PRCTICA N 12

CITOGENTICA: ESTRUCTURA CROMOSMICA Y CARIOTIPO

OBJETIVOS:

1.- Observar y describir la morfologa de los cromosomas.

2.- Reconocer un cariotipo humano y los criterios de clasificacin.

MARCO TERICO

NIVELES DE ORGANIZACIN DE LA CROMATINA

Todo el material gentico existe como una masa compacta en un volumen relativamente reducido.
Esta caracterstica resulta primordial, ya que la longitud total extendida del ADN en una clula
humana es de unos 2 m, pero este ADN debe caber en un ncleo con dimetro de tan solo 5 m a
10 m.
Durante la interfase, que es la etapa ms larga del ciclo celular, la cromatina est sujeta a un grado
de empaquetamiento de unas 2000 veces, es decir, lo que en su estado natural ocupara un
tamao de 2000 mm se reduce a un tamao de 1 mm. Esto se consigue por la unin de la doble
hebra de ADN con unas protenas bsicas llamadas histonas, cuyos grupos positivos interaccionan
con los grupos negativos del esqueleto fosfato del ADN. Hay 5 tipos principales de histonas,
llamadas H1, H2A, H2B, H3 y H4, que se asocian entre s para formar un octmero: dos molculas
de H3 junto con dos molculas de H4 forman un tetrmero, y dos dmeros H2A/H2B forman otro
tetrmero; ambos tetrmeros se asocian para formar un ncleo proteico (octmero) alrededor del
cual se enrolla la molcula de ADN. En concreto, 146 pares de bases de ADN dan 1,65 vueltas
alrededor del octmero, y sobre este complejo se une la histona H1. Esta estructura, de unos 10 nm
de dimetro, es lo que se conoce con el nombre de nucleosoma, y es la unidad bsica de
organizacin de la cromatina.
Los nucleosomas estn unidos entre s por el filamento de ADN que se va enrrollando a su
alrededor, como bolas en una cuerda, y esto da lugar a la fibra de cromatina de 10 nm. En esta
estructura, unos 200 pares de bases ocupan 10 nm, lo que significa un grado de empaquetamiento
de unas 6 veces respecto al tamao lineal que ocupara un fragmento de ADN de esa longitud (200
X 0,34 nm = 64 nm).
En condiciones fisiolgicas, la fibra de 10 nm sufre un segundo grado de enrollamiento sobre s
misma para dar lugar a una estructura en forma de solenoide, con 6 nucleosomas por vuelta. Esta
configuracin constituye la fibra de 30 nm, en la que el grado de empaquetamiento del ADN es de
unas 40 veces. La fibra de 30 nm sufre diferentes grados de empaquetamiento durante interfase y,
especialmente, en la mitosis, donde la fibra de 300 nm se condensa para dar lugar a una estructura
de 600 nm de grosor (una cromtide) en la que el ADN alcanza ya un grado de empaquetamiento
de 10.000 veces y da lugar a las estructuras visibles que llamamos cromosomas.
 Figura 1.- Esquema de los diferentes grados de empaquetamiento de la cromatina

Los cromosomas: Morfologa

La entrada en fase M supone que la mayor parte de la cromatina, tanto eucromatina como
heterocromatina, pasar a formar los cromosomas. Cada cromosoma en metafase est formado por
dos cromtidas hermanas, que resultan de la replicacin del ADN durante la fase S y se mantienen
unidas por las condensinas. Esta unin entre cromtidas quedar posteriormente reducida a una
nica regin, la regin centromrica. Muchas de las especies animales que nos son comunes son
diploides, es decir, tienen dos copias de cada cromosoma (cromosomas homlogos) y son
portadoras por tanto de dos formas de cada gen, denominadas alelos. El cariotipo es el conjunto
completo de los pares de cromosomas de una clula tal y como aparecen en metafase. El nmero,
las formas y los tamaos de los cromosomas que forman el cariotipo son caractersticos para cada
especie, aunque existan excepciones. Hay dos tipos de cromosomas en un cariotipo: los autosomas
y los cromosomas sexuales. Mientras que los autosomas son los mismos en hembras y en machos,
los sexuales pueden ser diferentes. Por ejemplo, las hembras de los mamferos presentan dos
cromosomas X mientras que los machos presentan un cromosoma X y otro Y.

Tipos de cromosomas
Partiendo del centrmero, el cromosoma se divide en dos brazos y el lugar que ocupa el centrmero
es caracterstico de un determinado cromosoma. Los cromosomas metacntricos presentan dos
brazos de longitud similar, los submetacntricos tienen un brazo claramente ms corto que el otro.
En los cromosomas subtelocntricos o acrocntricos la diferencia en longitud de los brazos es mayor
que en los submetacntricos y en los cromosomas telocntricos uno de los brazos es muy corto o
inexistente, es decir, el punto de unin entre cromtidas hermanas est en el extremo de stas.
Un centrmero tpico aparece como una constriccin, denominada primaria, visible con el
microscopio ptico en los cromosomas en metafase de eucariotas superiores. Se podra definir una
constriccin primaria como un lugar del cromosoma donde no se pueden discernir las dos cromtidas
hermanas y en el que ambas cromtidas son ms delgadas que en el resto del cromosoma. El
centrmero es una regin especializada del cromosoma, formada por cromatina menos condensada,
que dirige la segregacin de los cromosomas en la anafase. Esto es debido a que sobre l se
ensambla un complejo proteico, el cinetocoro, al que se unen parte de los microtbulos que
constituyen el huso mittico, posibilitando la correcta separacin de las cromtidas hermanas a polos
distintos durante la anafase.
Los telmeros son los extremos de la molcula de DNA que constituyen cada cromosoma, est
compuesto de secuencias repetidas de hexanucleotidos (TTAGGG), ricos en guanina y citosina,
protenas de enlace. Juegan un papel importante en la estructura y funcin de los cromosomas, cuya
misin es la de proteger las terminaciones cromosmicas de la degradacin, recombinacin y
fusiones.

El cariotipo
El cariotipo es el complemento cromosmico particular de un individuo y viene definido por el nmero
y morfologa de los cromosomas en la metafase mittica. En la especie humana la dotacin
cromosmica es de 2n = 46 (22 pares de autosomas y un par de cromosomas sexuales). Utilizando
tcnicas de tincin estndar los cromosomas aparecen uniformemente teidos en metafase y se
clasifican en 7 grupos de la A a la G atendiendo a su longitud relativa y a la posicin del centrmero
que define su morfologa. Los autosomas se numeran del 1 al 22 ordenados por tamaos
decrecientes y por la posicin del centrmero. Los cromosomas sexuales X e Y constituyen un par
aparte, independientemente del resto (por su tamao, el cromosoma X se incluira en el grupo C, y el
Y, en el grupo G). De esta forma el cariotipo humano queda constituido as:
 (Todos los cromosomas autosmicos estn ordenados en orden decreciente de tamao, excepto el
cromosoma 21 que ahora se sabe que es ms pequeo que el 22)

Sin embargo, atendiendo solamente a estos parmetros no es posible identificar inequvocamente

cada par de cromosomas. Para ello es necesario utilizar diferentes tcnicas de bandeo
cromosmico. Los distintos patrones de bandas que se consiguen son constantes y especficos de
cada tcnica y determinan la distribucin de regiones cromosmicas que se revelan positiva o
negativamente segn el mtodo utilizado.
El mtodo ms utilizado de bandeo es la tincin con quinacrina, un colorante fluorescente que
revela las bandas Q, el patrn de estas bandas Q, es caracterstico para cada cromosoma de una
especie y suministra una base para identificar cromosomas con rapidez y comparar los
cromosomas de una especie con la siguiente. Tambin se pueden descubrir alteraciones
cromosmicas como cambios en el patrn de bandas o para situar con precisin la posicin
ocupada por genes concretos en un cromosoma.

Clasificacin de los cromosomas

MATERIALES Y MTODOS:

MATERIALES:

Biolgico
o Laminillas
Equipos
o Laminas portaobjetos y cubreobjetos
o Microscopio ptico

ACTIVIDADES:

1.- Reconoce los distintos cromosomas y ordnalos formando el idiograma.

Despus realiza un informe por cada prueba indicando:
1. Sexo del individuo al que pertenece la fotografa del cariotipo.
2. Presencia o no de alguna anomala cromosmica, indicando el tipo.

Tabla de anomalas cromosmica

RESULTADOS
CUESTIONARIO

1.- Qu caractersticas permiten diferenciar unos cromosomas de otros?

2.- Qu clulas del organismo llevan el cariotipo diploide completo?
3.- Qu mecanismos cromosmicos producen anomalas del cariotipo humano?
4.- Segn la localizacin del centrmero que tipos de cromosomas existen?
5.- Qu pareces de cromosomas presentan satlites?