AGAR TSI

Medio diferencial complejo (de color rojo)

compuesto por 3 azcares: 10% lactosa, 10%
sacarosa y 1% glucosa y un ligador que es en
este caso el hierro. La siembra se realiza tanto
en la superficie del agar (aerobiosis) como en la
profundidad de ste (anaerobiosis).
Medio K (alcalino) de color rojo. Medio A
(cido) de color amarillo.

Combinaciones Agar TSI

K/K
Si la bacteria es aerobia estricta (no fermentadora), el medio permanece de color rojo. Los
azcares son respirados, degradndose completamente hasta CO2, que se elimina y no modifica
el pH.

K/A(H2S)
aparicin de un precipitado de color negro en el fondo del tubo. Algunas bacterias respiradoras
anoxobinticas son capaces de emplear el tiosulfato sdio como aceptor final de electrones en la
cadena transportadora. Este compuesto se reduce a cido sulhdrico que reacciona con el hierro
Fe2+ presente en el medio formando un precipitado negro de sulfuro de hierro.

A/A(g)
aparicin de burbujas, rotura o elevacin del agar del fondo del tubo.

K/A
Si la bacteria metaboliza slo la glucosa: en la superficie la utilizar por va respiratoria, y donde
la tensin de oxgeno disminuya lo suficiente, emplear una pequea proporcin por va
fermentativa. Esto generar una pequea cantidad de cidos que sern neutralizados por las
aminas derivadas de la decarboxilacin oxidativa de las protenas.
Como resultado, el medio mantendr su color rojo en la superficie, al no haber cambiado de pH.
Por el contrario, las bacterias crecidas en la profundidad emplearn desde el primer momento la
glucosa por va fermentativa, generando cidos que no sern neutralizados, provocndose un
descenso del pH y el color del medio en el fondo del tubo cambiar a amarillo.
CITRATO

Este medio indica la capacidad de las bacterias

de metabolizar el citrato. Contiene citrato como
nica fuente de carbono, fosfato de amonio
como nica fuente de fosfato y azul de
bromotimol como como indicador de pH.
nicamente las bacterias capaces de
metabolizar citrato podrn multiplicarse en
este medio, al utilizar los fosfatos presentes
liberan iones amonio (bsicos) que junto con la
eliminacin de citrato (cido) generar una
fuerte basificacin del medio que ser aparente
con un cambio de color del indicador de pH de
verde a azul.

UREA

El indicador de pH utilizado es el rojo fenol.

Esta prueba detecta la presencia de la enzima
ureasa en el metabolismo bacteriano, la cual al
hidrolizar urea forma productos amoniaco que
alcalinizan el medio y se evidencia con el
cambio de color del medio desde un amarillo
plido hasta un rojo fucsia.
 MIO

Fundamento
Medio de cultivo semislido, altamente nutritivo debido a la presencia de extracto de levadura,
peptona y triptena. Adems, la triptena aporta grandes cantidades de triptofano, sustrato de la
enzima triptofanasa, para la realizacin de la prueba del indol. La dextrosa es el hidrato de
carbono fermentable, la ornitina es el sustrato para la deteccin de la enzima ornitina
decarboxilasa, el prpura de bromocresol es el indicador de pH, que en medio alcalino es de color
prpura y en medio cido es amarillo.
Por su composicin, es posible detectar 3 reacciones en un mismo tubo: movilidad, presencia de
ornitina decarboxilasa e indol.
La movilidad se demuestra por un enturbiamiento del medio o por crecimiento que difunde mas
all de la lnea de inoculacin.
La reaccin positiva a la ornitina est dada por un color prpura del medio. Debido a la
fermentacin de la glucosa se reduce el pH produciendo una condicin cida y originando que el
indicador de pH prpura de bromocresol vire al amarillo. La presencia de acidez, otorga
condiciones ptimas para la actividad de la enzima ornitina decarboxilasa, la cual decarboxila la
ornitina presente. Por decarboxilacin, se alcaliniza el medio, con el consecuente viraje del
indicador hacia el color prpura.
El indol, es producido a partir del triptofano por los microorganismos que contienen la enzima
triptofanasa. El desarrollo de un color rojo luego de agregar unas gotas de reactivo de Kovacs o
de Erlich, indica un resultado positivo.

Caractersticas del medio

Medio preparado: prpura transparente a ligeramente opalescente.
Incubacin
En aerobiosis, durante 18-24 horas a 35-37 C.

Resultados

1-Movilidad:

-Resultado positivo: presencia de turbidez o crecimiento mas all de la lnea de siembra.

-Resultado negativo: crecimiento solamente en la lnea de siembra.

2-Ornitina decarboxilasa:

-Resultado positivo: color prpura.

-Resultado negativo: color amarillo. A veces se puede desarrollar un color violceo en la superficie
del medio.

3-Prueba del indol:

La prueba de indol se realiza una vez que se ha determinado la movilidad y la prueba de ornitina.
-Resultado positivo: color rojo al agregar el reactivo revelador.
-Resultado negativo: el color del reactivo revelador permanece incoloro-amarillento.
 LIA

Fundamento
En el medio de cultivo, la peptona y el extracto de levadura aportan los nutrientes para el desarrollo
bacteriano. La glucosa es el hidrato de carbono fermentable, y la lisina es el sustrato utilizado para detectar
la presencia de las enzimas decarboxilasa y deaminasa. El citrato de hierro y amonio, y el tiosulfato de
sodio, son los indicadores de la produccin de cido sulfhdrico. El purpura de bromocresol, es el indicador
de pH, el cual es de color amarillo a pH igual o menor a 5.2, y de color violeta a pH igual o mayor a 6.8.
Por decarboxilacin de la lisina, se produce la amina cadaverina, que alcaliniza el medio y esto produce el
viraje del indicador al color violeta. La decarboxilacin de la lisina, tiene lugar en medio cido, por lo que es
necesario que la glucosa sea previamente fermentada.
Los microorganismos que no producen lisina decarboxilasa, pero que son fermentadores de la glucosa,
producen un viraje de la totalidad del medio de cultivo al amarillo, pero a las 24 hs de incubacin se observa
el pico de color violeta debido al consumo de las peptonas, y el fondo amarillo.
La produccin de sulfuro de hidrgeno, se visualiza por el ennegrecimiento del medio debido a la formacin
de sulfuro de hierro.
Las cepas de los gneros Proteus, Providencia y algunas cepas de Morganella, desaminan la lisina, esto
produce un cido alfa-ceto-carbnico, el cual, con la sal de hierro y bajo la influencia del oxgeno forma un
color rojizo en la superficie del medio.

Caractersticas del medio

Medio preparado: color violeta.
Incubacin
En aerobiosis, durante 24 horas a 35-37 C.
Resultados

1- Decarboxilacin de la lisina:

-Prueba Positiva: Pico violeta/fondo violeta.

-Prueba Negativa: Pico violeta/fondo amarillo.

2-Desaminacin de la lisina:

Pico rojizo/fondo amarillo. Esto sucede con cepas del gnero Proteus, Providencia y alguna cepas
de Morganella spp.

3-Produccin de cido sulfhdrico:

-Prueba positiva: Ennegrecimiento del medio (especialmente en el lmite del pico y fondo)
 Agar Oxidacion/Fermentacion (OF)

FERMENTATIVO OXIDATIVO NEGATIVO

Amarillo - Amarillo - Levemente amarillo arriba en - No hay cambio de color en los
ambos tubos tubos
- Completamente azul los dos por
oxidacin

En condiciones aerobias las bacterias pueden oxidar la glucosa hasta CO2gas. El oxgeno es el aceptor final
de e- en el metabolismo respiratorio. en condiciones anaerobicas en ausencia de un aceptor de e- como
nitrato, las bacterias slo pueden utilizar la glucosa por va fermentativa. En este test se evala la capacidad
de las bacterias para oxidar y/o fermentar produciendo cido que se detecta gracias al azul de bromotinol
(indicador de pH) Es til en la distincin de pseudomonas y enterobacterias.

Se inoculan tubos de medio con asas de punta recta. Uno de los tubos se recubre con aceite de parafina
para aislarlo del oxgeno (tubo de fermentacin) y otro no (tubo de oxidacin).