Aislamiento del cido carmnico de la cochinilla (Dactilopius coccus costa) y Sntesis de

Carmines
A. Objetivos de la prctica
Aislar el cido carmnico a partir de la cochinilla.
Sintetizar el carmn de aluminio a partir de la cochinilla.

B. cido Carmnico y carmines. Estructuras, propiedades y usos.

[1]
Tabla N1. Propiedades fsico- qumicas del reactante, producto y/o subproductos orgnicos.
Sustancia Estructura Peso Punto de Solubilidad
molecular ebullicin por 100g
(g/mol) (C) de H2O
cido 492.4 136.0 2.00
carmnico

---------- --------- ---------

Camn de
aluminio

Usos:
cido carmnico:
-Se utiliza principalmente como colorante orgnico natural, algunas de sus
aplicaciones se dan en la fotografa, pigmentos artsticos, indicador de bacterias,
cosmticos, entre otros.
-Uno de los usos menos comunes es utilizarlo como agente complejante para
ciertos cationes metlicos como el aluminio, plomo, etc.
-En la industria alimentaria es usado con mucha frecuencia para dar color rojo a
los alimentos y bebidas.
Carmn de plomo:
-Se usa para el teido de lana, confeccin de mantos y tapices, as como para la
fabricacin de pinturas y entre otros. [1]

Parte Experimental
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C. Aislamiento del cido carmnico de la cochinilla

1. Diagrama del proceso qumico

Cochinilla

A. Extraccin:
i. 50ml de H2O hirviendo.
ii. Bao Mara 15 min T=90-95C.
iii. Agitacin constante 15.
iv. Filtrar
v. Concentrar a bao mara hasta unos 40ml
aprox.
Mezcla (cido carmnico e impurezas)
B. SEPARACIN:
i. Acetato de plomo (2g).
Residuo lquido ii. Reposo por 12h.
(acetato de plomo iii. Filtrar al vaco y lavar con agua.
+ impurezas)
Carmn de plomo

C. AISLAMIENTO:
i. 30ml de metanol-cido clorhdrico(2:1)
ii. Agitacin 20.
iii. Filtracin al vaco.
Residuo acuoso iv. Concentrar a bao Mara (20ml).
(HCl + metanol) v. Reposar 1 a 3 das.

cido carmnico cristalizado

C. SEPARACIN:
i. Filtracin y lavado con metanol fro.
cido carmnico slido

2. Observaciones Experimentales
a) Condiciones de reaccin:
Reactantes:
Sustrato Reactivos
Cochinilla 0,5 g Acetato de plomo 2g
Metanol- cido clorhdrico (2:1) 30ml
Tiempo de reaccin: 15 minutos.
Temperatura de reaccin: Bao mara T=90- 95C aprox.
Tiempo de cristalizacin: 1 a 3 das. .
Color de la mezcla de reaccin: Rojo claro.
Color del cido carmnico: Rojo oscuro.

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Figura N1. En la parte izquierda se muestra el color de la mezcla de reaccin (rojo claro),
mientras que en la derecha se observa el color del cido carmnico (rojo oscuro).

b) Producto obtenido. Caractersticas (colores) y cantidad.

Tabla N1. Caractersticas de cido carmnico y el subproducto cloruro de plomo

Producto Estado Color Masa(g)

cido carmnico Solido Rojo 0,08

oscuro

c) Rendimiento de la reaccin.

,
%= % = % = , %

d) Presentacin del producto.

D. Preparacin del carmn de aluminio

1. Diagrama del proceso qumico

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Cochinilla

B. Extraccin:
i. 50ml agua hirviendo
ii. Bao Mara 15 min T=90-95C
iii. Agitacin constante
iv. Filtrar
v. Concentrar a Bao Mara hasta unos
40ml aprox.
Mezcla (cido carminico e impurezas)

D. SEPARACIN:
i. 1.3g alumbre de aluminio
ii. Reposo por 4h
Residuo lquido iii. Filtrar al vaco y lavar con agua
y acetona

Carmn de Al

2. Observaciones Experimentales

a) Condiciones de reaccin:
Reactantes
Sustrato Reactivos
Cochinilla 0,5 g Alumbre de aluminio (1,3g)
Tiempo de reaccin: 15 minutos.
Temperatura de reaccin: Bao mara T=90- 95C aprox.
Tiempo de separacin: 4 horas.
Color de la mezcla de reaccin: fucsia.

Figura N2. Se trata del carmn de aluminio, el cual presenta un color fucsia.

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b) Producto obtenido. Caractersticas y cantidad.

Tabla N3. Carmn de aluminio

Producto Estado Color Masa(g)

Carmn de aluminio Slido fucsia 0,24

c) Rendimiento del proceso.

,
%= % = % = , %

d) Presentacin del producto.

Cuestionario .Anlisis de la bibliografa.

P1. Lloyd 1980: 91-107(Extraction and chemistry of cochineal, Pgs 102-105)
1. Cul es la principal caracterstica de los carmines (relacionada con su
color)?[7]

Solutions of carminic acid have little intrinsic colour below pH 7 (where the quinone ring
has greatest photostability) and in the region of pH 4 have a pale Straw tint depending
on concentration. However, carminic acid shares with other quinones, such as alizarin
(see Keil & Heertjes, 1963), the property of forming complexes with several metals, a
state of combination which is frequently accompanied by a shift in the position of
maximum absorption in the visible range to higher wavelengths (Jain, 1960) and
apparent increase in colour intensity when viewed by eye. Technologically speaking, the
most "brilliant' colours are produced with tin and aluminium. (Pg. 102)

Las soluciones de cido carmnico tienen poco intrnseca color por debajo de pH 7
(donde el anillo de quinona tiene mayor fotoestabilidad) y en la regin de pH 4 tienen
una tinte "plido paja" dependiendo de la concentracin. Sin embargo, el cido
carmnico comparte con otras quinonas, como la alizarina(ver Keil & Heertjes, 1963), la
propiedad de formar complejos con metales varios, un estado de combinacin que con
frecuencia se acompaa de un cambio en la posicin de mxima absorcin en la gama
visible de longitudes de onda mayores (Jain, 1960) y el aparente incremento en la
intensidad de color cuando se mira por el ojo. Tecnolgicamente hablando, los colores
ms "brillantes" se producen con estao y aluminio.

2. Cul es la diferencia principal entre el carmn de aluminio y el carmn de

calcio?

Subsequent stages of the process always involve treatment of the extract with an
aluminium salt. According to the intended end-use, the resultant complexes may
betreated with ethanol at high concentration to precipitate a "soluble" carmine or,
alternatively, they can be isolated in that form which is "insoluble' below pH 7 by the
addition of a calcium salt to the final solution. Colours ranging from pale 'strawberry' to
near "blackcurrant', certainly covering the spectrum of'reds' normally preferred in foods
and beverages.(Pg. 103)

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Las etapas subsiguientes del procedimiento implican siempre el tratamiento del extracto
con una sal de aluminio. De acuerdo con el uso final pretendido, los complejos
resultantes pueden ser tratados con etanol a alta concentracin para precipitar un
carmn "soluble" o, alternativamente, pueden aislarse en esa forma que es "insoluble"
por debajo de pH 7 mediante la adicin de un calcio. Demostr que, simplemente
ajustando la relacin cido carmnico / aluminio, es posible, al menos a escala de
laboratorio, producir colores solubles que van desde "fresa" plida hasta cerca de
"grosella negra", cubriendo ciertamente el espectro de "restos" normalmente preferidos
en los alimentos y bebidas.

3. Indique dos ventajas que caracterizan a los carmines solubles

Although more expensive to produce on a commercial scale, the "soluble" carmines
have certain distinct technological advantages, not least in their solubility over a wide pH
range even in aqueous ethanol mixtures.
A considerable reduction in the cost of producing carmines soluble over a wide range of
pH, coupled with a more precise adjustment of colour for a variety of applications, can be
obtained using spray-dried products both with and without the incorporation of other
approved food additives as diluents and carriers. Some of the latter greatly increase the
photostability of the pigment at pH values above 7 in the presence of oxygen (A. G.
Lloyd, unpublished work). (Pg. 103)
Los carmines "solubles" tienen ciertas ventajas tecnolgicas, sobre todo en su
solubilidad en un amplio rango de pH, incluso en mezclas acuosas de etanol.
Se puede obtener una reduccin considerable del costo de produccin de carmines
solubles en una amplia gama de pH, junto con un ajuste ms preciso del color para una
variedad de aplicaciones, usando productos secados por pulverizacin, con y sin la
incorporacin de otros aditivos alimentarios aprobados como diluyentes y portadores.
Algunos de estos ltimos aumentan considerablemente la fotoestabilidad del pigmento a
valores de pH superiores a 7 en presencia de oxgeno (A. G. Lloyd, trabajo indito).
4. Cules son los principales aminocidos encontrados en muestras de
carmines?

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Table 2 records the average results obtained in the studies, expressed as amino acid
residues per 1000 residues. It will be immediately obvious that the most striking features
include:
Successive studies show that these observations constitute a virtual "fingerprint' for
'soluble" carmines (J. Thomas and A. G. Lloyd, unpublished work). Although less
obvious, the same trends are apparent in amino acid analyses of 'insoluble" carmines. At
the risk of being accused of speculation, it must be said that this pattern is more
reminiscent of "structural" proteins than of their globular 'enzymic' counterparts. (Pg.
105)

Tabla 2 recoge los resultados promedio obtenidos en los estudios, expresados como
residuos de aminocidos por 1000 residuos. Ser inmediatamente evidente que las
caractersticas ms llamativas son:

Tabla 2
Anlisis de aminocidos tpicos para commercialsolublescarmines (expresado
como residuos de aminocidos por 1000 residuos).

Asp 116 Met 12

Thr 46 Ileu 20
Ser 56 Leu 29
PRO 53 Tyr 24
Glu 151 Phala 16
Gly 171 His 50
Ala 56 Lys 123
Val 29 Arg 40
Cys 8

Sucesivos estudios demuestran que estas observaciones constituyen un virtual "huella

digital ' para ' soluble" carmines (trabajan de J. Thomas y A. G. Lloyd, indito). Aunque
menos obvio, las mismas tendencias son evidentes en el anlisis de aminocidos de
"insoluble" carmines. A riesgo de ser acusados de especulacin, hay que decir que este
patrn es ms una reminiscencia de "estructurales" protenas que sus homlogos
'enzimtica' globular

P2. Eisner, T.et al.- 1980: 1039(Red Cocneal Dye (Carminic Acid): Its Role in
Nature)
1. Cul es el rol que cumple el cido carmnico en la cochinilla?[2]
Other Quinones are powerful deterrents of feeding predators, including insects such as
ants predaceous. Assuming that an antroquinona (acid carminic) could be equally
defensive, we undertook the bioassays that demonstrated that carminic acid is in fact
potentially deterrent to ants.

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Otras quinonas son potentes disuasivos de la alimentacin a los depredadores,

incluyendo los insectos predaceous tales como hormigas. Asumiendo que una
antroquinona (cido carmnico) pudo ser igualmente defensiva, emprendimos los
bioensayos que demostraron que el cido carmnico es de hecho potencialmente
disuasivo a las hormigas.

2. A qu se debe que los insectos Dactylopius confusus sean blancos?

The aggregations of dactylopius are conspicuously white, as a result of the spongy

investiture of waxy powder and silk thread which characteristically cover their bodies.
This wool is intended to act as a defensive half.

Las agregaciones de dactylopius son conspicuamente blancas, como resultado de la

investidura esponjosa de polvo ceroso e hilos de seda que caractersticamente tapa sus
cuerpos. Esta lana est pensada para actuar como medio defensivo.

P3. Estudio de la tesis de Licenciatura en Qumica Obtencin y Caracterizacin

de Carmines de los metales alcalino trreos a partir de la cochinilla (Vctor
Peragallo B., EPQ-FC, 1997). En cada caso, indique la pgina respectiva.

a) Sec.3.2 extraccin y purificacin del cido carmnico de la cochinilla(pgs..

28-39) presente dos semejanzas y dos diferencias con el procedimiento realizado
en su prctica de laboratorio.[8]

Tabla N 4. Semejanzas y diferencia del procedimiento experimental y la referencia.

SEMEJANZAS DIFERENCIAS

Se utiliza agua como solvente para la Como solvente de extraccin en el

extraccin de cido carmnico (pg. 31) desengrasado
Laboratorio: ter de petrleo
Referencia: n-Hexano (pg.28)

Las condiciones de la reaccin: Referencia: se desproteiniza con metanol

temperatura ( bao mara T=90-95C) (pg.29)
agitacin y tiempo (15-20 min) son las Laboratorio: no se realiza ese paso.
mismas (pg.31-32)

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P4. CARBOHIDRATOS. Indique las (i) estructuras, (ii) propiedades, (iii) utilizacin
y (iv) fuentes naturales de obtencin.
a) QUITINA.
Tabla N5. Estructura, propiedades, utilizacin y fuentes naturales de obtencin de la
quitina.
ESTRUCTURA[4]

PROPIEDADES[6] La quitina es la sustancia orgnica ms abundante en la

naturaleza despus de la celulosa , es un biopolmero lineal,
altamente insoluble en agua, propiedad esta que limita sus
aplicaciones; se disuelve rpidamente en cidos
concentrados, en algunos fluoroalcoholes y soluciones al 5%
de cloruro de litio, lo que la hace poco prctica para su
aplicacin y presenta baja reactividad. Otras propiedades
relevantes de este biopolmero son su alto peso molecular y
su estructura porosa favoreciendo una elevada absorcin de
agua

UTILIZACION[5] Debido a sus propiedades los hacen muy atractivos en

nutricin, cosmtica, biomedicina , agricultura y medio
ambiente. Actualmente, se consume de forma habitual en
todo el mundo como suplemento alimenticio , sus
propiedades antibacterianas y antivirales estn muy
indicadas para las aplicaciones de la medicina biolgica en
la cura de heridas , suturas y como ayuda en las
operaciones de cataratas y tratamiento de enfermedades.

FUENTES Constituye un componente menor en la mayora de los

NATURALES DE hongos y algunas algas , en los que sustituye con frecuencia
OBTENCION DE a la celulosa u otros glucanos .En las clulas de levadura en
QUITINA[4] fase de divisin, la quitina se encuentra en el tabique que se
forma entre las clulas que se estn separando. Sin
embargo , la funcin mejor conocida de la quitina es la que
posee en los animales invertebrado , donde constituye una
sustancia estrucutral importante del exoesqueleto de
muchos invertebrados e insectos.

REFERENCIA BIBLIOGRAFICA.
[1]Lloyd 1980: 91-107 extraction and chemestry of cochineal. Pgs.. 102-105
[2]Eisner, T.et al.- 1980_103 Red Cocineal Dye(carminic Acidic): its Role in Nature

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[3]Tesis de Licenciatura en Quimica Obtenion y Caracterizacion de Carmines de los

metales alcalino terreos a partir de la cochinilla(victor Peragallo B.,EPQ-FC,1997).
[4]V. Melo & Cuamatzi,O.(2007) Bioqumica de los procesos metablicos
.Carbohidratos:estrucutura y funcin biolgica. Mxico:Editorial Reverte (2da edicin)
pg. 68.
[5]Vilasoa Martinez ,M.(2008) Desarroll de mtodos analticos para la valoracin
nutricional del cangrejo de las nieves, chionoecetes opilio. Espaa, Santiago de
Compostela , pg 111.
[6] Rincon,M. & Gutierrez ,E.(2012) .Quitina y Quitosano, polmeros amigables .Una
revisin de sus aplicaciones. Revista Tecnocientifica URU , N1 pgs 54.
[7] Lloyd (1980). Extraction and chemistry of cochineal. Pgs 102-105.
[8] Vctor Peragallo.(1997). Obtencin y Caracterizacin de Carmines de los metales
alcalino trreos a partir de la cochinilla, B.,EPQ-FC. Pgs 31-39. 41-42.
[9] 3. Reyna, V. Prctica de laboratorio N2: Aislamiento del cido carmnico de la
cochinilla (Dactilopius coccus costa), sntesis de carmines y determinacin
cuantitativa de cido carmnico. Qumica Orgnica III. Universidad Nacional de
Ingeniera CQ- 441, Per, 2017.

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