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Cada TCR possui um sito de reconhecimento que diferente pra cada clula!
CD4 e CD8 so ptns de membrana e funcionam como co-receptores (auxiliar, mas fazem parte
da resposta).
Como vc faz uma clula ir pra algum lugar? via quimiocinas e receptores!!
Pq a gente no responde toda hora contra a gente? Pq a clula dendritica precisa ter entrado
em contato com um patgeno, precisa ser estimulada por um PAMP para conseguir ativar o
linfcito T, ela no se liga em qualquer coisa.
Vrias regies vo estar em contato com antgenos mucosas (microbiota), intestino (ptns da
dieta).
Clulas M transcitose
Clulas dendrticas captam para apresentar
Uma alternativa da gente apresentar antgeno sem ser pela via da mucosa: por meio de um
corte; vetor invasivo
A clula dendritica imatura tem pouca expresso de MHC de classe II; quando entra em contato
com um patgeno, aumenta o MHC de classe II.
Relembrando
MHC de classe II via endoctica fagocita processa encontra o MHC de classe II e apresenta
para a clula TCD4.
MHC de classe I (intracelular) via proteassoma vai para o reticulo via TAP se liga no MHC de
classe I e apresenta para o TCD8.
Se voc tiver uma clula dendritica apresentando e no tiver as molculas co estimuladoras,
voc no tem a proliferao de clulas. E vai induzir anergia faz com que o linfcito deixe de
ser funcional, ou seja, ele no vai responder mais.
ATIVAO.
O que poderia acontecer para essa clula que estava no G0 sem se dividir, passar a se proliferar?
Fator de crescimento; voc precisa que essa clula seja estimulada a proliferar; uma molcula
que faz essa clula proliferar; seria uma molcula autcrina, vc vai ter que estimular ela a se
ativar e ela mesma vai produzir molculas que vo fazer ela proliferar.
Quando a clula dendrtica ta ativada ela expressa molculas que facilitam a adeso; por isso se
chama de sinapse imunolgica pq a adeso intensa para que voc possa sinalizar para
aquela clula!
Toda cascata de sinalizao tem que gerar segundos mensageiros que so molculas que
amplificam o sinal e induzem fatores de transcrio que vo para o ncleo e estimulam a sntese
de molculas (no caso citocinas) que dependendo da quantidade vo ativar ou no a clula.
Vc tem duas clulas que esto l, que primeiro vo se aderir por molculas de adeso, se isso
tiver condies vai estimular a interao. Tendo o primeiro sinal, o TCR se ligou no MHC de
classe II e o CD4 se ligou no MHC de classe II, ento o que acontece??? Vai acontecer a
fosforilao dos motivos ITAMs ou seja, vai ter ativao do complexo!!!!
IP3
Estimula o fluxo de clcio vai abrir os canais de clcio vai aumentar o clcio extracelular
ativar calcineurina vai desfosforilar a NFAT. Ou seja, vai ativar a NFAT.
OPA!!!!! O que a NFAT? Um fator de transcrio! Ele vai para o ncleo ativar transcrio.
DAG
Ativa a ptn G gera RAF que gera MEK que gera ERK (RAF MEK ERK). ERK fator de
transcrio e ativa a AP-1 que tambm um fator de transcrio vai atuar no ncleo.
Outra forma:
quando vc ativa o DAG vai ter uma cascata que vai degradar os inibidores de NFKB que vai
liberar ele de forma ativa e ele vai poder ir para o ncleo.
3 fatores de transcrio: NFAT, AP-1 e NFKB. Eles atuam no ncleo na ativao da transcrio de
alguma coisa, o que? Um fator para estimular proliferao daquela clula. Os 3 so fatores de
transcrio para uma mesma molcula: citocina IL-2!!
IL-2 um fator de proliferao de linfcitos. Se vc pega um linfcito e joga IL-2 com uma
pipeta vc vai estimular a proliferao dele.
Vai ter muito IL-2 disponvel? No. autcrino, o que ele produzir que vai interagir com ele.
Teve interao do 1 sinal, teve interao do 2 sinal, vc vai ativar a fosforilao. O CD28 ligando
no B7 vai ativar o que? NFKB e AP-1. Vo ativar a transcrio de IL-2.
NFKB e AP-1 aumentam em 3x a transcrio e aumenta a estabilidade do RNAm. O que isso
gera? Uma traduo 30x maior da citocina IL-2. Nesse momento vc vai produzir IL-2 suficiente
para tirar o linfcito do G0 e ir para o G1 e comear a proliferar.
No s ter IL-2, tem que ter IL-2 numa quantidade o suficiente para a clula produzir e se auto
ativar a uma resposta autcrina. Por isso a necessidade do 2 sinal, para produzir 30x mais IL-2!
**na realidade so muitos complexos TCR (no mnimo 10) se ligando no MHC+pep e essa
ativao fraqussima e geralmente no produz! Para ter uma resposta imune ativando o
linfcito T, precisa de 100 a 1000 MHC+pep se ligando ao TCR**
Clula dendritica apresentando para o linfcito T 1 e 2 sinal produo da citocina IL-2 ela
vai ser secretada e vai interagir no linfcito T. Ento o que o linfcito T tem que ter? Receptor
pra IL-2!!
O receptor do IL-2 tem 3 cadeias: alfa, beta e gama. Quando o linfcito T virgem, ele no tem
a cadeia alfa.
O que isso faz no receptor? Vc produz IL-2, a quantidade para ativar o receptor tem que ser
muito alta por isso vc precisa dos 2 sinais. Quando essa clula ativada pelo prprio IL-2 ele
auto ativa e passa a expressar a cadeia alfa. Isso aumenta a afinidade do receptor, ento uma
menor quantidade de IL-2 passa a ser suficiente para proliferar e sobreviver esse linfcito.
Pq interessante vc responder mal quando virgem e responder bem quando est ativado??
Voc precisa produzir muito IL-2 para ativar ento voc ta garantindo um controle que s
quando tiver o segundo sinal vc vai ter IL-2 o suficiente para ativar essa clula. um mecanismo
de controle que faz a dificuldade de ativar. Quando ativa, agora fica mais fcil sobreviver a essa
clula.
O linfcito j efetor, ele sai do linfonodo e vai l no stio da infeco (um macrfago, por
exemplo apresenta). Vai ter o MHC+pep que interage com o TCR daquele linfcito, ele vai
precisar do segundo sinal no sitio da infeco? No!! Pois ele j possui a cadeia alfa do receptor,
j tem afinidade bem alta pelo IL-2. S o 1 sinal gera capacidade suficiente para ele produzir
um monte de citocinas loucamente.
um processo totalmente evolutivo que dificulta ativar, mas que no final vai facilitar o
funcionamento. O nome dessa molcula CD25+
o CD25 um receptor que passa a ser expresso e aumenta a afinidade pela IL-2 que aumenta
muito mais a sobrevivncia. crucial pq no futuro quando vc tiver apresentao, vc s precisa
de um sinal pra que isso gere resposta, vai precisar de muito menos IL-2; e vai sobreviver mais
fcil, proliferar mais fcil.
Resumindo a primeira parte da aula
tudo o que foi dito o que acontece na sinapse imunolgica: clula dendritica interagindo com
o linfcito para fazer a expanso de um clone patgeno-especifico. Essa interao tem que
produzir IL-2 para que autocrinamente ele possa ser ativado a proliferar.
Proliferou o linfcito...para que? O que esse linfcito faz?? Modula toda a resposta imune inata
atravs da produo de citocinas, tanto que antigamente as citocinas eram chamadas de
LINFOCINAS.
Se a funo do linfcito produzir citocinas, o que tem que acontecer para a gente poder
responder contra diferentes patgenos? (Ajudar no combate de um vrus e no de uma bactria,
por exemplo) produzir diferentes citocinas pois diferentes citocinas possuem diferentes funes.
por isso que vc responde contra vrus em uma, contra bactrias extracelulares em outras.
DIFERENCIAO.
Os linfcitos podem virar subpopulaes pequenos grupos que existem dentro do grupo
TCD4.
Qual a diferena do linfcito th1 para o linfcito th2 ? A citocina que cada um produz!!!
Como uma clula T pode virar qualquer uma dessas 4 subpopulaes? Atravs da citocina (que
vai estar sendo secretadas pela clula dendrtica) presente no microambiente.
Ou seja, dependendo da citocina que vai ser produzida, vai levar ao estmulo para a clula T se
diferenciar.
O 3 sinal a citocina que secretada pela clula dendritica que vai se ligar no receptor e ele
quem vai estimular a diferenciao do linfcito T.
Clula dendritica clula educadora, pois ela quem decide, direciona o linfcito a ser th1,
th2 atravs da citocina que vai ser secretada.
Existem 2 citocinas que podem estimular o linfcito T a ser Th1: IFN Gama e IL-12 (secretada
pela clula dendrtica).
Ento pq o linfcito Th1 produz interferon gama? Porque ativa o T-bet que age no ncleo
produzindo interferon gama.
Ao mesmo tempo esse T-bet inibe a produo de IL-4. Quem que produz IL-4? O Th2! Ou seja,
comprova que quando tem Th1, no tem Th2 pois ela se auto regulam. Como? O prprio fator
de transcrio que ativa th1, inibe o th2.
Clula da imunidade inata que produz interferon gama: NK (natural killer). A gente pode ter
interferon gama no incio ajudando na diferenciao pra th1, mas quem geralmente vai estar
presente no incio a IL-12 pq a clula dendritica produz o IL-12.
**Uma clula que produza interferon gama tambm pode participar desse processo. No caso se
tiver interferon gama e ele se ligar no seu receptor, vai ativar a STAT1 que ativa T-bet
transcreve interferon gama e inibe th2.
No caso da leishmania: o linfcito vai produzir interferon gama, este tem um receptor no
macrfago. Quando o interferon gama interage com o macrfago, ele ativa o buster oxidativo
que a produo de NO e ROS. Ou seja, aumenta a respirao da clula. Se voc produz mais
NO e ROS, esse macrfago se torna matador. Ele no estava pronto para o macrfago de
verdade, mas quando voc coloca o interferon gama, a histria muda. Ao invs de produzir um
pouco de NO, vai produzir muito NO e muito ROS.
ou seja, a resposta adaptativa regula a imunidade inata. No caso do macrfago: aumenta a
capacidade de matar. E aumenta muito a capacidade de fagocitar, pois estimula a produo de
anticorpos do tipo igG (opsonizantes).
C57BL/6: quando infecta com a L major, vc tem a doena, mas ela resolvida pq ele produz
muito interferon gama que ativa o macrfago e mata via produo de NO;
BALB/c (albino): pssimo produtor de interferon gama, mas timo produtor de IL-4; ou seja, o
animal fica suscetvel e no resolve a infeco. A pata cresce at cair.
Isso ajudou pois se viu que no C57BL/6 tinha IFN gama KO: ai pegaram um
interferon gama e no BALB no, tinha IL-4. camundongo que era KO (knock out)
em interferon gama, a leso ficou
horrvel, o que mostra que o interferon
gama essencial pro controle da
infeco visto que ele vai ativar a
produo de NO e ROS no macrfago; a
enzima que induz essa produo a
iNOs (NO induzida), quando tem
interferon gama aumenta a expresso
dessa iNOs que produz mais NO
iNOs KO: se voc usa um KO pra iNOs
fica muito pior, pois no tem produo
de NO, ento a leishmania faz a festa;
IL-12 KO: clula dendrtica produz o IL-
12 que vai ativar o linfcito T virgem a
virar th1 que produz interferon gama
que vai ativar macrfago a produzir
NO; se vc usa um KO pra IL-12, no
ser gerada essa resposta.
Produz IL-4 e outra duas citocinas: IL-5 e IL-13. Mas a citocina que induz a diferenciao pra th2
a IL-4!!!
O IL-4 se liga no receptor de IL-4 que vai ativar o STAT6 (segundo mensageiro; porm tambm
um fator de transcrio). Este vai ativar o GATA3 que o fator de transcrio. Ele vai para o
ncleo ativando a transcrio das citocinas IL-5, IL-13 e IL-4 e tambm vai inibir a produo de
interferon gama pois se tem th2 no tem th1.
OBS.:( (Isso tudo acontece no linfcito, mas a citocina foi produzida pela clula dendrtica))
IL-4 e IL-13: produo de muco quando estamos gripados; aumentar a contrao muscular;
alergia; produo de igE
Th17
((Onde uma resposta th1 vai ter produo de IL-12? No linfonodo porque a clula dendrtica vai
produzir IL-12 para o linfcito virar th1. E no sitio da infeco o linfcito vai produzir interferon
gama.))
No microambiente ou na
clula dendrtica tem que
ter TGFbeta+IL-6 ou
TGFbeta+IL-21 pois so as
citocinas que fazem o
direcionamento pra virar
th17.
A cella dendrtica produz IL-6 e este se liga no receptor de IL-6 do linfcito e induz o segundo
mensageiro STAT3 vai estimular a produo de RORgamaT. O TGFbeta vai produzir
RORgamaT diretamente. O RORgamaT estimula a produo de IL-17 e IL-21 (ajuda na
diferenciao do linfcito).
Ao mesmo tempo no sistema tem que ter IL-23 que vai ativar a prpria STAT3 que estimula
RORgamaT.
O th1 e o th2 quando esto totalmente diferenciados, eles no mudam, vo ser th1 e th2 para
sempre. J a th17 no, se a IL-23 for retirada e for colocado IL-4, a clula vai se diferenciar pra
th2. Isso se chama fentipo frouxo.
Se for cortada a IL-23 e no for adicionada outra citocina, a cella vai ser uma m produtora do
seu fentipo de th17
Monoclonal anti-IL-23: vc bloqueia o IL-23 fazendo com que aquele linfcito deixe de ser th17 e
pode introduzir uma outra citocina para auxiliar na diferenciao do linfcito novamente.
Se vc bloqueia o IL-23, mas vc tem um ambiente que tem TGFbeta, voc gera possibilidade
dessa clula virar uma clula T reguladora (Treg) visto que o fator de induo desta
TGFbeta+IL-2. A Treg vai ser a clula que vai curar o dano que a th17 fez; se tiver muita Treg e
pouca th17 causa um descontrole da microbiota e se tiver muito th17 e pouca Treg doena
inflamatria.
Isso nos mostra que h um equilbrio entre elas e estas clulas so autorreguladas.
FUNES DA IL-17:
Sinergia com IL-1beta, TNF alfa, IFN gama gera alta resposta inflamatria e
consequentemente o recrutamento de clulas;
LOGO, a IL-17 (no caso a th17) SUPER INFLAMATRIA!!!! A principal funo a resoluo de
patgenos extracelulares pelo recrutamento de neutrfilos, impedindo que a microbiota
entre para dentro da clula
CLULA T REGULADORA.
Vc bota suas clulas na cmara e uma clula por vez vai passar por um laser; vc vai colocando
anticorpos ligados na clula que vo ter cores diferentes; PE (eixo y) representa a cor laranja e
V450 (eixo x) representa a cor roxa; se vc tem uma clula que laranja, ela vai estar pra cima do
lado esquerdo; as clulas que no so nem laranjas e nem roxas, vo ficar situadas no quadrante
debaixo no canto esquerdo; as clulas que so roxas ficam no quadrante debaixo no canto
direito; as clulas que so roxas e laranjas ficam no quadrante de cima do lado direito, e estas
so as positivas pra CD25 e FoxP3 (CD25+FoxP3+).
OBS.: quando o IL-2 ativa o linfcito T (cadeia alfa do receptor de IL-2), ele passa a expressar o
CD25 para ter alta afinidade pela IL-2 e no precisar de tanto IL-2 no sistema.
A clula Treg gerada no timo. Elas eram chamadas de clulas Treg naturais, porm esse nome
caiu e agora so chamadas de clulas Treg tmicas; elas j saem do timo como clulas
reguladoras. (J saem com o fentipo CD25+FoxP3+)
Uma clula virgem aquela que os fatores de transcrio so todos negativos. Ela sai do timo T-
bet -, GATA3-, RORgamaT- pois ainda no foi diferenciada.
DIFERENCIAO DE nTREG
Clulas que saram virgens do timo e esto na periferia (linfonodo); uma clula dendrtica se
tiver os fatores TGFbeta, IL-2, cido retinico (vem da vitamina A), vai gerar uma clula que
Treg induzida. Tem muito dessas clulas no intestino visto que l h muito cido retinico e este
um co-fator essencial para gerar clula Treg.
Precisamos ter mais clulas Treg no intestino pois toda hora estamos inserindo antgenos, ento
respostas Treg induzidas tem que ser geradas contra antgenos da dieta e da microbiota, se no,
no podemos comer. A gente pode comer e no morremos devido s clulas Treg, sem elas h
um desbalano, pois ela quem faz a gente no responder, no gerar inflamao de antgenos
que inseramos atravs da dieta.
Ao contrrio das clulas Treg tmicas que so produzidas no timo e so contra antgenos
prprios, as clulas Treg induzidas so induzidas em contato com o antgeno, principalmente no
intestino, ou seja, so antgenos no prprios (ou da dieta ou da microbiota).
*lembrando que a clula dendrtica para ativar precisa do MHC+pep na membrana e molculas
co estimuladoras, manter ela imatura significa no ter molculas co estimuladoras na
membrana, ento ela no ativa o sistema imune
O que precisamos saber: a clula Treg uma clula com alta capacidade de inibir a resposta
tanto do linfcito T quanto da clula dendrtica, gerando uma inibio da resposta imune
adaptativa.
Na vacinao a gente gera clulas multifatoriais, ou seja, que produzem mais de 1 citocina)
Esses perfis tm respostas
antagnicas e todos eles so
regulados, todos se inibem.
Quando ta expressando th17,
no vai gerar nenhuma outra
pois ela inibe as outas. Porm,
tambm existe a plasticidade!!
exatamente igual ao TCD4+; 1 sinal do MHC+pep ligado ao TCR; 2 sinal B7 CD28; 3 sinal
o interferon do tipo 1 e IL-12
Pq a evoluo colocou o interferon do tipo 1 para ser o ativador das clulas TCD8+? A clula
TCD8 citotxica, ela mata clulas tumorais ou infectadas com vrus. Todas infeces virais
induzem o interferon do tipo 1 (toll like receptors TLR3, TLR7, TLR8, TLR9, RIG) via TRIF.
Resumindo para o linfcito TCD8 matar ele tem que reconhecer o MHC de classe I+pep viral e
matar por via de induo apoptose!!
((existem clulas TCD8 reguladoras e supressoras porm como so pouco estudadas, no vai ser
cobrado))
PARA CLULA EFETORA: apresentao via TCR, porm no precisa do co-estmulo (2 sinal)
(ao contrrio da clula virgem que para se tornar efetora precisa do 2 sinal)