Dinmica de la produccin en un cultivo de rosas.

Deteccin de virus en la variedad Gran Gala

A. de L Avila1, S. M. Pereyra1, R. Haelterman2, F. Giolitti2, S. de Breuil2, N. Meneguzzi2, C.

Perotto2, V. Conci2, S. Lenardn2 y L. Conci2
1
Area de Floricultura, Facultad de Ciencias Agropecuarias, Un. Nac. de Crdoba. Avda.
Valparaso S/N Ciudad Universitaria. CC 501. 5000 Crdoba.
2
Instituto de Fitopatologa y Fisiologa Vegetal. IFFIVE INTA.
E-mail: flores@agro.uncor.edu

Introduccin

La rosa es una de las flores ms consumidas a nivel mundial, junto a crisantemo y

clavel (Galinsky, 1996). Este cultivo se caracteriza por su elevada especializacin, alto nivel
de inversin y produccin con una vida til de 6-7 aos (Zieslin, 1998). Las causas que
determinan la vida til del cultivo estn relacionadas con el envejecimiento de los clones
(Trippi, 1982) y el estado sanitario, en especial la presencia de enfermedades virales
(Pataky, 1998). Sin embargo, no se conoce la dinmica de productividad a travs de los
aos de las variedades cultivadas en nuestras condiciones agroeclogicas.
Las enfermedades virales y los llamados amarillamientos son comunes en el cultivo
de rosa, donde todos los genotipos han demostrado ser susceptibles en mayor o menor
grado. Algunas de estas virosis causan serios daos y otras slo un retardo en el
crecimiento normal de la planta y suelen pasar inadvertidas por la presencia de sntomas
muy suaves. Los virus que afectan el cultivo de rosa son principalmente de los gneros
Ilarvirus y Nepovirus (Fulton, 1970, 1972; Moury et al, 2001; Ikin and Frost, 1976 y Mc Daniel
et al., 1971). Tambin se ha demostrado la presencia de fitoplasmas en plantas de rosa con
sintomatologa de malformacin y proliferacin de hojas y flores, achaparramiento general
de la planta y amarillamiento (Kaminska et al., 2001).
El objetivo de este trabajo fue evaluar la productividad de la variedad de rosa Gran
Gala en un cultivo con 3 densidades de plantacin, durante 5 aos y determinar la
presencia de enfermedades asociadas que pudieran explicar la dinmica de dicha
produccin.

Material y mtodos

Se trabaj con plantas de rosa del cultivar 'Gran Gala' implantadas en julio del ao
2000 (Meilland Star Rose). Las plantas se cultivaron en un invernculo tipo capilla en
una superficie de 200 m2, ubicado en el campo escuela de la Facultad de Ciencias
Agropecuarias de la UNC (31 LS). El cultivo se condujo segn lo descripto por Pereyra et
al. (2003).
La variedad 'Gran Gala' fue implantada con 3 densidades: 12.5, 14 y 17.5 plantas/m 2
de cantero. Se evalo: la dinmica de la produccin, como flores por m2/ ao, durante 5
aos y en el 5 ao de implantado, la presencia de patgenos como virus y fitoplasmas,
mediante a) ensayos serolgicos y b) reaccin en cadena de la polimerasa.
Para evaluar productividad, el diseo experimental fue completamente aleatorizado,
se trabaj con 30 repeticiones y la unidad experimental la constituy una planta. El anlisis
estadstico se realizo utilizando el programa INFOSTAT (2002).
Para evaluar la presencia de virus y fitoplasmas, se colectaron 20 plantas que
presentaban sintomatologa sospechosa de infeccin. Cada planta muestreada fue
etiquetada, se extrajo una hoja basal, una media y una apical y todo el material se conserv
a 4 C hasta su procesamiento.
a) Ensayos serolgicos para la deteccin de virus.
A los fines de realizar una primera aproximacin de las entidades virales presentes
en el cultivo, se hicieron determinaciones utilizando antisueros comerciales, y de produccin
local, mediante la tcnica de ELISA segn protocolo de Clark y Adams (1977). La
concentracin utilizada de cada reactivo fue la sugerida por la firma proveedora. Se
utilizaron antisueros anti-potivirus general (Adgia); anti- Prunus Necrotic Ring Spot Virus
(PNRSV) de Adgia; anti- Apple Mottle Virus (ApMV) de Adgia; anti- Cucumber Mosaic Virus
(CMV), anti- Strawberry Latent Ring Spot Virus (SLRSV) de Adgia.
Se tomaron hojas y pecolos de las muestras sintomticas y se molieron en buffer
extraccin en una relacin 1/5 p/v. En todos los casos se us como testigo sano, en varias
repeticiones por placa, plantas de rosas asintomticas.. La prueba se realiz sobre placas
de poliestireno de fondo plano y cuantific mediante la lectura en lector de ELISA a A 405. Se
consideraron enfermas aquellas plantas cuyos valores de absorbancia superaron la media
de los testigos sanos ms dos veces su desvo estndar.

b) Reaccin en cadena de la Polimerasa para la determinacin de fitoplasmas

Para la deteccin de fitoplasmas se us la tcnica de PCR de acuerdo a Lee et al.
(1998) utilizando primers universales P1/P7 (Smart et al., 1996). El ADN de las plantas
sintomticas, y de la sana como control, se realiz mediante el protocolo original de Doyle y
Doyle (1990). El producto de PCR se corri en geles de agarosa y se visualiz en
transiluminador bajo luz UV

Resultados y discusin

Dinmica de la productividad. La densidad de plantacin modific la produccin de flores

por unidad de superficie durante los 5 aos evaluados (Fig 1).
La mayor productividad se alcanza con
densidades de 14 y 17.5 pl/m2, sin
diferencias significativas entre ellas.
Esto acuerda con otros autores (Pereyra
et al., 2003) y permite concluir que la
densidad de 14 pl/m2 es la que mejor se
adapta a las condiciones agroecolgicas
descriptas.
En las tres densidades de plantacin, la
productividad del cultivo fue en
Fig. 1. Dinmica de la produccin mensual de flores /m 2 incremento durante los dos primeros
en plantas de rosa de la variedad 'Gran Gala' aos a partir de los cuales comenz a
implantadas con una densidad de 12.5 (), 14 (), y declinar (Fig.1). Estos resultados
17.5 () plantas por m2, durante 5 aos de cultivo.
sugieren que la dinmica de la
produccin es independiente de la
densidad de plantacin y podra estar
asociada a la presencia de agentes
biticos o a la gentica varietal.
Deteccin de virus y fitoplasmas. Todas las muestras probadas, en los ensayos
serolgicos contra los antisueros CMV y SLRSV, mostraron valores de absorbancia por
debajo del lmite establecido para considerarlas como enfermas, lo que permite suponer que
estas entidades virales no se encuentran en las muestras ensayadas. La prueba de PCR
tendiente a detectar la presencia de fitoplasmas tambin fue negativa. Sin embargo se
planea una variante (PCR-anidado), sobre las mismas muestras, para aumentar la
sensibilidad de la tcnica y descartar la posibilidad de que este tipo de patgenos est en
muy baja concentracin, y no hubieran sido detectados por metodologa estndar.
Por otra parte, en dos muestras que mostraron pequeos puntos clorticos en la
lmina foliar (Fig. 2) se observaron valores por encima del lmite de corte con el antisuero
contra potivirus, lo que podra indicar la presencia de este gnero viral en las
plantas.probadas. El reactivo utilizado es capaz de reconocer miembros del gnero
Potyvirus, pero no identifica especies, por ello se continuar trabajando para corroborar la
presencia de un potivirus en estas plantas y en la identificacin especfica del mismo.
El suero anti PNRSV reaccion positivamente con tres de las muestras probadas y
con valores muy altos de lectura, lo que permite suponer una alta concentracin viral en las
muestras, si bien los sntomas que induce este virus suelen ser suaves e incluso las plantas
infectadas pueden mostrarse como asintomticas. Una planta con sntomas de mosaico y
clorosis internerval (Fig. 3) se detect como positiva con el suero contra el ApMV.
Para poder asociar los sntomas observados con cada virus en particular se deben
repetir las pruebas y corroborar que cada planta sintomtica se encuentra infectada
nicamente por una especie viral.
Estos resultados preliminares sugieren que este lote de produccin de rosas se
encuentra infectado con al menos tres virus diferentes. Se deben continuar los estudios para
confirmar estos datos mediante la aplicacin de otras tcnicas, para lograr la completa
identificacin de cada uno de ellos y su posterior caracterizacin. Una vez identificadas las
virosis, se podr comenzar a evaluar la incidencia que estas entidades virales pueden llegar a
tener sobre los diferentes parmetros productivos de esta especie y si estn asociados a la
reduccin paulatina del rendimiento observado en el cultivo.

Fig. 2: Foliolo de una planta de rosa mostrando Fig. 3: Foliolo de una planta de rosa mostrando un
pequeos puntos o crculos clorticos y clorosis claro mosaico clortico internerval, asociados a la
en la base, asociados a la presencia de un presencia de un Ilarvirus (ApMV).
Potyvirus mediante una prueba positiva de ELISA.

Bibliografa

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