Revista CENIC Ciencias Biolgicas, Vol. 40, No. 2, 2009.

Actividad antimicrobiana de Waltheria indica

y Acacia farnesiana.

Nidia M. Rojas Hernndez, Senovio Avellaneda Saucedo, Armando Cullar Cullar,* Beatriz Romeu
lvarez y Daysi Lugo Moya.
Departamento de Microbiologa y Virologa, Facultad de Biologa, Universidad de la Habana, calle 25 entre calles I y J, El
Vedado, Plaza de la Revolucin, Ciudad de La Habana. Correo electrnico: nidia.rojas@infomed.sld.cu. *Instituto de Farmacia
y Alimentos, Universidad de la Habana, Ciudad de La Habana, Cuba.

Recibido: 30 de abril de 2008. Aceptado: 27 de noviembre de 2008.

Palabras clave: Acacia farnesiana L., Waltheria indica L., actividad antimicrobiana, actividad antibacteriana, medicina tradicional.
Key words: Acacia farnesiana L., Waltheria indica L., antibacterial activity, antimicrobial activity, traditional medicine.

RESUMEN. Entre las plantas medicinales empleadas en Tierra Caliente, estado de Guerrero, Mxico, se encuentran el Ginar
(Waltheria indica L., Esterculiaceae) y el Huizache (Acacia farnesiana L. Willd, Mimosaceae). En ambas, la infusin de la raz
se usa popularmente para las diarreas. Con la finalidad de validar las propiedades que se les atribuyen a estas especies vege-
tales, el presente trabajo tuvo como objetivo evaluar la actividad antimicrobiana in vitro de los extractos acuosos y etanlicos
preparados con las races de ambas plantas. A estos extractos, se les determin el rendimiento de slidos solubles totales y se
les realiz el anlisis fitoqumico general. La actividad antimicrobiana se evalu frente a 25 cultivos bacterianos, dos cepas de
hongos filamentosos y 13 cepas de siete especies de levaduras del gnero Candida. En ambas plantas, los extractos etanlicos
tuvieron mayor actividad que los acuosos. Los extractos etanlicos de estas especies vegetales afectaron el crecimiento de siete
cepas bacterianas, lo cual correspondi al 28 % de los cultivos evaluados. Esta actividad fue bacteriosttica y bactericida para
los dos extractos, a los que se les determinaron las Concentraciones Mnimas Inhibitoria (CMI) y Bactericida (CMB) frente a los
cultivos sensibles. Solo se detect actividad antifngica por el extracto de W. indica sobre la cepa de C. utilis. La accin sobre
bacterias enteropatgenas in vitro valida el uso de estas plantas en medicina tradicional y reafirma la necesidad de estudios
toxicolgicos para asegurar la inocuidad de su uso.

ABSTRACT. Two of the medicinal plants used in Tierra Caliente, Guerrero State, Mexico, are Ginar (Waltheria indica L., Ester-
culiaceae) and Huizache (Acacia farnesiana L. Willd, Mimosaceae). The root infusion obtained from these plants has a popular
use against gastrointestinal diseases, mainly against diarrheas. The goal of this work was to evaluate the antimicrobial activity
in vitro of the water and ethanol extracts obtained from the roots of both plants, in order to confirm the traditional use of these
species. Total soluble solids and a general phytochemical analysis of the extracts were determined. Furthermore, the antimi-
crobial activity was evaluated against 25 bacterial isolates, two strains of filamentous fungi and 13 isolates of seven species of
Candida. For both plants, the ethanol extracts showed higher antimicrobial activity than the water extracts. Bacterial growth
of seven strains was affected in ethanol extracts, which represents 28 % of the bacterial isolates evaluated. The ethanolic extract
of W. indica had inhibitory activity against C. utilis. Some other antifungic activity was not found. For the isolates the minimal
inhibitory concentration (MIC) and the mininal bactericidal concentration (MBC) of the extracts were determined. The in vitro
action over enteropathogenic bacteria confirms the use of these plants in traditional medicine and supports the necessity of
toxicology studies in screening tests.

INTRODUCCIN tra ubicado en la parte Sur de la Repblica Mexicana y

Las plantas medicinales constituyen una importante
fuente en la bsqueda de nuevos compuestos con activi-
dades farmacolgicas a partir de productos naturales.1,2
Actualmente en el mundo se realizan diversos trabajos
destinados a respaldar cientficamente el uso emprico
de las plantas en medicina natural, incluyendo su utili-
zacin con fines antimicrobianos.3,4
Mxico es uno de los pases con mayor riqueza flors-
tica en el mundo, con una antigua tradicin en el uso de
plantas medicinales.5 El estado de Guerrero se encuen-
representa el 3,3 % de la superficie del pas.6 La regin
Tierra Caliente ocupa el noroeste de este estado. Parte
de su abundante y variada vegetacin se emplea por
sus pobladores para aliviar o curar sus enfermedades
comunes, como diarreas, bronquitis, heridas etc.7 Sin
embargo, existen muy pocos trabajos destinados a vali-
dar cientficamente las propiedades que se les atribuyen
en medicina tradicional a estas plantas. Waltheria indi-
ca L. (Esterculiaceae), conocida por el nombre comn
de Ginar, crece abundantemente en las sabanas de
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Guerrero y Michoacn. Los pobladores de esas zonas
utilizan su raz para el tratamiento de la diarrea, aunque
tambin suelen beber infusiones preparadas a partir de
sus hojas para aliviar la bronquitis.8 Las races de esta
planta se emplean en infusin en Tierra Caliente para
el tratamiento de las diarreas, al igual que las races de
Acacia farnesiana L. Willd, (Mimosaceae), (Huizache,
Gisache y Aroma). Ambas se emplean con el mismo fin,
por 3 a 7 d segn una encuesta realizada en esta regin.8
El cocimiento del fruto y la raz de A. farnesiana se em-
plea contra la disentera en San Luis Potos.5 En otros
estados mexicanos como Morelos, Chiapas, Veracruz,
Oaxaca y San Luis Potos, emplean el extracto alcohlico
para disminuir el edema,7 pero tambin se prepara un
ungento con sus flores para aliviar el dolor de cabeza.
Debido a la carencia de informacin cientfica sobre las
propiedades antimicrobianas de estas plantas, el obje-
tivo del presente trabajo fue caracterizar desde el punto
de vista fitoqumico los extractos acuosos y etanlicos
preparados con las races de ambas plantas y evaluar
su actividad antimicrobiana in vitro, para comprobar
la existencia de las propiedades que se les atribuyen en
medicina tradicional.
MATERIALES Y MTODOS
Material empleado
Las plantas fueron colectadas en los meses de julio
y agosto en los municipios de Tierra Caliente donde se
recomendaron como medicinales. Se realizaron tres
muestreos de forma aleatoria y cada muestra estaba re-
presentada por al menos diez plantas. Las partes recolec-
tadas fueron las utilizadas por la poblacin en medicina
tradicional, en este caso, correspondieron a la raz.
Procesamiento del material vegetal y preparacin de
los extractos
Las muestras vegetales se secaron a la sombra entre
25 y 30 oC y se redujeron a polvo en un molino manual.
Con el material vegetal seco y molido se prepararon
extractos alcohlicos y acuosos.9 El extracto etanlico
se prepar por extraccin continua con etanol en un
equipo Soxhlet durante ocho h con 75 mL de disolvente
por cada 10 g de muestra. Se filtr y el primer extracto
se concentr a sequedad en un evaporador rotatorio
al vaco. El extracto acuoso se elabor con el residuo
vegetal del extracto etanlico de cada planta, despus
que se sec al aire y se macer durante 24 h con 35 mL
de agua destilada por cada 10 g de muestra, se calent
a ebullicin y se filtr. Posteriormente, se concentr a
sequedad.
Una alcuota de los extractos acuosos y etanlicos
de cada planta, se llev a sequedad para determinar el
contenido de slidos solubles totales.9 Tambin a los
extractos se les realiz un anlisis fitoqumico general9
para detectar los grupos qumicos presentes.
Determinacin de la actividad antimicrobiana
Los extractos alcohlicos y acuosos de cada planta se
enfrentaron a 25 cultivos bacterianos (Tabla 1).
Tambin se emplearon dos cepas de hongos fila-
mentosos y 13 cepas del gnero Candida (Tabla 2). Con
posterioridad, se determinaron las Concentraciones
Mnimas Inhibitoria (CMI) y Bactericida (CMB) de los
extractos activos frente a las cepas microbianas.
La CMI se determin por el minimtodo de difusin
radial10 con cortes de 6 mm de dimetro en monocapa de
medio Agar Meller-Hinton (Oxoid) para las bacterias y
130
en Agar Sabouraud Glucosa (Oxoid) para las levaduras
y hongos filamentosos. Las placas se incubaron a 35 C
durante 24 h . Las concentraciones de los extractos para
la CMI y la CMB fueron: 100; 50; 25; 12,5; 6,2; 3,1; 1,5; 0,75
y 0,4 mg mL1. Como control uno de los pocillos de cada
rplica por cepa microbiana se llen con etanol. Para la
determinacin de la CMB se utiliz el mtodo de dilu-
ciones dobles seriadas en caldo Meller-Hinton (Oxoid),
con pases a medio slido 24 h despus de la inoculacin
a 35 C .11 Como control positivo se utilizaron tubos con
caldo de cultivo sin extracto inoculados, y como control
para el disolvente se usaron tubos con caldo inoculados
a los cuales se les adicion el mismo volumen de etanol
que el volumen de extracto empleado. Se realizaron tres
rplicas por concentracin para cada cultivo.
RESULTADOS Y DISCUSIN
El anlisis fitoqumico (Tabla 3) del extracto de W. in-
dica, mostr reacciones dbiles para compuestos reduc-
tores, saponinas, quinonas, flavonoides, cardiotnicos y
fenoles o taninos o ambos, mientras en los extractos de
A. farnesiana la reaccin de triterpenos y esteroides y
de quinonas fue dbil, la de fenoles o taninos o ambos
fue media y la respuesta a la presencia de compuestos
reductores fue fuerte. Rodrguez y cols.12 revelaron la
presencia de cuatro homoterpenos y el flavonoide far-
nisina II en semillas de esta especie. Estos compuestos
se han asociado a actividad antimicrobiana en otras
plantas.13 La presencia de fenoles se ha demostrado en
esta ltima especie,12 lo cual confirma los presentes re-
sultados. No hay trabajos anteriores sobre la composicin
fitoqumica de W. indica.
La presencia de saponinas en W. indica se pueden
relacionar con propiedades antinflamatorias, diurticas
y antimicrobianas.9 Las saponinas se pueden presentar
en las plantas como glicsidos, con un ncleo triterpe-
noide o esteroide o ambos.14 La presencia del alcaloide
ciclopptido en la especie Walteria douradinha15 no
parece ser vlida para W. indica segn los resultados.
La carencia de otros estudios sobre la composicin fi-
toqumica de esta especie vegetal no permite conocer
los compuestos responsables de la dbil accin positiva
encontrada.
Los compuestos fenlicos constituyen uno de los
mayores grupos de metabolitos secundarios del reino
vegetal.9 Otros estudios plantean que los extractos de
plantas que son positivos a fenoles y taninos poseen
actividad antimicrobiana.14 La presencia de estos com-
puestos en los extractos de W. indica y A. farnesiana
sugiere que ellos pueden ser responsables de la actividad
antibacteriana encontrada en este trabajo en los extrac-
tos etanlicos de ambas plantas.
Los compuestos reductores son metabolitos esen-
ciales que suministran energa para el funcionamiento
celular de los vegetales, pero no parece haber ninguna
evidencia que relacione estos compuestos con la activi-
dad antimicrobiana.
La concentracin de slidos solubles totales presen-
tes en los extractos etanlicos de ambas plantas es mayor
a la de los extractos acuosos, con una relacin superior
a 1,2 en ambas plantas (Tabla 4).
En el anlisis de la actividad antimicrobiana de los
extractos, se observ que el control de etanol no afect
el crecimiento de ninguno de los microorganismos. Los
extractos acuosos son menos activos que los etanlicos
para cada planta, (Fig. 1) ya que los primeros inhibieron
el crecimiento de dos cultivos con W. indica (lo cual
corresponde al 8 % de cepas inhibidas) y una sola cepa
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Tabla 1. Cultivos empleados en la evaluacin de la actividad antibacteriana.

Cepas Origen Cepas Origen

Salmonella enterica (serovar Typhi) ATCC 7251 Enterobacter cloacae ATCC 23355
Salmonella enterica
ATCC 14028 Enterobacter aerogenes ATCC 13048
(serovar Typhimurium)
Salmonella enterica (serovar Enteritidis) ATCC 13076 Staphylococcus aureus ATCC 25923
Klebsiella pneumoniae ATCC 14056 Staphylococcus aureus ATCC 6538
Serratia marcescens ATCC 14056 Staphylococcus aureus ATCC 33862
Providencia sp. C -3450 Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853
Alcaligenes faecalis ATCC 1460 Streptococcus pyogenes ATCC 19615
Enterococcus faecalis ATCC 29212 Gluconacetobacter diazotrophicus Vegetal PAL-5
Escherichia coli ATCC 35150 Gluconacetobacter diazotrophicus Vegetal PM-18
Escherichia coli ATCC 8739 Micrococcus luteus ambiental
Shigella flexneri ATCC 12022 Bacillus subtilis ATCC 6633
Citrobacter freundii ATCC 8090 Bacillus subtilis ambiental
Citrobacter freundii ATCC 10625

Tabla 2. Cultivos fngicos empleados en la evaluacin antimicrobiana de los extractos etanlicos.

Especie Origen Especie Origen

Candida albicans ATCC 10231 Candida utilis C9 Clnico
Candida albicans C1, C2, C3, C4 Clnico Candida glabrata C10, C11 Clnico
Candida tropicalis C5, C6 Clnico Candida krusei C12 Clnico
Candida parapsilopsis C7 Clnico Aspergillus nger C49 y C50 Clnico
Candida kefyr C8 Clnico

Tabla 3. Anlisis fitoqumico de las plantas en estudio.

Ensayo W. indica A. farnesiana Ensayo W. indica A. farnesiana

Lactonas Flavonoides +
Triterpenos y esteroides + Cardiotnicos +
Compuestos reductores + +++ Fenoles o taninos o ambos + ++
Saponinas + Alcaloides +/
Quinonas + + Aminas

(-) Reaccin negativa. (+/-) Reaccin dudosa. (+) Reaccin positiva dbil. (++) Reaccin positiva media.
(+++) Reaccin positiva fuerte.

Tabla 4. Rendimiento de slidos solubles totales en los extractos

acuosos y alcohlicos.

A B
Planta % Relacin B/A
W. indica 6,8 12,0 1,7
A. farnesiana 8 10,0 1,2

A Extractos acuosos. B Extractos alcohlicos.

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Cepas
inhibidas
(%)

Fig. 1. Porcentaje de cepas inhibidas por extractos acuosos y etanlicos de W. indica y A. farnesiana.

Tabla 5. Concentraciones Mnimas Inhibitoria (CMI) y Bactericida (CMB) de los extractos etanlicos de W. indica
y A. farnesiana.

W. indica A. farnesiana
CMI CMB CMI CMB
Cepas Origen (mg mL )1

Salmonella enterica serovar Typhi ATCC 7251 R R 100 100

Serratia marcescens ATCC 14056 50 100 R R
Providencia sp. C - 3450 R R 100 100
Alcaligenes faecalis ATCC 1460 50 100 R R
Enterococcus faecalis ATCC 29212 50 50 R R
Escherichia coli ATCC 35150 R R 100 100
Shigella flexneri ATCC 12022 12,5 25 100 50
Staphylococcus aureus ATCC 25923 50 50 100 50
Streptococcus pyogenes ATCC 19615 R R 100 100
Bacillus subtilis ATCC 6633 12,5 25 100 100
Bacillus subtilis Ambiental 100 100 R R

con el extracto de A. farnesiana (4 % de inhibicin). Por
su parte, ambos extractos etanlicos inhibieron el 28 %
de las cepas bacterianas. Estos resultados motivaron la
continuacin del estudio de la actividad antimicrobiana
con los extractos etanlicos.
Segn lo presentado en la tabla 4, los extractos eta-
nlicos de las races de ambas plantas contienen una
mayor cantidad de compuestos slidos que los extractos
acuosos, lo cual tambin puede implicar que el contenido
de los extractos acuosos, no solo sea menor cuantitativa-
132
mente, sino que pueden contener menor variedad de los
componentes presentes en el material vegetal extrado.
Esto puede explicar la mayor actividad antibacteriana
encontrada en los extractos alcohlicos con respecto a
los extractos acuosos.
Solo el extracto etanlico de W. indica a la mayor
concentracin empleada (100 mg/mL) inhibi el creci-
miento de C. utilis. Esta especie fngica puede ocasionar
enfermedades infecciosas en pacientes comprometidos
o infecciones nosocomiales.16 Ninguna otra cepa fngica

fue afectada por efecto de los extractos evaluados.
De las 25 bacterias, solo siete fueron susceptibles
frente a cada extracto, (28 %) aunque no fueron los mis-
mos cultivos para ambas plantas (Tabla 5). La menor
CMI del extracto de W. indica correspondi a Shigella
flexneri y Bacillus subtilis (12,5 mg mL1). Las restantes
CMI de este extracto fueron de 50 mg mL1. En todas las
cepas inhibidas con el extracto de A. farnesiana la CMI
correspondi a la mxima concentracin, al igual que la
CMB. El extracto de W. indica tuvo una CMB entre 50
y 100 mg mL1.
Otra especie de este mismo gnero como Walthe-
ria douradinha se utiliza tradicionalmente en Brasil,
Uruguay, Paraguay y Argentina como agente antiinfla-
matorio para las bronquitis, contra la laringitis y como
desinfectante para lavar heridas.15 No se encontraron
otros estudios sobre la actividad antimicrobiana de
esta especie vegetal. Segn la encuesta realizada por
Avellaneda y cols.8
En Cuba, con las races de A. farnesiana se preparan
infusiones tiles en las inflamaciones tegumentarias,
oculares y de garganta.17 Los campesinos la emplean
como infusin en las conjuntivitis, diarreas crnicas y
hemorroides. Esta planta presenta una gran cantidad
de usos en medicina tradicional, tanto en Mxico, como
en otros pases16 algunos de los cuales pueden implicar
enfermedades infecciosas. Sin embargo, no se han
encontrado otros trabajos que validen las propiedades
antimicrobianas que se le atribuyen.
Los resultados de las pruebas realizadas, sugieren
la presencia de principios activos con actividad antimi-
crobiana in vitro en las races de ambas plantas, lo cual
explicara el uso de estas especies vegetales en medicina
tradicional.
La actividad antibacteriana hallada en estas especies
vegetales ofrece la posibilidad del empleo conjunto de
estos extractos y antibiticos convencionales, lo cual
potenciara el efecto antimicrobiano de acuerdo con
una actividad sinrgica, lo cual ha sido planteado por
algunos autores18 al emplear en conjunto otros extrac-
tos vegetales y antibiticos frente a cepas bacterianas
antibitico-resistentes.
La propiedad antidiarreica de las plantas medici-
nales es una accin que farmacolgicamente puede
deberse a causas diversas, como son la disminucin
del movimiento peristltico, la aglutinacin del bolo
fecal o la actividad antimicrobiana en s, por lo que son
necesarias investigaciones de laboratorio para definir la
accin especfica de los principios activos presentes en
los extractos vegetales.19,20
A pesar del amplio uso de plantas en medicina
tradicional en Mxico, existen muy pocos estudios so-
bre la inocuidad de su empleo, aspecto indispensable
para el buen uso de la medicina natural en los tiempos
actuales.21,22
CONCLUSIONES
Se detect la presencia de compuestos reductores,
saponinas, quinonas, flavonoides, cardiotnicos y fe-
noles o taninos o ambos en el extracto de W. Indica,
mientras en A. farnesiana se encontraron triterpenos y
esteroides, quinonas, fenoles o taninos o ambos y una re-
accin fuerte a la presencia de compuestos reductores.
Los extractos etanlicos de la raz de ambas plantas
poseen actividad antibacteriana in vitro sobre el 28 % de
los cultivos bacterianos evaluados y son ms activos que
los extractos acuosos. Esta actividad es bacteriosttica
y bactericida. El extracto de W. indica, presenta mayor
Revista CENIC Ciencias Biolgicas, Vol. 40, No. 2, 2009.
actividad que el de A. farnesiana. Solo el extracto eta-
nlico de W. Indica inhibi el crecimiento de la cepa de
C. utilis. No se detect actividad antifngica sobre los
otros cultivos fngicos.
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