IMPACTO DE LA PRUEBA QTPCR EN TIEMPO REAL EN EL SEGUIMIENTO DE

LOS PACIENTES EN TRATAMIENTO PARA LEUCEMIA MIELOCITICA CRONICA

EN EL INSTITUTO ONCOLOGICO DOCTOR HERIBERTO PIETER AGOSTO 2016
ENERO 2017
Dionis Jess Gonzlez Musseb, * Jadiel Nova
Vsquez, * Rosa Haydee Vasallo Veras, **
Rubn Daro Pimentel. **
RESUMEN
Se present un estudio observacional,
descriptivo y transversal, de recoleccin
prospectiva que se llev a cabo en el instituto
de oncologa Dr. Heriberto Pieter (IOHP),
Santo Domingo, Repblica Dominicana.
El universo estuvo conformado por 10
pacientes, que fueron los pacientes a los que
tuvimos acceso con diagnstico de leucemia
mieloctica crnica que asistan al IOHP con
fines de realizarse la prueba de QTPCR
durante el periodo de agosto del 2016 hasta
enero del 2017.
De los 10 pacientes, 6 procedan de
Santo Domingo, el resto era procedente de,
Azua, Bani, Barahona y Hato Mayor. De los
10 pacientes, 4 pertenecan al sexo
masculino, donde el menor tena 11 aos y
el mayor tena 43 aos; por otro lado, 6
pacientes pertenecan al sexo femenino
donde el menor tena 16 aos y el mayor
tena 49 aos.
En este estudio se destac que la fatiga
fue la manifestacin clnica que ms
predomin en los pacientes. Todos los
pacientes tenan diagnstico de Leucemia
Mieloide Crnica, a los cuales se les realiz
un breve interrogatorio acompaado de,
hemograma, qumica sangunea y la prueba
QTPCR, lo cual fue la base de los resultados
obtenidos.
Un total de 8 pacientes estaba siendo
tratado con imatinib y un total de 2 pacientes
con hidroxiurea. De los 8 pacientes tratados
con imatinib, 3 pacientes mantenan niveles
de QTPCR mayor de 10 por ciento en la
primera evaluacin, y niveles entre 1 y 10 por
ciento en la segunda evaluacin, este fue el
cambio ms significativo reflejado en esta
investigacin, llegando a alcanzar una
respuesta al tratamiento optima solo 1 de
estos 3 pacientes. Los 2 pacientes que se
encontraban en tratamiento con hidroxiurea
no reportaron disminucin significativa en los
niveles de QTPCR en la segunda
evaluacin.

Se reflejaron cambios en los niveles de

*Medico General
**Asesores QTPCR en el 100 por ciento de los

1
pacientes, aunque solo en 30 por ciento de was 16 years old and the oldest was 49 years
estos se evidencio un cambio significativo. old.
In this study, it was emphasized that
Palabras claves: BCR-ABL, Leucemia, fatigue was the most common clinical
QTPCR, hidroxiurea, imatinib. manifestation in between the 10 patients. All
patients were diagnosed with Chronic
ABSTRACT Myeloid Leukemia, to whom it was
The analysis of hematological performed a brief interrogation,
malignancies has been associated with the accompanied by blood count, blood
molecular analysis of chromosomal chemistry test and the QTPCR.
abnormalities, which highlights that there are 8 patients were treated with imatinib and
rearrangements of genes involved in these 2 patients were treated with hydroxyurea. 3
pathologies. The polymerase chain reaction out of the 8 patients treated with imatinib had
(PCR) is a tool used to detect the genetic QTPCR levels above 10 percent on the first
affections in these cases, which allows us to evaluation, and between 1 and 10 percent on
carry out a better follow-up of these the second evaluation, this was the most
diseases. In chronic myeloid leukemia, a t (9; significant change reflected in this study, but
22) (q34; q11) translocation is highlighted, only 1 out of these 3 patients presented an
and this results in a gene called BCR-ABL. optimal treatment response. The 2 patients
Real-time PCR detects the BCR-ABL gene, who were treated with hydroxyurea, did not
which helps us to effectively monitor these report any significant variation on their
patients. QTPCR levels in the second evaluation.
We report the results of 10 patients Changes in QTPCR levels were reflected
diagnosed with chronic myeloid leukemia, in 100 percent of the patients, although only
who attended IOHP (Instituto Oncolgico Dr. 30 percent of these patients showed
Heriberto Pieter) with the purpose of being significant changes.
monitored with QTPCR, this was performed
between August 2016 and January 2017. Keywords: BCR-ABL, hematological,
Out of the 10 patients, 6 resided in Santo QTPCR, hydroxyurea, imatinib.
Domingo, the rest of them resided in Azua,
Bani, Barahona and Hato Mayor. 4 of them INTRODUCCIN
were male, where the youngest was 11 years Los adelantos logrados en la
old and the oldest was 43 years old; and 6 comprensin de la biologa molecular en
patients were female where the youngest
la leucemia estn comenzando a

2
proporcionar un conocimiento
completo de la complejidad molecular de
la leucemia para fines diagnsticos, de
clasificacin, teraputicos y del
monitoreo de los resultados clnicos. 1
La Leucemia Mieloide Crnica (LMC)
es un trastorno de clulas madres
mieloides con una estimada ocurrencia
anual de 2-3 casos por cada 100.000
personas por ao.2
El defecto molecular causal es el gen
BCR-ABL codificado por el cromosoma
Philadelphia (Ph).2
El principio de la tcnica y el trmino
en tiempo real hacen referencia a que la
deteccin de los productos amplificados
sucede en cada ciclo de la reaccin. Por
su parte, el trmino cuantitativo hace
referencia a que es posible cuantificar la
cantidad de ADN en la muestra, a
diferencia de la PCR punto final donde
no es posible detectar en tiempo real ni
cuantificar la secuencia de
Precisamente, estas ltimas
caractersticas representan grandes
ventajas de la PCR en tiempo real, ya
que el producto de amplificacin es
monitoreado conforme transcurre
reaccin, sin que haya la necesidad de
que sea manipulado en un gel de
agarosa para conocer si la reaccin fue
ms exitosa como sucede en la PCR punto
final.3
Actualmente, la PCR en tiempo real es
el mtodo ms sensible para detectar y
cuantificar los cidos nucleicos. Aun
teniendo una cantidad muy pequea de
templado, el sistema garantiza una alta
sensibilidad, especificidad y eficiencia.
Una de sus aplicaciones ms usadas es
para cuantificar cambios muy pequeos
en la expresin gnica mediante la
deteccin de los niveles del ARNm
procedente de clulas o tejidos.3
La tcnica molecular de la
transcriptasa reversa, es considerada
como exacta por el hecho de hacer uso
de la tecnologa del ADN, que permite
caracterizar los transcriptos formados
por las translocaciones
desencadenantes de las leucemias,
como son los puntos de ruptura en las
regiones de los genes BCR y ABL, los
ADN. cuales estn asociados a la presentacin
dos clnica de la LMC y la LLA. Este
diagnstico de mayor precisin,
determina la estructura y composicin de
las protenas por fusin de genes
la producidos por los distintos rearreglos
genmicos y, por tanto, el fenotipo de la
leucemia.4
La eficacia de imatinib y de todos los
inhibidores de la tirosin quinasa se ha
3
definido mediante la medicin de los
niveles de transcripcin del gen BCR-
ABL para evaluar la enfermedad mnima
residual en los pacientes que han
alcanzado una respuesta citogentica
completa.2
En trminos de la respuesta al
tratamiento, se ha informado que este
inhibidor de quinasa BCR-ABL produce
una respuesta hematolgica completa
en el 98% de los pacientes en tres
meses, mientras que una respuesta
citogentica completa se produce en 12
meses de seguimiento en el 87% de los
pacientes recin diagnosticados con
LMC en fase crnica, as como 40 a 60%
de los pacientes en la fase tarda de la
fase crnica.2
El seguimiento molecular de los
niveles de transcripcin del gen BCR-
ABL por reaccin en cadena de la
polimerasa con transcripcin inversa
cuantitativa (QT-PCR) durante el
tratamiento, es la herramienta ms eficaz
para la evaluacin de los resultados y
evaluar el riesgo de recada, la cual
constituye la columna vertebral de
monitoreo de LMC en varios centros en
todo el mundo.2
MATERIAL Y MTODOS
Se trat de un estudio observacional,
descriptivo y transversal, de recoleccin
prospectiva de datos, con el objetivo de
determinar el impacto de la prueba QT-
PCR en el seguimiento de los pacientes
tratados para Leucemia Mielocitica
Crnica que fueron evaluados en el
Instituto Oncolgico Dr. Heriberto Pieter
Agosto 2016 hasta Enero 2017.
El universo estuvo constituido por
pacientes con diagnstico de LMC.
La muestra estuvo representada por
aquellos pacientes que se realizaron la
prueba QTPCR.
Criterios de inclusin.
Pacientes con diagnstico de
LMC con resultados de la prueba
QT-PCR.
No se discrimin edad.
No se discrimin sexo.
Criterios de exclusin.
Pacientes sin diagnstico de
LMC.
Pacientes que no se realizaron la
prueba QT-PCR.
4
Instrumento de recoleccin de datos. Cuadro 3. Resultados obtenidos de la
La recoleccin de la informacin se PCR Fatiga Enero. Instituto Oncolgico
realiz mediante un formulario Dr. Heriberto Pieter, Agosto 2016
conformado por diversos acpites los Enero 2017.
cuales contenan, datos
sociodemogrficos, encuestas, estudios
de laboratorio y resultado del BCR-ABL.
Resultados.

RESULTADOS.

Cuadro 1. Resultados obtenidos de la Cuadro 4. Resultados obtenidos de la

PCR en ambas evaluaciones. Instituto PCR Prdida de peso Octubre. Instituto
Oncologico Dr. Heriberto Pieter, Agosto Oncolgico Dr. Heriberto Pieter, Agosto
2016 Enero 2017. 2016 Enero 2017.

Cuadro 5. Resultados Obtenidos de la

Cuadro 2. Resultados obtenidos de la
PCR Prdida de peso Enero. Instituto
PCR Fatiga Octubre. Instituto
Oncolgico Dr. Heriberto Pieter, Agosto
Oncolgico Dr. Heriberto Pieter, Agosto
2016 Enero 2017.
2016 Enero 2017.

5
Cuadro 6. Resultados obtenidos de la
PCR Tratamiento Actual Octubre.
Instituto Oncolgico Dr. Heriberto Pieter,
Agosto 2016 Enero 2017.

Cuadro 9. Resultados obtenidos de la

PCR Tiempo de tratamiento Enero.
Instituto Oncolgico Dr. Heriberto Pieter,
Agosto 2016 Enero 2017.
Cuadro 7. Resultados obtenidos de la
PCR Tratamiento Actual Enero.
Instituto Oncolgico Dr. Heriberto Pieter,
Agosto 2016 Enero 2017.

Cuadro 10. Resultados obtenidos de la

PCR Esplenomegalia Octubre. Instituto
Oncolgico Dr. Heriberto Pieter, Agosto
Cuadro 8. Resultados obtenidos de la 2016 Enero 2017.
PCR Tiempo de tratamiento Octubre.
Instituto Oncolgico Dr. Heriberto Pieter,
Agosto 2016 Enero 2017.

6
Cuadro 11. Resultados obtenidos de la
PCR Esplenomegalia Enero. Instituto
Oncolgico Dr. Heriberto Pieter, Agosto
2016 Enero 2017.

Cuadro 14. Resultados obtenidos de la

PCR Fases Octubre. Instituto
Oncolgico Dr. Heriberto Pieter, Agosto
2016 Enero 2017.

Cuadro 12. Resultados obtenidos de la

PCR Leucocitos Octubre. Instituto
Oncolgico Dr. Heriberto Pieter, Agosto
2016 Enero 2017.

Cuadro 15. Resultados obtenidos de la

PCR Fases Enero. Instituto Oncolgico
Dr. Heriberto Pieter, Agosto 2016
Enero 2017.

Cuadro 13. Resultados obtenidos de la

PCR Leucocitos Enero. Instituto
Oncolgico Dr. Heriberto Pieter, Agosto
2016 Enero 2017.

7
Cuadro 16. Resultados obtenidos de la resultado de la PCR, todos estaban en
PCR Plaquetas Octubre. Instituto tratamiento con imatinib. Por otro lado, el
Oncolgico Dr. Heriberto Pieter, Agosto 20 por ciento de pacientes que
2016 Enero 2017. permaneci con valores de PCR mayor a
10 por ciento estaban en tratamiento con
hidroxiurea.
Los pacientes que reflejaron el cambio
ms significativo en sus niveles de PCR
fueron aquellos que tenan un menor
tiempo de diagnstico.
Hubo un 40 por ciento de los pacientes
que presento esplenomegalia al
momento de la primera evaluacin,
Cuadro 17. Resultados obtenidos de la porcentaje que permaneci sin
PCR Plaquetas Enero. Instituto variaciones al momento de la segunda
Oncolgico Dr. Heriberto Pieter, Agosto evaluacin, a pesar de que hubo
2016 Enero 2017. disminucin en los valores de PCR.
En cuanto al resultado del diferencial
de leucocitos, es importante destacar la
amplia disminucin que hubo en el nivel
de los basfilos, siendo la media al
momento de su primera evaluacin de
1.81 por ciento y esta disminuir a tan solo
0.7 por ciento al momento de la segunda
DISCUSIN evaluacin.
Conociendo la importancia de la
Al momento de comparar el trombocitosis y la trombocitopenia en los
tratamiento de nuestros pacientes con el pacientes con leucemia mieloide crnica,
resultado de la PCR, es de importancia es necesario mencionar los resultados
mencionar que del 30 por ciento de obtenidos que describen estas
pacientes que tuvo mejora en el condiciones; haciendo hincapi en que el

8
70 por ciento de nuestros pacientes se refirieron no presentarla en su segunda
mantuvo dentro de los parmetros evaluacin.
normales de plaquetas en ambas
evaluaciones, pero no es menos cierto REFERENCIAS
que, en el 30 por ciento restante
hubieron variaciones en los valores 1. Derveaux S, Vandesompele Jo,
plaquetarios, observndose que en la Hellemans Jan. how to do
primera evaluacin un 20 por ciento de succesful gene expression
los pacientes se encontraba con analysis using real-time PCR,
trombocitopenia y solo un 10 por ciento 2010; 227-230.
se encontraba con trombocitosis, 2. Moumen A, Dehbi H, Kottwitz D,
resultados que varan al momento de la El Amrani M, Bouchoutrouch N, El
segunda evaluacin y se presenta un 20 Hadi H et al. Quantitative real-time
por ciento de los pacientes con polymerase chain reaction as an
trombocitosis y solo un 10 por ciento con efficient molecular tool for
trombocitopenia. detecting minimal residual
Al momento de darle seguimiento a un disease in Moroccan chronic
paciente con leucemia, se debe tomar en myeloid leukemia patients.
cuenta que la fatiga y la prdida de peso Genetics and Molecular
son caractersticas clnicas de Research. 2015;14(1):1044-1055.
importancia, nuestros pacientes no 3. Tamay de Dios L, Ibarra C,
fueron la excepcin y fueron evaluados Velasquillo C, Fundamentos de la
tambin segn estas dos caractersticas reaccin en cadena de la
clnicas; un 42.8 por ciento de los polimerasa (PCR) y de la PCR en
pacientes que presentaron fatiga en su tiempo real, Investigacin en
primera evaluacin refirieron ya no discapacidad, Vol. 2, Nm. 2,
presentarla en su segunda evaluacin, Mayo-Agosto 2013 pp70-78.
de la misma manera hubo un 50% de los 4. Jimnez-Arce G, Carrillo J,
pacientes que presentaron prdida de Chvez M, Jimnez R, Vargas M,
peso en su primera evaluacin que Campos L, De La Guardia A,
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9
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