unor-. probleme,’ fn
eee A st fel art
ra enrmeor, tn acest fel'@ pari sn
fockimice ete‘ Se'osip: op, sani: ci
career ike selma. nu atin decane
au intrevizut’ posi
ete, 2 ware
Tumine-noilor date des
iv $i filtreta prin mai multe filtre
Hitle, Filirarea trebule repetata pind. eind filtratul este incolor- {ten
slab roz). Sclutia poate fi, pastrata 23 zile:
4. Reactiv de spalare: 04 g metabisulfit de potasiu, dizolvat in.
100 ml apa distilata, Ja care se adeuga 1m] HCl cone.
5. Reactiv de fixere : formol 40%/5 —- HCI cone, —
Benzile sint apoi
colorare, ele sint spalate ou solutia 4 detrei
sint pissate, pentru 2 minute tn HCI solutie
puse in reactiv 5—20 minute, spilete intro bi
2 minute si uscate tn aer.
i ele dé aceasti conceptie,. consta-
fn compoctamentul.izoonsimelor’ dtfe-
soiuri de plante, si leit,
18 moleculare @ pr ‘gi enzimelor si
Experienfa 41, EVIDENTIEREA TRANSPERINELOR
i. ip organism
prin care Fel?
feritina continuta in mucoasa duodenald este redus fa Fe", forma sub
care fierul trece in singe 51 este vehiculat de transfering,
colorare cuprinde 1 g hidroxilamin’, HC + 2,7 g
2,5.ml acid acetic glacial + 0,3 g Nitroza R ‘salt
dizolvate fn apd distilata pind la un volun final de 100m
3. Solujia dé spalare : 50 maf metené] + 50 ml apa 10 ml'ceid
acetic glacial,
Bopirionje 42, BVIDENTIEREA IZOENZIMBLOR LACTAT DEHIDROGENAZEL
ocean
a eee onan :
a ii te a ina aaa
a ee
i EP cuperats i t
Bit a tere tans Ean
tele ‘combinatii a doud subunit penis forme cic as
ieee GE cong Maal aE End ine a
er) om Dr og pa aan
iuoru, Serul sanguin este tratat eu cu sulfat de fier amo-
ind acesta contine 5 4g Fe'*/ml. z
asifel tratat este supus electroforezet conform modului descris
rile sint imeréate 10 minute in’
sub forma unar ben:
par gi alte bexizi datorith colordir
iri de pre ca
Dupa 10 minute, gelurile sint plasate in eolutia de spllare, care sto-
eaza procesul de colorare nespeciti,
eae fr, bem pec orto so hae
PDB, tn ena rein Set create de 29 ori M0 prime TEE se
See eas een
Soe ee
ai rime si my Sok in Mee co
activitati LDH, érestute (Figura 4.2)
fos
102Higura 4.1; — Structura tetramer
8 lzoenzimelor laelat dehidrogensset
88 88 Qo
e® C8
LOH) "LOH, “LOM
L0H, — LOHs
O subunitatea H
@ subunitateam
4
Figura 42, — Rex
Ging. infarct mige
Thepatic (Garb
108
Jzongimele LDH sint vioualizate.
ameéstec continind substrat
incubarea _gelurilor oa, un
Fenazin.metosuifat (iin accep.
trazoliu. Prin reducerea
liu se formeaza un formazan puternic ‘colorat care pr
le cu activitate enzimatica (Figura #3).
Lactat Naor, oe NBT,
Piruvat a ee. a Tred
formazan
insofubit
Sistemul enzimatle catalieat de lectat
ogeness
Figura 43, = Sourgeren’ etec
Reactivt si solugtt,
fampon KH,PO,-NagHPO, 0,05 M, pH 74
1 ME BET 9,2 ;
pare (Lactat de litiu' 0,1 M, 50 mg NAD* si
ie tampon 3. Solutia este stabila o siptimind
A
solufia tampon 2, Dupa o ora
trifugate Ia 6.000 tpi. timp
cite 50u1 p
Electroforegramele
mare atentie pozitia 1
finala $i gradu! de spatiere
‘Brperlonfa £2. EVIDENTISREA IZOENZIMELOR PEROXIDAZE! DIN NREAN
Principiul metodei, Toenai brean sint separate
rit electroforezi in gel de ager (1; "4 rea celor 7 izoenzime
105,