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Resumen
Hamelia patens cuyo nombre popular es Chichipince, es una planta medicinal
utilizada en Guatemala y pases vecinos para tratar afecciones, principalmente
lesiones de la piel. El anlisis fitoqumico de esta planta se realizar con
pruebas de carcter cualitativo y se llevarn a cabo separaciones de
cromatografa y reveladores coloridos para los compuestos de inters del
estudio como lo son los metaboltos para determinar la presencia de
flavonoides, alcaloides. Hipotticamente queremos comprobar que los
flavonoides tienen la funcin de fitoalexinas en las pomadas y jabones a base
de la planta Hamelia patens, Chichipince. Y que por lo tanto sean los
responsables de su actividad antiparasitaria, antimictica y antibacteriana.
2.1 Introduccin
Existe gran variedad de plantas medicinales que se usan en forma tradicional
para tratar diversas enfermedades dentro de la concepcin de la medicina
alternativa, complementaria y tradicional que aplican los terapeutas
tradicionales. Muchas de estas plantas medicinales se utilizan sin un protocolo
teraputico, y sin tener un conocimiento exacto sobre sus componentes, los
cuales podran en un futuro cercano, la base para el desarrollo de importantes
drogas. Hamelia patens, conocida como Chichipince, hierba del cncer,
cohetillo, Ixcann. El Chichipince pertenece a la familia de las rubiceas, la
misma familia a la que pertenece el caf y aproximadamente 10,300 especies
ms.
2.3 Objetivos
a. Objetivo General
Caracterizar el perfil fitoqumico de la planta medicinal Hamelia patens,
Chichipince a travs de reacciones coloridas especificas, para cada
grupo de metaboltos, y separacin cromatogrfico.
b. Objetivos especficos
Aislar los metaboltos secundarios relacionados con el patrn de
efecto mdico de la planta natural Hamelia patens, Chichipince
Describir la actividad farmacolgica atribuida a la planta H. patens
en funcin de los metaboltos secundarios encontrados.
Comparar los resultados experimentales con datos tericos y
prcticos
Establecer las bases para que los estudiantes de 3r. ao de la
carrera de Medicina de la Facultad de Ciencias Mdicas en el futuro
dispongan del protocolo para identificar los metabolitos secundarios
de las plantas medicinales que puedan identificar en el contenido
curricular de medicina biolgica y qumica, coordinados por el
laboratorio Multidisciplinario de nuestra Facultad.
De acuerdo a los resultados de esta investigacin, preparar el
protocolo para el ensayo clnico en pacientes, de acuerdo a la
Normativa para la Regulacin de ensayos clnicos en Humanos.
Acuerdo Ministerial SP-14-466-2007
2.4 Justificacin
De acuerdo a los resultados de la investigacin Caracterizacin Clnica y
Epidemiolgica de la Enfermedad Leishmaniasis cutnea en el rea Norte de
Petn Guatemala. C. A. El Dr. Otto HugoVelsquez, autor de dicho estudio,
consider que es pertinente realizar este estudio que dar nuevas lneas
estratgicas de prevencin, control y seguimiento de la enfermedad, dentro del
campo de la Medicina Biolgica dentro de una nueva concepcin de la
Medicina Tradicional, Alternativa y Complementaria.
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Los resultados de este estudio podran superar el paradigma del uso casi
exclusivo, 93 % de pacientes utilizaron de Antimoniato de metilglucamina,
comercialmente llamado glucantime, y la aplicacin de calor, hasta provocar
quemaduras de 1er. Grado en la piel, o aplicar otras sustancias como laca
(pintura de uas) y lquido de batera.
Reino -- Plantae
Filo -- Magnoliophyta
Clase -- Magnoliopsida
Orden -- Rubiaceae
Familia -- Rubiaceae
Gnero -- Hamelia
Especie -- Hamelia patens Jacq.
Hojas: Opuestas, sobre el tallo entre 2 hojas contiguas se presentan las estpulas
que son como hojillas triangulares, diminutas. De 2 a 4 hojas brotando del mismo
nudo, elpticas y a veces ms anchas hacia el pice, de 5 a 23 cm de largo,
puntiagudas, base variable; los pecolos de tamao muy variable.
Los colibres atrados por sus flores y otras aves se alimentan de la fruta, y
tambin el forraje atrae a los pequeos insectos se encuentran en las
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proximidades, lo que ayuda a reducir las plagas. El fruto tiene un refrescante sabor
cido, adems de ser muy apreciado por algunos pjaros, tambin son
comestibles para los seres humanos, en Mxico, se utiliza en una bebida
fermentada
Sinonimia
Los extractos acetnicos de hoja y tallo no son activos ante ninguna de las
cepas estudiadas (Germosn, 1993)
e. Composicin qumica
f. Farmacognosia
g. Toxicologa
h. Indicaciones teraputicas
2.7 Hiptesis
Existen metaboltos derivados de la planta medicinal Hamelia patens,
Chichipince que actan en el proceso de cicatrizacin y atacan al parasito de
la Leishmaniasis cutnea ?
3. Seccin II
Mtodo
que el olor y color de la planta, sacar del fuego y colocar en los embases de
almacenamiento previamente desinfectados. Dejar enfriar y tapar el recipiente de
la pomada.
El material vegetal seco se tritura con las manos usando guantes y luego se
coloca en un recipiente de poliuretano; se cubre con metanol (aproximadamente 2
galones) y se deja en reposo durante 2 semanas. Al terminar el perodo de
maceracin se procede a concentrar el extracto metanlico con un rota vapor (foto
adjunta), a 60 grados y al vaco. El slido remanente se vuelve a extraer con el
metanol recuperado hasta que quede de color pardo-verdoso. El extracto
concentrado es el que se usa para todas las pruebas. Mientras no se usa se
mantiene en refrigeracin a cerca de 4 grados Celsius.
Cuadro 1
Pruebas coloridas para flavonoides
Cambio a rojo es +
Leucoantocianidinas HCl y calor
Alcaloides
Cuadro 2
Pruebas coloridas y cromatogrficas para alcaloides
(Domnguez, 1973; Wagner et al, 1984)
PRUEBA REACTIVOS OBSERVACIONES
Saponinas
a. Pruebas generales
b. Pruebas coloridas
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Cuadro 3
Coloraciones con varios reactivos cidos para saponinas
(Domnguez, 1973)
c. Pruebas cromatogrficas
Cuadro 4
Pruebas cromatogrficas para saponinas
(Wagner et al, 1984)
SISTEMA DE SOLVENTES ASPERIADORES OBSERVACIN
5. Quinonas
a. Reacciones coloridas
Cuadro 7
Reacciones coloridas de las quinonas
(Domnguez, 1973)
Cromatografa
Se suele usar cromatografa en papel. Solventes como BAW, y revelado en UV.
Revelado con azul de leucometileno, aparecen como puntos azules.
Prueba de cianidinas
Reactivo: unas gotas de HCl concentrado y magnesio; luego octanol
Procedimiento: se agregan unas gotas de HCl y magnesio a la solucin. En
caso que aparezca un color definido despus de 10 minutos se agrega 1
mL de octanol a la solucin, se agita y se deja que separen las capas.
Observa el color de cada capa.
cido Sulfrico
Reactivo: cido sulfrico concentrado
Resultados esperados: las flavononas y flavononoles dan colores amarillos;
las flavononas dan un color anaranjado o guinda. Las chalconas dan
coloraciones rojo guinda.
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3. Alcaloides
o Prueba Mayer
Reactivo: a) 1.36 g de MgCl2 en 60 mL de agua
b) 5 g de Kl en 10mL de agua
o Prueba de Wagner
Reactivo: disolver 1.27 g de yodo re sublimado y 2 g de Kl en 20 mL de
agua; aforar a 100 mL
Procedimiento: agregar unas gotas del reactivo a la muestra
Resultados: si hay alcaloides presentes se forma un precipitado marrn.
o Prueba de Dragendorff
Reactivo: Disolver 8 g de subnitrato de bismuto en 20mL de cido ntrico al
30% y 27.2 g de Kl en 50mL de agua. Mezclar y dejar reposar por un da.
Luego aforar a 100mL
Procedimiento: se agregan unas gotas del reactivo a la muestra
Resultados: se observar un precipitado
Se realizar una prueba cromatogrfica en capa fina con slica gel como
fase estacionaria. Como fases mviles se us: cloroformo (5): acetona(4):
dietilamina(1); xileno(20):metuiacetona(2):metanol(3):dietilamina(1); n-
butano(4):cido actico(1); y n-butanol(10)cido actico(2):agua(1).
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4. Taninos y polifenoles
Se har un extracto del material vegetal en metanol grado industrial y se
tomaron 10mL de este para hacer esta prueba.
El extracto metanlico se dividi en dos tubos.
A una parte se le agreg sal (NaCl) y a la otra se le agreg gelatina
comercial incolora al 1% en agua.
El procedimiento anterior se repite con polvo verdoso que se forma en el
fondo del beaker hasta abajo del extracto metanlico antes de pasarlo por
el rotavapor.
Se evapora el equivalente a 10g del extracto metanlico, se seca en una
cpsula de porcelana y se le agrega 25mL de agua destilada, se calienta y
se observa si se disuelve.
Se deja que llegue a temperatura ambiente y se le agregan 4 gotas de
cloruro de sodio al 10% para formar el precipitado.
Esto se divide en cuatro tubos:
1. 4 gotas de gelatina al 1%
2. 4 gotas de reactivo de sal y gelatina (1% gelatina y 10% sal)
3. 4 gotas de cloruro frrico
4. 4 gotas de solucin salina al 10%
5. Esteroles
o Prueba de Lieberman-Burchard
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o Prueba de Salkowski
Reactivo: cido sulfrico
Procedimiento: se agrega el cido sulfrico lentamente a manera de
formar una interfase.
Resultados esperados: se observan los cambios de color en la interfase.
Un color cereza indica una prueba positiva; si no se forma el color
inmediatamente, se mezcla la solucin y se espera una hora.
5. Deoxiazcares
b. Tcnicas de cromatografa
Se toma 1 g del extracto metanlico y se extrajo bafo reflujo durante 20
minutos con 20mL de etanol al 50% junto con 10mL de solucin cido actico.
Se hace una extraccin con tres porciones de 15mL de diclorometano, con
alutacin suave para evitar emulsiones.
Las fases inferiores no se filtraron sobre sulfato anhidro, sino que nicamente
se evapora a sequedad, dentro de la campana.
El residuo se disuelve en 10mL de una solucin de diclorometano: etanol (1:1).
Esta solucin es la que se utiliza para realizar las cromatografas de capa fina.
o Solventes de la cromatografa
Acetato de etilo: piridina: agua (5:4:1)
Acetato de etilo: metanol: agua (16:1:1)
Acetato de etilo: metanol: agua (81:11:8)
Acetato de etilo: metanol: agua (81:11:4:8)
Cloroformo: metanol: agua (65:35:10)
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Asperjadores
o Reactivo de Kedde (cido 3,5 dinitrobenzico al 2% en metanol + KOH
al 5.7% en agua)
o Cloruro de antimonio (III) al 20% en cloroformo
o Reactivo de cido sulfrico (5% en etanol)
o Reactivo de cido sulfrico (10% en etanol)
8. Saponinas y sapogeninas
9. Quinonas
Md. Infieri ?
Md. Infieri ?
Md. Infieri ?
Md. Infieri ?
Presentacin
del proyecto a
DIGI
Reuniones de
coordinacin
con
instituciones
participantes
Prueba piloto
Estandarizacin
metodolgica
Recolecta y
extraccin de
material a
utilizar
Aislamiento de Prueba
los metaboltos piloto
secundarios e
Identificacin de
los
constituyentes
qumicos de la
planta Amelia
patens
Recoleccin y
anlisis de
resultados
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Evaluacin de
resultados y
preparacin de
informe final
Resultados esperados
mdico de la planta
natural Hamelia
patens, Chichipince
referido en la literatura
5.8 ANEXOS
PRENSA CIENTFICA
Encuentro Cientifico ao 2010 Facultad de Ciencias Mdicas USAC
INVESTIGACIN, DOCENCIA
Y SERVICIO EN GUATEMALA
La importancia de la recoleccin de datos en la investigacin cientfica
SEGURIDAD ENFERMEDADES
ALIMENTARIA TRANSMTIDAS POR
VECTORES
C0NTROL
MATERNO
ESTRS EN
ESTUDIANTES Y
Amelia Patens
PROFESORES
ENFERMEDADES
(Chicipince)
RESPIRATORIAS\
ROTAVIRUS