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MARCHA FITOQUMICA PRELIMINAR EN LA DETERMINACIN DE LOS

CONSTITUYENTES QUMICOS DEL PION POR PRUEBAS DE


COLORACIN

I. INTRODUCCIN

La medicina ha utilizado una gran variedad de plantas medicinales para desarrollar


medicamentos altamente efectivos contra diversas enfermedades, los cuales hubieran
sido difciles de encontrar sin los conocimientos que ofrece la medicina tradicional; as,
alcaloides importantes como atropina, morfina, estricnina son biosntetizados por las
especies Atropa belladonna, Papaver somniferum y Strychnos nux-vmica,
respectivamente (Adams, 1986).

La organizacin mundial de la salud estima que en muchos pases desarrollados el 70-


80% de la poblacin ha usado de alguna forma la medicina tradicional; adems, en
algunos pases asiticos y africanos el 80% de la poblacin depende de la medicina
tradicional para la atencin primaria de su salud (OMS, 2008).

Los antioxidantes naturales presentes en las plantas han cobrado gran inters en las
ltimas dos dcadas puesto que el estrs oxidativo (un desbalance entre las sustancias
oxidantes y prooxidantes) est implicado en un gran nmero de afecciones de la salud.
Se ha demostrado que el dao oxidativo causado por los radicales libres est
relacionado con una amplia gama de enfermedades y desordenes incluyendo: fallo
cardaco, inflamaciones, cataratas, daos celbrales, entre otros (Youngson, 2003).

Adems, existe la hiptesis de que el dao oxidativo permanente est vinculado al


proceso de envejecimiento. Por ello, el suministro de antioxidantes exgenos podra ser
una alternativa importante en la prevencin y tratamiento de diferentes enfermedades
(Montoya et al., 2003).

Como consecuencia, las plantas medicinales y los compuestos antioxidantes presentes


en ellas han tomado un nuevo auge; en los ltimos aos, varios programas de
investigacin y estudios se han desarrollado con el objetivo de mantener viva la
tradicin herbolaria, para encontrar nuevos compuestos activos con propiedades
antioxidantes que acten contra diversas enfermedades para su uso posterior en
medicina moderna.
II. OBJETIVOS

Desarrollar en forma prctica la marcha fitoquimica en la determinacin de los


constituyentes qumicos del pin por pruebas de coloracin con la finalidad de
obtener resultados satisfactorios.
Distinguir y clasificar los diferentes metabolitos secundarios presentes en el tejido
vegetal por medio de pruebas qumicas de coloracin.

III. REVISION BIBLIOGRAFIA

Origen del pin


Es una oleaginosa de porte arbustivo con ms de 3500 especies agrupadas en 210
gneros. Es originaria de Mxico y Centroamrica, pero crece en la mayora de los
pases tropicales. Se le cultiva en Amrica Central, America del Sur, Sureste de Asia,
India y frica. La palabra jatropha proviene del griego iatrs que significa mdico y
troph alimento.
Nombre comn en distintos pases:
Pin, tempate, yupur, coquito, capate, pioncito, piol, pin botija, higos del duende,
barbasco, piones purgativos, higo de infierno, purga de fraile, tua tua, physic nut,
pinhao manso, pinparaguayo, pin de purga, pin de cerca, purgante de caballo,
manduigau, mandubigua, higo del infierno, purgueira, pinho cro, etc.
Taxonoma
- Reino: Plantae
- Sub reino: Tracheobionta
- Divisin: Magnoliophyta
- Clase: Magnoliopsida
- Sub clase: Rosidae
- Orden: Euphorbiales
- Familia: Euphorbiacea
- Gnero: Jatropha
- Especie: curcas Son parientes cercanos del pin, la higuerilla (Ricinus
comunis), la yuca (Manihot esculenta Crantz) y el rbol de hule (Hevea
brasiliensis).

Morfologa
Es un arbusto grande, de crecimiento rpido, cuya altura normal es de dos a tres metros,
pero puede alcanzar hasta ocho metros en condiciones especiales. El tronco presenta un
fuste ramificado a poca altura y una corteza lisa de madera suave, mdula desarrollada
poco resistente, de aproximadamente 20 cm de dimetro, de color blanco grisceo;
floema con largos canales que se extienden hasta las races, por los cuales circula el
ltex, jugo lechoso que brota con abundancia de cualquier herida
Botnica
Raz
La planta de pin posee races cortas y poco
ramificadas, normalmente cuando las plntulas
proceden de semilla se forman cinco races, una
central y cuatro perifricas (2 secundarias y 2
terciarias). En el caso de propagacin por material
vegetativo (asexual) la nueva planta no posee raz
pivotante y las races que se forman se insertan
superficialmente.

Hojas
Las hojas del pin son verdes, amplias y brillantes,
largas y alternas, en forma de palmas pecioladas, la
mayora de 716 cm de largo y de alrededor del mismo
ancho, con nervaduras blanquecinas y salientes en el
envs, casi glabras pero ms o menos pilosas debajo en
las nervaduras. Normalmente se forman con 5 a 7
lbulos acuminados, pocos profundos y grandes, con
pecolos largos de 10 a 15 cm. El pin es un rbol de
hojas caducas (caducifolio) de acuerdo con Corteso
(1956) e Brasil (1985) durante la poca de verano
(diciembreabril) en Yoro, es muy comn ver los tallos sin hojas.

Flores
La floracin es monoica, presentndose los rganos
masculino y femenino en la misma planta, las
inflorescencias se forman terminalmente en el axial de las
hojas en las ramas. Ambas flores, son pequeas (68
mm), de color verdoso amarillo en el dimetro y
pubescente. Cada inflorescencia cuajada muestra un
racimo de aproximadamente 510 frutos.

Fruto
Son cpsulas drupceas y ovoides con dimetro de 1.5 a 3.0
cm. Al inicio son carnosas, pero dehiscentes cuando se secan.
El desarrollo del fruto toma entre 60 y 120 das, por lo general
90, desde la floracin hasta la madurez de la semilla segn las
variedades, igualmente la reproduccin se detiene al inicio del
periodo de lluvias. Los frutos se presentan frecuentemente disparejos y, el crecimiento
de los frutos tardos comienza hasta despus de la maduracin de los frutos tempranos.

Comestible
Las semillas son purgantes, pero tostadas pierden parcialmente esa propiedad y suelen
comerla en algunas regiones de Mxico..
Medicinal
Se aplica localmente para tratamiento de algodoncillo, fuego labial y mal de boca, se le
atribuyen propiedades abortivas. Las hojas maceradas en aceite de ricino se utilizan en
medicina casera para apresurar la supuracin de los granos infectados.
Industrial
Tambin se usa para preparar barnices despus de ser quemado con xidos de hierro, o
como un excelente sustituto para aceites industriales. En Europa se usa en el hilado de
lana y manufacturas textiles.
Combustible
El aceite de la semilla es una fuente de energa renovable no convencional, de bajo
costo y amigable con el ambiente, adems de ser un sustituto para diesel, keroseno y
otros combustibles.
Componentes qumicos
El gnero Jatropha contiene: alcaloides, sapogeninas, taninos, esteres, toxoalbminas,
compuestos cianognicos. Adems, contiene aceites fijos, cidos grasos (palmtico,
oleico, linoleico, esterico). La presencia en la semilla de curcina, una albmina txica
termolbil, es la responsable de su elevada toxicidad. La semilla contiene minerales
como fsforo, calcio, sodio, potasio y magnesio. Las hojas presentan estigmasterol y
glicsidos ravonoides.
Estudios Qumicos
Las plantas y en general los seres vivos sintetizan diversos compuestos para su
funcionamiento (metabolitos primarios) como los aminocidos, carbohidratos, lpidos,
glicridos, cidos nucleicos, y compuestos que intervienen en sus interacciones
ecolgicas con el ambiente (metabolitos secundarios) como terpenos, compuestos
fenlicos, glicsidos y alcaloides. Estos metabolitos cumplen con funciones de defensa
contra predadores y patgenos, como agentes alelopticos (que son liberados para
ejercer efectos sobre otras plantas), para encantar a los polinizadores con sus bellos
colores o atrayendo a los animales que van a utilizar los frutos como fuente de alimento
y que contribuyen a la dispersin de las semillas.
Composicin Qumica de los Piones

- Agua 7%
- Hidratos de carbono 29% (fibra 6%)
- Lpidos 36%
- Protenas 26%
- Sodio 1 mg/100 g
- Potasio 600 mg/100 g
- Fsforo 400 mg/100 g
- Calcio 80 mg/100 g
- Provitamina A 9 mg/100 g
- Vitamina C 3 mg/100 g
- Vitamina B1 0,48 mg/100 g
- Vitamina B2 0,13 mg/100 g

IV. MATERIALES Y METODOS

Materiales en seco Material en fresco


Hojas de pion (6 u 8 hojitas). Hojas de pin
Alcohol 90. Alcohol 90.
Reactivo Wagner y Mayer. Reactivo Wagner y Mayer.
HCl 1%. HCl 1%.
Agua destilada. Agua destilada.
HCl concentrado. HCl concentrado.
Limaduras de Mg. Limaduras de Mg.
FeCl3. FeCl3.
Balanza analtica. Balanza analtica.
Bagueta. Tabla de picar.
Papel filtro. Cuchillo.
Vaso de precipitado de 50ml. Bagueta.
Papel filtro.
Tubos de ensayo.
Vaso de precipitado de 50ml.
Embudo.
Tubos de ensayo.
Estufa
Embudo.
Material en seco
Procedimiento

1. Unas 6 hojitas de pin fresca colocamos en la estufa a 84C por 24 horas hasta
que se sec por completo.
2. Convertir las hojas de pin a partculas pequeas utilizando presin manual, en
seguida pesamos y obtuvimos 3.0114g de ella y colocamos en un vaso de 50ml.
Y agregamos 30ml de solvente (alcohol de 90).
3. Maceramos por 10 minutos con agitacin utilizando una bagueta, dejamos en
reposo y luego filtramos en un matraz con un embudo y papel filtro.
4. Echamos el residuo y tomamos el extracto en solucin y dividimos en partes
iguales en 6 tubos deensayo.
5. Dos tubos de prueba son asignados para la determinacin de ALCALOIDES. Un
tubo de prueba para la determinacin de SAPONINAS, un tubo de prueba para
la de FENOLES y un tubo de prueba para la determinacin de FLAVONOIDES.
6. Para la determinacin de ALCALOIDES se utilizara los reactivos de Wagner
(7gotas) y Mayer (7gotas), haciendo la prueba por separado en cada tubo de
prueba las que tendrn previamente 1 gota de HCl 1%.
7. Para la determinacin de SAPONINAS, se agreg agua (obteniendo doble de
volumen) y sacudir por 30 segundos, si hay espuma y mantiene este tiempo hay
presencia de saponinas (las espumas pueden variar de lo ms mnimo a lo ms
abundante segn la muestra).
8. Para la determinacin de FLAVONOIDES, se empleara la prueba de SHINODA
que consiste en obtener la variacin de coloracin del extracto por efecto de la
siguiente reaccin:

2HCl (con.) + Mg (S) MgCl2 + H2

Donde el HCl (6gotas) concentrado reaccionara con una o 2 limaduras de Mg.


Que se colocara en el extracto para dar el producto.

9. Para la determinacin de FENOLES, bastara agregar 1, 2 o 3 gotas de FeCl3 al


extracto del tubo de prueba para observar la presencia de este metabolito, cuanto
ms gotas se tornara ms oscura.
10. Anotar los resultados en cada iteracin observando los colores que ocasionan los
metabolitos sealados.
Material en fresco
Procedimiento:
1. Convertir las hojas de pin a partculas pequeas utilizando una tabla de picar y
cuchillo, en seguida pesamos y obtuvimos 3.1368gr de ella y colocamos en un
vaso de 50ml. Y agregamos 30ml de solvente (alcohol de 90).
2. Maceramos por 10 minutos con agitacin utilizando una bagueta, dejamos en
reposo y luego filtramos dentro de un matraz con un embudo y papel filtro.
3. Echamos el residuo y tomamos el extracto en solucin y dividimos en partes
iguales en 6 tubos de ensayo.
4. Dos tubos de prueba son asignados para la determinacin de ALCALOIDES. Un
tubo de prueba para la determinacin de SAPONINAS, un tubo de prueba para
la de FENOLES y un tubo de prueba para la determinacin de FLAVONOIDES
y un tubo para testigo de la muestra.
5. Para la determinacin de ALCALOIDES se utilizara los reactivos de Wagner
(5gotas) y Mayer (5gotas), haciendo la prueba por separado en cada tubo de
prueba las que tendrn previamente 1 gota de HCl 1%.
6. Para la determinacin de SAPONINAS, se agreg agua (obteniendo doble de
volumen) y sacudir por 30 segundos, si hay espuma y mantiene este tiempo hay
presencia de saponinas (las espumas pueden variar de lo ms mnimo a lo ms
abundante segn la muestra).
7. Para la determinacin de FLAVONOIDES, se empleara la prueba de SHINODA
que consiste en obtener la variacin de coloracin del extracto por efecto de la
siguiente reaccin:

2HCl (con.) + Mg (S) MgCl2 + H2

Donde el HCl (6gotas) concentrado reaccionara con una o 2 limaduras de Mg.


Que se colocara en el extracto para dar el producto.

8. Para la determinacin de FENOLES, bastara agregar 1, 2 o 3 gotas de FeCl3 al


extracto del tubo de prueba para observar la presencia de este metabolito, cuanto
ms gotas se tornara ms oscura.
9. Anotar los resultados en cada iteracin observando los colores que ocasionan los
metabolitos sealados.
V. RESULTADOS Y DISCUCIONES

Resultados
Tabla N1: (muestra seca de hojas de pin)
Compuestos a Reconocer Aspecto Descripcin

Hubo cambio de color


amarillo verdoso
Mayer opaco quiere decir que
si hay presencia de
alcaloides

ALCALOIDES

Hubo cambio de color


amarillo opaco quiere
Wagner decir que si hay
presencia de
alcaloides

Se ha encontrado
cantidad regular de
formacin de espuma,
SAPONINAS por lo tanto la prueba
es positiva quiere
decir que si hay
saponinas.

La coloracin fue de
marrn rojizo, por lo
tanto la prueba fue
FLAVONOIDES
positiva si hay
presencia de
flavonoides.
Cambio brusco
Coloracin casi negro
intenso con tonos
FENOLES
marrones, quiere decir
que si hay presencia
de fenoles.

Tabla N2: (muestra fresca de hojas de pin)


Compuestos a Reconocer Aspecto Descripcin

Presenta una
coloracin amarillento
Mayer
verdoso suave, dando
positiva la reaccin.

ALCALOIDES
La coloracin ha sido
amarillo opaco, como
se muestra en la figura
Wagner es ms ntido de
observar que si hay
presencia de
alcaloides.
Se form espumas en
ms cantidad que el
SAPONINAS anterior quiere decir
que si hubo presencia
de saponinas

Se form amarillo
plido hay cambio de
FLAVONOIDES coloracin de la
solucin presencia de
flavonoides

Cambio de color a
verde petrleo quiere
FENOLES
decir que si hay
presencia de fenoles.
Discusiones
Durante el desarrollo de la prctica se determin los alcaloides, saponinas, flavonoides,
fenoles y testigo de la muestra.

Discutiendo los resultados entre alas hojas del pin seca y fresca el reconocimiento de
los compuestos fue mayor en el material fresco debido a la presencia de la clorofila y
otros compuestos que no han sido eliminados; como en el caso de los Alcaloides que
fueron mejor colorados en las pruebas de Wagner y Mayer en el material fresco, al
contrario que seco en el cual el reactivo de Mayer no tuvo la coloracin esperada. En el
caso de las Saponinas se ha visto ms de estas en el material fresco tambin y en
flavonoides y fenoles una mejor coloracin.

VI. CONCLUSIONES Y RECMENDACIONES

Conclusiones
- Podemos llegar a la conclusin de la forma ms eficiente de aprovechar las
propiedades medicinales de una planta, es en forma de extracto, Ya que est en
estado fresco y con todas sus componentes qumicas intactas. Adems de tener
la ventaja de saber que el extracto es exactamente lo que se est consumiendo y
para un determinado fin, y la cantidad necesaria. Cosa que no ocurre cuando
consumimos extracto crudo o sin ser procesados.
- Unas de las alternativas de cultivo puede ser el ajo sacha orientada al
procesamiento de productos naturales como extractos.

Recomendaciones
- Al momento de agregar solvente a la muestra se debe agitar el envase donde se
deposita para que tenga mayor concentracin
- Tener cuidado en el momento de la separacin del solvente que se realiza en la
mquina de rota vapor.
- Tener mucho cuidado al extraer los metabolitos para obtener un porcentaje de
rendimiento ms exacto ya que se pueden perder al exponer mucho al calor.

VII. BIBLIOGRAFIA

- MANUAL PARA EL CULTIVO DE PION (Jatropha curcas) EN


HONDURAS, Documento elaborado por el Centro de Comunicacin Agrcola
de la Fundacin Hondurea de Investigacin Agrcola (FHIA), Mayo de 2008.
- Alfonso, J.A. 2007. Proyecto Gota Verde, Propagacin de pin, 7 pp.
- EPAMIG. 2005. Informe Agropecuario, v. 26 n. 229, pp. 4478.
- Fernndez, R. 2004. Nicaragua Biodiesel: El milagro del tempate, n. 143, p. 23
26.
- Michel, J. 2004. Revista nicaragense de Entomologa, Insectos asociados a
algunos cultivos tropicales No 64, 242 pp.
- Padilla, D. y Monterroso, D. 2003. Diagnstico preliminar de enfermedades del
cultivo de Tempate (Jatropha curcas) en Nicaragua. Manejo Integrado de Plagas.
Turrialba, Costa Rica.
- Schmook, B.; Sanchz, S. 2005. Uso y potencial de la Jatropha curcas L. en la
Pennsula de Yucatn, Mxico.

VIII. ANEXOS

Hojas de pion secas


Hojas de pin frescas

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