Informe de Suelos Terminado

Ao de la consolidacin del Mar de Grau
15-04-16
FACULTAD DE INGENIERIA AMBIENTAL
ALUMNAS:
Bustinza Damiano, Roco
Gonzales Rosales, Brisayda
Huiza Acosta, Karen Briguit
Lzaro Mendoza, Carmen Janeth
Rocha Yupanqui, Ruth
DOCENTE:
Alexandra Muoz
MATERIA:
Microbiologa Ambiental
CICLO:
IV
LIMA, 2016
PRACTICA 9 Y 10. SUELOS
I. OBJETIVOS:
El objetivo principal del presente informe es el reconocimiento del crecimiento de

colonias bacterianas en los medios de cultivos de Agar casena (AC), Agar
Nutritivo (AN) y Agar Papa Dextrosa (PDA). En el caso de respiracin del suelo
se tiene como objetivo principal la determinacin de la concentracin de dixido
de carbono. Y como objetivos especficos se tiene los siguientes:
Aprender a comparar y diferenciar las colonias bacterianas de diferentes

muestras de suelo.
Aprender a diferenciar el crecimiento y el nmero de colonias bacterianas
en diferentes medios de cultivos.
Diferenciar la diversidad y la morfologa de colonias bacterianas de las
muestras de suelo limpio, suelo ms gasolina, suelo ms sulfato de
amonio, suelo ms sacarosa y suelo ms sulfato de cobre.
Aprender a comparar el tipo de colonia que creci en ms de un medio de
cultivo.
Aprender a calcular la concentracin de cido clorhdrico gastado, para
que a partir de ello calcular la concentracin de dixido de carbono.
II. MATERIALES
MATERIALES PARA SUELO
Audio y video.
Microscopios.
Pizetas con agua.
6 frascos de 100 mL (1 frasco para la primera prctica de suelos y 5
frascos para la segunda prctica.
Tubos de ensayo para dilucin seriada (6 en la primera prctica de suelos
y 15 tubos de ensayo para la segunda prctica.
Balanzas.
Esptulas.
6 agares PDA (2 en la primera prctica de suelos y 4 en la segunda
prctica).
6 agares casena-almidn (2 en la primera prctica de suelos y 4 en la
segunda prctica).
Coloracin de Gram.
2 Probetas de 100 mL.
21 Pipetas de 1 mL (6 en la primera prctica de suelos y 15 en la segunda
prctica).
5 Pipetas de 10 mL.
1200g de suelo (300 gramos para cada frasco).
30ml de sacarosa.
40ml de sulfato de cobre.
40ml de sulfato de amonio.
4ml de gasolina.
MATERIALES PARA CALCULAR LA RESPIRACION DEL SUELO
Para el sistema de la respiracin del suelo:

-2 botellas + 1 manguera delgada
-300g de suelo
-100ml de NaOH 1N
Para la titulacin:
-1ml de NaOH 1N
-9ml de agua destilada
-25ml de HCl
-2 gotas de fenolftalena.
MUESTRAS DE SUELO
III. METODOLOGIA
RECOLECCION DE SUELOS
Cada grupo recolecto una muestra de suelo obtenindose asi 5 muestras de suelos.
La muestra de suelo que recolectamos nuestro grupo fue de Villa II de la universidad Cientfica del Sur,
debajo de un rbol cercano a la laguna II.
PROCEDIMIENTO DE LABORATORIO
Luego se Se construy un sistema cerrado de tal modo

Por la tcnica de siembra
rotularon del que el dixido de carbono pase de una primera
por extensin, en un
1 al 6 los botella a una segunda botella ambos
frasco esterilizado se
tubos que conectados por una manguerita de pecera.
diluyeron 10 g de suelo en
contenan Luego se agreg 300 g de suelo a una de las
90 ml de agua destilada y
9ml de agua. botellas y 100 ml de hidrxido de sodio a la
se homogeniz.
siguiente botella.
Se agreg 1ml del homogenizado de suelo y

Se cortaron 4 botellas de 600 ml a la direccin
agua destilada al tubo 1, enseguida tambin se
de su hombro y en cada botella se agreg 300
homogenizo esta mezcla y se pas 1ml de este
g de suelo asimismo se agreg un
tubo 1 al tubo 2, continuamente del
contaminante lquido, hasta que el suelo
homogenizado del tubo 2 tambin de saco 1 ml
humedeciera, asi como se presenta en la tabla:
para el tubo 3 realizando diluciones seriadas
hasta el tubo 6. Botellas Suelo Contaminante
(g) (ml)
Una vez terminada las disoluciones seriadas, se
B 1 + CuSO4 300 40 ml
encendi el mechero y se sembr con la pipeta
0.3 ml del tubo 2 en cada uno de los agares de B 2 + Gasolina 300 40 ml
PDA (Papa dextrosa Agar: medio de cultivo para
aislamiento de hongos), AC (agar casena: medio B 3 + Sacarosa 300 30 ml
de cultivo para microorganismo en general) y
B 4 + Sulfato 300 40 ml
AN (medio de cultivo para microrganismos).
de Amonio
Con ayuda de la gasa esparcimos la solucin en

todo el agar, de igual manera tambin se hizo Una vez terminado el procedimiento se
para el tubo 6. Finalmente, se incub a 37,5 C llevaron las 4 botellas y el sistema de botellas
por 7 das. al invernadero por 7 das, para luego continuar
con el proceso.
Para los medios de cultivo de los agares se
describieron y analizaron los resultados de
Pasado los 7 das, se revisaron y analizaron los cantidad (conteo de colonias), diversidad
resultados de los agares y se continu con el (tipos de colonias) y por medio de la
procedimiento de las botellas. microscopia para observar la morfologa,
para ello se realiz coloracin gram.
Para el caso de las 4 botellas y el sistema de Para el caso del sistemas de botellas se determin
botellas se prepararon soluciones: por la tcnica de la respiracin por medio de titulacin, donde se
siembra por extensin en un frasco esterilizado se agreg en un vaso precipitado 2 gotas de
agreg 10 g de suelo de la botella 1 y 90 ml de agua fenolftalena, 1ml de hidrxido de sodio y 9 ml de
destilada, del mismo modo se hizo para el resto. agua destilada y se agreg 25 ml de cido
clorhdrico a la bureta, donde se esper que el cido
clorhdrico baje gota a gota al vaso precipitado
Luego se rotularon 3 tubos para cada botella,
hasta que se visualice un cambio de color, para el
siendo en total 15 tubos, al cual a cada tubo se
caso de nuestro grupo que fue suelo limpio sin
agreg 9 ml de agua destilada. Seguidamente se
ningn contaminante resulto el cambio de color a
agreg al tubo 1, 1 ml de la muestra del frasco,
0.8 ml de cido clorhdrico gastado. A partir de ello
luego se homogenizo este tubo y se pas 1ml al
se determin la concentracin de dixido de
tubo 2, nuevamente se homogenizo y se pas 1ml
carbono.
al tubo 3. Estas diluciones seriadas se realizaron
paras el caso de los tubos de los frascos restantes.
Aquel resultado fue para respiracin, mientras que
Luego se sembraron 0.3 ml de todos los tubos 3 en
se realiz nuevamente otra titulacin para la
los agares de PDA (Papa dextrosa Agar: medio de
muestra control donde se us las mismas
cultivo para aislamiento de hongos), AC (agar
concentraciones tanto de fenolftalena, como de
casena: medio de cultivo para microorganismo en
hidrxido de sodio, agua destilada y cido
general) y AN (medio de cultivo para
clorhdrico, mostrando como resultado que a la
microrganismos); obtenindose 15 agares en total.
gota nmero 38 se visualiz el cambio de color lo
que equivale a 2ml de cido clorhdrico gastado.
Una vez culminado el procedimiento se incubo a
37,5 C por 7 das, donde una vez pasado los 7 das
se realizaron la descripcin de los resultados de
los 15 agars en cuanto a la diversidad (tipos de
colonias), cantidad (nmero de colonias) y
morfologa aplicando coloracin gram.
IV. RESULTADOS
RESULTADO DE RESPIRACION Y TITULACION DE SUELOS
Suelo en diferentes Gasto de HCL para Concentracin

sistemas la titulacin de CO2
Y contaminacin
Suelo limpio 0,8 ml 0,36M de CO2
Suelo+ detergente 1 0,3ml 0,135M de CO2
Suelo+ detergente 2 0,2ml 0,09M de CO2
Suelo+ sulfato de 0,9ml 0,405M de CO2

cobre
CALCULOS
1. TITULACION SUELO LIMPIO

Sabiendo que la bureta contena 25 ml de titulante (HCL 1M) ;el matraz
contena 1 ml de NaOH que fue tomado despus de la interaccin del sistema
,mas 9ml de agua (total 10 ml )y aadimos 2 gotas de fenolftalena como
indicador reaccin cido y base.
HCL.Imol
NaOH ..1mol
GASTO HCL 0.8 ml
Ecuacin
NaOH+HCL---------Nacl+H2O
Calculando concentracin de NaOH Sabiendo que se gast 0.8ml de HCL
1 1 1 1000
0,8ml*1000* * *10* =0,08mol/L NaOH de la diluida
1 1
Para 1ml de NaOH que se diluyo en 9ml de agua destilada

0.009
0,08mol/L NaOH*0,001=0,72mol/L=0,72M de NaOH.
Calculando la concentracin de C02

Ecuacin
1 2
0,72 *2 =0,36M de CO2

2. TITULACION SUELO CONTAMINADO CON DETERGENTE 1

,mas 9ml de agua (total 10 ml )y aadieron 2 gotas de fenolftalena como
HCL.Imol
NaOH ..1mol
GASTO HCL 0.3ml
Ecuacin
1 1 1 1000
1 1
Para 1ml de NaOH que se diluyo en 9ml

0.009
0,03mol/L NaOH*0,001=0,27mol/L=0,27 M de NaOH.

Ecuacin
2NaOH+C02Na2CO3+H2O
1 2
0,27 *2 =0,135M de CO2

3. TITULACION SUELO CONTAMINADO CON DETERGENTE 2

HCL.Imol
NaOH ..1mol
GASTO HCL 0.2ml
Ecuacin
1 1 1 1000
1 1
Para 1ml de NaOH que se diluyo en 9ml

0.009
0,02mol/L NaOH*0,001=0,27mol/L=0,18 M de NaOH.

Ecuacin
2NaOH+C02Na2CO3+H2O
1 2
0,18 *2 =0,09M de CO2

4. TITULACION SUELO CONTAMINADO CON SULFATO DE COBRE

HCL.Imol
NaOH ..1mol
GASTO HCL 0.9 ml
Ecuacin
1 1 1 1000
1 1
Para 1ml de NaOH que se diluyo en 9ml de agua destilada

0.009
0,09mol/L NaOH*0,001=0,72mol/L=0,81M de NaOH.

Ecuacin
2NaOH+C02Na2CO3+H2O
1 2
0,81 *2 =0,405M de CO2

Conteo de colonias
UFC/g s.s. = (NC * 1/FD * 1/ V) / (P * FH).

Donde: UFC/ g s. s. = unidades formadoras de
colonias / g de suelo seco.
NC = nmero de colonias en una caja.
FD = factor de dilucin que corresponde a la
dilucin de donde se tom la muestra con la que se
inocula la caja (10-2 a 10-10).
V= volumen inoculado en la caja = 0.1 ml.
P = peso de la muestra hmeda = 10 g.
FH = factor de correccin de humedad (1-
(%humedad/100)).
Fig. 1 Contador de colonias
Suelo limpio
TUB NUMERO, DIVERSIDAD Y MORFOLOGIA DE

MEDIO DE CULTIVO
OS COLONIAS
TUB AC N: ms de 300 unidades formadoras de

O #2 colonias.
Diversidad: se visualiza 2 tipos de colonias.
Morfologa: la primera colonia presentaba
una morfologa filamentosa, esparcida, de
color beige y la segunda colonia presentaba
una morfologa puntiforme, elevada y de color
blanco lechoso.
PDA N: ms de 300 unidades formadoras de

colonias.
una morfologa filamentosa, irregular de color
beige. La segunda colonia presentaba una
morfologa puntiforme, convexa de color
blanco lechoso. La tercera colonia presenta
una morfologa puntiforme, plana, de color
amarillo. La cuarta colonia presenta una
morfologa puntiforme, elevada de color rojo y
la quinta colonia presentaba una morfologa
circular, plana de color blanco corrector.
AN N: ms de 300 unidades formadoras de

colonias.
una morfologa filamentosa, esparcida,
cremosa, de color beige y la segunda colonia
presentaba una morfologa ramificada, plana
y de color blanco lechoso.
TUB AC
O
N: 138 unidades formadoras de colonias.
#6 Diversidad: se visualiza 3 tipos de colonias.
una morfologa filamentosa, esparcida, seca
de color blanco. La segunda colonia
presentaba una morfologa puntiforme,
elevada, mojada y de color beige y la tercera
colonia presentaba una morfologa
puntiforme, convexa, de color amarillo.
PDA
N: ms de 300 unidades formadoras de

colonias.
una morfologa filamentosa, esparcida, de
color beige y la segunda colonia presentaba
una morfologa puntiforme, plana y de color
blanco lechoso.
AN N: ms de 300 unidades formadoras de

colonias.
una morfologa circular, plana, de color blanco
y la segunda colonia presentaba una
morfologa puntiforme, elevada y de color
beige.
Microscopia a (1000x) luego de coloracin Gram respectiva
Figura 2 : Probable Bacillus Figura 8 : Probable

sp. Gram (+) Pseudomonas sp.Gram (-)
En la imagen observamos En la imagen se observan bacilos

abundantes bacilos de color azul de color fucsia , por ellos son
violeta, por ellos son Gram Gram negativos.
positivos.
Figura 9 : Probables Bacillus Figura 10 : Probables

sp. Gram (-) Bacillus sp. Gram (+)
Aqu observamos una diversidad de Aqu observamos bacilos gordos de

bacterias, cocos Gram negativos por su color azul , por ello son Gram
color rosado, y tambin bacilos Gram positivos.
positivos de color azul.
Figura 11 : Probables
Figura 11 : Probables Bacillus sp. Gram (+)
Lactobacillus sp. Gram (-)
Aqu se observan abundantes bacillos
Observamos cadenas de bacilos rosados, por ellos Gram positivos debido a su color
son Gram negativos y probables lactobacilos que violeta
son fermentadoras den el suelo.
Suelo inoculados con un adicional durante una semana
Nmero de colonias: En cuanto al nmero de colonias, en todas las placas se

observaron ms de 300 unidades formadoras de colonias.
NUMERO, DIVERSIDAD Y
TUBOS MEDIO DE CULTIVO ADICIONAL
MORFOLOGIA DE COLONIAS
AC Diversidad: se visualiza
cuatro tipos de colonias.
Morfologa: la primera
colonia presentaba una
morfologa filamentosa,
SUELO +
TUBO #3 esparcida y de color beige ;la
GASOLINA segunda era puntiforme,
elevada y de color amarillo; la
tercera colonia era puntiforme
elevada y de color rojo y la
cuarta colonia era puntiforme
elevada, de color gris
PDA
Diversidad: se visualiza tres
tipos de colonias.
morfologa puntiforme,
elevada de color marrn claro;
la segunda colonia
presentaba una morfologa
irregular esparcida, plana, de
color blanco lechoso y la
, elevada y de color blanco.
AN
Diversidad: se visualiza dos

tipos de colonias.
morfologa irregular,
esparcida, plana, de color
blanco lechoso y la segunda
elevada y de color amarillo.
AC
Diversidad: se visualiza
cinco tipos de colonias.
elevada, de color blanco; la
segunda colonia presentaba
una morfologa puntiforme,
elevada, de color rojo; la
tercera colonia era
puntiforme, elevada, de color
gris en el centro con bordes
blancos; la cuarta colonia era
amarillo y la quinta colonia era
puntiforme elevada y de color
beige.
PDA SUELO + Diversidad: se visualiza dos

SULFATO tipos de colonias.
DE Morfologa: la primera
AMONIO colonia presentaba una
elevada, de color beige; la
TUBO una morfologa circular,
#3 elevada, de color blanco
lechoso.
AN
tipos de colonias.
morfologa irregular
esparcida, de color beige y la
elevada y de color amarillo.
cinco tipos de colonias.
elevada y de color amarillo; la
elevada, de color fucsia; la
elevada de color gris en el
centro con bordes blancos; la
cuarta colonia era puntiforme
elevada de color beige y la
cuarta colonia era irregular
esparcida de color blanco
lechoso.
TUBO #
3

SUELO + tipos de colonias.
SACAROS Morfologa: la primera
A colonia presentaba una
elevada, de color beige y la
una morfologa circular,
elevada y de color blanco
lechoso.
PDA
AN Diversidad: se visualiza dos

tipos de colonias.
colonia era un probable
hongo que presentaba una
pulvinada, de color negro. La
elevada y de color blanco
lechoso.
pulvinada de color blanco; la
elevada y de color beige; la
elevada de color fucsia y la
cuarta colonia era irregular,
esparcida y de color blanco
lechoso.
PDA Diversidad: se visualiza

TUBO #
3
hongo que presentaba una
pulvinada, de color negro; la
SUELO segunda colonia presentaba
LIMPIO era puntiforme, elevada, de
color rosado; la tercera
hongo que tena una
convexa, de color blanco y la
cuarta colonia era irregular,
elevada de color beige.
AN Diversidad: se visualiza dos

tipos de colonias.
morfologa irregular, plana, de
color blanco y la segunda
colonia era un posible bacilo
que presentaba una
morfologa rizoide, convexa y
de color blanco.
morfologa puntiforme
elevada, de color blanco; la
elevada, de color fucsia, la
elevada de color marrn y la
cuarta colonia era irregular
esparcida de color blanco
lechoso.
*TUBO
N1
(Por PDA Diversidad: se visualiza dos

error se SUELO tipos de colonias.
inoculo MS Morfologa: la primera
en ese SULFATO colonia presentaba una
tubo, DE COBRE morfologa filamentosa,
debi pulvinada de color blanco y la
ser el segunda colonia presentaba
tubo N
elevada y de color beige.
3)
AN
Diversidad: se visualiza tres
tipos de colonias.
morfologa irregular
esparcida, de color blanco; la
segunda colonia era una
amarillo y la tercera colonia
era puntiforme elevada de
color beige,
Microscopia a (1000x) con azul de metileno y/o coloracin Gram respectiva
Figura 14. Probables Bacillus

Figura 13. Probable hongo sp. con organelas
Se observan bacilos gordos con organelas

Se observan las hifas y micelios de un
agrupados Gram positivos. De un suelo +
probable hongo del suelo limpio.
sacarosa.
Figura 16. Probable

Figura 15. Probable hongo
actinomiceto
Observamos ramificaciones que nos indicaran que
se trata de un actinomiceto, no obstante , tambin
Se observan las hifas y esporas de un posible
podran ser las ralladuras del protaobjeto. De la
hongo de la muestra de un suelo + sacarosa.
muestra de un suelo + sacarosa
Microscopia a (1000x) luego de coloracin Gram respectiva
Figura 17. Probable

Figura 18. Probable Bacillus sp.
actinomiceto
esporulados
Observamos un posible actinomiceto rodeado Observamos bacilos con esporas, Gram

de pequeos bacilos Gram positivos. De un positivos en la muestra de un suelo + sulfato
suelo ms gasolina. de amonio.
V. DISCUSIONES
CONTEO DE COLONIAS:
Cuando se realiz el conteo de colonias, solo se pudo contabilizar 138 unidades

formadoras de colonias en el cultivo AC del tubo 6 consuelo limpio, en
comparacin con los otros cultivos que pasaron las 300 unidades formadoras de
colonias, debido a que posiblemente estas hayan sido contaminadas por
diversos microrganismos que se encontraban en el ambiente o sino que hayan
sido sembrados en una mayor cantidad y porque quizs tomaron el tubo
incorrecto a la hora que realizar la siembra al igual que en el caso del medio con
suelo ms el contaminante de sulfato de cobre.
SUELO LIMPIO SIN RESPIRACIN:
En el medio AC del tubo2 con suelo limpio sin respiracin se formaron 2 tipos de
colonias una con morfologa filamentosa y esparcida, y la otra presentaba una
morfologa puntiforme y elevada al igual que en el medio AC del tubo 6 con suelo
limpio sin respiracin, sin embargo esta ltima presentaba 1 colonia ms que
mostraba una morfologa puntiforme y convexa, adems se diferenciaban en los
colores, pues en el medio AC del tubo 2 la primera colonia presentaba un color
beige, la segunda un color blanco lechoso; pero en el medio AC del tubo 6, la
primera colonia presentaba un color oscuro, la segunda un color beige y la
tercera un color amarillo.
En el medio PDA del tubo 2 con suelo limpio sin respiracin se formaron 5 tipos
de colonias: la primera colonia presentaba una morfologa filamentosa e
irregular, la segunda colonia tena una morfologa puntiforme y convexa, la
tercera tambin presentaba una morfologa puntiforme pero plana, la cuarta
colonia al igual que la segunda y la tercera presentaba una morfologa puntiforme
pero elevada y por ltimo la quinta colonia presentaba una morfologa circular y
plana, sin embargo en el medio PDA del tubo 6 con suelo limpio sin respiracin
solo se formaron 2 colonias la primera presentaba una morfologa filamentosa y
esparcida, y la segunda colonia presentaba una morfologa puntiforme y plana,
adems se diferenciaban en los colores, ya que en el medio PDA del tubo 2 la
primera colonia presentaba un color beige, la segunda un color blanco lechoso,
la tercera un color amarillo, la cuarta un color rojo y la quinta un color blanco
corrector; pero en el medio PDA del tubo 6, la primera colonia presentaba un
color beige y la segunda un color blanco lechoso.
En el medio AN del tubo 2 con suelo limpio sin respiracin se formaron 2 tipos
de colonias: la primera colonia presentaba una morfologa filamentosa, esparcida
y cremosa, y la segunda colonia presentaba una morfologa ramificada y plana;
al igual en el medio AN del tubo 6 con suelo limpio sin respiracin se formaron 2
colonias la primera presentaba una morfologa circular y plana, y la segunda
colonia presentaba una morfologa puntiforme y elevada, adems se
diferenciaban en los colores, ya que en el medio AN del tubo 2 la primera colonia
presentaba un color beige, la segunda un color blanco lechoso; pero en el medio
AN del tubo 6, la primera colonia presentaba un color blanco y la segunda un
color beige.
SUELO LIMPIO CON RESPIRACIN MAS SUELO CON CONTAMINANTE
En el medio AC del tubo 3 con suelo limpio se formaron 4 tipos de colonias, la

primera presentaba una morfologa filamentosa y pulvinada, la segunda colonia
presentaba una morfologa puntiforme y elevada, la tercera colonia al igual que
la segunda presentaba una morfologa puntiforme y elevada, y la cuarta colonia
era irregular y esparcida; al igual en el medio AC del tubo 3 con suelo ms
contaminante gasolina formaron 4 tipos de colonias la primera presentaba una
morfologa filamentosa y esparcida; la segunda, la tercera y la cuarta tenan una
morfologa puntiforme y elevada; sin embargo en el medio AC del tubo 3 con
suelo ms contaminante de sulfato de amonio formaron 5 tipos de colonias; la
primera, la segunda, la tercera, la cuarta y la quinta presentaban una morfologa
puntiforme y elevada al igual que la segunda, tercera y cuarta del medio AC con
contaminante gasolina; tambin en el medio AC del tubo 3 con suelo ms
contaminante sacarosa presentaban5 tipos de colonias, la primera, la segunda,
la tercera, la cuarta mostraba una morfologa puntiforme y elevada, y la quinta
colonia era irregular y esparcida. Al igual que el suelo mas sacarosa en el medio
AC del tubo 1 con suelo ms contaminante de sulfato de cobre se formaron 4
tipos de colonias la primera, la segunda y la tercera colonia presentaba una
morfologa puntiforme y elevada, y la cuarta colonia era irregular y esparcida.
Adems se diferenciaban en los colores, ya que en el medio AC del tubo 3 con
suelo limpio la primera colonia presentaba un color blanco, la segunda colonia
un color beige, la tercera colonia un color fucsia y la cuarta colonia mostraba un
color blanco lechoso, por otro lado en el medio AC del tubo 3 con suelo ms
contaminante gasolina la primera colonia presentaba un color beige, la segunda
colonia un color amarillo, la tercera colonia un color rojo y la cuarta colonia un
color gris, en comparacin con el medio AC del tubo 3 con suelo ms
contaminante de sulfato de amonio la primera colonia presentaba un color
blanco, la segunda colonia presentaba un color rojo, la tercera colonia un color
gris con bordes blancos, la cuarta colonia presentaba un color amarillo y la quinta
colonia era de color beige, tambin en el medio AC del tubo 3 con suelo ms
contaminante sacarosa la primera colonia presentaba un color amarillo, la
segunda colonia presentaba un color fucsia, la tercera colonia presentaba un
color un color gris con bordes blancos al igual que en la tercera colonia en medio
AC con contaminante sulfato de amonio, la cuarta colonia era de color beige y la
quinta era de color blanco lechoso, adems en el medio AC del tubo 1 con suelo
ms contaminante sulfato de cobre la primera colonia presentaba un color
blanco, la segunda colonia presentaba un color fucsia, la tercera colonia
presentaba un color marrn y la cuarta colonia era de color blanco lechoso.
En el medio PDA del tubo 3 con suelo limpio se formaron 4 tipos de colonias, la
primera colonia presentaba una morfologa filamentosa y pulvinada lo que
indicaba la presencia de un hongo que fue observado con microscopia, la
segunda, la tercera colonia presentaban una morfologa puntiforme y elevada
por lo que indicaba que era un supuesto hongo, y la cuarta colonia era irregular
y esparcida, al igual en el medio PDA del tubo 3 con suelo ms contaminante
gasolina formaron 3 tipos de colonias la primera colonia presentaba una
morfologa puntiforme y elevada, la segunda colonia presentaba una morfologa
irregular, esparcida y plana, y la tercera colonia era puntiforme y elevada al igual
que la primera colonia; sin embargo en el medio PDA del tubo 3 con suelo ms
contaminante de sulfato de amonio formaron 2 tipos de colonias; la primera
colonia presentaba una morfologa puntiforme y elevada, pero la segunda
colonia presentaba una morfologa circular y elevada; al que en el suelo con
contaminante sulfato de amonio en el medio PDA del tubo 3 con suelo ms
contaminante sacarosa presentaban2 tipos de colonias, la primera colonia
presentaba una morfologa puntiforme y elevada, y la segunda colonia
presentaba una morfologa circular y elevada. Tambin en el medio PDA del tubo
1 con suelo ms contaminante de sulfato de cobre se formaron 2 tipos de
colonias la primera colonia presentaba una morfologa filamentosa y pulvinada,
y la segunda colonia presentaba una morfologa puntiforme y elevada. Adems
se diferenciaban en los colores, ya que en el medio PDA del tubo 3 con suelo
limpio la primera colonia presentaba un color negro, la segunda colonia un color
rosado, la tercera colonia un color blanco y la cuarta colonia mostraba un color
beige, por otro lado en el medio PDA del tubo 3 con suelo ms contaminante
gasolina la primera colonia presentaba un color marrn claro, la segunda colonia
un color blanco lechoso y la tercera colonia un color blanco, en comparacin con
el medio PDA del tubo 3 con suelo ms contaminante de sulfato de amonio la
primera colonia presentaba un color beige, la segunda colonia presentaba un
color blanco lechoso, al igual que en el medio con contaminante de sulfato de
amonio los colores que presentaban las colonias eran similares al medio PDA
del tubo 3 con suelo ms contaminante sacarosa la primera colonia presentaba
un color beige, la segunda colonia presentaba un blanco lechoso, adems en el
medio PDA del tubo 1 con suelo ms contaminante sulfato de cobre la primera
colonia presentaba un color blanco, la segunda colonia presentaba un color
beige.
En el medio AN del tubo 3 con suelo limpio se formaron 2 tipos de colonias, la

primera colonia presentaba una morfologa irregular y plana, y la segunda
colonia presentaba una morfologa rizoide y convexa lo que indicaba que era un
bacilo y se comprob realizado microscopia que era un Bacillus sp; tambin en
el medio AN del tubo 3 con suelo ms contaminante gasolina formaron 2 tipos
de colonias la primera colonia presentaba una morfologa irregular, esparcida y
plana, y la segunda colonia presentaba una morfologa puntiforme y elevada; sin
embargo en el medio AN del tubo 3 con suelo ms contaminante de sulfato de
amonio formaron 2 tipos de colonias; la primera colonia presentaba una
morfologa irregular y esparcida, y la segunda colonia presentaba una morfologa
puntiforme y elevada; al igual que la del medio AN con contaminante sulfato de
amonio tambin en el medio AN del tubo 3 con suelo ms contaminante sacarosa
presentaban2 tipos de colonias la primera colonia presentaba una morfologa
filamentosa y pulvinada lo que indicaba un probable hongo, pero al realizar
microscopia se comprob la presencia del hongo, la segunda colonia presentaba
una morfologa puntiforme y elevada; entonces en el medio AN del tubo 1 con
suelo ms contaminante de sulfato de cobre se formaron 3 tipos de colonias la
primera colonia presentaba una morfologa irregular y esparcida, la segunda
colonia era una puntiforme y elevada, y la tercera colonia era puntiforme y
elevada. Adems se diferenciaban en los colores, ya que en el medio AN del
tubo 3 con suelo limpio la primera y la segunda colonia presentaban un color
blanco, pero se diferencian en la morfologa, por otro lado en el medio AN del
tubo 3 con suelo ms contaminante gasolina la primera colonia presentaba un
color blanco lechoso, la segunda colonia un color amarillo, en comparacin con
el medio AN del tubo 3 con suelo ms contaminante de sulfato de amonio la
primera colonia presentaba un color beige, la segunda colonia presentaba un
color amarillo, tambin en el medio AN del tubo 3 con suelo ms contaminante
sacarosa la primera colonia presentaba un color negro, la segunda colonia
presentaba un color blanco lechoso, la tercera colonia presentaba un color un
color gris con bordes blancos al igual que en la tercera colonia en medio AC con
contaminante sulfato de amonio, la cuarta colonia era de color beige y la quinta
era de color blanco lechoso, adems en el medio AN del tubo 1 con suelo ms
contaminante sulfato de cobre la primera colonia presentaba un color blanco, la
segunda colonia presentaba un color amarillo, la tercera colonia presentaba un
color beige.
VI. RECOMENDACIONES
1. Respecto a los sistemas de respiracin se recomienda que estos se
elaboren de manera cuidadosa previniendo que no tenga agujeros, puesto
que ello, alterara los resultados finales debido a que ingresara oxgeno
del medio.
2. Al momento de realizar la contaminacin del suelo de forma intencional,
se tiene que humedecer todo el suelo, tampoco se debe dejar como lodo,
y a la medida que se agrega el contaminante teniendo en cuenta cuanto
mililitros se agregan secuencialmente.
3. Cuando se lleva a cabo la siembra en el agar, con el fin de realizar el
conteo de colonias es recomendable esparcir menos de 0,3 ml de solucin
de microorganismos, puesto que si se siembra un volumen mayor a este
es ms probable que las colonias sean demasiadas o que esta crezcan
de manera conglomerada impidiendo el conteo de colonias separadas.
4. Al momento de realizar las disoluciones seriadas ubicar los tubos de
manera ordenada y rotulada cada tubo, para evitar confusiones al
momento de sembrar, del mismo modo con los respectivos agares.
5. En el momento del traslado del sistema del invernadero hacia el
laboratorio se tiene que evitar movimientos bruscos qu eso alterara la
transferencia de CO2 o el ingreso de oxigeno del medio.

Informe de Suelos Terminado

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Ao de la consolidacin del Mar de Grau

FACULTAD DE INGENIERIA AMBIENTAL

El objetivo principal del presente informe es el reconocimiento del crecimiento de

Aprender a comparar y diferenciar las colonias bacterianas de diferentes

MATERIALES PARA CALCULAR LA RESPIRACION DEL SUELO

Para el sistema de la respiracin del suelo:

Luego se Se construy un sistema cerrado de tal modo

Se agreg 1ml del homogenizado de suelo y

Con ayuda de la gasa esparcimos la solucin en

RESULTADO DE RESPIRACION Y TITULACION DE SUELOS

Suelo en diferentes Gasto de HCL para Concentracin

Suelo limpio 0,8 ml 0,36M de CO2

Suelo+ detergente 1 0,3ml 0,135M de CO2

Suelo+ detergente 2 0,2ml 0,09M de CO2

Suelo+ sulfato de 0,9ml 0,405M de CO2

1. TITULACION SUELO LIMPIO

Para 1ml de NaOH que se diluyo en 9ml de agua destilada

Calculando la concentracin de C02

2. TITULACION SUELO CONTAMINADO CON DETERGENTE 1

Para 1ml de NaOH que se diluyo en 9ml

Calculando la concentracin de C02

3. TITULACION SUELO CONTAMINADO CON DETERGENTE 2

Para 1ml de NaOH que se diluyo en 9ml

Calculando la concentracin de C02

4. TITULACION SUELO CONTAMINADO CON SULFATO DE COBRE

Para 1ml de NaOH que se diluyo en 9ml de agua destilada

Calculando la concentracin de C02

UFC/g s.s. = (NC * 1/FD * 1/ V) / (P * FH).

TUB NUMERO, DIVERSIDAD Y MORFOLOGIA DE

TUB AC N: ms de 300 unidades formadoras de

PDA N: ms de 300 unidades formadoras de

AN N: ms de 300 unidades formadoras de

N: ms de 300 unidades formadoras de

AN N: ms de 300 unidades formadoras de

Figura 2 : Probable Bacillus Figura 8 : Probable

En la imagen observamos En la imagen se observan bacilos

Figura 9 : Probables Bacillus Figura 10 : Probables

Aqu observamos una diversidad de Aqu observamos bacilos gordos de

Suelo inoculados con un adicional durante una semana

Nmero de colonias: En cuanto al nmero de colonias, en todas las placas se

Diversidad: se visualiza dos

PDA SUELO + Diversidad: se visualiza dos

Diversidad: se visualiza dos

AN Diversidad: se visualiza dos

PDA Diversidad: se visualiza

AN Diversidad: se visualiza dos

(Por PDA Diversidad: se visualiza dos

Figura 14. Probables Bacillus

Se observan bacilos gordos con organelas

Figura 16. Probable

Microscopia a (1000x) luego de coloracin Gram respectiva

Figura 17. Probable

Observamos un posible actinomiceto rodeado Observamos bacilos con esporas, Gram

Cuando se realiz el conteo de colonias, solo se pudo contabilizar 138 unidades

SUELO LIMPIO SIN RESPIRACIN:

SUELO LIMPIO CON RESPIRACIN MAS SUELO CON CONTAMINANTE

En el medio AC del tubo 3 con suelo limpio se formaron 4 tipos de colonias, la

En el medio AN del tubo 3 con suelo limpio se formaron 2 tipos de colonias, la

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