Regulacin de la expresin

gnica en procariotas

Biologa molecular II - 2016

MSc. Milagros Quintana Cceda

Diferencias entre transcripcin
procariota y eucariota

ARNm monocistrnico ARNm policistrnico

Transcripcin y procesamiento Transcripcin y traduccin acopladas
acoplados Regulacin principalmente a nivel
Mltiples niveles de regulacin transcripcin (represin/activacin)
Diferencias en la sntesis de protenas
entre procariotas y eucariotas
 Regulacin de la expresin gnica
procariota
Por adaptacin a las necesidades ambientales.
Es un principio de economa celular

Procariotas tienen vas catablicas para diversos azcares, si todas se expresaran

habra un enorme gasto energtico
Enzimas capaces de introducir cada azcar y enzimas capaces de romperlos
Mucho ms econmico para la clula producir solo las enzimas necesarias en
cada momento
Es esencial un mecanismo de regulacin de la expresin gnica, de manera que
los genes se expresen cuando sea necesario.
El cambio en la expresin ocurre en pocos minutos
Sistemas de regulacin

Encender y apagar ciertos genes o grupos de genes

Mecanismo sensor que determine que enzimas se
necesitan en cada momento (y que genes deben ser
expresados)
Activacin y desactivacin del sistema en el tiempo
 Opern
Unidad gentica funcional formada por un grupo o complejo de genes capaces de ejercer una regulacin
de su propia expresin por medio de los sustratos con los que interaccionan las protenas codificadas
por sus genes.
No se trate de "varios genes" de expresin coordinada, el opern es
un nico gen que codifica un ARNm policistrnico (codones de inicio
y trmino que darn protenas independientes)
Inductor: Sustrato o compuesto cuya
presencia o ausencia induce la expresin del
resto de los genes que conforman el opern.
Activador o Co-represor.
Las protenas (de genes estructurales) son generalmente
enzimas que participan en las vas metablicas cuya expresin
es regulada por factores de control (regiones regulatorias):
Promotor: controla inicio de la transcripcin del opern por
la afinidad a la ARN pol. Inmediatamente antes de los genes
estructurales
Operador: zona de control que permite la activacin o
desactivacin del promotor ("interruptor gnico). Tiene
secuencias reconocibles por protenas reguladoras. Por
plegamientos 3D de las protenas reguladoras interacciona
con el promotor, pues las protenas que se unieron
contactan con la ARN pol aumentando o disminuyendo su
afinidad por el promotor, dando lugar a la expresin o
represin de los genes estructurales. Se ubica entre
promotor y los genes estructurales
Gen regulador: codifica para la protena reguladora que
reconoce la secuencia del operador. Cerca de los genes
estructurales pero no inmediatamente al lado.
Protena reguladora: Represora o Activadora
 Clasificacin de los operones
De acuerdo a su regulacin

Inducible: es el que en condiciones normales no se expresa, se activa en respuesta a un agente

inductor que funciona como Activador, en el momento que el inductor se une al operador, se
activa el promotor y comienza la transcripcin de los genes estructurales.
Represible: es el que en condiciones normales s expresa las protenas estructurales an en
ausencia de inductor, en respuesta a un agente represor se activan. El inductor funciona como
represor y se une al operador, inhibiendo el funcionamiento del promotor y la transcripcin de
los genes estructurales.
Constitutivos: es el opern que siempre se expresa, y por lo tanto no estn regulados ni por
inductores ni por represores.
Induccin
Represin
Control positivo y control negativo

Se dice que un sistema est bajo control positivo cuando el

producto del gen regulador activa la expresin de los genes,
acta como un activador mientras que un sistema est bajo
control negativo cuando el producto del gen regulador
reprime o impide la expresin de los genes, acta como un
represor .

Tanto la represin como la induccin son ejemplos de control

negativo , dado que la protena represora detiene (turn off ) la
transcripcin.
 Modelo Opern
El modelo opern de la regulacin de los genes procariotas fue propuesto por
Francois Jacob y Jacques Monod en 1961
Jacob, Monod y col. analizaron el sistema de la lactosa en E. coli y los resultados de
sus estudios permitieron establecer el modelo que permite comprender como
tiene lugar la regulacin de la expresin gnica en bacterias .
Jacob y Monod recibieron en 1965 el Premio Nobel
Opern lactosa
Los genes del metabolismo de la glucosa se
expresan de forma continua en E.coli
El metabolismo de otros azcares como fuentes
energticas est regulado, es inducible.
Opern lac, es un sistema inducible.
La protena reguladora, producto del gen
regulador, es un represor que impide la
expresin de los genes estructurales en
ausencia del inductor.
El inductor es la lactosa
En presencia de lactosa se expresan las enzimas
que la degradan.
 Opern lac
Con inductor Sin inductor

Cuando hay lactosa en el medio (intestinos de Cuando no hay lactosa en el medio, la

un mamfero durante la lactancia), el inductor se protena represora se encuentra unida al
une al represor cambiando su forma lo que evita operador impidiendo la transcripcin de
que se pueda unir al operador y ARN pol puede los genes de las enzimas que metabolizan
transcribir los genes correspondientes la lactosa.
Opern lac
La lactosa estimula el aumento de 1000X de la expresin de 3 protenas:
B- galactosidasa (lacZ): Hidroliza la lactosa en glucosa y galactosa
Alolactosa (Inductor)
Permeasa (lacY): transporta lactosa a travs de la membrana
Transacetilasa (lac A): Funcin no conocida
Opern
 Estudio de la regulacin
Mediante el efecto de mutaciones en los distintos elementos del opern
Control positivo
Secuencia del opern lac de E. coli
Regulacin del opern lac
 Opern Triptfano

Sistema represible
Codifica 5 enzimas de la sntesis
del W
Cuando un producto del
metabolismo, el triptfano por
ejemplo, est en cantidades
suficientes la bacteria puede dejar
de fabricar las enzimas que los
sintetizan.
En este sistema, el producto
funciona como co-represor
unindose al represor y de este
modo detiene la sntesis proteica.
El W acta como co-represor
 Opern Triptfano
Con co-represor Sin co-represor

Cuando el W est presente las enzimas no se Cuando W est ausente las enzimas si se
transcriben, el represor est activo. transcriben, represor inactivo
 Opern Triptfano
Enzimas de la sntesis del
W
Los genes estructurales del
opern W se encuentran
en el mismo orden que
actan las productos
codificados por ellos en la
ruta biosinttica del
triptfano
 Regulacin por atenuacin
Yanofsky aisl el ARNm del opern W y
secuenci la regin del ext. 5 encontrando
una regin lder o gua de 160 bases que no
se traduce.
Esta secuencia se encuentra antes del
primer triplete que se transcribe (antes de
los codones de los genes estructurales)
Cuando analiz la secuencia Utilizando mutantes trpR- comprob que en presencia de
correspondiente a un mutante del gen altos niveles de W, que deberan hacer que la regin
trpR (codifica la protena represora) que atenuadora redujera en 10 veces la tasa de transcripcin, se
siempre produce niveles mximos de W, seguan transcribiendo las primeras 141 bases de la regin
detect una delecin de 30 bases de la lder del ARNm, aunque el ARNm de longitud normal solo
posicin 130 a la 160. apareca a un nivel 10 veces menor.
Llam atenuador a la regin del ADN En altos niveles de W las primeras 141 bases se transcriben al
inactivada por la delecin, pues la presencia mximo, pero por el mecanismo de atenuacin que tiene lugar
de dicha regin conduce aparentemente a en esa regin, solamente uno de cada 10 ARNm se transcribe
disminuir la tasa de transcripcin hasta el final.
Por consiguiente, la regin atenuadora acta como una regin terminadora de la transcripcin en
presencia de W, mientras que en ausencia de W el atenuador se desactiva y todas las molculas de
ARNm se completan. En la atenuacin, la transcripcin se inicia pero no se completa
 Organizacin de la regin
lder/atenuador
El sistema incluye la transcripcin y la
traduccin como procesos consecutivos
e inmediatos. Segn se va dando la
transcripcin, el ARNm va siendo
traducido por un ribosoma.
La regin lder tiene 4 secuencias y se
caracteriza por tener una sede de
reconocimiento para los ribosomas y los
codones de 14 aas (entre ellos 2W) y
regiones que puede formar una
estructura secundaria palindrmica en
forma de lazo u horquilla
La secuencia 1 codifica al pptido lder o
gua
Las secuencias 3 y 4 forman la secuencia
atenuadora, su contenido permite
formacin de una horquilla que impide
la continuacin de la transcripcin.
 Regulacin por atenuacin
Cuando los niveles de W son altos, la traduccin de
la primera parte de la regin lder impide la
transcripcin ms all de la estructura secundaria.
El pptido lder (secuencia 1) se traduce completo
y mientras el ribosoma va traduciendo la
secuencia 2, se transcribe la secuencia atenuadora
y se forma la horquilla entre las secuencias 3 y 4
que impide la accin de la ARN pol,
interrumpiendo la transcripcin
Cuando los niveles de W son bajos disminuye o
cesa la traduccin del pptido lder permitiendo
que la ARN pol transcriba el opern completo. El
pptido gua no puede formarse pues el ribosoma
al llegar a los (2) codones W se detiene dejando as
a la secuencia 2 libre el tiempo suficiente para que
se transcriba la secuencia 3 y entre ambas formen
una horquilla que a diferencia de la formada por la
secuencia 3 y 4 no impide la unin de la ARN pol
permitiendo la expresin de los genes
estructurales
 Modelo de atenuacin
Los ribosomas que traducen la
regin lder promueven la Ausencia de W
aparicin/desaparicin de la
estructura secundaria que permitir
el reconocimiento de esta regin por
el factor de terminacin.

Presencia de W
 Secuencia de aa de los atenuadores (pptidos
lder)de operones de E.coli

La regulacin por atenuacin tiene lugar en otros operones bacterianos relacionados con la
sntesis de aas, ya que en todos los casos el segmento inicial del polipptido transcrito es rico en
el aa que controla dicho opern.
Cuando hay poca cantidad del aa correspondiente la traduccin del pptido lder se detiene en
los codones correspondientes al mismo el tiempo suficiente para que se formen las estructuras
secundarias que permiten que la ARN polimerasa pueda continuar con la transcripcin.