Mtodo 9
Determinacin de Materia Orgnica Disuelta Coloreada
Laurencia Guzmn y Ramn Varela
Introduccin
La materia orgnica disuelta coloreada (MODC
o CDOM por sus siglas en ingles) es producto de la
descomposicin de compuestos orgnicos, princi-
palmente de origen vegetal, aportados por los ros y la
degradacin del fitoplancton en el mar. La MODC se
define como el material que pasa por un filtro de 0,2
m y se cuantifica en unidades de absorcin (m-1) pa-
ra longitudes de onda especficas. El espectro de
absorcin de la MODC con su mximo de absorcin
en el ultravioleta disminuye exponencialmente hacia
longitudes de onda mayores. Este procedimiento
describe el mtodo para determinar MODC, utilizando
un mtodo espectrofotomtrico con el cual se calcula
el coeficiente de absorcin del material disuelto (ag),
basndose en Bricaud et al. (1981), Nelson y Siegel
(2002) y Nelson et al. (2007).
Fundamentos del mtodo
La absorbancia de la MODC se mide en la regin del
ultravioleta y el azul empleando un espectrofotmetro.
El coeficiente de absorcin del material disuelto se
calcula a partir de estos valores para la(s) longitud(es)
de onda deseada(s).
Advertencias analticas
1. Usar agua recin destilada para el blanco y alma-
cenar al resguardo de la luz bajo refrigeracin para
prevenir alguna alteracin. Un blanco contamina-
do puede afectar el coeficiente de absorcin de la
MODC.
2. La lnea base en las mediciones espectrofotom-
tricas debe ser constante. Una lnea base fluctuan-
te puede afectar el coeficiente de absorcin de la
MODC.
3. Filtrar lentamente para evitar la rotura del filtro (y
el paso de partculas a travs del mismo) o que las
clulas se rompan (lo que libera los componentes
intracelulares).
4. La exposicin de las muestras a la luz por periodos
prolongados puede resultar en una prdida de co-
lor lo cual afecta el coeficiente de absorcin de la
MODC.
Materiales
Emplear guantes de polietileno en todo momento
para manipular los materiales y las muestras.
1. Filtros de jeringa de nylon, de 25 mm de dimetro y
0,2 m de tamao de poro.
2. Jeringas plsticas de 60 mL sin mbolo de goma
negra (Figura 9.1).
3. Jeringa de vidrio de 60 mL, con aguja de acero inoxi-
dable de 10,2 cm de largo, lavada con agua recin
destilada y etanol (Figura 9.2).
4. Celdas de cuarzo, 10-cm paso de luz, con tapas de
Teflon, lavadas con agua recin destilada y eta-
nol.
53
5. Botellas de vidrio mbar de 60 mL con tapa de
Teflon.
Reactivos
1. Acido clorhdrico (HCl), al 10%.
2. Etanol (C2H6O), grado reactivo o mejor.
Equipo
1. Espectrofotmetro para mediciones espectrales
con un ancho de banda de 200 850 nm. Es
conveniente realizar un barrido, a una resolucin
de 2nm.
Captacin de muestras
1. Pretratamiento del material de recoleccin
a. Sumergir las botellas mbar, sus tapas y las
jeringas en una solucin de HCl al 10% por una
noche a temperatura ambiente y luego enjuagar
con agua destilada.
2. Captacin de muestra
a. Captar la muestra con una jeringa plstica utili-
zando guantes de polietileno. Antes de captar la
muestra, retirar el mbolo y lavar la jeringa tres
veces con la muestra.
b. Conectar el filtro de nylon a la punta de la jeringa
y llenarla. Filtrar la muestra directamente dentro
de la botella mbar. Enjuagar la botella mbar 3
veces con la muestra filtrada. Dejar un espacio
de aire en la botella de aproximadamente 1
mL (10% del volumen total de la botella) para
permitir la expansin del agua al congelar.
c. Congelar la muestra a -20 C.
54
Anlisis de muestras
1. La adecuada preservacin de la muestra permite
que la misma permanezca sin alterar varios meses,
siempre y cuando se mantenga congelada y
resguardada de la luz.
2. Descongelar las muestras y permitir que alcancen
temperatura ambiente.
3. Extraer la muestra de la botella utilizando una
jeringa de vidrio con aguja metlica.
4. Retirar la aguja y colocar un filtro de jeringa de 0,2
m. Filtrar directamente en la celda, enjuagando
tres veces con la muestra. Llenar completamente
la celda sin que queden burbujas. Limpiar y secar
el exterior de la celda.
5. Preparar una celda con agua recin destilada
(blanco) a temperatura ambiente.
6. Realizar la medicin espectral de la muestra
(absorbancia, A()) entre 230 y 700 nm, ajustan-
do el espectrofotmetro con el blanco. Al finalizar,
las muestras no pueden congelarse nuevamente,
pero si pueden permanecer refrigeradas en sus
botellas mbar por no ms de 3-4 das.
7. Si es necesario corregir fluctuaciones de la lnea
base, sustraer de cada longitud de onda el valor de
absorbancia a 700 nm.
Clculo y Expresin de Resultados
El calcul del coeficiente de absorcin del material
disuelto (ag) se realiza mediante la siguiente expresin
(Bricaud et al., 1981):
ag()= 2,303 A()/L (1)
donde
A() = absorbancia a una determinada longitud
de onda (m-1).
L = longitud de la celda (0,1 m)

55