UNIVERSIDAD NACIONAL DE INGENIERA

FACULTAD DE INGENIERA DE PETRLEO

GAS NATURAL Y PETROQUMICA

QUIMICA ORGANICA I (PQ-311)

Prctica Laboratorio N 7
Uso de un cromatgrafo de gases

1. INTRODUCCIN

En general la Cromatografa es una tcnica que abarca un conjunto importante y diverso de

mtodos, que permite a los cientficos separar componentes estrechamente ligados en mezclas
complejas, y que en muchas ocasiones resulta imposible resolver por otros medios. Se basa en las
diferentes interacciones entre un soluto, una fase estacionaria y una fase mvil.

Hay muchos tipos diferentes de cromatografa: De capa fina (TLC), Cromatografa de lquidos de
alta eficacia (HPLC), y de gases (GC). La cromatografa se aplica en muchos campos. Los
bioqumicos utilizan cromatografa lquida para separar protenas; los qumicos utilizan GC, TLC, y
HPLC para identificar compuestos orgnicos. Los cientficos forenses y otros especialistas usan la
cromatografa de gases para el anlisis de drogas, toxinas y anlisis del medio ambiente.

Todos los tipos de cromatografa utilizan los mismos principios que incluyen una fase estacionaria
y una fase mvil. La fase estacionaria es inmvil en la columna o en la placa y la fase mvil se
desplaza desde un punto inicial a un punto final. Los compuestos viajan desde el principio hasta el
final a una velocidad especfica en funcin de su afinidad que compite por la fase mvil (gaseosa o
lquida) frente a la fase estacionaria slida. Los compuestos se adhieren a la fase estacionaria a
travs de interacciones dipolo-dipolo, fuerzas de dispersin o de interacciones inicas.
2. PRINCIPIOS DE FUNCIONAMIENTO DEL MINICROMATGRAFO VERNIER

El Mini GC Plus Vernier est diseado para separar mezclas de gases o lquidos voltiles e
identificar los componentes de las mezclas por su tiempo de retencin especfico. El cromatgrafo
utiliza aire ambiental suministrado por una bomba para llevar una pequea muestra de vapor a
travs de una columna de acero inoxidable.

La columna es una columna capilar con una fase estacionaria no polar de 11 m y 0,53 mm de
dimetro interno de propsito general de marca Restek (MXT-1).

Fase estacionaria no polar (polidimetilsiloxano)

La columna se calienta usando una corriente elctrica. La temperatura de la columna se controla

por un detector de temperatura de resistencia incorporado (IDT) para medidas exactas de la
temperatura (la columna trabaja entre 30 C y 160 C). El conjunto de columna tambin tiene un
termistor independiente para proteger contra el sobrecalentamiento.

Al final de la columna est el detector que es un sensor quimiocapacitivo de Seacoast Science. El

sensor es un chip sensor micromecanizado recubierto con un polmero quimioselectivo. El
polmero absorbe los analitos que salen de la columna. La absorcin del analito por el
recubrimiento de polmero es medido por el circuito detector.

Una muestra que consta de uno o ms compuestos se inyectan en la columna y es arrastrada por
el aire atmosfrico, que es la fase mvil. Los compuestos orgnicos que fluyen hacia la salida de
la columna de cromatografa se registran como un pico en un cromatograma, como se muestra en
la figura siguiente. El tiempo que necesita un compuesto especfico para salir de la columna (y ser
detectado) despus de que se inyecta se llama tiempo de retencin, y es un tiempo caracterstico
y nico para el compuesto en determinadas condiciones de trabajo. Con un equipo de GC, un
compuesto puede ser identificado a partir de una mezcla de compuestos por medio de su tiempo
de retencin.
 Cromatograma de una muestra

Varios factores pueden afectar el tiempo de retencin de un compuesto. Por ejemplo: Dados dos
compuestos del mismo grupo funcional, el ms voltil (es decir, el compuesto con un punto de
ebullicin ms bajo) se mover a travs de la columna ms rpido debido a que est fluyendo en la
fase mvil ms rpidamente. Los grupos funcionales presentes en el compuesto son tambin un
factor importante. Por ejemplo, los alcoholes pueden interaccionar con una fase estacionaria
polar, por lo que interactan ms fuertemente que los steres, porque los alcoholes son capaces
de formar enlaces de puente de hidrgeno, entonces, entre un alcohol y un ster de similares
masas molares, el alcohol demorar ms en salir (tiempo de retencin mayor). El peso molecular
de un compuesto tambin puede jugar un papel en pequea medida, a pesar de que no exista una
relacin directa entre la masa molecular y el tiempo que tarda en viajar a travs de una columna
de GC.
 En este experimento, usted se ver inmerso en el proceso de identificar una o ms especies
desconocidas usando la cromatografa de gases. En primer lugar, usted practicar realizando un
cromatograma de gases probando varias sustancias conocidas. Luego usar esta informacin para
identificar las sustancias presentes en una muestra de mezcla desconocida.

3. MATERIALES
LabQuest o computadora etanol
LabQuest App o Logger Pro acetato de etilo
Vernier Mini GC Metanol
Jeringa de vidrio de 1 L 4-metil-2-pentanona
Papel Tisuue, tejido sin pelusa o papel absorbente Mezcla desconocida

4. EJERCICIOS PRE-EXPERIMENTACIN
Complete la tabla de abajo. Esta informacin es un punto de partida comn para la comprensin
del comportamiento de un conjunto de sustancias a ser analizadas por cromatografa de gases,
que se pueden encontrar en una mezcla. Para cada sustancia identificar su familia orgnica:
alcano, alqueno, alcohol, aldehdo, ster, ter, cetona, etc.

Compuesto Temperatura de Masa Molar Grupo Funcional

Ebullicin (C) (g/mol)
Metanol
Etanol
Acetato de etilo
4-metil-2-pentanona

5. PROCEDIMIENTO

Parte I: Prueba para compuestos conocidos

1. Obtener una jeringa de vidrio as como un set de viales que contienen las cuatro sustancias
conocidas. Use el metanol para limpiar la aguja de la jeringa.

2. Prepare el Mini GC Vernier para la recoleccin de datos:

a) Encienda el Mini GC.

b) Conecte el mini GC al puerto USB de su ordenador.
c) Inicie el programa de recoleccin de datos y a continuacin elija Nuevo en el men Archivo.
d) Para abrir el perfil de Temperatura-Presin, haga click en Tomar datos .
e) Establezca los valores de Temperatura-Presin a:

Temperatura inicial 35C

Tiempo de mantenimiento 1 min

Rampa de calentamiento 10 C/min

Temperatura final 65C

Tiempo de mantenimiento 6 min

Tiempo de la corrida 10.0 min

Presin 4.0 kPa

f) Seleccione Aceptar para iniciar el Mini GC mientras calienta. Cuando el Mini GC est listo para
la inyeccin, en el paso 6, aparecer una ventana con el mensaje: "Inyectar y Recoger al
mismo tiempo", y el LED se iluminar en verde. Contine con el paso 3 durante el
calentamiento.

3. Siga estos pasos para limpiar y lavar la jeringa con metanol. Importante: La jeringa de vidrio es
frgil, tenga cuidado de no doblar la aguja o doblar el mbolo. Nunca tire del mbolo ms de 50%
de su volumen total. Tenga cuidado de no doblar el pistn a medida que lo presiona al momento
de la inyeccin.
a) Presione el mbolo completamente.
b) Sumergir la punta de la aguja de la jeringa en el vial de metanol.
c) Tire del mbolo para llenar la jeringa aproximadamente con 1/3 de metanol.
d) Expulsar el lquido sobre una toalla de papel.
e) Repita los pasos del a-d, al menos dos veces hasta que se sienta familiarizado con el
proceso de recoleccin de lquido en la jeringa y la medicin del volumen del mismo. Use
una toalla de papel para secar cuidadosamente alrededor de la punta de la aguja de la
jeringa.

4. Siga el proceso en el paso 3 para limpiar y lavar la jeringa con el lquido a analizar.

5. Recolecte cierto volumen del lquido a analizar para la inyeccin.

a) Sumerja la punta de la aguja dentro del vial del lquido a analizar.

 b) Medir 0.10 L de lquido. Es importante que el volumen est muy cercano a los 0.10 L
y que se inyecte el mismo volumen para cada muestra.
c) Despus de recolectar datos, secar suavemente la aguja con papel toalla.

6. Preprese para la inyeccin e inicio de recoleccin de datos:

a) El mini GC debera de haber llegado a la temperatura inicial y

presin adecuada y la luz LED debera estar en verde.
b) Para insertar la aguja de la jeringa en el puerto de inyeccin,
sostenga la jeringa con una mano y la aguja con la otra como se muestra en la
figura 2. Inserte la aguja en el puerto de inyeccin, hasta que el tope de la
misma se encuentre bien asentada. Si la aguja sobresale, gire la jeringa
mientras la inserta. No presione el mbolo mientras realiza esta accin.
c) Presione el mbolo y seleccione Tomar datos, simultneamente
para iniciar la recoleccin de datos. Una vez descargado todo el contenido,
retire la jeringa del puerto de inyeccin.

7. Mientras la recoleccin de datos se lleva a cabo, repita el paso 3 para

limpiar a fondo la jeringa y la aguja con el siguiente compuesto. Al momento Figura 2
de introducir el compuesto, notar que el desplazamiento del mbolo en la
jeringa se torna ms difcil. Puede tardar ms de 3 enjuagues sentir el movimiento del mbolo de
la jeringa sin problemas de nuevo, que ser nuestro indicador de que se limpi correctamente la
aguja y la jeringa.

8. La recoleccin de datos terminar despus de 10 minutos. Usted puede detener la recoleccin

antes, si tiene la certeza de que toda la muestra inyectada ha pasado por el detector.

9. Determine el tiempo de retencin de su cromatograma:

a) Elija Integracin de picos (peak integration) en el men de anlisis.
b) Seleccione e integre un pico. Para ello, arrastre desde un punto antes a la izquierda del
pico hasta lo suficientemente a la derecha que incluya toda la cima del pico. Seleccione Aadir.
c) Guarde el tiempo de retencin mostrado en su tabla de datos.

10. Repita los pasos anteriores con las otras muestras conocidas.

11. Repita los pasos anteriores con la mezcla de concentracin conocida, pero en este caso anote
las reas debajo de cada curva.
Parte II: Prueba para la mezcla desconocida:

1. Repita los pasos anteriores con la muestra desconocida. Determine los tiempos de retencin y
las reas de cada pico. Determine la identidad de las sustancias que componen la mezcla y su
concentracin por comparacin de reas.

2. Despus de haber completado la prueba de la mezcla desconocida, guarde el archivo para

usarlo en otro momento. Guarde el archivo en una unidad flash USB, ordenador segn las
indicaciones del instructor.

3. Apague el Mini GC, mantenga los resultados del experimento abierto en una ventana del
software ya que tendr que hacer referencia a los diferentes cromatogramas para responder a las
preguntas de anlisis de datos.

6. TABLA DE DATOS:

Compuesto Tiempo de Retencin

(min)
Metanol

Etanol

Acetato de etilo

4-metil-2-pentanona

Mezcla conocida Tiempo de Retencin rea

(min)
Etanol

4-metil-2-pentanona

Mezcla desconocida Tiempo de Retencin rea Concentracin

(min) calculada
7. TEMAS DE INVESTIGACIN

a) Principios de cromatografa
b) Partes de un cromatgrafo
c) Tiempo de retencin como criterio de identificacin. Factores que influyen.
d) Integracin de reas