Mtodo 4
Determinacin de Sulfuro de Hidrgeno
Xiaona Li e Yrene M. Astor
en 0,003 unidades de salinidad de un crucero al
siguiente.
Introduccin
Este procedimiento describe el mtodo para de-
-
terminar sulfuro disuelto (H2S, HS y S2-) en agua de
mar utilizando medidas espectrofotomtricas segn el
mtodo descrito por Cline (1969) y modificado segn
Hayes et al. (2006). Los resultados se expresan en
mol L-1 de S2- en agua de mar. El rango de concentra-
cin del mtodo es entre 0 y 1000 mol L-1. La preci-
sin del mtodo es de 3,3% y el lmite de deteccin del
anlisis es de 0,6 mol L-1.
Fundamentos del mtodo
El sulfuro de hidrgeno presente en la muestra de
agua de mar reacciona con una solucin de cloruro
frrico y N,N-dimetil-p-fenilen sulfato de diamina en
medio cido para formar azul de metileno el cual se
mide por un mtodo espectrofotomtrico.
Advertencias analticas
1. La presencia de burbujas, la agitacin y la manipu-
lacin de la muestra puede producir errores en el
resultado debido a que se puede introducir oxgeno
en la muestra.
2. La solucin patrn y la solucin estndar de sulfu-
ro son muy inestables y la concentracin de esta
ltima vara rpidamente (antes de agregar la solu-
cin fijadora de Zn(Ac)2). Es importante realizar el
anlisis en menos de 2 horas despus de aadir la
solucin de diamina.
3. El desarrollo del color depende del pH de la
muestra; por lo tanto, se efectan diluciones con
agua de mar libre de sulfuro para controlar el pH.
4. La presencia de tiosulfato en la muestra puede
inhibir la reaccin que desarrolla el color.
Materiales
1. Pipeta automtica monocanal con capacidad de 5
mL.
2. Viales con capacidad de 20 mL.
3. Jeringa de vidrio de 10 mL (Hamilton gas-tight)
con punta de embolo de Teflon. Esta jeringa se
debe probar antes de usar para verificar que las
burbujas se pueden expulsar fcilmente de la mis-
ma. Algunas jeringas estn elaboradas de manera
tal que resulta difcil deshacerse de las burbujas;
por lo tanto, es recomendable comprar varios tipos
diferentes de jeringas y probarlas antes del trabajo
de campo.
4. Jeringa de plstico de 60 mL con una manguera
Tygon de 60 cm de longitud conectada en su pun-
ta.
5. Manguera transparente Tygon para la captacin
de muestra de la botella Niskin, con dimetro no
mayor de 4 mm. Colocar un fragmento de man-
guera de silicona del mismo dimetro adherida a la
punta que entra en contacto con la espita en caso
29
 de que se pretenda tomar muestras de carbono
orgnico disuelto o total posteriormente. Se debe
sumergir la manguera en agua de mar limpia por 24
horas antes del crucero para minimizar la cantidad
de burbujas que se adhieren a la manguera durante
la recoleccin de la muestra.
Equipos
1. Espectrofotmetro con rango en el visible, equipado
con celdas que posean una longitud ptica de 1 y
10-cm.
Reactivos
Dependiendo de la concentracin de sulfuro pre-
sente en la muestra, las concentraciones de los reac-
tivos y los factores de dilucin varan. Ver Cline (1969)
para muestras con una concentracin menor de 3 o
mayor de 40 mol L-1. Los reactivos que aqu se espe-
cifican son para usarlos en muestras que tengan una
concentracin entre 3 y 40 mol L-1.
1. Solucin de acetato de cinc (0,05 M). Pesar 1,1
g de acetato de cinc (Zn(CH3COO)2, Zn (Ac)2) y
disolver en 100 mL de agua destilada. El reactivo
es estable y se usa como fijador del sulfuro.
2. Solucin mezclada de diamina (concentra-
ciones de sulfuro entre 0 y 44 mol L-1). Pesar
4,0 g de cloruro frrico calidad analitica (FeCl3) y
1,6 g de N,N-dimetil-p-fenilen sulfato de diamina
(C8H12N12H2O4S, peso molecular: 234,28 g mol-1).
Agregar a 100 mL de HCl 6N y mezclar. El reactivo
es estable por un mes si se almacena en una bote-
lla mbar a 4C.
3. Gas nitrgeno de alta pureza.
4. Agua destilada libre de oxgeno. Para preparar
hervir el agua destilada y esperar que alcance tem-
30
peratura ambiente mientras se le burbujea gas ni-
trgeno.
5. Solucin patrn de sulfuro. Preparar justo antes
de comenzar el anlisis. Colocar aproximadamen-
te 230 mL de agua destilada libre de oxgeno an
caliente (para minimizar difusin de oxgeno) en
un matraz volumtrico de 250 mL. Burbujear gas
nitrgeno en el matraz mientras el agua alcanza la
temperatura ambiente. Secar una cantidad aproxi-
mada a 0,5 g de sulfuro de sodio (Na2S.9H2O) de
calidad analtica con una servilleta que no deje fi-
bras y pesar. Anotar el peso exacto del reactivo
para calcular la concentracin de la solucin pa-
trn. Aadir el reactivo al matraz de 250 mL, mez-
clar y completar hasta el aforo con agua destilada
libre de oxgeno. Disolver el sulfuro completamen-
te bajo una atmsfera de nitrgeno.
6. Solucin estndar de sulfuro: Colocar 90 mL de
agua destilada libre de oxgeno an caliente en
un matraz volumtrico de 100 mL, burbujear gas
nitrgeno en el matraz mientras el agua alcanza
temperatura ambiente. Aadir 5 mL de la solucin
patrn y diluir hasta el aforo. Usar inmediatamen-
te.
NOTA. Durante la preparacin del patrn, el reac-
tivo debe permanecer en contacto con el aire el
mnimo tiempo posible; por ende, tanto el procedi-
miento de pesado como la disolucin en el matraz
deben ejecutarse rpidamente. Esta solucin, as
como la solucin estndar son muy inestables; por
lo tanto, la preparacin de la solucin patrn as
como la elaboracin de la curva de calibracin se
deben hacer en forma simultnea en un periodo de
tiempo breve.
7. Solucin de cido sulfrico (1:1, v/v).
8. Indicador. Disolver 1 g de almidn soluble en 100
mL de agua destilada y calentar hasta que desapa-
rezca la turbiedad. Aadir algunas gotas de cloro-
formo como preservativo y refrigerar. Esta solucin
es estable por 2 semanas. Renovar nuevamente si
no se obtiene un color azul puro cuando se titula.
9. Solucin de tiosulfato de sodio (0,01 N). Disolver
2,48 g de tiosulfato de sodio (Na2S2O3.5H2O) en
1000 mL de agua destilada. Esta solucin es bas-
tante inestable; por lo tanto, preparar antes de
cada anlisis y mantener en una botella mbar
en el refrigerador si no se usa inmediatamente.
Normalizar todos los das.
10. Solucin de yodato de potasio (0,01 N). Secar
el yodato de potasio (KIO3) en una estufa a 105
C por una hora, enfriar en un desecador y pesar
exactamente 0,3567 g. Disolver en agua destila-
da y ajustar el volumen a 1000 mL. Esta solucin
es estable indefinidamente si se evita la evapora-
cin.
11. Solucin de yoduro de potasio. Disolver 20 g de
yoduro de potasio (KI) en 100 mL de agua destila-
da.
Captacin de muestras
Las muestras se toman por triplicado y son las pri-
meras que salen de la botella Niskin. Si los sulfuros
entran en contacto con oxgeno se oxidan o volatilizan
rpidamente, por lo que es importante tomar las pre-
cauciones necesarias para evitar que esto suceda.
1. La muestra se capta colocando la jeringa de plsti-
co de 60 mL con su manguera en un soporte univer-
sal mientras se conecta la manguera a la espita de
la botella Niskin (Figura 4.1). Durante la captacin
permitir que el flujo ascienda por la jeringa mientras
se llena. Mantener el flujo a una velocidad modera-
da mientras se realiza la captacin lo que minimiza
el contacto con el aire y la formacin de burbujas.
Colocar la punta de la jeringa de vidrio por deba-
jo de la superficie del agua que fluye en forma as-
cendente y lavar la jeringa de vidrio tres veces con
agua de la muestra. Remover cualquier burbuja
atrapada despus del primer enjuague. Recolectar
4 mL de muestra manteniendo el tiempo de contac-
to entre el embolo y la muestra al mnimo. Evitar la
formacin de burbujas durante la captacin.
2. Colocar la muestra en un vial de 20 mL levemente
inclinado el cual contiene 0,5 mL de Zn(Ac)2 como
agente fijador. La inclinacin reduce el tiempo de
reaccin entre el sulfuro en la muestra y el Zn(Ac)2.
Tapar inmediatamente y agitar suavemente asegu-
rndose que la mezcla sea completa.
3. Refrigerar la muestra a 4 C a resguardo de la luz
tan pronto como sea posible. A esta temperatura, la
muestra puede permanecer almacenada hasta por
un mes.
4. En una botella de plstico de 100 mL, captar sufi-
ciente agua a una profundidad con una alcalinidad
similar al de la muestra de manera de garantizar un
sistema amortiguador similar tanto en las muestras
como en las soluciones estndares. Filtrar y alma-
cenar a 4 C. Esta agua libre de sulfuro se oxi-
gena y emplea en las diferentes diluciones que se
realizan tanto a las muestras como a las soluciones
estndar manteniendo un control del pH.
Anlisis de muestras
Encender el espectrofotmetro 15 minutos antes de
comenzar el anlisis para que estabilice.
1. Las muestras deben alcanzar la temperatura am-
biente antes de iniciar el anlisis.
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2. Aadir 0,05 mL (50 L) de la solucin mezclada de
diamina con una pipeta automtica. Tapar inmedia-
tamente e invertir el vial.
3. Permitir que la solucin repose por 20 minutos pro-
tegida de la luz.
4. Diluir la muestra con 5 mL de agua de mar libre de
sulfuro. Tapar rpidamente y mezclar. Permitir que
la solucin repose nuevamente por 15 minutos pro-
tegida de la luz.
5. Medir la absorcin en una celda de 1-cm a una lon-
gitud de onda de 670 nm para muestras que con-
tengan concentraciones de sulfuro mayores de 3
mol L-1. Para aquellas con concentraciones meno-
res de 3 mol L-1 emplear una celda de 10-cm.
6. Las muestras con concentraciones elevadas de
sulfuro se pueden diluir una vez desarrollado el co-
lor totalmente. Sin embargo, esto no es recomen-
dable ya que aumenta la incertidumbre del mtodo.
La absorcin ms alta debera ser menor de 0,8
ya que las soluciones acuosas de azul de metileno
con concentraciones elevadas no se ajustan a la
ley de Beer (Cline, 1969).
Calibracin
1. Para optimizar el anlisis, el rango de concentra-
cin de la curva de calibracin se mantiene dentro
del rango esperado en las muestras a estudiar. Ver
Cline (1969) para ms detalles acerca de la pre-
paracin de los reactivos y los factores de dilucin
para concentraciones mayores de 40 mol L-1.
2. Soluciones sub-estndares para la curva de
calibracin. Para un rango de concentracin de
sulfuro entre 0 a 40 mol L-1 se agrega 0,1; 0,2;
0,3 y 0,4 mL de la solucin estndar en viales que
contengan 0,5 mL de Zn(Ac)2.
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3. Diluir con 4 mL de agua de mar libre de sulfuro, y
aadir con una pipeta automtica 0,05 mL (50 L)
de la solucin mezclada de diamina. Tapar e invertir
los viales.
4. Permitir que los estndares diluidos reposen por 20
minutos protegidos de la luz.
5. Diluir con otros 5 mL de agua de mar libre de sulfu-
ro, y permitir que reposen nuevamente por 15 mi-
nutos ms, protegidos de la luz.
6. Medir la absorcin en una celda de 1-cm a una
longitud de onda de 670 nm. La concentracin de
sulfuro en cada vial se calcula a partir de la cantidad
de sulfuro de sodio aadido y de los factores de
dilucin.
Calibracin de la solucin estndar
La calibracin de la solucin estndar se hace in-
mediatamente despus de su preparacin:
1. Aadir 10 mL de la solucin de yoduro de potasio
y 10 mL de yodato de potasio a seis matraces
erlenmeyer con tapa biselada.
2. Agregar 1 mL de H2SO4 a cada matraz.
3. Con una pipeta volumtrica calibrada, aadir 50
mL de la solucin estndar de sulfuro a tres de
los matraces, y 50 mL de agua destilada libre de
oxgeno a los otros tres matraces.
4. Permitir reposar por 10 minutos.
5. Titular con tiosulfato de sodio empleando una
solucin de almidn como indicador.
6. El volumen de tiosulfato empleado entre rplicas no
debe variar de 0,05 mL.
(A - B) (1)
mol L-1H2S = 106*M*
2V
7. Calcular la cantidad de H2S presente en la solucin
con la formula:
donde
A= media de las rplicas de las tres solucio-
nes sin sulfuro, en mL.
B = media de las rplicas de las tres solucio-
nes con sulfuro, en mL.
V= volumen de la solucin estndar de sulfu-
ro, 50 mL.
M= concentracin de la solucin de tiosulfato
(mol L-1).
Anlisis del blanco
La cantidad de sulfuro de hidrgeno en el agua de
mar con oxgeno es insignificante; por lo tanto, se pue-
de emplear como blanco.
1. Colocar en un vial 0,5 mL de Zn(Ac)2 y aadir 4 mL
de agua de mar libre de sulfuro.
2. Aadir 0,05 mL de la solucin mezclada de diamina
con una pipeta automtica. Tapar y mezclar.
3. Permitir que la solucin repose por 20 minutos.
4. Medir la absorcin en una celda de 1 cm a una
longitud de onda de 670 nm. El valor obtenido de-
pende de la pureza y concentracin del reactivo,
turbiedad de la muestra y la diferencia entre celdas
(Cline, 1969).
Clculo y expresin de resultados
La cantidad de sulfuro de hidrgeno disuelto en
agua de mar se calcula con la siguiente ecuacin:
H2S(mol L-1) =
(2,388 * (Absm Absb))
(2)
p
donde
2,388 = factor de dilucin (calculado a partir
de los volmenes del Zn(Ac)2 + mues-
tra + agua libre de sulfuro + solucin
de diamina)/4.
Absm = absorcin de la muestra.
Absb = absorcin del blanco.
p = pendiente de la curva lineal de cali-
bracin calculada a partir de los sub-
estndares con extinciones menores
de 0,8.
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