
sustancias que interfieren, 230 Agua
Acceso aleatorio, 125,126
cidos grasos aumento en la retencin del, 319
Accidentes, 45-46
anlisis de, 303 captacin excesiva de, 316, 319
ACE (antgeno carcinoembrionario), 611, 613
esencial, 627-628 dficit de, 316-317
Acetaminofeno, 481, 597-598
omega, 627-628 desequilibrio del, 319
Acetilcolinesterasa (AChE), 555, 596
qumica de, 283-284 desionizada, 5, 6
especfica del sistema nervioso central (AChE-
Acidosis destilada, 5, 6
SNC), 555
cetoacidosis, 271 electrlitos, 315-317
AChE-SNC (acetilcolinesterasa especfica del
definicin, 344 equilibrio del, 522, 660
sistema nervioso central), 555
en pacientes peditricos, 659 especificaciones del, 5-6
Acidemia, 185, 348
lctica, 336 filtracin de, 5-6
isovalrica, 184,185
respiratoria, 348, 349 grado reactivo, 5, 6
cido(s) (Vase tambin Equilibrio acidobase)
tubular renal, 530 hidratacin, 25-26
acetilsaliclico, 597
tubular renal proximal, 530 OI (osmosis inversa), 5, 6
aminoglucognicos, 180
Acidosis metablica osmolalidad, 315-316
ascrbico, 619, 626
causas de la, 349 osmosis inversa (OI), 5, 6
biliares, 477, 484
definicin, 348 tipos I, II, III, 5, 6
biliares en el suero, 484
exceso de bases en, 358 Aire de espacio muerto, 351
carbnico, 345, 358
hiperpotasemia, 324 ALA (Vase cido 6-aminolevulnico)
concentraciones de, 677c
nutricin parenteral total, 637 Alantona, 227, 228
definicin, 344
pacientes peditricos, 659 Albmina
desoxirribonucleico (Vase DNA)
Acidosis no respiratoria caractersticas de, 190c, 193-194
etilendiaminotetractico (EDTA), 27, 281
causas de, 349 enfermedad heptica, 485
excrecin de, 523
definicin, 348 evaluacin nutricional, 634
fenilpirvico, 183
exceso de bases en, 358 fraccionamiento de, 205-207
gstrico, 548-549
hiperpotasemia, 324 lquido cerebroespinal, 215, 562
homovanlico (AHV), 424, 613-614
nutricin parenteral total, 637 microalbuminuria, 213, 279, 525-526, 534
pantotnico, 626
pacientes peditricos, 659 modificada por isquemia (AMI), 510, 513c
pH de, 9, 344
Aciduria argininosuccnica, 186 pacientes peditricos, 663
retinoico, 620
Aclaramiento de la creatinina (ACr), 28, 224, relacin de A/G, 205
ribonucleico (RNA), 161, 191-192
524-525 Alcalemia, 323, 348
711
712 NDICE
Cromatografa de gases, (cont.) patrn de sacudidas, 249 requerimientos de hierro en, 366
determinaciones de etanol, 592 trastornos cardacos, 249, 505-506 vitaminas en, 459, 627
espectrometra de masas, 113, 115 valores de referencia del, 250 2,3-Difosfoglicerato (2,3-DPG), 353
gas-lquido, 111,112 Desintoxicacin, 480 Difusin, 315
gas-slido, 111 Desnaturalizacin de protenas, 188 Digestin, 549
Cromatografa lquida de alta resolucin (CLAR), Desnutricin, 628-632 (Vase tambin Valoracin Digoxina, 577-578
110-111 de la nutricin) 1,25-Dihidroxivitamina D (l,25(OH)2D), 458-460,
anlisis de cido rico, 230 definicin, 628 524, 621
anlisis de creatinina, 226-227 hipermetabolismo por estrs, 629-632 Dilantina, 580-581
bombas en, 110 pacientes en el hospital, 629 Diluciones, 23-25
columnas en, 110 programa para prevenir el riesgo de, 632 serie, 24-25
detectores en, 111 respuesta inflamatoria en la, 629 simples, 23-24
fase inversa, 110 riesgo de, 618, 628-632 Diluidor/despachadores, 13,14
inyectores de muestra en, 110-111 11-Desoxicortisol (11-DOC), 419 Dinamometra de prensin manual, 633
porfirinas, 383 Desoxihemoglobina (HHb), 352 Dnodos, 95
registradores en, 111 Despachadores, 13,14 Dinucletido de nicotinamida y adenina (Vase NAD)
Cromatograma, 111,112 Desplazamiento de Stokes, 98 Dixido de carbono (Vase tambin Bicarbonato)
Cromo, 365c, 371, 638 Desviacin absoluta media (DAM), 52 aplicaciones clnicas de, 326
Cromogranina A, 426, 428, 613 Desviacin de cloruros, 325, 345 contenido total de, 358
CRP (Vase Protena C reactiva) Desviacin de monfosfato de hexosa (HMP), determinacin de, 326-327
CTUH (Capacidad total de unin con el hierro), 265, 266 equilibrio acidobase, 345, 346, 348
368c, 369 Desviacin estndar intercambio de gas, 349-351
Cuantificacin beta, 302 definicin, 51,52 intervalos de referencia de, 326
Cubetas ndices, 81 medicin de, 356
analizadores automatizados, 129-130,131,134 media, 52 presin parcial de (PC02), 354, 356
espectrofotmetros, 94 recta de regresin, 55 regulacin de, 326
transparentes, 136-137 Desviacin promedio, 52 Dipptidos, 187, 188
Cubiertas de bioseguridad (gabinetes), 36, 38c 5'-Desyodinasa, 446-447 Diploide, 160
Cuerpo lteo, 433 Detectores Director de programa POCT, 169-170
Cuerpos laminares, 560 centelleo de cristales, 152 Disacridos, 264
Curvas caractersticas de operacin del receptor, 63, 64 conductividad trmica (CT), 113 Disbetalipoproteinemia familiar, 296
Curvas de calibracin, 93 cromatografa, 111, 113 Dislipidemias
Curvas de las caractersticas de operacin del ionizacin de flama, 113 arteriosclerosis, 293-294, 650
receptor (CCOR), 63, 64 PDA (arreglo de fotodiodos), 95, 96 definicin, 283
CV (coeficiente de variacin), 51-52 sistema de fotodiodos, 95, 96 elevacin de Lp(a), 296
DEXA (absorciometra de rayos X de energa hipercolesterolemia, 289, 294, 295
dual), 471 hiperlipoproteinemia combinada, 296
D Dextrinas, 256 hiperlipoproteinemias, 294-295
DHEA (dehidroepiandrosterona), 414, 423-424 hipertrigliceridemia, 295-296
DE50, 589 Diabetes hipoalfalipoproteinemia, 296, 298
Defectos del conducto neural, 555 idioptica tipo 1, 269 hipolipoproteinemia, 296
Defectos septales, 498-499 inspida (Di), 320, 409 Disnea, 497
ventriculares (DSV), 498-499 Diabetes juvenil de inicio en la madurez (DJIM), 270 Disoluciones, 6-8
Dehidroepiandrosterona (DHEA), 414, 423-424 fisiopatologa de, 271 amortiguadoras, 8
5-Dehidrotestosterona (5-DHT), 423 insuficiencia renal, 532-534 concentracin de, 7, 20-23
DELFIA (fluoroinmunoensayo de lantnido microalbmina, 213, 279, 525-526, 534 conductividad de, 8
mejorado por disociacin), 158 pacientes peditricos, 662 definicin, 7
Demostracin del usuario de precisin y exactitud, proteinuria en, 213, 525-526 densidad de, 22
68-69 tipo 1, 269, 271, 532, 662 densidad relativa de, 22
Densidad de soluciones, 22 tipo 2, 269-270, 271, 532, 662 diluciones, 23-25
Densidad relativa (DR), 22, 527 Diabetes mellitus, 268-273 molalidad de, 7
Densitometra de minerales seos, 471 ancianos, 647-648 molaridad de, 7, 21
Densitmetros, 106, 208, 209, 210 aterosclerosis, 502 normalidad de, 7, 21-22
Derrames clasificacin de, 268-269 pH de, 8
materiales biopeligrosos, 38 criterios de diagnstico para, 271-273 porcentaje, 7, 20-21
mercurio, 40 definicin, 268 porcentuales, 7, 20-21
productos qumicos, 41 dependiente de insulina (DMDI), 269, 271, potencial redox, 8
Desarrollo de los rganos en los nios, 656 532, 662 propiedades coligativas, 7
Desarrollo fisiolgico, 656 gestacional (DMG), 269, 270-271, 272-273 saturacin de, 7
Desarrollos matemticos (Vase Clculos) hallazgos de laboratorio en, 269 superenfriadas, 118-119
Descomposicin celular, 322, 324 idioptica tipo 1, 269 supersaturadas, 7
Desecadores y desecantes, 15-16 ndice L/S en, 559 unidades de conversin de, 22-23
desecantes y desecadores, 15-16 magnesio, 328 Disolventes, 7, 109-110
equipo de vidrio y de plstico, 9-15 no dependiente de insulina (DMNDI), 269-270, Disopiramida, 579
jeringas, 15 271, 532, 662 Dispersin, 51, 55
pipetas, 10-15 tipo 1, 269, 271, 532, 662 Distribucin de frmacos, 572, 575
termmetros, 9 tipo 2, 269-270, 271, 532, 662 Distribuciones gaussianas, 49-50, 51, 52
vasos, 1 0 ,11c, 15 Diagrama de Altman-Bland, 53 Distrofia
Desechos biopeligrosos, 45 Dilisis miotnica, 439-440
Desechos de hospitales, 45 enfermedad renal de etapa terminal, 535 muscular, 244, 246
Deshidratacin, 202, 649 insuficiencia renal aguda, 534-535 muscular de Duchenne, 244, 246
Deshidrogenasa de glucosa-6-fosfato (G-6-PD), tcnica de separacin, 18-19, 135 Diurticos, 513
258-259, 274 Dilisis peritoneal, 534, 535 tiacida, 465,469
Deshidrogenasa de lactato (LD), 248-250 ambulatoria continua (DPAC), 534 DMDI (diabetes mellitus independiente de insulina),
determinacin de la, 250 cclica continua, 534 269, 271, 532, 662
fuentes de error en el, 250 Dicotoma adaptativa nutricionalmente dependiente, DMNDI (diabetes mellitus no dependiente de
fuentes tisulares del, 248 628, 630 insulina), 269-270, 271, 532, 662
hepatopatas, 485 Dieta DNA (cido desoxirribonucleico) (Vase tambin
importancia diagnstica del, 248-250 cardiopata, 291, 292, 511 Sondas de cido nucleico)
isoenzimas del, 248-250, 506 requerimientos de cinc en, 370 anlisis de hemoglobinopatas, 393
lquido cefalorraqudeo, 561 requerimientos de cobre en, 369 anlisis de talasemias, 393
NDICE 717
anlisis mediante citometra de flujo, 160 sodio, 320-322 fosfatasa alcalina en, 252
deteccin para fenilcetonuria, 183 tipos de, 103-104 prueba del lquido amnitico en, 555-560
estudio para hepatitis B, 488 Electroendosmosis, 107 Embarque de materiales biopeligrosos, 39
ndice de DNA (ID), 160 Electroforesis, 105-107 Eminencia media, 400
qumica de, 161 acetato de celulosa, 106, 392 Emisin de energa, 91, 92
sntesis de protenas, 191 agar de citrato, 392 Emisin gamma, 152
Documentacin para PLDA, 174, 175 anlisis de lipoprotenas, 300 Empleados y empleadores, 35
Dopamina, 405,406 bidimensional, 116 Emulsiones coloidales, 189
Ducto colector capilar (EC), 107, 142, 210-211 Encefalopata, 231
anatoma de, 518, 519 cinasa de creatina, 245, 247 Endocartitis infecciosa, 504-505
electrlitos, 340 deshidrogenasa de lactado, 249 Endosmosis, 107
fisiologa de, 521 deteccin y cuantificacin en, 106 Energa
Dplex, 161 electroendosmosis, 107 activacin, 238, 239
Duplicacin autosostenida de la secuencia (3SR), 163 enfoque isoelctrico, 107 metabolismo, en nios, 661-662
cinc, 370 fosfatasa alcalina, 252-253 requerimientos nutricionales para, 618
D-xilosa, 545, 550-551 fraccionamiento de protenas, 207-211 Enfermedad
alta resolucin, 210 almacenamiento de glucgeno, 274, 669-670
capilar, 210-211 autoinmunitaria de la tiroides, 449
E enfoque isoelctrico, 211 Bruton, 668
protena srica, 207-208, 209, 210 cardiovascular (ECV), 419 (Vase tambin
EAR (electroforesis de protenas de alta frontera mvil, 207 Cardiopata)
resolucin), 210 gel de poliacrilamida de dodecilsulfato de clulas falciformes, 385-387,391-392
EC (electroforesis capilar), 107,142, 210-211 sodio (EGPADSS), 159 cerebrovascular (ECV), 293
Ecuacin de Henderson-Hasselbalch, 8, 348 hemoglobina, 392 fibroqustica del pncreas (Vase Fibrosis
Ecuacin de Nernst, 103,356 inmunofijacin (EIF), 149, 150 qustica)
Edad libre, 207 Graves, 449, 451-453
aterosclerosis, 501 lquido cefalorraqudeo, 214 Gnther, 380
e intervalos de referencia, 57, 58 materiales de soporte para, 106 hemoglobina H, 389
gestacional, 557 orina, 525 hemoltica del recin nacido, 555-557
gestacional del feto, 557 procedimientos para, 105-106 membrana hialina, 557
niveles de testosterona, 440 protenas de alta resolucin (EAR), 210 molecular, 669-670
Edema, 498 protenas sricas (EPS), 207-208, 209, 210 molculas pequeas, 670-671
EDTA (cido etilendiaminotetractico), 27, 28c soluciones amortiguadoras para, 105-106 Munchausen por delegacin, 672
EEM (error estndar de la media), 52-53 tratamiento y aplicacin de la muestra, 106 orina con olor a jarabe de arce (EOOJM),
EFD (ensayo de fluorescencia directa), 159 zona, 105, 211 184-185
Efecto de gancho, 612 Electroforetograma, 105 Paget (ostetis deformante), 252
Efecto Wolff-Chaikoff, 454 Electroinmunoensayo, 150 renal de etapa terminal (ERET), 220, 532,
Efecto Zeeman, 98 Electrlitos, 315-340 535-536
Efectores directos, 402, 403 agua, 315-317 Tangier, 289, 298
Eficacia de diagnstico, 61-63 ancianos, 649 tiroides inducida por amiodarona, 453-454
Eficiencia, 62, 63 bicarbonato, 326-327 vascular perifrica (EVP), 293
Efusiones, 565 calcio, 331-334 von Gierke, 274
EGPADSS (Electroforesis en gel de poliacrilamida de cloruro, 324-326 Wilson, 196, 370
duodecilsulfato de sodio), 159 definicin, 315 Enfermedades genticas, 668-671
EIA (inmunoensayos de enzimas), 151, 152 espacio aninico, 338-339 diagnstico, 164, 555, 669-671
EID (ensayos de inmunofluorescencia fostato, 334-336 enfermedades de molculas grandes, 669-670
indirecta), 159 funcin renal, 339-340, 522-523 enfermedades de molculas pequeas, 670-671
EIE (enfoque isoelctrico), 107, 211 funciones de, 315 exploracin selectiva del recin nacido para,
Eje hipotalmico-hipofisario suprarrenal (EHHS), lactato, 336-338 669, 670
401, 448, 664-665 magnesio, 327-330 fibrosis qustica, 540, 544, 563-564, 669
Ejercicio nutricin parenteral total, 637, 638 Enfoque isoelctrico (EIE), 107, 211
ancianos, 652 pacientes peditricos, 660 Enlaces, 147,187
enfermedad cardaca, 502, 511 potasio, 322-324 colorante, 205, 206-207
regulacin de potasio, 322 sodio, 317-322 peptdicos, 187
Electrodispersin (ED), 111 sudor, 544, 563, 564 Enmiendas de mejoramiento del laboratorio clnico
Electrodo(s) Electroqumica 101-105 de 1988 (CLIA 88)
amoniaco, 231 celdas galvnicas y electrolticas en, 101 lmites de error permisibles, 68
analizadores de gases sanguneos, 354-355 clorurmetros voltamtricos en, 105 prueba automatizada, 126
Clarke, 354-355 electrodos de enzima en, 104-105 pruebas en el lugar de atencin, 169
detectores de gas, 104 electrodos de pH, 102-104 Enolasa especfica de las neuronas (NSE), 614
enzimas, 104-105 electrodos detectores de gas, 104 Ensayo de inhibicin bacteriana de Guthrie
indicadores, 102 electrodos selectivos de iones en, 102 enfermedad de la orina de jarabe de arce, 184
PC02, 104 semiceldas en, 101, 102c fenilcetonuria, 182
pH, 102-104, 356 voltametra de decapado andico, 105 homocistinuria, 185
P02, 104 Eliminacin de desechos, 44-45 Ensayo de inmunoconcentracin (ICON), 158
referencia, 102 Eliminacin de frmacos Ensayos
selectivos de iones, 102-105 aclaramiento metablico en, 574-575 captura de antgenos, 155
selectivos de microiones, 120 aclaramiento renal en, 575 cinticos, 242-243
sensores de macro y microelectrodo, 356-357 constante de, 572-574 competitivos, 151, 153-154
Severinghaus, 356 primer orden, 572, 573 DNA ramificado, 164
transcutneos, 355 tasa de, 572-574, 575 duplicados, 360-361
Electrodos selectivos de iones (ESI), 102-105 Eliminacin de materiales peligrosos, 44-45 fluorescencia directa (EFD), 159
amoniaco, 231 Eliminacin de primer orden, 572, 573 inmunofluorescencia, 159
analizadores automatizados, 125 ELISA (anlisis de inmunoabsorcin ligado a inmunofluorescencia indirecta (IFA), 159
calcio, 104, 334, 335 enzimas), 156 inmunomtricos, 154-155
cloro, 105, 325 Elucin de gradiente, 111,112 monitoreo continuo, 242-243
C 02 total 326 Elucin isocrtica, 111,112 Ensayos enzimticos acoplados
detectores de gas, 104 Embarazo cido rico, 229-230
electrodos de pH, 102-104 diabetes mellitus gestacional, 269, 270-271, amilasa, 257
enzima, 104-105 272-273 creatinina, 226
potasio, 324 fetoprotena alfa en, 190c, 195, 555 NAD/NADH en, 242
718 NDICE
Hipotiroidismo, (cont.) Hormona del crecimiento (GH), 402-405 IITMP (Inmunoensayo de inhibicin turbidimtrico
pacientes peditricos, 664-665 acciones de, 403-404 mejorado por partculas, 156
primario, 664-665 deficiencia de, 405, 665-666 IMA (Vase Infarto del miocardio)
secundario, 664-665 exceso de (acromegalia), 404-405, 526 Imgenes suprarrenales, 417-418
sntomas, 450 modificadores de secrecin de, 403 Immunodeficiencias, 668
subdnico, 449 prueba para, 404 Imprecisin, 64-65
tratamiento de, 451 regulacin de glucosa, 267 Incidentaloma, 427, 429
Hipouricemia, 229 secrecin de, 665 Incubacin, 135
Hipoventilacin, 349 Hormona estimuladora de folculos (FSH) ndice
Hipovitaminosis, 467, 619 control de testosterona, 437 altura, 632
Hipovolemia, 317 ovulacin, 433 cintura-cadera, 648
Hipoxemia, 349 pacientes peditricos, 666 estabilidad de espuma (IEE), 558
Hipoxia, 336, 337 secrecin de, 401 ictrico, 482
Hirsutismo, 432, 435-436 Hormona liberadora de corticotropina (CRH) IgG-albmina, 215, 562
Histogramas prueba de estimulacin de CRH, 421-422 L/S, 558, 559-560, 659
frecuencia, 49, 50, 52, 59, 60, 62 secrecin, 414, 415 lecitinas/esfingomielinas (L/S), 558, 559-560, 659
frecuencia acumulada, 50-51, 59 secrecin de ACTH, 418, 665 masa corporal (IMC), 618
Hitachi, analizadores Hormona paratiroidea (PTH) nitrgeno de la urea/creatinina, 221
estaciones de lavado en, 134 crecimiento seo, 663 nutricional inflamatorio pronstico, 633
fotmetro en, 136 equilibrio electroltico, 523 PA:PRA, 417
historia de, 125 hipercalcemia, 463-465 Inexactitud, 64, 65-66
mezclado en, 135 hipocalcemia, 466-467 Infantes (Vase Pacientes peditricos)
sondas de muestra en, 131,132 recombinante humana, 469 Infarto del miocardio (IMC), 503
soportes para muestras en, 129 regulacin del calcio, 331, 332, 333-334, aminotransferasa de aspartato, 250
HIV (virus de inmunodeficiencia humana), 159 460-461,523 cadenas ligeras de miosina, 507
Hojas de informacin sobre la seguridad del material regulacin del magnesio, 327, 523 cardiopata coronaria, 503
(HISM), 5, 39-40 Hs-CRP, 508, 513c cinasa de creatina, 244, 246, 506
Holoenzimas, 237 Hueso deshidrogenasa de lactato, 248, 249, 505-506
Homeostasis cortical, 462 diagnstico de, 505-511
calcio, 331, 332, 458-469, 523 metabolismo del calcio, 462, 663 marcadores de insuficiencia cardaca congestiva
envejecimiento, 646 pacientes peditricos, 663 en,509
pH, 344 trabecular, 462 mioglobina, 199-200, 394, 506-507
Homocistena, 185-186, 510, 513 vitamina D, 460, 663 protenas en la fase aguda, 507-508
Homocistinuria, 185-186, 529 troponinas, 201-202, 246, 507
estimulante de la tiroides (TSH) (Vase Infecciones
Tirotropina) l testculos, 440
hipofisiotrpicas, 402 tracto urinario, 531
Hormona(s) ICON (Ensayo de inmunoconcentracin), 158 Infecciones/obstrucciones de las vas urinarias, 531
ancianos, 645-647 Ictericia, 29, 478, 480 Infertilidad, 434, 436c
factores de crecimiento, 402-405, 665-666 heptica, 478 Inflamacin
funcin renal, 523-524 peditrica, 480, 482, 661 marcadores de, en IMA, 507-508
funcin testicular, 437 posterior a hepatitis, 478-479 reactivos de fase aguda, 208, 209, 210
funcin tiroidea, 446-448 tipos y causas de, 478-479, 480 Informacin de los resultados, 175
glndulas suprarrenales, 414-429 IDCG (inmunodeficiencia combinada grave), 668 Informacin sobre el paciente, promedio de la,
hipfisis, 400-409 IDE (ndices de desviacin estndar), 81 79-80
hipomagnesemia, 328 Identificacin Infundbulo, 400
hipotlamo, 402 muestras, 127,139 hipotlamo, 400
inhibidora de la hormona del crecimiento pacientes, 27 Inhibicin no competitiva, 241, 242
(GH-1H), 665 Idiotipos, 199 Inhibidores
islotes de Langerhans, 539 IDR (inmunodifusin radial), 149 competitivos, 241-242
liberadora de gonadotropina (GnRH), 401, 433, IECP (inmunoensayo enzimtico de captura de inter-a-tripsina (ITI), 190, 196
437, 666 micropartculas, 157 no competitivos, 241, 242
liberadora de la hormona del crecimiento IEE (ndice de estabilidad de espuma), 558 reacciones enzimticas, 241-242
(GHRH), 403, 665 IEO (inmunoensayo ptico) Inhibina, 437
liberadora de tirotropina (TRH), 401, 448, 664 IF (inmunoensayo fluorescente), 151c, 152 Inmunoblots, 158-159
luteinizante (LH), 401, 433, 437, 666 IFCP (Inmunoensayo por fluorescencia para Inmunocitoqumica, 159
metabolismo del calcio, 331, 458-461 concentracin de partculas, 157 Inmunocromatografa enzimtica, 158
ovulacin, 433 IFD (inmunofluorescencia directa), 159 Inmunodeficiencia combinada grave (IDCG), 668
pacientes peditricos, 664-666 IFI (inmunofluorescencia indirecta), 159 Inmunodifusin radial, 149
paratiroides, 460-461 IFNS (inmunoensayo por fluorescencia en el nivel Inmunoelectroforesis (IEF) 149-150
producidas por los ovarios, 432 del sustrato), 157 Inmunoensayo (s), 146-160
regulacin de la glucosa, 267-268 IFSF (Inmunoensayo de fase slida por anlisis de digoxina, 578
trpicas, 402, 403c fluorescencia), 157 anlisis de DNA por citometra de flujo, 160
Hormona adrenocorticotrpica (ACTH) IgA antgeno carcinoembrinico, 611
biosntesis de la hormona esteroidea, 414-415 caractersticas, 1901,199, 668c CK-MB, 247
cortisol, 418, 421-422, 665 pacientes peditricos, 668 consideraciones generales, 146-147,151
regulacin de la glucosa, 267 trastornos hepticos, 486 difusin doble, 148-149
ritmos diurnos, 402 IgD, 190c, 199, 668c difusin simple, 149
y vasopresina, 402 IgE, 190c, 199, 668 diseo de ensayo, 153-155
Hormona antidiurtica (ADH) IGF (factor de crecimiento insulnico), 403-404, donador de enzimas clonadas (CEDIA), 157
deficiencia de, 409 635, 665, 666 ejemplos de, 156-158
funcin de la hipfisis, 400, 408, 409 IgG enzimas, 243
funcin renal, 520, 521 caractersticas de, 190, 198, 199, 668 enzimtico (IME), 151, 152
mecanismo de la sed, 409, 522 lquido cefalorraqudeo, 214-215, 562-563 enzimtico de captura de micropartculas
osmolalidad, 315-316,409 pacientes peditricos, 668 (IECM), 157
produccin de, 400, 409 subclases, 668 etiquetado, 151-160
secrecin de ACTH, 418 trastornos hepticos, 486 etiquetas para, 151-153
Hormona de la tiroides IgM fase slida por fluorescencia (IFSF), 157
acciones de la, 448 caractersticas de, 190,198-199, 668 fluorescencia (FIA), 151c, 152
protena de unin con, 447-448 pacientes peditricos, 668 concentracin de partculas (IFCP), 157
sntesis de la, 446-447 trastornos hepticos, 486 nivel del sustrato (IFNS), 157
NDICE 723
heterogneos, 155 Insuficiencia primaria del ovario, 434 Inyectores para muestras, 110-111
homogneos, 155 Insuficiencia renal, 531-536 Ion hidrgeno (H+), 344-345 ( Vase tambin pH)
inhibicin turbidimtrico mejorado por aguda, 531-532, 534-535 Iontoforesis, 105, 544, 564
partculas (IITMP), 156 crnica, 532, 533, 533 nitrato de pilocarpina, 544, 564, 669
inmunoblots, 158-159 diabetes mellitus, 532-534 ISE (Vase Electrodos selectivos de iones)
inmunocitoqumica, 159 hipertensin, 534 Islotes de Langerhans, 267, 268, 539
inmunofenotipo, 159-160 metabolismo del calcio, 465, 468 Isoenzimas
inmunohistoqumica, 159 terminal, 532, 535-536 amilasa, 256-257
no competitivos, 154-155 tratamiento de, 534-536 anhidrasa carbnica, 510, 513
ptico (IEO), 158 uremia, 220 cinasa de creatina, 245-246, 506, 507
polarizacin por fluorescencia (FPIA), Insuficiencia suprarrenal, 418-419 definicin, 237
157-158 Insulina deshidrogenasa de lactato, 248-250, 506
precipitacin inmunitaria en gel, 147-150 descripcin, 267 fosfatasa alcalina, 252-253
rpidos, 158 diabetes mellitus, 271, 662 fosforilasa de glucgeno BB (GPBB), 510, 513
sin etiquetado, 147-151 hipocalemia, 323 III de anhidrasa carbnica, 510, 513c
tcnicas de separacin, 155-156 metabolismo de carbohidratos, marcadores de tumores, 609-610
transferencia de excitacin por fluorescencia 267, 268c Nagao, 253
(FETI), 157 prueba para, 279 Regan, 253
turbidimetra y nefelometra, 150-151 resistencia a, 647-648 Isoformas, 237
Inmunoensayos marcados, 151-153 Insulinoma, 273-274 Isomerasas, 237
anlisis de DNA mediante citometra de Interacciones de matrices, 305 Isopropanol, 591
flujo, 160 Interfase, 176 Isostenuria, 527
consideraciones generales de los, 151 Interleucinas, 636 Isquemia, cardaca, 501, 502-503, 650 (Vase
diseo del estudio, 153-155 Intervalo tambin Cardiopata)
ejemplos de, 156-158 analtico, 64 ITEF (inmunoensayo de transferencia de excitacin
inmunoblot, 158-159 dinmico, 64 por fluorescencia), 157
inmunocitoqumica, 159 lineal, 64 ITI (inhibidor de inter-a-tripsina), 190c, 196
inmunoensayo rpido, 158 osmolal, 317, 591
inmunofenotipos, 159-160 teraputico, 572
inmunohistoqumica, 159 Intervalos de referencia J
tcnicas de separacin en, 155-156 anlisis estadstico de, 58-61
Inmunofenotipo, 159-160 cido ascrbico, 626 Jeringas, 15, 133, 360
Inmunofluorescencia directa (IFD), 159 cido rico, 230 Joint Commission on Accreditation of Health care
Inmunofluorescencia indirecta (IIF), 159 cidos grasos, 627 Organzations 0CAHO), 35,126,169
Inmunogenicidad de protenas, 189, 191 aclaramiento de creatinina, 525
Inmungeno, 146 amilasa, 257
Inmunoglobulinas (Ig) aminotransferasa asprtica, 251 K
caractersticas de, 190c, 198-199 aminotransferasa de alanina, 251
lquido cefalorraqudeo, 214-215, 562-563 amoniaco, 232 Kfl (constante de disociacin), 8
monoclonales, 199, 208, 209 bilirrubina, 483, 590 Katai, 26
pacientes peditricos, 667-668 calcio, 334, 335c Kemcterus, 480
sistema inmunitario, 667, 668c cinasa de creatina, 248 Km(constante Michaelis-Menten), 239-240, 241
trastornos del hgado, 485 cloruro, 326c Kringles, 287
Inmunohistoqumica, 159 creatinina, 227 Kwashiorkor, 628, 630
Inmunoinhibicin, 247 deshidrogenasa de glucosa-6-fosfato, 259
Instrumentacin deshidrogenasa de lactato, 250
control de calidad de, 70 dixido de carbono, 327 L
cromatografa, 108-115 fosfatasa cida, 255
electroforesis, 105-107 fosfatasa alcalina, 253 Lactacin, 328, 406, 407
electroqumica, 101-105 fosfato, 336c Lactato, 336-338
espectrofotometra y fotometra, 91-101 gases de la sangre arterial, 348c determinacin del, 336-338
osmometra, 117-119 glutamiltransferasa gamma, 256 lquido cefalorraqudeo, 562
pruebas en el lugar de atencin, 119-120 hierro, 368c manejo de las muestras, 336-337
quimioluminiscencia, 100 lactato, 338c propiedades bioqumicas y fisiolgicas, 336, 337
Insuficiencia cardaca congestiva, 500-501, 502, 509 lipasa, 258 regulacin del, 336
ancianos, 650 lpidos en las heces, 544 usos clnicos del, 336
coronaria 501-503 lpidos, 290c valores de referencia del, 338
ancianos, 650 magnesio, 330c Lmparas
factores de riesgo para, 291c, 501-502 osmolalidad, 317c ctodo hueco, 97
insuficiencia cardaca en, 500-501 potasio, 324c espectrofotmetros, 93-94, 96
lpidos y lipoprotenas en, 283, 295, 296, protenas plasmticas, 190c espectrofotmetros de absorcin atmica, 97
298, 502 prueba de absorcin de D-xilosa, 551c fluormetros, 99
presentacin de, 502 pruebas en el lugar de atencin, 174 vapor de mercurio, 96
diagnstico de, 505-511 sodio, 3221 LCR (reaccin en cadena de la ligasa), 163
dieta, 291, 292c, 511 urea, 223 LCR (Vase Lquido cefalorraqudeo)
hipertensiva, 503-504, 511 urobilingeno, 484 LD (Vase Deshidrogenasa de lactato)
hipocalcemia, 466 vitamina B12, 625 LDL (Vase Lipoprotenas de baja densidad)
inefectiva, 504-505 definicin de, 57-58 Lesiones, 45-46
infartos de miocardio, 503 edad avanzada, 650-65 1 esfuerzo y desnutricin, 629-630
aminotransferasa de aspartato, 250 nios, 58 Leucemias, 159-160, 164
cinasa de creatina, 244, 246 recoleccin de informacin para, 58 Leucocitos, en la orina, 528
deshidrogenasa de lactato, 248, 249, 505-506 validacin de, 61 Ley de Beer (Beer-Lambert), 25-26, 91-93
mioglobina, 199-200, 394, 506-507 Intervalos/valores normales (Vase Intervalos de LH (Vase Hormona luteinizante)
troponinas, 201-202, 246, 507 referencia) Liasas, 237
insuficiencia cardaca congestiva, 500-501, Intestinos, 549-551 Licencia para PLA, 169
502, 509 absorcin de calcio en, 459-460, 461 Lidocana, 578
monitoreo, 511 fisiologa de, 549 Ligasas, 237
reumtica, 504 pruebas de, 550-551 Lmite de deteccin, 64
sntomas de, 497-498 Investigaciones en casos de violacin, 254 Linealidad, 96
tratamiento quirrgico de, 514 Inyectores de asa, 111 Linfocitos, 160, 667
tratamientos con frmacos de la, 511-513 Inyectores para cromatografa, 110-111 Linfocitos B, 667
Linfomas, 159-160, 164
724 NDICE
Lipasa (LPS), 257-258, 544-545 cardiopata coronaria, 283, 295, 298, 502 Macronutrimentos, 618
lipoprotena (LPL), 288, 296 definicin, 190c, 192,197, 283 Madurez sexual, 656, 666
Lpidos, 283-306 distribucin entre la poblacin, 290-291 Magnesio, 327-330
absorcin de, 288 estructura de, 285-287 determinacin de, 330
cidos grasos, 283-284, 303 funcin de, 283 fisiologa del, 327
anlisis de, 298-306 hiperlipoproteinemia, 294-295 hipermagnesemia, 329-330
exactitud, 304-305 hipolipoproteinemia, 296, 298 hipomagnesemia, 327-329
Cholesterol Reference Method Laboratory lipoprotena (a), 287, 296 hipopotasemia, 323
NetWork en, 305 muy baja densidad, 197, 283, 286c, 287 nutricin parenteral total, 637
analizadores compactos, 303 propiedades fisiolgicas y metabolismos de, reabsorpcin de los tbulos renales, 339, 523
objetivos del funcionamiento, 292c, 305 287-290 regulacin del, 327, 523
precisin en, 304 quilomicrones, 286-287 valores de referencia de, 330c
control de calidad, 305 trastornos relacionados con, 293-296, 298 Mamas
recoleccin de muestras, 305-306 Lquido(s), 555-566 cncer de, 608, 613
estandarizacin, 304-306 asctico, 566 desarrollo de, 434
apolipoprotenas, 285-286,303 clulas intersticiales, 315 Manejo de datos
arteriosclerosis, 293-294, 650 coleccin y procesamiento de, 28-29 anlisis automatizado, 138-139, 142
cardiopata coronaria, 283, 295, 296, 298, 502 extracelular (LEC), 315 automatizacin total de laboratorio, 142
colesterol, 284, 285, 298-299 extracelular intravascular, 315 pruebas en el lugar de atencin, 174, 176
HDL, 300-302 gstrico, 548-549 Manganeso, 365c, 372
LDL, 302 intracelular (LIC), 315 Mantenimiento preventivo, 70
distribucin de los, 290-291 lquido cefalorraqudeo, 561-563 Mantisa, 16
edad avanzada, 650 pancretico, 539, 542 Mapeo del espectro, 142
enfermedades relacionadas con los, 293-296, 298 paracentesis, 28, 29, 566 Marasmo, 628, 630
fosfolpidos, 284-285, 303 pericrdico, 565 Marbetes, cdigo de barras, 127, 129,130, 139
funcin heptica, 479 peritoneal, 565-566 Marcadores cardacos, 505-5 10
heces, 543-544 pleural, 565 albmina modificada por isquemia, 510, 513c
lipoprotenas, 285-287,300-302 sinovial, 564 caractersticas de, 505
metabolismo de los, 288-290, 479 sudor, 544, 563-564 diagnstico de cardiopata, 497, 506
propiedades qumicas de los, 283-285 Lquido amnitico (LA), 555-560 enzimas, 505-506
triglicridos, 284, 299-300 anlisis de homocistena, 185-186, 510, 513c
valores de referencia para, 290c defectos del tubo neural, 555 importancia de, 513
Lipiduria, 530 edad gestacional, 557 isoenzima BB de fosforilasa de glucgeno, 510, 513
Liplisis, 267 enfermedad hemoltica del recin nacido, isoenzima III de anhidrasa carbnica, 510, 513
Lipoprotein Measurement Working Group, 291 555-557 marcadores de inflamacin y coagulacin como,
Lipoprotena (a) (Lp(a)), 287, 296 enfermedades congnitas, 555 507-509, 513c
Lipoprotenas de alta densidad (HDL) madurez pulmonar fetal, 557-560 pptido natriurtico B, 509, 513c
anlisis de, 300-302 coleccin de, 555 protena cardaca de enlace a cidos grasos,
caractersticas de, 286, 287 procesamiento de, 28, 29 510, 513c
cardiopata y, 294 Lquido cefalorraqudeo (LCR) protenas, 506-507
electroforesis de protenas sricas, 197 anlisis de, 561-563 pruebas en el LDC para, 510-511
funcin de, 283 deshidrogenasa de lactato en, 561 troponinas, 200-201, 246, 507
va inversa de transporte de colesterol, 289-290 funciones de, 560-561 Marcadores luminescentes, 152-153
Lipoprotenas de baja densidad (LDL) glucosa en, 28-29, 561-562 Marcadores para inmunoensayos
afresis para extraer, 295 glutamina en, 486, 561 enzimas, 152
anlisis de, 302 procesamiento de, 28-29 fluorescentes, 152
caractersticas de, 286, 287 protenas en, 28-29, 214-215, 562-563 luminiscentes, 152-153
cardiopata, 294 recoleccin de, 561 radiactivos, 151-152
electroforesis de protenas sricas, 197 sangre y hemoglobina en, 561 resumen de, 151c
funcin de, 283 volumen de, 561 Marcadores radiactivos, 151-152
Lipoprotenas de muy baja densidad (VLDL) Lquidos serosos, 564-566 Marcadores tumoraies, 608-614
caractersticas de las, 286c, 287 lquido pericrdico, 565 cido homovanlico, 613-614
electroforesis de, 197 lquido peritoneal, 565-566 cido silico asociado a lpidos en el plasma, 614
funcin de las, 283 lquido pleural, 565 microglobulina beta-2, 612
Lipoprotenas, 283-306 (Vase tambin Lpidos) Litio, 465, 469, 581 antgeno carcinoembrionario, 613
alta densidad Lbulo del hgado, 476-477 antgeno de cncer 15-3, 613
anlisis de, 300-302 Logaritmo inverso, 19-20 antgeno de cncer 19-9, 613
caractersticas, 286, 287 Logaritmo negativo, 19-20 antgeno de cncer 125, 612
cardiopata y, 294 Logaritmos, 19-20 antgeno especfico de la prstata, 608, 614
electroforesis de las protenas sricas, 197 Longitud de onda, 91, 96 antgeno vanililmandlico, 614
funcin de, 283 Lp(a) (lipoprotena (a)), 287, 296 antgenos del carcinoma de clulas escamosas, 614
va de transporte de colesterol inversa, 289-290 LPL (lipoprotena lipasa), 288, 296 cncer de la tiroides, 449
anlisis de, 298-306, 300-303 LPS (lipasa), 257-258, 544-545 cromogranina A, 426, 428, 613
analizadores compactos en, 303 Luminol, 152 deteccin de cncer, 608
control de calidad en, 305 Luminmetros, 138 deteccin temprana, 609
Cholesterol Reference Method Laboratory Luteinizacin, 432 detectar recurrencia, 609
NetWork en, 305 Luz determinar el pronstico, 609
exactitud en, 304-305 fuentes de, 93-94, 97 efecto de gancho, 612
normalizacin en, 304-306 medicin en anlisis automticos, 136-137 enolasa especfica de las neuronas, 614
objetivos, 292c, 305 nefelometra, 100 enzimas, protena, hormonas, 609-610
precisin en, 304 parsita, 96 especificidad y sensibilidad de los, 605
recoleccin de muestras, 305-306 polarizada, 99, 157-158 especficos de clulas, 611
apolipoprotenas en, 285-286 ultravioleta, 383 fetoprotena alfa, 608, 612
baja densidad genes de la susceptibilidad, 608
afresis para extraer, 295 gonadatropina corinica humana, 613
anlisis de, 302 M monoclonales definidos, 611
caractersticas de, 286, 287 no especficos, 611
cardiopatas, 294 Macroamilasemia, 256 protenas carcinoembrionarias, 610-611
electroforesis en las protenas sricas, 197 Macro-CK, 247 receptor de estrgeno, 613
funcin de las, 283 Macroglobulina a-2, 190c, 196-197 receptor de progesterona, 614
caractersticas de las, 286c Macroglobulinemia de Waldenstrm, 199 recomendaciones al hacer los pedidos, 612
NDICE 725
NFPA (National Fire Protection Association), 36 definicin, 365 fosfatasa alcalina, 252
Niacina, 619c, 623 esenciales, 365c hipercalcemia, 463
Nictalopa, 620 fluoruro, 371-372 osteomalacia, 469-470, 524, 622
Nicturia, 498 funciones y anormalidades de los, 365c osteoporosis, 470-472
Nios ( Vase Pacientes peditricos) hierro, 365c, 366-369 raquitismo, 469-470, 618, 622
Nitratos, 512 manganeso, 365c, 372 Osteoporosis, 470-472, 646-647
Nitrito urinario, 527 molibdeno, 365c, 372-373 Otorrea, 562
Nitrgeno nutricin parenteral total, 637-638 Ovarios, 432-436
balance del, 192, 635-636 selenio, 365c, 373 caractersticas anatmicas de los, 432
metabolismo peditrico, 662-663 ultraoligoelementos, 365 ciclo menstrual, 432-433, 434
no protenico, 220-232 valores de referencia, 365c hipogonadismo hipogonadotrpico, 434-435
cido rico, 227-230, 522 Oligomenorrea, 434 hirsutismo, 432, 435-436
amoniaco, 231-232 Oligosacridos, 264 insuficiencia primaria de los ovarios, 434-435
creatina/creatinina, 223-227, 521 Oliguria, 527 ovulacin, 433
eliminacin del, 521-522 Olor de la orina, 526 produccin de hormonas, 432
urea, 220-223, 52c Opiceos, 601 pubertad en las mujeres, 434
protenas, 188 Opsonizacin, 198 sndrome del ovario poliqustico, 435
total, 203-204 Organismos infecciosos terapia de reemplazo de estrgeno, 436, 511
urea, 220 (Vase tambin Urea) deteccin mediante sondas de cidos Ovulacin, 433
ureico sanguneo (US), 220 (Vase nucleicos, 164 Oxidacin, 354
tambin Urea) orina, 527, 528 ultravioleta, 6
valoracin heptica, 485-486 prueba de inhibicin de Guthrie, 182,184, 185 Oxidasa de glucosa, 275-276
Nitrgeno no protenico, 220-232 Organofosfatos, 596 Oxidasa de monoamina (MAO), 425
cido rico, 227-230, 522 Orina (Vase tambin Anlisis de orina) Oxidorreductasas, 237, 238c, 258
amoniaco, 231-232 alcaptonuria, 184 Oxgeno
compuestos de importancia clnica, 220 anlisis de aminocidos en, 186 disociacin de hemoglobina, 353
creatina/creatinina, 223-227, 521. 524 apariencia de la, 526 fraccin inspirada, 351
eliminacin de, 521-522 bacterias en la, 527, 528, 531 intercambio de gases, 349-351
urea, 220-223, 521 bilirrubina en la, 528 presin parcial de, 350,351, 352-353, 354-355
Nivel mnimo del frmaco, 575 calcio en la, 334 transporte de, 351-352
NNP (Vase Nitrgeno no protenico) clulas en la, 528 valoracin del paciente, 352-353
Nodulos tiroideos, 454 cetonas en la, 278, 527 Oxihemoglobina (0 2Hb), 352, 353-354
Nomenclatura de enzimas, 237-238 cilindros en la, 528-529 Oxihemoglobina fraccionaria (porcentual)
Noradrenalina (NE), 424, 425 cistinuria, 186, 529 (F 02Hb), 352
Normalidad (N), 7, 21-22 cortisol en la, 420 Oximetra de pulso (Sp02), 352
Normalizacin cristales en la, 529 Oxitocina, 400, 409
anlisis de lpidos, 298, 304-306 densidad relativa de la, 527
pruebas en el lugar de atencin, 171-172 electroforesis de, 525
Normas enfermedad de la orina con olor a jarabe de arce, P
calibrar analizadores automatizados, 138-139 184-185
electrodo del pH, 358 frmacos en la, 598 Pacientes
laboratorio, 40 fenilcetonuria, 182-183 cuidado intensivo, 333
Light, 565 glucosa en la, 271, 527, 637 estudios en intervalos de referencia, 57-58
primarias, 5, 70 hemoglobina en la, 528 identificacin, 27
secundarias, 5, 70 homocistinuria, 185, 529 preparacin, 69
Normas de ejecucin lpidos en la, 530 Pacientes geritricos, 643-652
anlisis de lpidos, 292c, 305 metanefrina en la, 426 cambios bioqumicos y fisiolgicos en, 645-650
analitos comunes, 68c microalbmina en la, 213, 279, 525-526, 534 diabetes y resistencia a la insulina, 647-648
Northern blot, 162 olor de la, 526 electrlitos, 649
NPT (Vase Nutricin parenteral total) osmolalidad de la, 317, 320 enzimas, 650
NSE (enolasa especfica de neuronas), 614 pH de la, 527 funcin cardiovascular, 650
Nucleoprotenas, 192 porfirinas en la, 381 funcin endocrina, 645-647
5'-Nucleotidasa, 485 potasio en la, 417 funcin heptica en, 649
US (nitrgeno ureico sanguneo), 220 (Vase protenas en la, 211-214, 527 funcin pulmonar, 649
tambin Urea) recoleccin de, 28, 212, 524 funcin renal, 648-649
Nutricin parenteral total (NPT), 636-638 turbidez de, 526 lpidos, 650
electrlitos en la, 637 urobilingeno en la, 484, 528 cambios en analitos en, 646c
minerales en la, 637 volumen de la, 526-527 causas principales de muerte en, 646c
oligoelementos en la, 637-638 Orosomucoide, 190c, 195 enfermedades y trastornos con, 645c
pruebas en, 638 OSHA (Occupational Safety and Health Act), 5,35,45 impacto en el laboratorio, 643-644
pruebas en la orina, 637 Osmolalidad incremento de la poblacin de, 643
Nutrimentos esenciales, 619 definicin, 117,315 resultados de laboratorio, 650-652
determinacin de, 317 ejercicio y nutricin en, 652
determinaciones de etanol, 591 intervalos de referencia, 650-651
o hiponatremia, 319, 320 monitoreo de frmacos teraputicos, 651-652
importancia clnica de, 315-316 variables preanalticas en, 651
Obesidad, 648 muestras para determinar la, 317 Pacientes peditricos, 656-672
Objetivos de desempeo analtico, 305 orina, 320 balance hdrico en, 660-661
Obstruccin del tracto biliar, 252, 255 regulacin del potasio, 322 bilirrubina en, 480, 482,483c
Obstrucciones valor de referencia de, 317c calcio en, 333
conducto biliar, 252, 255 Osmolaridad, 315 cambios derivados del desarrollo, 656-657
vas urinarias, 531 Osmometra, 117-119, 317 circulacin en, 656
Occupational Safety and Health Act (OSHA), 5, 35, 45 Osmmetros de punto de congelamiento, colesterol en, 290-291, 295
Oftalmopata, 452 118-119,317 crecimiento de, 656, 663
25(OH)D3 (25-hidroxicolecalciferol), 622 Osteoblastos, 460 deficiencia de la hormona del crecimiento, 405
Oligoelementos, 365-373 Osteoclastos, 460 desarrollo de los rganos en los, 656
cinc, 365c, 370-371 Osteomalacia, 469-470, 524, 622 diabetes en, 662
cobalto, 365c, 371 Osteopatas eleccin del analizador para, 658
cobre, 365c, 369-370 cncer, 532 electrlitos en, 660-661
consideraciones generales de, 366 enfermedad de Paget, 252 enfermedad de la orina con olor a jarabe de arce
cromo, 365c, 371 fosfatasa cida, 254 en, 184-185
NDICE 727
enfermedad hemoltica del recin nacido, reacciones enzimticas, 240 deficiencia de deshidratasa de ALA (PDA), 379
555-557 soluciones amortiguadoras, 8, 344 eritropoytica (PE), 379, 381
enfermedades genticas en, 668-671 PHE (porfiria hepatoeritropoytica), 379, 381 hepatoeritropoytica (PHE), 379, 381
equilibrio cido-bsico en, 659 PIA (porfiria intermitente aguda), 379, 380 secundaria, 381
fenilcetonuria en, 182-183 PIE (factor inhibitorio de prolactina), 405 variegada (PV), 379
flebotoma en, 657 Piel en el sistema inmunitario, 667 Porfirinas, 378-383
funcin endocrina en, 664-666 Pielonefritis, 531 anlisis de, 381-383
funcin heptica en, 656, 661-663 Pipeta(s), 10-15 correlaciones en enfermedades con, 379-381
funcin renal en, 656, 660, 663 autodesage, 11 funcin en el cuerpo, 378
galactosemia en, 274 autolimpieza, 11 propiedades qumicas de, 378
gases en sangre en, 659 automticas, 13 sntesis de, 378-379
homocistinuria, 185 bulbos para, 12 Porfiringenos, 378
ictericia en, 480,482, 661 calibracin de, 14-15 Porfirinurias, 381
madres diabticas, 271 clasificacin de, 11c Positivos falsos (PF), 62, 63
madurez de los pulmones en los, 557-560 contener y entregar, 10-11 Positivos verdaderos (PV), 62, 63
madurez sexual en, 656, 666 contener, 10-11 Poszona, 148
metabolismo de los frmacos en, 671-672 descarga, 11 Potasio, 322-324
metabolismo del calcio y los huesos en, 663-664 despachadores, 13,14 colapso celular, 322
metabolismo del nitrgeno, 662-663 desplazamiento de aire, 13 comparacin de mtodos para, 52, 53
metabolismo energtico en, 661-662 desplazamiento positivo, 13 determinacin del, 324
nutricin parenteral total, 637 diluidor/despachadores, 13,14 ejercicio, 322
prematuros, 656-657 entregar, 10-11 excrecin urinaria de, 417
produccin de anticuerpos en, 667-668 graduadas, 11c, 12 hiperosmolalidad, 322
prueba del punto de atencin para, 658 limpieza, 10 hiperpotasemia, 322, 323-324, 638c
puntos preanalticos en, 657 medicin, 11c, 12 hipopotasemia, 322-323, 417, 638c
respiracin en, 656 medicin o graduacin, 11c, 12 nutricin parenteral total, 637
sistema inmunitario en, 666-668 micropipetas, 12,13 pacientes peditricos, 660-661
toxicidad del plomo, 594, 595 Mohr, 12 recoleccin de muestras determinacin de, 324
vitamina E en, 620 Ostwald-Folin, 12-13 regulacin del, 322, 339, 522
PAI (plasma acoplado inductivamente), 98 Pasteur, 13 valores de referencia de, 325c
Palpitaciones, 498 pipetas, 14-15 Potencial de xido-reduccin, 8
Pancreatitis, 540-54 1 posiciones correctas, 12 Potencial Redox, 8
Pancreocimina (Vase Colecistocinina) pruebas en el lugar de atencin, 174 Potenciales de reduccin estndar, 102c
Panencefalitis esclerosante (PEE), 562 recomendaciones para, 13-14 Prealbmina (transtirretina)
Panhipopituitarismo, 407, 408, 665 serolgicas, 12 lquido cefalorraqudeo, 562
Paquetes de prueba, reactivo en, 133,134 tcnica para, 11,12 protenas plasmticas, 190c, 193
Paraprotenas, 199 termmetros, 9 valoracin nutricional, 634-635
Parsitos, 528 tolerancia clase A, 11c Prealbmina de unin con tiroxina (TBPA), 448
Parche escrotal, 442 transferencia, 11c, 12-13 Precipitacin
Partcula de Dae, 486 transferir, 11,12-13 inmunitaria, 147-150
Patgenos llevados por el aire, 39 volumtricas, 12,13 contrainmunoelectroforesis, 149
Patgenos transportados por la sangre, 38-39 Piridoxina, 619c, 623 difusin doble (Ouchterlony), 148-149
PBG (porfobilingeno), 380, 382 Piuria, 531 difusin sencilla (inmunodifusin radial), 149
PC02 (presin parcial de dixido de carbono), pK, definicin, 344 electroforesis de inmunofijacin, 149-150
354, 356 p K ,8 inmunoelectroforesis, 149-150
PCR (reaccin en cadena de la polimerasa), Placas, 293-294 mtodos para, 148c
162-163,164 Placas de qumica seca tcnica del cohete, 150
PCT (porfiria cutnea tarda), 379, 380-381 calibracin de, 139 no inmunitaria, 155-156
PE (porfiria eritropoytica), 379, 381 espectrofotometra en, 137 qumica, 300, 301
PEC (porfirina eritropoytica congnita), 379, 380 historia de, 125 Precipitacin inmunitaria en gel, 147-150
Pelagra, 623 incubacin en, 135 contrainmunoelectroforesis, 149
Pepsina, 548 mezclado en, 134 difusin doble (Ouchterlony), 148-149
Pptido inhibitorio vasoactivo (VIP), 414 procesamiento de seales y manejo de difusin simple (inmunodifusin radial), 149
Pptido natriurtico datos en, 139 inmunoelectroforesis, 149-150
auricular (ANP), 414 reactivos en, 133 mtodos para, 148c
B (BNP), 509, 513c separacin en, 135 tcnica del cohete, 150
cerebral (BNP), 509, 513c Plaguicidas, 596-597 Precisin, 64-65,304
Percentiles, 51, 59 Plan qumico de higiene, 40 Pregnenolona, 414, 415
Prdidas de sodio, aumento de la, 318 Plasma, 27 Presin baromtrica (PB), 350
Pericarditis, 505 acoplado inductivamente (PAI), 98 Presin de vapor, 7
Peroxidas tiroidea (TPO), 446 Plomo, 594-595 Presin osmtica, 7
Persistencia del conducto arterioso, 499 Plumboporfiria, 379 Presin parcial de los gases, 350, 351
Persistencia hereditaria de hemoglobina fetal PMEP (prueba de microscopia ejecutada por el Presin parcial del oxgeno (P02), 350, 351,
(PHEF), 390 proveedor), 168 352-353, 354-355
Personal, 169-171, 173, 174 P02 (presin parcial de oxgeno), 350, 351, 352-353, Prevalencia de la enfermedad, 62, 63c
Peso 354-355 Prezona, 148
atmico, 684c-685c Polidipsia, 316,317,319 Primidona, 580
cardiopata, 511 Polimorfismo de la longitud del fragmento de Prismas, 94
equivalente, 7 restriccin, 164 PRL (Vase Prolactina)
nios, 656 Polipptidos, estructura de los, 187-188 Probabilidad de deteccin del error (Ped), 73, 74
prdida de, 623 Polisacridos, 264 Probabilidad de rechazo falso (Pfr), 73, 74
Pesos atmicos, 684c-685c Polticas en PLA, 173-174 Probetas graduadas, 10
pH (Vase tambin Gases sanguneos) Poliuria, 526 Procainamida, 578-579
arterial, valor de referencia para, 344 Porcentaje de pureza, 22 Procedimiento de Shewhart de varias reglas, 76, 77,
balance cido-bsico, 344-345, 348-349, 523 Porcentaje de saturacin de hierro, 367c, 368c, 369 78-79
conservacin de la homeostasis del, 344 Porcentaje de transmitancia (%T), 92, 93, 682c-683c Procedimiento Westgard de varias reglas, 73,
jugo gstrico, 672 Porcentaje real de oxihemoglobina (0 2Hb), 353-354 75-79, 80
medicin del, 354,356 Porfibilingeno (PBG), 380, 382 Procedimientos
orina, 527 Porfiria manuales para, 69
pacientes peditricos, 659 aguda intermitente (PAI), 379, 380 pruebas en el lugar de atencin, 173-174
plasma sanguneo, 344 cutnea tarda (PCT), 379, 380-381 Proceso de las muestras, 29
728 NDICE
Proceso de seales, 138-139 inmunogenicidad de, 189, 191 gases en la sangre, 175
Productos de la divisin de fibrina, 198 lquido cefalorraqudeo, 28-29, 214-215, 562-563 glucosa, 175
Productos finales de glucosilacin avanzada mielina bsica, 215, 563 hematologa, 176
(AGE), 648 mioglobina, 199-200, 394, 506-507, 525 licencia CLIA y reglamentos para, 169, 171c
Productos qumicos reactivos, 41 oligoclonales, 214, 563 negociacin contractual, 173
Proenzimas, 237 orina, 211-214 organizacin de, 173-174
Prueba de aprovechamiento plasma, 1901,193-199 pacientes peditricos, 658
anlisis de los gases de la sangre, 361 produccin heptica de, 479, 485 personal de apoyo para, 169-171
control de calidad externo, 80-81, 82 punto isoelctrico de, 189 procedimientos/polticas, 173-174
pruebas en el lugar de atencin, 174-175 relacionada con la hormona paratiroidea pruebas cardacas, 510-511
lmites de error en, 68 (PTHrP), 464-465 pruebas de eficacia, 174-175
Progesterona, 432 separacin en analizadores automatizados, 135 recertificacin para, 174
Programas para computadora, 139 simples, 192 seleccin de dispositivos/mtodos, 172-1 73
Prolactina (PRL), 405-407 sntesis de, 191-192 solicitudes de nuevas pruebas, 172
galactorrea idioptica, 407 solubilidad de, 189 tcnicas analticas para, 119-120
hiperprolactinemia, 406 Tamm-Horsfall, 213-214 validacin de, 173
prolactinoma, 406-407, 440 troponina, 200-201, 246, 507 PSA (Vase Antgeno especfico de la prstata)
secrecin de, 402 unin con el retinol (RBP), 635 PTH (Vase Hormona paratiroidea)
Prolactinoma, 406-407 unin con vitamina D, 196 Pubertad, 434, 438
Prooxidante, 368 unin para la tiroides, 447-448 Pulmones
Propiedades coligativas de soluciones, 7 valoracin nutricional, 633-636 edad avanzada, 649
Prostaglandinas (PG), 524 Proteinuria, 211-214 equilibrio cido-bsico, 345, 346, 348
Proteccin personal, 37-38, 41 electroforesis y, 525 madurez fetal de los, 557-560
Protena C reactiva (CRP) exceso, 213 presin parcial de los gases en, 351
caractersticas de, 190c, 198 glomerular, 212-213 Puncin de taln, 27, 657
enfermedad cardaca, 508, 513c importancia de las, 212-214 Puncin digital, 27, 657
evaluacin nutricional, 636 mtodos de anlisis para determinar, 211-212 Puncin lumbar, 561
inmunidad, 667 microalbuminuria, 213, 279, 525-526, 534 Punto de congelamiento, 7
Protenas plasmticas, 193-199 protena de Tamm-Horsfall, 213-214 Puntos isoelctricos (pl), 189
albmina, 193-194, 634 prueba para, 527 Prpura de bromocresol (PCB), 206-207
caractersticas de, 190c tubular, 213 PV' (valor predictivo de una prueba negativa), 62, 63
globulinas, 194-199 Proteoglucanos, 192 PV+ (valor predictivo de una prueba positiva), 62, 63
prealbmina (transtiretina), 193, 562, 634-635 Protemica, instrumentacin, 115-117
sistema amortiguador plasmtico, 345 electroforesis bidimensional, 116
valoracin nutricional, 633-636 espectrometra de masas MALDI-TOF, 116-117 Q
Protenas totales espectrometra de masas SELDI-TOF, 117,118
anlisis de, 204-205 Protooncogn Re, 464 Queladores, 368
absorcin ultravioleta, 205 Protoporfirina (PROTO), 378 Quemadores, trayectoria larga de premezcla, 97
mtodo de Biuret, 205 cinc (PPC), 381, 383 Quilomicrones, 286-287, 288-289
mtodo de Kjeldahl, 204 cinc de eritrocito (ZPP), 381, 383 Quimioluminiscencia
refractometra, 204 Proyecciones de Fisher, 263 anlisis automatizado, 138
unin con la tincin, 205 Proyecciones de Haworth, 263, 264 anlisis de nitrgeno, 204
anormalidades de, 202, 203c Prueba(s) inrnunoensayos, 151c, 152-153
lquido cefalorraqudeo, 214-215 absorcin de la D-xilosa, 545, 550-551 principios de, 100
orina, 211-214 descartadas, 169,170c Quimioterapia, 228
Protenas y reactivos de fase aguda especialistas, 638 Quinidina, 578
a-antitripsina, 190c, 194-195 F, 55, 56, 67
electroforesis de protenas, 210 Hoesch, 382
fibringeno, 190c, 198, 509, 513c inmunolgica para desnutricin, 632 R
inmunidad, 667 intolerancia al almidn, 545
protena reactiva C, 190c, 198, 636, 667 manchas, 598 Rabdomilisis, 525
Protena(s), 186-215 microscopia ejecutada por el proveedor, 168 Radiacin
amiloides, 202 moderadamente complejas, 169 electromagntica, 91
aminocidos en sntesis de, 181c molecular (Vase Sondas de cidos nucleicos) eliminacin de desechos, 45
anlisis de, 203-211 muy compleja, 169 no ionizante, 41-42
anfotricas, 188 orales de tolerancia a la glucosa (POTG), polticas de seguridad contra la, 41-42
anormalidades de, 202, 203 272, 277 Radicales libres, 645
balance del nitrgeno, 192 posprandiales, 276-277 Radioinmunoensayo (RIE), 151-152,158
carcinoembrionarias, 610-611 Schilling, 624 Raquitismo, 469-470, 618, 622
cardaca de enlace a cidos grasos (H-FABP), sensibilidad a la angiotensina (AST), 505 RBP (protena de unin con retinol), 635
510,513c solubilidad, 391-392 Reabsorcin
carga de, 188-189 supresin de clonidina, 428 cido rico, 227, 522
catabolismo de, 192 supresin de dexametasona, 421 definicin, 345
conjugadas, 192 t, 55-56, 67 tubular, 339, 520
contenido de nitrgeno en las, 188 tolerancia a la lactosa, 550 urea, 220, 521
definicin, 180 Watson-Schwartz, 382 Reaccin
dimensiones moleculares de las, 186 Pruebas en el lugar de atencin (PLA), 169-176 cadena de la ligasa (LCR), 163
enlace a IGF, 665 anlisis de lpidos, 303 cadena de la polimerasa (PCR), 162-163,164
enlace al factor de crecimiento insulnico, 665 anlisis qumicos, 175 cadena de la transcriptasa polimerasa inversa
especfica de grupo, 196 analitos descartados, 169,170c (RT-PCR), 163
estructura de, 187-188 capacitacin para, 174 Folin-Ciocalteau, 212
fase aguda coagulacin, 175-176 Jaffe, 225-226, 227
electroforesis de protenas, 209, 210 comunicacin en, 172-174,175 prueba clnica, 276
fibringeno, 190c, 198, 509, 513c conectividad en, 176 Trinder, 275, 597
immunidad, 667 control de calidad de, 81, 83, 174,175 Reacciones qumicas en analizadores, 133-136
protena C reactiva, 190c, 198, 636, 667 coordinacin de, 170-171 incubacin en, 135
fibronectina, 202, 635, 659 definicin, 169 mezclado en, 134-135
funciones de las, 192-193 elementos para establecer las, 169c separacin en, 135
G, 374 estandarizacin en, 171-172 sistemas automatizados, 141
G, estimuladora, 461 estructura del sistema, 172 tiempo de reaccin en, 135-136
globina, 383, 384 formas/registros para, 174 Reactividad cruzada, 147
In d i c e 729
Sndrome de Cushing, (cont.) estadstica, 54, 55, 70, 71 Sustancias trombolticas, 513
pacientes peditricos, 665 inexactitud, 64, 66 Sustratos
procedimientos de localizacin, 422 proporcional, 54, 55 concentracin de, 239-240
tratamiento de, 423 Sitios activos de enzimas, 237 definicin, 238
Sndrome de Klinefelter, 438-439 Sitios alostricos, 237 relacin con la enzima y el producto, 239
deficiencia de 5a-reductasa, 439 Sitosterolemia, 288
distrofia miotnica, 439-440 S02 (saturacin de oxgeno), 352, 353-354
Sintasa de cido S-aminolevulnico (ALA), 276, Sodio, 317-322 T
378-379 determinacin de, 320-322
Sntesis funcin renal, 522 T3 (triyodotironina)
carbohidratos, 479 hipernatremia, 319c, 320, 638c, 660 estudios para determinar, 449
enzimas, 479-480 hiponatremia, 318-320 libre, 448, 449
grasas, 479 intervalo de referencia de, 322c protena de unin con, 448
hem, 378-379 muestras para, 320 sntesis de, 446-447, 664
hemoglobina, 384-385 nutricin parenteral total, 637 T4 (tetrayodotironina)
hormonas de la tiroides, 446-447 osmolalidad, 316 estudios para, 449
porfirinas, 378-379 pacientes peditricos, 660 libre, 448, 450
protenas, 191-192, 479 regulacin del, 318, 339, 522 produccin de, 410
Sinusoides hepticos, 477 sudor, 544, 563, 564 protena de unin con, 448
Sistema Solubilidad de las protenas, 189 regulacin de la glucosa, 267
amortiguador de fosfato, 345 Soluciones amortiguadoras sntesis de, 446-447, 664
automatizacin de laboratorio clnico Hitachi definicin, 8, 344 Tabla peridica de los elementos, 692 (Vase tambin
(SALC), 141 electroforesis, 105-106 Oligoelementos)
hipotalmico-hipofisario de la corteza soluciones, en, 8 Tabletas, reactivo en, 132-133
suprarrenal, 665 Soluciones concentradas, 7 Tacrolimus, 583
Internacional de Unidades (SI), 3 ,4c, 675c Soluciones diluidas, 7 Tactoides, 386
MODULARANALYTICS , 141 Solutos, 6 Talasemia, 387, 389-390
multiplicador de contracorriente, 520 Somatomedinas ( Vase Factores de crecimiento alfa, 389
oxidasa de funcin mixta (MEO), 574 anlogos a la insulina) beta, 389-390
portal hipotalmico-hipofisario, 400-402 Somatostatina (SS) definicin, 378, 384
renina-angiotensina (SRA), 316,415-416,522, 523 liberacin de la hormona del crecimiento, 402, diagnstico de, 390-393
replicasa Q-beta, 163 403, 665 mayor, 389, 390
reproductor ( Vase Funcin gonadal) regulacin de la glucosa, 267-268 menor, 389, 390
Sistema inmunitario Somatotropina (Vase Hormona del crecimiento) Tasa de filtracin glomerular (TFG)
adaptacin, 667 Sondas clculo de, 224
clulas asesinas naturales en, 667 cidos nucleicos creatinina, 224-225
clulas B en, 667 aplicaciones de, 164 estimada, 525
fagocitos en, 667 definicin, 161 funcin renal, 519, 524
innato, 667 panorama de las, 160 pacientes peditricos, 660
pacientes peditricos, 666-668 propiedades qumicas de, 161 Tasa metablica basal (TMB), 629
piel en, 667 tcnicas de hibridacin, 161-164 TB (Tuberculosis), 39
produccin de anticuerpos en, 667-668 analizadores automatizados, 130,131, 132 TBG (globulina de unin con tiroxina), 447-448
protenas de fase aguda en, 667 termistores, 9 TBPA (prealbmina de unin con tiroxina), 448
sistema de complemento en, 667 Sorbente, 109 TD50, 589
trastornos de, 668 Southern blot, 162,164 Tcnica
Sistema reproductor femenino, 432-436 SPE (electroforesis de protenas sricas), 207-208, cohete, 150
ciclo menstrual, 432-433, 434 209, 210 cusum (suma acumulada), 79
desarrollo puberal femenino, 434 Sp02 (oximetra de pulso), 352 inmunoensayo multiplicado por enzimas (TIME),
hipogonadismo hipogonadotrpico, 434-435 SSIADH (sndrome de secrecin inadecuada de 156-157
hirsutismo, 432, 435-436 ADH), 319 Laurell, 150
infertilidad, 434, 436c Suero, 5, 27, 30c Ouchterlony, 148-149
ovarios en, 432-436 Sulfato de dehidroepiandrosterona (DHEAS), 414 pelcula gruesa y fina, 125, 357
ovulacin, 433 Suministros para laboratorio (Vase Equipo de suma acumulada (cusum), 79
produccin hormonal por, 432 laboratorio) Tcnicas analticas, 91-120
terapia de reemplazo de estrgeno, 436, 511 Supresin de captopril, 417 cromatografa, 108-115
Sistema reproductor masculino Sustancias electroforesis, 105-107
hipofuncin testicular, 438-441 delicuescentes, 16 electroqumica, 101-105
hipogonadismo, 441 infecciosas, 39 espectrofotometra y fotometra, 91-101
infertilidad, 436c Sustancias interferentes osmometra, 117-119
terapia de reemplazo de testosterona, 441-442 cido rico, 230 protemica, 115-117
testculos, 436-442 amoniaco, 232 pruebas en el lugar de atencin, 119-120
trastornos del desarrollo sexual, 438 anlisis de orina, 222-223 Tcnicas de hibridacin, 161-164
Sistema respiratorio creatinina, 227 amplificacin de seal, 163-164
edad avanzada, 649 Sustancias qumicas hibridacin in stu, 164
equilibrio cido-bsico, 345, 346, 347, 348, 349 almacenaje de, 36-37,40-41 Northern blot 162
pacientes peditricos, 656 carcingenas, 41 polimorfismo de la longitud del fragmento de
Sistemas amortiguadores (Vase tambin Gases carcingenas, 41 restriccin, 164
sanguneos) combustibles, 40-41 reaccin en cadena de la polimerasa, 162-163
bicarbonato-cido carbnico, 345, 346, 348 corrosivas, 41 reaccin en cadena de la transcriptasa-polimerasa
fosfato, 345 corrosivas, 41 inversa, 163
regulacin del ion hidrgeno, 344-345 derrames de, 41 reaccin en cadena de ligasa, 163
Sistemas de control de calidad estadsticos, 70, 71-72 efectos txicos por, 40 replicacin de secuencia autosostenida, 163
definicin, 70 eliminacin de, 44-45 resumen de, 162c
informacin de los pacientes en, 79-81 etiquetado de, 36, 37 sistema de replicada Q-beta, 163
operacin general de, 71-72 grados de pureza, 4-5 Southern blot 162, 164
reglas de control, 72-79 incompatibles, 678c-679c Tcnicas de medicina nuclear, 449
Sistemas de informacin en el laboratorio (SIL), 142 inflamables, 40-41 Tcnicas de separacin, 17-19
Sistemtico, error (ES) inflamables/combustibles, 40-41 anlisis automtico, 135
constante, 54, 55 peligrosas, 40 anlisis de lipoprotenas, 300
criterios de valor sencillo, 68 reactivas, 41 centrifugacin, 17-18
deteccin con reglas de control, 73, 74, 75-76 seguridad con, 39-41 cromatografa, 108-109
NDICE 731